Analisis Kualitatif dan Kuantitatif Kandungan Kimia dari Ekstrak Heksan, Aseton,

Etanol dan Air dari Rimpang Kunyit (Curcuma domestica Val)

Harrizul Rivai1), Sestry Misfadhila2), Leni Komala Sari2)
1)
Fakultas Farmasi Universitas Andalas(UNAND) Padang
2)
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFARM) Padang
Email: harrizul@phar.unand.ac.id; lenikomalasari3@gmail.com

ABSTRACT

Research on qualitative and quantitative analysis of turmeric rhizome (Curcuma

domestica Val) has been carried out on hexane, acetone, ethanol and water extracts.
Maceration used as extraction method for hexane, acetone and ethanol solvents, while for
water solvents the infusion method was used. Quantitative analysis was carried out by the
gravimetric method for alkaloid and UV-Vis spectrophotometer for flavonoid and phenol.
The result of the analysis showed that the turmeric rhizome hexane extract only contained
volatile oil with a level of 2.8 % which extracted by steam distilation. The extract turmeric
rhizome acetone extract contain alkaloid, flavonoid and phenol with levels of 1.9 %, 0.1419
% and 0.0598 % respectively. Mean while in ethanol extract turmeric rhizome contain
alkaloid and phenol with levels of 0.69 % and 0.0653 % and in the extract of turmeric
rhizome water flavonoid are obtained at the level of 0.1413 %. The results showed that
alkaloid and flavonoid more contained in the acetone extract, while more phenol contained in
extracted ethanol.
Keywords : Turmericrhizome, Curcuma domestica Val., Maceration, Gravimetry,Ultraviolet
Spectrophotometry

Penelitian tentang analisis kualitatif dan kuantitatif rimpang kunyit (Curcuma

domestica Val) telah dilakukan terhadap ekstrak heksan, aseton, etanol dan air. Metode
ekstraksi yang digunakan yaitu maserasi untuk pelarut heksan, aseton dan etanol, sedangkan
untuk pelarut air digunakan metode infusa. Analisis kuantitatif dilakukan dengan metode
gravimetri untuk alkaloid dan spektrofotometer UV-Vis untuk flavonoid dan fenol. Hasil
analisis menunjukkan bahwa pada ekstrak heksan rimpang kunyit hanya mengandung minyak
atsiri dengan kadar 2,8 % yang diekstrak dengan destilasi uap. Pada ekstrak aseton rimpang
kunyit mengandung alkaloid, flavonoid dan fenol dengan kadar masing-masing 1,9 %, 0,1419
% dan 0,0598 %. Sementara itu pada ekstrak etanol rimpang kunyit mengandung alkaloid dan
fenol dengan kadar 0,69 % dan 0,0653 % dan pada ekstrak air rimpang kunyit mengandung
flavonoid dengan kadar 0,1413 %. Hasil penelitian menunjukkan bahwa alkaloid dan
flavonoid lebih banyak terkandung pada ekstrak aseton, sementara fenol lebih banyak
terkandung pada ekstrak etanol.

Kata kunci : Rimpang Kunyit,Curcuma domestica Val., Maserasi, Gravimetri, Spektrofotometri Ultraviolet

PENDAHULUAN mekanisme antioksidan, dan memberi

Kunyit (Curcuma domestica Val)
merupakan rempah-rempah yang termasuk
dalam famili Zingiberaceae (Sawant &
Godghate, 2013). Rimpang kunyit
merupakan bagian yang paling berguna
untuk keperluan memasak dan obat,
mengawetkan makanan melalui
warna pada makanan. Selain itu kunyit
dianggap sebagai obat untuk penyakit
kuning, menambah nafsu makan, dan
pencernaan. Dalam obat-obatan India dan
Cina, kunyit digunakan sebagai anti
inflamasi untuk mengobati sakit gigi, nyeri

