EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL RIMPANG KENCUR (Kaempferia galanga Linn.

)
DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN Candida albicans
ISOLAT 218-SV SECARA IN VITRO

Rista Dwi Hermilasari*, Sri Winarsih**, Rita Rosita***

ABSTRAK

Infeksi Candida albicans merupakan penyebab timbulnya kandidiasis. Angka kejadian karena infeksi
Candida albicans yang sering banyak ditemukan, efek merugikan pada obat antifungi, dan semakin
berkembangnya pemakaian obat herbal maka perlunya pemanfaatan tanaman herbal sebagai pilihan obat
alternatif antijamur. Pilihan obat alternatif tersebut adalah kencur (Kampferia galanga Linn.), yang kemungkinan
kandungan zat aktif didalamnya seperti tanin, sineol, saponin, dan flavonoid berpotensi sebagai antijamur.
Tujuan penelitian ini adalah membuktikan bahwa ekstrak etanol rimpang kencur (Kaempferia galanga Linn.)
efektif dalam menghambat pertumbuhan Candida albicans secara in vitro. Penelitian ini menggunakan metode
dilusi agar dan sampel uji berupa satu isolat Candida albicans yang berasal dari penderita kandidiasis vagina.
Bahan uji yang digunakan adalah ekstrak etanol rimpang kencur yang dibuat dengan metode maserasi dengan
konsentrasi 0% (sebagai kontrol positif), 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, dan 50% (sebagai kontrol negatif). Hasil uji
analisis Kruskal-Wallis didapatkan perbedaan yang signifikan (p = 0,001), kemudian uji lanjutan dengan Mann-
Whitney dan terdapat hubungan antara kenaikan konsentrasi ekstrak etanol rimpang kencur dengan
pengurangan jumlah koloni Candida albicans (R = -0,964). Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa ekstrak
etanol rimpang kencur efektif dalam menghambat pertumbuhan koloni Candida albicans dengan Kadar Hambat
Minimal (KHM) pada konsentrasi 4%. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut efektivitas ekstrak etanol rimpang
kencur dalam menghambat pertumbuhan Candida albicans secara in vivo.

Kata Kunci: kencur (Kaempferia galanga Linn.), Candida albicans, efek antijamur

ABSTRACT

The Infection of Candida albicans causes the candidiasis. Many found numbers because of Candida
albicans infection, and the damage effect using antifungal medicine, and the increasing of using herbal, so
needed herbal plants exploitation as an antifungal alternative medical. This alternative medical is kencur
(Kaempferia galanga Linn.), that possibility contents of active essence inside as tannin, sineol, saponin, and
flavonoid having potential as antifungal. The goal of research is to proof that kencur (Kaempferia galanga Linn.)
rhizome ethanol extract is effective to impede the growth of Candida albicans by in vitro. This research is using
agar dilution method and test sample is one Candida albicans isolate which is come from patient with vaginal
candidiasis. Kencur (Kaempferia galanga Linn.) rhizome ethanol extract is for test material and used by
maseration method with 0% (as positive control), 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, and 50% concentrations (as negative
control). The Kruskal-Wallis analysis test result shows significance difference (p = 0,001), and test was continued
with Mann-Whitney and having correlation between the increasing of kencur rhizome ethanol extract
concentration and the decreasing of Candida albicans colony numbers (R = -0,964). The conclusion from this
research that kencur rhizome ethanol extract is effective to impede the growth of Candida albicans colony which
has Minimal Inhibitory Concentration (MIC) in 4% concentration. And needed reseacrh continuity about the
effectiveness of kencur rhizome ethanol extract to impede the growth of Candida albicans by in vivo.

