PROPOSAL SKRIPSI

UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK ETANOL 70%

DAUN MANGGA BACANG (Mangifera foetida L.) TERHADAP
TIKUS PUTIH JANTAN GALUR SPRAGUE DAWLEY YANG
DIBEBANI GLUKOSA
Disusun Untuk Melengkapi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Fam)

Oleh :

Prastika Erviana Septa

16040088

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

SEKOLAH TINGGI FARMASI MUHAMMADIYAH
TANGERANG
BANTEN
2019
 PROPOSAL SKRIPSI

UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK ETANOL 70%

DAUN MANGGA BACANG (Mangifera foetida L.) TERHADAP
TIKUS PUTIH JANTAN GALUR SPRAGUE DAWLEY YANG
DIBEBANI GLUKOSA
Disusun untuk melengkapi persyaratan memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

Oleh:
Prastika Erviana Septa
16040088

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

SEKOLAH TINGGI FARMASI MUHAMMADIYAH
TANGERANG
BANTEN
2019
 LEMBAR PERSETUJUAN

UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK ETANOL 70%

DAUN MANGGA BACANG (Mangifera foetida L.) TERHADAP

TIKUS PUTIH JANTAN GALUR SPRAGUE DAWLEY YANG

DIBEBANI GLUKOSA

Disusun oleh:

Prastika Erviana Septa

16040088

Telah disetujui oleh:

Pembimbing Utama Pembimbing Pendamping

Arini Aprilliani, M.S.Farm Nur’aini M.Farm.,Apt.

NIDN : 0417049401 NIDN : 0424098202

i
 KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Wr. Wb.

Puji syukur kehadirat Allah SWT, atas segala karunia dan hidayah-Nya,

sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul: “Uji Aktivitas

AntiDiabetes Ekstrak Etanol 70% Daun Mangga Bacang (Mangifera Foetida

L.) Terhadap Tikus Putih Jantan Galur Sprague Dawley Yang Dibebani

Glukosa”. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat bagi mahasiswa untuk

memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Program S1 Farmasi Sekolah Tinggi

Farmasi Muhammadiyah Tangerang.

Banyak pihak yang memberikan bantuan dan masukan baik berupa moril

dan materil. Untuk itu, penulis mengucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya

kepada:

1. Drs. Jaka Supriyanta, M.Farm., Apt selaku Ketua Sekolah Tinggi Farmasi

Muhammadiyah Tangerang.

2. Sefi Megawati, S.Farm., M.Si., Apt selaku Ketua Program Studi S1 di

Sekolah Tinggi Farmasi Muhammadiyah Tangerang.

3. Dina Pratiwi, S.Farm., M.Si selaku Pembimbing Akademik di Sekolah Tinggi

Farmasi Muhammadiyah Tangerang.

4. Arini Apriliani, S.Farm., M.S.Farm selaku Pembimbing Utama yang memberi

masukan demi sempurnanya proposal ini.

5. Nur’aini M.Farm.,Apt. selaku Pembimbing Pendamping yang memberi

arahan demi sempurnanya proposal ini.

ii
6. Kedua orang tuaku yang selalu memberikan doa dan semangat untuk

membantu dalam penyelesaian skripsi ini.

7. Muhamad Mardian yang selalu memberikan support, dan dukungan yang tak

henti-hentinya demi lancar nya penelitian ini.

8. Sahabatku dari bangku SD hingga saat ini Lisa Febri Budiarti yang selalu

sabar mendengarkan keluhan-keluhanku selama ini.

9. Sahabat seperjuangan, sependeritaan, seper-halu-an. Terimakasih banyak atas

haha hihi nya dan semangatnya selama 3 tahun ini, 12 serum antiku.

10. Sahabat seperkos-kosan yang selalu memberi dukungan, semangat dan

bantuan dengan ikhlas lahir batin.

11. Sahabat SMK squad yang selalu menebar emosi dan canda tawa.

12. Seluruh teman-teman seperjuangan angkatan 10 Sekolah Tinggi Farmasi

Muhammadiyah Tangerang.

13. Segenap staf Sekolah Tinggi Farmasi Muhammadiyah Tangerang.

Wassalamu’alaikum Wr. Wb.

Tangerang, 1 September 2019

Penulis

iii
 DAFTAR ISI

LEMBAR PERSETUJUAN ......................................................................... i

KATA PENGANTAR ................................................................................... ii
DAFTAR ISI .................................................................................................. iv
DAFTAR TABEL ......................................................................................... vi
DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... vii
DAFTAR SINGKATAN ............................................................................... viii
BAB I PENDAHULUAN .............................................................................. 1
I.1 Latar Belakang ................................................................................. 1
I.2 Rumusan Masalah ............................................................................ 3
I.3 Tujuan ............................................................................................... 4
I.4 Manfaat Penelitian ............................................................................ 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................... 6
II.1 Uraian Tanaman .............................................................................. 6
II.2 Simplisia .......................................................................................... 11
II.3 Pembuatan Simplisia ....................................................................... 13
II.4 Ekstrak dan Ekstraksi ...................................................................... 15
II.5 Pelarut ............................................................................................. 18
II.6 Glukosa ........................................................................................... 19
II.7 Diabetes ........................................................................................... 20
II.8 Glibenklamid ................................................................................... 32
II.9 Tikus Putih Jantan (Rattus norvegicus) .......................................... 33
II.10 Spektrofotometri UV-VIS ............................................................. 34
II.11Penelitian Relevan .......................................................................... 37
II.12 Kerangka Konsep .......................................................................... 38
II.13 Hipotesis ........................................................................................ 39
BAB III METODOLOGI PENELITIAN ................................................... 40
III.1 Deskripsi Objek Penelitian ............................................................ 40
III.2 Alat dan Bahan .............................................................................. 41

iv
 III.3 Variabel Penelitian ......................................................................... 42
III.4 Rancangan dan Prosedur Penelitian ............................................... 43
III.5 Cara Kerja ...................................................................................... 45
III.6 Teknik pengumpulan data ............................................................. 57
III.7 Definisi Operasional ...................................................................... 58
III.8 Skema Penelitian ........................................................................... 59
III.9 Rencana Penelitian ......................................................................... 60
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 61
LAMPIRAN .................................................................................................... 67

v
 DAFTAR TABEL

Tabel II.1 Faktor Resiko ................................................................................ 24

Table II.2 Kriteria Penegakan Diagnosis ....................................................... 25
Tabel III.1 Komposisi Sampel Uji .................................................................. 56
Tabel III.2 Definisi oprasional ........................................................................ 58
Tabel III.3 Rencana penelitian ........................................................................ 60

vi
 DAFTAR GAMBAR

Gambar II.1 Pohon Mangga Bacang ............................................................... 6

Gambar II.2 Struktur Kimia Flavonoid ........................................................... 8
Gambar II.3 Struktur Kimia Tanin .................................................................. 9
Gambar II.4 Struktur Kimia Kuinon ............................................................... 10
Gambar II.5 Struktur Kimia Steroid ............................................................... 10
Gambar II.6 Struktur Kimia Triterpenoid ....................................................... 11
Gambar II.7 Struktur Kimia Glukosa .............................................................. 20
Gambar II.8 Struktur Kimia Glibenklamid ..................................................... 32
Gambar II.9 Tikus Putih Jantan ...................................................................... 33
Gambar II.10 Instrumentasi Spektrofotometri UV-VIS................................... 35
Gambar II.11 Kerangka Konsep ..................................................................... 38
Gambar III.1 Skema Penelitian ....................................................................... 59

vii
 DAFTAR SINGKATAN

Singkatan Keterangan

ATP Adhenosin Tri Fosfat

CCl4 Carbon Tetra Klorida

Cm Centi Meter

Depkes Departemen Kesehatan

DKA Diabetes Ketoasidosis

DM Diabetes Melitus

DMG Diabetes Mellitus Gestasional

FeCl3 Feri klorida

GOD Glukosa oksidase

HCl Hidrogen klorida

IDDM Insulin Dependent Diabetes Mellitus

IFG Impaired Fasting Glucose

IGT Impaired Glucose Tolerance

Ml Mili liter

NaOH Natrium hidroksida

NIDDM Non Insulin Dependent Diabetes

Mellitus

Nm Nano meter

PAP Peroksidase

Ppm Part per million

viii
RISKESDAS Riset Kesehatan Dasar

TTGO Tes Toleransi Glukosa Oral

UV-VIS Ulta violet – visible

WHO World Health Organization

ix
 BAB I

PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang

Pengaruh globalisasi sangat memberikan efek terhadap pola hidup

masyarakat. Perubahan pola hidup yang cenderung tidak sehat seperti

konsumsi makanan cepat saji, kebiasaan merokok dan minum minuman

beralkohol, minim kegiatan berolahraga menyebabkan berbagai penyakit

yang disebabkan oleh stress oksidatif. Stres oksidatif diakibatkan oleh

ketidakseimbangan jumlah radikal bebas dengan antioksidan. Stres

oksidatif tanpa penanganan lebih lanjut akan menyebabkan degeneratif

seperti diabetes mellitus (DM) (Nasution dkk, 2018).

Glukosa darah merupakan gula yang terdapat dalam darah yang

terbentuk dari karbohidrat dan digunakan untuk menghasilkan energi.

Peningkatan kadar glukosa darah merupakan gejala awal terjadinya

penyakit diabetes mellitus. Diabetes Mellitus (DM) merupakan salah satu

penyakit tidak menular yang terus mengalami peningkatan prevalensi dan

berkontribusi terhadap penyebab peningkatan angka kematian yakni 63%

di seluruh dunia, yang artinya diabetes mellitus membunuh 36 juta jiwa

per tahunnya (Kartini, 2018).

Informasi RISKESDAS 2018 prevalensi DM di Indonesia

didasarkan pemeriksaan darah pada penduduk umur ≥ 15 tahun, 2013-

1
 2

2018 terdapat peningkatan dimana pada tahun 2013 sebesar 6,9% pada

tahun 2018 menjadi lebih tinggi sebesar 10,9% (Kemenkes, 2018).

Diabetes mellitus (DM) dapat disembuhkan dengan penggunaan

tumbuhan obat yang diperkirakan memiliki senyawa-senyawa yang

berkhasiat sebagai antidiabetes mellitus seperti flavonoid dan tanin.

Penggunaan obat tradisional secara umum dinilai lebih aman dari pada

penggunaan obat modern. Hal ini disebabkan karena obat tradisional

memiliki efek samping yang relatif lebih sedikit dari pada obat modern.

(Sinata novia dkk, 2016).

Salah satu tanaman yang digunakan untuk diabetes mellitus adalah

daun mangga. Khasiat dan manfaat daun mangga ternyata cukup

mengejutkan. Banyak sekali kandungan yang ada di dalam daun mangga

selain buahnya enak untuk di makan, daunnya pun sangat bermanfaat

untuk kesehatan. Bukan hanya penyakit diabetes saja yang bisa

dimanfaatkan dari khasiat daun mangga. Manfaat daun mangga ini juga

bisa menjadi obat alami untuk beberapa penyakit. Kandungan terbesar dari

ekstrak daun mangga adalah mangiferin yang telah diteliti oleh beberapa

peneliti memiliki fungsi antara lain sebagai antioksidan, analgesik,

antidiabetes, anti inflammatory, antitumor, antimikroba, dan peningkat

stamina atau daya tahan tubuh (Ilham dkk, 2015).

