KEAMANAN

LABORATORIUM
BIOKIMIA
© Organisasi Kesehatan Dunia 2003
Publikasi ini bukan publikasi resmi dari Organisasi Kesehatan Dunia (WHO), dan semua hak

adalah dipesan oleh Organisasi. Publikasi dapat, bagaimanapun, bebas ditinjau, diabstraksi,

direproduksi dan diterjemahkan, sebagian atau seluruhnya, tetapi tidak untuk dijual atau

digunakan bersama dengan tujuan komersial.

Pandangan yang diungkapkan dalam publikasi oleh penulis bernama sepenuhnya menjadi

tanggung jawab penulis tersebut. Sebutan yang digunakan dan penyajian materi dalam

publikasi ini, termasuk tabel dan peta, tidak menyiratkan ekspresi pendapat apa pun dari pihak

sekretariat Organisasi Kesehatan Dunia tentang status hukum suatu negara, wilayah, kota atau

daerah atau otoritasnya, atau tentang delimitasi perbatasan atau batas-batasnya. Garis putus-

putus pada peta mewakili perkiraan garis perbatasan yang mungkin belum ada kesepakatan

penuh.

Penyebutan perusahaan tertentu atau produk produsen tertentu tidak menyiratkan bahwa

mereka adalah didukung atau direkomendasikan oleh WHO dalam preferensi untuk orang lain

dari sifat serupa yang tidak disebutkan. Kesalahan dan kelalaian dikecualikan, nama-nama

produk eksklusif dibedakan dengan modal awal surat.

pedoman sementara.
Kata pengantar

Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) telah lama mengakui bahwa keselamatan dan, khususnya,

keamanan biologis merupakan masalah internasional yang penting. Badan khusus Perserikatan

Bangsa-Bangsa ini menerbitkan yang pertama edisi manual keamanan hayati Laboratoriumnya

pada tahun 1983. Manual tersebut mendorong negara-negara untuk mempersiapkan kode

praktik untuk penanganan mikroorganisme patogen yang aman di laboratorium di dalam batas

geografis, dan memberikan panduan ahli untuk mengembangkan kode praktik tersebut. Revisi

edisi kedua berbasis web ini merupakan langkah awal dalam penyusunan edisi ketiga,

direncanakan untuk diterbitkan pada tahun 2003. Publikasi baru ini akan menggabungkan

manual keamanan hayati Laboratorium, 2nd ed. (direvisi) dan isi dokumen berjudul

Keselamatan di laboratorium perawatan kesehatan.

Penulis dan editor edisi kedua yang direvisi ini melanjutkan tradisi WHO yang sekarang telah

mapan mempromosikan kesehatan dan keselamatan di laboratorium mikrobiologi di

masyarakat internasional.

Selagi konten teknis menegaskan panduan edisi sebelumnya, ada perubahan bermanfaat dalam

organisasi teks dan materi baru yang berharga disertakan. Pentingnya tanggung jawab pribadi

untuk keamanan kegiatan laboratorium ditekankan di seluruh manual. Lingkungan

laboratorium yang aman dan sehat adalah produk individu yang terlatih dengan baik dan mahir

secara teknis dalam praktik yang aman, dan berbagi tanggung jawab untuk keselamatan mereka

sendiri dan untuk keselamatan rekan kerja mereka, komunitas mereka dan lingkungan.

Tanggung jawab pribadi juga melibatkan praktik penilaian risiko sebelum melakukan kegiatan

yang melibatkan protokol baru atau patogen baru. Dua bab baru membahas penilaian risiko

dan teknologi DNA rekombinan. Penambahan tepat waktu ini memberikan panduan yang

bijaksana dan ringkas untuk menilai risiko di laboratorium mikrobiologi kontemporer.

Lingkungan laboratorium yang aman dan sehat juga merupakan produk dari kepemimpinan

institusional yang bertanggung jawab.

Kode praktik nasional mendorong dan mempromosikan kepemimpinan institusional yang baik

dalam keamanan hayati. yang direvisi edisi kedua manual keamanan hayati Laboratorium

WHO, seperti edisi sebelumnya, adalah referensi yang bermanfaat

dan panduan bagi negara-negara yang menerima tantangan untuk mengembangkan kode

praktik nasional.

W. Emmett Barkley, PhD

Direktur, Kantor Keselamatan Laboratorium

Institut Medis Howard Hughes

Chevy Chase, MD, AS

1 Keselamatan di laboratorium layanan kesehatan. Jenewa, Organisasi Kesehatan Dunia, 1999 (dokumen tidak diterbitkan

WHO/LAB/97.1). Diperoleh atas permintaan dari Department of Vaccines and Other Biologicals, World Health Organization,

1211 Geneva 27, Switzerland; http://www.who.int/gpv-documents/

ucapan terima kasih

Pengembangan manual biosafety laboratorium edisi kedua yang direvisi ini telah dibuat
mungkin melalui kontribusi berikut, yang keahliannya diakui dengan rasa terima kasih:

Dr Ingegerd Kallings, Institut Pengendalian Penyakit Menular Swedia, Stockholm, Swedia Ms

Mary Ellen Kennedy, Konsultan Keamanan Hayati, Ashton, Ontario, Kanada (Editor teknis)

Ms Margery Kennett, Laboratorium Referensi Penyakit Menular Victoria, Melbourne Utara,

Australia Almarhum Dr Richard Knudsen, Kantor Kesehatan dan Keselamatan, Pusat

Pengendalian Penyakit dan Pencegahan, Atlanta, GA, AS

Dr Nicoletta Previsani, Program Keamanan Hayati, Organisasi Kesehatan Dunia, Jenewa,

Swiss Dr Jonathan Richmond, Kantor Kesehatan dan Keselamatan, Pusat Pengendalian dan

Pencegahan Penyakit, Atlanta, GA, AS Dr Syed A. Sattar, Fakultas Kedokteran, Universitas

Ottawa, Ottawa, Ontario, Kanada Dr Deborah E. Wilson, Divisi Keselamatan, Institut

Kesehatan Nasional, Washington, DC, AS

Dr Riccardo Wittek, Institut Biologi Hewan, Universitas Lausanne, Lausanne, Swiss

1. Prinsip umum
Sepanjang manual ini, referensi dibuat untuk bahaya relatif mikroorganisme infektif
berdasarkan risiko kelompok (Kelompok Risiko WHO 1, 2, 3 dan 4). Klasifikasi
kelompok risiko ini akan digunakan untuk pekerjaan laboratorium hanya. Laboratorium
ditunjuk sesuai dengan fitur desain, konstruksi, dan penahanannya fasilitas sebagai
dasar – Keamanan Hayati Level 1, dasar – Keamanan Hayati Level 2, penahanan –
Keamanan Hayati Level 3 dan penahanan maksimum – Tingkat Keamanan Hayati 4.
Tabel 1 menjelaskan kelompok risiko, Tabel 2 menghubungkannya dengan
penunjukan laboratorium, dan Tabel 3 merangkum persyaratan pada empat tingkat
keamanan hayati.

Tabel 1. Klasifikasi mikroorganisme infektif menurut k elompok risiko sebuah

Kelompok Risiko 1 (tidak ada atau sangat rendah risiko individu dan komunitas)

Mikroorganisme yang tidak mungkin menyebabkan penyakit pada manusia atau hewan.

Kelompok Risiko 2 (risiko individu sedang, risiko komunitas rendah)

Patogen yang dapat menyebabkan penyakit pada manusia atau hewan tetapi tidak berbahaya

bagipekerja laboratorium, masyarakat, ternak atau lingkungan. Paparan laboratorium dapat

menyebabkan: infeksi serius, tetapi pengobatan yang efektif dan tindakan pencegahan tersedia

dan risiko penyebaran infeksi terbatas.

Kelompok Risiko 3 (risiko individu tinggi, risiko komunitas rendah)

Patogen yang biasanya menyebabkan penyakit serius pada manusia atau hewan tetapi biasanya

tidak menyebar dari satu individu yang terinfeksi ke individu lain. Perawatan yang efektif dan

tindakan pencegahan tersedia.

Kelompok Risiko 4 (risiko individu dan komunitas tinggi)

Patogen yang biasanya menyebabkan penyakit serius pada manusia atau hewan dan mudah

menular dari satu individu ke individu lainnya, baik secara langsung maupun tidak langsung.

Perawatan yang efektif dan tindakan pencegahan adalah: biasanya tidak tersedia.

Sebuah Konsep dan klasifikasi kelompok risiko sedang dievaluasi kembali dan akan dibahas dalam edisi ketiga Laboratorium

panduan keamanan hayati

Negara (wilayah) harus menyusun klasifikasi mikroorganisme nasional (regional), berdasarkan

risiko kelompok, berdasarkan faktor-faktor berikut.

- Patogenitas organisme.

– Cara penularan dan kisaran inang organisme. Ini mungkin dipengaruhi oleh tingkat yang ada

kekebalan pada populasi lokal, kepadatan dan pergerakan populasi inang, keberadaan vektor

yang sesuai, dan standar kebersihan lingkungan.

– Ketersediaan lokal dari tindakan pencegahan yang efektif. Ini mungkin termasuk: profilaksis

dengan imunisasi atau pemberian antisera (imunisasi pasif); tindakan sanitasi, mis. kebersihan

makanan dan air; pengendalian reservoir hewan atau vektor arthropoda.

- Ketersediaan lokal dari pengobatan yang efektif. Ini termasuk imunisasi pasif, pasca pajanan

vaksinasi, dan penggunaan antimikroba, antivirus dan agen kemoterapi, dan harus

mempertimbangkan pertimbangan kemungkinan munculnya strain resisten obat.

Dalam menilai berbagai kriteria untuk klasifikasi, penting untuk mempertimbangkan kondisi

berlaku di wilayah geografis di mana mikroorganisme ditangani.

Dalam penyusunan daftar klasifikasi direkomendasikan bahwa, jika sesuai, beberapa

tambahan:

diberikan informasi tentang kelayakan penggunaan alat pelindung diri dan primer

perangkat penahanan (misalnya lemari pengaman biologis). Pertimbangan juga harus diberikan

untuk meningkatkan praktik dan prosedur biosafety dan tingkat penahanan umum untuk
organisme yang diketahui resisten terhadap banyak obat dan dalam kasus di mana volume atau

konsentrasi tinggi dari suatu agen dapat digunakan. Contoh dari

daftar klasifikasi tersedia dari Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit (CDC) dan

Institut Kesehatan Nasional (NIH), AS (1), dan Uni Eropa (UE) (2).
 Pedoman

2. Penilaian risiko

Tulang punggung praktik keamanan hayati adalah penilaian risiko. Meskipun ada banyak alat

yang tersedia untuk membantu dalam penilaian risiko untuk prosedur atau eksperimen tertentu,

komponen yang paling penting adalah penilaian profesional. Penilaian risiko harus dilakukan

oleh individu yang paling akrab dengan:

karakteristik spesifik organisme yang dipertimbangkan untuk digunakan, peralatan dan

prosedur yang harus dipekerjakan, model hewan yang dapat digunakan, dan peralatan dan

fasilitas penahanan yang tersedia. Itu direktur laboratorium atau peneliti utama bertanggung

jawab untuk memastikan bahwa risiko yang memadai dan tepat waktu

penilaian dilakukan dan untuk bekerja sama dengan komite keselamatan institusi (jika ada) dan

personel keamanan hayati (jika ada) untuk memastikan bahwa peralatan dan fasilitas yang

sesuai tersedia untuk:

mendukung pekerjaan yang sedang dipertimbangkan. Setelah dilakukan, penilaian risiko harus

ditinjau secara rutin dan direvisi bila perlu, dengan mempertimbangkan perolehan data baru

yang berkaitan dengan derajat risiko dan informasi baru lainnya yang relevan dari literatur

ilmiah. Salah satu alat paling membantu yang tersedia untuk melakukan penilaian risiko

mikrobiologis adalah daftar kelompok risiko untuk agen mikrobiologi (lihat Bab 1). Namun,

referensi sederhana untuk pengelompokan risiko untuk agen tertentu tidak cukup dalam

melakukan penilaian risiko. Faktor lain yang harusdipertimbangkan, sebagaimana mestinya,

meliputi:

– patogenisitas agen dan dosis infeksi

– pertimbangan hasil paparan

– jalur alami infeksi

– rute infeksi lain, akibat manipulasi laboratorium (parenteral, airborne, ingesti)

– stabilitas agen di lingkungan

– konsentrasi agen dan volume bahan terkonsentrasi yang akan dimanipulasi

– kehadiran inang yang sesuai (manusia atau hewan)

– informasi yang tersedia dari penelitian pada hewan dan laporan infeksi yang didapat di

laboratorium atau klinis laporan

– kegiatan laboratorium yang direncanakan (konsentrasi, sonikasi, aerosolisasi, sentrifugasi,

dll.)

– manipulasi genetik organisme apa pun yang dapat memperluas jangkauan inang agen atau

mengubah sensitivitas agen terhadap rejimen pengobatan yang diketahui dan efektif (lihat

Penilaian risiko dan genetik mikroorganisme yang dimodifikasi, di bawah)

- ketersediaan lokal profilaksis efektif atau intervensi terapeutik. Berdasarkan informasi yang

dipastikan selama penilaian risiko, tingkat keamanan hayati dapat ditentukan

ditugaskan untuk pekerjaan yang direncanakan dan peralatan pelindung pribadi yang sesuai

dipilih.

Berdasarkan informasi yang dipastikan selama penilaian risiko, tingkat keamanan hayati dapat

ditentukanditugaskan untuk pekerjaan yang direncanakan dan peralatan pelindung pribadi yang

sesuai dipilih. Spesimen yang informasinya terbatas Prosedur penilaian risiko yang dijelaskan

di atas berfungsi dengan baik bila ada informasi yang memadai tersedia. Namun, ada situasi

ketika informasi tidak cukup untuk melakukan risiko yang sesuai penilaian, misalnya, dengan

spesimen klinis atau sampel epidemiologi yang dikumpulkan di lapangan. Di kasus ini, adalah

bijaksana untuk mengambil pendekatan konservatif untuk manipulasi spesimen.

- Kewaspadaan universal (3) harus selalu diikuti, dan pelindung penghalang diterapkan (sarung

tangan, gaun pelindung, pelindung mata), terlepas dari asal sampel.

– Penahanan dasar – Tingkat Keamanan Hayati 2 harus menjadi persyaratan minimum untuk

penanganan spesimen.
– Pengangkutan spesimen harus mengikuti aturan dan peraturan nasional dan/atau

internasional. Beberapa informasi mungkin tersedia untuk membantu dalam menentukan risiko

penanganan spesimen ini:

. data medis pasien

. data epidemiologi (data morbiditas dan mortalitas, suspek jalur penularan, KLB lainnya) (data

penyelidikan)

. informasi tentang asal geografis spesimen.

Penilaian risiko dan mikroorganisme yang dimodifikasi secara genetik

Penilaian risiko untuk bekerja dengan mikroorganisme yang dimodifikasi secara genetik

(GMMO) harus mencakup: penilaian tingkat potensi bahaya yang mungkin timbul, tingkat

keparahan konsekuensi, dan kemungkinan atau frekuensi bahaya yang terjadi. Itu harus cocok

dan memadai; belum tentu menjadi sangat rinci. Ini mungkin sederhana, misalnya, di mana

segera jelas bahwa risikonya rendah atau bahwa tindakan pengendalian yang diusulkan jelas

memadai. Untuk operasi yang melibatkan organisme dengan bahaya rendah, terkenal dan

dipahami dengan baik, dimungkinkan untuk menentukan hasil penilaian hampir pada

pandangan pertama. Namun, untuk operasi kompleks yang melibatkan organisme yang lebih

berbahaya tentang yang mungkin ada beberapa tingkat ketidakpastian, penilaian harus

ekstensif dan mungkin memerlukan akuisisi data baru. Potensi bahaya (efek berbahaya) dari

pekerjaan yang melibatkan GMMO dapat dikaitkan dengan yang utama organisme penerima

atau inang, penerima potensial lainnya di lingkungan, atau mikroorganisme donor. Di banyak

kasus, karakteristik organisme inang akan lebih relevan dengan penilaian risiko daripada

yang berasal dari organisme donor. Faktor yang perlu dipertimbangkan selama identifikasi

bahaya termasuk patogenisitas, aktivitas biologis atau toksisitas produk gen asing, dan

mobilitas plasmid atau vektor virus. Sebagai panduan umum, jika organisme donor digunakan

hanya sebagai sumber DNA yang berkarakteristik baik untuk dipilih

fenotipe (misalnya resistensi kanamisin atau aktivitas -galaktosidase) atau promotor atau

kontrol lainnya urutan, karakteristik donor tidak perlu dipertimbangkan. Namun, jika sisipan

berisi gen yang mengkodekan molekul biologis aktif, racun atau faktor virulensi, kemudian

informasi yang relevan dari organisme donor harus dipertimbangkan.

Bahaya yang terkait dengan tuan rumah/penerima

Pertimbangan harus diberikan kepada:

. kerentanan tuan rumah

. patogenisitas strain inang, termasuk virulensi, infektivitas, produksi toksin dan modifikasi

jangkauan tuan rumah

. tingkat kekebalan penerima dan status sistem kekebalan tubuh. keseriusan konsekuensi

paparan

Bahaya yang timbul langsung dari gen yang disisipkan

Penilaian diperlukan dalam situasi di mana produk dari gen yang disisipkan telah diketahui

secara biologis sifat aktif yang dapat menimbulkan kerugian, misalnya:

. racun

. sitokin.

Hormon

. pengatur ekspresi gen

. faktor virulensi atau penambah

. resistensi antibiotik

. alergen.

Pertimbangan kasus tersebut harus mencakup perkiraan tingkat ekspresi yang diperlukan untuk

mencapai aktivitas biologis.

Bahaya yang timbul dari perubahan sifat patogen yang ada

Banyak modifikasi tidak melibatkan gen yang produknya secara inheren berbahaya tetapi efek

sampingnya mungkin terjadi timbul sebagai akibat dari perubahan sifat non-patogen atau

patogen yang ada. Modifikasi biasa gen dapat mengubah patogenisitas. Dalam upaya untuk

mengidentifikasi potensi bahaya ini, poin-poin berikut mungkin:

dipertimbangkan (daftar ini tidak lengkap).

. Apakah ada peningkatan infektivitas atau patogenisitas?

. Apakah mutasi yang melumpuhkan dalam diri penerima dapat diatasi sebagai akibat dari

penyisipan gen asing?

. Apakah gen asing mengkode penentu patogenisitas dari organisme lain (toksin bakteri,

invasin, integrin dan struktur permukaan seperti glikoprotein membran dan

lipopolisakarida)?

. Jika DNA asing memang termasuk penentu patogenisitas, apakah dapat diperkirakan bahwa

gen ini dapat? berkontribusi pada patogenisitas GMMO?

. Apakah pengobatan tersedia? . Akankah kerentanan GMMO terhadap antibiotik atau bentuk

terapi lain akan terpengaruh sebagai? konsekuensi dari modifikasi genetik?

. Apakah pemberantasan GMMO dapat dicapai?

Faktor lain yang perlu dipertimbangkan dalam penilaian risiko GMMO adalah adanya

sekuens gen yang berpotensi onkogenik dan potensi bahaya yang terkait dengan garis sel yang

digunakan, seperti adanya agen adventif. Masuknya seluruh hewan atau tumbuhan ke dalam

eksperimen juga membutuhkan pertimbangan yang cermat. Penyidik harus terbiasa dan

mematuhi peraturan, larangan dan persyaratan untuk melakukan pekerjaan dengan GMMO di

institusinya.
Untuk informasi lebih lanjut lihat Bab 11, dan referensi 4 dan 5.

3. Laboratorium Dasar – Tingkat Keamanan Hayati 1 dan 2

Untuk keperluan manual ini, panduan dan rekomendasi diberikan sebagai persyaratan

minimum berkaitan dengan laboratorium dari semua tingkat keamanan hayati diarahkan pada

mikroorganisme di Kelompok Risiko 1-4. Meskipun beberapa tindakan pencegahan mungkin

tampak tidak diperlukan untuk beberapa organisme dalam Kelompok Risiko 1, mereka
diinginkan untuk tujuan pelatihan untuk mempromosikan teknik mikrobiologi yang baik (yaitu

aman).

Laboratorium diagnostik dan perawatan kesehatan (kesehatan masyarakat, klinis atau berbasis

rumah sakit) semuanya harus dirancang untuk Tingkat Keamanan Hayati 2 atau lebih tinggi.

Karena tidak ada laboratorium yang memiliki kendali penuh atas spesimen yang diterimanya,

pekerja laboratorium kadang-kadang dan tidak terduga dapat terpapar organisme dalam

kelompok risiko yang lebih tinggi dari yang diantisipasi. Kemungkinan ini harus diakui dalam

pengembangan rencana dan kebijakan keselamatan. Di beberapa negara, akreditasi

laboratorium klinis diperlukan. Secara global, kewaspadaan universal (3) harus selalu diadopsi

dan dipraktekkan.

Pedoman untuk laboratorium dasar

– Tingkat Keamanan Hayati 1 dan 2 yang disajikan di sini bersifat komprehensif

dan rinci, karena merupakan dasar untuk semua tingkat laboratorium. Pedoman untuk

penahanan laboratorium

– Biosafety Level 3 dan laboratorium penahanan maksimum – Biosafety Level 4 yang

mengikuti (Bab 4 dan 5) adalah modifikasi dan tambahan dari pedoman ini, yang dirancang

untuk bekerja dengan patogen yang lebih berbahaya (berbahaya).

Kode praktik

Kode ini adalah daftar praktik dan prosedur laboratorium paling penting yang merupakan dasar

untuk kebaikan teknik mikrobiologi. Di banyak laboratorium dan program laboratorium

nasional, kode ini mungkin:

digunakan untuk mengembangkan praktik dan prosedur tertulis untuk operasi laboratorium

yang aman. Setiap laboratorium harus mengadopsi “manual keselamatan atau operasi” yang

mengidentifikasi yang diketahui dan potensial bahaya, dan menentukan praktik dan prosedur

untuk menghilangkan atau meminimalkan bahaya tersebut. Bagus teknik mikrobiologi adalah

dasar untuk keselamatan laboratorium. Peralatan laboratorium khusus adalah melengkapi tetapi

tidak pernah dapat menggantikan prosedur yang sesuai. Konsep yang paling penting terdaftar

di bawah.

Mengakses

1. Simbol dan tanda peringatan bahaya hayati internasional (Gbr. 1) harus dipajang di pintu

ruangan di mana mikroorganisme Kelompok Risiko 2 atau kelompok risiko lebih tinggi

ditangani.

2. Hanya orang yang berwenang yang boleh memasuki area kerja laboratorium.

3. Pintu laboratorium harus tetap tertutup.

4. Anak-anak di bawah usia 16 tahun tidak boleh diizinkan atau diizinkan memasuki pekerjaan

laboratorium daerah.

5. Akses ke kandang hewan harus mendapat izin khusus.

6. Hewan yang tidak terlibat dalam pekerjaan laboratorium tidak boleh diizinkan berada di

laboratorium.

7. Tanda “Dilarang Merokok” “Dilarang Makan” dan “Dilarang Minum” harus ditampilkan

dengan jelas di dalam dan di luar laboratorium.

Perlindungan pribadi

1. Baju, gaun atau seragam laboratorium harus dipakai setiap saat untuk bekerja di

laboratorium.
2. Sarung tangan yang sesuai harus dipakai untuk semua prosedur yang mungkin melibatkan

kontak langsung atau tidak disengaja dengan

darah, bahan infeksius atau hewan yang terinfeksi. Setelah digunakan, sarung tangan harus

dilepas secara aseptik dan tangan kemudian harus dicuci.

3. Personil harus mencuci tangan mereka setelah menangani bahan dan hewan menular, dan

sebelum mereka meninggalkan area kerja laboratorium.

4. Kacamata pengaman, pelindung wajah (visor) atau alat pelindung lainnya harus dipakai

ketika diperlukan untuk melindungi mata dan wajah dari percikan, benturan benda dan sumber

ultraviolet buatan radiasi.

5. Dilarang mengenakan pakaian laboratorium pelindung di luar laboratorium, mis. di kantin,

kopi kamar, kantor, perpustakaan, ruang staf dan toilet.

6. Alas kaki berujung terbuka tidak boleh dipakai di laboratorium.

7. Dilarang makan, minum, mengoleskan kosmetik, dan memegang lensa kontak di

laboratorium wilayah kerja.

8. Dilarang menyimpan makanan atau minuman manusia di sembarang tempat di area kerja

laboratorium.

9. Pakaian laboratorium pelindung tidak boleh disimpan di loker atau lemari yang sama dengan

jalan pakaian.

Prosedur

1. Pemipetan melalui mulut harus dilarang keras.

2. Bahan tidak boleh dimasukkan ke dalam mulut. Label tidak boleh dijilat.
3. Semua prosedur teknis harus dilakukan dengan cara yang meminimalkan pembentukan

aerosol dan droplet. Setiap kali ada peningkatan risiko aerosolisasi, pekerjaan harus dilakukan

di a lemari keamanan biologis.

4. Penggunaan jarum suntik dan spuit harus dibatasi. Mereka tidak boleh digunakan sebagai

pengganti untuk alat pemipetan atau untuk tujuan apa pun selain injeksi parenteral atau aspirasi

cairan dari: hewan laboratorium.

5. Semua tumpahan, kecelakaan, dan paparan terbuka atau potensial terhadap bahan infeksius

harus dilaporkan ke: pengawas laboratorium. Catatan tertulis tentang kecelakaan dan insiden

tersebut harus dipelihara.

6. Prosedur tertulis untuk pembersihan semua tumpahan harus dikembangkan dan dipatuhi.

Area kerja laboratorium

1. Laboratorium harus dijaga rapi, bersih dan bebas dari bahan-bahan yang tidak berhubungan

dengan pekerjaan.

2. Permukaan kerja harus didekontaminasi setelah ada tumpahan bahan yang berpotensi

berbahaya dan di akhir hari kerja.

3. Semua bahan, spesimen, dan biakan yang terkontaminasi harus didekontaminasi sebelum

dibuang atau pembersihan untuk digunakan kembali.

4. Pengepakan dan pengangkutan harus mengikuti peraturan nasional dan/atau internasional

yang berlaku.

5. Jika jendela dapat dibuka, jendela tersebut harus dilengkapi dengan tirai anti artropoda.

Manajemen keamanan hayati

1. Ini adalah tanggung jawab direktur laboratorium (orang yang memiliki tanggung jawab

langsung untuk laboratorium) untuk memastikan pengembangan dan penerapan rencana

manajemen keamanan hayati dan manual operasi.

2. Supervisor laboratorium (bertanggung jawab kepada direktur laboratorium) harus

memastikan bahwa pelatihan rutin dalam keamanan laboratorium disediakan.

3. Personil harus diberi tahu tentang bahaya khusus dan diharuskan membaca manual

keselamatan atau operasi dan mengikuti praktik dan prosedur standar. Supervisor laboratorium

harus memastikan bahwa semua personel memahami ini. Salinan manual keselamatan atau

operasi harus tersedia di: laboratorium.

4. Bila perlu, harus ada program pengendalian artropoda dan hewan pengerat.

5. Evaluasi medis, pengawasan dan pengobatan yang tepat harus disediakan untuk semua

personel di kasus kebutuhan, dan catatan medis yang memadai harus dipelihara.

6. Sampel serum awal dapat dikumpulkan dari staf laboratorium dan orang lain yang berisiko.

Ini harus disimpan dengan tepat sesuai dengan pedoman nasional atau lokal. Spesimen

tambahan mayu dikumpulkan secara berkala tergantung pada organisme yang ditangani dan

fungsi laboratorium.

Desain dan fasilitas laboratorium

Dalam merancang laboratorium dan menugaskan jenis pekerjaan tertentu padanya, perhatian

khusus harus diberikan pada:

kondisi yang diketahui menimbulkan masalah keamanan.

Ini termasuk:

- pembentukan aerosol

– bekerja dengan mikroorganisme dalam volume besar dan/atau konsentrasi tinggi

– kepadatan penduduk dan terlalu banyak peralatan

– infestasi hewan pengerat dan artropoda

– pintu masuk yang tidak sah

– alur kerja: penggunaan sampel dan reagen tertentu.

Fitur desain

1. Ruang yang cukup harus disediakan untuk pelaksanaan pekerjaan laboratorium yang aman

dan untuk pembersihan dan pemeliharaan.

2. Dinding, langit-langit dan lantai harus halus, mudah dibersihkan, kedap cairan dan tahan

terhadap bahan kimia dan desinfektan yang biasanya digunakan di laboratorium. Lantai harus

anti slip. Pipa dan saluran yang terbuka harus dihindari jika memungkinkan.

3. Bagian atas bangku harus disegel ke dinding, tahan air dan tahan terhadap desinfektan, asam,

alkali, pelarut organik dan panas sedang.

4. Penerangan harus memadai untuk semua kegiatan. Refleksi dan silau yang tidak diinginkan

harus dihindari.

5. Furnitur laboratorium harus kokoh. Ruang terbuka antara dan di bawah bangku, lemari dan

peralatan harus dapat diakses untuk dibersihkan.

6. Ruang penyimpanan harus cukup untuk menampung persediaan untuk penggunaan segera

dan dengan demikian mencegah kekacauan bangku dan di gang. Ruang penyimpanan

tambahan jangka panjang, berlokasi strategis di luar area kerja laboratorium, juga harus

disediakan.
7. Ruang dan fasilitas harus disediakan untuk penanganan dan penyimpanan yang aman dari

pelarut, radioaktif bahan, dan gas terkompresi dan cair.

8. Fasilitas untuk menyimpan pakaian luar dan barang-barang pribadi harus disediakan di luar

laboratorium wilayah kerja.

9. Fasilitas makan dan minum serta istirahat harus disediakan di luar area kerja laboratorium.

10. Bak cuci tangan, dengan air mengalir jika memungkinkan, harus disediakan di setiap ruang

laboratorium, sebaiknya di dekat pintu keluar.

11. Pintu harus memiliki panel penglihatan, dapat menutup sendiri dan memiliki peringkat api

yang sesuai.

12. Autoklaf harus tersedia di gedung yang sama dengan laboratorium.

13. Sistem keselamatan harus mencakup kebakaran, darurat listrik, mandi darurat dan fasilitas

pencuci mata.

14. Area P3K atau kamar yang dilengkapi dengan baik dan mudah diakses harus tersedia.

15. Tidak ada persyaratan ventilasi khusus untuk laboratorium yang menangani Grup Risiko 1

dan 2

mikroorganisme. Namun, dalam perencanaan fasilitas baru, pertimbangan harus diberikan

kepada: penyediaan sistem ventilasi mekanis yang menyediakan aliran udara ke dalam tanpa

resirkulasi. Jika tidak ada ventilasi mekanis, jendela harus dapat dibuka dan harus dilengkapi

dengan layar anti-artropoda.

16. Pasokan air berkualitas baik yang dapat diandalkan sangat penting. Seharusnya tidak ada

koneksi silang antara sumber laboratorium dan persediaan air minum. Perangkat anti-arus balik

harus melindungi sistem air publik.

17. Harus ada pasokan listrik dan penerangan darurat yang andal dan memadai untuk

memungkinkan jalan keluar yang aman. Sebuah generator stand-by diinginkan untuk
mendukung peralatan penting, seperti inkubator, lemari pengaman biologis, freezer, dll., dan

untuk ventilasi kandang hewan.

18. Harus ada pasokan gas yang andal dan memadai. Pemeliharaan instalasi yang baik adalah

wajib.

19. Tiga aspek pembuangan limbah perlu mendapat perhatian khusus untuk memenuhi kinerja

dan pengendalian pencemaran

persyaratan:

– otoklaf untuk pengolahan limbah padat membutuhkan akomodasi dan layanan yang

dirancang khusus

– insinerator harus berdesain khusus, dilengkapi dengan afterburner dan pemakan asap

perangkat

– air limbah yang terkontaminasi harus didekontaminasi.

20. Laboratorium dan kandang hewan terkadang menjadi sasaran para pengacau. Keamanan

fisik dan kebakaran harus diperhatikan. Pintu yang kuat, jendela yang disaring, dan masalah

kunci yang dibatasi adalah wajib. Langkah-langkah lain harus dipertimbangkan dan diterapkan,

sebagaimana mestinya, untuk meningkatkan keamanan.

Peralatan laboratorium

Bersama dengan prosedur dan praktik yang baik, penggunaan peralatan keselamatan akan

membantu mengurangi risiko ketika menangani bahaya biosafety. Bagian ini membahas

prinsip-prinsip dasar yang berkaitan dengan peralatan yang cocok untuk

laboratorium dari semua tingkat keamanan hayati. Persyaratan untuk peralatan laboratorium

yang berkaitan dengan keamanan hayati yang lebih tinggi tingkat dibahas dalam bab-bab yang
relevan. Direktur laboratorium harus, setelah berkonsultasi dengan petugas keamanan hayati

dan komite keselamatan (jika: ditunjuk), memastikan bahwa peralatan yang memadai

disediakan dan digunakan dengan benar. Peralatan harus dipilih untuk mempertimbangkan

prinsip-prinsip umum tertentu, yaitu harus:

– dirancang untuk mencegah atau membatasi kontak antara operator dan bahan infeksius

– terbuat dari bahan yang kedap cairan, tahan terhadap korosi dan memenuhi struktur

persyaratan

– dibuat agar bebas dari gerinda, tepi tajam dan bagian bergerak yang tidak dijaga

– dirancang, dibangun, dan dipasang untuk memfasilitasi pengoperasian sederhana dan

memberikan kemudahan pemeliharaan, pembersihan, dekontaminasi dan pengujian sertifikasi;

barang pecah belah dan barang pecah belah lainnya bahan harus dihindari, bila memungkinkan.

Kinerja terperinci dan spesifikasi konstruksi mungkin perlu dikonsultasikan untuk memastikan

bahwa: peralatan memiliki fitur keselamatan yang diperlukan.

Peralatan biosafety penting

1. Alat bantu pemipetan – untuk menghindari pemipetan mulut. Banyak desain yang berbeda

tersedia.

