PERTUMBUHAN MIKROBA

MIKROBIOLOGI PERAIRAN
 PERTUMBUHAN
• PERTUMBUHAN PADA ORGANISME YANG MAKRO
MERUPAKAN PROSES BERTAMBAHNYA UKURAN ATAU
SUBTANSI ATAU MASA ZAT SUATU ORGANISME,
MISAL : BERTAMBAH TINGGI, BERTAMBAH BESAR

PADA ORGANISME BERSEL SATU PERTUMBUHAN LEBIH

DIARTIKAN SEBAGAI PERTUMBUHAN KOLONI, YAITU
PERTAMBAHAN JUMLAH KOLONI YANG SEMAKIN BESAR

PADA MIKROBA DIARTIKAN SEBAGAI PERTAMBAHAN JUMLAH

SEL MIKROBA ITU SENDIRI.
 WAKTU GENERASI
• ADALAH : SELANG WAKTU YANG DIBUTUHKAN
SEL UNTUK MEMBELAH DIRI

• TIAP SPESIES BAKTERI MEMILIKI WAKTU

GENERASI YANG BERBEDA-BEDA,

• CONTOH: ESCHERICHIA COLI, BAKTERI UMUM

YANG DIJUMPAI DI SALURAN PENCERNAAN
DAN DI TEMPAT LAIN, MEMILIKI WAKTU
GENERASI 15-20 MENIT
 KURVA PERTUMBUHAN BAKTERI
KURVA TUMBUH BAKTERI DIBUAT UNTUK
MENGGAMBARKAN KARAKTERISTIK
PERTUMBUHAN BAKTERI DALAM SUATU MEDIUM

Ada 4 fase, yaitu :

1. Fase lag
2. Fase log
(eksponensial)
3. Fase stasioner
4. Fase kematian
 KURVA PERTUMBUHAN BAKTERI
• FASE LAG
PADA FASE TIDAK TERJADI PENAMBAHAN JUMLAH
SEL, TETAPI AKTIVITAS METABOLISME SEDANG
BERLANGSUNG UNTUK PERSIAPAN PEMBELAHAN
SEL. DISEBUT JUGA SEBAGAI FASE ADAPTASI
(PENYESUAIAN)

• FASE LOG (EKSPONENSIAL)

POLA PERTUMBUHAN YANG SEIMBANG DAN CEPAT.
SEL-SEL BAKTERI MEMBELAH SECARA TERATUR
DENGAN LAJU YANG KONSTAN, TERGANTUNG PADA
KOMPOSISI MEDIUM KULTUR DAN KONDISI INKUBASI
SAMPAI NUTRIEN HABIS.
 KURVA PERTUMBUHAN BAKTERI
• FASE STASIONER
TERJADI PENUMPUKAN RACUN AKIBAT METABOLISME SEL DAN
KANDUNGAN NUTRIEN MULAI HABIS, AKIBATNYA TERJADI
KOMPETISI NUTRISI SEHINGGA BEBERAPA SEL MATI
SEDANGKAN YANG LAINNYA TETAP HIDUP. PADA FASE INI
BAKTERI MASIH MELAKUKAN AKTIVITAS MEMPRODUKSI
METABOLIT SEKUNDER SEPERTI ANTIBIOTIK.

• FASE KEMATIAN
GRAFIK MENUNJUKKAN PENURUNAN SECARA TAJAM KARENA
MERUPAKAN AKHIR DARI SUATU INDIVIDU YANG KEMBALI KE
TITIK AWAL.
PERTUMBUHAN MIKROBA
DIPENGARUHI OLEH :

1. FAKTOR FISIK

2. FAKTOR KIMIA
 FAKTOR FISIK FAKTOR KIMIA

• TEMPERATUR • KARBON
• PH • NITROGEN
• OKSIGEN • SULFUR
• POSFOR
 TEMPERATUR
SALAH SATU FAKTOR PENTING YANG MEMPENGARUHI
PERTUMBUHAN MIKROORGANISME.
SUHU DAPAT MEMPENGARUHI MIKROBA DALAM DUA
CARA YANG BERLAWANAN :
1) APABILA SUHU NAIK MAKA KECEPATAN METABOLISME
NAIK DAN PERTUMBUHAN DIPERCEPAT. SEBALIKNYA
APABILA SUHU TURUN, MAKA KECEPATAN METABOLISME
AKAN MENURUN DAN PERTUMBUHAN DIPERLAMBAT.
2) APABILA SUHU NAIK ATAU TURUN SECARA DRASTIS,
TINGKAT PERTUMBUHAN AKAN TERHENTI, KOMPENEN
SEL MENJADI TIDAK AKTIF DAN RUSAK, SEHINGGA SEL-
SEL MENJADI MATI
 TEMPERATUR OPTIMUM
PERTUMBUHAN MIKROBA
Psikrofil bakteri yang dapat tumbuh pada
suhu 0 - 200C. Suhu optimumnya sekitar
150C. Karakteristik istimewa dari semua
bakteri psikrofil adalah akan tumbuh pada
suhu 0 – 50C.

