Staphylococcus Aureus DAN Escherichia Coli SECARA IN VITRO

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN
BAYAM DURI (Amaranthus spinosus L.) TERHADAP

Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli SECARA IN VITRO
SKRIPSI
OLEH:
RIANI IVANA MEI LINTANG SIMANJUNTAK
NIM 141501049
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2019
Universitas Sumatera Utara

Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli SECARA IN VITRO
SKRIPSI
pz
OLEH:
RIANI IVANA MEI LINTANG SIMANJUNTAK
NIM 141501049
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2019

KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan
karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi
yang berjudul Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun bayam durit
(Amaranthus spinous L.) terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. S
Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.Pada kesempatan
ini, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu
Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah
menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi.
Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Bapak Dr.Panal
Sitorus,M.Si.,Apt., yang telah meluangkan waktu dan tenaga dalam membimbing
penulis dengan penuh kesabaran dan tanggung jawab, memberikan petunjuk dan
saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan terima kasih
juga penulis sampaikan kepadaIbu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., selaku
ketua penguji, Bapak Popi Patilaya S.Si.,M.Sc.,Apt selaku anggota penguji yang
telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi ini, serta Bapak dan Ibu
staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah banyak membimbing penulis
selama masa perkuliahan hingga selesai.Ibu Kepala Laboratorium Farmakognosi
dan Bapak Kepala Laboratorium Mikrobiologi yang telah memberikan fasilitas,
petunjuk dan membantu selama penelitian.
Penulis juga mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga
kepada bapak tercinta,M.Simanjuntak dan Ibunda M.Lumban Tobing serta adik-
iv
adik tersayang, atas limpahan kasih sayang, doa dan dukungan yang tak ternilai
dengan apapun atas doa dan dukungan selama ini kepada penulis. Penulis
menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum sempurna, oleh
karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun demi
kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini
bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi
Medan, Januari 2019

Penulis,
Riani Ivana Mei Lintang Simanjuntak

NIM 141501049
v
vi
Staphylococcus aureusDAN Escherichia coli
SECARA INVITRO
ABSTRAK
Latar Belakang: Tumbuhan di Indonesia banyak dimanfaatkan oleh masyarakat

secaratradisional untuk penanggulangan penyakit, di antaranya daun bayam duri
(Amaranthus spinosus L.) yang digunakan masyarakat desa Bakaran, Tebing
Tinggi ProvinsiSumatera Utara untuk pengobatan diare yang disebabkan oleh
infeksi bakteri
Tujuan:Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakteristik simplisia,
kandungan senyawa kimia dan aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun bayam
duri terhadap Staphylococcus aureusdanEscherichia coli.
Metode:Serbuk simplisia daun bayam duri dikarakterisasi dan diskrining
fitokimia kemudian diekstraksi secara maserasi dengan menggunakan pelarut
etanol 96%. Uji aktivitas antibakteri ekstrak daun bayam duri terhadap
Staphylococcus aureusdanEscherichia coli dilakukan dengn menggunakan
cakram kertas.
Hasil:Hasil karakteristik simplisia daun bayam duri diperoleh kadar air 8,42%,
kadar sari yang larut dalam air 15,95%, kadar sari yang larut dalam etanol
19,98%, kadar abu total 6,6% dan kadar abu tidak larut dalam asam 0,32%.
Skrining fitokimia terhadap serbu dan ekstrak daun bayam duri menunjukkan
adanya senyawa alkaloid, saponin, flavonoid, tanin, glikosida, dan
steroid/tirterpenoid. Hasil uji aktivitas antibakteri ektrak daun bayam duri
terhadap Staphylococcus aureus diperoleh konsentrasi 400 mg/ml dengan
diameter 14,06 mm dan bakteri Escherichia coli diperoleh konsentrasi 100 mg/ml
dengan diameter 13,12 mm.
Kesimpulan: Ekstrak daun bayam duri memiliki aktivitas antibateri terhadap
Staphylococcus aureusdanEscherichia coli.
Kata kunci: Antibakteri, daun bayam duri, Staphylococcus aureus, Escherichia

coli.
vii
ANTIBACTERIAL ACTIVITIES OF DURI SPINACH
LEAF(Amaranthus spinosus L.) ETHANOL EXTRACTS ON
Staphylococcus aureus AND Escherichia coli
INVITRO
ABSTRACT
Background: Plants in Indonesia are widely used by the people traditionally for
disease prevention, including spinach thorn leaves (Amaranthus spinosus L.) used
by the Bakaran village community, Tebing Tinggi North Sumatra Province to treat
diarrhea caused by bacterial infections
Objective: The aim of this study was to determine the characteristics of simplicia,
chemical compounds, and antibacterial activity of ethanol extract of spinach thorn
leaves against Staphylococcus aureus and Escherichia coli.
Methods: The thorn spinach leaf simplicia powder was characterized and
phytochemical screening then extracted by maceration using ethanol 96%. The
antibacterial activity of spinach thorn leaf extract against Staphylococcus aureus
and Escherichia coli was carried out using paper discs.
Results: The characteristics of thorn spinach leaf simplicia obtained 8.42% water
content, 15.95% water soluble extract content, 19.98% ethanol soluble extract
content, 6.6% total ash content and insoluble ash content in acid 0.32%.
Phytochemical screening of assault and spinach thorn leaf extract showed the
presence of alkaloid compounds, saponins, flavonoids, tannins, glycosides, and
steroids / tirterpenoids. The results of the antibacterial activity of extracts of
spinach thorn leaves againstStaphylococcus aureus obtained a concentration of
400 mg / ml with a diameter of 13.46 mm and the bacteria Escherichia coli
obtained a concentration of 100 mg / ml with a diameter of 13.43 mm.
Conclusion: Spinach thorn leaf extract has antibacterial activity against
Staphylococcus aureus and Escherichia coli.
