perpustakaan.uns.ac.

id

digilib.uns.ac.id

EFEK EKSTRAK DAUN KEMANGI (Ocimum sanctum L.)

TERHADAP KERUSAKAN HEPATOSIT MENCIT AKIBAT
MINYAK SAWIT DENGAN PEMANASAN BERULANG

SKRIPSI
Untuk Memenuhi Persyaratan
Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

WEDA KUSUMA
G0007025

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
commit to user
2010

perpustakaan.uns.ac.id

digilib.uns.ac.id

ABSTRAK
Weda Kusuma, G0007025, 2010. Efek Ekstrak Daun Kemangi (Ocimum
sanctum L.) terhadap Kerusakan Hepatosit Mencit Akibat Minyak Sawit dengan
Pemanasan Berulang, Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Tujuan Penelitian : Untuk mengetahui efek ekstrak daun kemangi (Ocimum
sanctum L.) dalam mencegah kerusakan hepatosit mencit akibat minyak sawit
dengan pemanasan berulang dan apakah dengan peningkatan dosis ekstrak dapat
meningkatkan efek proteksinya.
Metode Penelitian : Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorik dengan post
test only control group design. Mencit strain Swiss Webster jantan sebanyak 25
ekor dibagi dalam 5 kelompok yaitu kelompok kontrol dan kelompok perlakuan IIV (KP I-IV). Pada KP I-IV diberi minyak sawit dengan pemanasan berulang dari
hari pertama sampai hari ke-14. Pada 7 hari terakhir berturut-turut KP II-IV
diberikan ekstrak daun kemangi dengan dosis bertingkat (5,6 mg, 11,2 mg, dan
16,8 mg/ 20g BB mencit). Pada hari ke-15 mencit dikorbankan dan diambil
hatinya untuk pembuatan preparat. Kerusakan sel hati mencit diamati dengan
menghitung jumlah inti sel yang mengalami nekrosis pada lobulus centralis hati.
Data yang diperoleh kemudian dianalisis dengan One Way ANOVA dan LSD.
Hasil Penelitian : Pada penelitian ini diperoleh jumlah rata-rata inti sel nekrosis
pada kelompok kontrol sebesar 6,40, KP I 74,60, KP II 22,40, KP III 16,60, dan
KP IV sebesar 11,40. Hasil uji statistik One Way Anova menunjukkan adanya
perbedaan yang bermakna antara kelima kelompok penelitian p = 0,000
(p<0,050). Hasil uji statistik LSD juga menunjukkan perbedaan yang signifikan
antara kelima kelompok dengan masing-masing p = 0,000 dan p = 0,001
(p<0,050).
Simpulan Penelitian : Dari hasil penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa ekstrak
daun kemangi dapat mencegah kerusakan sel hati pada mencit yang dipapar
minyak sawit dengan pemanasan berulang. Pemberian ekstrak daun kemangi
dengan dosis bertingkat juga terbukti semakin meningkatkan efek proteksinya
terhadap hepar.

Kata kunci : daun kemangi, minyak sawit, kerusakan sel hati

commit to user
v

perpustakaan.uns.ac.id

digilib.uns.ac.id

ABSTRACT
Weda Kusuma, G0007025, 2010. The Effect of Basil (Ocimum sanctum L.)
Leaves Extract on Mice Hepatocyte Damage Induced by Palm Oil with Recurrent
Warming, Faculty of Medicine, Sebelas Maret University, Surakarta.
Objectives : The purpose of this experiment is to know the effect of basil
(Ocimum sanctum L.) leaves extract to prevent mice hepatocytes damage induced
by palm oil with recurrent warming and whether the increasing doses of the
extract can increase its protection effect.
Methods : This was a pure experiment with post test only control group design.
Twenty five male mice Swiss Webster strain divided into 5 groups; control group
and groups of I-IV. The groups of I-IV was induced by palm oil with recurrent
warming on day 1-14. On the 8th-14th day, group II-IV were administered orally
with multilevel doses of basil leaves extract (5,6 mg, 11,2 mg, dan 16,8 mg/ 20gs
body weight of mice). On the 15th day, all of mice were sacrificed for liver
histopathological study. The hepatocytes damage were observed by number of
necrosis cells on the central lobule of liver. Then the data was analyzed using One
Way Anova and LSD.
Results : The data showed that average number of necrotic nucleus in the control
group was 6,40, group I was 74,60, group II was 22,40, group was III 16,60, and
group IV was 11,40. The results of One Way ANOVA statistical test showed a
significant difference among the five groups, p = 0,000 (p <0,050). The results of
LSD test also showed a significant differences between the five groups with each
p = 0,000 and p = 0,001 (p <0,050).
Conclusion : From this experiments, it can be concluded that the leaves extract of
basil (Ocimum sanctum L.) can prevent mice hepatocytes damage induced by
palm oil with recurrent warming and the increasing doses of the extract can
increase its protection effect or can reduce the greater amount of damaged mice
liver cells.
Key words : basil leaves, palm oil, liver cells damage

commit to user
vi

perpustakaan.uns.ac.id

digilib.uns.ac.id

DAFTAR ISI

PRAKATA ....................................................................................................... vii

DAFTAR ISI ................................................................................................... viii
DAFTAR TABEL .............................................................................................. xi
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ xii
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xiii
BAB I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah ..................................................................... 1
B. Perumusan Masalah ............................................................................ 3
C. Tujuan Penelitian .............................................................................. 4
D. Manfaat Penelitian ...................................................................... ..... 4
BAB II. LANDASAN TEORI
A. Tinjauan Pustaka ......................................................................... ..... 5
1. Kemangi ...................................................................................... 5
a. Klasifikasi ............................................................................... 5
b. Nama daerah ........................................................................... 5
c. Nama asing ............................................................................. 6
d. Deskrispsi ............................................................................... 6

commit to user
viii

perpustakaan.uns.ac.id

digilib.uns.ac.id

e. Deskrispsi daun ....................................................................... 7

f. Bagian tanaman yang digunakan ............................................ 8
g. Kegunaan di masyarakat ........................................................ 8
h. Kandungan kimia ................................................................... 9
i. Efek farmakologis ................................................................. 10
j. Komponen daun kemangi yang memiliki efek antioksidan .. 10
k. Ekstrak ................................................................................... 11
2. Minyak sawit dengan pemanasan berulang................................ 12
3. Struktur histologis hepar ........................................................... 14
4. Proses kerusakan sel hati akibat radikal bebas yang
ditimbulkan oleh minyak sawit dengan pemanasan berulang ... 18
5. Mekanisme ekstrak daun kemangi dalam melindungi sel hati
akibat pemberian minyak sawit dengan pemansan berulang .... 21
B. Kerangka Pemikiran ........................................................................26
C. Hipotesis ..................................................................................... ..... 27
BAB III. METODE PENELITIAN
A. Jenis Penelitian ................................................................................28
B. Lokasi Penelitian .............................................................................28
C. Subjek Penelitian ........................................................................... . 28

commit to user
ix

perpustakaan.uns.ac.id

digilib.uns.ac.id

D. Teknik Sampling ..............................................................................29

E. Rancangan Penelitian ....................................................................... 29
F. Identifikasi Variabel Penelitian ........................................................ 31
G. Definisi Operasional Variabel ......................................................... 32
H. Instrumentasi dan Bahan Penelitian .................................................35
I. Cara Kerja......................................................................... ................ 35
J. Teknik Analisis Data ........................................................................ 39
BAB IV. HASIL PENELITIAN ....................................................................... 40
A. Hasil Penelitian ................................................................. ............. 40
B. Analisis Data ................................................................................... 42
BAB V. PEMBAHASAN ......................................................................... ..... 44
BAB VI. SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan ......................................................................................... 49
B. Saran .......................................................................................... ..... 49
DAFTAR PUSTAKA.......................................................................................50
LAMPIRAN.......................................................................................... ............ 56

commit to user
x

1
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Minyak kelapa sawit atau minyak sawit biasa digunakan masyarakat
dalam kegiatan memasak terutama untuk menggoreng bahan pangan. Metode
penggorengan yang biasa digunakan masyarakat baik industri pengolahan
makanan, restoran, penjual makanan jajanan, maupun tingkat rumah tangga
adalah deep frying. Metode deep frying merupakan metode menggoreng bahan
pangan dengan minyak yang banyak sehingga bahan pangan terendam
seluruhnya. Selain itu, metode ini juga menggunakan suhu tinggi dan jangka
waktu yang lama (Sartika, 2009). Oleh karena itu metode deep frying ini
menyisakan minyak goreng yang cukup banyak. Minyak ini biasanya tidak
dibuang, tetapi digunakan kembali sebagai usaha penghematan. Akibatnya
minyak mengalami pemanasan berulang. Pemanasan minyak berulang pada
suhu tinggi dapat menyebabkan kerusakan minyak goreng. Kerusakan
disebabkan karena proses oksidasi dan polimerisasi asam lemak jenuh yang
dikandungnya (Sunityoso dkk, 1998; Thadeus, 2005). Oksidasi lemak akan
menghasilkan asam-asam lemak berantai pendek yang dapat menimbulkan
perubahan bau dan rasa serta senyawa peroksida yang dapat membahayakan
kesehatan tubuh (Hariskal, 2009).
Berdasarkan fakta tersebut di atas, maka penggunaan minyak secara
berulang berbahaya bagi kesehatan karena dapat membentuk radikal bebas dan
commit to user

perpustakaan.uns.ac.id

2
digilib.uns.ac.id

senyawa toksin (Detak, 2009) serta hidrogen peroksida (H2O2). Hidrogen

peroksida selanjutnya dapat membentuk radikal hidroksil yang sangat
berbahaya (Suryohudoyo, 1993). Radikal hidroksil maupun radikal bebas
lainnya akan mengganggu integritas membran sel, khususnya asam lemak tak
jenuh yang merupakan komponen penting fosfolipid penyusun membran sel,
sehingga akan terbentuk peroksida lipid. Peroksida lipid inilah yang akan
merusak membran sel sampai pada akhirnya terjadi kematian sel. Peroksida
lipid juga menekan pompa Ca2+ mikrosom hati sehingga terjadi gangguan
homeostasis hati. Keadaan tersebut menyebabkan kematian hepatosit karena
tidak terbentuknya ATP sebagai sumber energi. Akibatnya terjadi proses yang
disebut nekrosis hati (Wenas, 1999)
Oleh karena itu, manusia memerlukan perlindungan terhadap dampak
negatif radikal bebas, dalam hal ini akibat penggunaan minyak sawit dengan
pemanasan berulang, yaitu dengan zat antioksidan (Musthafa dan Lawrence,
2000). Antioksidan mampu menghalangi proses oksidasi serta menetralkan
radikal bebas untuk mencegah berbagai penyakit degeneratif (Agustina dan
Ahmad, 2003).
Kemangi (Ocimum sanctum L.) merupakan tanaman yang umum bagi
masyarakat. Dr. Nuri Andarwulan bersama peneliti Institut Pertanian Bogor
(IPB) lainnya menyatakan bahwa kemangi (Ocimum sanctum L.) mengandung
antioksidan alami yang berkhasiat menjaga kesehatan badan. Senyawa
antioksidan alami tersebut berupa senyawa fenolik (tokoferol, flavonoid, asam
fenolat), senyawa nitrogen (alkaloid, turunan klorofil, asam amino, dan amina),
commit to user

