LAPORAN PRAKTIK KERJA INDUSTRI DI PT Biofarma

(PERSERO) BANDUNG – JAWA BARAT

(Pembuatan Preparat Histopatologi Untuk Uji Neurovirulensi)

Laporan Praktik Kerja Industri sebagai Syarat Mengikuti Ujian Akhir

Tahun Ajaran 2018/2019.

Oleh
Primatantra Nugraha 15.61.08174

KEMENTRIAN PERINDUSTRIAN REPUBLIK INDONESIA

Badan Pengembangan Sumber Daya Manusia
Industri Sekolah Menengah Kejuruan-SMAK Bogor
2019
 LAPORAN PRAKTIK KERJA INDUSTRI
DI PT Biofarma (PERSERO)
BANDUNG – JAWA BARAT

(Pembuatan Preparat Histopatologi Untuk Uji Neurovirulensi)

Sebagai Syarat Mengikuti Ujian Akhir Sekolah Menengah Kejuruan -

SMAK Bogor Tahun Pelajaran 2017/2018

Oleh
Primatantra Nugraha
15.61.08174

KEMENTRIAN PERINDUSTRIAN REPUBLIK INDONESIA

Badan Pengembangan Sumber Daya Manusia Industri

Sekolah Menengah Kejuruan-SMAK Bogor

2019
LEMBAR PERSETUJUAN DAN PENGESAHAN

Laporan Praktik Kerja Industri di PT Bio Farma (Persero) - Laboratorium

Uji Neurovirulensi (Pembuatan Preparat Histopatologi Untuk Uji
Neurovirulensi) oleh Primatantra Nugraha.

Disetujui dan disahkan oleh:

Disetujui oleh,

Drh. D. Budi Murtono, MP. AP Vet Sofrida Juliesti, M. Si

NIP 1481 NIP 19740725 200502 2
006
Pembimbing Institusi Pembimbing Sekolah

Disahkan oleh,

Dwika Riandari M.Si

NIP 19660726 200212 2 001

Kepala SMK – SMAK Bogor
KATA PENGANTAR

Alhamdulillahirabbil’alamin. Puji syukur penulis panjatkan kehadirat

Allah SWT, karena berkat rahmat dan karunia-Nya penulis dapat
menyelesaikan laporan Praktik Kerja Industri yang berjudul “Pembuatan
Preparat Histopatologi Untuk Uji Neurovirulensi” laporan ini disusun untuk
memenuhi persyaratan mengikuti ujian akhir kelas XIII SMK – SMAK Bogor
tahun ajaran 2018/2019. Ujian akhir yang dimaksud dilakukan setelah
mengikuti kegiatan Prakerin, meliputi ujian tertulis dan ujian lisan.
Penyusunan laporan ini berdasarkan hasil penelitian di PT Biofarma yang
berlokasi di Jalan Pasteur No.28, Bandung. Prakerin yang dilaksanakan di
PT Biofarma dimulai pada tanggal 2 Januari 2019 sampai tanggal 30 April
2019.

Laporan ini berisikan tentang analisis yang terdiri dari 5 bab, yang meliputi
pendahuluan, profil instansi, kegiatan di laboratorium, hasil dan pembahasan
serta kesimpulan dan saran atas hasil yang diperoleh. Bagian – bagian
tersebut berisi penjelasan dan materi mengenai kegiatan Prakerin yang
dilaksanakan. Kegiatan Prakerin yang dimaksud adalah kegiatan sehari-hari
yang dilakukan oleh siswa di instansi yang berhubungan dengan unit
kompetensi yang dilakukan siswa selama di sekolah. Unit kompetensi yang
dilaksanakan selama Prakerin merupakan unit kompetensi yang
berhubungan dengan analisis. Sebagian besar laporan ini bersifat
penjelasan mengenai hasil analisis dan kegiatan yang dilakukan siswa
selama Prakerin berlangsung.

Penulis menyadari bahwa laporan Prakerin ini dapat terselesaikan atas

bantuan dari berbagai pihak baik berupa bimbingan, arahan maupun do’a
yang selalu diberikan untuk penulis. Oleh karena itu, sudah selayaknya
penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Dwika Riandari M.Si selaku Kepala Sekolah Menengah Kejuruan – SMAK

Bogor.
2. Amilia Sari Ghani S.S selaku Wakil Kepala Sekolah Bidang Hubungan
Kerjasama Industri.
3. Drh. D. Budi Murtono, MP. AP Vet Selaku Kepala Laboratorium NVT dan
pembimbing di instansi.

I
4. Sofrida Juliesti, M. Si selaku pembimbing di SMK – SMAK Bogor.
5. Keluarga yang selalu mendukung dan memberikan semangat untuk
menjalankan Prakerin.
6. Bapak dan Ibu guru Sekolah Menengah Kejuruan-SMAK Bogor yang telah
memberikan banyak bekal dan ilmu yang sangat bermanfaat bagi penulis
selama Prakerin.
7. Ka Ipat Gumilar Nugraha, Ka Helma Musa, Pak Dadang, Pak Eri Ridwan
dan semua staf serta karyawan PT Biofarma (Persero) yang telah
membantu dan berbagi pengalaman berharganya selama prakerin.
8. Para sahabat angkatan 61 (Prometheus Clavata) yang sama sama
berjuang dan selalu saling memberi semangat dalam menjalankan
Prakerin.
9. Dan seluruh pihak yang telah banyak membantu penulis dalam
menjalankan praktik kerja industri hingga penulisan laporan ini selesai
yang tidak bisa disebutkan satu per satu.
10. Reinaldy Fauzan selaku teman seperjuangan selama Prakerin di
Biofarma.

Penulis menyadari masih terdapat kesalahan dan kekurangan di dalam

laporan Prakerin ini. Untuk itu, penulis sangat mengharapkan kritik dan saran
yang membangun atas isi laporan Prakerin ini. Hal tersebut akan bermanfaat
bagi kesempurnaan laporan, karena laporan ini masih jauh dari
kesempurnaan.

Penulis berharap semoga laporan ini dapat bermanfaat bagi semua pihak
yang membaca. Khususnya untuk warga SMK – SMAK Bogor dan dapat
berguna untuk perkembangan ilmu pengetahuan.

Bogor, Mei 2018 Penulis

II
DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR.......................................................................................................... I
DAFTAR ISI...................................................................................................................... III
DAFTAR GAMBAR...........................................................................................................V
DAFTAR LAMPIRAN...................................................................................................... VI
BAB I PENDAHULUAN.................................................................................................... 1
A. Latar Belakang dan Tujuan Praktik Kerja Industri........................................... 1
B. Tujuan Praktik Kerja Industri............................................................................... 2
C. Tempat dan Waktu Pelaksanaan Praktik Kerja Industri................................. 3
D. Tujuan Pembuatan Laporan Praktik Kerja Industri..........................................4
BAB II PROFIL INSTANSI............................................................................................... 5
A. Data Umum Instansi............................................................................................. 5
B. Sejarah....................................................................................................................5
C. Visi dan Misi Instansi............................................................................................8
D. Latar Belakang Instansi....................................................................................... 8
E. Struktur Organisasi............................................................................................... 8
F. Budaya PT Biofarma (Persero)........................................................................... 9
G. Disiplin Kerja....................................................................................................... 10
H. Produk PT Biofarma (Persero)......................................................................... 11
I. Ketenagakerjaan...................................................................................................12
J. Kegiatan Perusahaan......................................................................................... 12
K. Laboratorium Uji Mutu........................................................................................13
1. Bagian Pengujian Mutu Bakteri (PMVB).................................................. 13
2. Bagian Pengujian Mutu Vaksin Virus (PMVV).........................................13
3. Bagian Pengujian Mutu Mikrobiologi (PMM)........................................... 14
4. Bagian Pengujian Mutu Kimia dan Fisika (PMKF)..................................14
5. Bagian Uji Neurovirulensi (NVT)................................................................15
BAB III KEGIATAN DI LABORATORIUM................................................................... 16
A. Tinjauan Pustaka................................................................................................ 16
1. Virus............................................................................................................... 16
2. Poliomyelitis.................................................................................................. 16
3. Imunitas......................................................................................................... 18
4. Uji Neurovirulensi......................................................................................... 19

