Prinsip kerja yang steril dan aseptis merupakan prinsip kerja yang harus dilakukan pada saat

melakukan praktikum atau penelitian di Laboratorium Mikrobiologi. Kerja yang steril berarti
kerja pada kondisi bebas dari semua bentuk hidup mikroorganisme, termasuk endospora dan
virus. Namun, kondisi steril tidak terbebas dari kehadiran prion. Proses atau tahapan kerja untuk
menghilangkan atau mematikan seluruh bentuk hidup mikroorganisme dan virus disebut
sterilisasi. Sterilisasi dapat dilakukan dengan berbagai metode, baik metode fisik maupun kimia
(Nester dkk., 2004).

Sementara itu, kerja aseptis adalah kerja pada kondisi tercegah dari serangan agen infeksi yang
dapat menginfeksi jaringan atau material yang steril. Untuk mencapai kondisi aseptis diperlukan
teknik-teknik aseptik (Benson, 2001). Teknik-teknik aseptik adalah teknik yang dilakukan untuk
mengurangi serangan patogen yang dapat mengontaminasi media/kultur (Black, 2008) dan
jaringan hidup (Benson, 2001). Suatu media atau jaringan hidup agar terbebas dari kontaminasi
agen penyebab penyakit dan virus harus dilakukan upaya disinfeksi terlebih dahulu. Secara
umum, disinfeksi menggunakan zat kimia antimikroba yang disebut zat disinfektan (Nester dkk.,
2004; Black, 2008).

Zat disinfektan mudah mematikan bakteri dalam fase vegetatif, jamur, dan lipid containing virus.
Sementara itu, zat disinfektan sulit mematikan Mycobacteria dan non-lipid containing virus serta
umumnya spora bakteri dapat resistan terhadap zat tersebut (Collins & Lyne, 2004).

Zat disinfektan dapat berupa fungisida dan germisida. Fungisida adalah zat disinfektan yang
dapat membunuh jamur, sedangkan germisida adalah zat disinfektan yang dapat membunuh
mikroorganisme dan menginaktivasi virus (Nester dkk., 2004).

Sementara itu, zat disinfektan yang aman digunakan oleh kulit atau jaringan hidup lain disebut
zat antiseptik (Benson, 2001; Nester dkk., 2004).

Seperti yang telah disebutkan sebelumnya, sterilisasi mempunyai bermacam-macam metode.

Metode-metode sterilisasi tersebut antara lain metode penyalaan (flaming), panas-kering,
autoclaving, tyndalisasi, filtrasi, dan inspisasi (Collins & Lyne, 2004).

Namun, metode yang paling umum dan mendasar untuk digunakan dalam sterilisasi adalah
metode autoclaving, panas-kering, dan filtrasi (Harley & Prescott, 2002).

Metode autoclaving menggunakan alat yang disebut autoklaf. Metode autoclaving atau metode
panas-basah memanfaatkan panas uap air untuk melakukan proses pensterilan. Tidak hanya itu,
metode autoclaving memanfaatkan kekuatan tekanan, sehingga suhu yang dihasilkan menjadi
lebih tinggi dan proses sterilisasi menjadi lebih cepat (Collins & Lyne, 2004).

Sementara itu, metode panas-kering memanfaatkan aliran udara panas untuk melakukan proses
pensterilan. Berbeda dengan metode autoclaving, metode panas-kering memerlukan waktu yang
lebih lama karena sterilisasi tidak disertai dengan tekanan seperti halnya pada metode
autoclaving (Harley & Prescott, 2002).
Selanjutnya, metode filtrasi merupakan metode pensterilan dengan menggunakan pori yang
sangat kecil untuk menyaring bakteri. Namun, mikroplasma dan virus tidak ikut tersaring dengan
menggunakan metode filtrasi (Collins & Lyne, 2004).

Laboratorium Mikrobiologi harus mempunyai sejumlah alat yang dapat menunjang proses
praktikum dan penelitian di dalamnya. Di antara alat-alat tersebut, ada alat-alat yang khusus
digunakan di dalam Laboratorium Mikrobiologi dan ada juga yang tidak. Alat-alat tersebut
antara lain autoklaf, oven, inkubator statis, shaker incubator atau inkubator kocok, waterbath
shaker incubator, vorteks, desikator, transfer box, anaerobic jar, sentrifugator, dan
spektrofotometer. Berikut penjelasan artikel alat-alat laboratorium mikrobiologi beserta
fungsinya:

Equipment

1.Ose / Jarum Inokulum (inoculating loop)

jarum inokulum berfungsi untuk memindahkan biakan untuk ditanam/ ditumbuhkan ke media
baru. Jarum inokulum biasanya terbuat dari kawat nichrome atau platinum sehingga dapat
berpijar jika terkena panas. Bentuk ujung jarum dapat berbentuk lingkaran (loop) dan disebut ose
atau inoculating loop/transfer loop, dan yang berbentuk lurus disebut inoculating
needle/Transfer needle. Inoculating loop cocok untuk melakukan streak di permukaan agar,
sedangkan inoculating needle cocok digunakan untuk inokulasi secara tusukan pada agar tegak
(stab inoculating).
2.Mikropipet (Micropippete) dan Tip

Mikropipet adalah alat untuk memindahkan cairan yang bervolume cukup kecil, biasanya kurang
dari 1000 μl. Banyak pilihan kapasitas dalam mikropipet, misalnya mikropipet yang dapat diatur
volume pengambilannya (adjustable volume pipette) antara 1μl sampai 20 μl, atau mikropipet
yang tidak bisa diatur volumenya, hanya tersedia satu pilihan volume (fixed volume pipette)
misalnya mikropipet 5 μl. dalam penggunaannya, mukropipet memerlukan tip.

3.Tabung reaksi (Reaction Tube / Test Tube)

Di dalam mikrobiologi, tabung reaksi digunakan untuk uji-uji biokimiawi dan menumbuhkan
mikroba.Tabung reaksi dapat diisi media padat maupun cair. Tutup tabung reaksi dapat berupa
kapas, tutup metal, tutup plastik atau aluminium foil. Media padat yang dimasukkan ke tabung
reaksi dapat diatur menjadi 2 bentuk menurut fungsinya, yaitu media agar tegak (deep tube agar)
dan agar miring (slants agar). Untuk membuat agar miring, perlu diperhatikan tentang
kemiringan media yaitu luas permukaan yang kontak dengan udara tidak terlalu sempit atau tidak
terlalu lebar dan hindari jarak media yang terlalu dekat dengan mulut tabung karena
memperbesar resiko kontaminasi. Untuk alas an efisiensi, media yang ditambahkan berkisar 10-
12 ml tiap tabung.
4.Labu Erlenmeyer (Erlenmeyer Flask)

Berfungsi untuk menampung larutan, bahan atau cairan yang. Labu Erlenmeyer dapat digunakan
untuk meracik dan menghomogenkan bahan-bahan komposisi media, menampung akuades,
kultivasi mikroba dalam kultur cair, dll. Terdapat beberapa pilihan berdasarkan volume cairan
yang dapat ditampungnya yaitu 25 ml, 50 ml, 100 ml, 250 ml, 300 ml, 500 ml, 1000 ml, dsb.

5.Beaker Glass

Beaker glass merupakan alat yang memiliki banyak fungsi. Di dalam mikrobiologi, dapat
digunakan untuk preparasi media media, menampung akuades dll.

6.Gelas ukur (Graduated Cylinder)

Berguna untuk mengukur volume suatu cairan, seperti labu erlenmeyer, gelas ukur memiliki
beberapa pilihan berdasarkan skala volumenya.

7.Cawan Petri (Petri Dish)

Cawan petri berfungsi untuk membiakkan (kultivasi) mikroorganisme. Medium dapat dituang ke
cawan bagian bawah dan cawan bagian atas sebagai penutup. Cawan petri tersedia dalam
berbagai macam ukuran, diameter cawan yang biasa berdiameter 15 cm dapat menampung media
sebanyak 15-20 ml, sedangkan cawan berdiameter 9 cm kira-kira cukup diisi media sebanyak 10
ml.

8.Batang L (L Rod)
Batang L bermanfaat untuk menyebarkan cairan di permukaan mediaagar supaya bakteri yang
tersuspensidalam cairan tersebut tersebar merata. Alat ini juga disebut spreader.

9.Tabung Durham (Durham Tube)

Tabung durham yaitu tabung yang memiliki bentuk yang sama dengan tabung reaksi tetapi
memiliki ukuran yang lebih kecil dibanding tabung reaksi. Berfungsi untuk menampung hasil
fermentasi mikroorganisme berupa gas. Dalam penggunaannya, maka tabung durham itu
ditempatkan terbalik di dalam tabung reaksi yang lebih besar dan tabung ini kemudian diisi
dengan medium cair. Setelah seluruhnya disterilkan dan medium sudah dingin, maka dapat
dilakukan inokulasi. Jika bakteri yang ditumbuhkan dalam media tersebut memang
menghasilkan gas, maka gas akan tampak sebagai gelembung pada dasar tabung durham.

10.Termometer (thermometer)

Termometer adalah batang kaca yang panjangnya 300 mm, diameter 6-7 mm berisi air raksa dan
gas, serta dilengkapi dengan skala derajat Celcius. Berfungsi untuk mengukur suhu suatu larutan
atau ruang inkubator. Prinsip kerjanya yaitu mengukur suhu sesuai laju air raksa di dalam
thermometer.

Apparatus

1.Pembakar Bunsen (Bunsen Burner)

Salah satu alat yang berfungsi untuk menciptakan kondisi yang steril adalah pembakar bunsen.
Api yang menyala dapat membuat aliran udara karena oksigen dikonsumsi dari bawah dan
diharapkan kontaminan ikut terbakar dalam pola aliran udara tersebut. Untuk sterilisasi jarum
ose atau yang lain, bagian api yang paling cocok untuk memijarkannya adalah bagian api yang
berwarna biru (paling panas). Perubahan bunsen dapat menggunakan bahan bakar gas atau
metanol.

2.Hot plate stirrer dan Stirre bar

Hot plate stirrer dan Stirrer bar (magnetic stirrer) berfungsi untuk menghomogenkan suatu
larutan dengan pengadukan. Pelat (plate) yang terdapat dalam alat ini dapat dipanaskan sehingga
mampu mempercepat proses homogenisasi. Pengadukan dengan bantuan batang magnet Hot
plate dan magnetic stirrer seri SBS-100 dari SBS® misalnya mampu menghomogenkan sampai
10 L, dengan kecepatan sangat lambat sampai 1600 rpm dan dapat dipanaskan sampai 425oC.

