Anda di halaman 1dari 86

PEMBUATAN MEDIA PERTUMBUHAN BAKTERI DENGAN

MENGGUNAKAN UMBI UBI JALAR CILEMBU (Ipomoea


batatas (L.) Lam) UNTUK BAKTERI Lactobacillus acidophilus,
Salmonella typhii DAN Escherichia coli

SKRIPSI

OLEH:
LAILY PURNAMA SARI
NIM 151501117

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI


FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2019

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA


PEMBUATAN MEDIA PERTUMBUHAN BAKTERI DENGAN
MENGGUNAKAN UMBI UBI JALAR CILEMBU (Ipomoea
batatas (L.) Lam) UNTUK BAKTERI Lactobacillus acidophilus,
Salmonella typhii DAN Escherichia coli

SKRIPSI

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar


Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

OLEH:
LAILY PURNAMA SARI
NIM 151501117

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI


FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2019

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA


UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
KATA PENGANTAR

Puji syukur dan syukur kehadirat Allah yang Maha Kuasa yang telah

melimpahkan rahmat, karunia dan ridhoNya, sehingga penulis dapat

menyelesaikan skripsi yang berjudul “Pembuatan Media Pertumbuhan Bakteri

dengan Menggunakan Umbi Ubi Jalar Cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam)

untuk Bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhii dan Escherichia coli”.

Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana

pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Penulis menyampaikan terimakasih kepada Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara, Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., yang telah memberikan

bantuan dan fasilitas selama masa pendidikan. Ibu Dra. Erly Sitompul, M.Si.,

Apt., dan Ibu Dr. Dra Marline Nainggolan, MS. Apt., yang telah membimbing

dengan penuh kesabaran, tulus dan ikhlas selama penelitian dan penulisan skripsi

ini berlangsung. Bapak Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt., dan Bapak Drs.

Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan

kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Bapak

dan ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah

mendidik selama perkuliahan dan Ibu Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt., selaku

penasehat akademik yang memberikan bimbingan dan motivasi kepada penulis

selama masa perkuliahan.

Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tulus

kepada kedua orangtua, Ayahanda Rasmijan dan ibunda Murtini tercinta, serta

kakak, abang atas doa, dukungan, semangat dan pengorbanan baik moril maupun

materil dalam penyelesaian skripsi ini.

iv
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
v
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
vi
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
PEMBUATAN MEDIA PERTUMBUHAN BAKTERI DENGAN
MENGGUNAKAN UMBI UBI JALAR CILEMBU (Ipomoea
batatas (L.) Lam) UNTUK BAKTERI Lactobacillus acidophilus,
Salmonella typhii DAN Escherichia coli

ABSTRAK

Latar Belakang : Ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam) adalah salah satu
bahan alami yang merupakan sumber karbohidrat dan memiliki berbagai nutrisi
yang cukup seperti protein, vitamin (A,B,C) dan mineral sehingga memungkinkan
untuk digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri Lactobacillus acidophilus
Salmonella typhii dan Escherichia coli
Tujuan : Memanfaatkan umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam)
sebagai media pertumbuhan bakteri.
Metode : Pada penelitian ini diambil pati ubi jalar cilembu dengan proses
pemarutan dan untuk mendapatkan tepung dilakukan dibuat dalam bentuk
simplisia serbuk ubi jalar cilembu. Pembuatan media digunakan pati dan tepung
serta penambahan agar, nacl dan susu uht masing-masing dengan konsentrasi
formula yaitu 5% (F1), 7,5% (F2), dan 10% (F3), sebagai media pembanding
yaitu NA (Nutrient Agar). Selanjutnya dilakukan pengujian mikrobiologi secara
invitro dengan metode gores, sebar dan tuang menggunakan bakteri Lactobacillus
acidophilus, Salmonella typhii dan Escherichia coli dan dilakukan pengamatan.
Hasil : Hasil penelitian memberikan ubi jalar cilembu baik pati maupun tepung
dapat digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri. Hasil pertumbuhan bakteri
yang terbaik yaitu bakteri Salmonella typhii. Hasil media yang terbaik yaitu
tepung ubi jalar cilembu dengan konsentrasi 10% (F3), hal ini karena
pertumbuhan bakteri mengandung nutrisi dan mineral yang lebih tinggi dibanding
FI dan F2 dan untuk pati kurang baik pertumbuhannya. Metode biakan bakteri
pada penelitian ini digunakan metode gores, tuang dan sebar.
Kesimpulan : Hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa umbi ubi jalar cilembu
(Ipomoea batatas (L.) Lam) dapat digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri
Lactobacillus acidophilus Salmonella typhii dan Escherichia coli.

Kata Kunci :Ubi jalar cilembu, media pertumbuhan bakteri.

vii
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
THE PREPARATION OF BACTERIAL GROWTH MEDIA USING
CILEMBU SWEET POTATO TUBER (Ipomoea batatas (L.) Lam) FOR
Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhii AND Escherichia coli
BACTERIA

ABSTRACT

Background: Cilembu sweet potato (Ipomoea batatas (L.) Lam) is rich in


carbohydrate and contains nutrients such as protein, vitamins (A, B, C) and
minerals that makes it a good bacterial culture medium for Lactobacillus
acidophilus Salmonella typhii and Escherichia coli bacteria.
Purpose: To see the possibility of the utilization of cilembu sweet potato tubers
(Ipomoea batatas (L.) Lam) as a bacterial growth medium.
Method: In this study, cilembu sweet potato was shredded to obtain the starch
and the flour was made from the simplicial powder of cilembu sweet potato. The
starch and flour were used for the preparation of the media with addition of agar,
NaCl and milk with a concentration of formulas namely 5% (F1), 7.5% (F2), and
10% (F3) respectively, NA (Nutrient Agar) as a comparison medium.
Microbiology study was then carried out using Lactobacillus acidophilus,
Salmonella typhii and Escherichia coli bacteria and observations were done.
Results: The results showed that cilembu sweet potato, both starch and flour, can
be used as a medium for bacterial growth. The best bacterial growth was
Salmonella typhii bacteria. The best medium was cilembu sweet potato flour with
a concentration of 10% (F3) due to higher content of nutrition and minerals
compared to F1 and F2 and the starch did not showed good bacterial growth. The
methods used for bacterial culture in this study were streak, pour and spread
methods.
Conclusion: The results of this study showed that cilembu sweet potato tubers
(Ipomoea batatas (L.) Lam) can be used in the preparation of culture medium for
Lactobacillus acidophilus Salmonella typhii and Escherichia coli bacteria.

Keywords: Cilembu sweet potato (Ipomoea batatas (L.) Lam), bacterial growth
media.

viii
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
DAFTAR ISI

HALAMAN SAMPUL ........................................................................................ .. i


HALAMAN JUDUL ............................................................................................ ..ii
HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. .iii
KATA PENGANTAR ......................................................................................... .iv
SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS ........................................................ .vi
ABSTRAK ........................................................................................................... vii
ABSTRACT ........................................................................................................viii
DAFTAR ISI ........................................................................................................ .ix
DAFTAR TABEL ................................................................................................ .xi
DAFTAR GAMBAR ...........................................................................................xii
DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xiii
BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang .................................................................................................. 1
1.2 Perumusan Masalah .......................................................................................... 3
1.3 Hipotesis............................................................................................................ 3
1.4 Tujuan Penelitian .............................................................................................. 3
1.5 Manfaat Penelitian ............................................................................................ 4
1.6 Kerangka Pikir Penelitian ................................................................................. 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................................. 6
2.1 Uraian Tumbuhan.............................................................................................. 6
2.1.1 Sejarah dan Asal Ubi Jalar Cilembu .............................................................. 6
2.1.2 Taksonomi Ubi Jalar Cilembu ....................................................................... 7
2.1.3 Morfologi Ubi Jalar ........................................................................................ 8
2.1.4 Kandungan Gizi Ubi Cilembu ........................................................................ 9
2.1.5 Ciri dan Bentuk Ubi Cilembu ....................................................................... 10
2.1.6 Pati Ubi Cilembu .......................................................................................... 11
2.1.7 Tepung Ubi Cilembu .................................................................................... 11
2.1.8 Manfaat ubi Cilembu ................................................................................... 12
2.2 Pertumbuhan Mikroorganisme ........................................................................ 12
2.2.1 Pengaruh Faktor Fisik Pada Pertumbuhan Mikroorganime ......................... 12
2.2.2 Pengaruh Faktor Kimia Pada Pertumbuhan Mikroorganime ....................... 13
2.3 Media Pertumbuhan Bakteri ........................................................................... 16
2.4 Media Nutrient Agar ....................................................................................... 18
2.5 Metode Inokulasi Biakan Bakteri ................................................................... 19
2.5.1 Cara Pengembangbiakan Bakteri ................................................................. 20
2.5.2 Inkubasi Bakteri ........................................................................................... 21
2.6 Uraian Bakteri ................................................................................................. 22
2.6.1 Bakteri Escherichia coli ............................................................................... 22
2.6.2 Bakteri Salmonella typhii ............................................................................. 22
2.6.3 Bakteri Lactobacillus acidophilus ............................................................... 23
BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 24
3.1 Jenis Penelitian ................................................................................................ 24
3.2 Alat .................................................................................................................. 24
3.3 Bahan .............................................................................................................. 24
3.4 Penyiapan Sampel ........................................................................................... 25

ix
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
3.4.1 Pengambilan Sampel .................................................................................... 25
3.4.2 Identifikasi Sampel....................................................................................... 25
3.4.3 Pengolahan Sampel ...................................................................................... 25
3.4.3.1 Pengolahan Sampel Pati Ubi Jalar Cilembu.............................................. 25
3.4.3.1 Pengolahan Sampel Tepung Ubi Jalar Cilembu........................................ 26
3.5 Pembuatan Larutan Pereaksi dan Media ......................................................... 26
3.5.1 Pembuatan Larutan Pereaksi ........................................................................ 26
3.5.1.1 Larutan Iodum ........................................................................................... 26
3.5.1.2 Larutan Etanol 70%................................................................................... 27
3.5.1.3 Pereaksi CuSO4 1% ................................................................................... 27
3.5.1.4 Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N ............................................................. 27
3.5.1.5 Pereaksi Asam Klorida 2 N ....................................................................... 27
3.5.2 Pembuatan Media ......................................................................................... 27
3.5.2.1 Media Nutrient Agar ................................................................................. 27
3.5.2.2 Pembuatan Media Agar miring ................................................................. 28
3.5.2.3 Pembuatan Stok Kultur Bakteri ................................................................ 28
3.5.2.4 Pembuatan Suspensi Bakteri Uji ............................................................... 28
3.5.2.5 Pengenceran Bakteri Uji ........................................................................... 28
3.6 Pemeriksaan Karakteristik Pati ....................................................................... 28
3.6.1 Pemeriksaan Makroskopik ........................................................................... 28
3.6.2 Pemeriksaan Mikroskopik............................................................................ 29
3.6.3 Pemeriksaan Kelarutan................................................................................. 29
3.6.4 Penetapan Susust Pengeringan ..................................................................... 29
3.6.5 Uji Kadar Abu .............................................................................................. 30
3.6.6 Uji Karbohidrat ............................................................................................ 30
3.6.7 Uji protein .................................................................................................... 30
3.6.8 Pemeriksaan pH ........................................................................................... 30
3.7 Formula yang Direncanakan ........................................................................... 31
3.7.1 Media Pengganti Nutrient Agar ................................................................... 31
3.8 Cara Pengujian ................................................................................................ 31
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 33
4.1 Identifikasi Sampel.......................................................................................... 33
4.2 Pengolahan Pati dan Tepung Ubi Jalar Cilembu ............................................ 33
4.3 Pemeriksaan Karakterisasi .............................................................................. 33
4.4 Pembuatan Media Umbi Ubi Jalar Cilembu .................................................. 35
4.4.1 Pembuatan Media dari Pati Umbi Ubi Jalar Cilembu .................................. 35
4.5 Pengujian Media Umbi Ubi Jalar Cilembu terhadap Bakteri.......................... 36
4.5.1 Hasil pengujian Media Pati Umbi Ubi Jalar Cilembu .................................. 36
4.5.2 Hasil pengujian Media Tepung Umbi Ubi Jalar Cilembu............................ 37
4.6 Kriteria Pertumbuhan Bakteri pada Media Ubi Jalar Cilembu ....................... 38
4.6.1 Kriteria Pertumbuhan Bakteri pada Media Pati Ubi Jalar Cilembu ............. 38
4.6.2 Kriteria Pertumbuhan Bakteri pada Media Tepung Ubi Jalar Cilembu ....... 39
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................ 41
5.1 Kesimpulan ..................................................................................................... 41
5.2 Saran ................................................................................................................ 41
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 42
LAMPIRAN .......................................................................................................... 45

x
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
DAFTAR TABEL

2.1 Kandungan gizi ubi jalar cilembu ..................................................................... 9


3.7 Formula yang direncanakan ........................................................................... 31
4.1 Hasil Karakteristik Ubi jalar Cilembu kuantitatif ........................................... 33
4.2 Hasil Karakteristik Ubi jalar Cilembu kualititatif ........................................... 34
4.3 Jumlah Koloni Bakteri pada Media Pati Ubi jalar Cilembu ........................... 36
4.4 Jumlah Koloni Bakteri pada Media Tepung Ubi jalar Cilembu ..................... 37
4.5 Kriteria Pertumbuhan Bakteri pada Media Pati Ubi jalar Cilembu ................ 38
4.6 Kriteria Pertumbuhan Bakteri pada Media Tepung Ubi jalar Cilembu .......... 39

xi
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
DAFTAR GAMBAR

1.1 Kerangka pikir penelitian .................................................................................. 5


2.1 Ubi jalar cilembu ............................................................................................... 7
2.2 Fase pertumbuhan mikroorganisme ................................................................ 15

xii
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
DAFTAR LAMPIRAN

1. Hasil Identifikasi Tumbuhan ............................................................................. 45


2. Hasil Pemeriksaan Makroskopis ....................................................................... 46
3. Hasil Pemeriksaan Mikroskopis........................................................................ 48
4. Karakteristik Ubi Jalar Cilembu........................................................................ 49
5. Gambar Alat ...................................................................................................... 50
6. Gambar Bahan ................................................................................................... 53
7. Bagan Alir ......................................................................................................... 54
8. Hasil Pertumbuhan Bakteri ............................................................................... 61
9. Perhitungan ....................................................................................................... 70
10.Tabel Pengulangan Pengujian .......................................................................... 72

xiii
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Mikrobiologi adalah ilmu yang mempelajari organisme yang

berukuran sangat kecil sehingga tidak dapat dilihat dengan mata telanjang

melainkan harus menggunakan mikroskop. Organisme yang sangat kecil ini

disebut sebagai mikroorganisme (Waluyo, 2009).