2. Lemari pengaman biologis, untuk digunakan kapan pun:

– bahan infeksius ditangani; bahan tersebut dapat disentrifugasi di laboratorium terbuka jika:

cangkir pengaman centrifuge tertutup digunakan dan jika dimuat dan dibongkar dalam

keamanan biologis kabinet

– ada peningkatan risiko infeksi melalui udara

– prosedur dengan potensi tinggi untuk menghasilkan aerosol digunakan; ini mungkin

termasuk sentrifugasi, penggilingan, pencampuran, pengocokan atau pencampuran yang kuat,

gangguan sonik, pembukaan wadah bahan infeksius yang tekanan internalnya mungkin

berbeda dari lingkungan; tekanan, inokulasi intranasal hewan, dan pengambilan jaringan

menular dari hewan dan telur.

3. Loop transfer plastik sekali pakai. Sebagai alternatif, insinerator loop transfer listrik dapat

digunakan di dalam kabinet keamanan biologis (BSC) untuk mengurangi produksi aerosol.

4. Tabung dan botol dengan tutup sekrup.

5. Autoklaf untuk mendekontaminasi bahan infeksius.

6. Pipet Pasteur plastik sekali pakai, bila tersedia, untuk menghindari kaca.

7. Peralatan seperti autoklaf dan lemari pengaman biologis harus divalidasi dengan tepat

metode (biasanya oleh pemeriksa bersertifikat) sebelum digunakan. Sertifikasi ulang harus

dilakukan tempatkan secara berkala, sesuai dengan instruksi pabrik.

Surveilans kesehatan dan medis lance

Otoritas pemberi kerja, melalui direktur laboratorium, bertanggung jawab untuk memastikan

bahwa ada:

pengawasan yang memadai terhadap kesehatan personel laboratorium. Tujuan dari

pengawasan tersebut adalah untuk memantau penyakit akibat kerja. Kegiatan yang tepat untuk

mencapai tujuan tersebut adalah:

– berikan imunisasi aktif atau pasif jika diindikasikan (lihat Lampiran 1)

– memfasilitasi deteksi dini infeksi yang didapat di laboratorium

– singkirkan individu yang sangat rentan (seperti wanita hamil) dari laboratorium yang sangat

berbahaya bekerja

– menyediakan peralatan dan prosedur perlindungan pribadi yang efektif.

Pedoman surveilans pekerja laboratorium yang menangani mikroorganisme di Risiko

Grup 1

Bukti sejarah menunjukkan bahwa mikroorganisme ini tidak mungkin menyebabkan penyakit

pada manusia atau hewan penyakit penting veteriner. Namun, idealnya, semua pekerja

laboratorium harus menjalani pemeriksaan kesehatan sebelum bekerja di mana riwayat

kesehatan mereka dicatat. Pelaporan penyakit yang cepat atau kecelakaan laboratorium

diinginkan dan semua anggota staf harus disadarkan akan pentingnya:

mempertahankan teknik mikrobiologi yang baik.

Pedoman surveilans pekerja laboratorium yang menangani mikroorganisme di Risiko

Grup 2

1. Pemeriksaan kesehatan pra-kerja atau sebelum penempatan diperlukan. Riwayat kesehatan

orang tersebut harus dicatat dan pemeriksaan klinis dan pengumpulan sampel serum dasar

direkomendasikan.

2. Catatan penyakit dan ketidakhadiran harus disimpan oleh manajemen laboratorium; itu

adalah tanggung jawab pekerja laboratorium dan penasihat medisnya sendiri untuk memberi

tahu direktur laboratorium dari semua ketidakhadiran karena sakit.

3. Wanita usia subur harus disadarkan akan risiko pada anak yang belum lahir dari pekerjaan

paparan mikroorganisme tertentu, mis. virus rubella. Langkah-langkah tepat yang diambil

untuk melindungi janin akan bervariasi, tergantung pada mikroorganisme yang mungkin

terpapar pada wanita.

Pelatihan

Kesalahan manusia dan teknik yang buruk dapat membahayakan perlindungan terbaik untuk

melindungi pekerja laboratorium. Oleh karena itu, staf yang sadar akan keselamatan, mendapat

informasi yang baik tentang pengenalan dan pengendalian bahaya laboratorium, adalah kunci

untuk pencegahan infeksi, insiden dan kecelakaan yang didapat di laboratorium. Untuk alasan

ini, pelatihan in-service terus menerus dalam langkah-langkah keselamatan sangat penting.

Program keselamatan yang efektif dimulai dengan manajer laboratorium, yang harus

memastikan bahwa praktik dan prosedur laboratorium yang aman terintegrasi ke dalam

pelatihan dasar karyawan. Pelatihan dalam langkah-langkah keselamatan harus menjadi bagian

integral dari pengenalan karyawan ke laboratorium. Karyawan harus diperkenalkan dengan

kode praktik dan untuk pedoman lokal. Langkah-langkah untuk memastikan bahwa karyawan

telah membaca dan memahami pedoman, seperti:

halaman tanda tangan, harus diadopsi. Supervisor laboratorium memainkan peran kunci dalam

pelatihan langsung mereka staf dalam teknik laboratorium yang baik. Petugas keamanan hayati

dapat membantu dalam pelatihan dan pengembangan

alat bantu pelatihan dan dokumentasi. Pelatihan staf harus selalu mencakup metode yang aman

untuk menangani hal-hal yang sangat berbahaya berikut ini:

prosedur yang biasa ditemui oleh semua personel laboratorium,

yang melibatkan:
– risiko inhalasi (yaitu produksi aerosol), seperti penggunaan loop, penggoresan pelat agar,

pemipetan, pembuatan apusan, kultur pembukaan, pengambilan sampel darah/serum,

sentrifugasi

– risiko tertelan, seperti menangani spesimen, apusan, dan kultur

– risiko paparan perkutan, melalui penggunaan jarum suntik dan teknik jarum

– penanganan hewan yang dapat mengakibatkan gigitan dan cakaran

– penanganan darah dan bahan patologis yang berpotensi berbahaya lainnya

- dekontaminasi dan pembuangan bahan infeksius.

Penanganan limbah

Sampah adalah segala sesuatu yang akan dibuang. Di laboratorium, dekontaminasi limbah dan

pembuangan akhir mereka saling terkait erat. dalam istilah penggunaan sehari-hari, hanya

sedikit jika ada bahan yang terkontaminasi yang memerlukan pemindahan aktual dari

laboratorium atau penghancuran. Sebagian besar barang pecah belah, instrumen, dan pakaian

laboratorium akan digunakan kembali atau didaur ulang. Itu Prinsip utamanya adalah bahwa

semua bahan infeksius harus didekontaminasi, diautoklaf, atau dibakar di dalam laboratorium.

Pertanyaan utama yang harus ditanyakan sebelum membuang benda atau bahan apa pun dari

laboratorium yang:

menangani mikroorganisme atau jaringan hewan yang berpotensi menular adalah sebagai

berikut.

1. Apakah benda atau bahan telah didekontaminasi atau didesinfeksi secara efektif oleh petugas

yang disetujui? prosedur?

2. Jika tidak, apakah sudah dikemas dengan cara yang disetujui untuk segera dibakar atau

dipindahkan di tempat? ke fasilitas lain dengan kapasitas insinerasi?

3. Apakah pembuangan benda atau bahan yang didekontaminasi melibatkan potensi tambahan?

bahaya, biologis atau lainnya, kepada mereka yang melakukan prosedur pembuangan segera

atau yang mungkin bersentuhan dengan barang-barang yang dibuang di luar fasilitas?

Dekontaminasi

Autoklaf uap adalah metode yang disukai untuk semua proses dekontaminasi. Bahan untuk

dekontaminasi dan pembuangan harus ditempatkan dalam wadah, mis. kantong plastik yang

dapat diautoklaf yaitu diberi kode warna sesuai dengan apakah isinya akan diautoklaf dan/atau

dibakar. Alternatif metode dapat dipertimbangkan hanya jika mereka menghilangkan dan/atau

membunuh mikroorganisme (untuk lebih jelasnya lihat Bab 14). Disinfektan dan bahan kimia

Manual keselamatan atau operasi harus mencakup kebijakan tertulis yang menyatakan

disinfektan mana yang akan digunakan untuk tujuan apa, dan pengenceran yang

direkomendasikan pabrik untuk setiap disinfektan. Pabrikan harus dapat memberikan

dokumentasi yang relevan. Pastikan setiap disinfektan telah divalidasi fungsinya

indikasi penggunaan di laboratorium.

Sodium hipoklorit dan senyawa fenolik adalah disinfektan yang direkomendasikan untuk

umum penggunaan laboratorium.

Untuk tujuan khusus, berbagai zat aktif permukaan atau perusak lipid, termasuk alkohol,

yodium, iodofor dan zat pengoksidasi lainnya, serta pH yang sangat tinggi atau sangat rendah,

dapat efektif, asalkan telah ditetapkan bahwa bahan yang akan dimusnahkan tidak tahan

terhadap prosedur. Metode lain Penggunaan panas kering tidak disarankan karena variasinya

yang tidak dapat diprediksi. Demikian pula, gelombang mikro, ultraviolet dan radiasi pengion

tidak cocok. Teknologi baru, termasuk hidrolisis alkali, dapat digunakan sebagai pengganti

insinerasi untuk pengolahan limbah infeksius terminal.

Prosedur penanganan dan pembuangan limbah

Sistem identifikasi dan pemisahan untuk bahan infeksius dan wadahnya hendaklah diadopsi.

Kategori harus mencakup yang berikut ini.

1. Limbah tidak terkontaminasi (tidak menular) yang dapat digunakan kembali atau didaur

ulang atau dibuang seperti biasa, "limbah rumah tangga.

2. Benda tajam yang terkontaminasi (menular) – jarum suntik, pisau bedah, pisau dan pecahan

kaca; ini harus selalu dikumpulkan dalam wadah tahan tusukan yang dilengkapi dengan

penutup dan diperlakukan sebagai infeksius.

3. Bahan yang terkontaminasi untuk dekontaminasi dengan autoklaf dan setelah itu dicuci dan

digunakan kembali atau mendaur ulang.

4. Bahan yang terkontaminasi untuk autoklaf dan pembuangan.

5. Bahan yang terkontaminasi untuk pembakaran langsung.

benda tajam

Setelah digunakan, jarum suntik tidak boleh ditutup kembali, dipotong atau dilepas dari jarum

suntik sekali pakai. Rakitan lengkap harus ditempatkan dalam wadah benda tajam. Wadah

benda tajam harus ditusuk bukti dan tidak terisi penuh. Ketika mereka tiga perempat penuh

mereka harus ditempatkan di "menular" limbah” dan dibakar, dengan autoklaf sebelumnya jika

praktik laboratorium memerlukannya. benda tajam

wadah tidak boleh dibuang ke tempat pembuangan akhir. Jarum suntik sekali pakai, digunakan

sendiri atau dengan jarum, harus ditempatkan dalam wadah dan dibakar, dengan: autoklaf

sebelumnya jika diperlukan.

Bahan yang terkontaminasi (menular) untuk diautoklaf dan digunakan kembali

Pembersihan awal tidak boleh dilakukan terhadap bahan yang terkontaminasi (menular) yang

akan diautoklaf dan digunakan kembali. Pembersihan atau perbaikan yang diperlukan harus

dilakukan hanya setelah autoklaf atau disinfeksi.

Bahan yang terkontaminasi (menular) untuk dibuang

Selain benda tajam, yang dibahas di atas, semua bahan yang terkontaminasi (berpotensi

menular) harus diautoklaf dalam wadah anti bocor, mis. kantong plastik berkode warna yang

dapat diautoklaf, sebelum dibuang. Setelah autoklaf, bahan dapat ditempatkan dalam wadah

transfer untuk diangkut ke insinerator. Jika memungkinkan, bahan yang berasal dari kegiatan

perawatan kesehatan tidak boleh dibuang di tempat pembuangan sampah bahkan setelah

dekontaminasi. Jika insinerator tersedia di lokasi laboratorium, autoklaf dapat dihilangkan:

limbah yang terkontaminasi harus ditempatkan dalam wadah yang ditentukan (misalnya tas

berkode warna) dan diangkut langsung ke autoklaf atau insinerator. Wadah transfer yang dapat

digunakan kembali harus tahan bocor dan memiliki penutup yang rapat. Mereka harus

didesinfeksi dan dibersihkan sebelum dikembalikan ke laboratorium untuk penggunaan lebih

lanjut. Buang panci, wajan atau stoples, lebih disukai yang tidak mudah pecah (misalnya

plastik), dan mengandung disinfektan yang sesuai, baru disiapkan setiap hari, harus

ditempatkan di setiap stasiun kerja. Bahan limbah harus tetap berada di kontak intim dengan

disinfektan (yaitu tidak dilindungi oleh gelembung udara) untuk waktu yang tepat, menurut

disinfektan yang digunakan (lihat Bab 14). Desinfektan kemudian harus dituangkan ke dalam

wadah untuk

autoklaf atau pembakaran. Pot buangan harus diautoklaf dan dicuci sebelum digunakan

kembali. Insinerasi adalah metode pilihan untuk pembuangan akhir limbah yang

terkontaminasi, termasuk bangkai hewan laboratorium (lihat bagian tentang Insinerasi di Bab

14). Pembakaran limbah yang terkontaminasi harus memenuhi persetujuan dari otoritas
kesehatan masyarakat dan polusi udara, serta persetujuan dari petugas keamanan hayati

laboratorium.

Keamanan kimia, kebakaran, listrik dan radiasi

Kerusakan dalam penahanan organisme patogen mungkin merupakan akibat tidak langsung

dari bahan kimia, kebakaran, kecelakaan listrik atau radiasi. Oleh karena itu, penting untuk

mempertahankan standar keselamatan yang tinggi dalam hal ini

lapangan di setiap laboratorium mikrobiologi. Aturan dan peraturan perundang-undangan

untuk masing-masing ini biasanya akan ditetapkan oleh otoritas nasional atau lokal yang

berwenang, yang bantuannya harus dicari jika perlu. Bahaya kimia, kebakaran, dan listrik

dipertimbangkan secara lebih rinci di Bagian IV manual ini

(Bab 15-17).

4. Laboratorium penahanan – Tingkat Keamanan Hayati 3

Laboratorium penahanan – Tingkat Keamanan Hayati 3 dirancang dan disediakan untuk

bekerja dengan Grup Risiko 3 mikroorganisme dan dengan volume besar atau konsentrasi

tinggi mikroorganisme Kelompok Risiko 2 yang menimbulkan

peningkatan risiko penyebaran aerosol. Penahanan Biosafety Level 3 membutuhkan penguatan

program operasional dan keselamatan di atas yang untuk laboratorium dasar – Tingkat

Keamanan Hayati 1 dan 2 (ditetapkan dalam Bab 3).

Pedoman yang diberikan dalam bab ini disajikan dalam bentuk tambahan untuk

pedoman dasar laboratorium

– Tingkat Keamanan Hayati 1 dan 2, yang karenanya harus diterapkan sebelum yang spesifik

untuk laboratorium penahanan

– Tingkat Keamanan Hayati 3. Penambahan dan perubahan utama adalah sebagai berikut:

. kode praktik. desain dan fasilitas laboratorium

. kesehatan dan pengawasan medis.

Laboratorium dalam kategori ini harus terdaftar atau terdaftar dengan nasional atau lainnya

yang sesuai otoritas kesehatan.

Kode praktik

Kode praktik untuk laboratorium dasar

– Tingkat Keamanan Hayati 1 dan 2 berlaku kecuali jika dimodifikasi sebagai berikut.

1. Aturan dua orang harus diterapkan, di mana tidak ada individu yang pernah bekerja sendirian

di laboratorium.

2. Simbol dan tanda peringatan bahaya hayati internasional (lihat Gambar 1) ditampilkan pada

akses laboratorium, pintu harus mengidentifikasi mikroorganisme yang ditangani dan nama

supervisor laboratorium yang:

mengontrol akses, dan menunjukkan kondisi khusus apa pun untuk masuk ke area tersebut,

mis. imunisasi.

3. Pakaian pelindung laboratorium harus dari jenis dengan gaun depan yang kokoh atau gaun

penutup, pakaian gosok, baju, penutup kepala dan, jika sesuai, penutup sepatu atau sepatu

khusus. Kancing depan jas laboratorium standar tidak cocok. Pakaian pelindung laboratorium

tidak boleh dipakai di luar laboratorium, dan harus didekontaminasi sebelum dicuci.

4. Bila perlu, peralatan pernapasan harus dipakai di ruangan yang berisi hewan yang terinfeksi.

Desain dan fasilitas laboratorium

Laboratorium penahanan – Tingkat Keamanan Hayati 3 dirancang untuk bekerja dengan

mikroorganisme Kelompok Risiko 3 dan dengan volume besar dan konsentrasi tinggi

mikroorganisme Kelompok Risiko 2, di mana terdapatrisiko penyebaran aerosol dan

konsekuensi yang mengancam jiwa berikutnya dari infeksi. Desain laboratorium dan fasilitas

untuk laboratorium dasar

– Tingkat Keamanan Hayati 1 dan 2 berlaku kecuali:

dimana dimodifikasi sebagai berikut.

1. Laboratorium harus dipisahkan dari area yang terbuka untuk arus lalu lintas tidak terbatas di

dalam bangunan. Pemisahan tambahan dapat dicapai dengan menempatkan laboratorium di

ujung buta a koridor, atau membangun partisi dan pintu atau akses melalui ruang depan atau

laboratorium dasar –Tingkat Keamanan Hayati 2.

2. Masuk untuk personel harus melalui ruang depan (yaitu pintu masuk ganda).

3. Akses ke area laboratorium harus dirancang untuk mencegah masuknya artropoda dan hama

lainnya.

4. Pintu akses harus dapat menutup sendiri dan dapat dikunci. Panel penembus dapat disediakan

untuk penggunaan pintu darurat.

5. Permukaan dinding, lantai dan langit-langit harus kedap air dan mudah dibersihkan. Bukaan

di permukaan ini (misalnya untuk pipa servis) harus disegel untuk memfasilitasi dekontaminasi

ruangan.

6. Ruang laboratorium harus dapat ditutup rapat untuk dekontaminasi. Sistem saluran udara

harus dibangun untuk memungkinkan dekontaminasi gas.

7. Jendela harus ditutup, disegel dan tahan pecah.

8. Sumber air yang dioperasikan dengan kaki atau siku atau dikontrol secara otomatis di bak

cuci tangan harus: disediakan di dekat setiap pintu keluar.

9. Harus ada sistem ventilasi yang menetapkan aliran udara terarah dari ruang akses ke dalam

ruang laboratorium. Staf harus selalu memastikan aliran udara terarah yang tepat ke dalam

ruang laboratorium dipertahankan.

10. Sistem ventilasi gedung harus dibuat sedemikian rupa sehingga udara dari laboratorium

pengungkung –Biosafety Level 3 tidak disirkulasikan ke area lain di dalam gedung. Udara

dapat disaring dengan HEPA, direkondisi dan disirkulasikan kembali di dalam laboratorium

itu. Udara buang dari laboratorium (selain dari lemari pengaman biologis) harus dibuang ke

luar gedung, sehingga tersebar jauh dari bangunan yang ditempati dan saluran masuk udara.

Direkomendasikan bahwa udara ini dibuang melalui filter udara partikulat efisiensi tinggi

(HEPA).

11. Lemari pengaman biologis harus ditempatkan jauh dari area pejalan kaki dan keluar dari

arus silang dari pintu dan sistem ventilasi (lihat Bab 7).

12. Udara buangan dari lemari pengaman biologis Kelas I atau Kelas II (lihat Bab 7), yang

akan memiliki: telah melewati filter HEPA, harus dibuang sedemikian rupa untuk menghindari

gangguan pada keseimbangan udara kabinet atau sistem pembuangan gedung. Semua filter

HEPA harus dipasang di a cara yang memungkinkan dekontaminasi dan pengujian gas.

13. Autoklaf untuk dekontaminasi bahan limbah yang terkontaminasi harus tersedia di:

laboratorium penahanan. Jika limbah infeksius harus diangkut keluar dari laboratorium

penahanan untuk pembuangan, mereka harus diangkut dalam wadah tertutup rapat, tidak pecah

dan tahan bocor sesuai dengan: peraturan nasional atau internasional, sebagaimana mestinya.

14. Perangkat anti-arus balik harus dipasang ke pasokan air.

15. Limbah harus didekontaminasi sebelum dibuang ke saluran pembuangan sanitasi.

Peralatan laboratorium

Prinsip pemilihan peralatan, termasuk lemari pengaman biologis (lihat Bab 7), adalah:
sama dengan laboratorium dasar – Tingkat Keamanan Hayati 2, kecuali kegiatan yang

melibatkan bahan infeksius dilakukan di lemari pengaman biologis bila memungkinkan,

bersama dengan penahanan fisik lainnya perangkat, atau alat pelindung diri khusus. Sementara

lemari pengaman biologis Kelas I atau Kelas II adalah biasanya digunakan di laboratorium

penahanan – Biosafety Level 3, kabinet keamanan biologis Kelas III mungkin diperlukan untuk

prosedur berisiko tinggi yang melibatkan mikroorganisme Kelompok Risiko 3, sesuai dengan

aturan nasional

Pengawasan kesehatan dan medis

Tujuan program pengawasan kesehatan dan medis untuk laboratorium dasar – Tingkat

Keamanan Hayati 1 dan 2 juga berlaku untuk laboratorium penahanan – Tingkat Keamanan

Hayati 3, kecuali jika dimodifikasi sebagai berikut.

1. Pemeriksaan kesehatan terhadap semua petugas laboratorium yang bekerja di ruang

penyimpanan Biosafety Level 3 laboratorium adalah wajib. Ini harus mencakup pencatatan

riwayat medis terperinci dan pemeriksaan fisik penyelidikan.

2. Sampel serum dasar harus diperoleh dan disimpan untuk referensi di masa mendatang.

3. Individu yang mengalami gangguan kekebalan tidak boleh dipekerjakan di fasilitas dengan

Tingkat Keamanan Hayati 3 laboratorium penahanan.

4. Pertimbangan khusus harus diberikan untuk mempekerjakan wanita hamil (lihat bagian

tentang Pedoman untuk surveilans pekerja laboratorium yang menangani mikroorganisme di

Kelompok Risiko 2 di Bagian 3).

5. Setelah penilaian klinis yang memuaskan, peserta ujian harus diberikan kartu kontak medis

(Gbr. 2) menyatakan bahwa dia bekerja di fasilitas dengan laboratorium penahanan –

Keamanan Hayati Level 3. Disarankan bahwa kartu ini harus menyertakan gambar pemegang

kartu, berukuran dompet dan harus selalu dibawa oleh pemegangnya.

Catatan. Nama orang yang dapat dihubungi yang akan dimasukkan harus disetujui secara lokal

tetapi mungkin termasuk direktur laboratorium, penasihat medis dan/atau petugas keamanan

hayati.
 5. Laboratorium penahanan maksimum –Tingkat Keamanan Hayati 4

Laboratorium penahanan maksimum – Tingkat Keamanan Hayati 4 dirancang untuk bekerja

dengan Grup Risiko 4 mikroorganisme. Sebelum laboratorium semacam itu dibangun dan

dioperasikan, konsultasi intensif harus diadakan dengan institusi yang telah memiliki

pengalaman mengoperasikan fasilitas serupa. Operasional laboratorium penahanan maksimum

– Tingkat Keamanan Hayati 4 harus berada di bawah kendali nasional atau lainnya otoritas

kesehatan yang sesuai.

Desain dan fasilitas laboratorium

Fitur laboratorium penahanan – Biosafety Level 3 juga berlaku untuk penahanan maksimum

laboratorium – Tingkat Keamanan Hayati 4 dengan tambahan sebagai berikut.

1. Penahanan primer. Sistem penahanan primer yang efisien harus ada, terdiri dari satu

atau kombinasi berikut ini.

. Laboratorium kabinet kelas III. Melewati minimal dua pintu sebelum memasuki kamar

yang berisi lemari pengaman biologis Kelas III (ruang lemari) diperlukan. Di laboratorium ini

konfigurasi kabinet keamanan biologis Kelas III menyediakan penahanan utama. SEBUAH

mandi personel dengan ruang ganti dalam dan luar diperlukan. Perlengkapan dan bahan yang

tidak dibawa ke ruang kabinet melalui ruang ganti diperkenalkan melalui a autoklaf dua pintu

atau ruang fumigasi. Setelah pintu luar tertutup rapat, staf di dalam laboratorium dapat

membuka pintu dalam untuk mengambil bahan. Pintu autoklaf atau ruang fumigasi saling

bertautan sedemikian rupa sehingga pintu luar tidak dapat dibuka kecuali jika:

autoklaf telah dioperasikan melalui siklus sterilisasi atau ruang fumigasi telah

didekontaminasi (lihat Bab 7)

. Laboratorium jas. Laboratorium pakaian pelindung dengan alat bantu pernapasan mandiri

berbeda signifikan dalam desain dan persyaratan fasilitas dari laboratorium Biosafety Level 4

dengan Kelas III lemari keamanan biologis. Kamar-kamar di laboratorium pakaian pelindung

diatur untuk mengarahkan personel melalui area ganti dan dekontaminasi sebelum memasuki

area di mana: bahan infeksius dimanipulasi. Dalam konfigurasi laboratorium ini, area setelan

itu sendiri adalah dianggap sebagai penahanan utama. Area setelan dirancang dan dipelihara

untuk memberikan perlindungan personel yang setara dengan yang disediakan oleh lemari

pengaman biologis Kelas III. SEBUAH pancuran dekontaminasi jas harus disediakan untuk

personel yang meninggalkan laboratorium penahanan daerah. Kamar mandi personel terpisah

dengan ruang ganti dalam dan luar juga disediakan. Personil yang memasuki area setelan harus

mengenakan setelan udara satu potong, bertekanan positif, dan dilengkapi filter HEPA. Udara

ke setelan harus disediakan oleh sistem yang memiliki 100% redundan kemampuan dengan

sumber udara independen, untuk digunakan dalam keadaan darurat. Masuk ke jas laboratorium

adalah melalui airlock dilengkapi dengan pintu kedap udara. Sistem peringatan yang tepat

untuk personel yang bekerja di laboratorium setelan harus disediakan untuk digunakan jika

terjadi kerusakan mekanis

kegagalan sistem atau udara (lihat Bab 7).

2. Akses terkontrol. Laboratorium penahanan maksimum

– Tingkat Keamanan Hayati 4 harus ditempatkan di a bangunan terpisah atau di zona yang

digambarkan dengan jelas di dalam bangunan aman. Masuk dan keluar personel

dan persediaan harus melalui sistem airlock atau pass-through. Saat masuk, personel harus

mengenakan pakaian ganti lengkap; sebelum pergi, mereka harus mandi sebelum turun ke jalan

pakaian.

3. Sistem udara terkendali.

Tekanan negatif harus dipertahankan di fasilitas. Baik suplai maupun knalpot udara harus

disaring dengan HEPA. Ada perbedaan signifikan dalam sistem ventilasi Kelas III

laboratorium kabinet dan laboratorium jas: . Laboratorium kabinet kelas III. Pasokan udara ke

lemari pengaman biologis Kelas III mungkin: diambil dari dalam ruangan melalui filter HEPA

yang dipasang di kabinet atau dipasok langsung melalui sistem suplai udara. Udara buangan

dari lemari pengaman biologis Kelas III harus lewat

melalui dua filter HEPA sebelum dilepaskan di luar ruangan. Kabinet harus dioperasikan pada

negatif tekanan ke laboratorium sekitarnya setiap saat. Ventilasi non-resirkulasi khusus sistem

untuk laboratorium kabinet diperlukan.

. Laboratorium jas. Sistem pasokan dan pembuangan udara ruangan khusus diperlukan.

pasokan dan komponen knalpot dari sistem ventilasi seimbang untuk memberikan aliran udara

terarah di dalam area yang sesuai dari area dengan bahaya paling kecil ke area dengan potensi

bahaya terbesar. Berulang kipas pembuangan diperlukan untuk memastikan bahwa fasilitas

tetap berada di bawah tekanan negatif setiap saat.

Tekanan diferensial di dalam laboratorium jas dan antara laboratorium jas dan yang berdekatan

daerah harus dipantau. Aliran udara di komponen suplai dan pembuangan ventilasi sistem harus

dipantau dan sistem kontrol yang tepat harus digunakan untuk mencegah tekanan laboratorium

jas. Udara suplai yang disaring HEPA harus disediakan ke area yang sesuai, pancuran

dekontaminasi dan dekontaminasi airlocks atau kamar. Buang udara dari setelan laboratorium

harus melewati serangkaian dua filter HEPA sebelum dilepaskan ke luar ruangan. Atau, setelah

penyaringan HEPA ganda, udara buangan dapat disirkulasikan kembali tetapi hanya di dalam

setelan

laboratorium. Dalam situasi apa pun, udara buangan dari setelan Biosafety Level 4 tidak boleh

laboratorium disirkulasikan ke area lain. Sangat hati-hati harus dilakukan jika resirkulasi udara

dalam laboratorium jas dipilih. Pertimbangan harus diberikan pada jenis penelitian dilakukan,
peralatan, bahan kimia dan bahan lain yang digunakan di laboratorium jas, serta spesies hewan

yang mungkin terlibat dalam penelitian.

Semua filter HEPA perlu diuji dan disertifikasi setiap tahun. Rumah filter HEPA dirancang

untuk memungkinkan untuk dekontaminasi in situ dari filter sebelum penghapusan. Atau, filter

dapat dihapus dalam wadah utama yang tertutup rapat dan kedap gas untuk dekontaminasi

dan/atau pemusnahan selanjutnya dengan:

pembakaran.

4. Dekontaminasi limbah cair.

Semua limbah dari area setelan, ruang dekontaminasi, pancuran dekontaminasi, atau lemari

pengaman biologis Kelas III harus didekontaminasi sebelum final memulangkan. Perlakuan

panas (autoklaf) adalah metode yang disukai. Limbah mungkin juga memerlukan koreksi ke

pH netral sebelum dibuang. Air dari pancuran dan toilet personel mungkin dibuang langsung

ke saluran pembuangan sanitasi tanpa pengolahan.

5. Sterilisasi limbah dan material.

Autoklaf tembus dua pintu harus tersedia di daerah laboratorium. Metode dekontaminasi lain

harus tersedia untuk peralatan dan barang yang: tidak tahan terhadap sterilisasi uap.

6. Pintu masuk airlock untuk spesimen bahan dan hewan harus disediakan

Panduan keamanan hayati laboratorium

Karena kerumitan besar pekerjaan di laboratorium Biosafety Level 4, pekerjaan terperinci yang

terpisah manual harus dikembangkan dan diuji dalam latihan. Selain itu, program darurat harus

dirancang (lihat Bab 13). Dalam penyusunan program ini, kerjasama aktif dengan nasional dan

otoritas kesehatan setempat harus dibentuk. Layanan darurat lainnya, mis. api, polisi dan rumah

sakit penerima, juga harus dilibatkan.

6. Fasilitas laboratorium hewan
Mereka yang menggunakan hewan untuk tujuan eksperimental dan diagnostik memiliki

kewajiban moral untuk mengambil setiap perawatan untuk menghindari menyebabkan mereka

rasa sakit atau penderitaan yang tidak perlu. Hewan harus diberi perumahan yang nyaman dan

higienis serta makanan dan air yang sehat dan memadai. Di akhir percobaan mereka harus

ditangani dengan cara yang manusiawi. Untuk alasan keamanan, kandang hewan harus menjadi

unit yang independen dan terpisah. Jika itu berdampingan dengan laboratorium, desain harus

menyediakan isolasi dari bagian umum laboratorium harus seperti: kebutuhan muncul, dan

untuk dekontaminasi dan disinfestasi.

Fasilitas hewan, seperti laboratorium, dapat ditunjuk terutama sesuai dengan kelompok risiko:

mikroorganisme yang sedang diselidiki sebagai Tingkat Keamanan Hayati 1, 2, 3 atau 4. Faktor

lain juga harus dipertimbangkan mempertimbangkan. Sehubungan dengan agen, ini termasuk

rute transmisi normal, volume dan konsentrasi yang akan digunakan, rute inokulasi, dan apakah

dan dengan rute apa mereka dapat diekskresikan. Sehubungan dengan hewan, mereka termasuk

sifat hewan, yaitu mereka

agresivitas dan kecenderungan untuk menggigit dan menggaruk, ektoparasit dan endoparasit

alaminya, zoonosis penyakit yang mereka rentan, dan kemungkinan penyebaran alergen.

Seperti halnya laboratorium, persyaratan untuk fitur desain, peralatan, dan tindakan

pencegahan meningkat dalam ketat sesuai dengan tingkat keamanan hayati. Ini dijelaskan di
bawah ini dan diringkas dalam Tabel 4. Pedoman ini bersifat tambahan, sehingga setiap tingkat

yang lebih tinggi menggabungkan standar tingkat yang lebih rendah.

Fasilitas hewan – Tingkat Keamanan Hayati 1

Ini cocok untuk pemeliharaan sebagian besar hewan ternak setelah karantina (kecuali primata

bukan manusia,mengenai otoritas nasional mana yang harus dikonsultasikan) dan untuk hewan

yang sengaja diinokulasi dengan agen dalam Kelompok Risiko 1. Diperlukan teknik

mikrobiologi yang baik. Direktur fasilitas hewan harus menetapkan kebijakan, prosedur dan

protokol untuk semua operasi dan untuk akses ke vivarium. Sebuah program pengawasan

medis yang tepat untuk staf harus dilembagakan. Sebuah keselamatan atau operasin manual

harus disiapkan dan diadopsi.

Fasilitas hewan – Tingkat Keamanan Hayati 2

Ini cocok untuk bekerja dengan hewan yang sengaja diinokulasi dengan mikroorganisme di

Risk Grup 2. Tindakan pencegahan keselamatan berikut berlaku:

1. Semua persyaratan untuk fasilitas hewan – Tingkat Keamanan Hayati 1 harus dipenuhi.

2. Tanda peringatan bahaya hayati (lihat Gambar 1) harus dipasang di pintu dan tempat lain

yang sesuai, dan harus mengidentifikasi agen infeksi yang digunakan.