Keywords:Antibacterial, thorn spinach leaves, Staphylococcus aureus, Escherichia

coli.
viii
DAFTAR ISI
JUDUL ............................................................................................... ........... i

HALAMAN JUDUL .......................................................................... ........... ii
LEMBAR PENGESAHAN ..... ............................................................ ........... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................ ........... iv
SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS ........................................ ........... vi
ABSTRAK ......................................................................................... ........... vii
ABSTRACT ....................................................................................... ........... viii
DAFTAR ISI ...................................................................................... ........... ix
DAFTAR TABEL ............................................................................... ........... xii
DAFTAR GAMBAR .......................................................................... ........... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................... ........... xiv
BAB I PENDAHULUAN ................................................................... ....... .... 1
1.1 Latar Belakang .............................................................................. ........... 2
1.2 Perumusan Masalah ..................................................................... ....... .... 3
1.3 Hipotesis Penelitian ....................................................................... ........... 4
1.4 Tujuan Penelitian .......................................................................... ........... 4
1.5 Manfaat Penelitian ........................................................................ ........... 4
1.6 Kerangka Pikir Penelitian .............................................................. ........... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ......................................................... ........... 6
2.1 Uraian Tumbuhan Bayam Duri ...................................................... ........... 6
2.1.1 Sistematika Tumbuhan Bayam Duri ........................................... ........... 6
2.1.2 Morfologi Tumbuhan Bayam Duri ............................................. ........... 6
2.1.3 Kandungan Tumbuhan Bayam Duri ........................................... ....... .... 7
2.1.4 Flavonoid .................................................................................... ........... 7
2.1.3.3 Tanin ...................................................................................... ........... 7
2.1.3.4 Steroid ..................................................................................... ........... 7
2.1.3.5 Glikosida ................................................................................ ........... 7
2.2 Ekstraksi ....................................................................................... ........... 7
2.3 Sterilisasi ...................................................................................................... 10
2.4 Bakteri ......................................................................................... ........... 12
2.4.1 Uraian …………………………………………………………………… 12
2.4.2 Fase Pertumbuhan Bakteri .......................................................... ........... 14
2.4.3 Faktor Pertumbuhan Bakteri ....................................................... ........... 15
2.4.4 Media Pertumbuhan Bakteri ....................................................... ........... 17
2.5 Bakteri Penyebab Infeksi ............................................................... ........... 19
2.6 Staphylococcus aureus .................................................................. ........... 19
2.7 Escherichia coli ............................................................................ ........... 20
2.8 Pengujian Aktivitas Antibakteri ..................................................... ........... 22
BAB III METODE PENELITIAN ...................................................... ........... 23
3.1 Alat dan Bahan .............................................................................. ........... 23
3.1.1 Alat ............................................................................................ ........... 23
3.1.2 Bahan ......................................................................................... ........... 23
3.1.3 Bakteri Uji ................................................................................. ........... 24
3.2 Penyiapan Sampel ......................................................................... ........... 24
3.2.1 Pengumpulan Sampel ................................................................. ........... 24
3.2.2 Identifikasi Sampel ..................................................................... ........... 24
ix
3.2.3 Pengolahan Sampel .................................................................... ........... 24
3.3 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ............................................. ........... 25
3.3.1 Pemeriksaan Makroskopik ......................................................... ........... 25
3.3.2 Pemeriksaan Mikroskopik .......................................................... ........... 25
3.3.3 Penetapan Kadar Air .................................................................. ........... 25
3.3.4 Penetapan Kadar Sari Larut Air .................................................. ........... 26
3.3.5 Penetapan Kadar Sari Larut Etanol ............................................. ........... 26
3.3.6 Penetapan Kadar Abu Total ........................................................ ........... 27
3.3.7 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam .................................... ........... 27
3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi .......................................................... ........... 28
3.4.1 Larutan Pereaksi Mayer ............................................................... ........... 28
3.4.2 Larutan Pereaksi Dragendorff ..................................................... ........... 28
3.4.3 Larutan Pereaksi Bouchardat ...................................................... ........... 28
3.4.4 Larutan Pereaksi Libermann-Burchard ........................................ ........... 28
3.4.5 Larutan Pereaksi Molish .............................................................. ........... 28
3.4.6 Larutan Pereaksi Besi (III) Klorida 1% ........................................ ........... 28
3.4.7 Larutan Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M .................................. ........... 29
3.4.8 Larutan Pereaksi Asam Klorida 2N ............................................. ........... 29
3.4.9 Larutan Pereaksi Kloralhidrat ..................................................... ........... 29
3.5 Skrining Fitokimia ........................................................................ ........... 29
3.5.1 Pemeriksaan Alkaloid ................................................................. ........... 29
3.5.2 Pemeriksaan Glikosida .............................................................. ........... 29
3.5.3 Pemeriksaan Saponin ................................................................ ........... 30
3.5.4 Pemeriksaan Flavonoid .............................................................. ........... 30
3.5.5 Pemeriksaan Tanin ..................................................................... ........... 31
3.5.6 Pemeriksaan Steroid/Triterpenoid ............................................... ........... 31
3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol 70 % .................................................... ........... 31
