Vol : 3 No : 2 Surabaya,Oktober2Ol4 NO.

ISSN:

e-journal
{

JOURNAL OF ANIMAL REPRODU

il
I

*\- I
-
\-

rplf ,l
*J
I tL
t *T r-.\q
/

.r
l,l1l
{ \
\
 ISSN: 2302-6464

O\IOZOA (Jurnal Reproduksi Hewan)

Vol. 3, No. 2, Oktober 2014
Terbit tiap 6 bula+ pada Bulan April dan Oktober

Susunan Dewan Redaksi

Ketua Penyunting
Budi Utomo

Sekretaris
Tri Wahp Suprayogi

Bendahara
Sri Mulyati

Mitra Bestari
Prof. Dr. Laba Maha Putra
Prof. Dr. Ismudiono
Prof. Mas'ud Hariadi, PhD.
Prof. Dr. Imam Mustofa
Prof. Dr. Wurlina
Prof. Dr. Pudji Srianto

Penyunting Pelaksana
Hardij anto
Suhemi Susilowati
Sri Pantja Madyawati
AMul Samik
Herry Agoes Hermadi
Rimayanti
Suzanita Utama

Penyunting Penyelia
Husni Anwar
Trilas Sardj ito
Indah Nourma Triana
Tatik Hernawati
Tjuk Imam Restiadi
Hermin Ratnani
Erma Safitri

Alamat Redaksi: Departemen Reproduksi Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan

Universitas Airlangga, Kampus C Unair, Jl. Mulyorejo Surabaya 60115. Telp. 031-5992785 -
59930 I 6; Fax. 03 l -59930 I 5. E-mail : ovozoa@yahoo.com
 ISSN: 2302-6464

OVOZOA JOI]RNAL OF ANIMAL REPRODUCTION

Vol. 3, No. 2, Oktober 2014
Terbit tiap 6 bulaq pada Bulan April dan Oktober

Daftar Isi
Halaman
I Pengukuran Kerusakan DNA Inti Spermatozoa Sapi Simental post T'howing
Yang Disentrifugasi Menggunakan Diluter Skim Kuning Telur Dan trsitin
Kacang Kedelai (Novia Candrawati, Suhemi Susilowati dan Bambang
Pumomo) 22s

) Viabilitas Spermatozoa Domba Merino Dengan Penambahan Berbagai

Konsentrasi NaCl (Habib Syaiful Arif Tusk4 Sri Mulyati, dan Soetji
Prawesthirini) ..... 231

3 Angka Resistensi Spermatozoa Domba Merino dan Kambing peranakan

Etawa Dalam NaCl0,9%, NaCl l%o, dan NaCl l,l% (Dedi Meldiarsani, Husni
Anwar, dan Budiarto) 235

4 Respon Timbulnya Birahi Setelah Pencabutan lv{PA (Medroxy progesterotv

Acetate) lntravaginal yang Diikuti Dengan Pemberian Hormon Gonadotsopin
Pada Domba Ekor Gemuk (Herry Agoes Hennadi, Nur Aisyah Suslia Rani,
Indah Norma Trian4 dan Setiawati Sigit) 239

5 Efek Kombinasi Pregrrant Mare Serum Gonadotropin (PMSG) dan Follicle

Stimulating Hormone (FSH) Untuk Superowlasi Terhadap Waktu paruh dan
Durasi Esfus Domba Ekor Gemuk (Ovis aries) fl-audita Setia Busta, Suzanita
Utam4 dan Ngakan Made Rai Widjaja) 243

6 Pengaruh Berbagai Waktu Thowing Semen Beku Domba Ekor Gemuk @EG)
Terhadap Persentase Viabilitas, Motilias Dan Membran plasma Utuh
Spermatozoa (Wong Aihuwa Diah Lestari, Suhemi Susilowati, dan Sunaryo
Hadi Warsito) 247

7 Upaya Menambah Pendapatan Petemak Bebek Petelur Dan Mengatasi

Pencemaran Air Permukaan Melalui Tatalaksana PakarL Pengolahan Limbah
Dan Diversifikasi Usaha (HardUanto, Tri Wahyu Suprayogi, dan Emy
Koestanti SaMoningnrm) )\)
8. Efisiensi Reproduksi Pada Sapi Potong Setelah Inseminasi Buatan Di Wilayah
Timur Dan Barat Kabupaten Lombok Timur Tahun 2012 (Shafia Khairani, Rr.
Sri Pantja Madyawati, dan Anwar Ma'rufi .. 260