Mesofil adalah bakteri yang dapat tumbuh

pada suhu 20 - 450C. karakteristik istimewa
dari semua bakteri mesofil adalah
kemampuannya untuk tumbuh pada suhu
tubuh (370C) dan tidak dapat tumbuh pada
suhu di atas 450C.

Termofil adalah bakteri yang dapat tumbuh

pada suhu 350C atau lebih
 DERAJAT KEASAMAN (pH)
• PENGARUH pH TERHADAP PERTUMBUHAN TIDAK KALAH
PENTINGNYA DARI PENGARUH TEMPERATUR.
• ADA pH MINIMUM, pH OPTIMUM, DAN pH MAKSIMUM.
RENTANG pH BAGI PERTUMBUHAN BAKTERI ANTARA 4 – 9
DENGAN pH OPTIMUM 6,5 – 7,5. JAMUR LEBIH MENYUKAI pH
ASAM, RENTANG pH PERTUMBUHAN JAMUR DARI 1 – 9 DAN
pH OPTIMUMNYA 4 – 6. SELAMA PERTUMBUHAN pH DAPAT
BERUBAH, NAIK ATAU TURUN, BERGANTUNG KEPADA
KOMPOSISI MEDIUM YANG DIURAIKAN.
• BILA INGIN pH KONSTAN SELAMA PERTUMBUHAN HARUS
DIBERIKAN LARUTAN PENYANGGA ATAU BUFFER YANG SESUAI
DENGAN MEDIA DAN JENIS MIKROORGANISME.
 OKSIGEN
• MIKROORGANISME MEMILIKI KARAKTERISTIK SENDIRI-
SENDIRI DI DALAM KEBUTUHANNYA AKAN OKSIGEN.
• BERDASARKAN KEBUTUHAN OKSIGEN, MIKROORGANISME
DIBAGI DALAM TIGA KELOMPOK :
1. AEROBIK : HANYA DAPAT TUMBUH APABILA ADA
OKSIGEN BEBAS.
2. ANAEROB : HANYA DAPAT TUMBUH APABILA TIDAK ADA
OKSIGEN BEBAS.
3. ANAEROB FAKULTATIF : DAPAT TUMBUH BAIK DENGAN
ATAU TANPA OKSIGEN BEBAS
4. MIKROAEROFILIK : DAPAT TUMBUH APABILA ADA
OKSIGEN DALAM JUMLAH KECIL
OKSIGEN
 FAKTOR KIMIA YANG
MEMPENGARUHI PERTUMBUHAN

• KARBON :
- SUMBER ENERGI
- STRUKTUR ORGANIK MOLEKUL
- BAKTERI YANG BERSIFAT KEMOHETEROTROP
MENGGUNAKAN KARBON ORGANIK
- BAKTERI AUTOTROP MENGGUNAKAN CO2
 FAKTOR KIMIA YANG
MEMPENGARUHI PERTUMBUHAN

• NITROGEN :
- TERDAPAT DI DALAM ASAM AMINO DAN PROTEIN
- UMUMNYA BAKTERI BERPERAN SEBAGAI DEKOMPOSER
PROTEIN
- BEBERAPA BAKTERI MENGGUNAKAN NH4+ ATAU NO3-
- HANYA SEDIKIT BAKTERI YANG MENGGUNAKAN N2
UNTUK FIKSASI NITROGEN
 FAKTOR KIMIA YANG
MEMPENGARUHI PERTUMBUHAN

• SULFUR
- TERDAPAT DALAM ASAM AMINO, TIAMIN, DAN BIOTIN
- BEBERAPA BAKTERI MENGGUNAKAN SO42- ATAU H2S

• POSFOR
-TERDAPAT DI DALAM DNA, RNA, MEMBRAN, DAN
ATP
- PO43- MERUPAKAN SUMBER POSFOR
OKSIGEN DAPAT BERSIFAT LETAL UNTUK
BEBEBERAPA MIKROORGANISME
• HARUS DINETRALISIR TERLEBIH DAHULU OLEH ENZIM :
- SUPEROKSIDA DISMUTASE
- KATALASE
- PEROKSIDASE

• JIKA MIKROORGANISME TIDAK MENGHASILKAN ENZIN

TERSEBUT MAKA ORGANISME TERSEBUT BERSIFAT
ANAEROB.
TOKSIK YANG DIBENTUK OKSIGEN
 TEKNIK KULTUR KHUSUS
• BAKTERI MIKROAEROFILIK
• TUMBUH DENGAN BAIK PADA LEVEL O2 DI
BAWAH NORMAL DAN LEVEL CO2 DI ATAS
NORMAL

• ATMOSFIR NORMAL
- 21 % O2
-.0,3 - 3 % CO2
Meningkatkan level CO2 untuk menumbuhkan bakteri
Mikroaerofilik dengan metode Candle Jar

