Anda di halaman 1dari 91

2019

FITOFARMASI
3.

OLEH:
ARUM PUTRI SUKMAWATI
AKF17149
DWI RATNAWATI
AKF17161
LUTFA ALFIYAROTUL IMAMA
AKF17170
RIZQY WAHYUNINGTYAS
AKF17188
BUKU FITOFARMASI

Untuk memenuhi matakuliah Fitofarmasi

Yang dibimbing oleh Bapak Dr. Bilal Subchan A. S., M. Farm., Apt

Oleh :

ARUM PUTRI SUKMAWATI NIM AKF17149


DWI RATNAWATI NIM AKF17161
LUTFA ALFIYAROTUL IMAMA NIM AKF17170
RIZQY WAHYUNINGTYAS NIM AKF17188

AKADEMI FARMASI PUTRA INDONESIA MALANG


APRIL 2019

i
KATA PENGANTAR

Puji syukur sepatutnyalah kita panjatkan kehadirat Tuhan yang Maha Esa,
karena atas berkat, pertolongan dan petunjuknya sehingga kami dapat menyelesaikan
buku yang berjudul “FITOFARMASI” tepat pada waktu yang telah ditentukan.

Ucapan terima kasih kami sampaikan kepada semua pihak yang telah
membantu kami dalam menyelesaikan makalah ini, dan juga tak terlupa kepada
Bapak Dr. Bilal S.A.S., M.Farm., Apt Selaku dosen pengasuh matakuliah fitofarmasi.

Kami sadar buku ini masih sangat jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu
segala saran, kritik, dan masukan yang bersifat membangun sangat kami harapkan
demi kesempurnaan makalah ini.

Akhirnya besar harapan kami kiranya buku ini dapat membantu teman-teman
sekalian dalam memahami tentang fitofarmasi.

Malang, April 2019

Penulis

ii
DAFTAR ISI

BUKU FITOFARMASI........................................................................................................... i
KATA PENGANTAR ............................................................................................................. ii
DAFTAR ISI............................................................................................................................iii
BAB I ........................................................................................................................................ 1
FARMAKOGNOSI................................................................................................................. 1
1.1. Sejarah Singkat Farmakognosi.............................................................................. 1
1.2. Ruang Lingkup Ilmu Farmakognosi ..................................................................... 3
BAB II ...................................................................................................................................... 5
SIMPLISIA.............................................................................................................................. 5
2.1. Pengertian ................................................................................................................ 5
2.2. Syarat – Syarat Simplisia ....................................................................................... 5
2.3. Nama Latin Tanaman............................................................................................. 6
2.4. Tata Nama Simplisia............................................................................................... 7
2.5. Ejaan Latin .............................................................................................................. 8
2.6. Macam – Macam Simplisia ....................................................................................... 10
a. Simplisia Folium ..................................................................................................... 10
b. Simplisia Flos.......................................................................................................... 14
c. Simplisia Fructus .................................................................................................... 16
d. Simplisia Semen....................................................................................................... 21
e. Simplisia Amylum ................................................................................................... 24
f. Simplisia Oleum ....................................................................................................... 25
g. Simplisia Rhizoma ................................................................................................... 31
h. Simplisia Radix ....................................................................................................... 34
BAB III................................................................................................................................... 36
EKSTRAKSI ......................................................................................................................... 36
3.1. Pengertian Ekstraksi ............................................................................................ 36
3.2. Tujuan Ekstraksi .................................................................................................. 36
3.3. Prinsip ekstraksi.................................................................................................... 37
3.4. Jenis Ekstraksi ...................................................................................................... 39
BAB IV ................................................................................................................................... 49
SKRINING FITOKIMIA DAN IDENTIFIKASI .............................................................. 49
4.1. Skrining Fitokimia Alkaloid, Flavonoid, Dan Tanin ............................................. 49
a. Skrining fitokimia alkaloid ..................................................................................... 49
b. Skrining fitokimia flavonoid ................................................................................... 50
c. Skrining fitokimia tanin .......................................................................................... 50
4.2. Skrining Fitokimia Terpenoid dan Antrakuinon ................................................... 52
a. Skrining fitokimia terpenoid dan steroid tak jenuh .................................................. 53
b. Skrining fitokimia antrakuinon ................................................................................ 54
BAB V .................................................................................................................................... 55

iii
Kromatografi Lapis Tipis..................................................................................................... 55
5.1. Gambaran Umum Kromatografi Lapis Tipis ......................................................... 55
5.2. Metode Pemisahan pada Kromatografi ................................................................... 56
a. Pemisahan berdasarkan polaritas ............................................................................ 57
b. Pemisahan berdasarkan muatan ion ........................................................................ 57
c. Pemisahan berdasarkan ukuran molekul ................................................................. 58
d. Pemisahan berdasarkan bentukan spesifik .............................................................. 58
5.3. Tahapan Metode Analisis KLT ................................................................................ 59
5.4. Penanganan Eluen ..................................................................................................... 67
5.5. Penanganan Chamber ............................................................................................... 68
5.6. Elusi (Pengembangan) KLT...................................................................................... 73
a. Aplikasi Manual ....................................................................................................... 79
b. Zona Konsentrasi KLT............................................................................................. 80
5.7. Evaluasi Noda ............................................................................................................. 81
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................................ 84

iv
v
BAB I
FARMAKOGNOSI

1.1. Sejarah Singkat Farmakognosi


Farmakognosi telah diciptakan melalui penggabungan dua kata dalam bahasa
Yunani. Farmakon (obat) dan Gnosis (pengetahuan), yaitu pengetahuan tentang obat.
Tata nama Farmakognosi pertama kali dan paling sering digunakan oleh C.A Seydler,
seorang mahasiswa kedokteran di Halle/Saale, Jerman, yang secara tegas
menggunakan Analetica Pharmacognostica sebagai judul utama tesisnya pada tahun
1815. Selain itu, penelitian penelitian lebih lanjut telah mengungkapkan bahwa
Schmidt telah terlebih dahulu menggunakan istilah Farmakognosis di dalam
monografinya yang berjudul Lehrbuch der Materia Medica (yaitu catatan-catatan
kuliah tentang Materia Medis) pada tahun 1811 di Wina. Kompilasi ini khusus
membahas tentang tumbuh-tumbuhan berkhasiat obat dan karakteristiknya yang
bersesuaian.

Istilah Materia Medica adalah kata latin yang dikemukakan mula-mula oleh
seorang dokter Yunani Disocorides pada abad pertama sesudah Masehi. Bahan dasar
alam atau umumnya disebut bahan alam tersebut berasal dari tumbuhan (bahan alam
nabati), dari hewan (bahan alam hewani) dan dari mineral (bahan alam mineral). Dari
ketiga jenis bahan alam ini, tumbuhan merupakan jumlah terbesar yang digunakan
sebagai sumber bahan untuk farmasi. Bahan disini dapat berupa simplisia atau hasil
olahan simplisia berupa ekstrak medisinal, yaitu ekstrak yang digunakan untuk
pengobatan dan mengandung kumpulan senyawa kimia alam yang secara keseluruhan
mempunyai aktivitas biologi, atau hasil olahan (simplisia) berupa senyawa kimia
murni yang dapat digunakan sebagai prazat (1hysical1, zat pemula) untuk sintesis
senyawa kimia obat.

Memang cukup menarik mengetahui bahwa leluhur kita telah memiliki


pengetahuan yang luas, mendalam dan terperinci tentang 1hysical (banyak) obat yang
berasal dari tumbuhan, tetapi sayangnya, mereka tidak mempunyai pengetahuan yang
memadai tentang adanya senyawa-senyawa murni kimia di dalam sebagian besar
obat-obat tersebut.

Kamfor diketahui memiliki kegunaan yang sangat banyak dalam perawatan


dan pengobatan banyak penyakit oleh bangsa Mesir, Cina, India, Yunani dan Romawi
kuno, misalnya untuk tubuh bagian dalam sebagai 1hysical1 dan karminatif untuk
tubuh bagian luar sebagai antripuritik, 1hysical111tant, dan 1hysical11. Mula-mula,
kamfor diperoleh hanya dengan cara mendinginkan minyak atsiri dari 1hysical1,
rosemary, lavender, sage. Sedangkan, bangsa Yunani dan Romawi kuno
memperolehnya sebagai hasil samping dari pembuatan minuman anggur. Kini kamfor

1
2

diperoleh secara sintesis skala besar (campuran rasemat) dari α-pinena yang terdapat
di dalam minyak terpentin

Informasi tertulis paling tua dakan tradisi Eropa-Arab, berasal dari orang
Sumeria dan Akkad di Mesopotamia. Penduduk ini berasal dari daerah yang sama
seperti yang tercatat arkeologis Shanidar IV. Dokumentasi serupa telah bertahan
ribuan tahun di Mesir. Orangorang Mesir mendokumentasikan pengetahuan mereka
(termasuk kedokteran dan farmasi) pada kertas 2hysica yang terbuat dari Cyperus
aquaticus, suatu tumbuhan air seperti rumput (disebut juga 2hysica) ditemukan di
sepanjang Eropa selatan dan Afrika utara. Yang paling penting dalam tulisan ini
adalah Papirus Ebers, yang berasal dari sekitar 1500 SM. Papirus Ebers merupakan
buku pegangan medis yang mencakup semua macam penyakit dan termasuk empiris
dan juga bentuk simbolik pengobatan. Papirus lainnya berfokus pada resep untuk
sediaan farmasi (contohnya, yang disebut Papirus Berlin).

Secara keseluruhan, catatan tertulis mengenai obat Asia lainnya kurang


komprehensif daripada obat Cina. Ayurveda merupakan bentuk obat tradisional Asia
yang paling tua, yang pada dasarnya berasal dari India dan suatu cara filosofi-sains-
seni kehidupan. Istilah Aryuveda berasal dari kata Ayur yang berarti hidup dan veda
yang berarti pengetahuan serta tambahan terakhir untuk tulisan suci Hindu dari 1200
SM disebut Artharva-veda. Sekolah pertama yang mengajar obat Aryuveda adalah
Universitas Banaras pada 500 SM dan telah ditulis buku kitab Samhita (atau
ensiklopedia obat). Tujuh ratus tahun kemudian ensiklopedia besar lainnya ditulis dan
keduanya membentuk dasar Aryuveda. Lingkungan hidup dan non-hidup, termasuk
manusia terdiri atas unsur-unsur bumi (prithvi), air (jala), api (tejac), udara (vaju) dan
ruang (akasa).

Jamu adalah obat tradisional Indonesia yang diduga berasal dari 2hysica
Surakarta dan Yogyakarta, dari praktek budaya Jawa kuno dan juga hasil pengaruh
obat Cina, India dan Arab. Ukiran di candi Borobudur sejak dari tahun 800-900
menggambarkan penggunaan daun kalpataru (pohon yang tidak pernah mati) untuk
membuat obat-obatan. Pengaruh suku Jawa menyebar ke Bali ketika terbentuk
hubungan, dan pada tahun 1343 pasukan kerajaan Majapahit di Jawa Timur dikirim
untuk menaklukkan orang-orang Bali.

Kampo atau obat tradisional Jepang, kadang-kadang berhubungan dengan


dosis rendah TCM. Sampai tahun 1875 (ketika dokter-dokter Jepang dilarang
menggunakan obat barat untuk pemeriksaan medis), 2hysic Cina merupakan bentuk
utama praktek medis di Jepang, yang 2hysic melalui Korea dan dijadikan obat asli di
Jepang. Pertukaran pelajar dengan Cina mempunyai arti bahwa praktek medis dan
keagamaan sebenarnya 2hysica, sebagai contoh, 2hysic medis yang terbentuk di
3

Jepang pada tahun 701 merupakan salinan yang sama dengan 3hysic medis dinasti
Tang di Cina.

Perdagangan obat botani meningkat selama abad ke-16. Dari, India Timur
terdapat pala (Myristica fragrans) yang sudah digunakan oleh orang Yunani sebagai
bahan 3hysical dan untuk mengatasi masalah gastrointestinal. Kelembak (Rheum
palmatum) tiba di Eropa pada abad ke-10 dan dipakai sebagai pencahar yang kuat.
Perubahan penting lainnya pada saat ini adalah penemuan tumbuhan penyembuh
yang memiliki sifat-sifat baru sebagai penyembuh.

1.2. Ruang Lingkup Ilmu Farmakognosi

Berdasarkan perkembangan ilmu farmasi mengenai dan kedokteran yang


begitu pesat, maka muncullah Farnakope pertama yang dikeluarkan oleh kota-kota
otonom, dan menjadi dokumen resmi yang berjilid. Dimana dokumen tersebut berisi
mengenai komposisi sediaan dan penyimpanan bahan farmasi. Adapun farmakope
pertama ada tiga yaitu, Ricettaria fiorentina (Florensia, Italia) tahun 1498, Farmakope
Nuremberg (Frankonia Jerman) atau Pharmacorum omnium tahun 1546, Farmakope
Londiniensis (Inggris) tahun 1618, salah satu risalah awal farmasetik yang paling
berpengaruh. Farmakope-farmakope ini terutama ditujukan untuk membuat beberapa
sususnan menjadi berbagai bentuk sediaan yang bervariasi dan untuk mengurangi
masalah-masalah yang timbul karena variabilitas komposisi obat tersebut

Perkembangan lainnya adalah pendirian kebun tumbuhan obat oleh


Komunitas Terhormat Apoteker pada tahun 1617, dimana kebun tumbuhan tersebut
dikenal dengan Chelsea Physic Garden. Salah satu apoteker dari Inggris yang paling
dikenal pada abd ke-17 adalah Nicholas Culpeper (tahun 1616-1654), sangat dikenal
dengan dokter Inggris atau lebih umum disebut herbal Culpeper. Herbal ini saingan
popularitas General Historie of plantes karya John Gerard, tetapi akibat
kesombongannya dalam penolakan praktisi ortodoks, membuatnya sangat tidak
dikenal oleh kalangan dokter. Culpeper menjelaskan, bahwa tumbuhan yang tumbuh
di Inggris dan yang dapat digunakan untuk menyembuhkan orang atau untuk
memelihara kesehatan tubuh seseorang. Ia juga dikenal karena terjemahannya A
3hysical directory (dari bahasa latin menjadi bahasa Inggris) pada Farmakope London
pada tahun 1618 yang dipublikasikan pada tahun 1649. Contoh obat-obat murni
awalnya antara lain adalah:

1. Morfin, dari opium bunga Papaver somniferum, yang pertama kali diidentifikasi
oleh FW Sertuner dari Jerman pada tahun 1804 dan secara kimia dikarakterisasi
pada tahun 1817 sebagai alkaloid. Struktur utuhnya ditentukan pada tahun 1923
oleh JM Gulland dan R.Robinson di Manchester.
4

2. Kuinin, dari batang kulit Cinchona succirubra, yang pertama kali diisolasi oleh
Pierre Joseph Pelletier dan Joseph Bienaime Caventou dari Perancis pada tahun
1820; strukturnya dieludasi pada tahun 1880 oleh berbagai laboratorium. Pelletier
dan Caventou juga membantu dalam mengisolasi berbagai alkaloid lain.
3. Salisin, dari kulit kayu Salix spp, diisolasi pertama kali oleh Johannes Buchner di
Jerman. Salisin diturunkan pertama kali pada tahun 1838 oleh Rafaele Pirea
(Perancis) untuk menghasilkan asam salisilat, dan kemudian pada tahun 1899
oleh perusahaan Bayer untuk menghasilkan asam asetilsalisilat atau aspirin.
BAB II

SIMPLISIA

2.1. Pengertian

Dalam buku Materia Medika Indonesia, ditetapkan definisi bahwa simplisia


adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum mengalami
pengolahan apapun juga dan kecuali dikatakan lain, berupa bahan yang telah
dikeringkan. Simplisia dibedakan menjadi simplisia nabati, simplisia hewani dan
simplisia pelikan (mineral). Simplisia nabati adalah simplisia yang berupa tumbuhan
utuh, bagian tumbuhsn atau eksudat tumbuhan. Eksudat tumbuhan ialah isi sel yang
secara spontan keluar dari tumbuhan atau isi sel yang dengan cara tertentu
dikeluarkan dari selnya atau senyawa nabati lainnya yang dengan cara tertentu
dipisahkan dari tumbuhannya dan belum berupa senyawa kimia murni (Depkes RI,
2000). Simplisia nabati sering berasal dan berupa seluruh bagian tumbuhan, tetapi
sering berupa bagian atau organ tumbuhan seperti akar, kulit akar, batang, kulit
batang, kayu, bagian bunga dan sebagainya. Di samping itu, terdapat eksudat seperti
gom, lateks, tragakanta, oleoresin, dan sebagainya.

Simplisia nabati adalah simplisia berupa tanaman utuh, bagian tanaman atau
eksudat tanaman. Eksudat tanaman adalah isi sel yang secara spontan keluar dari
tanaman atau isi sel dengan cara tertentu dikeluarkan dari selnya, atau zat-zat nabati
lainnya yang dengan cara tertentu dipisahkan dari tanamannya dan belum berupa zat
kimia murni.

Simplisia hewan, seperti halnya dengan simplisia dari tumbuhan diperoleh


dari hewan piaraan atau hewan liar. Hewan liar harus diburu, misalnya ikan paus,
menjangan dan lain-lain. Untuk mendapatkan simplisia dengan kondisi optimum
maka diusahakan sejauh mungkin hewan untuk simplisia berasal dari hewan piaraan
seperti pada tumbuhan dibudidaya, misal tawon untuk menghasilkan madu yang
baik.

Simplisia mineral (pelikan) adalah simplisia yang berupa mineral (pelikan)


yang belum diolah atau diolah dengan cara sederhana dan belum berupa zat kimia
murni..

2.2. Syarat – Syarat Simplisia

Materia Medika Indonesia merupakan pedoman bagi simplisia yang akan


dipergunakan untuk keperluan pengobatan, tetapi tidak berlaku bagi bahan yang
dipergunakan untuk keperluan lain yang dijual dengan nama yang sama. Namun,
simplisia yang dijelaskan disini adalah simplisia nabati yang secara umum

5
6

merupakan produk hasil pertanian tumbuhan obat setelah melalui proses pasca panen
dan proses preparasi secara sederhana menjadi bentuk produk kefarmasian yang siap
dipakai atau siap diproses selanjutnya, yaitu:

1. Siap dipakai dalam bentuk serbuk halus untuk diseduh sebelum diminum (jamu)
2. Siap dipakai untuk dicacah dan digodok sebagai jamu godokan (infus)
3. Diproses selanjutnya untuk dijadikan produk sediaan farmasi lain yang umumnya
melalui proses ekstraksi, separasi dan pemurnian.

Variasi senyawa kandungan dalam produk hasil panen tumbuhan obat (in
vivo) disebabkan oleh aspek sebagai berikut:

1. Genetik (bibit)
2. Lingkungan (tempat tumbuh, iklim)
3. Rekayasa agronomi (fertilizer, perlakuan selama masa tumbuh)
4. Panen (waktu dan pasca panen)

Dalam hal simplisia sebagai bahan baku (awal) dan produk siap dikonsumsi
langsung, dapat dipertimbangkan 3 konsep untuk menyusun parameter standar
umum:

1. Simplisia sebagai bahan kefarmasian seharusnya memenuhi 3 parameter mutu


umum suatu bahan (material), yaitu kebenaran jenis (identifikasi), kemurnian
(bebas dari kontaminasi kimia dan biologis) serta aturan penstabilan (wadah,
penyimpanan dan transportasi)
2. Simplisia sebagai bahan dan produk konsumsi manusia sebagai obat tetap
diupayakan memenuhi 3 paradigma seperti produk kefarmasian lainnya, yaitu
quality-safetyefficacy (mutu-aman-manfaat)
3. Simplisia sebagai bahan dengan kandungan kimia yang bertanggung jawab
terhadap respon biologis harus mempunyai spesifikasi kimia, yaitu informasi
komposisi (jenis dan kadar) senyawa kandungan

2.3. Nama Latin Tanaman

1. Nama Latin tanaman terdiri dari 2 kata, kata pertama disebut nama genus
dan perkataan kedua disebut petunjuk species , misalnya nama latin dari padi
adalah Oryza sativa, jadi Oryza adalah genusnya sedangkan sativa adalah
petunjuk speciesnya. Huruf pertama dari genus ditulis dengan huruf besar
dan huruf pertama dari petunjuk species ditulis dengan huruf kecil .Nama
ilmiah lengkap dari suatu tanaman terdiri dari nama latin diikuti dengan
singkatan nama ahli botani yang memberikan nama latin tersebut.

Beberapa contoh adalah sebagai berikut :


7

Nama ahli botani Disingkat Nama tanaman lengkap


Linnaeus L Oryza sativa L
De Candolle DC Strophanthus hispidus DC
Miller Mill Foeniculum vulgare Mill
Houttuyn Houtt Myristica fragrans Houtt
2. Nama latin tanaman tidak boleh lebih dari 2 perkataan, jika lebih dari 2 kata (3
kata), 2 dari 3 kata tersebut harus digabungkan dengan tanda (-) .

Contoh : Dryopteris filix – mas

Strychnos nux – vomica

Hibiscus rosa – sinensis

3. Kadang- kadang terjadi penggunaan 1 nama latin terhadap 2 tanaman yang


berbeda, hal ini disebut homonim dan keadaan seperti ini terjadi sehingga ahli
botani lain keliru menggunakan nama latin yang bersangkutan terhadap tanaman
lain yang juga cocok dengan uraian morfologis tersebut.

2.4. Tata Nama Simplisia

Dalam ketentuan umum Farmakope Indonesia disebutkan bahwa nama


simplisia nabati ditulis dengan menyebutkan nama genus atau species nama
tanaman, diikuti nama bagian tanaman yang digunakan. Ketentuan ini tidak
berlaku untuk simplisia nabati yang diperoleh dari beberapa macam tanaman dan
untuk eksudat nabati.