III
 5. Histopatologi................................................................................................. 19
B. Metode Analisis................................................................................................... 20
1. Prinsip............................................................................................................ 20
2. Tujuan............................................................................................................ 21
3. Bahan.............................................................................................................21
4. Alat................................................................................................................. 21
5. Prosedur Etanasi dan Otopsi Monyet Uji NVT........................................ 22
6. Prosedur Pembuatan Sediaan Histologis................................................ 23
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN........................................................................... 27
A. Hasil Pembuatan Preparat................................................................................ 27
B. Pembahasan........................................................................................................27
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN............................................................................ 33
A. Kesimpulan.......................................................................................................... 33
B. Saran.....................................................................................................................33
DAFTAR PUSTAKA........................................................................................................34
LAMPIRAN....................................................................................................................... 35

IV
DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Logo Biofarma................................................................................................5

Gambar 2. Ukiran Mesir Kuno...................................................................................... 17
Gambar 3. Bentuk Virus Polio.......................................................................................17
Gambar 4. Hasil Pembuatan Preparat........................................................................ 27
Gambar 5. Mesin Pengolahan Jaringan......................................................................28
Gambar 6. Potongan Otak besar..................................................................................28
Gambar 7. Potongan pons dan serebelum.................................................................29
Gambar 8. Potongan midbrain dan batang otak........................................................ 26
Gambar 9. Potongan sumsum tulang belakang.........................................................29
Gambar 10. Potongan ganglion (kanan,kiri)...............................................................29
Gambar 11. Penyaringan Pewarna..............................................................................31
Gambar12. Covering Preparat......................................................................................32

V
DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Struktur Organisasi (1)............................................................................. 35

Lampiran 2. Struktur Organisasi (2)............................................................................. 36
Lampiran 3. Anatomi otak monyet................................................................................37
Lampiran 4. Daerah - daerah tulang belakang...........................................................37

VI
BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang dan Tujuan Praktik Kerja Industri

Sejalan dengan meningkatnya pembangunan di sektor

industri yang telah memasuki era globalisasi, maka sekolah –
sekolah menengah kejuruan, khususnya Sekolah Menengah
Kejuruan – SMAK Bogor harus mampu menghadapi tuntutan
dan tantangan masyarakat industri yang akan semakin
meningkat di tahun tahun-tahun mendatang dan bersifat padat
pengetahuan dan keterampilan. Salah satu cara yang dapat
dilakukan yaitu dengan peningkatan dan pengembangan ilmu
pengetahuan dan teknologi khususnya di bidang analisis
kimia. Dengan demikian dapat dihasilkan lulusan yang
berkualitas sehingga dapat bersaing di sektor industri.

Praktik Kerja Industri (Prakerin) adalah program kurikulum

pendidikan akhir di Sekolah Menengah Kejuruan – SMAK
Bogor.Prakerin merupakan suatu bagian integral dari
keseluruhan program pendidikan calon analis kimia. Prakerin
wajib dilaksanakan oleh siswa – siswi kelas XIII. Pada
dasarnya Prakerin bertujuan untuk mengembangkan kualitas
pendidikan tenaga analis kimia yang siap terjun ke sektor
industri. Hal tersebut berperan untuk menunjang dalam
pengembangan keahlian dan wawasan seorang analis
sebagai tenaga pembangun.

Lulusan Sekolah Menengah Kejuruan – SMAK Bogor

diharapkan menjadi seorang analis kimia tingkat menengah
yang produktif, terampil dan mandiri. Hal tersebut merupakan
harapan warga SMK – SMAK Bogor dengan diadakannya
Prakerin.Pada kegiatan Prakerin ini dibutuhkan kerjasama
antara sekolah dan dunia industri. Kerjasama tersebut
diperlukan agar Prakerin terlaksana dengan baik. Prakerin ini

1
 dilaksanakan oleh seluruh siswa kelas XIII sebagai
persyaratan untuk menempuh ujian akhir sekolah.

Sekolah Menengah Kejuruan – SMAK Bogor sebagai

salah satu unit pendidikan kejuruan yang bernaung di bawah
pembinaan Kementerian Perindustrian. SMK – SMAK Bogor
bertugas untuk menyelenggarakan pendidikan untuk
menghasilkan tenaga menengah yang terampil khususnya di
bidang kimia analisis. Sebagai Sekolah Menengah Kejuruan,
maka pada pelaksanaan program pendidikan Sekolah
Menengah Analis Kimia Bogor mempunyai visi dan misi
sebagai berikut:

1. Visi
Menjadi sekolah menengah analis kimia unggulan
dan berwawasan lingkungan yang menghasilkan
lulusan profesional dan bermartabat.
2. Misi
a. Melaksanakan pendidikan kejuruan analis kimia
yang berkualitas dan mampu memenuhi kebutuhan
masyarakat, dunia usaha dan dunia industri.
b. Membina dan meningkatkan kemitraan nasional
dan internasional.
c. Menerapkan budaya cinta dan peduli lingkungan
yang berkesinambungan.
d. Membina dan menyelenggarakan fungsi sosial dan
kemasyarakatan.

B. Tujuan Praktik Kerja Industri

Tujuan pelaksanaan praktik kerja industri (Prakerin), yaitu:

1. Ditinjau secara umum, yaitu:
a. Untuk mengaplikasikan ilmu teori yang didapat
di sekolah dengan praktik pada laboratorium di
dunia industri atau tempat Prakerin.

2
 b. Menanamkan dan menumbuhkan sikap disiplin
kerja dan sikap profesional siswa sebelum
terjun langsung ke dunia industri sesuai dengan
disiplin ilmu.
c. Memberikan kesempatan kepada siswa untuk
menerapkan keterampilan dan keahlian di
bidang masing.
– masing.
2. Ditinjau dari segi ilmu pengetahuan, yaitu:
a. Mengembangkan ilmu teori yang sudah
dipelajari.
b. Memperluas ilmu teori tentang lingkungan.
c. Meningkatkan pengetahuan tentang cara
analisis untuk lingkungan.
3. Ditinjau dari segi akademis, yaitu:
a. Merupakan salah satu program dari sekolah.
b. Memperoleh masukan dan sebagai upaya
mengembangkan akademik sekolah.
4. Ditinjau dari segi praktikan, yaitu:
a. Menambah pengalaman siswa dalam hal
penggunaan instrumen kimia analisis yang
lebih modern, dibandingkan dengan fasilitas
yang tersedia di sekolah.
b. Meningkatkan wawasan pada aspek-aspek
yang potensial dalam dunia industri, antara lain:
struktur organisasi, kedisiplinan, lingkungan
dan manajemen kerja.

C. Tempat dan Waktu Pelaksanaan Praktik Kerja Industri

Praktik Kerja Industri dilaksanakan di unit atau bagian

pada perusahaan atau lembaga penelitian yang terkait dengan
analisis kimia. Adapun tempat Praktik Kerja Industri yang
dipilih oleh penulis adalah PT Biofarma yang berlokasi di Jalan
Pasteur No. 28, Bandung. Dilaksanakan selama empat bulan

3
 terhitung mulai dari 2 Januari 2019 sampai dengan 30 April
2019.

