1.

Gambaran makroskopik sputum yang baik dan tidak baik (sertakan gambarnya) untuk
pemeriksaan mikrobiologi
2. Sebutkan kriteria specimen sputum yang baik secara mikroskopik!
Sel Epitel :………………
PMN : …………………..
3. Tuliskan Langkah-langkah pengecatan BTA dengan metode Ziehl-Neelsen!
4. Bagaimana cara pelaporan hasil pengecatan BTA rekomendasi IUATLD?
5. Sebutkan klasifikasi Streptococcus sp. Berdasarkan sifat hemolisisnya! (sertakan gambar)
6. Sebutkan ciri-ciri / karakteristik Staphylococcus aureus (sertakan gambar):
Mikroskopik : Sifat pewarnaan gram, bentuk ?
Di media kultur?
7. Sebutkan karakteristik Haemophilus influenza secara mikroskopik dan di media kultur!
8. Sebutkan karakteristik Corynebacterium diphteriae secara mikroskopik dan di media
kultur!
JAWAB
1. Sputum yang baik:
Sputum yang tidak baik:
2. Sel epitel:
PMN:
3. Pewarnaan BTA dengan metode Ziehl-Neelsen

ALAT BAHAN REAGENT

Ose Sputum positif Carbol fuchsin 1%
Pembakar spiritus Minyak emersi Asam alcohol 5%
Gelas objek Aquades/air keran Methylene blue/asam pikrat
Mikroskop
Tissue
Pipet tetes

Prosedur kerja:
1) Sediaan kuman diwarnai dengan larutan fukhsin karbol dan dipanaskan dengan
api kecil sehingga keluar asap, biarkan selama 5 menit.
 2) Sediaan dicuci dengan air mengalir dan dimasukkan dalam larutan asam alkohol
selama 1-2 detik. (Untuk kuman M. leprae digunakan larutan H2SO4 1%.)
3) Kemudian dicuci dengan aquadest sehingga tidak ada warna merah mengalir.
4) Sediaan dicuci dengan air dan diwarnai dengan larutan biru metilen selama 1-2
menit, dicuci dengan air lagi dan dikeringkan.
Hasil dapat dibaca sebagai berikut:
- Kuman tahan asam berwarna merah
- Bukan kuman tahan asam berwarna biru.
Sesudah pencucian dengan asam-alkohol kuman tahan asam mempertahankan
warna merahnya, sedangkan kuman bukan tahan asam melepaskan warna ini dan
menjadi tidak berwarna. Sifat tahan asam ini disebabkan karena terdapatnya asam
mikolat yang terikat dalam dinding sel. Dinding sel kuman tahan asam terdiri dari
peptidoglikan, arabinogalaktan dan lipid, sedangkan 50% dari lipid ini adalah asam
mikolat.

Pembacaan Hasil Pengamatan:

1) Preparat yang sudah jadi diamati dibawah mikroskop dengan setting pembesaran
objektif 10 kali untuk mencari lapang pandang, kemudian dilanjutkan dengan
perbesaran objektif 100 kali dengan penambahan oil imersi untuk memperjelas
objek yang diamati.
2) Diamati bentuk dan warna bakteri, bakteri tahan asam akan berwarna merah dan
bakteri tidak tahan asam akan berwarna biru.
4. Skala pelaporan menurut IUATLD (International Union Against Tuberculosis Lung
Disease)
 Laporkan BTA negatif apabila tidak ditemukan kuman dalam 100 lapang pandang
 Laporkan BTA positif apabila ditemukan kuman dengan cara:
 1-9 BTA/100 lapang pandang : dilaporkan jumlahnya
 10-99 BTA/100 lapang pandang : + (positif 1)
 1-10 BTA/lapang pandang : ++ (positif 2, dibaca minimal 50 lapang
pandang)
 >10 BTA/lapang pandang : +++ (positif 3, dibaca minimal 20 lapang
pandang)
5. Klasifikasi Streptococcus sp berdasarkan sifat hemolisisnya ada 3:
1) α-hemolytic (alfa-hemolitik, hanya mampu melisiskan eritrosit secara parsial
sehingga berwarna hijau)
2) β-haemolytic (beta-hemolitik, mampu melisiskan eritrosit dengan sempurna
sehingga berwarna merah dan terang)
3) γ-hemolytic (gama-hemolitik, tidak terjadi proses hemolisis) (Patterson, 2018).
Penampakan Hemolisis Pada Media BAP:

Penampakan mikroskopik:

6. Ciri-ciri / karakteristik Staphylococcus aureus:

 Gram positif, berbentuk bulat
 Berdiameter 0,8-1,0 μm
 Tersusun dalam kelompok-kelompok yang tidak teratur seperti buah anggur
 Fakultatif anaerob
 Tidak membentuk spora
 Tidak bergerak
Mikroskopik : Sifat pewarnaan gram, bentuk:
Bakteri gram positif berwarna ungu disebabkan kompleks zat warna kristal violet-yodium
tetap dipertahankan meskipun diberi larutan pemucat. Perbedaan struktur luar dinding sel
 bakteri gram positif dan negative mengakibatkan terjadinya perbedaan warna pada akhir
prosedur pewarnaan gram. Dinding sel terluar bakteri gram positif terdiri dari
peptodoglikan tebal tanpa lapisan lipoprotein atau lipopolisakarida. Retnowati et al.
(2011) menyatakan bahwa S. aureus merupakan gram positif yang memiliki lapisan
peptidoglikan tebal.

Bentuk: Kokus gram positif

Di media kultur: Manitol Salt Agar (MSA)/agar darah
Sumber: file:///C:/Users/ACER/Downloads/16506-Article%20Text-49683-2-10-20170814.pdf
7. karakteristik Haemophilus influenza secara mikroskopik dan di media kultur:
Dalam spesimen yang berasal dari infeksi akut, organisme ini menjadi pendek (1,5 pm)
basilokokus, yang kadangkadang muncul berpasangan atau berupa rantai pendek.
Dalam biakan, morfologinya tergantung pada lama dan mediumnya. Selama 6-8 jam
dalam medium kaya, sebagian besar akan berbentuk kokobasilus kecil. Kemudian akan
berbentuk batang panjang, bakteri yang mengalami lisis, dan bentuk sangat pleomorfik.
Organisme pada biakan yang singkat (6-18 jam) pada medium yang diperkaya
mempunyai kapsul yang tampak jelas. Kapsul tersebut adalah antigen yang digunakan
untuk "typing” H. influenza.
secara mikroskopik:
dimedia kultur: Pada agar coklat, setelah masa inkubasi 24 jam akan timbul koloni rata,
berwarna coklat keabu-abuan dengan diameter 1-2 mm. IsoVitaleX pada media dapat
mempercepat pertumbuhan bakteri.
8. karakteristik Corynebacterium diphteriae secara mikroskopik dan di media kultur:
Mikroskopik: Coryne bacterium cenderung pleomorfik pada morfologi mikroskopik dan
colonial. Kuman difteri berbentuk batang ramping berukuran 1,5-5 pm x 0,5-L pm dan
biasanya salah satu ujungnya menggembung sehingga berbentuk gada, tidak berspora,
tidak bergerak, positif Gram dan tidak tahan asam. Di dalam preparat sering tampak
membentuk susunan huruf-huruf V, L, Y, tulisan Cina atau anyaman pagar (palisade)
Media kultur: Pada agar darah, koloni C. Diphtheriae berbentuk kecil, granular, dan
berwarna abu-abu, dengan tepi tidak beraturan, dan mungkin memiliki zona hemolysis
kecil. Pada agar yang mengandung kalium telurit, koloni berwarna coklat sampai hitam
dengan daerah halo berwarna coklat-hitam karena telurit direduksi secara intraseluler.