Contoh :

1. Genus + nama bagian tanaman : Cinchonae Cortex, Digitalis Folium, Thymi


Herba, Zingiberis Rhizoma

2. Petunjuk species + nama bagian Belladonnae Herba, Serpylli Herba,


tanaman : Ipecacuanhae Radix, Stramonii Herba

3. Genus + petunjuk species + Curcuma aeruginosae Rhizoma, Capsici


nama bagian tanaman : frutescentis Fructus

Keterangan : Nama species terdiri dari genus + petunjuk spesies

Contoh : Nama spesies : Cinchona succirubra

Nama genus : Cinchona

Petunjuk species : succirubra


8

2.5. Ejaan Latin


Meskipun alfabet Latin sama dengan alfabet yang dipergunakan dalam
bahasa Indonesia, tetapi dengan ejaan yang disempurnakan pada bahasa
Indonesia, maka terdapat perbedaan cara pengucapan dari beberapa huruf dan
rangkaian huruf.

Cara pembacaan huruf – huruf atau rangkaian – rangkaian huruf Latin


yang dimaksud, dapat kita lihat pada contoh – contoh berikut ini :

Huruf atau Dibaca sebagai Contoh Diucapkan sebagai


rangkaian huruf

Ae e Galangae ga-la-nge

Lobeliae lo-be-li-e

C k jika diikuti huruf a, o, Cacao ka-ka-o


u atau huruf mati
Cola ko-la

Curcuma kur-ku-ma

Fructus Fruk -tus

C s jika diikuti huruf e, i, y Cera Se-ra

Citri Sit-tri

Glycyrrhiza Gli-si-ri-sa

Cc kk jika diikuti huruf a , Succus Suk-kus


o, u

Cc ks jika diikuti huruf Coccinella Kok-si-ne-la

e, i, y

Ch kh jika diikuti huruf Cinchona Sin-ko-na

hidup

Ch h jika diikuti huruf mati Strychni Strih-ni

Eae e Dioscoreae Di-es-ko-re

Eu e+u Oleum O-le-um

Cetaceum Se-ta-se-um

Ff f Paraffinum Pa-ra-fi-num
9

ie i..+ ye Iecoris Iye-ko-ris

ii i+i Aurantii Au-ran-ti-i

j y Cajuputi Ka-yu-pu-ti

ll l Vanilla Va-ni-la

mm m Gummi Gu-mi

Ichtammolum Ih-ta-mo-lum

nh n Ipecacuanhae I-pe-ka-ku-ane

oe eu Foeniculi Feu-ni-ku-li

Asafoetida A-sa-feu-ti-da

nn n Belladonna Be-la-do-na

Sennae Se-ne

ph f Orthosiphon Or-to-si-fon

pp p hippoglossi hi-po-glo-si

qu kw quercus kwer-kus

Rh r rhei re-i

rhizoma ri-zo-ma

Rr r myrrha mi-ra

Sh sy shorea syo-re

purshiana pur-si-a-na

Ss s Cassia ka-si-a

Th t Mentha men-ta

tiae sie Liquiritiae li-kwi-ri-sie

X ks jika tertera pada Pix p iks


tengah / akhir kata
radix ra-diks

cortex kor-teks

bixa bik-sa

X s jika pada permulaan xanthorrhiza san-to-ri-za


kata
10

Y i jika didahului dan / hydrastis hi-dras-tis


atau diikuti oleh huruf
maydis ma-i-dis
mati

Y y jika diapit oleh 2 huruf papaya pa-pa-ya


hidup

(Farmakognosi 1 : 2009)

2.6. Macam – Macam Simplisia


a. Simplisia Folium
1. ABRI FOLIUM

Nama lain : Daun Saga

Nama tanaman asal : Abrus precatorius

Keluarga : Papilionaceae

Zat berkhasiat : Glisirizin sampai 10 %, Gliserin tidak kurang 15 %,


utama/isi Ca-Oksalat

Penggunaan : Obat sariawan, obat batuk

2. ACHILEAE FOLIUM

Nama lain : Daun seribu

Nama tanaman asal : Achillea millefolium (L.)

Keluarga : Asteraceae

Zat berkhasiat : azulen


utama/isi

Penggunaan : Antipiretika, diaforetika, karminativa

3. AGLAIAE FOLIUM

Nama lain : Daun pacar cina

Nama tanaman asal : Aglaia odorata (Lour)

Keluarga : Meliaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri alkaloida, damar, garam – garam mineral


utama/isi

Penggunaan : Mengurangi haid, obat gonorrhoe


4. APII GRAVEOLENTIS FOLIUM

Nama lain : Daun seledri

Nama tanaman asal : Apium graveolens

Keluarga : Apiaceae

Zat berkhasiat : Flavo-glukosida (apiin), zat pahit, minyak atsiri,


utama/isi vitamin, kaolin, lipase

Penggunaan : Memacu enzim pencernaan (stomakik), peluruh seni


(diuretika)

5. BAECKEAE FOLIUM

Nama lain : Daun jungrahab

Nama tanaman asal : Baeckeae frutescens

Keluarga : Myrtaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung eugenol, kariofilin, zat


utama/isi penyamak, damar

Penggunaan : Diuretika, obat sakit perut, muntah (emetika)

6. BASILICI FOLIUM

Nama lain : Daun selasih

Nama tanaman asal : Ocimum basilicum (L.)

Keluarga : Lauraceae

Zat berkhasiat : Minyak menguap, osimen, pinen, terpen, sineol, metil


utama/isi khavikol

Penggunaan : Ekspektoransia, Emenagoga, Karminativa, Anti


emetika, Adstringen, Antipiretika, Anti spasmodika,
Penambah nafsu makna, pengobatan pasca persalinan

7. BATATASAE FOLIUM

Nama lain : Daun ubi jalar

Nama tanaman asal : Ipomoe batatas (L.)

Keluarga : Convolvulaceae

Zat berkhasiat : Vitamin A, B, C, diduga mengandung zat menyerupai


utama/isi insulin

11
12

Penggunaan : Mempercepat pematangan bisul

8. BLUMEAE FOLIUM

Nama lain : Daun sembung

Nama tanaman asal : Blumeae balsamifera

Keluarga : Asteraceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung kamfer, zat penyamak


utama/isi (tanin), dan damar

Penggunaan : Karminativa, sudorifika, antitusif, adstringen

9. CARICAE FOLIUM

Nama lain : Daun pepaya (tanpa tangkai daun)

Nama tanaman asal : Carica papaya (L)

Keluarga : Caricaceae

Zat berkhasiat : Enzim proteolitik papain, alkaloid karpin


utama/isi pseudokarpin, glikosid, karposida, damar

Penggunaan : Anti demam, amara, obat desentri

10. CARYOPHYLLI FOLIUM

Nama lain : Daun cengkeh

Nama tanaman asal : Syzygium aromaticum (L.) Merr & Perry, Eugenia
aromatica (L.) Bail, Eugenia caryophyllata Thumb

Keluarga : Myrtaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, tanin galat, kalsium oksalat

Penggunaan : Aromatik, karminativa, stimulan

11. COLEI AMBOINICI FOLIUM

Nama lain : Daun jinten

Nama tanaman asal : Plectranthus amboinicus / Coleus amboinicus Lour

Keluarga : Lamiaceae

Zat berkhasiat : Kalium, minyak atsiri (0,043% bobot segar, 0,2%


utama/isi bobot kering) dan mengandung karvakrol, isopropil-o-
13

kresol

Persyaratan kadar : Minyak atsiri tidak kurang dari 0,2% v/b

Penggunaan : Antipiretik, analgetik, obat luka, sariawan, antitusif,


mules

12. CYMBOPOGONIS FOLIUM

Nama lain : Daun sereh

Nama tanaman asal : Cymbopogon nardus (L) Rendle

Keluarga : Poaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung geraniol dan sitronelal


utama/isi (campuran minyak tawon)

Penggunaan : Karminativa, antispasmodika, antipiretika, amara,


penghalau serangga

13. DESMODII TRIQUETRI FOLIUM

Nama lain : Daun duduk

Nama tanaman asal : Desmodium triquetrum (DC)

Keluarga : Papilionaceae

Zat berkhasiat : Alkaloida hifaforin dan trigonelin, zat penyamak, asam


utama/isi kersik dan kalium

Penggunaan : Tonikum, diuretik

14. DIGITALIS FOLIUM

Nama lain : Daun digitalis / Daun jari

Nama tanaman asal : Digitalis purpurea (L)

Keluarga : Scrophulariaceae

Zat berkhasiat : Purpureaglukosida A, Purpureaglukosida B,


utama/isi Purpureaglukosida C, Zat warna kuning luteolin dan
tapsin,oksidase.

Penggunaan : Kardiatonika

15. DIGITALIS LANATAE FOLIUM

Nama lain : Daun digitalis lanata


14

Nama tanaman asal : Digitalis lanata (Ehrh.)

Keluarga : Scrophulariaceae

Zat berkhasiat : Digitoksigenina, gitoksigenina, Digoksigenina,


utama/isi Diginatigenina, Gitaloksigeina

Penggunaan : Isolasi glukosida, terutama digoksina

16. ECLIPTAE FOLIUM

Nama lain : Daun urang - aring

Nama tanaman asal : Eclipta prostrata

Keluarga : Asteraceae

Zat berkhasiat : Alkaloida nikotin, ekliptin

Penggunaan : Adstringen

b. Simplisia Flos
1. Caryophylli Flos

Nama lain : Cengkeh

Nama tanaman asal : Eugenia caryophyllus spreng.

Keluarga : Myrtaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri mengandung eugenol , zat serupa damar


utama/isi yang tdak berasa, zat hablur berupa jarum yang disebut
kariofilin, zat penyamak, dan gom

Penggunaan : Stimulansia, obat mulas, menghilangkan rasamual dan


muntah

2. Gunnerae Fructus Et Flos


15

Nama lain : Sukmadiluwih

Nama tanaman asal : Gunnera macrophylla BI

Keluarga : haloragaceae

Zat berkhasiat : –

Penggunaan : penyegar badan

3. Jasmini Flos

Nama lain : Bunga melati

Nama tanaman asal : Jaminum sambac

Keluarga : Oleaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, asam forminat, asam benzoat, asam


utama/isi asetat, ester metil antranil, seskuiterpen, dan
seskuiterpen – alkohol

Penggunaan : Korigen odoris, antipiretik, penghenti ASI

4. Messuae Flos

Nama lain : Bunga Nagasari

Nama tanaman asal : Messua Ferrea (L.)

Keluarga : Clusiaceae

Zat berkhasiat : Lemak, protein, dan asam-asam organik (seperti asam


utama/isi palmitat, asam linolet, dan asam stearat ).

Penggunaan : Antidiare, aromatikum, ekspektoran

5. Woodfordiae Flos Et Fructus


16

Nama lain : Bunga dan Buah Sidowayah

Nama tanaman asal : Woodfordia Fructicosa L atau Woodfordia


Floribunda Salisbury

Keluarga : Lytraceae

Zat berkhasiat : Zat penyamak (Tanin)

Penggunaan : Adstringensia

c. Simplisia Fructus
1. AMOMI FRUCTUS

Nama lain : Kapulaga, kapol, Cardamomi fructus

Nama tanaman asal : Amomum compactum ( Solan. Ex. Maton) disebut juga
Amomum cardamomum, Amomum kapulaga (Sprague
& Burk)

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri 8% dengan isi utama Sineol

Penggunaan : Bumbu masak, bahan pewangi, karminativa, dibuat


tingtur

2. ANISI FRUCTUS

Nama lain : Buah adas manis

Nama tanaman asal : Pimpinella anisum

Keluarga : Keluarga : Apiaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung anetol 80 – 90%,


utama/isi metilkavikol, anisketon, asetaldehida, terdapat pula
minyak lemak, zat putih telur, hidrat arang

Penggunaan : Karminativa, obat mulas

3. BRUCEAE FRUCTUS

Nama lain : Tambara marica, buah Makasar

Nama tanaman asal : Brucea javanica (L) Merr, disebut juga Brucea
amarissima Lour Merr, dan Brucea sumatrana (Roxb)
17

Keluarga : Simarubaceae

Zat berkhasiat : Minyak lemak, zat penyamak, glukosida brukamarin


utama/isi burseral, brusealin

Penggunaan : Obat disentri, hemostatika

4. CAPSICI FRUCTUS

Nama lain : Cabe, Capsicum cayenne pepper, lombok

Nama tanaman asal : Capsicum annum

Keluarga : Solanaceae

Zat berkhasiat : Kapsisin, vitamin C, damar, zat warna kapsantin dan


utama/isi karoten

Penggunaan : Penggunaan : Stomakikum, tingturnya sebagai obat


gosok

5.CAPSICI FRUTESCENTIS FRUCTUS

Nama lain : Buah cabe rawit

Nama tanaman asal : Capsicum frutescens

Keluarga : Solanaceae

Zat berkhasiat : Kapsisin, vitamin C, damar, zat warna kapsantin dan


utama/isi karoten

Penggunaan : Penggunaan : Stomakikum, tingturnya sebagai obat


gosok

6. COPTICI FRUCTUS

Nama lain : Buah mungsi

Nama tanaman asal : Carum copticum (Benth)

Keluarga : Apiaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung timol, karvon,


utama/isi limonen

Persyaratan kadar Kadar minyak atsiri tidak kurang dari 1,6% v/b

Penggunaan : Karminativa, desinfektansia

7. CORIANDRI FRUCTUS

Nama lain : Ketumbar

Nama tanaman asal : Coriandrum sativum (L)

Keluarga : Apiaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung koriandrol, terdapat


utama/isi pula minyak lemak
18

Penggunaan : Bumbu masak, karminativa

8. CUBEBAE FRUCTUS

Nama lain : Buah kemukus

Nama tanaman asal : Piper cubeba

Keluarga : Piperaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, asam kubeba, kubebin, piperin, minyak


utama/isi lemak

Penggunaan : Obat radang selaput lendir saluran kemih

9. CUMINI FRUCTUS

Nama lain : Buah jinten putih

Nama tanaman asal : Cuminum cyminum (L)

Keluarga : Apiaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung kuminal, lemak


utama/isi

Penggunaan : Stimulans, karminativa, stomakikum

10.FOENICULI FRUCTUS

Nama lain : Buah adas

Nama tanaman asal : Foeniculum vulgare (Mill.)

Keluarga : Apiaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung anetol, fenkon (rasa


utama/isi pahit), metal khavikol, anisaldehida, minyak lemak

Penggunaan : Karminativa, obat mulas, obat gosok anak

11. GOSSYPIUM DEPURATUM FRUCTUS

Nama lain : Kapas murni

Nama tanaman asal : Gossypium hirsutum

Keluarga : Malvaceae

Zat berkhasiat : Selulosa

Penggunaan : Alat kesehatan

12. MELALEUCAE FRUCTUS

Nama lain : Buah kayu putih, merica bolong

Nama tanaman asal : Melaleuca leucadendra (L.)

Keluarga : Myrtaceae
19

Zat berkhasiat : Minyak atsiri

Penggunaan : Karminativa

13.MORINDAE CITRIFOLIAE FRUCTUS

Nama lain : Mengkudu, pace, buah noni

Nama tanaman asal : Morinda citrifolia

Keluarga : Rubiaceae

Zat berkhasiat : Morindin, morindon

Penggunaan : Antidiabetika, antihipertensi, roboransia,


ekspektoransia

14. PANDANUS CONIDEUS FRUCTUS

Nama lain : Papuan Red Fruit / Buah merah

Nama tanaman asal : Pandanus conideus

Keluarga : Pandanaceae

Zat berkhasiat : Betakaroten, tokoferol, asam oleat, asam linoleat dan


utama/isi dekanoat

Penggunaan : obat tekanan darah tinggi, asam urat, antikolesterol,


obat kanker, tumor dan HIV

15. PAPAVERIS FRUCTUS

Nama lain : Buah mahkota dewa, phaleria papuana

Nama tanaman asal : Phaleria macrocarpa

Keluarga : Thymelacaceae

Zat berkhasiat : Alkaloid, saponin, polifenol

Penggunaan : Penggunaan : Antihipertensi, asam urat, antidiabetes,


liver, kanker, pendarahan dan membersihkan racun

16. PIPERIS ALBI FRUCTUS

Nama lain : Lada putih, merica putih

Nama tanaman asal : Piper album

Keluarga : Piperaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri dan pati

Penggunaan : Karminativa, bumbu masak

17. PIPERIS NIGRI FRUCTUS

Nama lain : Lada hitam, merica hitam


20

Nama tanaman asal : Piper nigrum

Keluarga : Piperaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri berisi felandren, kariofilen. Alkaloida


utama/isi khavisin (berupa hablur putih kekuningan, rasa amat
pedas), piperin (tidak larut dalam air, mula – mula
tidak berasa, lama – lama pedas dan tajam, oleh alkali
diuraikan jadi piperidin dan asam piperat), Piperidin
(cairan atsiri larut dalam air dan alkohol)

Persyaratan kadar : minyak atsiri tidak kurang dari 1% v//b

Penggunaan : Karminativa, iritasi lokal

18. RETROFRACTI FRUCTUS

Nama lain : Cabe jawa, lada panjang, cabe jamu

Nama tanaman asal : Piper retrofractum (Vahl.)

Keluarga : Piperaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, piperin, damar, pati

Penggunaan : Stimulansia, karminativa, diaforetika

19. TAMARINDI PULPA FRUCTUS

Nama lain : Asam jawa, Pulpa Tamarindorum cruda

Nama tanaman asal : Tamarindus indica (L.)

Keluarga : Caesalpiniaceae

Zat berkhasiat : Asam – asam organik antara lain asam tartrat, asam
utama/isi sitrat, asam malat

Penggunaan : Pencahar lemah

20. VANILLAE FRUCTUS

Nama lain : Buah vanili

Nama tanaman asal : Vanilla planifolia (Andrews)

Keluarga : Orchidaceae

Zat berkhasiat : Vanilin

Persyaratan kadar : Kadar sari anhidrat yang larut dalam etanol 70 % tidak
kurang dari 12 %

Penggunaan : Bahan pewangi

21. WOODFORDIAE FRUCTUS

Nama lain : Buah sidowayah

Nama tanaman asal : Woodfordia fruticosa (L.) atau Woodfordia floribunda


21

(Salisbury)

Keluarga : Lythraceae

Zat berkhasiat : Zat penyamak (tannin)

Penggunaan : Adstringen

d. Simplisia Semen
1. ARECAE SEMEN

Nama lain : Biji pinang, jambe

Nama tanaman asal : Areca catechu

Keluarga : Arecaceae

Zat berkhasiat : Alkaloida berupa arecolin, tannin, lemak

Penggunaan : Memperkecil pupil mata, obat cacing (anthelmintika)


khususnya cacing pita, untuk makan sirih

2. COFFEAE SEMEN

Nama lain : Biji kopi

Nama tanaman asal : Coffea arabica Linden ex de Wildem disebut juga


Coffea canephora piere ex Froehner varietas Robusta
dan beberapa spesies Coffea lainnya

Keluarga : Rubiaceae

Zat berkhasiat : Kofein, asam kofeotanat, ksantin

Penggunaan : Penawar racun (antidota), penurun panas (antipiretika),


peluruh air seni (diuretik)

3. COLAE SEMEN

Nama lain : Biji kola

Nama tanaman asal : Beberapa species cola antara lain : Cola Nitida dan
Cola acuminata (Schott et Endl.)

Keluarga : Sterculiaceae

Zat berkhasiat : Kofeina, sebagian bebas dan sebagian terikat dengan


utama/isi zat penyamak sebagai kolatin dan kolatein, terdapat
pula Theobromina, zat penyamak, kolaipase, kola-
oksidase, zat warna merah kola

Penggunaan : Minuman yang menyegarkan seperti halnya dengan


teh, kopi, guarana karena berisi kofeina

4. CUCURBITAE SEMEN

Nama lain : Biji labu merah


22

Nama tanaman asal : Cucurbita moschata (Duchesne)

Keluarga : Cucurbitaceae

Zat berkhasiat : Minyak lemak, zat yang aktif terhadap pengobatan


utama/isi cacing pita, terdapat dalam embrio dan selaput
hijaunya

Penggunaan : Obat cacing pita, diberikan sebagai emulsa segar

5. FOENIGRAECI SEMEN

Nama lain : Biji klabet

Nama tanaman asal : Trigonella foenumgraecum (L.)

Keluarga : Papilionaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, alkaloida trigonelin (alkaloida tanpa


utama/isi khasiat), lendir, minyak lemak, zat pahit, zat warna
kuning

Penggunaan : Bahan pewangi

6. MYRISTICAE SEMEN

Nama lain : Pala, Nutmeg, Nux Moschata

Nama tanaman asal : Myristica fragrans (Houtt)

Keluarga : Myristicaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung miristin (bersifat


utama/isi membius), kamfen, minyak lemak terutama berupa
gliserida dari asam miristinat, asam oleat dan asam
linoleat, zat putih telur

Penggunaan : Bahan pewangi, karminativa, stimulansia setempat


terhadap saluran pencernaan, miristin berkhasiat
membius, menyebabkan rasa kantuk dan
memperlambat pernafasan

7. MYRISTICAE ARILUS

Nama lain : Kembang pala, macis

Nama tanaman asal : Myristica fragrans (Houtt)

Keluarga : Myristicaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri terutama miristin, kamfen, eugenol,


utama/isi minyak lemak

Persyaratan kadar : : Kadar minyak atsiri tidak kurang dari 9% v/b

8. MYRISTICAE PERICARPIUM SEMEN

Nama lain : Kulit buah pala

Nama tanaman asal : Myristica fragrans


23

Keluarga : Myristicaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri terutama yang mengandung monofen


utama/isi (kamfen), eugenol, miristin, isoeugenol, minyak lemak

Penggunaan : Karminativa, aromatik

9. NIGELLAE DAMASCENAE SEMEN

Nama lain : Biji jinten hitam manis

Nama tanaman asal : Nigella damascena

Keluarga : Ranunculaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri

Penggunaan : Karminativa

10. NIGELLAE SATIVAE SEMEN

Nama lain : Biji jinten hitam pahit

Nama tanaman asal : Nigella sativa (L.)

