Jurnal Kromatografi A, 799 (1998) 101-110

Analisis kuantitatif flavonol, flavon, dan flavanon dalam buah-buahan,

sayuran dan minuman dengan kromatografi cair kinerja tinggi dengan
susunan foto-dioda dan spektrometri massa
deteksi
Ulla Justesen *, Pia Knuthsen, Torben Leth
Administrasi Hewan dan Makanan Denmark, Mørkhøj Bygade 19, DK- 2860 Søborg, Denmark

Diterima 23 Juli 1997; diterima dalam bentuk revisi 7 Oktober 1997; diterima 17 Oktober 1997

Abstrak

Metode pemisahan kromatografi cair (HPLC) kinerja tinggi dengan photo-diode array (PDA) dan deteksi spektrometri massa (MS)
dikembangkan untuk menentukan dan mengukur flavonol, flavon, dan flanon dalam buah-buahan, sayuran dan minuman. Senyawa dianalisis
sebagai aglikon, diperoleh setelah hidrolisis asam dari bahan makanan kering beku. Identifikasi didasarkan pada waktu retensi, UV dan
spektrum massa dibandingkan dengan standar komersial, dan area puncak UV digunakan untuk menghitung isi flavonoid. Contoh analisis
HPLC-MS dari pulp jeruk, tomat, dan apel disajikan. Metode ini telah digunakan untuk menyaring makanan di pasar Denmark, dan kandungan
flavon, flavonol, dan flavanon diukur. • 1998 Elsevier Science BV

Kata kunci: Analisis makanan; Flavonol; Flavon; Flavanones

1. Perkenalan
Kelompok besar polifenol tumbuhan menarik perhatian besar
karena potensi sifat antiaterogenik yang diduga didasarkan
pada fungsinya sebagai antioksidan alami. Dari polifenol
tumbuhan, flavonoid menjadi perhatian khusus karena
prevalensinya yang tinggi dalam makanan seperti buah-buahan,
sayur-sayuran dan teh. Dalam studi kohort yang dilakukan oleh
Hertog et al. [1], ditemukan bahwa asupan flavonoid berbanding
terbalik dengan kematian akibat penyakit jantung koroner pada
usia paruh baya.
Pria Belanda. Studi kohort lain [2], dilakukan di Finlandia, juga
menunjukkan hubungan terbalik antara asupan flavonoid,
terutama dari apel dan bawang, dan penyakit jantung koroner.
Meskipun hubungan terbalik juga telah diamati antara asupan
buah-buahan dan sayuran, dan kanker di berbagai tempat [3],
dalam studi epidemiologi, belum dimungkinkan untuk
menetapkan korelasi flavonoid individu dengan penurunan risiko
kanker [4]. Studi pada hewan dan kultur sel menunjukkan,
bagaimanapun, bahwa flavonoid mungkin melindungi terhadap
kanker di berbagai tempat [5].

Jumlah flavonoid pada tumbuhan besar, dan kompleks dengan

kemunculannya sebagian besar dalam bentuk O-glikosidik dengan
sejumlah gula seperti glukosa, galaktosa, rhamnosa, arabinosa,
* Penulis yang sesuai. xilosa dan rutinose.

0021-9673 / 98 / $ 19,00 • 1998 Elsevier Science BV Semua hak dilindungi undang-undang.