Berdasarkan penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh M Ilham

Syah, Suhendar dan Lanny Mulqie pada tahun 2015 dengan judul “Uji

Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Daun Mangga Arumanis

(Mangifera Indica L. “Arumanis”) pada Mencit Swiss Webster Jantan

 3

dengan Metode Tes Toleransi Glukosa Oral (Ttgo)”. Hal tersebut

menggambarkan mangiferin dalam ekstrak daun mangga mempunyai

potensi terhadap penyembuhan penyakit diabetes mellitus. Mangiferin

yang merupakan senyawa flavonoid ini dapat menurunkan kadar glukosa

darah dan lemak pada tikus diabetes lewat oral atau injeksi intraperitoneal.

Mekanisme dari efek hipoglikemik yang potensial ini mungkin disebabkan

oleh meningkatnya pelepasan insulin dari sel β-pancreas. Sehingga peneliti

tertarik untuk menggunakan daun mangga bacang karena sejauh ini belum

ada penelitian yang berkaitan dengan pemanfaatan ekstrak etanol daun

mangga bacang (Mangifera foetida L.) sebagai antidiabetes. Hal ini

mendorong peneliti untuk mengkaji lebih lanjut mengenai uji aktivitas anti

diabetes ekstrak etanol 70% daun mangga bacang (Mangifera foetida L.)

terhadap tikus putih jantan galur sprague dawley yang dibebani glukosa.

I.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, dapat dibuat rumusan masalah

sebagai berikut :

1. Apakah pemberian ekstrak etanol 70% daun mangga bacang

(Mangifera foetida L.) dapat menurunkan kadar gula darah pada tikus

putih jantan galur sprague dawley yang dibebani glukosa?

2. Berapa dosis optimal ekstrak etanol 70% daun mangga bacang

(Mangifera foetida L.) yang dapat menurunkan kadar gula darah pada

tikus putih jantan galur sprague dawley yang dibebani glukosa?

 4

3. Bagaimana perbandingan aktivitas anti diabetik antara glibenclamid

dengan ekstrak etanol 70% daun mangga bacang (Mangifera foetida

L.) terhadap tikus putih jantan galur sprague dawley yang dibebani

glukosa ?

I.3 Tujuan

berdasarkan rumusan masalah, maka dapat dibuat tujuan sebagai

berikut :

1. Untuk mengetahui apakah ekstrak etanol 70% daun mangga bacang

(Mangifera foetida L.) dapat menurunkan kadar gula darah.

2. Untuk mengetahui berapa dosis optimal ekstrak etanol 70% daun

mangga bacang (Mangifera foetida L.) yang dapat menurunkan kadar

gula darah pada tikus putih jantan galur spague dawley yang dibebani

glukosa.

3. Untuk mengetahui perbandingan aktivitas antidiabetik antara

glibenclamid dengan ekstrak etanol 70% daun mangga bacang

(Mangifera foetida L.) terhadap tikus putih jantan galur spague dawley

yang dibebani glukosa.

I.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Institusi

Menambah pengetahuan secara ilmiah tentang potensi

ekstrak etanol 70% daun mangga bacang (Mangifera Foetida L.)

terhadap kadar gula darah.

 5

1.4.2 Peneliti

Menambah pengetahuan secara ilmiah tentang ekstrak

etanol 70% daun mangga bacang (Mangifera foetida L.) terhadap

kadar gula darah .

1.4.3 Bagi masyarakat

Sebagai informasi untuk masyarakat bahwa daun mangga

bacang (Mangifera foetida L.) dapat menurunkan kadar gula darah.

 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Uraian Tanaman

Gambar II.1 Pohon Mangga Bacang (Mangifera foetida L.) (Pangkalan ide,2010)

II.1.1 Klasifikasi Tanaman (Pangkalan ide, 2010)

Kingdom : Plantae

Subkingdom : Tracheobionta

Super Divisi : Spermatophyta

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Sub Kelas : Rosidae

Ordo : Sapindales

Famili : Anacardiaceae

Genus : Mangifera

Spesies : Mangifera foetida L.

6
 7

II.1.2 Morfologi Tanaman

Ciri-ciri mangga bacang dapat diperhatikan dari bentuk

pohon, daun, bunga, dan buahnya. Ciri-ciri tersebut adalah sebagai

berikut :

1. Pohon mangga bacang berpohon sedang, dan berdaun lebat.

Memiliki diameter kurang lebih 50 cm dengan ketinggian pohon

mencapai 20-30 m.

2. Pohon mangga bacang memiliki ranting yang cukup banyak,

sehingga sangat berpengaruh terhadap jumlah buahnya. Karena

jumlah rantingyang begitu banyak dan rimbun maka buahnya

pun banyak dan rimbun.

3. Daun mangga bacang ini bergelombang pada tepi sampai

permukaan daun. Panjang daunnya sekitar 35 cm sampai 40 cm.

lebarnya berkisar antara 4 cm sampai 8 cm. Bagian ujung daun

meruncing, sedangkan bagian pangkal agak tumpul sehingga

dilihat dari kejahuan tampak berbentuk oval.

4. Mangga bacang mulai berbunga pada bulan Mei sampai

Agustus. Tidak semua bunga menjadi buah karena faktor alam

atau kondisi bunga itu sendiri. Misal rontok sebelum menjadi

buah atau putik tidak terbuahi. Bunga berbentuk majemuk,

berwarna agak keputih-putihan dengan tangkai bunga berwarna

ungu kemerah-merahan dan bentuknya mengerucut.

5. Mulai tampak buah biasanya pada bulan September. Setelah

besar dan masih muda buahnya berbentuk bulat dengan warna

 8

coklat muda atau hijau muda. Ketika sudah tua masak warna

buahnya berubah agak hijau tua atau kecoklatan. Kulitnya tebal

dilapisi lilin tipis sehingga tampak pori-pori kulit dengan jelas.

Sepintas seperti terdapat bintik coklat tua atau hitam.

6. Buah mangga bacang rasanya agak asam dengan serat yang

kasar. Bentuknya agak besar lonjong dengan serat yang panjang-

panjang. Warna dagingnya kuning kemerah-merahan. Walaupun

dalam keadaan tua masak, kuloit mangga ini mengandung getah

yang jika terkena kuloit menyebabkan kulit terasa gatal

menyengat oleh karena itu sebelum dimakan kulit dikupas agak

tebal dan harus dicuci terlebih dahulu (Suparman, 2007).

II.1.3 Kandungan Senyawa Tanaman

1. Flavonoid

Gambar II.2 struktur flavonoid (Hanani,2015)

Flavonoid merupakan golongan senyawa metabolit

sekunder yang mengandung 15 atom karbon dalam inti

dasarnya yang tersusun dalam konfigurasi C6-C3-C6 yaitu dua

cincin aromatik yang dihubungkan oleh satuan tiga karbon

yang dapat atau tidak dapat membentuk cincin ketiga. Ciri -

 9

Ciri flavonoid yaitu bersifat agak asam dan dapat larut dalam

basa, senyawa polar dan larut dalam pelarut-pelarut polar

seperti etanol, methanol, butanol, dimetilsulfooksida,

dimetilformamida, air dan lain-lain (Hanani, 2015).

2. Tannin

Gambar II.3 Struktur Tannin (Harborne,1987)

Tanin disebut sebagai polifenol tanaman yang mempunyai

peran alam pengikatan protein, pembentuk pigmen, sebagai ion

metal, dan mempunyai susunan molekul yang besar, serta

sebagai aktivitas antioksidan. Tanin memiliki rumus molekul

C76H52O46 . Ada yang berwarna kuning atau cokelat, ada juga

yang tidak berwarna. Tanin tumbuhan dibagi menjadi dua

golongan, yaitu tanin terkondensasi dan tanin terhidrolisis.

Kadar tanin yang tinggi mempunyai arti penting bagi

tumbuhan yakni pertahanan bagi tumbuhan dan membantu

mengusir hewan pemakan tumbuhan (Harborne, 1987).

 10

3. Kuinon

Gambar II.4 Struktur kuinon (Putri,2017)

Kuinon adalah senyawa berwarna dan mempunyai

kromofor dasar seperti kromofor dasar pada benzokuinon, yang

terdiri dari 2 gugus karbonil yang berkonjugasi dengan 2 ikatan

rangkap. Kuinon terdiri dari 4 kelompok : benzokuinon,

naftokuinon, antrakuinon, dan kuinon isoprenoid. Tiga

kelompok pertama biasanya terhidrolisasi dan bersifat senyawa

fenol. Kuinon isoprenoid terlibat dalam respirasi sel dan

fotosintesis dan dengan demikian kuinon tersebar secara merata

dalam tumbuhan (Putri, 2017).

4. Steroid / triterpenoid

Gambar II.5 struktur kimia steroid (Poedjiadi dan Supriyanti,1994)

 11

Steroid merupakan golongan lipid yang diturunkan dari

senyawa jenuh yang dinamakan siklopentanoperhidrofenantrena,

yang memiliki inti dengan 3 cincin sikloheksana terpadu dan 1

cincin siklopentana yang tergabung pada ujung cincin

sikloheksana tersebut (Poedjiadi dan Supriyanti, 1994).

Gambar II.6 struktur kimia triterpenoid (Poedjiadi dan Supriyanti,1994)

Triterpenoid adalah senyawa dengan kerangka karbon yang

disusun dari 6 unit isoprena, suatu rantai C30 hidrokarbon

asiklik. senyawa tersebut mempunyai struktur siklik yang relatif

kompleks, kebanyakan suatu alkohol, aldehida, atau asam

karboksilat (Poedjiadi dan supriyanti, 1994).

II.2 Simplisia

Proses pemanenan dan preparasi simplisia merupakan proses yang

menentukan mutu simplisia dalam berbagai artian, yaitu komposisi

senyawa kandungan, kontaminasi dan stabilitas bahan. Namun demikian

simplisia sebagai produk olahan, variasi senyawa kandungan dapat di

perkecil, diatur atau dikonstankan (Depkes RI, 2000).

 12

Simplisia dapat digolongkan menjadi tiga jenis, berdasarkan bahan

bakunya (widaryanto, 2018) :

a. Simplisia Nabati

Simplisia nabati ialah simplisia yang dibuat dari tanaman, baik

berupa keseluruhan, bagian organ, ataupun eksudat tanaman. Eksudat

ialah bagian isi sel yang keluar secara spontan atau sengaja

dikeluarkan dari selnya dengan teknik tertentu. Contoh bagian organ

tanaman yang dimanfaatkan sebagai simplisia ialah herba (seluruh

bagian tanaman), akar, umbi, daun, rimpang, batang, bunga, buah, biji,

pati, getah, damar, minyak, malam, dan kulit kayu.

b. Simplisia Hewani

Simplisia hewani ialah simplisia yang bahan dasarnya dari hewan.

Simplisia jenis ini dapat berupa hewan utuh atau zat yang dihasilkan

oleh hewan dan belum berwujud senyawa kimia murni, seperti madu.

c. Simplisia Pelikan atau Mineral

Simplisia pelikan ialah simplisia yang berwujud bahan mineral

atau pelikan, masih belum mengalami proses pengolahan atau sudah

diolah namun masih dengan teknik yang sederhana dan masih belum

berbentuk zat kimia murni. Contohnya ialah serbuk tembaga dan seng.

Standarisasi suatu simplisia tidak lain pemenuhan terhadap

persyaratan sebagai bahan dan penetapan nilai berbagai parameter dari

produk seperti yang ditetapkan sebelumnya. Standarisasi simplisia

mempunyai pengertian bahwa simplisia yang akan digunakan yang

tercantum dalam monografi terbitan resmi Departemen Kesehatan

 13

(Materia Medika Indonesia). Sedangkan sebagai produk yang langsung

dikonsumsi (serbuk jamu dsb.) masih harus memenuhi persyaratan produk

kefarmasian sesuai dengan peraturan yang berlaku. (Depkes RI, 2000).