1
dada, dan kesulitan menstruasi (Himesh et
al., 2011).
Tanaman kunyit memiliki
kandungan metabolit sekunder yang
memiliki berbagai fungsi biologis yang
bermanfaat untuk manusia (Duraisankar &
Ravindran, 2015). Kandungan kimia yang
terdapat di dalam rimpang kunyit yaitu
campuran dari kurkumin (diferuoilmetan),
minyak atsiri yang terdiri dari α-felandren,
sabinen, sineol, borneol, zingeberen,
seskuiterpen, kurkumin, α- dan β-tumeron
(Kementerian Kesehatan Republik
Indonesia, 2011). Kurkumin adalah
hidrofobik di alam dan larut dalam
metilsulfoksida, aseton, etanol, dan
minyak (Himesh et al., 2011).
Penelitian tentang analisis kualitatif
dari ekstrak rimpang kunyit telah
dilakukan oleh Duraisankar & Ravindran
(2015). Hasil penelitian menunjukkan
bahwa ekstrak eter rimpang kunyit
mengandung minyak lemak dan minyak
atsiri sedangkan pada ekstrak benzen dan
alkohol rimpang kunyit mengandung fenol
dan resin. Sedangkan pada ekstrak
kloroform rimpang kunyit mengandung
alkaloid, fenol, dan resin. Dari hasil
penelitian tersebut menunjukkan bahwa
rimpang kunyit mengandung kadar
kurkumin 0,756 %.
Penelitian lain tentang analisis
kualitatif dari ekstrak rimpang kunyit juga
telah dilakukan oleh Sawant & Godghate
(2013). Hasil penelitian menunjukkan
bahwa dari ekstrak kloroform dan metanol
rimpang kunyit mengandung alkaloid,
saponin, steroid, tanin, antosianin,
emodins, flavonoid, diterpen, phistoterol,
fenol dan phlobatanin. Pada ekstrak etanol
rimpang kunyit mengandung alkaloid,
saponin, tanin, antosianin, emodins dan
diterpen.
Analisis kuantitatif kurkumin
fenolik dari ekstrak etanol rimpang kunyit
yang dilakukan oleh Himesh et al., (2011),
diperoleh 11,24 mg/gram ekstrak etanol
rimpang kunyit dengan mendapatkan kadar
kurkumin 10,23 %. Penelitian lain juga
dilakukan oleh Rezki et al., (2015) dengan
menggunakan metode dua tahap dan
metode tiga tahap. Dari metode tersebut
diperoleh kadar kurkumin sebesar 15,15 %
pada ekstraksi dua tahap dan 16,001 %
pada ekstraksi tiga tahap.
Berdasarkan uraian tersebut,
peneliti tertarik untuk melakukan
penelitian analisis kualitatif dan kuantitatif
dari ekstrak heksan, aseton, etanol dan air
pada rimpang kunyit (Curcuma
domestica). Penelitian ini dilakukan untuk
mengetahui kandungan kimia pada ekstrak
heksan, aseton, etanol dan air dari sampel
rimpang kunyit.
METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan antara lain:
Spektrofotometri UV-Vis (Shimadzu UV-
1800), sonikator (Branson), Lampu UV
(CAMAG), “rotary evaporator” (IKA®),
corong pisah (pyrex), penangas air
(Memmert Basic Water Bath – WNB 14),
timbangan analitik (Precisa), wadah
maserasi (botol gelap), erlenmeyer (Iwaki),
labu ukur (Iwaki), batang pengaduk, gelas
piala (Iwaki), pipet ukur (Iwaki), pipet
tetes, kertas saring, kertas perkamen,
kertas saring Wathman No 42, spatel, bola
hisap, corong (pyrex), oven, Silica gel 60
F254, chamber, pipa kapiler, blander
(Philip), aluminium foil, cawan penguap,
krus porselen, tabung reaksi.
Bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah tanaman rimpang
kunyit (Curcuma domestica Val),
kuersetin, asam galat, heksan (C6H14)
(Merck), aseton (C3H6O) (Merck), etanol
70 % (C2H5OH) (Merck), air suling (H2O)
2
(Bratachem), kalium iodida (KI) (Merck),
raksa klorida (HgCl₂) (Merck), α-naftol,
asam sulfat P (H2SO₄) (Merck), asam sitrat
(C₆H₈O₇), timbal asetat (Pb(C2H3O2)2)
(Merck), tembaga sulfat anhidrat (CuSO4),
natrium klorida (NaCl) (Merkc), KMNO₄
(kalium permanganat), asam asetat
(CH₃COOH) (Merck), besi (III) klorida
(FeCl₃) (Merck) dan kloroform (CHCl3)
(Merck), Folin-Ciocalteu, Benedictus.
Prosedur
Penyiapan Simplisia
1. Pengumpulan Bahan Baku
2. Sortasi Basah
3. Pencucian
4. Perajangan
5. Pengeringan
6. Sortasi kering
7. Pembuatan serbuk sampel
Karakterisasi Simplisia
Karakterisasi simplisia berdasarkan
Farmakope Herbal Indonesia (2008) yaitu
meliputi uji makroskopis, uji mikroskopis,
pola kromatografi lapis tipis, susut
pengeringan, kadar abu total, kadar abu
tidak larut asam, kadar sari larut air dan
sari larut etanol.
Ekstraksi
Sejumlah 50 gram serbuk simplisia
rimpang kunyit dimaserasi dengan cara
merendam simplisia kedalam masing-
masing pelarut (heksan, aseton, etanol)
sebanyak 500 mL (perbandingan 1:10 w/v)
Direndam selama 6 jam pertama sambil
sesekali diaduk, kemudian diamkan selama
18 jam. Maserat dipisahkan dengan cara
filtrasi (penyaringan), proses penyaringan
ini diulangi 2 kali, dengan menggunakan
jenis dan jumlah pelarut yang sama.
Semua maserat dikumpulkan, kemudian di
uapkan dengan alat rotary evaporator pada
suhu dibawah50Csehingga diperoleh
ekstrak.
Metode infusa adalah cara ekstraksi
dengan menggunakan pelarut air, pada
suhu 96-98 º C selama 15 menit sambil
sesekali diaduk. Bejana infus tercelup
dalam tangas air. Dengan cara menimbang
sebanyak 50 gram simplisia rimpang
kunyit dan dimasukkan kedalam panci
infus dan ditambahkan dengan pelarut air
sebanyak 500 mL, lalu dimasukkan
kedalam penangas air selama 15 menit
pada suhu 98º C, lalu saring menggunakan
kain flanel sehingga diperoleh ekstrak air
rimpang kunyit.
Analisis Kualitatif
1. Uji karbohidrat
 Tes Molish
Ekstrak 2 mL ditambahkan dua tetes
larutan alkohol α-naftol,lalu campuran
dikocok dengan baik dan tambahkan
beberapa tetes asam sulfat pekat
perlahan sepanjang sisi tabung reaksi.
Cincin ungu menunjukkan adanya
karbohidrat(Banu & Cathrine, 2015).
 Tes Benedict
Untuk 0,5 mL ekstrak, tambahkan 0,5
mL reagen Benedict. Campuran
dipanaskan sampai mendidih selama 2
menit. Presipitat warna orange
kemerahan karakteristik menunjukkan
adanya gula (Banu & Cathrine, 2015).
 Tes Fehling
Untuk 2 mL ekstrak tanaman,
ditambahkan pereaksi Fehling A dan B
dalam jumlah yang sama banyak
kedalam larutan uji, lalu akan terjadi
reduksi menghasilkan endapan kupro
oksida berwarna merah bata (Hanani,
2017).
2. Uji asam lemak
Tambahkan asam sulfat 25% ,
pengamatan dilakukan dengan
pemanasan, dan terbentuk warna
cokelat muda menunjukkan adanya
asam lemak (Hanani, 2017).
3
3. Uji fenol
 Tes Ferri klorida
Pipet ekstrak sebanyak 2 mL,
tambahkan 3-4 tetes besi (III) klorida.
Senyawa fenol akan memberikan warna
hijau hingga biru hitam dengan
penambahan larutan garam besi (III)
klorida (Banu & Cathrine, 2015).
 Uji timbal asetat
Pipet ekstrak sebanyak 2 mL,
tambahkan 3 mL larutan timbal asetat
10% ini telah ditambahkan. Endapan
putih besar menunjukkan adanya
senyawa fenolik(Banu & Cathrine,
2015).
4. Uji tannin
Penambahan 3 tetes pereaksi FeCl3 ke
dalam 1 mL ekstrak menghasilkan
warna biru hitam (Hanani, 2017).
5. Uji flavonoid
 Uji Timbal Asetat
Ekstrak 1 mL ditambahkan dengan
beberapa tetes larutan timbal asetat.
Pembentukan endapan warna kuning
menunjukkan adanya flavonoid
(Tiwarietal., 2011).
 Uji Shinoda
Ekstrak seabnyak 1 mL diuapkan