PI I S0021-9673 (97) 01061-3

102 U. Justesen dkk. / J. Kromatogr. SEBUAH 799 (1998) 101 - 110

Glikosilasi meningkatkan polaritas flavonoid dan dengan demikian
kelarutan dalam air, yang diperlukan untuk penyimpanan dalam
vakuola sel tumbuhan. Fungsi flavonoid pada tumbuhan diyakini
sebagai agen pelindung terhadap radiasi UV dan juga melawan
mikroorganisme [6].
Efek fisiologis pada manusia tidak diketahui, tetapi teori
tersebut didasarkan pada fungsi flavonoid sebagai
antioksidan dan pemulung radikal bebas. Dalam hal ini,
berspekulasi bahwa kelompok (katekin,
antosianin, fl avones, fl avonol,
avanones dll.) berbeda dalam sifatnya, tergantung pada jumlah
dan posisi gugus hidroksil dan substitusi gula. Telah
ditunjukkan dalam uji absorbansi radikal oksigen [7] bahwa
aktivitas radikal antiperoksil meningkat dengan jumlah gugus
hidroksil. Menggunakan model oksidasi lipoprotein in vitro,
Vinson et al. [8] menunjukkan bahwa flavanols dan flavonols
adalah yang paling efektif, dan flavones dan flavanones paling
tidak efektif sebagai antioksidan. Percobaan terutama
dilakukan dengan menggunakan aglikon.
Sedikit yang diketahui tentang penyerapan, distribusi,
metabolisme, dan ekskresi flavonoid pada manusia. Telah
diterima sampai saat ini, bahwa hanya aglikon yang dapat
melewati dinding usus, tetapi makalah terbaru oleh Hollman et
al. [9] dan Paganga dan RiceEvans [10] berpendapat bahwa
flavonoid dapat diserap sebagai glikosida dan hadir dalam
plasma. Studi lain tentang metabolisme rutin pada tikus [11] atau
diosmetin pada sukarelawan manusia [12] tidak menunjukkan
adanya glikosida dalam plasma. Metode untuk menghitung
dan Beecher [15] menyajikan metode untuk menghitung
flavanone-glikosida hesperidin, naringin dan narirutin dalam
jus jeruk dan jeruk bali.
Untuk tujuan penyaringan buah-buahan, sayuran dan
minuman untuk memperkirakan asupan flavonoid di Denmark,
kami telah mengembangkan metode HPLC dengan photo-diode
array (PDA) dan deteksi spektrometri massa (MS) untuk
kuantitasi flavonol, flavon dan flanones dalam makanan. Kondisi
ekstraksi dan hidrolisis asam didasarkan pada metode yang
dilaporkan oleh Hertog et al. [13]. Dalam penelitian ini, kami telah
memasukkan analisis senyawa yang tercantum dalam Tabel 1.
Strukturnya terskema pada Gambar. 1. Area puncak UV senyawa
digunakan untuk kuantitasi, dan deteksi MS digunakan untuk
meningkatkan spesifitas senyawa. metode. Jumlah flavonoid
yang ada dalam makanan tinggi, dan oleh karena itu interferensi
satu sama lain mungkin terjadi dalam sistem kromatografi
manapun. Untuk jumlah senyawa aglikon flavonoid yang kami
miliki sebagai standar, kami mengamati koelusi beberapa
flavonoid. Kami telah menyertakan deteksi MS selain deteksi
PDA untuk mengecualikan kemungkinan interferensi dalam kasus
seperti itu, dan juga untuk dapat memverifikasi struktur glikosidik.
Contoh analisis HPLC-MS dari flavonoid aglycones dalam daging
buah jeruk dan tomat disajikan, seperti deteksi
phloretin-glycosides dalam kulit apel.
2. Bahan-bahan dan metode-metode

flavonoid dalam sampel makanan telah dipublikasikan [13,14].

Metode ini tidak termasuk penentuan flavanones. Bronner 2.1. Persiapan sampel

Buah dan sayuran utuh dibeli di

Tabel 1
Waktu retensi HPLC, UV maxima dan ion pseudomolekuler dari flavon, flavonol dan aglikon flavanon
2
t R ( m di) UV maks (n m) [M 2 H] atau M 2