9. Efisiensi Reproduksi Sapi Peranakan Limousin dan Simmental Hasil

Inseminasi Buatan (lB) Periode 2012 DI Kecamatan Ngoro Kabupaten
Jombang (Nur Oky Andreana, Ngakan Made Rai Widjaja, dan AMul Samik).. 266

10. Pengaruh Infusa Kulit Manggis (Gorcinia mangostana I.) Terhadap Reaksi
Akosom Spermatozoa Tikus Putih (Rattus norvegicus) (Gian'iLoooy F. A.,

IV
 ISSN: 2302-6464

Budi Utoni -.. dan Sri Hidanah) 270

I l. Penambahan Plasma Seminalis Sapi Terhadap Kualitas Spermatozoa
Kambing
no11lgmbekuan Dengan Waktu Ekuilibrasi yang Berbeda (Suhem'i
faa3
Susilowati, Trilas Sardjito, dan Indah Norma Triana).......I...
274
12. Identifikasi Protein Ferlility Associated Antigen (FAA) Pada Vesikula
Seminalis Sapi Brangus Jantan Menggunakan Teknik Sodium Dodecyl
Sulphaa Polyacrylamide Gel Ee lectrophores ,r (SDS-PAGE) Dan Westem
.8/or @uswita Permana Sari, Anwar Ma'ruf, Sri Pan$a Madyawati,
dan Tri
Wahyu SuprayogD ............. 281
13. Isolasi dan Identifikasi Osteopontin Mem bran Spermatozoa Sebagai
Upaya
Peningkatan Kualitas semen beku Sapi Perah Fressian holstein (Tatik
Hernawati, Abdul Samitq dan Erma Safitri)
286
14. Suplementasi Insuline-likc Growth Factor-I Serum Kuda Thoroughbred
Bunting Pada Peningkatan pembelahan Embrio Sapi (Tjuk Imam nestiaai;
... 294
Ovozoa (Jumal Reproduksi Hewan) Vol. 3, No. 2, Oktober 2014
ISSN: 2302-6464

MEASI,JREMENT OFNUCLEARDNA DAMAGE OF SIMENTAL BT'LL

SPERMATOZOA POST TIU'YING WTfiI SENTRIFUGED EGG YOLK SKIM
AND SOYBEAN LECITIN DILUTER

PENGI'KT]RAN KERUSAKAN DNA INTI SPERMATOZOA SAPI SIMENTAL

POST TIUVNG YA}IG DISENTRIFT'GASI MENGGIJNAKAN DILUTER
SKIM KIJNING TELI.]R DAN LESITIN KACANG KEDELAI
Novia Candrawatil), Suherni Susilowati2), Bambang Pumomo3)
tbtudenq 2bepartment ofveterinary Reproduction, 3beparunent of Veterinary Embriolory
Faculty of r/eterinary Medicine Airlangga University

ABSTRACT

The research was aimed to compare egg yolk skim and soybean lecithin diluter after
entrifugation. Comparison both diluter mc€sured by nuclear DNA damage of Simental bull
spemalozoa All parameter were measured before and after sentrifugarion. Aloptotic sperm
nuclear damage was measured by TUNNEL assay mctode using Apo-BrdU-lHC ^ lz Siru DNA
Fragmentation Assay Kit. The result of evaluation of nuclear DNA damage showed significant
diffcrence (p4,05), it was perhaps caused by the composition of soybean lecithin diluter was
morc complete with the present of antioxidant. The result of spermatozoan quality measruement
showed there were no significant difrerence except for the motility that showed siSnificant
differenc€ before sentrifugation (p4,05).