Keluarga : Ranunculaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, minyak lemak, glukosida beracun,


utama/isi melantin

Penggunaan : Stimulan, karminativa, diaforetika

11. PARKIAE SEMEN

Nama lain : Biji kedawung

Nama tanaman asal : Parkia roxburghii (G.Don.) atau Parkia Biglobosa


(Bentha)

Keluarga : Mimosaceae

Zat berkhasiat : Glukosa dan dammar, hidrat arang , tannin, garam,


utama/isi alkali

Penggunaan : Antidiare, adstringen

12. STRYCHNI SEMEN

Nama lain : Biji strihni

Nama tanaman asal : Strychnos nux - vomica

Keluarga : Loganiaceae

Zat berkhasiat : Alkaloida terutama strichnina dan brusina, terdapat


utama/isi pula minyak, glukosid loganin

Penggunaan : Amara, stimulansia, antidota (pada keracunan obat


tidur golongan barbiturat)
24

e. Simplisia Amylum
1. AMYLUM MANIHOT

Nama lain : Pati singkong

Nama tanaman asal : Manihot Utilissima (Pohl.)

Keluarga : Euphorbiaceae

Zat berkhasiat : Amilosa dan amilopektin

Penggunaan : Bahan penolong bahan sediaan

2. AMYLUM MAYDIS

Nama lain : Pati jagung, Maizena, Corn starch

Nama tanaman asal : Zea mays (L.)

Keluarga : Poaceae

Zat berkhasiat : Amilosa, amilopektin

Penggunaan : Zat tambahan

3. AMYLUM ORYZAE

Nama lain : Pati beras

Nama tanaman asal : Oryza sativa (L.)

Keluarga : Poaceae

Zat berkhasiat : Amilosa, amilopektin, air, abu

Penggunaan : Bahan penolong bahan sediaan

4. AMYLUM SOLANI

Nama lain : Pati kentang

Nama tanaman asal : Solanum tuberosum (L.)

Keluarga : Solanaceae

Zat berkhasiat : Amilosa dan amilopektin

Penggunaan : Bahan penolong bahan sediaan obat

5. AMYLUM TRITICI (E.F.I.)

Nama lain : Pati gandum, pati terigu

Nama tanaman asal : Triticum vulgare (Vill.)

Keluarga : Poaceae

Zat berkhasiat : Amilosa dan amilopektin, air, abu

Penggunaan : Bahan penolong bahan sediaan obat


25

f. Simplisia Oleum
1. OLEUM ANISI (FI)

Nama lain : Minyak adasmanis

Nama tanaman asal : Pimpinella anisum (L) atau verum (Hook.f)

Keluarga : Apiaceae

Zat berkhasiat : Anetol,metal khavikol(isomer dari anetol),anisaldehida


utama/isi dan terpen

Penggunaan : Obat batuk,perangsang peristaltic pada mulas

2. OLEUM ARACHIDIS

Nama lain : Minyak kacang, Peanut oil

Nama tanaman asal : Arachis hypogaea ( L. )

Keluarga : Leguminosae

Zat berkhasiat : Gliserida dari asam oleat, linoleat, asam palmitat, asam
utama/isi hipogeat, asam lignoserat, asam arakhidat

3. OLEUM AURANTII ( FI )

Nama lain : Minyak jeruk manis

Nama tanaman asal : Citrus sinensis ( L. )

Keluarga : Rutaceae

Zat berkhasiat : d-limonen, campuran sitral, sitronelal

Persyaratan : Kadar aldehida tidak kurang dari 1,0 % dan tidak lebih
kadar dari 3,0 %

Penggunaan : Obat bronchitis menahun, bahan pewangi

4. OLEUM CACAO

Nama lain : Lemak coklat

Nama tanaman asal : Theobroma cacao ( L. )

Keluarga : Sterculiaceae

Zat berkhasiat : Sebagian besar gliserida dari asam stearat, asam


utama/isi palmitat, asam oleat dan asam laurat. Terdapat pula
sejumlah kecil gliserida dan asam arakhidat, asam
linoleat, asam forminat, asam asetat dan asam butirat

5. OLEUM CAJUPUTI

Nama lain : Minyak kayu putih.

Nama tanaman asal : Melaleuca Leucadendra

Keluarga : Mirtaceae
26

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung sineol(kayuputol) ,


utama/isi terpinol bebas atau sebagai ester dengan asam cuka ,
asam mentega, asam valerat

Persyaratan Kadar sineol tidak kurang dari 50 % dan tidak lebih


kadar : dari 65 %

Penggunaan : Sebagai obat gosok pada encok dan rasa nyeri lainnya
kadang kadang untuk obat batuk.

6. OLEUM CANANGA

Nama lain : Minyak kenanga

Nama tanaman asal : Canangium odoratum (Hook& Thoms )

Keluarga : Anonaceae

Zat berkhasiat : Alkohol dengan ester (metil-benzoat, linalool,

terpineol )

Penggunaan : Zat tambahan - parfum

7. OLEUM CARCHARIDIS

Nama lain : Minyak ikan hiu

Nama hewan asal : Carcharis, Chilocyllium dan Zygaena

Zat berkhasiat : Vitamin A

Penggunaan : Sumber kalori dan pengobatan avitaminose A dan D

8. OLEUM CARYOPHYLI

Nama lain : Minyak cengkeh, Clove oil

Nama tanaman asal : Eugenia caryophyllata ( Sreng )

Keluarga : Myrtaceae

Zat berkhasiat : Egenol, asetilegenol

Penggunaan : Obat sakit gigi, mules , kadang untuk obat batuk.

9. OLEUM CINNAMOMI

Nama lain : Minyak kayumanis, Oleum ciaoi

Nama tanaman asal : Cinnamomum zeylanicum ( BI )

Keluarga : Lauraceae

Zat berkhasiat : Sinamilaldehida, egenol

Persyaratan : Kadar aldehida jumlah dihitung sebagai


kadar sinamilaldehida 60,0 % - 75,0 %

Penggunaan : Obat gosok, obat mulas, pengawet sirop


27

10. OLEUM CITRI

Nama lain : Minyak jeruk, Lemon oil

Nama tanaman asal : Citrus lemon ( L. )

Keluarga : Rutaceae

Zat berkhasiat : Sitral, d – limonene dan felandren

Persyaratan : Kadar aldehida jumlah dihitung sebagai sitral tidak


kadar kurang dari 3,5 %

Penggunaan : Obat batuk,perangsang peristaltic pada mulas

11. OLEUM CORIANDRI

Nama lain : Minyak ketumbar

Nama tanaman asal : Coriandrum sativum ( L. )

Keluarga : Apiaceae

Zat berkhasiat : Koriandrol (= d-linalool ), terdapat pula geraniol

Penggunaan : Bahan pewangi dan Karminativa

12. OLEUM EUCALYPTI

Nama lain : Minyak ekaliptus

Nama tanaman asal : Eucalyptus globullus (Labill)

Keluarga : Myrtaceae

Zat berkhasiat : Ekaliptol (= sineol ) terdapat pula pinem dan terpen-


utama/isi terpen

Penggunaan : Germisida, obat batuk, antiseptika saluran pernafasan

13. OLEUM FOENICULI

Nama lain : Minyak adas

Nama tanaman asal : Foeniculum Vulgare (Mill.)

Keluarga : Apiaceae

Zat berkhasiat : Anetol, zat pahit fenkhon

Penggunaan : Obat gosok gigi, obat mulas untuk anak-anak,


karminativanya lemah, terbanyak dipakai sebagai
bahan pewangi Aqua Foeniculi (F.I. Ed.I)

14. OLEUM HYDNOCARPI

Nama lain : Minyak hidnokarpi, Oleum chaulmogra, minyak


kaulmogra

Nama tanaman asal : Hydnocarpus wightiana ( Blume ),Hydnocarpus


anthelmintica (Pierra), Hynocarpus
28

heterophylla (Blume),Taraktogenos kurzii ( King )

Keluarga : Flacourtiaceae

Zat berkhasiat : Gliserida dari asam hidnokarpat, asam khaulmograt,


utama/isi asam palmitat, asam oleat dan asam gorlat

Penggunaan : Obat lepra

15. OLEUM IECORIS ASELLI

Nama lain : Minyak ikan, oleum morrhuae. Codliver oil.

Nama tanaman asal : Gadus callarias

Keluarga : Gadidae

Zat berkhasiat : Vitamin A dan D, Gliserida trimalmitat dan tristearat,


utama/isi kolesterol, gliserida dan asam-asam jenuh, yang
disebut asam morrhuat, berupa campuran berbagai
asam : asam yakoleat, asam terapiat, asam aselat, asam
gadinat, yodium, basa-basa aselin dan morrhuin.
Unsur-unsur : Cl, Br, S, P dan Fe sebagai senyawa
organik.

Penggunaan : Potensi vitamin A tidak kurang dari 600 S.I tiap gram
dan potensi vitamin D tidak kurang dari 80 S.I tiap
gram.

16. OLEUM MAYDIS

Nama lain : Minyak jagung

Nama tanaman asal : Zea mays ( L. )

Keluarga : Poaceae

Zat berkhasiat : Gliserida

Penggunaan : Zat tambahan, pengganti minyak lemak bagi pasien yang


tinggi kadar kolesterolnya

17. OLEUM MENTHAE PIPERITAE

Nama lain : Minyak permen, pepermin oil

Nama tanaman asal : Mentha piperita (L.)

Keluarga : Lamiaceae

Zat berkhasiat : Menthol, metilasetat

Persyaratan : Kadar ester dihitung sebagai metal asetat tidak kurang


kadar dari 4 % dan tidak lebih dari 9 %, kadar mentol bebas
tidak kurang dari 45 %

Penggunaan : Karminativa, stimulansia, sebagai obat mulas


29

18. OLEUM MYRISTICAE

Nama lain : Minyak pala, Nutmeg oil

Nama tanaman asal : Myristica fragrans (Houtt)

Keluarga : Myristicaceae

Zat berkhasiat : Miristin, egenol, asam miristinat bebas atau sebagai ester

Penggunaan : Karminativa, stimulansia lambung

19. OLEUM MYRISTICAE EXPRESSUM

Nama lain : Lemak pala, Oleum Nucistae, Nutmeg butter

Nama tanaman asal : Myristica fragrans (Houtt)

Keluarga : Myristicaceae

Zat berkhasiat : Gliserida trimiristinat, trioleat Gliserida asam serotinat,


utama/isi asam asetat, miristisin zat yang tak tersabunkan, minyak
atsiri yang berisi egenol

Penggunaan : Obat gosok, stimulansia luar

20. OLEUM OLIVAE

Nama lain : Minyak zaitun, olivae oil, sweet oil

Nama tanaman asal : Olea europea (L.)

Keluarga : Oleaceae

Zat berkhasiat : Trigliserida dari asam oleat dan asam palmitat, gliserida
utama/isi asam linoleat, bagian yang tak tersabunkan berupa
fitosterol dan hidrokarbon skualen

Penggunaan : Minyak zaitun, olivae oil, sweet oil

21. OLEUM POGOSTEMONI

Nama lain : Minyak nilam

Nama tanaman asal : Pogostemon cablin (Blnco. Benth)

Keluarga : Lamiaceae

Zat berkhasiat : Seskui terpen-terpen (40-45 %), sinamilaldehida, egenol


utama/isi dan azulen

Penggunaan : Zat tambahan, bahan pewangi

22. OLEUM RICINI

Nama lain : Minyak jarak, Castor oil

Nama tanaman asal : Ricinus communis

Keluarga : Euphorbiaceae
30

Zat berkhasiat : Gliserida dari asam risinoleat, glisida asam oleat, asam
utama/isi linoleat, asam-asam jenuh lainnya

Penggunaan : Pencahar ( hati-hati pada wanita yang sedang hamil atau


sedang haid ). Jangan dicampur dengan obat cacing yang
dapat larut dalam minyak, hair tonic.

23. OLEUM ROSAE

Nama lain : Minyak mawar, Rose oil

Nama tanaman asal : Rosa gallica (L.), Rosa damascena (Niler), Rosa alba
(L.), Rosacentifolia (L.) dan varietas Rosa lainnya

Keluarga : Rosaceae

Zat berkhasiat : Geraniol, paraffin, nerol, egenol

Penggunaan : Bahan pewangi

24. OLEUM SESAMI

Nama lain : Minyak wijen, sesame oil

Nama tanaman asal : Sesamum indicum ( L. )

Keluarga : Pedaliaceae

Zat berkhasiat : Gliserida dari asam oleat, asam linoleat, asam palmitat,
utama/isi asam stearat, asam miristinat

Penggunaan : Sebagai bahan makanan, obat luar untuk melemaskan


kulit, untuk pembuatan plester, sabun, salep, liniment

25. OLEUM SHOREAE

Nama lain : Minyak tengkawang, Borneo talk

Nama tanaman asal : Shorea stenoptera ( Burok )

Keluarga : Dipterocarpaceae

Zat berkhasiat : Gliserida oleodistearat, oleo dipalmitat dan tristearat,


utama/isi asam lemak bebas

Penggunaan : Bahan kosmetika dan suppositoria

26. OLEUM VETIVERIAE

Nama lain : Minyak Akarwangi

Nama tanaman asal : Vetiveria zizanoides

Keluarga : Poaceae

Zat berkhasiat : Vetiveron, Vetiverol, Vetivenil vetivenat dan vetiven

Penggunaan : Zat tambahan, bahan pewangi


31

g. Simplisia Rhizoma
1. BOESENBERGIAE RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Temu kunci

Nama tanaman asal : Boesenbergia pandurata (Roxb) sehleaht

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, damar, pati

Penggunaan : Antidiare

2. CALAMI RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Dringo, Jaringau , Calamus , Sweetflag

Nama tanaman asal : Acorus calamus (L)

Keluarga : Araceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri mengandung egenol. asaron. asaril aldehid.


utama/isi Zat pahit akorin, zat penyamak, pati, akoretin, tannin.
Kadar minyak atsiri tidak kurang dari 2,5 %
v/b

Penggunaan : Bahan pewangi, karminativa, insektisida,demam nifas

3. CURCUMAE RHIZOMA ( FI )

Nama lain : Temu lawak, Koneng gede

Nama tanaman asal : Curcuma xanthorrhiza (Roxb)

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung felandren dan


utama/isi tumerol, zat warna kurkumin, pati. Kadar minyak atsiri
tidak kurang dari 8,2 % b/v

Penggunaan : Kolagoga , antispasmodika

4. CURCUMAE AERUGINOSAE RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Temu hitam

Nama tanaman asal : Curcuma aeruginosa (Roxb)

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, pati, damar, lemak

Penggunaan : Bagian dari jamu, antirematik, karminativa

5. CURCUMAE HEYNEANAE RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Rimpang temu giring

Nama tanaman asal : Curcuma heyneana (Val)


32

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, tanin. kurkumin

Penggunaan : Antiseptika kulit

6. CURCUMAE DOMESTICAE RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Kunyit , kunir

Nama tanaman asal : Curcuma domestica (Val)

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, zat warna kurkumin, pati, damar

Penggunaan : Karminativa, antidiare, kolagoga, skabisida

7. CYPERI RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Rimpang teki , teki

Nama tanaman asal : Cyperus rotundus (L)

Keluarga : Cyperaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri, alkaloida, glikosida, flavonoida

Penggunaan : Diuretika, stomakika

8. IMPERATAE RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Akar alang- alang

Nama tanaman asal : Imperata cylindrica (Beauv)

Keluarga : Poaceae

Zat berkhasiat : Asam kersik, damar, logam alkali

Penggunaan : Diuretika, Antipiretika

9. KAEMPFERIAE RHIZOMA ( MMI)

Nama lain : Kencur

Nama tanaman asal : Kaempferia galanga (L)

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Alkaloida, minyak atsiri yang mengandung sineol dan


utama/isi kamferin, mineral dan pati

Penggunaan : Ekspektoransia, diaforetika, karminativa, stimulansia,


roboransia

10. LANGUATIS RHIZOMA ( MMI)

Nama lain : Laos, Lengkuas, Galanga Rhizoma


33

Nama tanaman asal : Alpina officinarum (Hance), Alpinia galanga(L),

Languas galanga (L)

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung; metilsinamat, sineol,


utama/isi kamfer dan galangol

Penggunaan : Bumbu, karminativa, antifungi

11. ZINGIBERIS RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Jahe

Nama tanaman asal : Zingiber officinale ( Roscoe )

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Pati, damar, oleo resin, gingerin, minyak atsiri yang
utama/isi mengandung zingeron,zingiberol, zingiberin,borneol,
kamfer, sineol dan felandren

Penggunaan : Karminativa, stimulansia, diaforetika

12. ZINGIBERIS AROMATICAE RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Lempuyang wangi

Nama tanaman asal : Zingiber aromatica ( Val )

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung zerumbon bumolen,


utama/isi limonen

Penggunaan : Karminativa, stomakika

13. ZINGIBERIS LITTORALIS RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Lempuyang pahit

Nama tanaman asal : Zingiber littorale (Val)

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri dengan komponen utama


utama/isi Seskuiterpenketon

Penggunaan : Stomakik

14. ZINGIBERIS PURPUREI RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Cassumunar Rhizoma , Bengle

Nama tanaman asal : Zingiber cassumunar ( Roxb), disebut juga Zingiber


purpureum (Roxb)

Keluarga : Zingiberaceae
34

Zat berkhasiat : Minyak atsiri mengandung sineol ; Damar lunak yang


utama/isi pahit, albuminoid

Penggunaan : Karminativa,menghangatkan badan

15. ZINGIBERIS ZERUMBETI RHIZOMA (MMI)

Nama lain : Lempuyang gajah

Nama tanaman asal : Zingiber zerumbet (Sm)

Keluarga : Zingiberaceae

Zat berkhasiat : Minyak atsiri yang mengandung zerumbon, Sineol,


utama/isi pinen, kariofilen, kamfer

Penggunaan : Karminativa, stomakik

h. Simplisia Radix
1. CATHARANTHI RADIX

Nama lain : Akar tapak dara

Nama tanaman asal : Catharanthus roseus (L), Vinca rosea (L), Lochnera
rosea (L)

Keluarga : Apocynaceae

Zat berkhasiat : Alkaloida : Ajmalisin,serpentina, tetrahidroalstonin,


utama/isi vindesin, vinkristin, vinblastin

Penggunaan : Peluruh kemih, obat diabetes, obat kanker

2. GLYCYRRHIZAE RADIX

Nama lain : Akar manis

Nama tanaman asal : Glcyrthiza glabra

Keluarga : Papilionaceae

Zat berkhasiat : Glysirin dengan kadar 5-10 %, sebagai garam K dan Ca


utama/isi dari asam glisirizat(zat ini 50 x lebih manis dari

Penggunaan : Anti tusiva

3. PANACIS RADIX

Nama lain : gingseng

Nama tanaman asal : Panax schin-seng

Keluarga : Araliaceae

Zat berkhasiat : Glukosida panakuilon, minyak atsiri, damar, panaks


utama/isi sapoginol
35

Penggunaan : Amara dan stimulansia

4. RHEI RADIX

Nama lain : Kelembak

Nama tanaman asal : Rheum palmatum, Rheum officinale

Keluarga : Polygonaceae

Zat berkhasiat : Antraglukosida yang pada penguraian memberikan


utama/isi emodin, rhein, aloe emodin dan asam krisofanat
terdapat pula tanin, pektin, katekhin, pati, kalsium
oksalat

Penggunaan : Laksativa

5. RAUWOLFIAE SERPENTINAE RADIX

Nama lain : Akar pule pandak, rauwolfia radix

Nama tanaman asal : Rauwolfia serpentina

Keluarga : Apocynaceae

Zat berkhasiat : Alkaloid-alkaloid : aymalin, aymalisina, aymalinina,


utama/isi serpentina, reserpina

Penggunaan : Anti hipertensi dan gangguan neuropsikhiatrik

6. VETIVERIAE RADIX

Nama lain : Akar wangi

Nama tanaman asal : Vetiveria zizanoides

Keluarga : poaceae

Zat berkhasiat : minyak atsiri, hars, dan zat pahit


utama/isi

Penggunaan : Bahan pewangi( dalam oleum), diaforetika


BAB III

EKSTRAKSI

3.1. Pengertian Ekstraksi


Ekstraksi adalah penyarian zat-zat aktif dari bagian tanaman obat. Adapun
tujuan dari ekstraksi yaitu untuk menarik komponen kimia yang terdapat dalam
simplisia.
3.2. Tujuan Ekstraksi
Tujuan ekstraksi adalah untuk menarik semua komponen kimia yang terdapat
dalam simplisia. Ekstraksi ini didasarkan pada perpindahan massa komponen zat
padat ke dalam pelarut dimana perpindahan mulai terjadi pada lapisan antar muka,
kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut. Secara umum, terdapat empat situasi
dalam menentukan tujuan ekstraksi:
a. Senyawa kimia telah diketahui identitasnya untuk diekstraksi dari organisme.
Dalam kasus ini, prosedur yang telah dipublikasikan dapat diikuti dan dibuat
modifikasi yang sesuai untuk mengembangkan proses atau menyesuaikan dengan
kebutuhan pemakai.
b. Bahan diperiksa untuk menemukan kelompok senyawa kimia tertentu, misalnya
alkaloid, flavanoid atau saponin, meskipun struktur kimia sebetulnya dari
senyawa ini bahkan keberadaannya belum diketahui. Dalam situasi seperti ini,
metode umum yang dapat digunakan untuk senyawa kimia yang diminati dapat
diperoleh dari pustaka. Hal ini diikuti dengan uji kimia atau kromatografik yang
sesuai untuk kelompok senyawa kimia tertentu
c. Organisme (tanaman atau hewan) digunakan dalam pengobatan tradisional, dan
biasanya dibuat dengan cara, misalnya Tradisional Chinese medicine (TCM)
seringkali membutuhkan herba yang dididihkan dalam air dan dekok dalam air
untuk diberikan sebagai obat. Proses ini harus ditiru sedekat mungkin jika ekstrak
akan melalui kajian ilmiah biologi atau kimia lebih lanjut, khususnya jika
tujuannya untuk memvalidasi penggunaan obat tradisional.
d. Sifat senyawa yang akan diisolasi belum ditentukan sebelumnya dengan cara
apapun. Situasi ini (utamanya dalam program skrining) dapat timbul jika
tujuannya adalah untuk menguji organisme, baik yang dipilih secara acak atau
didasarkan pada penggunaan tradisional untuk mengetahui adanya senyawa
dengan aktivitas biologi khusus.
Proses pengekstraksian komponen kimia dalam sel tanaman yaitu pelarut
organik akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang
mengandung zat aktif, zat aktif akan larut dalam pelarut organik di luar sel, maka
larutan terpekat akan berdifusi keluar sel dan proses ini akan berulang terus sampai
terjadi keseimbangan antara konsentrasi cairan zat aktif di dalam dan di luar sel.