Apigenin 24.2 341 2 69

Eriodictyol 13.0 289 288
Hesperitin 18.5 289 301/302
Isorhamnetin 24.0 372 315
Kaempferol 22.9 366 285
Luteolin 18.5 351 285
Myricetin 11.5 375 317
Naringenin 17.5 292 272
Phloretin 18.4 287 273
Quercetin 16.6 374 301
 U. Justesen dkk. / J. Kromatogr. SEBUAH 799 (1998) 101 - 110
Gbr. 1. Struktur flavones, flavonols, dan flanones yang digunakan dalam campuran standar (Gbr. 2).
toko grosir lokal, dibersihkan dan, bila perlu, dibagi menjadi bagian
yang dapat dimakan dan tidak dapat dimakan, yang ditimbang
secara terpisah. Apel, jeruk dan pir dikupas (sesuai standar
mungkin), dan kulitnya dianalisis secara terpisah dari pulp. Bagian
makanan yang dapat dimakan dipotong-potong dalam food
processor, diliofilisasi 24-48 jam dan disimpan 2 18 8 C sampai analisis
lebih lanjut. Persentase kelembaban diukur berdasarkan perbedaan
berat badan sebelum dan sesudah liofilisasi.
2.2. Ekstraksi dan hidrolisis
Sampel padat disiapkan sebagai berikut: 40 ml dari 62,5%
metanol berair yang mengandung BHA (2 g / l) ditambahkan ke 0,500
g bahan sampel kering-beku. Untuk ini, 10 ml 6 M HCl ditambahkan
dengan hati-hati untuk memberikan volume total 50 ml. Campuran
ekstraksi terdiri dari 1.2 M HCl dalam 50% metanol berair. Untuk
sampel Brassica, 17 ml 6 M HCl ditambahkan ke 33 ml dari 62,5%
metanol berair. Campuran ekstraksi kemudian dipanaskan sampai 90 8
C pada penangas uap dan difluks selama 2 jam, dibiarkan dingin
dalam lemari es, diencerkan menjadi 100 ml dengan metanol dan
disonikasi selama 5 menit untuk membentuk ekstrak akhir.
103
Prosedur untuk sampel cairan seperti teh, jus buah dan
anggur adalah: 40 ml metanol berair 62,5% (mengandung 2
g / l BHA) ditambahkan ke 15 ml sampel cair. Untuk ini, 10
ml 6 M HCl ditambahkan dan dicampur dengan hati-hati.
Prosedur lainnya seperti yang dijelaskan di atas, kecuali
sampel anggur merah dihidrolisis selama 4 jam pada 90 8 C.
Sekitar 3 ml ekstrak akhir disaring melalui 0,45- m filter
(Sartorius Minisart) sebelum 20 m l injeksi ke dalam sistem
HPLC. Sampel disiapkan dan dianalisis dalam rangkap dua.
Prosedur ekstraksi flavonoid-glikosida adalah sebagai
berikut: 0,5 g sampel kering-beku dihaluskan dalam mortar
dan diekstraksi dengan 20 ml.
62,5% air metanol menggunakan BHA sebagai antioksidan.
Setelah sedimentasi, 2 ml alikuot ditambahkan ke 2 ml air, pH 2,5
dan sampel disaring (seperti di atas) sebelum injeksi 20- m Saya
juga mirip dengan HPLC.
2.3. Standar
Standar flavonoid dibeli dari Apin (Oxon, UK) dan Sigma
(St. Louis, MO, USA). Standar dibubarkan dalam DMSO
menjadi konsen-
104 U. Justesen dkk. / J. Kromatogr. SEBUAH 799 (1998) 101 - 110
tration 0,1 g / l dan tetap terlindung dari cahaya pada
2 18 8 C sampai 3 bulan. Larutan kerja dibuat setiap hari dengan
mengencerkan 0,50 ml larutan stok standar dengan 10 ml
metanol berair 62,5% yang mengandung BHA (2 g / l), dan 2,5
ml 6 M HCl. Kromatogram campuran standar disajikan pada
Gambar. 2A dan B.
2.4. HPLC
Sistem HPLC terdiri dari sistem air (Milford, MA, USA) 717
autoinjector, 616 pompa, dan 996 PDA detektor. Untuk
analisis sampel makanan terhidrolisis asam, Phenomenex
(Torrance,
CA, USA) RP C 1 8 kolom (250 3 4,6 mm, 5 m m)
