MAKALAH

Sintesis Riboflavin (B2)

Makalah ini diajukan untuk memenuhi salah satu tugas mata kuliah Kimia Organik Sintesis




Disusun oleh :
Akhmad Nur Halimmy 3211111029




Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Jenderal Achmad Yani
2014


Abstrak
Biosintesis dari satu molekul riboflavin membutuhkan satu molekul GTP dan dua molekul ribulosa 5-fosfat
sebagai substrat. Cincin imidazol GTP adalah hydrolytically terbuka, menghasilkan 4,5-diaminopyrimidine yang
dikonversi menjadi 5-amino-6-ribitylamino-2, 4 (1H, 3H)-pyrimidinedione oleh rangkaian deaminasi, sisi pengurangan
rantai dan defosforilasi. Kondensasi dari 5-amino-6-ribitylamino-
2,4 (1H, 3H)-pyrimidinedione dengan 3,4 dihidroksi-2-butanone 4-fosfat yang diperoleh dari ribulosa 5-fosfat affords
6,7-dimetil-8-ribityllumazine. Dismutasi dari hasil lumazine turunan riboflavin dan 5-amino-6-ribitylamino-2, 4 (1H,
3H)-pyri-midinedione, yang didaur ulang dalam jalur biosintesis. Struktur enzim biosintesis, 6,7-dimetil-8-
ribityllumazine synthase, telah dipelajari secara rinci.


BAB I
Pendahuluan

Riboflavin (vitamin B2) yang disentesis pada tanaman dan banyak bakteri. sayuran dan susu
merupakan sumber utama dari vitamin dalam gizi manusia. Ruminansia dapat memperoleh vitamin B2 dari
flora usus mereka. disarankan al lowance untuk vitamin B2 adalah 1,8 mg (59). Meskipun flavocoenzymes
benar-benar diperlukan dalam semua organisme seluler, gejala defisiensi riboflavin jarang diamati pada
manusia. Namun, kekurangan riboflavin mungkin relatif sering terjadi, terutama pada wanita dan remaja
(36)-khususnya di negara-negara berkembang (1). Terlepas dari sumber alami, vitamin B2 diproduksi dalam
jumlah massal untuk suplementasi vitamin nutrisi manusia dan hewan.
Proses fermentasi, yang semakin menggantikan proses manufaktur kimia, memiliki sejarah panjang.
Mereka awalnya dipicu oleh kejadian alam bakteri, ragi, dan jamur, yang menghasilkan riboflavin tingkat
melebihi kebutuhan metabolik jelas mereka (37). Studi awal pada biosintesis vitamin B2 yang terkait erat
dengan upaya untuk meningkatkan produksi riboflavin oleh mikro-organisme flavinogenic.
Penemuan pada tahun 1952 oleh MacLaren (67) bahwa produksi riboflavin dapat ditingkatkan
dengan penambahan turunan purin ke dalam media kultur dari Eremothecium ashbyii menyarankan
hubungan antara purin dan riboflavin. Studi Nu-merous telah selanjutnya menunjukkan bahwa bagian
pirimidin riboflavin adalah biosynthetically terkait dengan guanin (12, 16, 71, 72, 87). Kerja berikutnya
diidentifikasi guanosin trifosfat (GTP) sebagai prekursor berkomitmen riboflavin memasok cincin pirimidin
dan atom nitrogen dari cincin pyrazine, serta rantai samping ribityl vitamin (41, 42, 68).
Pekerjaan awal pada jalur biosintesis riboflavin telah ditinjau ulang peatedly (2, 4-7, 30-32, 37, 88,
90, 94). Artikel ini berfokus pada studi struktural dan mekanistik baru-baru ini enzim yang terlibat dalam
biosintesis riboflavin. Beberapa reaksi mekanis kompleks dan masih tidak sepenuhnya dipahami.

BAB II
Tinjauan Pustaka

Sintesis Riboflavin
Kondensasi pirimidin dengan 3,4- dihidroksi- 2 butanone 4 - fosfat memberi satu setara dengan 6,7 -
dimethyllumazine dua setara air , dan satu ekuivalen ortofosfat . Reaksi enzim - dikatalisasi adalah
regiospecific ( 57 , 78 ) . Hal ini menunjukkan bahwa reaksi dimulai dengan pembentukan basis Schiff
melalui reaksi dari posisi 5 gugus amino dari pirimidin dengan gugus karbonil dari . Konjugasi ikatan imina
dengan cincin pirimidin dapat memfasilitasi abstraksi dari sebuah proton dari antara diikuti dengan
penghapusan fosfat . Penutupan cincin itu bisa terjadi oleh serangan nukleofilik dari posisi gugus amino
pada rantai samping karbohidrat dalam hubungannya dengan langkah-langkah tautomerization .
Stereoselektivitas lumazine synthase sehubungan dengan substrat karbohidrat relatif rendah .
Kecepatan pembentukan lumazine dengan natu - reli yang terjadi L - 3 ,4 - dihidroksi- 2 - butanone 4 - .
Fosfat melebihi kecepatan dengan D - enansiomer hanya dengan faktor 5 Nilai KM untuk 6 dan 7 adalah 5
M dan 63 M .
Sintesis lumazin dari tanaman dan banyak mikroorganisme memiliki massa sekitar 1 MDA . Enzim ini
terdiri dari 60 subunit identik yang membentuk kapsid bola dengan icosahedral 532 simetri ( 3 , 15 , 61 , 62
, 63 , 106 ) .
Di Bacillaceae , yang icosahedral 532 capsids lumazine sintase melampirkan trimerik riboflavin
synthase modul ( 105 , 106 ) . Kompleks enzim ini dapat mengkatalisis dua langkah terakhir dalam
biosintesis riboflavin . Enzim menunjukkan tidak biasa kinetika steady state , yang telah dikaitkan dengan
substrat penyaluran ( 56 ) . Dalam B. subtilis , kompleks enzim ini hanya mewakili 20 % dari total aktivitas
riboflavin synthase, sedangkan 80 % dari aktivitas riboflavin sintase dapat dikaitkan dengan 75 - kDa trimer
, yang tidak terkait dengan lumazine synthase . Dilarutkan , capsids berongga lumazine synthase dari B.
subtilis telah dipelajari oleh difraksi sinar-X ( 62 , 63 , 100 , 106 ) . Molekul-molekul hampir bulat