36
37

3.3. Prinsip ekstraksi


1. Prinsip Maserasi
Penyarian zat aktif yang dilakukan dengan cara merendam serbuk
simplisia dalam cairan penyari yang sesuai selama tiga hari pada temperatur
kamar terlindung dari cahaya, cairan penyari akan masuk ke dalam sel melewati
dinding sel. Isi sel akan larut karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan
di dalam sel dengan di luar sel. Larutan yang konsentrasinya tinggi akan terdesak
keluar dan diganti oleh cairan penyari dengan konsentrasi rendah ( proses
difusi ). Peristiwa tersebut berulang sampai terjadi keseimbangan konsentrasi
antara larutan di luar sel dan di dalam sel. Selama proses maserasi dilakukan
pengadukan dan penggantian cairan penyari setiap hari. Endapan yang diperoleh
dipisahkan dan filtratnya dipekatkan.
2. Prinsip Perkolasi
Penyarian zat aktif yang dilakukan dengan cara serbuk simplisia
dimaserasi selama 3 jam, kemudian simplisia dipindahkan ke dalam bejana
silinder yang bagian bawahnya diberi sekat berpori, cairan penyari dialirkan dari
atas ke bawah melalui simplisia tersebut, cairan penyari akan melarutkan zat
aktif dalam sel-sel simplisia yang dilalui sampai keadan jenuh. Gerakan ke
bawah disebabkan oleh karena gravitasi, kohesi, dan berat cairan di atas
dikurangi gaya kapiler yang menahan gerakan ke bawah. Perkolat yang diperoleh
dikumpulkan, lalu dipekatkan.
3. Prinsip Soxhletasi
Penarikan komponen kimia yang dilakukan dengan cara serbuk simplisia
ditempatkan dalam klonsong yang telah dilapisi kertas saring sedemikian rupa,
cairan penyari dipanaskan dalam labu alas bulat sehingga menguap dan
dikondensasikan oleh kondensor bola menjadi molekul-molekul cairan penyari
yang jatuh ke dalam klonsong menyari zat aktif di dalam simplisia dan jika
cairan penyari telah mencapai permukaan sifon, seluruh cairan akan turun
kembali ke labu alas bulat melalui pipa kapiler hingga terjadi sirkulasi. Ekstraksi
sempurna ditandai bila cairan di sifon tidak berwarna, tidak tampak noda jika di
KLT, atau sirkulasi telah mencapai 20-25 kali. Ekstrak yang diperoleh
dikumpulkan dan dipekatkan.
4. Prinsip Refluks
Penarikan komponen kimia yang dilakukan dengan cara sampel
dimasukkan ke dalam labu alas bulat bersama-sama dengan cairan penyari lalu
dipanaskan, uap-uap cairan penyari terkondensasi pada kondensor bola menjadi
molekul-molekul cairan penyari yang akan turun kembali menuju labu alas bulat,
akan menyari kembali sampel yang berada pada labu alas bulat, demikian
seterusnya berlangsung secara berkesinambungan sampai penyarian sempurna,
38

penggantian pelarut dilakukan sebanyak 3 kali setiap 3-4 jam. Filtrat yang
diperoleh dikumpulkan dan dipekatkan.
5. Prinsip Destilasi Uap Air
Penyarian minyak menguap dengan cara simplisia dan air ditempatkan
dalam labu berbeda. Air dipanaskan dan akan menguap, uap air akan masuk ke
dalam labu sampel sambil mengekstraksi minyak menguap yang terdapat dalam
simplisia, uap air dan minyak menguap yang telah terekstraksi menuju kondensor
dan akan terkondensasi, lalu akan melewati pipa alonga, campuran air dan minyak
menguap akan masuk ke dalam corong pisah, dan akan memisah antara air dan
minyak atsiri.
6. Prinsip Rotavapor
Proses pemisahan ekstrak dari cairan penyarinya dengan pemanasan yang
dipercepat oleh putaran dari labu alas bulat, cairan penyari dapat menguap 5-10º
C di bawah titik didih pelarutnya disebabkan oleh karena adanya penurunan
tekanan. Dengan bantuan pompa vakum, uap larutan penyari akan menguap naik
ke kondensor dan mengalami kondensasi menjadi molekul-molekul cairan pelarut
murni yang ditampung dalam labu alas bulat penampung.
7. Prinsip Ekstraksi Cair-Cair
Ekstraksi cair-cair (corong pisah) merupakan pemisahan komponen kimia
di antara 2 fase pelarut yang tidak saling bercampur di mana sebagian komponen
larut pada fase pertama dan sebagian larut pada fase kedua, lalu kedua fase yang
mengandung zat terdispersi dikocok, lalu didiamkan sampai terjadi pemisahan
sempurna dan terbentuk dua lapisan fase cair, dan komponen kimia akan terpisah
ke dalam kedua fase tersebut sesuai dengan tingkat kepolarannya dengan
perbandingan konsentrasi yang tetap.
8. Prinsip Kromatografi Lapis Tipis
Pemisahan komponen kimia berdasarkan prinsip adsorbsi dan partisi, yang
ditentukan oleh fase diam (adsorben) dan fase gerak (eluen), komponen kimia
bergerak naik mengikuti fase gerak karena daya serap adsorben terhadap
komponen-komponen kimia tidak sama sehingga komponen kimia dapat bergerak
dengan kecepatan yang berbeda berdasarkan tingkat kepolarannya, hal inilah yang
menyebabkan terjadinya pemisahan.
9. Prinsip Penampakan Noda
a. Pada UV 254 nm
Pada UV 254 nm, lempeng akan berflouresensi sedangkan sampel akan
tampak berwarna gelap.Penampakan noda pada lampu UV 254 nm adalah karena
adanya daya interaksi antara sinar UV dengan indikator fluoresensi yang terdapat
pada lempeng. Fluoresensi cahaya yang tampak merupakan emisi cahaya yang
dipancarkan oleh komponen tersebut ketika elektron yang tereksitasi dari tingkat
39

energi dasar ke tingkat energi yang lebih tinggi kemudian kembali ke keadaan
semula sambil melepaskan energi.
b. Pada UV 366 nm
Pada UV 366 nm noda akan berflouresensi dan lempeng akan berwarna
gelap. Penampakan noda pada lampu UV 366 nm adalah karena adanya daya
interaksi antara sinar UV dengan gugus kromofor yang terikat oleh auksokrom
yang ada pada noda tersebut. Fluoresensi cahaya yang tampak merupakan emisi
cahaya yang dipancarkan oleh komponen tersebut ketika elektron yang tereksitasi
dari tingkat energi dasar ke tingkat energi yang lebih tinggi kemudian kembali ke
keadaan semula sambil melepaskan energi. Sehingga noda yang tampak pada
lampu UV 366 terlihat terang karena silika gel yang digunakan tidak
berfluororesensi pada sinar UV 366 nm.
c. Pereaksi Semprot H2SO4 10%
Prinsip penampakan noda pereaksi semprot H2SO4 10% adalah
berdasarkan kemampuan asam sulfat yang bersifat reduktor dalam merusak gugus
kromofor dari zat aktif simplisia sehingga panjang gelombangnya akan bergeser
ke arah yang lebih panjang (UV menjadi VIS) sehingga noda menjadi tampak
oleh mata.

3.4.Jenis Ekstraksi
1. Ekstraksi secara dingin
a. Metode maserasi
Maserasi merupakan cara penyarian sederhana yang dilakukan dengan
cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari selama beberapa hari pada
temperatur kamar dan terlindung dari cahaya. Metode maserasi digunakan untuk
menyari simplisia yang mengandung komonen kimia yang mudah larut dalam
cairan penyari, tidak mengandung benzoin, tiraks dan lilin.
Keuntungan dari metode ini adalah peralatannya sederhana. Sedang
kerugiannya antara lain waktu yang diperlukan untuk mengekstraksi sampel
cukup lama, cairan penyari yang digunakan lebih banyak, tidak dapat digunakan
untuk bahan-bahan yang mempunyai tekstur keras seperti benzoin, tiraks dan
lilin.
b. Metode Perkolasi
Perkolasi adalah cara penyarian dengan mengalirkan penyari melalui
serbuk simplisia yang telah dibasahi.Keuntungan metode ini adalah tidak
memerlukan langkah tambahan yaitu sampel padat (marc) telah terpisah dari
ekstrak. Kerugiannya adalah kontak antara sampel padat tidak merata atau
terbatas dibandingkan dengan metode refluks, dan pelarut menjadi dingin selama
proses perkolasi sehingga tidak melarutkan komponen secara efisien.
40

2. Ekstraksi secara panas


a. Metode refluks
Keuntungan dari metode ini adalah digunakan untuk mengekstraksi
sampel-sampel yang mempunyai tekstur kasar dan tahan pemanasan langsung..
Kerugiannya adalah membutuhkan volume total pelarut yang besar dan sejumlah
manipulasi dari operator.
b. Metode destilasi uap
Destilasi uap adalah metode yang popular untuk ekstraksi minyak-
minyak menguap (esensial) dari sampel tanaman. Metode destilasi uap air
diperuntukkan untuk menyari simplisia yang mengandung minyak menguap atau
mengandung komponen kimia yang mempunyai titik didih tinggi pada tekanan
udara normal.
a. Proses Ekstraksi Oleoresin

Oleoresin merupakan campuran senyawa minyak atsiri dan resin yang


diperoleh dengan cara ekstraksi. Dalam perdagangan, sudah banyak oleoresin
yang dipasarkan seperti oleoresin jahe (ginger), cabe (capsicum), lada hitam
(black pepper), kayu manis (cinnamon bark), bunga cengkeh (clove bud
oleoresin), pala (nutmeg oleoresin), paprika oleoresin, dan masih banyak lagi
yang lain. Umumnya oleoresin ini bisa berbentuk cair, pasta ataupun padatan
tergantung dari komponen senyawa yang terkandung. Sedang fungsi oleoresin
adalah sebagai bahan baku flavor, disamping sebagai bahan pengawet alami.
Di dunia industri, oleoresin digunakan sebagai bahan baku obat, kosmetik,
parfum, pengalengan daging, fresh drink dan masih banyak lagi, hingga
industri bakery maupun kembang gulapun juga membutuhkan oleoresin.

Kebutuhan bahan alami oleoresin saat ini meningkat tajam. Untuk


keperluan ekspor saja, Indonesia belum mampu memenuhi permintaan pasar
padahal bahan baku rempah di Indonesia sangat melimpah. Banyak tanaman
rempah sebagai bahan baku oleoresin hanya bisa tumbuh di daerah tropis
seperti Indonesia. Sementara pasar/buyer oleoresin seperti daratan Eropa,
Amerika termasuk Timur Tengah tidak bisa menanam sendiri bahan rempah
yang sangat banyak ragamnya. Ujung-ujungnya mereka akan tetap selalu
mengimpor produk rempah sebagai kekayaan hayati Indonesia. Terlebih lagi
41

Eropa sudah mengaklamasikan “Back to Nature” untuk masyarakatnya.


Masyarakat maju seperti di Eropa memang sudah mulai meninggalkan produk
sintetis untuk beralih ke produk alami yang mempunyai efek samping sangat-
sangat rendah dibanding produk sintetik.

Proses Ekstraksi
Grinder Bahan baku bersih yang telah disortasi
dikecilan ukuran ukurannya dengan cara
menggiling menggunakan mesin grinding,
baru pengayakan pada mesh tertentu.
Untuk mendapat hasil berkualitas, gunakan
mesin penggiling rempah yang inert yaitu
berbahan stainless steel.

Perkolator Tahap selanjutnya serbuk bahan baku


diekstraksi dengan pelarut organik. Ada
beberapa pelarut yang biasa dipakai seperti
etanol, metilen chloride, aceton, hexan, dll.
Pemilihan solven organik ini disesuaikan
dengan jenis rempah yang diekstraksi agar
mendapat hasil yang optimum dan
spesifikasi produk oleoresin sesuai standar
yang telah ditentukan. Selain pemilihan
pelarut, pemilihan metode ekstraksi juga
berpengaruh terhadap produk. Metode
ekstraksi skala industri bisa dengan ekstrak
maserasi satu tahap dan multi tahap atau
menggunakan metode perkolasi dengan
alat perkolator untuk mendapatkan proses
penyarian yang sempurna.
42

Vacuum Filter Selanjutnya dilakukan filtrasi untuk


memisahkan residu dan filtrat
menggunakan alat filtrasi. Untuk
mempercepat proses filtrasi, gunakan alat
filtrasi sistem vakum. Penggunaan filter
penyaring bisa dipasang berapa mikron
yang akan dipakai, menyesuaikan
bahabaku yang diekstraksi. Kemudian
filtrat yang diperoleh selanjutnya
dievaporasi atadiuapkan dengan evaporator
recycling solvent agar diperoleh oleoresin
murni.
Evaporator Penggunaan alat evaporator recycling
solvent ini dimaksudkan agar pelarut
tertampung dalam container dan bisa
digunakan lagi untuk ekstraksi sehingga
mendapat efisien cost produksi. Hasil
oleoresin murni selanjutnya diuji kualitas
dengan parameter yang telah ditentukan
tergantung bahan uji yang diekstraksi.
Sebagai contoh, oleoresin capsicum ditest
dengan parameter tingkat kepedasan,
kekentalan, sisa pelarut dan
microbiological testing seperti total plate
count, total yeast and mould dan E.coli
salmonella

a. Ekstraksi Fase Padat

Jika dibandingkan dengan ekstraksi cair-cair, ekstraksi fase padat yang


biasa disebut Solid Phase Extraction (SPE) merupakan teknik yang relatif
baru akan tetapi SPE cepat berkembang sebagai alat yang utama untuk pra-
perlakuan sampel atau untuk clean-up sampel-sampel yang kotor, misal
sampel-sampel yang mempunyai kandungan matriks yang tinggi seperti
garam-garam, protein, polimer, resin, dll.

Keunggulan SPE dibandingkan dengan ekstraksi cair-cair adalah:

1. Proses ekstraksi lebih sempurna


2. Pemisahan analit dari penganggu yang mungkin ada menjadi lebih efisien
3. Mengurangi pelarut organik yang digunakan
43

4. Fraksi analit yang diperoleh lebih mudah dikumpulkan


5. Mampu menghilangkan partikulat
6. Lebih mudah diotomatisasi

Karena SPE merupakan proses pemisahan yang efisien maka untuk


memperoleh recovery yang tinggi (>99%) pada SPE lebih mudah dari pada
ekstraksi cair-cair. Dengan ekstraksi cair-cair diperlukan ekstraksi beberapa
kali untuk memperoleh recovery yang tinggi, sedangkan dengan SPE hanya
dibutuhkan satu tahap saja untuk memperolehnya.

Sementara itu kerugian SPE adalah banyaknya jenis cartridge (berisi


penjerap tertentu) yang beredar di pasaran sehingga reprodusibilitas hasil
bervariasi jika menggunakan cartridge yang berbeda dan juga adanya adsorpsi
yang bolak-balit pada cartridge SPE.

a. Prosedur SPE

Ada 2 strategi untuk malakukan penyiapan sampel menggunakan SPE


ini. Strategi pertama adalah dengan memilih pelarut yang mampu menahan
secara total analit yang dituju pada penjerap yang digunakan, sementara
senyawa-senyawa yang mengganggu akan terelusi. Analit yang dituju yang
tertahan pada penjerap ini selanjutnya dielusi dengan sejumlah kecil pelarut
organik yang akan mengambil analit yang tertahan ini. Strategi ini bermanfaat
jika analit yang diutuju berkadar rendah.

Diagram skematik prosedur SPE sebagai berikut :


44

Strategi lain adalah dengan mengusahakan supaya analit yang tertuju


keluar (terelusi), sementara senyawa pengganggu tertahan pada penjerap.
Tahap pertama menggunakan SPE adalah dengan mengkondisikan penjerap
dengan pelarut yang sesuai. Untuk penjerap non polar seperti C18 dan
penjerap penukar ion dikondisikan dengan mengalirinya menggunakan
metanol lalu dengan akuades. Pencucian yang berlebihan dengan air akan
mengurangi recovery analit. Penjerap-penjerap polar seperti diol, siano,
amino, dan silika harus dibilas dengan pelarut nonpolar seperti metilen
klorida.

Dari diagram atas dapat diketahui bahwa ada 4 tahap dalam prosedur
SPE, yaitu:
1. Pengkondisian
Cartridge (Penjerap) dialiri dengan pelarut sampel untuk
membasahi permukaan penjerap dan untuk menciptakan nilai pH yang
sama, sehingga perubahan-perubahan kimia yang tidak diharapkan ketika
sampel dimasukkan dapat dihindari.
2. Retensi (tertahannya) sampel
Larutan sampel dilewatkan ke cartridge baik untuk menahan analit yang
diharapkan sementara komponen lain terelusi atau untuk menahan
komponen yang tidak diharapkan sementara analit yang dikehendaki
terelusi
3. Pembilasan
Tahap ini penting untuk menghilangkan seluruh komponen yang tidak
tertahan oleh penjerap selama tahap retensi.
4. Elusi
Tahap ini merupakan tahap akhir untuk mengambil analit yang
dikehendaki jika analit tersebut tertahan pada penjerap.

b. Fase SPE
Berbagai macam cartridge SPE yang berisi berbagai macam penjerap
diringkas dalam tabel dibawah. Suatu penjerap pada SPE harus dipilih yang
mampu menahan analit secara kuat selama pemasukan sampel ke dalam
cartridge.

Untuk sampel-sampel yang bersifat ionik atau yang dapat terionisasi,


digunakan penjerap penukar ion. Fraksi analit yang keluar dari SPE dapat
langsung diinjeksikan ke sistem kromatografi atau dilakukan pengaturan pH
untuk meminimalkan ionisasi sehingga dapat dipisahkan dengan kolom fase
terbalik pada KCKT.
45

Sebagaimana dalam metode kromatografi cair, retensi analit


tergantung pada konsentrasi sampel, kekuatan pelarut, dan karakteristik
penjerap. Pendekatan empirik untuk melakukan pengembangan metode SPE
melibatkan screening penjerap yang tersedia. Langkah pertama adalah
menentukan penjerap mana yang paling baik dalam hal menahan analit yang
dituju. Pertimbangan kedua adalah pelarut apa yang dibutuhkan untuk
mengelusi analit yang dituju. Langkah ketiga adalah menguji matriks sampel
blanko untuk mengevaluasi adanya pengganggu yang mungkin ada, dan
akhirnya (langkah keempat) adalah menentukan recovery dengan menambah
analit dalam jumlah tertentu harus dilakukan.
Polaritas pelarut yang meningkat dibutuhkan untuk mengelusi
senyawa yang tertahan dalam penjerap silika; sementara untuk senyawa yang
tertahan dalam penjerap non polar (seperti C18) digunakan pelarut non polar.

b. Ekstraksi Metode Destilasi

Metode destilasi adalah pemisahan minyak mentah menjadi bagian-


bagian untuk penggunaan khusus seperti untuk transportasi, pembangkit
listrik, pemanas, dll. Udara didistilasi menjadi komponen-komponen seperti
oksigen untuk penggunaan medis dan helium untuk pengisi balon. Distilasi
juga telah digunakan sejak lama untuk pemekatan alkohol dengan
penerapanpanas terhadap larutan hasil fermentasi untuk menghasilkan
minuman suling.

Destilasi atau penyulingan adalah suatu metode pemisahan bahan


kimia berdasarkan perbedaan kecepatan atau kemudahan menguap
(volatilitas) bahan.Dalam penyulingan, campuran zat dididihkan sehingga
menguap, dan uap ini kemudian didinginkan kembali ke dalam bentuk
46

cairan. Zat yang memiliki titik didih lebih rendah akan menguap lebih
dulu. Metode ini termasuk sebagaiunit operasi kimia jenis perpindahan
massa. Penerapan proses ini didasarkan pada teori bahwa pada suatu larutan,
masing-masing komponen akan menguap pada titik didihnya. Model ideal
distilasi didasarkan pada Hukum Raoult dan Hukum Dalton.

