JURNAL REVIEW SINTESIS DYHIDROPIRIMIDINONE (DHPM) SEBAGAI ANTI

KANKER

Abstrak
Sintesis Dihydropirimidinone (DHPM) telah dilakukan dengan berbasis green chemistry.
Dihydropirimidinone (DHPM) disebut sebagai senyawa yang memiliki aktivitas anti-kanker.
Namun, sintesisnya banyak menggunakan pelarut yang kurang aman bagi lingkungan. Dalam
jurnal review ini, terdapat beberapa metode sintesis Dihydropirimidinone (DHPM) yang ramah
lingkungan. Metode pertama menggunakan Chromene dengan katalis tanah liat berpilar Fe/Al
daur ulang. Metode kedua menggunakan sintesis asam asetoasetat. Metode ketiga menggunakan
kondensasi Biginelli.
hasil reaksi siklokondensasi Claisen dari
Pendahuluan aldehid, etil asetoasetat, dan urea atau
Dihydropyrimidinone (DHPM) tiourea. Senyawa dihidropirimidinon
merupakan suatu senyawa heterosiklik yang memilikii aktivitas biologis baik sebagai
memiliki sifat farmakologis dan terapi yang antimikroba maupun pengobatan seperti
berbeda. Pyrimidinones atau aktivitas antivirus, antimikroba, antitumor,
Dihydropyrimidinones (DHPMs) antihipertensi, antikanker, dan
didambakan karena bioaktifitas dan antiperadangan (Supartono; 2011).
ketekunan mereka dalam bidang penemuan In recent years, organic chemists
obat. DHPM khusus tersubstitusi dan have focused their attention towards multi-
turunannya adalah zat penting dalam kimia component reactions (MCRs) [1-3] for the
organik dan obat-obatan. Monastrol, DHPM synthesis of heterocyclic compounds due to
pengganti anaryl terkenal karena aktivitas a broad range of notable advantages such as
anti kankernya. Kerjanya dengan mildness, environmentallyfriendliness,one-
mengganggu fase mitosis pembelahan sel potoperation,low-cost, atom-economy, and
yang menghambat kinesin. simple work-up. Due to numerous important
Dihydropyrimidinone terkait dengan biological and pharmaceutical activities, 2-
bagian aromatik dari inti kromen yang oxoand 2-thio-1,2,3,4-tetrahydropyrimidines
memiliki ikatan etil metil pada C2 are important targets among synthetic
menghasilkan molekul antikanker yang heterocyclic compounds. Typically, these
sangat baik. Ditemukan bahwa senyawa compounds have been used as calcium
chromene-dihydropyrimidinone (CDHPM) channel blockers and α-1a-antagonists [4],
menghambat proliferasi sel kanker paru-paru as well as antihypertensive [5], anticancer
(A549) melalui penangkapan mitosis dan [6], anti HIV [7], antibacterial and
distorsi perakitan mikrotubulus. antifungal [8],antiviral [9],antioxidative
Salah satu senyawa yang memiliki [10], and
aktivitas biologis dan bersifat antimikroba anti-inflammatory [11] agents.
adalah derivat dihidropirimidinon (DHPM). Recently, numerous protocols for the
Senyawa dihidropirimidinon merupakan preparation of these compounds that include
Lewis and Brønsted acid catalysts have been
reported [12-22]. Based on the above
considerations, and in continuation of our
efforts to develop simple methodologies, as
well as our interest in applications of mild
and efficient catalyzed organic reactions
[23-30], we report herein CrCl3·6H2O
(chromium(III) chloride hexahydrate) as a
clean, mild, and efficient catalyst for the
synthesis of 2-oxo- and 2-thio-1,2,3,4-
tetrahydropyrimidines by means of a three-
component Biginelli reaction[31] between
β-keto esters, aldehyde derivatives, and
urea/thiourea under thermal and solvent-free
conditions, with high to excellent yields
(Figure1).