Keywords : Diluents, centrifueation, sperm nuclear DNA

Pendrhulu.n druing Salmonella tltphinuriwr sebanyak

Proses .In Yitro Fertilisasi (l\IF) mem-
butuhkan sernen beku yang berkualitas ting-
gi dengan bahan pengenccr semen yarg
mampu mernpertahankan kualitas spcrma-
tozoa selama prcses pendinginan, pembe-
kuaq maupun pada saat riawing. Bahan
pengencer scrnen beku harus mengandung
sumber nutrisi, bufer, Mhan anli cold
siact, antibiotik dan krioprotektan yang
dapat melindungi sp€rmatozoa selama
proses pembekuan dan ,,ralling. Saat ini
sccara mcluas telah dan digunakan bahan
pengencer yang mengandung buffer sepcrti
tis (hydrorymethyl) aminomethan dan
yang dapat dibuat berdasarkan resep seperti
skim kuning telur (SKQ yang sccara uni-
versal di gunakan untuk semen beku sapi
(Arifiantini dan Yusui 2012).
Pengencer Skim Kuning Tetur (SKT)
menggunakan kuning telur sebagai sa.lah
satu komponen pen),usun, yang diketahui
mcngandung berbagai jenis mikroorganis-
me dan mungkin menjadi media penyebar
beberapa penyalit menular. Didukung oleh
(Fronirg, dalam Surac\n:an, d':k. 2006)
melaporkan bahwa telur ayam ms mengan-
rata:Ials 67,09 CFU/ml. Salah satu pengen-
cer semen yang terbuat dari bahan Lesitin
Kacang Kedelai (LKK) dan tidak mengan-
-kuning
dung telur adalah Andromedo
(Minititbe - Jennan). Pengencer semen ko,
mersial ini selain tidak terkontaminasi
mikoorganisme yang brasal dari kuning
telur juga mudah digunakan karena telah
tersedia dalam paket siap pakai.
Proses pembekuan sel spermatozoa da-
pat mempengaruhi kerusakan membran
plasma spcrmatozoa Membran plasma
yang menyelubungi sebuah scl selain mern-
batasi keberadaan sebuah sel, juga meme-
lihara pertedaan pokok antara isi sel de.
ngan lingkungan. Nsrnun membrsn tersebut
tidak sekedar merupakan sebuah penyekat
pasif, melainkan juga merupakan sebuah
filter yang memiliki kemampuan memilih
bahan-bahan yang melintasinya dengan te-
tap mernelihara perbedaan kadar ion di
dalam dan di luar sel. Adanya protein dan
mukopolisakarida pada permukaan membu-
a: membran hidrofil, yang bcrani bahwa air
melekat dengan mudah pada membrdn
tersebul. Lipid lerletak di tengah membran