Ada 4 jenis destilasi yang akan dibahas disini, yaitu destilasi


sederhana, destilasi fraksionasi, destilasi uap, dan destilasi vakum. Selain itu
ada pula destilasi ekstraktif dan destilasi azeotropic homogenous, destilasi
dengan menggunakan garam berion, destilasi pressure-swing, serta destilasi
reaktif.
1. Destilasi Sederhana
Pada destilasi sederhana, dasar pemisahannya adalah perbedaan
titik didih yang jauh atau dengan salah satu komponen bersifat volatil. Jika
campuran dipanaskan maka komponen yang titik didihnya lebih rendah
akan menguap lebih dulu. Selain perbedaan titik didih, juga perbedaan
kevolatilan, yaitu kecenderungan sebuah substansi untuk menjadi gas.
Destilasi ini dilakukan pada tekanan atmosfer. Aplikasi distilasi sederhana
digunakan untuk memisahkan campuran air dan alkohol.
2. Destilasi Fraksionisasi
Fungsi destilasi fraksionasi adalah memisahkan komponen-
komponen cair, dua atau lebih, dari suatu larutan berdasarkan perbedaan
titik didihnya. Destilasi ini juga dapat digunakan untuk campuran dengan
perbedaan titik didih kurang dari 20 °C dan bekerja pada tekanan atmosfer
atau dengan tekanan rendah. Aplikasi dari destilasi jenis ini digunakan
pada industri minyak mentah, untuk memisahkan komponen-komponen
dalam minyak mentah.
Perbedaan destilasi fraksionasi dan distilasi sederhana adalah
adanya kolom fraksionasi. Di kolom ini terjadi pemanasan secara bertahap
dengan suhu yang berbeda-beda pada setiap platnya. Pemanasan yang
berbeda-beda ini bertujuan untuk pemurnian destilat yang lebih dari plat-
plat di bawahnya Semakin ke atas, semakin tidak volatil cairannya.
3. Destilasi Uap
Destilasi uap digunakan pada campuran senyawa-senyawa yang
memiliki titik didih mencapai 200 °C atau lebih. Destilasi uap dapat
menguapkan senyawa-senyawa ini dengan suhu mendekati 100 °C dalam
tekanan atmosfer dengan menggunakan uap atau air mendidih. Sifat yang
fundamental dari distilasi uap adalah dapat mendistilasi campuran
senyawa di bawah titik didih dari masing-masing senyawa campurannya.
Selain itu distilasi uap dapat digunakan untuk campuran yang tidak larut
dalam air di semua temperatur, tapi dapat didistilasi dengan air. Aplikasi
47

dari distilasi uap adalah untuk mengekstrak beberapa produk alam seperti
minyak eucalyptus dari eucalyptus, minyak sitrus dari lemon atau jeruk,
dan untuk ekstraksi minyak parfum dari tumbuhan.
Campuran dipanaskan melalui uap air yang dialirkan ke dalam
campuran dan mungkin ditambah juga dengan pemanasan. Uap dari
campuran akan naik ke atas menuju ke kondensor dan akhirnya masuk ke
labu distilat.
4. Destilasi Vakum
Destilasi vakum biasanya digunakan jika senyawa yang ingin
didistilasi tidak stabil, dengan pengertian dapat terdekomposisi sebelum
atau mendekati titik didihnya atau campuran yang memiliki titik didih di
atas 150 °C. Metode destilasi ini tidak dapat digunakan pada pelarut
dengan titik didih yang rendah jika kondensornya menggunakan air
dingin, karena komponen yang menguap tidak dapat dikondensasi oleh
air. Untuk mengurangi tekanan digunakan pompa vakum atau aspirator.
Aspirator berfungsi sebagai penurun tekanan pada sistem distilasi ini.
5. Azeotrop
Azeotrop adalah campuran dari dua atau lebih komponen yang
memiliki titik didih yang konstan. Azeotrop dapat menjadi gangguan yang
menyebabkan hasil distilasi menjadi tidak maksimal. Komposisi dari
azeotrope tetap konstan dalam pemberian atau penambahantekanan. Akan
tetapi ketika tekanan total berubah, kedua titik didih dan komposisi dari
azeotrop berubah. Sebagai akibatnya, azeotrop bukanlah komponen tetap,
yang komposisinya harus selalu konstan dalam interval suhu dan tekanan,
tetapi lebih ke campuran yang dihasilkan dari saling memengaruhi dalam
kekuatan intramolekuler dalam larutan.
Azeotrop dapat didistilasi dengan menggunakan tambahan pelarut
tertentu, misalnya penambahan benzena atau toluena untuk memisahkan
air. Air dan pelarut akan ditangkap oleh penangkap Dean-Stark. Air akan
tetap tinggal di dasar penangkap dan pelarut akan kembali ke campuran
dan memisahkan air lagi. Campuran azeotrop merupakan penyimpangan
dari hukum Raoult.
6. Efektifitas Destilasi
Secara teori, hasil distilasi dapat mencapai 100% dengan cara
menurunkan tekanan hingga 1/10 tekanan atmosfer. Dapat pula dengan
menggunakan distilasi azeotrop yang menggunakan penambahan pelarut
organik dan dua distilasi tambahan, dan dengan menggunakan
penggunaan cornmeal yang dapat menyerap air baik dalam bentuk cair
atau uap pada kolom terakhir. Namun, secara praktek tidak ada distilasi
yang mencapai 100%.
48

7. Distilasi Skala Industri


Umumnya proses distilasi dalam skala industri dilakukan dalam
menara, oleh karena itu unit proses dari distilasi ini sering disebut
sebagaimenara distilasi (MD). Menara distilasi biasanya berukuran 2-5
meter dalam diameter dan tinggi berkisar antara 6-15 meter. Masukan dari
menara distilasi biasanya berupa cair jenuh, yaitu cairan yang dengan
berkurang tekanan sedikit saja sudah akan terbentuk uap dan memiliki dua
arus keluaran, arus yang diatas adalah arus yang lebih volatil (mudah
menguap) dan arus bawah yang terdiri dari komponen berat. Menara
distilasi terbagi dalam 2 jenis kategori besar :
a. Menara Distilasi tipe Stagewise
Menara ini terdiri dari banyak piringan yang memungkinkan
kesetimbangan terbagi-bagi dalam setiap piringannya
b. Menara Distilasi tipe Continous
Menara ini terdiri dari pengemasan dan kesetimbangan cair-
gasnya terjadi di sepanjangkolom menara.
BAB IV

SKRINING FITOKIMIA DAN IDENTIFIKASI

4.1. Skrining Fitokimia Alkaloid, Flavonoid, Dan Tanin


Pada tahun - tahun terakhir ini fitokimia tumbuhan telah berkembang
menjadi satu disiplin ilmu tersendiri, berada diantara kimia organik bahan alam
dan biokimia tumbuhan, dan antar keduanya berkaitan erat. Fokus bahasannya
terletak pada aneka ragam senyawa organik yang dibentuk dan ditimbun oleh
tumbuhan, yaitu mengenai struktur kimianya, biosintesisnya, perubahan serta
metabolismenya, penyebaran secara alamiah dan fungsi biologinya. Untuk
melakukan semua kegiatan di atas diperlukan metode skrining yang tepat untuk
identifikasi kandungan yang terdapat dalam tumbuhan yang sifatnya berbeda -
beda dan yang jumlahnya banyak itu.

Metode yang digunakan pada skrining fitokimia seharusnya memenuhi


beberapa kriteria berikut, antara lain adalah sederhana, cepat, hanya
membutuhkan peralatan sederhana, khas untuk satu golongan senyawa, memiliki
batas limit deteksi yang cukup lebar (dapat mendeteksi keberadaan senyawa
meski dalam konsentrasi yang cukup kecil). Salah satu hal penting yang berperan
dalam prosedur skrining fitokimia adalah pelarut untuk ekstraksi. Hadirnya
senyawa-senyawa dari golongan lain dalam tanaman tersebut yang akan
berpengaruh terhadap proses kelarutan senyawa yang diinginkan. Setiap tanaman
tentunya memiliki komposisi kandungan yang berbeda-beda sehingga kelarutan
suatu senyawa juga tidak bisa ditentukan secara pasti.

Hasil negatif juga harus diwaspadai, apakah benar-benar senyawa yang


diteliti tidak ada dalam sampel atau hasil yang negatif itu disebabkan karena
prosedur skrining yang digunakan tidak sesuai atau tidak tepat. Karena alasan-
alasan yang demikian inilah maka skrining fitokimia sudah ditinggalkan dalam
penelitian-penelitian bahan alam yang modern, sebagai gantinya penggalian
referensilah yang lebih diutamakan. Skrining fitokimia merupakan tahap
pendahuluan dalam penelitian fitokimia. Secara umum dapat dikatakan bahwa
metodenya sebagian besar merupakan reaksi pengujian warna dengan suatu
pereaksi warna.
a. Skrining fitokimia alkaloid
Uji skrining fitokimia senyawa golongan alkaloid dilakukan dengan
menggunakan metode Culvenor dan Fitzgerald. Bahan tanaman segar
sebanyak 5-10 gram diekstraksi dengan kloroform beramonia lalu disaring.
Selanjutnya ke dalam filtrat ditambahkan 0,5-1 ml asam sulfat 2N dan
dikocok sampai terbentuk dua lapisan. Lapisan asam (atas) dipipet dan
dimasukkan ke dalam tiga buah tabung reaksi. Ke dalam tabung reaksi yang

49
50

pertama ditambahkan dua tetes pereaksi Mayer. Ke dalam tabung reaksi


kedua ditambahkan dua tetes pereaksi Dragendorf dan ke dalam tabung
reaksi yang ketiga dimasukkan dua tetes pereaksi Wagener. Adanya senyawa
alkaloid ditandai dengan terbentuknya endapan putih pada tabung reaksi
yang pertama dan timbulnya endapan berwarna coklat kemerahan pada
tabung reaksi kedua dan ketiga. Pembuatan larutan kloroform beramonia,
dapat dilakukan dengan cara mengambil sebanyak 1 ml amonia pekat 28%
ditambahkan ke dalam 250 ml kloroform. Kemudian dikeringkan dengan
penambahan 2,5 gram Natrium sulfat anhidrat dan disaring. Pembuatan
larutan Mayer dilakukan dengan cara mengambil HgCl2 sebanyak 1,5 gram
dilarutkan dengan 60 ml akuades. Di tempat lain dilarutkan KI sebanyak 5
gram dalam 10 ml akuades. Kedua larutan yang telah dibuat tersebut
kemudian dicampur dan diencerkan dengan akuades sampai volume 100 ml.
pereaksi Mayer yang diperoleh selanjutnya disimpan dalam botol gelap.
Pembuatan pereaksi Dragendorf dilakukan dengan mencampur Bismuth
subnitrat sebanyak 1 gram dilarutkan dalam campuran 10 ml asam asetat
glasial dan 40 ml akuades. Di tempat lain 8 gram KI dilarutkan dalam 20 ml
akuades. Kedua larutan yang telah dibuat dicampur kemudian diencerkan
dengan akuades sampai volumenya 100 ml. pereaksi Dragendorf ini harus
disimpan dalam botol yang berwarna gelap dan hanya dapat digunakan
selama periode beberapa minggu setelah dibuat. Pembuatan pereaksi
Wagner, dilakukan dengan cara mengambil senyawa KI sebanyak 2 gram
dan iodine sebanyak 1,3 gram kemudia dilarutkan dengan akuades sampai
volumenya 100 ml kemudian disaring. Pereaksi Wagner ini juga harus
disimpan dalam botol yang gelap.
b. Skrining fitokimia flavonoid
Uji skrining senyawa ini dilakukan dengan cara menggunakan
pereaksi Wilstater/ Sianidin. Bahan sampel tanaman sebanyak 5 gram
diekstraksi dengan pelarut n-heksana atau petroleum eter sebanyak 15 ml
kemudian disaring. Ekstrak yang diperoleh selanjutnya diekstraksi lebih
lanjut menggunakan metanol atau etanol sebanyak 30 ml. Selanjutnya, 2 ml
ekstrak metanol atau etanol yang diperoleh kemudian dimasukkan ke dalam
tabung reaksi dan ditambah dengan 0,5 ml asam klorida pekat (HCl pekat)
dan 3-4 pita logam Mg. Adanya flavonoid ditandai dengan warna merah,
oranye dan hijau tergantung struktur flavonoid yang terkandung dalam
sampel tersebut.
c. Skrining fitokimia tanin
Tanin terdapat luas dalam tumbuhan berpembuluh, dalam
angiospermae terdapat khusus dalam jaringan kayu. Menurut batasannya,
tanin dapat bereaksi dengan proteina membentuk kopolimer mantap yang tak
51

larut dalam air. Dalam industri, tanin adalah senyawa yang berasal dari
tanaman, yang mampu mengubah kulit hewan yang mentah menjadi kulit
siap pakai karena kemampuannya menyambung silang proteina. Di dalam
tanaman, letak tanin terpisah dari protein dan enzim sitoplasma, tetapi bila
jaringan rusak, misalnya bila hewan memakannya, maka reakis penyamakan
dapat terjadi. Reaksi ini menyebabkan protein lebih sukar dicapai oleh cairan
pencernaan hewan. Pada kenyataannya, sebagian besar tanaman yang
banyak bertanin dihindari oleh hewan pemakan tanaman karena rasanya
yang sepat. Kita menganggap salah satu fungsi utama tanin dalam tanaman
adalah penolah hewan pemakan tanaman. Secara kimia terdapat dua jenis
tanin yang tersebar merata dalam dunia tumbuhan. Tanin-terkondensasi
hampir terdapat semesta di dalam paku-pakuan dan gymnospermae, serta
tersebar luas dalam angiospermae, terutama pada jenis tanaman berkayu.
Sebaliknya, tanin yang terhidrolisiskan penyebarannya terbatas pada
tanaman berkeping dua; di Inggris hanya terdapat dalam suku yang nisbi
sedikit. Tetapi, kedua jenis tanin itu dijumpai bersamaan dalam tumbuhan
yang sama seperti yang terjadi pada kulit daun ek, Quercus. Tanin
terkondensasi atau flavolan secara biosintesis dapat dianggap terbentuk
dengan cara kondensasi katekin tunggal (atau galokatekin) yang membentuk
senyawa dimer dan kemudian oligomer yang lebih tinggi. Ikatan karbon
menghubungkan satu satuan flavon dengan satuan berikutnya melalui ikatan
4-8 atau 6-8. Kebanyakan flavolan mempunyai 2 sampai 20 satuan flavon.
Nama lain untuk tanin terkondensasi adalah proantosianidin karena bila
direaksikan dengan asam panas, beberapa ikatan karbon-karbon penghubung
satuan terputus dan dibebaskanlah monomer antosianidin. Kebanyakan
proantosianidin adalah prosianidin, ini berarti bila direaksikan dengan asam
akan menghasilkan sianidin. Dikenal juga dengan prodelfinidin dan
properlargonidin, demikian juga campuran polimer yang menghasilkan
sianidin dan delfinidin pada penguraian oleh asam. Tanin terhidrolisiskan
terutama terdiri dari dua kelas yang sederhana yaitu depsida galoilglukosa.
Pada senyawa ini, inti yang berupa glukosa dikelilingi oleh lima gugus ester
galoil atau lebih. Pada jenis kedua, inti molekul berupa senyawa dimer asam
galat, yaitu asam heksahidroksidifenat, disini pun berikatan dengan glukosa.
Bila dihidrolisis elagitanin ini menghasilkan asam elagat. Senyawa dalam
kedua golongan ini dapat dipilah lebih lanjut berdasarkan biogenesisnya. Uji
skrining tanin dapat dilakukan dengan 2 metode yaituuji gelatin FeCl3.
Untuk uji FeCl3, maka sebanyak 2 ml ekstrak air dari suatu bagian tanaman
ditambahkan ke dalam 2 ml air suling. Selanjutnya, larutan ekstrak tersebut
ditetesi dengan satu atau dua tetes larutan FeCl31%. Adanya kandungan
tanin ditandai dengan timbulnya warna hijau gelap atau hijau kebiruan.
52

Suatu esktrak bagian tanaman mengandung tanin jika terbentuk endapan


putih, setelah diberi larutan gelatin 1% yang mengandung NaCl 10%.

4.2. Skrining Fitokimia Terpenoid dan Antrakuinon


Terpenoid adalah suatu senyawa alam yang terbentuk dengan proses
biosintesis, terdistribusi luas dalam dunia tumbuhan dan hewan. Terpenoid
ditemui tidak saja pada tumbuhan tingkat tinggi, namun juga pada terumbu
karang dan mikroba. Struktur terpenoid dibangun oleh molekul isoprena,
kerangka terpenoid terbentuk dari dua atau lebih banyak satuan unit isoprena.
Terpenoid terdiri atas beberapa macam senyawa, mulai dari komponen minyak
atsiri, yaitu monoterpen dan seskuiterpen yang mudah menguap, diterpen yang
lebih sukar menguap, sampai ke senyawa yang tidak menguap, triterpenoid dab
sterol serta pigmen karotenoid. Masing-masing golongan terpenoid itu penting,
baik pada pertumbuhan dan metabolisme maupun pada ekologi tumbuhan.
Secara kimia, terpenoid umumnya larut dalam lemak dan terdapat di dalam
sitoplasma sel tumbuhan. Kadang-kadang minyak atsiri terdapat di dalam sel
kelenjar khusus pada permukaan daun, sedangkan karotenoid terutama
berhubungan dengan kloroplas di dalam daun dan dengan kromoplas di dalam
daun bunga. Biasanya terpenoid diekstraksi dari jaringan tanaman dengan
memakai eter minyak bumi, eter atau kloroform dan dapat dipisahkan secara
kromatografi pada silika gel atau alumina memakai pelarut di atas. Tetapi, sering
kali ada kesukaran sewaktu mendeteksi dalam skala mikro karena semuanya
(kecuali karotenoid) tidak berwarna dan tidak ada pereaksi kromogenik semesta
yang peka. Sering kali kita harus mengandalkan cara deteksi yang nisbi tidak
khas pada plat KLT, yaitu penyemprotan dengan asam sulfat pekat, diteruskan
dengan pemanasan. Senyawa terpenoid berkisar dari senyawa volatil, yakni
komponen minyak atsiri, yang merupakan mono dan seskuiterpen, senyawa yang
kurang volatil, yakni diterpen, sampai senyawa nonvolatil seperti triterpenoid dan
sterol serta pigmen karotenoid. Baik pada tumbuhan ataupun hewan yang
menjadi senyawa dasar untuk biosintesis terpenoid adalah isopentenil pirofosfat.
Sesuai dengan strukturnya, terpenoid pada umumnya merupakan senyawa yang
larut dalam lipid, senyawa ini berada pada sitoplasma sel tumbuhan. Minyak
atsiri adakalanya terdapat pada sel kelenjar khusus yang berada pada permukaan,
sedangkan karotenoid berasosiasi dengan kloroplas pada daun dan dengan
kromoplas pada tajuk bunga. Berdasarkan tingkat kepolarannya, terpenoid pada
umumnya diekstraksi dari jaringan tumbuhan dengan petroleum eter, eter dan
kloroform, selanjutnya dipisahkan dengan metode kromatografi dengan fase
diam silika gel atau alumina dengan fase gerak yang sesuai. Pada umumnya,
terpenoid sulit dideteksi dalam skala mikro, karena kebanyakan terpenoid berupa
senyawa yang tidak berwarna (kecuali karotenoid). Tidak ada pereaksi
kromogenik umum yang dapat mendeteksi semua golongan terpenoid.
53

Sudah banyak dan bermacam-macam peran terpenoid dalam tanaman


yang diketahui. Sifatnya yang dapat mengatur pertumbuhan sudah terbukti, dua
dari golongan utama pengatur tumbuh ialah seskuiterpenoid absisin dan giberelin
yang mempunyai kerangka dasar diterpenoid. Karotenoid berperan dalam
pemberi warna tanaman dan terlibat dalam pigmen pembantu fotosintesis. Mono
dan seskuiterpena berperan dalam memberi bau yang khas. Umumnya masih
belum banyak yang diketahui mengenai peranan terpenoid pada antaraksi
tanaman dengan hewan, misalnya sebagai alat komunikasi dan pertahanan pada
serangga. Namun, bidang ini sekarang sudah bisa menjadi lapangan penelitian
yang aktif. Akhirnya, patut disebutkan terpenoid tertentu yang tidak menguap
telah diimplikasikan sebagai hormon kelamin pada fungus. Pada minyak atsiri
yang bagian utamanya terpenoid, biasanya terpenoid itu terdapat pada fraksi
atsiri yang tersuling-uap. Zat inilah yang menyebabkan bau yang khas pada
banyak tanaman. Secara ekonomi, senyawa tersebut penting sebagai dasar
wewangian alam dan juga untuk rempah-rempah serta sebagai senyawa cita-rasa
dalam industri makanan. Secara kimia, terpena minyak atsiri dapat dipilah
menjadi dua golongan, yaitu monoterpena dan seskuiterpena, berupa isoprenoid
yang titik didihnya berbeda. Untuk mengisolasinya dari jaringan tanaman,
dilakukan teknik ekstraksi memakai eter, eter minyak bumi atau aseton. Cara
klasik untuk mengisolasi minyak atsiri adalah memisahkannya dari jaringan
segar dengan penyulingan-uap. Sekarang langkah ini jarang dilakukan karena ada
bahaya terbentuknya senyawa jadian pada suhu yang dinaikkan. Terpena dapat
mengalami tata susun-ulang (misalnya dehidrasi pada alkohol tersier) atau
polimerisasi. Keatsirian terpena sederhana mempunyai arti bahwa terpena itu
merupakan bahan yang ideal untuk pemisahan dengan kromatografi gas. Banyak
terpena yang berbau harum dan dengan demikian sering kali dapat dikenali
langsung dalam sulingan tanaman bila terdapat sebagai kandungan utama.
Sebagian minyak atsiri merupakan fraksi menguap pada destilasi, senyawa ini
bertanggung jawab terhadap rasa dan bau atau aroma berbagai tumbuhan.
Minyak atsiri mempunyai manfaat komersial sebagai basis parfum alami,
rempah-rempah dan flavor dalam industri makanan.