Metode
Sintesis Chromene-Dyhydropirimidone
(CDHPM)
Untuk mensintesis senyawa Chromene-
Dyhydropirimidone (CDHPM), dilakukan
beberapa hal berikut ini. Resorcinol pada
asilasi dengan hidrida asetat dengan adanya
asam lewis membentuk 2,4-
dihydroxyacetophenone. 2,4-
dihydroxyacetophenone kemudian
dikonversi menjadi 7-hydroxy benzopyran-
4-one tersubstitusi dengan kondensasi
dengan keton tersubstitusi dengan adanya
basa seperti amberlite dasar. Metilasi O dari
gugus hidroksil menghasilkan benzopyran-
4-one yang teralkilasi yang menghasilkan
reaksi Vilsmeier-Haack untuk menghasilkan
chloro chromene. Perlakuan chloro
chromene dengan asam heteropoly berbasis
silikon menghasilkan DHPM. Meskipun
hasil reaksi katalisis poliasid memuaskan
(89%) katalis itu mahal, tidak dapat
dipulihkan dan menghasilkan limbah asam
yang kuat selama pemurnian dan karenanya,
tidak layak untuk reaksi peningkatan. Untuk
mengatasi kekurangan ini, dikembangkan
reaksi bebas pelarut baru. Metodologi baru
ini melibatkan kimia hijau dengan biaya
rendah, katalis yang dapat didaur ulang,
penanganan mudah dan ketersediaan dan
hasil tinggi. Kami mengoptimalkan kondisi
reaksi dengan menggunakan
chlorochromene aldehyde (1 equiv.) Ethyl
acetoacetate (1.2equiv.), Urea (1.0equiv.)
Dalam etanol pada suhu refluks
menggunakan katalis yang berbeda.
Didapatkan hasil optimal yang lebih baik
diperoleh dengan menggunakan katalis
Fe/Al tanah liat yaitu 98% dalam kondisi
bebas pelarut.
Sintesis Dyhydropirimidone (DHPM)
dengan katalis asam asetoasetat
Alat yang digunakan dalam penelitian
ini yaitu seperangkat alat destilasi sederhana
dengan pengurangan tekanan dan alat
refluks, neraca analitik, magnetic stirrer,
melting point SMP-1, gas chromatography
(GC) Agilent Cerity QA/GC Report,
spektrofotometer IR (Perkin Elmer
Spectrum Version 10.4.00), gas
chromatography-mass spectroscopy (GC-
MS) Perkin Elmer 680/SQ 8T, jarum ose,
autoklaf dan cawan petri. Bahan-bahan yang
diperlukan untuk penelitian adalah bahan
dengan grade pro analyst buatan Merck
yaitu etil asetat, etanol, CaCl2-anhidrat,
NaCl, asam asetat, benzaldehid, urea,
alkohol 96%, medium NA, medium NB,
biakan bakteri Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli, dan akuades. Sebanyak 5
mL etanol dan 3 g natrium dicampurkan
dalam labu alas bulat dan tunggu beberapa
menit. Memasukkan 75 mL etil asetat
kedalam campuran tersebut yang dilengkapi
kondensor. Campuran direfluks hingga
natrium benar-benar larut sekitar 3,5 jam.
Campuran didinginkan sampai suhu kamar
dan diasamkan dengan 30 mL asam asetat
50% dan diuji dengan kertas lakmus,
kemudian campuran dijenuhkan dengan
larutan garam NaCl jenuh dan dipisahkan
dengan corong pisah sehingga membentuk
dua lapisan. Lapisan atas berupa ester yang
dikeringkan dengan CaCl2-anhidrat. Larutan
hasil, didestilasi dengan pengurangan
tekanan dan hasil yang diperoleh dianalisis
dengan FT-IR, GC, dan GC-MS. Senyawa
etil asetoasetat yang dhasilkan kemudian
digunakan dalam sintesis
dihidropirimidinon. Sebanyak 2,72 g
benzaldehid, 2,7 g etil asetoasetat, 1,2 g urea
dan 2 mL jus buah nanas dimasukkan dalam
erlenmeyer kemudian distirrer selama 3,5
jam pada suhu ruangan. Reaksi campuran
disaring dan dicuci dengan etanol 3 mL
kemudian filtratnya dimasukkan ke dalam
lemari pendingin sampai terbentuk kristal.