II.3 Pembuatan Simplisia

Proses pembuatan simplisia menurut (Prasetyo, 2013) terbagi

menjadi:

a. Sortasi basah

Sortasi basah dilakukan untuk memisahkan kotoran-kotoran

atau bahan asing lainnya dari bahan simplisia. Misalnya pada

simplisia yang dibuat dari akar suatu tanaman obat, bahan-

bahan asing seperti tanah, kerikil, rumput, batang, daun, akar

yang telah rusak, serta kotoran lain harus dibuang. Tanah

mengandung bermacam-macam mikroba reaksi antara bahan

dan logam pisau.

b. Pencucian

Pencucian dilakukan untuk menghilangkan tanah dan

kotoran lainnya yang melekat pada bahan simplisia. Air yang

digunakan sebaiknya adalah air yang mengalir yang bersumber

dari air bersih, seperti PAM, air sumur, atau mata air.

c. Perajangan

Proses ini dilakukan untuk mempermudah proses

pengeringan, tetapi apabila ukuran simplisia cukup kecil atau

tipis maka proses ini dapat diabaikan.

 14

d. Pengeringan

Tujuan pengeringan yaitu untuk mendapatkan simplisia

yang tidak mudah rusak, sehingga dapat disimpan dalam waktu

yang lebih lama. Dengan mengurangi kadar air dan

menghentikan reaksi enzimatik akan dicegah penurunan mutu

atau perusakan simplisia. Pengeringan simplisia dilakukan

dengan menggunakan sinar matahari atau suatu alat pengering.

Hal-hal yang perlu diperhatikan selama proses pengeringan

adalah suhu pengeringan, kelembapan udara, aliran udara,

waktu pengeringan dan luas permukaan bahan. Untuk bahan

yang mengandung minyak atsiri atau komponen lain yang

termolabil hendaknya dilakukan pada suhu yang tidak terlalu

tinggi dengan alitran udara rendah secara teratur. Tetapi untuk

bahan yang tahan panas dapat mengunakan suhu dibawah

700C.

e. Sortasi Kering

Sortasi kering bertujuan untuk memisahkan bahan-bahan

asing, seperti bagian tanaman yang tidak diinginkan dan

kotoran lain, yang masih ada dan tertinggal di simplisia kering.

f. Pengepakan

Pengepakan simpliksia menggunakan wadah yang inert,

tidak beracun, dapat melindungi simplisia dari cemaran dan

mencegah kerusakan.
 15

g. Penyimpanan

Penyimpanan simplisia sebaiknya ditempat yang

kelembapannya rendah, terlindung dari sinar matahari, dan

terlindung dari gangguan serangga dan tikus. Simplisia nabati

atau hewani harus dihindarkan dari srangga, cemaran mikroba

dengan penambahan kloroform, CCl4, eter, atau pemberian

bahan yang sesuai sehingga tidak membahayakan kesehatan.

h. Pemeriksaan mutu

Simplisia yang diterima harus simplisia murni dan

memenuhi persyaratan umum untuk simplisia. Simplisia yang

bermutu adalah simplisia yang memenuhi persyaratan

Farmakope Indonesia atau Materia Medika Indonesia.

II.4 Ekstrak dan Ekstraksi

II.4.1 Pengertian Ekstrak

Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan

mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia

hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau

hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa

diperlakukan sedemikian memenuhi baku yang telah ditetapkan.

Sebagian besar ekstrak dibuat dengan mengekstraksi bahan baku

obat secara perkolasi (Depkes RI, 2000).

 16

II.4.2 Ekstraksi

Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang

dapat larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut

denggan pelarut cair. Kelarutan dan stabilitas senyawa pada

terlindung dari gangguan serangga dan tikus. Simplisia nabati atau

hewani hatus dihindarkan dari serangga, cemaran mikroba dengan

penambahan klorofom, CCl4, eter, atau pemberian bahan yang

sesuai sehingga tidak membahayakan kesehatan. (Depkes RI,

2000). Pembagian metode ekstraksi menurut (Depkes RI, 2000)

yaitu:

a. Cara Dingin

1. Maserasi

Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan

menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan

atau pengadukan pada temperatur ruangan (kamar). Cairan

penyari akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam

rongga sel yang mengandung zat aktif yang akan larut,

karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat

aktif didalam sel dan diluar sel maka larutan di desak keluar

2. Perkolasi

Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu

baru sampai sempurna (exhaustive extraction) yang

umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses

terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi

 17

antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan/

penampungan ekstrak), terus menerus sampai diperoleh

ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan.

b. Cara Panas

1. Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada

temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah

pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya

pendingin balik. Umumnya dilakukan 3 sampai 5 kali

sehingga hasil proses ekstraksi sempurna.

2. Soxhletasi

Soxhlet adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang

selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus

sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut

relatif konstan dengan adanya pendingin balik.

3. Digesti

Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan

kontinu) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur

ruangan (kamar), yaitu secara umum dilakukan pada

temperatur 40 - 50°C.

4. Infundasi

Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada

temperatur penangas air (bejana infus tercelup dalam

 18

penangas air mendidih, temperatur terukur 96-98°C selama

waktu tertentu 15 - 20 menit.

5. Dekokta

Dekokta adalah infus pada waktu yang lebih lama dan

tempratur samapai titik didih air, yakni 30 menit pada suhu

90 sampai 100oC. (Depkes RI, 2000)

II.5 Pelarut

Pelarut pada umumnya adalah zat yang berada pada larutan dalam

jumlah besar, sedangkan zat lainnya dianggap sebagai zat terlarut. Pelarut

yang digunakan pada proses ekstraksi haruslah merupakan pelarut terbaik

untuk zat aktif yang terdapat dalam simplisia, sehingga zat aktif dapat

dipisahkan dari simplisia dan senyawa lainnya yang ada dalam simplisia

tersebut. Hasil akhir ekstraksi ini adalah didapatkannya ekstrak yang

hanya mengandung sebagian besar dari zat aktif yang diinginkan (Marjoni,

2016).

II.5.1 Pengelompokkan Pelarut Berdasarkan Kepolaran

Pelarut berdasarkan kepolarannya menurut Marjoni (2016) yaitu :

1. Pelarut Polar

Pelarut polar adalah senyawa yang memiliki rumus umum

ROH dan Menunjukkan adanya atom hidrogen yang

menyerang atom elektronegatif (Oksigen). Pelarut dengan

tingkat kepolaran yang tinggi merupakan pelarut yang cocok

baik untuk semua jenis zat aktif karena disamping menarik

 19

senyawa dengan tingkat kepolaran lebih rendah. Contoh pelarut

polar diantaranya : air, methanol, etanol, dan asam asetat.

2. Pelarut Semi polar

Pelarut semipolar adalah pelarut yang memiliki molekul

yang tidak mengandung ikatan O-H. Pelarut dalam kategori ini,

semuanya memiliki dipole yang besar. Ikatan dipole ini

biasanya merupakan ikatan rangkap antara karbon dengan

oksigen atau nitrogen. Pelarut ini digunakan untuk melarutkan

senyawa-senyawa yang juga bersifat semipolar dari tumbuhan.

Contoh pelarut semipolar adalah : aseton, etil asetat, DMSO,

dan klorometan.

3. Pelarut Non polar

Pelarut nonpolar merupakan senyawa yang memiliki

konstanta dielektrik yang rendah dan tidak larut dalam air.

Pelarut ini baik digunakan untuk menarik senyawa yang sama

sekali tidak larut dalam pelarut polar seperti minyak. Contoh

pelarut nonpolar : heksana, kloroform, dan eter.

II.6 Glukosa

Glukosa merupakan sumber energi utama bagi seluruh manusia.

Glukosa terbentuk dari karbohidrat yang dikonsumsi melalui makanan dan

disimpan sebagai glikogen di hati dan otot.

 20

Gambar II.7 Struktur kimia glukosa

Glukosa merupakan sumber tenaga yang terdapat dalam biologi

dan dibutuhkan oleh tubuh. Glukosa termasuk salah satu sumber tenaga

yang dibutuhkan oleh tubuh. Hal itu terjadi disebabkan Karena keadaan

abiotik glukosa dapat terbentuk dari folmaldehid sehingga akan mudah

didapatkan bagi sistem biokimia. Keberadaan glukosa termasuk hal yang

sangat penting bagi organism tingkat atas dibanding dengan heksosa

lainnya yang secara spesifik tidak mudah bereaksi dengan gugus amin

fungsi enzim dapat tereduksi akibat reaksi glikosilasi tersebut. Dengan

banyaknya glukosa yang berada dalam isomer siklik yang kurang reaktif

dapat menyebabkan rendahnya laju glikosilasi. Tetapi komplikasi sakit

lainnya seperti kebutaan, gagal ginjal, diabetes dapat disebabkan oleh

faktor lain salah satunya glikosilasi protein (Praja, 2015)

II.7 Diabetes

II.7.1 Pengertian diabetes

Diabetes mellitus (DM) didefinisikan sebagai suatu

penyakit atau gangguan metabolisme kronis dengan multi etiologi

 21

yang ditandai dengan tingginya kadar gula darah disertai dengan

gangguan metabolisme karbohidrat, lipid dan protein sebagai

akibat insufisiensi fungsi insulin. Insufisiensi fungsi insulin dapat

disebabkan oleh gangguan atau defisiensi produksi insulin oleh sel-

sel beta Langerhans kelenjar pankreas, atau disebabkan oleh

kurang responsifnya sel-sel tubuh terhadap insulin (WHO, 1999).

Diabetes mellitus (DM) merupakan sesuatu yang tidak

dapat dituangkan dalam satu jawaban yang jelas dan singkat, tapi

secara umum dapat dikatakan sebagai suatu kumpulan problema

anatomik dan kimiawi yang merupakan akibat dari sejumlah faktor.

Pada diabetes mellitus didapatkan defisiensi insulin absolut atau

relatif dan gangguan fungsi insulin. Diabetes mellitus

diklasifikasikan atas DM tipe 1, DM tipe 2, DM tipe lain, DM

Gaestasional, dan Pra Diabetes (Eva decroli, 2019).

II.7.2 Kasifikasi Diebetes Mellitus Berdasarkan Etiologi

A. Diabetes Mellitus Tipe 1 :

Destruksi sel B umunya menjuruis kea rah dedfisiensi insulin

absolut

1. Melalui proses imunologik (otoimunologik)

2. Idiopatik

B. Diabetes Mellitus tipe 2 :

Bervariasi, mulai yang predominan resisten insulin disertai

defisiensi insulin relatif sampai yang predominan gangguan

sekresi insulin bersama resistensi insulin.

 22

C. Diabetes Mellitus Tipe Lain :

1. Defek genetik fungsi sel β :

a. Kromosom 12, HNF-1 α (dahulu disebut MODY 3)

b. kromosom 7, glukokinase (dahulu disebut MODY 2)

c. kromosom 20, HNF-4 α (dahulu disebut MODY 1)

d. DNA mitokondria

2. Defek genetik kerja insulin

3. Penyakit eksokrin pankreas :

a) Pankreatitis

b) Trauma atau pankreatektomi

c) Neoplasma

d) Cystic fibrosis

e) Hemokromatosis

f) Pankreatopati fibro kalkulus

4. Endokrinopati :

a) Akromegali

b) Sindroma cushing

c) Feokromositoma

d) Hipertiroidisme

5. Diabetes karena obat/zat kimia: Glukokortikoid, hormon

tiroid, asam nikotinat, pentamidin, vacor, tiazid, dilantin,

interferon.

6. Diabetes karena infeksi

7. Diabetes imunologi ( jarang )

 23

8. Sindroma genetik lain : sindroma down, klinefelter, turner,

Huntington, chorea, prader willi.