3
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

dan beta karotene (Hidayati, 2008). Beta karotene yang terkandung dalam
kemangi merupakan senyawa antioksidan yang dapat mencegah kerusakan sel
tubuh manusia (Jannah, 2009).
Zat antioksidan yang terkandung di dalam kemangi terutama pada
daunnya diperkirakan dapat mengurangi kerusakan sel hepar yang diakibatkan
oleh pemberian minyak sawit dengan pemanasan berulang. Penelitian yang
dilakukan oleh Chattopadhyay et al. (1992) telah membuktikan bahwa ekstrak
daun Ocimum sanctum L. memiliki efek hepatoprotektif terhadap tikus yang
yang diinduksi dengan parasetamol. Alasan inilah yang mendorong penulis
untuk melakukan penelitian apakah pemberian ekstrak daun kemangi (Ocimum
sanctum L.) dapat mencegah kerusakan hepatosit mencit akibat pemberian
minyak sawit dengan pemanasan berulang.

B. Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang masalah di atas, maka dapat dirumuskan
masalah pada penelitian ini, yaitu :
1. Apakah pemberian ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.) dapat
mencegah kerusakan hepatosit mencit akibat pemberian minyak sawit
dengan pemanasan berulang?
2. Apakah peningkatan dosis ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)
dapat meningkatkan efek proteksi terhadap kerusakan hepatosit mencit
akibat pemberian minyak sawit dengan pemanasan berulang?
commit to user

4
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

C. Tujuan Penelitian
1. Untuk mengetahui apakah pemberian ekstrak daun kemangi (Ocimum
sanctum L.) dapat mencegah kerusakan hepatosit mencit akibat pemberian
minyak sawit dengan pemanasan berulang.
2. Untuk mengetahui apakah dengan peningkatan dosis ekstrak daun
kemangi (Ocimum sanctum L.) dapat meningkatkan efek proteksi terhadap
kerusakan hepatosit mencit akibat pemberian minyak sawit dengan
pemanasan berulang.

D. Manfaat Penelitian
1. Aspek teoritis
Penelitian ini dapat memberikan informasi ilmiah mengenai efek
hepatoprotektor ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.) pada mencit
yang dipapar minyak sawit dengan pemanasan berulang.
2. Aspek aplikatif
Penelitian ini dapat dijadikan pedoman pengolahan maupun
penelitian lebih lanjut mengenai daun kemangi sebagai obat herbal alami
yang dapat mencegah kerusakan hati.

commit to user

5
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

BAB II
LANDASAN TEORI

A. Tinjauan Pustaka
1. Kemangi (Ocimum sanctum L.)
a. Klasifikasi
Kingdom

: Plantae

Divisi

: Spermatophyta

Subdivisi

: Angiospermae

Kelas

: Dicotyledonae

Ordo

: Tubiflorae

Famili

: Lamiaceae

Genus

: Ocimum

Spesies

: Ocimum sanctum L. (BPTO, 2004; Tjitrosoepomo, 2002)

Gambar 2.1 Kemangi (Ocimum sanctum L.)

b. Nama Daerah
Jawa

: Lampes/Surawung/Ruku-ruku (Sunda), Lampes (Jawa

Tengah),commit
Kemanghi
(Madura)
to user

6
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

Bali

: Uku-uku

Manado

: Balakama

Maluku

: Lufe-lufe (Ternate)

Minahasa : Baramakusu
(BPTO, 2004)
c. Nama asing
Ajaka, bai gka-prow, bai gkaprow, baranda, basilici herba,
brinda, common basil, garden basil, green holy basil, hot basil, Indian
basil, kala tulasi, kala tulsi, kemangen manjari, Krishna tulsi,
krishnamul, Manjari tulsi, orientin, parnasa, patra-puspha, Rama tulsi,
red holy basil, sacred basil, sacred purple basil, shayama tulsi, St.
Joseph's wort, suvasa tulasi, Thai basil, thulasi, thulsi, Trittavu, tulasi,
tulshi, tulsi, tulsi chajadha, vicenin, Vishnu priya.
d. Deskripsi
Tanaman yang banyak tumbuh di daerah tropis ini merupakan
herba tegak atau semak, tajuk membulat, bercabang banyak, sangat
harum dengan tinggi 0,3-1,5 m. Batang pokoknya tidak jelas, berwarna
hijau sering keunguan, dan berambut atau tidak (Sudarsono dkk., 2002).
Daun tunggal, berhadapan, dan tersusun dari bawah ke atas.
Panjang tangkai daun 0,25-3 cm dengan setiap helaian daun yang
berbentuk bulat telur sampai elips, memanjang, dan ujung meruncing
atau tumpul. Pangkal daun pasak sampai membulat, di kedua
commit to user

7
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

permukaan berambut halus. Tepi daun bergerigi lemah, bergelombang,

atau rata (Sudarsono dkk., 2002).
Bunga kemangi tersusun pada tangkai bunga berbentuk
menegak. Bunganya jenis hemafrodit, berwarna putih dan

berbau

sedikit wangi. Bunga majemuk berkarang dan di ketiak daun ujung

terdapat daun pelindung berbentuk elips atau ulat telur dengan panjang
0,5-1 cm. Kelopak bunga berbentuk bibir, sisi luar berambut kelenjar,
berwarna ungu atau hijau, dan ikut menyusun buah, Mahkota bunga
berwarna putih dengan benang sari tersisip di dasar mahkota dan kepala
putik bercabang dua namun tidak sama (Sudarsono dkk., 2002).
Buah berbentuk kotak, berwarna coklat tua, tegak, dan tertekan
dengan ujung membentuk kait melingkar. Panjang kelopak buah 6-9
mm. Biji berukuran kecil, bertipe keras, coklat tua, dan waktu diambil
segera membengkak, Tiap buah terdiri dari empat biji. Akar tunggang
dan berwarna putih kotor (Mangoting, dkk., 2005; Sudarsono dkk.,
2002).
e. Deskripsi daun
Makroskopis: helaian daun bentuk lonjong, memanjang, bundar,
telur, atau bundar telur memanjang, ujung

runcing, pangkal daun

runcing atau tumpul sampai membundar, tulang-tulang daun menyirip,

tepi bergerigi dangkal atau rata dan bergelombang, daging daun tipis,
permukaan berambut halus, panjang daun 2,5 cm sampai 7,5 cm, lebar
commit to user

8
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

1 cm sampai 2,5 cm, tangkai daun berpenampang bundar, panjang 1 cm

sampai 2 cm, berambut halus.
Mikroskopis: Pada penampang daun melintang melalui tulang
daun tampak epidermis atas terdiri darisatu lapis sel kecil, bentuk empat
persegi panjang, warna jernih, dinding tipis, kutikula tipis dan licin.
Pada pengamatan tangensial berbentuk poligonal, berdinding lurus atau
agak berkelok-kelok. Epidermis bawah terdiri dari satu lapis sel kecil
bentuk empat persegi panjang, warna jernih, dinding tipis, kutikula tipis
dan licin. Rambut penutup, bengkok, terdiri dari 1 sel tangkai dan 2-4
sel kepala, bentuk bundar, tipe Laminaceae. Jaringan palisade terdiri
dari selapis sel berbentuk silindris panjang dan berisi banyak butir
klorofil. Jaringan bunga karang, dinding samping lurus atau agak
berkelok tipis, mengandung butir klorofil. Berkas pembuluh tipe
kolateral terdapat jaringan penguat yaitu kolenkim. Stomata tipe diasitik
pada epidermis atas dan bawah (Depkes RI, 1995)
f. Bagian tanaman yang dapat digunakan: akar, daun, biji.
g. Kegunaan di masyarakat
Daun dapat digunakan untuk mengobati demam, batuk, selesma,
encok, urat syaraf, air susu kurang lancar, sariawan, panu, radang
telinga, muntah-muntah dan mual, peluruh kentut, peluruh haid,
pembersih darah setelah bersalin, borok, dan untuk memperbaiki fungsi
lambung (Sudarsono dkk., 2002).
commit to user

9
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

Biji digunakan untuk mengatasi sembelit, kecing nanah,

penyakit mata, borok, penenang, pencahar, peluruh air kencing, peluruh
keringat, kejang perut (Sudarsono dkk., 2002).
Akar digunakan untuk mengobati penyakit kulit. Semua bagian
tanaman digunakan sebagai pewangi, obat perangsang, disentri, dan
demam (Sudarsono dkk., 2002).
h. Kandungan kimia
Beberapa bahan kimia yang terkandung pada seluruh bagian
tanaman

kemangi

diantaranya

1,8

sineol,

anthol,

apigenin,

stigmaasterol, triptofan, tannin, sterol, dan boron (Hariana, 2007;

