Aplikasi Spektroskopi Massa dalam Analisis Senyawa Organik

1. Pengaplikasian Metode Kromatografi Gas–Spektrometri Massa Tandem (GC-

MS-MS) untuk Analisis Pestisida Dalam Buah dan Sayuran
Bahan-bahan:
Diklorometana, sikloheksana, heksana, aseton, dan metanol. Larutan baku dari
masing-masing pestisida dipersiapkan dalam aseton pada konsentrasi yang
berkisar antara 75 sampai 550 mg/L dan disimpan dalam sebuah freezer pada
suhu -30°C (1 tahun waktu penyimpanan maksimum). Larutan-larutan didapatkan
dengan pengenceran yang sesuai dengan sikloheksana dan disimpan dalam
refrigerator (4°C) (2 bulan waktu penyimpanan maksimum).

Peralatan:
Seperangkat alat GC-MS-MS Saturn 2000 digunakan untuk semua analisis.
Spektrometer massa dioperasikan dalam mode ionisasi tubrukan elektron (EI) dan
mode ionisasi kimiawi (CI) dan opsi MS-MS digunakan. Pustaka MS-MS dibuat
utuk analit-analit target pada pusta MS komersial dan kondisi-kondisi
eksperimental tersedia untuk informasi tambahan. Helium (kemurnian 99,999%)
digunakan sebagai gas pengangkut.

Kalibrasi Spektroskopi Massa

Spektrometer massa dikalibrasi setiap pekannya setelah uji software. Udara dan
air diperiksa setiap hari serta tekanan reagen CI (metanol). Semua senyawa dianalisis
dengan menggunakan tipe bentuk gelombang non-resonan. Dengan tergantung pada
analit, ada dua mode ionisasi yang digunakan (CI dan EI). Parameter-parameter
umum untuk kedua mode ini adalah tegangan multiplier sebesar 1700 V, offset
multiplier +200, dan jebakan, manifold dan suhu jebakan, percabangan pipa, dan
saluran transfer masing-masing adalah 200, 50 dan 280oC. Untuk mode CI arus emisi
ditentukan pada 30 μA, waktu ionisasi pra-scan adalah 100 μs dan nilai target AGC
adalah 2000 hitungan. Pada mode EI nilai-nilai ini masing-masing adalah 80μA, 1500
μs, dan 5000 hitungan.

2. Menggunakan Ion Molekul Untuk Menentukan Massa Relatif Suatu

Molekul
Pada spektrum massa, ion yang terberat (yang mempunyai nilai m/z terbesar)
cenderung merupakan ion molekul. Hanya beberapa molekul yang tidak mempunyai
ion molekul karena langsung terfragmentasi. Sebagai contoh, pada spektrum massa
pentana, ion yang terberat mempunyai nilai m/z 72.

Gambar 2.1 Spektrum massa pentane

Nilai m/z yang terbesar adalah 72, yang merupakan ion terbesar yang melewati
spektrometer massa. Ini bisa diasumsikan sebagai ion molekul sehingga formula
massa relatifnya adalah 72. Jadi, dalam menentukan massa relatif dari spektrum
massa yang dilihat adalah nilai m/z yang terbesar. Tetapi beberapa kesulitan akan
ditemukan jika molekul tersebut mempunyai beberapa isotop baik itu karbon, klor
dan brom..
Note : Kehadiran isotop karbon-13 pada ion molekul dapat dilihat dengan
adanya puncak kecil 1 unit lebih besar dari pada puncak M+ . Puncak ini
disebut puncak M+1. Atom klor dalam suatu senyawa menyebabkan adanya
 dua puncak pada daerah ion molekul yaitu puncak M+ dan puncak M+2. Hal ini
tergantung pada jenis isotop atom klor (klor-35 atau klor-37) yang dimiliki ion
molekul tersebut. Brom juga memberikan hal yang sama.

Efek Atom Klor Atau Brom Pada Spektrum Massa Senyawa Organik
a) Senyawa yang mengandung atom klor
Puncak ion molekul (M+ dan M+2) akan muncul jika suatu senyawa mempunyai satu
atom klor. Hal ini terjadi karena klor mempunyai dua isotop yaitu 35Cl dan 37Cl.

Gambar 2.2 Spektrum massa 2-kloropropana

Ion molekul yang mengandung isotop 35 Cl mempunyai massa relatif 78

sedangkan isotop 37 Cl mempunyai massa relatif 80 –sehingga ada 2 garis pada m/z =
78 dan m/z = 80 dengan rasio tinggi 3 : 1; yang disebabkan karena klor mengandung
isotop 35Cl tiga kali dari isotop 37Cl. Pada daerah ion molekul, terdapat dua puncak
yang terpisah sebanyak 2 unit m/z dengan rasio tinggi 3 : 1. Ini mengindikasikan
bahwa molekul ini mempunyai satu atom klor. Kita juga melihat fragmen pada m/z =
63 dan m/z = 65 pada spectrum massa, yang berarti hasil fragmentasinya masih
mengandung satu atom klor seperti mekanisme dibawah ini:
 Gambar 2.3 mekanisme kandungan atom klor

b) Mempunyai 2 atom klor

Pada daerah ion molekul terdapat nilai m/z 98, 100, dan 102 yang berasal dari 2 atom
klor. Terjadinya 3 garis ini karena penggabungan dua isotop klor. Jumlah karbon dan
hidrogen adalah 28 – sehingga diperoleh beberapa variasi ion molekul, yaitu:

Gambar 3.3 Spektrum massa 1,2-dikloroetana

28 + 35 + 35 = 98
28 + 35 + 37 = 100
28 + 37 + 37 = 102
Didapatkan rasio tingginya adalah 9:6:1

Kesimpulan, jika terdapat 3 garis pada daerah ion molekul (M+, M+2 and
M+4) dengan jarak antaranya adalah 2 unit m/z dan memiliki perbandingan
tinggi 9:6:1, maka senyawa ini mempunyai 2 atom klor.
c) Senyawa yang mempunyai atom brom
Brom mempunyai 2 isotop, 79Br dan 81Br, dengan perbandingan tinggi 50.5 :
49.5. Berarti, senyawa yang mempunyai satu brom mempunyai dua puncak dalam
daerah ion molekul dengan tinggi yang hampir sama.