yang terbaik digambarkan sebagai dodecamers dari pentamers . Masing-masing dari 60 situs aktif yang
setara terletak pada antarmuka dari dua subunit yang berdekatan dalam modul pentamer . Kedua subunit
yang berdekatan bersama-sama membentuk permukaan rongga situs aktif . Rantai samping ribityl substrat
pirimidin dapat membentuk ikatan hidrogen dengan backbone peptida serta dengan rantai samping asam
amino ( 62 ) . Mekanisme reaksi hipotetis pada Gambar 3 menunjukkan beberapa reaksi transfer proton
diharapkan untuk melibatkan residu asam amino tertentu . Namun, tidak ada residu asam amino tertentu
yang berpartisipasi dalam asam / basa katalis dapat diidentifikasi oleh situs aktif mutagenesis ( M Fischer , K
Kugelbrey , K Kis , M Cushman , R Ladenstein , et al , naskah dalam persiapan ) . Temuan ini menunjukkan
bahwa enzim bertindak terutama sebagai positioner untuk dua substrat .
Kondensasi dari pirimidin 6 ( Gambar 3 ) dengan karbohidrat 7 ( Gambar 3 ) dapat dilanjutkan pada
suhu kamar dalam keadaan netral , encer , larutan berair dengan tidak adanya lumazine synthase ( 60 ) .
Hal ini juga luar biasa bahwa jumlah omzet enzim dari B. subtilis hanya 0,076 s - 1 per subunit ( 57 ) .Baru-
baru ini , ditemukan bahwa sintase lumazine dari mikroorganisme tertentu homopentamers ( 44 , 73 ) .
Struktur enzim pentameric dari S. cerevisiae telah ditentukan oleh kristalografi sinar-X . Tidak
mengherankan, pola lipat dari pentameric dan lumazine synthase icosahedral serupa .Lumazine synthase
dari Brucella abortus ditemukan mendominasi respon antibodi manusia terhadap mikroorganisme .


BAB III
Metodologi

Gambaran umum jalur sintesis riboflavin


Jalur biosintesis diringkas dalam Gambar 1. Cincin imidazol GTP (struktur 1 Gambar 1) dibuka
hydrolytically bawah pelepasan format disertai dengan pelepasan pirofosfat, yang dikatalisis oleh GTP
cyclohydro-lase II (12, 13, 16, 26 , 41, 42, 58, 83, 108, 109). Produk enzim 2,5-diamino-6-ribosylamino-4
(3H)-pyrimidinone 50-fosfat (2 pada Gambar 1) diubah menjadi
5-amino-6-ribitylamino-2, 4 (1H, 3H)-pyrimidinedione 50-fosfat (5 pada Gambar 1) dengan dua tahap
reaksi, yang melibatkan pembelahan hidrolitik dari posisi 2 gugus amino dari cincin heterosiklik dan
pengurangan rantai samping ribosyl affording rantai samping ribityl vitamin (33, 83). Urutan langkah-
langkah reaksi ini bervariasi pada organisme yang berbeda. Dalam Eubacteria, deaminasi mendahului
pengurangan rantai samping (33). Dalam ragi dan jamur, pengurangan mendahului deaminasi (10, 54, 64,
103).
50-Fosfat struktur 5 tidak dapat berfungsi sebagai substrat untuk 6,7-dimetil-8-ribityllumazine
synthase. Oleh karena itu, senyawa tersebut harus dephosphorylated sebelum konversi lebih lanjut (49,
75). Tidak ada yang diketahui tentang langkah reaksi.
































Gambar 1
Dephosphorylated 5-amino-6-ribitylamino-2, 4 (1H, 3H)-pyrimidinedione (6 dalam Gambar 1)
dikondensasikan dengan 3,4-dihydroxybutanone 4-fosfat (7 pada Gambar 1) dengan 6,7-dimetil-8-
ribityllumazine synthase (57, 75, 111). Jenis carbo-hidrat substrat (7 pada Gambar 1) dari enzim yang telah
ditemukan relatif baru (111, 112). Hal ini terbentuk dari ribulosa 5-fosfat (10 pada Gambar 1) dengan reaksi
yang tidak biasa yang melibatkan hilangnya atom karbon 4 melalui penataan ulang di-tramolecular (113).
Langkah terakhir dari jalur biosintesis adalah dismutasi dari 6,7-dimetil-8-ribityllumazine (8 pada
Gambar 1) dikatalisasi oleh riboflavin synthase (48, 89, 92, 93). Produk kedua dismutasi adalah 5-amino-6-
ribitylamino-2, 4 (1H, 3H) - pyrimidinedione (6 pada Gambar 1) (114). Senyawa ini merupakan substrat
lumazine synthase dan didaur ulang dalam jalur biosintesis. Stoikiometri, untuk-mation riboflavin
membutuhkan satu ekuivalen GTP dan dua setara dari ribulosa
5-fosfat. Atom karbon 17 dari molekul riboflavin, semua kecuali empat dengan demikian berasal dari kolam
pentosa fosfat.