3.7 Pembuatan Media untuk Bakteri Uji ............................................... ........... 32
3.7.1 Pembuatan Media Nutrient Agar (NA) ....................................... ........... 32
3.7.2 Pembuatan Media Nutrient Broth (NB) ...................................... ........... 32
3.7.3 Pembuatan Media Miring ........................................................... ........... 32
3.8 Pembuatan Stok Kultur Bakteri .................................................... ........... 33
3.9 Pembuatan Inokulum Bakteri ....................................................... ........... 33
3.10 Pembuatan Suspensi Standar McFarland No. 0,5 .......................... ........... 33
3.11 Sterilisasi Alat dan Bahan ............................................................ ........... 33
3.12 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol ........................................ ........... 33
3.13 Pengujian Aktivitas Antibakteri ................................................... ........... 33
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................. ........... 34
4.1 Identitas Tumbuhan ....................................................................... ........... 34
4.2 Bentuk Makroskopik ..................................................................... ........... 34
4.2.1 Bentuk Mikroskopik ................................................................... ........... 34
4.2.2 Karakteristik Simplisia ............................................................... ........... 34
4.2.3 Ekstrak Daun Bayam Duri .......................................................... ........... 35
4.2.4 Skrining Simplisia Daun Bayam Duri ......................................... ........... 35
4.2.5 Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Bayam Duri . ...... ……… 35
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ............................................... ........... 40
5.1 Kesimpulan ................................................................................... ........... 40
5.2 Saran ............................................................................................. ........... 40
x
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................... ........... 41
LAMPIRAN ....................................................................................... ....... .... 43
xi
DAFTAR TABEL
4.1 Hasil Karakteristik Serbuk Simplisia Daun Bayam Duri .................. ........ 35
4.2 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak Daun Bayam Duri ........ 36
4.3 Hasil Pengukuran Daya Hambat Pertumbuhan Bakteri dan Ekstrak
Etanol Daun Bayam Duri ................................................................ ........ 39
xii
DAFTAR GAMBAR
1.1 Kerangka Pikir Peneliti ................................................................... ........ 5

2.1 Struktur Dinding Sel Bakteri Gram Positif dan Gram Negatif .......... ........ 13
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
1. Hasil Identifikasi Tumbuhan ............................................................. ........ 43

2. Tumbuhan Daun Bayam Duri (Amaranthus spinosus L.) ................... ........ 44
3. Serbuk Simplisia Daun Bayam Duri ................................................... ........ 45
4. Gambar Mikroskopik ........................................................................ ........ 46
5. Karakteristik Simplisia ...................................................................... ........ 47
6. Bagan Skrining Fitokimia dan Ekstraksi Simplisia ............................ ........ 48
7. Bagan Alir Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Bayam Duri .................. ........ 49
8. Bagan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Bayam Duri .... ........ 49
9. Hasil Pengukuran Daerah Hambatan Uji Aktivitas Antibakteri
Ekstrak Etanol Daun Bayam Duri terhadap Staphylococcus aureus
dan Escherichia coli ………………………………………………….......... 55
10. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Bayam Duri
Terhadap Staphylococcus aureus ..................................................... ........ 56
11. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Bayam Duri
Terhadap Escherichia coli .............................................................. ........ 57
12. Perhitungan Pembuatan Variasi Konsentrasi Larutan Uji ................. ........ 59
xiv
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Indonesia merupakan pusat keragaman hayati dunia dan menduduki urutan
terkaya di dunia setelah Brasil. Di Indonesia di perkirakan hidup sekitar 40.000
spesies tumbuhan dimana dari seluruh spesies tumbuhan tersebut diperkirakan
sekurang-kurangnya 9.600 spesies berkhasiat obat dan baru kurang lebih 300
spesies yang digunakan sebagai obat tradisional (Depkes RI, 2006). Seiring
dengan kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi para ilmuwan terus melakukan
penelitian tentang khasiat tumbuhan obat dan adanya istilah back to
nature.Pendayagunaan obat tradisional merupakan salah satu alternatif untuk
memenuhi kebutuhan penduduk di bidang kesehatan, maka perlu diupayakan
pengenalan, penelitian, pengujian, pengembangan khasiat dan keamanan obat
tradisional (Mursito, 2001).Banyak tumbuh-tumbuhan mengandung golongan
senyawa kimia seperti flavonoid yang menunjukkan sifat antimikroba.Salah satu
tumbuhanyang telah dimanfaatkan oleh masyarakat adalah daun bayam duri.
Bayam duri merupakan tanaman liar. Menurut jurnal penelitian (Faridah,
2013) ekstrak etanol daun bayam duri memiliki aktivitas untuk diare dan
diperoleh bahwa daunbayam duri mengandung bebeberapa metabolit sekunder
seperti flavonoid, glikosida, steroid/tri terpenoid, saponin dan tanin.
Berdasarkan informasi yang diperoleh peneliti dari masyarakat di Desa
Bakkaran Batu Mala Sore Kota Tebing Tinggi Provinsi Sumatera
Utara,menggunakan bayam duri sebagai obat tradisional untuk mengatasi
penyakit pencernaan.
1
Penyakit infeksi merupakan penyakit yang disebabkan oleh adanya infeksi
dari mikroorganisme seperti bakteri.Penyakit tersebut dapat disembuhkan dengan
menggunakan antibiotik.Penggunaan antibiotik yang tidak rasional dapat
menyebabkan bakteri patogen menjadi resisten (Heni, 2015).
Menurut Jawetz dkk., (2001), ada beberapa bakteri yang dapat
menyebabkan infeksi pada manusia, diantaranya adalah Escherichia coli yang
merupakan bakteri gram negatif penyebab penyakit diare dan Staphylococcus
aureus yang merupakan bakteri gram positif penyebab penyakit kulit seperti bisul.
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli merupakan 2 dari 12 bakteri
yang secara umum paling kebal terhadap obat-obat (Angelica, N. 2013). Secara
alami kedua bakteri ini merupakan bakteri flora normal dalam tubuh, tetapi bila
populasinya melebihi dan keberadaannya diluar habitat aslinya, kedua bakteri
tersebut dapat menimbulkan penyakit. Kedua bakteri patogen ini juga merupakan
bakteri yang paling sering resisten terhadap berbagai jenis antibiotik, sehingga
mempersulit pemilihan antibakteri yang sesuai untuk pengobatan (Jawetz dkk.,
2001) Saat ini pengembangan untuk penemuan antibakteri dari tanaman dianggap
penting dan memberikan harapan baru untuk penelitian selanjutnya. Antibakteri
yang berasal dari tanaman juga dipercaya memiliki efek samping yang minimal
Mursito (2001).
Melihat potensi tanaman bayam duri sebagai tanaman obat, maka
dilakukan karakterisasi simplisia dan standardisasi ekstrak daun bayam duri
sehingga dapat menetapkan mutu dan keamanan bahan bahan baku ekstrak yang
digunakan dalam menunjang kesehatan. Tujuan dari standarisasi simplisia adalah
menjaga konsistensi dan keseragaman khasiat dari obat herbal, menjaga
keamanannya dan stabilitas ekstrak/bentuk sedian terkait dengan efikasi dan
2
keamanan pada konsumen, dan meningkatkan nilai ekonomi (Saifudin, Rahayu, &
Teruna, 2011).