D. Diabetes Mellitus Gestasional

Diabetes mellitus yang muncul pada masa kehamilan,

umumnya bersifat sementara, tetapi merupakan faktor risiko

untuk DM Tipe 2

E. Pra-diabetes :

1. IFG ( Impaired fasting glucose ) = GPT (Glukosa Puasa

Terganggu)

2. IGT (Impaired Glucose Tolerance) = TGT (Toleransi

Glukosa Terganggu) (Depkes RI, 2005).

II.7.3 Faktor resiko

Setiap orang yang memiliki satu atau lebih faktor risiko

diabetes selayaknya waspada akan kemungkinan dirinya mengidap

diabetes. Para petugas kesehatan, dokter, apoteker dan petugas

kesehatan lainnya pun sepatutnya memberi perhatian kepada

orang-orang seperti ini, dan menyarankan untuk melakukan

beberapa pemeriksaan untuk mengetahui kadar glukosa darahnya

agar tidak terlambat memberikan bantuan penanganan. Karena

makin cepat kondisi diabetes mellitus diketahui dan ditangani,

makin mudah untuk mengendalikan kadar glukosa darah dan

mencegah komplikasi-komplikasi yang mungkin terjadi. Beberapa

faktor risiko untuk diabetes mellitus, terutama untuk DM Tipe 2,

dapat dilihat pada tabel (Depkes RI, 2005).

 24

Tabel II.1 Faktor Resiko Diabetes Mellitus

Riwayat Diabetes dalam keluarga Diabetes Gestasional

Melahirkan bayi dengan berat badan >4 kg Kista
ovarium (Polycystic ovary syndrome) IFG
(Impaired fasting Glucose) atau IGT (Impaired
glucose tolerance)
Obesitas >120% berat badan ideal
Umur 20-59 tahun : 8,7%
> 65 tahun : 18%
Etnik/Ras
Hipertensi >140/90mmHg
Hiperlipidemia Kadar HDL rendah <35mg/dl
Kadar lipid darah tinggi >250mg/dl
Faktor-faktor Lain Kurang olah raga
Pola makan rendah serat

II.7.4 Patofisiologi

Tabel II.2 Kriteria Penegakan Diagnosis

Glukosa plasma puasa Glukosa plasma 2 jam

setelah makan

Normal <100 mg/dl <140 mg/dl

Pra-diabetes 100-125 mg/dl -

IFG dan IGT - 140 – 199 mg/dl

Diabetes ≥ 126 mg/dl ≥ 200 mg/dl

DM tipe 1 (IDDM) terjadi pada 10% dari semua kasus

diabetes. Secara umum, DM ini berkembang pada anak-anak atau

pada awal masa dewasa yang disebabkan oleh kerusakan sel β

pankreas akibat aoutoimun, sehingga terjadi defisiensi insulin

absolut. Reaksi autoimun umumnya terjadi setelah waktu yang

panjang (9-13 tahun) yang ditanai oleh adanya parameter-

parameter sistem imun ketika terjadi kerusakan sel β (Depkes RI,

2005).
 25

DM tipe 2 (NIDDM) terjadi 90% dari semua kasus diabetes

dan biasanya ditandai dengan resistensi insulin dan difisiensi

insulin relatif. Resistens insulin ditandai dengan peningkatan

lipolisis dan produksi asam lemak bebas, peningkatan produksi

glukosa hepatik, dan penurunan pengambilan glukosa pada otot

seklet. Disfungsi sel β mengakibatkan gangguan pda pengontrolan

glukosa darah. DM tipe 2 lebih disebabkan karena gaya hidup

penderita diabetes (kelebihan kalori, kurangnya olahraga, dan

obesitas) dibandingkan pengaruh genetik. Diabetes yang

disebabkan oleh fator lain (1-2% dari semua kasus diabetes)

termasuk gangguan endokrin (misalnya akromgali, sindrom

cushing), diabetes militus gestational (DMG), penyakit pankreas

eksorin (pankreatis), dan karena obat (glukokortikoid, pentamidin,

niasin dan α-interferon) (Depkes RI, 2005).

Komplikasi mikrovaskular berupa retinopati, neuropati, dan

nefropati sedangkan komplikasi mikrovaskular berupa penyakit

jantung koroner, stroke, dan penyakit vaskular periferal (Depkes

RI, 2005).

II.7.5 Manifestasi klinik

Diabetes seringkali muncul tanpa gejala. Namun demikian

ada beberapa gejala yang harus diwaspadai sebagai isyarat

kemungkinan diabetes. Gejala tipikal yang sering dirasakan

penderita diabetes antara lain poliuria (sering buang air kecil),

polidipsia (sering haus), dan polifagia (banyak makan/mudah

 26

lapar). Selain itu sering pula muncul keluhan penglihatan kabur,

koordinasi gerak anggota tubuh terganggu, kesemutan pada tangan

atau kaki, timbul gatal-gatal yang seringkali sangat mengganggu

(pruritus), dan berat badan menurun tanpa sebab yang jelas

(Depkes RI,2005).

a. Pada DM Tipe I gejala klasik yang umum dikeluhkan

adalah poliuria, polidipsia, polifagia, penurunan berat

badan, cepat merasa lelah (fatigue), iritabilitas, dan pruritus

(gatal-gatal pada kulit).

b. Pada DM Tipe 2 gejala yang dikeluhkan umumnya hampir

tidak ada. DM Tipe 2 seringkali muncul tanpa diketahui,

dan penanganan baru dimulai beberapa tahun kemudian

ketika penyakit sudah berkembang. dan komplikasi sudah

terjadi. Penderita DM Tipe 2 umumnya lebih mudah terkena

infeksi, sukar sembuh dari luka, daya penglihatan makin

buruk, dan umumnya menderita hipertensi, hiperlipidemia,

obesitas, dan juga komplikasi pada pembuluh darah dan

syaraf (Depkes RI, 2005).

II.7.6 Penggolongan Obat Oral Antidiabetik

Obat-obat hipoglikemik ini berguna dalam pengobatan

pasien diabetes tidak tergantung insulin yang tidak dapat diperbaiki

hanya dengan diet. Pasien yang mungkin berespon terhadap obat

hipoglikemik oral adalah mereka yang diabetesnya berkembang

setelah berumur 40 tahun dan dan telah menderita diabetes kurang

 27

dari 5 tahun. Namun obat-obat hipoglikemik oral ini harusnya tidak

diberikan pada penderita diabetes tipe 1.

Obat-obat berefek hipoglikemik tersebut antara lain adalah:

1. Kelompok Sulfonilurea yaitu, tolbutamida, klorpropamida,

tolazamida, glibenklamida, gliklazida, glinizida, dan glikidon

bekerja dengan menstimulasi sel-sel beta dari pulau langerhans

sehingga sekresi insulin ditingkatkan .

2. Kelompok Biguanida: yaitu metformin, bekerja dengan

menekan nafsu makan atau efek anoreksia. Sehingga berat

badan tidak meningkat sehingga layak diberikan pada pasien

over weigh.

3. Kelompok Glikosidase inhibitor: yaitu acarbose dan militol.

Obat ini bekerja berdasarkan persaingan inhibisi enzim

alfaglucosidase di mukosa duodenum sehingga reaksi

penguraian terhambat.

4. Kelompok Thiazolidinedion yaitu troglitazon. Bekerja dengan

menurunkan kadar glukosa dan insulin dengan jalan

meningkatkan kepekaan bagi insulin dari otot, jaringan lemak

dan hati.

5. Kelompok Miglitinida yaitu repaglinida. Bekerja denga

mekanisme khusus yakni mencetuskan pelepasan insulin dari

pankreas segera sesudah makan. Eksresinya cepat karena dalam

waktu 1 jam sudah dikeluarkan oleh tubuh (Tan dan Rahardja,

2002).
 28

II.7.7 Uji Antidiabetes

Keadaan diabetes mellitus pada hewan percobaan dapat

diinduksi dengan cara pankreatomi dan dengan cara kimia. Zat-zat

kimia sebagai induktor (diabetogen) pada umumnya diberikan

secara parenteral. Jenis hewan percobaan yang digunakan meliputi

mencit, tikus, kelinci, atau anjing (Depkes RI, 1993).

Penentuan kadar gula dapat dilakukan secara kualitatif

terhadap glukosa urin, sedangkan kadar gula darah ditentukan

secara kuantitatif. Penentuannya dilakukan secara kolorimetri atau

spektrofotometri pada panjang gelombang tertentu. Uji efek

antidiabetes dapat dilakukan dengan dua metode yaitu metode uji

toleransi glukosa dan metode uji diabetes aloksan (Depkes RI,

1993).

a. Uji Toleransi Glukosa Prinsip metode ini yaitu pada

kelinci yang telah dipuasakan (20-24 jam), diberikan

larutan glukosa 50 % peroral, setengah jam sesudah

pemberian obat yang diujikan. Pada awal percobaan

sebelum pemberian obat, dilakukan pengambilan

cuplikan darah vena dari masing-masing hewan uji

sejumlah 0,5 mL sebagai kadar glukosa darah awal.

Pengambilan cuplikan darah vena diulangi setelah

perlakuan pada waktu-waktu tertentu. Cuplikan darah

ditampung dalam ependorf, disentrifuge selama 5

menit pada putaran 3000 – 6000 rpm. Serum yang

 29

diperoleh diberi pereaksi dan diukur serapannya untuk

menentukan kadar glukosanya (Depkes RI, 1993).

b. Uji Diabetes Aloksan Prinsip dari metode ini yaitu

induksi diabetes dilakukan pada hewan uji yang diberi

suntikan aloksan monohidrat dengan dosis 70 mg/

kgBB. Penyuntikan dilakukan secara intravena pada

ekor mencit. Perkembangan hiperglikemia diperiksa

tiap hari. Pemberian obat antidiabetik secara oral dapat

menurunkan kadar glukosa darah dibandingkan

terhadap mencit positif (Depkes RI, 1993).

II.7.8 Metode pemeriksaan gula darah

Pemeriksaan glukosa darah dapat dilakukan dengan

beberapa metode yaitu metode enzimatik, metode kimia dan alat

meter. Berikut penjelasan tentang metode pemeriksaan glukosa

darah :

1. Metode Enzimatik

Metode enzimatik biasanya digunakan pada

pemeriksaan glukosa darah karena metode ini memberikan

hasil spektifitas yang tinggi. Metode ini hanya mengukur

kadar glukosa dalam darah. Metode enzimatik terdiri dari 2

macam metode yaitu metode glukosa oksidase dan metode

heksokinase.
 30

a. Metode Glukosa Oksidase (GOD-PAP)

Metode ini digunakan untuk pengukuran glukosa.

Metode ini dianjurkan oleh WHO dan IFCC . Prinsip

metode ini adalah glukosa oksidasi secara enzimatis

menggunakan enzim glukosa oksidase (GOD), membentuk

asam glukonik dan H2O2 kemudian bereaksi dengan fenol

dan 4-aminoantipirin dengan enzim peroksidase (PAP)

sebagai katalisator membentuk quinomine. Intensitas

warna yang terbentuk sebanding dengan konsentrasi dalam

serum spesimen dan diukur secara fotometris pada panjang

gelombang 500 nm (Kemenkes, 2010).

Reaksi pembentukan warna quinonemine dari

glukosa atau reaksi glukosa oksidase menurut Kemenkes

(2010) yaitu :

Glukosa + O2+ H2O Asam Glukonik + H2O2

H2O2 + 4 Aminophenazon + Phenol Quinomine +

4H2O

b. Metode Heksokinase

Metode ini digunakan untuk pengukuran glukosa.

Prinsip pemeriksaan pada metode ini yaitu heksokinase

sebagai katalisator mengubah glukosa menjadi glukosa-6-

fosfat dan ADP. Glukosa-6-fosfat dihidrogenase (G-

6PDH) mengoksidase glukosa 6 fosfat menjadi glukosa-6-

P dan NADP menjadi NADPH. Banyaknya NADPH yang

 31

terbentuk sebanding dengan konsentrasi glukosa dalam

spesimen dan diukur secara fotometri pada panjang

gelombang 340 nm (Kemenkes, 2010).