3.Autoklaf (Autoclave)
Autoklaf adalah alat pemanas tertutup yang digunakan untuk mensterilisasi suatu benda
menggunakan uap bersuhu dan bertekanan tinggi (1210C, 15 lbs) selama kurang lebih 15 menit.
Penurunan tekanan pada autoklaf tidak dimaksudkan untuk membunuh mikroorganisme,
melainkan meningkatkan suhu dalam autoklaf. Suhu yang tinggi inilah yang akan membunuh
microorganisme. Autoklaf terutama ditujukan untuk membunuh endospora, yaitu sel resisten
yang diproduksi oleh bakteri, sel ini tahan terhadap pemanasan, kekeringan, dan antibiotik. Pada
spesies yang sama, endospora dapat bertahan pada kondisi lingkungan yang dapat membunuh sel
vegetatif bakteri tersebut. Endospora dapat dibunuh pada suhu 100 °C, yang merupakan titik
didih air pada tekanan atmosfer normal. Pada suhu 121 °C, endospora dapat dibunuh dalam
waktu 4-5 menit, dimana sel vegetatif bakteri dapat dibunuh hanya dalam waktu 6-30 detik pada
suhu 65 °C.

Perhitungan waktu sterilisasi autoklaf dimulai ketika suhu di dalam autoklaf mencapai 121 °C.
Jika objek yang disterilisasi cukup tebal atau banyak, transfer panas pada bagian dalam autoklaf
akan melambat, sehingga terjadi perpanjangan waktu pemanasan total untuk memastikan bahwa
semua objek bersuhu 121 °C untuk waktu 10-15 menit. Perpanjangan waktu juga dibutuhkan
ketika cairan dalam volume besar akan diautoklaf karena volume yang besar membutuhkan
waktu yang lebih lama untuk mencapai suhu sterilisasi. Performa autoklaf diuji dengan indicator
biologi, contohnya Bacillus stearothermophilus.

Autoklaf adalah sebuah alat yang digunakan untuk melakukan sterilisasi dengan memanfaatkan
panas uap air di bawah tekanan. Temperatur panas uap air pada tekanan atmosfer hanya
mencapai 100 °C. Akan tetapi, temperatur akan meningkat dengan adanya tekanan, misalnya
pada tekanan 1 bar (kira-kira 15 lb/in2) temperatur menjadi 121°C. Bakteri akan dibunuh pada
temperatur tersebut kurang lebih selama 15-20 menit (Collins & Lyne, 2004; Black, 2008).
Autoklaf dapat digunakan untuk sterilisasi kultur media, jarum suntik, dan larutan yang
termostabil (Cappuccino & Sherman, 2001).

Sterilisasi dengan menggunakan autoklaf memiliki kisaran tekanan, waktu dan temperatur,
tergantung material yang akan disterilisasi. Tekanan yang dipakai pada alat autoklaf berkisar
antara 15-20 lb, temperatur yang diizinkan berkisar antara 121-125 °C (250-256 °F), dan waktu
yang dibutuhkan berkisar antara 15-45 menit, tergantung bahan atau material yang akan dimuat
(Morello dkk., 2003). Udara juga merupakan faktor penting yang memengaruhi keefektifan alat
autoklaf. Kehadiran udara pada muatan autoklaf akan memberi pengaruh kurang baik terhadap
penetrasi panas uap air ke kultur media (Collins & Lyne, 2004). Sementara itu, untuk mengecek
alat autoklaf masih bekerja baik atau tidak, diperlukan pengetesan menggunakan indikator
biologi. Indikator biologi yang lazim digunakan adalah endospora Bacillus stearothermophilus.
Spora bakteri tersebut dipakai karena sporanya dapat resistan terhadap panas. Apabila setelah
sterilisasi masih ditemukan spora bakteri tersebut, berarti alat autoklaf sedang bermasalah. Cara
pengecekan dimulai dengan menaruh strip yang mengandung spora bakteri dengan material yang
disterilisasi pada autoklaf. Setelah proses sterilisasi selesai, tiap strip ditempatkan di dalam
medium cair. Apabila terjadi perubahan warna pH indikator pada medium cair, berarti proses
sterilisasi tidak berjalan sukses (Morello dkk., 2003).

4.oven

Oven Berfungsi untuk sterilisasi kering. alat-alat yang disterilkan menggunakan oven antaralain
peralatan gelas seperti cawan petri, tabung reaksi, dll. serilisasi kerning dengan oven dilakukan
dengan cara memanaskan dengan suhu 180oC selama 1 jam.

Oven adalah alat yang digunakan pula dalam melakukan sterilisasi. Berbeda dengan autoklaf,
oven tidak memanfaatkan panas uap air untuk melakukan sterilisasi. Oven dapat mensterilkan
barang-barang dengan memanfaatkan aliran udara panas. Aliran udara panas tersebut didapatkan
secara elektrik. Barang-barang yang disterilkan oleh oven antara lain cawan petri, labu
erlenmeyer, pipet, dan objek metal (Collins & Lyne, 2004: 45). Barang pecah belah tersebut akan
tergores dan rusak apabila diberikan panas uap air (Harley & Prescott, 2002).

Kelemahan sterilisasi menggunakan oven adalah waktu yang diperlukan untuk melakukan
sterilisasi cukup lama, yaitu sekitar dua jam. Temperatur yang diizinkan untuk melakukan
sterilisasi pada oven, berkisar antara 160-170 °C. Apabila lebih dari 180 °C, barang yang
disterilisasi akan menjadi gosong (Harley & Prescott, 2002).

5.Inkubator (Incubator)
Inkubator adalah alat untuk menginkubasi atau memeram mikroba pada suhu yang terkontrol.
Alat ini dilengkapi dengan pengatur suhu dan pengatur waktu. Inkubator merupakan alat yang
digunakan untuk menginkubasi atau mengerami suatu biakan. Inkubator menyediakan kondisi
temperatur yang optimum untuk mikroorganisme bisa melakukan pertumbuhan. Inkubator
memiliki alat pengatur suhu, sehingga temperatur dapat diatur sesuai biakan yang akan
diinkubasi. Inkubator memanfaatkan panas-kering seperti oven. Pada beberapa jenis inkubator,
kelembapan disediakan dengan memberikan air di dalam inkubator selama periode pertumbuhan
mikroba. Lingkungan yang basah memperlambat dehidrasi pada medium sehingga menghindari
kondisi lingkungan yang bias (Cappuccino & Sherman, 2001).

Inkubator.

Inkubator memiliki banyak tipe, misalnya inkubator statis, inkubator kocok, dan inkubator
waterbath shaker. Inkubator statis adalah jenis inkubator yang digunakan untuk mengerami
mikroba pada medium padat. Sementara itu, inkubator kocok dan inkubator waterbath shaker
digunakan untuk mengerami mikroba pada medium cair. Pengocokan pada inkubator kocok
dilakukan untuk memberikan pengaruh terhadap temperatur dan beberapa aspek metabolisme
mikroba (Patching & Rose, 1970). Adanya prosedur pengocokan pada proses inkubasi mikroba
sangat bermanfaat pada mikroba yang dikultur di medium cair, seperti meningkatkan kontak
antara mikroba dan media.

Penggunaan inkubator waterbath shaker memiliki keuntungan dibandingkan dengan jenis

inkubator yang lain. Keuntungannya adalah penghantaran panas lebih cepat dan merata kepada
kultur mikroba, karena penghantaran panas melalui air. Agitasi atau pergolakan air juga akan
meningkatkan aerasi. Namun, inkubator waterbath shaker juga memiliki kekurangan, yaitu hanya
dapat menginkubasi mikroba pada medium cair (Cappuccino & Sherman, 2001).

Selanjutnya, timbul masalah khusus mengenai inkubasi terhadap bakteri anaerob. Hal tersebut
disebabkan bakteri anaerob akan terbunuh jika terpapar dengan oksigen. Inkubasi bakteri
anaerob dapat dilakukan pada alat khusus yang mencegah kondisi lingkungan yang kaya
oksigen, yaitu alat yang disebut anaerobic jar. Anaerobic jar mempunyai banyak tipe, salah
satunya adalah yang memanfaatkan teknik GasPak system (Cappuccino & Sherman, 2001).

Prinsip kerja dari alat anaerobic jar yang menggunakan teknik GasPak system adalah dengan
mengeluarkan oksigen dari botol yang tertutup dengan bantuan GasPak Generator dan katalis.
Sistem tersebut menggunakan bungkus kimia GasPak Generator yang terdiri dari sodium
bikarbonat dan sodium borohidrit, yang nantinya akan bereaksi dengan air sehingga
menghasilkan karbon dioksida dan hidrogen. Proses penambahan air dilakukan sebelum botol
ditutup, dengan cara dipipet ke dalamnya. Setelah itu, paladium, yang terletak di tutup botol,
mengkatalisis pembentukan air yang berasal dari hidrogen dan oksigen residu. Akhirnya,
kandungan oksigen semakin berkurang dan kandungan karbon dioksida semakin meningkat,
sehingga menciptakan kondisi lingkungan yang kondusif untuk pertumbuhan bakteri anaerob
(Cappuccino & Sherman, 2001; Morello dkk., 2003; Tortora dkk., 2010).

Untuk mengecek alat anaerobic jar masih bekerja dengan baik atau tidak, dapat menggunakan
indikator biologi dan kimia. Indikator biologi yang dapat digunakan seperti Pseudomonas
aeruginosa dan Clostridium welchii. Indikator biologi dapat digunakan untuk melihat kecukupan
prosedur anaerob yang terjadi pada alat anaerob jar. Namun, pengecekan dengan indikator
biologi memerlukan waktu yang lama (harus menunggu tahap inkubasi sampai selesai) dan
hasilnya bergantung juga pada medium yang digunakan (Watt dkk., 1976). Sementara itu,
indikator kimia yang sering digunakan adalah metilen biru. Metilen biru akan menjadi berkurang
warnanya pada kondisi yang kehilangan oksigen (Cappuccino & Sherman, 2001; Morello dkk.,
2003; Tortora dkk., 2010).

6.Penangas air (Water bath)

Penangas air besfungsi untuk menyimpan media agar (yang digunakan untuk analisa dengan
teknik tuang / pure plate ) supaya media tetap dalam kondisi leleh/cair, bisanya suhu diatur pada
kisaran 40-45oC. Untuk menjaga air pada penangas air tidak terkontaminasi mikro organisme
maka perlu ditambahkan citric acid 0.3% dan potassium sorbat 0.1%.

7.PH Meter

PH meter berfungsi untuk mencek derajat keasaman / PH media, karena derajat keasaman sangan
berpengaruh terhadap pertumbuhan mikroba.

8.Timbangan digital / neraca digital

Neraca digital berfungsi untuk menimbang media dan juga sample atau contoh uji saat preparasi.

