U K S I

PR OD
S U L I N
IN
OLEH:
LALU SANIK WAHYU FADIL AMRULLOH
LALU UNDRUS YUDISTIA MAHENDRA G.
MATSNA YULIANA
MELLANI LESTARI
MELISA WIDYANI
MUTIA LEOGENY CHAIRUNISA
 SEJARAH INSULIN
Insulin pertama kali di ekstraksi dari jaringan
pankreas anjing pada tahun 1921 oleh para ahli
fisiologi asal kanada Sir Federick Glant Banting dan
Charles Hebert Best serta ahli fisiologi asal Inggris
John James Richard Macleod. Seorang ahli boikimia
James Betram Collip kemudian memproduksi
dengan tingkat kemurnian yang cukup baik untuk
digunakan sebagai obat pada manusia. Pada tahun
1965 insulin manusia telah berhasil disintesis
secara kimia.
 PENGERTIAN INSULIN
Efeknya:
Insulin adalah
hormon utama yang 1. Tingkat gula
mengendalikan darah menurun.
glukosa dari darah ke
dalam sebagian 2. Iritasi kulit
besar sel (terutama
3. Hipoglikemia
sel otot dan lemak,
tetapi tidak pada sel 4. Kekacauan
sistem saraf pusat). metabolisme. Ex:
Asidosis.
 STRUKTUR INSULIN
Secara kimia, insulin adalah protein kecil sederhana
yang terdiri dari 51 asam amino, 30 di antaranya
merupakan satu rantai polipeptida, dan 21 lainnya
yang membentuk rantai kedua.
 JENIS-JENIS INSULIN
Berdasarkan lama kerjanya, insulin dibagi
menjadi 4 macam, yaitu:
1. Insulin kerja singkat Insulin regular
(Crystal Zinc Insulin / CZI ).
2. Insulin kerja menengah Netral Protamine
Hegedorn ( NPH ), Monotard, Insulatard.
3. Insulin kerja panjang Protamine Zinc
Insulin ( PZI ), Ultratard.
4. Insulin infasik (campuran) Mixtard 30 / 40.
Cont...
MEKANISME SEKRESI INSULIN
 FUNGSI INSULIN
Fungsi utama insulin untuk melawan
beberapa fungsi hormon yang
menyebabkan hiperglikemia dan
sekaligus bersamaan dalam
mempertahankan jumlah glukosa dalam
darah tetap normal.
 Cont...
Hormon insulin juga berfungsi untuk:
Merangsang terjadinya sintesis asam lemak (fatty
acids) yang mana asetil koenzim-A di konversi
menjadi asam lemak (lipogenesis).
Meningkatkan pangangkutan asam amino
kedalam sel.
Mengurangi terjadinya pemecahan lemak (lipid)
(lipolisis).
Memodulasi transkripsi dan merangsang
pemindahan protein, sintesis DNA, pertumbuhan
dan penggandaan sel yang semuanya terkait
denga fungsi pertumbuhan.
CARA PEMBERIAN INSULIN
Intravena : Penyuntikan obat suntikan ke
dalam pembuluh darah.
Lokasi : Pada vena-vena anggota gerak
Sudut : 15 - 30

Intramuskuler : Penyuntikan obat ke dalam

jaringan otot.
Lokasi : Otot pangkal lengan, otot paha bagian
luar, otot bokong.
Sudut : 90

Subkutan : Penyuntikan obat di bawah kulit.

Lokasi : Lengan atas sebelah luar, paha bagian
luar, daerah dada.
Sudut : 45
TEMPAT INJEKSI INSULIN
 PRODUKSI INSULIN DARI
MIKROORGANISME

Eschericia coli

Eschericia coli Saccharomyces cerevisiae

Pichia pastoris
PRODUKSI INSULIN DARI E. coli

Pengkodean untuk insulin rantai A dan rantai B

dilakukan secara terpisah pada E. coli. Setelah
diekspresikan, kedua rantai kemudian
dimurnikan dan diinkubasi di bawah reaksi
optimum. Pendekatan lain melibatkan ekspresi
dari disintesis cDNA koding tunggal secara
kimia untuk proinsulin manusia dalam E. coli
yang diikuti dengan pemurnian dan eksisi
berikutnya pada C-peptida oleh pencernaan
proteolitik. Pendekatan ini lebih efisien dan
nyaman untuk produksi insulin skala besar.
PRODUKSI INSULIN DARI E. coli
Lispro yang dikembangkan oleh Eli Lilly, adalah analog insulin yang
dapat bertindak dengan cepat merupakan analog insulin pertama
yang mendapatkan persetujuan untuk digunakan pada terapi pada
tahun 1996. Lispro adalah insulin yang direkayasa sedemikian rupa
sehingga ia memiliki asam amino dengan urutan yang sama pada
insulin asli tapi memiliki inverse urutan prolin-lisin pada posisi 28 dan
29 dari rantai B, yang mengakibatkan berkurangnya interaksi
hidrofobik dan dengan demikian dapat mencegah formasi dimer.
Untuk produksi komersial insulin Lispro, cDNA encoding
disintetisuntuk Lys B28- Pro proinsulin manusia B29 diekspresikan
dalam E. coli dan insulin Lispro itu dipotong secara proteolitik dari
proinsulin dengan menggunakan tripsin dan Carboxypeptidase.
PRODUKSI INSULIN DARI E. coli
 PRODUKSI INSULIN DARI
YEAST
Ragi adalah host yang lebih disukai untuk ekspresi
berbagai protein heterolog yang memerlukan modifikasi
pasca-translasi untuk aktivitas biologisnya.
Strain Ragi alternative selain S. cerevisiae yaitu Pichia
pastoris memberikan keuntungan besar pada glikosilasi
protein yang disekresikan. Glikoprotein yang diproduksi di
Pichia pastoris mungkin lebih cocok untuk digunakan
terapi pada manusia.
Ekspresi protein heterolog yang sangat tinggi dapat
dicapai dalam Pichia pastoris, yang mungkin merupakan
sekitar 30% dari total protein selular yang sangat tinggi
dibandingkan dengan S. cerevisiae. Karena itu, Pastoris
Pichia bisa menjadi alternatif yang menarik untuk produksi
rekombinan insulin dan insulin analog skala besar.
Cont...
 KESIMPULAN
WHO memperkirakan pada 20 tahun kedepan penjualan
insulin akan tumbuh dari $ 12 miliar menjadi $ 54 miliar
secara global. Adanya perubahan pola makan dan gaya hidup
sehingga menyebabkan peningkatan drastis diabetes di
seluruh dunia. Oleh karena itu, insulin rekombinan manusia
sangat dibutuhkan untuk diproduksi lebih banyak terutama
menggunakan E. coli dan Saccharomyces cereviciae yang
dapat digunakan untuk terapi pada manusia. Strategi lain
untuk meningkatkan produksi insulin yaitu dengan
menggunakan inang yang berbeda selain E. coli dan
Saccharomyces cereviciae untuk produksi insulin.
THANK
YOU