i
ii
iii
KATA PENGANTAR
iv
6. Fakultas Farmasi Universitas Airlangga khususnya ibu lusi dan teman-
teman FFUA (Dini, Aula, dkk) yang telah membantu dalam pembelajaran
sehingga penulis dapat mengenal dan mempelajari tentang kultur jaringan.
7. Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gajah Mada,
khususnya Prof.Dr.Supargiyono,DTM&H.,SU.,PhD.,Sp.ParK dan Ibu
Rumbi yang telah bersedia meluangkan waktu dan memberikan tempat
agar penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik.
8. Ika Ratna Hidayati, S.Farm., Apt., selaku Dosen wali. Terima kasih
banyak atas arahan ibu selama ini.
9. Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhamadiyah Malang yang
sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat
bermanfaat. Terutama Ibu Arina Swastika Maulita, S.Farm., Apt., yang
telah susah payah membantu jalanya ujian skripsi sehingga kami dapat
melaksanakan ujian skripsi dengan baik.
10. Staff Tata Usaha Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu kesehatan
Universitas Muhammadiyah Malang terima kasih karena telah banyak
membantu dalam hal administrasi.
11. Kedua orang tuaku tercinta, Bapak Drs. H. Takat Saifudin, dan Ibu
Hj.Uswatun Khasanah, yang tiada hentinya memotivasi dalam segala hal,
terima kasih atas didikan dan kerja kerasnya untuk membahagiakan
putrinya serta dengan sabar mendoakan untuk kebaikan dan kesuksesan
putrinya. Buat nenek dan kakekku (H. Saichon, Hj.Saningsih dan
Hj.Safiinah), serta adek-adekku (dek Fuad dan dek Arif) motivasinya dan
doa-doanya.
12. Sahabat-sahabatku Widi Astutik, Sutriani, Nabilah Nadhif, Dini Setiya
Praja, Dwi Ajeng Eli Ananda, Royyan Athoillah, dengan keceriaan dan
semangat kalian selama ini sebagai sahabat yang membantu dan
mendukung saat senang maupun susah.
13. Teman-teman seperjuangan Emma, Atika, dan Wilda dengan banyak
keceriaan, kebersamaan, bantuan, motivasi, semangat serta kerja samanya
sehingga skripsi ini dapat terwujud.
v
14. Teman-teman Farmasi 2009 terimakasih atas kebersamaannnya selama 4
tahun terakhir ini, kalian memberikan warna baru dalam kehidupanku.
15. Teman-teman kos mutiara sigura-gura kav.9 (neney, santi, sabitul, tika,
icha, rahma, rara, vivi, farah2), terimaksih buat semangat yang diberikan
sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.
16. Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya, penulis mohon maaf
dan terima kasih yang sebesar-besarnya. Semua keberhasilan ini tak luput
dari bantuan, doa yang telah kalian semua berikan.
Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini, penulis
tidak mampu membalas dengan apapun. Semoga amal baik semua pihak
mendapat imbalan dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari
kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang
membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini. Semoga penulisan ini dapat
berguna bagi penelitian berikutnya, amiin.
vi
RINGKASAN
vii
hasil KLT menunjukkan adanya senyawa flavonoid dan triterpenoid padaekstrak
n-heksana daun kucai (Allium odorum L.).
Kandungan kimia antikanker dari penelitian ini perlu dilakukan penelitian
lanjutan melakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan jenis sel kanker
lainnya, seperti sel kanker MCF 7 dan kanker prostat. Selain itu, juga perlu
dilakukan optimasi dengan menggunakan pelarut lain untuk mendapatkan IC 50
yang lebih aktif terhadap sel kanker payudara T47D.