Dharmayanti, 2007). Tanaman ini juga mengandung asam askorbat,
asam kafeat, iskulin, histidin, magnesium, dan betasitosterol. Semua
senyawa berkhasiat ini diperlukan tubuh untuk menjaga kesehatan
(Avianto, 2007).
Daun kemangi mengandung minyak atsiri dengan eugenol
sebagai komponen utama. Di samping itu juga mengandung flavon
apigenin, luteolin, flavon O-glikosida apigenin 7-O glukoronida,
luteolin 7-O glukoronida, flavon C-glukosida orientin, molludistin dan
asam ursolat (Sudarsono dkk., 2002).
Sedangkan pada daun kemangi sendiri, penelitian fitokimia telah
membuktikan adanya flavonoid, glikosid, asam gallic dan esternya,
asam caffeic, dan minyak atsiri yang mengandung eugenol (70,5%)
sebagai komponen utama.
commit to user

10
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

Menurut Daftar Komposisi Bahan Makanan Direktorat Gizi

Departemen Kesehatan RI, kemangi termasuk sayuran kaya provitamin
A. Setiap 100 g daun kemangi terkandung 5.000 SI vitamin A.
Kelebihan

lainnya,

kemangi

termasuk

sayuran

yang

banyak

mengandung mineral kalsium dan fosfor, yaitu sebanyak 45 dan 75 mg

per 100 g daun kemangi.
i. Efek farmakologis
Minyak atsiri dari daun kemangi memiliki efek antimikrobiologi
yaitu efek melawan Microbacterium tuberculosis dan Staphylococcus
aureus in vitro dan bakteri serta jamur lainnya. Efek tersebut
diperankan oleh eugenol dan methyl eugenol yang menunjukkan reaksi
yang positif. Oleh karena itu infeksi bakteri dan jamur kulit dapat
diobati dengan jus daun kemangi (Batla, 2004).
Ekstrak cair daun kemangi menunjukkan efek hipotensi dan
dapat menghambat kontraksi otot halus yang dirangsang oleh
asetilkolin, karbakol, dan histamin (Batla, 2004).
Sedangkan ekstrak padat daun kemangi dalam dosis 500mg x 3
selama seminggu, signifikan menurunkan sesak nafas pada 20 pasien
dengan eosinofilia tropical. Meskipun disana tidak ada pengurangan
jumlah eosinofil pada darah tepi (Batla, 2004).
j. Komponen daun kemangi yang memiliki efek antioksidan
Daun Ocimum sanctum L. digunakan untuk mencegah formasi
radikal bebas dan telah digunakan dalam pengobatan arthritis, nyeri
commit to user

11
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

otot, dan reumatik. Kandungan utama Ocimum sanctum L. yang bersifat

antioksidatif adalah asam askorbat, b-karotene, b-sitosterol, eugenol,
asam palmitat, dan tannin (Mishra et al., 2007).
Penelitian yang dilakukan oleh Balanehru dan Nagarajan
menyebutkan bahwa asam ursolic yang terkandung dalam ekstrak daun
Ocimum sanctum L. dapat menghambat peroksidasi lemak (Balanehru
dan Nagarajan, 1991).
k. Ekstrak
Ekstrak adalah sediaan kering, kental, atau cair dibuat dengan
menyari simplisia nabati atau hewani menurut cara yang cocok di luar
pengaruh cahaya matahari langsung (Ansel, 1989).
Metode pembuatan ekstrak yang umum digunakan antara lain
maserasi, perkolasi, soxhletasi, dan infundasi. Metode ekstraksi dipilih
berdasarkan beberapa faktor seperti sifat dari bahan mentah obat dan
penyesuaian dengan tiap macam metode ekstraksi dan kepentingan
dalam memperoleh ekstrak yang sempurna (Ansel, 1989).
Menurut Bhargava and Singh (1981) metode yang sesuai untuk
mengekstrak daun kemangi adalah metode perkolasi. Perkolasi
merupakan proses penyarian serbuk simplisia dengan pelarut yang
cocok dengan melewatkan secara perlahan-lahan melewati suatu kolom,
serbuk simplisia dimasukkan ke dalam perkolator. Dengan cara
penyarian ini mengalirkan cairan melalui kolom dari atas ke bawah
melalui celah untuk keluar dan ditarik oleh gaya berat seberat cairan
commit to user

12
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

dalam kolom. Dengan pembaharuan yang terus menerus bahan pelarut,

memungkinkan berlangsungnya maserasi bertingkat (Ansel, 1989).
Menurut Balai Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat (BPTO)
Tawangmangu, dari metode perkolasi akan dihasilkan ekstrak kental
dari sejumlah simplisia kering daun kemangi.
Bubuk daun Ocimum sanctum L. diekstrak dengan cara
perkolasi pada suhu ruangan 70% ethyl alkohol. Ekstrak terkonsentrasi
di bawah tekanan yang berkurang (suhu 50C) dan pada akhirnya
dikeringkan di dalam vacuum desiccator. Sisa dari Ocimum sanctum L.
dilarutkan di dalam propylene glycol dengan konsentrasi 50 mg/ml dan
digunakan pada percobaan.
2. Minyak sawit dengan pemanasan berulang
Minyak sawit biasanya digunakan oleh masyarakat untuk
menggoreng bahan pangan (Sutarmi dan Rozaline, 2005) dengan metode
deep frying, yaitu bahan pangan yang digoreng terendam dalam minyak
goreng panas (Fennema, 1985). Dengan kata lain, jumlah minyak yang
digunakan untuk menggoreng cukup banyak karena setiap bahan pangan
terendam dalam minyak. Temperatur yang digunakan pada proses
penggorengan biasanya sekitar 150C dan setiap bahan pangan rata-rata
memerlukan waktu 8 menit untuk matang pada suhu tersebut. Oleh karena
metode deep frying ini akan menyisakan sejumlah minyak yang masih
cukup banyak, biasanya minyak yang digunakan setelah menggoreng tidak
dibuang, melainkan digunakan kembali untuk menggoreng sebagai usaha
commit to user

13
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

penghematan atau menekan biaya produksi. Penggunaan minyak goreng

secara berulang kali merupakan hal yang biasa di masyarakat (Hariskal,
2009). Minyak sawit akan diganti setelah tiga kali atau lebih penggunaan
(Suharto, 1991). Padahal telah diketahui bahwa pada pemanasan yang
relatif tinggi yaitu pada suhu 150-180C, minyak dapat mengalami
kerusakan khususnya asam lemak tak jenuh (Fer, 2004). Dengan sistem
menggoreng deep frying, yang umumnya digunakan masyarakat Indonesia,
dan juga pemakaian berulang minyak goreng, akan mengubah asam lemak
tidak jenuh menjadi asam lemak trans, yang dapat meningkatkan kolesterol
LDL dan menurunkan kolesterol HDL (Intan, 2010). Penelitian yang
dilakukan oleh Sartika pada tahun 2009 menunjukkan bahwa asam lemak
trans baru terbentuk setelah proses menggoreng dengan metode deep
frying pada pengulangan ke-2, dan kadarnya meningkat sejalan dengan
pengulangan penggunaan minyak. Selain itu diketahui

bahwa minyak

goreng yang digunakan berulang kali pada suhu tinggi akan mengalami
proses oksidasi membentuk radikal bebas, senyawa toksin, dan senyawa
peroksida yang berbahaya bagi kesehatan tubuh manusia (Detak, 2009).
Apabila minyak tersebut diberikan kepada hewan percobaan akan
menyebabkan kehilangan berat badan, gangguan pertumbuhan, kerusakan
hepar dan akumulasi peroksida dalam jaringan (Fennema, 1985).

commit to user

14
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

3. Stuktur histologis hepar

Hepar adalah organ pencernaan dan kelenjar terbesar dalam tubuh
dengan berat antara 1,2 - 1,8 kg atau kurang lebih 2,5% berat badan orang
dewasa (Amirudin, 2007; Junqueira dan Carneiro, 2007). Hepar juga
merupakan pusat metabolisme tubuh dengan fungsi yang sangat kompleks,
dimana fungsi hepar dalam sistem sirkulasi adalah untuk menampung,
mengubah,

menimbun

metabolit,

menetralisasi

dan

mengeluarkan

substansi toksik yang terbawa oleh aliran darah. Sebagian besar darah
yang menuju ke hepar dipasok dari vena porta, dan sebagian kecil dipasok
dari arteri hepatika (Amirudin, 2007; Junqueira dan Carneiro, 2007). Hati
mempunyai peran yang dominan, seperti tempat utama untuk aktivitas
sintesis, katabolik, dan detoksifikasi dalam tubuh, menentukan ekspresi
pigmen darah (heme), serta berperan dalam reaksi imunologik (Robbins et
al., 2004).
Secara makroskopis, hepar tebagi atas beberapa lobus dan tiap
lobus hepar terbagi menjadi struktur yang dinamakan lobulus, yang
merupakan unit mikroskopis dan fungsional organ. Secara mikroskopis, di
dalam hati manusia terdapat 50.000-100.000 lobuli. Setiap lobulus
berbentuk heksagonal yang terdiri atas lembaran sel hepar berbentuk
kubus yang tersusun radial mengelilingi vena sentralis. Diantara lembaran
sel hepar terdapat kapiler-kapiler yang disebut sinusoid, sinusoid
merupakan cabang vena porta dan arteri hepatika. Selain cabang-cabang
vena porta dan arteri hepatika yang melingkari bagian perifer lobulus
commit to user

15
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

hepar, juga terdapat saluran empedu yang membentuk kapiler empedu,

dinamakan kanalikuli empedu yang berjalan diantara lembaran sel hati
(Amirudin, 2007; Price dan Wilson, 2006).
a. Lobulus hepar
Lobulus hepar sebagai kesatuan histologis berbentuk prisma
poligonal, diameter 1-2 mm, penampang melintang tampak sebagai
heksagonal dengan pusatnya vena sentralis dan di sudut-sudut luar
lobuli terdapat kanalis porta (Leeson dkk., 1996). Lobulus-lobulus ini
dipisahkan oleh jaringan pengikat dan pembuluh darah. Daerah ini
disebut trigonum portae yang berisi cabang arteri hepatika, cabang vena
porta, cabang duktus biliferus, dan anyaman pembuluh limfe (Junqueira
dan Carneiro, 2007).
Pembagian lobulus hepar sebagai unit fungsional dibagi
menjadi. tiga zona:
Zona 1

: zona aktif, sel-selnya paling dekat dengan pembuluh darah,

akibatnya zona ini yang pertama kali dipengaruhi oleh
perubahan darah yang masuk, disebut juga Zone of
permanent function.