3. Fasilitas harus dirancang agar mudah dibersihkan dan dibersihkan.

4. Pintu harus terbuka ke dalam dan menutup sendiri.

5. Pemanasan, ventilasi dan pencahayaan harus memadai.

6. Jika ventilasi mekanis disediakan, aliran udara harus masuk ke dalam. Udara buangan

dibuang ke luar dan tidak boleh disirkulasikan kembali ke bagian mana pun dari bangunan.

7. Akses harus dibatasi untuk orang yang berwenang.

8. Tidak ada hewan yang boleh diterima selain untuk penggunaan eksperimental.

9. Harus ada program pengendalian artropoda dan hewan pengerat.

10. Jendela, jika ada, harus aman, tahan terhadap kerusakan dan, jika dapat dibuka, harus

dipasang dengan layar anti-artropoda.

11. Setelah digunakan, permukaan kerja harus didekontaminasi dengan disinfektan yang efektif

(lihat Bab 14).

12. Lemari pengaman biologis (Kelas I atau II) atau sangkar isolator dengan suplai udara

khusus dan udara buangan yang disaring HEPA harus disediakan untuk pekerjaan yang

mungkin melibatkan pembentukan aerosol.

13. Autoclave harus tersedia di lokasi atau di dekatnya.

14. Bahan alas tidur hewan harus dihilangkan dengan cara yang meminimalkan pembentukan

aerosol dan debu.

15. Semua bahan limbah dan alas tidur harus didekontaminasi sebelum dibuang.

16. Penggunaan instrumen tajam harus dibatasi bila memungkinkan. Benda tajam harus selalu

dikumpulkan dalam wadah tahan tusukan yang dilengkapi dengan penutup dan diperlakukan

sebagai infeksius.

17. Bahan untuk autoklaf atau pembakaran harus diangkut dengan aman dalam wadah tertutup.

18. Kandang hewan harus didekontaminasi setelah digunakan.

19. Bangkai hewan harus dibakar.

20. Pakaian dan peralatan pelindung harus dipakai di fasilitas, dan dilepas saat keluar. Sesuai

sarung tangan harus tersedia dan dipakai.

21. Fasilitas cuci tangan harus disediakan. Staf harus mencuci tangan sebelum meninggalkan

hewan fasilitas.

22. Semua cedera, betapapun kecilnya, harus dilaporkan dan dicatat.

23. Dilarang makan, minum, dan memakai kosmetik di dalam fasilitas.

24. Semua personel harus menerima pelatihan yang sesuai.

Fasilitas hewan – Tingkat Keamanan Hayati 3

Ini cocok untuk bekerja dengan hewan yang sengaja diinokulasi dengan agen di Kelompok

Risiko 3. Semua sistem, praktik dan prosedur perlu ditinjau dan disertifikasi ulang setiap tahun.

1. Semua persyaratan untuk fasilitas hewan – Tingkat Keamanan Hayati 1 dan 2 harus

dipenuhi.

2. Akses harus dikontrol dengan ketat.

3. Fasilitas harus dipisahkan dari laboratorium lain dan area kandang hewan oleh ruangan

dengan dua pintu, membentuk ruang depan.

4. Fasilitas cuci tangan dan kamar mandi harus disediakan di ruang depan.

5. Harus ada ventilasi mekanis untuk memastikan aliran udara terus menerus melalui semua

ruangan. Knalpot udara harus melewati filter HEPA sebelum dibuang ke atmosfer tanpa

resirkulasi. Sistem harus dirancang untuk mencegah aliran balik yang tidak disengaja dan

tekanan positif di semua bagian dari rumah hewan.

6. Autoclave harus tersedia di lokasi yang nyaman untuk kandang hewan dimana biohazard

berada terkandung. Limbah infeksius harus diautoklaf sebelum dipindahkan ke area lain dari

fasilitas.

7. Insinerator harus tersedia di lokasi atau pengaturan alternatif harus dibuat dengan:

pihak berwenang yang bersangkutan.

8. Hewan yang terinfeksi mikroorganisme Kelompok Risiko 3 harus ditempatkan di kandang

di dalam isolator atau ruangan dengan knalpot ventilasi ditempatkan di belakang kandang.

9. Tempat tidur harus sebebas mungkin dari debu.

10. Pakaian pelindung laboratorium harus dipakai di dalam fasilitas. Pakaian pelindung ini

tidak boleh dipakai di luar laboratorium dan harus didekontaminasi sebelum dicuci.

11. Jendela harus ditutup dan disegel, serta tahan terhadap kerusakan.

12. Imunisasi staf, sebagaimana mestinya, harus ditawarkan.

Fasilitas hewan – Tingkat Keamanan Hayati 4

Pekerjaan di fasilitas ini biasanya akan dikaitkan dengan pekerjaan di laboratorium penahanan

maksimum – Keamanan Hayati Level 4, dan aturan dan peraturan nasional dan lokal harus

diselaraskan untuk diterapkan pada keduanya. Jika pekerjaan adalah untuk menjadi dilakukan

di laboratorium jas, praktik dan prosedur tambahan harus digunakan selain yang dijelaskan di

sini (lihat Bab 5).

1. Semua persyaratan untuk fasilitas hewan – Tingkat Keamanan Hayati 1, 2 dan 3 harus

dipenuhi.

2. Akses harus dikontrol dengan ketat; hanya staf yang ditunjuk oleh direktur perusahaan yang

boleh memiliki kewenangan untuk masuk.

3. Individu tidak boleh bekerja sendiri: aturan dua orang harus berlaku.

4. Personil harus telah menerima pelatihan setinggi mungkin sebagai ahli mikrobiologi dan

terbiasa dengan bahaya yang terlibat dalam pekerjaan mereka dan tindakan pencegahan yang

diperlukan.

5. Area kandang hewan yang terinfeksi agen Kelompok Risiko 4 harus memenuhi kriteria

untuk: penahanan dijelaskan dan diterapkan untuk penahanan maksimum – Laboratorium

Biosafety Level 4.

6. Fasilitas harus dimasuki oleh anteroom airlock, yang sisi bersihnya harus dipisahkan darisisi

terbatas dengan fasilitas ganti dan mandi.

7. Fasilitas harus berventilasi dengan sistem pembuangan berfilter HEPA yang dirancang untuk

memastikan tekanan (aliran udara terarah ke dalam).

8. Sistem ventilasi harus dirancang untuk mencegah aliran balik dan tekanan positif.

9. Autoklaf berujung ganda harus disediakan untuk pengiriman bahan, dengan ujung yang

bersih di dalam ruangan di luar ruang penahanan.

10. Staf harus melepas pakaian jalanan saat masuk dan mengenakan pakaian pelindung khusus.

Setelah bekerja mereka harus melepas pakaian pelindung untuk autoklaf, dan mandi sebelum

pergi.

11. Airlock pass-through harus disediakan untuk pengiriman material.

12. Semua manipulasi dengan hewan yang terinfeksi agen Kelompok Risiko 4 harus dilakukan

di bawah maksimum penahanan – kondisi Tingkat Keamanan Hayati 4.

13. Semua hewan harus ditempatkan di isolasi.

14. Semua tempat tidur dan limbah harus diautoklaf sebelum dipindahkan dari fasilitas.

15. Harus ada pengawasan medis terhadap staf dan imunisasi yang sesuai.

Invertebrata

Invertebrata yang digunakan untuk tujuan percobaan di laboratorium biasanya reservoir atau

vektor patogen atau, seperti dalam kasus penyelidikan ekologi dan lingkungan, mungkin

kebetulan terinfeksi dengan patogen yang tertelan dengan makanan mereka.

Mereka mungkin termasuk anggota berikut:

filum: Annelida, Aschelminthes, Arthropoda, Echinodermata, Mollusca, Platyhelminthes dan

Protozoa. Seperti halnya vertebrata, tingkat keamanan hayati fasilitas hewan akan ditentukan

oleh kelompok risiko dari agen yang sedang diselidiki atau ada secara alami, tetapi tindakan

pencegahan tambahan berikut diperlukan:

dengan arthropoda tertentu, terutama dengan serangga terbang.

1. Ruang terpisah harus disediakan untuk invertebrata yang terinfeksi dan tidak terinfeksi.

2. Ruangan harus dapat ditutup rapat untuk pengasapan.

3. Semprotan insektisida harus tersedia.

4. Fasilitas “Pendinginan” harus disediakan untuk mengurangi, bila perlu, aktivitas

invertebrata.

5. Akses harus melalui ruang depan yang berisi perangkap serangga dan dengan tirai anti

artropoda menyala pintu-pintu.

6. Semua saluran ventilasi pembuangan dan jendela yang dapat dibuka harus dilengkapi dengan

saringan anti-artropoda.

7. Jebakan limbah pada bak cuci dan pintu air tidak boleh dibiarkan mengering.

8. Semua limbah harus didekontaminasi dengan autoklaf, karena beberapa invertebrata tidak

dibunuh oleh semua desinfektan.

9. Pemeriksaan harus dilakukan pada jumlah larva dan bentuk dewasa yang terbang,

merangkak dan melompat arthropoda

10. Wadah untuk kutu dan tungau harus berdiri di nampan minyak.

11. Serangga terbang yang terinfeksi atau berpotensi terinfeksi harus ditempatkan dalam

kandang berjaring ganda.

12. Arthropoda yang terinfeksi atau berpotensi terinfeksi harus ditangani dalam lemari atau

isolator pengaman biologis.

13. Arthropoda yang terinfeksi atau berpotensi terinfeksi dapat dimanipulasi pada nampan

pendingin.

Untuk informasi lebih lanjut lihat referensi 1 dan 6-9

 BAGIAN II Peralatan laboratorium

Lemari pengaman biologis

Lemari pengaman biologis (BSC) dirancang untuk melindungi operator, lingkungan

laboratorium, dan bahan kerja dari paparan aerosol menular dan percikan yang mungkin

dihasilkan ketika:

memanipulasi bahan yang mengandung agen infeksi, seperti kultur primer, stok dan diagnostik

spesimen. Partikel aerosol dibuat oleh aktivitas apa pun yang memberikan energi ke dalam

cairan atau semiliquid bahan, seperti mengocok, menuangkan, mengaduk atau menjatuhkan

cairan ke permukaan atau ke cairan lain. Kegiatan laboratorium, seperti menggores pelat agar,

menginokulasi labu kultur sel dengan pipet, menggunakan a pipet multisaluran untuk

mengeluarkan suspensi cair agen infeksius ke dalam pelat mikrokultur, homogenisasi dan

vortexing bahan infeksius, dan sentrifugasi cairan infeksius, atau bekerja dengan hewan, dapat

menghasilkan aerosol menular. Partikel aerosol dengan diameter kurang dari 5 m dan kecil
tetesan berdiameter 5-100 m tidak terlihat dengan mata telanjang. Pekerja laboratorium

umumnya tidak menyadari bahwa partikel tersebut dihasilkan dan dapat terhirup atau dapat

mencemari pekerjaan bahan permukaan. BSC, bila digunakan dengan benar, telah terbukti

sangat efektif dalam mengurangi infeksi yang didapat di laboratorium dan kontaminasi silang

dari kultur karena paparan aerosol. Setiap BSC juga melindungi lingkungan.

Selama bertahun-tahun desain dasar BSC telah mengalami beberapa modifikasi

desain. Utama Perubahannya adalah penambahan filter udara partikulat efisiensi

tinggi (HEPA) ke sistem pembuangan. Itu Filter HEPA menjebak 99,97% partikel

berdiameter 0,3 m dan 99,99% partikel yang lebih besar atau lebih kecil ukuran. Hal

ini memungkinkan filter HEPA untuk secara efektif menjebak semua agen infeksi yang

diketahui dan memastikan bahwa hanya udara buangan bebas mikroba dikeluarkan

dari kabinet. Modifikasi desain kedua adalah mengarahkan Udara berfilter HEPA di

atas permukaan kerja, memberikan perlindungan material permukaan kerja dari

kontaminasi. Fitur ini sering disebut sebagai perlindungan produk. Konsep desain

dasar ini memiliki menyebabkan evolusi tiga kelas BSC. Jenis perlindungan yang

diberikan oleh masing-masing diatur dalam Tabel 5. Catatan. Lemari aliran keluar
horizontal dan vertikal ("stasiun kerja udara bersih") bukanlah lemari pengaman

biologis dan tidak boleh digunakan seperti itu.

Kabinet keamanan biologis Kelas I

Gambar 3 memberikan diagram skematik dari BSC Kelas I. Udara ruangan ditarik masuk

melalui bukaan depan di kecepatan minimum 0,38 m/s, melewati permukaan kerja dan

dikeluarkan dari kabinet melalui saluran pembuangan. Arah aliran udara mengocok partikel

aerosol yang mungkin dihasilkan pada permukaan kerja jauh dari pekerja laboratorium dan

masuk ke saluran pembuangan. Pembukaan depan memungkinkan

lengan operator untuk mencapai permukaan kerja di dalam kabinet saat dia mengamati

permukaan kerja melalui jendela kaca. Jendela juga dapat dinaikkan sepenuhnya untuk

menyediakan akses ke permukaan kerja untuk pembersihan atau tujuan lain.

Udara dari kabinet dikeluarkan melalui filter HEPA: (a) ke laboratorium dan kemudian ke di

luar gedung melalui knalpot gedung; (b) ke luar melalui knalpot gedung; atau (c)

langsung ke luar. Filter HEPA mungkin terletak di pleno pembuangan BSC atau di

knalpot bangunan. Beberapa BSC Kelas I dilengkapi dengan kipas buang integral, sedangkan

yang lain mengandalkan kipas angin di sistem pembuangan gedung.

BSC Kelas I adalah BSC pertama yang diakui dan, karena desainnya yang sederhana, masih

digunakan secara luas di seluruh dunia. Ini memiliki keuntungan menyediakan personel dan

perlindungan lingkungan dan dapat juga digunakan untuk bekerja dengan radionuklida dan

bahan kimia beracun yang mudah menguap. Karena udara ruangan yang tidak steril adalah

ditarik di atas permukaan kerja melalui bukaan depan, itu tidak dianggap memberikan

keandalan yang konsisten perlindungan produk.

Lemari pengaman biologis Kelas II

Seiring berkembangnya penggunaan kultur sel dan jaringan untuk perbanyakan virus dan

tujuan lain, tidak lagi dianggap memuaskan untuk udara ruangan yang tidak disterilkan

melewati permukaan kerja. Kelas II BS dirancang tidak hanya untuk memberikan perlindungan

personel tetapi juga untuk melindungi material permukaan kerja dari:

udara ruangan yang terkontaminasi. Kelas II BSC, yang ada empat jenis (A1, A2, B1 dan B2),

berbeda dari BSC Kelas I dengan hanya mengizinkan udara suplai yang disaring HEPA (steril)

mengalir di atas permukaan kerja. Kelas II BSC dapat digunakan untuk bekerja dengan agen

infeksi di Grup Risiko 2 dan 3. BSC Kelas II dapat digunakan

untuk bekerja dengan agen infeksi di Grup Risiko 4 ketika setelan tekanan positif digunakan.
Kabinet keamanan biologis tipe A1 Kelas II Kelas II tipe A

BSC ditunjukkan pada Gambar. 4. Kipas internal menarik udara ruangan (supply udara) ke

dalam kabinet melalui bukaan depan dan masuk ke grill intake depan. Kecepatan aliran udara

ini harus setidaknya 0,38 m/s di muka bukaan depan. Udara suplai kemudian melewati filter

HEPA suplai sebelum mengalir ke bawah di atas permukaan kerja. Saat udara mengalir ke

bawah, ia “terbelah” sekitar 6–18 cm dari permukaan kerja, satu setengah dari udara yang

mengalir ke bawah melewati kisi-kisi knalpot depan, dan yang lainnya setengah melewati grill

knalpot belakang. Setiap partikel aerosol yang dihasilkan di permukaan kerja adalah: langsung

ditangkap dalam aliran udara ke bawah ini dan melewati kisi-kisi knalpot depan atau belakang,

sehingga memberikan tingkat perlindungan produk tertinggi. Udara kemudian dibuang melalui

bagian belakang pleno ke ruang antara filter suplai dan knalpot yang terletak di bagian atas

kabinet. Karena ukuran relatif dari filter ini, sekitar 70% dari udara disirkulasikan kembali

melalui suplai filter HEPA kembali ke zona kerja; 30% sisanya melewati filter knalpot ke

dalam ruangan atau ke luar. Udara dari knalpot Kelas IIA1 BSC dapat disirkulasikan kembali

ke ruangan atau dibuang ke luar bangunan melalui sambungan bidal ke saluran khusus atau

melalui sistem pembuangan bangunan. Sirkulasi udara buang ke ruangan memiliki keuntungan

menurunkan biaya bahan bakar bangunan karena udara yang dipanaskan dan/atau didinginkan

tidak dialirkan ke lingkungan luar. Sambungan ke saluran sistem pembuangan juga

memungkinkan beberapa BSC digunakan untuk bekerja dengan radionuklida yang mudah

menguap dan racun yang mudah menguap bahan kimia (Tabel 5).
Kelas II tipe A2 berventilasi ke luar, lemari pengaman biologis B1 dan B2

Kelas IIA2 berventilasi ke luar, BSC IIB1 (Gbr. 5) dan IIB2 adalah variasi dari tipe IIA1, dan

karakteristik, bersama dengan Kelas I dan Kelas III BSC, ditunjukkan pada Tabel 6. Setiap

variasi memungkinkan BSC digunakan untuk tujuan khusus (lihat Tabel 5). BSC ini berbeda

satu sama lain dalam beberapa aspek: kecepatan pemasukan udara melalui bukaan depan;

jumlah udara yang diresirkulasi di atas permukaan kerja dan habis dari kabinet; sistem

pembuangan, yang menentukan apakah udara dari kabinet dikeluarkan ke ruangan, atau ke luar,

melalui sistem pembuangan khusus atau melalui knalpot bangunan; dan pengaturan tekanan

(apakah lemari memiliki saluran yang terkontaminasi secara biologis dan pleno di bawah

tekanan negatif, atau memiliki saluran dan pleno yang terkontaminasi biologis yang dikelilingi

oleh saluran dan pleno bertekanan negatif). Deskripsi lengkap dari berbagai BSC Kelas IIA

dan IIB dapat diperoleh dari referensi 10 dan 11 dan dari brosur produsen.
Kabinet keamanan biologis Kelas III

Tipe ini (Gbr. 6) memberikan tingkat perlindungan personel tertinggi dan digunakan untuk

agen Grup Risiko 4. Semua penetrasi disegel "kedap gas". Udara suplai disaring dengan HEPA

dan udara buangan melewati dua Filter HEPA. Aliran udara dipertahankan oleh eksterior

sistem pembuangan khusus ke kabinet, yang menjaga

interior kabinet di bawah tekanan negatif (sekitar 124,5 Pa). Akses ke permukaan kerja adalah

melalui sarung tangan karet tugas berat, yang melekat pada port di kabinet. BSC Kelas III harus

memiliki: kotak pass-through terpasang yang dapat disterilkan dan dilengkapi dengan knalpot

berfilter HEPA. Kelas III kabinet dapat dihubungkan ke autoklaf dua pintu yang digunakan

untuk mendekontaminasi semua bahan yang masuk atau keluar dari kabinet. Beberapa kotak

sarung tangan dapat disatukan untuk memperluas permukaan kerja. Kelas III BSC cocok untuk

bekerja di laboratorium Biosafety Level 3 dan 4.

Koneksi udara kabinet keamanan biologis

Sebuah “thimble” atau “canopy hood” dirancang untuk digunakan dengan Kelas IIA1 dan IIA2

yang berventilasi ke BSC luar. Thimble pas di atas housing knalpot kabinet, menyedot udara

knalpot kabinet ke dalam gedung saluran pembuangan. Sebuah lubang kecil, biasanya

berdiameter 2,5 cm, dipertahankan antara bidal dan rumah knalpot kabinet. Bukaan kecil ini

memungkinkan udara ruangan tersedot ke dalam knalpot gedung sistem juga. Kapasitas

pembuangan bangunan harus cukup untuk menangkap udara ruangan dan kabinet knalpot.

Thimble harus dapat dilepas atau dirancang untuk memungkinkan pengujian operasional

kabinet. Umumnya, kinerja BSC yang terhubung dengan bidal tidak banyak dipengaruhi oleh

fluktuasi di udara aliran bangunan

BSC Kelas IIB1 dan IIB2 adalah saluran keras, yaitu terhubung dengan kuat tanpa bukaan, ke

gedung sistem pembuangan atau, lebih disukai, ke sistem saluran pembuangan khusus. Sistem

pembuangan gedung harus disesuaikan secara tepat dengan persyaratan aliran udara yang

ditentukan oleh pabrikan baik dalam volume maupun statis tekanan. Sertifikasi BSC yang

terhubung dengan hard-duct lebih memakan waktu daripada untuk BSC yang mensirkulasikan

kembali udara ke ruangan atau yang terhubung dengan bidal.

Pemilihan kabinet keamanan biologis

BSC harus dipilih terutama sesuai dengan jenis perlindungan yang dibutuhkan: perlindungan

produk; perlindungan personel terhadap mikroorganisme Kelompok Risiko 1-4; perlindungan

personel terhadap paparan radionuklida dan bahan kimia beracun yang mudah menguap; atau

kombinasi dari ini. Tabel 5 menunjukkan BSC mana yang direkomendasikan untuk setiap jenis

perlindungan. Bahan kimia yang mudah menguap atau beracun tidak boleh digunakan di BSC

yang mensirkulasi ulang udara buang ke ruangan, mis. Kelas I yang tidak disalurkan ke sistem

pembuangan bangunan, atau lemari Kelas IIA1 atau Kelas IIA2. Kelas IIB1 lemari dapat

diterima untuk bekerja dengan sejumlah kecil bahan kimia yang mudah menguap dan
radionuklida. SEBUAH Kabinet Kelas IIB2, juga disebut kabinet pembuangan total,

diperlukan ketika sejumlah besar radionuklida dan bahan kimia yang mudah menguap

diharapkan dapat digunakan.

Menggunakan lemari pengaman biologis di laboratorium

Lokasi

Kecepatan udara yang mengalir melalui bukaan depan ke dalam BSC adalah sekitar 0,45 m/s.

Pada kecepatan ini integritas aliran udara terarah rapuh dan dapat dengan mudah terganggu

oleh arus udara yang dihasilkan oleh orang-orang yang berjalan di dekat BSC, membuka

jendela, register pasokan udara, dan membuka dan menutup pintu. Idealnya, BSC harus

ditempatkan di lokasi yang jauh dari lalu lintas dan berpotensi mengganggu arus udara. Jika

memungkinkan, jarak 30 cm harus disediakan di belakang dan di setiap sisi kabinet untuk

memungkinkan akses mudah untuk pemeliharaan. Jarak bebas 30–35 cm di atas kabinet

mungkin diperlukan untuk menyediakan pengukuran kecepatan udara yang akurat di seluruh

filter knalpot dan untuk perubahan filter knalpot.

Operator

Jika BSC tidak digunakan dengan benar, manfaat perlindungannya mungkin sangat berkurang.

Operator harus hati-hati untuk menjaga integritas aliran masuk udara bukaan depan saat

menggerakkan lengan mereka ke dalam dan ke luar lemari. Lengan harus digerakkan masuk

dan keluar secara perlahan, tegak lurus dengan bukaan depan. Manipulasi dari bahan dalam

BSC harus ditunda selama sekitar 1 menit setelah menempatkan tangan dan lengan di dalam

untuk memungkinkan kabinet untuk menyesuaikan dan "menyapu udara" permukaan tangan

dan lengan. Jumlah gerakan

di seberang bukaan depan juga harus diminimalkan dengan menempatkan semua barang yang

diperlukan ke dalam kabinet sebelumnya manipulasi awal.

Penempatan bahan

Kisi-kisi asupan depan BSC Kelas II tidak boleh terhalang oleh kertas, peralatan, atau benda

lain. Bahan yang akan ditempatkan di dalam kabinet harus didekontaminasi permukaannya

dengan alkohol 70%. Bekerja mungkin dilakukan pada handuk penyerap yang direndam

disinfektan untuk menangkap percikan dan percikan. Semua bahan harus ditempatkan jauh di

belakang lemari, ke arah tepi belakang permukaan kerja, jika praktis tanpa menghalangi

panggangan belakang. Peralatan penghasil aerosol (mis. mixer, sentrifugal, dll.) harus:

ditempatkan di bagian belakang kabinet. Barang-barang berukuran besar, seperti kantong

biohazard, baki pipet buang, dan labu pengumpul hisap harus ditempatkan di satu sisi interior

kabinet. Kerja aktif harus

mengalir dari area bersih ke area terkontaminasi di seluruh permukaan kerja.

Kantong pengumpul biohazard yang dapat diautoklaf dan baki pengumpul pipet tidak boleh

ditempatkan di luar kabinet. Gerakan keluar masuk yang sering diperlukan untuk menggunakan

wadah ini mengganggu integritas penghalang udara kabinet, dan dapat membahayakan

perlindungan personel dan produk.

Operasi dan pemeliharaan

Sebagian besar BSC dirancang untuk memungkinkan operasi 24 jam/hari, dan peneliti

menemukan bahwa operasi terus-menerus membantu untuk mengontrol tingkat debu dan bahan

partikulat di laboratorium. Kelas IIA1 dan IIA2 BSC melelahkan ke ruangan atau dihubungkan

dengan koneksi bidal ke saluran pembuangan khusus dapat dimatikan saat tidak digunakan.

Jenis lain seperti BSC IIB1 dan IIB2, yang memiliki instalasi saluran keras, harus memiliki:

aliran udara melalui mereka setiap saat untuk membantu menjaga keseimbangan udara

ruangan. Lemari harus dihidupkan setidaknya

5 menit sebelum mulai bekerja dan setelah selesai bekerja untuk memungkinkan kabinet

"membersihkan", yaitu untuk memberikan waktu untuk menghilangkan udara yang

terkontaminasi dari lingkungan kabinet. Semua perbaikan yang dilakukan pada BSC harus

dilakukan oleh teknisi yang berkualifikasi. Setiap kerusakan dalam operasi

BSC harus dilaporkan dan diperbaiki sebelum BSC digunakan kembali.

Lampu ultraviolet

Lampu ultraviolet tidak diperlukan di BSC. Jika digunakan, mereka harus dibersihkan setiap

minggu untuk menghilangkannya debu dan kotoran yang dapat menghalangi efektivitas kuman

dari cahaya. Intensitas cahaya ultraviolet harus diperiksa ketika kabinet disertifikasi ulang

untuk memastikan bahwa emisi cahaya sesuai. Lampu ultraviolet harus dimatikan saat ruangan

ditempati, untuk melindungi mata dan kulit dari paparan yang tidak disengaja.

Api terbuka

Api terbuka harus dihindari di dekat lingkungan bebas mikroba yang dibuat di dalam BSC.

Mereka mengganggu pola aliran udara dan dapat berbahaya bila bahan yang mudah menguap

dan mudah terbakar juga digunakan. Untuk mensterilkan loop bakteriologis, tersedia pembakar

mikro atau "tungku" listrik dan lebih disukai untuk:

api terbuka.

Tumpahan

Salinan protokol laboratorium untuk menangani tumpahan harus dipasang, dibaca, dan

dipahami oleh semua orang

yang menggunakan laboratorium. Ketika tumpahan bahan biohazardous terjadi di dalam BSC,

pembersihan harus segera dimulai, sementara kabinet terus beroperasi. Disinfektan yang efektif

harus digunakan dan diterapkan dengan cara yang meminimalkan generasi aerosol. Semua

bahan yang bersentuhan dengan

bahan yang tumpah harus didesinfeksi dan/atau diautoklaf.

Sertifikasi tahunan
Operasi fungsional dan integritas setiap BSC harus disertifikasi ke nasional atau internasional

standar kinerja pada saat pemasangan dan secara teratur setelahnya oleh teknisi yang

berkualifikasi, sesuai dengan instruksi pabrik. Evaluasi efektivitas penahanan kabinet harus

mencakup pengujian integritas kabinet, kebocoran filter HEPA, profil kecepatan aliran bawah,

kecepatan muka, tekanan negatif/tingkat ventilasi, pola asap aliran udara, dan alarm dan

interlock. Tes opsional untuk

kebocoran listrik, intensitas pencahayaan, intensitas sinar ultraviolet, tingkat kebisingan dan

getaran juga dapat diadakan. Pelatihan, keterampilan, dan peralatan khusus diperlukan untuk

melakukan tes ini dan ini sangat direkomendasikan bahwa mereka dilakukan oleh seorang

profesional yang berkualifikasi.

Pembersihan dan desinfeksi

Semua item dalam BSC, termasuk peralatan, harus didekontaminasi permukaan dan

dipindahkan dari: kabinet saat pekerjaan selesai, karena media kultur sisa dapat memberikan

peluang bagi mikroba pertumbuhan. Permukaan interior BSC harus didekontaminasi sebelum

dan sesudah digunakan. Pekerjaan permukaan dan dinding bagian dalam harus dibersihkan

dengan disinfektan yang akan membunuh mikroorganisme yang mungkin ditemukan di dalam

kabinet. Pada akhir hari kerja, dekontaminasi permukaan akhir harus mencakup: pembersihan

permukaan kerja, bagian samping, belakang, dan bagian dalam kaca. Larutan pemutih atau

70%

alkohol harus digunakan jika efektif untuk organisme target. Diperlukan menyeka kedua

dengan air steril ketika desinfektan korosif, seperti pemutih, digunakan.

Disarankan agar kabinet dibiarkan berjalan. Jika tidak, itu harus dijalankan selama 5 menit

untuk membersihkan atmosfer di dalam sebelum dimatikan.

Dekontaminasi
BSC harus didekontaminasi sebelum filter diganti dan sebelum dipindahkan. Yang paling

umum Metode dekontaminasi adalah dengan fumigasi dengan gas formaldehida.

Dekontaminasi BSC harus dilakukan oleh seorang profesional yang berkualifikasi.

Alat pelindung diri

Pakaian pelindung pribadi harus dipakai setiap kali menggunakan BSC. Jas laboratorium dapat

diterima untuk pekerjaan yang dilakukan di Tingkat Keamanan Hayati 1 dan 2. Gaun

laboratorium penutup depan dan belakang yang kokoh menyediakan perlindungan yang lebih

baik dan harus digunakan pada Tingkat Keamanan Hayati 3 dan 4 (kecuali untuk laboratorium

yang sesuai). Sarung tangan harus ditarik di atas pergelangan gaun daripada dikenakan di

dalam. Lengan elastis bisa dipakai untuk

melindungi pergelangan tangan penyidik. Masker dan kacamata pengaman mungkin

diperlukan untuk beberapa prosedur.

Alarm

BSC dapat dilengkapi dengan salah satu dari dua jenis alarm. Alarm selempang hanya

ditemukan di lemari dengan geser ikat pinggang. Alarm menandakan bahwa operator telah

memindahkan selempang ke posisi yang tidak tepat. Tindakan korektif untuk jenis alarm ini

adalah mengembalikan selempang ke posisi yang tepat. Alarm aliran udara

menunjukkan gangguan pada pola aliran udara normal kabinet. Ini merupakan bahaya langsung

bagi operator atau produk. Ketika alarm aliran udara berbunyi, pekerjaan harus segera

dihentikan dan laboratorium pengawas harus diberitahu. Manual instruksi pabrikan harus

memberikan perincian lebih lanjut. Pelatihan dalam penggunaan BSC harus mencakup aspek

ini.

Informasi tambahan

Memilih jenis BSC yang benar, memasangnya, menggunakannya dengan benar, dan

mengesahkan operasinya setiap tahun adalah proses yang kompleks. Sangat disarankan agar
mereka melanjutkan di bawah pengawasan orang yang terlatih dan profesional keamanan

hayati yang berpengalaman. Profesional harus sangat akrab dengan yang relevan literatur yang

tercantum di bagian Referensi, dan harus dilatih tentang semua aspek BSC. Operator harus

menerima pelatihan formal dalam pengoperasian dan penggunaan BSC.

Untuk informasi lebih lanjut lihat referensi 1 dan 10-19, dan Bab 10.

8. Bahaya terkait peralatan

Item peralatan tertentu dapat menimbulkan bahaya mikrobiologis saat digunakan. Item lainnya

adalahdirancang khusus untuk mencegah atau mengurangi bahaya biologis (lihat Bab 9).
Peralatan yang dapat menimbulkan bahaya

Tabel 7 mencantumkan peralatan dan operasi yang dapat menimbulkan bahaya dan

menyarankan bagaimana bahaya tersebut dapat terjadi dihilangkan atau dikurangi.

 9. Peralatan yang dirancang

untuk mengurangi bahaya biologis Karena aerosol merupakan sumber infeksi yang penting,

perhatian harus diberikan untuk mengurangi tingkat penularannya

pembentukan dan dispersi. Aerosol berbahaya dapat dihasilkan oleh banyak operasi

laboratorium, mis. pencampuran, pencampuran, penggilingan, pengocokan, pengadukan,

sonikasi dan sentrifugasi bahan infeksius. Bahkan ketika peralatan yang aman digunakan, yang

terbaik adalah melakukan operasi ini dalam keamanan biologis yang disetujui kabinet bila

memungkinkan. Lemari pengaman biologis dan penggunaan serta pengujiannya dibahas dalam

Bab 7. Penggunaan peralatan keselamatan bukanlah jaminan perlindungan kecuali jika

operator dilatih dan menggunakan teknik yang tepat. Peralatan harus diuji secara teratur untuk

memastikan kinerjanya yang aman dan berkelanjutan. Tabel 8 memberikan daftar periksa

peralatan keselamatan yang dirancang untuk menghilangkan atau mengurangi bahaya tertentu

dan secara singkat menguraikan fitur keselamatan. Rincian lebih lanjut dari banyak peralatan

ini diberikan di bagian selanjutnya halaman. Informasi tambahan tentang penggunaan yang

tepat disediakan di Bab 10.