?25

Novia Candrawati, dkk
dan tidak dapat di tembus oleh z t yang
tidak larut dalam lipid, bagian lemak mo-
lekul fosfolipid mclekat pada fasc lipid
yang terletak di t€ngah membran sel, dan
bagian polar (terionisasi) molekul menonjol
ke permukaan ymg tcrikat secara elcktrs.
kimia dengan lapisan dan lapisan luar pro-
tein (Ayq 2012).
Menurut Rahmrh (2008) apabila mem-
bran sel nrsak mak! dapat berakibat rusak-
nya organel yang t€rdrpat di dalam sel
seperti mitokondria dan lisosom. Frmgsi
mitokondria merupakan tempat terjadinya
respirasi sel yang menglrasitkan energi. Ke-
rusakan mitokondria akan mengganggu pro-
ses metabolisme yang secara langsung akan
mempenganrhi pa'gerakan spermatozos-
Kcrusakan lisosom mengakibatkan lisisnya
enzim yang ada dalam sp€rmatozoa. K€ru-
sakan integritas membran spermatozoa juga
mempenganrhi integritas DNA spemsto-
zoa- Integdtas DNA spermatozoa p€nting
untuk keberlnsilan fertilisasi termasuk per-
kembangan dari embrio dan berasal dari
fetus yang normal atau ketunmannya- Spcr-
matozoa yang akan dibekukan scharusny8
menggunakan bahan pengencer yang memi-
liki b€rbagai kandungan flal ini dipcrlukan
karena selama proses pembuaran dan pe-
nyimpanan scmen bekrl bahan pengencer
terscbd dapat mengurangi motilitas dan
merusak integritas membran plasma sper-
matozoa, sehingga dapat menurunkan ting-
k8t fedilitas.
Reacttue 6ygen spec&s (ROS) meru-
pakan senyawa yang secara alamiah dipro-
duksi dalam metabolisme seluler. Produki
ROS berlebih disebabkan karena terse-
diurya oksigen dalam jumlah banyak di
dalam spennatozoa. Hal ini dapat
menimbulkan kmrsakan spermatozoa aki-
b* peroksidasi lipid- Peroksidasi lipid
ditimbulkan adanya radikal bebas, bebempa
contoh radikal bebas ters€but adalah super-
oksids, hidroksil dan peroksil (Darmawart
2004. Radikal b€bas ters€but sangat re-
aktif. dan bila bereaksi dengan asam lemak
tak jcnuh akan mcmbentuk pcroksidasi li-
pid. Peroksidasi lipid juga dapat terdekom-
posisi oleh senyawa radikal bebas menjadi
serryawa malondialdehrd (MDA), pada
umumnya hasil akhir dari peroksidasi di
spermalozos adalah terbentuknya senyawa
' VDA (Fauzi,2008).
226
MDA mempunyai korelasi dengan mo-
tilitas spermatozo4 sehingga dapat mem-
pengaruhi kualitas sp€rmatozoa dengan me-
nuunnya motilitas spermatozoa. Pada tahap
akhir proses sp€rmatogcnesis, histon (soza-
lic hislone) yang berasosiasi dengan DNA
pada inti sp€rmatozoa akan digantikan oleh
suatu protein transisi dan selanjutnya skan
terbentuk histon atau protamin (keduanya
adalah prolein sederhana yang secara ber-
gantian menstabilkan strulcur inti sperma-
tozoa selama sPermatogenesis) yang spesi-
fik untuk spermatozoa Penggantian protein
ini dianggap bertanggung jawab terhadap
pengh.anbatan proses trarskipsi pada inti
dan p€ngompakan V,tomatin (chromatin
compaction). Rusaknya strukur kornatin
juga dapat discbabkan oleh radikal bebas.
Salah satu agen oksidasi adalah ROS yang
dalam kadar tinggi dapat bersifat toksik
terhadap spermatoma (Saili, 2006). Penu-
n[ran produksi spermatozoa dapat juga
karcna penganrh apoptosis sel germinal.
Akivasi caspase 3 merupakan jalur ekse-
kutor sebelum terjadi apoptosis. Aktifitas
ca+ase 3 yang lama secara tidak langsung
dapat menyebabkan azoospermia (llyas,
2007).
Tujuan umum penelitian ini adalah
unok membandingkan terjadinya kerusak-
an DNA inti spermatoma pada semen beku
yang di senrifirgasi dengur menggunakan
dilutc skim kming telur dan lesitin kscang
kedelai. Tujuan khusus dari penelitian ini
adalah mengetahui kenrsakan DNA inti
spermstozoa sebagai indikator dari apopto-
sis saelah mengalami proses pembekuan
dan scntrifugasi.
Metodc Penelitiin
Sampel semen diperoleh dengan cara
penampungan menggrmakan vagina buatan
dari sspi Simental jantan yang berumu 5{
tahun. Pmampungan dilakuksn sore hari
pada jam 16.00-17.00 WIB sebanyak satu
kali.
Setelah semen ditampmg maka segera
dipcriksa sccara makoskopis maupun mi-
koskopis. Pemeriksaan tersebut bertujuan
urtuk mengetahui apakah semen masih
layak digpnakan untuk menjadi semen
beku. Pemeriksaan makroskopis meliputi :
volume, warna, bau, konsistensi, dan dera-