Mempelajari sifat-sifat dan menumbuhkan mikroorganisme memerlukan

suatu media sebagai tempat pertumbuhan mikroorganisme. Media pertumbuhan

harus memenuhi persyaratan nutrisi yang dibutuhkan oleh suatu

mikroorganisme (Atlas, 2004). Nutrisi yang dibutuhkan mikroorganisme untuk

pertumbuhannya meliputi sumber karbon, nitrogen, unsur non logam seperti

sulfur dan fosfor, unsur logam seperti Ca, Zn, Na, K, Cu, Mn, Mg, dan Fe,

vitamin, air, dan energi (Cappucino, 2014).

Dasar makanan yang paling baik untuk pertumbuhan bakteri ialah medium

yang mengandung zat-zat organik seperti rebusan daging, sayur- sayuran, sisa-sisa

makanan atau ramuan-ramuan yang dibuat oleh manusia (Dwidjoseputro, 1987).

Media sangat penting untuk menumbuhkan mikroba, isolasi, perhitungan

jumlah mikroba, dan pengujian sifat-sifat fisik bakteri sehingga suatu bakteri

dapat diidentifikasi. Media pertumbuhan dalam berbagai bidang sangat besar

peranannya, media pertumbuhan dapat digunakan sebagai media untuk

pemeriksaan dan pengembangan penyakit yang berasal dari virus dan bakteri,

pembuatan antimikroba untuk membunuh virus dan jamur pada tumbuhan,

sebagai media pengembangan zat antivirus. Media yang umum digunakan untuk

1
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
menumbuhkan mikroorganisme adalah media Nutrient agar yang merupakan

media racikan berbentuk siap pakai.

Mahalnya harga media komersial yang dapat mencapai Rp 500.000,-

hingga Rp 1.500.000,- setiap 500 g serta melimpahnya sumber alam yang dapat

digunakan sebagai media pertumbuhan mikroorganisme mendorong para peneliti

untuk menemukan media alternatif dari bahan-bahan yang mudah didapat dan

tidak memerlukan biaya yang mahal serta untuk memberikan alternatif media

pertumbuhan mikroorganisme (Anisah, 2015).

Beberapa peneliti berhasil menemukan media alternatif untuk

pertumbuhan mikroorganisme dari bahan-bahan yang mudah ditemukan di

alam. Seperti dari sumber protein yaitu kacang hijau, kacang kedelai hitam dan

berbagai sumber karbohidrat seperti seperti ubi jalar dan singkong

(Arulananthan, 2012).

Ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam) adalah salah satu bahan

alami yang merupakan sumber karbohidrat yang harganya relatif murah. Selain

ubi jalar cilembu ada juga ubi jalar orange, ungu, kuning dan putih. Ubi tersebut

memiliki nutrisi yang cukup sehingga memungkinkan untuk digunakan sebagai

media pertumbuhan bakteri.

Menurut Mayastuti (2002), Ubi jalar cilembu ( Ipomoea batatas ( L.)

Lam) memiliki kandungan vitamin A dalam bentuk β–karoten. vitamin B-1

vitamin B-2 dan niacin, serta vitamin C. Selain itu, ubi cilembu juga

mengandung karbohidrat, protein dan lemak.

Berdasarkan latar belakang tersebut, penulis tertarik melakukan

penelitian untuk mengetahui penggunaan pati umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea

batatas (L.) Lam) untuk media pertumbuhan bakteri.

2
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
1.2 Perumusan Masalah

Rumusan masalah penelitian ini adalah :

a. Apakah tepung dan pati umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam)

dapat digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri Lactobacillus

acidophilus, Salmonella typhii dan Escherichia coli ?

b. Apakah tingkat kesuburan pertumbuhan bakteri Lactobacillus acidophilus,

Salmonella typhii dan Escherichia coli menggunakan media pati dan tepung

umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam) dapat dibandingkan

dengan Media Nutrient Agar (NA) ?

1.3 Hipotesis Penelitian

a. Tepung dan pati umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam) dapat

digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri Lactobacillus acidophilus,

Salmonella typhii dan Escherichia coli.

b. Tingkat kesuburan pertumbuhan bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella

typhii dan Escherichia coli menggunakan media tepung dan pati umbi ubi jalar

cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam) dapat dibandingkan dengan Media

Nutrient Agar (NA)

1.4 Tujuan Penelitian

a. Memanfaatkan tepung dan pati umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.)

Lam) sebagai media pertumbuhan bakteri Lactobacillus acidophilus,

Salmonella typhii dan Escherichia coli.

b. Mengetahui pertumbuhan bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhii

dan Escherichia coli pada media pertumbuhan bakteri dengan menggunakan

3
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam) dan membandingkan

pertumbuhan bakteri tersebut tersebut dalam media nutrient agar dengan

memperhatikan jumlah koloninya.

1.5 Manfaat Penelitian

a. Memberikan informasi bahwa umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.)

Lam) dapat digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri.

b. Memberikan informasi bahwa media instant (media yang sudah dipatenkan)

dapat digantikan dengan media umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.)

Lam)

c. Memberikan informasi kepada peneliti dalam pembuatan media pertumbuhan

bakteri menggunakan bahan yang mudah di dapat dan relatif murah.

4
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
1.6 Kerangka Pikir Penelitian

Penelitian ini dilakukan dengan kerangka pikir yang dapat dilihat pada
Gambar 1.1:

Pati dan tepung umbi


ubi jalar cilembu

Variabel Bebas Variabel Terikat

Konsentrasi pati dan Pertumbuhan


tepung umbi ubi jalar bakteri
cilembu dalam media
pertumbuhan bakteri

Parameter

jumlah koloni bakteri


Lactobacillus
acidophilus

jumlah koloni bakteri


Salmonella typhi Pertumbuhan
bakteri
Lactobacillus
acidophilus,
Salmonella typhi
jumlah koloni bakteri
dan Escherichia
Escherichia coli coli.

Gambar 1.1 Kerangka Pikir Penelitian

5
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tumbuhan

2.1.1 Sejarah dan Asal Ubi Jalar Cilembu

Ubi Cilembu adalah kultivar ubi jalar merupakan ras lokal asal dari

Desa Cilembu Kecamatan Pamulihan, Kabupaten Sumedang, Provinsi Jawa

barat. Ubi cilembu ini populer di kalangan konsumen semenjak tahun 1990-an.

Lahannya yang gembur dan subur sangat cocok dengan tanaman yang menjalar

ini. Selain itu lahan yang berada di daerah pegunungan yang berhawa dingin dan

menyejukkan (Haryati dkk., 2015).

Ubi cilembu dikenal dengan nama ketela rambat, huwi boled

(Sunda), tela rambat (Jawa), sweetpotato (Inggris), dan shoyo (Jepang)

merupakan sumber karbohidrat yang cukup penting dalam sistem ketahanan

pangan kita. Selain karbohidrat sebagai kandungan utamanya, ubi cilembu juga

mengandung vitamin, mineral, zat-zat antioksidan dan serat (pektin, selulosa,

hemiselulosa) (Haryati dkk., 2015).

Ada beberapa varietas ubi cilembu yang ada di Indonesia yaitu

Daya, Borobudur, Prambanan, Mendut, Kalasan, Muara Takus, Cangkuang,

Sewu. Sedangkan varietas-varietas yang baru dikenalkan pada tahun 2001

antara lain: Cilembu yang berasal dari Sumedang. Masing- masing varietas

memiliki rasa khas yang berbeda-beda (Haryati dkk., 2015).

Ubi cilembu bisa juga ditanam di daerah lain, namun rasanya bisa

berrbeda karena unsur hara dalam tanah dan iklim sangat mempengaruhi

karakteristik ubi tersebut (Mayastuti 2002).

6
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Ubi jalar Cilembu lebih istimewa dari pada umbi biasanya karena umbi ini

lebih manis, lebih manisnya ubi jalar cilembu disebabkan boleh kadar gula ubi

jalar Cilembu lebih tinggi dari ubi jalar lain yaitu ubi mentah mencapai 11-13%

dan ubi masak 19-23% (Rukmana, 2005)

2.1.2 Taksonomi ubi jalar cilembu (Ipomoea batats L).Lam)

Menurut Mayastuti,2002 kedudukan taksonomi tanaman ubi jalar

(Ipomoea batats L).Lam) Cilembu adalah sebagai berikut :

Kerajaan : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Sub Divisi : Angiospermae

Kelas : Dicotyledoneae

Bangsa : Solanales

Suku : Convolvulaceae

Marga : Ipomoea

Spesies : Ipomoea batatas (L).Lam

Varietas : Cilembu

Gambar 2.1 Ubi jalar Cilembu


Sumber : Dokumentasi pribadi

7
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
2.1.3 Morfologi Ubi Jalar

Tanaman ubi jalar termasuk tumbuhan semusim (annual) yang memiliki

susunan tubuh utama terdiri dari batang, ubi, daun, bunga, buah, dan biji. Batang

tanaman ubi jalar berbentuk bulat, tidak berkayu, berbuku-buku, dan tumbuh

tegak atau merambat (menjalar). Panjang batang tanaman bertipe tegak antara

1-2 m, sedangkan pada tipe merambat (menjalar) antara 2-3m. Ukuran batang

dibedakan atas tiga macam, yaitu besar, sedang, dan kecil. Warna batang biasanya

hijau tua sampai keungu-unguan (Rukmana, 1997).

Pada buku-buku batang tumbuh daun bertangkai agak panjang tunggal.

Daun berbentuk bulat sampai lonjong dengan tepi rata atau berlekuk dangkal

sampai berlekuk dalam, sedangkan bagian ujung daun meruncing. Helaian daun

berukuran lebar, menyatu mirip bentuk jantung, namun ada pula yang bersifat

menjari. Daun biasanya berwarna hijau tua atau kekuning-kuningan. Dari ketiak

daun akan tumbuh karangan bunga. Bunga ubi jalar berbentuk terompet, tersusun

dari lima helai daun mahkota, lima helai kalyx, dan satu putik. Mahkota bunga

berwarna putih atau putih keungu-unguan. Bunga ubi jalar mekar pada pagi hari

mulai pukul 04.00-11.00. Bila terjadi penyerbukan buatan, bunga akan

membentuk buah. Buah ubi jalar berbentuk bulat berkotak tiga, berkulit keras dan

berbiji (Rukmana, 1997).

Tanaman ubi jalar yang sudah berumur ±3 minggu setelah tanam biasanya

sudah membentuk ubi dan dapat dipanen pada umur 3-3,5 bulan. Bentuk ubi

yang ideal adalah lonjong agak panjang dengan berat antara 250-1000 g per ubi.

Kulit ubi berwarna putih, kuning, ungu atau ungu kemerah-merahan tergantung

jenis (varietas)nya. Daging ubi berwarna putih, kuning, atau jingga sedikit ungu.

(Rukmana, 1997).

8
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
2.1.4 Kandungan Gizi Ubi Cilembu

Kandungan Gizi ubi jalar Cilembu selengkapnya dapat dilihat pada


Tabel:
Tabel 2.1 Kandungan Gizi Ubi Cilembu/100 gram Bahan

Komponen Jumlah
Energi (kJ) 360 (86 kcal)
Karbohidrat (g) 20,1
Pati(g) 12,7
Gula (g) 4,2
Diet Serat (g) 3,0
Lemak (g) 0,1
Protein (g) 1,6
Vitamin A
A equiv (mg) 709
Vitamin B
2. Beta-Karoten (mg) 8509
1. Thiamine (Vit. B1) (mg) 0,1
2. Riboflavin (Vit. B2) (mg) 0,1
3. Niacin (Vit. B3) (mg) 0,61
4. Asam Pantotenat (B5) (mg) 0,8
5. Vitamin B6 (mg) 0,2
6. Folat (Vit. B9) (mg) 11
Vitamin C (mg) 2,4
Air (g) 68,50
Kalsium (mg) 30,0
Besi (mg) 0,6
Magnesium (mg) 25,0
Fosfor (mg) 47,0
Kalium (mg) 337
Sodium (mg) 55
Seng (mg) 0,3
Sumber : Mayastuti (2002).

9
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Menurut Mayastuti (2002), Ubi jalar Ipomoea batatas (L).Lam) varietas

Cilembu memiliki kandungan vitamin A dalam bentuk β – karoten sebesar

8.509 mg. Suatu jumlah yang cukup tinggi untuk perbaikan gizi bagi mereka

yang kekurangan vitamin A. Padahal, ubi-ubian jenis lain, kandungan

vitamin A-nya 60–7.700 mg per 100 gram. Selain vitamin A yang tinggi,

ubi Cilembu juga mengandung kalsium hingga 30 mg per 100 gram, vitamin

B-1 0,1 mg, vitamin B-2 0,1 mg dan niacin 0,61 mg, serta vitamin C 2,4 mg.