Kristal tersebut disaring sehingga
didapatkan filtrat dan padatan kristal.
Padatan kristal hasil sintesis, kemudian
direkristalisasi dengan etanol dan saring
sehingga didapatkan senyawa
dihidropirimidinon murni yang dianalisis
dengan FT-IR. dan GC-MS. Senyawa
dihidropirimidinon yang dihasilkan di uji
aktivitas antibakterinya dengan
menggunakan medium nutrient agar dengan
metode difusi sumuran. Daya antibakteri
diamati berdasarkan diameter zona hambat
yang terbentuk dibandingkan dengan kontrol
positif.
Sintesis Dyhydropirimidone (DHPM)
dengan kondensansi Biginelli antara β-keto
ester dengan urea menggunakan katalis
CrCl3•6H2O
Titik lebur semua senyawa
ditentukan dengan menggunakan alat
Electrothermal 9100. Spektrum resonansi
magnetik nuklir (1H NMR) proton direkam
pada instrumen Bruker DRX-400 Avance
dengan DMSO-d6 sebagai pelarut. Semua
reagen dan pelarut dibeli dari perusahaan
kimia Merck, Fluka, dan Acros dan
digunakan tanpa penambahan lebih lanjut.
Prosedur umum untuk persiapan 2-oxo- dan
2-thio-1,2,3,4-tetrahydropyrimidines (4a-n).
Campuran aldehida (1 mmol), β-keto ester
(1 mmol), urea atau tiourea (1,5 mmol), dan
CrCl3•6H2O (15 mol%) dipanaskan dengan
pengadukan pada 80 ° C. Setelah selesai
reaksi, sebagaimana dinilai dengan
kromatografi lapis tipis (KLT), campuran
reaksi didinginkan, dituangkan ke dalam air
4°C, dan diaduk selama 5 menit. Padatan
disaring, dicuci dengan air dingin, disaring,
dan direkristalisasi dari etanol untuk
menghasilkan produk murni (4a-n). Data
spektral untuk beberapa produk yang
dikenal ini termasuk dalam bahan
pelengkap.
Hasil dan Pembahasan
Berdasarkan metode pertama,
didapatkan hasil studi partisi sel darah
merah (RBC) 27 menunjukkan bahwa
senyawa Chromene-Dyhydropirimidone
(CDHPM), memiliki afinitas yang lebih
tinggi terhadap RBC yang tidak
dibandingkan dengan plasma yang dapat
menyebabkan akumulasi. Rasio darah
terhadap plasma dari senyawa Chromene-
Dyhydropirimidone (CDHPM) mencapai
1,4, karenanya mungkin menunjukkan
toksisitas yang lebih rendah. Atenolol, yang
digunakan sebagai standar menunjukkan
partisi RBC 1,0, yang berada dalam
jangkauan porting. Hati memiliki peran
utama dalam metabolisme obat; karenanya
stabilitas metabolik suatu senyawa di hati
adalah parameter penting untuk diperiksa.
Stabilitas metabolik senyawa 1 dinilai dalam
mikrosom hati tikus (RLM) dan mikrosom
hati manusia (HLM). Hasilnya menunjukkan
bahwa senyawa Chromene-
Dyhydropirimidone (CDHPM) lebih dari
75% stabil di bawah kondisi eksperimental.
Studi stabilitas metabolik in-vitro dari
senyawa Chromene-Dyhydropirimidone
(CDHPM) menunjukkan waktu paruh in-
vitro yang sangat baik (T50%) dan
konsekuensinya dalam pembersihan trinsik
menggunakan kedua mikrosom hati (tikus
dan manusia) . Rasio ekstraksi hati
ditemukan di antara 0,4 dan 0,6 untuk tikus
dan manusia masing-masing. Dari hasil
tersebut dapat disimpulkan pembersihan
hepar 1 bergantung pada kapasitas
metabolisme intrinsik dan aliran darah hati,
dari hati.
