Media Farmasi Indonesia Vol 18 No 2 | DOI : 10.53359/mfi.v18i2.

223

Uji Aktivitas Antibakteri Toner Minyak Atsiri Kulit Jeruk Purut (Cytrus
Hystrix Dc) terhadap Propionibacterium Acnes

Clarisa Indriapuspa, Definingsih Yuliastuti*), Pramita Yuli Pratiwi

Jurusan Farmasi, Poltekkes Kemenkes Surakarta
*Email : defie.farmasi@gmail.com

Abstrak
Jerawat yaitu permasalahan kulit yang terjadi dikarenakan peradangan pada folikel
polisebasea. Kulit jeruk purut (Cytrus hystrix DC) mengandung senyawa β-pinen yang
bekerja sebagai antibakteri. Toner merupakan sediaan yang digunakan setelah susu pembersih
dan berfungsi untuk menyegarkan wajah, menghapus sisa make up, dan menyebabkan
pengelupasan ringan pada kulit wajah. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas
antibakteri toner minyak atsiri kulit jeruk purut (Cytrus hystrix DC) terhadap
Propionibacterium acnes. Toner dibuat dalam tiga formulasi dengan variasi konsentrasi
minyak atsiri kulit jeruk purut yaitu F0 (0%), F1 (5%), dan F2 (10%). Pengujian dilakukan
dengan metode difusi paper disk. Hasil rerata diameter zona hambat adalah F0 (1,09 mm)
kategori lemah, F1 (5,93 mm) kategori sedang, F2 (7,96 mm) kategori sedang. Kesimpulan
dari uji statistik didapatkan p˂0,05 menunjukkan terdapat perbedaan yang signifikan sehingga
perbedaan konsentrasi minyak atsiri mempengaruhi diameter zona hambat yang terbentuk

Kata kunci : minyak atsiri, toner, propionibacterium acnes

Abstract
Acne is a skin problem that occurs due to inflammation of the polysebaceous follicles. Kaffir
lime peel (Cytrus hystrix DC) contains β-pinene which works as an antibacterial. Toners are
preparations that are used after cleansing milk and function to refresh the face, remove
makeup residue, and cause mild peeling of the facial skin. This study aims to determine the
antibacterial activity of kaffir lime peel essential oil toner (Cytrus hystrix DC) against
Propionibacterium acnes. The toner was made in three formulations with varying
concentrations of kaffir lime peel essential oil, namely F0 (0%), F1 (5%), and F2 (10%). The
test was carried out using the paper disk diffusion method. The mean diameter of the
inhibition zone was F0 (1.09 mm) in the weak category, F1 (5.93 mm) in the moderate
category, F2 (7.96 mm) in the moderate category. The conclusion from the statistical test was
obtained p˂0.05 indicating that there was a significant difference so that the difference in
essential oil concentrations affected the diameter of the inhibition zone formed.