dilindungi oleh kolom pelindung (LC 1 8) digunakan. Fase gerak
terdiri dari metanol-air (30:70,
v / v) dengan asam format 1% (A) dan 100% metanol (B).
Gradien adalah 25-86% B dalam 50 menit dengan kecepatan
aliran 1 ml / menit. Spektrum UV direkam dari 220–450 nm
dengan kecepatan 1,00 spektrum / s dan resolusi 1,2 nm.
Metanol tingkat HPLC dibeli di Rathburn (Walkerburn, Inggris).
Untuk analisis glikosida, sebuah Hewlett-Packard
(Palo Alto, CA, USA) Purospher RP C 1 8 250 3 4.6
mm, 5 m m) kolom digunakan, dengan fase gerak
terdiri dari 1% asam format dalam air (A) dan 100% asetonitril (B).
Gradien adalah 5-60% B dalam 60 menit dengan kecepatan aliran 1
ml / menit.
2.5. Spektrometri massa
MS dilakukan pada instrumen quadrupole VG Platform II
(Micromass, Chesire, UK) yang dilengkapi dengan sumber
ionisasi tekanan atmosfer (API) menggunakan saluran
masuk APcI. Anion pseudomolekul karakteristik senyawa
tercantum dalam Tabel 1. Parameter probe dan sumber ion
adalah: suhu sumber 150 8 C, suhu probe 450 8 C, tegangan
kerucut 2 30 eV, dan lucutan korona
1,6–1,9 kV. Spektrum massa ion negatif dari aglikon dan
glikosida diperoleh dari 120 hingga 450
amu dan 120 hingga 650, masing-masing, dengan kecepatan
pemindaian satu pemindaian / s. HPLC dihubungkan ke probe
spektrometer massa melalui outlet sel UV, menggunakan tubing PEEK.
2.6. Kuantitas
Untuk setiap senyawa, area puncak ditentukan pada panjang
gelombang yang memberikan absorbansi UV maksimal (lihat Tabel
1) pada kriteria signal-to-noise minimal 5 (tinggi puncak), sesuai
dengan kira-kira 1 ng yang diinjeksikan pada kolom dan 0,1 mg /
100 mg berat segar sampel pada faktor pengeringan 0,1. Kurva
kalibrasi dari standar mulai dari 2,5 hingga 25 mg / ml (10 level)
menunjukkan linieritas yang baik dengan R 2
nilai melebihi 0,99 (area puncak vs. konsentrasi). Kuantitas
dilakukan berdasarkan standar eksternal dengan campuran
standar konsentrasi yang diketahui yang dianalisis dalam
rangkap dua sebelum dan sesudah batch sampel, dan area
puncak digunakan untuk menghitung isi sampel senyawa yang
tercantum dalam Tabel 1.
2.7. Validasi
Serangkaian analisis sampel dilakukan untuk menyelidiki
kinerja metode. Sampel kulit apel, brokoli, dan kulit jeruk
dipilih untuk reproduktifitas. Analisis individual dari sampel ini
diulangi dalam rangkap selama 5 hari. Untuk pemulihan,
sampel kulit apel, bawang merah, daging jeruk, dan teh
dipilih. Tiga analisis berulang dari penambahan 100% dari
masing-masing komponen dilakukan pada hari yang sama.
Standar aglikon ditambahkan sebelum hidrolisis asam. Data
dari uji validasi dapat dilihat pada Tabel 2.
3. Hasil dan Pembahasan
3.1. Prosedur kuantitatif dan identifikasi oleh HPLC dan
MS
Menggunakan metode ini, kami mengisolasi dan mengukur flavon,
flavonol, dan flavanon yang ada dalam makanan Denmark. HPLC
dengan deteksi PDA digunakan untuk memisahkan dan mengukur
flavonoid, dan MS digunakan untuk deteksi jelas dari flavonoid
aglikon dalam sampel terhidrolisis, untuk menghilangkan kesalahan
identifikasi senyawa coeluting dengan spektrum UV yang serupa
(lihat Gambar. 2).
Validasi metode (Tabel 2) menunjukkan kinerja metode
yang baik - variasi sehari-hari
 U. Justesen dkk. / J. Kromatogr. SEBUAH 799 (1998) 101 - 110 105