Berdasarkan metode kedua, dari hasil
analisis menggunakan GC-MS belum
terbentuk senyawa etil asetoasetat dengan
massa molekul relative (Mr) 130 yang
diinginkan. Senyawa yang terbentuk dalam
sintesis ini merupakan senyawa etil asetat
dengan massa molekul relative (Mr) 88
dengan waktu retensi 2,443 menit dan
persentase 72,38%. Senyawa hasil sintesis
digunakan dalam sintesis senyawa
dihidropirimidinon (I) yang kemudian
dibandingkan dengan senyawa
dihidropirimidinon (II) dari etil asetoasetat
hasil industri. Sintesis senyawa
dihidropirimidinon melalui reaksi
siklokondensasi Claisen merupakan reaksi
yang melibatkan multi komponen starting
material. Untuk memperoleh senyawa ini
digunakan tiga starting material yaitu
benzaldehid (2,72 g), urea (1,2 g), etil
asetoasetat (2,7 g) serta jus nanas (2 mL)
sebagai katalis alam pengganti katalis asam
homogen. Dari senyawa dihidropirimidinon
I dan II memiliki gugus fungsi yang
diinginkan dan dapat diperkirakan bahwa
hasil reaksi tersebut adalah
dihidropirimidinon. Berdasarkan analisis
dari GCMS yang dihasilkan menunjukkan
bahwa tidak terbentuk senyawa
dihidropirimidinon I dengan waktu retensi
26,608 menit. Senyawa yang terbentuk
dalam sintesis ini yaitu asam oleat dengan
persentase kemurnian 6,16%. Senyawa yang
terbentuk dengan starting material
benzaldehid, senyawa etil asetat hasil
sintesis, urea serta katalis asam jus nanas ini
senyawa yang kemungkinan terbentuk yaitu
4-feni-2-pirimidinon. Menurut studi literatur
senyawa dihidropirimidininon memiliki
aktivitas antibakteri. Namun dari hasil
penelitian terhadap aktivitas antibakteri
senyawa dihidropirimidinon I dan II
menunjukkan bahwa senyawa tersebut tidak
memiliki zona hambat atau aktivitas
antibakteri terhadap Staphylococcus aureus
dan Escherichia coli. Tidak adanya zona
hambat pada dihidropirimidinon I dan II
juga dengan mempertimbangkan rendahnya
kandungan zat aktif senyawa
dihidropirimidinon. Faktor-faktor yang
dapat menyebabkan rendahnya kandungan
zat aktif senyawa dihidropirimidinon
diantaranya yaitu pemilihan pelarut yang
digunakan. Pemilihan pelarut didasarkan
pada prinsip like dissolves like, yaitu
senyawa yang non polar akan mudah larut
dalam pelarut non polar sedangkan senyawa
polar akan larut pada pelarut polar. Aquades
merupakan pelarut yang sangat polar
sehingga tidak dapat melarutkan senyawa-
senyawa organik atau senyawa non polar.
Berbeda dengan metanol yang dapat
digunakan sebagai pelarut karena sifatnya
yang dapat melarutkan berbagai senyawa
polar maupun non polar (Trianto, et al.;
2004). Kemudian penelitian yang dilakukan
oleh Sanusi, et al. (2012) menyatakan bahwa
pelarut metanol lebih efisien daripada
pelarut aquades dengan persentase 15,2%
(metanol) dan 12,3% (aquades). Pelarut
aquades memiliki daya larut sebesar 28,28%
dan pelarut etanol memiliki daya larut
39,45%.
Berdasarkan metode ketiga, awalnya
dilakukan reaksi kondensasi Biginelli tiga
komponen benzaldehida (3, 1, 0 mmol), urea
(2, 1, 5 mmol), dan etil asetoasetatat (1, 1, 0
mmol) dengan CrCl3•6H2O (15 mol%) di
bawah kondisi bebas pelarut pada 80 ° C.