a. Skrining fitokimia terpenoid dan steroid tak jenuh


Uji skrining senyawa golongan terpenoid dan steroid tak jenuh
dilakukan dengan menggunakan pereaksi Lieberman-Burchard. Bahan
sampel tanaman sebanyak 5 gram diekstraksi dengan pelarut n-heksana atau
petroleum eter sebanyak 10 ml kemudian disaring. Ekstrak yang diperoleh
diambil sedikit dan dikeringkan di atas papan spot test, ditambahkan tiga
tetes anhidrida asetat dan kemudian satu tetes asam sulfat pekat. Adanya
senyawa golongan terpenoid akan ditandai dengan timbulnya warna merah
54

sedangkan adanya senyawa golongan steroid ditandai dengan munculnya


warna biru.

b. Skrining fitokimia antrakuinon


Modifikasi uji Borntrager dapat digunakan untuk menguji adanya
senyawa golongan antrakuinon. Bahan tanaman sebanyak 5 gram diuapkan
di atas penangas air sampai kering. Bahan kering yang sudah dingin tersebut
kemudian dimasukkan ke dalam campuran larutan 10 ml KOH 5N dan 1 ml
H2O2 3% dan dipanaskan di atas penangas air selama 10 menit, kemudian
disaring. Ke dalam filtrat yang diperoleh setelah penyaringan ditambahkan
asam asetat glasial sampai larutan bersifat asam, kemudian diekstraksi
dengan benzena. Ekstrak benzena yang diperoleh kemudian diambil 5 ml
dan ditambah dengan 5 ml amonia, lalu dikocok. Jika terbentuk warna merah
pada lapisan amonia, maka bahan tanaman tersebut mengandung senyawa
golongan antrakuinon.
BAB V

Kromatografi Lapis Tipis

5.1. Gambaran Umum Kromatografi Lapis Tipis


Kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi kertas tergolong
"kromatografi planar." KLT adalah yang metode kromatografipaling sederhana
yang banyak digunakan. Peralatan dan bahan yang dibutuhkan untuk
melaksanakan pemisahan dan analisis sampel dengan metode KLT cukup
sederhana yaitu sebuah bejana tertutup (chamber) yang berisi pelarut dan
lempeng KLT. Dengan optimasi metode dan menggunakan instrumen komersial
yang tersedia, pemisahan yang efisien dan kuantifikasi yang akurat dapat dicapai.
Kromatografi planar juga dapat digunakan untuk pemisahan skala preparatif
yaitu dengan menggunakan lempeng, peralatan, dan teknik khusus.
Pelaksanaan analisis dengan KLT diawali dengan menotolkan alikuot
kecil sampel pada salah satu ujung fase diam (lempeng KLT), untuk membentuk
zona awal. Kemudian sampel dikeringkan. Ujung fase diam yang terdapat zona
awal dicelupkan ke dalam fase gerak (pelarut tunggal ataupun campuran dua
sampai empat pelarut murni) di dalam chamber. Jika fase diam dan fase gerak
dipilih dengan benar, campuran komponen-komponen sampel bermigrasi dengan
kecepatan yang berbeda selama pergerakan fase gerak melalui fase diam. Hal ini
disebut dengan pengembangan kromatogram. Ketika fase gerak telah bergerak
sampai jarak yang diinginkan, fase diam diambil, fase gerak yang terjebak dalam
lempeng dikeringkan, dan zona yang dihasilkan dideteksi secara langsung
(visual) atau di bawah sinar ultraviolet (UV) baik dengan atau tanpa penambahan
pereaksi penampak noda yang cocok.
Perbedaan migrasi merupakan hasil dari perbedaan tingkat afinitas
masing-masing komponen dalam fase diam dan fase gerak. Berbagai mekanisme
pemisahan terlibat dalam penentuan kecepatan migrasi. Kecepatan migrasi
komponen sampel tergantung pada sifat fisika kimia dari fase diam, fase gerak
dan komponen sampel. Retensi dan selektivitas kromatografi juga ditentukan
oleh interaksi antara fase diam, fase gerak dan komponen sampel yang berupa
ikatan hidrogen, pasangan elektron donor atau pasangan elektron-akseptor
(transfer karge), ikatan ionion, ikatan ion-dipol, dan ikatan van der Waals.
Pengambilan sampel, pengawetan, dan pemurnian sampel adalah masalah umum
untuk KLT dan metode kromatografi lainnya. Sebagai contoh, pengembangan
KLT biasanya tidak dikeringkan. Ujung fase diam yang terdapat zona awal
dicelupkan ke dalam fase gerak (pelarut tunggal ataupun campuran dua sampai
empat pelarut murni) di dalam chamber. Jika fase diam dan fase gerak dipilih
dengan benar, campuran komponen-komponen sampel bermigrasi dengan

55
56

kecepatan yang berbeda selama pergerakan fase gerak melalui fase diam. Hal ini
disebut dengan pengembangan kromatogram. Ketika fase gerak telah bergerak
sampai jarak yang diinginkan, fase diam diambil, fase gerak yang terjebak dalam
lempeng dikeringkan, dan zona yang dihasilkan dideteksi secara langsung
(visual) atau di bawah sinar ultraviolet (UV) baik dengan atau tanpa penambahan
pereaksi penampak noda yang cocok.
Perbedaan migrasi merupakan hasil dari perbedaan tingkat afinitas
masing-masing komponen dalam fase diam dan fase gerak. Berbagai mekanisme
pemisahan terlibat dalam penentuan kecepatan migrasi. Kecepatan migrasi
komponen sampel tergantung pada sifat fisika kimia dari fase diam, fase gerak
dan komponen sampel. Retensi dan selektivitas kromatografi juga ditentukan
oleh interaksi antara fase diam, fase gerak dan komponen sampel yang berupa
ikatan hidrogen, pasangan elektron donor atau pasangan elektron-akseptor
(transfer karge), ikatan ionion, ikatan ion-dipol, dan ikatan van der Waals.
Pengambilan sampel, pengawetan, dan pemurnian sampel adalah masalah
umum untuk KLT dan metode kromatografi lainnya. Sebagai contoh,
pengembangan KLT biasanya tidak analisis yang berbeda dalam laboratorium
yang sama, sehingga perlu dipertimbangkan penggunaan Rf relatif yaitu nilai Rf
noda senyawa dibandingan noda senyawa lain dalam lempeng yang sama.
Faktor-faktor yang menyebabkan nilai Rf bervariasi meliputi dimensi dan jenis
ruang, sifat dan ukuran lempeng, arah aliran fase gerak, volume dan komposisi
fase gerak, kondisi kesetimbangan, kelembaban, dan metode persiapan sampel
KLT sebelumnya.
Konfirmasi identifikasi dapat diperoleh dengan mengerok noda dalam
lempeng kemudian analit dalam lempeng dielusi dan dideteksi dengan
spektrometri inframerah (IR), spektrometri Nuclear magnetic resonance (NMR),
spektrometri massa, atau metode spektrometri lain jika senyawa hasil elusi cukup
tersedia. Metode identifikasi ini juga dapat menggunakan untuk menandai zona
langsung pada lapisan (in situ).

5.2. Metode Pemisahan pada Kromatografi


Metode pemisahan merupakan aspek penting dalam dibidang analisis
karena kebanyakan sampel yang akan dianalisis berupa campuran. Untuk
memperoleh senyawa murni dari suatu campuran, harus dilakukan proses
pemisahan. Berbagai teknik pemisahan dapat diterapkan untuk memisahkan
campuran diantaranya ekstraksi, destilasi, kristalisasi dan kromatografi.
Kromatografi adalah teknik pemisahan campuran didasarkan atas perbedaan
distribusi dari komponen-komponen campuran tersebut diantara dua fase, yaitu
fase diam (padat atau cair) dan fase gerak (cair atau gas) yang menyebabkan
terjadinya perbedaan migrasi dari masing-masing komponen. Perbedaan migrasi
57

merupakan hasil dari perbedaan tingkat afinitas masing-masing komponen dalam


fase diam dan fase gerak. Afinitas senyawa dalam fase diam dan fase gerak
ekstraksi, pelarut mudah dipisahkan dari solut, sehingga dapat dipergunakan
kembali dan pelarut tersedia dipasaran dan tidak mahal. Faktor –faktor yang
menyebabkan perbedaan migrasi komponenkomponen dalam sampel meliputi
faktor pendorong migrasi analit dan faktor penghambat migrasi analit.
Faktor pendorong migrasi meliputi gaya gravitasi, elektrokinetik, dan
hidrodinamik. Faktor penghambat migrasi meliputi friksi molekul, elektrostatik,
adsorbsi, kelarutan, ikatan kimia dan interaksi ion. Adanya gaya gravitasi yaitu
gaya yang menarik benda selalu menuju ke bawah, elektrokinetik yaitu
pergerakan molekul karena adanya listrik dan hidrodinamik yaitu pergerakan
suatu cairan, dapat mendorong pergerakan molekul analit sehingga mempercepat
migrasi analit. Sedangkan adanya friksi molekul yaitu gaya yang muncul dengan
arah gerakan yang berlawanan dengan arah gerakan molekul, adanya
elektrostatik yaitu gaya yang dikeluarkan oleh medan listrik statik (tidak
berubah/bergerak) terhadap objek bermuatan yang lain, adanya sifat adsorbsi
yaitu suatu proses yang terjadi ketika suatu fluida, cairan maupun gas pada suatu
padatan atau cairan (zat penjerap, sorben) dan membentuk suatu lapisan tipis
pada permukaan, adanya kelarutan analit, adanya ikatan kimia dan atau interaksi
ion antara analit fase diam dan fase gerak dapat menghambat pergerakan molekul
analit. Metode pemisahan pada kromatografi sangat tergantung dari jenis fase
diam yang digunakan. Jenis fase diam yang digunakan menentukan interaksi
yang terjadi antara analit dengan fase diam dan fase gerak. Metode pemisahan
pada kromatografi terbagi menjadi :
a. Pemisahan berdasarkan polaritas
Metode pemisahan berdasarkan polaritas, senyawa-senyawa terpisah
karena perbedaan polaritas. Afinitas analit tehadap fase diam dan fase gerak
tergantung kedekatan polaritas analit terhadap fase diam dan fase gerak (like
dissolve like). Analit akan cenderung larut dalam fase dengan polaritas sama.
Analit akan berpartisi diantara dua fase yaitu fase padat-cair dan fase cair-cair.
Ketika analit berpartisi antara fase padat dan cair faktor utama pemisahan adalah
adsorbsi. Sedangkan bila analit berpartisi antara fase cair dan fase cair, faktor
utama pemisahan adalah kelarutan. Prinsip pemisahan dimana analit terpisah
karena afinitas terhadap fase padat dan fase cair biasa disebut dengan adsorbs
dan metode kromatografinya biasa disebut kromatografi adsorbsi. Sedangkan
prinsip pemisahan dimana analit terpisah karena afinitas terhadap fase cair dan
fase cair disebut dengan partisi dan metode kromatografinya biasa disebut
kromatografi cair.
b. Pemisahan berdasarkan muatan ion
58

Pemisahan berdasarkan muatan ion dipengaruhi oleh jumlah ionisasi


senyawa, pH lingkungan dan keberadaan ion lain. Pemisahan yang disebabkan
oleh kompetisi senyawa-senyawa dalam sampel dengan sisi resin yang
bermuatan sehingga terjadi penggabungan ion-ion dengan muatan yang
berlawanan disebut kromatografi penukar ion. Pemisahan yang terjadi karena
perbedaan arah dan kecepatan pergerakan senyawasenyawa dalam sampel karena
perbedaan jenis dan intensitas muatan ion dalam medan listrik disebut
elektroforesis.

c. Pemisahan berdasarkan ukuran molekul


Ukuran molekul suatu senyawa mempengaruhi difusi senyawa-senyawa
melewati pori-pori fase diam. Pemisahan terjadi karena perbedaan difusi
senyawa-senyawa melewati pori-pori fase diam dengan ukuran pori-pori yang
bervariasi. Senyawa dengan ukuran molekul besar hanya berdifusi kedalam pori-
pori fase diam yang berukuran besar, sedangkan senyawa dengan ukuran molekul
kecil akan berdifusi ke dalam semua pori-pori fase diam, sehingga terjadi
perbedaan kecepatan pergerakan molekul melewati fase diam. Senyawa dengan
ukuran molekul besar memiliki kecepatan yang lebih besar dibanding senyawa
dengan ukuran molekul kecil. Metode pemisahan ini biasa disebut dengan
kromatografi permeasi gel.
d. Pemisahan berdasarkan bentukan spesifik
Pemisahan senyawa berdasarkan bentukan yang spesifik melibatkan
ikatan kompleks yang spesifik antara senyawa sampel dengan fase diam. Ikatan
ini sangat selektif seperti ikatan antara antigen dan antibody atau ikatan antara
enzim dengan substrat. Pemisahan ini biasa disebut dengan kromatogafi afinitas.
59

Fase diam KLT dengan sorben yang memiliki bentukan spesifik dengan
selektifitas tinggi dalam bentuk lempeng siap pakai belum tersedia dipasaran.

5.3. Tahapan Metode Analisis KLT


Pada metode analisis KLT, beberapa persiapan harus dipenuhi untuk
mendapatkan hasil pemisahan sampel yang baik meliputi preparasi sampel,
penanganan lempeng KLT, penanganan eluen, penanganan chamber tempat
elusi, aplikasi sampel, proses pengembangan sampel dan evaluasi noda.
1. Preparasi sampel
Sebelum melakukan preparasi sampel terlebih dahulu ditentukan jenis
sampel dan sifat fisika kimia analit yang akan dianalisis. Jenis sampel terbagi
menjadi :
a. Sampel larutan jernih
Preparasi sampel larutan jernih lebih mudah dibandingkan jenis
sampel yang lain yaitu dengan mengencerkan sampel dengan pelarut yang
sesuai yaitu yang mudah menguap yang dapat melarutkan sampel dan sebisa
mungkin sedikit melarutkan matrik. Pelarut pada metode KLT sebaiknya
menggunakan pelarut yang mudah menguap karena akan memudahkan
penguapan pelarut saat aplikasi (penotolan) sampel.
b. Sampel larutan keruh
Preparasi larutan keruh dilakukan dengan mengekstraksi analit dengan
pelarut yang dapat melarutkan analit dengan cara manual (dikocok) atau
menggunakan alat yaitu vorteks atau ultrasonic degaser. Penarikan analit
dengan cara ekstraksi harus dipastikan bahwa analit sudah terekstraksi
sempurna. Pemastian kesempurnaan ekstraksi dapat dilakukan dengan cara
ekstraksi berulang atau dengan menganalisis sisa (ampas) hasil ekstraksi.
c. Sampel semisolid (setengah padat)
Preparasi sampel semisolid dilakukan dengan cara penghancuran
sampel dengan cara digerus atau diblender. Sampel yang telah dihancurkan
diekstraksi dengan pelarut yang dapat melarutkan analit dengan cara manual
(dikocok) atau menggunakan alat dengan menggunakan vorteks atau
ultrasonic degaser. Kesempurnaan penarikan analit dengan cara ekstraksi juga
harus dipastikan. Ekstraksi pada sampel semisolid dapat di bantu dengan
pemanasan. Pemanasan dapat mengencerkan bentuk sampel dari semisolid
menjadi larutan sehingga penarikan analit dalam sampel menjadi lebih mudah.
Hanya saja pada pemisahan ampas dengan larutan pengekstrak sebaiknya
dilakukan sebelum dingin karena bila pemisahan dilakukan setelah sampel
dingin dikawatirkan analit akan terjebak kembali ke dalam sampel semisolid.
d. Sampel padat.
60

Preparasi sampel padat dilakukan dengan cara menyerbuk sampel


dengan cara digerus atau diblender. Serbuk diekstraksi dengan pelarut yang
dapat melarutkan analit dengan cara manual (dikocok) atau menggunakan alat
yaitu vorteks atau ultrasonic degaser. Sifat fisika kimia analit yang harus
diketahui sebelum melakukan preparasi sampel adalah kelarutan analit dan
stabilitas analit. Dari kelarutan analit dapat dipilih pelarut untuk preparasi
sampel.
Stabilitas analit menentukan cara preparasi sampel. Misalnya untuk
analit yang tidak stabil pada suhu tinggi, dihindari adanya pemanasan pada
preparasi sampel. Pada ekstraksi sampel dengan ultrasonic degasser
sebaiknya alat diatur pada suhu normal tanpa pemanasan.
Penyaringan larutan sampel juga merupakan tahapan penting pada
preparasi sampel. Penyaringan dapat memperbaiki kromatogram yang
dihasilkan dan mempermudah penotolan sampel karena dapat memisahkan
analit dari partikel-partikel yang ada dalam larutan sampel. Adanya partikel
dalam larutan sampel dapat menyebabkan munculnya pengotor pada
kromatogram yang dihasilkan terutama bila partikel tersebut larut dalam fase
gerak dan terdeteksi oleh detektor yang digunakan. Selain itu adanya partikel
dalam larutan sampel dapat mengganggu penetrasi analit dalam lempeng KLT
ketika penotolan larutan sampel. Berbagai penyaring yang tersedia dipasaran
dapat digunakan, seperti penyaring berbahan selulosa asetat, selulosa dan
nitrat, alumina atau polipropilen. Pada khasus dimana terdapat banyak
kontaminan yang mengganggu noda analit pada kromatogram KLT maka
diperlukan prosedur preparasi sampel tambahan yaitu metode pembersihan
(clean-up) seperti yang dilakukan pada metode Kromatografi Cair Kinerja
Tinggi (KCKT). Prosedur clean-up dapat menggunakan solid phase extraction
yang sesuai. Sorben solid phase extraction (SPE) dapat berupa diatomeae
bumi, gel silika, C2, C8, C18, CN,diol, NH2 dan fenil-terikat pada gel silika,
serta sorben penukar ion dengan bahan dasar silika dan berbagai polimer.
Selektifitas ekstraksi dapat dicapai dengan memilih sorben yang tepat yaitu
yang dapat menyerap analit tetapi tidak menyerap kotoran, atau yang dapat
menyerap kotoran dan tidak menyerap analit sehingga analit terelusi keluar.
Pada sampel biologis seperti plasma darah pada tahapan preparasi sampel
dapat ditambah dengan trikloroasetat, asam perklorat atau asetonitril untuk
menghilangkan protein dengan cara pengendapan.
2. Penanganan Lempeng KLT
Sebelum menggunakan lempeng KLT, pastikan dulu jenis lempeng
yang digunakan (dapat dilihat di macam sorben) sehingga tidak terjadi
kesalahan penanganan lempeng. Lempeng KLT bersifat rapuh dan harus
ditangani dengan benar mulai dari pembukaan kemasan sampai ke tahap
61

dokumentasi. Pendukung sorben yang paling umum digunakan pada lempeng


KLT adalah aluminium foil, film plastik dan piring kaca. Lempeng tersebut
digunakan untuk berbagai tujuan dan penanganan masing-masing jenis
pendukung sorben berbeda-beda. Film plastik jarang digunakan karena tidak
tahan pemanasan. Pendukung sorben yang banyak digunakan adalah
aluminium foil.
a. Pemotongan Lempeng
Pemotongan lempeng KLT dengan pendukung aluminium foil
dapat menggunakan gunting. Saat memotong lempeng dengan pendukung
aluminium foil sudut gunting harus diperhatikan. Sudut gunting tidak boleh
cenderung ke kiri seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2.1, karena hal ini
biasanya menyebabkan lepasnya sorben dari pendukungnya. Akibatnya,
terjadi kesenjangan kapilaritas antara sisi lapisan sorben tepi dengan sisi
lapisan sorben tengah, di mana pelarut bergerak maju lebih cepat pada sisi
tepi dibandingkan sisi tengah dari kromatogram tersebut. Hal ini terjadi
karena pelarut juga mengalir dari bagian tepi potongan menuju ke tengah
kromatogram sehingga menyebabkan deformasi noda dan kromatogram
miring dan menyimpang jalur (gambar 2.2).
Pemotongan lempeng dengan pendukung kaca dapat menggunakan
alat pemotong kaca khusus seperti T. Omori yang diproduksi oleh
DESAGA (Gambat 2.3). Alat ini dapat memotong lempeng kaca selebar 1
cm dengan baik.