hingga kering, ditambahkan 1-2 mL
etanol, kemudian ditambahkan sedikit
serbuk magnesium dan 2 mL asam
klorida 5 M. Warna merah hingga
merah lembayung yang timbul
menandakan adanya senyawa
flavanone, flavonol, flavanonol, dan
dihidroflavonol (Hanani, 2017).
6. Uji alkaloid
 Tes Mayer
Untuk 2 mL ekstrak tanaman, dua tetes
reagen Mayer ditambahkan disepanjang
sisi tabung reaksi. Endapan krem putih
menunjukkan adanya alkaloid (Banu &
Cathrine, 2015).
 Tes Wagner
Dua tetes reagen Wagner ditambahkan
ke 2 mL ekstrak tumbuhan di sepanjang
sisi tabung reaksi. Endapan coklat
kemerahan mengkonfirmasikan tes
tersebut sebagai positif (Banu &
Cathrine, 2015).
7. Uji terpenoid
Ekstrak sebanyak 1 mL ditambahkan 2
tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes
asam sulfat pekat perubahan warna
ungu atau merah kemudian menjadi
biru hijau menunjukkan adanya
terpenoid (Banu & Cathrine, 2015).
8. Uji minyak atsiri
Ekstrak sebanyak 1 mL ditambahkan
Larutan kalium permanganat, warna
akan menjadi pucat atau hilang
(Hanani, 2017).
9. Uji saponin
Ekstrak 1 mL dikocok dengan 10 mL
air selama 10 menit, terbentuk buih
selama tidak kurang dari 10 menit
setinggi 1 cm sampai 10 cm. Pada
penambahan 1 tetes asam klorida 2 N,
buih tidak hilang (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 1995).
10. Uji steroid
Ekstrak 1 mL ditambahkan kloroform
dan 5 tetes asam asetat anhidrat dan
biarkan mengering. Lalu tambahkan 3
tetes H2SO4 P. Maka akan terbentuk
warna biru. Terbentuknya warna biru
dapat diamati pada bagian pinggir plat
tetes (Hanani, 2017).
Analisis Kuantitatif
1. Penetapan Kadar Alkaloid
Pipet ekstrak sebanyak 20 mL, sari
menggunakan 100 mL metanol P dan
10 mL amoniak P, panaskan diatas
tangas air selama 30 menit, saring.
Ulangi 2 kali penyarian menggunakan
jenis dan jumlah pelarut yang sama.
Tambahkan 50 mL asam klorida 1 N LP
pada kumpulan filtrat, uapkan hingga
volume lebih kurang 25 mL, saring
kedalam corong pisah. Basakan filtrat
dengan amoniak P sampai pH±10,sari 3
kali dengan 25 mL kloroform P.
Kumpulkan dan uapkan fase kloroform
pada suhu 50°,kemudian keringkan
pada suhu 100°hingga bobot
tetap.Hitung sisa pengeringan sebagai
alkaloid total (kadar alkaloid total
dinyatakandalam % b/b) (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 2008).
4
2. Penetapan Kadar Flavonoid
Penetapan kadar flavonoid total
menggunakan spektrofotometer Uv-Vis
menurut Departemen Kesehatan
Republik Indonesia (2010).
a. Larutan uji untuk ekstrak cair
Ukur seksama sejumlah volume ekstrak
cair, encerkan dengan etanol 80%
sampai kadar yang sesuai untuk
kolorimetri.
b. Penentuan panjang gelombang
maksimum
Timbang seksama kurang lebih 10
mgkuersetin, larutkan dalam 10 mL
etanol 80%, kemudian lakukan
pengenceran dengan cara memipet 0,5
mL larutan katekin murni dan larukan
dengan etanol 80% dalam labu 10 mL
(50 µg/mL). Kemudian lakukan
pengukuran panjang gelombang dengan
menggunakan spektrofotometri UV-
Vis.
c. Larutan pembanding
Timbang seksama kurang lebih 10 mg
pembanding, larutkan dalam etanol
80%, encerkan secara kuantitatif dan
jika perlu bertahap dengan etanol 80%
hingga kadar 30, 40, 50, 60 dan 70
µg/mL.
d. Pengukuran
Pipet secara terpisah 0,5 mL larutan uji
dan larutan pembanding, tambahkan
pada masing-masing 1,5 mL etanol P,
0,1 mLalumunium klorida P 10%, 0,1
ml natrium asetat 1 M dan 2,8 mL air
suling. Kocok dan diamkan selama 30
menit pada suhu ruang. Ukur serapan
pada panjang gelombang serapan
maksimum. Lakukan pengukuran
blangko dengan cara yang sama, tanpa
penambahan alumunium klorida.
3. Penetapan Kadar Fenol
Penetapan kadar fenol dilakukan
dengan metode spektrofotometri Uv-
Vis menurut Departemen Kesehatan
Republik Indonesia (2011)
a. Larutan uji
Pipet ekstrak sebanyak 1 mL, masukkan
kedalam labu tentukur, encerkan secara
kuantitatif dan jika perlu bertahap
dengan metanol P hingga kadar seperti
yang tertera pada masing-masing
monografi.
b. Penentuan panjang gelombang
maksimum
Timbang seksama kurang lebih 10 mg
asam galat, larutkan dalam 10 mL
metanol P, kemudian lakukan
pengenceran dengan konsentrasi 15
μg/mL. Kemudian lakukan pengukuran
panjang gelombang dengan
menggunakan spektrofotometri UV-
Vis.
c. Pembuatan larutan pembanding
Timbang seksama 10 mg asam galat,
masukkan kedalam labu tentukur,
encerkan secara kuantitatif dan jika
perlu bertahap dengan metanol P hingga
kadar lebih kurang 1 mg/mL. Buat
pengenceran larutan pembanding
dengan kadar berturut-turut lebih
kurang 15, 30, 45, 75 dan 90 μg/mL.
d. Pengukuran
Pipet masing-masing 1 mL larutan uji
dan enceran larutan pembanding dalam
tabung reaksi, tambahkan 5 mL enceran
Folin-Ciocalteu Fenol LP (7,5% dalam
air). Diamkan selama 8 menit,
tambahkan 4 mL NaOH 1%, diamkan
selama 1 jam. Ukur serapan pada
panjang gelombang maksimum, buat
kurva kalibrasi dan hitung kadar fenol
total.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Sebelum dilakukan proses ekstraksi,
dilakukan karakterisasi simplisia dengan
hasil sebagai berikut:
1. Gambaran makroskopis yaitu bentuk
bulat atau menjorong, tepi rimpang
berkeriput, warna rimpang coklat muda,
permukaan tengah berwarna coklat
kemerahan, bau aromatik yang khas,
rasa agak pahit dan pedas
2. Gambaran mikroskopis yang didapat
yaitu jaringan gabus, sel parenkim
berisi bahan berwarna kuning, berkas
pengangkut, rambut penutup, butir
5
 amilum, dan sel parenkim berisi
amilum
3. Pola kromatografi lapis tipis dari
simplisia rimpang kunyit dengan Rf1 =
0,214, Rf2 = 0,271 dan Rf3 = 0,557.
4. Rata-rata susut pengeringan dari
simplisia rimpang kunyit adalah 8,1054
% ± 0,0235 %.
5. Rata-rata kadar abu total simplisia
rimpang kunyit adalah 7,889 % ±
0,0161 %.
6. Rata-rata kadar abu tidak larut asam
simplisia rimpang kunyit adalah 0,772
% ± 0,02 %
7. Rata-rata kadar sari larut air simplisia
rimpang kunyit adalah 16,91 % ±
0,1096 %.
8. Rata-rata kadar sari larut etanol
simplisia rimpang kunyit adalah 16,62
% ± 0,0556 %.
 Analisis Kualitatif Ekstrak Rimpang
Kunyit
Rimpang kunyit yang telah diekstraksi
menggunakan 4 pelarut yang berbeda
yaitu pelarut heksan, aseton, etanol dan
air dilakukan analisis secara kualitatif
yang menunjukkan senyawa kimia yang
terkandung dalam masing-masing
ekstrak tersebut (Tabel I.).
 Analisis Kuantitatif Ekstrak
Rimpang Kunyit
1. Kadar flavonoid total dari ekstrak
aseton dan air rimpang kunyit adalah
0,1419 % dan 0,1413 % dihitung
sebagai kuersetin (Tabel II, Gambar 1,
2).
2. Kadar fenol total ekstrak etanol dan
aseton dari rimpang kunyit adalah
0,0598 % dan 0,0653 %. dihitung
sebagai asam galat (Tabel II, Gambar
3, 4.).
3. Kadar alkaloid total dari esktrak etanol,
dan aseton rimpang kunyit adalah 0,69
% dan 19 % (Tabel II).
4. Kadar minyak atsiri total dari ektrak
heksan dari rimpang kunyit adalah 2,8
% (Tabel II).