Produk 4a, ditemukan pada 82%. Dari hasil
ini, kami memilih reaksi ini sebagai model
untuk mempelajari kondisi reaksi lebih
lanjut untuk sintesis 2-oxo- dan 2-thio-
1,2,3,4-tetrahydropyrimidines (4a-n). Untuk
mengoptimalkan kondisi reaksi, jumlah
katalis yang dibutuhkan bervariasi. Tidak
ada produk yang terjadi tanpa adanya katalis
bahkan setelah 4 jam. Karena penggunaan 5
mol% CrCl3•6H2O menghasilkan waktu
reaksi yang lebih lama dan hasil yang lebih
rendah dibandingkan dengan hasil awal,
dilakukan variasi katalis secara bertahap dari
5 mol% menjadi 20 mol%. Didapatkan hasil
bahwa 15 mol% CrCl3•6H2O optimal untuk
melakukan reaksi dengan waktu reaksi
relevan. Penggunaan katalis berlebih tidak
mengubah waktu reaksi atau hasil produk.
Laju reaksi meningkat pada kenaikan suhu
dari suhu kamar (RT) ke 90°C, dan hasil
produk meningkat secara signifikan. Reaksi
optimum berlangsung pada suhu 80°C
menghasilkan produk dengan kemurnian
82% dalam 30 menit. Kenaikan lebih lanjut
pada suhu tidak mempengaruhi hasil produk.
Selanjutnya 15 mol% CrCl3•6H2O sebagai
katalis diterapkan untuk berbagai aldehida,
urea/tiourea, dan etil/metil asetoasetat.
Reaksi dapat dilanjutkan melalui N-
acylimine B awal yang terbentuk dari
aldehida 3 dan urea 2. Koordinasi pasangan
elektron bebas nitrogen dalam N-acylimine
B dengan asam lewis dapat mengarah pada
pembentukan in-situ ion N-
carbamoyliminium C, yang cukup
elektrofilik untuk bereaksi dengan bentuk
enol dari etil asetoasetat, yang memberikan
intermediet rantai terbuka. Selanjutnya
siklisasi intramolekul, dengan eliminasi
H2O, menghasilkan 2-oxo- dan 2-thio-
1,2,3,4-tetrahydropyrimidines.
Simpulan
Dari metode pertama dapat
disimpulkan, penggunaan katalis Al/Fe
tanah liat untuk sintesis chromene-
dihydropyrimidinone (CDHPM) berdasarkan
studi farmakokinetik in-vitro menunjukkan
kelarutannya yang rendah, lipofilisitas yang
optimal, tidak ada aktivitas penghambatan
P-gp, permeabilitas menengah, partisi RBC
rendah dan yang paling penting adalah
stabilitas metabolik yang sangat baik dalam
mikrosom hati tikus. seperti pada mikrosom
hati manusia dengan rasio ekstraksi hati
menengah.
Dari metode kedua dapat
disimpulkan, sintesis senyawa etil
asetoasetat sebagai zat perantara dalam
sintesis dihidropirimidinon melalui reaksi
kondensasi Claisen belum terbentuk
walaupun secara fisik menunjukkan
senyawa etil asetoasetat. Pengujian aktivitas
antibakteri pada dihidropirimidinon I yang
menggunakan senyawa hasil sintesis
maupun dihidropirimidinon II yang
menggunakan etil asetoasetat hasil industri
pada konsentrasi 0,1, 0,2, dan 0,4%
menunjukkan tidak adanya hambatan atau
tidak mempunyai aktivitas antibakteri
terhadap Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli.
Berdasarkan metode ketiga dapat
disimpulkan, penggunaan katalis
CrCl3•6H2O (chromium (III)
chloridehexahydrate) tersedia untuk katalis
sintesis sederhana dan bersih dari beragam
2-oxo- dan 2-thio-1,2,3,4-
tetrahydropyrimidine dalam kondisi bebas
pelarut. telah dikembangkan. Penggunaan
katalis yang ramah lingkungan, tidak
beracun, dan murah, bersama dengan waktu
reaksi yang pendek dan hasil yang tinggi
hingga sangat baik, menyediakan metode
menarik untuk menyiapkan senyawa yang
aktif secara biologis ini.

DAFTAR PUSTAKA