D. Tujuan Pembuatan Laporan Praktik Kerja Industri

Selama melaksanakan Praktek Kerja Industri siswa harus

mencatat segala kegiatan praktik. Kegiatan selama praktik ini
kemudian dikumpulkan dalam bentuk Laporan Praktik Kerja
Industri sebagai syarat untuk mengikuti ujian lisan. Laporan ini
merupakan dokumen dan bukti tanggung jawab yang diemban
oleh penulis selama melaksanakan Praktik Kerja Iindustri.
Bahan laporan adalah seluruh materi yang diberikan selama
siswa melaksanakan Praktik Kerja Industri atas persetujuan
pembimbing.

Adapun tujuan pembuatan laporan ini adalah:

1. Memantapkan siswa dalam pengembangan dan

penerapan pelajaran dari sekolah di institusi tempat
Prakerin.
2. Siswa mampu mencari alternatif lain dalam pemecah
masalah analisis kimia secara terperinci dan
mendalam (seperti apa yang terungkap dalam
laporan Prakerin yang dibuatnya.

4
BAB II PROFIL INSTANSI

A. Data Umum Instansi

Nama Perusahaan : PT Biofarma (Persero)

Alamat Kantor Pusat : jalan Pasteur No.28, Bandung
(40161)
Nomor Telepon (022)
2033755
Nomor Faximile : (022) 2041306
mail@biofarma.co.id
www.biofarma.co.id

B. Sejarah dan Perkembangan PT Biofarma Bandung

Gambar 1. Logo Biofarma

Pada masa pemerintahan Gubernur Jenderal J.P. Graaf Van

Limburg Stirum (1916 - 1921), timbul gagasan untuk memindahkan
Ibukota Hindia Belanda dari Batavia ke Bandung. Karena faktor
kondisi alam dan udara yang segar, maka Tuan H.F. Tilema
merekomendasikan agar Kota Bandung dipilih sebagai Ibukota
Wilayah Hindia Belanda. Usulan tersebut berangsur mulai
dilaksanakan oleh pemerintah kolonial Belanda pada tahun 1920,
setelah mendapat dukungan dari Prof. Ir. J. Kolopper, Rector
Maginficus dari Bandoengeche Techniseche Hoogeschool (yang
sekarang dikenal sebagai ITB). Maka berbagai pihak menyambut
ide pemindahan tersebut dengan memindahkan fungsi dan
bangunan umum ke Bandung, seperti Kantor Pusat Dagang
Perusahaan - perusahaan asing, Tentara Bala Keselamatan (Leger

5
des Hells). Instasi Pemerintah kemudain menyusul pindah ke
Bandung, kemudian pindah pula sebagian dari Departemen
Perdagangan dari Bogor, kantor Keuangan dan Lembaga
Penelitian Cacar yang bergabung dengan Institut Pasteur yang
telah berada di Bandung, atau sekarang lebih dikenal dengan
Biofarma.

Institut Pasteur juga didirikan untuk mengatasi wabah penyakit

tropis, sejak tahun 1895 di Bandung mulai dirintis pembangunan
kompleks bangunan Institut Pasteur. Biofarma merupakan Badan
Usaha Milik Negara, dibawah pengawasan Menteri Kesehatan dan
bertanggung jawab dalam memproduksi produk produk biologis,
terutama vaksin, serum dan diagnostik. Pada mulanya merupakan
bagian dari rumah sakit Militer di Batavia dan hanya memproduksi
vaksin cacar. Vaksin yang diproduksi terus berkembang. Pada
tahun 1985 memberikan perawatan rabies. Nyland (salah satu
pimpinan Biofarma terdahulu) memperkenalkan vaksin baru yang
mengandung vaksin rabies. Dilanjutkan dengan produksi vaksin
kolera dan tipus.

Institut Pasteur secara resmi ditugaskan oleh Pemerintah

untuk memproduksi vaksin dan sera pada tahun 1913, pembuatan
tetanus dan difteri formol toksoid secara statistik. Lalu
memproduksi serum anti tetanus yang pertama, mulai digalakan
imunisasi di lingkungan Angkatan Darat terhadap Kolera, Typus,
dan Paratypus A pada tahun 1915. Baru pada tahun 1923 Institut
Pasteur memulai kegiatannya di Bandung dan dilengkapi dengan
Laboratorium Diagnostik. Tahun 1925 penelitian dalam bidang Bio
Kimia klinik dimulai. Pembuatan vaksin terus berlanjut, Otten
memperkenalkan Vaksin Cacar Kering (room dried smallpox
vaccine). Maria Van Stockum berhasil membuat vaksin rabies yang
diinaktifasi dengan formalin dan berasal dari otak kera pada tahun
1930, sedangkan pada tahun 1934 Otten berhasil membuat Vaksin
sampan (Pes) hidup yang berasal dari suku Pasteurella pesits
Ciwidey yang avirulen (natural attenuated). Didirikan Laboratorium

6
Virus dan kultur Jaringan pada tahun 1957, yang digunakan WHO
dalam mendiagnosa Cacar untuk negara - negara Asia Tenggara
pada tahun 1969. Produksi vaksin terus berkembang, seperti
produksi vaksin BCG yang dimulai dengan menggunakan primary
seed lot dari Pasteur Institut Paris, vaksin cacar beku kering
diperkenalkan tahun 1968. Tahun 1971 didirikan bagian
Pengawasan Mutu dan Laboratorium Mycology, sedangkan
perkembangan pembuatan vaksin juga terus berkembang. Pada
tahun 1982 digunakan mesin fermentor 1000 1 yang berasal dari
Shinko Pflauder, yang dilengkapi dan dipasang oleh
Commonwealth Serum Laboratory (CSL) untuk produksi Tetanus.
Pada bulan November 1986 pabrik cairan infus diresmikan,
dilanjutkan dengan pembangunan Sarana Produksi dan
Pengawasan Mutu Vaksin Polio dan Campak yang diresmikan
menteri kesehatan saat itu (tahun 1990), Bapak Dr. Adhityatma
MPH, dan selesai pada akhir 1991. Sejak didirikan, Biofarma telah
mengalami pergantian nama, pada Agustus 1890 didirikan dengan
surat keputusan Gubernur Jenderal Hindia Belanda bertempat di
Rumah Sakit Militer Weltevreden Jakarta dengan nama Parc
Vaceinogen.

Berikut ini merupakan perkembangan sejarah nama Biofarama dari

tahun 1895 sampai dengan sekarang :
1895-1901 Parc Vaccinogene Instituut Pasteurn
1902-1941 Landskoepok Inrichting en Instituut Pasteur
1942-1945 Bandung Boeki Kenkyushoo
1945 Gedung Cacar dan Lembaga Pasteur
1946 Kegiatan berpindah ke Klaten/Yogyakarta
1946-1949 Selama Bandung diduduki Belanda, namanya
kembali menjadi Landskopoepok Inrichting en
Instituut Pasteur.
1950-1954 Gedung Cacar dan Lembaga Pasteur
1955-1960 Perusahaan Negara Pasteur
1961-1978 Perusahaan Negara Biofarma
1978-1996 Perusahaan Umum Biofarma

7
 1997-sekarang Perusahaan Perseroan (Persero) atau yang lebih
dikenal dengan nama PT Biofarma (Persero).

C. Visi dan Misi Instansi

1. Visi
Menjadi perusahaan Life Science kelas dunia yang berdaya
saing global
2. Misi
Menyediakan dan mengembangkan produk Life Science
berstandar internasional untuk meningkatkan kualitas hidup

D. Latar Belakang Instansi

Didukung kompetensi, pengalaman dan proses

pembelajaran selama lebih dari 125 tahun, Biofarma hadir
sebagai bagian dari perjuangan, dalam menyelamatkan dan
meningkatkan kualitas hidup manusia, berperan penting
dalam membangun kesehatan bangsa, sehingga
keberadaannya dipertahankan dari masa ke masa. Dengan
filosofi “Dedicated to Improve Quality of Life” Biofarma siap
mendedikasikan kerja keras untuk keamanan kesehatan
global (Global Health Security), sehingga melalui Biotech for a
Better Future memberikan solusi untuk kemakmuran global.