Tabel I. Data Uji Kualitatif Dari Ekstrak Heksan, Aseton, Etanol dan Air dari Biji Alpukat
Ekstrak
No. Pengujian
Heksan Aseton Etanol Air
1. Karbohidrat
- Molish - - - -
- Benedict - - - -
- Fehling - - - -
2. Asam lemak
- Asam sulfat - - - -
3. Fenol
- FeCl3 - + +
- Timbal asetat - - - -
4. Tanin
- FeCl3 - - - -
5. Flavonoid
- Timbal asetat - - - +
- Shinoda - + - -
6. Alkaloid
- Mayer - + + -
- Wagner - - - -
7. Terpenoid
- As. Asetat anhidrat + as. sulfat - - - -
8. Minyak Atsiri
- KMnO4 + - - -
9. Saponin

6
 s - Tes busa - - - -
10. Steroid
- As. Asetat anhidrat + as. sulfat - - - -

Keterangan :

+ = Mengandungsenyawametabolit
_
= Tidakmengandungsenyawametabolit

Gambar 1. Spektrum serapan kuersetindengan penambahan alumunium kloridakonsentrasi50

μg/mLpada 430.5 nm

Kurva Kalibrasi Kuersetin

0.7
y = -0,0579 + 0,0101x
0.6 R = 0,9996
R² = 0,9991
0.5
Absorban

0.4
0.3 Absorban

0.2 Linear (Absorban)

0.1
0
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Konsentrasi (ppm)

Gambar 2. Kurva kalibrasi kuersetin pada panjang gelombang maksimum 430,5 nm

7
Gambar 3. Spektrum serapan asam galat dengan penambahan Folin-Ciocalteu konsentrasi 15
μg/mLpada 764 nm

Kurva Kalibrasi Asam Galat

0.9
0.8
y = 0,1979 + 0,0066x
0.7
R = 0,9997
0.6 R² = 0,9995
Absorban

0.5
0.4 Absorban
0.3 Linear (Absorban)
0.2
0.1
0
0 20 40 60 80 100
Konsentrasi (ppm)

Gambar 4. Kurva kalibrasi asam galat pada panjang gelombang 764 nm

Tabel II. Data Uji Kuantitatif dari Ekstrak Heksan, Aseton, Etanol dan Air dari Rimpang
Kunyit

Ekstrak biji Alkaloid Flavonoid total Fenol total (%) Minyak atiri(%)
alpukat total (%) (%)