Gambar. 2. Kromatogram HPLC dari campuran standar tercatat pada 290 dan 365 nm. (A) 1, Myricetin; 2, quercetin; 3, naringenin, 4, luteolin;
5, hesperetin; 6, kaempferol; 7, apigenin; 8, BHA (antioksidan): (B) 9, eriodictyol; 10, phloretin; 11, isorhamnetin; 12, BHA.
106 U. Justesen dkk. / J. Kromatogr. SEBUAH 799 (1998) 101 - 110

Meja 2
Rata-rata konten (mg / 100 g berat segar) dari lima sampel, reproduktifitas lima komponen dalam tiga sampel, pemulihan sebagai penambahan 100% dari enam komponen individu menjadi
empat sampel

Makanan C om p satu nt SEBUAH rata-rata c ont e nt R eproducibilit.dll y Rek Hai ver y b

(mg / 100 g) CV Sebuah (%) (%)

Brokoli Q uercetin 6. 8 6
Kaempferol 10 13
kulit jeruk Hesperetin 21 11
Naringenin 375 4
Kulit apel Quercetin 23 3 103
Daging buah jeruk Hesperetin 56.0 6 0.7 c 78
Naringenin 11.3 6 0.1 68
Bawang Quercetin 34.8 6 1.0 95
teh Quercetin 1.6 6 0.1 81
Kaempferol 1.1 6 0.1 97
Sebuah Antara- vari hari Sebuah tion s, perfor m ed d analisis duplikat untuk 5 bersama n detik u tive day s.

b Dilakukan sebagai penambahan 100% dari rata-rata isi komponen individu (sebagai aglikon). Penambahan dilakukan rangkap tiga pada hari yang sama.

c Analisis rangkap tiga dilakukan pada hari yang sama (rata-rata 6 deviasi standar).

Gambar. 3. Analisis HPLC-MS dari sampel tomat terhidrolisis. Kromatogram ion dari m / z 272 dan spektrum massa pada t R 17,4 menit Diidentifikasi sebagai naringenin dibandingkan dengan
standar komersial.
 U. Justesen dkk. / J. Kromatogr. SEBUAH 799 (1998) 101 - 110 107

tions berada di bawah 13%. Pemulihan standar aglikon yang melindungi botol dari sinar UV, degradasi standar myricetin berada
ditambahkan berada di kisaran 68-103%, kecuali untuk dalam batas yang dapat diterima (sekitar 15%). Oleh karena itu,
pemulihan standar myricetin (30%). Pemulihan rendah dari kami memasukkan penghitungan myricetin dalam penelitian ini
standar myricetin aglycone dapat dijelaskan dengan degradasi karena berkontribusi secara signifikan terhadap kadar flavonoid
dalam proses hidrolisis asam. Perkiraan pemulihan myricetin dalam teh, yang penting karena dengan asupan harian rata-rata
yang lebih tepat harus dilakukan dengan menggunakan standar yang tinggi di Denmark.
myricetin-glycoside.
Tingkat flavones, flavonol dan diharapkan
Telah dilaporkan dalam literatur bahwa myricetin sulit untuk diukur, Avanones adalah sebagai menurut sebelumnya senyawa ini
karena masalah dengan ketidakstabilan [13] atau dengan gangguan investigasi dalam kelompok makanan,
dari senyawa lain [16]. Kami tidak mengamati interferensi yang bagaimanapun, termasuk
[15,17,18]. Tidak keduanya

dijelaskan oleh Shepherd dan Ibe [16], yang dapat dijelaskan dengan
gradien 50 menit kami dalam sistem kromatografi, yang
memungkinkan senyawa yang sangat polar terelusi sebelum myricetin.
Kami setuju bahwa myricetin kurang stabil dibandingkan dengan
aglikon flavonoid lainnya. Dengan mengambil tindakan pencegahan
seperti menggunakan campuran standar yang baru dibuat,
pendinginan autosampler, dan
kuantitas flavanones dalam jeruk, jus jeruk atau tomat. Kami
menemukan flavanon dalam jumlah yang signifikan dalam
makanan ini. Isi naringenin dan hesperetin dari pulp jeruk
ditemukan rata-rata 11 dan 31 mg / 100 g berat segar, dan
kandungan naringenin tomat dihitung menjadi 1,5 mg / 100 g
berat segar, sama dengan kadar quercetin dalam sampel
tomat. ana-