2.1.5 Ciri dan Bentuk Ubi Cilembu

Cilembu ini memiliki beberapa jenis, di antaranya adalah :

a. Jenis Nirkum

Ubi cilembu ini sudah terkenal sejak tahun 1990 an. Tetapi karena kurang

memberikan nilai ekonomis dan proses pembudidayaan rumit membuatnya

sekarang tidak dibudidayakan secara masal seperti dulu. Tapi untuk

mengakalinya petani pun menyilangkan antara jenis nirkum dan jenis lainnya

hingga menghasilkan ubi jenis rancing (Haryati dkk., 2015).

b. Jenis Nirkum ketan / ubi rancing / mene’s

Ubi ini lebih manis, memiliki bentuk panjang dan dagingnya

memiliki warna kemerahan. Biasanya ubi ini sampai di ekspor ke luar negeri

seperti ke negara Malaysia, Singapura, Korea dan Jepang (Haryati dkk., 2015).

c. Jenis Ubi Odos / Jawer

Untuk jenis yang satu ini memiliki karakteristik kulit putih kekuningan saat

mentah, dan memiliki cairan seperti madu lebih sedikit daripada jenis

nirkum (Haryati dkk., 2015).

10
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
d. Jenis ubi inul

Ubi inul bentuknya lebih bulat seperti kentang, memiliki warna

kuning tapi agak pudar dan memiliki rasa kurang manis bahkan hampir

tidak manis (Haryati dkk., 2015).

2.1.6 Pati Ubi Cilembu

Pati merupakan suatu karbohidrat yang tersusun atas atom-atom karbon,

hidrogen dan oksigen (C6H10O5)n. Pati merupakan polimer kondensasi dari suatu

glukosa yang tersusun dari unit-unit anhidroglukosa. Unit-unit glukosa terikat satu

dengan lainnya melalui C1 Oksigen yang dikenal sebagai ikatan glikosida

(Swinkels, 1985).

Pati merupakan campuran dari amilosa dan amilopektin yang tersusun di

dalam granula pati. Amilosa merupakan polimer linier yang mengandung 500-

2000 unit glukosa yang 19 19 terikat oleh ikatan α-(1,4) sedangkan amilopektin

selain mengandung ikatan α (1,4) juga mengandung ikatan α-(1,6) sebagai titik

percabangannya (Swinkels, 1985).

2.1.7 Tepung Ubi Cilembu

Tepung merupakan produk yang memiliki kadar air yaitu 11-14%. Paling

umum dilakukan untuk menurunkan kadar air yaitu dengan cara pengeringan,

baik dengan penjemuran langsung atau dengan alat. Pembuatan tepung ubi jalar

dimodifikasi meliputi pembersihan, pengirisan, penghancuran dan pengeringan

sampai kadar air tertentu. Tepung ubi jalar juga memiliki beberapa kelebihan

yaitu sebagai sumber karbohidrat, serat pangan, dan beta karoten (Kadarisman

dan Sulaeman, 1993). Selain itu tepung ubi jalar mempunyai kandungan gula

yang cukup tinggi sehingga dalam pembuatan produk olahan berbahan tepung ubi

jalar dapat mengurangi penggunaan gula sebanyak 20% (Nuraini, 2004).

11
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
2.1.8 Manfaat ubi Cilembu

Ubi Cilembu juga bermanfaat sebagai antioksidan yang kuat untuk

menetralisir keganasan radikal bebas, penyebab penuaan dini dan pencetus aneka

penyakit degeneratif seperti kanker dan penyakit jantung sehingga akan

meningkatkan daya tahan dan kekebalan tubuh terhadap serangan penyakit

degeneratif (Anonim, 2010).

2.2 Pertumbuhan Mikroorganisme

Pertumbuhan mikroorganisme lebih ditunjukkan oleh adanya peningkatan

jumlah mikroorganisme dan bukan peningkatan ukuran sel individu pada dasarnya

ada dua macam tipe pertumbuhan, yaitu pembelahan inti tanpa diikuti pembelahan

sel sehingga dihasilkan peningkatan ukuran sel ( misalnya pada mikroorganisme

xenocytic) dan pembelahan inti yang diikuti pembelahan sel sehingga dihasilkan

peningkatan jumlah sel serta pembesaran ukuran sel diikuti pembelahan

membentuk dua progeni yang kurang lebih berukuran sama (Pratiwi, 2008).

Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme dapat

dibedakan menjadi faktor fisik dan faktor kimia. Faktor fisik meliputi temperatur,

pH, tekanan osmotik, dan cahaya. Faktor kimia meliputi karbon, oksigen,

mikroelemen atau unsur kelumit (trace element), dan faktor-faktor pertumbuhan

organik termasuk nutrisi yang terdapat dalam media pertumbuhan (Pratiwi, 2008).

2.2.1. Pengaruh faktor fisik pada pertumbuhan mikroorganisme

a. Temperatur

Temperatur menentukan aktivitas enzim yang terlibat dalam aktivitas

kimia. Peningkatan temperatur sebesar 10ºC dapat meningkatkan aktivitas enzim

sebesar dua kali lipat. Pada temperatur yang sangat tinggi dapat menyebabkan

12
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
denaturasi protein yang tidak dapat balik (irreversible) sedangkan pada

temperatur yang sangat rendah aktivitas enzim akan berhenti.Pada temperatur

pertumbuhan optimal akan terjadi kecepatan pertumbuhan optimal dan dihasilkan

jumlah sel yang maksimal.

b. pH

pH merupakan indikasi konsentrasi ion hidrogen. Peningkatan dan

penurunan konsentrasi ion hidrogen dapat menyebabkan ionisasi gugus-gugus

dalam protein, amino dan karboksilat. Hal ini dapat menyebabkan denaturasi

protein yang mengganggu pertumbuhan sel. Kebanyakan bakteri memiliki pH

optimum terletak antara 6,5 dan 7,5.

c. Tekanan osmosis

Tekanan osmosis merupakan tekanan yang dihasilkan akibat adanya

proses osmosis. Osmosis merupakan perpindahan air melewati membran

semipermeabel karena ketidakseimbangan material terlarut dalam media. Dalam

larutan hipotonik air akan masuk ke dalam sel mikroorganisme, sedangkan dalam

larutan hipertonik air akan ke luar dari dalam sel mikroorganisme sehingga

membran plasma mengerut dan lepas dari dinding sel (plasmolisis), serta

menyebabkan sel secara metabolik tidak aktif (Pratiwi, 2008).

2.2.2. Pengaruh faktor kimia pada pertumbuhan

a. Nutrisi

Nutrisi merupakan substansi yang diperlukan untuk biosintesis dan

pembentukan energi. Berdasarkan kebutuhannya, nutrisi dibedakan menjadi dua

yaitu makroelemen, yaitu elemen yang diperlukan dalam jumlah banyak dan

mikroelemen yaitu elemen nutrisi yang diperlukan dalam jumlah sedikit.

Makroelemen meliputi karbon (C), oksigen (O), magnesium (Mg), kalsium (Ca),

13
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
besi (Fe), sulfur (S), fosfor (P), Nitrogen (N), kalium (K), hidrogen (H).

Mikroelemen meliputi mangan (Mn), zinc (Zn) dan tembaga (Cu) (Pratiwi,2008).

b. Media kultur

Bahan nutrisi yang digunakan untuk pertumbuhan mikroorganisme di

laboratorium disebut media kultur.

c. Oksigen

Klasifikasi mikroorganisme berdasarkan kebutuhan oksigen dibagi

menjadi 4 golongan,yaitu:

1. Aerob mutlak, oksigen sebagai syarat utama metabolisme

2. Anaerob mutlak, tidak mentoleransi adanya oksigen atau akan mati bila ada

oksigen

3. Anaerob fakultatif, mampu tumbuh baik dalam suasana dengan atau tanpa

oksigen.

4. Mikroaerofilik, hanya tumbuh baik pada konsentrasi oksigen yang rendah yaitu

kurang dari 20%, pada konsentrasi oksigen yang tinggi menyebabkan toksik

( Pratiwi, 2008).

Ada empat macam fase pertumbuhan mikrpoorganisme, yaitu fase lag,

fase log (fase eksponensial), fase stationer, dan fase kematian.

a. Fase lag

Fase lag merupakan fase adaptasi, yaitu fase penyesuaian mikroorganisme

pada suatu lingkungan baru. Ciri fase lag adalah tidak adanya peningkatan jumlah

sel, yang ada hanyalah peningkatan ukuran sel. Lama fase lag tergantung pada

kondisi dan jumlah awal mikroorganisme dan media pertumbuhan. Bila sel-sel

mikroorganisme diambil dari kultur yang sama sekali berlainan, maka yang sering

14
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
terjadi adalah mikroorganisme tersebut tidak mampu tumbuh dalam kultur

(Pratiwi, 2008).

Fase pertumbuhan mikroorganisme dapat dilihat pada Gambar 2.2

Gambar 2.2 Fase pertumbuhan mikroorganisme

b. Fase log (fase eksponensial)

fase log (fase eksponensial) merupakan fase dimana mikroorganisme

tumbuh dan membelah pada kecepatan maksimum, tergantung pada genetika

mikroorganisme, sifat media, dan kondisi pertumbuhan. Sel baru terbentuk

dengan laju konstan dan massa yang bertambah secara eksponensial. Hal yang

dapat menghambat laju pertumbuhan adalah bila satu atau lebih nutrisi dalam

kultur habis, sehingga hasil metabolisme yang bersifat racun akan tertimbun dan

menghambat pertumbuhan (Pratiwi, 2008).

c. Fase stationer

Pada fase stationer, pertumbuhan mikroorganisme berhenti dan terjadi

keseimbangan antara jumlah sel yang membelah dengan jumlah sel yang mati

(Pratiwi, 2008). Kekurangan nutrisi, akumulasi produk sisa, dan perubahan pH

yang bersifat toksik bagi sel dianggap menjadi penyebab berhentinya

pertumbuhan eksponensial sel (Radji, 2010).

15
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
d. Fase kematian

Pada fase kematian, jumlah sel yang mati meningkat, faktor penyebabnya

adalah ketidaktersediaan nutrisi dan akumulasi produk buangan yang toksik(

Pratiwi, 2008).

2.3 Media Pertumbuhan Bakteri

Media merupakan nutrien yang dibutuhkan oleh mikroorganisme untuk

pertumbuhan secara in vitro. Pemilihan media yang akan digunakan disesuaikan

sifat penelitian atau pemeriksaan. Fungsi dari suatu media yaitu secara kualitatif

digunakan untuk isolasi dan identifikasi mikroorganisme, sedangkan secara

kuantitatif digunakan untuk perbanyakan dan perhitungan jumlah mikroorganisme

(Harti, 2014).

Media perbenihan adalah media nutrisi yang disiapkan untuk

menumbuhkan bakteri didalam skala laboratorium. Media perbenihan harus dapat

menyediakan energi yang dibutuhkan untuk pertumbuhan bakteri. Media harus

mengandung sumber karbon, nitrogen, sulfur, fosfor, dan faktor pertumbuhan

organik (Radji, 2010).

Sejumlah bakteri yang diinokulasikan pada sebuah media perbenihan

disebut inokulum. Bakteri yang tumbuh dan berkembang biak dalam media

perbenihan itu disebut biakan bakteri (Radji, 2010).

Pembiakan bakteri di laboratorium memerlukan media yang berisi zat hara

serta lingkungan pertumbuhan yag sesuai bagi bakteri. Zat hara diperlukan untuk

pertumbuhan, sintesis sel, keperluan energi dalam metabolisme dan pergerakan.

Lazimnya, media biakan mengandung air, sumber energi , zat hara sebagai

sumber karbon, nitrogen, sulfur, fosfat, oksigen dan hidrogen, kedalam bahan

16
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
dasar media dapat pula ditammbahkan faktor pertumbuhan berupa asam amino

dan vitamin. Media biakan dapat dikelompokkan dalam beberapa kategori, yaitu :

I. Berdasarkan asalnya , dapat dibagi atas beberapa media yaitu :

a. Media chemically defined yaitu media yang kandungan dan isi bahan yang

ditambahkan diketahui secara terperinci, contohnya : glukosa, kalium fosfat,

magnesium fosfat.

b. Media kompleksyaitu media yang kandungan dan isinya tidak diketahui

secara terperinci yaiutu media yang kandungan dan isinya tidak diketahui

secar terperinci dan menggunakan bahan yang terdapat di alam, contohnya :

ekstrak daging , pepton, Nutrient Agar (Lay, 1996).

II. Berdasarkan kegunaannya , dapat dibedakan menjadi beberapa media yaitu

sebagai berikut :

a. Media umum

Media yang paling sering digunakan dalam penelitian mikrobiologi.

contohnya : Nutrient Agar merupakan media yang kaya dan subur.

b. Media selektif

Media selektif adalah media biakan yang mengandung paling sedikit satu

bahan yang dapat menghambat perkembangbiakan mikroorganisme yang

tidak diinginkan dan membolehkan perkembangbiakan mikroorganisme

tertentu yang ingin diisolasi, contohnya : MCA, PDA, Saboaraut Agar (SA).

c. Media diferensial

Media ini digunakan untuk menyeleksi suatu organisme dari berbagai jenis

dalam suatu lempengan agar, contohnya : EMB, SSA.

d. Media Diperkaya

Media ini digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme yang diperoleh

17
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
dari lingkungan alami karena jumlah mikroorganisme yang ada terdapat

dalam jumlah sedikit, beberapa zat organik yang mengandung zat karbon dan

nitrogen (Irianto, 2006).