9.Biological Safety Cabinet / Laminar Air Flow

Biological Safety Cabinet (BSC) atau dapat juga disebut Laminar Air Flow (LAF) adalah alat
yang berguna untuk bekerja secara aseptis karena BSC mempunyai pola pengaturan dan
penyaring aliran udara sehingga menjadi steril dan aplikasisinar UV beberapa jam sebelum
digunakan.

Microbiological safety cabinet (MSC) adalah suatu tempat atau ruangan yang didesain untuk
memproteksi suatu pekerjaan dari kontaminasi, contohnya adalah transfer box atau laminar flow.
Selain itu, MSC berguna untuk menciptakan keadaan yang aseptis pada saat pembuatan medium
atau manipulasi objek mikroorganisme. Alat MSC mempunyai berbagai tipe sirkulasi udara,
setidaknya ada tiga tipe. Salah satu tipenya, udara yang telah terfiltrasi dialirkan ke seluruh MSC
agar tercipta sirkulasi udara yang baik, kemudian dikeluarkan melalui suatu exhaust air.
Sirkulasi udara bersih tersebut dapat mencegah kontaminasi pada saat melakukan kegiatan
pembuatan medium atau manipulasi objek mikroorganisme (Collins & Lyne, 2004).

10.Colony counter

Alat ini berguna untuk mempermudah perhitungan koloni yang tumbuh setelah diinkubasi di
dalam cawankarena adanya kaca pembesar. Selain itu alat tersebut dilengkapi dengan skala/
kuadran yang sangat berguna untuk pengamatan pertumbuhan koloni sangat banyak. Jumlah
koloni pada cawan Petri dapat ditandai dan dihitung otomatis yang dapat di-reset.

11.Mikroskop Cahaya (Brightfield Microscope)

Salah satu alat untuk melihat sel mikroorganisme adalah mikroskop cahaya. Dengan mikroskop
kita dapat mengamati sel bakteri yang tidak dapat dilihat dengan mata telanjang. Pada umumnya
mata tidak mampu membedakan benda dengan diameter lebih kecil dari 0,1 mm.

12.Mikroskop stereo (Zoom Stereo Microscope)

Mikroskop ini berfungsi untuk melihat objek yang membutuhkan perbesaran tidak terlalu besar.
Di Laboratorium Mikrobiologi, mikroskop stereo biasanya digunakan untuk mengamati secara
detail bentuk koloni dan jamur.

13. Desikator

Desikator adalah alat yang menjaga suatu material dalam kondisi kering dan menjauhkannya dari
uap air. Desikator disebut juga kotak pengering karena segala sesuatu yang disimpan di
dalamnya akan menjadi kering. Hal tersebut karena adanya suatu desiccant, yaitu suatu agen
yang dapat mengabsorpsi semua uap air yang ada di udara pada lingkungan desikator yang
tertutup. Salah satu desiccant yang sering digunakan adalah silika gel. Silika gel akan berubah
warna setelah mengabsorpsi uap air. Perubahan warna pada silika gel karena reaksi kimia yang
terjadi antara silika gel dengan air yang telah diabsorpsi.

14. Vorteks

Vorteks merupakan alat yang digunakan untuk mencampur sejumlah bahan dalam suatu botol.
Prinsip kerja dari vorteks adalah dengan memberikan putaran atau guncangan pada botol
sehingga berbagai campuran bahan yang ada di dalam botol tersebut menjadi tercampur secara
merata. Proses pencampuran bahan pada vorteks harus dilakukan di ruangan mikrobiological
safety cabinet untuk mencegah terjadinya kontaminasi (Collin & Lyne, 2004).

15. Sentrifugator

Sentrifugator adalah alat yang digunakan untuk mempelajari struktur dan fungsi suatu komponen
sel. Prinsip kerjanya adalah dengan memisahkan atau memfraksionasi setiap komponen sel
berdasarkan berat jenis dari tiap komponen sel. Alat tersebut memberikan gaya sentrifugal
sehingga substansi yang lebih berat akan mengendap dan substansi yang lebih ringan akan
berada di atas. Jika kecepatan sentrifugator semakin meningkat, komponen yang lebih ringan
akan mengendap di dasar. Komponen sel yang mengendap disebut pellet, dan komponen sel
yang tersuspensi di atasnya disebut supernatan. Pellet yang berhasil didapatkan nantinya akan
dipelajari lebih lanjut untuk diketahui fungsinya (Campbell & Reece, 2009).

16. Spektrofotometer

Spektrofotometer adalah alat yang dapat digunakan untuk mengukur tingkat kekeruhan suatu
sampel kultur. Pengukuran tingkat kekeruhan bertujuan untuk menghitung jumlah konsentrasi sel
bakteri yang berada pada suatu sampel (Benson 2001; Nester dkk. 2003). Prinsip kerja yang
digunakan adalah dengan mengkonversi jumlah cahaya yang diserap oleh sampel
(absorban/densitas optik, O.D.) menjadi jumlah konsentrasi sel bakteri. Sebelumnya, jumlah
cahaya yang diteruskan (%T) oleh sampel harus diketahui dengan cara melihat jarum
galvanometer yang tertera pada alat spektrofotometer. Jumlah cahaya yang diteruskan (%T) tadi,
kemudian dimasukkan ke dalam rumus densitas optik (O.D.) sebagai berikut:

O.D. = 2 – log . (%T)

Angka O.D. yang telah didapatkan kemudian dikonversi dengan menggunakan tabel logaritma
atau kalkulator, sehingga jumlah konsentrasi sel bakteri pada sampel tersebut dapat diketahui
(Benson, 2001).

Cara Kerja Peralatan

No. Nama Alat Fungsi Cara Kerja

Autoclave Untuk mensterilkan alat dan
1. bahan. 1. Sebelum melakukan sterilisasi cek
dahulu banyaknya air dalam autoclave.
Jika air kurang dari batas yang
 ditentukan, maka dapat ditambah air
sampai batas tersebut. Gunakan air hasil
destilasi, untuk menghindari
terbentuknya kerak dan karat.

2. Masukkan peralatan dan bahan. Jika

mensterilisasi botol bertutup ulir, maka
tutup harus dikendorkan.

3. Tutup autoclave dengan rapat lalu

kencangkan baut pengaman agar tidak
ada uap yang keluar dari bibir autoclave.
Klep pengaman jangan dikencangkan
terlebih dahulu.

4. Nyalakan autoclave, diatur timerdengan

waktu minimal 15 menit pada suhu
121oC.

5. Tunggu sampai air mendidih sehingga

uapnya memenuhi kompartemen
autoclave dan terdesak keluar dari klep
pengaman. Kemudian klep pengaman
ditutup (dikencangkan) dan tunggu
sampai selesai. Penghitungan waktu 15’
dimulai sejak tekanan mencapai 2 atm.

6. Jika alarm tanda selesai berbunyi, maka

tunggu tekanan dalam kompartemen
turun hingga sama dengan tekanan
udara di lingkungan (jarum
pada preisure gauge menunjuk ke angka
nol). Kemudian klep-klep pengaman
dibuka dan keluarkan isi autoclave
dengan hati-hati.

Untuk memindahkan atau Jarum Ose disentuhkan pada bagian mikrobia

mengambil koloni suatu kemudian menggosokkan pada kaca preparat
2. Jarum Ose
mikrobia ke media yang akan untuk diamati.
digunakan kembali.
Enkas Sebagai tempat penanaman Pengerjaan sampel dengan aseptis dan menekan
3. mikroba. udara bebas.
 1. Hubungkan kabel power ke stop kontak.

2. Putar tombol power ke arah kiri (lampu

power hijau menyala).

3. Atur suhu dalam incubator dengan

menekan tombol set.

4. Sambil menekan tombol set, putarlah

Tempat menyimpan hasil tombol di sebeklah kanan atas tombol
4. Inkubator
penanaman mikroba. set hingga mnencapai suhu yang di
inginkan.

5. Setelah suhu yang diinginkan selesai

diatur, lepaskan tombol set.

6. Inkubator akan menyesuaikan setingan

suhu secara otomatis setelah beberapa
menit.

Magnetik Untuk menghomogenkan

5. Stirer suatu larutan dengan 1. Tombol logam untuk menghidupkan
pengadukan. alat.

2. Ambil stirer ( batang magnet) dan

masukkan pada larutan (di tempatkan
dalam erlenmeyer/ beaker glass) yang
akan di homogenkan.

3. Letakkan tepat di bagian tengah papan

besi dengan hati-hati.

4. Ubah tombol di sebelah kanan untuk

mengatur kecepatan( lihat tanda panah).

5. Ubah tombol di sebelah kiri untuk

mengatur suhu.

6. Waktu penggunaan di sesuaikan dengan

kebutuhan.

Menimbang bahan yang akan
Timbangan digunakan dalam praktikum
6.
Analitik dengan tingkat ketelitian yang
tinggi.
Untuk mengaduk senyawa
7. Fortex kimia yang ada dalam tabung
reaksi atau wadah.
Untuk menampung larutan,
8. Erlenmeyer
bahan atau cairan.
Tabung Wadah untuk mereaksikan
9. Reaksi dua atau lebih larutan/ bahan
kimia. Wadah pengembangan
mikroba, misalnya dalam
pengujian jumlah bakteri.
7. Setelah selesai, tombol kecepatan dan
suhu di-0 kan kemudian matikan alat.
8. Ambil batang magnet dari larutan yang
telah homogen,cuci dan letakkan
kembali di atas papan besi.
1. Meletakkan bahan pada timbangan
tersebut.
2. Melihat angka yang tertera pada layar,
dan angka itu merupakan berat dari
bahan yang ditimbang.
1. Tabung reaksi diletakkan pada lubang
tempat tabung.
2. Menekan tombol power hingga tempat
meletakkan tabung bergerak. Dengan
adanya tegangan yang diberikan, maka
tabung reaksi yang berisi larutan akan
tercampur rata.
1. Menyiapkan Erlenmeyer yang sudah
bersih.
2. Isi dengan benda cair dengan jumlah
besar dan berskala.
1. Sterilisasikan alat yang akan digunakan
untuk melakukan percobaan.
2. Masukkan tabung reaksi yang telah
disterilkan pada rak tabung reaksi.
3. Masukkan bahan yang akan dilarutkan
pada tabung reaksi.