Ekstrak Heksan - - - 2,8

Ekstrak Aseton 1,9 0,1419 0,0653 -

Ekstrak Etanol 0,69 - 0,0598 -

Ekstrak Air - 0,1413 - -

8
Pembahasan
Sampel yang digunakan adalah
rimpang kunyit (Curcuma domestica Val).
yang diambil di daerah Kecamatan Pauh
Pariaman, Kabupaten Padang Pariaman,
Sumatera Barat. Rimpang kunyit yang
diambil pada pagi hari karena proses
fotosintesis terjadi di pagi hari sehingga
kandungan kimia pada tumbuhan dalam
keadaan optimal.
Sampel yang digunakan untuk
pengujian ini adalah rimpang kunyit
(Curcuma domestica Val) yang telah
dilakukan uji identifikasi di Herbarium
Universitas Andalas (ANDA), jurusan
biologi FMIPA Universitas Andalas
Kampus Limau Manis, Padang, Sumatera
Barat, Indonesia. Hasil specimen berupa
Curcuma domestica Val. (famili:
Zingiberaceae) gambar dan hasil dapat
dilihat pada Lampiran 1, Gambar 5.
Pemeriksaan makroskopik rimpang kunyit
antara lain: bentuk bulat atau menjorong,
tepi rimpang berkeriput; warna rimpang
coklat muda, permukaan tengah berwarna
coklat kemerahan; bau aromatic yang khas,
rasa agak pahit dan agak pedas.
Setelah dilakukan identifikasi
dilanjutkan dengan pengujian simplisia
yang bertujuan untuk mendapatkan
simplisia yang bermutu baik dan
memenuhi standarisasi Farmakope Herbal
Indonesia Edisi I (2008), yaitu
diantaranya: Pemeriksaan pemerian,
berupa rimpang dimana bentuk bulat atau
menjorong, bagian tengah berwarna
cokelat kemerahan, warna rimpang cokelat
muda, tepi rimpang berkeriput, bau
aromatic (Lampiran 1, Gambar 6).
Pemeriksaan tersebut sesuai dengan
standarisasi yang terdapat dalam
Farmakope Herbal Indonesia Edisi I
(2008). Pemeriksaan mikroskopik
menunjukkan jaringan gabus, sel parenkim
berisi bahan berwarna kuning, berkas
pengangkut, rambut penutup, butir
amilum, dan sel parenkim berisi amilum
(Lampiran 1, Gambar 7, 8, 9, 10, 11 dan
12). Hasil Pemeriksaan tersebut sesuai
dengan standarisasi yang terdapat dalam
Farmakope Herbal Indonesia Edisi I
(2008).
Setelah dilakukan pemeriksaan
mikroskopis, selanjutnya dilakukan
penetapan kadar susut pengeringan dari
simplisia rimpang kunyit dan diperoleh
hasil 8,1054 % ± 0,0235 % (Lampiran 1,
Tabel III). Hasil yang diperoleh memenuhi
nilai standarisasi yang terdapat dalam
Farmakope Herbal Indonesia Edisi I
(2008) yaitu tidak lebih dari 10 %. Tujuan
dilakukan penentuan kadar susut
pengeringan yaitu untuk memberikan
batasan maksimal mengenai besarnya
senyawa yang hilang pada proses
pengeringan. Penetapan kadar abu total
simplisia didapat hasil 7,889 % ± 0,0161
% (Lampiran 1, Tabel IV). Hasil ini
memenuhi nilai standarisasi yang terdapat
dalam Farmakope Herbal Indonesia Edisi I
(2008) dimana tidak lebih dari 8,2 %.
Penetapan kadar abu total dilakukan
dengan tujuan untuk memberikan
gambaran kandungan mineral internal dan
eksternal yang berasal dari proses awal
sampai terbentuknya simplisia. Kadar abu
berikatan dengan mineral baik senyawa
organik maupun anorganik yang diperoleh
secara internal maupun eksternal.
Penetapan kadar abu tidak larut asam dari
simplisia diperoleh sebesar 0,772 % ± 0,02
% (Lampiran 1, Tabel V), nilai ini
memenuhi standarisasi yang terdapat
9
dalam Farmakope Herbal Indonesia Edisi I
(2008) dimana tidak lebih dari 0,9 %.
Penentuan kadar abu tidak larut asam
bertujuan untuk mengetahui jumlah abu
yang diperoleh dari faktor eksternal,
bersumber dari pasir atau tanah silikat
(Deperteman Kesehatan Republik
Indonesia 2000). Kadar sari larut dalam air
diperoleh sebesar 16,91 % ± 0,1096 %
(Lampiran 1, Tabel VI). Hasil memenuhi
nilai standarisasi yang terdapat dalam
Farmakope Herbal Indonesia Edisi I
(2008) dimana nilai kadar sari larut air
tidak kurang dari 11,5 %. Penentuan kadar
sari larut air dilakukan untuk memberikan
gambaran awal jumlah senyawa yang
dapat tersari dengan pelarut air dari suatu
simplisia (Deperteman Kesehatan
Republik Indonesia 2000). Kadar sari larut
dalam etanol diperoleh 16,62 % ± 0,0556
% (Lampiran 1, Tabel VII), dimana hasil
ini memenuhi nilai standarisasi yang
terdapat dalam Farmakope Herbal
Indonesia Edisi I (2008) dimana nilai
kadar sari larut etanol yaitu tidak kurang
dari 11,4 %. Penentuan kadar sari larut
etanol dilakukan untuk memberikan
gambaran awal jumlah senyawa yang
dapat tersari dengan pelarut etanol dari
suatu simplisia (Deperteman Kesehatan
Republik Indonesia 2000).
Setelah dilakukan karakterisasi simplisia
yang sudah dinyatakan memenuhi standar,
selanjutnya dilakukan ekstraksi simplisia
ditimbang sebanyak 50 gram untuk
dijadikan ekstrak. Ekstrak dapat dibuat
dengan cara maserasi yaitu dengan
merendam simplisia dalam pelarut pada
suhu kamar sehingga kerusakan atau
degradasi metabolit dapat diminimalisasi.
Pada maserasi terjadi proses
kesetimbangan konsentrasi antara larutan
di luar dan di dalam sel sehingga
diperlukan pergantian pelarut secara
berulang dan dengan pengadukan (Hanani,
2017). Simplisia yang telah ditimbang
dimasukkan ke dalam botol kaca gelap,
ditambah dengan 500 mL pelarut heksan
direndam selama 6 jam sambil sesekali
diaduk dan dibiarkan selama 18 jam.
Kemudian saring, dan ulangi sebanyak 2
kali pengulangan dengan jenis dan jumlah
pelarut yang sama. Maserat dikumpulkan
lalu diuapkan dengan penguap vakum
(rotary evaporator) (Gambar 17) pada
suhu ± 50 ºC, penguapan ini bertujuan
menguapkan pelarut sehingga diperoleh
ekstrak cair. Lakukan hal yang sama
terhadap seluruh pelarut yaitu aseton dan
etanol hingga diperoleh ekstrak cair.
Ekstraksi rimpang kunyit dengan pelarut
air dilakukan dengan metode infusa.
Metode infusa adalah cara ekstraksi
dengan menggunakan pelarut air, pada
suhu 96-98 ºC selama 15-20 menit
(dihitung setelah suhu 96º C tercapai).
Cara ini sesuai untuk simplisia yang
bersifat lunak, seperti bunga dan daun
(Hanani, 2017). Ekstraksi dilakukan
dengan cara menimbang sebanyak 50 gram
simplisia rimpang kunyit dan dimasukkan
ke dalam panci infus dan ditambahkan
dengan pelarut air sebanyak 500 mL.
Lakukan ekstraksi dengan penangas air
selama 15-20 menit pada suhu 98º C, lalu
saring menggunakan kain flanel sehingga
diperoleh ekstrak air rimpang kunyit.
Kromatografi lapis tipis (KLT) merupakan
salah satu metode analisis kualitatif
dengan cara memisahkan komponen-
komponen sampel berdasarkan perbedaan
kepolaran. Pada plat KLT, plat tipis
berfungsi sebagai fase diam. Pada
percobaan ini digunakan plat silika gel 60
F254 yang bersifat polar. Fase gerak akan
bergerak melalui fase diam dan membawa
komponen-komponen dengan kecepatan
yang berbeda untuk komponen yang
10
berbeda. Eluen yang digunakan adalah
kloroform P - metanol P dengan
perbandingan 95:5. Kemudian dilakukan
penotolan sampel pada plat KLT dan
dimasukkan dalam chamber yang berisi
fase gerak (kloroform P dan metanol P).
Sebelum dilakukan pemisahan, plat KLT
diberi tanda terlebih dahulu yaitu tanda
batas bawah dan batas atas dengan pensil
bukan menggunakan tinta karena pewarna
dari tinta akan bergerak atau ikut terelusi.
Di dalam chamber yang berisi campuran