III. Berdasarkan konsistensinya, dibagi atas : (Irianto, 2006)

a. Media padat / solid

b. Media semi solid

c. Media cair

Persyaratan yang harus dipenuhi dalam penyiapan medium supaya

mikroorganisme dapat tumbuh baik adalah:

1. Mengandung semua nutrisi yang mudah digunakan oleh mikroba

2. Mempunyai tekanan osmose, tegangan permukaan, dan pH yang sesuai

3. Tidak mengandung zat-zat penghambat

4. Steril( Rakhmawati, 2012).

2.4 Media Nutrient Agar

NA (Nutrient Agar) merupakan suatu medium yang berbentuk padat, NA

(Nutrient Agar) dibuat dari campuran ekstrak daging dan peptone dengan

menggunakan agar sebagai pemadat, dalam hal ini media yang di gunakan di

produksi oleh Oxoid.ltd., Basingstoke, Hampshire, England, dengan merek

OXOID. kode CM0003. Komposisi NA Kode CM0003 adalah pepton 5.0,

sodium chlorida 5.0, agar 15.0, lab-lemco’ powder 1.0, yeast extract 2.0 (tertulis

dalam kemasan) (Rossita dkk., 2015).

Media NA (Nutrient Agar) berdasarkan bahan yang digunakan termasuk

dalam kelompok media semi alami, media semi alami merupakan media yang

terdiri dari bahan alami yang ditambahkan dengan senyawa kimia. Berdasarkan

18
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
kegunaanya media NA (Nutrient Agar) termasuk kedalam jenis media umum,

karena media ini merupakan media yang paling umum digunakan untuk

pertumbuhan sebagian besar bakteri. Bedasarkan bentuknya media ini berbentuk

padat, karena mengandung agar sebagai bahan pemadatnya. Media padat biasanya

digunakan untuk mengamati penampilan atau morfologi koloni bakteri

(Munandar, 2016).

2.5 Metode inokulasi biakan bakteri

Penanaman bakteri (inokulasi) adalah pekerjaan memindahkan bakteri dari

medium yang lama ke medium yang baru dengan tingkat kesterilan yang sangat

tinggi. Untuk melakukan inokulasi terlebih dahulu semua alat harus steril , hal ini

untuk menghindari terjadinya kontaminasi (Saputro, 2017).

Ada beberapa tahap yang harus dilakukan sebelum melakukan teknik

inokulasi yaitu :

1. Siapkan ruangan tempat penanaman bakterti, kondisi harus bersih dan steril.

Inokulasi dapat dilakukan dalam kotak kaca (encast) udara yang lewat dalam

kotak tersebut di lewatkan saringan melalui suaru agar terkena sinar

ultraviolet.

2. Pemindahan dengan pipet. Cara ini di lakukan dalam pengujian air minum

dengan cara di ambil 1 ml sampel dan diencerkan dengan air sebanyak 99 ml.

3. Pemindahan dengan kawat inokulas. Ujungnya boleh lurus juga boleh berupa

kolongan yang diameternya 1-3mm. Kawat inokulasi terlebih dahulu di

pijarkan sedangkan sisanya tungkai cukup di lewatkan nyala api saja setelah

dingin kembali kawat tersebut di sentuhkan lagi dengan nyala api (Saputro,

2017).

19
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
2.5.1 Cara Pengembangbiakan Bakteri

Menurut (Saputro, 2017) membiakkan bakteri dapat dilakukan dengan

berbagai cara, salah satunya mengembangbiakkan dalam media cawan petri.

Pengembangbiakan dalam cawan ini ada beberapa metode , yaitu :

a. Cara gores (Streak plate)

Ose yang telah steril dicelupkan ke dalam suspensi mikroorganisme yang

diencerkan, lalu digoreskan ose tersebut pada cawan yang berisi media steril,

goresan dapat dilakukan pada 3-4 bagian membentuk garis horizontal di sisi

cawan. Pada metode ini, goresan di sisi pertama diharapkan koloni tumbuh padat

dan berhimpitan, pada goresan sisi kedua, koloni mulai tampak jarang dan begitu

selanjutnya , sehingga di dapat koloni yang tumbuh terpisah dengan koloni lain.

b. Cara sebar (Spread plate)

Pada metode sebar, 0,1 ml suspensi bakteri yang telah diencerkan disebar

pada media steril yang telah didiapkan. Selanjutnya suspensi dalam cawan

diratakan dengan batang hockey stik L-shaped rod agar koloni tumbuh merata

pada media dalam dalam cawan. Kemudian diletakkan dalam inkubator (37ºC)

selama 1-2 hari. Batang hockey stik L-shaped rod harus benar-benar steril , yaitu

dengan mencelupkan terlebih dahulu dalam alkohol kemudian dipanaskan dengan

bunsen. Batang hockey stik L-shaped rod yang masih panas akibat pemanasan

dengan api bunsen dapat merusak media agar sehingga harus di dinginkan terlebih

dahulu dengan meletakkannya di sekitar api bunsen (± 15 cm)

c. Cara tuang (Pour plate)

Metode tuang sangat mudah dilakukan tanpa membutuhkan ketrampilan

khusus. Metode ini dilakukan dengan pengenceran isolat. Pengenceran dapat

dilakukan beberapa kali agar biakan yang didapat tidak terlalu padat. Satu ml

20
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
suspensi bakteri di tuangkan kedalam cawan petri steril dan dituangkan media

stetil hangat (40-50oC) kemudian ditutup rapat dan diletakkan dalam inkubator

(37ºC) selama 1-2 hari. Penuangan dilakukan secara aseptik atau dalam keadaan

steril agar tidak terjadi kontaminasi atau masuknya organisme yang tidak

diinginkan. Media yang dituang hendaknya tidak terlalu panas karena dapat

mengganggu proses penuangan dan mengeluarka uap yang akanmenempel pada

cawan penutup, sehingga menggangu proses pengamatan. Pada metode ini, koloni

akan tumbuh di dalam media agar. Kultur diletakkan terbalik kemudian di

letakkan dalam inkubator.

d. Cara Tusuk (Stab)

Metode tusuk di lakukan pada media agar tegak. Mikroba yang

ditumbuhkan pada metode tusuk umumnya adalah mikroba anaerob karena koloni

mikroba yang tumbuh di dalam media agar sehingga tidak memungkinkan

adanya oksigen yang cukup bagi mikroba. Metode tusuk dilakukan dengan cara

menusukkan ose jarum yang telah diberi inokulum ke dalam media agar

tegak dengan tidak menyetuhkan ose pada dinding tabung reaksi

2.5.2 Inkubasi Bakteri

Inkubasi merupakan suatu teknik perlakuan bagi mikroorganisme yang

telah di inokulasikan pada media (padat atau cair), kemudian di simpan pada suhu

tertentu untuk dapat melihat pertumbuhannya. Penanaman bakteri dengan media

agar akan dilakukan dengan inkubasi. Bila suhu inkubasi tidak sesuai dengan yang

diperlukan, biasanya mikroorganisme tidak dapat tumbuh dengan baik. Inkubasi

di golongkan menjadi 2 jenis, yaitu :

a. Inkubasi pada lemari biasa atau suhu kamar.

b. Inkubasi pada inkubator yang suhunya dapat ditentukan (Saputro, 2017).

21
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
2.6 Uraian Bakteri

2.6.1 Bakteri Escherichia coli

a. Klasifikasi

Kingdom : Bacteria

Divisio : Gracilicutes

Class : Scotobacteria

Ordo : Eubacteriales

Family : Enterobacteriaceae

Genus : Escherichia

Spesies : Escherichia coli

b. Morfologi
Bakteri Escherichia coli merupakan bakteri Gram negatif berbentuk

batang pendek yang memiliki panjang sekitar 2 μm, diameter 0,7 μm, lebar 0,4-

0,7μm dan bersifat anaerob fakultatif. Escherichia coli membentuk koloni yang

bundar, cembung, dan halus dengan tepi yang nyata (Jawetz et al., 2012).

2.6.2 Bakteri Salmonella thypi (Garrity 2004)

a. Klasifikasi

Kingdom : Bacteria

Phylum : Proteobacteria

Class : Gammaproteobacteria

Ordo : Enterobacteriales

Familia : Enterobacteriacea

Genus : Salmonella

Spesies : Salmonella thypi

22
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
b. Morfologi

Bakteri Salmonella typhi adalah bakteri Gram negatif berbentuk batang

lurus dengan ukuran 0,7-1,5 µ m, biasanya tunggal dan kadang-kadang

membentuk rantai pendek, jenis yang bergerak berflagela peritrik, hidup secara

aerobik fakultatif, meragikan glukosa dengan menghasilkan asam kadang-

kadang gas. Tumbuh optimal pada suhu 37oC dan berkembang baik pada

suhu kamar, bakteri ini dapat ditemukan di saluran pencernaan manusia

dan hewan. Bakteri ini merupakan penyebab demam tifoid (Pelczar 1958).

2.6.3 Bakteri Lactobacillus acidophilus

a. Klasifikasi

Kingdom : Bacteria

Divisi : Firmicutes

Kelas : Bacilli

Ordo : Lactobacillales

Famili : Lactobacillaceae

Genus : Lactobacillus

Spesies : Lactobacillus acidophilus (Ahumada et al, 2003).

b. Morfologi

Bakteri Lactobacillus acidophilus adalah salah satu dari delapan

genera umum dari bakteri asam laktat , secara umum merupakan bakteri Gram

positif dengan sel berbentuk batang panjang tetapi terkadang hampir bulat dan

membentuk rantai yang pendek, berukuran 0,5-1,2 x 1,0-10,0 μm bersifat non

motil, dan non spora yang memproduksi asam laktat sebagai produk utama

dari metabolisme fermentasi dan menggunakan laktosa sebagai sumber karbon

utama dalam memproduksi energi (Buttris, 1997).

23
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Jenis Penelitian

Jenis Penelitian yang dilakukan adalah penelitian eksperimental desain

dengan variabel terikat menggunakan berbagai macam formula serta variabel

bebas adalah pati ubi jalar cilembu dan agar. Tahapan-tahapan penelitian meliputi

pengumpulan sampel, identifikasi sampel, pengolahan sampel dan karakterisasi

pati dan pembuatan media.

3.2 Alat-alat

Alat-alat yang digunakan adalah alat inkubator, alat-alat gelas, aluminium

foil (Total Wrap), autoklaf (Wisd Laboratory Analyrical), batang pengaduk,

benang wol, blender , bluetip, bunsen, cawan petri, deck glass, gunting ,

inkubator, hot plate stirrer (Thermo Scientific Cimarec), kain kasa,kain saringan,

kapas, kertas label, kertas perkamen, kurs porselen, lemari pendingin, loyang,

mikro pipet, mikroskop, mortir dan stamper, neraca analitik (Boeco Germany),

objek glas, ose, oven (Dynamica), parutan, penjepit tabung, pipet tetes,pisau,

saringan, spatula, tanur (Stuart).

3.3 Bahan

Bahan-bahan yang digunakan adalah umbi ubi jalar cilembu (ipomoeae

batatas (L.) Lam), akuades, agar, biakan bakteri Escherichia coli, Lactobacillus

acidophilus dan Salmonella typhi,, larutan iodum 0,005 M, etanol 70%, etanol

80%, Nacl, media nutrient agar .

24
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
3.4 Penyiapan Sampel

Penyiapan Sampel meliputi pengambilan sampel, identifikasi sampel dan

pengolahan sampel.

3.4.1 Pengambilan Sampel

Pengambilan tumbuhan dilakukan secara purposive, artinya tanpa

membandingkan sampel yang diambil dengan sampel yang sama dari daerah lain.

Sampel yang digunakan adalah umbi ubi jalar cilembu yang di pasarkan pada

supermarket semarco medan provinsi sumatera utara.

3.4.2 Identifikasi Sampel

Identifikasi sampel (Ubi Jalar cilembu) dilakukan di Herbarium

Medanense (MEDA) Fakultas FMIPA Universitas Sumatera Utara.

3.4.3 Pengolahan Sampel

3.4.3.1 Pengolahan Pati Ubi Jalar Cilembu

Sampel diolah dengan cara pembuatan pati ubi jalar cilembu yaitu

sebanyak 5 kg daging umbi ubi jalar dipisahkan dari kulitnya dengan cara

pengupasan.Selama pengupasan dilakukan sortasi bahan baku dengan pemilihan

ubi jalar yang bagus. Daging ubi jalar kemudian ditimbang. Daging ubi jalar

dicuci sampai bersih didalam bak yang berisi air untuk memisahkan kotoran yang

menempel pada ubi jalar. Daging ubi jalar diparut secara manual (parutan biasa)

sampai halus. Ubi yang sudah diparut ditimbang kembali, kemudian ditambahkan

air sehingga terbentuk bubur dan diremas-remas agar pati lebih banyak yang

terlepas dari sel umbi. Bubur umbi kemudian disaring dengan kain saring

sehingga pati lolos dari saringan sebagai suspensi pati, dan serat tertinggal pada

saringan. Suspensi pati yang di peroleh di endapkan di dalam wadah pengendapan

selama 12 jam. Pati akan mengendap sebagai pasta. Cairan diatas endapan

25
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
dialirkan dan ditampung didalam wadah yang lain, dan pasta dikeringkan dengan

alat pengering (Oven) sampai kadar air dibawah 14%. Pati ubi jalar yang telah

kering atau pati kasar kemudian diayak sampai (sekurang-kurangnya 80 mesh)

sampai halus (Mustafa, 2015).

3.4.3.2 Pengolahan Tepung Ubi Jalar Cilembu

Pengolahan tepung ubi yaitu sebanyak 5kg ubi jalar di cuci untuk

menghilangkan sisa kotoran yang menempel pada pada ubi jalar cilembu.

Selanjutnya di lakukan perajangan ubi jalar cilembu untuk mempermudah dan

mempercepat pada proses pengeringan untuk mendapatkan tepung ubi cilembu,

dilakukan dengan cara manual dengan menggunakan pisau. Setelah ubi Cilembu

berbentuk irisan dilakukan pengeringan. Pengeringan dilakukan untuk

menghilangkan kadar air yang terdapat dalam ubi jalar cilembu dengan

menggunakan oven selama 12 jam dan suhu 60°C. Setelah kepingan kering

kemudian dilakukan proses penghancuran, proses penghancuran dilakukan

untuk menghancurkan ubi menggunakan blender yang sebelumnya berbentuk

kepingan sehingga dihasilkan bentuk tepung yang diharapkan. Tepung ubi jalar

yang telah dihancurkan kemudian diayak untuk mendapatkan tepung yang halus

Proses pengayakan dilakukan dengan menggunakan ayakan dengan

ukuran mesh 80 (Saleha, 2016).