Proses standarisasi daun bayam duri (Amaranthus spinosus L.)memerlukan
bahan baku atau simplisia yang memenuhi syarat dalam monografi terbitan resmi
Departemen Kesehatan (Materia Medika Indonesia) dan ekstrak yang memenuhi
persyaratan dalam buku khusus monografi ekstrak tumbuhan obat. Bahan baku
simplisia dan ekstrak etanol daun bayam duri (Amaranthus spinosus L.)belum
tercantum dalam monografi terbitan resmi Departemen Kesehatan (Materia
Medika Indonesia dan Monografi ekstrak tumbuhan obat). Pengujian standarisasi
ini dilakukan pada ekstraksi etanol daun daun bayam duri (Amaranthus spinosus
L.)dengan menggunakan pelarut etanol (Harborne, 1987).
Berdasarkan uraian di atas, uji aktivitas antibakteri daun bayam duri secara
maserasi dengan pelarut etanol 96% mempunyai aktivitas antibakteri
terhadapStaphylococcus aureus dan Escherichia coli mewakili bakteri Gram
Positif dan Gram Negatif dengan metode difusi agar dengan kertas pencadang.
Sebelum dilakukan pemeriksaan makroskopik, mikroskopik, penetapan kadar abu
total, penetapan kadar abu tidak larut asam, penetapan kadar air, penetapan kadar
sari larut dalam air, penetapan kadar sari larut dalam etanol dan skrining
fitokimia.
1.2 Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, maka perumusan masalah penelitian ini
adalah:
a. Apakah karakteristik simplisia daun bayam duri dapat diketahui?
3
b. Golongan senyawa kimia apa saja yang terdapat pada daun bayam duri
(Amaranthus spinosus L.)?
c. Apakah ekstrak daun bayam duri (Amaranthus spinosus L.) memiliki
aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli?
1.3 Hipotesis Penelitian
Berdasarkan perumusan masalah diatas maka hipotesis penelitian ini
adalah:
a. Karakteristik simplisia dari daun bayam duri (Amaranthus spinosus L.) dapat
dketahui dengan menggunakan prosedur yang tertera pada Materia Medika
Indonesia
b. Golongan senyawa kimia dalam simplisia dan ekstrak daun bayam duri
(Amaranthus spinosus L.) dapat ditentukan dengan menggunakan skrining
fitokimia.
c. Ekstrak daun bayam duri (Amaranthus spinosus L.) memiliki aktivitas
antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
1.4 Tujuan Penelitian
Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah :
a. Mengetahui karakteristik simplisia daun bayam duri (Amaranthus spinosus
L.) ;
b. Mengetahui golongan senyawa kimia yang terdapat pada daun bayam duri
(Amaranthus spinosus L.) ;
c. Mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun bayam duri (Amaranthus
spinosus L.) terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.
4
1.5 Manfaat Penelitian
Manfaat penelitian ini yaitu penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi
secara ilmiah mengenai karakteristik simplisia, golongan senyawa kimia, dan
aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun bayam duri (Amaranthus spinosus L.)
terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli kepada pembaca.
1.6 Kerangka Pikir Penelitian
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan variabel bebas yaitu ekstrak
etanol daun bayam duri (Amaranthus spinosus L.) dengan berbagai konsentrasi
dan variabel terikatnya.Aktivitas antibakteri terhadap Staphlococcus aureus dan
Escherichia coli dengan parameter adalah diameter hambat masing-masing
bakteri, konsentrasi hambat maksimum dan konsentrasi hambat minimum.Dilihat
pada Gambar 1.1.
Variabel bebas Variabel terikat Parameter

Diameter
Ekstrak etanol daun Aktivitas antibakteri
hambat masing-
bayam duri terhadapStaphylococc
masing bakteri
(Amaranthus spinosus us aureus dan
L.) dengan berbagai Escherichia coli
konsentrasi. KonsentrasiHa
mbat minimun
KonsentrasiHa
mbat Efektif
Gambar 1.1 Kerangka Pikir Penelitian
5
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tumbuhan
Bayam duri adalah tanaman liar yang tumbuh liar di kebun-kebun, tepi
jalan, tanah kosong dari dataran rendah.
2.1.1 Sistematika Tumbuhan
Hasil identifikasi tumbuhan dari Herbarium Medanense,diperoleh
sistematika tumbuhan bayam duri sebagai berikut:
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliopsida
Subdivisio :Spermatophyta
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Caryophyllales
Familia : Amaranthaceae
Genus : Amaranthus
Spesies : Amaranthus spinosus L.
2.1.2 Morfologi Tumbuhan
Ciri-ciri bayam duri (Amaranthus spinosusL) dan senyawa yang
terkandung di dalamnya.Bayam mempunyai daya adaptasi yang baik terhadap
lingkungan tumbuh, sehingga dapat ditanam di dataran rendah sampai dataran
tinggi.Tingginya dapat mencapai 1 meter.Tumbuhan ini dapat dikembangbiakkan
melalui bijinya yang bulat, kecil dan hitam.Ciri khas dari tumbuhan bayam duri
yaitu pada batang, tepatnya di pangkal tangkai daun terdapat duri, sehingga orang
6
mengenal sebagai bayam duri, bayam duri tumbuh baik di tempat-tempat yang
cukup sinar matahari dengan suhu udara antara 25 – 350C.
2.1.3 Kandungan kimia
Daun tumbuhan bayam duri berdasarkan penelitian sebelumnya
mengandung flavonoida, glikosida, saponin, tanin dansteroid/triterpenoid
(Faridah, 2013).
2.1.3.1 Flavonoida
Flavonoida merupakan salah satu golongan fenol alam yang mengandung
15 atom karbon dalam inti dasarnya, yang tersusun dalam konfigurasi C6-C3-C6
yaitu dua cincin aromatik yang dihubungkan oleh satuan tiga karbon yang dapat
atau tidak dapat membentuk cincin ketiga, pada umumnya tersebar luas pada
tumbuhan hijau (Markham, 1988).
Umumnya senyawa flavonoida dalam tumbuhan terikat dengan gula
disebut sebagai glikosida dan aglikon.Flavonoida yang berbeda-beda mungkin
saja terdapat pada satu tumbuhan dalam beberapa bentuk kombinasi
glikosida.Oleh karena itu dalam menganalisis flavonoida biasanya lebih baik
memeriksa aglikon yang telah dihidrolisis dibandingkan dalam bentuk glikosida
dengan kerumitan strukturnya (Harborne, 1987).Flavonoida berkhasiat sebagai
antifungi,antioksidan, antibakteri dan antiinflamasi (Robinson, 1995).