Zona 2

: zona intermedia, sel-selnya memberi respon kedua terhadap

darah, disebut juga Intermediate zone.

Zona 3

: zona pasif, aktifitas sel-selnya rendah dan tampak aktif bila

kebutuhan meningkat (Leeson dkk., 1996).
commit to user

16
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

b. Parenkim hepar
Parenkim hepar terdiri atas sel-sel hepar (hepatosit) yang
tersusun berderet secara radier dalam lobulus hepar (Junqueira dan
Carneiro, 2007). Sel-sel hepar ini berbentuk polyhedral dengan ukuran
yang berbeda-beda, nukleusnya lebar, bulat, berada di tengah,
mengandung satu atau lebih nuckleoli serta terdapat bercak-bercak
kromatin. Pada sel hepar tikus dapat juga ditemui polipoid nukleus,
binukleus dan multinukleus. Sitoplasma sel hepar bervariasi dalam
penampakan, tergantung dari nutrisi dan status fungsionalnya.
(Bergman et al., 1996).
Lempeng-lempeng sel-sel hepar atau hepatosit ini secara radial
bermula dari tepian lobulus menuju ke vena sentralis sebagai pusatnya.
Lembaran-lembaran ini bercabang-cabang dan beranastomose secara
bebas sehingga diantara lempeng-lempeng tersebut terdapat ruangan
sinusoid. Permukaan sel hepar berkontak dengan dinding sinusoid
melalui celah Disse dan juga kontak dengan permukaan hepatosit lain
(Junqueira dan Carneiro, 2007; Lesson dkk., 1996).
c. Sinusoid hepar
Sinusoid hati merupakan suatu pembuluh yang melebar tidak
teratur dan hanya terdiri dari satu lapisan sel-sel endotel yang tidak
kontinyu (Jones, 1993). Sinusoid terdapat diantara lempeng-lempeng sel
hepar dan mengikuti percabangannya (Eroschenko, 2000). Sinusoid hati
membentuk jaringan intralobuler yang kaya akan susunan pembuluh darah
commit to user

17
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

yang saling bertemu satu sama lainnya pada vena sentralis. Menurut tipe
kapilernya dibedakan menjadi dua : (1) sinusoid yang lebar dan bervariasi
dalam ukuran diameter, dan (2) sinusoid yang dindingnya terdiri atas dua
tipe sel yang dapat dibedakan, yaitu sel endotel, dan sel Kupffer (Jones,
1993). Sel Kupffer berbentuk stelat dengan sifat histologis seperti vakuola
jernih, lisosom dan retikuloendoplasma granular tersebar di seluruh
sitoplasma. Ini membedakan sel-sel Kupffer dan sel-sel endotel (Junqueira
dan Carneiro, 2007). Sel Kupffer di sini bersifat "endogeneous peroxidase
activity" dan beregenerasi atau berproliferasi dengan sendirinya. Sel
Kupffer ini berperan dalam produksi benda-benda imun, fagositosis, dan
formasi darah (Jones, 1993).
Sinusoid hati juga mengandung sel-sel darah dan pada neonatus
mengandung elemen hemopoetik. Diantara sinusoid terdapat sebuah celah,
disebut celah disse, memisahkan permukaan hepatosit yang menghadap
sinusoid dengan barisan sel endotel (Damjanov and Linder, 1996).
d. Kanalikuli Biliferus
Merupakan celah tubuler yang hanya dibatasi oleh membran
plasma hepatosit dan mempunyai sedikit mikrovili pada bagian
dalamnya. Kanalikuli biliferus membentuk anastomosis yang kompleks
di sepanjang lempeng-lempeng lobulus hati dan berakhir dalam daerah
porta. Oleh karena itu, empedu mengalir berlawanan arah dengan aliran
darah, yaitu dari tengah ke tepi lobulus. Beberapa kanalikuli biliferus
commit to user

18
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

membentuk duktulus biliferus yang bermuara dalam duktus biliferus

dalam segitiga porta (Junqueira dan Carneiro, 2007).
e. Daya regenerasi hepar
Hati mempunyai kemampuan regenerasi yang luar biasa
meskipun sel-selnya diperbaharui secara lambat. Percobaan pada hewan
tikus, hati dapat memulihkan kehilangan sampai 75% berat total hati
hanya dalam waktu satu bulan (Junqueira dan Carneiro, 2007). Sel
nekrotik lokal dapat digantikan oleh sel baru melalui mitosis hepatosit
yang berdekatan (Lu, 1995). Kesempurnaan pemulihan sangat
tergantung pada keutuhan kerangka dasar jaringan. Pada hati yang
cedera, jika kerangka retikulum masih utuh akan terjadi regenerasi sel
hati yang teratur dan struktur lobuli yang kembali normal serta
fungsinya akan pulih kembali (Robbins et al., 2004). Apabila kerusakan
hati terjadi berulang-ulang atau terus menerus, terdapat nekrosis masif
sel hati atau destruksi unsur-unsur stromanya, maka terbentuk banyak
jaringan ikat bersama regenerasi sel hati. Kelebihan jaringan ikat
mengakibatkan kacaunya struktur hati, suatu keadaan yang dikenal
dengan sirosis (Robbins et al., 2004)
4. Proses kerusakan sel hati akibat radikal bebas yang ditimbulkan oleh
minyak sawit dengan pemanasan berulang
Hati merupakan organ tubuh yang paling sering menerima jejas
(Robbins et al., 2004). Dalam hal ini kerusakan sel hati disebabkan oleh
pemberian minyak sawit dengan pemanasan berulang. Dimana minyak
commit to user

19
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

sawit dengan pemanasan berulang pada suhu tinggi dapat membentuk

radikal bebas dan senyawa toksin (Detak, 2009) serta terjadi pembentukan
hidrogen peroksida (H2O2).
Radikal bebas merupakan spesies kimiawi dengan satu elektron tak
berpasangan di orbital terluar. Adanya elektron tak berpasangan
menyebabkan radikal bebas secara kimiawi sangat tidak stabil dan mudah
bereaksi dengan zat kimia anorganik atau organik (Robbins et al., 2004).
Sifat reaktif ini menimbulkan perubahan kimiawi dan merusak berbagai
komponen sel hidup seperti protein, lipid, karbohidrat, maupun nukleotida
(Subroto, 2005).
Tiga reaksi yang paling relevan dengan jejas sel yang diperantarai
radikal bebas yaitu peroksidasi lipid membran, fragmentasi DNA, dan
ikatan silang protein (Robbins et al., 2004).
Membran sel hampir seluruhnya terdiri dari protein dan lipid.
Struktur dasarnya ialah sebuah lapisan lipid bilayer dan diantara lapisan
lipid bilayer tersebut terdapat molekul besar protein globular. Sedangkan
struktur dasar dari lapisan lipid bilayer sendiri terdiri atas molekulmolekul fosfolipid (Guyton dan Hall, 1997). Molekul fosfolipid ini
mengandung asam lemak tidak jenuh (Suryohudoyo, 1993) yang
mempunyai ikatan rangkap antara beberapa atom karbon. Ikatan ini mudah
diserang oleh radikal bebas yang berasal dari oksigen sehingga terbentuk
senyawa peroksida lipid yang dapat merusak membran sel (Robbins et al.,
2004).

commit to user

20
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

Kerusakan membran sel menyebabkan membran sel menjadi lebih

permeabel terhadap beberapa substansi dan memungkinkan substansi
tersebut melewati membran secara bebas. Jika substansi tersebut adalah
radikal bebas seperti H2O2 maka akan terjadi reaksi Fenton (Fe2+ + H2O2
Fe3+ + OH0 + OH-) yang diperantarai oleh logam transisi, seperti
tembaga (Cu) dan zat besi (Fe). Reaksi Fenton tersebut akan menghasilkan
radikal hidroksil (OH0) yang akan lebih merusak membran sel (Robbins et
al., 2004).
Perubahan permeabilitas membran yang disebabkan peroksida lipid
juga mengakibatkan pengaturan ion, nutrisi sel, dan volume intra-ekstrasel
menjadi terganggu dan pada akhirnya proses metabolisme sel secara
keseluruhan menjadi terganggu. Peroksida lipid juga menekan pompa Ca2+
mikrosom hati sehingga terjadi gangguan homeostasis sel hati.
Peningkatan Ca2+ intrasel akan mengaktivasi fosfolipase (mencetuskan
kerusakan membran), protease (mengatabolisasi protein membran dan
struktural), ATPase (mempercepat deplesi ATP), dan endonuklease
(memecah material genetik). Semua keadaan tersebut akan merusak sel
hati. Ketika suatu sel tidak dapat kembali normal lagi (point of no return)
atau tidak dapat beregenerasi lagi setelah mendapat jejas berulang kali dan
dengan durasi yang panjang maka sel tersebut akan mengalami kematian
(nekrosis) (Robbins et al., 2004).