Keywords: kencur (Kaempferia galanga Linn.), Candida albicans, antifungal

*Program Studi Kebidanan Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya

**Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya
***Laboratorium Anatomi-Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya
PENDAHULUAN
Candida albicans merupakan jamur
oportunistik yang dapat menginfeksi seluruh organ
tubuh manusia.15 Di dalam tubuh manusia, jamur
Candida dapat hidup sebagai parasit atau saprofit
baik di dalam mulut, saluran pernafasan, saluran
pencernaan, ataupun vagina11. Infeksi Candida
albicans akan terjadi apabila terdapat faktor
predisposisi. Termasuk diantaranya pemakaian
antibiotik berspektrum luas, diabetes mellitus,
pemakaian steroid topikal ataupun sistemik,
kehamilan, sistem pertahanan tubuh yang menurun,
dan aposisi daerah kulit sehingga menghasilkan
lingkungan yang lembab.2
Kandidiasis adalah suatu infeksi yang
disebabkan oleh Candida albicans. Infeksi Candida
albicans yang menimbulkan kandidiasis ini, infeksinya
tergolong menjadi dua macam yaitu ringan dan
berat.6 Terjadinya Infeksi Candida albicans pada
vagina, sekitar 5-10% terjadi pada wanita yang tidak
hamil dan pada kehamilan akan meningkat sekitar
40%.1 Pada wanita usia subur diperkirakan 75%
pernah mengalami kandidiasis vulvovaginal
sedikitnya satu kali selama masa hidupnya dan
sekitar 40-50% pernah pula mengalami infeksi
Candida albicans pada vagina secara berulang.12
Wanita yang mengalami kandidiasis vulvovaginitis
selama kehamilan, bayinya akan mengalami infeksi
Candida albicans melalui jalan lahir selama proses
persalinan sehingga akan menimbulkan kandidiasis
oral dan proses menyusui akan terganggu.7
Pemakaian obat antifungi merupakan
pilihan yang paling sering digunakan untuk mengobati
kandidiasis. Obat antifungi yang sering digunakan
adalah golongan azol. Obat golongan azol dapat
memberikan efek yang menguntungkan, dapat pula
menimbulkan efek yang merugikan. Apabila diberikan
selama kehamilan dapat menyebabkan teratogenik
pada janin.13 Pengobatan antifungi secara topikal
merupakan pilihan yang sering digunakan untuk
mengobati kandidiasis vulvovagina. Obat antifungi
tersebut adalah nystatin yang berupa salep tetapi
pemakaian obat tersebut dapat menimbulkan efek
yang tidak menguntungkan, diantaranya rasa gatal,
eritema, dan rasa panas pada daerah vulvovagina.4
Terbukti bahwa pada akhir-akhir ini,
masyarakat lebih tertarik untuk menggunakan obat
herbal dalam pengobatan. Salah satu tanaman
tradisional yang banyak dimanfaatkan untuk
pengobatan adalah Kaempferia galanga Linn., yang
lebih dikenal dengan nama kencur. Di Indonesia
khususnya di wilayah Bojonegoro Jawa Timur
terdapat salah satu masyarakat etnik yaitu
masyarakat Samin yang memanfaatkan rimpang
kencur yang dibuat dalam bentuk minuman untuk
mengatasi masalah keputihan.9
Dari hasil suatu penelitian menunjukkan
bahwa minyak atsiri yang terkandung di dalam
rimpang kencur memiliki efek antibakteri terhadap S.
aureus dan E. Coli.16 Akhir-akhir ini beberapa jenis
tanaman obat tradisional mulai banyak dilakukan
penelitian untuk mengetahui efektivitas zat aktif
tanaman yang terkandung didalamnya yang dapat
digunakan sebagai bahan pengobatan. Berdasarkan
uraian diatas, akan dilakukan penelitian mengenai
efek rimpang kencur terhadap pertumbuhan Candida
albicans.
TUJUAN PENELITIAN
Membuktikan bahwa ekstrak etanol rimpang kencur
efektif dalam menghambat pertumbuhan C. albicans
secara in vitro.
Menganalisis hubungan konsentrasi ekstrak etanol
rimpang kencur dengan jumlah koloni C. albicans
secara in vitro.
Mengetahui KHM ekstrak etanol rimpang kencur
terhadap pertumbuhan C. albicans secara in vitro.
HIPOTESIS PENELITIAN
Ekstrak etanol rimpang kencur (Kaempferia
galanga Linn.) menurunkan jumlah koloni Candida
albicans secara in vitro.
METODE PENELITIAN
Rancangan Penelitian. Penelitian ini menggunakan
eksperimental laboratorium secara in vitro dengan
true experiment-post test only control group design,
dengan metode dilusi agar.
Tempat dan Waktu Penelitian. Penelitian ini
dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