2.1.3.2 Saponin
Saponin adalah glikosida triterpenoida dan sterol.Senyawa golongan ini
banyak terdapat pada tumbuhan tinggi, merupakan senyawa dengan rasa yang
pahit dan mampu membentuk larutan koloidal dalam air serta menghasilkan busa
jika dikocok dalam air.Saponin merupakan senyawa aktif permukaan, bersifat
seperti sabun dan dapat di uji berdasarkan kemampuannya membentuk
7
busa.Pembentukan busa yang mantap sewaktu mengekstraksi tumbuhan atau
padawaktu memekatkan ekstrak tumbuhan merupakan bukti terpercaya akan
adanya saponin (Harborne, 1987).
Senyawa ini dapat mengiritasi membran mukosa dan pada konsentrasi
rendah dapat menyebabkan hemolisa sel darah merah.Saponin dapat menurunkan
tegangan permukaan dari larutan berair sehingga dalam bidang farmasi digunakan
sebagai penstabil sediaan suspensi (Tyler, 1976).
2.1.3.3 Tanin
Tanin didefinisikan sebagai makromolekul senyawa fenolik yang larut
dalam air yang mempunyai sifat khusus yaitu kemampuannya mengendapkan
alkaloid, gelatin dan protein lainnya.Metabolit sekunder ini dibagi menjadi 2
kelompok utama yaitu tanin terhidrolisis dan tanin terkondensasi.
Penyebarannya hampir pada semua tumbuhan dan biasanya terdapat pada
bagian daun, buah, akar serta batang.Tanin dan senyawa turunannya bekerja
dengan jalan menciutkan selaput lendir pada saluran pencernaan dan di bagian
kulit yang luka.Pada perawatan untuk luka bakar, tanin dapat mempercepat
pembentukan jaringan yang baru sekaligus dapat melindunginya dari infeksi atau
sebagai antiseptik (Tyler, 1976).Menurut batasannya tanin dapat bereaksi dengan
protein membentuk polimer mantap yang tidak larut dalam air. Tanin dapat
diidentifikasi dengan cara penambahan pereaksi ferri klorida, menghasilkan warna
hijau kehitaman ataubiru kehitaman (Harborne, 1987).
2.1.3.4 Steroida/triterpenoida
Steroid adalah triterpena yang kerangka dasarnya terbentuk sistem cincin
Siklopentanoperhidrofenantren dan merupakan senyawa organik yang berasal dari
hewan dan tumbuhan dan dengan struktur inti molekulnya C27, tetrasiklin dengan
8
susunan 3 cincin segi enam dan 1 cincin segi lima. Triterpenoid adalah senyawa
yang kerangka karbonnya berasal dari 6 satuan isopren dan secara
biosintesisditurunkan dari hidrokarbon C30 asiklik yaitu skualen (Harborne,
1987).
2.1.3.5 Glikosida
Glikosida adalah suatu senyawa yang jika dihidrolisis akan menghasilkan
bagian gula yang disebut glikon dan bagian bukan gula disebut aglikon. Gula
yang dihasilkan biasanya adalah glukosa, ramnosa, dan lain sebagainya.Jika
bagian gulanya adalah glukosa maka disebut glukosida, sedangkan jika bagian
gulanya selain glukosa disebut glikosida.
2.2 Ekstrak
Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari
simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang
sesuai,kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau
serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah
ditetapkan(Ditjen POM RI, 1995).
Ekstraksi adalah proses penarikan kandungan kimia yang dapat larut
sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair.Simplisia
yang diekstraksi mengandung senyawa aktif yang dapat larut dan senyawa yang
tidak dapat larut seperti serat, karbohidrat, protein dan lain-lain. Senyawa aktif
yang terdapat dalam berbagai simplisia dapat digolongkan ke dalam golongan
minyak atsiri, alkaloida, flavonoid dan lain-lain. Setelah diketahui senyawa aktif
yang dikandung oleh simplisia akan memudahkan pemilihan pelarut dan cara
ekstraksi yang tepat. Simplisia yang lunak seperti rimpang dan daun mudah
9
ditembus oleh pelarut, karena itu proses ekstraksi tidak perlu diserbuk sampai
sangat halus. Simplisia yang keras seperti biji, kulit kayu dan kulit akar sulit untuk
ditembus oleh pelarut, karena itu perlu diserbuk sampai sangan halus (Depkes
RI,2000).
Ekstraksi dengan menggunakan pelarut terdiri dari 2 cara, yaitu:
1. Cara dingin
Ekstraksi menggunakan pelarut dengan cara dingin terdiri dari:
a. Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut
dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan.
b. Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna
yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses terdiri dari tahapan
pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya
(penetesan/penampungan ekstrak), terus-menerus sampai diperoleh ekstrak
(perkolat).
2. Cara panas
Ekstraksi menggunakan pelarut dengan cara panas terdiri dari :
a. Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama
waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya
pendingin balik.
b. Sokletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang
umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu
dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik.
c. Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada temperature
yang lebih tinggi dari temperatur kamar (40-50oC).
10
d. Infundasi adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas
air(bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur 96-
98oC) selama waktu tertentu (15-20 menit).
e. Dekoktasi adalah infus pada waktu yang lebih lama (30 menit) dan temperature
sampai titik didih air (Depkes RI, 2000).
2.3 Simplisia
Simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum
mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan lain, berupa bahan
alam yang telah dikeringkan. Simplisia dibedakan atas simplisia nabati,simplisia
hewani dan simplisia mineral.
Eksudat tumbuhan ialah isi sel yang secara spontan keluar dari tumbuhan
atau isi sel yang dengan cara tertentu dapat dikeluarkan dari selnya. Simplisia
hewani adalah simplisia yang berupa hewan utuh, bagian hewan atau zat-zat
berguna yang dihasilkan oleh hewan dan belum berupa zat kimia murni. (Depkes
RI., 2000).