3.5 Pembuatan Larutan Pereaksi dan Media

3.5.1 Pembuatan Larutan Pereaksi

3.5.1.1 Larutan Iodum 0,005 M

Iodium kristal sebanyak 14 gram dilarutkan dalam larutan 36 gram kalium

iodida pekat dalam 1000 mL air suling (Ditjen, POM., 1979).

26
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
3.5.1.2 Larutan Etanol 70% v/v

Sebanyak 72,9 mL etanol 96% dilarutkan dalam air suling hingga 100 mL

(Ditjen, POM., 1979).

3.5.1. 3 Larutan Pereaksi CuSO4 1% (b/v)

Sebanyak 1 g CuS04 dilarutkan dalam akuades secukupnya dan diencerkan

hingga 100 Ml (Ditjen, POM., 1995).

3.5.1.4 Larutan Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N

Sebanyak 8 g kristal Natrium Hidroksida dilarutkan dalam akuades

sebanyak 100 mL (Ditjen, POM., 1995).

3.5.1.5 Larutan Pereaksi Asam Klorida 2N

Sebanyak 17 mL larutan asam klorida P diencerkan dengan akuades

hingga 100 mL (Ditjen, POM., 1995).

3.5.2 Pembuatan Media

3.5.2.1 Media Nutrient Agar

Adapun komposisi media Nutrient Agar (NA) adalah sebagai berikut :

Komposisi : Lemco beef extract 1 g

Yeast extract 2 g

Peptone 5 g

NaCl 5 g

Agar 15 g

Cara pembuatan:

Sebanyak 28 g nutrient agar ditimbang, disuspensikan kedalam air suling

sebanyak 1000 mL, lalu dipanaskan sampai bahan larut sempurna lalu disterilkan

di dalam autoklaf pada suhu 121ºC selama 15 menit (Oxoid, 1982).

27
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
3.5.2.2 Pembuatan media agar miring

5 ml media NA dimasukkan ke dalam tabung reaksi.Tabung kemudian

diletakkan dengan kemiringan 30-45º dan dibiarkan pada suhu kamar hingga

media memadat. Media disimpan dalam lemari pendingin (Lay, 1994).

3.5.2.3 Pembuatan stok kultur bakteri

Sebanyak satu ose dari masing-masing biakan murni bakteri Lactobacillus

acidophilus,Salmonella thypii, dan Escherichia coli diinokulasi pada permukaan

agar miring, diinkubasi pada suhu 37ºC selama 18-24 jam (Ditjen POM, 1995).

3.5.2.4 Pembuatan suspensi bakteri uji

Koloni bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella thypii, dan

Escherichia coli diambil dari agar miring nutrient agar menggunakan jarum ose,

lalu disuspensikan ke dalam pelarut nacl 0,9% sebanyak 10 ml dan kocok

homogenkan dalam tabung reaksi. Kekeruhan suspensi mikroba uji diukur dengan

alat spektrofotometer UV-Vis dengan panjang gelombang 580nm dan transmitan

25% (Depkes RI, 1995).

3.5.2.5. Pengenceran Suispensi Bakteri

Dilakukan pengenceran suspense bakterti 106 sebanyak 4 kali yaitu 105,

104, 103, 102 dengan menggunakan NaCl dimana masing-masing NaCl

dimasukkan 9 ml kedalam tabung reaksi dan ditambahkan 1 ml ke masing-masing

pengenceran secara berurutan.

3.6 Pemeriksaan Karakteristik Pati

3.6.1 Pemeriksaan Makroskopik

Pemeriksaan makroskopik terhadap pati ubi cilembu dilakukan dengan

mengamati tekstur, rasa, warna ,dan baunya.

28
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
3.6.2 Pemeriksaan Mikroskopik

Pemeriksaan makroskopik terhadap pati dan tepung ubi jalar cilembu

dilakukan dengan cara pati dan tepung secukupnya diambil dan diletakkan diatas

objek glass kemudian ditetesi dengan satu tetes akuades dan ditutup dengan kaca

penutup dan diamati dibawah mikroskop kemudian dilihat bentuk amilum dan

lamella.

3.6.3 Pemeriksaan Kelarutan

a. Kelarutan dalam air dingin

Ke dalam tabung reaksi masing-masing dimasukkan pati sebanyak 0,1g

kemudian ditambahkan 1 mL air dingin kemudian diaduk dan diamati

kelarutannya.

b. Kelarutan dalam air

Ke dalam tabung reaksi masing-masing dimasukkan pati sebanyakn 0,1g

kemudian di suspensikan 1 mL air panas kemudian diaduk dan diamati

kelarutannya

c. Kelarutan dalam Aqua DM

Ke dalam tabung reaksi masing-masing dimasukkan pati sebanyak 0,1g

kemudian di suspensikan 1 mL Aqua DM kemudian diaduk dan diamati

kelarutannya

d. Kelarutan dalam etanol

Ke dalam tabung reaksi masing-masing dimasukkan pati sebanyakn 0,1g

kemudian di suspensikan 1 mL etanol kemudian diaduk dan diamati kelarutannya.

3.6.4 Penetapan Susut Pengeringan

Cawan porselen ditimbang dikeringkan selama 30 menit pada suhu 100°C

sampai 105° C selama 2 jam dan ditimbang bobotnya, ditimbang sebanyak 5 gram

29
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
masing-masing pati dan tepung dimasukkan dalam cawan porselen dan ditimbang

beratnya. Masukkan kedalam oven dipanaskan sampel pada suhu 100° sampai

105° selama 2 jam. Pada waktu oven dibuka, cawan porselen didinginkan dalam

desikator, lalu ditimbang. Perlakuan ini dilakukan hingga didapat bobot konstan

(SNI, 1998).

3.6.5 Penetapan Kadar Abu

Krus porselen kosong dipijar di dalam tanur dengan suhu 550°C

Kemudian ditimbang bobotnya, ditimbang 2 g masing-masing pati dan tepung

ubi jalar cilembu dimasukkan ke dalam krus porselen dan dihitung bobotnya.

Kemudian dimasukkan kedalam tanur dengan suhu 550°C sampai membentuk abu

dan didinginkan dalam desikator dan selanjutnya ditimbang bobotnya (Depkes,

RI.,1995).

3.6.6 Uji Karbohidrat

Ditimbang masing-masing pati dan tepung sebanyak 0,05gram , kemudian

ditambahkan 1 tetes larutan iodium (lugol) diatas objek glass. Diamati perubahan

warnanya yaitu biru kehitaman.

3.6.7 Uji Protein

Tepung dan Ubi jalar cilembu diletakkan pada plat tetes, disuspensikan

dengan akuades 1 ml, ditambahkan 3 tetes larutan NaOH, lalu ditambahkan 3 tetes

larutan CuSO4 terbentuk warna ungu menunjukkan reaksi terhadap protein (Ditjen

POM, 1995).

3.6.8 Pemeriksaan pH

Sebanyak 1 tetes suspensi pati atau tepung diteteskan diatas kertas

indikator pH, kemudian dilihat dan diamati perubahan warna serta pHnya.

30
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
3.7 Formula yang direncanakan

3.7.1 Media pengganti Nutrient Agar

Media yang direncanakan sebagai pengganti media NA (Nutrient Agar)

terdiri dari Formula 1, Formula 2 dan Formula 3, dapat dilihat pada tabel sebagai

berikut :

Bahan Formula media


Formula I Formula II Formula III
(5%) (7,5%) (10%)
Pati / tepung 5 gram 7,5 gram 10 gram
Susu UHT 8 ml 8 ml 8 ml
NaCl 5 gram 5 gram 5 gram
Agar 10 gram 7,5 gram 5 gram
Air suling 1000 ml 1000 ml 1000 ml

Cara Pembuatan :

Sebanyak 28 g media Formula I ditimbang, dilarutkan kedalam air suling

sebanyak 1000 mL, lalu dipanaskan sampai bahan larut sempurna lalu disterilkan

di dalam autoklaf pada suhu 121ºC selama 15 menit, dilakukan dengan cara yang

sama untuk formula II dan Formula III (Oxoid, 2016).

3.8 Cara Pengujian

Pengujian media pati dan tepung ubi jalar cilembu yaitu dengan metode

inokulasi terhadap bakteri uji dengan cara :

a. Cara gores

Metode ini di lakukan untuk bakteri anaerob yaitu dengan cara dituangkan

media sebanyak 10-15 ml kedalam cawan petri yang sudah disterilkan, didiamkan

hingga padat dan dingin. Setelah media padat dan dingin kemudian ambil suspensi

bakteri yang telah diencerkan (106) menggunakan jarum ose yang sudah

dipanaskan diatas api bunsen, kemudian suspensi bakteri (106) digoreskan diatas

31
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
permukaan media secara zig-zag, selanjutnya cawan petri dibungkus dengan

kertas perkamen dan di beri label identitas. Cara ini di lakukan untuk bakteri

aerob.

b. Cara sebar

Metode ini di lakukan untuk bakteri aerob yaitu dengan cara dituangkan

media sebanyak 10-15 ml kedalam cawan petri yang sudah disterilkan, didiamkan

hingga padat dan dingin. kemudian ambil suspensi bakteri yang telah diencerkan

(102) sebanyak 0,1 ml di masukkan kedalam media yang sudah padat dan dingin,

kemudian inokulum disebar dengan menggunakan batang kaca yang bengkok

(stik L) steril. kemudian cawan petri dibungkus dengan kertas perkamen dan di

beri label identitas. Cawan petri di letakkan dengan posisi terbalik pada saat

inkubasi di dalam inkubator.

e. Cara tuang

Metode ini di lakukan untuk bakteri anaerob yaitu dengan cara diambil

sebanyak 0,1ml suspensi bakteri yang telah diencerkan (102) dimasukkan kedalam

cawan petri kosong kemudian tunagkan media cair kedalam cawan petri lalu

homogenkan dengan metode angka 8 hingga bakteri dan media homogen,

kemudian cawan petri dibungkus dengan kertas perkamen dan di beri label

identitas.

Setelah proses inokulasi dilakukan dengan metode diatas selanjutnya di

inkubasikan bakteri kedalam inkubator pada suhu 37ºC selama 24 jam kemudian

diamati pertumbuhan dan jumlah koloni bakteri pada masing-masing cawan petri

(Saputro, 2017).

32
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Identifikasi Sampel

Tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah umbi dari ubi jalar

cilembu yang telah diidentifikasi di Herbarium Medanese (MEDA), Universitas

Sumatera Utara.

4.2 Pengolahan Pati dan Tepung Ubi Jalar Cilembu

Hasil pengolahan pati yaitu digunakan umbi ubi jalar cilembu sebanyak 5

kg kemudian diperoleh pati sebanyak 500 gram dan hasil pengolahan tepung

yaitu digunakan umbi ubi jalar cilembu sebanyak 2 kg dan diperoleh tepung

sebanyak 500 gram.

Hasil pemeriksaan makroskopik yang dilakukan yaitu meliputi masing-

masing pati dan tepung ubi jalar cilembu . Pati ubi jalar cilembu berwarna putih

sedangkan tepung ubi jalar cilembu berwarna kuning kehijauan, berbau khas, dan

mempunyai rasa yang sedikit manis. Hasil mikroskopik dapat dilihat pada

Lampiran 3 halaman 48 serbuk pati ubi jalar cilembu terlihat adanya lamela dan

hilus sedangkan pada tepung ubi jalar cilembu terdapat amilum, lamela dan hilus.

4.3 Pemeriksaan Karakterisasi

Hasil pemeriksaan karakterisasi pati ubi jalar cilembu dan tepung ubi jalar

cilembu yaitu dapat dilihat pada Tabel 4.1 :

No Parameter Uji Kuantitatif


Pati Tepung
1. Susut Pengeringan 13,6% 11,6%
2. Kadar Abu 1,2% 2,3%
3. Rendemen 10% 25%
Tabel 4.1 Hasil Karakterisasi pati dan tepung ubi jalar cilembu secara kuantitatif.

33
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Hasil penetan kadar air ubi jalar cilembu yang diperoleh baik pati maupun

tepung memenuhi syarat yaitu diperoleh kadar air dibawah 14%. Berkurangnya

kandungan air pada pati dan tepung ubi jalar cilembu yaitu melalui proses

pengolahan pati dan tepung terutama proses pengeringan Mustafa, 2015).

Hasil penetapan kadar abu yang diperoleh pati ubi jalar cilembu yaitu 1%

sedangkan tepung ubi jalar cilembu yaitu 2,5%. Menurut Antarlina (1997),

kandungan abu ubi jalar maksimal 2,58 %, sehingga kadar abu pati dan tepung ubi

jalar cilembu memenuhi syarat. Kandungan kadar abu yang rendah diduga

berhubungan dengan proses pengolahan tepung dan pati dimana melalui tahapan

pencucian dengan air. Pencucian tersebut dapat menyebabkan larutnya mineral

ubi jalar dalam air (Noer, 2017).

Hasil pemeriksaan karakterisasi pati dan tepung ubi jalar cilembu secara

kualitatif yaitu dapat dilihat pada Tabel 4.2 :

Tabel 4.2 Hasil Karakterisasi pati dan tepung ubi jalar cilembu secara kualititatif.

No Parameter Uji Kualititatif


Pati Tepung
Positif Positif
1. Uji karbohidrat
(biru kehitaman) (biru kehitaman)
Negatif (Hijau Negatif (Hijau
2. Uji Protein
muda) muda)
Larutan dalam air Larutan dalam
3. Kelarutan
panas air panas

Uji karbohidrat pati dan tepung ubi jalar cilembu menunjukkan hasil yang

positif mengandung karbohidrat dimana pati dan tepung ubi cilembu

menunjukkan warna awal kehijauan kemudian menjadi warna biru kehitaman

setelah penambahan KI.