Pengambilan dan pemindahan lempeng dilakukan dengan hati-hati


yaitu dengan memegang bagian tepi dari lempeng. Pada saat penanganan
lempeng diusahakan tidak meninggalkan sidik jari ataupun keringat pada
sorben lempeng KLT. Dan juga jangan meletakkan benda diatas sorben
lempeng KLT karena benda tersebut dapat meninggalkan kotoran pada
lempeng KLT. Sidik jari, keringat dan kotoran yang menempel pada sorben
62

lempeng KLT dapat terlihat jelas setelah diderivatisasi oleh penampak


noda misalnya, ninhidrin atau vanilin-asam sulfat ataupun setelah dilihat
dibawah sinar UV. Adanya noda sidik jari, keringat atau kotoran dalam
lempeng KLT menyebabkan munculnya noda tambahan yang tidak
diinginkan yang dapat mengganggu keberadaan noda analit.

b. Pencucian lempeng (Prewashing)


Teknik pencucian lempeng KLT / KLTKT diperlukan untuk
menghilangkan pengotor lempeng baik itu pengotor yang berasal dari
bahan pengikat lempeng maupun dari atmosfer yang teradsorbsi ke dalam
lempeng. Adanya pengotor dalam lempeng ini bermasalah jika pengotor
tersebut terdeteksi oleh pereaksi penampak noda yang digunakan ataupun
oleh lampu deteksi yang digunakan. Pada umumnya kotoran dalam
lempeng bersifat hidrofil sehingga penggunaan fase gerak polar akan
menyebabkan pengotor lempeng cenderung bermigrasi mengikuti fase
gerak dan memiliki Rf tinggi (>0,8). Bila noda analit berada dekat dengan
noda pengotor lempeng maka pemisahan antara noda analit dengan noda
pengotor lempeng menjadi kurang bagus atau resolusinya jelek.
Konsentrasi pengotor biasanya tidak dipermasalahkan. Bila fase gerak
yang digunakan cenderung non polar maka hampir tidak ada migrasi dari
pengotor lempeng sehingga pengotor tetap tersebar dalam lempeng yang
menyebabkan munculnya gangguan latar belakang saat deteksi lempeng.
Lempeng yang telah dimurnikan dengan cara pencucian akan memiliki
latar belakang yang lebih bersih dan lebih seragam saat diamati secara
visual maupun dengan bantuan lampu deteksi, serta dapat meningkatkan
63

rasio sinyal/noise bila lempeng dideteksi dengan KLT Scanner atau


densitometri. Hampir semua sorben dapat dilakukan pencucian lempeng,
tergantung pada aplikasi yang diinginkan. Pencucian lempeng dilakukan
dengan cara mengelusi lempeng dengan metanol, campuran metanol
dengan kloroform atau dengan eluen yang digunakan. Setelah dielusi,
lempeng harus dikeringkan untuk menghilangkan eluen yang terjebak
dalam
lempeng sehingga tidak ada pelarut. Setelah kering lempeng hasil
pencucian dapat digunakan untuk analisis. Teknik pencucian lempeng ini
perlu dipertimbangkan pada analisis kuantitatif dan direkomendasikan
untuk pengujian stabilitas dan analisis jejak (trace). Dalam analisis rutin
pencucian lempeng dapat dilakukan untuk menghilangkan noda pengotor
lempeng yang dapat mengganggu noda analit. Gambar 2.4 menunjukan
pengaruh pencucian lempeng pada kromatogram yang dihasilkan.

Adanya teknik pencucian lempeng memungkinkan adanya daur


ulang lempeng. Daur ulang lempeng KLT dapat dilakukan dengan catatan
bila seluruh noda sampel dapat terelusi sempurna dan larutan
pengembang yang digunakan tidak merubah sifat fisika kimia dari sorben
baik itu polaritas, muatan ion dan sebagainya. Tidak berubahnya sifat
fisika kimia sorben menyebabkan lempeng KLT daur ulang akan
memberikan pemisahan yang sama dibandingkan sebelum lempeng KLT
didaur ulang. Dengan terelusinya seluruh noda sampel maka akan
didapatkan lempeng dengan latar belakang yang bersih dan seragam
karena noda sampel maupun noda pengotor akan terkonsentrasi ditepi
atas dari lempeng. Cara pembuatan Lempeng KLT daur ulang adalah
dengan mengelusi kembali lempeng yang sudah digunakan dengan eluen
selama waktu tertentu. Lamanya elusi lempeng daur ulang umumnya
empat kali lama elusi normal atau tergantung dari eluen yang digunakan
dan kecepatan terelusinya noda sampel. Setelah lempeng terelusi,
64

lempeng dikeringkan dalam lemari asam selama 10 menit kemudian


lempeng dikeringkan dengan dioven selama 15 menit suhu kurang lebih
100oC.
Dari profil kromatografi hasil scanning dengan densitometer
menunjukkan bahwa lempeng KLT daur ulang lebih bersih atau memiliki
pengotor lebih sedikit dibandingkan lempeng baru. Dikarenakan pada
lempeng baru, di ujung lempeng atau pada akhir elusi terdapat pengotor
yang terlihat dengan lampu UV, meskipun pada analisis kuantitatif
pengotor tersebut tidak mengganggu karena mempunyai Rf > 0,85
(berada di luar Rf analisis kuantitatif yaitu 0,2-0,8). Pada lempeng daur
ulang pengotor tersebut tidak tampak karena baik noda sampel maupun
noda pengotor akan terelusi oleh eluen. Bila diamati dengan densitometer
panjang gelombang 254 nm lempeng daur ulang akan terlihat lebih bersih
dibandingkan lempeng baru sehingga untuk pemakaian kualitatif lempeng
daur ulang akan lebih menguntungkan dibanding lempeng baru (gambar
2.5).

Untuk analisis kuantitatif, kepresisian hasil analisis lempeng daur


ulang juga harus diuji. Pemilihan jenis lempeng yang digunakan juga
mempengaruhi hasil daur ulang lempeng. Daur ulang lempeng KLTKT
(Kromatografi lapis tipis kinerja tinggi) lebih bagus dibandingkan KLT
konvensional baik dari segi kebersihan lempeng dari pengotor maupun
kepresisian hasil analisis kuantitatif.
65

c. Aktivasi lempeng
Aktivasi lempeng ditujukan untuk menghilangkan kelembaban air
atmosfer yang teradsorbsi dalam lempeng. Contoh aktivasi lempeng yaitu
pegeringan lempeng silika gel 30 menit pada 120 ° C. Jika suhu yang
digunakan terlalu tinggi akan menyebabkan pelepasan senyawa kimia
dalam lempeng yang dapat merubah sifat silika gel secara irreversible (tak
terpulihkan). Pada kromatografi adsorbsi, aktivitas lempeng yang tinggi
dapat meningkatkan ketertambatan fase diam sehingga jarak migrasi
sampel menjadi lebih pendek. Untuk mendapatkan reprodusibilitas nilai
ketertambatan (faktor retardasi) diperlukan penentuan tingkat aktivasi
lempeng yang baik. Proses aktivasi lempeng diatas hanya cocok untuk
lempeng silika gel dan aluminium oksida. Untuk lempeng dengan sorben
lain aktivasi lempeng dilakukan sesuai petunjuk yang disarankan produsen
lempeng. Misalnya untuk lempeng KLTKT modifikasi amino (Merck)
merekomendasikan agar lempeng diaktivasi selama 10 menit pada 120 ° C
sebelum digunakan. Temperatur dan lama aktivasi lempeng merupakan
sumber kesalahan dalam aktivasi. Terlalu pendek waktu aktivasi akan
mengakibatkan tidak sempurnyanya penghilangan kelembaban air dalam
lempeng ataupun sisa eluen pencucian lempeng sehingga lempeng akan
memberikan latar belakang yang tidak seragam. Sebaliknya waktu aktivasi
yang terlalu lama akan menghilangkan air kimia terikat yang dapat
merubah sifat fisika kimia lempeng. Selain itu lapisan sorben lempeng
dapat retak karena adanya modifikasi kimia.
d. Pengkondisian lempeng (conditioning)
Pengkodisian lempeng dapat dilakukan untuk mempengaruhi proses
kromatografi. Pengkondisian lempeng ditujukan untuk mengontrol
kelembaban lempeng dalam chamber. Kelembaban lempeng dapat
66

dikontrol dengan menggunakan pereksi pengontrol kelembaban dalam


chamber twin trough. Pereaksi ditempatkan dalam salah satu kompartemen
dalam chamber twin trough. Beberapa pereaksi (larutan garam) yang dapat
mengontrol kelembaban terdapat pada tabel 1. Pengaruh pengkondisian
lempeng dapat dilihat dari nilai faktor retardasi dan resolusi pemisahan
pada kromatogram yang dihasilkan (gambar 2.6).

e. Impregnasi Lempeng
Masalah yang muncul dalam pemisahan dengan KLT dapat diatasi
dengan merubah sorben fase diam yang digunakan dengan cara impregnasi
sorben lempeng KLT dengan senyawa anorganik maupun senyawa
organik. Selain memakan waktu, teknik ini memerlukan pengalaman dalam
67

pembuatannya. Impregnasi dapat dilakukan dengan cara pencelupan,


penyemprotan maupun dengan pra elusi dengan pelarut pengimpregnasi.
Tujuan impregnasi lempeng tergantung masalah pemisahan KLT yang
dihadapi. Misalnya untuk mendapatkan lempeng KLT dengan pH yang
homogen, dapat dilakukan dengan cara pengkondisian lempeng atau
dengan diimpregnasi lempeng dengan uap asam atau uap ammonia.
Impregnasi dengan cara pencelupan dapat digunakan untuk pemisahan
senyawa tak jenuh (impregnasi dengan perak nitrat). Impregnasi dengan
cara penyemprotan dapat untuk memisahkan senyawa antibiotik
(impregnasi dengan EDTA). Impregnasi dengan cara elusi dengan eluen
dapat digunakan untuk memisahkan senyawa alkaloid (dengan mengontrol
pH) dan juga untuk merubah polaritas lempeng silika gel dari polar
menjadi non polar (impregnasi dengan pelarut non polar).

5.4. Penanganan Eluen


Pemilihan eluen merupakan faktor yang paling berpengaruh pada sistem
KLT. Eluen dapat terdiri dari satu pelarut atau campuran dua sampai enam
pelarut. Campuran pelarut harus saling sampur dan tidak ada tanda-tanda
kekeruhan. Fungsi eluen dalam KLT :
1. Untuk melarutkan campuran zat
2. Untuk mengangkat atau membawa komponen yang akan dipisahkan
melewati sorben fase diam sehingga noda memiliki Rf dalam rentang yang
dipersyaratkan untuk memberikan selektivitas yang memadai untuk
campuran senyawa yang akan dipisahkan.
Eluen juga harus memenuhi persyaratan sebagai berikut: memiliki
kemurnian yang cukup, stabil, memiliki viskositas rendah, memiliki partisi
isotermal yang linier, tekanan uap yang tidak terlalu rendah atau tidak terlalu
tinggi, toksisitas serendah mungkin
Pemilihan eluen yang cocok dapat dilakukan melalui tahapan optimasi
eluen. Optimasi eluen diawali dengan menentukan sifat fisika kimia analit yang
akan dianalisis dan jenis sorben fase diam yang digunakan. Misalnya sorben
dengan prinsip pemisahan berdasarkan muatan ion diperlukan data tentang jenis
dan intensitas muatan ion analit dalam pemilihan komposisi eluen. Pada sorben
dengan prinsip pemisahan berdasarkan polaritas dibutuhkan nilai koefisien partisi
(P atau log P) dan tetapan dissosiasi (pKa) analit dalam penentuan eluen. Nilai
koefisien partisi analit digunakan untuk menentukan afinitas analit terhadap fase
diam dan fase gerak.
Nilai tetapan disosiasi (pKa) digunakan untuk menentukan bentuk analit
(ion atau molekul) pada pH lingkungan tempat analit berada. Bila analit berada
pada pH dibawah pKa, analit akan berbentuk molekul. Bila analit berada pada
68

pH diatas pKa, analit berbentuk ion. Saat analit berbentuk molekul afinitas analit
terhadap fase diam dan fase gerak akan sesuai dengan nilai koefisien partisinya
tetapi ketika analit berbentuk ion maka analit akan bersifat polar atau sebagian
besar larut dalam pelarut polar dan hampir tidak dapat larut dalam pelarut non
polar. Oleh karena itu nilai log P dan pKa analit menentukan apakah analit satu
dengan analit yang lain dapat dipisahkan dengan metode KLT. Bila dua analit
memiliki koeffisien partisi (log P) sama dan nilai tetapan disosiasi (pKa) juga
sama, maka kedua analit tersebut akan sulit dipisahkan dengan metode KLT.
Bila dua analit memiliki nilai log P sama tetapi nilai pKa berbeda, maka
kedua analit masih dapat dipisahkan dengan cara mengatur pH dari eluen yang
digunakan. pH eluen diatur agar salah satu analit berada dalam bentuk molekul
sedangkan analit yang lain berada dalam bentuk ion. Selain nilai log P dan pKa
tentu sifat fisika kimia yang lain (misalnya ikatan kimia) juga menentukan proses
pemisahan analit. Tabel 2 menunjukkan beberapa pelarut yang paling sering
digunakan dalam KLT, disertai dengan nilai log P dan koefisien kecepatan
migrasi masing-masing pelarut, yang digunakan sebagai acuan kekuatan elusi.
Nilai K merupakan kecepatan migrasi pelarut melewati lempeng silika gel, yang
berhubungan dengan lamanya waktu pengembangan KLT. Semakin besar nilai K
semakin cepat waktu pengembangan KLT. Nilai log P menunjukkan polaritas
pelarut yang berhubungan dengan afinitas analit dengan pelarut. Analit yang
bersifat polar akan memiliki afinitas tinggi terhadap pelarut polar dan afinitasnya
rendah terhadap pelarut non polar. Sebaliknya analit yang bersifat non polar akan
memiliki afinitas tinggi terhadap pelarut non polar dan afinitasnya rendah
terhadap pelarut polar. Pencarian eluen berdasarkan pustaka yang ada juga dapat
membantu tahapan optimasi eluen. Eluen dari pustaka dapat dimodifikasi untuk
mendapatkan pemisahan yang efisien. Bila noda yang dihasilkan belum bagus
(noda masih berekor atau belum simetris), eluen dapat dimodifikasi dengan
menambahkan sedikit asam atau basa sehingga merubah pH eluen. Dari beberapa
eluen yang dicoba dalam optimasi eluen dapat ditentukan efisiensi kromatogram
yang dihasilkan (dapat dilihat pada bab 3.2) sehingga dapat diperoleh eluen yang
optimal.

5.5. Penanganan Chamber


Beberapa hal yang perlu diperhatikan dalam penanganan chamber adalah
kondisi chamber dan jenis chamber. Chamber harus dipastikan dalam kondisi
bersih (bebas dari kotoran) dan kering (bebas dari adanya air). Adanya kotoran
dan air dalam chamber akan menggangu kromatogram yang dihasilkan dan
mempengaruhi reprodusibilitas pemisahan KLT. Jenis chamber yang digunakan
juga harus diperhatikan untuk menentukan teknik pengembangan yang akan
69

digunakan. Ada berbagai jenis chamber KLT, masing-masing dirancang dengan


fitur khusus untuk mengontrol reprodusibilitas pengembangan KLT.

Dalam chamber terjadi beberapa hal yaitu kejenuhan uap pelarut, adsorpsi
uap pelarut oleh sorben lempeng KLT, munculnya efek tepi yang disebabkan
oleh ketidakseimbangan gaya kapilaritas pada sisi tengah dengan sisi tepi
lempeng KLT. Hal- hal tersebut sangat mempengaruhi proses pemisahan, oleh
karena itu modifikasi fitur pada chamber dilakukan untuk menghilangkan efek
yang tidak diinginkan dan memperbaiki resolusi pemisahan. Berikut ini adalah
beberapa jenis chamber KLT :
1. Chamber Nu (chamber normal, alas datar, tak jenuh)
2. Chamber Ns (chamber normal, alas datar, jenuh)
3. Camber Twin-trough (chamber dengan dua kompartemen tempat eluen)
4. Chamber Su (chamber sandwich, tak jenuh)
5. Chamber Ss (chamber sandwich, jenuh)
6. Chamber horizontal (jenuh dan tak jenuh)
7. Chamber elusi otomatis
70

Chamber N
Chamber normal merupakan chamber dengan alas datar dimana semua
komponen pelarut berada dalam kesetimbangan dengan uap pelarut yang berada
didalam chamber baik sebelum maupun ketika proses kromatografi berlangsung.
Proses yang terjadi dalam chamber adalah diawali dengan terjadi keseimbangan
antara fase eluen dan fase uap eluen dalam chamber N. Ketika lempeng masuk
kedalam chamber, lempeng langsung kontak dengan uap eluen. Sorben lempeng
KLT berinteraksi dengan molekul uap pelarut. Interaksi yang terjadi tergantung
dari kejenuhan chamber. Secara bersamaan pelarut bermigrasi melewati sorben
lempeng KLT melalui gaya kapilaritas dan juga berinteraksi dengan uap eluen
secara simultan (gambar 2.7). Didalam lempeng sejumlah interaksi terjadi yaitu
interaksi antara fase uap eluen, fase eluen, kelembaban yang teradsorbsi dalam
lempeng, dan sorben lempeng itu sendiri. Adanya analit dalam lempeng akan
menambah jumlah interaksi yang terjadi. Pada chamber N tak jenuh, eluen
sebanyak 3-5 mm kedalaman diletakkan dalam chamber, kemudian chamber
ditutup dengan penutup chamber. Uap eluen akan memenuhi ruangan dalam
chamber dan terjadi proses penjenuhan chamber kurang lebih selama 15 menit.
Kejenuhan di bagian tengah chamber sekitar 75% dan kejenuhan ruangan
diatasnya lebih kecil lagi. Ketika lempeng KLT dimasukkan dalam chamber
kejenuhan sedikit berubah dan butuh beberapa waktu untuk mengkondisikan
kejenuhan baru. Proses pengembangan diawali dengan meningkatnya aliran
molekul eluen melewati sorben lempeng.
Dibagian atas chamber terjadi adsorbsi uap eluen oleh lempeng KLT
kering (bagian lempeng yang tidak terbasahi eluen) sehingga uap eluen semakin
tak jenuh. Terjadi penguapan dari eluen yang ada dalam lempeng menuju
ruangan dalam chamber yang menyebabkan kecepatan alir eluen berkurang
(gambar 2.8). Analit dengan Rf rendah tidak terpengaruh oleh efek tersebut tetapi
analit dengan Rf mendekati batas depan eluen akan mengalami perubahan bentuk
noda dari bulatan menjadi pita tipis. Eluen yang terdiri dari pelarut dengan titik
didih rendah dan sangat mudah menguap dapat menyebaban terjadinya efek tepi
dan melengkungnya bentuk garis depan eluen. Hal ini dikarenakan penguapan
tidak hanya terjadi dari atas kebawah tapi juga dari samping tepi chamber ke
tengah chamber. Efek ini dapat diatasi dengan cara sederhana yaitu dengan
membuat chamber N jenuh. Dalam chamber N jenuh sisi dalam chamber dilapisi
dengan kertas sorben (kertas saring). Kejenuhan lempeng dicapai dalam waktu 5-
15 menit tergantung pelarut yang digunakan. Ketika lempeng dimasukkan dalam
chamber praloading sisi kering lempeng yang terjadi hampir sempurna sehingga
efek yang tidak diinginkan diatas tidak muncul.
71

Pada pemisahan dengan KLT sebaiknya menyebutkan jenis


pengembangan yang dilakukan untuk mendapatkan reprodusibiitas nilai Rf.
Penggunaan chamber jenuh akan memiliki nilai Rf yang berbeda dibanding
chamber tak jenuh. Chamber jenuh memiliki nilai Rf lebih rendah bila
dibandingkan dengan chamber tak jenuh dengan kondisi pengembangan yang
sama. Pada chamber jenuh terdapat dua pengamatan garis depan eluen yaitu garis
depan eluen nyata dan garis depan eluen teramati. Adanya kondensasi uap eluen
menyebabkan munculnya garis depan baru didepan garis depan eluen nyata yaitu
garis depan eluen teramati (gambar 2.9).

Penggunaan eluen dengan komposisi campuran pelarut yang terdiri dari


pelarut sangat polar dan sangat tidak polar akan menyebabkan proses demixing
yaitu kurang bercampurnya eluen. Sebagai contoh pada pengembangan dengan
eluen terdiri dari kloroform, metanol dan asam asetat, pelarut yang paling polar
(asam setat) teradsorbsi oleh lempeng KLT dan membentuk garis depan eluen β
yang tidak teramati. Kemudian pelarut dengan polaritas dibawahnya yaitu
metanol juga teradsorbsi oleh lempeng KLT yang membentuk garis depan eluen
β yang lain yang juga tidak teramati. Sedangkan kloroform bermigrasi melewati
lempeng KLT dan membentuk garis depan eluen yang teramati yaitu garis depan
72

eluen α (gambar 2.11). Kedua garis depan β pada awalnya tidak teramati. Setelah
elusi selesai dan lempeng divisualisasi dengan penampak noda atau lampu UV
garis depan eluen β akan tampak. Efek demixing eluen pada lempeng KLT dapat
mengganggu kromatogram yang dihasilkan. Analit yang berada berada tepat atau
didekat garis depan eluen α dan β akan membentuk noda yang jelek (pecah).
Demixing eluen dapat dihindari dengan cara menjenuhkan lempeng dengan uap
eluen dengan chamber twin trough (gambar 2.12). Selain itu pemilihan
komposisi yang eluen yang digunakan juga perlu diperhatikan untuk mencegah
efek demixing eluen. Pada pencampuran pelarut sangat polar dengan pelarut
sangat non polar sebaiknya ditambah satu pelarut lagi yaitu pelarut semipolar
sehingga eluen yang terbentuk dapat bercampur dengan baik (tidak terlihat
adanya kekeruhan).
73

5.6. Elusi (Pengembangan) KLT


Elusi atau pengembangan KLT dipengaruhi oleh chamber yang
digunakan dan kejenuhan dalam chamber. Metode pengembangan yang dipilih
tergantung tujuan analisis yang ingin dicapai dan ketersediaan alat di
laboratorium. Terdapat beberapa jenis metode pengembangan KLT :
a. Metode pengembangan satu dimensi
1. Pengembangan non linier (melingkar)
2. Pengembangan linier
3. pengembangan menaik (ascending),
4. pengembangan menurun (descending)
5. Pengembangan ganda
6. Pengembangan horizontal
7. Pengembangan kontinyu
8. Pengembangan gradien
b. Pengembangan dua dimensi

Pengembangan Satu dimensi


Sebagian besar kromatogram yang dihasilkan dari analisis KLT
merupakan hasil pengembangan satu dimensi. Metode pengembangan satu
dimensi biasa digunakan untuk keperluan analisis kuantitatif dengan metode
KLT. Metode pengembangan satu dimensi meliputi :
a. Metode pengembangan non linier (melingkar)
Metode pengembangan melingkar hampir tidak pernah digunakan saat
ini untuk analisis KLT kecuali untuk penelitian yang menggunakan
pengembangan melingkar untuk tujuan tertentu. Pengembangan melingkar
pertama kali dilakukan dalam cawan petri yang berisi fase gerak dan sebuah
sumbu ditempelkan pada lempeng KLT yang diletakkan diatas cawan.
Chamber U (Camag) adalah chamber yang digunakan untuk pengembangan
melingkar, tetapi instrumen ini tidak lagi tercantum dalam katalog Camag.
Kromatogram melingkar juga dapat dihasilkan dengan menggunakan metode
preparatif yang modern, misalnya, dengan alat OPLC (Over pressure layer
cromatography) dan micropreparative RPC (Rotation planar
kromatography).
b. Metode pengembangan linier
Dalam banyak khasus, untuk mendapatkan kromatogram KLT yang
bagus dipilih metode pengembangan linier. Metode pengembangan linier
yang paling sering digunakan adalah metode pengembangan menaik
(ascending). Metode ini dilakukan dengan cara memasukkan eluen dalam
chamber, setelah chamber jenuh, ujung lempeng bagian bawah direndam ke
dalam eluen dalam chamber. Eluen bermigrasi dari bawah lempeng menuju
keatas dengan gaya kapilaritas. Sebaliknya pada pengembangan menurun
74

(descending) eluen bergerak dari atas menuju ke bawah (gambar 2.15).