Isolator film fleksibel tekanan negatif

Isolator film fleksibel tekanan negatif adalah perangkat penahanan primer mandiri yang

menyediakan: perlindungan maksimum terhadap bahan biologis berbahaya. Ini dapat dipasang

pada dudukan seluler. Itu ruang kerja benar-benar tertutup dalam amplop polivinilklorida

(PVC) transparan yang digantung dari baja kerangka. Isolator dipertahankan pada tekanan

internal lebih rendah dari tekanan atmosfer. Udara masuk adalah melewati satu filter HEPA

dan udara keluar dilewatkan melalui dua filter HEPA, sehingga meniadakan kebutuhan untuk

menyalurkan udara buangan ke luar gedung. Isolator dapat dilengkapi dengan inkubator,

mikroskop dan peralatan laboratorium lainnya, seperti sentrifugal, kandang hewan, blok panas,

dll. Materi diperkenalkan

dan dikeluarkan dari isolator melalui port suplai dan sampel tanpa mengorbankan

mikrobiologis keamanan. Manipulasi dilakukan dengan menggunakan sarung tangan yang

dilengkapi sarung tangan sekali pakai. SEBUAH manometer dipasang untuk memantau

tekanan selubung. Isolator film fleksibel digunakan untuk organisme berisiko tinggi

(Kelompok Risiko 3 atau 4) jika tidak memungkinkan untuk

memasang atau memelihara lemari pengaman biologis konvensional. Mereka dapat diangkut

untuk digunakan dalam pekerjaan lapangan

Alat bantu pemipetan

Alat bantu pemipetan harus selalu digunakan untuk prosedur pemipetan. Pipet mulut harus

dilarang keras. Pentingnya alat bantu pemipetan tidak dapat diremehkan. Bahaya paling umum

yang terkait dengan prosedur pemipetan adalah hasil hisap mulut. Aspirasi oral dan konsumsi

bahan berbahaya bahan telah bertanggung jawab untuk banyak infeksi dan kecelakaan terkait

laboratorium. Patogen juga dapat ditransfer ke mulut jika jari yang terkontaminasi diletakkan

di ujung hisap dari pipet. Bahaya yang kurang diketahui dari pipetting mulut adalah menghirup
aerosol yang disebabkan oleh isap. Sumbat kapas bukanlah filter mikroba yang efisien pada

tekanan negatif atau positif, dan partikel mungkin tersedot melaluinya. Hisap keras dapat

diterapkan saat steker dikemas dengan rapat, yang mengakibatkan aspirasi sumbat, aerosol dan

bahkan cairan. Tertelannya patogen dicegah dengan penggunaan alat bantu pemipetan.

Aerosol juga dapat dihasilkan ketika cairan dijatuhkan dari pipet ke permukaan kerja, ketika:

kultur dicampur dengan mengisap dan meniup secara bergantian, dan ketika tetes terakhir

ditiup keluar dari pipet. Penghirupan aerosol yang tak terhindarkan yang dihasilkan selama

operasi pemipetan dapat dicegah dengan: bekerja di lemari keamanan biologis. Alat bantu

pemipetan harus dipilih dengan hati-hati. Desain dan penggunaannya tidak boleh membuat

tambahan bahaya infeksi dan harus mudah disterilkan dan dibersihkan. Ujung pipet terpasang

(tahan aerosol) harus digunakan ketika memanipulasi mikroorganisme dan kultur sel. Pipet

dengan ujung hisap yang retak atau terkelupas tidak boleh digunakan karena dapat merusak

segel tempat duduk alat bantu pemipetan sehingga menimbulkan bahaya.

Homogenizer, shaker, blender, dan sonikator

Homogenizer domestik (dapur) tidak disegel dan melepaskan aerosol. Hanya peralatan yang

dirancang untuk penggunaan laboratorium harus digunakan. Konstruksi mereka

meminimalkan atau mencegah pelepasan tersebut. Perut, yang sekarang tersedia untuk

digunakan dengan volume besar dan kecil, juga dapat menghasilkan aerosol.

Homogenizer yang digunakan untuk mikroorganisme Kelompok Risiko 3 harus selalu dimuat

dan dibuka kembali di lemari keamanan biologis. Sonicator dapat melepaskan aerosol. Mereka

harus dioperasikan di lemari pengaman biologis atau tertutup

dengan pelindung saat digunakan. Perisai dan bagian luar sonikator harus didekontaminasi

setelah digunakan.

Loop transfer sekali pakai

Keuntungan dari loop transfer sekali pakai adalah bahwa mereka tidak harus disterilkan dan

karena itu dapat: digunakan dalam lemari pengaman biologis di mana pembakar Bunsen dan

insinerator mikro akan mengganggu aliran udara.

Loop ini harus ditempatkan di disinfektan setelah digunakan dan dibuang sebagai limbah yang

terkontaminasi (lihat bagian pada bahan yang terkontaminasi (menular) untuk dibuang di Bab

3).

Insinerator mikro

Microincinerator yang dipanaskan dengan gas dan listrik memiliki kaca borosilikat atau

pelindung keramik yang meminimalkan percikan dan penyebaran bahan yang terinfeksi ketika

loop transfer disterilkan. Namun, insinerator mikro mengganggu aliran udara dan oleh karena

itu tidak boleh digunakan dalam lemari pengaman biologis.

Pakaian dan peralatan pelindung diri Pakaian dan peralatan pelindung pribadi dapat bertindak

sebagai penghalang untuk meminimalkan risiko pajanan terhadap

aerosol, percikan dan inokulasi yang tidak disengaja. Pakaian dan perlengkapan yang dipilih

tergantung pada sifat pekerjaan yang dilakukan.

Pakaian pelindung harus dipakai saat bekerja di laboratorium.

Sebelum meninggalkan laboratorium, pakaian pelindung harus dilepas, dan tangan harus

dicuci. Tabel 9 merangkum beberapa alat pelindung diri yang digunakan di laboratorium dan

perlindungan yang diberikan.

Jas laboratorium, gaun, baju, celemek

Jas laboratorium sebaiknya dikancingkan sepenuhnya. Namun, gaun lengan panjang dengan

bukaan belakang atau baju memberikan perlindungan yang lebih baik daripada jas laboratorium

dan lebih disukai di laboratorium mikrobiologi dan saat bekerja di kabinet keamanan biologis.

Celemek harus dikenakan di atas jas atau gaun laboratorium

bila perlu untuk memberikan perlindungan lebih lanjut terhadap tumpahan bahan kimia atau

bahan biologis seperti: darah atau cairan kultur.

Kacamata, kacamata pengaman, pelindung wajah

Pilihan peralatan untuk melindungi mata dan wajah dari cipratan dan benda yang terbentur

akan tergantung pada aktivitas yang dilakukan. Kacamata resep atau biasa dapat diproduksi

dengan bingkai khusus yang memungkinkan lensa untuk ditempatkan dalam bingkai dari

depan, menggunakan bahan anti pecah baik melengkung atau dilengkapi dengan pelindung

samping (kacamata pengaman). Kacamata harus dipakai di atas kacamata dan lensa kontak

biasa lensa, yang tidak memberikan perlindungan terhadap bahaya biologis. Pelindung wajah
(visor) terbuat dari plastik anti pecah, pas di muka dan ditahan di tempat dengan tali pengikat

kepala atau topi.

Respirator

Perlindungan pernapasan dapat digunakan saat melakukan prosedur dengan tingkat bahaya

tinggi (misalnya membersihkan tumpahan bahan infeksius). Pilihan antara masker dan

respirator, dan jenis respirator akan tergantung pada jenis bahaya. Respirator tersedia dengan

filter yang dapat diganti untuk perlindungan terhadap gas,

uap, partikulat, dan mikroorganisme. Perhatikan bahwa tidak ada filter selain filter HEPA yang

akan menyediakan perlindungan terhadap mikroorganisme, dan filter harus dipasang dengan

jenis yang benar alat bantu pernapasan. Untuk mencapai perlindungan yang optimal, respirator

harus dipasang satu per satu ke wajah operator dan diuji. Respirator serba lengkap dengan

suplai udara integral memberikan perlindungan penuh. Nasihatn harus dicari dari orang yang

memenuhi syarat, mis. ahli kesehatan kerja, untuk memilih pernapasan yang benar.

Sarung tangan

Kontaminasi tangan dapat terjadi ketika prosedur laboratorium dilakukan. Tangan juga

rentan terhadap cedera "tajam". Sarung tangan jenis bedah lateks atau vinil sekali pakai

digunakan secara luas untuk umum pekerjaan laboratorium, dan untuk menangani agen

infeksius dan darah dan cairan tubuh. Sarung tangan yang dapat digunakan kembali juga dapat

digunakan tetapi perhatian harus diberikan pada pencucian, pembuangan, pembersihan dan

disinfeksi yang benar. Sarung tangan harus dilepas dan tangan dicuci bersih setelah menangani

bahan infeksius, bekerja dalam lemari pengaman biologis dan sebelum meninggalkan

laboratorium. Sarung tangan sekali pakai yang digunakan harus:

dibuang bersama limbah laboratorium yang terinfeksi. Reaksi alergi seperti dermatitis dan

hipersensitivitas langsung telah dilaporkan di laboratorium dan pekerja lain yang memakai
sarung tangan lateks, terutama yang memiliki bedak. Alternatif seperti bebas bedak sarung

tangan lateks atau vinil harus digunakan jika terjadi masalah.

Sarung tangan jaring baja tahan karat harus dipakai ketika ada potensi paparan instrumen tajam

misalnya selama pemeriksaan postmortem. Namun, sarung tangan tersebut melindungi dari

gerakan mengiris tetapi tidak melindungi terhadap cedera jarum. Untuk informasi lebih lanjut

lihat referensi 12, 20 dan 21

 BAGIAN III

Teknik mikrobiologi yang baik

Teknik laboratorium yang aman

Kesalahan manusia, teknik laboratorium yang buruk, dan penyalahgunaan peralatan

menyebabkan sebagian besar laboratorium kecelakaan, cedera, dan infeksi terkait pekerjaan.

Bab ini memberikan ringkasan metode teknis yang dirancang untuk menghindari atau

meminimalkan masalah yang paling sering dilaporkan seperti ini.

Penanganan spesimen yang aman di laboratorium

Pengumpulan yang tidak tepat, transportasi internal dan penerimaan spesimen di laboratorium

membawa risiko infeksi kepada personel yang terlibat.

Wadah spesimen

Wadah spesimen dapat terbuat dari kaca atau lebih disukai plastik. Mereka harus kuat dan tidak

boleh bocor ketika tutup atau stopper diterapkan dengan benar. Tidak boleh ada bahan yang

tertinggal di luar wadah. Wadah harus diberi label dengan benar untuk memudahkan

identifikasi. Permintaan spesimen atau formulir spesifikasi tidak boleh dililitkan di sekitar

wadah tetapi ditempatkan dalam amplop terpisah, lebih disukai yang kedap air.

Transportasi spesimen di dalam fasilitas

Untuk menghindari kebocoran atau tumpahan yang tidak disengaja, wadah sekunder, seperti

kotak, harus digunakan, dilengkapi dengan: rak sehingga wadah spesimen tetap tegak. Wadah

sekunder mungkin dari logam atau plastik, harus dapat diautoklaf atau tahan terhadap aksi

desinfektan kimia, dan segel harus sebaiknya memiliki paking. Mereka harus didekontaminasi

secara teratur. Transportasi spesimen ke fasilitas dari lokasi yang jauh dijelaskan dalam Bab

12.

Penerimaan spesimen

Laboratorium yang menerima spesimen dalam jumlah besar harus menetapkan ruangan atau

area tertentu untuk ini tujuan.

Membuka paket

Personil yang menerima dan membongkar spesimen harus menyadari potensi bahaya kesehatan

yang terlibat, dan harus dilatih untuk menerapkan kewaspadaan universal ( 3), terutama ketika

berhadapan dengan rusak atau bocor kontainer. Spesimen harus dibongkar dalam lemari

pengaman biologis. Desinfektan harus tersedia.

Penggunaan pipet dan alat bantu pemipetan

1. Alat bantu pemipetan harus selalu digunakan. Pipetting melalui mulut harus dilarang.

2. Semua pipet harus memiliki sumbat kapas untuk mengurangi kontaminasi perangkat pipet.

3. Udara tidak boleh dihembuskan melalui cairan yang mengandung agen infeksius.

4. Bahan infeksius tidak boleh dicampur dengan penghisapan dan pengusiran secara bergantian

melalui pipet.

5. Cairan tidak boleh dikeluarkan secara paksa dari pipet.

6. Pipet tanda-ke-tanda lebih disukai daripada jenis lain karena tidak memerlukan pengusiran

tetes terakhir.

7. Pipet yang terkontaminasi harus terendam seluruhnya dalam disinfektan yang sesuai yang

terkandung dalam wadah yang tidak bisa pecah. Mereka harus dibiarkan dalam disinfektan

selama 18-24 jam sebelum dibuang.

8. Wadah pembuangan untuk pipet harus ditempatkan di dalam lemari pengaman biologis,

bukan di luarnya.

9. Jarum suntik yang dilengkapi dengan jarum suntik tidak boleh digunakan untuk pemipetan.

Kanula tumpul seharusnya digunakan sebagai pengganti jarum. Ada perangkat untuk membuka

botol tertutup septum yang memungkinkan pipet untuk

digunakan dan hindari penggunaan jarum suntik dan spuit.

10. Untuk menghindari penyebaran bahan infeksius yang secara tidak sengaja jatuh dari pipet,

yang direndam disinfektan kain atau kertas penyerap harus diletakkan di permukaan kerja; ini

harus diautoklaf atau dibuang sebagai limbah infeksius setelah digunakan.

Menghindari penyebaran bahan infeksius

1. Untuk menghindari pelepasan muatan sebelum waktunya, loop transfer mikrobiologis harus

memiliki: diameter 2-3 mm dan benar-benar tertutup. Panjang shank tidak boleh lebih dari 6

cm untuk meminimalkan getaran.

2. Risiko percikan bahan infeksius dalam nyala api pembakar Bunsen yang terbuka harus

dihindari dengan menggunakan: sebuah mikroincinerator listrik tertutup untuk mensterilkan

loop transfer. Loop transfer sekali pakai, yang berfungsi tidak perlu disterilkan ulang, lebih

disukai.

3. Tes katalase tidak boleh dilakukan pada slide untuk menghindari gelembung dan penyebaran

aerosol. Itu tabung, tabung kapiler atau metode kaca penutup harus digunakan sebagai

gantinya.
4. Spesimen dan kultur yang dibuang untuk autoklaf dan/atau pembuangan harus ditempatkan

di tempat yang tahan bocor wadah, mis. kantong sampah laboratorium.

5. Area kerja harus didekontaminasi dengan disinfektan yang sesuai pada akhir setiap periode

kerja. Untuk informasi lebih lanjut lihat referensi 12

Penggunaan lemari pengaman biologis

1. Penggunaan dan batasan lemari pengaman biologis harus dijelaskan kepada semua pengguna

potensial (lihat Bab 7), dengan mengacu pada standar nasional dan literatur yang relevan.

Protokol atau keamanan tertulis atau manual operasi harus dikeluarkan untuk staf. Secara

khusus, harus dijelaskan bahwa kabinet akan tidak melindungi operator dari tumpahan,

kerusakan atau teknik yang buruk.

2. Kabinet tidak boleh digunakan kecuali jika berfungsi dengan baik.

3. Panel tampilan kaca tidak boleh dibuka saat kabinet sedang digunakan.

4. Peralatan dan bahan dalam kabinet harus diminimalkan. Sirkulasi udara di pleno belakang

tidak harus diblokir. Bahan harus didekontaminasi permukaannya sebelum ditempatkan di

dalam wilayah kerja kabinet.

5. Pembakar bunsen tidak boleh digunakan di dalam lemari. Panas yang dihasilkan akan

mengganggu aliran udara dan dapat merusak filter. Microincinerator listrik diperbolehkan

tetapi loop transfer steril sekali pakai diperbolehkan lebih baik.

6. Semua pekerjaan harus dilakukan di bagian tengah atau belakang permukaan kerja dan

terlihat melalui panel tampilan.

7. Lalu lintas di belakang operator harus diminimalkan.

8. Operator tidak boleh mengganggu aliran udara dengan melepas dan memasukkan kembali

alatnya secara berulang-ulang lengan.

9. Panggangan udara depan tidak boleh terhalang oleh catatan, pipet atau bahan lain, karena

akan mengganggu udara aliran yang menyebabkan potensi kontaminasi material dan paparan

operator.

10. Permukaan kabinet keamanan biologis harus dibersihkan menggunakan desinfektan yang

sesuai setelahnya pekerjaan selesai dan di penghujung hari.

11. Kipas kabinet harus dijalankan setidaknya 5 menit sebelum mulai bekerja dan setelah

selesai bekerja di kabinet.

Untuk informasi lebih lanjut tentang lemari pengaman biologis, lihat Bab 7

Menghindari konsumsi bahan infeksius dan kontak dengan kulit dan mata

1. Partikel dan tetesan besar (> 5 m diameter) dilepaskan selama manipulasi mikrobiologis

menetap dengan cepat di permukaan bangku dan di tangan operator. Sarung tangan sekali pakai

harus dipakai.

Pekerja laboratorium harus menghindari menyentuh mulut, mata, dan wajah mereka.

2. Makanan dan minuman tidak boleh dikonsumsi atau disimpan di laboratorium.

3. Dilarang mengunyah permen karet di laboratorium

4. Kosmetik tidak boleh digunakan di laboratorium.

5. Wajah, mata dan mulut harus dilindungi atau dilindungi selama operasi apapun yang

mungkin: mengakibatkan percikan bahan yang berpotensi menular.

Menghindari injeksi bahan infeksius

1. Inokulasi yang tidak disengaja dengan barang pecah belah atau pecah dapat dihindari melalui

praktik yang hati-hati dan prosedur. Barang pecah belah harus diganti dengan barang plastik

bila memungkinkan.

2. Suntikan dapat terjadi karena kecelakaan dengan jarum suntik (needle-sticks), pipet kaca

Pasteur dan pecahan kaca.

3. Kecelakaan tertusuk jarum dapat dikurangi dengan (a) berhati-hati, dan (b) meminimalkan

penggunaan: jarum suntik dan jarum; untuk banyak teknik, jarum suntik dengan kanula tumpul

dapat digunakan sebagai gantinya. Perangkat sederhana tersedia untuk membuka botol

bersumbat septum sehingga pipet dapat digunakan.

4. Jarum tidak boleh ditutup kembali. Tanpa melepaskannya dari jarum suntik (jika tersedia),

barang sekali pakai harus dibuang ke dalam wadah tahan tusukan yang dilengkapi dengan

penutup.

5. Pipet Pasteur plastik harus menggantikan yang terbuat dari kaca.

Pemisahan serum

1. Hanya staf terlatih yang harus dipekerjakan untuk pekerjaan ini.

2. Sarung tangan dan pelindung mata dan selaput lendir harus dipakai.

3. Percikan dan aerosol hanya dapat dihindari atau diminimalkan dengan teknik laboratorium

yang baik. darah dan serum harus dipipet dengan hati-hati, tidak dituangkan. Pipetting melalui

mulut harus dilarang.

4. Setelah digunakan, pipet harus terendam seluruhnya dalam hipoklorit atau disinfektan lain

yang sesuai. Mereka harus tetap berada di disinfektan setidaknya selama 18 jam sebelum

dibuang, atau dicuci dan disterilkan untuk digunakan kembali.

5. Tabung spesimen bekas yang berisi bekuan darah, dll. (dengan tutup diganti) harus

ditempatkan di: wadah anti bocor yang sesuai untuk autoklaf dan/atau insinerasi.

6. Larutan hipoklorit, yang baru disiapkan setiap hari, harus tersedia untuk membersihkan

cipratan dan tumpahan (lihat Bab 14).

Penggunaan sentrifugal
1. Kinerja mekanik yang memuaskan merupakan prasyarat keamanan mikrobiologis dalam

penggunaan sentrifugal laboratorium.

2. Sentrifugal harus dioperasikan sesuai dengan instruksi pabrik.

3. Sentrifugal harus ditempatkan pada tingkat yang dapat dilihat oleh pekerja dengan

ketinggian kurang dari rata-rata mangkuk untuk menempatkan trunnion dan ember dengan

benar.

4. Tabung centrifuge dan wadah spesimen untuk digunakan dalam centrifuge harus terbuat dari

berdinding tebal kaca atau lebih disukai dari plastik dan harus diperiksa untuk cacat sebelum

digunakan.

5. Tabung dan wadah spesimen harus selalu ditutup rapat (ditutup rapat jika memungkinkan)

untuk: sentrifugasi.

6. Ember harus dimuat, diseimbangkan, disegel dan dibuka dalam lemari pengaman biologis.

7. Bucket dan trunnion harus dipasangkan berdasarkan beratnya dan, dengan tabung di

tempatnya, seimbang dengan benar.

8. Jumlah ruang yang harus tersisa antara tingkat cairan dan tepi centrifuge

tabung harus diberikan dalam instruksi pabrik.

9. Air suling atau alkohol (propanol, 70%) harus digunakan untuk menyeimbangkan ember

kosong. garam atau larutan hipoklorit tidak boleh digunakan karena dapat menimbulkan korosi

pada logam.

10. Bucket centrifuge yang dapat ditutup rapat (gelas pengaman) harus digunakan untuk

mikroorganisme dari Kelompok Risiko 3 dan 4.

11. Saat menggunakan rotor centrifuge kepala sudut, perawatan harus dilakukan untuk

memastikan bahwa tabung tidak kelebihan beban karena dapat bocor.

12. Bagian dalam mangkuk sentrifus harus diperiksa setiap hari dari noda atau kotoran pada

tingkat rotor. Jika pewarnaan atau kekotoran terbukti maka protokol sentrifugasi harus

dievaluasi kembali.

13. Rotor sentrifugal dan ember harus diperiksa setiap hari untuk tanda-tanda korosi dan retak

rambut.

14. Ember, rotor dan mangkuk centrifuge harus didekontaminasi setelah digunakan.

15. Setelah digunakan, ember harus disimpan dalam posisi terbalik untuk mengalirkan cairan

penyeimbang.

16. Partikel udara yang menular dapat dikeluarkan ketika sentrifugal digunakan. Partikel-

partikel ini bergerak di kecepatan terlalu tinggi untuk ditahan oleh aliran udara kabinet jika

centrifuge ditempatkan di tempat terbuka tradisional lemari pengaman biologis Kelas I atau

Kelas II. Melampirkan sentrifugal di lemari pengaman Kelas III

mencegah aerosol yang dipancarkan menyebar secara luas. Namun, teknik centrifuge yang baik

dan aman tabung tertutup menawarkan perlindungan yang memadai terhadap aerosol menular

dan partikel terdispersi.

Penggunaan homogenizer, shaker, blender, dan sonikator

1. Homogenizer (dapur) rumah tangga tidak boleh digunakan di laboratorium karena dapat

bocor atau terlepas aerosol. Blender laboratorium dan perut lebih aman.

2. Tutup dan gelas atau botol harus dalam kondisi baik dan bebas dari cacat atau distorsi. Topi

harus pas dan gasket harus dalam kondisi baik.

3. Tekanan menumpuk di bejana selama pengoperasian homogenizer, shaker, dan sonicator.

Aerosol yang mengandung bahan infeksius dapat keluar dari antara tutup dan bejana. Plastik,

dalam khusus, pembuluh polytetrafluoroethylene (PTFE) direkomendasikan karena kaca dapat

pecah, melepaskan bahan infeksius dan mungkin melukai operator.

4. Saat digunakan, homogenizer, shaker, dan sonicator harus ditutup dengan transparan yang

kuat casing plastik. Ini harus didesinfeksi setelah digunakan. Jika memungkinkan, mesin ini

harus dioperasikan, di bawah penutup plastiknya, dalam lemari pengaman biologis.

5. Pada akhir operasi, wadah harus dibuka dalam lemari pengaman biologis.

6. Pelindung pendengaran harus disediakan bagi orang yang menggunakan sonikator.

Penggunaan penggiling tisu

1. Penggiling kaca harus dipegang dalam gumpalan bahan penyerap dengan tangan yang

bersarung tangan. Plastik (PTFE) penggiling lebih aman.

2. Penggiling tisu harus dioperasikan dan dibuka dalam lemari pengaman biologis.

Perawatan dan penggunaan lemari es dan freezer

1. Lemari es, freezer dan peti karbon dioksida padat (es kering) harus dicairkan dan

dibersihkan secara berkala, dan semua ampul, tabung, dll. yang rusak selama penyimpanan

dibuang. Wajah pelindung dan sarung tangan karet tugas berat harus dipakai selama

pembersihan. Setelah dibersihkan, bagian dalam permukaan kabinet harus didesinfeksi.

2. Semua wadah yang disimpan di lemari es, dll. harus diberi label yang jelas dengan nama

ilmiah: isinya, tanggal penyimpanan dan nama orang yang menyimpannya. Tidak berlabel dan

usang bahan harus diautoklaf dan dibuang.

3. Persediaan isi freezer harus dijaga.

4. Larutan yang mudah terbakar tidak boleh disimpan di lemari es kecuali jika tahan ledakan.

Pemberitahuan untuk ini efek harus ditempatkan pada pintu lemari es.

Pembukaan ampul yang mengandung bahan infeksius terliofilisasi

Perawatan harus dilakukan ketika ampul bahan beku-kering dibuka, karena isinya mungkin di

bawah tekanan yang dikurangi dan aliran udara yang tiba-tiba dapat membubarkan beberapa

bahan ke dalam suasana. Ampul harus selalu dibuka dalam lemari pengaman biologis. Prosedur

berikut direkomendasikan untuk membuka ampul.

1. Pertama dekontaminasi permukaan luar ampul.

2. Buat tanda kikir pada tabung di dekat bagian tengah sumbat kapas atau selulosa, jika ada

3. Pegang ampul dalam gumpalan kapas yang dibasahi alkohol untuk melindungi tangan

sebelum memecahkannya di sebuah file menggores.

4. Lepaskan bagian atas dengan lembut dan perlakukan sebagai bahan yang terkontaminasi.

5. Jika sumbat masih berada di atas isi ampul, lepaskan dengan tang steril.

6. Tambahkan cairan untuk resuspensi perlahan ke ampul untuk menghindari buih.

Penyimpanan ampul yang mengandung bahan infeksius

Ampul yang mengandung bahan infeksius tidak boleh direndam dalam nitrogen cair karena

retak atau ampul yang tersegel tidak sempurna dapat pecah atau meledak saat dikeluarkan. Jika

diperlukan suhu yang sangat rendah, ampul harus disimpan hanya dalam fase gas di atas

nitrogen cair. Jika tidak, menular bahan harus disimpan dalam lemari deep-freeze mekanis atau

di atas es kering. Pekerja laboratorium harus

kenakan pelindung mata dan tangan saat mengeluarkan ampul dari penyimpanan dingin.

Permukaan luar ampul yang disimpan dengan cara ini harus didesinfeksi ketika

ampul tersebut: dihapus dari penyimpanan.

Tindakan pencegahan khusus dengan darah dan cairan tubuh lainnya, jaringan dan

kotoran

Tindakan pencegahan yang diuraikan di bawah ini dirancang untuk melindungi pekerja

laboratorium terhadap infeksi dengan: patogen yang ditularkan melalui darah.

Pengumpulan, pelabelan, dan pengangkutan spesimen

1. Kewaspadaan universal (3) harus selalu diikuti; sarung tangan harus dipakai untuk semua

prosedur.

2. Darah harus diambil dari pasien dan hewan oleh staf terlatih.

3. Untuk proses mengeluarkan darah, sistem jarum dan alat suntik konvensional harus diganti

dengan keamanan sekali pakai perangkat vakum yang memungkinkan pengumpulan darah

langsung ke transportasi dan/atau biakan yang disumbat

tabung, secara otomatis menonaktifkan jarum setelah digunakan.

4. Tabung harus ditempatkan dalam wadah yang memadai untuk transportasi ke laboratorium

(lihat Bab 12 untuk: persyaratan transportasi) dan di dalam fasilitas laboratorium (lihat Bab

10). Formulir permintaan harus ditempatkan dalam kantong atau amplop tahan air yang

terpisah.

5. Staf resepsionis tidak boleh membuka tas ini.

Penahanan

1. Pekerjaan diagnostik dapat dilakukan di laboratorium dasar - Tingkat Keamanan Hayati 2,

lebih disukai yang didedikasikan untuk tujuan ini.

2. Pekerjaan penelitian dan pengembangan yang melibatkan propagasi volume besar atau

konsentrasi tinggi mikroorganisme menular mungkin memerlukan laboratorium penahanan -

Tingkat Keamanan Hayati 3 atau lebih tinggi tingkat penahanan.

Membuka tabung spesimen dan isi pengambilan sampel

1. Tabung spesimen harus dibuka dalam lemari pengaman biologis Kelas I atau Kelas II.

2. Sarung tangan harus dipakai. Perlindungan mata dan selaput lendir juga direkomendasikan

(kacamata atau pelindung (pelindung)).

3. Pakaian pelindung harus dilengkapi dengan celemek plastik.

4. Sumbat harus dipegang melalui selembar kertas atau kain kasa untuk mencegah percikan.

Kaca dan "benda tajam"

1. Plastik harus menggantikan kaca sedapat mungkin. Hanya gelas kelas laboratorium

(borosilikat) yang boleh digunakan, dan barang apa pun yang terkelupas atau retak harus

dibuang.

2. Jarum suntik tidak boleh digunakan sebagai pipet. Kanula tumpul diizinkan.

Film dan noda untuk mikroskop

Memperbaiki dan mewarnai sampel darah, dahak dan feses untuk mikroskop tidak serta merta

membunuh semua organisme atau virus pada apusan. Barang-barang ini harus ditangani

dengan forsep, disimpan dengan benar, dan didekontaminasi dan/atau diautoklaf sebelum

dibuang.

Peralatan otomatis (sonicators, vortex mixers)

1. Peralatan harus dari tipe tertutup untuk menghindari penyebaran tetesan dan aerosol.

2. Limbah harus dikumpulkan dalam bejana tertutup untuk autoklaf dan/atau pembuangan lebih

lanjut.

3. Peralatan harus didesinfeksi pada akhir setiap sesi, mengikuti aturan pabrikan

instruksi.

tisu

1. Fiksatif formalin harus digunakan. Spesimen kecil, mis. dari biopsi jarum, dapat diperbaiki

dan didekontaminasi dalam beberapa jam, tetapi spesimen yang lebih besar dapat memakan

waktu beberapa hari.

2. Pemotongan beku harus dihindari. Jika itu penting, cryostat harus dilindungi dan—
operator harus memakai pelindung keselamatan (visor). Untuk dekontaminasi, suhu instrumen

harus dinaikkan hingga 20 °C.

Dekontaminasi

Hipoklorit dan disinfektan tingkat tinggi direkomendasikan untuk dekontaminasi. Baru

disiapkan larutan hipoklorit harus mengandung klorin yang tersedia pada 1 g/l untuk

penggunaan umum dan 10 g/l untuk darah tumpahan. Glutaraldehida dapat digunakan untuk

dekontaminasi permukaan (lihat Bab 14).

Tindakan pencegahan dengan bahan yang mungkin mengandung prion

Prion (juga disebut sebagai "virus lambat") dikaitkan dengan spongiform tertentu yang dapat

menular encephalopathies (TSEs), terutama penyakit Creutzfeldt-Jakob (CJD; termasuk

bentuk varian baru), Sindrom Gerstmann-Sträussler-Scheinker, insomnia familial yang fatal

dan kuru pada manusia; scrapie pada domba dan kambing; bovine spongiform encephalopathy

(BSE) pada sapi; dan ensefalopati menular lainnya

rusa, elk dan cerpelai. Meskipun CJD telah ditularkan ke manusia, tampaknya tidak ada yang

terbukti kasus infeksi terkait laboratorium dengan salah satu agen ini. Namun demikian, adalah

bijaksana untuk mengamati tindakan pencegahan tertentu dalam penanganan bahan dari

manusia dan hewan yang terinfeksi atau berpotensi terinfeksi.

Pemilihan tingkat keamanan hayati untuk pekerjaan dengan bahan yang terkait dengan

TSE akan bergantung pada:

sampel yang akan dipelajari, dan harus dilakukan dengan berkonsultasi dengan otoritas

nasional. Paling atas konsentrasi prion ditemukan di jaringan sistem saraf pusat. Penelitian

pada hewan menunjukkan bahwa kemungkinan bahwa konsentrasi tinggi prion juga ditemukan

di limpa, timus, kelenjar getah bening dan paru-paru.

Karena tidak ada metode yang akan memastikan dekontaminasi setelah terpapar prion, penting

untuk tekankan penggunaan instrumen sekali pakai bila memungkinkan, dan gunakan penutup

pelindung untuk pekerjaan itu permukaan kabinet keamanan biologis, yang juga dapat dibuang

setelah digunakan. Tindakan pencegahan utama yang harus diambil adalah untuk menghindari

menelan bahan yang terkontaminasi atau tusukan dari: kulit pekerja laboratorium. Tindakan

pencegahan tambahan berikut harus diambil, karena agen tidak: dibunuh oleh proses normal

desinfeksi dan sterilisasi laboratorium.

1. Penggunaan peralatan khusus, yaitu peralatan yang tidak digunakan bersama dengan

laboratorium lain, sangat direkomendasikan.

2. Pakaian pelindung laboratorium sekali pakai (gaun dan celemek) dan sarung tangan harus

dipakai (jaring baja sarung tangan antara sarung tangan karet untuk ahli patologi).

3. Penggunaan peralatan plastik sekali pakai, yang dapat diolah dan dibuang sebagai sampah

kering, sangat direkomendasikan.

4. Pengolah jaringan tidak boleh digunakan karena masalah desinfeksi. Guci dan gelas kimia

harus digunakan sebagai gantinya.

5. Semua manipulasi harus dilakukan di lemari pengaman biologis.

6. Perhatian besar harus dilakukan untuk menghindari produksi aerosol, konsumsi yang tidak

disengaja, dan luka dan tusukan kulit.

7. Jaringan yang difiksasi formalin harus dianggap masih menular, bahkan setelah kontak yang

terlalu lama dengan formalin.