commit to user

21
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

Secara mikroskopis jaringan nekrosis seluruhnya berwarna kemerahan

dan tidak menyerap zat warna hematoksilin, sering pucat. Pada nekrosis
kerusakan banyak terjadi pada inti, perubahan pada inti diantaranya adalah:
a. hilangnya gambaran kromatin
b. inti menjadi keriput, tidak-vaskuler lagi
c. inti tampak lebih padat, warnanya gelap hitam (piknosis)
d. inti terbagi-bagi atas fragmen-fragmen, robek (karioreksis)
e. inti tidak lagi menyerap zat warna, karena itu pucat dan tidak nyata
(kariolisis) (Price dan Wilson, 2006).
Umumnya perubahan-perubahan lisis yang terjadi pada sel nekrotik
dapat terjadi pada semua bagian sel, tetapi perubahan pada inti sel adalah
penunjuk paling jelas pada kematian sel (Price dan Wilson, 2006).
Petunjuk paling positif bahwa sel telah mati diperoleh dari penampilan
intinya, yang paling umum disebut piknotik (Cormack, 1994).
Penelitian yang dilakukan oleh Sunityoso dkk (1998) menunjukkan
bahwa pemberian minyak goreng bekas pada mencit dapat menyebabkan
kerusakan pada hepar berupa perluasan dan pembendungan vena sentralis,
inti sel-sel hepar mengalami piknotik dan berlanjut serta terjadi
peradangan. Selain itu penelitian yang dilakukan oleh Herwiyanti dan
Gufran (1999) menunjukkan bahwa radikal bebas dapat menyebabkan
kematian sel dan nekrosis hepar pada tikus putih

commit to user

perpustakaan.uns.ac.id

22
digilib.uns.ac.id

5. Mekanisme ekstrak daun kemangi dalam melindungi sel hati akibat

pemberian minyak sawit dengan pemanasan berulang
Secara umum, radikal bebas merusak struktur seluler dan
subseluler melalui tiga tahap yaitu tahap inisiasi, tahap propagasi, dan
tahap terminasi. Oleh karena itu untuk melawan radikal bebas ini
diperlukan tiga tahapan yaitu tahap pertama mencegah dan menghambat
terbentuknya radikal bebas, tahap kedua inaktivasi dan memutus propagasi
(chain breaking), dan tahap selanjutnya memperbaiki kerusakan akibat
radikal bebas (Agustina dan Ahmad, 2003)
Antioksidan merupakan senyawa pemberi elektron (electron donors)
dalam arti kimia, namun menurut arti biologis pengertian antioksidan lebih
luas. Pengertian antioksidan dalam arti biologis adalah senyawa-senyawa
yang dapat meredam dampak negatif oksidan (Suryohudoyo, 1993),
termasuk dalam penghambatan dan penghentian kerusakan oksidatif
terhadap suatu molekul target (Setiawan dan Suhartono, 2005). Manfaat
antioksidan adalah untuk mengurangi kerusakan asam deoksiribonukleat,
menurunkan peroksidasi lipid, atau terhambatnya transformasi keganasan
invitro (Agustina dan Ahmad, 2003). Antioksidan eksogen yang dapat
meredam efek buruk radikal bebas adalah yang tergolong dalam
antioksidan vitamin seperti vitamin E, C, dan beta karoten (Bagiada, dkk.,
1995)
Daun kemangi (Ocimum sanctum L.) dapat digunakan untuk
mencegah formasi radikal bebas dan telah digunakan dalam pengobatan
commit to user

23
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

arthritis, nyeri otot, dan reumatik. Kandungan utama Ocimum sanctum L.

yang bersifat antioksidatif adalah asam askorbat (Vitamin C), tokoferol
(Vitamin E), b-karotene, b-sitosterol, eugenol, asam palmitat, asam
ursolic, senyawa fenolik (flavonoid, asam fenolat), dan senyawa nitrogen
(alkaloid, turunan klorofil, asam amino, dan amina) (Mishra et al., 2007;
Hidayati, 2008).
Secara umum, antioksidan dapat digolongkan menjadi 3 kelompok
yaitu antioksidan primer, sekunder dan tersier. Antioksidan primer ialah
golongan antioksidan yang berfungi untuk mencegah pembentukan radikal
bebas, misalnya transferin, feritin, dan albumin. Antioksidan sekunder
ialah golongan antioksidan yang berfungsi menangkap radikal bebas dan
menghentikan

pembentukan

radikal

bebas,

misalnya

Superoxide

Dismutase (SOD), Glutathion Peroxidase (GPx), Vitamin C, Vitamin E, bkarotene, dll. Antioksidan tersier ialah golongan antioksidan yang
berfungsi memperbaiki jaringan tubuh yang rusak oleh radikal bebas.
Vitamin E dan b-karotene (antioksidan sekunder) yang terkandung
dalam daun kemangi merupakan pertahanan utama melawan oksigen
perusak, khususnya khususnya radikal bebas dan peroksidasi lipid dalam
jaringan hati (Maslachah et al., 2001). Vitamin E dan b-karotene bersifat
lipofilik sehingga dapat berperan pada membran sel untuk mencegah
peroksidasi lipid. Walaupun nantinya akan terbentuk radikal vitamin E,
senyawa tersebut tidak terlalu reaktif karena terjadinya resonansi. Terdapat
tiga cara untuk menghilangkan
radikal
vitamin E yaitu (1) radikal vitamin
commit
to user

24
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

E mengalami reaksi-reaksi intramolekul menghasilkan senyawa-senyawa

non-radikal, (2) setelah bergeser kearah permukaan molekul, radikal
vitamin E bereaksi dengan vitamin C dan menghasilkan radikal vitamin C,
radikal vitamin C kemudian dihilangkan melalui reaksi dismutasi yang
menghasilkan vitamin C dan dihidro-asam ascorbat (DHAA), dan (3)
radikal vitamin E dapat pula bereaksi dengan glutation atau sistein yang
juga terdapat dalam sitosol. Vitamin E hanya dapat berperan bila tekanan
oksigen (pO2) tinggi. Pada tekanan oksigen rendah, peranan vitamin E
digantikan oleh b-karoten. Seperti halnya radikal vitamin E, radikal bkaroten agak stabil karena adanya resonansi dalam molekulnya
(Suryohudoyo, 1993). Sedangkan vitamin C sebaliknya bersifat hidrofilik
dan berperan dalam sitosol.
Senyawa fenolik seperti flavonoid, asam fenolat, dan tannin yang
juga terkandung dalam daun kemangi (Ocimum sanctum L.) merupakan
antioksidan primer maupun sekunder yang dapat mencegah terjadinya
proses oksidasi lebih lanjut dengan cara mendonorkan atom hidrogennya
kepada radikal bebas sehingga dapat menghambat terbentuknya radikal
peroksida pada tahap propagasi (Subroto, 2005). Gugus fungsi pada
senyawa flavonoid dapat berperan sebagai penangkap radikal bebas
hidroksi (OH) sehingga tidak mengoksidasi lemak, protein, dan DNA
dalam sel. Kematian sel hati pun dapat dicegah. Kemampuan flavonoid
dalam menangkap radikal bebas ini 100 kali lebih efektif dibandingkan
commit to user

25
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

vitamin C dan 25 kali lebih efektif dibandingkan vitamin E (Salamah dkk.,

2008 cit. Harbone, 1987).
Asam ursolic yang terkandung dalam ekstrak daun Ocimum sanctum
L. juga diperkirakan dapat menghambat peroksidasi lemak (Balanehru dan
Nagarajan, 1991). Namun belum ada penelitian yang dapat menjelaskan
mekanisme kerja asam ursolic dalam menghambat peroksidasi lemak.
Dengan demikian kerusakan hati yang timbul akibat reaksi radikal
hidroksil (radikal bebas) yang disebabkan oleh pemberian minyak sawit
dengan pemanasan berulang dapat dicegah dan kerusakan hati pun dapat
berkurang (Setiawan, 2006). Pencegahan kerusakan hati tersebut yaitu
dengan pemberian ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)
(Chattopadhyay et al., 1992; Ubaid et al., 2003)

commit to user

26
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

B. Kerangka Pemikiran
Minyak sawit dengan
pemanasan berulang

Ekstrak daun kemangi

(Ocimum sanctum L.)

Oksidasi yang dikatalis

oleh pemanasan
Senyawa hidrogen
peroksida dan radikal
bebas lainnya

Asam askorbat (Vitamin C)

Reaksi dengan lipid tak jenuh

Tokoferol (Vit E)
Asam palmitat
Asam ursolic
b-karoten
Senyawa fenolik
flavonoid, tannin
Senyawa nitrogen
alkaloid

Antioksidan alami
Penangkap radikal bebas
Peroksidasi lipid pada
membran sel

Radikal bebas masuk ke intrasel

terjadi reaksi Fenton Radikal hidroksil

Menghambat peroksidasi lipid

Menangkap radikal bebas di intrasel

Merusak membran sel dan mitokondria,

mengganggu pompa Ca2+

Gangguan homeostasis sel, gangguan

metabolisme sel, ATP tidak terbentuk

Nekrosis
(inti piknotik, karioreksis, kariolisis)

Faktor lain: genetik, umur,

jenis kelamin, makanan,
minuman, tempat perlakuan,
kondisi psikologi mencit,
patogenitas suatu zat, daya
regenerasi sel hati, imunitas.

commit
to user
Gambar 2.2 Skema
Kerangka
Berpikir Konseptual

27
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

C. Hipotesis
1. Pemberian ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.) dapat mencegah
kerusakan hepatosit mencit akibat pemberian minyak sawit dengan
pemanasan berulang.
2. Peningkatan dosis ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.) dapat
meningkatkan efek proteksi terhadap kerusakan hepatosit akibat
pemberian minyak sawit dengan pemanasan berulang.

commit to user

28
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

BAB III
METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorik.
Penelitian ini merupakan langkah awal dalam penelitian sebelum hasil
penelitian diterapkan pada manusia (trial clinic). Peneliti memberikan
perlakuan

terhadap

sampel

berupa

hewan

coba

di

laboratorium

(Taufiqurrahman, 2003).
B. Lokasi Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Histologi Fakultas Kedokteran
Universitas Sebelas Maret (UNS) Surakarta.
C. Subjek Penelitian
1. Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit (Mus
musculus) yang didapat dari Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi
Surakarta dengan kriteria subjek berjenis kelamin jantan, strain Swiss
Webster dan berumur 2-3 bulan dengan berat badan 20 gr.
2. Besar sampel: dua puluh lima (25) ekor mencit
Banyaknya jumlah sampel ditentukan dengan menggunakan rumus
Federer (Purawisastra, 2001)
Rumus Federer :
(k-1) (n-1) > 15
k : jumlah kelompok

commit to user

28

29
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

n : jumlah sampel dalam tiap kelompok

Besar sampel yang diperlukan dihitung dengan rumus:
(k-1) (n-1) > 15

;k=5

(5-1) (n-1) > 15

4n-4

> 15

4n

>19

> 4,75 (=5)

Peneliti membagi sampel menjadi 5 kelompok dimana tiap

kelompok terdapat 5 mencit sehingga dalam penelitian ini membutuhkan

25 mencit dari populasi yang ada.
D. Teknik Sampling
Pengambilan sampel sebanyak 25 ekor dilakukan secara incidental
sampling karena pemilihan subjek sampel berasal dari hewan yang secara
kebetulan dijumpai (Taufiqurrahman, 2003).
E. Rancangan penelitian
Rancangan penelitian ini adalah The post test only control group design
(Taufiqurrahman, 2003).