E. Struktur Organisasi Instansi

Struktur organisasi perusahaan PT Biofarma (Persero) terdiri

atas Dewan komisiaris yang dipegang oleh seorang Komisaris
Utama dan dibantu oleh sejumlah anggota Dewan Komisaris, serta
Dewan Direksi yang terdiri dari:

1. Direktur Utama

2. Direktur Umum dan Keuangan

3. Direktur Perencanaan dan Pengembangan

8
 4. Direktur Produksi

5. Direktur Pemasaran

Masing - masing direktorat membawahi beberapa divisi,

dimana masing masing divisi membawahi beberapa bagian atau
departemen. Skema Organisasi di PT Biofarma (Persero) dapat
dilihat pada lampiran.

Dalam melaksanakan kebijakan tugas menuju ke arah yang

lebih baik, tentu diperlukan suatu koordinasi yang baik antara unit
kerja beserta tugasnya yang mampu mengendalikan keadaan
perusahaan. Berikut adalah fungsi dari setiap bagian :

a. Direktur utama bertugas:

1) Memimpin perusahaan.
2) Menentukan hasil keputusan.
b. Direktur pemasaran bertugas :
1) Mengorganisir suatu pertemuan bisnis.
2) Menentukan validasi dan tempat pertemuan bisnis.
3) Melakukan suatu negosiasi harga untuk terjadi suatu
kesepakatan bisnis.
c. Direktur keuangan bertugas :
1) Menangani keuangan dalam perusahaan.
2) Membayar rekening – rekening pajak atas pimpinan.
d. Staf karyawan bertugas :
1) Melakukan segala aktivitas pekerjaan secara langsung
dibawah naungan atasan.

F. Budaya PT Biofarma (Persero)

Setiap organ perusahaan yang bersikap dan berpikir secara

profesional, memiliki integritas yang tinggi, bekerja dalam suatu tim,
penuh inovasi dan berorientasi terhadap pelayanan konsumen.

9
 1. Profesional
Berkomitmen menjalankan tugas yang dengan penuh
tanggung jawab, efektif, berorientasi ke depan, dan taat
prosedur.

2. Integritas
Jujur, transparan, dan dapat dipercaya sesuai dengan
tujuan perusahaan.

3. Teamwork
Bekerja sama dengan menghargai peran dan pendapat
orang lain.

4. Inovasi
Melakukan perbaikan dan pengembangan secara terus
menerus untuk menghasilkan gagasan baru.

5. Orientasi kepada pelanggan

Memahami kebutuhan dan memberikan solusi yang
tepat kepada pelanggan.

G. Disiplin Kerja

Secara umum, setiap karyawan staf kantor yang bekerja di

PT Biofarma memiliki 5 hari kerja selama 7 – 8 jam setiap
harinya, yaitu:
Senin – Jumat : 07.10 - 16.10 WIB
Istirahat : 12.00 - 13.00 WIB

Hari dan jam kerja untuk karyawan shift disesuaikan

dengan kebutuhan produksi. Karyawan PT Biofarma
mempunyai hak cuti selama 12 hari dalam setahun.Pakaian
karyawan PT Biofarma untuk hari senin sampai rabu adalah
pakaian seragam, untuk hari kamis adalah bebas dan untuk
kaos harus bekerah atau polo shirt dan pakaian hari jumat
adalah baju batik.

10
H. Produk PT Biofarma (Persero)

PT Biofarma memiliki tugas dan fungsi untuk memproduksi

vaksin dan anti sera bagi manusia, dimana pengawasan dan
jaminan mut dari seluruh produk PT Biofarma (Persero) telah
memenuhi standar internasional, baik dari unsur pengawasan mutu
(Quality control) dan jaminan mutu (Quality assurance). Selain itu,
proses produksi dan pengawasan mutu vaksin selalu dipantau oleh
National Control Authority (NCA) / Badan POM (BPOM) RI yang
diakui oleh WHO. Seluruh produk PT Biofarma (Persero) terbagi ke
dalam 4 kategori vaksin, anti sera, dan diagnostika, yaitu :
1. Vaksin Virus
a. Vaksin Oral Polio
b. Vaksin Campak Kering
c. Vaksin Hepatitis B Rekombinan
d. Vaksin Flubio

2. Vaksin Bakteri
a. Vaksin Tetanus
b. Vaksin DT (Difteri dan Tetanus)
c. Vaksin DTP (Difteri, Tetanus, Pertusis)
d. Vaksin Td (Tetanus dan Difteri untuk anak 7 tahun
keatas)

3. Vaksin Kombinasi
a. Vaksin DTP-HB (Difteri, Tetanus, Pertusis, dan Hepatitis
B)
4. Anti Sera
a. Serum Anti Tetanus
b. Serum Anti Difteri.
c. Serum Anti Bisa Ular
5. Diagnostik
Diagnostik merupakan reagenesia instrumen dan sistem
yang digunakan untuk mendiagnosa penyakit atau kondisi
tertentu, termasuk penentuan tingkat kesehatan, dengan
maksud pengobatan, pengurangan atau mencegah penyakit

11
 atau akibatnya. Produk diagnostik yang diproduksi PT Bio
Farma (Persero) antara lain :
a. PPD RT 23, yaitu turunan protein yang dimurnikan yang
digunakan untuk menguji hipersentivitas terhadap
tuberkulosis.
b. Sera aglutinasi, untuk identifikasi bakteri dari
kelompok Salmonella,Shigella dan species E.coli.

I. Ketenagakerjaan

Bagi PT Biofarma (Persero), sumber daya manusia merupakan

hal yang paling berharga dan mitra kerja yang paling strategis.
Sampai dengan tahun 2012 jumlah karyawan PT Biofarma kira-kira
900 orang. Dari segi tingkat pendidikannya karyawan terdiri dari S3
di bidang Teknologi Biologi Molekuler dan Immunologi S2 (Master)
yang memiliki pendidikan dalam bidang yang sesuai dengan
tuntutan pekerjaannya, S1 (sarjana) dalam bidang farmasi, kimia,
kedokteran hewan, dan yang sederajat. Selain itu juga terdapat
Lulusan D3 Analis, Kejuruan (teknik), karyawan dengan pendidikan
tertentu dan SMA diberikan kesempatan mengikuti pendidikan dan
training-training di dalam dan di luar negeri pada institusi-institusi
yang melakukan kolaborasi dengan PT Biofarma (Persero).

J. Kegiatan Perusahaan

PT Biofarma (Persero) selain memproduksi berbagai jenis

vaksin, juga memproduksi serum dan diagnostik. Produk utama
vaksin bakteri yang terdiri dari vaksin BCG, DTP, DT, Td, dan TT.
Sedangkan vaksin virus terdiri dari dari vaksin Polio, Hepatitis B,
dan Campak. Melalui proses kreasi, inovasi, dan produksi selama
bertahun-tahun, PT Biofarma (Persero) sekarang sudah mampu
menjadi produsen vaksin yang memenuhi kualitas WHO, termasuk
dalam menyediakan kebutuhan untuk program imunisasi dunia.