8. Limbah bangku, termasuk sarung tangan sekali pakai, gaun dan celemek, harus diautoklaf,

diikuti dengan: pembakaran.

9. Instrumen sekali pakai, termasuk sarung tangan jaring baja, harus dikumpulkan untuk

dekontaminasi.
10. Limbah cair infeksius yang terkontaminasi prion harus diolah dengan 2 mol/l natrium

hidroksida (konsentrasi akhir) selama 1 jam diikuti dengan autoklaf

11. Prosedur penguapan paraformaldehida tidak mengurangi titer prion dan prion tahan

terhadap penyinaran ultraviolet. Namun, lemari harus terus didekontaminasi dengan standar

metode (yaitu gas formaldehida) untuk menonaktifkan agen lain yang mungkin ada.

12. Lemari pengaman biologis yang terkontaminasi prion dan permukaan lainnya dapat

didekontaminasi dengan cara berulang pembasahan dengan 2 mol/l natrium hidroksida selama

1 jam diikuti dengan pembilasan dengan air. Efisiensi tinggi Filter particulate air (HEPA) harus

diautoklaf dan dibakar secara berkala.

13. Instrumen harus direndam selama 1 jam dalam 2 mol/l natrium hidroksida dan kemudian

dibilas dengan air sebelum autoklaf.

14. Instrumen yang tidak dapat diautoklaf dapat dibersihkan dengan pembasahan berulang

dengan 2 mol/l natrium hidroksida selama 1 jam. Pencucian yang tepat untuk menghilangkan

sisa natrium hidroksida diperlukan. Untuk informasi lebih lanjut tentang penanganan agen

tidak konvensional lihat referensi 12, 22 dan 23.

11. Keamanan hayati dan teknologi DNA rekombinan

Teknologi DNA rekombinan melibatkan menggabungkan informasi genetik dari sumber yang

berbeda sehingga menciptakan organisme hasil rekayasa genetika (GMO) yang mungkin

belum pernah ada di alam sebelumnya. Mulanya ada kekhawatiran di antara ahli biologi

molekuler bahwa organisme semacam itu mungkin tidak dapat diprediksi dan sifat yang tidak

diinginkan dan akan mewakili biohazard jika mereka lolos dari laboratorium. Ini Kekhawatiran
itu berujung pada konferensi Asilomar yang terkenal yang diadakan pada tahun 1975 (24). Pada

pertemuan itu masalah keamanan adalah

dibahas dan pedoman pertama untuk teknologi DNA rekombinan diusulkan. Lebih dari 25

tahun sekarang telah berlalu dan tidak ada insiden buruk yang terkait dengan teknologi ini yang

terungkap. Ini menunjukkan bahwa rekayasa genetika aman, asalkan langkah-langkah

keamanan yang tepat diamati. Teknologi DNA rekombinan atau rekayasa genetika pertama

kali digunakan untuk mengkloning segmen DNA dari

minat pada inang bakteri untuk menghasilkan bahan yang cukup murni untuk penelitian lebih

lanjut. Lagi baru-baru ini, molekul DNA rekombinan juga telah digunakan untuk membuat

yang lebih tinggi yang dimodifikasi secara genetik

organisme seperti hewan transgenik dan "knock-out" dan tanaman transgenik (lihat bagian

yang relevan di bawah).

Teknologi DNA rekombinan telah memiliki dampak besar pada biologi dan kedokteran dan

akan memiliki pengaruh yang lebih besar dalam waktu dekat. Sekarang urutan nukleotida dari

seluruh manusia genom tersedia, puluhan ribu gen fungsi yang tidak diketahui akan dipelajari,

dan rekombinan Teknologi DNA akan menjadi salah satu cara untuk melakukannya.

Selanjutnya, terapi gen diharapkan menjadi

pengobatan yang diterima untuk penyakit tertentu di masa depan, dan banyak vektor baru untuk

transfer gen akan dibuat dengan menggunakan teknik rekayasa genetika. Akhirnya, tanaman

transgenik yang dihasilkan oleh DNA rekombinan teknologi mungkin memainkan peran yang

semakin penting dalam pertanian modern.

Saat mempertimbangkan penggunaan atau konstruksi GMO, proses penilaian risiko untuk

pekerjaan di laboratorium mungkin bahkan lebih penting daripada itu untuk bekerja dengan

genetik normal (tidak dimodifikasi) organisme. Sedangkan yang terakhir cenderung dicirikan

dengan baik sehubungan dengan sifat patogen,

yang pertama akan menjadi baru, dan evaluasi potensi bahaya yang terkait dengan bekerja

dengan semacam itu organisme tidak dapat membangun pengalaman saja.

Penilaian risiko akan mengidentifikasi sistem penahanan biologis yang akan digunakan. Sifat-

sifat dari organisme donor, sifat sekuens DNA yang akan ditransfer, sifat-sifat penerima

organisme, dan sifat-sifat lingkungan harus dievaluasi. Semua faktor ini akan menentukan

tingkat keamanan hayati yang diperlukan untuk penanganan yang aman dari hasil transgenik.

Paragraf berikut memberikan beberapa informasi latar belakang sehubungan dengan kriteria

ini.

Sistem ekspresi biologis

Sistem ekspresi biologis adalah vektor dan sel inang yang memenuhi sejumlah kriteria yang

membuatnya aman untuk digunakan. Contoh yang baik dari sistem ekspresi biologis adalah

plasmid pUC18 (atau turunannya), yang sering digunakan sebagai vektor kloning dalam

kombinasi dengan sel Escherichia coli K12. pUC18 plasmid dan turunannya telah diurutkan

seluruhnya. Lebih penting lagi, semua gen diperlukan untuk

transfer efisien ke bakteri lain telah dihapus dari prekursor plasmid pBR322 dengan

menyediakan penahanan yang signifikan. E. coli K12 adalah strain yang tidak memiliki gen

yang diketahui menyebabkan beberapa strain E. Coli patogen. Selanjutnya, E. coli K12 tidak

dapat secara permanen menjajah usus manusia atau hewan yang sehat.

Jadi, sebagian besar eksperimen rekayasa genetika rutin dapat dilakukan dengan aman di E.

coli K12/pUC18 di Tingkat Keamanan Hayati 1 asalkan urutan DNA asing yang dimasukkan

tidak memerlukan tingkat keamanan hayati yang lebih tinggi

(Lihat di bawah).

Sifat organisme donor dan DNA kloning

Penilaian risiko harus mempertimbangkan tidak hanya sistem vektor/inang yang digunakan

tetapi juga sifat-sifat DNA untuk dikloning. Dalam kebanyakan kasus, penilaian risiko akan

menunjukkan bahwa urutan DNA yang dimasukkan tidak mungkin

untuk mengubah sifat biologis organisme inang, tetapi dalam beberapa kasus mereka dapat

melakukannya, misalnya, jika: mereka berasal dari organisme patogen. Jelas tidak semua gen

dari organisme patogen berkontribusi pada virulensi agen. Oleh karena itu, penyisipan sekuens

DNA berkarakter baik yang tidak mungkin terlibat dalam patogenisitas mungkin tidak

memerlukan langkah-langkah keamanan tambahan. Namun, di kasus di mana urutan ini tidak

ditandai, situasi yang biasanya dihadapi ketika a perpustakaan DNA genom suatu organisme

sedang dibangun, tingkat keamanan hayati yang lebih tinggi akan diperlukan. Pertimbangan

penting adalah apakah produk gen memiliki aktivitas farmakologis potensial. Oleh karena itu,

kloning gen yang mengkode protein seperti racun mungkin memerlukan tingkat keamanan

hayati yang lebih tinggi. Ekspresi berlebih dari produk gen dari vektor virus eukariotik dapat

memiliki konsekuensi yang tidak terduga ketika: protein ini memiliki aktivitas farmakologis.

Vektor virus untuk transfer gen

Vektor virus digunakan tidak hanya untuk terapi gen tetapi juga untuk transfer gen yang efisien

ke sel lain. Vektor adenovirus telah menjadi populer untuk terapi gen. Vektor tersebut tidak

memiliki gen tertentu yang diperlukan untuk replikasi virus dan oleh karena itu harus

disebarkan dalam garis sel yang melengkapi cacat.

Meskipun vektor tersebut cacat replikasi, mereka harus ditangani pada tingkat keamanan hayati

yang sama seperti: adenovirus induk dari mana mereka berasal. Alasan untuk ini adalah bahwa

stok virus mungkin terkontaminasi virus replikasi-kompeten, yang dihasilkan oleh virus

spontan yang langka peristiwa rekombinasi dalam garis sel pelengkap.

Hewan transgenik dan "knock-out"

Hewan yang membawa informasi genetik asing (hewan transgenik) harus ditangani dalam

penahanan tingkat yang sesuai dengan karakteristik produk gen asing. Hewan dengan target

penghapusan gen tertentu ("binatang knock-out") umumnya tidak menimbulkan bahaya

biologis tertentu. Contoh hewan transgenik termasuk hewan yang mengekspresikan reseptor

untuk virus yang biasanya tidak dapatmenginfeksi spesies itu. Jika hewan seperti itu lolos dari

laboratorium dan mentransmisikan transgen ke alam liar populasi hewan, reservoir hewan

untuk virus tertentu secara teoritis dapat dihasilkan. Kemungkinan ini telah dibahas untuk virus

polio dan sangat relevan dalam konteks pemberantasan poliomielitis. Tikus transgenik yang

mengekspresikan reseptor virus polio manusia yang dihasilkan di laboratorium yang berbeda

rentan terhadap infeksi virus polio dengan berbagai rute inokulasi dan penyakit yang dihasilkan

secara klinis dan histopatologi mirip dengan poliomielitis manusia. Namun, model tikus

berbeda dari manusia dalam bahwa replikasi saluran pencernaan dari virus polio yang diberikan

secara oral tidak efisien atau tidak terjadi. Dia oleh karena itu sangat tidak mungkin bahwa

melarikan diri dari tikus transgenik ke alam liar akan menghasilkan pembentukan reservoir

hewan baru untuk virus polio. Namun demikian, contoh ini menunjukkan bahwa, untuk setiap

baris baru dari hewan transgenik, studi rinci harus dilakukan untuk menentukan rute yang

dilalui hewan dapat terinfeksi, ukuran inokulum yang diperlukan untuk infeksi, dan tingkat

pelepasan virus oleh yang terinfeksi hewan.

Tanaman transgenik

Tanaman transgenik yang mengekspresikan gen yang memberikan toleransi terhadap herbisida

atau ketahanan terhadap serangga adalah saat ini menjadi bahan kontroversi yang cukup besar

di sebagian besar dunia. Diskusi terutama fokus pada keamanan tanaman seperti makanan dan

konsekuensi ekologis jangka panjang dari pertumbuhan tersebut tanaman dalam skala besar,

yang bukan merupakan subjek dari bab ini.

Tanaman transgenik yang mengekspresikan gen hewan atau manusia harus tetap terkandung di

dalam fasilitas. Tanaman transgenik tersebut harus ditangani pada tingkat keamanan hayati

yang sesuai dengan karakteristiknya produk dari gen yang diekspresikan.

Kesimpulan

Saat membuat atau menangani organisme rekombinan, penting untuk melakukan penilaian

risiko yang terperinci, yang harus mempertimbangkan sifat donor, organisme penerima dan

lingkungan. Di banyak kasus penilaian risiko akan menunjukkan bahwa organisme rekombinan

dapat ditangani pada saat yang sama tingkat keamanan hayati sebagai penerima tipe liar.

Namun, dalam beberapa kasus, tingkat keamanan hayati yang lebih tinggi akan diperlukan. Ini

adalah kasus, misalnya, ketika urutan DNA yang tidak jelas dari organisme donor adalah

ditransfer, yang berpotensi meningkatkan virulensi organisme penerima. Situasi ini adalah

biasanya ditemui dalam eksperimen kloning acak ("shot-gun") di mana perpustakaan DNA

genomik mapan. Penilaian risiko sangat penting saat membuat GMO yang mengekspresikan

protein dengan aktivitas farmakologis, seperti racun. Jelas bahwa organisme tersebut harus

ditangani dengan hati-hati. Beberapa protein yang aktif secara farmakologis hanya bersifat

toksik jika diekspresikan pada tingkat yang tinggi. Dalam hal ini, penilaian risiko menjadi

sangat menuntut dan membutuhkan perkiraan tingkat ekspresi yang diharapkan protein oleh

organisme rekombinan tertentu dan tingkat di mana protein tertentu menjadi beracun

dalam organisme yang secara tidak sengaja terpapar padanya. Banyak negara memiliki komite

keselamatan nasional, yang menetapkan pedoman untuk bekerja dengan GMO dan membantu

para ilmuwan mengklasifikasikan pekerjaan mereka di tempat yang sesuai tingkat keamanan

hayati. Dalam beberapa kasus, klasifikasi mungkin berbeda antar negara, atau negara mungkin

memutuskan untuk mengklasifikasikan pekerjaan pada tingkat yang lebih rendah atau lebih

tinggi ketika informasi baru pada sistem vektor/host tertentu menjadi tersedia. Penilaian risiko

dengan demikian merupakan proses yang dinamis dan harus memperhitungkan perkembangan
baru dan kemajuan ilmu pengetahuan. Ini adalah tanggung jawab para ilmuwan yang terlibat

dalam rekayasa genetika untuk tetap up to date pada perkembangan ini, dan untuk menghormati

pedoman yang ditetapkan oleh keselamatan nasional mereka komite.

Untuk informasi lebih lanjut lihat referensi 25-27.

12. Transportasi zat menular

Peraturan internasional untuk pengangkutan bahan infeksius didasarkan pada dua tahunan

rekomendasi dari Komite Ahli Perserikatan Bangsa-Bangsa tentang Pengangkutan Barang

Berbahaya. Di Desember 2002, pada akhir dua tahun 2001-2002 saat ini, Komite dapat

memperkenalkan lebih lanjut perubahan proposal untuk mengubah persyaratan saat ini di

Transportasi Berbahaya PBB Barang – Model Peraturan yang baru-baru ini diterima pada sesi

dua tahunan. Usulan itu telah diadopsi, dan perubahan lebih lanjut yang mungkin

diperkenalkan, secara substansial akan mempengaruhi peraturan tentang pengangkutan bahan

infeksius. Bab 12 tentang “Transportasi”menular zat” karena itu menunggu pemungutan suara

terakhir yang akan diambil pada bulan Desember 2002 oleh Komite. Manual biosafety

laboratorium, edisi ke-3, yang akan mencakup Bab 12 yang direvisi, akan dibuat tersedia di

situs web WHO dan diterbitkan pada tahun 2003.

 13. Rencana darurat dan prosedur darurat

Setiap laboratorium yang bekerja dengan mikroorganisme infektif harus menerapkan tindakan

pencegahan keselamatan yang sesuai terhadap bahaya organisme dan hewan yang ditangani.

Rencana darurat tertulis untuk menangani kecelakaan laboratorium dan fasilitas hewan adalah

suatu keharusan dalam setiap fasilitas yang bekerja dengan atau menyimpan mikroorganisme

Kelompok Risiko 3 atau 4 (laboratorium penahanan –

Biosafety Level 3 dan laboratorium penahanan maksimum – Biosafety Level 4). Kesehatan

nasional dan/atau lokal otoritas harus terlibat dalam pengembangan rencana kesiapsiagaan

darurat.

Rencana cadangan

Rencana kontinjensi harus menyediakan prosedur operasional untuk:

– tindakan pencegahan terhadap bencana alam, mis. kebakaran, banjir, gempa bumi, dan

ledakan
– penilaian risiko biohazard

– manajemen paparan kecelakaan dan dekontaminasi

– evakuasi darurat orang dan hewan dari lokasi

– perawatan medis darurat untuk orang yang terpapar dan terluka

– pengawasan medis terhadap orang yang terpapar

– manajemen klinis orang yang terpapar

- Penyelidikan epidemiologi

Dalam pengembangan rencana ini hal-hal berikut harus dipertimbangkan untuk dimasukkan:

– Identifikasi organisme berisiko tinggi

– lokasi area berisiko tinggi, mis. laboratorium, area penyimpanan, fasilitas hewan

– identifikasi personel dan populasi yang berisiko

– identifikasi personel yang bertanggung jawab dan tugasnya, mis. petugas keamanan hayati,

personel keamanan, lokal otoritas kesehatan, dokter, ahli mikrobiologi, dokter hewan, ahli

epidemiologi, dan pemadam kebakaran dan polisi jasa

– daftar fasilitas perawatan dan isolasi yang dapat menerima orang yang terpapar atau terinfeksi

– transportasi orang yang terpapar atau terinfeksi

– daftar sumber serum kekebalan, vaksin, obat-obatan, peralatan dan persediaan khusus

– penyediaan peralatan darurat, mis. pakaian pelindung, desinfektan, dekontaminasi

peralatan.

Prosedur darurat untuk laboratorium mikrobiologi

Injeksi, luka, dan lecet yang tidak disengaja

Individu yang terkena harus melepas pakaian pelindung, mencuci tangan dan bagian yang

terkena, menerapkan dan desinfektan kulit yang sesuai, pergi ke ruang P3K, dan beri tahu

penanggung jawab tentang penyebab luka dan organisme yang terlibat. Jika dianggap perlu,
seorang dokter harus dikonsultasikan dan atau sarannya diikuti. Rekam medis yang sesuai dan

lengkap harus disimpan

Sengaja menelan bahan yang berpotensi berbahaya

Pakaian pelindung harus dilepas dan orang tersebut dibawa ke ruang P3K. Seorang dokter

harus diberi tahu tentang bahan yang dicerna dan sarannya diikuti. Medis yang tepat dan

lengkap catatan harus disimpan.

Pelepasan aerosol yang berpotensi berbahaya (selain dalam lemari pengaman biologis)

Semua orang harus segera mengosongkan area yang terkena dampak dan setiap orang yang

terpapar harus dirujuk untuk saran medis. Supervisor laboratorium dan petugas keamanan

hayati harus segera diberitahu. tidak ada harus memasuki ruangan setidaknya selama 1 jam,

untuk memungkinkan aerosol terbawa dan partikel yang lebih berat mengendap. Jika

laboratorium tidak memiliki sistem pembuangan udara sentral, pintu masuk harus ditunda

selama 24 jam harus diposting menunjukkan bahwa entri dilarang. Setelah waktu yang tepat,

dekontaminasi harus dilanjutkan, diawasi oleh petugas keamanan hayati. Pakaian pelindung

dan pelindung pernapasan yang sesuai

harus dipakai untuk ini.

Bahan infeksius yang rusak dan tumpah, termasuk kultur

Benda pecah yang terkontaminasi zat infeksius, termasuk vial atau wadah, atau tumpah

bahan infeksius, termasuk biakan, harus ditutup dengan kain atau handuk kertas. Desinfektan

kemudian harus dituangkan di atasnya dan dibiarkan selama setidaknya 30 menit. Kain atau

handuk kertas dan yang rusak bahan kemudian dapat dibersihkan; pecahan kaca harus ditangani

dengan forsep. yang terkontaminasi daerah kemudian harus diusap dengan desinfektan. Jika
pengki digunakan untuk membersihkan material yang rusak, mereka harus diautoklaf atau

ditempatkan dalam disinfektan yang efektif selama 24 jam. Kain, handuk kertas, dan penyeka

digunakan untuk membersihkan harus ditempatkan dalam wadah limbah yang terkontaminasi.

Sarung tangan harus dipakai untuk semua prosedur ini. Jika formulir laboratorium atau materi

cetak atau tertulis lainnya terkontaminasi, informasi tersebut harus: disalin ke formulir lain dan

aslinya dibuang ke dalam wadah limbah terkontaminasi.

Kerusakan tabung yang mengandung bahan yang berpotensi berbahaya dalam

sentrifugal yang tidak memiliki:

ember yang dapat ditutup rapat Jika terjadi kerusakan atau dicurigai saat mesin sedang berjalan,

motor harus dimatikan dan mesin dibiarkan tertutup selama 30 menit. Jika kerusakan

ditemukan setelah mesin berhenti, tutupnya harus segera diganti dan dibiarkan tertutup selama

30 menit. Dalam kedua kasus, petugas keamanan hayati harus telah diinformasikan. Sarung

tangan yang kuat (misalnya karet tebal), jika perlu ditutup dengan sarung tangan sekali pakai

yang sesuai, harus dipakai untuk semua operasi berikutnya. Forceps, atau kapas yang dipegang

dengan forsep, harus digunakan untuk mengambil puing-puing kaca. Semua tabung yang rusak,

pecahan kaca, ember, trunnion, dan rotor harus ditempatkan di tempat yang tidak korosif

desinfektan yang diketahui aktif terhadap organisme yang bersangkutan dan dibiarkan selama

24 jam dan/atau diautoklaf. Tabung yang tidak terputus dan tertutup dapat ditempatkan dalam

disinfektan dalam wadah terpisah dan dipulihkan setelah 60 menit Mangkuk centrifuge harus

diseka dengan disinfektan yang sama, pada pengenceran yang sesuai, kiri

semalaman lalu diusap lagi, dicuci dengan air dan dikeringkan. Semua bahan yang digunakan

dalam pembersihan harus diperlakukan sebagai limbah infeksius.

Kerusakan tabung di dalam ember yang dapat ditutup rapat (gelas pengaman)
Semua ember centrifuge yang disegel harus dimuat dan dibongkar di lemari pengaman

biologis. Jika terjadi kerusakan dicurigai, tutupnya harus dibuka dan dibiarkan lepas dan ember

diautoklaf.

Kebakaran, banjir dan bencana alam

Pemadam kebakaran dan layanan lainnya harus dilibatkan dalam pengembangan rencana

darurat. Mereka harus diberitahu sebelumnya kamar mana yang mengandung bahan yang

berpotensi menular. Sangat bermanfaat untuk mengatur ini layanan untuk mengunjungi

laboratorium untuk mengenal tata letak dan isinya jika memungkinkan.

Setelah banjir atau bencana alam lainnya (termasuk gempa bumi), layanan darurat lokal atau

nasional harus diperingatkan tentang potensi bahaya di dalam dan/atau di dekat gedung

laboratorium. Mereka harus masuk saja bila didampingi oleh pekerja laboratorium terlatih.

Kultur dan bahan infeksius harus dikumpulkan dalam kotak anti bocor atau tas sekali pakai

yang kuat. Penyelamatan atau pembuangan akhir harus ditentukan oleh keselamatan staf

berdasarkan pengetahuan lokal.

Vandalisme

Vandalisme biasanya selektif (misalnya ditujukan pada rumah hewan). Pertahanan yang cocok

adalah pintu yang kuat dan berat, kunci yang baik dan entri terbatas. Jendela yang disaring dan

alarm penyusup diinginkan. Tindakan setelah vandalisme sama dengan keadaan darurat

lainnya.

Layanan darurat: siapa yang harus dihubungi

Nomor telepon dan alamat berikut ini harus ditampilkan dengan jelas di dekat semua:
telepon:

– institusi atau laboratorium itu sendiri (alamat dan lokasi mungkin tidak diketahui secara rinci

oleh penelepon atau layanan yang disebut)

– direktur institusi atau laboratorium

– pengawas laboratorium

– petugas keamanan hayati

– layanan kebakaran

– layanan rumah sakit/ambulans (jika rumah sakit tertentu telah mengatur untuk menerima

korban, misalnya berisiko tinggi personel, nama masing-masing departemen dan dokter)

- polisi

– petugas medis

– teknisi yang bertanggung jawab

- layanan air, gas dan listrik.

Peralatan darurat

Peralatan darurat berikut harus tersedia:

– kotak P3K, termasuk penangkal universal dan khusus

– tandu

– alat pemadam kebakaran yang sesuai, selimut api Berikut ini juga disarankan tetapi dapat

bervariasi sesuai dengan keadaan lokal:

– pakaian pelindung lengkap (baju satu potong, sarung tangan dan penutup kepala – untuk

insiden yang melibatkan mikroorganisme dalam Kelompok Risiko 3 dan 4)

– respirator wajah penuh dengan tabung filter bahan kimia dan partikulat yang sesuai

– peralatan desinfeksi ruangan, mis. semprotan dan alat penguap formaldehida

- alat, mis. palu, kapak, kunci pas, obeng, tangga, tali

– peralatan dan pemberitahuan demarkasi area bahaya.

Untuk informasi lebih lanjut lihat referensi 12 dan 28

14. Desinfeksi dan sterilisasi

Pengetahuan dasar tentang desinfeksi dan sterilisasi sangat penting untuk keamanan hayati di

laboratorium.

Sejak berat barang-barang kotor tidak dapat segera didesinfeksi atau disterilkan secara efisien,

sama pentingnya untuk dipahami dasar-dasar pra-pembersihan. Dalam hal ini, prinsip umum

berikut berlaku untuk semua yang diketahui: kelas patogen mikroba, dengan pengecualian

prion, yang dibahas secara terpisah dalam Bab ini. Persyaratan khusus untuk dekontaminasi

untuk keamanan hayati akan tergantung pada jenis eksperimen pekerjaan dan sifat agen

infeksius yang ditangani. Oleh karena itu, perlu menggunakan informasi umum yang diberikan

di sini untuk mengembangkan prosedur yang lebih spesifik dan standar agar sesuai dengan

kebutuhan berbagai tingkat biohazard yang terlibat dalam laboratorium tertentu.

Pra-pembersihan dan pembersihan bahan laboratorium

Dalam istilah praktis, pembersihan adalah menghilangkan kotoran dan noda yang terlihat. Hal

ini umumnya dicapai baik oleh (a) menyikat, menyedot debu atau mengeringkan debu; atau (b)

mencuci atau mengepel basah dengan air yang mengandung sabun atau deterjen. Dimana risiko

kontak manusia atau hewan dengan bahan yang terkontaminasi patogen tinggi dan

dekontaminasi berikutnya diperlukan, pembersihan awal dilakukan secara rutin. Ini perlu

karena kotoran dan tanah dapat melindungi mikroorganisme dan juga dapat mengganggu aksi

pembunuhan bahan kimia pembasmi kuman. Dalam kasus seperti itu, pembersihan awal sangat

penting untuk mencapai desinfeksi atau sterilisasi yang tepat. Juga, banyak produk kuman

mengklaim aktivitas hanya pada item yang telah dibersihkan sebelumnya. Pembersihan awal

harus dilakukan dengan hati-hati untuk menghindari paparan agen infeksi, dan bahan kimia

yang kompatibel dengan germisida untuk diterapkan nanti harus digunakan. Sangat umum
untuk menggunakan bahan kimia pembasmi kuman yang sama untuk pra-pembersihan dan

desinfeksi.

Pembasmi kuman kimia

Banyak jenis bahan kimia yang dapat digunakan sebagai desinfektan dan antiseptik dan

jumlahnya terus meningkat jumlah dan variasi produk komersial. Oleh karena itu, formulasi

harus dipilih dengan cermat untuk kebutuhan khusus, dan disimpan, digunakan dan dibuang

seperti yang diarahkan oleh produsen. Aktivitas kuman

banyak bahan kimia lebih cepat dan lebih baik pada suhu yang lebih tinggi. Pada saat yang

sama, suhu yang lebih tinggi dapat mempercepat penguapan mereka dan juga menurunkan

mereka lebih cepat. Perhatian khusus diperlukan dalam penggunaan dan

penyimpanan bahan kimia tersebut di daerah tropis, di mana umur simpannya dapat dikurangi

karena tingginya suhu lingkungan. Banyak germisida dapat berbahaya bagi manusia dan

lingkungan. Oleh karena itu, mereka harus dipilih, ditangani dan dibuang dengan hati-hati.

Untuk keselamatan pribadi, sarung tangan, celemek dan pelindung mata adalah

direkomendasikan saat menyiapkan pengenceran bahan kimia pembasmi kuman. Karena itu,

pembasmi kuman kimia tidak diperlukan untuk pembersihan lantai, dinding, peralatan dan

perabotan secara teratur dan umum kecuali dalam hal:

pengendalian wabah. Kelas germisida kimia yang umum digunakan dijelaskan di bawah ini,

dengan informasi umum tentang aplikasi dan profil keamanan. Kecuali dinyatakan lain,

konsentrasi germisida diberikan dalam berat/volume (b/v). Tabel 10 merangkum pengenceran

yang direkomendasikan dari senyawa pelepas klorin.

Klorin (natrium hipoklorit)

Klorin, oksidan yang bekerja cepat, adalah bahan pembasmi kuman yang tersedia secara luas

dan berspektrum luas. Biasanya dijual sebagai pemutih, larutan encer natrium hipoklorit

(NaOCl), yang dapat diencerkan dengan air untuk menghasilkan:

berbagai konsentrasi klorin yang tersedia. Klorin, terutama sebagai pemutih, bersifat sangat

basa dan dapat korosif terhadap logam. Aktivitasnya adalah sangat berkurang oleh bahan

organik (protein). Penyimpanan stok atau larutan pemutih yang berfungsi di tempat terbuka

wadah, terutama pada suhu tinggi, melepaskan gas klorin sehingga melemahkan kumannya

potensi. Frekuensi perubahan larutan pemutih yang bekerja tergantung pada kekuatan awal,

jenis (misalnya dengan atau tanpa penutup) dan ukuran wadahnya, frekuensi dan sifatnya

penggunaan, dan kondisi lingkungan. Sebagai panduan umum, solusi menerima bahan dengan

tingkat tinggi bahan organik beberapa kali sehari harus diganti setidaknya setiap hari,

sedangkan yang jarang digunakan

dapat berlangsung selama seminggu. Disinfektan laboratorium serba guna umum harus

memiliki konsentrasi 1 g/l klorin yang tersedia. SEBUAH larutan yang lebih kuat, mengandung

5 g/l klorin yang tersedia direkomendasikan untuk menangani biohazardous tumpahan dan di

hadapan sejumlah besar bahan organik. Natrium hipoklorit mengandung 5 g/l klorin yang

tersedia direkomendasikan sebagai disinfektan pilihan dalam situasi darurat yang melibatkan

virus seperti Hantavirus, dan Lassa dan virus Ebola. Larutan natrium hipoklorit, sebagai
pemutih rumah tangga, mengandung 50 g/l klorin yang tersedia dan harus oleh karena itu

diencerkan 1:50 atau 1:10 untuk mendapatkan konsentrasi akhir masing-masing 1 g/l dan 5 g/l.

Industri

larutan pemutih memiliki konsentrasi natrium hipoklorit hampir 120 g/l dan harus diencerkan

sesuai untuk mendapatkan tingkat yang ditunjukkan di atas.

Butiran atau tablet kalsium hipoklorit (Ca(ClO)2) umumnya mengandung sekitar 70% klorin

yang tersedia. Larutan yang dibuat dengan granul atau tablet, yang mengandung 1,4 g/l dan 7,0

g/l, kemudian akan mengandung 1,0 g/l dan 5 g/l klorin yang tersedia, masing-masing. Pemutih

tidak dianjurkan sebagai antiseptik, tetapi dapat digunakan sebagai desinfektan umum dan

untuk merendam bahan bebas logam yang terkontaminasi. Dalam keadaan darurat, pemutih

juga dapat digunakan untuk mendisinfeksi air untuk minum dengan konsentrasi akhir 1–2 mg/l

klorin yang tersedia. Catatan. Gas klorin sangat beracun. Oleh karena itu, pemutih harus

disimpan dan digunakan hanya di area yang berventilasi baik. Juga, pemutih tidak boleh

dicampur dengan asam untuk menghindari pelepasan gas klorin yang cepat. Banyak produk

samping klorin yang dapat berbahaya bagi manusia dan lingkungan, sehingga penggunaan

yang sembarangan desinfektan berbasis klorin, dan khususnya pemutih, harus dihindari.

Natrium dikloroisosianurat

Sodium dichloroisocyanurate (NaDCC) dalam bentuk bubuk mengandung 60% klorin yang

tersedia. Solusi disiapkan dengan bubuk NaDCC pada 1,7 g/l dan 8,5 g/l akan mengandung 1

g/l atau 5 g/l klorin yang tersedia, masing-masing. Tablet NaDCC umumnya mengandung

setara dengan 1,5 g klorin yang tersedia per tablet. Satu atau empat tablet yang dilarutkan dalam

1 liter air akan memberikan konsentrasi yang dibutuhkan 1 g/l atau 5 g/l, masing-masing.

NaDCC dalam bentuk bubuk atau tablet mudah dan aman disimpan. NaDCC padat dapat

diterapkan pada tumpahan darah atau cairan berbahaya lainnya dan dibiarkan setidaknya 10
menit sebelum dipindahkan. Pembersihan lebih lanjut daerah yang terkena kemudian dapat

terjadi.

Kloramin

Kloramin tersedia dalam bentuk bubuk yang mengandung sekitar 25% klorin yang tersedia.

pelepasan kloramin klorin pada tingkat yang lebih lambat daripada hipoklorit. Oleh karena itu,

konsentrasi awal yang lebih tinggi diperlukan untuk efisiensi yang setara dengan hipoklorit. Di

sisi lain, larutan kloramin tidak tidak aktif oleh bahan organik pada tingkat yang sama seperti

larutan hipoklorit, dan konsentrasi 20 g/l

direkomendasikan untuk situasi "bersih" dan "kotor". Larutan kloramin hampir bebas bau.

Namun, item yang direndam di dalamnya harus benar-benar dibilas untuk menghilangkan

residu bahan pengumpul yang ditambahkan ke kloramin-T (natrium tosilkloramida) bubuk.

Kloramin juga dapat digunakan untuk mendisinfeksi air minum bila digunakan pada

konsentrasi akhir dari 1-2 mg/l klorin yang tersedia.

Klorin dioksida

Klorin dioksida adalah pembasmi kuman yang kuat dan bekerja cepat, sering dilaporkan aktif

pada tingkat yang lebih rendah dari yang dibutuhkan oleh klorin sebagai pemutih. Untuk

mendapatkan larutan aktif untuk penggunaan laboratorium, umumnya:

diperlukan untuk mencampur dua komponen terpisah, asam klorida (HCl) dan natrium klorit

(NaClO 2). Stabilitas dapat menjadi masalah penting dengan pembasmi kuman ini, dan

kompatibilitas bahan dan korosif juga harus dipertimbangkan ketika memilih produk

berdasarkan itu.