Sebagai wadah penyimpanan
10. Cawan Petri
dan pembuatan kultur media.
Alumunium Sebagai penutup
11.
Foil Erlenmeyer/tabung reaksi.
Menutup wadah (cawan petri)
12. Plastic Wrap yang sudah berisi media
yang akan diteliti.
Jangka Untuk mengukur panjang
13. Sorong suatu benda dengan ketelitian
hingga 0,1 mm.
1. Meletakan medium di dalam cawan
petri.
2. Menutup Cawan petri dengan penutup
cawan.
1. Ambil aluminium foil secukupnya.
2. Letakkan pada bibir Erlenmeyer maupun
tabung reaksi.
3. Rekatkan sampai tertutup rapat.
1. Mengambil plastic wrap secukupnya.
2. Menutupkan pada cawan petri yang
berisi media (bakteri) rekatkan sampai
kencang.
1. Hal pertama yang kita lakukan adalah
melepaskan pengunci.
2. Memasangkan dan menggeserkan
rahang geser hingga bola mini terjepit
diantara rahang geser dan rahang tetap,
lalu mengunci rahang geser.
3. Amati skala nonius dan mencari garis
pada skala nonius yang segaris dengan
garis skala pada skala utama. Pada
contoh ini, kita mendapatkan angka 40
(atau 0,4 mm).
4. Amati skala utam dan cari garis pada
skala utama yang terdekat dengan garis
0 pada skala nonius. Pada contoh ini,
 kita mendapatkan angka 32 mm.

5. Jumlahkan hasilyang kita dapatkan dari

skala utama dan skala nonius, yaitu 32
mm + 0,44 mm = 32,4 mm

1. Hubungkan Kabel Power ke sumber

listrik.

2. Tekan tombol di sebelah kiri belakang

sampai lampu colony counter menyala
dan stabil.

3. Letakkan cawan petri dengan posisi

terbalik.

4. Tekan tombol set agar angka pada

Colony Untuk menghitung jumlah display menunjukkan angka 0.
14.
Counter koloni mikroba.
5. Hitung jumlah colony mikroba dengan
menekan koloni yang terlihat.

6. Jumlah yang tertera pada display

menunjukkan jumlah koloni yang telah
di hitung.

CATATAN : Jika penggunaan memerlukan

waktu yang lama, colony counter harus sering di
matikan.

Mikropipet Memindahkan cairan yang

15. bervolume cukup kecil,
biasanya kurang dari 1000 µl. 1. Sebelum digunakan Thumb
Knobsebaiknya ditekan berkali-kali
untuk memastikan lancarnya mikropipet.

2. Masukkan Tip bersih ke dalam Nozzle /

ujung mikropipet.

3. Tekan Thumb Knob sampai hambatan

 pertama / first stop, jangan ditekan lebih
ke dalam lagi.

4. Masukkan tip ke dalam cairan sedalam

3-4 mm.

5. Tahan pipet dalam posisi vertikal

kemudian lepaskan tekanan dari Thumb
Knob maka cairan akan masuk ke tip.

6. Pindahkan ujung tip ke tempat

penampung yang diinginkan.

7. Tekan Thumb Knob sampai hambatan

kedua / second stopatau tekan
semaksimal mungkin maka semua cairan
akan keluar dari ujung tip.

8. Jika ingin melepas tip putar Thumb

Knob searah jarum jam dan ditekan
maka tip akan terdorong keluar dengan
sendirinya, atau menggunakan alat
tambahan yang berfungsi mendorong tip
keluar.

Tip / Ujung Sebagai tempat untuk cairan

16. Mikropipet dalam ukuran 1µl sampai 20
µl. 1. Masukkan Tip bersih ke dalam Nozzle /
ujung mikropipet.

2. Tekan Thumb Knob sampai hambatan

pertama / first stop, jangan ditekan lebih
ke dalam lagi.

3. Masukkan tip ke dalam cairan sedalam

3-4 mm.

4. Tahan pipet dalam posisi vertikal

kemudian lepaskan tekanan dari Thumb
Knob maka cairan akan masuk ke tip.

5. Pindahkan ujung tip ke tempat

penampung yang diinginkan.
 6. Tekan Thumb Knob sampai hambatan
kedua / second stop atau tekan
semaksimal mungkin maka semua cairan
akan keluar dari ujung tip. Jika ingin
melepas tip putar Thumb Knob searah
jarum jam dan ditekan maka tip akan
terdorong keluar dengan sendirinya, atau
menggunakan alat tambahan yang
berfungsi mendorong tip keluar.

Untuk mengambil benda

dengan menjepit misalnya Bahan yang akan diambil, dijepit dengan pinset
17. Pinset
saat memindahkancakram yang tengah-tengahnya ditekan.
antibiotik.
Tempat penyimpanan tabung
Rak Tabung Meletakkan tabung reaksi tegak lurus dalam
18. reaksi agar posisi tabung
Reaksi jumlah banyak.
tetap tegak.

Untuk memanaskan medium,

1. Menyalakan Bunsen.
mensterilkan jarum inokulasi
19. Bunsen dan alat-alat yang terbuat dari
2. Memanaskan alat-alat tersebut di atas
platina dan nikrom seperti
api sampai pijar.
jarum platina dan ose

Alat sterilisasi dengan oven

Paper Dish / yang terbuat dari kertas saring 1. Sampel dicelupkan ke dalam paper dish.
20.
Blank Dish dan di celupkan kedalam
cairan antibiotik. 2. Mensterilkan dengan pemanasan

Reference :

Benson. 2001. Microbiological application lab manual, 8th ed.

Black, J. G. 2008. Microbiology, 7th ed.

Campbell, N. A. & J. B. Reece. 2009. Biology, 8th ed.

Cappuccino, J. G. & N. Sherman. 2002. Microbiology: A laboratory manual.

Collins, C. H. & P. M. Lyne. 2004. Collins & Lyne’s microbiological methods.

Harley & Prescott. 2002. Laboratory exercises in microbiology, 5th ed.

Patching, J. W. & A. H. Rose. 1970. The Effects and control of temperature. Dalam: Norris, J. R.
& D. W. Ribbons (eds.). 1970. Methods in microbiology volume 2.

Morello, J. A., P. A. Granato & H. E. Mizer. 2003. Laboratory manual and workbook in
microbiology: Applications to patient care.

Nester, E. W., D. G. Anderson, C. E. Roberts, N. N. Pearsall & M. T. Nester. 2004.

Microbiology: A human perspective, 4th ed.

Tortora, G. J., B. R. Funke & C. L. Case. 2010. Microbiology: An introduction, 10th.

Watt, B., J. G. Collee & R. Brown. 1976. Tests of performance of anaerobic jars.

Iklan

SOP Laboratorium Mikrobiologi

1. Setiap orang yang akan masuk ke laboratorium, sebelumnya harus mendapat ijin dari petugas
laboratorium dan mengisi daftar hadir/buku pengguna lab.
2. Petugas laboratorium harus memberikan induksi keselamatan terlebih dahulu kepada orang-
orang yang baru masuk ke dalam laboratorium.
3. Kenali jenis bahaya dan risiko , kimia, biologi, listrik, ergonomic, kebakaran, kejatuhan.
4. Gunakan jas Lab setiap akan memulai bekerja di laboratorium (untuk dosen, laboran, dan
praktikan)
5. Gunakan alat pelindung diri (APD), seperti : kacamata keselamatan/googles, sepatu tertutup,
sarung tangan/gloves, pelindung telinga (jika bekerja dalam kebisingan), pelindung wajah,
rambut diikat. Serta dilarang memakai sandal dan sepatu sandal
6. Pastikan sarung tangan yang digunakan sesuai dengan bahan kimia yang digunakan.
7. Pengguna Laboratorium (Dosen, Mahasiswa, Laboran, Peneliti) dilarang Makan dan Minum
di seluruh ruangan laboratorium. Bila perlu dilakukan kegiatan makan dan minum di
laboratorium dalam rangka praktikum atau penelitian, maka harus dilakukan di bawah
pengawasan oleh dosen yang bersangkutan dan dilakukan di area yang ditetapkan.
8. Dilarang memakai kosmetik/berdandan, merokok, menggunakan kontak lensa (terutama saat
dekat dengan bahan-bahan yang mudah terbakar), menggunakan perhiasan.
9. Dilarang berlari-larian dan bercanda di dalam laboratorium.
10. Bekerja dengan bahan kimia karsinogenik, toksik, dan embriotoksin, cryogenic,
herbisida/pestisida, peroxide, bahan kimia yang sensitive terhadap bahan organic dan goncangan,
sianida, asam fluoride dan tabung gas harus selalu mengacu pada MSDS (Material Safety Data
Sheet)
11. Jangan memipet larutan dengan menggunakan mulut, gunakanlah alat pipet mekanis secara
hati-hati
12. Ikuti semua prosedur penggunaan alat dan jangan gunakan peralatan atau instrument apapun
tanpa adanya pengawasan dari supervisor/dosen dan laboran, saat menggunakan peralatan
apapun di laboratorium.
13. Matikan semua peralatan listrik bila tidak digunakan.
14. Semua peralatan yang harus ditinggalkan menyala semalaman harus diberi label serta
dituliskan nama dan nomor telepon yang bisa dihubungi (diletakkan di sekitar alat dan dipintu
masuk laboratorium)
15. Pengguna lab harus melakukan “house keeping” yang baik, yaitu :
A. Menjaga kebersihan lantai dan jaga agar tetap kering
B. Jaga kebersihan dan kerapihan meja lab : bahan kimia dan peralatan yang tidak digunakan
jangan disimpan di atas meja lab.
C. Bersihkan tempat kerja dan peralatan setelah digunakan.
D. Pelihara kebersihan dan kerapihan bagian dalam dan sekitar lemari asam.
E. Amati semua tanda-tanda keselamatan setiap saat.
F. Bila meninggalkan laboratorium, matikan semua peralatan yang telah digunakan.
16. Cucilah kulit dengan air mengalir bila terkontaminasi oleh asam atau basa (jika perlu
mintalah pertolongan dokter)
17. Mata yang terkena bahan kimia harus dibilas dengan air mengalir selama 15 menit dan perlu
dicari pertolongan dokter secepatnya.
18. Segala tumpahan harus dilaporkan pada supervisor dan ditangani secepatnya. Material harus
segera dibersihkan dan disediakan tempat pembuangan untuk gelas dan material.
19. Cucilah tangan dan bukalah jas lab setelah menyelesaikan pekerjaan di laboratorium (dosen,
laboran, praktikan) sebelum meninggalkan labor
A. Bahaya
Bahaya adalah sumber, situasi, atau tindakan yang dapat berpotensi menimbulkan cidera atau
penyakit atau kombinasi keduanya. Bekerja di laboratorium mengandung bahaya berupa
kecelakaan. Kecelakaan yamg sering terjadi di laboratorium berupa kebakaran, kesakitan,
kematian dan kerugian akibat kecelakaan ataupun kerusakan peralatan laboratorium.