16 % O2
4% CO2
ANAEROBIC JAR MENGELIMINASI OKSIGEN
UNTUK MENUMBUHKAN BAKTERI ANAEROB
 MEDIA KULTUR
• MEDIA KULTUR
NUTRISI YANG DIPERSIAPKAN UNTUK PERTUMBUHAN MIKROBA

• STERIL
TIDAK ADA MIKROBA YANG TUMBUH

• INOKULUM
MEMPERKENALKAN MIKROBA KE DALAM MEDIA

• KULTUR
MIKROBA TUMBUH DI DALAM/PADA MEDIA KULTUR
 MEDIA KULTUR
MEDIA SELEKTIF
MEDIA YANG MENEKAN PERTUMBUHAN MIKROBA
YANG TIDAK DIINGINKAN DAN MENUMBUHKAN
MIKROBA SASARAN
CONTOH:
- MANNITOL SALT AGAR (MSA) UNTUK BAKTERI STAPHYLOCOCCI
- HOKTOEN ENTERIC AGAR (HE)
- PHENYLETHYL ALCOHOL AGAR (PEA/PAA)

MSA
 DIFFERENTIAL MEDIA

• UNTUK MEMISAHKAN KOLONI DARI MIKROBA-MIKROBA

YANG TUMBUH PADA PETRI YANG SAMA.
CONTOH :
• TSA DIGUNAKAN UNTUK MEMISAHKAN BAKTERI TIPE
STREPTOCOCCI
• EMB (EOSIN METYLENE BLUE) UTK BAKTERI GRAM NEGATIF
TERHADAP BAKTERI GRAM POSITIF
• MACCONKEY’S AGAR

TSA
 MENGIRIM MEDIA

• KULTUR MURNI HANYA BERISI SATU SPESIES ATAU

SATU STRAIN MIKROBA

• SATU KOLONI ADALAH SATU POPULASI YANG

BERASAL DARI SATU SEL ATAU SATU KOLONI

• SATU KOLONI ATAU KOLONI TUNGGAL DISEBUT

DENGAN A COLONI-FORMING UNIT (CFU)
CARA MENGUKUR PERTUMBUHAN
BAKTERI
 Plate Count/Viable Cell Count
Most Probable Number (MPN)
 Direct Microscopic Count
- Breed Count method : Petroff-Hausser counter
 Metode secara tidak langsung:
- kekeruhan (turbidity)
- Aktifitas metabolik
- Berat kering
Metode Plate Count memerlukan Pengenceran
(Dilution series) untuk memperoleh koloni
Most Probable Number
adalah metode yang digunakan untuk menghitung
Mikroorganisme yang masih hidup yang hidup
Di dalam sampel yang diuji.

 Berdasarkan aplikasi kemungkinan jumlah

pertumbuhan mikroorganisme positif terhadap
pengenceran berseri (serial dilution)

 Biasa digunakan untuk sampel heterogen, seperti:

tanah, air, produk pertanian, yang jumlah sel
individu mikroorganisme yang pasti tidak mungkin
ditentukan
MENGHITUNG LANGSUNG
 MENGUKUR PERTUMBUHAN
MIKROBA SECARA LANGSUNG
Direct Microscopic Count
 ESTIMASI JUMLAH BAKTERI
DENGAN METODE TIDAK
LANGSUNG
CARA MENGHITUNG MIKROBA SECARA TIDAK LANGSUNG DIPAKAI UNTUK
MENENTUKAN JUMLAH MIKROBA SECARA KESELURUHAN, BAIK YANG HIDUP
MAUPUN YANG MATI ATAU. CARA PERHITUNGAN MIKROBA SECARA TIDAK
LANGSUNG ANTARA LAIN :
KEKERUHAN
AKTIFITAS METABOLIK
BERAT KERING
Kekeruhan / Turbidimetri
• Perhitungan Turbidimetri yaitu metode dengan mengukur massa sel
dengan prinsipnya yaitu bahwa sesuatu sel dalam medium cair
akan menahan atau memancarkan cahaya sebanding dengan total
massanya (Konsentrasi sel) dalam biakan
• Spektrofotometer digunakan untuk mengukur kekeruhan
• Absorbansi/Densitas optis (Optical Density/OD) : ukuran kuantitatif
yang diekspresikan sebagai rasio logaritmik antara radiasi yang
jatuh ke suatu bahan dan yang ditransmisikan menembus bahan.
Aktifitas Metabolik
Berat Kering

cara yang paling cepat mengukur jumlah sel adalah metode berat
kering. Metode tersebut relatif mudah dilakukan, yaitu kultur
disaring atau disentrifugasi, kemudian bagian yang disaring atau
yang mengendap hasil sentrifugasi dikeringkan.
 FAKTOR LINGKUNGAN YANG
MENGHAMBAT PERTUMBUHAN
MIKROBA

• KEKURANGAN MAKANAN, AIR, ATAU NUTRISI

• POPULASI YANG TERLALU PADAT
• AKUMULASI METABOLIT YANG TIDAK BERGUNA
• KEKURANGAN OKSIGEN
• PERUBAHAN PH
• TEMPERATUR
Terima Kasih