Keywords : essential oil, toner, propioibacterium acnes

1. PENDAHULUAN Beberapa aspek yang menyebabkan

Jerawat adalah masalah kulit yang
diindikasikan dengan komedo, papula,
pustula, dan kista. Ini disebabkan oleh
peradangan pada folikel polisebaceous.
jerawat yaitu sebum, bakteri, makanan,
iklim, psikologi dan kosmetik (Narulita
2017). Tumbuhan obat digunakan untuk
menyembuhkan penyakit oleh 80%
masyarakat (Kursia, dkk., 2016). Salah
101
 Media Farmasi Indonesia Vol 18 No 2 | DOI : 10.53359/mfi.v18i2.223
satu tumbuhan yang dapat digunakan
untuk menyembuhkan jerawat dan
memiliki aktivitas antibakteri adalah buah
jeruk purut (Cytrus hystrix DC). Kulit
jeruk purut (Cytrus hystrix DC)
mengandung minyak atsiri yang berfungsi
sebagai antibakteri, antijamur dan tonic.
Komponen utamanya adalah β-pinene
(21,44%), sitronelal (20,91%), limonene
(12,59%), dan terpinene-4-ol (11,93%).
Dari komponen utama tersebut, β-pinene
merupakan komponen yang memiliki efek
antibakteri (Jamaluddin, dkk., 2017).
Propionibacterium acnes adalah
jenis bakteri gram positif dengan
peptidoglikan tebal, berbentuk batang yang
dapat menyebabkan jerawat. Enzim
hidrolitik yang diproduksi oleh
Propionibacterium acnes menyebabkan
kerusakan pada folikel polisebaceous
(Hafsari, dkk., 2015). Minyak atsiri kulit
jeruk purut yang terbukti memiliki efek
antibakteri kemudian diformulasikan
dalam sediaan toner. Toner adalah sediaan
yang digunakan setelah susu pembersih
dan berfungsi untuk menyegarkan kulit,
menghapus sisa makeup dan menyebabkan
pengelupasan ringan pada kulit (Khanza
dan Mardhiyah 2017).
2. METODE
Jenis dan Rancangan Penelitian
Jenis penelitian yang digunakan yaitu
eksperimental laboratorik.
Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian bertempat di Laboratorium
terpadu kampus 3 Poltekkes Kemenkes
Surakarta dan Laboratorium Mikrobiologi
FK UNS pada Januari-April 2023.
Alat dan Bahan
Penelitian ini menggunakan alat
antara lain timbangan analitik (Kern),
kertas perkamen, sendok tanduk, batang
pengaduk (Iwaki), mortir dan stamper
(OneMed), cawan petri (Pyrex), tabung
reaksi (Iwaki), rak tabung reaksi,
erlenmeyer (Pyrex), beaker glass (Pyrex),
pipet tetes, mikropipet (Dragonlab), yellow
tip dan blue tip, hotplate (Thermo),
autoklaf (GEA), oven (Memmert), Laminar
Air flow (biotek), jarum ose, pinset,
bunsen, paper disk, jangka sorong, dan
incubator (Memmert).
Bahan yang digunakan yaitu toner
dalam 3 formula, media MHA (Mueller
Hinton Agar) darah, aquadest, etanol 70%,
inokulasi bakteri Propionibacterium acnes,
klindamisin, tissue, kapas, dan koran.
Prosedur Kerja
Persiapan Bahan Penelitian
Bahan aktif yang digunakan yaitu minyak
atsiri kulit jeruk purut yang dibeli dari
Lansida Herbal Technology di Purbayan,
Kecamatan Kotagede, Kota Yogyakarta
dengan syarat terdapat CoA (Certificate of
Analyze).
Pembuatan Sediaan Toner
Pembuatan toner yaitu menimbang CMC
Na sebanyak 0,25 gram, memasukkan
kedalam mortir, kemudian menambahkan
air hangat sebanyak 5 ml dan mengaduk
hingga homogen. Selanjutnya menimbang
metil paraben sebanyak 0,18 gram dan
menambahkan sedikit air hangat agar bisa
larut. Langkah selanjutnya yaitu
menimbang gliserin sebanyak 5 gram,
polisorbat 80 sebanyak 1 gram dan
propilenglikol sebanyak 10 gram lalu
memasukkan dalam campuran yang telah
dibuat kemudian menambahkan minyak
atsiri kulit jeruk purut sebanyak F0 0 gram
; F1 5 gram ; F2 10 gram dan
menambahkan aquadest hingga 100 ml.
Terakhir, memasukkan sediaan yang telah
dibuat kedalam wadah (Khanza dan
Mardhiyah 2017).
Sterilisasi Alat
Mencuci alat kemudian membungkus
dengan Koran dan di sterilkan pada