Untuk menghindari dan meminimalkan kemungkinan terjadinya potensi bahaya di tempat

kerja, Pengenalan potensi bahaya di tempat kerja merupakan dasar untuk mengetahui
pengaruhnya terhadap tenaga kerja, serta dapat dipergunakan untuk mengadakan upaya-upaya
pengendalian dalam rangka pencegahan penyakit akibat kerja yang mungkin terjadi. Secara
umum, potensi bahaya lingkungan kerja dapat berasal atau bersumber dari berbagai faktor, antara
lain : 1) faktor teknis, yaitu potensi bahaya yang berasal atau terdapat pada peralatan kerja yang
digunakan atau dari pekerjaan itu sendiri; 2) faktor lingkungan, yaitu potensi bahaya yang
berasal dari atau berada di dalam lingkungan, yang bisa bersumber dari proses produksi termasuk
bahan baku, baik produk antara maupun hasil akhir; 3)faktor manusia, merupakan potensi
bahaya yang cukup besar terutama apabila manusia yang melakukan pekerjaan tersebut tidak
berada dalam kondisi kesehatan yang prima baik fisik maupun psikis.

1. Jenis-jenis Bahaya dalam Laboratorium

Menurut Nuryani R (2005 : 142) jenis-jenis bahaya dalam laboratorium diantaranya adalah ;
a. Kebakaran, sebagai akibat penggunaan bahan-bahan kimia yang mudah terbakar seperti pelarut
organik, aseton, benzene, etil alcohol, etil eter, dll.
b. Ledakan, sebagai akibat reaksi eksplosif dari bahan-bahan reaktif seperti oksidator.
c. Keracunan bahan kimia yang berbahaya, seperti arsen, timbal, dll.
d. Iritasi yaitu peradangan pada kulit atau saluran pernapasan dan juga pada mata sebagai kontak
langsung dengan bahan-bahan korosif.
e. Luka pada kulit atau mata akibat pecahan kaca, logam, kayu dll
f. Sengatan listrik.

Beberapa sumber bahaya yang berpotensi menimbulkan kecelakaan kerja dapat dikategorikan
sebagai berikut:
a. Bahan Kimia.
Meliputi bahan mudah terbakar, bersifat racun, korosif, tidak stabil, sangat reaktif, dan gas yang
berbahaya. Penggunaan senyawa yang bersifat karsinogenik dalam industri maupun laboratorium
merupakan problem yang signifikan, baik karena sifatnya yang berbahaya maupun cara yang
ditempuh dalam penanganannya. Beberapa langkah yang harus ditempuh dalam penanganan
bahan kimia berbahaya meliputi manajemen, cara pengatasan, penyimpanan dan pelabelan,
keselamatan di laboratorium, pengendalian dan pengontrolan tempat kerja, dekontaminasi,
disposal, prosedur keadaan darurat, kesehatan pribadi para pekerja, dan pelatihan. Bahan kimia
dapat menyebabkan kecelakaan melalui pernafasan (seperti gas beracun),
serapan pada kulit (cairan), atau bahkan tertelan melalui mulut untuk padatan dan cairan. Bahan
kimia berbahaya dapat digolongkan ke dalam beberapa kategori yaitu, bahan kimia yang
eksplosif (oksidator, logam aktif, hidrida, alkil logam, senyawa tidak stabil secara
termodinamika, gas yang mudah terbakar, dan uap yang mudah terbakar).
Bahan kimia yang korosif (asam anorganik kuat, asam anorganik lemah, asam organik kuat,
asam organik lemah, alkil kuat, pengoksidasi, pelarut organik). Bahan kimia yang merusak paru-
paru (asbes), bahan kimia beracun, dan bahan kimia karsinogenik (memicu pertumbuhan sel
kanker), dan teratogenik.
Keracunan akibat penyerapan zat kimia beracun (toxic) baik melalui oral maupun
kulit. Keracunan dapat bersifat akut atau kronis. Akut artinya dapat memberikan akibat
yang dapat dilihat atau dirasakan dalam waktu singkat. Misalnya, keracunan fenol dapat
menyebabkan diare dan keracunan karbon monoksida dapat menyebabkan pingsan atau
kematian dalam waktu singkat. Kronis artinya pengaruh dirasakan setelah waktu yang
lama, akibat penyerapan bahan kimia yang terakumulasi terus menerus. Contoh menghirup
udara benzena, kloroform, atau karbon tetraklorida terus menerus dapat menyebabkan sakit hati
(lever). Uap timbal dapat menyebabkan kerusakan dalam darah.

Iritasi dapat berupa luka, atau peradangan pada kulit, saluran pernapasan dan mata akibat
kontak dengan bahan kimia korosif, seperti asam sulfat, gas klor, dll.
Luka kulit dapat terjadi sebagai akibat bekerja dengan alat gelas. Kecelakaan ini sering
terjadi pada tangan atau mata karena pecahan kaca.
 Luka bakar atau kebakaran disebabkan kurang hati-hati dalam menangani pelarut-
pelarut organik yang mudah terbakar, seperti eter dan etanol. Hal yang sama dapat diakibatkan
oleh peledakan bahan reaktif peroksida dan perklorat.

b. Aliran Listrik
Penggunaan peralatan dengan daya yang besar akan memberikan kemungkinan-kemungkinan
untuk terjadinya kecelakaan kerja. Beberapa faktor yang harus diperhatikan antara lain:
(1). Pemakaian safety switches yang dapat memutus arus listrik jika penggunaan melebihi limit/batas
yang ditetapkan oleh alat.

(2). Improvisasi terhadap peralatan listrik harus memperhatikan standar keamanan dari peralatan.

(3). Penggunaan peralatan yang sesuai dengan kondisi kerja sangat diperlukan untuk menghindari
kecelakaan kerja.

(4) Berhati-hati dengan air. Jangan pernah meninggalkan perkerjaan yang memungkinkan peralatan
listrik jatuh atau bersinggungan dengan air. Begitu juga dengan semburan air yang langsung
berinteraksi dengan peralatan listrik.

(5). Berhati-hati dalam membangun atau mereparasi peralatan listrik agar tidak membahayakan
penguna yang lain dengan cara memberikan keterangan tentang spesifikasi peralatan yang telah
direparasi.

(6). Pertimbangan bahwa bahan kimia dapat merusak peralatan listrik maupun isolator sebagai
pengaman arus listrik. Sifat korosif bahan kimia dapat menyebabkan kerusakan pada komponen
listrik.

(7). Perhatikan instalasi listrik jika bekerja pada atmosfer yang mudah meledak. Misalnya pada
lemari asam yang digunakan untuk pengendalian gas yang mudah terbakar.

(8). Pengoperasian suhu dari peralatan listrik akan memberikan pengaruh pada bahan isolator listrik.
Temperatur sangat rendah menyebabkan isolator akan mudah patah dan rusak. Isolator yang
terbuat dari bahan polivinil clorida (PVC) tidak baik digunakan pada suhu di bawah 0 ºC. Karet
silikon dapat digunakan pada suhu –50 ºC. Batas maksimum pengoperasian alat juga penting
untuk diperhatikan. Bahan isolator dari polivinil clorida dapat digunakan sampai pada suhu 75
ºC, sedangkan karet silikon dapat digunakan sampai pada suhu 150 ºC.
 c. Radiasi
Radiasi dapat dikeluarkan dari peralatan semacam X-ray difraksi atau radiasi internal yang
digunakan oleh material radioaktif yang dapat masuk ke dalam badan manusia melalui
pernafasan, atau serapan melalui kulit. Non-ionisasi radiasi seperti ultraviolet, infra merah,
frekuensi radio, laser, dan radiasi elektromagnetik dan medan magnet juga harus diperhatikan
dan dipertimbangkan sebagai sumber kecelakaan kerja.

d. Mekanik.
Walaupun industri dan laboratorium modern lebih didominasi oleh peralatan yang terkontrol oleh
komputer, termasuk di dalamnya robot pengangkat benda berat, namun demikian kerja mekanik
masih harus dilakukan. Pekerjaan mekanik seperti transportasi bahan baku, penggantian
peralatan habis pakai, masih harus dilakukan secara manual, sehingga kesalahan prosedur kerja
dapat menyebabkan kecelakaan kerja. Peralatan keselamatan kerja seperti helmet, sarung tangan,
sepatu, dan lain-lain perlu mendapatkan perhatian khusus dalam lingkup pekerjaan ini.
e. A p i.
Hampir semua laboratorium atau industri menggunakan bahan kimia dalam berbagai variasi
penggunaan termasuk proses pembuatan, pemformulaan atau analisis. Cairan mudah terbakar
yang sering digunakan dalam laboratorium atau industri adalah hidrokarbon. Bahan mudah
terbakar yang lain misalnya pelarut organik seperti aseton, benzen, butanol, etanol, dietil eter,
karbon disulfida, toluena, heksana, dan lain-lain. Para pekerja harus berusaha untuk akrab dan
mengerti dengan informasi yang terdapat dalam Material Safety Data Sheets (MSDS). Dokumen
MSDS memberikan penjelasan tentang tingkat bahaya dari setiap bahan kimia, termasuk di
dalamnya tentang kuantitas bahan yang diperkenankan untuk disimpan secara aman.
Sumber api yang lain dapat berasal dari senyawa yang dapat meledak atau tidak stabil. Banyak
senyawa kimia yang mudah meledak sendiri atau mudah meledak jika bereaksi dengan senyawa
lain. Senyawa yang tidak stabil harus diberi label pada penyimpanannya. Gas bertekanan juga
merupakan sumber kecelakaan kerja akibat terbentuknya atmosfer dari gas yang mudah terbakar.
Kebakaran merupakan salah satu bahaya di laboratorium. Berdasarkan klasifikasi oleh NFPA
(National Fire Protection Agency), api dapat diklasifikasikan menjadi:
1. Kelas A, yaitu jenis api biasa yang berasal dari kertas, kayu, atau plastic yang terbakar
2. Kelas B, yaitu jenis api yang ditimbulkan oleh zat mudah terbakar dan mudah menyala seperti
bensin, kerosin, pelarut organic umum yang digunakan di laboratorium.
3. Kelas C, yaitu jenis api yang timbul dari peralatan listrik
4. Kelas D, yaitu jenis api yang timbul dari logam mudah menyala seperti magnesium, titanium,
kalium, dan natrium.