Gambar 4. Spektrum massa dari dua puncak utama dalam sampel pulp oranye. (A) Kromatogram ion dari ion m / z 302. Disisipkan adalah spektrum
senyawa yang terelusi pada t R 18,5 menit Diidentifikasi sebagai hesperetin. (B) Kromatogram ion dari ion m / z 272. Disisipkan adalah spektrum senyawa yang terelusi di t R 17,4 menit
Diidentifikasi sebagai naringenin.
108 U. Justesen dkk. / J. Kromatogr. SEBUAH 799 (1998) 101 - 110

lysed (Tabel 3). Gambar. 3 menunjukkan kromatogram massa
sampel tomat, spektrum massa dan waktu retensi senyawa
yang terelusi pada 17,4 menit mendekati identik dengan data
yang diperoleh dari standar naringenin.
Gambar. 4A dan B menyajikan spektrum massa hesperetin
dan naringenin yang diperoleh dari HPLC-MS sampel pulp jeruk
terhidrolisis. Gambar 4A menunjukkan spektrum hesperetin, ion
pseudomolekul 302 dan fragmen 287 (kehilangan metil)
menunjukkan hesperetin dalam sampel oranye, dibandingkan
dengan standar komersial dari hesperetin. Spektrum pada
Gambar 4B, ion pseudomolekul m / z 272 dan ion fragmen m / z 166
dan 152, hampir identik dengan spektrum standar naringenin.
Meskipun adanya phloretin-glycosides (phloridzin dan
phloretin-xyloglucoside) dalam apel
Daging, biji dan kulit telah dilaporkan [19], kami tidak dapat
menghitung phloretin dalam 18 sampel kulit apel atau daging
menggunakan metode ini. Dengan ekstraksi kulit apel dan pulp
sebelum hidrolisis, kami menggunakan HPLC-MS untuk
memverifikasi keberadaan phloretin-glikosida dalam sampel apel.
Kromatogram ion dari m / z 273 dan spektrum massa yang
disisipkan (Gbr. 5) menunjukkan adanya dua phloretinglycosides,
sebuah diglikosida m / z 567 dan monoglikosida m / z 435.
Monoglikosida disarankan menjadi phloridzin (perbedaan 162
sesuai dengan satu molekul glukosa) dan diglikosida menjadi
phloretin-xyloglucoside (perbedaan 294 sesuai dengan satu
glukosa dan satu molekul xilosa). Deteksi phloretin-conjugate
dengan prosedur ini tetapi tidak menggunakan prosedur hidrolisis
asam menunjukkan bahwa phloretin terdegradasi oleh hidrolisis
asam karena

Gambar. 5. Analisis HPLC-MS dari ekstrak kulit apel. Kromatogram ion dengan massa 273 dan spektrum massa diperoleh pada menit 32,0. Ion pseudomolekul m / z 567 dan
ion fragmen m / z 273 menunjukkan xyloglucoside dari phloretin. Spektrum massa pada 34,5 menit menunjukkan phloretin-glukosida phloridzin, sebagai waktu retensi, ion
pseudomolekul. m / z 435 dan ion fragmen pada m / z 273 ditemukan serupa dengan standar komersial.
 U. Justesen dkk. / J. Kromatogr. SEBUAH 799 (1998) 101 - 110 109

ke struktur dihydrochalcone cincin terbuka yang kurang stabil. sayuran dan minuman dapat dilihat pada Tabel 3. Data yang disajikan di
sini adalah nilai rata-rata dari analisis duplikat dari satu atau sejumlah
sampel makanan tertentu. Untuk makanan dengan minat terbatas dalam
3.2. Analisis kuantitatif flavon, flavonol, dan flavanon dalam penelitian ini, karena asupan rata-rata yang rendah di Denmark, kami
makanan hanya menganalisis satu sampel. Seperti yang diharapkan dari data yang
disajikan oleh Hertog et al. [17], quercetin secara keseluruhan adalah
Hasil penghitungan flavonol, flavon dan flavanon pada flavonol utama, diikuti oleh kaempferol. Itu
sejumlah buah,