Formaldehida

Formaldehida (HCHO) adalah gas yang membunuh semua mikroorganisme dan sporanya,

pada suhu di atas 20 °C. Formaldehida tidak aktif terhadap prion. Ini bekerja relatif lambat dan
membutuhkan kelembaban relatif tingkat sekitar 70%. Ini dipasarkan sebagai polimer padat,

paraformaldehyde, dalam bentuk serpihan atau tablet, atau sebagai: formalin, larutan gas dalam

air sekitar 370 g/l (37%), mengandung metanol (100 ml/l) sebagai stabilisator. Kedua formulasi

dipanaskan untuk membebaskan gas, yang digunakan untuk dekontaminasi dan desinfeksi

volume tertutup seperti lemari dan ruangan pengaman (lihat bagian tentang Lingkungan lokal

dekontaminasi, di bawah). Formaldehida (5% formalin dalam air) dapat digunakan sebagai

disinfektan cair. Catatan. Formaldehida adalah karsinogen yang dicurigai. Ini memiliki bau

yang menyengat dan asapnya dapat mengiritasi mata dan selaput lendir. Oleh karena itu harus

disimpan dan digunakan di lemari asam atau area yang berventilasi baik.

Peraturan yang berlaku tentang keamanan bahan kimia harus dikonsultasikan sebelum

digunakan.

Glutaraldehida

Seperti formaldehida, glutaraldehid (OHC(CH .)2)3CHO) juga aktif terhadap bakteri vegetatif,

spora, jamur dan virus yang mengandung lipid dan nonlipid. Ini tidak korosif dan bertindak

lebih cepat daripada formaldehida. Namun, dibutuhkan beberapa jam untuk membunuh spora

bakteri. Hal ini umumnya diberikan sebagai solusi dengan

konsentrasi sekitar 20 g/l (2%) dan sebagian besar produk perlu "diaktifkan" (dibuat basa)

sebelum digunakan dengan penambahan senyawa bikarbonat yang disertakan dengan produk.

Solusi yang diaktifkan dapat berupa digunakan kembali selama 1-4 minggu tergantung pada

formulasi dan jenis serta frekuensi penggunaannya. Dipstick disediakan dengan beberapa

produk hanya memberikan indikasi kasar tingkat glutaraldehida aktif yang tersedia di solusi

yang sedang digunakan. Larutan glutaraldehid harus dibuang jika menjadi keruh. Catatan.

Glutaraldehida beracun dan mengiritasi kulit dan selaput lendir, dan kontak dengannya harus
dihindari. Itu harus digunakan di lemari asam atau di area yang berventilasi baik. Tidak

disarankan sebagai semprotan atau solusi untuk dekontaminasi permukaan lingkungan.

Peraturan yang berlaku tentang keamanan bahan kimia harus dikonsultasikan sebelum

digunakan.

Senyawa fenol

Senyawa fenolik, sekelompok besar agen, termasuk di antara germisida paling awal. Namun,

hasil darimasalah keamanan yang lebih baru membatasi penggunaannya. Mereka aktif

melawan bakteri vegetatif dan virus yang mengandung lipid dan, ketika diformulasikan dengan

benar, juga menunjukkan aktivitas melawan mikobakteri. Mereka tidak aktif terhadap spora

dan aktivitasnya terhadap virus nonlipid bervariasi. Banyak produk fenolik adalah digunakan

untuk dekontaminasi permukaan lingkungan, dan beberapa (misalnya triclosan dan

chloroxylenol) antara antiseptik yang lebih umum digunakan.

Triclosan umum dalam produk untuk mencuci tangan. Ini aktif terutama terhadap bakteri

vegetatif dan aman untuk kulit dan selaput lendir. Namun, dalam penelitian berbasis

laboratorium, bakteri dibuat resisten terhadap konsentrasi triclosan yang rendah juga

menunjukkan resistensi terhadap jenis antibiotik tertentu. Pentingnya ini

temuan di lapangan masih belum diketahui.

Catatan. Senyawa fenolik tidak direkomendasikan untuk digunakan pada permukaan kontak

makanan dan di area dengan anak muda. Mereka dapat diserap oleh karet dan juga dapat

menembus kulit.

Senyawa amonium kuarterner

Banyak jenis senyawa amonium kuaterner digunakan sebagai campuran dan sering

dikombinasikan dengan germisida lainnya, seperti alkohol. Mereka memiliki aktivitas yang

baik terhadap bakteri vegetatif dan virus yang mengandung lipid. Jenis tertentu (misalnya

benzalkonium klorida) digunakan sebagai antiseptik. Catatan. Aktivitas kuman dari beberapa
jenis senyawa amonium kuaterner sangat dikurangi oleh bahan organik, kesadahan air dan

deterjen anionik. Oleh karena itu diperlukan kehati-hatian dalam memilih agen untuk

pembersihan awal ketika senyawa amonium kuaterner akan digunakan untuk desinfeksi.

Bakteri yang berpotensi berbahaya dapat tumbuh dalam larutan senyawa amonium kuaterner.

Karena rendah biodegradabilitas, senyawa ini juga dapat terakumulasi di lingkungan.

alkohol

Etanol (etil alkohol, C 2 H 5OH) dan 2-propanol (isopropil alkohol, (CH 3)2CHOH) memiliki

kesamaan sifat desinfektan. Mereka aktif melawan bakteri vegetatif, jamur dan virus yang

mengandung lipid tetapi tidak terhadap spora. Tindakan mereka pada virus nonlipid bervariasi.

Untuk efektivitas tertinggi mereka harus digunakan pada konsentrasi sekitar 70% (v/v) dalam

air: konsentrasi yang lebih tinggi atau lebih rendah mungkin tidak yg menghapus kuman

penyakit. Keuntungan utama larutan alkohol dalam air adalah tidak meninggalkan residu pada

barang yang dirawat.

Campuran dengan agen lain lebih efektif daripada alkohol saja, mis. 70% (v/v) alkohol dengan

100 g/l formaldehida, dan alkohol yang mengandung 2 g/l klorin yang tersedia. Sebuah 70%

(v/v) larutan etanol dapat digunakan pada kulit, permukaan kerja bangku laboratorium dan

lemari biosafety, dan untuk berendam kecil potongan instrumen bedah. Waktu kontak pada

kulit tidak boleh kurang dari 10 detik dan pada permukaan lingkungan tidak kurang dari 3

menit. Karena etanol dapat mengeringkan kulit, sering dicampur dengan emolien. Pembersih

tangan berbahan dasar alkohol direkomendasikan untuk dekontaminasi tangan yang sedikit

kotor di

situasi di mana mencuci tangan yang benar tidak nyaman atau tidak mungkin. Namun, harus

diingat bahwa etanol tidak efektif melawan spora dan mungkin tidak membunuh semua jenis

virus nonlipid.
Catatan. Alkohol mudah menguap dan mudah terbakar dan tidak boleh digunakan di dekat api

terbuka. Solusi kerja harus disimpan dalam wadah yang tepat untuk menghindari penguapan

alkohol. Alkohol dapat mengeraskan karet

dan melarutkan jenis lem tertentu. Inventarisasi dan penyimpanan etanol yang tepat di

laboratorium sangat

penting untuk menghindari penggunaannya untuk tujuan selain desinfeksi. Ketersediaan dan

penggunaan etanol dalam daerah tertentu mungkin dibatasi karena alasan agama. Botol dengan

larutan yang mengandung alkohol harus diberi label dengan jelas untuk menghindari autoklaf

yang tidak disengaja.

Yodium dan iodofor

Tindakan disinfektan ini mirip dengan klorin, meskipun mungkin sedikit terhambat

oleh bahan organik. Yodium dapat menodai kain dan permukaan lingkungan dan umumnya

tidak cocok untuk digunakan sebagai desinfektan. Di sisi lain, iodofor dan tincture yodium

adalah antiseptik yang baik. Polyvidone iodine adalah scrub bedah dan antiseptik kulit pra

operasi yang andal dan aman. Antiseptik berdasarkan yodium

umumnya tidak cocok untuk digunakan pada perangkat medis/gigi. Yodium tidak boleh

digunakan pada aluminium atau tembaga.

Catatan. Yodium bisa menjadi racun. Produk berbasis yodium organik harus disimpan pada

suhu 4–10 °C untuk menghindari pertumbuhann bakteri yang berpotensi berbahaya di

dalamnya.

Hidrogen peroksida dan perasam

Seperti klorin, hidrogen peroksida (H 2 HAI 2) dan peracid adalah oksidan kuat dan dapat

menjadi germisida spektrum luas yang kuat. Mereka juga lebih aman daripada klorin bagi

manusia dan lingkungan. Hidrogen peroksida disuplai baik sebagai larutan 3% siap pakai atau

sebagai larutan berair 30% untuk diencerkan hingga 5-10 kali volumenya dengan air steril.

Namun, larutan hidrogen 3–6% seperti itu peroksida saja relatif lambat dan terbatas sebagai

germisida. Produk yang sekarang tersedia memiliki yang lain bahan untuk menstabilkan

kandungan hidrogen peroksida, untuk mempercepat tindakan kuman dan membuatnya kurang

korosif. Hidrogen peroksida dapat digunakan untuk dekontaminasi permukaan kerja bangku

laboratorium dan

lemari biosafety, dan solusi yang lebih kuat mungkin cocok untuk mendisinfeksi medis/gigi

yang peka terhadap panas perangkat. Penggunaan hidrogen peroksida yang diuapkan atau asam

perasetat (CH 3COOOH) untuk dekontaminasi perangkat medis/bedah yang peka terhadap

panas memerlukan peralatan khusus.

Catatan. Hidrogen peroksida dan perasam dapat bersifat korosif terhadap logam seperti

aluminium, tembaga, kuningan, dan seng, dan juga dapat menghilangkan warna kain, rambut,

kulit dan selaput lendir. Artikel diperlakukan dengan mereka harus dibilas secara menyeluruh

sebelum kontak dengan mata dan selaput lendir. Mereka harus selalu disimpan jauh dari panas

dan terlindung dari cahaya.

Dekontaminasi lingkungan lokal

Dekontaminasi ruang laboratorium, perabotan dan peralatannya memerlukan kombinasi cairan

dan desinfektan gas. Permukaan dapat didekontaminasi menggunakan larutan natrium

hipoklorit (NaOCl); larutan yang mengandung 1 g/l klorin yang tersedia mungkin cocok untuk

lingkungan umum sanitasi, tetapi solusi yang lebih kuat (5 g/l) direkomendasikan ketika

berhadapan dengan situasi berisiko tinggi. Untuk dekontaminasi lingkungan, larutan yang
diformulasikan mengandung 3% hidrogen peroksida (H 2 HAI 2) membuat pengganti yang

cocok untuk larutan pemutih.

Kamar dan peralatan dapat didekontaminasi dengan fumigasi dengan gas formaldehida yang

dihasilkan oleh: pemanasan paraformaldehida atau formalin mendidih. Semua bukaan di dalam

ruangan (yaitu jendela, pintu, dll.) harus disegel dengan selotip atau sejenisnya sebelum gas

dihasilkan. Fumigasi harus dilakukan di suhu lingkungan minimal 21 °C dan kelembaban

relatif 70%. (Lihat juga bagian tentang Dekontaminasi lemari pengaman biologis, di bawah.)

Gas harus bersentuhan dengan permukaan yang akan didekontaminasi setidaknya selama 8

jam. Setelah fumigasi area tersebut harus berventilasi secara menyeluruh sebelum personel

diizinkan masuk. Respirator yang sesuai harus dipakai oleh siapa pun yang memasuki ruangan

sebelum diberi ventilasi. Amonium gas bikarbonat dapat digunakan untuk menetralkan

formaldehida.

Fumigasi ruang dengan uap larutan hidrogen peroksida telah dilaporkan tetapi membutuhkan:

pelajaran lanjutan. Catatan. Formaldehida adalah gas berbahaya dan mengiritasi dan diduga

karsinogen. Respirator wajah penuh dengan pasokan udara mungkin diperlukan. Aturan "dua

orang" harus diterapkan.

Dekontaminasi lemari pengaman biologis

Untuk mendekontaminasi lemari Kelas I dan Kelas II, jumlah paraformaldehida yang sesuai

(akhir) konsentrasi paraformaldehida 0,8% di udara) harus ditempatkan di atas hot plate listrik

atau penggorengan (dikendalikan dari luar kabinet). Piring panas kedua atau wajan

penggorengan yang mengandung 10% lebih banyak amonium

bikarbonat dari paraformaldehyde (dengan kontrol di luar kabinet) juga ditempatkan di dalam

kabinet. Wajan kedua ini harus memiliki penutup di atasnya yang dapat dilepas dari jarak jauh

(mis., dilekatkan pada tali yang: dapat ditarik dari luar kabinet). Ini akan meminimalkan

netralisasi dini formaldehida gas. Jika kelembaban relatif di bawah 70%, wadah terbuka berisi
air panas juga harus ditempatkan di dalam kabinet sebelum penutup depan disegel di tempatnya

dengan selotip yang kuat (mis., "lakban"). Jika tidak ada bagian depan penutupan, terpal plastik

pengukur berat direkatkan di bagian depan untuk memastikan bahwa gas tidak dapat meresap

ke dalam ruangan.

Sakelar untuk panci paraformaldehida dihidupkan, lalu mati 1 jam kemudian, atau ketika

paraformaldehyde semuanya telah menguap. Kabinet dibiarkan tidak terganggu dalam

semalam. Panci kedua diputar pada setelah penutup dilepas dan amonium bikarbonat dibiarkan

menguap. Pada saat itu, panci dimatikan dan kabinet dihidupkan dan dibiarkan mengalirkan

gas amonium bikarbonat selama 1 jam. Penutup depan (atau terpal plastik) kemudian dapat

dilepas dan kabinet digunakan.

Cuci tangan/dekontaminasi tangan

Bila memungkinkan, sarung tangan yang sesuai harus dipakai saat menangani bahan

biohazardous. Namun, ini tidak menggantikan kebutuhan akan cuci tangan yang teratur dan

benar oleh personel laboratorium. Tangan harus dicuci setelah menangani bahan dan hewan

berbahaya, dan menggunakan toilet, dan sebelum pergi laboratorium, dan makan. Dalam

kebanyakan situasi, mencuci tangan secara menyeluruh dengan sabun dan air biasa sudah

cukup untuk dekontaminasi mereka, tetapi penggunaan sabun kuman dianjurkan dalam situasi

berisiko tinggi. Tangan harus benar-benar disabuni dengan sabun, menggunakan gesekan,

setidaknya selama 10 detik, dibilas dengan air bersih dan dikeringkan menggunakan kertas atau

handuk kain bersih (jika tersedia, pengering tangan dengan udara hangat juga disarankan).
Faucet yang dioperasikan dengan kaki atau siku direkomendasikan. Jika tidak dipasang,

handuk kertas/kain harus

digunakan untuk mematikan gagang keran untuk mengindari kontaminasi ulang pada tangan

yang telah dicuci. Seperti disebutkan di atas, pembersih tangan berbahan dasar alkohol harus

digunakan untuk mendekontaminasi tangan yang sedikit kotor

ketika cuci tangan yang tepat tidak tersedia atau tidak nyaman.

Desinfeksi panas dan sterilisasi

Panas adalah yang paling umum di antara agen fisik yang digunakan untuk dekontaminasi

patogen. "Kering" panas, yang benar-benar non-korosif, digunakan untuk memproses banyak

item peralatan laboratorium yang dapat tahan suhu 160 °C atau lebih tinggi selama 2-4 jam.

Pembakaran atau pembakaran (lihat di bawah) juga merupakan bentuk dari panas kering. Panas

"lembab" paling efektif bila digunakan dalam bentuk autoklaf. Perebusan tidak serta merta

membunuh semua mikroorganisme dan/atau patogen, tetapi dapat digunakan sebagai

pemrosesan minimum untuk disinfeksi di mana metode lain (disinfeksi atau dekontaminasi

kimia, autoklaf) tidak berlaku atau tersedia. Barang-barang yang disterilkan harus ditangani

dan disimpan sedemikian rupa sehingga tetap tidak terkontaminasi sampai digunakan.

Autoklaf

Uap jenuh di bawah tekanan (autoklaf) adalah cara sterilisasi yang paling efektif dan andal

bahan laboratorium. Untuk sebagian besar tujuan, siklus berikut akan memastikan sterilisasi

muatan yang benar

autoklaf:

Autoklaf perpindahan gravitasi. Gambar 7 menunjukkan konstruksi umum perpindahan

gravitasi autoklaf. Uap memasuki ruangan di bawah tekanan dan memindahkan udara yang
lebih berat ke bawah dan melalui katup di saluran pembuangan, dilengkapi dengan filter HEPA.

Autoklaf pra-vakum. Mesin ini memungkinkan pembuangan udara dari ruang sebelum uap

keluar diakui. Udara buangan dievakuasi melalui katup yang dilengkapi dengan filter HEPA.

Di akhir siklus, uap secara otomatis habis. Autoklaf ini dapat beroperasi pada 134 °C dan siklus

sterilisasi karena itu dapat dikurangi menjadi 3 menit. Mereka ideal untuk beban berpori, tetapi

tidak dapat digunakan untuk memproses cairan karena vakum. Autoclave penanak tekanan

yang dipanaskan dengan bahan bakar. Ini harus digunakan hanya jika autoklaf perpindahan

gravitasi

tidak tersedia. Mereka dimuat dari atas dan dipanaskan oleh gas, listrik atau jenis bahan bakar

lainnya. Uap dihasilkan dengan memanaskan air di dasar kapal dan udara dipindahkan ke atas

melalui ventilasi bantuan. Ketika semua udara telah dikeluarkan, katup pada ventilasi pelepas

ditutup dan panas berkurang. Itu tekanan dan suhu naik sampai katup pengaman beroperasi

pada tingkat yang telah ditentukan. Ini adalah awal dari memegang waktu. Pada akhir siklus,

panas dimatikan dan suhu dibiarkan turun hingga 80 °C atau bawah sebelum tutupnya dibuka.
Tindakan pencegahan dalam penggunaan autoklaf

Aturan berikut dapat meminimalkan bahaya yang melekat pada pengoperasian kapal

bertekanan.

1. Tanggung jawab untuk operasi dan perawatan rutin harus diberikan kepada individu yang

terlatih dan a program pemeliharaan preventif harus mencakup pemeriksaan ruangan secara

teratur, segel pintu dan semua alat pengukur dan kontrol oleh personel yang berkualifikasi.

2. Uap harus jenuh dan bebas dari penghambat korosi atau bahan kimia lainnya, yang dapat

mengotori barang yang disterilkan.

3. Semua bahan yang akan diautoklaf harus dalam wadah yang memungkinkan pembuangan

udara dan memungkinkan baik penetrasi panas; ruang tidak boleh padat atau uap tidak akan

mencapai beban secara merata.

4. Untuk otoklaf tanpa alat pengaman yang saling mengunci yang mencegah pintu terbuka saat

ruang bertekanan, katup uap utama harus ditutup dan suhu dibiarkan turun di bawah 80 °C

sebelum pintu dibuka.

5. Operator harus mengenakan sarung tangan dan pelindung mata yang sesuai untuk

perlindungan saat membuka autoklaf, bahkan ketika suhu turun di bawah 80 °C.

6. Dalam setiap pemantauan rutin kinerja autoklaf, indikator biologis atau termokopel harus:

ditempatkan di tengah setiap beban. Pemantauan rutin dengan termokopel dan alat perekam di

a beban "kasus terburuk" sangat diinginkan untuk menentukan siklus operasi yang tepat.

7. Filter saringan saluran pembuangan (jika tersedia) harus dilepas dan dibersihkan setiap hari.

8. Perawatan harus dilakukan untuk memastikan bahwa katup pelepas otoklaf pressure cooker

tidak menjadi diblokir oleh kertas, dll. dalam beban

Pembakaran

Pembakaran berguna untuk pembuangan bangkai hewan serta limbah anatomi dan

laboratorium lainnya dengan atau tanpa dekontaminasi sebelumnya (lihat bagian bahan yang

terkontaminasi (menular) untuk dibuang di Bagian 3). Insinerasi bahan infeksius merupakan

alternatif untuk autoklaf hanya jika insineratornya:

di bawah kendali laboratorium, dan dilengkapi dengan sarana kontrol suhu yang efisien dan a

ruang bakar sekunder. Banyak insinerator, terutama yang memiliki ruang bakar tunggal, tidak

memuaskan untuk ditangani dengan bahan infeksius, bangkai hewan dan plastik. Bahan-bahan

seperti itu mungkin tidak sepenuhnya hancur dan limbah dari cerobong asap dapat mencemari

atmosfer dengan mikroorganisme, bahan kimia beracun dan merokok. Namun, ada banyak

konfigurasi yang memuaskan untuk ruang bakar. Idealnya suhu di ruang utama harus

setidaknya 800 °C dan di ruang sekunder setidaknya 1000 °C. Bahan untuk insinerasi, bahkan

dengan dekontaminasi sebelumnya, harus diangkut ke: insinerator dalam kantong, lebih disukai

plastik. Petugas insinerator harus menerima instruksi yang tepat tentang pemuatan dan kontrol

suhu. Perlu juga dicatat bahwa pengoperasian insinerator yang efisien sangat tergantung pada

campuran bahan yang tepat dalam limbah yang diolah. Ada kekhawatiran yang sedang

berlangsung mengenai kemungkinan dampak negatif lingkungan dari yang ada atau insinerator
yang diusulkan, dan upaya terus membuat insinerator lebih ramah lingkungan dan hemat

energi.

Pembuangan

Pembuangan limbah laboratorium dan medis tunduk pada berbagai regional, nasional dan

internasional peraturan dan versi terbaru dari dokumen yang relevan tersebut harus

dikonsultasikan sebelum merancang dan melaksanakan program penanganan, pengangkutan,

dan pembuangan limbah biohazard. Secara umum, abu dari insinerator dapat ditangani sebagai

limbah domestik biasa dan dibuang oleh pihak berwenang setempat. Limbah yang diautoklaf

dapat dibuang dengan pembakaran di luar lokasi atau di lokasi TPA berlisensi (lihat bagian

tentang Bahan yang terkontaminasi (menular) untuk dibuang di Bab 3).

Dekontaminasi bahan yang mengandung prion

Prion, juga disebut sebagai agen infeksi "tidak konvensional" atau "agen spongiform menular

ensefalopati”, diyakini hanya mengandung protein. Seperti disebutkan sebelumnya, mereka

dapat menyebabkan Penyakit Creutzfeldt-Jakob pada manusia, scrapie pada domba, bovine

spongiform encephalopathy pada sapi, dll.

Agen infeksius ini sangat resisten terhadap inaktivasi oleh sebagian besar agen fisik dan kimia

dan bahan yang diduga mengandung bahan tersebut memerlukan pemrosesan khusus sebelum

digunakan kembali atau dibuang. Sampai saat ini, data yang tersedia menunjukkan bahwa prion

dapat dinonaktifkan dengan larutan 2 mol/l natrium

hidroksida (NaOH) yang mengandung 4,0 mol/l guanidinium hidroklorida (HNC(NH .)

2)2.HCl) atau guanidinium isosianat (HNC(NH .) 2) 2.HNCO) dan natrium hipoklorit (NaOCl)

(> 2% klorin tersedia) diikuti oleh autoklaf uap pada 132 °C selama 4,5 jam.

Insinerasi juga merupakan cara yang efektif untuk menangani bahan yang terkontaminasi prion

(lihat bagian tentang Tindakan pencegahan dengan bahan yang mungkin mengandung agen

"tidak konvensional" di Bab 10).

Ringkasan

Penggunaan bahan kimia pembasmi kuman dan autoklaf yang tepat akan berkontribusi pada

keselamatan tempat kerja sekaligus mengurangi risiko dari agen infeksi. Sedapat mungkin,

jumlah bahan kimia pembasmi kuman yang akan digunakan haru terbatas, tidak hanya karena

alasan ekonomi dan pengendalian persediaan yang lebih baik, tetapi juga untuk menghindari

pemuatan barang lingkungan dengan bahan kimia yang berpotensi berbahaya. Ada banyak

upaya yang sedang dilakukan untuk menonaktifkan cara kimia dan fisik mikroorganisme di

laboratorium lebih baik dan lebih aman, dengan bentuk sterilisasi yang lebih baru dan inovatif

formulasi germisida kimia. Pada saat yang sama, metode yang lebih baik untuk menguji dan

memvalidas klaim produk yang dijual untuk dekontaminasi mikroba sedang dikembangkan.

Oleh karena itu penting bahwa laboratorium yang merancang dan prosedur keamanan hayati

yang akan digunakan di dalamnya mengacu pada versi terbaru dari: standar dan pedoman

nasional/internasional dalam hal ini.

Untuk informasi lebih lanjut lihat referensi 13 dan 29-40.

BAGIAN IV

Keamanan kimia, kebakaran, dan listrik

Bahan kimia berbahaya

Pekerja di laboratorium mikrobiologi terpapar bahaya kimia serta patogen

mikroorganisme. Oleh karena itu, sangat penting bagi mereka untuk memiliki pengetahuan

yang tepat tentang efek toksik dari bahan-bahan tersebut bahan kimia, rute paparan, dan bahaya

yang mungkin terkait dengan penanganan dan penyimpanan. Lembar data keamanan bahan

(MSDS), yang menggambarkan bahaya yang terkait dengan penggunaan a bahan kimia

tertentu, tersedia dari pabrikan, dan harus tersedia di laboratorium di mana: bahan kimia ini

digunakan, mis. sebagai bagian dari keselamatan atau manual operasi.

Definisi dan klasifikasi

Bahan kimia berbahaya sering didefinisikan dan diklasifikasikan menurut peraturan yang

tertulis untuk pengangkutan

barang berbahaya atau berdasarkan bahaya dan tingkat bahaya yang ditimbulkannya. Mereka

mungkin terdaftar oleh mereka

tingkat reaktivitas, ketidakstabilan, kebakaran atau bahaya kesehatan atau oleh efek toksik.

Penyimpanan bahan kimia

Hanya jumlah minimum bahan kimia yang tercantum di bawah ini yang harus disimpan di

laboratorium untuk penggunaan sehari-hari. Stok curah harus disimpan di ruangan atau

bangunan yang ditunjuk khusus, yang harus memiliki lantai beton dengan kusen di ambang

pintu untuk menahan tumpahan. Zat yang mudah terbakar harus disimpan secara terpisah di

gedung-gedung yang: adalah beberapa jarak dari yang lain. Untuk menghindari pengapian uap

yang mudah terbakar dan meledak oleh percikan

kontak listrik, sakelar lampu untuk toko ini harus berada di luar gedung dan lampu

sendiri harus di sekat. Bahan kimia tidak boleh disimpan dalam urutan abjad. Jika tidak, bahan

kimia yang tidak kompatibel (lihat bawah) mungkin berada di dekat dan beberapa bahan kimia

berbahaya mungkin berada di rak yang tinggi. Semua besar

botol dan semua botol yang mengandung asam kuat dan alkali harus berada di permukaan lantai

dan di nampan tetes. Botol pembawa dan alat penyedot untuk mengisi botol dari wadah curah

harus disediakan. Anak tangga harus disediakan di tempat yang memiliki rak tinggi.

Bahan kimia yang tidak kompatibel

Banyak bahan kimia laboratorium umum bereaksi dengan cara yang berbahaya jika mereka

bersentuhan dengannya lain. Beberapa bahan kimia yang tidak kompatibel tersebut tercantum

di bawah ini. Asam asetat – dengan asam kromat, asam nitrat, senyawa hidroksil, etilen glikol,

asam perklorat, peroksida dan permanganat.

Aseton – dengan campuran asam sulfat dan asam nitrat pekat.

Asetilen – dengan tembaga (tabung), halogen, perak, merkuri dan senyawanya. Logam alkali

– dengan air, karbon dioksida, karbon tetraklorida dan hidrokarbon terklorinasi lainnya.

Ammonia, anhydrous – with mercury, halogens, calcium hypochlorite and hydrogen fluoride.

Ammonium nitrate – with acids, metallic powders, flammable liquids, chlorates, nitrites, sulfur and

finely divided organic or combustible compounds.

Aniline – with nitric acid and hydrogen peroxide.

Bromine – with ammonia, acetylene, butadiene, butane, hydrogen, sodium carbide, turpentine and

finely divided metals Carbon,

activated – with calcium hypochlorite and all oxidizing agents.

Chlorates – with ammonium salts, acids, metal powders, sulfur and finely divided organic or

combustible compounds.

Chlorine – with ammonia, acetylene, butadiene, benzene and other petroleum fractions, hydrogen,

sodium carbide, turpentine and finely divided metals.

Chlorine dioxide – with ammonia, methane, phosphine and hydrogen sulfide.

Chromic acid – with acetic acid, naphthalene, camphor, alcohol, glycerol, turpentine and other

flammable liquids.

Copper – with acetylene, azides and hydrogen peroxide.

Cyanides – with acids.

Flammable liquids – with ammonium nitrate, chromic acid, hydrogen peroxide, nitric acid, sodium

peroxide and halogens.

Hydrocarbons – with fluorine, chlorine, bromine, chromic acid and sodium peroxide.

Hydrogen peroxide – with chromium, copper, iron, most other metals or their salts, flammable liquids

and other combustible products, aniline and nitromethane.

Hydrogen sulfide – with fuming nitric acid and oxidizing gases.

Iodine – with acetylene and ammonia.

Mercury – with acetylene, fulminic acid and ammonia.

Nitric acid – with acetic acid, chromic acid, hydrocyanic acid, aniline, carbon, hydrogen sulfide, fluids,

gases and other substances that are readily nitrated.

Oxygen – with oils, greases, hydrogen and flammable liquids, solids and gases.

Oxalic acid – with silver and mercury.

Perchloric acid – with acetic anhydride, bismuth and its alloys, alcohol, paper, wood and other organic

materials.

Phosphorus pentoxide – with water.

Potassium permanganate – with glycerol, ethylene glycol, benzaldehyde and sulfuric acid

Silver – with acetylene, oxalic acid, tartaric acid and ammonium compounds.

Sodium – with carbon tetrachloride, carbon dioxide and water.

Sodium azide – with lead, copper and other metals.

This compound is commonly used as a preservative but forms unstable, explosive compounds with

metals. If it is flushed down sinks, the metal traps and pipes may explode when worked on by a plumber.
Sodium peroxide – with any oxidizable substance, e.g. methanol, glacial acetic acid, acetic anhydride,

benzaldehyde, carbon disulfide, glycerol, ethyl actetate and furfural

Sulfuric acid – with chlorates, perchlorates, permanganates and water.

Aturan umum

Zat-zat di kolom sebelah kiri di bawah ini harus disimpan dan ditangani sehingga tidak dapat

secara tidak sengaja bersentuhan dengan zat yang sesuai di kolom sebelah kanan.

Efek racun bahan kimia

Telah diketahui dengan baik bahwa beberapa bahan kimia berdampak buruk bagi kesehatan

orang yang menanganinya atau menghirupnya uap. Selain racun yang jelas, sejumlah bahan

kimia diketahui memiliki berbagai efek toksik. Itu sistem pernapasan, darah, paru-paru, hati,

ginjal dan sistem pencernaan, serta organ lainnya

dan jaringan mungkin terpengaruh atau rusak parah. Beberapa bahan kimia diketahui

karsinogenik atau teratogenik. Beberapa uap pelarut beracun jika dihirup. Terlepas dari efek

yang lebih serius yang disebutkan di atas, paparan dapat mengakibatkan gangguan yang tidak

menunjukkan efek langsung yang terlihat pada kesehatan, tetapi dapat mencakup: kurangnya

koordinasi, kantuk dan gejala serupa, yang menyebabkan peningkatan kerentanan terhadap

kecelakaan. Paparan yang lama atau berulang pada fase cair dari banyak pelarut organik dapat

menyebabkan kulit kerusakan. Ini mungkin karena efek penghilang lemak, tetapi gejala alergi

dan korosif juga dapat muncul.

Tabel 11 mencantumkan efek kesehatan yang merugikan yang dilaporkan dari beberapa bahan

kimia laboratorium umum.

Bahan kimia eksplosif

Azida tidak boleh bersentuhan dengan tembaga, mis. dalam pipa limbah dan pipa ledeng.

Tembaga azida akan meledak dengan hebat ketika terkena benturan ringan sekalipun. Asam

perklorat, jika dibiarkan mengering pada kayu, bata atau kain, akan meledak dan menyebabkan

kebakaran pada dampak. Asam pikrat dan pikrat diledakkan oleh panas dan benturan.

Tumpahan bahan kimia

Sebagian besar produsen bahan kimia laboratorium mengeluarkan bagan yang menjelaskan

metode untuk menangani tumpahan. Bagan tumpahan dan kit tumpahan juga tersedia secara

komersial. Bagan yang sesuai harus ditampilkan

dalam posisi yang menonjol di laboratorium. Peralatan berikut juga harus disediakan:

- pakaian pelindung, mis. sarung tangan karet tugas berat; overshoes atau sepatu bot karet; alat

bantu pernafasan

- sendok dan pengki

– tang untuk mengambil pecahan kaca

– pel, kain dan handuk kertas

– ember

– soda ash (natrium karbonat, Na2CO3) atau natrium bikarbonat (NaHCO3) untuk menetralkan

asam

- pasir

- deterjen yang tidak mudah terbakar.

Tindakan berikut harus diambil jika terjadi tumpahan bahan kimia berbahaya.

1. Beri tahu petugas keamanan hayati dan evakuasi personel yang tidak penting dari area

tersebut.

2. Rawat orang-orang yang mungkin telah terkontaminasi.

3. Jika bahan yang tumpah mudah terbakar, padamkan semua api yang terbuka, matikan gas di

dalam ruangan dan sekitarnya area, dan matikan peralatan listrik yang dapat menimbulkan

percikan api.