viii
ABSTRAK
Kucai (Allium odorum L.) adalah tanaman yang berfungsi sebagai antioksidan,
antikanker, antibakteri serta antimikroba dan antiseptik karena mampu
menghambat bakteri patogen (penyebab penyakit). Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antikanker serta mengetahui golongan senyawa kimia dari
ekstrak yang positif pada daun kucai (Allium odorum L.) terhadap sel kanker
payudara T47D secara in vitro dengan metode Microculture Tetrazolium Salt
(MTT) Assay. Potensi adanya aktivitas antikanker dapat diketahui setelah
pembacaan data menggunakan elisa reader kemudian ditentukan besarnya IC50
dengan menggunakan analisis probit. Suatu ekstrak dikatakan aktif sebagai
antikanker berdasarkan metode Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay jika
harga IC50 < 30 µg/ml. Dari ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak
metanol, ekstrak n-heksana memiliki harga IC50 sebesar 200.484 µg/ml dan
ekstrak metanol sebesar 273,445 µg/ml. Nilai IC50 semua ekstrak daun kucai
terhadap sel kanker payudara T47D > 100 µg/ml. Berdasarkan National cancer
institute (NCI), nilai ini menunjukkan aktivitas antikanker ekstrak daun kucai
yang sangat lemah terhadap sel T47D. Isolasi dan pengujian menggunakan pelarut
lain serta menggunakan sel lain masih diperlukan untuk pengembangan di masa
depan.
Kata Kunci: Daun Kucai (Allium odorum L.), Sel T47D, Microculture
Tetrazolium Salt (MTT) Assay, n-Heksana, Metanol.
ix
ABSTRACT
Key words: Allium odorum L. Leaf, T47D cells, Microculture Tetrazolium Salt
(MTT) Assay, n-Heksana, Methanol,
x
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL............................................................................................ i
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ ii
LEMBAR PENGUJIAN ....................................................................................iii
KATA PENGANTAR ....................................................................................... iv
RINGKASAN ................................................................................................... vii
ABSTRAK ......................................................................................................... ix
DAFTAR ISI ...................................................................................................... xi
DAFTAR TABEL ............................................................................................ xiv
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ xv
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xvi
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................ xvii
BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................................. 1
1.1 Latar belakang ................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah Penelitian ............................................................ 3
1.3 Tujuan Penelitian .............................................................................. 4
1.4 Hipotesis Penelitian........................................................................... 4
1.5 Manfaat Penelitian ............................................................................ 4
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 5
2.1 Tinjauan tentang Kucai ..................................................................... 5
2.1.1 Klasifikasi................................................................................ 5
2.1.2 Sinonim ................................................................................... 5
2.1.3 Nama Daerah ........................................................................... 5
2.1.4 Morfologi ................................................................................ 5
2.1.5 Penyebaran .............................................................................. 6
2.1.6 Kandungan .............................................................................. 6
2.1.7 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai ................................... 7
2.1.8 Khasiat ..................................................................................... 8
2.2 Tinjauan tentang Kanker .................................................................. 9
2.2.1 Definisi .................................................................................... 9
xi
2.2.2 Epidemiologi ........................................................................... 9
2.2.3 Sifat Sel Kanker .................................................................... 10
2.2.4 Karsinogenesis ...................................................................... 10
2.2.5 Siklus Pertumbuhan Sel ........................................................ 13
2.3 Tinjauan tentang Kanker Payudara ................................................. 14
2.3.1 Definisi .................................................................................. 14
2.3.2 Epidemiologi ......................................................................... 15
2.3.3 Faktor Resiko ........................................................................ 16
2.3.4 Gejala .................................................................................... 17
2.3.5 Perkembangan Sel ................................................................. 17
2.4 Tinjauan Sel T47D .......................................................................... 18
2.5 Tinjauan tentang Kultur Sel ............................................................ 19
2.6 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay ............ 21
2.6.1 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup ................................ 22
2.7 Tinjauan tentang Ekstraksi ............................................................. 23
2.8 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara
........................................................................................................ 24
BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL ............................................................ 25
BAB 4 METODE PENELITIAN...................................................................... 28
4.1 Bahan Penelitian ........................................................................... 28
4.1.1 Bahan Tanaman..................................................................... 28
4.1.2 Bahan Kimia ......................................................................... 28
4.2 Alat-alat Penelitian........................................................................ 29
4.3 Variabel Penelitian ........................................................................ 29
4.3.1 Variabel Bebas ...................................................................... 29
4.3.2 Variabel Tergantung ............................................................. 30
4.4 Metode Penelitian ......................................................................... 30
4.4.1 Rancangan Penelitian ............................................................ 30
4.4.2 Kerangka Operasional ........................................................... 31
4.4.3 Prosedur Kerja ...................................................................... 32
4.4.3.1 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji ....................................... 32
