Aklimatisasi, bertujuan untuk mendapatkan kultur biomassa yang telah teradaptasi terhadap air limbah yang akan diteliti.

Setelah melalui proses pembenihan, maka dilakukan aklimatisasi. Aklimatisasi adalah pengadaptasian mikroorganisme terhadap air limbah yang akan diolah. Pada proses ini dilakukan dengan sistem bacth karena diharapkan mikroorganisme dapat tumbuh dan berkembang biak serta beradaptasi dengan kondisi baru. Pengapdaptasian dilakukan dengan cara mengganti pemberian glukosa dengan air limbah pabrik . Akhir dari proses ini adalah konsentrasi COD menjadi stabil Pembenihan (seeding) merupakan tahapan awal sebelum penelitian. Tujuan dari proses ini adalah untuk mendapatkan suatu populasi mikroorganisme yang mencukupi untuk memulai penelitian proses lumpur aktif dan mampu mengoksidai zat zat organic yang terkandung didalam air limbah. Dalam penelitian ini mikroorganisme yang digunakan berasal dari bak aerasi. Pada tahap ini diharapkan mikroorganisme tersebut dapat tumbuh dan berkembang biak dengan baik dengan pemberian nutrien dan oksigen secara teratur. Parameter yang diamati adalah VSS dan COD. Pada hari pertama pembenihan, COD adalah sebesar 610,22 mg/l dan konsentrasi VSS adalah sebesar 3096 mg/l. Jika konsentrasi BOD atau COD dalam tempat pengembangan telah relatif konstan,dengan fluktuasi sekitar 5% maka konsentrasi umpan dan volume pembibitan ditambah. Prosesini terus dilakukan hingga volume pembibitan mencapai sekitar 10% kolam yang pengolahanyang dibuat dan VSS sekitar 3000-4000 mg/l. Parameter yang dianalisis adalah VSS (Volatile Suspended Solid) dan kebutuhan oksigen kimiawi (COD). VSS adalah untuk mengetahui banyaknya mikroorganisme yang hidup. Nilai VSS merupakan indicator adanya mikroorganisme yang aktif dan memegang peranan penting dalam proses biologis. Pengukuran ini digunakan dengan menggunakan metode gravimetri. Salah satu parameter yang sering digunakan dalam pengolahan limbah cair sistem lumpur aktif adalah Mixed Liquor Suspended Solids (MLSS). Mixed liquor suspended solids adalah jumlah dari bahan organik dan mineral berupa padatan terlarut, termasuk mikroorganisme di dalam mixed liquor. Selama periode aklimatisasi ini dilakukan pemeriksaan parameter organik (mg/l KmnO4), VSS, pH, dan temperatur. Konsentrasi oksigen terlarut selalu dijaga diatas 4 mg/l untuk memastikan proses aerob dapat berlangsung baik. Temperatur dalam proses juga dijaga pada temperatur kamar dan dalam rentang pH normal. Proses aklimatisasi dianggap selesai jika pH, VSS, temperatur dan efisiensi penyisihan senyawa organik telah konstan dengan fluktuasi yang tidak lebih dari 10%.