BAB IV
Hasil dan Pembahasan

1. GTP CYCLOHYDROLASE II
GTP cyclohydrolase II pertama kali diisolasi dari ekstrak sel Escherichia coli ( 41 ) . Dalam reaksi
tandem jelas , enzim mengkatalisis pelepasan C - 8 dari cincin imidazol GTP sebagai format dan
pelepasan pirofosfat dari rantai samping triphosphoribosyl . Enzim membutuhkan ion magnesium
untuk aktivitas . Mekanisme dua reaksi hidrolitik yang terjadi di tempat yang jauh dari molekul substrat
masih harus dijelaskan . Dapat dibayangkan , reaksi bisa pro - ceed dalam tiga langkah : ( a) kovalen
phosphoguanylation enzim dengan pelepasan pirofosfat ; ( b ) pelepasan hidrolitik dari format dari
phosphoguanosyl bagian kovalen terikat ; dan ( c ) pembelahan hidrolitik dari ikatan fosfodiester
dengan merilis produk 2 ( Gambar 1 ) .
GTP cyclohydrolase II dari E. coli ditentukan oleh gen RIBA ( 98 ) . The 21.8 - kDa protein
kemungkinan untuk membentuk sebuah homodimer .Bakteri tertentu , seperti Bacillus subtilis ,
membentuk protein bifunctional dengan GTP cyclohydrolase dan 3,4 dihidroksi - 2 - butanone aktivitas
sintase 4 - fosfat ( 53 , 99 ) .
2. Deaminase DAN reduktase
Enzim bakteri Bifunctional mengkatalisis deaminasi dari senyawa 2 (Gambar 1) dan pengurangan
selanjutnya dari rantai samping phosphoribosyl dari 3 (Gambar 1) telah ditemukan di E. coli dan B.
subtilis (95). Kedua aktivitas enzim memerlukan Mg2 +. Reduktase membutuhkan NADPH atau NADH
sebagai kofaktor (33, 52). Gen menentukan protein yang diduga serupa telah ditemukan dalam
berbagai mi-croorganisms.
Reduktase dari Saccharomyces cerevisiae ragi menggunakan produk GTP cyclohydrolase II sebagai
substrat dan mengkonversi ke 2,5-diamino-6-ribitylamino-pyri-midinone 50-fosfat (4 pada Gambar 1).
Kesamaan antara reduktase ditentukan oleh gen RIB7 dari S. cerevisiae dan bakteri deaminase /
reduktase relatif rendah (95). Enzim mengkatalisis deaminasi ribitylaminopyrimidine (4 pada Gambar 1)
sebagian telah dimurnikan dari ekstrak S. cerevisiae dan Ashbya gossypii (52, 77)
3. Sintesis 3,4-dihidroksi-2-butanone 4-phospate
Pembentukan bisiklik riboflavin prekursor 6,7 - dimetil - 8 - ribityllumazine oleh kondensasi dari
turunan 2,5- diamino - pirimidin dengan empat karbon com - pound diantisipasi oleh peneliti awal (
untuk review, lihat 2 ) . Namun, senyawa empat karbon sebenarnya tetap sulit dipahami meskipun
banyak penelitian .Dalam percobaan vivo menggunakan berbagai prekursor 13C - label ditunjukkan
hubungan antara biosintesis sulit dipahami senyawa empat karbon dan kolam pentosa melalui
perbandingan 13C pola pelabelan cincin xilena dengan rantai samping ribityl riboflavin ( 8 , 9 ) . Lebih
khusus lagi , in vivo studi menyarankan perakitan prekursor empat - karbon dari atom karbon 1 , 2 , 3 ,
dan 5 senyawa kolam pentosa / pentulose .
Berdasarkan data tersebut , enzim kemudian diisolasi dari ragi Candida flavinogenic guilliermondii ,
yang mengkatalisis pembentukan 3,4- dihidroksi -2 - butanone 4 - fosfat dari ribulosa 5 - fosfat ( 65 , 74 ,
111 , 112 ) . Studi dengan senyawa 5 - fosfat isotop berlabel ribulosa menunjukkan bahwa C - 4 substrat
diekstrusi sebagai format melalui penataan ulang intramolekul bahwa atom karbon rekonstruksi nects 3
dan 5 dari pentulose prekursor ( 113 ) . Atom-atom hidrogen pada C - 3 produk yang diperkenalkan dari
pelarut . Berdasarkan data tersebut , mekanisme tahapan menampilkan serangkaian reaksi
tautomerization dan penataan ulang sig - matropic diusulkan ( Gambar 2 ) . Lebih khusus , telah
diusulkan bahwa reaksi penting adalah pembentukan endiol ( 11 pada Gambar - ure 2 ) oleh
tautomerization . 1 - Fosfat dari yang hipotetis menengah telah diusulkan sebelumnya sebagai
perantara dalam reaksi dikatalisis oleh karboksilase ribulosa bifosfat ( 81 , 84 , 85 ) . Penghapusan air
dari Januari - diciptakan endiol diikuti oleh tautomerization dapat menghasilkan diketon ( 12 pada
Gambar 2 ) . Sebuah penataan ulang sigmatropik kemudian menghasilkan karbohidrat bercabang ( 13
pada Gambar 2 ) . Penghapusan format dan stereospesifik reprotonation af - tempat penyeberangan
produk enzim 3,4 dihidroksi - 2 - butanone 4 - fosfat . Kursus stereo - kimia penataan ulang sigmatropik
ini dipelajari hanya baru-baru ini menggunakan stereospecifically 5 - 2H - berlabel ribulosa 5 - fosfat ( 47
) . Menurut studi ini , penataan ulang ini berlangsung dengan retensi konfigurasi pada C - 4 dari 7 (
Gambar 2 ) , yang juga sejalan dengan penataan ulang 1,2- sigmatropik ( 76 , 115 ) .
The 3,4 dihidroksi - 2 - butanone sintase 4 - fosfat dari E. coli adalah homodimer dari 47 - kDa
ditentukan oleh gen RIBB ( 96 , 97 , 99 ) . Meskipun berat , analisis struktur molekul relatif besar enzim
oleh magnet reso - nance nuklir telah dimulai berhasil menggunakan beberapa isotop stabil pelabelan
dan diferensial pelabelan jenis asam amino tertentu ( 55 , 96 ) .Dalam berbagai bakteri dan tanaman,
3,4-dihidroksi-2-butanone 4-fosfat sintase terjadi sebagai protein bifunctional juga terdiri dari domain
GTP cyclohydrolase II .

Figure 2





4. Sintesis lumazin
Kondensasi pirimidin yang ( 6 dalam Gambar 3 ) dengan 3,4- dihidroksi- 2 - butanone4 - fosfat ( 7
dalam Gambar 3 ) memberi satu setara dengan 6,7 - dimethyllumazine ( 8 dalam Gambar 3 ) , dua
setara air , dan satu ekuivalen ortofosfat . Reaksi enzim - dikatalisasi adalah regiospecific ( 57 , 78 ) . Hal
ini menunjukkan bahwa reaksi dimulai dengan pembentukan basis Schiff melalui reaksi dari posisi 5
gugus amino dari pirimidin ( 6 dalam Gambar 3 ) dengan gugus karbonil dari 7 ( Gambar 3 ) . Konjugasi
ikatan imina dengan cincin pirimidin dapat memfasilitasi abstraksi dari sebuah proton dari antara 14 (
Gambar 3 ) diikuti dengan penghapusan fosfat . Penutupan cincin itu bisa terjadi oleh serangan
nukleofilik dari posisi6 gugus amino pada rantai samping karbohidrat dalam hubungannya dengan
langkah-langkah tautomerization ( Gambar 3 ) .
Stereoselektivitas lumazine synthase sehubungan dengan substrat karbohidrat relatif rendah .
Kecepatan pembentukan lumazine dengan natu - reli yang terjadi L - 3 ,4 - dihidroksi- 2 - butanone 4 - .
Fosfat melebihi kecepatan dengan D - enansiomer hanya dengan faktor 5 Nilai KM untuk 6 dan 7
(Gambar 3 ) adalah
5 M dan 63 M , masing-masing ( 57 ) .
lumazine sintase dari tanaman dan banyak mikroorganisme memiliki massa sekitar 1 MDA . Enzim
ini terdiri dari 60 subunit identik yang membentuk kapsid bola dengan icosahedral 532 simetri ( 3 , 15 ,
61 , 62 , 63 , 106 ) .Di Bacillaceae , yang icosahedral 532 capsids lumazine sintase melampirkan trimerik
riboflavin synthase modul ( 105 , 106 ) . Kompleks enzim ini dapat mengkatalisis dua langkah terakhir
dalam biosintesis riboflavin . Enzim menunjukkan tidak biasa kinetika steady state , yang telah dikaitkan
dengan substrat penyaluran ( 56 ) . Dalam B. subtilis , kompleks enzim ini hanya mewakili 20 % dari total
aktivitas riboflavin synthase, sedangkan 80 % dari aktivitas riboflavin sintase dapat dikaitkan dengan 75
- kDa trimer , yang tidak terkait dengan lumazine synthase .Dilarutkan , capsids berongga lumazine
synthase dari B. subtilis telah dipelajari oleh difraksi sinar-X ( 62 , 63 , 100 , 106 ) . Molekul-molekul
hampir bulat
Figure 3