kloroform P dan metanol P terlebih dahulu
dijenuhkan dengan menutup rapat chamber
dengan tujuan agar eluen dalam chamber
jenuh dengan uap pelarut. Penjenuhan
udara dalam chamber dengan uap dapat
mencegah penguapan pelarut.
Setelah chamber jenuh, maka plat KLT
yang sudah ditotolkan dengan sampel
dimasukkan ke dalam chamber. Ketika
pelarut mulai membasahi plat, pelarut akan
melarutkan senyawa-senyawa dalam
sampel. Senyawa akan bergerak pada plat
seperti bergeraknya pelarut, setelah itu
terbentuk beberapa spor noda karena
sampel akan ikut berinteraksi dengan silika
yang ada pada lempengan. Selanjutnya
noda dideteksi di bawah sinar UV pada
gelombang 366 nm dan diperoleh 3 noda
yang berarti terdapat 3 senyawa kimia
yang terbawa oleh fase gerak yang masing-
masing memiliki nilai Rf 1 = 0,214, Rf 2 =
0,271, Rf 3 = 0,557 (Gambar. 13). Nilai-
nilai Rf mendekati nilai Rf dari
pembanding yang terdapat dalam
Farmakope Herbal Indonesia Edisi I
(2008) yaitu Rf = 0,62 (Lampiran 1, Tabel
2 dan Gambar 13). Senyawa yang
memiliki nilai Rf yang lebih besar, berarti
mempunyai kepolaran yang rendah, hal
tersebut dikarenakan fase diam bersifat
polar. Senyawa yang lebih polar akan
tertahan kuat pada fase diam, sehingga
menghasilkan nilai Rf yang kecil.
Setelah didapatkan ekstrak cair dari
masing-masing pelarut, selanjutnya
dilakukan analisa kandungan senyawa
kimia pada masing-masing ekstrak cair.
Identifikasi metabolit primer dan
sekunder dengan metode uji fitokimia
dilakukan untuk mengetahui kandungan
senyawa metabolit primer dan sekunder
dalam suatu tanaman secara kualitatif.
Dilakukan 10 uji metabolit diantaranya uji
alkaloid, uji flavonoid, uji steroid, uji
saponin, uji minyak atsiri, uji terpenoid, uji
tanin, uji fenol, uji asam lemak dan uji
karbohidrat. Hasilnya, ekstrak cair heksan,
aseton, etanol dan air mengandung
alkaloid, flavonoid, fenol, dan minyak
atsiri (Tabel VIII).
Hasil pengujian semua ekstrak
negatif terhadap tannin, steroid, saponin,
terpenoid, asam lemak dan karbohidrat.
Hasil positif ditunjukkan pada pengujian
alkaloid, flavonoid, minyak atsiri dan
fenol. Hasil yang didapatkan pada ekstrak
heksan adalah minyak atsiri, ekstrak aseton
mengandung alkaloid, flavonoid dan fenol,
sedangkan pada ekstrak etanol
mengandung alkaloid dan fenol dan pada
ekstrak air positif mengandung flavonoid.
Hasil analisis kualitatif yang didapatkan
lebih sedikit. Jika dibandingkan dengan
hasil penelitian yang dilakukan oleh
Duraisankar & Ravindra, (2015) yang
diperoleh hasil positif minyak atsiri,
minyak lemak, fenol, resin dan alkaloid.
Sementara itu pada penelitian lain yang
dilakukan oleh Sawant & Godghate,
(2013) diperoleh hasil positif alkaloid,
saponin, steroid, tannin, antosianin,
flavonoid, diterpen, phistoterol dan fenol.
Hasil kualitatif ini dipengaruhi oleh
beberapa faktor yaitu saat melakukan
maserasi, saat penarikan zat aktif belum
11
sempurna sehingga berpengaruh untuk uji
fitokimia. Selain itu tempat tumbuh juga
dapat mempengaruhi kandungan senyawa
kimia pada tanaman (Setyorini et al.,
2016).
Dilihat dari reaksi kimia yang terjadi
pada pengujian kualitatif yaitu pada uji
karbohidrat dimana ekstrak tidak
menunjukkan reaksi dengan penambahan
fehling A dan B, tidak terjadi reduksi yg
membuat terbentuknya endapan kupro
oksida menjadi warna merah bata.
Sehingga percobaan yang dilakukan
memperoleh hasil negatif. Begitupun pada
uji asam lemak reaksi kimia yang terjadi
juga tidak memberikan hasil yang bagus
pada ekstrak heksan, etanol dan air.
Karena ekstrak tidak bereaksi dengan asam
sulfat 25 %. Pada estrak aseton didapat
hasil yang positif yang ditunjukkan dengan
warna coklat muda. Uji fenol dan tannin
menggunakan pereaksi yang sama yaitu
besi (III) klorida yang mana hasilnya
menunjukkan warna endapan biru hitam.
Pada percobaan yang dilakukan
menunjukkan hasil endapan biru hitam
pada ekstrak aseton dan etanol, pada
pengujian fenol, namun menunjukkan hasil
yang negatif pada pengujian tanin. Uji
flavonoid menunjukkan reaksi kimia yang
terjadi antara ekstrak dan pereaksi, yaitu
ekstrak aseton dan ekstrak air dapat
bereaksi saat penambahan etanol, serbuk
Mg dan asam klorida 5M yang
menunjukkan terbentuknya warna merah
hingga merah lembayung, menunjukkan
hasil yang negatif pada ekstrak etanol.
Uji alkaloid juga menunjukkan hasil
yang sama dengan uji flavonoid, yaitu
positif pada ekstrak etanol dan aseton. Hal
ini juga terjadi reaksi kimia saat ekstrak
ditambahkan reagen mayer yang
membentuk endapan krem putih.
Percobaan yang dilakukan hanya dua yang
menunjukkan hasil positif yaitu ekstrak
etanol dan aseton, sedangkan pada ekstrak
heksan dan air tidak memberikan reaksi
saat penambahan reagen mayer. Uji
minyak atsiri juga memberikan reaksi
kimia pada ekstrak heksan, karena hasil
yang didapatkan menghilangkan warna
kalium permanganat pada ekstrak heksan,
sehingga hasil yang diperoleh memberikan
hasil positif pada ekstrak heksan.
Reaksi kimia juga tidak terjadi pada
uji saponin. Saat ekstrak ditambahkan
dengan air, setelah dikocok timbul busa,
setelah ditunggu 10 menit busa tersebut
hilang, maka hasil percobaan yang
dilakukan menunjukkan hasil negatif.
Begitu juga pada uji terpenoid dan steroid
yang menunjukkan hasil negatif, pada uji
terpenoid ekstrak tidak menunjukkan
reaksi kimia dengan penambahan asam
asetat anhidrat dan asam sulfat sehingga
tidak terbentuk warna biru hujau. Begitu
juga pada uji steroid, ekstrak tidak
menunjukkan adanya reaksi kimia yang
memberikan warna hijau saat ditambahkan
kloroform dan asam sulfat. Sehingga hasil
percobaan yang didapatkan dari uji
terpenoid dan uji steroid negatif.
A. Kadar flavonoid total pada ekstrak
etanol dan air
Penetapan kadar flavonoid total dari
ekstrak etanol dan ekstrak air rimpang
kunyit dilakukan dengan menggunakan
metode kolorimetri alumunuim klorida.
Dengan prinsip penetapan kadar flavonoid
metode aluminium klorida adalah
pengukuran berdasarkan pembentukan
warna dan terjadinya pembentukan
kompleks antara aluminium klorida
dengan gugus keto pada atom C- 4 dan
gugus hidroksi pada atom C-3 atau C-5.
Penetapan kadar flavonoid total dilakukan
dengan menggunakan spektrofotometri
12
Uv-Vis karena flavonoid mengandung
sistem aromatik yang terkonjugasi
sehingga menunjukkan pita serapan kuat
pada daerah spektrum sinar ultraviolet dan
spektrum sinar tampak (Harborne, 1987).
Pada pembuatan kurva kalibrasi
dengan metode alumunium klorida
digunakan kuersetin sebagai pembanding
karena kuersetin merupakan flavonoid
golongan flavonol yang mempunyai gugus
keto pada C-4 dan memiliki gugus
hidroksi pada atom C-3 atau C-5 yang
bertetangga dari flavon dan flavonol.
Sebelum melakukan penetapan kadar
sampel, maka terlebih dahulu melakukan
penetapan panjang gelombang maksimum.
Tahapan ini bertujuan untuk mengurangi
kesalahan pembacaan serapan seminimal
mungkin, karena pengukuran didapatkan
pada panjang gelombang serapan
maksimum.
Pada penelitian ini penentuan
panjang gelombang serapan maksimum