jat keasaman atau pH. SedanSkan untuk
pemeriksaan mikoskopis meliputi : gerak-
 Novia Candrawati, dkk
! E ss.,
gcrakan individq motilitas, dan
fdqnrrasi sp€mEtozoa- Semen yang
EDFmyai pcrs€rtasc motilitas swal mini-
@l 7V/o, konsentrasi spermatozoa lebih
dri 500 jda/ml pcrsentasc spermatozoa
bitrp lebih dai EV/o digunakan sebagai
smpcl. Selanjutslya pembuatan diluter
s&im kuning tclur dan diluter lesitin kacang
kcdclai yang kemudian dilanjutkan dengan
proscs pembekuan semen.
Keberadaan kromatin dalam inti sel
sangat menentukan status DNA yang terikat
.rat pada protamin yang berfimgsi sebagai
pelindung bagi DNA inti. Perubahan yang
terjadi pada kromatin akan berakibat pada
perubahan status DNA, sehingga pemerik-
saan kondisi komatin dapat menggambar-
kan status DNA yang terdapat di dalam
lcomatin tersebut. Kondensasi yang kurang
kompak berkorclasi positif dengan abnor-
malitas komatin dan DNA inti sp€rmato-
zoa" Kondisi ini juga dapat terjadi pada
spermatozoa yang terpapar oleh radikal
bebas atau akibat apoptosis. Pengukuran
DNA Inti spermatozoa yang mengalami
apoptosis dilakukan dengan metode TUN-
NEL_ assay menggunakan Apo-.BrdU-
IHC'" ln.t'tu DNA Frapentation Assay
Kit.
Pemeriksren DNA Inti Spe rmrtomr
Sampel di dapatku dari semen beku
yang telah diberi perlakuan kemudian pe-
lleaya di jadikan prEpsrat dengan fiksasi
meng$makan formalin 107o. Dilanjdkan
dengan meneteskan l00pl Proteinase K dan
diinkubasi pada suhu ruangan selama 20
menit. Dilanjutkan dengan menetcskan 3oZ
H2O, sebanyak l00pl diinkubasi dalam
suhu ruangan selama 5 menit. Teteskan
l00pl 5 kali Reetion Bufer, dilanjutkan
dengan meneteskan 50pl DNA labeling
solution yang terdiri dari (5 kali Reaction
Bufer, TdT Enzyme, Br lIfP, dan Disti-
lled HrO) sesuai perhitungaq diinkubasi
pada suhu 3?oC selama l-1,5 jam. Teteskan
l00yl Blocking ErrJEa diinkubasi nada
suhu nrangan sclama I0 mcnit. Dilanjutkan
dengan meneteskan l00pl Antibody Solu-
tion yang terdiri dari (Anti-BrdU-Biotin
mAb dan Blocking Bufer\ sesuai perhi-
tungan, diinkubasi pada suhu ruangan
dalam ruang gelap selama l-1,5 jam.
227
Dilanjutkan dengan meneteskan l00pl 200
k^li Conjugate yang terdiri dari (200 kali
Conjugae dm Bluking Bufer), diinkubasi
pada suhu ruangan sclama 30 menit. Se-
lama menunggu reaksi dari Co$ugde,
siapkan DAB solution yang tcrdiri dari (l
tab DAB+I tab H2O2+l ml Aqua), setelah
30menit lanjdkan dengan menetcskal
l00pl larutan DAB diinkubasi pada suhu
ruangan selarna 15 menit, setelah itu cuci
dengan aquadest. Pada setiap langkah per-
gantian penetesan larutan diatas lakukan
pencucian dengan PBS sebanyak satu kali
secara perlahan. Langkah selanjutnya ada-
lah pewamaan menggunakan l00l Methyl
Creen Cowterstain yang diinkubasi dalam
suhu ruangan selama 3 menit, dan dibilas
menggunakan 100% ethanol, dan langkah
ini di ulang sebanyak 2 kali kemudian dike-
ringkan dan ditutup menggunakan cover
g/ass yang telah diberi paraffin
Terlebih dahulu dilakukan uji Homo-
genitas pada sebaran data tmtuk mengetahui
normalitas data, bila data dalam benhrk skor
diuji menggunakan Mann-Whihey TesL
Data hasil p€nelitian dalam bentuk rasio di
uji normalitas disrribusi, sehingga daA yang
normal di analisis dengan menggunalcan Uji
T Indepndent (studenl's t) (Krsriningrum,
20o8).
Hesil den Pembehesrr
Hesil Pcmeriksern Kerusekrn DNA Inti
Spcrmetozor Sspi Simentrl
lIasil pemeriksaan rata-rata dan stan-
dart deviasi Kerusakan DNA inti sperma-
tozoa sapi Simental setelah di beri per-
lakuan dua bahan pengencer : pengencer
Skim Kuning Telur (SKT) dan pengencer
Lesitin Kacang Kedelai (LKK) yang telah
disenrifugasi tercantum pada Tabel l.
Pefiitungan kerussk&l DNA inti sper-
matozoa sapi Simental posf-fluwrng setelah
diberi perlakuan dua bahan pcngencer :
p€ngenc€r Skim Kuning Telur (SKT) dan
pengencer Lesitin Kacang Kedelai (LKK).
Hasil pemeriksaan menunjukkan belbeda
nysts (p<0,05) pada kerusakan DNA inti
spermatozoa dengan menggurakan uji
Mann-Whihey, hal ini dikarenakan sebaran
dari dsta tidsk rata. Dibawah ini terdapat
gambar dari spoptosis yang terdapat pada
 228
Novia Candnrrdi, dkk