Reaksi yang terjadi pada heksokinase sebagai

berikut :

Glukosa + ATP Glukosa-6-fosfat + ADP

Glukosa-6-fosfat + NADP glukonat-6-p + NADPH +

H+

Pemeriksaan kadar glukosa sudah dianjurkan dengan

cara enzimatik, tidak lagi dengan prinsip reduksi untuk

menghindari ikut terukurnya zat-zat lain yang akan

memberikan hasil yang tinggi atau rendah palsu.

2. Metode Kimiawi

Metode ini memanfaatkan sifat mereduksi dari

glukosa dengan bahan indikator yang akan berubah warna

apabila tereduksi. Tetapi, metode ini tidak spesifik karena

senyawa-senyawa lain yang ada didalam darah juga dapat

mereduksi (misalnya : urea yang dapat meningkat, dan

cukup bermakna pada uremia) (Sacher, 2004 ).

 32

II.8 Glibenklamid

Gambar II.8 Struktur glibenklamid (Ganiswara,1995)

Glibenklamid merupakan obat antidiabetika golongan sulfonilurea

yang sukar larut dalam air dan larut dalam alkohol. Setelah pemberian

oral, glibenklamid dapat diabsorbsi dengan cepat dan baik. Glibenklamid

diberikan dalam dosis tunggal, dosis sehari 5 – 20 mg. Bila pemberian

dihentikan, obat akan bersih dari serum setelah 36 jam. Glibenklamid

menurunkan kadar glukosa darah pada diabetes mellitus tipe 2 dan tidak

pada diabetes mellitus tipe 1. Mekanisme kerjanya menstimulasi sekresi

insulin, meskipun secara kualitatif golongan sulfonilurea mempunyai efek

farmakologi yang sama tetapi secara kuantitatif ada bedanya. Efek

hipoglikemik glibenklamid 5 mg sama dengan tolbutamid 1000 mg,

klorpropamid 250 mg, atau tolazamid 250 mg (Ganiswara, 1995).

 33

II.9 Tikus Putih Jantan (Rattus novergicus) Galur Sprague dawley

Gambar II.9 Tikus putih jantan (Rattus novergicus) (sumber pribadi, 2019)

Tikus putih (Rattus norvegicus) merupakan hewan pengerat dan

sering digunakan sebagai hewan percobaan atau digunakan untuk

penelitian, dikarenakan tikus merupakan hewan yang mewakili dari kelas

mamalia, sehingga kelengkapan organ, kebutuhan nutrisi, metabolisme

biokimianya, sistem reproduksi, pernafasan, peredaran darah dan ekskresi

menyerupai manusia. Tikus yang digunakan dalam penelitian adalah galur

Sprague dawley berjenis kelamin jantan berumur kurang lebih 3 bulan.

Tikus Sprague dawley dengan jenis kelamin betina tidak digunakan

karena kondisi hormonal yang sangat berfluktuasi pada saat mulai

beranjak dewasa, sehingga dikhawatirkan akan memberikan respon yang

berbeda dan dapat mempengaruhi hasil penelitian (Kesenja, 2005).

Tikus putih yang digunakan untuk percobaan laboratorium yang

dikenal ada tiga macam galur yaitu Sprague dawley , Long Evans dan

Wistar. Tikus galur Sprague dawley dinamakan demikian, karena

ditemukan oleh seorang ahli Kimia dari Universitas Wisconsin, Dawley.

Dalam penamaangalur ini, dia mengkombinasikan dengan nama pertama

dari istri pertamanya yaitu Sprague dan namanya sendiri menjadi Sprague

dawley (Akbar, 2010).

 34

Tikus putih memiliki beberapa sifat yang menguntungkan sebagai

hewan uji penelitian di antaranya perkembangbiakan cepat, mempunyai

ukuran yang lebih besar dari mencit, mudah dipelihara dalam jumlah yang

banyak. Tikus putih juga memiliki ciri-ciri morfologi seperti albino,

kepala kecil, dan ekor yang lebih panjang dibandingkan badannya,

pertumbuhannya cepat, temperamennya baik, kemampuan laktasi tinggi,

dan tahan terhadap arsenik tiroksid (Akbar, 2010).

II.10 Spektrofotometri UV-VIS

Spektrofotometer sesuai dengan namanya adalah alat yang terdiri

dari spektometer dan fotometer. Spektrofotometer menghasilkan sinar dan

spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer adalah alat

pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau yang diabsobsi

(Khopkar, 1990).

Spektrofotometri merupakan metode yang digunakan untuk

menguji sejumlah cahaya yang diabsorbsi pada setiap panjang gelombang

di daerah ultraviolet dan tampak. Dalam instrumen ini suatu sinar cahaya

akan terpecah sebagian, cahaya diarahkan melalui sel transparan yang

mengandung pelarut. Ketika radiasi elektromagnetik dalam daerah UV-Vis

melewati suatu senyawa yang mengandung ikatan-ikatan rangkap,

sebagian dari radiasi biasanya diabsorpsi oleh senyawa. Hanya beberapa

radiasi yang diabsorpsi tergantung pada panjang gelombang dari radiasi

dalam struktur senyawa. Absorpsi radiasi disebabkan oleh pengurangan

 35

energi cahaya radiasi ketika elektron dalam orbital dari rendah tereksitasi

ke orbital energi tinggi (Underwood, 2002).

Gambar II.10 Instrumentasi spektrofotometri UV-VIS

Komponen-komponen spektrofotometer (Khopkar, 1990) :

1. Sumber cahaya

Beberapa sumber radiasi yang dipakai pada spektrofotometer

adalah lampu deuterium, lampu tungstein, dan lampu merkuri.

Sumber-sumber radiasi ultraviolet yang kebanyakan dipakai adalah

lampu hydrogen dan lampu deuterium. Lampu deuterium dapat

diapakai pada panjang gelombang 180 nm sampai 370 nm.

Lampu tungstein merupakan campuran dari filamen tungstein gas

iodin (halogen), oleh sebab itu lampu tungstein-iodin pada

spektrofotometer sebagai sumber radiasi pada daerah sinar tampak

dengan rentang panjang gelombang 380-900 nm.

Lampu merkuri adalah suatu lampu yang mengandung uap merkuri

tekanan rendah dan biasanya dipakai untuk mengecek, mengkalibrasi

panjang gelombang pada spektrofotometer pada daerah ultraviolet

khususnya daerah disekitar panjang gelombang 365 nm.

 36

2. Monokromator

Monokromator berfungsi untuk mendapatkan radiasi

monokromatis dari sumber radiasi yang memancarkan radiasi

polikromatis. Monokromator pada spektrofotometer biasanya terdiri

dari susunan meliputi celah (slit), filter, prisma, kisi dan celah keluar.

a. Celah (slit)

Celah monokromator adalah bagian yang pertama dan

terakhir dari suatu sistem optik monokromator pada

spektrofotometer. Celah monokromator berperan penting

dalam hal terbentuknya radiasi monokromatis dan resolusi

panjang gelombang.

b. Filter optik

Filter optik berfungsi untuk menyerap warna

komplementer sehingga cahaya tampak yang diteruskan

sesuai dengan warna filter optik yang dipakai.

c. Prisma dan kisi

Prisma dan Kisi merupakan bagian monokromator yang

terpenting. Prisma dan kisi pada prinsipnya mendispersi

radiasi elektromagnetik sebesar mungkin supaya didapatkan

resolusi yang baik dari radiasi polikromatis.

3. Sel/kuvet

Kuvet atau sel merupakan wadah sampel yang dianalisis.

Umumnya tebal kuvet adalah 10 mm, tetapi yang lebih kecil maupun
 37

yang lebih besar tetap dapat digunakan. Sel yang biasa digunakan

berbentuk persegi, bentuk silinder juga dapat digunakan.

4. Detektor

Detektor berfungsi untuk memberikan respon terhadap cahaya pada

berbagai panjang gelombang.

5. Amplifier

Amplifier dibutuhkan pada saat sinyal listrik elektronik yang

dilahirkan setelah melewati detektor untuk menguatkan karena penguat

dengan resistensi masukan yang tinggi sehingga rangkaian detektor

tidak terserap habis yang menyebabkan keluaran yang cukup besar

untuk dapat dideteksi oleh suatu alat pengukur.

II.11 Penelitian Relevan

Berdasarkan penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh M Ilham

Syah, dkk pada tahun 2015 dengan judul “Uji Aktivitas Antidiabetes

Ekstrak Etanol Daun Mangga Arumanis (Mangifera Indica L.

“Arumanis”) pada Mencit Swiss Webster Jantan dengan Metode Tes

Toleransi Glukosa Oral (Ttgo)”. Hal tersebut menggambarkan mangiferin

dalam ekstrak daun mangga arum manis mempunyai potensi terhadap

penyembuhan penyakit diabetes mellitus.

Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Andi Emelda, dkk

pada tahun 2015 dengan judul “Uji Efek Hipoglikemik Infus Daun

Mangga Varietas Golek Terhadap Mencit (Mus Musculus) Diabetik Yang

Telah Diinduksi Aloksan“ menyatakan bahwa infus daun mangga

 38

(Mangifera indica L.) varietas golek dosis 36,75 mg/bb mencit dapat

memberikan efek hipoglikemik yang paling baik terhadap mencit (Mus

Musculus).

Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Febryan Darma Putra,

dkk pada tahun 2015 dengan judul ”Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Daun

Wani (Mangifera caesia) Pada Mencit Yang Diinduksi Streptozotocin”

menggambarkan bahwa ekstrak daun wani secara signifikan mampu

menurunkan kadar glukosa darah mencit diabetes. Pemberian ekstrak daun

wani yang mampu menurunkan kadar glukosa darah mencit diabetes

paling baik dengan dosis 500 mg/kgBB.

II.12 Kerangka Konsep

Variabel Independent Variabel Dependent

Pengujian aktivitas anti diabetes Aktivitas anti diabetes ekstrak

esktrak etanol 70% daun mangga
bacang terhadap tikus putih
jantan galur Sprague dawley
berdasarkan hasil dari orientasi
dosis dengan kontrol positif
menggunakan glibenklmid dan
kontrol negative Na CMC 0,5%
daun mangga bacang dari metode
ekstraksi maserasi terhadap tikus
putih jantan galur Sprague dawley
dengan berbagai kelompok
perlakuan

Gambar II.11 Kerangka Uji aktivitas Anti Diabetes Ekstrak Etanol 70% Daun Mangga Bacang
 39

II.13 Hipotesis

Berdasarkan rumusan masalah dan penelitian relevan dapat dibuat

hipotesis bahwa :

3. Ekstrak etanol 70% daun mangga bacang (Mangifera foetida L.)

dapat menurunkan kadar gula darah tikus putih jantan galur Sprague

dawley yang dibebani glukosa.

4. Dosis optimal ekstrak etanol 70% daun mangga bacang (Mangifera

foetida L.) yang dapat menurunkan kadar gula darah pada tikus putih

jantan galur Sprague dawley yang dibebani glukosa mulai dari 30,87

mg/ 200 g, 123,48 mg/ 200 g, 493,92 mg/ 200g.

5. Ekstrak etanol 70% daun mangga bacang (Mangifera foetida L.)

memiliki aktivitas yang sama besar dengan glibenklamid.

 BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

III.1 Deskripsi Objek Penelitian

III.1.1 Jenis Penelitian

Jenis penelitian ini adalah eksperimetal karena berinteraksi

langsung terhadap objek penelitian yaitu aktivitas antidiabetes dari

ekstrak etanol 70% daun mangga bacang (Mangifera foetida L.)

dan subjek yaitu ekstrak etanol 70% daun mangga bacang

(Mangifera foetida L.) dengan tujuan untuk mengetahui pengaruh

pemberian ekstrak etanol 70% daun mangga bacang (Mangifera

foetida L.) terhadap kadar gula pada tikus putih jantan (Rattus

norvergicus) galur sprague dawley.

III.1.2 Objek Penelitian

Objek dalam penelitian ini adalah aktivitas antidiabetes dari

ekstrak etanol 70% daun mangga bacang (Mangifera foetida L.)

III.1.3 Subjek Penelitian

Subjek dalam penelitian ini adalah ekstrak etanol 70% daun

mangga bacang (Mangifera foetida L.)

40
 41

III.1.4 Tempat Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Labolatorium Farmakologi Sekolah

Tinggi Farmasi Muhammadiyah Tangerang, Banten, LABKESDA

(Laboratorium Kesehatan Daerah), dan LIPI (Lembaga Ilmu

Pengetahuan Indonesia).

III.1.5 Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada bulan Desember – Maret 2020.

III.2 Alat dan Bahan

Alat dan bahan yang digunakan untuk menunjang jalannya

penelitian yang akan dilakukan antara lain :

1. Alat

Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah kandang

tikus, tempat makan dan botol tikus, timbangan hewan, masker,

sarung tangan, labu takar, gelas ukur, tabung reaksi, rotary

evaporator (Yamato), spektrofotometer UV VIS, kertas saring,

beaker glass, alumunium foil, oral sonde dan spuit, tabung ependrof.

2. Bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih

jantan (galur wistar) dengan berat badan 150 – 200 gram yang

berjumlah 25 ekor sebagai hewan uji, ekstrak daun mangga bacang,

bahan kimia yang digunakan dalam penelitian adalah etanol 70%, Na

CMC, glukosa, EDTA, dan glibenklamid, kloroform, HCL, toluene,

 42

aquades, amil alcohol, formal dehid, FeCl3, pereaksi meyer, reagen

GOD PAP.

III.3 Variabel Penelitian

III.3.1 Klasifikasi Variabel

1. Varibel Bebas

Variabel bebas merupakan variable yang faktornya diukur

dan dipilih oleh peneliti untuk menentukan hubungan dengan

suatu gejala yang di observasi, yang termasuk variabel bebas

dalam penelitian ini adalah uji ekstrak etanol 70% daun mangga

bacang (Mangifera foetida L.) kontrol positif menggunakan

glibenklamid, dan kontrol negative menggunakan Na CMC

0,5% 2,5ml.

2. Variabel Terikat

Variabel terikat adalah variabel yang faktornya diamati

dan diukur untuk menentukan pengaruh yang disebabkan oleh

variabel terikat, yang termasuk variabel terikat adalah pengaruh

pemberian aktivitas ekstrak etanol 70% pada tikus putih jantan

galur wistar sebagai penurun kadar gula darah dalam tiap

kelompok perlakuan.

3. Variabel Terkendali

Makanan, usia, jenis kelamin, serta galur pada hewan uji.

 43

4. Variabel Tak Terkendali

Stress, penyakit hati, penyakit pancreas, obstruksi empedu,

hormonal, kondisi ginjal, status imunitas tikus, infeksi atau

trauma dari luar, sensitivitas tikus terhadapat obat, kondisi

sistemik tiap tikus putih meliputi kondisi, kesehatan lambung

kepekaan terhadap zat yang diberikan.

III.4 Rancangan dan Prosedur Penelitian

III.4.1 Rancangan Penelitian

Pada penelitian ini digunakan hewan uji sebanyak 30 ekor

tikus putih jantan (Rattus norvegicus) galur sprague dawley dibagi

menjadi 5 kelompok dimana masing-masing kelompok terdiri dari

5 ekor tikus dengan pembagian kelompok, dihitung berdasarkan

rumus Federer :

(n-1)(t-1) ≥ 15

Keterangan:

n = jumlah ulangan minimal dari tiap perlakuan

t = jumlah perlakuan
jumlah hewan uji yang digunakan adalah :

(n-1)(t-1) ≥ 15

(n-1)(5-1) ≥ 15

4n – 4 ≥ 15

4n ≥ 19

n ≥ 4,9
 44

dari jumlah perhitungan tersebut dapat diartikan bahwa pada 5

kelompok percobaan terdapat minimal 5 ekor tikus pada masing-

masing kelompok.

III.4.2 Pengajuan Judul Penelitian

Dalam melakukan penelitian langkah pertama dimulai

dengan mengajukan judul penelitian ke BAAK Sekolah Tinggi

Farmasi Muhammadiyah Tangerang. Judul yang diajukan

selanjutnya disetujui oleh Ketua Program pendidikan S1 Farmasi

dan Ketua Sekolah Tinggi Farmasi Muhammadiyah Tangerang

serta menentukan pembimbing untuk penelitian.

III.4.3 Studi Literatur

Studi Literatur dilakukan dengan mengumpulkan literatur–

literatur terkait dengan penelitian. Literatur di dapat dari berbagai

sumber seperti buku, jurnal, dan berbagai media online yang

akurat.

III.4.4 Pembuatan Proposal

Pembuatan proposal dibuat dan disusun sesuai dengan judul

penelitian yang diajukan. Penyusunan proposal dimulai dengan

menyusun latar belakang akan dilakukannya penelitian tersebut,

kemudian ditarik rumusan masalah dan tujuan penelitia. Rumusan

masalah tersebut kemudian dijadikan landasan dalam pembuatan

kerangka konsep, selanjutnya dibuat sebuah hipotesa mengenai

penelitian yang akan dilakukan. Tahap selanjutnya yaitu menyusun

 45

tinjauan pustaka yang diambil dari beberapa sumber akurat. Tahap

berikutnya menyusun metodologi penelitian yang meliputi

rancangan penelitian, seperti alat dan bahan, prosdur kerja, teknik

pengumpulan data, teknik analisis data, dan jadwal penelitian.

Rancangan penilitian meliputi jenis penelitian yang akan

dilakukan, tempat dan jadwal penelitian. Rancangan penelitian

meliputi jenis penelitian. Alat dan bahan meliputi semua alat dan

bahan yang akan digunakan pada penelitian yang akan dilakukan,

prosedur kerja meliputi semua proses yang akan dilakukan dari

awal sampai selesai penelitian.

Teknik pengumpulan data dan analisa data disusun dengan

jenis penelitian yang akan dilakukan. Semua referensi yang

dilakukan dalam penyusunan proposal tercantumkan dalam daftar

pustaka.

III.5 Cara Kerja

III.5.1 Determinasi Tumbuhan

Daun mangga bacang (Mangifera foetida L.) diperoleh dari

wilayah Tangerang Tigaraksa. Determinasi dilakukan di LIPI

Cibinong, Jl. Raya Jakarta-Bogor KM 46 Cibinong Bogor, 16911

Jawa Barat.

III.5.2 Pembuatan Simplisia

daun mangga bacang (Mangifera foetida L.) yang telah

didapat dibersihkan dengan menggunakan air mengalir kemudian

dipotong-potong. Potongan daun mangga bacang dikeringkan

 46

dengan menggunakan oven pada suhu 40-50oC setelah kering,

daun mangga bacang yang sudah kering dihaluskan sampai

berbentuk serbuk setelah itu dilakukan pengayakan menggunakan

mesh 40.

III.5.3 Karakterisasi mutu simplisia

1. Parameter Spesifik

a. Identitas tumbuhan

Tujuan dari identitas tumbuhan untuk memberikan

identitas obyektif dari nama dan spesifik dari senyawa

pemeriksaan organoleptik meliputi pemeriksaan bentuk,

warna, bau, dan rasa dari simplisia daun mangga bacang.

2. Uji Parameter Non Spesifik

a. Susut pengeringan

Simplisia ditimbang sebanyak 1-2 gram dan

dimasukkan kedalam cawan yang sebelumnya telah

dipanaskan pada suhu 105°C selama 30 menit. Sebelum

ditimbang simplisia terlebih dahulu diratakan dengan

menggunakan batang pengaduk. Kemudian dimasukkan ke

dalam oven. Lalu keringkan pada suhu 105°C hingga

bobot tetap. Setelah pengeringan dinginkan hingga suhu

kamar (Depkes, 2000).

b. Uji kadar air

Penetapan kadar air sampel dengan cara sejumlah

berat sampel kering dimasukkan kedalam cawan porselin

 47

yang telah diketahui bobot kosongnya. Kemudian cawan

tersebut dipanaskan di dalam oven pada suhu 105oC

selama 3 jam. Setelah itu didinginkan didalam desikator

dan ditimbang untuk mengetahui bobot keringnya,

pemanasan sampel diulang sampai diperoleh bobot yang

konstan. Kadar air ditentukan dengan rumus (Depkes RI,

2000)

Keterangan :

A : Berat cawan kosong

B : Berat cawan + berat sampel

C : Berat akhir sampel

c. Penetapan kadar abu total

Timbang lebih kurang 2-3 g bahan uji yang

telah dihaluskan dan masukkan ke dalam krus

silikat yang telah dipijar dan ditara, pijarkan

perlahan-lahan hingga arang habis, lalu

didinginkan dan ditimbang. Jika dengan cara ini

arang tidak dapat dihilangkan, tambahkan air

panas, aduk, saring dengan kertas saring bebas abu.

Pijarkan kertas saring beserta sisa penyaringan

dalam krus yang sama. Masukkan filtrat ke dalam

krus, uapkan dan pijarkan hingga bobot tetap.

 48

Kadar abu total dihitung terhadap berat bahan uji

(Depkes, 2008).

III.5.4 Ekstraksi

Metode yang digunakan pada penelitian ini untuk

mengekstrak daun mangga bacang adalah metode maserasi. Pada

metode maserasi ini menggunakan pelarut etanol 70%. Simplisia

daun mangga bacang dimasukkan kedalam wadah toples ditambah

etanol 70% dengan perbandingan simplisia dengan pelarut 1 : 10 ,

campuran ini kemudian diaduk agar tercampur dengan rata lalu

didiamkan selama 3-5 hari. Kemudian diambil filtratnya dengan

penyaringan. Pengadukan pada metode maserasi dilakukan

sebanyak 12 kali selama 15 menit. Kemudian dilakukan

penyaringan untuk memisahkan fitrat dari ampas. Ampas

dilakukan remaserasi dengan perbandingan 1 : 5 dan dilakukan

perlakuan yang sama seperti pada tahap awal. Hasil saringan

kemudian diuapkan dengan rotary vacuum evaporator. Setelah itu

disaring dengan kertas saring hingga diperoleh ektrak daun mangga

bacang. Selanjutnya, ekstrak yang diperoleh kemudian dimasukkan

kedalam wadah lalu di vaccum rotary evaporator dengan tujuan

untuk menguapkan pelarut sehingga didapatkan hasil ekstraksi

berupa ekstrak kental mangga bacang.

 49

III.5.5 Karakterisasi mutu ekstrak

a. Parameter spesifik

1. Identitas ekstrak

Tujuan dari identitas ekstrak untuk memberikan

identitas objektif dari nama dan spesifik dari senyawa

identitas (Depkes RI, 2000).

Deskripsi tata nama (nama ekstrak, nama lain

tumbuhan, bagian tumbuhan yang digunakan dan nama

Indonesia tumbuhan).