Kedokteran Universitas Brawijaya Malang pada bulan
September sampai Oktober 2012.
Sampel Penelitian. Populasi pada penelitian ini
adalah jamur Candida albicans. Sampel penelitian
adalah isolat Candida albicans yang berasal dari
penderita kandidiasis vagina.
Bahan untuk Pembuatan Ekstrak Rimpang Kencur
dan Uji Antifungi. Bahan untuk pembuatan ekstrak
adalah rimpang kencur, etanol 96%, alkohol 70%,
aquadest steril. Bahan untuk uji antijamur adalah
ekstrak rimpang kencur, isolat C. albicans,
pewarnaan gram (kristal violet, lugol, alkohol 96%,
safranin), serum plasma mamalia, SDA (Sabouraud
Dextrose Agar), aquades steril.
Alat untuk Pembuatan Ekstrak Rimpang Kencur
dan Uji Antifungi. Alat untuk pembuatan ekstrak
meliputi gelas erlenmeyer, labu penampung
evaporator, water bath, evaporator, rotary evaporator,
oven. Alat untuk uji antifungi meliputi cawan petri, ose,
mikropipet, bunsen, gelas obyek, mikroskop,
inkubator.
Pembuatan Ekstrak Rimpang Kencur dan Uji
Antifungi. Rimpang kencur dicuci bersih kemudian
dikupas kulit umbinya dan dipotong menjadi kecil-
kecil kemudian dimasukkan ke dalam oven hingga
kering pada suhu 80C. Rimpang kencur yang telah
dikeringkan kemudian dihaluskan hingga menjadi
seperti serbuk kemudian ditimbang dengan
timbangan digital sebesar 100 gr sebagai sampel
kering. Sampel kering yang berupa serbuk rimpang
kencur yang telah ditimbang dimasukkan ke dalam
gelas erlenmeyer. Direndam dengan larutan etanol
96%. Dikocok sampai tercampur merata selama 30
menit. Hasil campuran didiamkan semalaman hingga
mengendap. Bagian lapisan teratas dari campuran
zat aktif yang telah diperoleh dengan pelarut etanol
diambil dan dimasukkan dalam labu penampung
evaporator yang berukuran 1 liter dan labu evaporasi
di pasang pada evaporator. Water bath di isi dengan
air hingga penuh dan memasang seluruh alat
meliputi pemanas water bath dan rotary evaporator
untuk disambungkan dengan arus listrik. Pelarut
etanol dibiarkan menguap dan ditunggu 2 jam
hingga tetesan etanol yang masuk ke dalam labu
evaporasi berhenti menetes. Hasil dari proses
evaporasi dimasukkan ke dalam botol penampung
yang telah dipersiapkan.
Pembuatan Suspensi Jamur Uji. Sebelum di uji,
jamur Candida albicans terlebih dahulu di identifikasi
dengan melakukan pembiakan pada SDA, pewarnaan
Gram, dan Germinating Tube Test. Konsentrasi
suspensi jamur uji pada penelitian ini adalah 104
CFU/ml. Jamur C. albicans diinokulasi pada SDA
kemudian diinkubasi pada suhu 37C selama 24 jam.
Selanjutnya distandarisasi dengan spektrofotometri
pada : 530 nm sehingga siperoleh konsentrasi
jamur 1 x 106 CFU/ml.
Uji Antifungi.
- Disediakan cawan petri steril yang ditandai dengan
KC, I, II, III, IV, V, dan KK (Kontrol Kencur).
- Cawan petri KC diisi 15 ml SDA yang masih cair)
dan biarkan agar memadat kemudian masukkan
dalam inkubator pada suhu 37C selama 24 jam .
Agar plate ini digunakan sebagai kontrol positif.
- Cawan petri I, II, III, IV, V diisi dengan ekstrak etanol
rimpang kencur masing-masing sebanyak 0,15 ml;
0,3 ml; 0,45 ml; 0,6 ml; 0,75 ml.
- Selanjutnya agar plate I, II, III, IV, V dicampur
dengan SDA yang masih cair masing-masing
sebanyak 14,85 ml; 14,7 ml; 14,55 ml; 14,4 ml;
14,25 ml sehingga konsentrasi ekstrak etanol
rimpang kencur sekarang pada agar plate berturut-
turut menjadi 1%, 2%, 3%, 4%, 5%. Homogenkan
campuran ekstrak etanol rimpang kencur dengan
agar dan biarkan memadat. Diinkubasikan pada
suhu 37C selama 24 jam .
- Teteskan suspensi jamur Candida albicans dengan
kepadatan 104 CFU/ml menggunakan mikropipet
pada plate agar KC, I, II, III, IV, V masing-masing
sebanyak 10 l dan biarkan suspensi C. albicans
meresap ke dalam media agar. Kontrol C. albicans 1%
- Cawan petri KK diisi ekstrak etanol rimpang kencur
sebanyak 7,5 ml kemudian dicampur dengan 7,5 ml
SDA yang masih cair dan biarkan memadat. Agar
plate ini digunakan sebagai kontrol negatif.
- Ketujuh agar plate diinkubasikan pada suhu 37C
selama 24 jam. 2% 3%
- Selanjutnya, semua agar plate dikeluarkan dari
inkubator dan diamati pertumbuhan koloni Candida
albicans sehingga KHM dapat ditentukan.