Simplisia sebagai produk hasil dari petanian atau pengumpulan dari
tumbuhan liar yang memiliki kandungan kimia yang tidak terjamin selalu dengan
konstan karena adanya variabel bibit, tempat tumbuh, iklim, kondisi panen, serta
proses pasca panen dan preparasi akhir. Kandungan senyawa dalam produk
hasilpanen tumbuhan obat disebabkan aspek sebagai berikut (Depkes RI., 2000):
a. Genetik (bibit)
b. Lingkungan (tempat tumbuh, iklim)
c. Rekayasa agronomi (fertilizer, perlakuan selama masa tumbuh)
d. Panen (waktu dan pasca panen)
11
Proses pemanenan dan preparasi simplisia merupakan proses yang dapat
menentukan mutu simplisia dalam artian, yaitu komposisi senyawa kandungan
kontaminasi dan stabilitas bahan (Depkes RI, 2000).
2.4 Sterilisasi
Steril merupakan keadaan suatu zat yang bebas dari mikroba hidup, baikyang
menimbulkan penyakit maupun tidak menimbulkan penyakit, sedangkan
sterilisasi adalah suatu proses untuk membuat ruang atau benda menjadi steril
(Syamsuni, 2006)
Peralatan yang dipergunakan dalam uji antibakteri harus dalam keadaan steril,
artinya pada peralatan tersebut tidak didapatkan bakteri, baik yang akan merusak
media dan proses yang sedang berlangsung. Sterilisasi didapatkan melalui
sterilisasi, cara sterilisasi yang umum dilakukan antara lain :
a. Sterilisasi secara fisik, misalnya dengan pemanasan penggunaan
sinargelombang pendek seperti sinar X, sinar gamma dan sinar ultra violet.
b. Sterilisasi secara kimiawi, dengan menggunakan desinfektan dan larutan
alkohol (Pratiwi, 2008).
2.4.1 Sterilisasi dengan pemanasan secara kering
Pemanasan secara kering menggunakan alat yang dinamakan dengan oven,
yaitu lemari pengering dengan dinding ganda, dilengkapi dengan termometer dan
lubang tempat keluar masuknya udara, dan dipanaskan dengan gas atau listrik
(Depkes RI, 1979). Selain dengan oven, sterilisasi dengan pemanasan secara
kering bisa dilakukan dengan pemijaran. Pemijaran dilakukan dengan memakai
api gas dengan nyala api tidak berwarna atau api dari lampu spiritus. Cara ini
sangat sederhana, cepat dan menjamin sterilisasi bahan atau alat yang disterilkan,
12
tetapi penggunaannya terbatas hanya untuk beberapa alat atau bahan saja.
Biasanya alat- alat yang disterilkan dengan pemijaran ini antara lain benda-benda
logam (pinset,penjepit krus), tabung reaksi, mulut wadah seperti erlemeyer, botol
dan lainnya.Sedangkan mortar dan stamfer disiram dengan alkohol kemudian
dibakar(Syamsuni, 2006).
2.4.2 Sterilisasi dengan pemanasan secara basah
Sterilisasi dengan pemanasan secara basah menggunakan temperatur di atas
100°C dilakukan dengan uap yaitu menggunakan autoklaf.Prinsip autoklaf adalah
terjadinya koagulasi protein yang cepat dalam keadaan basah dibandingkan
keadaan kering.Siklus sterilisasi dengan pemanasan secara basah meliputi tahap
pemanasan, tahap sterilisasi dan tahap pendinginan (Pratiwi, 2008).
2.5 Bakteri
Bakteri merupakan suatu organisme prokariot yang berarti tidak mempunyai inti
sel sejati.Struktur sel yang paling penting adalah dinding sel yang bersifat kaku
dan berfungsi untuk mempertahankan bentuknya dan melindungi sel
dariperubahan tekanan osmotik antara sel dengan lingkungannya. Bakteri pada
umumnya mempunyai ukuran sel 0,5-1,0 μm kali 2,0-5,0 μm.
Berdasarkan proses pewarnaan gram, bakteri dibagi menjadi dua golongan
yaitu bakteri gram positif dan bakteri gram negatif. Bakteri gram positif menyerap
zat warna pertama yaitu kristal violet yang menyebabkan warna ungu, sedangkan
bakteri gram negative menyerap zat warna kedua yaitu safranin dan
menyebabkannya berwarna merah. Perbedaan hasil dalam pewarnaan gram
disebabkan perbedaan struktur, terutama dinding sel kedua bakteri tersebut
(Waluyo, 2010).
13
2.5.1 Morfologi bakteri
Berdasarkan morfologinya bakteri dapat dibedakan atas tiga bagian yaitu:
Bentuk basil
Basil adalah bakteri yang mempunyai bentuk batang atau silinder,membelah
dalam satu bidang, berpasangan ataupun bentuk rantai pendek ataupanjang.
Bentuk basil dapat dibedakan atas:
Monobasil yaitu basil yang terlepas satu sama lain dengan kedua ujung tumpul.
a. Diplobasil yaitu basil yang bergandeng dua dan kedua ujungnya tumpul.
b. Streptobasil yaitu basil yang bergandengan panjang dengan kedua ujung tajam.
Gambar 2.1 Bakteri bentuk basil
Adapun contoh bakteri dengan bentuk basil yaitu Eschericia coli, Bacillus
anthracis, Salmonella typhimurium, Shigella dysentriae (Pelczar, dkk.,1986).
Bentuk kokus
Kokus adalah bakteri yang bentuknya seperti bola-bola kecil, ada yang hidup
sendiri dan ada yang berpasang-pasangan. Bentuk kokus ini dapat dibedakan atas:
a. Monokokus yaitu sel bakteri kokus yang tunggal
b. Diplokokus yaitu kokus yang bergandeng dua.
14
c. Tetrakokus yaitu kokus yang mengelompok empat.
d. Stafilokokus yaitu kokus yang mengelompok dan membentuk anggur.
e. Streptokokus yaitu kokus yang bergandengan panjang menyerupai rantai.
f. Sarsina yaitu kokus yang mengelompok seperti kubus.
Gambar 2.2 Bakteri bentuk kokus
Contoh bakteri dengan bentuk kokus yaitu Staphylococcus aureus, Sarcina
luten,Diplococcus pneumoniae, Streptococcus lactis (Volk dan Wheeler, 1993).