12
K. Laboratorium Uji Mutu

Di PT Biofarma (Persero), divisi Perencanaan dan

Pengembangan mempunyai tugas menyelenggarakan peneleitian
dan pengembangan dalam bidang produk biologi dan farmasi.
Kegiatan laboratorium dilaksanakan oleh PT Biofarma (Persero)
berdasarkan pada cara pembuatan obat yang baik (CPOB) yang
meliputi aspek yang terkait dalam proses produksi, pengawasan
mutu, penanganan terhadap hasil pengamatan, serta pembuatan
dan teknis pelaksanaannya. CPOB ini berfungsi untuk menjamin
mutu, melindungi produksi, sebagai standar, serta meminimalkan
kesalahan. Divisi Pengawasan Mutu PT Biofarma (Persero)
merupakan salah satu divisi dibawah Direktorat Perencanaan dan
Pengembangan. Divisi Pengawasan Mutu di PT Biofarma (Persero)
ini terdapat lima bagian laboratorium pengujian mutu, yaitu :
1. Bagian Pengujian Mutu Bakteri (PMVB)
2. Bagian Pengujian Mutu Vaksin Virus (PMVV)
3. Bagian Pengujian Mutu Mikrobiologi (PMM)
4. Bagian Pengujian Mutu Kimia dan Fisika (PMKF)
5. Bagian Uji Neurovirulensi (NVT)

1. Pengujian Mutu Vaksin Bakteri (PMVB)

Dibagian Pengujian Mutu Vaksin Bakteri (PMVB) ini

menguji produk-produk vaksin bakteri, seperti : vaksin
difteri, vaksin tetanus, vaksin typus, dan vaksin kolera.
Kegiatan pengujian yang dilakukan di Pengujian Mutu
Vaksin Bakteri (PMVB), diantaranya :
1. Uji Potensi
2. Uji Hemolisis
3. Uji Toksisitas Abnormal

2. Pengujian Mutu Vaksin Virus (PMVV)

Dibagian Pengujian Mutu Vaksin Virus (PMVV) ini

menguji produk vaksin virus seperti vaksin Hepaitis B, vaksin

13
 polio, dan vaksin campak. Kegiatan pengujian yang
dilakukan di Pengujian Mutu Vaksin Virus (PMVV),
diantaranya :
1. Uji Potensi Vaksin Virus
2. Uji Residual Serum Protein
3. Uji TCST
4. Uji Identity
5. Uji Retrovirus
6. Uji Haeme Adsorption Test (HAD)

3. Pengujian Mutu Mikrobiologi (PMM)

Di bagian Pengujian Mutu Mikrobiologi (PMM) ini

menguji produk vaksin bakteri secara mikrobiologi.
Kegiatan pengujian yang dilakukan di Pengujian Mutu
Mikrobiologi (PMM), diantaranya :
1. Uji Sterility bakteri dan fungi
2. Uji Sterility Mycoplasma
3. Uji Sterility Mycobacteri
4. Uji Bioburden
5. Uji Limulis Ambocyle Lysate (LAL)
6. Growth test
7. Pemantauan Lingkungan

4. Pengujian Mutu Kimia dan Fisika (PMKF)

Di bagian Pengujian Mutu Kimia dan Fisika (PMKF) ini

menguji bahan atau material dari suatu vaksin secara kimia
dan fisika. Kegiatan Pengujian yang dilakukan di Pengujian
Mutu Kimia dan Fisika (PMKF), diantaranya :
1. Uji Kimia, meliputi pengujian secara kualitatif dan
kuantitatif. Uji kimia ini dilakukan untuk bahan baku,
produk antara, dan produk akhir. Uji yang dilakukan
antara lain: penetapan kadar thimerosal, penetapan
kadar protein, penetapan kadar formaldehida, penetapan
kadar alumunium, dan lain-lain.

14
 2. Uji Fisika, meliputi pengujian ukuran, kemasan,
redaksi dan warna dari box, file, dus, etiket, dan
lain-lain.

5. Uji Neurovirulensi (NVT)

Uji Neurovirulensi dilakukan untuk menguji vaksin

polio, dengan menyuntikan virus polio yang akan
digunakan sebagai bahan baku vaksin ke dalam sumsum
tulang belakang dengan jumlah monyet yang ditentukan.
Pada saat yang bersamaan, dilakukan penyuntikan
menggunakan virus polio yang didapat dari WHO (virus
rujukan atau referen), yang akan didapat hasil
pengujiannya dan dibandingkan dengan hasil pengujian
yang dilakukan di laboratorium uji neurovirulensi.

15
BAB III KEGIATAN DI LABORATORIUM

A. Tinjauan Pustaka

1. Virus

Virus merupakan agen infeksi kelas khusus yang merupakan

parasit intraseluler obligat. Mereka berbeda dari jenis
mikroorganisme lain dalam hal organisasinya, susunannya, dan
mekanisme replikasinya. Setiap virus memiliki material genetik,
antara RNA atau DNA. Pada hampir semua virus, setidaknya
satu dari protein ini membentuk kapsid di sekitar asam nukleat.
Virus tertentu juga memiliki protein lain dalam kapsid; beberapa
protein ini bertindak sebagai enzim, seringnya selama sintesis
asam nukleat.Biasanya, virus akan menempel di suatu sel dan
mengambil alih sel tersebut untuk mengembangbiakkan
virus-virus lain sampai akhirnya sel tersebut mati. Atau pada
kasus lain, virus mengubah sel normal menjadi sel yang
berbahaya untuk kesehatan.

2. Poliomyelitis

Poliomyelitis, yang berasal dari kata Yunan berdasarkan dari

kata polio yang berarti “abu-abu dan myelos yang berarti
“sumsum”, mengacu pada sumsum tulang belakang, dan akhiran
-itis pada kata Poliomyelitisyang berarti peradangan.
Poliomyelitis, kemudian disingkat, menjadi polio. Penyakit
polomyelitis disebabkan oleh virus polio. Penyakit ini telah lama
berada di bumi dari jaman mesir kuno sekitar tahun 1350 dan
1580, hal ini terdokumentasi pada ukiran ukiran dinding kuil-kuil
Mesir kuno, dimana terlihat gambar orang yang memiliki kaki
kanan yang lebih kecil daripada kaki kiri dan menggunakan
tongkat.

16
 Gambar 2. Ukiran Mesir Kuno

Penyakit poliomyelitis pertama kali dipublikasi oleh

Underwood pada tahun 1789, Underwood menjelaskan bahwa
poliomyelitis adalah penyakit yang khas dan berbeda dari
penyakit lainnya, namun pada saat itu belum diketahui penyebab
dari poliomyelitis karena pada tahun tersebut belum berkembang
tentang ilmu virologi. Pada tahun 1892 ditemukan pertama kali
bahwa virus sebagai penyebab penyakit oleh Iwanoski. Iwanoski
dapat memindahkan virus mosaik tembakau dari tanaman
tembakau yang terinfeksi ke tanaman sehat, dengan memfiltrasi
virus dari tanaman yang terkena virus mosaik tembakau. Pada
tahun 1909 Landsteiner dan Propper menemukan penyebab
poliomyelitis adalah virus polio.

Gambar 3. Bentuk Virus Polio

17
 Virus polio terklasifikasi sebagai family picornaviridae. Virus
polio termasuk virus terkecil (pico) yang telah diketahui saat ini,
dengan genomnya yaitu ssRNA non – enveloped. Virus polio
mempunyai diameter 20-30 nm, berat molekular 8-9 x 106 dalton,
dapat hidup di ph 3 – 5 dan optimal di pH 7 – 7,4, terdiri dari ±
7.500 nukleotida, reseptor virus berupa CD155 (glikoprotein)
yang hanya terdapat pada manusia dan hewan bertulang
belakang (monyet). Secara serologis dibagi menjadi 3 tipe, yaitu;
tipe 1 (Bunhilde), tipe 2 (Lansing), dan tipe 3 (Leon). Dapat di
inaktifasi dengan 0,3 % formaldehid, 0,1N HCl & UV Light.