HASIL PENELITIAN
4% 5%
Hasil Identifikasi C. albicans. Dalam penelitian ini,
isolat C. albicans diidentifikasi dengan pembiakan
koloni pada SDA plate, pewarnaan Gram, dan
Germinating Tube Test. Pada pembiakan koloni C.
albicans dalam SDA plate didapatkan bahwa koloni
yang tumbuh pada SDA berwarna putih kekuningan, Kontrol Kencur
licin, agak mengkilat, dan berbau ragi. Pada
pewarnaan Gram ditemukan sel C. albicans Gambar 1 Pertumbuhan Koloni C. albicans pada SDA
Setelah Diberi Perlakuan Ekstrak Etanol Rimpang
berbentuk budding cell berwarna ungu dan bersifat
Kencur
Gram positif. Hasil uji identifikasi Candida albicans
dengan Germinating Tube Test ditemukan adanya Hasil pengamatan pertumbuhan koloni jamur pada
pseudohypha. agar plate dapat terlihat pada histogram rerata jumlah
koloni C. albicans berikut ini.
Hasil Pengamatan KHM pada Metode Dilusi Agar.
Pengamatan pertumbuhan koloni pada agar plate
bertujuan untuk menentukan Kadar Hambat Minimal 12 0

Jumlah KoloniCandida albicans

(KHM) ekstrak rimpang kencur terhadap pertumbuhan 1102,3

Candida albicans. Hasil dari penghitungan terhadap 80

634,7
jumlah koloni Candida albicans pada Sabouraud

553,7
486,5

Dextrose Agar (SDA) plate dapat dilihat pada Gambar 40

1 berikut ini.
0 0
0

0 % 1 % 2 % 3 % 4 % 5 %
v
Konse nt ras i Ekst rak Etanol Rim pang Kencur (% /v)