Uji biuret dilakukan untuk melihat kandungan protein pada ubi jalar

cilembu, dimana apabila sampel ditambahkan preaksi ini akan menghasilkan

34
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
warna ungu, tetapi pada pati dan tepung ubi jalar cilembu menghasilkan warna

kehijauan setelah ditambahkan pereaksi benedict. Hal ini dapat terjadi karena

kandungan protein yang sangat kecil didalam sampel.

Kelarutan pati ubi jalar cilembu dan tepung ubi jalar cilembu tidak larut

didalam air dingin dan etanol tetapi larut didalam air panas (air yang mendidih),

hal ini dikarenakan pati tersusun antara amilosa dan amilopektin, dimana amilosa

bersifat larut dalam air , sedangkan amilopektin tidak larut dalam air. Proses

pemanasan menyebabkan pati kehilangan sebagian amilosa, sehingga terjadi

penurunan kadar pati amilosa mempunyai rantai lurus yang cenderung

membentuk susunan paralel satu salam lain dan saling berikatan melalui ikatan

hidrogen. Ikatan ini dapat terjadi karena molekul amilosa memiliki banyak gugus

hidroksil, dimana gugus ini bersifat polar dan sifat polar ini menyebabkan

amilosa bersifat hidrofilik (Winarno, 2004).

4.4 Pembuatan Media Umbi Ubi Jalar Cilembu

4.4.1 Pembuatan Media dari Pati dan Tepung Umbi Ubi Jalar Cilembu

Pembuatan media menggunakan pati dan tepung umbi ubi jalar cilembu

(Ipomoea batatas (L.) Lam) dari 3 formula dimana konsentrasi yang digunakan

yaitu 5% b/v, 7,5% b/v dan 10% b/v. Metode yang digunakan yaitu metode

tuang, sebar dan gores. Bakteri uji yang digunakan yaitu Lactobacillus

acidophilus, Salmonella typhii dan Escherichia coli dengan waktu inkubasi 24

jam pada suhu 37oC.

Berdasarkan hasil yang didapat pada pembuatan media menggunakan pati

dan tepung umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam) pada formula 1

media lebih cepat memadat dibanding dengan formula 2 dan formula 3 hal ini

35
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
terjadi berdasarkan adanya perbandingan antara tepung dan agar yang berbeda

dari masing-masing formula, dimana perbandingan pada Formula 1 yaitu 1:2,

pada formula 2 1:1 dan formula 3 perbandingan 2:1. Media pati dan tepung ubi

jalar cilembu memerlukan waktu memadat sekitar 15-20 menit.

4.5 Pengujian Media Umbi Ubi Jalar Cilembu terhadap Bakteri

4.5.1 Hasil pengujian Media Pati Umbi Ubi Jalar Cilembu terhadap Bakteri
Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhii dan Escherichia coli

Hasil pengujian media pati umbi ubi jalar cilembu terhadap bakteri

Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhii dan Escherichia coli terlihat pada

Tabel 4.3 dimana sebagai kontrol yang digunakan adalah media NA ( Nutrient

Agar ).

Tabel 4.3 jumlah koloni bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhi dan
Escherichia coli pada media pati ubi jalar cilembu

Biakan Metode Konsentrasi Pati (*) Kontrol


Bakteri Biakan F1 F2 F3 NA
(CFU/ml) (CFU/ml) (CFU/ml)
Lactobacillus Tuang 14 x102 16 x102 ∞ ∞
2 2
acidophilus Sebar ∞ 16 x10 11 x10 ∞
Salmonella Tuang 164 x102 104 x102 215 x102 ∞
2 2 2
typhii Sebar 161 x10 320 x10 174 x10 ∞
2 2
Escherichia Tuang 26 x10 10 x10 ∞ ∞
coli Sebar 68 x102 60 x102 ∞ ∞
Keterangan : (*) : 3 (tiga) kali pengulangan, F : Formula, F1 : 5%, F2 : 7,5%,
F3 : 10%, NA : Nutrient Agar, CFU/ml : Colony Forming Unit,
102 : Pengenceran bakteri, ∞ : Pertumbuhan bakteri tidak dapat
dihitung.

Tabel diatas menunjukkan hasil koloni bakteri pada semua konsentrasi

(5%, 7,5%, dan 10%) media pati ubi jalar cilembu mendekati jumlah koloni media

kontrol NA (Nutrient Agar), tetapi jumlah koloni yang didapat dari setiap bakeri

menunjukkan hasil yang berbeda , hal ini dapat disebabkan suspensi bakteri yang

kurang homogen pada proses homogenisasi sehingga memungkinkan terjadi

36
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
perbedaan jumlah koloni bakteri. Jumlah koloni bakteri yang disimbolkan dengan

(∞) menunjukkan bahwa koloni bakteri sudah menumpuk sehingga sulit untuk

menghitung jumlah koloni pada bakteri.

Pertumbuhan koloni bakteri dapat diamati pada permukaan agar hal ini

karena bakteri yang digunakan pada pengujian yaitu bakteri Lactobacillus

acidophilus, Salmonella typhii dan Escherichia coli bersifat aerob fakultatif

sehingga dapat tumbuh dengan atau tanpa oksigen hal ini berhubungan dengan

metode yang digunakan yaitu metode sebar dan metode tuang, pada metode tuang

digunakan untuk menumbuhkan bakteri yang bersifat aerob (membutuhkan

oksigen) dan metode tuang digunakan untuk menumbuhkan bakteri yang bersifat

anaerob (dapat hidup tanpa adanya oksigen).

4.5.2 Hasil pengujian Media Tepung Umbi Ubi Jalar Cilembu terhadap
Bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhii dan Escherichia
coli
Hasil jumlah koloni bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhi

dan Escherichia coli yang didapat pada media tepung ubi jalar cilembu dapat

dilihat pada Tabel 4.4.

Tabel 4.4 jumlah koloni bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhii dan
Escherichia coli pada media tepung ubi jalar cilembu
Biakan Metode Konsentrasi tepung (*) Kontrol
Bakteri Biakan F1 F2 F3 NA
(CFU/ml) (CFU/ml) (CFU/ml)
Lactobacillus Tuang 5 x102 ∞ ∞ ∞
acidophilus Sebar ∞ ∞ ∞ ∞
Salmonella Tuang 123 x102 177 x102 483 x102 ∞
2 2 2
typhii Sebar 33 x10 5 x10 7 x10 ∞
Escherichia Tuang 88 x102 87 x102 ∞ ∞
2 2
coli sebar 126 x10 164 x10 ∞ ∞
Keterangan : (*) : 3 (tiga) kali pengulangan, F : Formula, F1 : 5%, F2 : 7,5%,
F3 : 10%, NA : Nutrient Agar, CFU/ml : Colony Forming Unit,
102 : Pengenceran bakteri, ∞ : Pertumbuhan bakteri tidak dapat
dihitung.

37
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Tabel diatas menunjukkan hasil koloni bakteri pada semua konsentrasi

(5%, 7,5%, dan 10%) media tepung ubi jalar cilembu mendekati jumlah koloni

media kontrol NA (Nutrient Agar), hal ini dapat disebabkan suspensi bakteri yang

kurang homogen pada proses homogenisasi sehingga memungkinkan terjadi

perbedaan jumlah koloni bakteri. Jumlah koloni bakteri yang disimbolkan dengan

(∞) menunjukkan bahwa koloni bakteri sudah menumpuk sehingga sulit untuk

menghitung jumlah koloni pada bakteri.

Pertumbuhan koloni bakteri dapat diamati pada permukaan agar hal ini

karena bakteri yang digunakan pada pengujian yaitu bakteri Lactobacillus

acidophilus, Salmonella typhii dan Escherichia coli bersifat anaerob fakultatif

sehingga dapat tumbuh dengan atau tanpa oksigen hal ini berhubungan dengan

metode yang digunakan yaitu metode sebar dan metode tuang, pada metode tuang

digunakan untuk menumbuhkan bakteri yang bersifat aerob (membutuhkan

oksigen) dan metode tuang digunakan untuk menumbuhkan bakteri yang bersifat

anaerob (dapat hidup tanpa adanya oksigen).

4.6 Kriteria Pertumbuhan Bakteri pada Media Ubi Jalar Cilembu

4.6.1 Kriteria Pertumbuhan Bakteri pada Media Pati Ubi Jalar Cilembu

Tabel 4. 5 Kriteria pertumbuhan bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella


typhii dan Escherichia coli pada media pati ubi jalar cilembu
Biakan Bakteri Metode Konsentrasi pati Kontrol NA
Biakan (F1) (F2) (F3
Lactobacillus
Gores ++ +++ +++ +++++
acidophilus

Salmonella typhii Gores ++++ ++++ +++ +++++

Escherichia coli Gores ++++ ++++ ++++ +++++

38
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Keterangan : (*) : 3 (tiga) kali pengulangan F : Formula, F1 : 5%, F2 : 7,5%, F3 :
10%, , NA : Nutrient Agar.
Kriteria : + : Sangat Tipis, ++ : Tipis, +++ : Agak Tebal, ++++ : Tebal ,
+++++ : Sangat Tebal.
4.6.2 Kriteria Pertumbuhan Bakteri pada Media Tepung Ubi Jalar Cilembu

Tabel 4. 6 Kriteria pertumbuhan bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella


typhi dan Escherichia coli pada media tepung ubi jalar cilembu
Biakan Bakteri Metode Konsentrasi Tepung Kontrol NA
Biakan 5% 7,5% 10%
(F1) (F2) (F3
Lactobacillus Gores +++ ++++ +++ +++++
acidophilus
Salmonella typhii Gores ++ +++++ +++ +++++

Escherichia coli Gores ++++ +++++ ++++ +++++

Keterangan : (*) : 3 (tiga) kali pengulangan F : Formula, F1 : 5%, F2 : 7,5%,


F3 : 10%, NA : Nutrient Agar.
Kriteria : + : Sangat Tipis, ++ : Tipis, +++ : Agak Tebal, ++++ : Tebal ,
+++++ : Sangat Tebal.

Tabel 4.5 dan Tabel 4.6 menunjukkan kriteria pertumbuhan bakteri.

Pertumbuhan koloni bakteri dapat diamati pada permukaan agar hal ini karena

bakteri yang digunakan pada pengujian yaitu bakteri Lactobacillus acidophilus,

Salmonella typhii dan Escherichia coli bersifat anaerob fakultatif sehingga dapat

tumbuh dengan atau tanpa oksigen hal ini berhubungan dengan metode yang

digunakan yaitu metode gores digunakan untuk menumbuhkan bakteri bersifat

aerob (membutuhkan oksigen).

Hasil penelitian yang dilakukan,bahwa pati dan tepung ubi jalar cilembu

dapat digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri. Media yang terbuat dari

tepung ubi jalar cilembu menghasilkan pertumbuhan bakteri lebih banyak

dibandingkan media yang terbuat dari pati ubi jalar cilembu, hal ini disebabkan

pada pembuatan media tepung ubi jalar cilembu semua bagian dari ubi jalar

cilembu digunakan sedangkan pada media pati ubi cilembu hanya patinya saja

39
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
yang digunakan (air dan ampas ubi dibuang) sehingga pada tepung ubi jalar

cilembu terdapat lebih banyak nutrisi dibandingkan pada pati ubi jalar cilembu.

Bakteri yang digunakan pada penelitian ini yaitu bakteri Lactobacillus

acidophilus, Salmonella typhii dan Escherichia coli. Berdasarkan hasil yang

diperoleh dapat dilihat perbedaan hasil pertumbuhan pada setiap bakteri dimana

pertumbuhan bakteri Salmonella typhii memiliki pertumbuhan yang lebih baik

dibanding bakteri Escherichia coli dan Lactobacillus acidophillus.

Media pati dan tepung ubi jalar cilembu mempunyai pH 7 (netral), hal ini

memenuhi persyaratan media pertumbuhan bakteri yaitu pH 7 (netral) sesuai

dengan pH media kontrol NA (Nutrient Agar) yaitu 7-7,4. Pertumbuhan bakteri

Lactobacillus acidophillus pada media pati dan tepung ubi jalar cilembu kurang

baik pertumbuhannya dibanding dengan bakteri Salmonella typhii dan

Escherichia coli hal ini disebabkan bakteri Lactobacillus acidophillus bersifat

asam dan dapat tumbuh pada pH 4.

40
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan , dapat disimpulkan

bahwa :

a. Umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.) Lam) dapat digunakan sebagai

media pertumbuhan bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhii dan

Escherichia coli.

b. Pertumbuhan bakteri Lactobacillus acidophilus, Salmonella typhii dan

Escherichia coli pada media umbi ubi jalar cilembu (Ipomoea batatas (L.)

Lam) hampir mendekati pertumbuhan pada media kontrol NA (Nutrient Agar).

Formula media yang baik yaitu pada formula 2 dan pertumbuhan koloni yang

banyak terdapat pada formula 3. Pertumbuhan ketiga bakteri tersebut yang

paling baik adalah bakteri Salmonella typhii.

5.2 Saran

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan , disarankan kepada peneliti

selanjutnya untuk:

a. Melakukan pengembangan media pati dan tepung umbi ubi jalar cilembu

dengan penambahan nutrisi seperti mineral.

b. Melanjutkan formula media pati dan tepung umbi ubi jalar cilembu dengan

mikroorganisme yang berbeda seperti jamur.