Tsbcil.Rs.IstadanstmdsrtD.vi.sil,,silPcmcri}saoPc's€otsscKerrrsotmDNAlnti
Simgrtal Setelah

Kerusrkeu DNA lntl l2J2 + l10,!ff 6,78 + 61,00

Supcnkrip @a baris Yang sama dengan notasi yang sama mcnunjukkan tidak berbeda
nyata (p0,05)

DNA

15

10 r DNA

5 V
0
SKT txK

Gambr l. Diagram pada DNA inti sp€tmdozoa d€ngan perbandingan diluter SKT dan LKK

Gambar 2. Pcmoiksran DNA Inti spermatozoa tcrhadsp semen beku ymg telah mcngalami
perlakuan. rlasil pewunian spennalozoa dangan hte-l asJ'Y untuk mengetahui
adanya ryoptosis bNA irti pada kcpala ryermstozoa dengan terbentulmya
wama
coU* (pcmUcsaratr 1000X, diambil dcngm kamca Nikon H60OL)'
Panah merah : kepals sp€marozoa yanS rnengdami apoptosis padr DNA inti
Panatr biru : kcpala spcrrndozoa yang tidak menplami apoptosis'

DNA lnti sp€rmdozoa dm glmbr diagram
pcrbedaan dihtrlr SKT dst LKK.
Parglmatan eoposis DNA inti sper-
md,ozm @ saiaP samPcl, mcruPakan
junlah total yurg diteinukur psds 5 (ima)
lqanem pandmg Yang berbeda, Pada
p€mbsaran 1000 kali (dcngnn merrgguna'
kan solwte Ni-S Elemcnts 4.00.10;
Nikoo). Mcnggunakgn Apo-BrdU-IHC In
Srrz DNA Frsgmcntrtion Assgy Kit menun'
jul:kar hasil wama coklat muda hingga
coklat tus pada apoposis DNA inti, bila
tidak t€rjadi apoptosis maka kepala s6rma-
toaa tidak tkan tcrvsrn8i.
Pcrneriksaan kerusakan DNA inti spcr-
mdoma mcnrmjukkm hasil yang befteda
deoggr hasil Pcmeriksaan pada variabel
ini dis€bab'
pemeriksaan ysng lainnya. Hal
L- f.*" ai aat"m An&omedo Yang
menprdmg lesitin kacorg kedelai memi-
 Novia Candrawati, dkk.
Lrnposisi ymg leryl sehingga sesuai
ketentuan untuk msljadi diluter.
dcngan Toelihere 1993) p€rsyaratan
( dari aktivasi enzim
y.ng harus dimiliki oleh suatu bahan
semen adalah mengadung sum-
cncrgi, buffer, dan antibiotik untuk
Eah pertumbuhan kuman.
Hasil pcnelitian Aku (2005) melapor-
h bahwa di samping lesitin, Andromedo
jle mangandung protein, karbhidrat (fruk-
E, glukos4 manosa dan maltotriosa),
aincral (natrium, kalsium, kalium, magne-
siuru klorida, fosfor, dan mangan), asam
sit4 antiokida& gliserol, Iemd dan gli-
scrilfosforil kolin (GPC). Selanjutnya
dilaporkan bahwa Andromedo mengandung
lcsitin yang cukup tinggi, yakni sebanyak
5,75 g l00ml'' (6,76%). Seluruh bahan-
bahan yang terkandung di dalam pengencer
Andromedo merupakan balan-hahan yang
telah umum digunakan dalam menlrusun
pelgancer selama ini (Rizal, dkt., 2006).
Salah satu bahan dalam Andromedo
tcrdapat asan sitrat dan bila dalam siklus
keb akan berubah mcnjadi asam laktat.
Sesuai Setyawati (2010) Siklus asam sitrat
atau yutg dikenal juga dengan sebagai
siklus krebs atau siklus asam trikarboksilat
mempakan lintasan akhir bersama oksidasi
karbohidrat, lipid dan pmtein. Siklus Krebs
terkait dengan segi metabolisme biokimia