2. Organoleptik

Penggunaan pancaindera mendiskripsikan bentuk,

warna, bau, rasa sebagai berikut (Depkes RI, 2000) :

a) Bentuk (padat, serbuk kering, kental, cair)

b) Warna (kuning, coklat, dan lain-lain)

c) Bau (aromatik, tidak berbau, dan lain lain)

d) Rasa (pahit, manis, kelat, dan lain lain)

b. Parameter non spesifik

1) Rendemen

Rendemen adalah perbandingan antar ekstrak yang

diperoleh dengan simplisia awal (Depkes RI, 2000) :

Perhitungan rendemen
 50

2) Kadar Air

Penetapan kadar air sampel dengan cara sejumlah

berat sampel kering dimasukkan kedalam cawan porselin

yang telah diketahui bobot kosongnya. Kemudian cawan

tersebut dipanaskan di dalam oven pada suhu 105oC selama

3 jam. Setelah itu didinginkan didalam desikator dan

ditimbang untuk mengetahui bobot keringnya, pemanasan

sampel diulang sampai diperoleh bobot yang konstan.

Kadar air ditentukan dengan rumus (Depkes RI, 2000):

Keterangan :

A : Berat cawan kosong

B : Berat cawan + berat sampel

C : Berat akhir sampel

3) Kadar Abu

Lebih kurang 2-3 gram sampel ekstrak ditimbang,

dimasukkan kedalam krus silikat yang telah dipijar dan

ditara. Pijarkan perlahan-lahan hingga arang habis, lalu di

dinginkan dan ditimbang. Jika dengan cara ini arang tidak

dapat dihilangkan, tambahkan air panas, lalu saring dengan

kertas saring bebas abu. Pijarkan sisa kertas dan kertas

saring dalam krus yang sama. Masukkan filtrat ke dalam

krus, uapkan, lalu pijar hingga bobot tetap, kemudian

 51

timbang. Hitunglah kadar abu terhadap bahan yang telah

dikeringkan diudara (Depkes RI, 2000).

4) Sisa Pelarut

Ekstrak di timbang 5 gram dilarutkan sampai 10 ml

air di Vortek lalu di sentrifuge 3000 rpm selama 10 menit,

lalu disentrifuge lagi dengan kecepatan 13000 rpm selama

10 menit kemudian sampel di injeksikan ke HPLC (Depkes

RI, 2000).

5) Skrining Fitokimia

Pemeriksaan Kandungan Kimia pada ekstrak daun

mangga bacang (Mangifera foetida L) diantaranya (Depkes

RI, 2000) :

a. Identifikasi Flavonoid

Sebanyak 5 ml ekstrak cair dimasukkan ke

dalam tabung reaksi. Serbuk magnesium, 2 ml HCl 2N

serta 5 ml amil alkohol dimasukkan ke dalam tabung

reaksi. Tabung reaksi ditutup dan dikocok kuat

kemudian dibiarkan hingga menjadi dua fase. Hasil

positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna jingga

pada lapisan amil alkohol dibagian bawah.

 52

b. Identifikasi Tanin

Ekstrak dimasukkan ke dalam tiga tabung reaksi

dengan masing-masing 3 ml ekstrak. Tabung pertama

ditetesi larutan FeCl3 10%. Hasil positif senyawa fenol

ditunjukkan dengan terbentuknya warna hijau, biru,

atau hitam. Tabung kedua ditetesi larutan gelatin 1%.

Hasil positif tanin ditunjukkan dengan pembentukan

endapan putih. Tabung ketiga ditetesi pereaksi Steasny

(Formaldehid 30% - HCl = 2:1). Hasil positif tanin

katekat ditunjukkan dengan pembentukan endapan

merah. Campuran dari tabung ketiga disaring dan

filtratnya ditambahkan natrium asetat hingga jenuh.

Filtrat kemudian ditetesi larutan FeCl3 10%. Hasil

positif tanin galat ditunjukkan dengan perubahan warna

menjadi biru tinta.

c. Alkaloid

Serbuk simplisia sebanyak 2 gram dibasahi

dengan 5 ml amonia dan digerus dalam mortar.

Kloroform sebanyak 20 ml ditambahkan ke dalam

mortir dan digerus kuat-kuat. Campuran disaring, reaksi

positif ditunjukkan oleh pembentukan warna merah atau

jingga. Sisa filtrat diekstraksi dengan HCl 10% (1:2)

dan fraksi asam diambil. Fraksi dimasukan kedalam

tabung lalu ditetesi pereaksi Mayer (raksa II klorida +

 53

kalium iodida) dan reaksi positif ditunjukkan dengan

terbentuknya endapan putih.

d. Steroid/triterpenoid

Serbuk simplisia sebanyak 1 gram dimaserasi

dengan 20 ml eter selama 2 jam. Hasil maserasi

kemudian disaring dan filtrat diuapkan. Ke dalam residu

diteteskan pereaksi Liebermann-Burchard (anhidrida

asetat + asam sulfat). Hasil positif steroid/triterpenoid

ditunjukkan dengan pembentukan warna biru hijau atau

merah ungu.

e. Identifikasi Saponin

Ekstrak cair sebanyak 10 ml dikocok vertikal

selama 10 detik dan dibiarkan selama 10 menit. Hasil

positif ditunjukkan dengan terbentuknya busa yang

mantap selama 10 menit dengan tinggi 1-10 cm. Ke

dalam tabung reaksi kemudian ditambahkan beberapa

tetes asam klorida 2N. Hasil positif saponin ditunjukkan

dengan busa yang tetap stabil.

f. Identifikasi kuinon

Ekstrak sebanyak 5ml dimasukkan ke dalam

tabung reaksi ditambahkan beberapa tetes larutan

NaOH. Hasil positif kuinon ditunjukkan dengan

perubahan warna menjadi merah.

 54

III.5.6 Penyiapan hewan uji

Hewan coba yang digunakan pada penelitian ini adalah

tikus putih (Rattus norvergicus) jantan galur Sprague dawley

sebanyak 25 ekor tikus dengan bobot sekitar 150-200 gram. Dibagi

kedalam 5 kelompok perlakuan, masing-masing kelompok terdiri

dari 5 ekor. Tikus sebelumnya di aklimatisasi dahulu diruang

kandang hewan selama kurang lebih 7 hari. Aklimatisasi bertujuan

untuk membiasakan tikus terhadap lingkungannya. Kandang

berbentuk kotak plastik dengan tutup kawat yang berukuran 30 cm

× 20 cm × 12 cm yang di alasi sekam padi dan dibersihkan secara

rutin tiga kali seminggu agar kondisi kandang tetap kering dan

sehat. Tikus diberi pakan pellet standar B-512 dan minum ad

libitum.

III.5.7 Pembuatan larutan uji

a. Pembuatan suspensi Na CMC 0,5%

Na CMC sebanyak 0,5gram dimasukan sedikit demi

sedikit kedalam 100 ml aquades pada suhu 60oC selama 30

menit lalu dihomogenkan.

b. Pembuatan larutan glukosa 60%

D-Glukosa monohidrat (berat sesuai dosis konversi dari

kelinci ke tikus) dilarutkan sedikit demi sedikit dalam air panas

hingga 100,0 mL. Stok sediaan dibuat dalam 100 mL, sehingga

untuk dosis:
 55

2 g/ kgBB = 3g/ 1,5kg BB 2g/ kg BB = 60g/ 100 mL

Konsentrasi = 3g/ 5mL 2g = 1kg BB

= 0,6g/ mL 0,4g = 200g BB tikus

= 60g/ 100mL 2g = 60g / 100mL

0,4g = 12g/ 100mL

c. Perhitungan dosis glibenklamid

Dosis glibenklamid untuk tikus di dasarkan pada dosis

terapi per oral sekali minum untuk manusia. Dosis untuk

manusia berat 70 kg sekali minum = 5 mg konversi dari

manusia ke tikus

200 g adalah 0,018 × 5 mg = 0.09 mg/ 200g BB tikus

III.5.8 Pemberian Ekstrak Etanol 70% Daun Mangga Bacang

(Mangifera Foetida L.) Pada Hewan Uji

Tikus dikelompokkan menjadi 5 kelompok perlakuan.

Setiap kelompok terdiri dari 5 ekor. Tikus dipuasakan (20-24

jam), tetap diberi minum ad libitum. Kemudian dilakukan

pengambilan cuplikan darah vena ekor dari masing-masing tikus

sejumlah 3 ml sebagai kadar glukosa darah awal. Masing –

masing kelompok terdiri dari 5 ekor tikus. Kelompok 1 sebagai

kontrol negatif diberikan NaCMC 0,5% peroral. Kelompok 2

sebagai kontrol positif diberikan glibenclamid 0,45mg/200gBB

peroral. Kelompok 3, 4 dan 5 sebagai kelompok perlakuan

 56

dengan dosis berdasarkan hasil dari orientasi dosis. Pemberian

sediaan uji dilakukan bersamaan dengan pembebanan glukosa

(0,4 g/ 200 g). Setelah pembebanan glukosa, cuplikan darah

diambil dari vena ekor tikus tiap menit ke-0, 60, dan 120 dengan

volume kira-kira 3mL. Kadar glukosa darah ditetapkan dengan

metode enzimatis menggunakan reagen GOD-PAP.

III.5.9 Pengujian Kadar Glukosa Plasma

Kadar glukosa darah ditetapkan secara enzimatis

dengan menggunakan reagen GOD-PAP. Cuplikan darah

ditampung dalam microtube 1,5 mL yang diberi EDTA,

kemudian dikocok dengan vortex dan disentrifuge dengan

kecepatan 2500 rpm selama 10 menit lalu dibaca serapan nya

pada panjang gelombang maximum menggunakan spektrometer

UV-VIS. Dipersiapkan komposisinya seperti pada :

Tabel III.I Komposisi Sampel Uji

Komposisi Volume pengambilan

bahan Sampel µL Standar µL Blangko µL
Plasma darah 10 - -
Glukosa darah - 10 -
Aquades - - 10
Ditambah 1000,0 µL reagen GOD-PAP. Diinkubasi pada suhu kamar
selama operating time. Kemudian dibaca serapan nya pada panjang
gelombang maksimum
 57

III.6 Teknik pengumpulan data

III.6.1 Data Primer

Data primer pada penelitian ini adalah data yang diperoleh

dari Uji Aktivitas Anti Diabetes Ekstrak Daun Mangga Bacang

(Mangifera foetida L.) Terhadap Tikus Putih Jantan Yang

Dibebani Glukosa.

III.6.2 Data Sekunder

Data yang diperoleh dari studi pustaka yang berasal dari

buku, jurnal, dan hasil penelitian sebelumnya yang mendukung

penelitian ini.

III.6.3 Analisis Data

Data yang diperoleh dianalisis dengan menggunakan One-

way ANOVA yang mana merupakan singkatan dari “Analysis of

Varian” adalah salah satu uji komparatif yang digunakan untuk

menguji perbedaan mean ( rata-rata ) data lebih dari dua kelompok.

Pengujian ANOVA dengan tujuan untuk mengetahui bahwa

variabel-variabel yang kita uji dengan tingkat kepercayaan 95%.

