PP No 20 Tahun 1990 tentang kriteria kualitas air golongan A

Persyaratan max
Parameter Volume contoh (ml)
(membran filter)
Total coliform 100 3
Fecal coliform 100 0
Enterococci 100 ******

Persyaratan mikrobiologi air untuk pengolahan ikan

menurut CD/80/778/EEC
Persyaratan max
Parameter Volume contoh (ml)
(membran filter)
Total coliform 100 0
Fecal coliform 100 0
Enterococci 100 0
Gram -; batang pendek diameter
1,1x2-6 µm; memfermentasi laktosa,
glukosa, sukrosa, maltosa dan
manitol; positif indol dan MR; negatif
VP dan citrat

Escherichia
coli
 bakteri gram negatif
 dapat ditemukan dalam usus besar
manusia
 Kebanyakan E. coli tidak berbahaya
 E . c o l i y a n g t i d a k b e r b a h ay a d a p a t
menguntungkan manusia : 1. memproduksi
vitamin K 2 , 2. mencegah bakteri lain di
dalam usus.
 Biasa digunakan sebagai vektor
untuk menyisipkan gen-gen tertentu
yang diinginkan untuk dikembangkan.

 E. coli
dipilih karena pertumbuhannya
sangat cepat dan mudah dalam
penanganannya.
. Dalam pemeriksaan bakteri golongan
coliform ada dua macam :1. bakteri
coliform non fekal dan 2. bakteri coliform
fekal.
Coliform non fekal berasal dari hewan atau
tanaman yang sudah mati, misalnya
Enterobacter aerogenes.
Sedangkan coliform fekal berasal dari
kotoran manusia dan hewan, misalnya
Escherichia coli.
 ALAT

Autoclave
Filter apparatus
Vacum pump
Inkubator
Waterbath
Glass ware
Laminary air flow
Membran selulose 0,45 µm
Lampu bunsen
Jarum osa
 BAHAN
 Escherichia coli
 Lactose TTC with Tergitol 7
 Media TSA
 Trytophan broth
 Oksidase strip
 Kovacks Reagen
 Coliform dan E. coli
100 ml contoh atau lebih (misalnya 250 ml) koloni yang
dihitung 20-80 koloni/filter

Membran
Pendugaan Coliform:
• Pindahkan membran filter ke Lactose TTC Agar koloni tersangka
• Inkubasi 36 ± 2° C, 21 ± 3 jam berwarna kuning,
jingga, kemerahan
Sub kultur (> 10 atau semua)

Trytophan Broth (Tryptone Water)

TSA miring Inkubasi 36 ± 2° C, 21 ± 3 jam Inkubasi 44 ± 0.5° C, 21 ± 3 jam

Uji Oksidase Uji Indol

Penegasan Coliform Oksidase (-) Penegasan E. coli Oksidase (-) Indol (+)
Koloni Tersangka
Koloni Tersangka
 Tambahkan 0,2 ml -0,3 ml
pereaksi kovacs (p-
dimethylaminobenzaldehyde 5
g, amyl alchol 75 ml, H CL 25
ml) ke dalam kultur bakteri
+ dalam tryptone broth.

Reaksi positif bila bakteri

- + mampu memfermentasi
trypton menghasilkan senyawa
indol.
 Reaksi positif apabila bakteri mampu
menghasilkan indol.
Indol dengan reagensia kovacs (p-
Dimethylaminobenzaldehyde dalam amyl
alcohol) membentuk lapisan warna
+ merah pada permukaan (cincin merah).

-
E coli Biotype 1 mampu dan Biotype 2
+
tidak mampu memfermantasi Trypton
mampu menghasilkan senyawa berbau
busuk Indol.
Berdasarkan interpretasi hasil nyatakan :
 Coliform : koloni /100 ml
 Escherichia coli : koloni /100 ml