dari larutan standar kuersetin adalah 430,5
nm pada konsentrasi 50 μg/mL. Untuk
penentuan kurva kalibrasi kuersetin dibuat
pengenceran dengan berbagai konsentrasi
yaitu 30 μg/mL, 40 µg/mL, 50 µg/mL, 60
µg/mL dan 70 µg/mL. Pengukuran larutan
uji dan pembanding dari ekstrak etanol dan
air rimpang kunyit ditambahkan dengan
etanol P sebagai peningkat kelarutan,
kemudian tambahkan 0,1 mL aluminium
(III) klorida P 10 % yang dapat
membentuk kompleks sehingga terjadi
pergeseran panjang gelombang ke arah
visible (tampak) yang ditandai dengan
larutan menghasilkan warna yang lebih
kuning (Chang et al., 2002). Setelah itu
ditambahkan 0,1 mL natrium asetat yang
berfungsi sebagai penstabil, kemudian
dicukupkan dengan 2,8 mL air suling.
Kocok dan diamkan selama 30 menit pada
suhu ruang. Hal tersebut dimaksudkan agar
reaksi antara larutan standar kuersetin
dengan pereaksi-pereaksi yang
ditambahkan dapat berlangsung dengan
sempurna. sehingga intensitas warna yang
dihasilkan lebih maksimal (Azizah &
faramayuda, 2004).
Berdasarkan kurva kalibrasi pada
Gambar 14 diperoleh persamaan regresi y=
0,0101x - 0,0579. Koefisien korelasi r =
0,9996, angka ini mendekati 1 yang berarti
terdapat korelasi yang sangat tinggi antara
absorban dan kadar senyawa serta
menunjukkan hubungan antara keduanya.
Berdasarkan Tabel XII diperoleh kadar
flavonoid total masing-masing pada
ekstrak aseton dan ekstrak air sebesar
0,1419 % dan 0,1413 %.
2. Kadar fenol pada ekstrak etanol dan
ekstrak aseton
Pada penelitian ini penentuan
kadar fenol total menggunakan metode
Folin Ciocalteu. Reagen Folin-Ciocalteu
digunakan karena senyawa fenolik dapat
beraksi dengan Folin membentuk larutan
berwarna yang dapat diukur
absorbansinya. Prinsip dari metode Folin-
Ciocalteu adalah terbentuknya senyawa
kompleks berwarna biru yang dapat diukur
pada panjang gelombang 765 nm. Pereaksi
ini mengoksidasi fenolat (garam alkali)
atau gugus fenolik-hidroksi mereduksi
asam heteropoli (molibdenum-tungsten)
yang terdapat dalam pereaksi Folin-
Ciocalteu menjadi senyawa kompleks
molibdenum-tungsten. Senyawa fenolik
bereaksi dengan reagen Folin Ciocalteu
hanya dalam suasana basa agar terjadi
disosiasi proton pada senyawa fenolik
menjadi ion fenolat. Untuk membuat
kondisi basa maka digunakan natrium
hidroksida 1 % . Gugus hidroksi pada
senyawa fenolik bereaksi dengan reagen
Folin Ciocalteu membentuk kompleks
molibdenum-tungsten berwarna biru yang
13
dapat terdeteksi dengan spektrofotometer.
Warna biru yang terbentuk akan semakin
pekat, setara dengan konsentrasi ion
fenolat yang terbentuk (Tahir et al., 2017).
Pada penentuan kadar fenolat total,
senyawa standar fenolat yang digunaka
adalah asam galat. Asam galat merupakan
senyawa golongan fenolat yang bersifat
stabil, murni, murah dan mudah didapat.
Berdasarkan kurva kalibrasi pada
gambar 15 diperoleh persamaan regresi y=
0,0066x + 0,1979. Koefisien korelasi r =
0,9997, angka ini mendekati 1 yang berarti
terdapat korelasi yang sangat tinggi antara
absorban dan kadar senyawa serta
menunjukkan hubungan antara keduanya.
Berdasarkan Tabel XI diperoleh kadar
fenolat total masing-masing pada, ekstrak
etanol dan ekstrak aseton sebesar 0,0598
% dan 0,0653 %.
3. Kadar alkaloid total pada ekstrak etanol
Penetapan kadar alkaloid total
dilakukan dengan metode gravimetri,
metode gravimetri adalah salah satu
metode penentuan secara kuantitatif
dengan cara mengukur berat komponen
dalam keadaan murni setelah melalui
proses pemisahan (Hanani, 2017).
Alkaloid adalah senyawa metabolit
sekunder mengandung unsur nitrogen (N)
biasanya pada cincin heterosiklik dan
bersifat basa.Alkaloid dalam tumbuhan
umumnya berbentuk garam, yaitu
berikatan dengan asam organik yang
terdapat dalam tumbuhan, alkaloid larut
dalam pelarut polar seperti etanol ataupun
air, namun dalam bentuk basa alkaloid
lebih larut dalam pelarut nonpolar (Hanani,
2017).
Amoniak P akan bereaksi dengan
asam klorida yang membentuk garam yang
larut dalam air sedangkan alkaloid kembali
dalam bentuk basa dan tidak terlarut dalam
air tetapi mudah larut dalam kloroform.
Alkaloid dalam keadaan bebas dapat
diekstraksi dengan pelarut kloroform,
sehingga dihasilkan ekstrak kloroform
yang merupakan alkaloid total.
Berdasarkan hasil perhitungan
kadar alkaloid total ekstrak etanol dan
aseton diperoleh kadar sebesar 0,69 % dan
1,9 %.
4. Penetapan kadar minyak atsiri dilakukan
dengan distilasi uap. Timbang 100 gram
rimpang kunyit, masukkan ke dalam labu
alas bulat 1 L, tambahkan 200 mL air
suling hubungkan labu dengan pendingin
dan buret berskala. Panaskan diatas hot
plate. Setelah penyulingan selesai, biarkan
selama tidak kurang dari 15 menit, catat
volume minyak atsiri pada buret. Dimana
kadar minyak atsiri yang diperoleh yaitu
2,8 mL untuk 100 gram sampel.
KESIMPULAN
Dari data yang diperoleh dalam
penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa:
a. Kandungan senyawa kimia dari
ekstrak heksan yaitu minyak atsiri.
Kandungan senyawa kimia dari
ekstrak aseton yaitu alkaloid dan
flavonoid. Kandungan senyawa
kimia dari ekstrak etanol yaitu
alkaloid dan fenol. Kandungan
senyawa kimia dari ekstrak air
yaitu flavonoid.
b. Kadar fenol total pada ekstrak
aseton dan etanol sebesar 0,0598 %
dan 0,0653 %, kadar flavonoid
total pada ekstrak aseton dan air
sebesar 0,1419 % dan 0,1413 %,
Kadar alkaloid total pada ekstrak
aseton dan etanol sebesar 0,69 %
dan 1,9 %, dan kadar minyak atsiri
pada ekstrak heksan sebesar 2,8 %.
14
DAFTAR PUSTAKA
Azizah, D. N., Kumolowati, E., &
Faramayuda, F. (2014). Penetapan
kadar flavonoid metode AlCl3 pada
ekstrak methanol kulit buah Kakao
(Theobroma cacao L.,). Kartika
Jurnal Ilmiah Farmasi, 2 (2), 45-
49
Badan Pengawasan Obat dan Makanan
Republik Indonesia. (2008).
Taksonomi Koleksi Tanaman
Obat Kebun Tanaman Obat
Citeureup. Jakarta: Badan
Pengawasan Obat dan Makanan
Republik Indonesia.
Badan Pengawas Obat dan Makanan
Republik Indonesia. (2011). Acuan
Sediaan Herbal. Vol 6. Edisi 1.
Jakarta: Badan Pengawas Obat dan
Makanan RI.
Banu, K. Sahira & Cathrine.L. (2015).
General Techniques Involved In
Phytochemical Analysis.
International Journal of Advanced
Research in Chemical Sciene, 2
(4): 25-32.
Departemen Kesehatan Republik
Indonesia. (2000). Parameter
standar umum ekstrak tumbuhan
obat. (Edisi 1). Jakarta: Direktorat
Jendral Pengawasan Obat dan
Makanan, Direktorat Pengawasan
Obat Tradisional.
Departemen Kesehatan Republik
Indonesia. (2008). Farmakope
Herbal Indonesia. (Edisi 1).
Jakarta: Departemen Kesehatan
Republik Indonesia.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
(2010). Suplemen I Farmakope Herbal
Indonesia. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia.
Durainsakar. M & Ravindran David. A.
(2015). Identification of Curcuma
Longa Rhizomes by
Physicochemical and TLC
Fingerprint Analysis. International
Journal of PharmaTech Research,
8 (6): 199-205.
Evans. W. C. (2002). Treasend Evans
Pharmacognosy. Harcourt Brace
and Company. London.