Infeksi virus polio dapat dibagi dua jenis yaitu infeksi paralitik
poliomyelitis dan non – paralitik poliomyelitis. Infeksi non -
paralitik poilomyelitis adalah infeksi dengan virus polio tetapi tidak
hingga terjadi kelumpuhan, karena virusnya tidak menyerang
sistem syaraf pusat, hanya menyebabkan demam, dan diare.
Sedangkan infeks paralitik poliomyelitis adalah infeksi dimana
virus polio menyerang langsung ke sistem syaraf pusat, terutama
saraf otot sehingga menyebabkan kelumpuhan otot.

Virus polio dapat masuk melalui mulut dan berkembang biak

di tenggorokan dana saluran pencernaan, kemudian bergerak ke
pembuluh darah dan terbawa ke sistem syaraf utama dimana
virus mereplikasi dan merusak sistem syaraf motorik dan
menyebabkan kelumpuhan.

3. Imunitas

Imunitas adalah suatu kondisi tubuh dimana tubuh dapat

menahan suatu infeksi. Setiap manusia mempunyai kekebalan
alami yang luas sekali terhadap bermacam – macam
mikroorganisme yang ada di lingkungannya. Namun kekebalan
tubuh manusia sangat rentan terhadap penyakit – penyakit
yang ditularkan oleh bakteri atau virus. Sehingga dibuatlah
bermacam – macam cara untuk meningkatkan imunitas. Yaitu,

18
 dengan cara pengebalan (Imunisasi) pasif atau aktif
menggunakan sera atau vaksin.

Imunisasi merupakan suatu usaha untuk memberikan

kekebalan pada bayi dan anak-anak dengan memasukan vaksin
yang berfungsi sebagai antigen ke dalam tubuh agar tubuh dapat
membuat zat antibodi untuk mencegah masuknya penyakit
tertentu dalam tubuh. Sedangkan vaksin adalah bahan yang
dipakai untuk merangsang pembentukan zat antibodi yang
dimasukkan ke dalam tubuh melalui suntikan atau dengan
melalui tetesan ke mulut. Imunisasi mempunyai berbagai
keuntungan, yaitu:

a. Pertahanan tubuh yang terbentuk akan dibawa seumur

hidupnya.
b. Vaksinasi tidak berbahaya, reaksi yang serius sangat jarang
terjadi, jauh lebih jarang dari pada komplikasi yang
timbul apabila terserang penyakit tersebut secara alami

4. Uji Neurovirulensi

Uji neurovirulensi adalah uji yang dilakukan untuk

mendeteksi kemungkinan adanya kontaminasi oleh virus polio
virulen yang bersifat dapat menyebabkan kelumpuhan,
berdasarkan hasil pengamatan gejala klinis dan hispatologi yang
terjadi pada sel saraf. Pada saat yang bersamaan, dilakukan
penyuntikan menggunakan virus polio yang didapat dari WHO
(virus rujukan atau referen), yang akan didapat hasil
pengujiannya dan dibandingkan dengan hasil pengujian yang
dilakukan di laboratorium uji neurovirulensi..

5. Histopatologi

Histopatologi merupakan cabang dari ilmu patologi yang

mempelajari perubahan pada suatu jaringan. Pemeriksaan
histopalogi ditujukan untuk mengetahui perubahan yang terjadi
pada jaringan baik yang disebabkan mikroorganisme pathogen,

19
 senyawa, maupun agen kimia/toksik. Sebagai salah satu metode
diagnosa, pemeriksaan histopatologi mempunyai arti yang sangat
penting untuk menentukan tindakan kuratif maupun preventif
terhadap pathogen tertentu. Selain itu, dalam dunia riset,
perubahan histopatologi dapat memberikan jawaban tentang
pengaruh atau dampak yang ditimbulkan dari suatu senyawa atau
perlakuan suatu penelitian.
Aplikasinya diawali dengan pembuatan preparat dengan
menipiskan sel jaringan dari organ-organ tubuh. Untuk itu jaringan
halus dapat ditanam pada parafin dengan pembekuan, selanjutnya
jaringan dipotong. Prasyarat untuk mendapatkan histopatologi dan
histokimia yang tepat dapat diperoleh dengan mengamati preparat
dibawah mikroskop elektron. Preparat dari histopat mempunyai
tanda spesifik yang terlihat dari jaringan sel dan struktur jaringan
akibat serangan patogenisitas. Terdapat tahapan tenik
histopatologi adalah sebagai berikut :
1. Fiksasi.
2. Preparasi organ atau jaringan.
3. Washing.
4. Dehidrasi.
5. Clearing.
6. Infiltrasi.
7. Embedding.
8. Slicing.
9. Staining.

B. Metode Analisis

1. Prinsip

Pembuatan preparat histopatologi berprinsip dari 9 tahap,

yaitu fiksasi pada proses etanasi dan otopsi, preparasi organ
atau jaringan pada proses diseksi, washing saat dicuci air
mengalir, dehidrasi saat di rendam dalam alkohol, clearing pada
saat di rendam dalam xylol, infiltrasi pada saat direndam dalam
parafin, embedding pada saat mencetak blok parafin, slicing

20
 pada saat mengiris dengan mikrotom, dan staining pada saat
pewarnaan dan covering preparat.

2. Tujuan

Pembuatan preparat histopatologis ini bertujuan untuk

membuat preparat yang nantinya dibaca menggunakan
mikroskop untuk melihat radang atau kerusakan pada jaringan.

3. Bahan

1. Air suling
2. Alkohol 96% Teknis
3. Alkohol 96% p.a.
4. Formalin Teknis 37 %
5. Formalin p.a
6. NaCl p.a.
7. Xylol
8. Gallocyanin
9. Parafin
10. Sampel Monyet
11. Label
12. Larutan anestesi Ketamin HCl
13. Chromium allum
14. Enthelan
15. Asam Asetat glasial
16. Putih telur

4. Alat

1. Kandang monyet
2. Syringe
3. Gunting operasi
4. Scalpel
5. Botol kaca
6. Tang tulang

21
 7. Waterbath Yamato model BT-15
8. Tissue Processor
9. Tissue Tek Embedding Consoles
10. Mikrotom
11. Slide glass
12. Cover glass
13. Pinset anatomis
14. Pisau pemotong blok parafin
15. Inkubator
16. Keranjang preparat
17. Gergaji tulang
18. Keranjang khusus potongan

5. Prosedur Etanasi dan Otopsi Monyet Uji NVT

a. Etanasi Monyet Uji NVT

1. Lakukan anestesi dengan menyuntikan 0,7 mL larutan
ketamin HCl/ketalar.
2. Bawa monyet ke ruang otopsi, dan tempatkan monyet
pada meja perfusi.
3. Lakukan irisan pada kulit bagian atas untuk membuka
dinding diafragma dengan menggunakan scalpel.
4. Potong kedua sisi tulang rusuk dengan menggunakan
gunting tulang, dan potong tulang dada dengan
gunting.
5. Diiris lapisan pembungkus jantung dengan gunting.
6. Alirkan larutan perfusi garam NaCl 0,85 % (larutan
fiksatif 1) kedalam jantung, dan dilanjutkan dengan
mengalirkan larutan fiksatif 2 hingga terjadi perubahan
warna darah dan organ.
7. Hentikan perfusi bila terlihat adanya kekakuan pada
otot-otot anggota gerak monyet
8. Kemudian rendam monyet dalam larutan disinfektan

22
 b. Otopsi Monyet Uji NVT
1. Lakukan pengkulitan mulai dari kepala hingga
pangkal ekor.
2. Hilangkan lapisan otot-otot yang menempel pada
tulang kepala dan tulang belakang dengan
menggunakan scalpel.
3. Gergaji tulang punggung di dua tempat, hingga bisa
ditarik menggunakan tang tulang.
4. Keluarkan sediaan otak dan sumsum tulang belakang
menggunakan pinset
5. Masukkan sediaan tersebut kedalam botol berisi
formalin yang telah diencerkan (larutan fiksatif 3) .