Sampel
Mencit
25 ekor

KK

O0

KP1

O1

KP2

O2

KP3

O3

KP4

O4

Bandingkan
dengan uji
statistik

Gambar 3.1 Skema Rancangan Penelitian

commit to user

perpustakaan.uns.ac.id

30
digilib.uns.ac.id

Keterangan :
KK : Kelompok kontrol, hanya diberi diet standar (pellet dan air minum)
serta propylen glycol 50 mg/ml pada 7 hari terakhir.
KP1 : Kelompok perlakuan 1, diberikan diet standar dan minyak sawit dengan
pemanasan berulang peroral sebanyak 0,06 ml/20g BB mencit perhari
serta propylen glycol 50 mg/ml pada 7 hari terakhir.
KP2 : Kelompok perlakuan 2, diberi diet standar dan minyak sawit dengan
pemanasan berulang peroral sebanyak 0,06 ml/20g BB mencit perhari
selama 14 hari, dimana 7 hari terakhir berturut-turut setelah selang 1
jam diberikan pula ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)
sebanyak 5,6 mg/20 g BB mencit.
KP3 : Kelompok perlakuan 3, diberi diet standar dan minyak sawit dengan
pemanasan berulang peroral sebanyak 0,06 ml/20g BB mencit perhari
selama 14 hari, dimana 7 hari terakhir berturut-turut setelah selang 1
jam diberikan pula ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)
sebanyak 11,2 mg//20 g BB mencit.
KP4 : Kelompok perlakuan 4, diberi diet standar dan minyak sawit dengan
pemanasan berulang peroral sebanyak 0,06 ml/20g BB mencit perhari
selama 14 hari, dimana 7 hari terakhir berturut-turut setelah selang 1
jam diberikan pula ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)
sebanyak 16,8 mg//20 g BB mencit.
O0 : Pengamatan jumlah inti sel hepar piknotik, karioreksis, dan kariolisis
dari 100 sel lobulus centralis hepar pada kelompok kontrol (KK)
commit to user

31
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

O1 : Pengamatan jumlah inti sel hepar piknotik, karioreksis, dan kariolisis

dari 100 sel lobulus centralis hepar pada kelompok perlakuan 1 (KP1)
O2 : Pengamatan jumlah inti sel hepar piknotik, karioreksis, dan kariolisis
dari 100 sel lobulus centralis hepar pada kelompok perlakuan 2 (KP2)
O3 : Pengamatan jumlah inti sel hepar piknotik, karioreksis, dan kariolisis
dari 100 sel lobulus centralis hepar pada kelompok perlakuan 3 (KP3)
O4 : Pengamatan jumlah inti sel hepar piknotik, karioreksis, dan kariolisis
dari 100 sel lobulus centralis hepar pada kelompok perlakuan 4 (KP4)
Pengamatan jumlah inti sel hepar piknotik, karioreksis dan kariolisis
dilakukan pada hari ke-15 setelah perlakuan pertama dikerjakan.
F. Identifikasi variabel penelitian
1. Variabel bebas

: Ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)

2. Variabel terikat

: Kerusakan sel hati mencit yang ditandai dengan

gambaran mikroskopis inti sel hati yang nekrosis
baik dengan inti piknotik, karioreksis, maupun
kariolisis.

3. Variabel luar
a. Variabel luar terkendali
Jenis makanan, minuman, galur mencit, umur mencit, jenis kelamin mencit,
berat badan mencit, suhu udara ruangan.
b. Variabel luar tak terkendali
Kondisi psikologis mencit, patogenesis suatu zat yang dapat merusak
hepar selain radikal bebas yaitu efek toksik dan hipersensitivitas
commit to user

32
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

(alergi), keadaan awal hati mencit, daya regenerasi sel hati dari masingmasing hewan coba dan imunitas dari masing-masing hewan coba.

G. Definisi Operasional Variabel

1. Variabel bebas: ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)
Bagian tanaman kemangi yang digunakan pada penelitian ini
adalah daun karena sebagian besar kandungan zat antioksidan berada pada
bagian daun kemangi (Mishra et al., 2007). Berdasarkan penelitian yang
telah dilakukan Chattopadhyay et al. (1992), Bhargava and Singh (1981),
dan Ubaid et al. (2003), pemberian ekstrak daun Ocimum sanctum L.
sebanyak 200 mg/kg/hari atau 40 mg/200 g tikus per hari secara per oral
menunjukkan efek hepatoprotektor pada tikus. Faktor konversi tikus putih
dengan berat badan 200 g ke mencit dengan berat badan 20 g adalah 0,14
(Ngatidjan, 1991).
Dosis untuk mencit = 40 mg x 0,14 / 20 g mencit
= 5,6 mg / 20 g mencit
Jadi pada penelitian ini digunakan dosis pemberian ekstrak daun
kemangi (Ocimum sanctum L.) sebanyak 5,6 mg/20 g mencit, 11,2 mg/20
gram mencit, dan 16,8 mg/20 g mencit untuk mengetahui apakah terdapat
efek hepatoprotektor dari ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.) dan
pada dosis berapa efek hepatoprotektor tersebut paling baik.
Skala pengukuran variabel ini adalah ordinal.
commit to user

perpustakaan.uns.ac.id

33
digilib.uns.ac.id

2. Kerusakan sel hepar

Kerusakan sel hepar adalah gambaran mikroskopis sel hepar
mencit yang dipapar dengan minyak goreng dengan pemanasan berulang.
Hal ini dinilai dari jumlah sel hepar yang mengalami nekrosis yang
dihitung dari 100 sel pada zona sentrolobuler pada perbesaran 1000 kali.
Adapun tanda-tanda sel yang mengalami nekrosis:
a. Sel yang mengalami pyknosis intinya kisut (mengecil) dan bertambah
basofil, berwarna gelap (hiperkromasi) batasnya tidak teratur.
b. Sel yang mengalami karyorrhexis inti mengalami fragmentasi atau
hancur degan meninggalkan pecahan-pecahan zat kromatin yang
tersebar di dalam sel.
c. Sel yang mengalami karyolisis yaitu kromatin basofil menjadi pucat,
inti sel kehilangan kemampuan untuk diwarnai dan menghilang begitu
saja (Price dan Wilson, 2006).
Skala pengukuran variabel ini adalah rasio.
3. Variabel luar terkendali
a. Jenis makanan dan minuman
Makanan yang diberikan berupa pellet dan minuman dari air PAM.
b. Galur mencit
Jenis hewan coba yang digunakan adalah mencit (Mus musculus)
dengan galur Swiss webster.
c. Umur, jenis kelamin, dan berat badan mencit
Mencit berumur 2-3 bulan, berjenis kelamin jantan dengan berat 20g
commit to user

34
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

d. Suhu ruangan
Hewan percobaan diletakkan dalam ruangan dengan suhu udara
berkisar antara 25-28o C.

4. Variabel luar tak terkendali

a. Keadaan psikologis
Kondisi psikologis mencit sangat dipengaruhi oleh keadaan
lingkungan yang terlalu ramai atau gaduh, pemberian perlakuan
berulang kali, keadaan kandang, dan perkelahian antar mencit. Untuk
mengurangi keadaan tersebut, peneliti mengatur tempat kandang mencit
di tempat yang tidak ramai oleh manusia.
b. Patogenesis suatu zat yang dapat merusak hepar selain radikal bebas
yaitu efek toksik dan hipersensitivitas (alergi). Reaksi hipersensitivitas
dapat terjadi karena adanya variasi kepekaan mencit terhadap zat yang
digunakan.
c. Keadaan awal hati mencit tidak diperiksa pada penelitian ini sehingga
mungkin saja ada mencit yang sebelum perlakuan hatinya sudah
mengalami kelainan.
d. Daya regenerasi sel hati dari masing-masing hewan coba tidak sama.
e. Imunitas (sistem kekebalan) dari masing-masing hewan coba tidak
sama.

commit to user

35
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

H. Instrumentasi dan Bahan Penelitian

1. Alat-alat yang digunakan
a. Kandang mencit 5 buah masing-masing untuk 5 ekor mencit.
b. Timbangan duduk dan timbangan neraca
c. Alat bedah hewan percobaan (scalpel, pinset, gunting, jarum, meja
lilin).
d. Sonde lambung
e. Alat untuk pembuatan preparat histologi (mikrotom, waterbath)
f. Mikroskop cahaya medan terang
g. Gelas ukur dan pengaduk
h. Pipet mikro
2. Bahan yang digunakan
a. Makanan hewan percobaan (pellet)
b. Aquades
c. Minyak goreng kelapa sawit dengan pemanasan berulang
d. Ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)
e. Bahan untuk pembuatan preparat histology (alkohol, xylol, pengecatan
Haematoxylin Eosin/HE)
I.