yang terbaik digambarkan sebagai dodecamers dari pentamers . Masing-masing dari 60 situs aktif yang setara
terletak pada antarmuka dari dua subunit yang berdekatan dalam modul pentamer . Kedua subunit yang berdekatan
bersama-sama membentuk permukaan rongga situs aktif .Rantai samping ribityl substrat pirimidin dapat membentuk
ikatan hidrogen dengan backbone peptida serta dengan rantai samping asam amino ( 62 ) . Mekanisme reaksi
hipotetis pada Gambar 3 menunjukkan beberapa reaksi transfer proton diharapkan untuk melibatkan residu asam
amino tertentu . Namun, tidak ada residu asam amino tertentu yang berpartisipasi dalam asam / basa katalis dapat
diidentifikasi oleh situs aktif mutagenesis ( M Fischer , K Kugelbrey , K Kis , M Cushman , R Ladenstein , et al , naskah
dalam persiapan ) . Temuan ini menunjukkan bahwa enzim bertindak terutama sebagai positioner untuk dua substrat
.Kondensasi dari pirimidin 6 ( Gambar 3 ) dengan karbohidrat 7 ( Gambar 3 ) dapat dilanjutkan pada suhu kamar
dalam keadaan netral , encer , larutan berair dengan tidak adanya lumazine synthase ( 60 ) . Hal ini juga luar biasa
bahwa jumlah omzet enzim dari B. subtilis hanya 0,076 s - 1 per subunit ( 57 ) .
Baru-baru ini , ditemukan bahwa sintase lumazine dari mikroorganisme tertentu homopentamers ( 44 , 73
) . Struktur enzim pentameric dari S. cerevisiae telah ditentukan oleh kristalografi sinar-X . Tidak mengherankan, pola
lipat dari pentameric dan lumazine synthase icosahedral serupa .Lumazine synthase dari Brucella abortus ditemukan
mendominasi respon antibodi manusia terhadap mikroorganisme yang ( 38 , 46 , 51 ) .
5. GENETIKA DAN PERATURAN riboflavin BIOSINTESIS
Dalam B. subtilis, enzim yang terlibat dalam biosintesis riboflavin ini terkelompok dalam operon yang juga
terdiri dari kerangka baca terbuka ribT tambahan fungsi yang tidak diketahui (20, 21, 23-25, 27, 45, 86). Aktivitas
transkripsional operon ini dapat diatur melalui berbagai (14). Sebuah ribC gen yang telah diasumsikan untuk
menentukan protein represor baru-baru ini menunjukkan kode untuk bifunctional riboflavin kinase / FAD sintetase
(20-22, 27-29, 34, 35, 66). Fungsi regulasi enzim ini masih harus dijelaskan.
6. BIOTEKNOLOGI riboflavin
Riboflavin merupakan produk massal teknis untuk digunakan dalam nutrisi manusia dan hewan. Sampai
saat ini, vitamin ini diproduksi terutama oleh sintesis kimia. Skr-rently, proses fermentasi menggunakan B. subtilis,
Ashbya gossypii, atau Candida ragi secara progresif mengganti metode persiapan sintetis (50, 82). Rekombinan strain
B. subtilis untuk produksi vitamin B2 telah dijelaskan secara rinci di tempat lain (35, 66, 104).
Baru-baru ini, sebuah metode telah diusulkan untuk menggunakan mutan riboflavin-kekurangan dari
pleuropneumoniae Acti-nobacillus sebagai vaksin untuk babi (43). Enterobacteriaceae tidak memiliki sistem
penyerapan untuk riboflavin. Oleh karena itu, riboflavin mutan-kekurangan tidak dapat tumbuh dalam berbagai
mamalia, meskipun mereka dapat dibudidayakan in vitro di hadapan sejumlah besar riboflavin.

Daftar Pustaka
1. Ajayi OA, James OA. 1984. Effect of ri-
boflavin supplementation and riboflavin nu-
triture of a secondary school population in
Nigeria. Am. J. Clin. Nutr. 39:78791
2. Bacher A. 1991. Biosynthesis of flavins. See
Ref. 73a, 1:21559
3. Bacher A, Baur R, Eggers U, Harders H,
Otto MK, Schnepple H. 1980. Riboflavin
synthases of Bacillus subtilis. Purification
and properties. J. Biol. Chem. 255:632
37
4. Bacher A, Eberhardt S, Richter G. 1996.
Biosynthesis of riboflavin. In Escherichia
coli and Salmonella, ed. FC Neidhardt, pp.
65764. Washington, DC: Am. Soc. Micro-
biol.