Gambar 2 Histogram Rerata Jumlah Koloni C. albicans

Setelah Diberi Ekstrak Etanol Rimpang Kencur
Analisis Data. Penggunaan Uji Kruskal-Wallis untuk
mengetahui pengaruh konsentrasi ekstrak etanol
rimpang kencur terhadap pertumbuhan koloni
Candida albicans. Pada penelitian ini, menggunakan
tingkat kepercayaan sebesar 95% (=0,05) sebagai
tingkat signifikansinya. Selanjutnya akan dilakukan uji
lanjut menggunakan uji Mann-Whitney untuk
mengetahui ada perbedaan bermakna antar
kelompok perlakuan. Hasil daru uji Mann-Whitney
didapatkan bahwa pada antar kelompok konsentrasi
secara keseluruhan terdapat perbedaan yang
signifikan (p < 0,05) kecuali pada konsentrasi 2%
dengan 3% dan 4% dengan 5% yang menunjukkan
bahwa tidak berbeda secara signifikan (p > 0,05).
Uji Korelasi Spearman. Uji korelasi Spearman
digunakan untuk mengetahui hubungan antara
konsentrasi ekstrak etanol rimpang kencur dengan
jumlah pertumbuhan koloni Candida albicans. Nilai
korelasi yang diperoleh adalah sebesar -0,964. Hasil
uji korelasi Spearman didapatkan nilai p sebesar
0,000 yang berarti terdapat hubungan bermakna
antara ekstrak etanol rimpang kencur dengan jumlah
pertumbuhan Candida albicans, yaitu makin tinggi
konsentrasi ekstrak etanol rimpang kencur
menunjukkan makin rendah jumlah koloni Candida
albicans.
PEMBAHASAN
Pada penelitian ini, bahan uji yang digunakan yaitu
rimpang kencur yang didapatkan dari Balai Materia
Medika Batu, Malang. Metode penyarian zat aktif
bahan uji yang dipilih dalam penelitian ini adalah
ekstraksi etanol dikarenakan sebagian dari zat
antimikroba yang terkandung didalam rimpang kencur.
Identifikasi C. albicans telah dilakukan dengan tiga
macam cara. Pembiakan koloni C. albicans
pewarnaan Gram, germinating tube. Pada penelitian
ini, hasil identifikasi Candida albicans yang
didapatkan sesuai dengan morfologi jamur Candida
albicans.
Berdasarkan hasil uji yang telah dilakukan dalam
penelitian ini maka Kadar Hambat Minimal yang
diperoleh adalah sebesar 4% yang merupakan
konsentrasi terendah ekstrak etanol rimpang kencur
yang mampu menghambat pertumbuhan Candida
albicans. Hal tersebut menunjukkan bahwa kenaikan
konsentrasi ekstrak etanol rimpang kencur yang
digunakan dapat menyebabkan pengurangan jumlah
koloni C. albicans.
Dari penelitian yang telah dilakukan oleh Wahyudi dkk
(2002) membuktikan bahwa kandungan zat aktif
dalam rimpang temu giring memiliki efek antifungi
terhadap Candida albicans. Sedangkan penelitian
mengenai tanaman rimpang kencur menyebutkan
bahwa ekstrak rimpang kencur mempunyai
kemampuan dalam menghambat pertumbuhan jamur
selain Candida albicans. Berdasarkan hasil penelitian
sebelumnya, kemungkinan bahan aktif dalam rimpang
kencur memiliki mekanisme yang sama dengan
kandungan zat aktif yang terdapat dalam rimpang
temu giring yang memiliki kemampuan dalam
menghambat pertumbuhan C. albicans.
Salah satu kandungan zat aktif yang terkandung
dalam rimpang kencur yaitu tanin memiliki
kemampuan untuk menganggu proses terbentuknya
komponen stuktur dinding sel jamur dengan
menghambat sintesis khitin dalam sel jamur.8
Kandungan sineol dalam rimpang kencur mempunyai
kemampuan untuk menghambat sintesis ergosterol
yang terdapat dalam membran sel jamur dengan
mengganggu permeabilitas membran sel jamur yang
mengakibatkan kebocoran sel dengan keluarnya
berbagai komponen penting sel jamur dari dalam
membran sel sehingga sel lebih mudah lisis. Saponin
memiliki efek antifungi seperti sineol dalam merusak
membran sel jamur. Kemampuan saponin dalam
merusak membran sel yaitu dengan cara
menginaktivasikan enzim sel jamur sehingga
permeabilitas membran sel juga terganggu dan
mengakibatkan aktivitas kerja sel menjadi tidak
efektif.5,10 Flavonoid dalam rimpang kencur sebagai
penghambat sintesis asam nukleat C. albicans yang
mengakibatkan tidak terjadinya proses pembentukan
DNA dan RNA pada sel jamur.3
Hasil penelitian secara in vitro merupakan langkah
awal dari penggunaan atau penerapan rimpang
kencur dalam menghambat pertumbuhan Candida