yang sebenamy4 bahan yang masuk berasal
dari karbohidrat dapat keluar mernbentuk
lemalq sedangkan bahan yang masuk
berasal dari asam amino dapat keluar
membentuk kafiohidrat. Namu& teramat
jarang ialah dari lemak menuju karbohidrat.
Kerusakan pada membran plasma sperma-
tozoa mengakibatkan kematian pada sel
(apoptosis), sel yang mengalami apoptosis
dengan cepat diserap oleh sel Sertoli,
sehingga berpengaruh pada jumlah sperma-
tozoa (Wardani, dkk., 2012).
Menurut Anom (2010) proses kemati-
an sel akibat adanya apoptosis yaitu kema-
tian sel secara terprogram tanpa didahului
oleh proses pembengkikan pada sel 313u
proses keradangan sel. Proses apoptosis
dimulai dengan adanya proses pengerutan
sel, selanjutnya sel akan pecah dan diikuti
dengan pecahnya inti sel. Proses apoptosis
pada sel dapat terjadi melalui proses
fisiologi maupun proses palologi. Proses
apoptosis yang terjadi secara fisiologis me-
libatkan peran dan fngsi telomer. Telomer
229
adalah suatu protein yang berfungsi melin-
dungi komosom telomer, telomer terbentuk
telomerase. Adanya
hambatan pada pembntukan enzim telome-
rase akan menyebabkan hambatan pemben-
tukan telomer sehingga komosom pecah
dan sel akan mati. Proscs apoptosis ini
membutuhkan waktu lebih lama dibanding-
kan dengan neloosis yaitu sckitar beberapa
jam hingga beberapa hari tergantung inisia-
tomya (Hadi, 201 I ).
Sesuai dengan pendapat Weber et a/.,
(2008) sel sperma menunjukkan karakteris-
tik dari sel apoptosis. Apoptosis adalah pro-
gram fisiologis kematian seluler yang ditan-
dai dengan pen),usutan sel, pengurangan
volume sitoplasm4 kondensasi komatin,
pembelahan DNA dan fi-agmentasi nucleus.
Setiap deregulasi proses apoptosis selama
spermalogenesis akaa mengarah pada pem-
bentukaa sperma yang rusak. Peningkatan
jumlah sperma yang mengalarni apoptosis
berpotensi menyebabkan infertil itas. Ada
kernungkinan bahwa kerusakan gcnetik pa-
da spenna, terjadinya apoptosis, dan motile-
tas sperma saling berhubungan. Pada sper-
ma normal terdapt Wrtrd,aan molekul pe-
nanda apoposis dengan sperma abnormal
(Hadi, 201 l).
Kesimpulrn
Diluter lesitin kacang kedelai lebih
baik dibandingkan dengan diluter skim ku-
ding telur yang dibuktikan dengan tinggi-
nya p€rsentasg kerusakan DNA inti sp€rma-
tozoa pada diluter skim kuning telur.
Daftar Pustskr
Ak''r A.S- 20C5. Preservasi dan Kriopre-
servasi Semen Domba Garut (Ovis
aries) dalam Berbagai Jenis Pengencer
Berbasis Lesitin. [Tesis]. Sekolah
Pascasadam" Institut Pertanian Bogor.
Bogor.
Anom, I.D.P.2010. Ekpresi Protein p53
dan Cycline Dependent Kinase (CDK)
Pada Kanker Mammae Mencit Setelah
Pemberian Fraksi Alkaloid Jarong
ffesis]. Program Pascasari ana- Univer-
sitas Airlangga. Surabaya
Arifriantini. RI. dan TL. Yusuf. 2012.