5. Bacher A, Eisenreich W, Kis K, Ladenstein
R, Richter G, et al. 1993. Biosynthesis of
flavins. In Bioorganic Chemistry Frontiers,
ed. H Dugas, FP Schmidtchen, pp. 14792.
New York: Springer Verlag
6. Bacher A, Eisenreich W, Kis K, Richter G,
Scheuring J, Weinkauf S. 1993. Recent ad-
vances in the biosynthesis of flavins and
deazaflavins. Trends Org. Chem. 4:33549
7. Bacher A, Ladenstein R. 1991. The luma-
zine synthase/riboflavin synthase complex
of Bacillus subtilis. See Ref. 73a, 1:293
316
8. Bacher A, Le Van Q, Keller PJ, Floss HG.
1983. Biosynthesis of riboflavin. Incorpo-
ration of
13
C labelled precursors into the
xylene ring. J. Biol. Chem. 258:1343137
9. Bacher A, Le Van Q, Keller PJ, Floss HG.
1985. Biosynthesis of riboflavin. Incorpo-
ration of multiply
13
C-labeled precursors
into the xylene ring. J. Am. Chem. Soc.
107:638085
10. Bacher A, Lingens F. 1970. Biosynthesis
of riboflavin. Formation of 2,5-diamino-6-
hydroxy-4-(1
0
-D-ribitylamino)pyrimidine
in a riboflavin auxotroph. J. Biol. Chem.
245:464752
11. Bacher A, Lingens F. 1971. Biosynthe-
sis of riboflavin. Formation of 6-hydroxy-
2,4,5-triaminopyrimidine in rib7 mutants
of Saccharomyces cerevisiae. J. Biol.
Chem. 246:701822
12. Bacher A, Mailander B. 1973. Biosynthe-
sis of riboflavin. The structure of the purine
precursor. J. Biol. Chem. 248:622731
13. Bacher A, Mailander B. 1976. Biosynthe-
sis of riboflavin. Structure of the purine pre-
cursor and origin of the ribityl side chain.
See Ref. 109a, pp. 73336
14. Bacher A, Mailander B. 1978. Biosynthe-
sis of riboflavin in Bacillus subtilis: func-
tion and genetic control of the riboflavin
synthase complex. J. Bacteriol. 134:476
82
15. Bacher A, Schnepple H, Mailander B, Otto
MK, Ben-Shaul Y. 1980. Structure and
function of the riboflavin synthase complex
of Bacillus subtilis. In Flavins and Flavo-
proteins, ed. K Yagi, T Yamano, pp. 579
86. Tokyo: Japan Sci. Soc.
16. Baugh GM, Krumdiek CL. 1969. Biosyn-
thesis of riboflavine in Corynebacterium
species: the purine precursor. J. Bacteriol.
98:111419
17. Beach R, Plaut GWE. 1969. The forma-
tion of riboflavin from 6,7-dimethyl-8-
ribityllumazine in acid media.
Tetrahedron Lett. 40:348992
18. Beach R, Plaut GWE. 1970. Investiga-
tions of structures of substituted
lumazines by deuterium exchange and
nuclear mag- netic resonance
spectroscopy. Biochemis- try 9:76070
19. Bown DH, Keller PJ, Floss HG,
Sedlmaier
H, Bacher A. 1986. Solution structure of
6,7-dimethyl-8-substituted lumazines. 13C
NMR evidence for intramolecular ether
formation. J. Org. Chem. 51:246167
20. Bresler SE, Cherepenko EI, Chernik TP,
Kalinin VL, Perumov DA. 1970. Investi-
gation of the operon of riboflavin
synthesis in Bacillus subtilis. I. Genetic
mapping of the linkage group. Genetika
6:11624
21. Bresler SE, Cherepenko EI, Perumov DA.
1970. Investigation of the operon of ri-
boflavin synthesis in Bacillus subtilis. II.
Biochemical study of regulator mutations.
Genetika 6:12639.
22. Bresler SE, Cherepenko EI, Perumov DA.
1971. Investigation of the operon of ri-
boflavina biosynthesis in Bacillus sub-
tilis. III. Production and properties of mu-
tants with a complex regulatory genotype.
Genetika 7:11723
23. Bresler SE, Glazunov EA, Perumov
DA, Chernik TP. 1977. Investigation of
the operon of riboflavin biosynthesis in
Bacillus subtilis. XIII. Genetic and bio-
chemical investigation of mutants related
to intermediate stages of biosynthesis.
Genetika 13:200716
24. Bresler SE, Gorinchuk GF, Chernik TP,
Perumov DA. 1978. Riboflavin operon in
Bacillus subtilis. XV. Investigation of the
mutants relating to initial steps of biosyn-
thesis. The origin of the ribityl side chain.
Genetika 14:208290
25. Bresler SE, Kalinin VL, Krivisky AS, Pe-
rumov DA, Chernik TP. 1969. Mutant
of Bacillus subtilis synthesizing notable
amounts of riboflavin. Genetika 5:133
38
26. Bresler SE, Perumov DA. 1979.
Riboflavin operon in Bacillus subtilis.
Regulation of GTP-cyclohydrolase
synthesis in strains of different
genotypes. Genetika 15:967
71
27. Bresler SE, Perumov DA, Chernik TP,
Glazunov EA. 1976. Investigation of
the operon of riboflavin biosynthesis in
Bacillus subtilis. X. Genetic and bio-
chemical study of mutants that accumu-
late 6-methyl-7-(10 ,20 -dihydroxyethyl)-8-
ribityllumazine. Genetika 12:8391
28. Bresler SE, Perumov DA, Chernik TP,
Skvortsova AP. 1976. Investigation of the
riboflavin operon of Bacillus subtilis. XI.
Determination of the type of regulation by
the dominance test for operator constitu-
tive and regulatory constitutive mutations.
Genetika 12:12430
29. Bresler SE, Perumov DA, Skvortsova AP,
Chernik TP, Shevchenko TN. 1975. Study
of the riboflavin operon of Bacillus
subtilis. VII. Genetic mapping of ribC
markers in relation to the cluster of
structural genes. Genetika 11:95100
30. Brown GM, Williamson JM. 1982.
Biosyn- thesis of riboflavin, folic acid,
thiamine, and pantothenic acid. Adv.
Enzymol. 53:
34581
31. Brown GM, Reynolds JJ. 1969.
Biogenesis of the water-soluble vitamins.
Annu. Rev. Biochem. 32:41962
32. Brown GM, Williamson JM. 1987.
Biosyn- thesis of folic acid, riboflavin,
thiamine and pantothenic acid. In
Escherichia coli and Salmonella
thyphimurium, ed. FC Nei- dhardt, 1:521
38. Washington, DC: Am. Soc. Microbiol.
33. Burrows RB, Brown GM. 1978. Presence
in Escherichia coli of a deaminase and a
reductase involved in biosynthesis of ri-
boflavin. J. Bacteriol. 136:65767
34. Chernik TP, Bresler SE, Machkovsky
VV, Perumov DA. 1979. Riboflavin-
biosynthesis operon in Bacillus subtilis.
XVI. Localization of group ribC markers
on the chromosome. Genetika 15:1569
77
35. Coquard D, Huecas M, Ott M, van Dijl
JM, van Loon AP, Hohmann HP. 1997.
Molecu- lar cloning and characterization
of the ribC gene from Bacillus subtilis: a
point muta- tion in ribC results in
riboflavin overpro- duction. Mol. Gen.
Genet. 254:8184
36. Cromer B, Thomas SD, Padilla LD,
Vivian VM. 1989. Riboflavin status in
urban ado- lescents. J. Adolesc. Health
Care. 10:382
85
37. Demain AL. 1972. Riboflavin oversynthe-
sis. Annu. Rev. Microbiol. 26:36988
38. De-Mot R, Nagy I, Schoofs G, Vanderley-
den J. 1996. Identification of a Rhodococ-
cus gene cluster encoding a homolog of
the
17-kDa antigen of Brucella and a putative
regulatory protein of the AsnC-Lrp
family. Curr. Microbiol. 33:2630
39. Eberhardt S, Korn S, Lottspeich F, Bacher
A. 1997. Biosynthesis of riboflavin. An
un- usual riboflavin synthase of
Methanobac- terium
thermoautotrophicum. J. Bacteriol.
179:293843
40. Eberhardt S, Richter G, Gimbel W,
Werner T, Bacher A. 1996. Cloning,
sequencing, mapping and hyperexpression
of the ribC gene coding for riboflavin
synthase of Es- cherichia coli. Eur. J.
Biochem. 242:712
19
41. Foor F, Brown GM. 1975. Purification
and properties of guanosine triphosphate
cyclo- hydrolase II from Escherichia coli.
J. Biol. Chem. 250:354551
42. Foor F, Brown GM. 1980. GTP-cyclohy
drolase II from Escherichia coli. Methods
Enzymol. 66:3037
43. Fuller TE, Thacker BJ, Mulks MH. 1996.
A riboflavin auxotroph of Actinobacillus
pleuropneumoniae is attenuated in swine.
Infect. Immun. 64:465964
44. Garcia-Ramirez JJ, Santos MA, Revuelta
JL. 1995. The Saccharomyces cerevisiae
RIB4 gene codes for 6,7-dimethyl-8-
ribityllumazine synthase involved in ri-
boflavin biosynthesis. J. Biol. Chem.
270:238017
45. Glazunov EA, Bresler SE, Perumov DA.
1974. Investigation of the riboflavin operon of
Bacillus subtilis. VII. Biochemical study
of mutants relating to early stages of
biosynthesis. Genetika 10:8392
46. Goldbaum FA, Velikovsky CA, Baldi FC,
Mortl S, Bacher A, Fossati CA. 1999.
The
18-kDa cytoplasmatic protein of Brucella
speciesan antigen useful for
diagnosis is a lumazine synthase. J.
Med. Mikrobiol.
48:83339
47. Go tze E, Kis K, Eisenreich W,
Yamauchi N, Kakinuma K, Bacher A.
1998. Biosyn- thesis of riboflavin.
Stereochemistry of 3,4- dihydroxy-2-
butanone 4-phosphate syn- thase reaction.
J. Org. Chem. 63:645657
48. Harvey RA, Plaut GWE. 1966. Riboflavin
synthase from yeast: properties of com-
plexes of the enzyme with lumazine
derivatives and riboflavin. J. Biol. Chem.
241:212036
49. Harzer G, Rokos H, Otto MK, Bacher
A, Ghisla S. 1978. Biosynthesis of ri-
boflavin. 6,7-Dimethyl-8-ribityllumazine
50 -phosphate is not a substrate for ri-
boflavin synthase. Biochim. Biophys. Acta
540:4854
50. Heefner DL, Weaver CA, Yarus MJ, Bur-
dzinski LA. 1992. Method for producing
riboflavin with Candida famata. US Patent
No. 5164303
51. Hemmen E, Weynants V, Scarcez T,
Letes- son JJ, Saman E. 1995. Cloning
and sequence analysis of a newly
identified Brucella abortus gene and
serological eval- uation of the 17-
kilodalton antigen that it encodes. Clin.
Diagn. Lab. Immunol.
2:26367
52. Hollander I, Brown GM. 1979. Biosyn-