Chang, C., Yang, M., Wen & Chern J. Hanani, E. (2017). Analisis Fitokimia.
(2002). Estimation of Total Jakarta: Buku Kedokteran EGC.
Flavonoid Content in Propolis by Harborne, J. B. (1987). Metode fitokimia,
Two Complementary Colometric Penuntun Cara Modern
Methods. Journal of Food and Menganalisis Tumbuhan. (Edisi ke-
Drug Analysis. 10 (3), 178-182 2). Diterjemahkan oleh K.
Padmawinata dan I. Soediro.
Departemen Kesehatan Republik Bandung: Penerbit ITB.
Indonesia. (1985). Cara pembuatan
simplisia. Jakarta: Departemen Hartono, Nurwati, I., Ikasari, F., &
Kesehatan Republik Indonesia. Wiryanto., (2005). Pengaruh
Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma
domestica Val) Terhadap
Peningkatan Kadar SGOT dan

15
 SGPT Tikus Putih (Rattus
norvegicus) Akibat Pemberian
Asetaminofen. Jurusan Biologi
FMIPA UNS Surakarta, 3 (2): 57-
60.
Himesh S., Sharan P. S, Mishra, K.,
Govind, N., & Singhai AK (2011).
Qualitative dan Quantitative profile
of Curcumin From Ethanolic
Extract of Curcuma Longa.
International Research Journal of
Pharmacy, 2 (4), 180-184.
Kementerian Kesehatan Republik
Indonesia. (2011). Formularium
Obat Herbal Asli Indonesia
(volume 1). Jakarta: Kementerian
Kesehatan Republik Indonesia.
Mulyono. (2006). Membuat reagen kimia.
Jakarta: PT Bumi Aksara.
Peraturan Menteri Kesehatan Republik
Indonesia. (2016). Formularium
Obat Herbal Asli Indonesia. Jakarta:
Menteri Kesehatan Republik
Indonesia.
Rezki, S. R., Anggoro. D, & Siswarni,
MZ. (2015). Ekstraksi Multi Tahap
Kurkumin Dari Kunyit (Curcuma
domestica Val) Menggunakan
Pelarut Etanol. Jurnal Teknik
Kimia usu: 29-34.
Rivai, H. (2011). Studi Metode Analisis
Bahan Alam Yang Mengandung
Senyawa Fenolat Untuk
Pengembangan Data Monografi
Tumbuhan Obat Indonesia
(Disertasi). Padang: Universitas
Andalas.
Robinson, T. (1995). Kandungan Organik
Tumbuhan Tinggi. Terjemahan
Kosasih Padmawinata. Bandung:
ITB
Saifudin, A. (2014). Senyawa Alam
Metabolit Sekunder Teori Konsep
Dan Teknik Pemurnian.
Yogyakarta: Deepublish.
Sawant, R. S & Godghate, A, G. (2013).
Qualitative Phytochemical
Screening of Rhizomes of Curcuma
Longa Linn. International Journal
of Science, Environment and
Technology, 2 (4): 635-641.
Tahir, M., Muflihunna, A., & Syafrianti.
(2017). Penentuan Kadar Fenolik
Total Ekstrak Etanol Daun Nilam
(Pogostemon Cablin Benth) dengan
Metode Spektrofotometri UV-Vis.
Jurnal Fitofarmaka Indonesia, 4
(1): 215-218.
Tiwari, P., Kumar, M., Kaur, M., Kaur, G.,
& Kaur, H., (2011). Phytochemical
Screening and Extraction: A
Review. Internationale
Pharmaceutica Sciencia, 1 (1): 98-
106.
16