Cara Kerja
1. Persiapan percobaan
a. Sampel
Sampel mencit 25 ekor dilakukan pengelompokkan secara
random menjadi 5 kelompok, masing-masing berisi 5 ekor mencit.
commit to user

36
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

Sampel diadaptasikan di laboratorium Histologi selama 1 minggu. Satu

minggu setelah adaptasi, dilakukan penimbangan dan penanda untuk
menentukan dosis.
b. Ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.)
Metode ekstraksi yang digunakan disini sama seperti yang
dikemukakan oleh Bhargava and Singh (1981). Bubuk daun Ocimum
sanctum L. diekstrak dengan cara perkolasi pada suhu ruangan 70%
ethyl alkohol. Ekstrak terkonsentrasi di bawah tekanan yang berkurang
(suhu 50C) dan pada akhirnya dikeringkan di dalam vacuum
desiccator. Residu dari Ocimum sanctum L. dilarutkan di dalam
propylene glycol dengan konsentrasi 50 mg/ml dan digunakan pada
percobaan. Prosedur pembuatan ekstrak daun kemangi lebih lengkap
dapat dilihat pada lampiran 10.
c. Minyak sawit dengan pemanasan berulang
Minyak goreng yang diberikan adalah minyak goreng kelapa
sawit yang dipanaskan 150C sebanyak 6 kali, tiap pemanasan selama 8
menit. Pemberian menggunakan dosis pada penelitian sebelumnya
(Setiawan, 2006) yang disesuaikan dengan tabel konversi (Ngatidjan,
1991) yaitu sebesar 0,06 ml/20g BB mencit perhari. Dosis ini diberikan
selama 14 hari berturut-turut.
2. Pelaksanaan percobaan
Percobaan mulai dilakukan pada minggu ke-2 dan berlangsung
selama 14 hari.

commit to user

37
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

Alur penelitian secara umum :

S
(mencit 25 ekor)

Kelompok K
mencit 5 ekor

Kelompok P1
mencit 5 ekor

Kelompok P2
mencit 5 ekor

Kelompok P3
mencit 5 ekor

Kelompok P4
mencit 5 ekor

DIET STANDAR

HARI KE 1 - 14
minyak sawit dengan
pemanasan berulang
0,06 ml/20g BB
mencit
HARI KE 7 - 14
propylene glycol 50
mg/ml

HARI KE 1 - 14
minyak sawit dengan pemanasan berulang 0,06
ml/20g BB mencit

HARI KE 7 - 14
ekstrak daun
kemangi dosis 5,6
mg/20g BB
mencit

HARI KE 7 - 14
ekstrak daun
kemangi dosis
11,2 mg/20g BB
mencit

HARI KE 15
Semua hewan coba dikorbankan
Pembuatan preparat
Pengamatan inti sel hati
normal dan nekrosis
Analisis statistik
Gambar 3.2 Skema Alur Penelitian
commit to user

HARI KE 7 - 14
ekstrak daun
kemangi dosis
16,8 mg/20g BB
mencit

38
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

3. Pengukuran hasil
Pada hari ke-15 semua hewan percobaan dikorbankan dengan cara
cervical dislocation. Kemudian organ hepar diambil untuk selanjutnya
dibuat preparat histologi dengan metode blok paraffin dengan pengecatan
HE. Pembuatan preparat dilakukan pada hari ke-15 agar efek perlakuan
tampak nyata. Lobus hepar yang diambil adalah lobus kanan dan irisan
untuk preparat diambil pada bagian tengah dari lobus tersebut. Hal ini
dilakukan untuk mendapatkan preparat yang seragam. Tebal irisan hepar
3-8 mm.
Dari 25 hewan coba yang ada dibuat 3 preparat untuk masingmasing hewan coba sehingga akan didapatkan 75 preparat hepar yang akan
diamati. Pengamatan preparat dengan pembesaran 100 kali untuk
mengamati seluruh lapang pandang, kemudian ditentukan daerah yang
akan diamati pada sentrolobuler lobulus hepar yaitu dipilih 4 lapang
pandang (pada arah jam 12, jam 3, jam 6, dan jam 9) yang persebaran
kerusakan selnya terdistribusi merata. Dari tiap zona sentrolobuler lobulus
hepar tersebut dengan pembesaran 1000 kali kemudian ditentukan jumlah
sel yang mengalami nekrosis yaitu yang ditandai dengan inti piknosis,
karioreksis dan kariolisis dari tiap 100 sel. Hasil yang diperoleh dari tiap
kelompok kemudian dirata-rata dan selanjutnya dibandingkan dengan ratarata kelompok lainnya dengan uji Oneway ANOVA. Jika terdapat
perbedaan yang bermakna maka dilanjutkan dengan uji Post Hoc.
commit to user

39
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

J.

Teknik analisis data

Data yang diperoleh diuji normalitasnya menggunakan uji ShapiroWilk karena besar sampel 50 dan p-value > 0,05. Kemudian, dilakukan
uji varians menggunakan Levenes test. Uji hipotesis menggunakan uji
One way ANOVA (Analysis of Variant) untuk mengetahui adanya
perbedaan jumlah sel nekrosis antara kelompok kontrol (KK), kelompok
perlakuan 1 (KP1), kelompok perlakuan 2 (KP2), kelompok perlakuan 3
(KP3), serta kelompok perlakuan 4 (KP4). Dengan syarat skala variabel
dependen berupa skala numerik, distribusi data normal, dan varians data
harus sama (p> 0,05). Jika terdapat perbedaan bermakna maka dilanjutkan
dengan uji LSD (Least Significant Difference) dengan derajat kemaknaan
= 0,05 untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan mean diantara lima
kelompok (Dahlan, 2006).
Jika syarat tersebut tidak terpenuhi, maka digunakan uji nonparametrik yaitu uji Kruskal-Wallis dilanjutkan dengan uji Mann Whitney.
Data diolah dengan program komputer Statistical Product and Service
Solutions (SPSS) 17.0 for Windows (Dahlan, 2006).

commit to user

40
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

BAB IV
HASIL PENELITIAN

A. Hasil Penelitian
Data hasil penelitian berupa data rasio jumlah inti sel hati yang
mengalami nekrosis yang dihitung dari 100 sel pada lobulus centralis hati
dengan perbesaran 1000 kali.
Hasil pengamatan jumlah inti sel normal dan yang mengalami
nekrosis untuk masing-masing kelompok akan disajikan dalam tabel berikut
ini:
Tabel 4.1 Rata-rata inti sel hati yang mengalami nekrosis dari 100 sel pada
lobulus centralis hati untuk masing-masing kelompok percobaan

Kelompok
KK (diet standar + propylene glycol 50mg/ml 0,5 ml)
KP I (minyak sawit dengan pemanasan berulang 0,06 ml +
propylene glycol 50mg/ml 0,5 ml)
KP II (minyak sawit dengan pemanasan berulang 0,06 ml
+ ekstrak daun kemangi 5,6 mg)
KP III (minyak sawit dengan pemanasan berulang 0,06 ml
+ ekstrak daun kemangi 11,2 mg)
KP IV (minyak sawit dengan pemanasan berulang 0,06 ml
+ ekstrak daun kemangi 16,8 mg)

40 user
commit to

Inti nekrosis
Mean

SD

6,40

1,516

74,60

2,701

22,40

2,191

16,60

1,342

11,40

2,074

perpustakaan.uns.ac.id

41
digilib.uns.ac.id

Hasil pengamatan pada tabel 4.1 menunjukkan bahwa inti nekrosis,

pada kelompok kontrol mempunyai rata-rata sebesar 6,40. Pada kelompok
perlakuan I yang hanya diberikan minyak sawit dengan pemanasan berulang
memiliki jumlah rata-rata inti sel nekrosis yang lebih besar yaitu 74,60.
Sedangkan pada kelompok perlakuan II, III, dan IV, selain diberikan minyak
sawit dengan pemanasan berulang juga diberikan ekstrak daun kemangi
dengan dosis bertingkat, sehingga jumlah rata-rata inti sel nekrosis pun
berkurang. Pada tabel tersebut terlihat pengurangan jumlah rata-rata inti sel
nekrosis yang signifikan jika dibandingkan dengan kelompok perlakuan I,
yaitu pada kelompok perlakukan II 22,40, kelompok perlakuan III 16,60, dan
kelompok perlakuan IV 11,40. Untuk melihat lebih jelas perbedaan dari ratarata inti sel tersebut dapat dilihat pada gambar 4.1.

Gambar 4.1 Histogram perbedaan rata-rata inti sel nekrosis

Rata-rata inti sel nekrosis yang terbesar adalah pada kelompok perlakuan I
to user
dan yang terkecil adalah padacommit
kelompok
kontrol.

42
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

Gambar 4.2 Pengamatan mikroskopis inti sel nekrosis (terlihat piknotik)

Pengecatan HE, Perbesaran Optilab 100x (kiri), Mikroskop 1000x
(kanan)
B. Analisis Data
Data tersebut kemudian diuji normalitas data dengan menggunakan
uji Shapiro Wilk. Uji ini bertujuan menguji apakah sebaran data yang ada
dalam distribusi normal atau tidak. Pada uji one sampel Shapiro Wilk
didapatkan nilai signifikansi pada data inti nekrosis KK sebesar 0,492, KP I
0,980, KP II 0,607, KP III 0,201, dan KP IV 0,754. Nilai-nilai ini kemudian
dibandingkan dengan = 0,05, sehingga signifikasi (p>0,05) dengan
demikian Ho diterima, yang artinya data berdistribusi normal. Kemudian,
dilakukan uji varians menggunakan Levenes test dan didapatkan nilai p =
0,574 (p>0,05) untuk data inti sel nekrosis, maka dapat ditarik kesimpulan
bahwa tidak ada perbedaan varians antara kelompok yang dibandingkan
(varians data homogen). Oleh karena data telah berdistribusi normal dan
varians data homogen, analisis data diputuskan menggunakan uji One Way
Anova.

commit to user

43
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

Uji One Way Anova dengan tingkat signifikansi 5% ( = 0,05)

dilakukan untuk membandingkan rata-rata inti sel nekrosis antara kelima
kelompok penelitian ini. Pada uji One Way Anova didapatkan nilai
signifikansi inti sel nekrosis 0,000, dimana signifikasi p<0,05, sehingga Ho
ditolak dan H1 diterima, yang artinya data diantara kelima kelompok dalam
penelitian ini terdapat perbedaan yang signifikan, dimana Ho adalah data
diantara kelima kelompok tidak terdapat perbedaan yang signifikan. Untuk
lebih jelas, hasil uji statistik One Way Anova dapat dilihat pada lampiran 4.
Untuk mengetahui letak perbedaan kerusakan inti sel yang
mengalami nekrosis dari kelima kelompok tersebut selanjutnya dilakukan
Post Hoc Test dengan uji LSD.
Tabel 4.2 Hasil Uji Post Hoc Test LSD inti sel nekrosis
No.

Pasangan kelompok

Signifikansi < 0,05

Simpulan

1.

KK KP I

0,000

Berbeda signifikan

2.

KK KP II

0,000

Berbeda signifikan

3.

KK KP III

0,000

Berbeda signifikan

4.

KK KP IV

0,001

Berbeda signifikan

5.

KP I KP II

0,000

Berbeda signifikan

6.