6. Prosedur Pembuatan Sediaan Histologis

a. Fiksasi dan Pemotongan Sediaan Histologi

1. Lakukan pemotongan histopatologi dengan tebal
pemotong 2-3 mm.
2. Bagian yang dipotong dimulai dari mid brain, untuk
memisahkan bagian otak besar, otak kecil, dan batang
otak.
3. Bagian bagian yang diambil meliputi
 Otak besar dari belahan otak kanan dan otak
kiri
 Mid Brain
 Batang otak bagian atas dan bawah
 Serebelum dan Pons
 12 bagian sumsum tulang belakang bagian
cerviks
 18 bagian sumsum tulang belakang bagian
lumbar
 Otak kecil
 Thalamus dari belahan otak kanan dan otak
kiri

23
 4. Potongan-potongan otak tersebut ditusuk dengan
jarum dan diberi label sesuai dengan nomor monyet.
5. Hasil potongan otak tersebut direndam dalam larutan
formalin encer didalam botol.

b. Pengolahan Potongan Otak

1. Potongan otak yang telah direndam, dipindahkan ke
keranjang khusus potongan dan di cuci dengan air
yang mengalir selama kurang lebih 8-10 jam untuk
menghilangkan sisa formalin.
2. Pindahkan keranjang tersebut kedalam mesin
pengolah jaringan yang otomatis melakukan
proses-proses berikut:
a. Perendaman dalam alkohol 70 % selama 1,5
jam
b. Perendaman dalam alkohol 80 % selama 1,5
jam
c. Perendaman dalam alkohol 90 % selama 1,5
jam
d. Perendaman dalam alkohol 96 % selama 1,5
jam
e. Perendaman dalam alkohol 96 % selama 1,5
jam
f. Perendaman dalam alkohol 96 % selama 1,5
jam
g. Perendaman dalam Xylol I selama 1,5
jam
h. Perendaman dalam Xylol II selama 1,5
jam
i. Perendaman dalam Xylol III selama 1,5
jam
j. Perendaman dalam parafin selama 1,5
jam
k. Perendaman dalam parafin selama 1,5
jam

24
c. Pencetakan Sediaan Histologi dalam Blok Parafin
1. Pindahkan sediaan histologi yang sudah diolah
kedalam mesin pencetak blok parafin.
2. Tuangkan parafin cari dalam cetakan parafin.
3. Letakkan potongan tadi kedalam cetakan yang telah
berisis parafin cair, susun potongan sehinggga
menempel pada dasar cetakan
4. Letakkan cincin plastik yang telah diberi nomor
monyet di atas cetakan
5. Penuhi cincin plastik dengan parafin, pindahkan
cetakan ke lempeng dingin sampai blok parafin
membeku/mengeras.
6. Setelah parafin membeku, lepaskan blok parafin dari
cetakan.

d. Slicing Blok Parafin dengan Mikrotom

Pemotongan blok parafin dibagi menjadi 2 tahap, slicing
kasar dan slicing halus.
1. Pasang pisau mikrotom
2. Letakkan blok parafin pada penjepit blok pada
mikrotom.
3. Lakukan slicing kasar pada permukaan blok parafin
dengan hati hati sampai lapisan parafin diatas jaringan
habis.
4. Lakukan slicing halus setebal 9 micron, lakukan 2-3
kali untuk mendapatkan hasil terbaik.
5. Pindahkan irisan jaringan tersebut ke atas permukaan
air dingin
6. Siapkan kaca slide yang sudah diberi nomor monyet,
bagian potongan,dan tipe polio yang diuji.
7. Angkat irisan jaringan tersebut dengan menggunakan
kaca slide yang telah dilapisi putih telur.
8. Masukan kaca slide yang mengandung irisan jaringan
ke dalam penangas air dengan suhu 40-450C, selama
4-5 detik, sampai irisan tersebut mengembang.

25
 9. Angkat kembali, letakkan pada keranjang slide kaca
dan keringkan dalam inkubator 370C  10C selama 1
malam sampai dilakukan pewarnaan dengan
Gallocyanin.

e. Pewarnaan Preparat Histologi

1. Preparat direndam dalam xylol selama kurang lebih
satu malam.
2. Setelah satu malam diangkat dan biarkan sisa xylol
menghilang lalu direndam kedalam alkohol selama
kurang lebih 1 malam .
3. Setelah 1 malam, direndam kedalam larutan pewarna
gallocyanin yang sebelumnya disaring terlebih dahulu,
selama 2 jam.
4. Preparat tadi di angkat dan di cuci dengan air mengalir
selama 10-30 detik
5. Preparat diangkat dan dikeringkan dalam inkubator
pada suhu 370C  10C selama 1 malam.
6. Setelah kering, preparat direndam di xylol, kemudain
di tutup dengan cover glass yang sudah diberi enthelan
secukupnya.

26
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Pembuatan Preparat

Didapatkan hasil pembuatan preparat histopatologi, seperti yang

terlihat pada gambar di bawah ini

Gambar 4. Hasil Pembuatan Preparat

B. Pembahasan

Pembuatan preparat histopatologis adalah hal yang diperlukan dalam

pelaksanaan uji Neurovirulensi (NVT), dimana pembuatan preparat
histopatologis digunakan jaringan potongan potongan dari otak, dimana
didapatkan dari sampel monyet yang diotopsi. Dalam proses otopsi ada
beberapa hal yang perlu diperhatikan, pertama adalah larutan perfusi
garam 0,85 % (larutan fiksatif 1) yang berfungsi sebagai mengganti
cairan tubuh dan pembersih darah pada organ dan larutan fiksatif 2
mengeraskan organ agar mudah untuk diambil. Otak monyet hasil otopsi
dimasukkan kedalam larutan formalin encer (larutan fiksatif 3), yang
berfungsi agar otak tersebut awet dan tidak cepat busuk. Pada diseksi,
bagian bagian yang dipotong merupakan bagian - bagian yang dapat
mewakili otak dan sumsum tulang belakang sehingga tidak perlu diambil
seluruh bagiannya. Bagian yang dipotong dan diambil adalah potongan

27
otak besar, potongan midbrain dan batang otak, potongan pons dan
serebelum, potongan sumsum tulang belakang bagian cerviks dan
lumbar, dan potongan ganglion. Pada pengolahan potongan bagian otak,
ada beberapa tahapan, pada saat direndam dalam alkohol 70 %, 80 %,
90 % dan 96 % tahap ini disebut tahap dehidrasi dimana air yang
menempel pada potongan - potongan tadi setelah di cuci oleh air
mengalir selama 8-10 jam akan menghilang ditarik oleh alkohol sehingga
akan mudah untuk tahap selanjut yaitu tahap clearing menggunakan xylol
p.a. dimana akan menghilangkan alkohol hasil dehidrasi dan membuat
potongan - potongan tersebut menjadi transparan. Tahap terakhir yaitu
tahap infiltrasi dengan menggunakan parafin dimana parafin akan masuk
kedalam potongan potongan menggantikan xylol yang telah hilang, yang
berfungsi agar potongan tidak rusak saat di slicing oleh mikrotom.

Gambar 5. Mesin Pengolahan Jaringan

Pada tahap pencetakan blok parafin atau juga bisa disebut dengan
parafin embedding, setiap potongan memiliki penempatan yang khas
untuk mempermudah dalam pembacaan preparat. Seperti yang terlihat
pada gambar di bawah ini.