albicans. Selanjutnya diharapkan adanya penelitian
lebih lanjut dengan uji in vivo sebagai uji praklinik
sebelum nantinya diuji cobakan secara klinik pada
manusia.
Kekurangan dari penelitian ini adalah isolat Candida
albicans yang digunakan hanya satu isolat. Hal
tersebut dikarenakan terbatasnya isolat yang berasal
dari penderita kandidiasis vagina. Sebelumnya,
peneliti juga sudah mengupayakan mencari isolat dari
penderita kandidiasis vagina tetapi isolat tersebut
jarang sekali ditemukan. Selain itu, peneliti
mengharapkan adanya penelitian rimpang kencur
sebagai antifungi dengan menggunakan rebusan
sehingga masyarakat mudah menggunakannya.
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
1. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak etanol rimpang
kencur (Kaempferia galanga Linn.) menunjukkan
semakin rendah jumlah koloni Candida albicans
secara in vitro.
2. Kadar Hambat Minimal dari ekstrak etanol
rimpang kencur (Kaempferia galanga Linn.)
adalah pada konsentrasi 4%.
Saran
- Ekstrak etanol rimpang kencur (Kaempferia
galanga Linn) dapat dikembangkan sebagai
pilihan pengobatan alternatif antijamur khususnya
mengatasi keputihan.
- Perlunya dilakukan penelitian lebih lanjut
mengenai efektivitas ekstrak etanol rimpang
kencur dalam menghambat pertumbuhan Candida
albicans secara in vivo, uji toksisitas pemberian
ekstrak rimpang kencur pada manusia, dan
pemanfaatan ekstrak rimpang kencur sebagai
antifungi terhadap jenis jamur lainnya.
- Perlunya dilakukan penelitian lagi dengan
menggunakan beberapa isolat Candida albicans
sehingga dapat digeneralisasikan bahwa ekstrak
rimpang kencur efektif menghambat pertumbuhan
Candida albicans.
DAFTAR PUSTAKA
1. Arulkumaran S, Regan L, Papageorghiou A. 2011.
Oxford Desk Reference Obstetrics and
Gynecology. New York: Oxford University Press.
2. Brown, RG. 2005. Dermatologi : Catatan Kuliah.
Jakarta: Erlangga. Hal. 38-40.
3. Cushnie TP, Lamb AJ. Antimicrobial activity of
flavonoids. Elsevier International Journal,
2005 ;(26): 343-356.
4. Dressen G, Kusche W, Neumeister C, Schwantes
U. Diagnosis of Vulvovaginal Candidiasis and
Effectiveness of Combined Topical Treatment
With Nystatin. The Open Womens Health Journal,
2012 ;(6): 19-23.
5. Ficker CE, Smith ML, Susiarti S, Leaman DJ,
Irawati C and Anarson JT. Inhibition of Human
Pathogenic Fungi by Members of Zingiberaceae
Used by the Kenyah. Etnopharmacol Journal,
2003;(2): 289.
6. Gates, RH. 2003. Infectious disease secrets 2th
Edition. USA: Elsevier Health Sciences.
7. Glenville, M. 2009. Boost Your Fertility: New
Solutions for Conceiving Quickly and Having a
Healthy Pregnancy as Soon as Possible. USA:
Fair Winds.
8. Huang YW, Chung KT, Wong TY, Wey CI, Lin Y.
Tannins and Human Health. Food Science
Nutrition Journal, 1998;(2): 421-464.
9. Mahfudloh, W. 2011. Studi Etnobotani Tumbuhan
yang Dimanfaatkan sebagai Bahan Perawatan
Pra dan Pasca Persalinan oleh Masyarakat Samin
di Kecamatan Margomulyo Kabupaten Bojonegoro.
Skripsi. Fakultas Sains dan Teknologi Universitas
Islam Negeri, Malang.
10. Simons V, Morrissey JP, Latijnhouwers M, Csukai
M, Cleaver A, Yarrow C, Osbourn. Dual Effects of
Plant Steroidal Alkaloids on Saccharomyces
cerevisiae. Antimicrob. Agents Chemother, 2006,
50: 2732-2740.
11. Siregar, RS. 2004. Penyakit jamur kulit. Jakarta:
EGC. Hal. 49-51.
12. Tan JS, Salata RA, Tan MJ. 2007. Expert Guide to
Infectious Diseases. United States of America:
ACP Press. P. 335-358.
13. Tjay, TH, Rahardja K. 2007. Obat-obat Penting:
Khasiat, Penggunaan dan Efek-Efek Sampingnya.
Jakarta: Gramedia.
14. Wahyudi M, Wonohadi E, Ryanto B. 2002.
Skrining Daya Antimikroba Ekstrak Etanol Temu
 Giring in E. Proc. Seminar Nasional XVIII
Tumbuhan Obat Indonesia.
15. Weisman, J. 2010. Guide to Yeast Genetics:
Functional Genomics, Proteomics and Other
Systems Analysis, 2th edition. London: Academic
Press.
16. Winarto, WP. 2007. Tanaman Obat Indonesia
untuk Pengobatan Herbal. Jakarta: Kryasari Herba
Media.