Bentuk spiral
Bakteri dalam bentuk spiral apat dibedakan sebagai berikut:
a. Spiral yaitu menyerupai spiral atau lilitan.
b. Vibrio yaitu bentuk batang yang melengkung berupa koma.
c. Spirochaeta yaitu menyerupai bentuk spiral, bedanya dengan spiral dalam
kemampuannya melenturkan dan melengkukkan tubuhnya sambil bergerak.
Gambar 2.3 Bakteri bantuk spiral
15
2.5.2 Fase pertumbuhan mikroorganisme
Ada empat macam fase pertumbuhan mikroorganisme, yaitu fase lag, fase log
(fase esksponensial), fase stasioner dan fase kematian.
1. Fase lag
Fase lag atau fase adaptasi, yaitu fase penyesuaian mikroorganisme pada suatu
lingkungan baru. Ciri fase lag adalah tidak ada terjadi peningkatan jumlah sel,
yang ada hanya peningkatan ukuran sel.
Lama faseini dapat tergantung pada kondisi danjumlah awal mikroorganisme dan
media pertumbuhan mikroorganisme. Pada fasenimikroorganisme yang belum
berkembang biak, tetapi aktivitas metabolismenya sangat tinggi. Fase ini
merupakan persiapan untuk fase berikutnya (Pratiwi, 2008).
2. Fase log (fase eksponensial)
Fase ini merupakan fase dimana mikroorganisme tumbuh dan membelah pada
kecepatan maksimum, tergantung pada genetika mikroorganisme, sifat media, dan
kondisi pertumbuhan.
Hal yang dapat menghambat laju pertumbuhan adalah bila satu atau lebih nutrisi
dalam kultur habis, sehingga hasil metabolism yang bersifat racun akan tertimbun
dan menghambat pertumbuhan bakteri.
Hasil metabolisme bakteri yang bersifat racun dapat menganggu pertumbuhan
bakteri (Pratiwi, 2008).
3. Fase stationer
Pada fase ini pertumbuhan mikroorganisme dapat menjadi berhenti dan terjadi
keseimbangan antara jumlah sel yang membelah dengan jumlah sel yang mati.
Pada fase ini, akanterjadi akumulasi produk buangan yang toksik.
16
Adanya kehilangan sel yang lambat kemungkinan karena kematian
diimbangi oleh pembentukan sel-sel yang baru melalui pertumbuhan dan
pembelahan dengan nutrisi yang dilepaskan oleh sel-sel yang mati karena lisis
(Pratiwi, 2008).
4. Fase kematian
Pada fase ini jumlah sel yang mati meningkat. Konsentrasi produkdari buangan
yang bersifat toksis akan meningkat dan ketersediaan makanan untuk bakteri
menurun. Jumlah bakteri yang mati meningkat dengan cepat.
Pada sebagaianbakteri akan dapat terlihat berbeda dari bakteri yang sehat pada
fase log. Perubahan morfologi bakteri juga terlihat perubahan seperti bakteri akan
semakin terus panjang, dan bakteri juga akan terlihat bercabang(Pratiwi, 2008).
2.5.3 Uraian bakteri
Pertumbuhan dan perkembangan bakteri dipengaruhi oleh beberapa faktor, yaitu:
1. Zat makanan (nutrisi)
Sumber zat makanan bagi bakteri diperoleh dari senyawa karbon, nitrogen,sulfur,
fosfor, unsur logam (natrium, kalsium, magnesium, mangan, besi, tembaga dan
kobalt), vitamin dan air untuk fungsi metabolik dan pertumbuhannya
(Pelczar,dkk.,1986).
2. Keasaman dan kebasaan (pH)
Bakteri patogen untuk pertumbuhannya pada pH 7,2-7,6.
3. Temperatur
Proses pertumbuhan bakteri tergantung pada reaksi kimiawi dan laju reaksi kimia
yang dipengaruhi oleh temperatur. Berdasarkan ini maka bakteri dapat
diklasifikasikan sebagai berikut:
17
a. Bakteri psikofil, yaitu bakteri yang dapat hidup pada temperatur 0-30oC,dengan
temperatur optimum umtuk pertumbuhannya adalah 10-20oC.
b. Bakteri mesofil, yaitu bakteri yang dapat hidup pada temperatur 5-
60oC,temperatur optimum adalah 25-40oC.
c. Bakteri termofil, yaitu bakteri yang dapat hidup pada temperatur optimum
adalah 55-65oC (Pelczar dkk.,1986).
4. Oksigen
Pembagian bakteri berdasarkan kebutuhan oksigen adalah:
a. Aerobik, yaitu bakteri yangmembutuhkan oksigen dalam pertumbuhannya.
b. Anaerobik, yaitu bakteri yang dapat tumbuh tanpa oksigen
c. Anaerobik fakultatif, yaitu bakteri yang dapat tumbuh dengan oksigen
ataupun tanpa oksigen.
d. Mikroaerofilik, yaitu bakteri yang dapat tumbuh baik dengan adanya sedikit
oksigen.
5. Tekanan osmosa
Medium yang baik bagi pertumbuhan bakteri adalah medium isotonis terhadap isi
sel bakteri (Pelczar dkk.,1986).
6. Kelembapan
Secara umum bakteri tumbuh dan berkembang biak dengan baik pada lingkungan
yang lembap. Kebutuhan akan air tergantung dari jenis bakterinya (Pelczar
dkk.,1986).Berdasarkan pengecatan Gram, maka bakteri dapat dibedakan menjadi
dua bagian (Pratiwi, 2008) yaitu :
1. Bakteri Gram positif, yaitu bakteri yang memberikan warna ungu saat diwarnai
dengan zat warna pertama (kristal violet) dan setelah dicuci dengan
18
alkohol,warna ungu tersebut akan tetap kelihatan. Kemudian ditambahkan zat
warnakedua (safranin), warna ungu pada bakteri tidak berubah.
2. Bakteri Gram negatif, yaitu bakteri yang yang memberikan warna ungu
saatdiwarnai dengan zat warna pertama (kristal violet) namun setelah dicuci
dengan alkohol, warna ungu tersebut akan hilang. Kemudian ditambahkan zat
warna kedua (safranin) akan menghasilkan warna merah.