Gambar 6. Potongan Otak besar

28
 Gambar 7. Potongan pons dan serebelum

Gambar 8. Potongan midbrain dan batang otak

Gambar 9. Potongan sumsum tulang belakang

Gambar 10. Potongan ganglion (kanan,kiri)

Untuk potongan sumsum tulang belakang, akan ada dua macam,

sumsum tulang belakang bagian cerviks dan sumsum tulang belakang
bagian lumbar, dan dari bagian itu dipotong 12 bagian sumsum tulang
belakang bagian cerviks dan 18 bagian sumsum tulang belakang bagian
lumbar. Sehingga, 12 bagian sumsum tulang belakang bagian cerviks,
dibuat menjadi 2 blok parafin dan 18 bagian sumsum tulang belakang
bagian lumbar nantinya dibuat menjadi 3 blok parafin. Terkadang
potongan hasil diseksi tidak terlalu rata, sehingga perlu ditekan potongan
tersebut ke dasar cetakan.Potongan potongan ini nantinya akan dibentuk

29
menjadi blok parafin dengan tambahan embedding ring yang sudah diberi
nomor sesuai dengan nomor monyet pada potongan tersebut. Alat
embedding tersendiri memiliki tempat untuk mendinginkan potongan
potongan tersebut hingga mengeras dan bisa dilepas dari cetakannya.

Pada tahap slicing, pastikan pisau mikrotom sudah tajam, bila tidak
akan menyulitkan proses slicing. Penempatan blok parafin juga harus
datar, sehingga saat proses slicing kasar permukaan akan teriris secara
rata. Dilanjutkan dengan slicing halus, dengan ketebalan irisan hanya 9
mikron, hasil potongan dimasukan kedalam wadah berisi air dingin, agar
jaringan tetap menyusut. Selanjutnya disiapkan kaca slide yang sudah
diberi nomor monyet, tipe keberapa, dan bagian potongan seperti contoh
dibawah ini.

PR - 5624 Keterangan :
PR - 5624 : Nomor monyet
BF3
BF : Biofarma
L2
3 : Polio tipe tiga
L2 : Lumbar ke dua

Langkah selanjutnya adalah memindahkan irisan tersebut ke kaca

slide yang telah dioleskan dengan putih telur yang berfungsi agar mudah
menempelkan irisan tersebut pada alat waterbath yang berisi air bersuhu
40-450C selama 4 detik, karena jika terlalu lama dikhawatirkan jaringan
pada irisan menyebar jauh sehingga menjadi susah saat pembacaan.
Dirapikan kaca slide ke keranjang preparat.

Pada tahap pewarnaan atau staining, preparat tersebut dimasukan

ke dalam xylol untuk menghilangkan parafin yang terbawa saat slicing
dan dilanjutkan dengan direndam kedalam alkohol untuk menghilangkan
xylol tadi yang masih terikat kedalam jaringan. Sebelum diberi pewarna,
pewarna gallocyanin terlebih dahulu disaring, karena bisa jadi terdapat
minyak minyak dalam larutan gallocyanin yang dapat menyusahkan

30
proses pewarnaan, menyaringnya menggunakan kertas saring berabu
dengan lipatan seperti bunga.

Gambar 11. Penyaringan Pewarna

Pada saat pewarnaan, preparat direndam dalam larutan gallocyanin
pada suhu 40-500C selama kurang lebih 2 jam. Dilakukannya pewarnaan
pada suhu sekitar 40-500C untuk mempercepat menempelnya pewarna
gallocyanin pada preparat. Jika suhu kurang dari itu, hasil warna pada
preparat akan pucat dan perlu diulang pewarnaannya. Setelah diwarnai,
preparat dicuci oleh air mengalir untuk menghilangkan pewarna yang
terbawa dan tidak menempel di jaringan, lalu dimasukkan ke inkubator
untuk mempercepat pengeringan.

Tahap selanjutnya yaitu menutup preparat dengan cover glass.

Sebelum ditutup dengan cover glass, preparat dimasukan kedalam xylol
sekitar 1-2 menit lalu diambil cover glass dan oles enthelan ke cover
glass. Fungsi xylol pada tahap ini agar enthelan tidak terlalu cepat
mengering saat menempelkan cover glass pada preparat. Pada saat
menempelkan cover glass, harus dipastikan juga tidak ada gelembung -
gelembung udaranya, hal ini dikarenakan jika saat enthelan mengering
gelembung udara tersebut akan melebar dan bisa mengenai jaringan, hal
itu bisa mengganggu pembacaan jaringan. Dilihat dari hasil dapat
dikatakan bahwa semua preparat merupakan hasil yang baik, karena dari

31
warnanya yang ungu dan tidak pucat, juga dilihat dari tidak adanya
gelembung udara yang terperangkap saat di cover dengan cover glass.

Gambar 12. Covering Preparat

32
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Berdasarkan analisis yang telah dilakukan, preparat histopatologi

tersebut semuanya adalah hasil yang baik, hal ini terlihat dari warna
jaringannya yang berwarna ungu dan tidak ada gelembung udara yang
terperangkap di dalamnya. Oleh karena itu dapat dinyatakan bahwa
preparat layak dibaca dengan mikroskop.

B. Saran

Ada beberapa hal-hal yang perlu diperhatikan pada saat membuat

preparat histopatologi, yang pertama adalah perlu diperhatikannya
tanggal kadaluarsa dari pereaksi yang digunakan, dikarenakan hasil dari
tiap-tiap tahap dapat rusak jika menggunakan pereaksi yang kadaluarsa
dan yang kedua adalah saat memindahkan potongan sumsum tulang
belakang pada tahap embedding, tangan sebaiknya tidak terlalu banyak
bergetar.

33
DAFTAR PUSTAKA

Alat Labor. 2013. “Preparat Histologi”.

http://www.alatlabor.com/article/detail/178/preparat-histologi . Artikel
Online. 14 Maret 2019 pkl. 20.05 WIB.

Biofarma. 2014. “Tentang Biofarma“ . Info dapat diakses pada:

http://www.Bio Farma.co.id/en/tentang-kami/ . 20 Februari 2019 pkl.
20.20 WIB.

Depati, Roby Ringgan. 2014. Pengujian Neurovirulensi Kepada Hewan

Monyet (Macaca rhesus/fasculiaris) Untuk Keamanan Vaksin Polio
Oral di PT Biofarma [skripsi]. Bandung (ID): Universitas Padjajaran.

Junqueira, L. Carlos, José Cenrneiro, Robert O. Kelley.1997. Histologi Dasar.

Jakarta : EGC.

Murtono, Drh. Dodot Budi, Drh. Purnomo. 2018. Prosedur Baku Uji
Neurovirulensi Vaksin Polio. Bandung: Biofarma.

Samiadi, Lika Aprilia. 2017. "Infeksi Bakteri dan Infeksi Virus, Apa
Bedanya?" .
https://hellosehat.com/hidup-sehat/tips-sehat/membedakan-infeksi-vir
us-dan-bakteri/ . Artikel Online . 11 Maret 2019 pkl. 21.05 WIB.

Wallace, Greg, dan Jim Alexander. 2011. ”Poliomyelitis”.

https://www.cdc.gov/vaccines/pubs/pinkbook/downloads/polio.pdf).
Artikel Online . 13 Maret 2019 pkl. 13.27 WIB.

34
LAMPIRAN

Lampiran 1. Struktur Organisasi (1)

35
Lampiran 2. Struktur Organisasi (2)

36
 Lampiran 3. Anatomi otak monyet

Lampiran 4. Daerah - daerah tulang belakang

37