Beberapa hal yang perlu diperhatikan pada pengembangan linier :
1. Selama pengembangan, chamber harus berada diatas bidang yang datar,
permukaan chamber juga harus sejajar (tidak miring), dan pastikan
selama pengembangan tidak terganggu oleh hal-hal yang tidak
diinginkan.
2. Selama pengembangan, dalam keadaan apapun tidak diperkenankan
menggerakkan chamber untuk mengamati proses pengembangan
3. Selama pengembangan juga tidak diperkenankan membuka tutup
chamber untuk melihat garis depan eluen. Jika pemisahan dengan cara
pengembangan tunggal tidak tercapai dapat dilakukan dengan
pengembangan ganda.
Pada pengembangan ganda lempeng KLT dielusi sebanyak dua kali
atau lebih. Setelah lempeng dielusi, lempeng dikeringkan dahulu kemudian
lempeng kering dapat dielusi kembali. Tujuan pengembangan ganda adalah
untuk mendapatkan resolusi yang lebih baik. Contoh kromatogram hasil
pengembangan ganda dapat dilihat pada gambar 2.16.

c. Metode pengembangan horisontal


Kebalikan dari pengembangan linier, pada pengembangan horizontal
lempeng KLT dimasukkan ke dalam chamber terlebih dahulu. Kemudian
setelah eluen dimasukkan, strip kaca didorong sehingga menempel pada
lempeng KLT sehingga eluen akan bergerak melewati lempeng KLT. Pada
chamber horizontal CAMAG dimungkinkan pengembangan dengan dua arah
yang berlawanan. Masing-masing kompartemen eluen terisi eluen dan eluen
bergerak menuju ke pusat lempeng. Ketika dua garis depan eluen bertemu
maka secara otomatis pengembangan akan berhenti (gambar 2.17).
d. Metode pengembangan kontinyu
Pengembangan kontinyu (pengembangan terus menerus) dilakukan
dengan cara mengalirkan fase gerak secara terusmenerus pada lempeng KLT
75

melalui suatu wadah (biasanya alas tangki) melalui suatu lapisan dan dibuang
dengan cara tertentu pada ujung lapisan.
e. Pengembangan gradien
Pengembangan ini dilakukan dengan menggunakan komposisi fase
gerak yang berbeda-beda. Lempeng yang berisi analit dapat dimasukkan ke
dalam bejana kromatografi yang berisi fase gerak tertentu lalu komponen fase
gerak selanjutnya ditambahkan sedikit demi sedikit ke dalam bejana dan
diaduk sampai homogen. Tujuan utama sistem ini adalah untuk mengubah
polaritas fase gerak. Meskipun demikian untuk memperoleh komposisi fase
gerak yang reprodusibel sangatlah sulit. Alat pengembangan gradient secara
otomatis disebut Automated Multipled Development (AMD). Dengan AMD
komposisi eluen dapat berubah-ubah sesuai dengan jarak migrasi eluen. Pada
umumnya berubahan kompisisi eluen bervariasi antara 10-40 komposisi
eluen. Eluen bergerak melewati lempeng dengan kenaikan yang konstan.
Perubahan komposisi eluen berdasarkan jarak migrasi eluen biasanya antara
1-3 cm. Perubahan komposisi eluen diprogram melalui komputer. Setelah
pengembangan dengan satu komposisi eluen selesai, eluen dipompa keluar
dan lempeng dikeringkan dengan sistem vakum. Kemudian eluen berikutnya
dipompa masuk dalam kompartemen pra pengkondisian lempeng. Kemudian
pengembangan berikutnya berjalan dan seterusnya. Pencampuran pelarut
disiapkan oleh pompa mixer dan gradien. Pelarut murni diletakkan dalam
wadah pelarut.
Sistem AMD memiliki enam botol pelarut dan sepenuhnya diprogram,
dengan kemampuan untuk menyimpan dan mengingat metode gradien. Sistem
AMD dapat digunakan pada pemisahan pestisida (gambar 2.18).

Pengembangan Dua Dimensi


Pengembangan dua dimensi ditujukan untuk identifikasi senyawa
dalam sampel multikomponen. Pengembangan dua dimensi disebut juga
pengembangan dua arah. Pengembangan dua dimensi ini bertujuan untuk
meningkatkan resolusi (pemisahan) sampel ketika komponen-komponen solut
mempunyai karakteristik kimia yang hampir sama, karenanya nilai Rf juga
hampir sama sebagaimana dalam sampel asam-asam amino. Selain itu, adanya
dua sistem fase gerak yang sangat berbeda dapat digunakan secara berurutan
pada
suatu campuran tertentu sehingga memungkinkan untuk melakukan
pemisahan analit yang mempunyai tingkat polaritas yang berbeda.
Pengembangan dua dimensi dilakukan dengan cara lempeng dielusi dengan
eluen pertama. Setelah elusi selesai lempeng dikeringkan kemudian dielusi
kembali dengan eluen kedua dengan arah migrasi eluen yang berbeda. Eluen
76

kedua dapat berupa eluenyang sama dengan eluen pertama atau eluen yang
berbeda dengan eluen pertama (gambar 2.19). Contoh pengembangan KLT
dua dimensi pada sampel asam-asam amino yang dapat memisahkan senyawa-
senyawa kritis (senyawa yang memiliki sifat fisika kimia mirip) terdapat pada
gambar 2.20.
77
78

5.6. Aplikasi Sampel


Pemisahan pada kromatografi lapis tipis yang optimal akan diperoleh
hanya jika menotolkan sampel dengan ukuran bercak sekecil dan sesempit
mungkin. Sebagaimana dalam prosedur kromatografi yang lain, jika sampel yang
digunakan terlalu banyak akan menurunkan resolusi. Aplikasi sampel pada
sorben lempeng KLT dapat dilakukan secara manual dengan peralatan sederhana
dan dapat juga dengan peralatan otomatis. Semakin tepat posisi penotolan dan
kecepatan penotolan semakin baik kromatogram yang dihasilkan. Aplikasi
sampel secara otomatis dapat memperbaiki kualitas penotolan sampel. Hasil
penelitian menunjukkan bahwa penotolan sampel secara otomatis lebih dipilih
daripada penotolan secara manual terutama jika sampel yang akan ditotolkan
lebih dari 15 μl. Penotolan sampel yang tidak tepat akan menyebabkan bercak
yang menyebar dan puncak ganda (gambar 2.21). Untuk memperoleh
reprodusibilitas, volume sampel yang ditotolkan paling sedikit 0,5 μl. Jika
volume sampel yang akan ditotolkan lebih besar dari 2-10 μl maka penotolan
harus dilakukan secara bertahap dengan dilakukan pengeringan antar totolan.
Aplikasi pita dengan teknik manual hampir tidak mungkin tanpa beberapa
kerusakan pada lempeng KLT. Hal ini juga sangat sulit untuk mendapatkan
panjang dan lebar pita yang seragam begitu juga dengan konsentrasi seragam.
Kerusakan pada permukaan sorben lempeng KLT yang disebabkan oleh mikro
pipet merupakan kesalahan terbesar yang berpengaruh pada noda yang
dihasilkan. Untuk mendapatkan hasil terbaik, perlu diperhatikan prosedur yang
digunakan dimana kontak dengan permukaan sorben dapat dihindari sebisa
mungkin. Untuk aplikasi dosis pita dapat menggunakan mikro pipet yang
dilengkapi dengan reservoir larutan sampel. Meskipun demikian sulit untuk
menghasilkan ukuran dan bentuk pita yang seragam secara menyeluruh.
79

a. Aplikasi Manual
Sebelum aplikasi sampel pada lempeng KLT, posisi awal penotolan
diberi tanda berupa titik dengan pensil dan akhir elusi ditandai berupa garis.
Sedapat mungkin penandaan tidak merusak sorben KLT. Untuk aplikasi
manual, terdapat beberapa alat penotolan sampel (gambar 2.22). Alat aplikasi
manual yang paling banyak digunakan adalah pipet mikro kapiler
(microcaps). Dengan cara mencelupkan pipet kapiler mikro, larutan secara
otomatis akan mengisi ruang dalam pipet mikro kapiler. Setelah terisi
tempelkan pipet pada permukaan lempeng KLT maka larutan sampel akan
berpindah dari pipet kapiler menuju sorben lempeng KLT. Penggunaan
syringe lebih dipilih dibandingkan pipet kapiler pada beberapa kondisi :
1. Bila pelarut yang digunakan memiliki berat jenis tinggi, misalnya
kloroform atau metilen klorida, sehingga cairan cenderung keluar dari
pipet kapiler ketika pipet kapiler dalam posisi vertikal.
2. Bila pelarut yang digunakan sangat mudah menguap (titik didih 40-60 °
C) misalnya n-heksana, petroleum eter atau dietil eter. Gaya kapiler tidak
dapat mengisi ruang pipet kapiler secara reprodusibel.
3. Bila sampel mengandung surfaktan yang dapat mengurangi tegangan
permukaan pipet kapiler sehingga pengisian ruang dalam pipet kapiler
tidak reprodusibel
4. Bila sampel berupa cairan kental yang sulit mengalir dalam pipet kapiler.
Pengeluaran larutan dari pipet kapiler juga tidak bisa sempurna karena
masih ada larutan yang menempel pada dinding dalam pipet kapiler
sehingga volume sampel yang dikeluarkan juga tidak reprodusibel.
5. Bila pelarut yang digunakan sulit menguap (titik didih ≥ 100oC) misalnya
air. Pengeluaran larutan dari pipet kapiler juga tidak bisa sempurna karena
masih ada larutan yang menempel pada dinding dalam pipet kapiler
sehingga volume sampel yang dikeluarkan juga tidak reprodusibel.
80

b. Zona Konsentrasi KLT


Zona konsentrasi KLT / KLTKT tersedia secara komersial untuk
aplikasi yang ideal pada volume sampel yang besar. Sampel diterapkan ke
area zona konsentrasi, bisanya sebagai noda cairan yang besar, pada lokasi
yang diinginkan dalam zona atau dengan perendaman secara sempurna
pada luas lempeng (Gambar 2.26). Beban sampel pada lempeng akan
bervariasi tergantung pada resolusi yang mungkin terjadi antara komponen
yang terpisah. Misalnya dengan pemisahan pewarna lipofilik yang
ditunjukkan pada Gambar 2.27, beban yang diterapkan sampai dengan 20
μg dan sebuah resolusi yang baik masih diperoleh, (20 ml dalam larutan
0,1% b / v dengan menggunakan pipet 2μ l). Apabila larutan sampel
sangat encer dan teknik konsentrasi bukan lagi sebuah pilihan maka
aplikasi berulang bisa dilakukan secara langsung ke zona konsentrasi,
dengan pengeringan antara beban yang diperlukan. Ketika lempeng
diperkenalkan ke fase gerak pada chamber kromatografi, pelarut berada
didepan dengan cepat bermigrasi melalui zona konsentrasi membawa
sampel dengan pelarut tersebut. Idealnya sebagai bahan zona konsentrasi
hanya memiliki kapasitas penyimpanan yang rendah dimana noda sampel
mulai berkonsentrasi kedalam ikatan.
Pada saat mencapai antarmuka, mereka menjadi lebih fokus.
Beberapa pengotor dipertahankan oleh adsorpsi di zona bawah/rendah dan
pemisahan komponen-komponen sampel kemudian dimulai di zona atas
silika gel 60. Resolusi lebih baik daripada untuk pengembangan noda
yang normal, sebagai pemisah suatu ikatan yang telah terbentuk terutama
untuk komponen yang paling dekat yang tetap dipertahankan keasliannya.
Namun, kualitas fokus tergantung juga pada pilihan dari fase gerak.
Umumnya untuk silika gel 60 polaritas rendah, pelarut viskositas rendah
81

memberikan hasil terbaik. Polar, pelarut kental seperti fase gerak dapat
menyebabkan peningkatan yang rendah dalam pemisahan.
Seperti ditunjukkan dalam Gambar 2.27, beban tertinggi untuk
lempeng tipis dapat diperoleh dengan menggunakan seluruh lebar
lempeng dan mencelupkannya ke dalam larutan sampel. Setelah kering
lempeng dapat diulang sampai pemuatan yang diperlukan diperoleh, tetapi
perawatan diperlukan untuk menghindari terjadinya overloading atau
kelebihan. Setiap kebocoran pada penyimpanan fase gerak biasanya
diabaikan. Untuk meningkatkan potensi lempeng zona konsentrasi,
lempeng KLT fase terbalik telah digunakan dan telah terbukti bernilai
untuk berbagai aplikasi. Dibandingkan silika gel 60, gel silika RP18 telah
menjadi media pemisahan dengan luas pori-pori yang sesuai sorben untuk
zona konsentrasi.

5.7. Evaluasi Noda


Evaluasi lempeng KLT dapat dilakukan secara langsung maupun dengan
instrumen. Untuk noda yang berwarna evaluasi noda dapat dilakukan dengan
visualisasi langsung pada lempeng KLT dengan menggunakan cahaya matahari,
82

atau dapat dibantu dengan menggunakan lampu UV yang memberikan


pencahayaan pada panjang gelombang tertentu. Untuk noda yang tidak berwarna
beberapa jenis visualisasi dari zona kromatografi diperlukan untuk mengevaluasi
noda hasil kromatografi. Sebagian besar senyawa akan menyerap sinar UV atau
sinar tampak atau fluoresensi tetapi beberapa senyawa membutuhkan visualisasi
yang sesuai untuk mengamati noda hasil kromatografi. Visualisasi dapat
dilakukan dengan cara penyemprotan atau pencelupan ke dalam pereaksi
penampak noda. Karena sorben yang digunakan pada lempeng KLT umumnya
bersifat inert maka reaksi kimia dapat dilakukan di atas lempeng tanpa
terpengaruh lapisan sorben. Berbagai macam pereaksi kimia telah digunakan
untuk mendeteksi zona kromatografi dengan penampakan hasil yang baik.
Beberapa pereaksi yang disebut sebagai pereaksi universal digunakan untuk
memvisualisasikan berbagai senyawa yang berbeda struktur molekulnya.
Termasuk dalam kelompok pereaksi ini adalah pelarut asam dan uap amonia,
fluorescein, diklorofluoresein, dan yodium. Adapun beberapa pereaksi dapat
digunakan dalam teknik destruktif (destructive tekniques). Teknik ini
menyebabkan kerusakan pada senyawa yang akan meninggalkan noda yang
tampak pada lapisan kromatografi. Sebaliknya ada teknik non destruktif
(nondestructive tekniques) yang memungkinkan deteksi senyawa dalam zona
kromatografi tanpa merubah sorben lempeng atau zona kimianya. Termasuk
dalam teknik non destruktif adalah sinar tampak dan UV, dan kadang-kadang
dengan penggunaan yodium atau amonia uap. Dua pereaksi terakhir dalam
banyak kasus “reaksi” dimasukkan dalam reaksi reversibel.
Pereaksi lainnya yang merupakan kelompok gugus spesifik dan dapat
digunakan untuk mendeteksi gugus senyawa, seperti alkohol, aldehid, keton,
ester, atau asam. Pereaksi ini disebut kelompok pereaksi gugus spesifik.
Seringkali, senyawa yang dipisahkan dapat dideteksi dan divisualisasikan oleh
kombinasi teknik-teknik di atas. Sebuah teknik non-destruktif, seperti radiasi
UV, yang mungkin digunakan pertama, kemudian diikuti dengan pereaksi
universal, dan akhirnya digunakan pereaksi gugus spesifik untuk meningkatkan
selektivitas dan sensitivitas. Stabilitas juga merupakan bagian penting dalam
pemilihan pereaksi pendeteksi yang cocok. Beberapa pereaksi mempunyai
stabilitas yang baik selama beberapa minggu sementara yang lain harus dibuat
hanya sebelum digunakan. Stabilitas zona kromatografi yang divisualisasikan
juga kemungkinan berbeda. Beberapa noda memudar cukup cepat, ada yang lama
memudar bahkan ada tetap stabil, tetapi muncul latar belakang pada lempeng
yang menyulitkan visualisasi noda. Kadang-kadang latar belakang gelap atau
berwarna dapat diringankan oleh adanya paparan lempeng KLT dengan uap asam
atau alkali atau mengeringkan lempeng dalam oven sebelum pemberian pereaksi
penampak noda. Pemilihan pelarut yang digunakan untuk menyiapkan pereaksi
83

visualisasi juga membutuhkan pertimbangan. Kadangkadang pemilihan pelarut


yang sedikit, menyebabkan visualisasi zona kromatografi dapat menyebar dan
berkembang menjadi ekor. Efeknya dapat terlihat zona “leaking” pada
permukaan. Hal ini biasanya disebabkan oleh analit di zona kromatografi yang
larut dalam pelarut pereaksi. Masalahnya dapat diselesaikan dengan
menggunakan pelarut dengan kekuatan elusi yang lebih rendah dalam
penyusunan pereaksi. Semua efek ini perlu dipertimbangkan sehingga prosedur
visualisasi yang paling efektif dapat digunakan.
DAFTAR PUSTAKA

Agoes, G., 2009. Teknologi Bahan Alam. Penerbit ITB, Bandung.

Alam, Gemini dan Abdul Rahim. 2007. Penuntun Praktikum Fitokimia. UIN
Alauddin: Makassar. 24-26.

Anonim, 1979 Farmakope Indonesia edisi III, Departemen Kesehatan Republik


Indonesia.

Anonim, 1989. Materia Medika Indonesia Jilid I-V, Departemen Kesehatan Republik
Indonesia.

Anonim, 2008. Farmakope Herbal Indonesia I, Departemen Kesehatan Republik


Indonesia.

Cahyo, A, 2015. Teknologi Ekstraksi Senyawa Bahan Aktif dari Tanaman Obat.
Plataxia, Yogyakarta.

Ditjen POM, (1986), "Sediaan Galenik", Departemen Kesehatan Republik Indonesia,


Jakarta.

Gunawan, D dan Mulyani, S. 2002. Ilmu Obat Alam. (Farmakognosi) Jilid 1. Penebar
Swadaya, Jakarta.

Harborne, J.B. Metode Fitokimia: Penuntun cara modern menganalisi tumbuhan,


diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Penerbit ITB,
Bandung.

Heinrich, et al. 2009. Farmakognosi dan fitoterapi; alih bahasa: Winny R. Syarief et
al; editor bahasa Indonesia, Amalia H. Hadinata. EGC, Jakarta.

Http://devinurmiati.blogspot.com/2017/01/simplisia-fructus_17.html

Http://devinurmiati.blogspot.com/2017/01/simplisia-semen.html

Https://halimatussakdyah.wordpress.com/2017/01/15/simplisia-flos-bunga/

Kar, Autosh, 2013. Farmakognosi dan farmakobioteknologi; alih bahasa, July


Manurung,

Kristanti, dkk, 2008. Buku Ajar Fitokimia. Airlangga Universitiy Press, Surabaya.

Parameter Standar Simplisia dan Ekstrak. BPOM RI.

Rachmawati, Ryeska Fajar Respaty Ed 1-3. EGC, Jakarta.

Saifudin, A., Rahayu V., Taruna H.Y., 2011. Standardisasi Bahan Obat Alam. Graha
Ilmu, Yogyakarta.

84
85

Sirait, M, 2007. Penuntun fitokimia dalam farmasi. Penerbit ITB, Bandung.

Soediro,I dan Soetarno, S. 1991. Farmakognosi. Penulisan buku/monografi. Pusat


Antar Universitas Bidang Ilmu Hayati- ITB.

Stahl, Egon. 1985. Analisis Obat Secara Kromatografi dan Mikroskopi. ITB:
Bandung. 3-5

Sudjadi, Drs., (1986), "Metode Pemisahan", UGM Press, Yogyakarta

Wijaya H. M. Hembing (1992), ”Tanaman Berkhasiat Obat di Indonesia”, Cet 1 ,


Jakarta .

Winny Rivany Syarief, Jojor Simanjuntak; editor edisi bahasa Indonesia, Sintha

Anda mungkin juga menyukai