Tabel 3
Kandungan flavon, flavonol dan flavanon dalam buah, sayur dan minuman disajikan dalam nilai rata-rata 6 deviasi standar (mg / 100 g berat segar)

Subjek makanan n Sebuah Qu erceti n Ka e mpfer ol Hesperetin N cincin e nin Myricetin SEBUAH pigen di Luteolin

apel 18 2.0 6 0 .4

Aprikot 1 2.6

Kacang, hijau 2 1.6 6 0.6

Blackcurrant 3 3.7 6 0.1 0.1 6 0.1

Blueberry 1 7.3

Brokoli 5 3.7 6 2.5 6.0 6 3.4

kubis Brussel 2 0.6 6 0.1 0.9 6 0.1

Seledri, daun 3 75 6 28 20 6 8
Seledri, batang 4 1.6 6 0.9 0,5 6 0.3

ceri 1 1.0

Cowberry 1 21 0,5

Cranberi 1 16 23

Grapefruit, bubur kertas 2 0,5 6 0.1 0.4 6 0.1 1.5 6 0.3 53 6 6

Anggur, biru 2 3.7 6 3.0

Anggur, hijau 1 0.2

kubis 4 12 6 2 47 6 3
Bawang perai 2 3.1 6 1.3

Lemon, bubur kertas 1 17 0,5

Jeruk nipis, bubur 1 0.4 43 3.4

Bawang merah 3 45 6 21

Bawang, musim semi 2 18 6 12 0.6 6 0.6

Bawang, kuning 5 34 6 7
Jeruk, bubur 5 31 6 2 11 6 2
Jus jeruk 3 9.0 6 1.0 0.8

Peterseli 2 1.1 185 6 5 1.1 6 1.1

Pir, kupas 2 4.5 6 2.0

Plum, biru 1 1.5

Kismis merah 2 0.8 6 0.1

Raspberry merah 1 0,5

anggur merah 21 0.8 6 0,5 1.0 6 0.6

Kuntum bunga mawar 1 2.6 1.5

Salad b 5 , 1.0

Stroberi 4 0.6 6 0,5 0,5 6 0.3

Paprika, hijau 2 0,5 0,5 6 0.1

Paprika, merah 2 0.1 6 0.1

Paprika, kuning 2 0.2 6 0.2

teh 8 1.4 6 0,5 1.6 6 0,5 0.4 6 0.2

Tomat 5 1.4 6 0.8 1.5 6 0.4

Sebuah Jumlah s ampl es dianalisis.

b Lima salad berbeda (kubis) dianalisis: kubis selada, kubis Cina, kubis sapi, salad gunung es, savoy. Analisis duplikat dari dua sampel individu dari setiap jenis salad dilakukan, masing-masing dengan kandungan di bawah

1,0 mg / 100 g berat segar.