thesis of riboflavin: reductase and deam- inase
of Ashbya gossypii. Biochem. Bio- phys.
Res. Commun. 89:75963
53. Hu mbelin M, Griesser V, Keller T,
Schurter W, Haiker H, et al. 1999. GTP
cyclohy- drolase II and 3,4-dihydroxy-2-
butanone
4-phosphate synthase are rate-limiting en-
zymes in riboflavin synthesis of an in-
dustrial Bacillus subtilis strain used for
riboflavin production. J. Ind. Microbiol.
Biot. 22:17
54. Keller PJ, Le Van Q, Kim SC, Bown
DH, Chen HC, et al. 1988. Biosynthe-
sis of riboflavin. Mechanism of formation
of the ribitylamino linkage. Biochemistry
27:111720
55. Kelly MJS, Krieger C, Ball LJ, Yu Y,
Richter G, et al. 1999. Application of
amino acid type-specific 1H- and 14N-
labeling in a 2H-,15N-labeled background
to a 47 kDA homodimer: potential for
NMR structure determination of large pro-
teins. J. Biomol. NMR 14:7983
56. Kis K, Bacher A. 1995. Substrate chan-
neling in the lumazine synthase/riboflavin
synthase complex of Bacillus subtilis. J.
Biol. Chem. 270:1678895
57. Kis K, Volk R, Bacher A. 1995. Biosyn-
thesis of riboflavin. Studies on the
reaction mechanism of 6,7-dimethyl-8-ri-
bityllumazine synthase. Biochemistry
34:288392
58. Koltun LV, Shavlovsky GM, Kashchenko
VE, Trach VM. 1984. Changes in the
activ- ity of certain enzymes involved in
flavino- genesis during cultivation of
Eremothe- cium ashbyii. Microbiology
53:3236
59. Kraut H. 1960. U berdie Deckung des
Nahr-
stoffbedarfs in Westdeutschland. Nutr. Di- eta
1:4560
60. Kugelbrey K. 1997. Biosynthese von
Vitamin B2. NMR-Untersuchungen zum
Reaktionsmechanismus der 6,7-Dimethyl-
8-ribityllumazin-Synthase. PhD thesis.
Technische Universitat, Mu nchen.
197 pp.
61. Ladenstein R, Ludwig HC, Bacher A.
1983. Crystallization and preliminary X-
ray diffraction study of heavy riboflavin
synthase from Bacillus subtilis. J. Biol.
Chem. 258:1198183
62. Ladenstein R, Ritsert K, Huber R,
Richter G, Bacher A. 1994. The lumazine
synthase/riboflavin synthase complex of
Bacillus subtilis: X-ray structure analysis
of reconstituted 60 capsids at 3.2 A
resolution. Eur. J. Biochem. 223:1007
17
63. Ladenstein R, Schneider M, Huber R,
Schott K, Bacher A. 1988. The structure
of the icosahedral 60 capsid of heavy ri-
boflavin synthase from Bacillus subtilis.
Z. Krist.gr. 185:12224
64. Logvinenko EM, Shavlovsky GM, Za-
kalsky AE. 1979. On the product formed
at the second step of riboflavin
biosynthesis by Pichia guilliermondii.
Mikrobiologiya
48:75658
65. Logvinenko EM, Shavlovsky GM,
Zakal0 sky AE, Zakhodylo IV. 1982.
Biosynthesis of 6,7-dimethyl-8-ribityll-
umazine in yeast extracts of Pichia
guilliermondii. Biokhimiya 47:93136
66. Mack M, van Loon AP, Hohmann HP.
1998. Regulation of riboflavin biosynthe- sis
in Bacillus subtilis is affected by the
activity of the flavinokinase/flavin
adenine dinucleotide synthetase encoded
by ribC. J. Bacteriol. 180:95055
67. MacLaren JA. 1952. The effects of certain
purines and pyrimidines upon the produc-
tion of riboflavin by Eremothecium ash-
byii. J. Bacteriol. 63:23341
68. Mailander B, Bacher A. 1976. Biosynthe-
sis of riboflavin. Structure of the purine
pre- cursor and origin of the ribityl side
chain. J. Biol. Chem. 251:362328
69. Masuda T. 1956. Application of chro-
matography. XXIX. G compound isolated
from the mycelium of Eremothecium ash-
byii. Pharm. Bull. 4:37581
70. Masuda T. 1956. Isolation of a green fluo-
rescent substance produced by Eremothe-
cium ashbyii. Pharm. Bull. 4:7172