Jika terjadi kebakaran, alat pemadam kebakaran (fire extinguisher) yang digunakan harus
disesuaikan dengan penyebab timbulnya api. Beberapa jenis pemadam kebakaran yang dapat
digunakan adalah:
1. Air (water extinguisher); Sangat cocok untuk api kelas A, tetapi tidak cocok untuk api kelas B,
C, dan D.
2. Uap air (watermist extinguisher); Sangat cocok untuk api kelas A dan C
3. Bahan kimia kering (dry chemical extinguisher); Sangat berguna untuk api kelas A, B, dan C
dan merupakan pilihan terbaik untuk semua jenis kebakaran. Jenis dray chemical
extinguisher yang digunakan adalah:
a) Untuk api kelas B dan C, bahan kimia yang digunakan mengandung natrium atau kalium
karbonat
b) Untuk api kelas A, B, dan C, bahan kimia yang digunakan mengandung ammonium fosfat
4. Karbondioksida (CO2 extinguisher); Dipergunakan bagi api kelas B dan C pemadaman
kebakaran dari karbondioksida lebih baik dari dry chemichhal karena tidak meninggalkan zat
berbahaya sesudahnya. Paling baik digunakan untuk api yang berasal dari listrik.
5. Personal Protective Equipment (PPE); Perlengkapan pelindung individu (personal protective
equipment) yang umumnya harus digunakan adalah jas laboratorium, sarung tangan, masker,
sepatu pengaman, dan pelindung mata.

f. Suara (kebisingan).
Sumber kecelakaan kerja yang satu ini pada umumnya terjadi pada hampir semua industri, baik
industri kecil, menengah, maupun industri besar. Generator pembangkit listrik, instalasi
pendingin, atau mesin pembuat vakum, merupakan sekian contoh dari peralatan yang diperlukan
dalam industri. Peralatan-peralatan tersebut berpotensi mengeluarkan suara yang dapat
menimbulkan kecelakaan kerja dan gangguan kesehatan kerja. Selain angka kebisingan yang
 ditimbulkan oleh mesin, para pekerja harus memperhatikan berapa lama mereka bekerja dalam
lingkungan tersebut. Pelindung telinga dari kebisingan juga harus diperhatikan untuk menjamin
keselamatan kerja.

Laboratorium menghadapi beragam resiko, dari dalam laboratorium maupun dari luar
laboratorium. Beberapa resiko mungkin hanya mempengaruhi laboratorium itu sendiri, tapi
beberapa resiko bisa mempengaruhi perusahaan atau lembaga dimana laboratorium itu berada,
atau bahkan mempengaruhi masyarakat secara umum.

g. Keadaan Darurat Skala Besar dan Situasi Sensitif

Ada banyak jenis kejadian skala besar dan situasi sensitif yang bisa mempengaruhi perusahaan
atau lembaga sampai ketingkat operasional perusahaan,misalnya :
1) Kebakaran
2) Banjir
3) Gempa Bumi
4) Pemadaman Listrik
5) Tumpahan atau lepasnya bahan berbahaya
6) Peneliti atau penelitian berbau politis atau kontroversi
7) Hilangnya bahan atau peralatan laboratorium
8) Hilangnya data atau sistem komputer

h. Pelanggaran Keamanan
Pelanggaran keamanan secara sengaja atau tidak, bisa dilakukan oleh petugas, pegawai atau
orang luar. Beberapa pelanggaran keamanan, meliputi ;
Pencurian atau penyalahgunaan peralatan bernilai tinggi
1) Pencurian atau penyalah gunaan bahan kimia untuk kegiatan ilegal
2) Pelepasan bahan kimia berbahaya secara sengaja atau tidak
3) Eksperimentasi laboratorium secara tidak sah

i. Bahaya Hayati
Bahaya hayati merupakan masalah di laboratorium yang menangani mikroorganisme atau bahan
yang terkontaminasi mikroorganisme.
Bahaya bahaya ini muncul biasanya muncul di laboratorium penelitian kimia dan penyakit
 menular, dan tidak menutup kemungkinan muncul di laboratorium mikrobiologi.
Penilaian resiko bahan hayati berbahaya perlu mempertimbangkan beberapa faktor, seperti :
1) organisme yang dimanipulasi
2) perubahan yang dilakukan terhadap organisme tersebut
3) aktifitas yang akan dilakukan dengan organisme tersebut

j. Limbah Berbahaya
Hampir setiap laboratorium menghasilkan limbah. Limbah adalah bahan yang dibuang atau
hendak dibuang, atau tidak lagi berguna sesuai peruntukannya.
Limbah juga meliputi item seperti bahan bekas laboratorium sekali pakai, media filter, larutan
cair, dan bahan kimia berbahaya.
Limbah dianggap berbahaya jika memiliki salah satu sifat berikut ini :
1) Bisa menyulut api
2) Korosif
3) Reaktif
4) Beracun

k. Bahaya Fisik
Beberapa kegiatan di laboratorium menimbulkan resiko fisik bagi petugas karena zat atau
peralatan yang digunakan, seperti misalnya :
1) Gas yang dimampatkan
2) Kriogen tidak mudah menyala
3) Reaksi tekanan tinggi
4) Kerja vakum
5) Bahaya frekuensi radio dan gelombang mikro
6) Bahaya listik
Petugas di laboratorium juga menghadapi bahaya di tempat kerja umum akibat kondisi atau
aktifitas di laboratorium, seperti :
1) Luka terpotong
2) Tergelincir
3) Tersandung
4) Terjatuh

2. Simbol-simbol bahan kimia berbahaya

Simbol bahaya adalah simbol dikenali dirancang untuk memperingatkan tentang bahan
berbahaya, lokasi, atau benda, termasuk arus listrik, racun, dan hal-hal lain. Penggunaan simbol-
simbol bahaya sering diatur oleh hukum dan diarahkan oleh organisasi standar. Simbol bahaya
mungkin muncul dengan warna yang berbeda, latar belakang, perbatasan dan informasi
tambahan dalam rangka untuk menentukan jenis bahaya.

Simbol bahaya digunakan untuk pelabelan bahan-bahan berbahaya menurut Peraturan tentang
Bahan Berbahaya (Ordinance on Hazardeous Substances).
Peraturan tentang Bahan Berbahaya (Ordinance on Hazardeous Substances) adalah suatu aturan
untuk melindungi/menjaga bahan-bahan berbahaya dan terutama terdiri dari bidang keselamatan
kerja. Arah Peraturan tentang Bahan Berbahaya (Ordinance on Hazardeous Substances) untuk
klasifikasi, pengepakan dan pelabelan bahan kimia adalah valid untuk semua bidang, area dan
aplikasi, dan tentu saja, juga untuk lingkungan, perlindungan konsumer dan kesehatan manusia.
Bahan kimia berbahaya diberi lambang sbb.
Eksplosif (meladak). Meledak pada kondisi tertentu. Contoh amonium nitrat dan nitroselulosa.
Hindari benturan, gesekan, loncatan, panas.
Toxic (beracun). Bahaya bagi keselamatan bila terisap, tertelan atau kontak dengan kulit, dan
dapat mematikan. Contoh arsen triklorida dan merkuri klorida. Hindari kontak atau masuk ke
dalam tubuh. Segera berobat ke dokter bila kemungkinan keracunan.

Zat yang mudah terbakar. Contoh butana, propana, eter dan etanol. Hindari udara dan sumber
api.

Zat yang secara spontan terbakar apabila kena air. Contoh logam natrium. Hindari kontak
dengan air

Zat yang secara spontan terbakar. Contoh posfor, alumunium alkil fosfor. Hindari kontak dengan
udara.
Oksidator. Zat yang dapat membakar zat lain atau penyebab timbulnya api. Contoh hidrogen
peroksida dan kalium perklorat. Hindari panas serta bahan yang mudah terbakar.
Kerusakan kecil pada tubuh atau iritasi terhadap kulit, mata, dan alat pernapasan. Contoh piridin,
amoniak, dan benzil klorida. Hindari kontak dengan tubuh atau penghirupan

Bahan kimia bersifat radioaktif

Korosif atau merusak jaringan atau tubuh manusia. Contoh asam sulfat dan fenol. Hindari
kontak dengan kulit dan mata

Tabel 1. Bahan beracun

c. Kegiatan laboratorium yang dapat menimbulkan kecelakaan.

Sumber bahaya lain yang terjadi di laboratorium dapat diakibatkan oleh kesalahan teknik
bekerja. Beberapa contoh yang berhubungan dengan aspek ini adalah:
 Banyak peralatan yang tidak diperlukan pada meja praktikum. Simpanlan kelebihan
peralatan tersebut pada lemari alat.
Mengarahkan tabung reaksi yang sedang dipanaskan ke badan atau teman didekatnya.
Melubangi sumbat karet tanpa dibasahi dahulu dengan air atau menggunakan
tumpuannya menggunakan telapak tangan.
Memasukkan pipa kaca ke dalam sumbat karet tanpa mengunakan lap, tanpa dibasahi air, dan
cara memegang pipa kacanya jauh dari permukaan karet
Memindahkan zat ke botol pereaksi bermulut kecil tanpa menggunakan corong, dll.
(Kadarohman, 2007)

B. Resiko
Risiko adalah gabungan dari kemungkinan terjadinya bahaya atau paparan dan keparahan luka
atau gangguan kesehatan yang dapat disebabkan oleh kejadian atau paparan.

1. Cara Mengidentikasi Bahaya Menggunakan Konsep “Penilaian Resiko”

Menurut John Ridley (2008 : 47- 48), cara pencegahan bahaya menggunakan konsep “Penilaian
Resiko” bertujuan untuk menghilangkan, mengurangi, dan mengendalikan bahaya sebelum
terjadi kecelakaan yang dapat mengakibatkan cedera tubuh maupun kerusakan fisik sarana
laboratorium. Adapun langkah-langkahnya adalah sbb.:
a. Mengidentifikasi tugas dan proses
b. Mengidentifikasi macam-macam bahaya
c. .Menghilangkan atau mengurangi bahaya hingga minimum
d. .Mengevaluasi resiko, dan mempredeksi tingkat resiko
e. .Mengembangkan strategi pencegahan
f. .Melakukan pelatihan metode kerja baru
g. .Mengimplementasikan upaya pencegahan
h. .Memonitor kerja
i. . Melakukan kajian ulang secara berkala.