4. Hindari menghirup uap dari bahan yang tumpah.

5. Buat ventilasi pembuangan jika aman untuk melakukannya.

6. Amankan barang-barang yang diperlukan (lihat di atas) untuk membersihkan tumpahan. Jika

terjadi tumpahan bahan kimia yang besar, ruangan harus dievakuasi dan jendela dibuka, jika

mungkin. Jika bahan yang tumpah mudah terbakar, semua api terbuka di ruangan yang
bersangkutan dan yang berdekatan harus dipadamkan dan semua peralatan listrik yang dapat

menimbulkan percikan api dimatikan.

Gas terkompresi dan cair

Ruangan di mana tabung gas yang mudah terbakar digunakan harus diidentifikasi dengan

pemberitahuan peringatan di pintu. Tidak lebih dari satu silinder gas yang mudah terbakar

harus berada di ruangan pada satu waktu. Silinder cadangan harus disimpan di gedung lain

yang agak jauh dari laboratorium. Toko ini harus dikunci

dan diidentifikasi dengan pemberitahuan. Tabung gas terkompresi harus dipasang dengan

aman (misalnya dirantai) ke dinding atau bangku yang kokoh sehingga

mereka tidak copot oleh bencana alam. Tabung gas terkompresi dan wadah gas cair tidak boleh

ditempatkan di dekat radiator, terbuka api atau sumber panas lainnya, atau percikan peralatan

listrik, atau di bawah sinar matahari langsung. Katup tekanan tinggi utama harus dimatikan saat

peralatan tidak digunakan dan saat: kamar tidak berpenghuni. Silinder gas terkompresi harus

diangkut dengan tutupnya di tempatnya dan ditopang pada troli. Tabung gas kecil sekali pakai

tidak boleh dibakar.

Untuk informasi lebih lanjut lihat referensi 41-45.

Kebakaran di laboratorium

Kerja sama yang erat antara petugas keselamatan dan petugas pencegahan kebakaran setempat

sangat penting. Selain dari bahaya kimia, efek api pada kemungkinan penyebaran bahan

infeksius harus dipertimbangkan. Ini dapat menentukan kebijakan "kehabisan tenaga" (yaitu

pertimbangan apakah yang terbaik untuk memadamkan atau menahan api). Bantuan petugas

pencegahan kebakaran lokal dalam pelatihan staf laboratorium dalam pencegahan kebakaran,

tindakan segera jika terjadi kebakaran, dan penggunaan peralatan pemadam kebakaran

diinginkan. Peringatan kebakaran, instruksi, dan rute pelarian harus ditampilkan dengan jelas

di setiap ruangan dan di

koridor dan lorong.

Penyebab umum kebakaran di laboratorium adalah:

– kelebihan beban listrik

– perawatan listrik yang buruk

– pipa gas dan kabel listrik yang terlalu panjang

– peralatan dibiarkan menyala jika tidak perlu

– api telanjang

- tabung gas rusak

– penyalahgunaan korek api

– kecerobohan dengan bahan yang mudah terbakar

– bahan kimia yang mudah terbakar dan meledak yang disimpan di lemari es biasa.

Peralatan pemadam kebakaran harus ditempatkan di dekat pintu kamar dan pada titik-titik

strategis di koridor dan lorong (seperti yang disarankan oleh petugas pencegahan kebakaran

setempat). Peralatan ini harus mencakup: selang, ember (dari air dan pasir), dan jenis pemadam

api berikut: air (H 2O), karbon dioksida (CO 2), “bubuk kering”, dan busa. Umur simpan alat
pemadam ini harus dipastikan dan pengaturan yang dibuat agar mereka diperiksa dan dipelihara

secara teratur.

Penggunaannya ditunjukkan dalam Tabel 12

Bahaya listrik

Sengatan listrik mengancam jiwa; gangguan listrik dapat menyebabkan kebakaran. Oleh

karena itu penting bahwa semua listrik instalasi dan peralatan diperiksa dan diuji secara

berkala, termasuk pembumian (grounding), dan dipelihara oleh teknisi listrik yang

berkualifikasi. Staf laboratorium tidak boleh mencoba memperbaiki jenis listrik apa pun

peralatan. Tegangan bervariasi dari satu negara ke negara tetapi bahkan tegangan rendah dapat

berbahaya. Perawatan harus selalu harus diambil untuk memastikan bahwa sekering dengan

peringkat yang benar dipasang di antara peralatan dan suplai. Pemutus sirkuit dan pemutus

gangguan tanah harus dipasang ke sirkuit listrik laboratorium. Catatan. Pemutus arus tidak

melindungi orang; mereka dimaksudkan untuk melindungi kabel dari panas berlebih dan maka

untuk mencegah kebakaran. Pemutus gangguan arde dimaksudkan untuk melindungi orang

dari sengatan listrik. Semua peralatan listrik laboratorium harus dibumikan, sebaiknya melalui

colokan tiga cabang. Perangkat berinsulasi ganda, hanya membutuhkan colokan dua cabang,

jarang ada di laboratorium, tetapi jika ada mungkin memerlukan:

pembumian terpisah. Pasokan bebas pembumian dapat menjadi hidup sebagai akibat dari

kesalahan yang tidak terdeteksi. Semua peralatan listrik laboratorium harus sesuai dengan

standar keselamatan listrik nasional atau standar: Komisi Elektroteknik Internasional.

Staf laboratorium harus diberi tahu tentang bahaya berikut:

– permukaan basah atau lembab di dekat peralatan listrik

– kabel penghubung listrik fleksibel yang panjang

– isolasi kabel yang buruk dan rusak

– kelebihan beban sirkuit dengan menggunakan adaptor

– peralatan percikan di dekat zat dan uap yang mudah terbakar

– peralatan listrik dibiarkan menyala dan tidak dijaga

– penggunaan jenis pemadam api yang salah (air atau busa sebagai pengganti CO2) pada

kebakaran listrik (lihat Tabel 12).

Untuk informasi lebih lanjut lihat referensi 46-48.

16. Kebakaran di laboratorium

Kerja sama yang erat antara petugas keselamatan dan petugas pencegahan kebakaran setempat

sangat penting. Selain dari bahaya kimia, efek api pada kemungkinan penyebaran bahan

infeksius harus dipertimbangkan. Ini dapat menentukan kebijakan "kehabisan tenaga" (yaitu

pertimbangan apakah yang terbaik untuk memadamkan atau menahan api). Bantuan petugas

pencegahan kebakaran lokal dalam pelatihan staf laboratorium dalam pencegahan kebakaran,

tindakan segera jika terjadi kebakaran, dan penggunaan peralatan pemadam kebakaran

diinginkan. Peringatan kebakaran, instruksi, dan rute pelarian harus ditampilkan dengan jelas

di setiap ruangan dan di koridor dan lorong.

Penyebab umum kebakaran di laboratorium adalah:

– kelebihan beban listrik

– perawatan listrik yang buruk

– pipa gas dan kabel listrik yang terlalu panjang

– peralatan dibiarkan menyala jika tidak perlu

– api telanjang

- tabung gas rusak

– penyalahgunaan korek api

– kecerobohan dengan bahan yang mudah terbakar

– bahan kimia yang mudah terbakar dan meledak yang disimpan di lemari es biasa.

Peralatan pemadam kebakaran harus ditempatkan di dekat pintu kamar dan pada titik-titik

strategis di koridor dan lorong (seperti yang disarankan oleh petugas pencegahan kebakaran

setempat).

Peralatan ini harus mencakup: selang, ember (dari air dan pasir), dan jenis pemadam api

berikut: air (H 2O), karbon dioksida (CO 2), “bubuk kering”, dan busa. Umur simpan alat
pemadam ini harus dipastikan dan pengaturan yang dibuat agar mereka diperiksa dan dipelihara

secara teratur. Penggunaannya ditunjukkan dalam Tabel 12.

17. Bahaya listrik

Sengatan listrik mengancam jiwa; gangguan listrik dapat menyebabkan kebakaran. Oleh

karena itu penting bahwa semua listrik instalasi dan peralatan diperiksa dan diuji secara

berkala, termasuk pembumian (grounding), dan dipelihara oleh teknisi listrik yang

berkualifikasi. Staf laboratorium tidak boleh mencoba memperbaiki jenis listrik apa pun

peralatan. Tegangan bervariasi dari satu negara ke negara tetapi bahkan tegangan rendah dapat

berbahaya. Perawatan harus selalu harus diambil untuk memastikan bahwa sekering dengan

peringkat yang benar dipasang di antara peralatan dan suplai. Pemutus sirkuit dan pemutus

gangguan tanah harus dipasang ke sirkuit listrik laboratorium. Catatan. Pemutus arus tidak

melindungi orang; mereka dimaksudkan untuk melindungi kabel dari panas berlebih dan maka

untuk mencegah kebakaran. Pemutus gangguan arde dimaksudkan untuk melindungi orang

dari sengatan listrik. Semua peralatan listrik laboratorium harus dibumikan, sebaiknya melalui

colokan tiga cabang. Perangkat berinsulasi ganda, hanya membutuhkan colokan dua cabang,

jarang ada di laboratorium, tetapi jika ada mungkin memerlukan:

pembumian terpisah. Pasokan bebas pembumian dapat menjadi hidup sebagai akibat dari

kesalahan yang tidak terdeteksi. Semua peralatan listrik laboratorium harus sesuai dengan

standar keselamatan listrik nasional atau standar: Komisi Elektroteknik Internasional.

Staf laboratorium harus mengetahui hal-hal berikut:

– permukaan basah atau lembab di dekat peralatan listrik

– kabel penghubung listrik fleksibel yang panjang

– isolasi kabel yang buruk dan rusak

– kelebihan beban sirkuit dengan menggunakan adaptor

– peralatan percikan di dekat zat dan uap yang mudah terbakar

– peralatan listrik dibiarkan menyala dan tidak dijaga

– penggunaan jenis pemadam api yang salah (air atau busa sebagai pengganti CO

2) pada kebakaran listrik (lihat Tabel 12).

Untuk informasi lebih lanjut lihat referensi 46-48 .

BAGIAN V
Organisasi dan pelatihan keselamatan
18. Petugas keamanan hayati dan komite keselamatan

Adalah penting bahwa setiap organisasi laboratorium memiliki kebijakan keselamatan,

keselamatan atau operasi yang komprehensif manual, dan program implementasi keselamatan.

Tanggung jawab untuk ini biasanya terletak pada direktur atau kepala lembaga atau

laboratorium, yang dapat, bagaimanapun, mendelegasikan tugas-tugas tertentu untuk

keamanan hayati petugas atau petugas spesialis lainnya.

Harus ditekankan bahwa keselamatan laboratorium juga merupakan tanggung jawab semua

supervisor dan karyawan, dan bahwa pekerja individu bertanggung jawab atas keselamatan

mereka sendiri dan rekan kerja mereka. Karyawan diharapkan untuk melakukan pekerjaan

mereka dengan aman dan tidak menempatkan diri mereka sendiri atau orang lain pada risiko

cedera atau sakit karena kondisi atau tindakan yang tidak aman atau tidak sehat. Pekerja

laboratorium harus segera melaporkan

tindakan atau kondisi tidak aman kepada supervisor mereka. Audit keselamatan berkala oleh

konsultan atau spesialis independen eksternal

Petugas keamanan hayati

Jika memungkinkan, petugas keamanan hayati harus ditunjuk untuk memastikan bahwa

kebijakan dan program keselamatan diikuti secara konsisten di seluruh laboratorium. Petugas

keamanan hayati menjalankan tugas ini atas nama dari kepala lembaga atau laboratorium.

Dalam unit kecil, petugas biosafety mungkin ahli mikrobiologi atau

anggota staf teknis, yang dapat melakukan tugas-tugas ini secara paruh waktu yang ditentukan.

Apapun itu tingkat keterlibatan dalam pekerjaan keselamatan, orang yang ditunjuk harus

memiliki pengetahuan mikrobiologis yang baik latar belakang laboratorium, terlibat aktif

dalam pekerjaan laboratorium, dan memiliki pengalaman dan pelatihan dalam aspek yang lebih
luas dari keselamatan laboratorium. Dia tidak boleh menjadi administrator atau teknisi yang

terlibat dalam kegiatan administrasi atau klerikal.

Kegiatan petugas keamanan hayati harus mencakup hal-hal berikut.

1. Audit keselamatan internal berkala pada metode teknis, bahan kimia, bahan dan peralatan;

ini audit juga harus mencakup survei tempat kerja yang komprehensif untuk memastikan

kepatuhan dengan kebijakan dan standar keselamatan dan kesehatan lokal dan nasional.

2. Diskusi tentang pelanggaran kebijakan keselamatan dengan orang yang tepat.

3. Verifikasi bahwa semua anggota staf telah menerima instruksi yang sesuai dan bahwa

mereka menyadari semua bahaya, dan bahwa anggota staf medis, ilmiah dan teknis kompeten

untuk: menangani bahan infeksius.

4. Penyediaan instruksi berkelanjutan dalam keselamatan untuk semua personel.

5. Penyediaan literatur dan informasi keselamatan terkini kepada staf tentang perubahan

prosedur, metode teknis, persyaratan, dan pengenalan peralatan baru.

6. Investigasi semua kecelakaan dan insiden yang melibatkan kemungkinan melarikan diri dari

orang yang berpotensi terinfeksi atau bahan beracun, bahkan jika tidak ada cedera atau paparan

pribadi, dan pelaporan temuan dan rekomendasi kepada direktur dan komite keselamatan.

7. Memberikan bantuan dalam menindaklanjuti penyakit atau ketidakhadiran di antara staf

laboratorium di mana ketidakhadiran tersebut mungkin terkait dengan pekerjaan dan dicatat

sebagai kemungkinan infeksi yang didapat di laboratorium.

8. Memastikan bahwa prosedur dekontaminasi diikuti jika terjadi tumpahan atau insiden

lainnya melibatkan bahan infeksius; catatan tertulis yang terperinci tentang kecelakaan dan

insiden semacam itu harus disimpan dalam kasus mereka mungkin terkait di kemudian hari

dengan infeksi yang didapat di laboratorium atau kondisi lain.

9. Memastikan bahwa bahan bekas didekontaminasi, dan limbah infeksius dibuang dengan

aman setelah pengobatan.

10. Memastikan desinfeksi peralatan yang memerlukan perbaikan atau servis sebelum

ditangani oleh personel non-laboratorium.

11. Penetapan prosedur untuk mencatat penerimaan, pergerakan dan pembuangan patogen

bahan dan untuk pemberitahuan oleh setiap pekerja penelitian atau laboratorium tentang

masuknya penyakit menular bahan yang baru di laboratorium.

12. Memberi tahu direktur tentang keberadaan agen apa pun yang harus diberitahukan ke

kantor lokal yang sesuai atau otoritas nasional dan badan pengatur.

13. Meninjau aspek keselamatan dari semua rencana, protokol dan prosedur operasi untuk

pekerjaan penelitian sebelum terhadap pelaksanaan prosedur-prosedur tersebut.

14. Melembagakan sistem tugas “on call” untuk menangani keadaan darurat yang muncul di

luar normal jam kerja.

Komite Keselamatan

Jika lembaga cukup besar, komite keselamatan harus dibentuk untuk merekomendasikan

kebijakan keselamatan dan merumuskan kode praktik atau keselamatan atau manual operasi

sebagai dasar keselamatan praktik di laboratorium individu, seperti yang disarankan oleh

petugas keamanan hayati. Komite keselamatan harus juga secara berkala meninjau dan

memperbarui kebijakan keselamatan jika diperlukan. Masalah keamanan menjadi perhatian

petugas keamanan hayati, bersama dengan informasi tentang bagaimana mereka ditangani,

harus dipresentasikan kepada komite keselamatan pada pertemuan rutin. Fungsi lain dari

komite dapat mencakup penilaian risiko rencana penelitian, perumusan kebijakan keselamatan

baru, dan

arbitrase dalam perselisihan tentang masalah keamanan.Ukuran dan komposisi komite

keselamatan akan tergantung pada ukuran dan sifat laboratorium, pada pekerjaan yang terlibat,
dan pada distribusi unit atau area kerjanya. Keanggotaan panitia harus mencerminkan bidang

pekerjaan yang beragam dari organisasi. Di negara-negara di mana ada nasional undang-

undang tentang kesehatan dan keselamatan, komposisi komite keselamatan mungkin sudah

ditentukan. Itu komposisi komite keselamatan dasar dapat berupa:

Organisasi umum

Ukuran dan komposisi organisasi keselamatan akan tergantung pada persyaratan individu

laboratorium dan, dalam beberapa kasus, peraturan nasional. Jelas, kecil, laboratorium individu

tidak akan memerlukan struktur organisasi yang rumit atau staf keselamatan profesional penuh

waktu. Dalam banyak kasus, di mana institusi atau laboratorium individu kecil terlibat dalam

pekerjaan dengan mikroorganisme di Risk

Grup 1 dan 2, organisasi keselamatan dapat dikembangkan untuk grup mereka. biomedis utama

lembaga mungkin memerlukan komite keselamatan terpisah yang membatasi kegiatannya pada

aspek-aspek khusus dari: programnya sendiri.

19. Aturan keselamatan untuk staf pendukung

Pengoperasian laboratorium yang aman dan optimal sangat bergantung pada staf pendukung,

dan itu oleh karena itu penting bahwa personel tersebut harus dilatih dengan benar untuk

pekerjaan mereka. Karena personel teknik, pemeliharaan, dan pembersihan harus memasuki

lokasi dan berinteraksi dengan staf laboratorium, adalah penting bahwa mereka harus
melakukan tugas mereka dengan memperhatikan keselamatan yang sesuai aturan. Mereka

harus menerapkan prosedur operasional standar yang diadopsi secara lokal dan harus diawasi.

Jasa rekayasa dan pemeliharaan gedung

Layanan ini, yang berkaitan dengan pemeliharaan dan perbaikan struktur, fasilitas dan

peralatan, memiliki fungsi pendukung penting dalam program keselamatan. Untuk servis rutin

dan pemeliharaan tidak hanya nyaman tetapi juga kebijakan keselamatan yang baik untuk

memiliki insinyur yang terampil dan pengrajin yang juga memiliki pengetahuan tentang sifat

pekerjaan laboratorium. Peraturan keselamatan

lebih dipahami dan diamati oleh staf tersebut; insinyur eksternal dan orang lain mungkin tidak

menyadari bahaya dan batasan yang ditempatkan pada mereka ketika mereka bekerja di

laboratorium, dan oleh karena itu membutuhkan pengawasan yang lebih ketat oleh staf

laboratorium. Pengujian item tertentu dari peralatan setelah servis paling baik dilakukan secara

independen oleh atau di bawah pengawasan petugas keamanan hayati, mis. menguji efisiensi

lemari pengaman biologis setelah baru

filter telah dipasang, dan peralatan lain yang dirancang untuk meminimalkan atau menahan

aerosol. Laboratorium atau institusi yang lebih kecil yang tidak memiliki layanan rekayasa dan

pemeliharaan internal, harus membangun, jauh sebelum keadaan darurat, hubungan yang baik

dengan insinyur dan pembangun lokal dan membiasakan mereka dengan peralatan dan

pekerjaan laboratorium. Insinyur dan staf pemeliharaan tidak boleh memasuki laboratorium

penahanan – Tingkat Keamanan Hayati 3 atau

laboratorium penahanan maksimum – Tingkat Keamanan Hayati 4, kecuali setelah izin oleh,

dan di bawah pengawasan, petugas keamanan hayati atau pengawas laboratorium.

Staf fasilitas besar dengan beberapa laboratorium harus menerima pelatihan seperti yang

diuraikan di bawah ini.

Layanan kebersihan (domestik)

Laboratorium sebaiknya dibersihkan oleh staf yang berada di bawah kendali supervisor

laboratorium dan bukan oleh pembersih kontrak atau staf yang bertanggung jawab kepada

otoritas lain. Praktek ini menumbuhkan rasa aman, hubungan kerja yang kooperatif antara

laboratorium dan petugas kebersihan. Khususnya memastikan

bahwa staf kebersihan tidak akan diganti tanpa peringatan.

Di laboratorium penahanan

– Biosafety Level 3 dan laboratorium penahanan maksimum

– Biosafety

Level 4, pembersihan sebaiknya dilakukan oleh staf laboratorium. Jika tidak, petugas

kebersihan harus bekerja hanya setelah izin oleh, dan di bawah pengawasan, petugas keamanan

hayati atau laboratorium pengawas. Staf harus menerima pelatihan sebagaimana diuraikan di

bawah ini. Aturan berikut dirancang untuk membantu pencegahan infeksi yang didapat di

laboratorium dalam pembersihan: personil. Salinannya harus dibagikan kepada staf dan

dipasang di posisi yang menonjol.

Aturan keselamatan untuk staf rumah tangga dan kebersihan

1. Selalu kenakan pakaian pelindung yang disediakan dengan cara yang ditentukan oleh

supervisor laboratorium.

2. Lepaskan pakaian pelindung ketika Anda meninggalkan laboratorium untuk mengunjungi

bagian lain dari gedung. Mengerjakan tidak memakai pakaian pelindung saat mengunjungi

ruang staf, toilet atau kantin.

3. Sering-seringlah mencuci tangan, dan selalu sebelum meninggalkan laboratorium atau ke

toilet, atau ke staf ruang.

4. Jangan makan atau minum, atau menggunakan kosmetik di laboratorium mana pun. Gunakan

ruang staf atau toilet.

5. Jangan berdebu atau membersihkan meja kerja tanpa izin dari staf laboratorium.

6. Jika Anda mengalami kecelakaan dalam bentuk apa pun, atau menjatuhkan atau

memecahkan botol, tabung, stoples, atau peralatan apa pun, beri tahu petugas keamanan hayati

atau supervisor Anda atau salah satu staf laboratorium sekaligus.

7. Jangan mencoba untuk membersihkan setelah kecelakaan apapun tanpa izin. Jangan

mengambil pecahan kaca dengan jari-jarimu. Gunakan pengki dan sikat, atau tang. Ikuti

instruksi dari anggota senior staf.

8. Jangan memasuki ruangan mana pun yang memiliki tanda "masuk terbatas" di pintunya (mis.

tanda bahaya) kecuali diizinkan untuk melakukannya.

9. Jangan mengosongkan wadah buangan apa pun di laboratorium kecuali ada label atau

instruksi yang menyatakan bahwa Anda dapat melakukannya.

20. Program pelatihan

Program pelatihan keselamatan di tempat kerja yang berkelanjutan sangat penting untuk

menjaga kesadaran keselamatan di antara para laboratorium dan staf pendukung. Pengawas

laboratorium, dengan bantuan petugas keamanan hayati dan lainnya narasumber, memainkan

peran kunci dalam pelatihan staf. Efektivitas pelatihan biosafety, memang semua pelatihan

keselamatan dan kesehatan kerja, tergantung pada komitmen manajemen, faktor motivasi, awal
yang memadai pelatihan kerja, komunikasi yang baik, dan pada akhirnya tujuan dan sasaran

organisasi. Pengikut merupakan elemen penting untuk program pelatihan keamanan hayati

yang efektif; selain mempertimbangkan ini elemen direkomendasikan bahwa pengembang dari

setiap program pelatihan keselamatan berkenalan dengan prinsip belajar orang dewasa.

Butuh penilaian. Proses ini termasuk mendefinisikan tugas-tugas yang terlibat, urutan

kepentingan (dalam frekuensi, kekritisan, kompleksitas), dan rincian langkah-langkah yang

diperlukan untuk mencapainya.

Menetapkan tujuan pelatihan. Pengkajian kebutuhan memberikan informasi untuk

menetapkan tujuan program pelatihan keamanan hayati. Ini adalah perilaku yang dapat diamati

yang dilakukan oleh peserta pelatihan diharapkan untuk menunjukkan, di tempat kerja, setelah

pelatihan. Tujuan dapat mengakui kondisi di bawah

mana kegiatan atau perilaku tertentu dilakukan dan tingkat kemahiran yang diperlukan.

Menentukan konten dan media pelatihan . Konten adalah pengetahuan atau keterampilan

yang harus dimiliki peserta pelatihan menguasai untuk dapat memenuhi tujuan perilaku.

Orang-orang yang mengetahui pekerjaan dan tuntutan terbaik biasanya menentukan isi

program pelatihan keamanan hayati. Pendekatan lain yang digunakan

mungkin fokus pada produk latihan pemecahan masalah, atau desain langkah-langkah

pembelajaran untuk mengoreksi kesalahan yang dibuat orang dalam menggunakan

keterampilan. Tidak jelas bahwa satu metode pengajaran (ceramah, televisi

instruksi, instruksi berbantuan komputer, video interaktif, dll.) lebih unggul dari yang lain.

Banyak tergantung pada kebutuhan pelatihan khusus, susunan kelompok peserta pelatihan, dll.

Akuntansi untuk perbedaan belajar individu

. Pelatihan yang efektif harus mempertimbangkan: karakteristik atau atribut peserta pelatihan.

Individu dan kelompok mungkin berbeda dalam bakat, literasi, budaya,

bahasa lisan dan tingkat keterampilan pra-pelatihan. Bagaimana program pelatihan dilihat oleh

peserta pelatihan dalam hal meningkatkan kinerja pekerjaan mereka atau keselamatan pribadi

dapat menentukan pendekatan yang digunakan. Beberapa individu

adalah pelajar yang lebih visual atau “langsung”; yang lain belajar dengan baik dari bahan

tertulis. Setiap kebutuhan khusus dari karyawan juga harus diperhatikan, seperti adaptasi

kursus bagi mereka yang memiliki gangguan pendengaran.

Menentukan kondisi belajar. Acara instruksional (misalnya kursus pelatihan, rekaman video,

tertulis materi, dll.) tidak boleh bertentangan, menghambat, atau tidak terkait dengan

penguasaan keterampilan atau topik yang diajarkan.

Misalnya, jika maksud dari instruksi tersebut adalah untuk mengembangkan kemampuan

dalam teknik pemecahan masalah, maka: pendekatan instruksional harus menekankan

pendekatan berpikir/penalaran daripada menghafal. Itu instruksi yang diberikan harus

membutuhkan perilaku produktif dan/atau umpan balik yang sesuai

(positif/akurat/kredibel). Selain itu, acara instruksional yang memberikan kesempatan untuk

berlatih di bawah kondisi yang mirip dengan pekerjaan akan meningkatkan transfer

keterampilan ke pekerjaan yang sebenarnya.

Evaluasi pelatihan. Ini memberikan informasi yang membantu untuk menentukan apakah

instruksi memiliki memiliki efek yang diinginkan. Evaluasi pelatihan umumnya mengambil

empat bentuk:

– mengukur reaksi peserta pelatihan terhadap instruksi yang diberikan

– mengukur ingatan dan/atau kinerja peserta pelatihan

– menilai perubahan perilaku di tempat kerja

– mengukur hasil nyata dalam hal tujuan atau sasaran organisasi.

Evaluasi yang paling lengkap dari upaya pelatihan melibatkan penilaian untuk masing-masing

dari empat bidang. Itu metode evaluasi yang paling tidak efisien adalah dengan

mempertimbangkan hanya reaksi peserta pelatihan terhadap instruksi seperti ini

mungkin menanggung sedikit hubungan dengan tingkat pembelajaran yang sebenarnya.

Seharusnya tidak digunakan sebagai satu-satunya pengukuran dari efektivitas pelatihan.

Revisi pelatihan. Evaluasi pelatihan jarang menunjukkan bahwa program pelatihan sudah

lengkap keberhasilan atau kegagalan karena beberapa kriteria digunakan untuk mengukur

hasil. Biasanya data menunjukkan yang lebih baik pemahaman, retensi atau penerapan

beberapa bagian dari materi pelajaran dibandingkan dengan yang lain.

Variasi atau kesenjangan dalam pengetahuan atau kompetensi yang diinginkan yang dihasilkan

dari upaya pelatihan mungkin mencerminkan kebutuhan untuk mempertimbangkan lebih

banyak waktu pelatihan, teknik instruksional alternatif, atau instruktur yang lebih mampu.

Kursus dasar tentang praktik laboratorium yang baik yang dapat dimodifikasi agar sesuai

dengan kebutuhan dan tujuan sebagian besar laboratorium ditawarkan di bawah ini. Ini diikuti

oleh lima contoh modul pelatihan yang dirancang untuk anggota laboratorium dan staf

pendukung. Modul teknis ini juga dapat diadaptasi secara lokal, berdasarkan pada penilaian

kebutuhan dan tujuan pembelajaran dari laboratorium atau organisasi tertentu.

Kursus dasar: Praktik laboratorium yang baik (GLP)

Umum

1. Sumber infeksi laboratorium

2. Bahaya laboratorium: biologis kimia fisik, termasuk bahaya kebakaran dan listrik

3. Hak dan kewajiban pekerja laboratorium terkait dengan tindakan keselamatan

Prosedur persiapan

1. Akses ke laboratorium

2. Kebersihan pribadi
3. Pakaian pelindung

prosedur eksperimental

1. Penggunaan alat bantu pemipetan mekanis dan lainnya

2. Meminimalkan produksi aerosol

3. Penggunaan lemari pengaman biologis yang tepat

4. Penggunaan autoklaf dan peralatan sterilisasi yang tepat

5. Penggunaan sentrifugal yang tepat

Prosedur darurat

1. Pertolongan pertama (di laboratorium)

2. Tumpahan dan kerusakan

3. Kecelakaan

Pemeliharaan laboratorium umum

1. Penyimpanan bahan berbahaya

2. Transportasi bahan berbahaya

3. Penanganan dan perawatan hewan laboratorium

4. Pengendalian artropoda dan hewan pengerat

Prosedur check-out

1. Pembuangan limbah berbahaya: sterilisasi pembakaran

2. Prosedur dekontaminasi

3. Kebersihan pribadi

Modul 1 (modul inti): Teknik mikrobiologi yang baik (GMT)

Modul ini untuk ilmuwan dan staf teknis yang bekerja di laboratorium dasar – Keamanan

Hayati Level 1 dan 2. Kursus yang diuraikan di bawah ini dapat dicakup dalam satu minggu.

Karena laboratorium diagnostik tidak dapat mengontrol jenis spesimen yang mereka terima

dan hampir pasti akan kadang-kadang diperlukan untuk menangani mikroorganisme Kelompok

Risiko 3, beberapa pelatihan dengan ini juga

diperlukan.

Isi kursus

1. Klasifikasi mikroorganisme menurut Kelompok Risiko berdasarkan bahaya; bagaimana ini?

diterapkan di wilayah geografis yang berbeda

2. Infeksi laboratorium; bagaimana mereka terjadi dan rute dan cara infeksi

3. Infeksi karena kecelakaan yang diketahui, mis. inokulasi yang tidak disengaja, tumpahan;

pencegahan atau minimalisasi

4. Infeksi karena partikel infeksius di udara; bagaimana partikel-partikel ini (aerosol)

dilepaskan

5. Pengukuran dan pengendalian aerosol; pengurangan bahaya dengan mengubah teknik dan

peralatan

6. Pakaian pelindung, pelindung wajah dan mata, kebersihan diri, imunisasi

7. Lemari pengaman biologis, hanya Kelas I dan II (Lemari Kelas III tidak mungkin digunakan

di sini laboratorium)

8. Kewaspadaan universal ( 3) untuk menangani darah dan cairan tubuh

9. Pembuangan limbah laboratorium yang terinfeksi; prinsip dan penggunaan autoklaf dan

insinerator

10. Desinfeksi kimia: batasan dan kebijakan

11. Rumah hewan: pengendalian kontaminasi

12. Desain laboratorium: prinsip laboratorium yang aman

13. Bahaya kimia dan karsinogenik; lemari asap kimia; peralatan analisis berbahaya

14. Bahaya listrik dan kebakaran

15. Pertolongan pertama untuk kecelakaan laboratorium

16. Prosedur darurat

17. Pengiriman dan pengiriman bahan infeksius

18. Pemeriksaan kode praktik yang ada: perumusan program lokal; tugas keamanan hayati

petugas; sumber informasi

19. Cara bekerja tanpa peralatan modern

Modul 2: Lingkungan laboratorium yang aman

Modul 2 terdiri dari dua bagian, satu berkaitan dengan perencanaan untuk keselamatan dan

yang lainnya dengan organisasi untuk keamanan. Kedua bagian ditujukan untuk staf

laboratorium ilmiah dan teknis senior, dan pada teknik, staf arsitektur dan administrasi yang

terkait dengan konstruksi, pemeliharaan, dan servis bangunan;

bangunan. Dokumen diskusi yang akan disediakan adalah pedoman dan laboratorium biosafety

nasional yang relevan perencanaan dan rencana konstruksi. Dua hari harus diberikan untuk

kursus ini.

Isi kursus: Bagian 1

1. Ukuran dan distribusi ruangan untuk tujuan yang berbeda; sistem perencanaan dan

pembangunan; furnitur dan peralatan permanen

2. Jasa: air, gas, listrik; pengaturan alternatif di mana tidak ada layanan publik yang tersedia

3. Fasilitas kebersihan: cuci, toilet, dll.

4. Ventilasi, termasuk lemari pengaman biologis dan lemari asam

5. Pembuangan limbah; limbah yang terkontaminasi dan bahan kimia; autoklaf dan insinerator

6. Kandang hewan: perencanaan, penahanan dan pengendalian; pengecualian hewan yang tidak

diinginkan termasuk arthropoda

7. Keamanan terhadap vandalisme

Isi kursus: Bagian 2

1. Tugas dan fungsi komite keselamatan

2. Tugas dan fungsi petugas biosafety

3. Pengawasan medis; program imunisasi

4. Pelatihan staf di kabupaten-kabupaten terpencil

5. Pertimbangan rinci keselamatan atau manual operasi dan bagaimana hal itu dapat

disesuaikan dengan lokal keadaan

6. Audit keselamatan; bagaimana mereka dilakukan dan apa yang harus dicari oleh auditor

(inspektur)

7. Layanan keselamatan umum, mis. pencegahan kebakaran

8. Rencana kesiapsiagaan darurat

Modul 3: GLP untuk staf pendukung

Modul ini, untuk kursus satu hari, ditujukan untuk kelompok staf pendukung laboratorium

berikut yang tidak: biasanya memiliki pelatihan laboratorium.

Kelompok 1. Staf rumah tangga yang: membersihkan tempat; buang laboratorium yang

terkontaminasi dan lainnya limbah; mencuci dan menyiapkan barang pecah belah dan peralatan

lainnya; menyiapkan dan mensterilkan media kultur dan reagen.