autoclave dengan suhu 121°C selama 15
menit (Zafarani 2020).
102
 Media Farmasi Indonesia Vol 18 No 2 | DOI : 10.53359/mfi.v18i2.223
Pembuatan Media MHA darah
34 g media MHA dilarutkan dalam
1000mL air suling dan disterilkan pada
autoclave, kemudian ditambahkan 5%
darah domba segar (Dewi 2019).
Peremajaan Propionibacterium acnes
Mengambil bakteri uji menggunakan jarum
ose yang telah disterilkan, kemudian
menggoreskan secara zig-zag pada
medium MHA darah yang sudah memadat.
Inkubasi selama 5x24 jam pada suhu 37℃
(Sa`adah, dkk., 2020).
Pembuatan Suspensi Bakteri
Propionibacterium acnes
Melarutkan biakan murni dengan NaCl
0,9% steril kemudian dibandingkan dengan
standar Mc Farland 0,5 (Astriani, dkk.,
2021).
Uji Aktivitas Antibakteri
Pengujian ini menggunakan kertas cakram
6 mm. Kertas cakram ditetesi sediaan toner
dan klindamisisn sebanyak 20µL.
Meletakkan kertas cakram tersebut pada
cawan petri yang berisi media MHA darah
yang telah diolesi dengan suspensi
Propionibacterium acnes menggunakan
kapas lidi steril. Inkubasi pada temperatur
37℃ selama 5x24 jam (Aran, dkk., 2021).
3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengujian aktivitas antibakteri
sediaan toner dengan bahan aktif berupa
minyak atsiri kulit jeruk purut yang
diperoleh dari Lansida Herbal Technology
di Purbayan, Kecamatan Kotagede, Kota
Yogyakarta dengan syarat terdapat CoA
(Certificate of Analyze) yang dibuat
kedalam 3 formula. Sediaan toner yang
telah dibuat kemudian dilakukan pengujian
organoleptis dan mendapatkan hasil toner
memiliki warna bening pada F0 atau
kontrol basis dan memiliki warna putih
pada F1 dan F2 dikarenakan terdapat
penambahan minyak atsiri pada F1
sebanyak 5% dan F2 sebanyak 10%. Hasil
uji organoleptik warna telah sesuai dengan
penelitian Kusumawati, dkk (2018) yang
menyatakan bahwa konsentrasi minyak
atsiri yang semakin tinggi mempengaruhi
warna sediaan yang semakin putih
(Kusumawati, dkk., 2018). Sediaan toner
yang dibuat berbentuk cair dan memiliki
bau khas jeruk purut yang disebabkan
karena kandungan senyawa linalool
(Wardana dan Fathurrahman 2018).
Uji aktivitas antibakteri dilakukan
dengan menggunakan kultur bakteri dari
Laboratorium Mikrobiologi FK UNS.
Sampel pada penelitian ini berupa toner
yang dibuat dalam 3 formula yaitu F0
(0%), F1 (5%), F2 (10%), kontrol positif
yaitu klindamisin disk dan kontrol negatif
yaitu aquadest steril. Metode yang
digunakan yaitu metode difusi cakram,
karena lebih mudah dan cepat dengan
menjenuhkan kertas cakram pada bahan uji
dan meletakkannya pada media yang telah
ditanami bakteri (Nurhayati, dkk., 2020).
Alat dan bahan yang akan
digunakan disterilkan menggunakan
autoclave agar tidak terkontaminasi oleh
mikroorganisme lain. Cara pengujian
dengan meletakkan kertas cakram yang
telah ditetesi dengan bahan uji diatas
media MHA darah yang telah diolesi
suspensi Propionibacterium acnes. Media
MHA digunakan dalam pengujian
antibakteri karena sebagai media terbaik
untuk pengujian antibakteri, selain itu
World Health Organization (WHO) juga
merekomendasikan media MHA untuk
pengujian antibakteri terutama bakteri
aerob dan anaerob (Sunadi Putra I.M.A.
2015). Darah domba segar ditambahkan
pada media MHA karena
Propionibacterium acnes memerlukan
komponen kompleks seperti darah dan
digunakan untuk menyesuaikan dengan
sifat bakteri Proponibacterium acnes yaitu
menarik komponen leukosit dalam darah
(Kemoatraktan). Setelah itu, inkubasi pada
suhu 37˚C selama 5x24 jam dan ukur
diameter zona hambat yang terbentuk
(Nugrahani, dkk., 2020).
103
 Media Farmasi Indonesia Vol 18 No 2 | DOI : 10.53359/mfi.v18i2.223