4.4.3.2 Pembuatan Media .......................................................... 34
xii
4.4.3.3 Penumbuhan Sel ............................................................ 35
4.4.3.4 Penggantian Media ........................................................ 35
4.4.3.5 Panen Sel ....................................................................... 36
4.4.3.6 Perhitungan Sel.............................................................. 36
4.4.3.7 Preparasi Sampel .......................................................... 38
4.4.3.8 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji ................... 38
4.4.3.9 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT ............ 39
4.4.3.10 Analisis Data ............................................................... 41
4.4.3.11 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ........................... 41
BAB 5 HASIL PENELITIAN .......................................................................... 43
5.1 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai
(Allium odorum L.) ...................................................................... 43
5.2 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43
5.3 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak
Metanol Daun Kucai (Allium odorum L.) Terhadap Sel Kanker
Payudara T47D dengan Metode MTT ......................................... 44
5.4 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun
Kucai (Allium odorum L.) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D
dengan Probit Analisis ................................................................. 47
5.5 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ................................... 47
5.7.1 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid
.............................................................................................. 47
5.7.1 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48
BAB 6 PEMBAHASAN ................................................................................... 49
BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN............................................................. 54
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 55
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
II.1 Formula Baku Media Kultur ...................................................................... 20
IV.1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap
Percobaan ................................................................................................... 30
V.1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai
(Allium odorum L.) .................................................................................... 43
V.2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media .................................................. 44
V.3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker
Payudara (T47D) dengan Metode MTT..................................................... 45
V.4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol
Daun Kucai (Allium odorum L.) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D
dengan Metode MTT ................................................................................. 45
V.5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin, IC50 ekstrak n-heksana dan IC50
ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L.) terhadap sel kanker payudara
T47D dengan analisis probit ...................................................................... 47
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Kucai (Allium odorum L.) ............................................................................. 6
2.2 Struktur Flavonoid ........................................................................................ 7
2.3 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid ..................................... 8
2.4 Karsinogenesis ............................................................................................ 11
2.5 Pertumbuhan Sel ......................................................................................... 13
2.6 Perkembangan Kanker Payudara ................................................................ 18
2.7 Reaksi MTT ................................................................................................ 21
3.1 Skema Kerangkan Konseptual .................................................................... 27
4.1 Skema Kerangkan Operasional ................................................................... 31
4.2 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai.................. 33
4.3 Perhitungan Sel ........................................................................................... 37
5.1 Ekstrak Kental Daun Kucai ......................................................................... 43
5.2 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan
perbesaran 40x ........................................................................................... 44
5.3 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase
sel hidup kanker payudara T47D .............................................................. 46
5.4 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L.)................................. 47
5.5 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L.) ................................. 48
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Daftar Riwayat Hidup .................................................................................... 59
2 Surat Pernyataan............................................................................................. 60
3 Surat Determinasi ........................................................................................... 61
4 Sertifikat Kultur Jaringan ............................................................................... 62
5. Data Hasil Pembacaan Elisa reader ............................................................. 63
6. Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai
(Allium odorum L.) ...................................................................................... 64
7. Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin ......................................................... 65
8. Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin ............................................... 66
9. Analisis Probit Ekstrak n-Heksana................................................................ 68
10. Analisis Probit EkstrakMetanol .................................................................. 70
11. Lampiran Foto ............................................................................................. 72
12. Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x
Lensa Objektif .............................................................................................. 75
13. Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan
Perbesaran 40x Lensa Objektif..................................................................... 76
14. Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran
40x Lensa Objektif ....................................................................................... 77
xvi
DAFTAR SINGKATAN
xvii
DAFTAR PUSTAKA
Agoes, Azwar, 2010. Tanaman Obat Indonesia (Buku 1), Salemba Medika,
Jakarta.