Gambar 3.4 Spektrum massa bromoetana

Jumlah karbon dan hidrogen adalah 29. Adanya puncak M+ dan M+2 disebabkan
karena:
29 + 79 = 108
29 + 81 = 110
Jika suatu senyawa mempunyai dua garis yang hampir sama tingginya pada
daerah ion molekul dengan jarak antaranya adalah 2 unit m/z; menandakan bahwa
molekul tersebut mempunyai satu atom brom.

Contoh sederhana aplikasi pada spektroskopis massa dalam bidang farmasi

menggunakan sampel garam dapur untuk mengetahui isotop dari kandungan senyawa
natrium klorida contoh berikut mendeskripsikan operasi massa analizer yang
merupakan sektor penting dari MS, sampel natrium klorida dalam komponen sumber
ion, diuapkan (membentuk gas) dan diionkan (diubah kedalam partikel yang
bermuatan listrik) (Na+ Cl-). kecepatan partikel bermuatan dapat di tingkatkan atau di
turunkan ketika melalui medan listrik dan arah tersebut dapat diubah oleh medan
magnet. Tingkat pembelokan pada ion-ion yang bergerak bergantung pada rasio
massa atau muatan ion-ion tersebut. Ion-ion yang lebih besar massa atau muatannya
lebih sulit di belokkan oleh sumber magnet dari pada ion yang massa atau muatannya
kecil

Kesimpulan :
Spektroskopi massa adalah suatu instrument yang dapat menyeleksi molekul-molekul
gas bermuatan berdasarkan massa atau beratnya. Kegunaan Spektroskopi Massa
yaitu: mengetahui komposisi unsur dari bahan yang dianalisa sehingga diketahui
berat dan rumus molekulnya, mengetahui unsur senyawa baik senyawa organic
maupun anorganik, untuk analisis kualitatif maupun kuantitatif suatu kompleks,.
Prinsip kerja spektroskopi massa adalah pengionisasian senyawa kimia menghasilkan
molekul atau fragmen molekul dan mengukur rasio massa atau muatan. Hukum yang
mendasari prinsip kerja dari spektroskopi massa adalah hukum kedua Newton.
Komponen-komponen dari spektroskopi massa adalah teknologi sumber ion,
teknologi penganalisis massa, dan detector. Keuntungan utama yang dimiliki
Spektroskopi Massa adalah penggunaan tandem Spektroskopi Massa-Spektroskopi
Massa. Spektrometri massa kini tidak digunakan dalam pengendalian mutu rutin tapi
ditempatkan dalam suatu lingkungan penelitian dan pengembangan yang digunakan
untuk mengatasi masalah-masalah spesifik yang berasal dari proses rutin atau dalam
pnegembangan proses intrumentasi ini mahal dan membutuhkan dukungan personel
yang sangat terlatih dan pemeliharaan yang teratur. Contoh sederhana penelitian
menggunakan Spektroskopi Massa adalah pada sample garam dapur untuk
mengetahui isotop dari kandungan senyawa natrium dan klorida.
Ketika sinar elektron berenergi 70 volt di dalam spektrometer massa mengenai suatu
senyawa, maka sebuah elektron tunggal akan lepas daTi molekul pada rasa gas tersebut clan
menghasilkan sebuah iQD-!1!2kkYl. dalam bentuk radikal kation (M+.). Contohnya adalah
metanol yang membentuk sebuah ion molekul seperti berikut [Silverstein, 1981]:
CH3OH + e- ---CH3OH+.
(m/z 32) + 2 eIon-ion molekul ini kemudian terurai lebih lanjut dalam waktu 10-10 hing!~a
10-3 detik untuk menghasilkan sebuah fragmen positif dan sebuah radikal. Sejumlah ion
flagmen akan terbentuk; clan masing-masingnya akan terurai lagi menjadi fragmen-fragmen
yang lebih kecillagi
CH3OH+. ---CHzOH+Smlz 31) + H.
CH3OH+. ---CH3+ (nllz 15) + .OH
CHzOH+ ---CHO+ (r,'!/z 29) + Hz
Jika beberapa ion molekular (ion induk) berinteraksi cukup lama (sekitar 10-6 detik) untuk
mencapai detektor. maka dihasilkan sebuah puncak ion molekul. Puncak ini sangat penling
unluk ~ diketahui, sebab ia memberikan bobot molekul daTi senyawa yang dianalisis. Dalam
resolusi satuan, bobot molekul ini akan merupakan bilangan bulat terdekat, dan bukan nilai
taksiran seperti yang diperoleh daTi penentuan bobot molekullainnya. Spektrum massa
menunjukkan massa fragmen-fragmen bermuatan positif (termasuk ion molekul) terhadap
konsentrasi relatif. Puncak spektrum yang paling tinggi, disebut Quncak dasar (base peak),
dan diberi nilai 100%. lntensitas (atau tinggi x faktor kepekaan) daTi puncak-puncak lainnya,
termasuk juga ion molekul, ditunjukkan dalam persentase daTi puncak basa. Kadangkala,
puncak ion molekul adalah juga puncak dasar [Pecsok, 1976]. Pacta Gambar 1, puncak ion
molekul adalah mIl 58, dan puncak dasar adalah mil 29.