Aktivitas antibakteri dapat Data dari besar zona hambat

dibedakan menjadi 4 tingkatan berdasarkan kemudian dianalisis menggunakan SPSS.
diameter zona hambat yang terbentuk Pertama dilakukan pengujian
yaitu, lemah (˂5 mm), sedang (5-10 mm), menggunakan test of normality, pada test
kuat (>10 mm), dan sangat kuat (>20 mm) of normality didapatkan hasil bahwa data
(Emelda, dkk., 2021). Berdasarkan hasil terdistribusi normal. Selanjutnya dilakukan
penelitian menunjukkan bahwa F0 atau pengujian homogeneity of variance, pada
kontrol basis terdapat diameter zona pengujian homogeneity of variance
hambat dengan rerata 1,09 mm (lemah). didapatkan hasil bahwa data bersifat
Hal ini disebabkan karena F0 atau kontrol homogen. Berdasarkan pengujian tersebut,
basis mengandung metil paraben yang dapat dilanjutkan dengan pengujian
berfungsi sebagai pengawet yang dapat parametrik OneWay ANOVA. Pada
menghambat pertumbuhan pengujian OneWay ANOVA didapatkan
mikroorganisme bakteri (Rizki dan nilai signifikansi 0,000 sehingga H0
Ferdinan 2020). Sediaan F1 dan F2 ditolak dan H1 diterima, yang berarti
memiliki diameter zona hambat yang lebih sediaan toner minyak atsiri kulit jeruk
besar yaitu 5,93 mm (sedang) untuk F1 dan purut (Cytrus hystrix DC) yang dibuat
7,96 mm (sedang) untuk F2. Hal ini dapat dalam 3 formula berpengaruh terhadap
terjadi karena penambahan minyak atsiri pertumbuhan bakteri Propionibacterium
sebanyak 5% pada F1 dan 10% pada F2 acnes. Kemudian, dilakukan pengujian
dimana minyak atsiri kulit jeruk purut lanjutan menggunakan Post Hoc, pada
mengandung β-pinen yang bekerja sebagai pengujian Post Hoc didapatkan bahwa F0
antibakteri (Jamaluddin, dkk., 2017). vs F1, F0 vs F2, F0 vs K+, F1 vs K+, dan
Pada kontrol positif rerata zona F2 vs K+ terdapat perbedaan signifikan,
hambat sebesar 26,25 mm (sangat kuat). tetapi antara F1 dengan F2 tidak terdapat
Kontrol positif digunakan untuk perbedaan signifikan.
membandingkan kemampuan toner minyak
atsiri kulit jeruk purut (Cytrus hystrix DC) Tabel
terhadap Propionibacterium acnes. Formula toner minyak atsiri kulit jeruk
Klindamisin dipilih sebagai kontrol positif purut dapat dilihat pada Tabel 1
karena antibiotik ini biasanya digunakan
untuk terapi jerawat dengan cara Tabel 1. Formula Toner
memodifikasi atau menghambat No Bahan
Fungsi Formulasi(%)
pertumbuhan sintesis protein bakteri Bahan F0 F1 F2
penyebab jerawat (Hasanah dan Novian 1 Minyak Zat aktif - 5 10
atsiri kulit
2020). Hasil perlakuan aquadest steril jeruk purut
sebagai kontrol negatif tidak terdapat zona 2 Polisorbat Pengemulsi 1 1 1
hambat karena aquadest steril hanya 80
digunakan sebagai pelarut dalam 3 Gliserin Pelembab 5 5 5
pembuatan toner (Hasanah dan Novian 4 Metilparab Pengawet 0,18 0,18 0,18
en
2020). Hasil menunjukkan bahwa toner 5 Na CMC Pengental 0,25 0,25 0,25
konsentrasi 0%, 5% dan 10% memiliki dan pengikat
efek antibakteri terhadap P.acnes. 6 Propilenglik Penstabil zat 10 10 10
Konsentrasi dengan zona hambat ol yang tidak
berbanding lurus, karena dengan larut air
7 Aquadest Pelarut Ad Ad Ad
meningkatnya konsentrasi zat akan 100 100 100
meningkat senyawa yang berfungsi sebagai
antibakteri (Hasanah dan Novian 2020). Hasil uji organoleptis dapat dilihat pada
Tabel 2
104
 Media Farmasi Indonesia Vol 18 No 2 | DOI : 10.53359/mfi.v18i2.223