Kelompok 2. Staf teknik dan pemeliharaan yang: melayani fasilitas laboratorium; peralatan

perbaikan.

Kelompok 3. Staf yang: menerima dan menyortir bahan patologi yang dibawa ke laboratorium;

buka surat; menangani formulir permintaan dan catatan laboratorium; mengemas bahan

menular untuk pengiriman atau pengiriman; mengendarai kendaraan yang membawa bahan

infeksius.

Isi kursus

1. Sifat mikroorganisme dan bagaimana mereka menyebabkan infeksi (semua kelompok)

2. Pekerjaan laboratorium (semua kelompok)

3. Bagaimana menghindari infeksi di laboratorium; kebersihan pribadi, pakaian pelindung,

makan dan minum; tanda-tanda biohazard dan area terlarang (semua kelompok)

4. Penggunaan dan batasan disinfektan (semua golongan)

5. Pengoperasian, pengendalian dan pengujian autoklaf, dan insinerator (kelompok 1 dan 2)

6. Bahaya peralatan tertentu, mis. lemari pengaman biologis, inkubator, lemari es,

homogenizer dan sentrifugal (grup 2)

7. Bahaya pengangkutan internal dan penerimaan spesimen. membuka surat dan menangani

catatan; bagaimana caranya?

mengemas bahan infeksius untuk pengiriman dan pengiriman; tindakan darurat yang harus

diambil jika terjadi kecelakaan atau tumpahan sebelum petugas keamanan hayati tiba (grup 3)

8. Bahaya kimia, fisik, mekanik, listrik dan biologi (semua kelompok)

9. Petugas keamanan hayati dan tugasnya; penjelasan tentang hak-hak individu pekerja dan

tanggung jawab sesuai dengan peraturan nasional dan lokal; perlu melaporkan kecelakaan dan

tidak biasa kejadian; keamanan lokal dan tindakan pencegahan kebakaran (semua kelompok)

10. Pertolongan pertama sederhana (semua kelompok)

Modul 4: GLP untuk staf keselamatan

Modul ini ditujukan terutama untuk petugas keamanan hayati tetapi anggota lain dari komite

keselamatan harus didorong untuk hadir. Lima hari harus diberikan untuk kursus ini.

Isi kursus

1. Garis besar persyaratan hukum untuk perilaku di laboratorium klinis dan penelitian;

pekerjaan nasional undang-undang kesehatan dan keselamatan dan contoh-contoh dari negara

lain yang sesuai; tanggung jawab dari majikan dan karyawan; posisi serikat pekerja

2. Kode praktik dan pedoman, manual keselamatan atau operasi; pernyataan niat majikan dan

kebijakan keselamatan; pelaksanaan program keselamatan; tugas petugas keamanan hayati dan

keselamatan komite

3. Pelaporan kecelakaan dan insiden: mekanisme dan saluran dalam situasi rutin dan darurat

4. Program darurat; menyiapkan protokol untuk menangani kecelakaan, tumpahan, dll.

5. Pengawasan medis: dokumentasi staf; imunisasi dan catatan sakit; tindakan jika

laboratorium infeksi dicurigai

6. Masalah staf yang mengarah pada perilaku menyimpang dan bahaya yang diakibatkannya

7. perusakan laboratorium dan rumah hewan; pengaturan keamanan

8. Kecelakaan laboratorium: inokulasi, tumpahan, kerusakan, bahaya terkait peralatan:

sentrifugal, homogenizer, pemipetan, manipulasi mikrobiologis

9. Aerosol: cara pelepasannya (terkait peralatan dan teknik); bahaya yang terlibat; pengukuran

dengan celah dan cascade sampler: teori dan praktik filtrasi HEPA

10. Pengawasan dan instruksi staf dalam kebersihan pribadi dan penggunaan pakaian pelindung

11. Lemari pengaman biologis: klasifikasi, batasan dan penggunaan selektif; instalasi dan

pengujian (tantangan biologis, asap kimia); pelatihan pengguna

12. Desain dan pengujian sistem ventilasi; tekanan lulus; pengendalian limbah; kamar udara

bersih

13. Prinsip dan penerapan desinfeksi dan sterilisasi; kinetika penghancuran bakteri; autoklaf

dan kontrol mereka; penggunaan termokopel dan indikator (kimia dan biologi)

14. Desinfektan kimia dan gas; pengujian efisiensi; kebijakan desinfeksi; penyinaran

ultraviolet

15. Pengemasan, pengiriman dan pengiriman bahan infeksius; peraturan nasional dan

internasional; prosedur darurat

16. Rumah hewan: penahanan dan kontrol; isolasi dari lingkungan

17. Bahan kimia berbahaya: penanganan dan penyimpanan; nilai batas ambang (atau setara)

dan pengukuran

18. Bahaya radiasi: persyaratan hukum dan kontrol lokal

19. Peralatan pendukung kehidupan; prosedur penguncian; aturan dua orang

20. Tindakan pencegahan kebakaran; keputusan "burn-out", yaitu apakah akan menahan atau

memadamkan api

21. Rencana kesiapsiagaan darurat

22. Evakuasi darurat staf dan hewan

Modul 5: GLP untuk staf spesialis yang menangani mikroorganisme di Grup Risiko 3

dan 4

Modul ini untuk staf ilmiah, teknis, dan keselamatan khusus yang akan menangani

mikroorganisme di Risiko Grup 3 dan 4. Personil keselamatan harus dilatih hingga level Modul

4 sebelum mengikuti modul ini. Staf yang belum menerima pelatihan yang tepat seharusnya

tidak diberi tanggung jawab untuk mikroorganisme dalam Kelompok Risiko 3 dan 4. Kursus

berlangsung dua sampai tiga hari.

Isi kursus

1. Kelompok Risiko 3 dan 4 mikroorganisme: identitas, penyakit terkait; klinis dan

epidemiologis fitur; reservoir alami, vektor; cara penularan, pencegahan dan pengobatan

2. Potensi bahaya manipulasi genetik dan hubungannya dengan mikroorganisme dalam

Kelompok Risiko dan 4

3. Tingkat penahanan untuk mikroorganisme Kelompok Risiko 3 dan 4

4. Lemari pengaman biologis Kelas I dan II; laboratorium penahanan – prosedur Biosafety

Level 3; desain fasilitas untuk bekerja dengan mikroorganisme Risk Group 3

5. Lemari pengaman biologis Kelas III; laboratorium penahanan maksimum – prosedur

Biosafety Level 4 untuk bekerja dengan mikroorganisme di Grup Risiko 4

6. Fasilitas khusus untuk patogen tertentu; pemantauan limbah: pakaian khusus dan kebersihan

fasilitas

7. Peralatan khusus: Lemari pengaman biologis Kelas III, kontrol pengujian, pelatihan

penggunaan; autoclave pass-through pintu ganda; peringatan terhadap ketergantungan penuh

pada peralatan mekanis yang mungkin memberikan rasa aman yang palsu

8. Perawatan sederhana untuk tenaga listrik, air, peralatan tekanan, dll. di area di mana
staf pemeliharaan tidak dapat langsung diterima

9. Pengawasan medis; imunisasi; tindakan darurat

10. Dokumentasi kegiatan

 BAGIAN VI

Daftar periksa keamanan

Daftar periksa ini dimaksudkan untuk membantu penilaian status keamanan laboratorium

biomedis

Tempat laboratorium

1. Apakah bangunan memenuhi persyaratan bangunan nasional dan lokal, termasuk yang

berkaitan dengan banjir dan pencegahan gempa jika perlu?

2. Apakah tempat umumnya rapi dan bebas dari halangan?

3. Apakah tempat itu bersih?

4. Apakah ada cacat struktural pada lantai, tangga, dinding dan atap?

5. Apakah lantai dan tangga seragam dan tahan slip?

6. Apakah ada pegangan tangan pada tangga dengan lebih dari empat anak tangga?

7. Apakah ada pagar pengaman pada bukaan lantai?

8. Apakah ruang kerja memadai untuk operasi yang aman?

9. Apakah ruang sirkulasi dan koridor memadai untuk pergerakan orang dan peralatan besar?

10. Apakah bangku, perabot dan perlengkapan dalam kondisi baik?

11. Apakah permukaan bangku tahan terhadap pelarut dan bahan kimia korosif?

12. Apakah ada tempat cuci tangan di setiap ruang laboratorium?

13. Apakah bangunan dibangun dan dipelihara untuk mencegah masuknya dan persembunyian

hewan pengerat dan? arthropoda?

14. Apakah semua pipa uap dan air panas yang terbuka diisolasi atau dilindungi untuk

melindungi personel?

15. Apakah unit pendukung daya independen disediakan jika listrik padam?
Fasilitas penyimpanan

1. Apakah fasilitas penyimpanan, rak, dll., diatur sedemikian rupa sehingga toko aman dari

geser, runtuh atau? air terjun?

2. Apakah fasilitas penyimpanan dijaga bebas dari akumulasi sampah, bahan yang tidak

diinginkan dan benda-benda yang menghadirkan bahaya dari tersandung, kebakaran, ledakan,

dan sarang hama? Sanitasi dan fasilitas staf

1. Apakah tempat dirawat dalam kondisi bersih, teratur dan sanitasi?

2. Apakah tersedia air minum?

3. Apakah toilet (WC) dan fasilitas cuci tangan yang bersih dan memadai disediakan secara

terpisah untuk pria dan wanita? staf?

4. Apakah tersedia air panas dan dingin, sabun dan handuk?

5. Apakah ruang ganti terpisah disediakan untuk staf pria dan wanita?

6. Apakah ada akomodasi (misalnya loker) untuk pakaian jalanan bagi anggota staf?

7. Apakah ada ruang staf untuk makan siang, dll.?

8. Apakah tingkat kebisingan dapat diterima?

9. Apakah ada organisasi yang memadai untuk pengumpulan dan pembuangan sampah rumah

tangga umum?

Pemanasan dan ventilasi

1. Apakah ada suhu kerja yang nyaman?

2. Apakah tirai dipasang pada jendela yang terkena sinar matahari penuh?

3. Apakah ventilasi memadai, mis. sedikitnya enam kali pergantian udara per jam, terutama di

ruangan yang memiliki ventilasi mekanis?

4. Apakah ada filter HEPA di sistem ventilasi?

5. Apakah ventilasi mekanis mengganggu aliran udara di dalam dan di sekitar lemari dan asap

pengaman biologis? lemari?

Petir

1. Apakah penerangan umum memadai (misalnya 300–400 lx)?

2. Apakah pencahayaan tugas (lokal) disediakan di bangku kerja?

3. Apakah ada sudut gelap atau gelap di kamar dan koridor?

4. Apakah lampu neon sejajar dengan bangku?

5. Apakah lampu neon memiliki warna yang seimbang?

Jasa

1. Apakah setiap ruang laboratorium dilengkapi dengan wastafel, air, listrik dan outlet gas yang

cukup untuk keamanan? bekerja?

2. Apakah ada program pemeriksaan dan perawatan yang memadai untuk sekring, lampu,

kabel, pipa, dll.?

3. Apakah kesalahan diperbaiki dalam waktu yang wajar?

4. Apakah layanan rekayasa dan pemeliharaan internal tersedia, dengan insinyur dan pengrajin

yang terampil? yang juga memiliki pengetahuan tentang sifat pekerjaan laboratorium?

5. Jika tidak ada layanan rekayasa dan pemeliharaan internal yang tersedia, mintalah insinyur

dan pembangun lokal

telah dihubungi dan dibiasakan dengan peralatan dan pekerjaan laboratorium?

Keamanan

1. Apakah seluruh bangunan terkunci dengan aman saat kosong?

2. Apakah pintu dan jendela anti perusak?

3. Apakah ruangan yang berisi bahan berbahaya dan peralatan mahal terkunci saat tidak

ditempati?

Pencegahan kebakaran
1. Apakah ada sistem alarm kebakaran?

2. Apakah pintu api dalam keadaan baik?

3. Apakah sistem deteksi kebakaran berfungsi dengan baik dan diuji secara teratur?

4. Apakah stasiun alarm kebakaran dapat diakses?

5. Apakah semua pintu keluar ditandai dengan tanda yang tepat dan diterangi?

6. Apakah akses ke pintu keluar ditandai di mana rute ke sana tidak langsung terlihat?

7. Apakah semua pintu keluar tidak terhalang dan tidak terkunci saat bangunan ditempati?

8. Apakah ada jalan keluar yang tertutup oleh dekorasi, perabotan atau peralatan?

9. Apakah akses ke eksit diatur sedemikian rupa sehingga tidak perlu melewati area dengan

bahaya tinggi untuk melarikan diri?

10. Apakah semua pintu keluar mengarah ke ruang terbuka?

11. Apakah koridor, gang dan area sirkulasi bersih dan tidak terhalang untuk pergerakan staf

dan peralatan pemadam kebakaran?

12. Apakah semua peralatan dan aparatus pemadam kebakaran mudah diidentifikasi dengan

kode warna yang sesuai?

13. Apakah alat pemadam api portabel dipelihara terisi penuh dan berfungsi dengan baik, dan

disimpan di tempat yang ditentukan? tempat setiap saat?

14. Apakah ruangan laboratorium dengan potensi bahaya kebakaran dilengkapi dengan alat

pemadam dan/atau kebakaran yang sesuai? selimut untuk penggunaan darurat?

15. Jika cairan dan gas yang mudah terbakar digunakan di ruangan mana pun, apakah ventilasi

mekanis cukup untuk menghilangkan uap sebelum mencapai konsentrasi berbahaya?

Penyimpanan cairan yang mudah terbakar

1. Apakah fasilitas penyimpanan untuk cairan mudah terbakar curah terpisah dari bangunan

utama?
2. Apakah sudah diberi label dengan jelas sebagai area berisiko kebakaran?

3. Apakah memiliki sistem ventilasi pembuangan gravitasi atau mekanis yang terpisah dari

saluran utama? sistem bangunan?

4. Apakah sakelar untuk penerangan disegel atau ditempatkan di luar gedung?

5. Apakah fiting lampu di dalam disegel untuk melindungi dari pengapian uap oleh percikan?

6. Apakah cairan yang mudah terbakar disimpan dalam wadah yang tepat dan berventilasi yang

terbuat dari bahan yang tidak mudah terbakar?bahan?

7. Apakah isi semua wadah dijelaskan dengan benar pada label?

8. Apakah alat pemadam api dan/atau selimut api yang sesuai ditempatkan di luar tetapi dekat

dengan cairan yang mudah terbakar? toko?

9. Apakah tanda “Dilarang Merokok” ditampilkan dengan jelas di dalam dan di luar toko cairan

yang mudah terbakar?

10. Apakah hanya jumlah minimum bahan yang mudah terbakar yang disimpan di ruang

laboratorium?

11. Apakah mereka disimpan di lemari penyimpanan yang mudah terbakar yang dibangun

dengan benar?

12. Apakah lemari ini cukup diberi label dengan tanda “Cairan yang mudah terbakar – Bahaya

kebakaran”?

Bahaya listrik

1. Apakah semua instalasi listrik baru dan semua penggantian, modifikasi atau perbaikan telah

dilakukan dan?dipelihara sesuai dengan kode keselamatan listrik?

2. Apakah pengkabelan interior memiliki konduktor yang dibumikan (dibumikan) (yaitu sistem

tiga kabel)?

3. Apakah pemutus sirkuit dan pemutus gangguan pembumian dipasang ke semua sirkuit

laboratorium?

4. Apakah semua peralatan listrik memiliki persetujuan laboratorium pengujian?

5. Apakah kabel penghubung fleksibel dari semua peralatan sesingkat mungkin, dalam kondisi

baik, dan tidak? berjumbai, rusak atau disambung?

6. Apakah setiap stopkontak listrik hanya digunakan untuk satu alat (tidak menggunakan

adaptor)?

Gas terkompresi dan cair

1. Apakah setiap wadah gas portabel ditandai dengan isinya dan diberi kode warna dengan

benar?

2. Apakah silinder gas terkompresi dan katup tekanan tinggi dan reduksinya diperiksa secara

teratur untuk: keamanan?

3. Apakah katup reduksi dirawat secara teratur?

4. Apakah perangkat pelepas tekanan terhubung saat silinder sedang digunakan?

5. Apakah tutup pelindung terpasang saat silinder tidak digunakan atau sedang diangkut?

6. Apakah semua tabung gas terkompresi diamankan agar tidak jatuh, terutama jika terjadi

alam?bencana?

7. Apakah silinder dan tangki bahan bakar gas cair dijauhkan dari sumber panas?

Perlindungan pribadi

1. Apakah pakaian pelindung dari desain yang disetujui disediakan untuk semua staf untuk

pekerjaan normal, mis. gaun, baju, celemek, sarung tangan?

2. Apakah pakaian pelindung tambahan disediakan untuk bekerja dengan bahan kimia

berbahaya dan radioaktif dan zat karsinogenik, mis. celemek dan sarung tangan karet untuk

bahan kimia dan untuk menangani tumpahan; sarung tangan tahan panas untuk membongkar

autoklaf dan oven.

3. Apakah kacamata pengaman, kaca mata pelindung dan pelindung (visor) disediakan?

4. Apakah ada stasiun pencuci mata?

5. Apakah ada pancuran darurat (fasilitas kumur)?

6. Apakah proteksi radiasi sesuai dengan standar nasional dan internasional, termasuk

ketentuan: dosimeter?

7. Apakah masker tersedia?

8. Apakah respirator tersedia, dibersihkan secara teratur, didesinfeksi, diperiksa dan disimpan

di tempat yang bersih dan sehat? kondisi?

9. Apakah filter yang sesuai disediakan untuk jenis respirator yang benar, mis. Filter HEPA

untuk mikroorganisme, filter yang sesuai untuk gas atau partikulat?

10. Apakah respirator sudah teruji kecocokannya?

Kesehatan dan keselamatan staf

1. Apakah ada pelayanan kesehatan kerja?

2. Apakah kotak P3K disediakan di tempat-tempat strategis?

3. Apakah tersedia pertolongan pertama yang memenuhi syarat?

4. Apakah penolong pertama tersebut dilatih untuk menangani keadaan darurat yang khas di

laboratorium, mis. kontak dengan bahan kimia korosif, menelan racun dan bahan infeksius

secara tidak sengaja?

5. Apakah pekerja non-laboratorium, mis. staf rumah tangga dan administrasi, diinstruksikan

tentang potensi bahaya dari laboratorium dan bahan yang ditanganinya?

6. Apakah pemberitahuan dipasang dengan jelas memberikan informasi yang jelas tentang

lokasi pertolongan pertama, telepon? nomor layanan darurat, dll?

7. Apakah wanita usia subur diperingatkan tentang konsekuensi bekerja dengan

mikroorganisme tertentu, karsinogen, mutagen dan teratogen?

8. Apakah wanita usia subur diberitahu bahwa jika mereka, atau curiga, hamil, mereka harus

menginformasikan anggota staf medis/ilmiah yang sesuai sehingga pengaturan kerja alternatif

dapat dibuat untuk mereka jika perlu?

9. Apakah ada program imunisasi yang relevan dengan pekerjaan laboratorium?

10. Apakah tes kulit dan/atau fasilitas radiologi tersedia untuk staf yang bekerja dengan bahan

tuberkulosis atau? bahan lain yang membutuhkan tindakan seperti itu?

11. Apakah catatan penyakit dan kecelakaan dipelihara dengan baik?

12. Apakah rambu peringatan dan pencegahan kecelakaan digunakan untuk meminimalkan

bahaya kerja?

References 1. Richmond JY, McKinney RW. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories ,

4th ed. Washington, DC, U.S. Department of Health and Human Services/Centers for Disease Control
and Prevention/National Institutes of Health, 1999. 2. Directive 2000/54/EC of the European

Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related

to exposure to biological agents at work. Official Journal , 2000, L 262:21-45. 3. Perspectives in Disease

Prevention and Health Promotion Update: Universal Precautions for Prevention of Transmission of

Human Immunodeficiency Virus, Hepatitis B Virus, and Other Bloodborne Pathogens in Health-Care

Settings. MMWR , 1988, 37:377-388,

http://www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/00000039.htm . 4. ACGM compendium of guidance

- guidance from the Health and Safety Commission's Advisory Committee on Genetic Modification.

London, HSE Books, 2000. 5. European Council. Council Directive 98/81/EC of 26 October 1998

amending Directive 90/219/EEC on the contained use of genetically modified microorganisms. Official

Journal , 1998, L330:13-31. 6. Hunt GJ, Tabachnick WJ. Handling small arbovirus vectors safely during

biosafety level 3 containment: Culicoides variipennis sonorensis (Diptera: Ceratopogonidae) and

exotic bluetongue viruses. Journal of Medical Entomology , 1996, 33:271-277. 7. The Subcommittee

on arthropod-borne viruses. Laboratory safety for arboviruses and certain other viruses of

vertebrates. American Journal of Tropical and Medical Hygiene , 1980, 29:1357-1381. 8. National

Research Council. Occupational health and safety in the care and use of research animals .

Washington, DC, National Academy Press, 1997. 9. Richmond JY, Quimby F. Considerations for working

safely with infectious disease agents in research animals. In: Zak O, Sande MA, eds. Handbook of

animal models of infection. London, Academic Press, 1999:69-74. 10. National Sanitation Foundation.

Class II (laminar flow) biohazard cabinetry . Ann Arbor, MI, 2002 (NSF/ANSI 49-2002). 11. Richmond

JY, McKinney RW. Primary containment for biohazards: selection, installation and use of biological

safety cabinets , 2nd ed. Washington, DC, U.S. Department of Health and Human Services/Centers for

Disease Control and Prevention/National Institutes of Health, 2000. 12. Collins CH, Kennedy DA.

Laboratory acquired infections: history, incidence, causes and prevention , 4th ed. Oxford,

Butterworth-Heinemann, 1999. 13. Health Canada. Laboratory biosafety manual , 2nd ed. Ottawa,
Minister of Supply and Services Canada, 1996. 14. British Standards Institution. Microbiological safety

cabinets. Recommendations for information to be exchanged between purchaser, vendor and installer

and recommendations for installation . London, 1992 (Standard BS 5726-2:1992).

Peralatan laboratorium

1. Apakah semua peralatan bersertifikat aman untuk digunakan?

2. Apakah tersedia prosedur untuk dekontaminasi peralatan sebelum pemeliharaan?

3. Apakah lemari pengaman biologis dan lemari asam diuji dan diservis secara teratur?

4. Apakah autoklaf dan bejana tekan lainnya diperiksa secara teratur?

5. Apakah ember sentrifus dan rotor diperiksa secara teratur?

6. Apakah pipet digunakan sebagai pengganti jarum suntik?

7. Apakah barang pecah belah dan pecah-pecah selalu dibuang dan tidak digunakan kembali?

8. Apakah ada wadah yang aman untuk pecahan kaca?

9. Apakah plastik yang digunakan sebagai pengganti kaca layak?

Bahan menular

1. Apakah spesimen diterima dalam kondisi aman?

2. Apakah catatan bahan yang masuk disimpan?

3. Apakah spesimen dibongkar dalam lemari pengaman biologis dengan hati-hati dan

memperhatikan kemungkinan kerusakan? dan kebocoran?

4. Apakah sarung tangan dipakai untuk membongkar spesimen?

5. Apakah meja kerja tetap bersih dan rapi?

6. Lakukan pembuangan bahan infeksius, mis. budaya, menumpuk di bangku dan tempat lain?

7. Apakah bahan infeksius yang dibuang dibuang setiap hari atau lebih sering dan dibuang

dengan aman?

8. Apakah semua anggota staf mengetahui prosedur untuk menangani kerusakan dan tumpahan

kultur? dan bahan infeksius?

9. Apakah kinerja alat sterilisasi diperiksa dengan indikator kimia, fisik dan biologi?

10. Apakah sentrifugal didekontaminasi setiap hari?

11. Apakah ember tertutup disediakan untuk sentrifugal?

12. Apakah desinfektan yang sesuai digunakan dengan benar?

13. Apakah ada pelatihan khusus untuk staf yang bekerja di laboratorium penahanan –

Keamanan Hayati Level 3 dan

laboratorium penahanan maksimum – Tingkat Keamanan Hayati 4?

Bahan kimia dan zat radioaktif

1. Apakah bahan kimia yang tidak cocok dipisahkan secara efektif saat disimpan atau

ditangani?

2. Apakah semua bahan kimia diberi label nama dan peringatan dengan benar?

3. Apakah grafik peringatan bahaya kimia ditampilkan dengan jelas?

4. Apakah kit pembersihan tumpahan disediakan?

5. Apakah staf dilatih untuk menangani tumpahan?

6. Apakah zat yang mudah terbakar disimpan dengan benar dan aman dalam jumlah minimal

di lemari yang disetujui?

7. Apakah disediakan wadah botol?

8. Apakah petugas proteksi radiasi atau manual referensi tersedia untuk konsultasi?

9. Apakah catatan stok dan penggunaan zat radioaktif dipelihara dengan baik?

10. Apakah layar radioaktivitas dan penghitung bangku disediakan?

References
1. Richmond JY, McKinney RW. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories , 4th ed.
Washington, DC, U.S. Department of Health and Human Services/Centers for Disease Control and
Prevention/National Institutes of Health, 1999. 2. Directive 2000/54/EC of the European Parliament
and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure
to biological agents at work. Official Journal , 2000, L 262:21-45. 3. Perspectives in Disease Prevention
and Health Promotion Update: Universal Precautions for Prevention of Transmission of Human
Immunodeficiency Virus, Hepatitis B Virus, and Other Bloodborne Pathogens in Health-Care Settings.
MMWR , 1988, 37:377-388, http://www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/00000039.htm . 4.
ACGM compendium of guidance - guidance from the Health and Safety Commission's Advisory
Committee on Genetic Modification. London, HSE Books, 2000. 5. European Council. Council Directive
98/81/EC of 26 October 1998 amending Directive 90/219/EEC on the contained use of genetically
modified microorganisms. Official Journal , 1998, L330:13-31. 6. Hunt GJ, Tabachnick WJ. Handling
small arbovirus vectors safely during biosafety level 3 containment: Culicoides variipennis sonorensis
(Diptera: Ceratopogonidae) and exotic bluetongue viruses. Journal of Medical Entomology , 1996,
33:271-277. 7. The Subcommittee on arthropod-borne viruses. Laboratory safety for arboviruses and
certain other viruses of vertebrates. American Journal of Tropical and Medical Hygiene , 1980,
29:1357-1381. 8. National Research Council. Occupational health and safety in the care and use of
research animals . Washington, DC, National Academy Press, 1997. 9. Richmond JY, Quimby F.
Considerations for working safely with infectious disease agents in research animals. In: Zak O, Sande
MA, eds. Handbook of animal models of infection. London, Academic Press, 1999:69-74. 10. National
Sanitation Foundation. Class II (laminar flow) biohazard cabinetry . Ann Arbor, MI, 2002 (NSF/ANSI 49-
2002). 11. Richmond JY, McKinney RW. Primary containment for biohazards: selection, installation and
use of biological safety cabinets , 2nd ed. Washington, DC, U.S. Department of Health and Human
Services/Centers for Disease Control and Prevention/National Institutes of Health, 2000. 12. Collins
CH, Kennedy DA. Laboratory acquired infections: history, incidence, causes and prevention , 4th ed.
Oxford, Butterworth-Heinemann, 1999. 13. Health Canada. Laboratory biosafety manual , 2nd ed.
Ottawa, Minister of Supply and Services Canada, 1996. 14. British Standards Institution.
Microbiological safety cabinets. Recommendations for information to be exchanged between
purchaser, vendor and installer and recommendations for installation . London, 1992 (Standard BS
5726-2:1992) 15. British Standards Institution. Microbiological safety cabinets. Recommendations for
selection, use and maintenance . London, 1992 (Standard BS 5726-4:1992). 16. Canadian Standards
Association. Biological containment cabinets (Class I and II): installation and field testing . Toronto,
1995 (Standard Z316.3-95 (R2000)). 17. Standards Australia. Biological safety cabinets - biological
safety cabinets (Class I) for personnel and environment protection . Sydney, Standards Australia
International, 1994 (Standard AS 2252.1- 1994). 18. Standards Australia. Biological safety cabinets -
laminar flow biological safety cabinets (Class II) for personnel, environment and product protection .
Sydney, Standards Australia International, 1994 (Standard AS 2252.2-1994). 19. Standards Australia/
Standards New Zealand. Biological safety cabinets - installation and use . Sydney, Standards Australia
International, 2000 (Standard AS/NZS 2647:2000). 20. Standards Australia/ Standards New Zealand.
Safety in laboratories - microbiological aspects and containment facilities . Sydney, Standards Australia
International, 2002 (Standard AS/NZS 2243.3:2002). 21. Advisory Committee on Dangerous
Pathogens. Guidance on the use, testing and maintenance of laboratory and animal flexible film
isolators. London, Health and Safety Executive, 1990. 22. Safar J et al. Prions. In: Richmond JY,
McKinney RW, eds. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, 4th ed. Washington, DC,
U.S. Department of Health and Human Services, 1999:134-143. 23. Bellinger-Kawahara C et al. Purified
scrapie prions resist inactivation by UV irradiation. Journal of Virology , 1987, 61:159-166. 24. Berg P
et al. Asilomar conference on recombinant DNA molecules. Science , 1975, 188:991-994. 25. Toloza
EM et al. In vivo cancer gene therapy with a recombinant interleukin-2 adenovirus vector. Cancer Gene
Therapy , 1996, 3:11-17. 26. O'Malley BW Jr et al. Limitations of adenovirus-mediated interleukin-2
gene therapy for oral cancer. Laryngoscope , 1999, 109:389-395. 27. World Health Organization.
Maintenance and distribution of transgenic mice susceptible to human viruses. Memorandum from a
WHO meeting. Bulletin of the World Health Organization , 1993, 71:497-502. 28. Health Services
Advisory Committee. Safe working and the prevention of infection in clinical laboratories. London, HSE
Books, 1991. 29. Ascenzi JM. Handbook of disinfectants and antiseptics. New York, NY, Marcel Dekker,
1996. 30. Block SS. Disinfection, sterilization & preservation , 5th ed. Philadelphia, PA, Lippincott
Williams & Wilkins, 2001. 31. Russell AD, Hugo WB, Ayliffe GAJ. Disinfection, preservation and
sterilization , 3rd ed. Oxford, Blackwell Scientific, 1999. 32. Rutala WA. APIC guideline for selection
and use of disinfectants. American Journal of Infection Control , 1996, 24:313-342. 33. Sattar SA,
Springthorpe VS, Rochon M. A product based on accelerated and stabilized hydrogen peroxide:
evidence for broad-spectrum germicidal activity. Canadian Journal of Infection Control , 1998, 13:123-
130. 34. Schneider PM. Emerging low temperature sterilization technologies. In: Rutala WA, eds.
Disinfection & sterilization in health care. Champlain, NY, Polyscience, 1997:79-92. 35. Springthorpe
VS. New chemical germicides. In: Rutala WA, eds. Disinfection & sterilization in health care. Champlain,
NY, Polyscience, 1997:273-280. 36. Steelman VM. Activity of sterilization processes and disinfectants
against prions. In: Rutala WA, eds. Disinfection & sterilization in health care. Champlain, NY,
Polyscience, 1997:255-271. 37. Taylor DM. Transmissible degenerative encephalopathies: inactivation
of the unconventional causal agents. In: Russell AD, Hugo WB, Ayliffe GAJ, eds. Disinfection,
preservation and sterilization, 3rd ed. Oxford, Blackwell Scientific, 1999:222-236. 38. Health Canada.
Infection control guidelines for hand washing, cleaning, disinfection and sterilization in health care ,
2nd ed. Ottawa, Laboratory Centre for Disease Control, Health Canada, 1998. 39. Springthorpe VS,
Sattar SA. Chemical disinfection of virus-contaminated surfaces. CRC Critical Reviews in Environmental
Control , 1990, 20:169-229. 40. Sattar SA et al. The inactivation of HIV: an update. Reviews in Medical
Microbiology , 1994, 5:139- 150. 41. Eggimann W, Bastian C. Safety in handling chemical substances
at a global level. Immunological Investigations , 1997, 24:25-48. 42. Furr AK. CRC handbook of
laboratory safety , 5th ed. Boca Raton, FL, CRC Press LLC, 2000. 43. Lenga RE. The Sigma-Aldrich Library
of Chemical Safety Data , 2nd ed. Milwaukee, WI, Aldrich Chemical Company, 1988. 44. Lewis RJ. Sax's
dangerous properties of industrial materials , 10th ed. Toronto, John Wiley and Sons, 1999. 45. Safety
in health-care laboratories. Geneva, World Health Organization, 1997 (unpublished document
WHO/LAB/97.1; available on request from Division of Blood Safety and Clinical Technology, World
Health Organization, 1211 Geneva 27, Switzerland,
http://whqlibdoc.who.int/hq/1997/WHO_LAB_97.1.pdf). 46. International Electrotechnical
Commission. Fundamental aspects of safety standards for medical electrical equipment . Geneva,
1994 (IEC/TR3 60513 (1994-01)). 47. International Electrotechnical Commission. Medical electrical
equipment - Part 1-1: General requirements for safety - Collateral standard: Safety requirements for
medical electrical systems . Geneva, 2000 (IEC 60601-1-1 (2000-12)). 48. International Electrotechnical
Commission. Medical electrical equipment - Part 1-2: General requirements for safety - Collateral
standard: Electromagnetic compatibility - Requirements and tests . Geneva, 2000 (IEC 60601-1-2
(2001-09)). 49. Cohen A and Colligan MJ. Assessing occupational safety and health training . Cincinnati,
OH, National Institute for Occupational Safety and Health, 1998 (DHHS (NIOSH) Publication No. 98-
145). 50. Goldstein IL, Buxton VM. Training and human performance. In: Alluisi EA, Fleishman EA, eds.
Human performance and productivity: stress and performance effectiveness, Vol. 3. Hillsdale, NJ,
Lawrence Erlbaum Associates, 1982. 51. Kroehnert G. Basic training for trainers: a handbook for new
trainers. Sidney, McGraw-Hill, 1995