41
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
DAFTAR PUSTAKA

Ahumada, M.C., Bru, E., Colloca, M.E., Lopez, M.E., dan Macias, M.E.N.
2003. Evaluation and Comparison of Lactobacilli Characteristics in the
Mouths of Patients With or Without Cavities. Journal of Oral
Science. Vol. 45 Halaman 1-9.
Anisah, R.T. 2015. Media Alternatif untuk Pertumbuhan Bakteri
Menggunakan Sumber Karbohidrat yang Berbeda. Surakarta :
Universitas Muhammadiyah Surakarta. Halaman 1-2.
Anonim. 2010. Budidaya Ubi Jalar Cilembu Sebagai Komoditas Unggulan.http:
//tatangkostaman.blogspot.com/2010/09/budidaya-ubi-jalar-cilembu-st
1.html. Diakses 02 September 2010.
Antarlina, S.S., dan Utomo, J.S. 1997. Proses Pembuatan dan Penggunaan
Tepung Ubi Jalar untuk Produk Pangan. Dalama Edisi Khusus Balitkabi
15-1999. Halaman 224.
Arulanantham, R., Pathmanathan, S., Ravimannan, N., dan Niranjan, K. 2012.
Alternative Culture Media for Bacterial Growth Using Different
Formulation of Protein Sources. Journal of Natural Product and Plant
Resourse. Halaman 697-700.
Atlas, R.M., 2004. Handbook of Microbiological Media fourth Edition Volume
1. United States Of America: CRC Press. Halaman 110.
Badan Standarisasi Nasional. 1998. Syarat Mutu Ubi Jalar . SNI 01-4493-1998.
BSN, Jakarta. Halaman 5-7.
Buttris, J., 1997. Nutritional Properties of Fermented Milk Products.
International Journal of Dairy Technology. Vol. 50 . Halaman 21-27.
Cappuccino, J.G., dan Sherman, N. 2013. Manual Laboratorium biologi; alih
bahasa, Nur Miftahurrahmah. Jakarta: EGC. Halaman 250.
Ditjen POM.1979. Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 3126, 412.
Ditjen POM.1995. Farmakope Indonesia. Edisi Keempat. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia.
Dwijoseputro.1987. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta : Penerbit Djambatan.
Halaman 15, 30, 31, 32, 35, 37, 38.
Garrity, G.M.B., dan Lilburn. 2004. Taxonomic Outline of The Procaryotes
Bergey's Manual of Systemic Bacteriologi, 2th Edition. United States of
America: Springer, New York Berlin Hendelberg. Halaman 114.
Harti, A.S., 2014. Mikrobiologi Kesehatan. Yogyakarta: CV. Andi offset.
Halaman 72.
Haryati, B., Nurbaeti, N., dan Nana, S. 2015. Petunjuk Teknis Budidaya Ubi
Cilembu . Jawa Barat : Balai Pengkajian Teknologi Pertanian (BPTP) Jawa
Barat. : 1-7.
Irianto, K. 2006. Mikrobiologi Menguak Dunia Mikroorganisme. Jilid I. Bandung
: CV. Yrama Widya. Halaman 75,85-87.
Jawetz, E., Melnick, J.L., Adelberg, E.A. 2012. Mikrobiologi Kedokteran. Edisi
25. Jakarta: EGC. Halaman 250.
Kadarisman, D., dan A. Sulaeman. 1993. Teknologi Pengolahan Ubi Kayu dan
Ubi Jalar. PAU Pangan dan Gizi, IPB. Bogor. Halaman

42
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lay, B. W. 1994. Analisis Mikroba di Laboratorium. Raja Grafindo Persada.
Jakarta. Halaman 34, 72, 73.
Lay, B.W. 1996. Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta : Penerbit Raja
Grafindo Persada. Halaman 34, 42, 44, 70-72.
Mayastuti, A. 2002. Pengaruh Penyimpanan dan Pemanggangan Terhadap
Kandungan Zat Gizi dan Daya Terima Ubi Jalar (Ipomoea batatas (L).
Lam) Cilembu. Skripsi. Jurusan Gizi Masyarakat dan Sumberdaya
Keluarga. Halaman 20-25.
Munandar, K. 2016. Pengenalan Laboratorium IPA-BIOLOGI Sekolah.
Bandung: Refika Aditama. Halaman 10.
Mustafa, A. 2015. Analisis Proses Pembuatan Pati Ubi Kayu (Tapioka) Berbasis
Neraca Massa. Makassar : Politeknik Pertanian Negeri Pangkep. Halaman
15.
Noer, M.W.S., Wijaya, M., dan Kadirman. 2017. Pemanfaatan Tepung Ubi Jalar
(Ipomoea Batatas L) Berbagai Varietas Sebagai Bahan Baku Pembuatan
Bolu Kukus Cake. Makasar. Pendidikan Teknologi Pertanian UNM : Vol 3
(2017) : S60-S71.
Nuraini. 2004. Pengolahan Tepung Ubi Jalar dan Produk-produknya untuk
Pemberdayaan Masyarakat Pedesaan. Makalah Pribadi Falsafah Sains
(PPS 702). Bogor : Institut Pertanian Bogor. Halaman 9.
Oxoid. 1982. The oxoid mannual of culture media, ingredients and other
laboratory services. Fifth Edition. Published by Oxoid Limited, Wade
Road.Basingtoke.Hampshire. Halaman: 223
Pratiwi, S.T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Penerbit Erlangga. Halaman
18,111,106,188,135.
Pelczar, J.M., dan Chan, E.C.S. 1958. Microbiology, Second Edition, McGraw
Hill Inc., USA. Halaman 230.
Pelczar, J.M., dan Chan, E.C.S. 2008. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta :
Universitas Indonesia. Halaman 245.
Pomeranz, Y. 1991. Functional Properties of Food Components. Academic Press
Inc. San Diego. California.
Radji, M . 2010. Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan
Kedokteran. Jakarta: EGC. Halaman 112-136.
Rakhmawati, A. 2012. Penyiapan Media Organisme. Yogyakarta. Jurusan
Pendidikan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Negeri Yogyakarta. Halaman 2.
Ravimannan, N., Arulanantham, R., Sevvel, P., dan Niranjan, K. 2014.
“Alternative Culture Media For Fungal Growth Using Different
Formulation Of Protein Sources”. Annals of Biological Research.
Halaman 36-39.
Rosita, A.S., Kukuh, M., dan Sawitri, K. 2015. Komparasi Media NA Pabrikan
dengan NA Modifikasi untuk Media Pertumbuhan Bakteri Comparison of
Medium NA Manufacturer With NA Modifications to the Medium of the
Bacteri. Jember : FKIP Universitas Muhammadiyah Jember. Halaman
193.
Rukmana, R. 1997.Ubi Jalar : Budidaya dan Pasca Panen. Yogyakarta :
Penerbit Kanisius. Halaman 130-137.

43
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Rukmana, R. 2005. Ubi Jalar : Budidaya dan Pasca Panen. Cetakan ketujuh.
Yogyakarta: Penerbit Kanisius. Halaman 111.

Saleha, N.M. 2016. Optimasi Formulasi Flakes Berbasis Tepung Ubi Cilembu
Tepung Tapioka Serta Tepung Kacang Hijau Menggunakan Aplikasi
Design Expert Metode Mixture D-Optimal. Skripsi. Bandung: Fakultas
teknik Universitas Pasundan Bandung. Halaman 42.
Saputro, B. 2017. Pengantar Bakteriologi Dasar. Malang: Intimedia. Halaman
18-20.
Swinkels, J.J.M. 1985. Source of Starch, its Chemistry and Physics. dalam:
G.M.A.V. Beynum dan J.A Roels (eds.). Starch Conversion Technology.
Marcel Dekker. Inc. New York. Halaman 240.
Waluyo, L. 2009. Mikrobiologi Lingkungan. Malang : UMM Press. Halaman 1-
9.
Winarno F.G. 2004. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta : Gramedia Pustaka Utama.
Halaman 45-47.

44
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan

45
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 2. Hasil pemeriksaan makroskopis Pati dan Tepung Ubi jalar Cilembu

(A)

(B)

Keterangan : A: Ubi jalar cilembu , B: Simplisia ubi jalar cilembu.

46
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 2. (Lanjutan)

(C)

(C)

(D)

Keterangan : C: Hasil pemeriksaan makroskopis pati ubi jalar cilembu, D : Hasil


pemeriksaan makroskopis tepung ubi jalar cilembu.

47
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 3. Hasil Pemeriksaan Mikroskopis Pati dan Tepung Ubi jalar Cilembu

Serat
Hilus
Jaringan parenkim
(terdapat ruang antar sel
dengan butir amilum di
dalamnya)
Amilum setengah
majemuk
Amilum poliadelph

(A)

Amilum poliadelph

Amilum setengah
majemuk
Amilum topi baja

Hilus

(B)

Keterangan : A : Hasil Pemeriksaan Mikroskopis Pati Ubi jalar Cilembu


perbesaran 10x40. B : Hasil Pemeriksaan Mikroskopis Tepung
Ubi jalar Cilembu perbesaran 10x4.

48
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 4. Hasil Karakteristik ubi jalar cilembu

(A) (B)

(C) (D) (E)

(F) (G)

(H)

Keterangan : A : Hasil uji karbohidrat pada pati, B : Hasil uji karbohidrat pada
tepung , C : Hasil uji karbohidrat pada pati, D : Hasil uji
karbohidrat pada tepung, E : Hasil kadar abu, F : Hasil uji protein
pada pati, G : Hasil uji protein pada tepung, H : Hasil kadar abu

49
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 5. Alat-alat yang digunakan

(A) (B)

(C) (D)

(E)

Keterangan : A : oven, B : inkubator, C: autoklaf , D : LAC, E: Spektrofotometer

50
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 5. (Lanjutan)

(F) (G) (H)

(I) (J)

(K) (L) (M)

Keterangan : F : Mikropipet, G : Timbangan Analitik, H: Spatel, I : Rak Tabung,


J : Spotplate, K : Krus Porselen , L : Spritus, M : Botol semprot.

51
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 5. (Lanjutan)

(N) (O)

(P)

Keterangan: N : Cawan porselen, O : Ayakan mesh 80, N : Alat gelas ( Gelas


ukur, erlenmeyer, beaker glass, pipet tetes, cawan petri, batang
pengaduk, tabung reaksi, stik L)

52
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 6. Bahan yang digunakan

(A) (B) (C)

(D) (D)

Keterangan : A : Media NA (Nutrient Agar), B : Akua DM (Demineralisata),


C: Nacl , D : Susu UHT dan komposisi , E : Agar-agar powder dan
Komposisi.

53
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 7. Bagan alir

1. Pengolahan pati umbi ubi jalar cilembu

5kg Umbi ubi jalar cilembu

dikupas kulit ubi


ditimbang

dicuci daging ubi

Umbi ubi jalar cilembu tanpa kulit

dihaluskan menggunakan parutan


ditambahkan akuades
disaring dengan kain
dibiarkan selama 12 jam

dipisahkan air dan endapan pati

Air Pati

dikeringkan pati menggunakan


oven suhu 60oC
dihaluskan pati menggunakan
blender
diayak pati sampai halus
menggunakan ayakan mesh 80

Serbuk pati ubi jalar cilembu

54
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 7. (Lanjutan)
2. Pengolahan tepung umbi ubi jalar cilembu
2 kg Umbi ubi jalar cilembu

dicuci bersih
ditiriskan dan dipotong ukuran ± 1mm

Simplisia ubi jalar cilembu

dikeringkan menggunakan oven


selama 12 jam dengan suhu 60oC
dihancurkan dengan blender

diayak pati sampai halus


menggunakan ayakan mesh 80

Serbuk tepung ubi jalar cilembu

55
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 7. (Lanjutan)
3. Pembuatan peremajaan biakan bakteri

Nutrient Agar

ditimbang sebanyak 2,8 gram


dilarutkan dalam 100 ml aquades
dipanaskan hingga larut sempurna
dimasukkan kedalam tabung reaksi
sebanyak 5 ml
disterilkan dalam autoklaf pada suhu
121ºC selama 15 menit
dimiringkan tabung dan didiamkan
hingga media memadat

Media Nutrient Agar

diambil sebanyak 1 ose dari masing-


masing biakan murni Lactobacillus
acidophilus, Salmonella typhii
dan Escherichia coli
diinokulasi pada permukaan media
agar miring
diinkubasi dalam inkubator dengan
suhu 37ºC selama 24 jam
Biakan Bakteri Lactobacillus
acidophilus, Salmonella
typhii dan Escherichia coli

56
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 7. (Lanjutan)
4. Pembuatan Suspensi Bakteri

Biakan Bakteri Lactobacillus


acidophilus, Salmonella
typhii dan Escherichia coli

diambil menggunakan jarum ose

disuspensikan ke dalam pelarut


NaCl 0,9% sebanyak 10 ml kemudian
kocok homogen dalam tabung reaksi
menggunakan vortex

didiamkan selama ±3 jam


diukur kekeruhan suspensi mikroba uji
dengan menggunakan alat spektro-
fotometer UV-Vis dengan panjang
gelombang 580 nm dan transmitan
25%
Suspensi Biakan Bakteri
Lactobacillus acidophilus,
Salmonella typhii dan
Escherichia coli

5. Pengenceran Suspensi Bakteri

Suspensi Bakteri 106


dilakukan pengenceran dari suspensi
bakteri 106 sebanyak 4 kali yaitu 105,
104, 103 dan 102 dengan menggunakan
NaCl fisiologis steril

digunakan suspensi bakteri 106 pada


metode gores sedangkan pada metode
sebar dan tuang digunakan suspensi
bakteri 102.
Hasil pengenceran suspensi
bakteri 102

57
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 7. (Lanjutan)
6. Pembuatan Media Pengganti Nutrient Agar