 58

III.7 Definisi Operasional

Tabel III. 2 Definisi Operasional

No Variabel Definisi Operasional Indikator Skala

1. Ekstrak daun mangga Ekstrak hasil dari proses ekstraksi Ekstrak kental Nominal
bacang (Mangifera dengan cara maserasi
foetida L.) menggunakan pelarut etanol 70%

2. Penentuan Aktivitas Senyawa yang mampu Nilai persen Rasio

Anti Diabetes menurunkan kadar glukosa plasma. inhibisi
menggunakan Dengan menggunakan reagen
spektrofotometri UV- GOD-PAP pada panjang
VIS gelombang maksimum
 59

III.8 Skema Penelitian

Daun mangga bacang (Mangifera foetida L) Determinasi CoA

Simplisia Karakterisasi mutu simplisia

1. Makroskopik 5. Sari larut etanol
Karakterisasi mutu simplisia
2. Susut pengeringan 6. Kadar air
3. Kadar abu
Maserasi dengan etanol 70%
77770%70%70% 4. Sari larut air

Filtrat etanol 70% Residu

Ekstrak etanol 70% Remaserasi

70%

Ekstrak
Pengujian ekstrak
kental

Karakterisasi mutu ekstrak Skrining fitokimia Pemberian ekstrak daun

mangga bacang
1. Kadar air 1. Alkaloid

2. Kadar abu 2. Flavonoid

Uji aktivitas Anti Diabetes
3. Sisa pelarut 3. Tanin
4. kuinon
Perhitunga kadar
5. Saponin
glukosa plasma
6. Steroid dan triterpenoid

Analisis data

Gambar III.1 Skema Penelitian

 60

III.9 Rencana Penelitian

Tabel III.3 Rencana penelitian

No Nama Kegiatan Jul Sep Nov Des Jan Feb Mar

2019 2019 2019 2019 2020 2020 2020

1 Pengajuan Judul √

2 Studi Literatur √ √

3 Pembuatan Proposal √

4 Sidang Proposal √

5 Izin Penelitian √

6 Penelitian √ √ √

7 Analisis Data √ √

8 Sidang Skripsi √
 DAFTAR PUSTAKA

Akbar, B. 2010. Tumbuhan Dengan Kandungan Senyawa Aktif Yang Berpotensi

Sebagai Bahan Infertilitas. Jakarta : Adabia Press.

Andi, E., Safriani, R., Andi, S.R. 2015. Uji Efek Hipoglikemik Infus Daun
Mangga Varietas Golek Terhadap Mencit (Mus Musculus) Diabetik Yang
Telah Diinduksi Aloksan. Jurnal Sains dan Kesehatan.

Anna Poedjiadi dan F.M. Titin Supriyanti. 1994. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta :
UI Press.

Depkes RI. 1993. Pedoman Pengujian dan Penapisan Farmakologi, Pengujian

Fitokimia dan Pengujian Klinik, 15-17. Jakarta : Yayasan Pengembangan
Obat Alam.

Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:
Departemen Kesehatan Republik Indonesia.

Depkes RI. 2005. Pharmaceutical Care Untuk Penyakit Diabetes Mellitus. Jakarta
: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.

Eva, Decroli. 2019. Diabetes mellitus tipe 2. Fakultas Kedokteran Universitas

Andalas : Pusat Penerbitan Bagian Ilmu Penyakit Dalam.

Febryan, D.P., Boy, R.S., Yuniarti, A. 2015. Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Daun
Wani (Mangifera Caesia) Pada Mencit Yang Diinduksi Streptozotocin .
Jurnal Sains dan Kesehatan.

Ganiswara, G.S. 1995. Farmakologi dan Terapi, edisi ke empat. Jakarta : Balai
Penerbit FKUI.

Gunawan, S.G., Setiabudi, R., Nafriadi., Elizabeth. 2007. Farmakologi dan Terapi
Edisi 5. Jakarta : FKUI

Hanani, E. 2015. Analisis Fitokimia. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC.

64
 65

Ilham, S., Mulqie, L., dan Suwendar. 2015. Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak
Etanol Daun Mangga Arumanis (Mangifera Indica L. “Arumanis”) pada
Mencit Swiss Webster Jantan dengan Metode Tes Toleransi Glukosa Oral
(Ttgo). Prosiding Penelitian SPeSIA Unisba.

Kartini, K., Khumaidi, A., Khaerati, K., dan Ihwan. 2018. Ekstrak Etanol Daun
Eboni Menurunkan Kadar Glukosa Darah Tikus Jantan yang Diinduksi
Aloksan. Jurnal veteriner, 19(3), 329-334.
Kementrian Kesehatan RI. 2018. Hasil Utama Riskesdas 2018. Jakarta :
Kementerian Kesehatan Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan.
Keputusan Menteri Kesehatan RI. 2010. Pedoman Pemeriksaan Kimia Klinik.
Jakarta

Kesenja, R. 2005 . Pemanfaatan tepung Buah Pare (Momordica charantia L.)

untuk penurunan kadar glukosa darah pada tikus diabetes mellitus. (Skripsi).
Bogor : Institut Pertanian Bogor.

Khopkar, S. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: Universitas Indonesia

Kusumawati, D. 2000. Bersahabat Dengan Hewan Coba. Yogyakarta : Gajah

Mada. University Press.

Marjoni, R. 2016. Dasar-dasar Fitokimia. Jakarta Timur: Trans Info Media.

Nasution, M., Oka, I., Parwata, A., Suirta, I., dan Wasudewa, K. 2018. Efektifitas
Ekstrak Air Daun Gaharu ( Gyrinop versteegii ) Dalam Menurunkan
Kadar Glukosa Darah Pada Tikus Wistar Hiperglikemia Effectiveness of
Agarwood Leaf Water Extract ( Gyrinop versteegii ) in Reducing Blood
Glucose Levels in Hyperglycemic Wistar Mice. Jurnal media sains, 2(2),
83-89.
Pangkalan, Ide. 2010. Health secret of mango. Jakarta : PT Elex Media
Komputindo.

Praja, D.I. 2015. Zat Adiktif Makanan : Makanan dan Bahayanya. Yogyakarta :
Garudhawaca.

Sacher, Ronald A. 2004. Tinjauan klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium Edisi

 66

11. Jakarta : Buku Kedokteran EGC. Hal 286, 288, 289.

Sinata, N., Arifin H. 2016. Antidiabetes dari Fraksi Air Daun Karamunting
(Rhodomyrtus tomentosa (Ait.) Hassk.) Terhadap Kadar Glukosa Darah
Mencit Diabetes. Jurnal Sains Farmasi & Klinis, 3(1), 72-78.

Suhardjono, D. 1995. Percobaan Hewan Laboratorium. Yogyakarta : Gajah Mada.

University Press.

Suparman. 2010. Bercocok Tanam Mangga. Azka press : Semarang.

Tan, H.T, dan Kirana Raharja. Obat-Obat Penting. Jakarta : Gramedia Pustaka
Umum.

Underwood, A.L & Day, R.A. 2002. Analisis Kimia Kuantitatif. Jakarta:
Erlangga.

Widaryanto, Eko., & Azizah, N. 2018. Persfektif Tanaman Obat Berkhasiat.

Malang: UB Press.
 LAMPIRAN

Lampiran 1. Penentuan Dosis

A. Penentuan dosis ekstrak daun mangga bacang

Pada penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh M. Ilham dkk,

(2015) Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Daun mangga Arum Manis

(Mangifera indica L. “Arumanis”) pada dosis 2,1mg/20g BB mencit

4,2mg/20g BB mencit, dan 8,4mg/20g BB mencit memiliki efek sebagai anti

diabetes, dari dosis tersebut pada penelitian ini akan dilakukan orientasi dosis

atau uji pendahuluan untuk menentukan variasi dosis yang digunakan dalam

pengujian antidiabetes. Uji orientasi dosis akan dilakukan pada dosis

2,1mg/20g BB mencit 4,2mg/20g BB mencit, dan 8,4mg/20g BB mencit

Stok sediaan uji dilarutkan dalam Na CMC 0,5% dibuat dalam

100mL, tiap pemberian sebanyak 3mL. Jadi, dosis yang digunakan dalam

penelitian ini dikonversi menjadi dosis untuk tikus yaitu:

1. Konversi dosis mencit ke tikus 200 g = 2,1 mg x 7,0

= 14,7 mg

Dosis 1 ekstrak : 14,7mg = 14,7 mg/ 200 g BB tikus

= 14,7 mg / 3mL
= 4,9 mg / mL
= 490 mg / 100 mL

Rumus perhitungan = x Dosis

67
 68

2. Konversi dosis mencit ke tikus 200g = 4,2mg x 7,0

= 29,4mg

Dosis 2 ekstrak : 29,4mg = 29,4 mg/ 200 g BB tikus

= 29,4 mg/ 3 mL
= 9,8 mg/ mL
= 980 mg/ 100 mL

Rumus perhitungan = x Dosis

3. Konversi dosis mencit ke tikus 200g = 8,4mg x 7,0

= 58,8mg

Dosis ekstrak 3 : 58,8mg = 58,8 mg/ 200g BB tikus

= 58,8 mg / 3mL
= 19,6 mg / mL
= 196 mg/ 100mL

Rumus perhitungan = x Dosis

B. Kontrol positif

Dosis glibenklamid pada manusia adalah 5 mg

Dikonversi menjadi dosis mencit = 5 mg x 0,018

= 0,09 mg/200 g BB mencit

Dosis glibenklamid tikus 200g = 0.09mg = 0,09mg / 200 g BB

= 0,09 mg / 3 mL

= 0.03 mg / mL

Jika dibuat stok 100 mL = 3 mg/ 100 mL

Rumus perhitungan = x Dosis

 69

C. Kontrol negatif

Pembuatan larutan Na CMC 0,5% b/v, yaitu 0,5 g Na CMC dalam 100 ml air.

Tiap mencit diberikan secara oral sebanyak 0,5 ml.

D. Pembuatan larutan D Glukosa Monohidrat 60%

Berdasarkan literatur larutan D glukosa monohidrat 60% dibuat dalam 2g /

kg BB, larutan sttok dibuat dalam 100 mL setiap pemberian 3 mL. maka

dibuat konversi dari kelinci ke tikus 200g menjadi :

2 g/ kgBB = 3g/ 1,5kg BB 2g/ kg BB = 60g/ 100mL

Konsentrasi = 3g/ 5mL 2g = 1kg

= 0,6g/ mL 0,4g = 200g BB tikus

= 60g/ 100mL 2g = 60g

0,4g = 12g/ 100mL

 70

Lampiran 2. Konversi perhitungan dosis dan volume maksimum larutan

sediaan hewan uji dan manusia

Tabel 1. Konversi perhitungan dosis untuk berbagai jenis hewan gyuji dan manusia (Kusumawati,
2004)

ffff Mencit Tikus Marmut Kelinci Kucing Kera Anjing Manusia

20 g 200 g 400 g 2 kg 2 kg 4 kg 12 kg 70 kg
Mencit 1,0 7,0 12,25 27,8 29,7 64,1 124,2 387,0
20 g
Tikus 0,14 1,0 1,74 3,9 4,2 9,2 17,8 56,0
200 g
Marmut 0,08 0,57 1,0 2,25 2,4 5,2 10,2 31,5
400 g
Kelinci 0,04 0,25 0,44 1,0 1,08 2,4 4,5 14,2
2 kg
Kucing 0,03 0,23 0,41 0,92 1,0 2,2 4,1 13,0
2 kg
Kera 0,016 0,11 0,19 0,42 0,45 1,0 1,9 6,1
4 kg
Anjing 0,018 0,06 0,10 0,22 0,24 0,52 1,0 3,1
12 kg
Manusia 0,0026 0,018 0,031 0,07 0,076 0,16 0,32 1,0
70 kg
 71

Tabel 2. Volume maksimum sediaan yang diberikan pada beberapa hewan uji
(Soehardjono, 1995)

Jenis Hewan Uji i.v i.m i.p s.c p.o

(ml) (ml) (ml) (ml) (ml)
Mencit 0,5 0,05 1,0 0,5-10 1,0
20-30 g
Tikus 1,0 0,1 2,5 2,5 5,0
200 g
Hamster - 0,1 1-2 2,5 2,5
50 g
Marmut - 0,25 2-5 5,0 10,0
250 g
Merpati 2 0,5 2,0 2,0 10,0
300 g
Kelinci 5-10 0,5 10-20 5-10 20,0
2,5 kg
Kucing 5-10 1,0 10-20 5-10 50,0
3 kg
Anjing 10-20 5,0 20-50 10,0 100,0
5 kg