Tabel 2. Hasil Uji Organoleptis 5. DAFTAR PUSTAKA

Uji
Organoleptik F0 F1 F2 Aran, Diana Hala, Yeni Mariani, dan
Warna Bening Putih Putih Fathul Yusro. (2021). Minyak Atsiri
Tidak Khas jeruk Khas jeruk
Bau berbau purut purut
Daun Jeruk Purut (Citrus Hystrix) dan
Bentuk Cair Cair Cair
Bioaktivitasnya Terhadap Bakteri
Hasil uji antibakteri dapat dilihat pada Propionibacterium Acnes dan
Tabel 3 Pseudomonas Aeruginosa. Bioma :
Jurnal Biologi Dan Pembelajaran
Tabel 3. Hasil Uji Antibakteri Biologi. 6(1).pp. 1–10.
Diameter Zona Astriani, Ni Komang, Dewi Chusniasih,
Hambat (mm) Rata-rata dan Selvi Marcellia. (2021). Uji
Sampel R1 R2 R3 ±SD Kategori Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun
F0 0,74 0,79 1,76 1,09±0,57* Lemah Jeruk Purut (Citrus Hystrix) Terhadap
F1 5,42 7,29 5,10 5,93±1,18* Sedang Bakteri Escherichia Coli dan
F2 7,13 8,98 7,77 7,96±0,93* Sedang Staphylococcus Aureus. Jurnal Ilmu
Kontrol Sangat Kedokteran Dan Kesehatan. 8(3). pp.
+ 26,10 25,51 27,15 26,52±0,83* Kuat 291–301.
Kontrol
- 0 0 0 0 - Dewi, Asiska Permata. (2019). Uji
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun
Senduduk (Melastoma Affine D.Don)
Hasil uji statistik dapat dilihat pada Tabel Terhadap Staphylococcus Aureus.
4 JOPS (Journal Of Pharmacy and
Tabel 4. Hasil Uji Statistik Science). 3(1). pp. 10–14.
Nama Uji Sig Emelda, Eka Asriani Safitri, dan Annisa
Uji OneWay ANOVA 0,000 Fatmawati. (2021). Aktivitas Inhibisi
Uji Post Hoc F0 vs F1 0,001 Ekstrak Etanolik Ulva Lactuca
F0 vs F2 0,000 Terhadap Bakteri Staphylococcus
F0 vs KP 0,000
Aureus. Pharmaceutical Journal of
F1 vs F2 0,098
F1 vs KP 0,000 Indonesia. 7(1). pp. 43–48.
F2 vs KP 0,000 Hafsari, Anggita Rahmi, Tri Cahyanto,
Toni Sujarwo, dan Rahayu Indri
4. KESIMPULAN Lestari. (2015). Uji Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Daun Beluntas
Rerata besar diameter zona hambat pada (Pluchea Indica (L.) Less.) Terhadap
F0 yaitu 1,09 mm yang tergolong lemah, Propionibacterium acnes Penyebab
F1 5,93 mm yang tergolong sedang, F2 Jerawat. Jurnal UIN Sunan Gunung
7,96 mm yang tergolong sedang, kontrol Jati. 9(1). pp. 141–61.
positif 26,25 mm yang tergolong sangat Hasanah, Nur, dan Dede Rival Novian.
kuat, dan kontrol negatif tidak terdapat (2020). Daya Hambat Ekstrak Daun
diameter zona hambat. Kesimpulan uji Belimbing Wuluh (Averrhoa Bilimbi
statistik yaitu terdapat perbedaan yang L) Terhadap Bakteri Penyebab
signifikan antara formula toner terhadap Jerawat (Propionibacterium acnes).
aktivitas antibakteri Propionibacterium Jurnal Poltek Tegal. 9(1). pp. 46–53.
acnes, yang berarti perbedaan konsentrasi Jamaluddin, Nasrullah, Maimunah Hindun
minyak atsiri memengaruhi diameter zona Pulungan, dan Warsito. (2017). Uji
hambat yang terbentuk. Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri
Jeruk Purut (Citrus hystrix DC)
Terhadap Klebsiella Pneumoniae
105
 Media Farmasi Indonesia Vol 18 No 2 | DOI : 10.53359/mfi.v18i2.223
ATCC. Jurnal Teknologi Dan
Manajemen Agroindustri. 6(2). pp.
61–66.
Khanza, Azizah., dan Mardhiyah. (2017).
Mutu Fisik Sediaan Toner Kefir.
Akademi Farmasi Putra Malang. pp.
1–8.
Kursia, S., Julianri, S, Lebang.,
Burhanuddin, Taebe., Asril, Burhan.,
Wa. O.R.Rahim. 2016. Uji Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Etilasetat Daun
Sirih Hijau ( Piper betle L .) terhadap
Bakteri Staphylococcus epidermidis.
IJPST. 3(2).
Kusumawati, Anggun Hari, Lidya
Ameliana, Yudi Wicaksono, dan Evi
Umayah Ulfa. (2018). Uji Aktivitas
Antijerawat dan Karakteristik Fisik
Emulgel Minyak Atsiri Daun Jeruk
Purut (Citrus hystrix DC) Dengan
Basis Gel HPMC Terhadap
Propionibacterium Acnes.” Jurnal
Ilmu Farmasi. 3(1). pp. 145–58.
Narulita, Windy. (2017). Uji Efektivitas
Ekstrak Daun Binahong (Anredera
Cordifolia) Dalam Menghambat
Pertumbuhan Bakteri
Propionibacterium Acnes Secara In
Vitro. Skripsi UIN Raden Intan
Lampung.
Nugrahani, Arsa Wahyu, Febriani
Gunawan, dan Akhmad Khumaidi.
(2020). Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Etanol Daun Kapas (Gossypium
Barbadense L.) Terhadap
Staphylococcus epidermidis Dan
Propionibacterium acnes. Jurnal
Farmasi Udayana. 9(1). pp. 52–61.
Nurhayati, Lilih Siti, Nadhira Yahdiyani,
dan Akhmad Hidayatulloh. (2020).
Perbandingan Pengujian Aktivitas
Antibakteri Starter Yogurt Dengan
Metode Difusi Sumuran Dan Metode
Difusi Cakram. Jurnal Teknologi
Hasil Peternakan. 1(2). pp. 41–46. d
Rizki, Fitri Sri, dan Ade Ferdinan. (2020).
Uji Daya Hambat Antibakteri Salep
Ekstrak Etanol Daun Pandan Hutan
(Freycinetia Sessiliflora Rizki.)
Terhadap Pertumbuhan Bakteri
Staphylococcus epidermidis. Jurnal
Ilmiah Ibnu Sina. 5(2). pp. 376–86.
Sa`adah, Hayatus, Supomo, dan Musaenah.
(2020). Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Air Kulit Bawang Merah (Allium
Cepa L.) Terhadap Bakteri
Propionibacterium acnes. Jurnal
Riset Kefarmasian Indonesia. 2(2).
pp. 80–88.
Sunadi Putra I.M.A. (2015). Uji Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Sirsak (Annonae Muricata L.)
Dengan Metode Difusi Agar Cakram
Terhadap Escherichia coli. Jurnal
Ilmiah Medicamento. 1(1). pp. 15–19.
Wardana, Ganar Eka, dan M. Qisth.
Fathurrahman. (2018). Pengambilan
Minyak Atsiri Dari Biji Ketumbar
(Coriandrum Sativum) Menggunakan
Etanol Dengan Metode Ekstraksi Dan
Distilasi. Skripsi Fakultas Vokasi
Institut Teknologi Sepuluh Nopember
Surabaya.
Zafarani, Welly. (2020). Formulasi Dan
Uji Aktivitas Antibakteri Spray Hand
Sanitizer Dari Ekstrak Daun Jambu
Biji ( Psidium Guajava L .) Terhadap
Bakteri Staphylococcus aureus.
Skripsi Universitas Perintis Indonesia
Padang.
106