Amalina, Nur Lia, 2008. Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70%Buah Merica
Hitam (Piper nigrum L.) Terhadap Sel Hela, Skripsi Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Balmer, C.M., Valley, A.W., and Iannucci, A., 2005. Cancer treatment and
Chemotherapy. In: Dipiro, J.T., Talbert, R.L., Matzke G.R., Wells, B.G.,
and Posey, L.M. (Eds.). Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach,
6th Edition, New York: The McGraw-Hill Co., Inc.
Baskhara, Ali Widi, 2008. Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran, Kreasi
Wacana, Yogyakarta.
Chooi,ong hean, 2007. Sayuran : Khasiat Makanan dan Ubatan. Kuala lumpur
xviii
Departemen Kesehatan RI, 2009. Profil Kesehatan Indonesia 2008. Jakarta:
Departemen Kesehatan, hal: 65-66
Dipiro, J.T., Talbert, R.L., Yee, G.C., Matzke G.R., Wells, B.G., and Posey,
L.M., 2008. Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach, 7th Edition,
New York: The McGraw-Hill Co., Inc.
Jaya, Ara Miko. 2010. Isolasi dan Uji Efektivitas Antibakteri Senyawa
Saponin dari Akar Putri Malu (Mimosa pudica). Skripsi Fakultas Sains
dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.
http://lib.uin-
malang.ac.id/?mod=th_viewer&page=1&id=fullchapter/04530001.pdf
Kristanti, A.N, Aminah, N.S, Tanjung,M. Dan Kurniadi,B. 2008. Buku Ajar
Fitokimia. Surabaya: airlangga university press.
Listiani, Irda, Sukrasno, 2005. Telaah Kandungan Kimia Daun Kucai (Allium
odorum L.), Sekolah Farmasi ITB http://bahan-
alam.fa.itb.ac.id/detail.php?id=61 diakses tanggal 5 November 2010.
xix
Maryati, dan Sutrisna EM., 2007. Potensi Sitotoksik Tanaman Ceplukan
(Physalis angulata L.) Terhadap Sel HeLa. Surakarta. Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Muti, Annisa Farida, 2010. Uji Aktivitas Antikanker Ekstrak Etanol Rimpang
Kunyit (Curcuma domestica Val.) Terhadap Kanker Kolon Mencit
Yang Diinduksi DMBA, Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Airlangga.
Mutia, Dita. 2010. Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Buah Anggur (Vitis
vinifera) Terhadap Larva Artemia salina Leach Dengan Metode Brine
Shrimp Lethality Test (BST), Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas
Diponegoro.
Park, Kyoung-Wuk; Kim, So-Yeon; Jeong, Il-You; Byun, Myung-Woo; Park, Ki-
Hun; Yamada, Koji; and Seo, Kwon-Il. 2007. Cytotoxic and Antitumor
Activities of Thiosulfinates from Allium tuberosum L. Korea: Sunchon
National University. http://pubs.acs.org/doi/pdfplus/10.1021/jf0713051
Sianturi, Alesipso HM, 2001. Isolasi dan Fraksinasi Senyawa Bioktif dari Biji
Mahoni (Swietenia mhagoni Jacq), Skripsi Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam Institut Pertanian Bogor.
xx
Sukardiman; Puji,Awik; Fadjri,Hani Tenia. 2011. Uji Sitotoksisitas dan Efek
Ekstrak Spons Laut Aaptos suberitoides Terhadap Sel Kanker Serviks
(Hela) Secara InVitro, Skripsi Institute Teknologi Sepuluh November
Sumarawati, titiek dan Fatmawati, dina, 2011. Isolasi dan Uji Sitotoksik
senyawa Alkaloid Mahkota Dewa (Phaleria macocarpa) Pada Kultur
Sel Kanker Payudara (T47D), Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas
Islam Sultan Agung Semarang.
Winarno, Eko, 2011. Uji Sitotoksik Ekstrak Kapang Aspergillus sp. Terhadap
Sel Kanker Payudara T47D, Skripsi Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam Universitas Indonesia.
Wulandari, Fina Tri, 2011. Uji Praskrining Aktivitas Antikanker Daun Kucai
(Allium odorum L.) Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BST)
(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol), Skripsi Fakultas Ilmu
Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang
xxi