71. McNutt WS. 1954. The direct contri-
bution of adenine to the biogenesis of
riboflavin by Eremothecium ashbyii. J.
Biol. Chem. 210:51119
72. McNutt WS. 1955. The incorporation of
the pyrimidine ring of adenine into the
isoalloxazine ring of riboflavin. J. Biol.
Chem. 219:36573
73. Mo rtl S, Fischer M, Richter G, Tack J,
Weinkauf S, Bacher A. 1996. Biosyn-
thesis of riboflavin. Lumazine synthase of
Escherichia coli. J. Biol. Chem.
271:332017
73a. Mu ller F ed. 1991. Chemistry and Bio-
chemistry of Flavoproteins. Boca Raton,
FL: CRC
74. Neuberger G, Bacher A. 1985. Biosyn-
thesis of riboflavin. An aliphatic interme-
diate in the formation of 6,7-dimethyl-
8-ribityllumazine from pentose phos- phate.
Biochem. Biophys. Res. Commun.
127:17591
75. Neuberger G, Bacher A. 1986. Biosynthe-
sis of riboflavin. Enzymatic formation of
6,7-dimethyl-8-ribityllumazine by heavy
riboflavin synthase from Bacillus sub-
tilis. Biochem. Biophys. Res. Commun.
139:111116
76. Nickon A, Weglein RC. 1975. Band align-
ment vs. product stability in the control of
Wagner-Meerwein rearrangements. J.
Am. Chem. Soc. 97:127173
77. Nielsen P, Bacher A. 1983. Biosyn-
thesis of riboflavin. Synthesis of the
substrate and substrate analogues for
pyrimidine deaminase. In Chemistry
and Biochemistry of Pteridines, ed. JA
Blair, pp. 699703. Berlin: Walter de
Gruyter
78. Nielsen P, Neuberger G, Fuji I, Bown DH,
Keller PJ et al. 1986. Biosynthe- sis of
riboflavin. Enzymatic formation of 6,7-
dimethyl-8-ribityllumazine from pentose
phosphate. J. Biol. Chem.
261:366169
79. Paterson T, Wood HCS. 1969. Deu- terium
exchange of C-methyl protons in 6,7-
dimethyl-8-D-ribityllumazine, and studies
of the mechanism of riboflavin
biosynthesis. J. Chem. Soc. Chem. Com-
mun. 29091
80. Paterson T, Wood HCS. 1972. The
biosyn- thesis of pteridines. VI. Studies of
the mechanism of riboflavin biosynthesis.
J. Chem. Soc. Perkin Trans. I. 105156
81. Peach C, Pierce J, McCurry SD, Tol-
bert NE. 1978. Inhibition of ribulose 2,5-
bisphosphate carboxylase/oxygenase by
ribulose 1,5-bisphosphate epimerization
and degradation products. Biochem. Bio-
phys. Res. Commun. 83:108492
82. Perkins JB, Pero JG, Sloma A. 1991. Ri-
boflavin overproducing strains of bacteria.
Eur. Patent Appl. No. EP0405370
83. Perumov DA, Glazunov EA, Gorinchuk
GF. 1986. Riboflavin operon in Bacillus
subtilis. XVII. Regulatory functions of in-
termediate products and their derivatives.
Genetika 22:74854
84. Pierce J, Andrews TJ, Lorimer GH.
1986. Reaction intermediate partition- ing
by ribulose-bisphosphate carboxylases
with differing substrate specificities. J.
Biol. Chem. 261:1024856
85. Pierce J, Tolbert NE, Darker R. 1980. In-
teraction of ribulosebisphosphate carboxy-
lase, oxygenase with transition-state ana-
logues. Biochemistry 19:93442
86. Piggot PJ, Hoch JA. 1985. Revised
genetic linkage map of Bacillus subtilis.
Microbiol. Rev. 49:15879
87. Plaut GWE. 1954. Biosynthesis of ri-
boflavin. Incorporation of 14C-labeled
compounds into rings B and C. J. Biol.
Chem. 208:51320
88. Plaut GWE. 1961. Water-soluble
vitamins.
II. Folic acid, riboflavin, thiamine, vitamin
B12. Annu. Rev. Biochem. 30:40946
89. Plaut GWE. 1963. Studies on the nature of
the enzymic conversion of 6,7-dimethyl-8-
ribityllumazine to riboflavin. J. Biol.
Chem.
238:222543
90. Plaut GWE. 1971. Metabolism of water-
soluble vitamins: the biosynthesis of ri-