110 U. Justesen dkk. / J. Kromatogr. SEBUAH 799 (1998) 101 - 110
Hesperetin dan naringenin avanones hadir dalam buah jeruk,
naringenin juga pada tomat. Apigenin flavon dan luteolin
ditemukan hanya ada dalam sejumlah makanan terbatas
seperti seledri, paprika manis (hanya luteolin), dan peterseli
(hanya apigenin). Dalam seledri, kandungan apigenin dan
luteolin di daun kira-kira 40 kali lebih tinggi dari pada
batangnya. Dalam makanan lain, kami juga mengamati
perbedaan tingkat flavonoid di berbagai bagian tanaman.
Misalnya dalam 18 sampel apel, kami menemukan quercetin
hanya terletak di kulit (nilai rata-rata 16 mg / 100 g berat
segar). Tidak ada quercetin (atau di bawah batas deteksi dari
metode ini) yang ditemukan di kulit apel.
Kami menemukan flavonoid tingkat rendah (0,1 mg / 100 g
berat segar) dalam berbagai selada dan kubis. Makanan lain
yang dikonsumsi dalam jumlah besar di Denmark seperti
kentang, wortel, kacang polong, dan bunga kuli ternyata tidak
mengandung flavon, flavonol, atau flavanon.
4. Kesimpulan
Metode ekstraksi, hidrolisis, dan analisis dengan HPLC-MS yang
disajikan di sini telah terbukti spesifik dan sensitif untuk
penghitungan flavonol, flavon, dan flavanon dalam buah-buahan,
sayuran dan minuman tertentu yang dikonsumsi di Denmark. Data
tersebut akan digunakan untuk memperkirakan asupan rata-rata
flavones, flavonol, dan flavanones di Denmark. Hasilnya akan
disajikan di tempat lain.
Ucapan Terima Kasih
Kami berterima kasih kepada Ny. J. Børup dan Tn. G. Rasmussen atas
bantuan teknis yang terampil.
Referensi
[1] MGL Hertog, EJM Feskens, PCH Hollman, MB
Katan, D.Kromhout, Lancet 342 (1993) 1007.
[2] P. Knekt, R. Järvinen, A. Reunanen, J. Maatela, Sdr. Med. J.
312 (1996) 478.
[3] KA Steinmetz, JD Potter, Cancer Penyebab Control 2 (1991)
427.
[4] MGL Hertog, PC Hollman, Eur. J. Clin. Nutr. 50 (1996)
63.
[5] M. Strube, LO Dragsted, JC Larsen. Terjadi secara alami
antitumourigen. I. Fenol tumbuhan. Konferensi Nordik dan Laporan
Kemajuan 605, Dewan Menteri Nordik, 1993. [6] K. Robards, M.
Antolovich, Analis 122 (1997) 11R.
[7] G. Cao, E. Sofc, RL Prior, Free Rad. Biol. Med. 5 (1997)
749.
[8] JA Vinson, YA Dabbagh, MM Serry, J. Jang, J. Agric.
Kimia Makanan. 43 (1995) 2800.
[9] PCH Hollman, JHM de Vries, SD van Leeuwen, MJB
Mengelers, MB Katan, Am. J. Clin. Nutr. 62 (1995) 1276. [10] G.
Paganga, CA Rice-Evans, FEBS Lett. 401 (1997) 78. [11] C. Manach, C.
Morand, O. Texier, M.-L. Favier, G. Agullo,
C. Demigné, F. Régérat, C. Rémésy, J. Nutr. 125 (1995)
1911.
[12] D. Cova, L. De Angelis, F. Giavarini, G. Palladini, R.
Perego, Int. J. Clin. Pharm. Ada. Tox. 30 (1) (1992) 29. [13] MGL Hertog,
PCH Hollman, DPVenema, J. Agric. Makanan
Chem. 40 (1992) 1591.
[14] A. Crozier, MEJ Lean, MS McDonald, J. Chromatogr. SEBUAH
761 (1997) 315.
[15] KAMI Bronner, GR Beecher, J. Chromatogr. A 705 (1995)
247.
[16] MJ Gembala, F. Ibe. Flavonoid dalam sampel diet total Inggris.
Laporan nomor FD 95/2 dari CSL Food Science Laboratory, Norwich,
UK, Juni 1995.
[17] MGL Hertog, PCH Hollman, MB Katan, J. Agric. Makanan
Chem. 40 (1992) 2379.
[18] A. Crozier, MEJ Lean, MS McDonald, C. Black, J. Agric.
Kimia Makanan. 45 (1997) 590.
[19] GA Spanos, RE Wrolstad, J. Agric. Kimia Makanan. 40 (1992)
1478.