Teknik pulasan histologi

Modul Biomedik
dr. Muhammad In’am Ilmiawan,M.Biomed
2018
Teknik
• Histokimia
• Imunohistokimia
• Fluorescent in situ hybridization (FISH)
 Pulasan Histokimia
(Histochemical Stain)

Tujuan
1. Secara selektif mewarnai Sel & Komponen Sel
2. Untuk mengenali jaringan (misal otot atau
jaringan ikat)
3. Identifikasi bahan non seluler (misal amiloid)
4. Aktivitas enzimatik
5. Identifikasi organisme penginfeksi
Secara selektif mewarnai Sel & Komponen Sel
Periodic acid–Schiff (PAS)
Mengenali Polisakarida (glikogen, mucosubstances glikoprotein, glikolipid,
musin, misal mukosa usus)

Nuclei - Blue/Black
Glycogen - Magenta
Neutral/sialomucins - Magenta
Various Glycoproteins, early
lipofuchsins - Magenta
Alcian blue
stains acidic mucins blue
Lemak: Sudan IV, Sudan Black, Oil red
Oil Red
Sudan Black

Black circles in this image are lipid

droplets in brown fat cells
Untuk mengenali jaringan (misal otot atau jaringan ikat)

Masson Trichrome (MT) staining

Merah: keratin, otot

Biru/hijau: kolagen, tulang
Coklat gelap-hitam: nukleus
Identifikasi bahan non seluler (misal amiloid)

Congo Red
Aktivitas enzimatik

Gomori stain with a lead

precipitate

Alkaline Phosphatase in rat

kidney
Identifikasi organisme penginfeksi
Ziehl-Neelsen (ZN)
Kuman Mycobacterium Tuberculosis
 Imunohistokimia
• Identifikasi Protein dalam sel menggunakan
antibodi
 Ekspresi protein P53

A B

C D

(A) Sinoviosarkoma ekspresi p53 (+), (B) Sinoviosarkoma

ekspresi p53 (-), (C) kontrol (+) (tumor payudara), (D)
kontrol (-) sinoviosarkoma, (40x)
 Fluorescent in situ hybridization (FISH)

Identifikasi struktur DNA menggunaan pasangan

basanya
Translokasi t(X;18) (p11.2;q11.2) - FISH

Gen SYT, Translokasi gen SYT kromosom 18

kromosom 18

Translokasi
SYT-SSX

50 nukleus:
Kasus (+): translokasi ≥ 20%, atau Kasus (-): transloksi < 20%.
Probe: ZyGreen (eksitasi 503 nm, emisi 528 nm)  filter FITC (eksitasi 490
nm,emisi 525 nm); ZyOrange (eksitasi 547 nm, emisi 572 nm)  filter CY3
(eksitasi 554 nm, emisi 568 nm);
 Translokasi gen SYT

(A) Translokasi gen SYT (+) (panah putih), (B) Translokasi gen SYT (-) (panah putih),
pembesaran lensa obyektif 100x dengan emersi.
Terima Kasih