Inspeksi Tingkat Masalah sesuai dengan Penilaian Faktor Resiko (John Ridley, 2006) :
a. Kondisi tempat kerja
1. Temperature
2. Penerangan
3. Kebersihan
4. Asap & debu
5. Penataan yang aman
b. Fasilitas kenyamanan
1. P3K
2. Toilet
3. Kantin
c. Tindakan pencegahan kebakaran
1. Alat pemadamapi
2. Rute-rute evakuasi
3. Alarm api
4. Area lokasi untuk merokok

d. Alat-alat permesinan / alat-alat listrik

1. Arus pemutus listrik
2. Alat pengaman mesin
3. Penggunaan APD (Alat Pelindung Diri)
e. Akses jalan dan pintu emergency
1. Permukaan lantai tidak licin
2. Penerangan yang cukup
3. Pintu mudah dibuka
4. Tangga darurat

f. Pengelolaan Limbah Laboratorium

Asal limbah dari :
1. Bahan baku kadaluwarsa
2. Bahan habis pakai
3. Produk proses di laboratorium
Klasifikasi limbah berdasarkan sifat bahayanya :
1. Korosif
2. Reaktif
3. Mudah terbakar
4. Beracun

Tabel 2. Klasifikasi limbah kimia berdasarkan sifat tingkat bahaya

 Ringan Berat Sangat Beracun
Asam astat Aseton Benzene
Alumunium klorida Kloro benzene Cadmium klorida
Besi klorida Kobalt nitrat Kloroform
Magnesium klorida Tembaga sulfat Nikel sulfat
Metanol Timah hitam klorida Kalium kromat

Penilaian risiko dilakukan dengan menggunakan pendekatan FMEA (Failure Mood Effect and
Analysis). Setelah validasi dari tahap sebelumnya diperoleh, kemudian dilakukan penilaian
terhadap masing-masing kejadian risiko. Penilaian dilakukan melalui kuesioner yang diberikan
kepada pihak Laboratorium.
Penilaian adalah seseorang yang sangat memahami kondisi keselamatan dan kesehatan kerja
yang terjadi di perusahaan. Ada 3 hal yang dinilai yaitu S (severity), O (occurance), D
(detection) untuk masing-masing kejadian risiko yang sudah teridentifikasi. Perhitungan nilai
RPN (Risk Priority Number) dari masing-masing kejadian risiko dilakukan dengan mengalikan
antara nilai S, O, dan D.
Nilai RPN kemudian diurutkan berdasarkan nilai tertinggi. Faktor risiko yang memiliki
kejadian risiko dengan nilai RPN tertinggi ditetapkan sebagai faktor risiko yang dominan.

Berikut ini adalah skala yang digunakan untuk penilaian S (severity), O (occurance), D
(detection) dan RPN (Risk Priority Number).

Tabel 3. Nilai severity berdasarkan keparahan dampak yang diakibatkan

Skala Definisi
1 Jika tidak ada dampak yang diakibatkan sangat kecil bagi manusia,
proses produksi, property atau menyebabkan perawatan fisik setidaknya
dalam 15 menit.
2 Jika terjadi luka kecil tetapi cukup hanya dirawat oleh tim p3k dan /
menyebabkan satu hari kerja hilang atau kurang.
Jika dampak yang terjadi mengakibatkan gangguan kesehatan dan dapat
disembuhkan dalam waktu satu minggu atau kurang.
Jika dampak yang terjadi menyebabkan interupsi satu jam pada proses
produks, kerusakan property dapat diperbaiki dalam satu hari dan
mengacu pada penilaian kerugian skala2
3 Jika terjadi luka berat dan / menyebabkan sedikitnya dua hari kerja
hilang atau kurang, interupsi proses produksi kurang dari setengah shift
kerja atau penurunan kapasitas produksi, kerusakan property dapat
 diperbaiki kurang dari satu minggu dan mengacu pada penilaian
kerugian skala 3
Jika dampak yang terjadi mengakibatkan gangguan kesehatan dan dapat
disembuhkan dalam waktu satu minggu sampai enam bulan.
4 Jika terjadi luka berat dan membutuhkan perawatan dirumah sakit dan
atau menyebabkan hari kerja hilang lebih dari dua hari.
Jika dampak yang terjadi mengakibatkan gangguan kesehatan yang tidak
dapat disembuhkan dan menyebabkan kematian.
Jika dampak yang terjadi mengakibatkan kecacatan sementara, interupsi
proses produksi dalam setengah sampai satu shift kerja, kerusakan
properti yang dapat diperbaiki dalam satu minggu dan mengacu pada
penilaian kerugian skala4.
5 Jika dampak yang terjadi mengakibatkan kecacatan permanen atau
parsial atau bahkan kematian, kerusakan total terhadap property,
interupsi proses produksi setidaknya satu hari kerja (2 shift kerja).

(Sumber : Sugiarto, 2009)

Tabel 4. Resiko dan bahaya di laboratorium

NO Kelompok Penyebab Resiko (Efek)

1 Alat-alat gelas yang mudah pecah Luka gores

Alat-alat listrik seperti: kompor
2 listrik, oven, lampu pemanas, lampu menyebabkan terjadinya sengatan listrik.
UV

Penghirupan uap asam sulfat Iritasi pada hidung dan tenggorokkan

3
Kontak langsung dengan NaOH Luka bakar
4
Tertusuk Luka tusuk
5
Penghirupan 20-40 ppm asam Keracunan
6 sianida

Terpeleset Memar
7
Mengangkat beban diluar batas Cedera punggung
8 kemampuan

Kebisingan Stress
9
Terdapat 3 unsur bersama-sama Timbulnya kebakaran dengan akibat luka
10 yaitu: oksigen, bahan yang mudah bakar dari ringan sampai berat
terbakar dan panas bahkan kematian
 Terinfeksi Penularan
11
Terkena asam sulfat di mata Kebutaan
12
Tertelannya asam asetat Gangguan saluran usus
13

2. Pengendalian Resiko
Sistem Manajemen Kesehatan dan Keselamatan Kerja adalah pencapaian tujuan yang sudah
ditentukan sebelumnya, dengan mempergunakan bantuan orang lain (G.Terry). Untuk mencapai
tujuan tersebut, dia membagi kegiatan atau fungsi manajemen menjadi :
a. Planning /(perencanaan)
b. Organizing/ (organisasi)
c. Actuating /(pelaksanaan)
d. Controlling /(pengawasan)

a. Planning/ (Perencanaan)
Fungsi perencanaan adalah suatu usaha menentukan kegiatan yang akan dilakukan di masa
mendatang guna mencapai tujuan yang telah ditetapkan. Dalam hal ini adalah keselamatan dan
kesehatan kerja di laboratorium. Dalam perencanaan, kegiatan yang ditentukan meliputi :
1. apa yang dikerjakan
2. bagaimana mengerjakannya
3. mengapa mengerjakan
4. siapa yang mengerjakan
5. kapan harus dikerjakan
6. di mana kegiatan itu harus dikerjakan

Kegiatan laboratorium sekarang tidak lagi hanya di bidang pelayanan, tetapi sudah mencakup
kegiatan-kegiatan di bidang pendidikan dan penelitian, juga metoda-metoda yang dipakai makin
banyak ragamnya; semuanya menyebabkan risiko bahaya yang dapat terjadi dalam laboratorium
makin besar. Oleh karena itu usaha-usaha pengamanan kerja di laboratorium harus ditangani
secara serius oleh organisasi keselamatan kerja laboratorium.

b. Organizing/ (Organisasi)
 Organisasi keselamatan dan kesehatan kerja laboratorium dapat dibentuk dalam beberapa
jenjang, mulai dari tingkat laboratorium daerah (wilayah) sampai ke tingkat pusat atau nasional.
Keterlibatan pemerintah dalam organisasi ini baik secara langsung atau tidak langsung sangat
diperlukan. Pemerintah dapat menempatkan pejabat yang terkait dalam organisasi ini di tingkat
pusat (nasional) dan tingkat daerah (wilayah), di samping memberlakukan Undang-Undang
Keselamatan Kerja. Di tingkat daerah (wilayah) dan tingkat pusat (nasional) perlu dibentuk
Komisi Keamanan Kerja Laboratorium yang tugas dan wewenangnya dapat berupa :
1. menyusun garis besar pedoman keamanan kerja laboratorium
2. memberikan bimbingan, penyuluhan, pelatihan pelaksana- an keamanan kerja laboratorium
3. memantau pelaksanaan pedoman keamanan kerja laboratorium
4. memberikan rekomendasi untuk bahan pertimbangan penerbitan izin laboratorium
5. mengatasi dan mencegah meluasnya bahaya yang timbul dari suatu laboratorium
6. dan lain-lain.

Perlu juga dipikirkan kedudukan dan peran organisasi /Cermin Dunia Kedokteran No. 154, 2007
5/ background image Manajemen keselamatan kerja profesi (PDS-Patklin) ataupun organisasi
seminat (Patelki, HKKI) dalam kiprah organisasi keselamatan dan kesehatan kerja laboratorium
ini. Anggota organisasi profesi atau seminat yang terkait dengan kegiatan laboratorium dapat
diangkat menjadi anggota komisi di tingkat daerah (wilayah) maupun tingkat pusat (nasional).
Selain itu organisasi-organisasi profesi atau seminat tersebut dapat juga membentuk badan
independen yang berfungsi sebagai lembaga penasehat atau Panitia Pembina Keselamatan dan
Kesehatan Kerja Laboratorium.

c. Actuating/ (Pelaksanaan)
Fungsi pelaksanaan atau penggerakan adalah kegiatan mendorong semangat kerja bawahan,
mengerahkan aktivitas bawahan, mengkoordinasikan berbagai aktivitas bawahan menjadi
aktivitas yang kompak (sinkron), sehingga semua aktivitas bawahan sesuai dengan rencana yang
telah ditetapkan sebelumnya. Pelaksanaan program kesehatan dan keselamatan kerja
laboratorium sasarannya ialah tempat kerja yang aman dan sehat. Untuk itu setiap individu yang
bekerja dalam laboratorium wajib mengetahui dan memahami semua hal yang diperkirakan akan
dapat menjadi sumber kecelakaan kerja dalam laboratorium, serta memiliki kemampuan dan
pengetahuan yang cukup untuk melaksanakan pencegahan dan penanggulangan kecelakaan kerja
tersebut. Kemudian mematuhi berbagai peraturan atau ketentuan dalam menangani berbagai
 spesimen reagensia dan alat-alat. Jika dalam pelaksanaan fungsi penggerakan ini timbul
permasalahan, keragu-raguan atau pertentangan, maka menjadi tugas manajer untuk mengambil
keputusan penyelesaiannya.

d. Controlling/ (Pengawasan)
Fungsi pengawasan adalah aktivitas yang mengusahakan agar pekerjaan-pekerjaan terlaksana
sesuai dengan rencana yang ditetapkan atau hasil yang dikehendaki. Untuk dapat menjalankan
pengawasan, perlu diperhatikan 2 prinsip pokok, yaitu :
1. adanya rencana
2. adanya instruksi-instruksi dan pemberian wewenang kepada bawahan.
Dalam fungsi pengawasan tidak kalah pentingnya adalah sosialisasi tentang perlunya disiplin,
mematuhi segala peraturan demi keselamatan kerja bersama di laboratorium. Sosialisasi perlu
dilakukan terus menerus, karena usaha pencegahan bahaya yang bagaimanapun baiknya akan
sia-sia bila peraturan diabaikan. Dalam laboratorium perlu dibentuk pengawasan labora- torium
yang tugasnya antara lain :
1. memantau dan mengarahkan secara berkala praktek- praktek laboratorium yang baik, benar
dan aman
2. memastikan semua petugas laboratorium memahami cara- cara menghindari risiko bahaya
dalam laboratorium
3. melakukan penyelidikan / pengusutan segala peristiwa berbahaya atau kecelakaan. 4.
mengembangkan sistem pencatatan dan pelaporan tentang keamanan kerja laboratorium
5. melakukan tindakan darurat untuk mengatasi peristiwa berbahaya dan mencegah meluasnya
bahaya tersebut
6. dan lain-lain.