boflavin. In Comprehensive Biochemistry, ed.
M Florkin, EH Stotz, 21:1145. Ams-
terdam: Elsevier
91. Plaut GWE, Beach RL. 1976. Substrate
specificity and stereospecific mode of ac-
tion of riboflavin synthase. See Ref. 109a,
pp. 73746
92. Plaut GWE, Beach RL, Aogaichi T. 1970.
Studies on the mechanism of elimination of
protons from the methyl groups of 6,7-
dimethyl-8-ribityllumazine by riboflavin
synthetase. Biochemistry 9:77185
93. Plaut GWE, Harvey RA. 1971. The en-
zymic synthesis of riboflavin. Methods
En- zymol. 18B:51538
94. Plaut GWE, Smith CM, Alworth W. 1974.
Biosynthesis of water-soluble vitamins.
Annu. Rev. Biochem. 43:899922
95. Richter G, Fischer M, Krieger C, Eber-
hardt S, Lu ttgen H, et al. 1997. Biosyn-
thesis of riboflavin. Characterization of
the bifunctional deaminase/reductase of
Es- cherichia coli and Bacillus subtilis. J.
Bac- teriol. 179:202228
96. Richter G, Kelly MJS, Krieger C, Yu Y,
Bermel W, et al. 1999. NMR studies on
the
46-kD dimeric protein, 3,4-dihydroxy-2-
butanone 4-phosphate synthase using 2H,
13C, and 15N-labelling. Eur. J. Biochem.
261:5765
97. Richter G, Krieger C, Volk R, Kis K,Ritz
H, et al. 1997. Biosynthesis of riboflavin:
3,4- dihydroxy-2-butanone 4-phosphate
syn- thase. Methods Enzymol. 280:374
82
98. Richter G, Ritz H, Katzenmeier G, Volk
R, Kohnle A, et al. 1993. Biosynthesis of
riboflavin. Cloning, sequencing, mapping
and expression of the gene coding for
GTP cyclohydrolase II of Escherichia
coli. J. Bacteriol. 175:404551
99. Richter G, Volk R, Krieger C, Lahm H,
Rothlisberger U, Bacher A. 1992.
Biosyn- thesis of riboflavin. Cloning,
sequenc- ing and expression of the gene
coding for 3,4-dihydroxy-2-butanone 4-
phosphate synthase of Escherichia coli. J.
Bacteriol.
174:405056100. Ritsert K, Turk D, Huber R,
Ladenstein R, Schmidt-Base K, Bacher
A. 1995. Studies on the lumazine
synthase/riboflavin syn- thase complex of
Bacillus subtilis. Crystal structure analysis
of reconstituted, icosa- hedral subunit
capsid at 2.4 A resolu- tion. J. Mol. Biol.
253:15167
101. Rowan T, Wood HCS. 1963. The
biosyn- thesis of riboflavin. Proc. Chem.
Soc., pp.
2122
102. Rowan T, Wood HCS. 1968. The
biosyn- thesis of pteridines. V. The
synthesis of riboflavin from pteridine
precursor. J. Chem. Soc. C, pp. 45258
103. Sadique J, Shaumugasundaram R, Shau-
mugasundaram ERB. 1966. Isolation of
5-amino-4-ribitylaminouracil from a ri-
boflavineless mutant of Aspergillus nidu-
lans. Biochem. J. 101:2C3C
104. Sauer U, Hatzimanikatis V, Hohmann
HP, Manneberg M, van Loon AP, Bailey
JE.
1996. Physiology and metabolic fluxes of
wild-type and riboflavin-producing
Bacillus subtilis. Appl. Environ. Micro-
biol. 62:368796
105. Schott K, Kellermann J, Lottspeich F,
Bacher A. 1990. Riboflavin synthases of
Bacillus subtilis. Purification and amino
acid sequence of the subunit. J. Biol.
Chem. 265:42049
106. Schott K, Ladenstein R, Ko nig
A, Bacher A. 1990. The lumazine syn-
thase/riboflavin synthase complex of
Bacillus subtilis. Crystallization of recon-
stituted icosahedral subunit capsids. J.
Biol. Chem. 265:1268689
107. Sedlmaier H, Mu ller F, Keller PJ,
Bacher A. 1987. Enzymatic synthesis of
ri- boflavin and FMN specifically labeled
with 13C in the xylene ring. Z. Natur-
forsch. 42C:42529

108. Shavlovsky GM, Logvinenko EM,
Benndorf R, Koltun CV, Kashenko VE,
et al. 1980. First reaction of ri- boflavin
biosynthesiscatalysis by a guanosine
triphosphate cyclohydrolase from yeast.
Arch. Microbiol. 124:255
59
109. Shavlovsky GM, Logvinenko EM,
Kashenko VE, Koltun LV, Zakal0 sky
AE.
1976. Detection of an enzyme of the first stage
of flavinogenesis of GTP-
cyclohydrolase in yeast Pichia guil-
liermondii. Dokl. Akad. Nauk. SSSR
230:148587
109a. Singer TP, ed. 1976. Flavins and Flav-
inproteins. Amsterdam: Elsevier Sci.
110. Deleted in proof
111. Volk R, Bacher A. 1988. Biosynthesis of
riboflavin. The structure of the 4-carbon
precursor. J. Am. Chem. Soc. 110:3651
53
112. Volk R, Bacher A. 1990. Studies on the
four carbon precursor in the biosynthe- sis
of riboflavin. Purification and prop- erties
of L-3,4-dihydroxy-2-butanone 4-
phosphate synthase. J. Biol. Chem.
265:1947985
113. Volk R, Bacher A. 1991. Biosynthe-
sis of riboflavin. Studies on the mech-
anism of L-3,4-dihydroxy-2-butanone
4-phosphate synthase. J. Biol. Chem.
266:2061018
114. Wacker H, Harvey RA, Winestock
CH, Plaut GWE. 1964. 4-(10 -D-
Ribitylamino)-5-amino-2,6-dihydroxy-
pyrimidine, the second product of the
riboflavin synthetase reaction. J. Biol.
Chem. 239:349397
115. Woodward RB, Hoffmann R. 1970. Die
Erhaltung der Orbitalsymmetrie. Wein-
heim, Ger.: Chemie