KP I KP III

0,000

Berbeda signifikan

7.

KP I KP IV

0,000

Berbeda signifikan

8.

KP II KP III

0,000

Berbeda signifikan

9.

KP II KP IV

0,000

Berbeda signifikan

10. KP III KP IV

0,001
commit to user

Berbeda signifikan

44
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

commit to user

44
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

BAB V
PEMBAHASAN

Pengamatan pada penelitian ini adalah pengaruh pemberian ekstrak daun

kemangi terhadap kerusakan sel hati pada mencit yang dipapar dengan minyak
sawit dengan pemanasan berulang. Pada tabel 4.1 dapat dilihat kelompok
perlakuan I memiliki jumlah kerusakan sel yang lebih besar jika dibandingkan
dengan kelompok perlakuan II, III dan IV. Minyak sawit dengan pemanasan
berulang yang diberikan pada kelompok perlakuan I menyebabkan perubahan
struktur dan fungsi membran yang akan diikuti dengan kematian sel. Hal ini
terjadi karena minyak sawit dengan pemanasan berulang mengandung radikal
bebas yang berpotensi dasar untuk merusak sel. Sedangkan pada kelompok
perlakuan II, III, dan IV, selain diberikan minyak sawit dengan pemanasan
berulang juga diberikan ekstrak daun kemangi, sehingga dapat mengurangi
dampak negatif dari radikal bebas tersebut yaitu dengan mengurangi jumlah
kerusakan sel hati. Hal ini sesuai dengan penelitian sebelumnya yang telah
dilakukan oleh Chattopadhyay et al., ekstrak daun kemangi dosis 200mg/kg BB
tikus memiliki pengaruh yang signifikan terhadap kerusakan sel hati yang dipapar
dengan paracetamol. Pada penelitian ini, dosis ekstrak daun kemangi ditingkatkan
untuk mengetahui dosis mana yang paling baik dalam mencegah kerusakan sel
hati. Kerusakan sel hati mencit diamati dengan menghitung jumlah inti sel yang
mengalami nekrosis, baik inti sel yang mengalami piknosis, karioreksis, maupun
kariolisis. Penghitungan inti sel ini di lakukan pada lobulus centralis hati.
commit to user

44

perpustakaan.uns.ac.id

45
digilib.uns.ac.id

Data hasil perhitungan dianalisis dengan menggunakan uji One Way

Anova dan apabila terdapat perbedaan yang signifikan dilanjutkan dengan uji
LSD. Hasil uji One Way Anova menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna
antara kelima kelompok perlakuan (p<0,05). Hasil uji LSD menunjukkan
perbedaan yang bermakna antara kelompok yang satu dengan kelompok yang lain,
baik untuk inti sel yang normal maupun yang mengalami nekrosis. Inti sel
nekrosis, baik inti sel piknotik, karioreksis, dan kariolisis ditemukan pada
kelompok kontrol dan kelompok perlakuan. Kerusakan inti sel pada kelompok
perlakuan merupakan proses nekrosis, sedangkan kerusakan inti sel pada
kelompok kontrol merupakan proses apoptosis. Menurut Junqueira dan Carneiro
tahun 2006, nekrosis adalah kematian sel yang merupakan proses patologis, dapat
disebabkan oleh mikroorganisme, virus, bahan kimia, dan bahan-bahan berbahaya
lainnya, sehingga selain ditemukan inti nekrosis, juga ditemukan tanda-tanda
peradangan. Apoptosis merupakan proses kematian secara fisiologi, dapat
ditemukan inti nekrosis seperti piknotik, karioreksis, dan kariolisis, tanpa terdapat
tanda-tanda peradagangan.
Hasil uji LSD antara kelompok kontrol (diberi diet standar dan propylene
glycol) dengan kelompok perlakuan I (diberikan minyak sawit dengan pemanasan
berulang dan propylene glycol) menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna.
Perbedaan ini disebabkan karena terjadi kerusakan sel hati pada kelompok
perlakuan I. Dari gambar 4.1 dapat dilihat rata-rata inti sel nekrosis pada
kelompok kontrol sebesar 6,4 dan pada kelompok perlakuan I sebesar 74,6.
Minyak sawit dengan pemanasan berulang banyak mengandung radikal bebas
commit to user

perpustakaan.uns.ac.id

46
digilib.uns.ac.id

yang dapat menyebabkan kerusakan sel dan jaringan. Menurut Robbins et al.
(2004), kerusakan sel oleh radikal bebas yang berasal dari oksigen didahului oleh
penyerangan radikal bebas pada ikatan rangkap membran sel sehingga terbentuk
senyawa peroksida lipid. Hasil peroksidasi lipid membran sel oleh radikal bebas
berefek langsung terhadap kerusakan membran sel, antara lain dengan mengubah
struktur dan fungsi membran, akhirnya akan menyebabkan kematian sel.
Hasil uji LSD antar kelompok perlakuan I (diberikan minyak goreng
dengan pemanasan berulang dan propylene glycol) dan kelompok perlakuan II
(diberikan minyak sawit dengan pemanasan berulang dan ekstrak daun kemangi
sebanyak 5,6 mg/20 g BB mencit) menunjukkan adanya perbedaan yang
bermakna. Perbedaan yang signifikan juga tampak antara kelompok perlakuan I
dengan kelompok perlakuan III (diberikan minyak sawit dengan pemanasan
berulang dan ekstrak daun kemangi sebanyak 11,2 mg/20 g BB mencit) dan
kelompok perlakuan IV (diberikan minyak sawit dengan pemanasan berulang dan
ekstrak daun kemangi sebanyak 16,8 mg/20 g BB mencit). Pada grafik 4.1 dapat
dilihat rata-rata inti sel nekrosis pada KP I sebesar 74,6, pada KP II sebesar 22,4,
pada KP III sebesar 16,6, dan KP IV 11,4. Hal ini berarti pemberian ekstrak daun
kemangi dapat mengurangi kerusakan sel hati akibat paparan minyak sawit
dengan pemanasan berulang. Menurut Mishra et al. (2007) dan Hidayati (2008),
daun kemangi mengandung berbagai macam antioksidan seperti asam askorbat
(Vitamin C), tokoferol (Vitamin E), b-karotene, b-sitosterol, eugenol, asam
palmitat, asam ursolic, senyawa fenolik (flavonoid, asam fenolat), dan senyawa
nitrogen (alkaloid, turunan klorofil, asam amino, dan amina). Antioksidan
commit to user

perpustakaan.uns.ac.id

47
digilib.uns.ac.id

berperan penting dalam meredam dampak negatif dari radikal bebas dan
peroksidasi lipid sehingga kematian sel hati pun dapat dicegah.
Hasil uji LSD antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan II
menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna. Perbedaan yang bermakna juga
tampak antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan III dan IV. Hal ini
berarti kerusakan sel hati yang terjadi akibat pemberian minyak sawit dengan
pemanasan berulang sebanyak 0,06 ml/20g BB mencit perhari belum mampu
diperbaiki sampai mendekati normal oleh pemberian ekstrak daun kemangi
dengan dosis 5,6 mg/20g BB mencit perhari, 11,2 mg/20g BB mencit, maupun
16,8 mg/20 g BB mencit perhari. Hal ini mungkin disebabkan karena sampel pada
kelompok perlakuan II, III, dan IV masih mendapat paparan radikal bebas dari
minyak sawit dengan pemanasan berulang selama pemberian ekstrak daun
kemangi. Perbedaan yang signifikan tersebut dapat pula disebabkan karena dosis
ekstrak daun kemangi yang masih kurang sehingga dampak negatif dari radikal
bebas belum mampu diredam sepenuhnya oleh antioksidan yang terkandung di
dalam ekstrak daun kemangi.
Hasil uji LSD antara kelompok perlakuan II dengan kelompok perlakuan
III dan kelompok perlakuan IV menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna.
Hal ini berarti ekstrak daun kemangi dengan dosis 16,8 mg/20 g BB mencit
perhari mampu mencegah kerusakan sel hati lebih baik dibandingkan ekstrak daun
kemangi dengan dosis 5,6 mg/20 g BB mencit dan 11,2 mg/20 g BB mencit
perhari walaupun dengan ketiga dosis tersebut belum mampu mencegah hingga
mendekati keadaan normal. Hal tersebut dapat terjadi karena kandungan
commit to user

48
digilib.uns.ac.id

perpustakaan.uns.ac.id

antioksidan pada ekstrak daun kemangi dengan dosis 16,8 mg/20g BB mencit
perhari lebih banyak daripada ekstrak daun kemangi dengan dosis 5,6 mg/20g BB
mencit dan 11,2 mg/20g BB mencit perhari.
Dari hasil dan analisis data yang dilakukan pada penelitian ini dapat
disimpulkan bahwa pemberian ekstrak daun kemangi dapat mencegah kerusakan
sel hati pada mencit yang dipapar minyak sawit dengan pemanasan berulang.
Pemberian ekstrak daun kemangi dengan dosis bertingkat juga terbukti semakin
mengurangi jumlah kerusakan sel hati mencit, walaupun belum mampu mendekati
hingga keadaan normal. Penelitian selanjutnya diharapkan dapat menunjukkan
dosis efektif ekstrak daun kemangi yang dapat mencegah kerusakan sel hati
hingga mendekati keadaan normal.

commit to user

perpustakaan.uns.ac.id

digilib.uns.ac.id

BAB VI
SIMPULAN DAN SARAN

A. Simpulan
1. Pemberian ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.) dapat mencegah
kerusakan hepatosit mencit akibat pemberian minyak sawit dengan
pemanasan berulang.
2. Peningkatan dosis ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum L.) dapat
meningkatkan efek proteksi terhadap kerusakan hepatosit mencit akibat
pemberian minyak sawit dengan pemanasan berulang. Namun pada dosis
tertinggi hingga 16,8 mg/20g BB mencit perhari belum mampu mencegah
kerusakan sel hati hingga mendekati keadaaan normal.

B. Saran
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai dosis ekstrak daun
kemangi yang mampu mencegah kerusakan sel hati hingga mendekati
normal.
2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai antioksidan yang spesifik
dalam mencegah kerusakan sel hati.

commit to user

49