Keberhasilan Penggunaan Tiga Pe-
n3encer .lelrm Dua Jenis Kemasan
 Novia Candrawati, dkk.
pada Proses Pembekuan Semen Sapi
Frisien Holstein. Institute Pertanian
Bogor. Bogor.
Ayq D.K. 2012. Pcogaruh Berbagai Bahan
Pengarcer Tcdmdap Motilitas, Viabili-
tas dan Membran Plasma Utuh Sperma
Sapi Friesian Holstein Posl-Thai,ing
[Tcsis]. Progrart Magister Fakultas
Kedokteran Hcwan. Universitas Air-
langga- Surabaya-
Darmawarq H. 2007. Production of ROS
and its effect on mitochondrial and
nuclear DNA, human spermalozo4
and sperm frrnction- Media Jumal
Indonesia l6 (2):127- 133.
Fauzi, T.M. 2008. Pengaruh Pemberian
Timbal€ Asetat dan Vitamin C Setyawati, A.N. 2010. Handout Ajar Siklus
Terhadap Kadar Malondialdehid dan
Kualitas Spennarozoa Didalam Sekesi
Epididimis Mencit Albino (Mus
musculus m) Strain balb/c flesisl.
Univenias Sumatra Utar& Medan.
Hadi, RS. 201 l. Apoptosis Pada Sperma
Sebagai Pctanda Adanya Gangguan
Kesuburan Pria- Majalah Kesehatan
Pharma Medika 3(2): 282-285.
Ilyas, S. 2007. Analysis of protein fas
expression and caspase 3 activated at
the suppression phase to sp€rm quan-
tity by andmgcn/progestin combina-
tion. Jumal Biologi Sumaterd- 2 (2): 45
-47.
Kusriningrum. 2008. Perancangan Perco-
baan. Airlangga University Press.
Surabaya.
S€tyawati, A.N. 2010. Handout Ajar Siklus
Krcbs. Biokimia Fakultas Kedokleran
Univ€Tsitas Diponegom. Setyawati,
A.N. 2010. Handout Ajar Siklus
Krebs. Biokimia Fakultas Kedolderan
Universitas Dipo-.ncgoro.
230
Rizal,M, Mamaq S., Herdis, dan Achmad,
S.A. 2006. Peranan Plasma Semen
dalam Mempertahankan Kualitas Sper-
matozoa Asal Epididimis Domba yang
Disimpan pada Suhu Rendah (3-5oC).
il'tY tt (4):287-294.
Saili, T. 2006. Morfologi dan tntegritas
DNA Spermatozoa Domba Setetah
Diawetkan Dengan Metode Pengering-
bekuan [Tesis]. Institut Pertanian Bc.
gor. Bogor.
Surachmaru M., Herdis, M. A. Setiadi, dan
M. Rizal. 2006. Cryopreservation of
Ram Epididymal Spermatozoa Using
I€cithin-Based Extender. Jurnal lndo-
nesia Trop.Anim.Agric. 3l (2) : 83-89.
Krebs. Biokimia Fakultas Kedokteran
Universitas Diponegoro.
Toelihere, M.R. 1993. I$eminasi Buatan
Pada Ternak. Penerbit Angkasa.
Bandung.
Wardani, E.T. H. Alfi8h, dan I.B. Rai
Pidada- 2012. Pengaruh Ekstrak Jahe
(Zingiber offcinale Rosc.) var. Gaiah
Terhadap Jumlah dan Viabilitas Sper-
matozoa Mencit (Mus musculus) Yar.g
Terpapar 2-Methoxyethanol [Skipsi].
Fakultas Sains dan Telnologi. Univer-
sitas Airlangga Surabaya-
Weber, B.F., M.R. Andre, M.M. Canila, P.
Marcell4 Millamtto, D.G. Marcello,
C.D. Cassia, A.V. Jose and E.O.D.
Mayra 2008. Kinetics of changes in
plasma mernbrane related to apoptosis
and necrosis in bovine sperm cells at
different incubation times. BraL J. vet.
Res. anim. Sci., Slo Paulo, 45(5): 398-
404.