3. Alat Pelindung Diri

Perlengkapan yang digunakan tergantung pada jenis pekerjaan, alat-alat, dan bahan yang
digunakan diantaranya:
a) Pelindung Mata
1) Pelindung mata digunakan pada semua area yang berpotensi untuk menghasilkan cipratan atau
luka pada mata. Tidak hanya berlaku bagi orang yang bekerja langsung, tetapi juga bagi orang
yang berada di area itu walaupun sementara.
2) Jenis pelindung mata yang diperlukan tergantung pada jenis bahaya. Untuk penanganan bahan
kimia secara umum, kaca mata pengaman dengan pelindung sudah cukup. Ketika ada resiko
cipratan bahan kimia, diperlukan google.
3) Bagi pengguna lensa kontak, sebaiknya kontaknya lensa tidak digunakan dilaboratorium, karena
jika larutan korosif memercikan ke mata, reflex alami untuk memejamkan mata akan
menyulitkan pengembalian kontak lensa. Selain itu, bahan plastic pembuat kontak lensa dapat
tertembus beberapa jenis uap yang ada dilaboratorium. Uap tersebut dapat terterjebak di
belakang lensa dan menyebabkan iritasi yang luas pada mata. Keberadaan lensa pun akan
mencegah air mata untuk menghapus iritan. Jika kontak lensa ingin tetap digunakan, maka harus
dilindungi dengan goggle yang didesain khusus untuk pengguna kontak lensa.

b) Sarung Tangan
1) Banyak materi berbahaya yang dapat terserap masuk ke dalam kulit. Oleh karena itu, sarung
tangan pelindung harus digunakan ketika kulit berpotensi terkena tumpahan atau kontaminasi.
2) Sarung tangan yang digunakan harus disesuaikan dengan jenis pekerjaan. Untuk bekerja dengan
larutan asam, alkali atau pelarut organic, sarung tangan dari karet alami, neoprene atau nitrile
yang sebaiknya digunakan. Untuk menangani onjek panas, sarung tangan yang digunakan harus
tahan panas sedangkan sarung tangan khusus harus digunakan untuk menagani objek yang
sangat dingin seperti nitrogen cair.
3) Sebelum digunakan, sarung tangan harus diperiksa terlebih dahulu jika terdapat bagian yang
luntur, sobek atau rusak. Sebelum dilepaskan, sarung tangan yang tidak dibuang dan akan
dipakai lagi harus dicuci seluruhnya baik dengan air atau dengan dengan air dan sabun.
4) Sarung tangan yang telah terkontaminasi harus dibuang secepatnya. Selalu cuci tangan segera
setelah membuang sarung tangan yang telah terkontaminasi dan lepaslah sarung tangan sebelum
meninggalkan tenpat kerja untuk mencegah kontaminasi pada gagang pintu telepon, sakelar
listrik, dan lain-lain.

c) Pakaian
1) Pakaian longgar atau sobek harus dihindari karena berpotensi untuk terbakar terkecuali
mengunakan jas laboratorium, absorpsi dan terkait pada mesin. Perhiasan yang menggantung dan
rambut panjan juga memiliki resiko yang serupa. Cincin atau perhiasan yang yang sulit
dilepaskan sebaiknya dihindai karena cairan yang korosif atau yang dapat mengiritasi dapat
mengiritasi kulit.
2) Jas laboratorium harus digunakan selama berada di laboratorium ketika terdapat infeksi atau
bahaya bahan kimia. Jas laboratorium dan perlengkapan pelindung lainnya jangan digunakan
diluar laboratorium untuk mencegah kontaminasi luar area laboratorium. Sepatu tertutup harus
digunakan selama berada di laboratorium karena sandal dan sepatu terbuka membuat kaki
berisiko untuk terkena tumpahan zat kimia yang mengiritasi atau korosif.
d) Masker
Masker digunakan sebagai penutup mulut dan hidung untuk menyaring partikel-partikel kimia
maupun bahan partikulat. Masker merupakan perlindungan terhadap masuknya bahan berbahaya
ke dalam tubuh melalui saluran pernafasan.

3. Tata Tertib di Laboratorium

Tata tertib laboratorium dapat dibedakan atas tata tertib umum dan tata tertib khusus. Tata tertib
umum adalah tata tertib yang berlaku bagi
semua orang yang bekerja di laboratorium baik itu siswa, guru ataupun pegawai lain yang
memasuki laboratorium. Tata tertib khusus menyangkut tata tertib yang berhubungan dengan
prosedur kerja dan
berlaku di kalangan tertentu misalnya para guru atau pimpinan sekolah dan tidak perlu diketahui
siswa.

Hal-hal yang perlu diatur dan dikemukakan dalam tata tertib umum berhubungan dengan :
a) Disiplin waktu melaksanakan dan mengikuti kegiatan laboratorium.
b) Cara berpakaian untuk bekerja di laboratorium.
c) Cara bertutur kata dan berperilaku di dalam laboratorium.
d) Barang bawaan yang boleh dan yang tidak boleh dibawa ke dalam dan luar laboratorium.
e) Prosedur peminjaman, pemakaian dan pengembalian alat-alat laboratorium.
f) Keselamatan kerja dan keselamatan alat-alat laboratorium.
g) Pemeliharaan keamanan, kebersihan dan kenyamanan laboratorium.
(Kemendikbud, 2011)

C. Pertolongan Pertama pada Kecelakaan

Pertolongan pertama (First Aid) di tempat kerja merupakan usaha pertolongan segera
kepada penderita sakit atau cedera di tempat kerja dengan penanganan medis dasar. Medis dasar
adalah tindakan perawatan berdasarkan ilmu kedokteran yang dapat dimiliki oleh awam atau
awam yang terlatih secara khusus. Batasannya adalah sesuai dengan sertifikat yang dimiliki oleh
Pelaku Pertolongan Pertama (First Aider).
First Aider tidak dapat menggantikan tenaga medis, tetapi hanya memberikan pertolongan awal
terhadap korban yang sakit atau cedera.
Tujuan pertolongan pertama di tempat kerja adalah :

1. Menyelamatkan jiwa di tempat kerja.

2. Memberikan rasa nyaman dan menunjang proses penyembuhan.

3. Mencegah terjadinya hal yang lebih buruk pada korban.

4. Menenangkan penderita atau korban yang terluka di tempat kerja.

Peranan First Aider sangat penting dalam keadaan darurat, mereka bertanggungjawab terhadap
beberapa hal, yaitu:

1. Melakukan identifikasi dan evaluasi keadaan, bahwa tindakannya tidak membahayakan

dirinya maupun orang lain.

2. Melakukan penilaian dengan baik sehingga penatalaksanaan penderita dapat dilakukan

sebaik-baiknya dan memastikan bahwa tidak ada yang terlewat, dengan cara melihat
bagaimana kondisinya, kemungkinan apa saja yang akan terjadi, dan bagaimana cara
mengatasinya.

3. Memberikan pertolongan segera, tepat, memadai, dengan mengingat bahwa korban bisa
saja mengalami lebih dari satu cedera, dan bahwa korban yang satu lebih perlu
diperhatikan dari pada yang lainnya.

4. Jangan menunda-nunda pengiriman korban ke tenaga medis atau rumah sakit sesuai
dengan tingkat keseriusan sakit atau cedera korban setelah diberikan pertolongan pertama
seperlunya.
Usaha yang dapat dilakukan oleh First Aider harus menekankan pada upaya:

1. Memelihara jalur udara bebas untuk masuk sistem pernafasan (Airway)

 2. Memulihkan kembali fungsi sistem pernafasan (Breathing)

3. Memulihkan kembali sistem sirkulasi darah yang cukup (Circulation)

Secara umum tahap yang harus dikerjakan dalam memberikan pertolongan pertama pada saat
datang di lokasi kejadian adalah :

1. Memastikan keselamatan penolong.

2. Penolong harus memperkenalkan diri bila memungkinkan, yaitu nama penolong, nama
organisasi/pekerjaan, permintaan izin untuk menolong kepada penderita atau orang
sekitar.

3. Menentukan keadaan umum kejadian dan mulai melakukan penilaian dini dari penderita.

4. Mengenali dan mengatasi cedera yang mengancam nyawa.

5. Menstabilkan penderita dan meneruskan pemantauan.

6. Meminta bantuan bila dianggap perlu.

7. Menghentikan pendarahan dengan cara menekan langsung di atas luka.

8. Jangan memberi apapun kepada korban lewat mulut bila korban tidak sadar atau setengah
sadar

9. Menenangkan kondisi korban dengan cara yang tepat dan penolong harus dalam keadaan
tenang pula.

10. Mengupayakan bantuan medis dengan cepat.

(Rizwan, 2008)

Santosa (2010) menyebutkan kecelakaan yang terjadi di laboratorium Fisika dapat

diakibatkan beberapa faktor dan penanggulangannya seperti berikut ini :
Jenis Kecelaakan Cara Pencegahannya Pertolongan yang Diberikan
Syok Listrik Tempelkan gambar orang Matikan sumber listrik, cabut
menggunakan sandal atau sambungan sumber, jangan
 sepatu saat memegang korban kesetrum,
menghubungkan listrik tenangkan korban, dan bawa
ke sumbernya di dinding- ke dokter
dinding laboratorium
Kebakaran Jauhkan zat yang mudah Basahi handuk dan kurungkan
terbakar dari api ke atas api yang menyala,
siapkan tabung pemadam
kebakaran. Dan jauhkan
bahan-bahan lain yang mudah
terbakar dari api
Terhirup gas beracun - Jangan menghirup gas Usahakan pasien untuk
sembarangan muntah, bawa ke tempat yang
- Gunakan masker jika tenang dan udara bersih,
hendak praktikum kimia berikan minum air hangat

Tersiram zat kimia - Jangan letakkan zat Jangan langsung dilap bagian
kimia di tepi meja kulit yang terkena cairan.
- Gunakan pakaian khusus Alirkan air ke atas bagian kulit
ketika akan bekerja yang terkena tumpahan.
dengan bahan-bahan
kimia
- Bacalah dengan teliti
label zat yang ada di
botol