28 gram Media Pengganti Nutrient Agar

ditimbang sesuai formula


(
disuspensikan kedalam air suling
sebanyak 1000 ml
dipanaskan

disterilkan didalam autoklaf


pada susu 121oC selama 15
menit

Media Pengganti Nutrient Agar Steril

7 . Pengujian bakteri dengan metode inokulasi

Metode Gores

dituang media 10-15


ml kedalam cawan
petri
didiamkan media
hingga memadat
diambil 1 ose suspensi
bakteri (Lactobacillus
acidophilus, Salmonella
typhii dan Escherichia coli)

digoresskan diatas
permukaan media
secara zig-zag
dibungkus cawan petri
dengan perkamen
diinkubasi dalam inkubator
dengan suhu 37ºC selama
18-24 jam
Pertumbuhan Bakteri
Lactobacillus acidophilus,
Salmonella typhii dan
Escherichia coli

58
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 7. (Lanjutan)

Metode Sebar

dituang media 10-15 ml


kedalam cawan petri

didiamkan media
hingga memadat

diambil 1ml suspensi bakteri


(Lactobacillus acidophilus,
Salmonella typhii dan Escherichia
coli)
disebar menggunakan stik L

dibungkus cawan petri


dengan perkamen
di inkubasi dalam inkubator
dengan posisi cawan petri
terbalik dengan suhu 37ºC
selama 18-24 jam

Pertumbuhan Bakteri
Lactobacillus acidophilus,
Salmonella typhii dan
Escherichia coli

59
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 7. (Lanjutan)

Metode Tuang

diambil 0,1ml suspensi


bakteri (Lactobacillus
acidophilus, Salmonella
typhii dan Escherichia
coli)

dimasukkan kedalam
petri kosong
dituangkan media 10,15 ml
kedalam cawan petri

dihomogenkan dengan
metode angka 8
dibungkus cawan petri
dengan perkamen
diinkubasi dalam inkubator
dengan suhu 37ºC selama 18-
24 jam

Pertumbuhan Bakteri
Lactobacillus
acidophilus, Salmonella
typhii dan Escherichia
coli

60
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 8. Media Pertumbuhan Bakteri Tepung Ubi Jalar Cilembu

a. Media Pertumbuhan Bakteri Salmonella typhii Menggunakan Umbi Ubi Jalar


Cilembu dengan Metode Gores

(A1) (B1) (C1)

(A2) (B2) (C2)

(A3) (B3) (C3)

Keterangan : A1 : Pati 5% (F1), A2 : Pati 7,5% (F2), A3 : Pati 10% (F3),


B1 : Tepung 5% (F1), B2 : Tepung 7,5% (F2), B3 : Tepung 10%
(F3), C1,C2,C3 : NA (Nutrient Agar).

61
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 8. (Lanjutan)

b. Media Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli Menggunakan Umbi Ubi Jalar


Cilembu dengan Metode Gores

(A1) (B1) (C1)

(C)

(A2) (B2) (C2)

(A3) (B3) (C3)

Keterangan : A1 : Pati 5% (F1), A2 : Pati 7,5% (F2), A3 : Pati 10% (F3),


B1 : Tepung 5% (F1), B2 : Tepung 7,5% (F2), B3 : Tepung 10%
(F3), C1,C2,C3 : NA (Nutrient Agar).

62
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 8. (Lanjutan)

c. Media Pertumbuhan Bakteri Lactobacillus acidophillus Menggunakan Umbi


Ubi Jalar Cilembu dengan Metode Gores

(A1) (B1) (C1)

(A2) (B2) (C2)

(A3) (B3) (C3)

Keterangan : A1 : Pati 5% (F1), A2 : Pati 7,5% (F2), A3 : Pati 10% (F3),


B1 : Tepung 5% (F1), B2 : Tepung 7,5% (F2), B3 : Tepung 10%
(F3), C1,C2,C3 : NA (Nutrient Agar).

63
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 8. (Lanjutan)

d. Media Pertumbuhan Bakteri Salmonella typhii Menggunakan Umbi Ubi Jalar


Cilembu dengan Metode Sebar

(A1) (B1) (C1)

(A2) (B2) (C2)

(A3) (B3) (C3)

Keterangan : A1 : Pati 5% (F1), A2 : Pati 7,5% (F2), A3 : Pati 10% (F3),


B1 : Tepung 5% (F1), B2 : Tepung 7,5% (F2), B3 : Tepung 10%
(F3), C1,C2,C3 : NA (Nutrient Agar).

64
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 8. (Lanjutan)

e. Media Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli Menggunakan Umbi Ubi Jalar


Cilembu dengan Metode Sebar

(A1) (B1) (C1)

(A2) (B2) (C2)

(A3) (B3) (C3)

Keterangan : A1 : Pati 5% (F1), A2 : Pati 7,5% (F2), A3 : Pati 10% (F3),


B1 : Tepung 5% (F1), B2 : Tepung 7,5% (F2), B3 : Tepung 10%
(F3), C1,C2,C3 : NA (Nutrient Agar).

65
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 8. (Lanjutan)

f. Media Pertumbuhan Bakteri Lactobacillus acidophillus Menggunakan Umbi


Ubi Jalar Cilembu dengan Metode Sebar

(A1) (B1) (C1)

(A2) (B2) (C2)

(A3) (B3) (C3)

Keterangan : A1 : Pati 5% (F1), A2 : Pati 7,5% (F2), A3 : Pati 10% (F3),


B1 : Tepung 5% (F1), B2 : Tepung 7,5% (F2), B3 : Tepung 10%
(F3), C1,C2,C3 : NA (Nutrient Agar).

66
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 8. (Lanjutan)

g. Media Pertumbuhan Bakteri Salmonella typhii Menggunakan Umbi Ubi Jalar


Cilembu dengan Metode Tuang

(A1) (B1) (C1)

(A2) (B2) (C2)

(A3) (B3) (C3)

Keterangan : A1 : Pati 5% (F1), A2 : Pati 7,5% (F2), A3 : Pati 10% (F3),


B1 : Tepung 5% (F1), B2 : Tepung 7,5% (F2), B3 : Tepung 10%
(F3), C1,C2,C3 : NA (Nutrient Agar).

67
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 8. (Lanjutan)

h. Media Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli Menggunakan Umbi Ubi Jalar


Cilembu dengan Metode Tuang

(A1) (B1) (C1)

(A2) (B2) (C2)

(A3) (B3) (C3)

Keterangan : A1 : Pati 5% (F1), A2 : Pati 7,5% (F2), A3 : Pati 10% (F3),


B1 : Tepung 5% (F1), B2 : Tepung 7,5% (F2), B3 : Tepung 10%
(F3), C1,C2,C3 : NA (Nutrient Agar).

68
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 8. (Lanjutan)

i. Media Pertumbuhan Bakteri Lactobacillus acidophillus Menggunakan Umbi


Ubi Jalar Cilembu dengan Metode Tuang

(A1) (B1) (C1)

(A2) (B2) (C2)

(A3) (B3) (C3)

Keterangan : A1 : Pati 5% (F1), A2 : Pati 7,5% (F2), A3 : Pati 10% (F3),


B1 : Tepung 5% (F1), B2 : Tepung 7,5% (F2), B3 : Tepung 10%
(F3), C1,C2,C3 : NA (Nutrient Agar).

69
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 9. Perhitungan

1. Rendemen Umbi ubi jalar cilembu

a. Rendemen pati ubi cilembu

= = 10,00%

b. Rendemen tepung ubi cilembu

= = 25,00 %

2. Penetapan Susut Pengeringan pati ubi cilembu

Sampel Berat Cawan Berat Berat Cawan + Berat cawan +


kosong Sampel Sampel pati kering
I 24,38 gram 5 gram 29,43 gram 28,72 gram
II 24,39 gram 5 gram 29,44 gram 28,74 gram
III 24,38 gram 5 gram 29,43 gram 28,78 gram

Kadar air sampel =

Sampel I = = 14,00%

Sampel II = = 13,90 %

Sampel II = = 13,00 %
Rata-rata sampel = 13,63 %

3. Penetapan Susut Pengeringan tepung ubi cilembu

Sampel Berat Cawan Berat Berat Cawan + Berat cawan +


kosong Sampel Sampel pati kering
I 55,35 gram 5 gram 60,35 gram 59,77 gram
II 55,36 gram 5 gram 60,36 gram 59,77 gram
III 55,35 gram 5 gram 60,35 gram 59,75 gram

70
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 9. (Lanjutan)

Kadar air sampel =

Sampel I = = 11,00 %

Sampel II = = 11,80 %

Sampel II = = 12,00 %

Rata-rata sampel = 11,60%


4. Penetapan kadar abu pati ubi cilembu

Sampel Berat krus Berat Berat krus + Berat krus + pati


kosong Sampel Sampel kering
I 38,61 gram 2 gram 38,63 gram 38,63 gram
II 50,28 gram 2 gram 50,30 gram 50,30 gram
III 36,29 gram 2 gram 38,29 gram 36,32 gram

Kadar abu sampel =

Sampel I = = 1,00%

Sampel II = = 1,00%

Sampel III = = 1,50%

Rata-rata sampel = 1,16 %


5. Penetapan kadar abu tepung ubi cilembu

Sampel Berat krus Berat Berat krus + Berat krus + pati


kosong Sampel Sampel kering
I 52,90 gram 2 gram 54,90 gram 52,94 gram
II 52,17 gram 2 gram 54,17 gram 52,22 gram
III 51, 67 gram 2 gram 53, 67 gram 52,08 gram
Kadar abu sampel =

Sampel I = = 2,00 %

Sampel II = = 2,50%

Sampel III = = 2,50%

Rata-rata sampel = 2,30 %

71
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 10. Tabel pengulangan pengujian

1. Tabel pengulangan pengujian pati ubi cilembu dengan metode tuang dan sebar

No Biakan Metode Konsentrasi Pati NA


Bakteri Biakan F1 (5%) F2 (7,5%) F3 (10%)
(CFU/ml) (CFU/ml) (CFU/ml)
2 2
Lactobacillus Tuang 14 x10 16 x10 ∞ ∞
2
acidophilus Sebar ∞ 16 x10 11 x102 ∞
Salmonella Tuang 164 x102 104 x102 215 x102 ∞
1. 2 2
typhii Sebar 161 x10 320 x10 174 x102 ∞
Escherichia Tuang 26 x102 10 x102 ∞ ∞
2 2
coli sebar 68 x10 60 x10 ∞ ∞

No Biakan Metode Konsentrasi Pati NA


Bakteri Biakan F1 (5%) F2 (7,5%) F3 (10%)
(CFU/ml) (CFU/ml) (CFU/ml)
Lactobacillus Tuang 543 x102 74 x102 45 x102 ∞
acidophilus Sebar 2 x102 30 x102 3 x102 ∞
2 2
Salmonella Tuang 24 x10 8 x10 7 x102 ∞
2
typhii Sebar 162 x102 109 x102 10 x102 ∞
2 2
Escherichia Tuang 109 x10 34 x10 16 x102 ∞
coli sebar 78 x102 5 x102 19 x102 ∞

No Biakan Metode Konsentrasi Pati NA


Bakteri Biakan F1 (5%) F2 (7,5%) F3 (10%)
(CFU/ml) (CFU/ml) (CFU/ml)
Lactobacillus Tuang 63 x102 246 x102 22 x102 ∞
acidophilus Sebar 16 x102 23 x102 15 x102 ∞
2 2
Salmonella Tuang 69 x10 169 x10 133 x102 ∞
3
typhii Sebar 11 x102 13 x102 5 x102 ∞
Escherichia Tuang 12 x102 41 x102 20 x102 ∞
2 2
coli sebar 2 x10 3 x10 13 x102 ∞

Keterangan : F : Formula, F1 : 5%, F2 : 7,5%, F3 : 10%, NA : Nutrient Agar,


CFU/ml : Colony Forming Unit, 102 : Pengenceran bakteri, ∞ :
Pertumbuhan bakteri tidak dapat dihitung.

72
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Lampiran 10. (Lanjutan )

2. . Tabel pengulangan pengujian tepung pati ubi cilembu

No Biakan Metode Konsentrasi tepung NA


Bakteri Biakan F1(5%) F2 (7,5%) F3 (10%)
(CFU/ml) (CFU/ml) (CFU/ml)
Lactobacillus Tuang 5 x102 ∞ ∞ ∞
acidophilus Sebar ∞ ∞ ∞ ∞
2 2
Salmonella Tuang 123 x10 177 x10 483

1 typhii x102
2 2
Sebar 33 x10 5 x10 7 x102 ∞
Escherichia Tuang 88 x102 87 x102 ∞ ∞
2
coli sebar 126 x10 164 ∞ ∞

No Biakan Metode Konsentrasi tepung NA


Bakteri Biakan F1(5%) F2 (7,5%) F3 (10%)
(CFU/ml) (CFU/ml) (CFU/ml)
Lactobacillus Tuang 109 x102 ∞ ∞ ∞
acidophilus Sebar 9 x102 ∞ ∞ ∞
2
Salmonella Tuang 77 x10 ∞ 5 x102 ∞
2
typhii Sebar 7 x102 1 x102 15 x102 ∞
2 2
Escherichia Tuang 24 x10 13 x10 14 x102 ∞
coli sebar 6 x102 2 x102 21 x102 ∞

No Biakan Metode Konsentrasi tepung NA


Bakteri Biakan F1(5%) F2 (7,5%) F3 (10%)
(CFU/ml) (CFU/ml) (CFU/ml)
3 Lactobacillus Tuang 61x102 6 x102 57 x102 ∞
2 2
acidophilus Sebar 10 x10 5 x10 3 x102 ∞
Salmonella Tuang 5x102 26 x102 54 x102 ∞
typhii Sebar 8 x102 ∞ ∞ ∞
2 2
Escherichia Tuang 9 x10 7 x10 ∞ ∞
coli sebar 13 x102 ∞ ∞ ∞

Keterangan : F : Formula, F1 : 5%, F2 : 7,5%, F3 : 10%, NA : Nutrient Agar,


CFU/ml : Colony Forming Unit, 102 : Pengenceran bakteri, ∞ :
Pertumbuhan bakteri tidak dapat dihitung.

73
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

Anda mungkin juga menyukai