2.5.3.1 Uraian Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus merupakan sel gram positif, yang berbentuk bulat dengan
diameter 0,4-1,2 μm (rata-rata 0,8 μm) dengan koloni, biasanya akan tersusun
dalam rangkaian tak beraturan seperti anggur, tahan hidup dalam lingkungan yang
mengandung garam dengan konsentrasi tinggi (Jawetz, et al., 2005), berwarna
kuning dan bersifat saprobe atau patogen (Dwidjoseputro, 1978).
Sistematika dari bakteri Staphylococcus aureusadalah: (Dwidjoseputro,
1978)
Divisi : Protophyta
Kelas : Schizomycetes
Ordo : Eubacteriales
Famili : Micrococcacea
Genus : Staphylococcus
Spesies : Staphylococcus aureus (Jawetz et al., 2005)
a. Ciri-ciri bakteri Staphylococcus aureus
Sel berbentuk bola dengan diameter rata sekitar 1μm dan tersusun dalam
kelompok-kelompok tak beraturan. Pada biakan cair terlihat dalam bentuk kokus
tunggal, berpasangan, berbentuk tetrad dan berbentuk
rantai.BakteriStaphylococcus aureus tidak bergerak dan tidak membentuk spora.
19
b. Biakan bakteri Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus mudah tumbuh pada kebanyakan perbenihan bakteri dalam
keadaan aerobik atau mikroaerofilik dan tumbuh paling cepat pada suhu 37°C,
tidak membentuk spora, katalase positif, oksidasi negatif. Bakteri ini membentuk
koloni berwarna abu-abu sampai kuning emas tua.
2.5.3.2 Uraian Escherichia coli
Escherichia coli merupakan bakteri Gram negatif berbentuk batang dan hidupnya
aerobik atau anaerobik fakultatif yang habitat alaminya adalah usus besar manusia
dan hewan, bergerak dengan flagel yang peritrik atau tidak bergerak dan memiliki
kemampuan menguraikan glukosa dan menghasilkan gas.Escherichia coli tumbuh
pada suhu antara 10-40oC, dengan suhu optimumnya 370C.Sistematika dari
bakteri Escherichia coli adalah: (Jawetz et al., 2005)
Divisi : Protophyta
Kelas : Schizomycetes
Odo : Eubacteriales
Famili : Enterobacteriaceae
Genus : Escherichia
Spesies : Escherichia coli
2.6 Pengujian Aktivitas Antibakteri
Pengukuran aktivitas antimikroba dapat dilakukan dengan metode difusi
atau dengan metode dilusi.
a. Cara difusi
Metode yang digunakan adalah cakram kertas, silinder gelas/logam dan pencetak
lubang yang diletakkan pada media agar padat yang telah dicampurkan dengan
20
mikroba uji dan zat yang bersifat antimikroba diteteskan ke dalam pencadang
kemudian diinkubasi pada suhu 37oC selama 18-24 jam. Selanjutnya diamati
adanya area (zona) jernih di sekitar pencadang yang menunjukkan tidak adanya
pertumbuhan mikroba dan ini digunakan untuk
b. Cara dilusi
Metode ini digunakan untuk menentukan Kadar Hambat Minimum (KHM) dan
Kadar Bunuh Minimum (KBM) dari zat antimikroba.Metode ini menggunakan
satu seri tabung reaksi yang diisi media cair dan sejumlah mikroba uji.Tabung
diuji dengan zat antimikroba yang telah diencerkan secara serial.Seri tabung
diinkubasi pada suhu ± 37oC selama 18-24 jam dan diamati terjadinya kekeruhan
pada tabung.Selanjutnya biakan dari semua tabung yang jernih diinokulasikan
pada media agar padat, diinkubasikan pada suhu ± 37oC selama18-24 jam.Lalu
diamati ada tidaknya mikroba yang tumbuh (Dzen, 2003).
2.7 Mekanisme Kerja Antibakteri
Berbagai faktor yang mempengaruhi penghambatan mikroorganisme mencakup
kepadatan populasi mikroorganisme, kepekaan terhadap bahan antimikroba,
volume bahan yang disterilkan, lamanya bahan antimikroba diaplikasikan pada
mikroorganime, konsentrasi bahan antimikroba, suhu dan kandungan bahan
organik (Lay, 1994).
Semua substansi yang diketahui memiliki kemampuan untuk menghalangi
pertumbuhan organisme lain khususnya mikroorganisme disebut sebagai
antibiotik.
Antibiotik berdasarkan spektrum atau kisaran kerja dapat diklasifikasikan
menjadi antibiotik berspektrum sempit (narrow spectrum) yang hanya mampu
21
menghambat atau membunuh segolongan jenis bakteri saja dan antibiotik
berspektrum luas (broad spectrum) yang dapat menghambat atau membunuh
bakteri dari golongan gram positif maupun gram negatif.
Berdasarkan mekanisme kerja, antibiotik dibedakan menjadi lima, yaitu
antibiotik dengan mekanisme penghambatan sintesis dinding sel, perusakan
membran plasma, penghambatan sintesis protein, penghambatan sintesis asam
nukleat dan penghambatan sintesis metabolit esensial (Pratiwi, 2008).
2.8 Proses Pewarnaan Bakteri Gram Positif dan Bakteri Gram Negatif
Langkah dalam proses pewarnaan bakteri Gram positif dan bakteri Gram-
negatif dapat dilakukan dalam beberapa langkah yang ditunjukkan dalam Tabel
2.1 di bawah ini.
Tabel 2.1 Proses pewarnaan bakteri Gram-positif dan Gram negatif

Prosedur Pewarnaan Gram Gram positif Gram negatif
1. Ungu kristal Gram (suatu Ungu tua (partikel Ungu tua (partikel zat
partikel zat warna kecil). zat warna kecil) warna kecil)
2. Iodium Gram (suatu bahan Ungu tua Ungu tua (kompleks
yang menyebabkan (kompleks zat zat warna besar)
terbentuknya kompleks atau warna besar)
mordant).
3. Pengaburan warnaalkohol Ungu Tidak berwarna
aseton.
4. Counterstain (zat warna Ungu/biru Merah/merah muda
tandingan) Safranin (zat
warna merah pucat).
22
BAB III
METODE PENELITIAN
Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimental meliputi
pengumpulan tumbuhan, identifikasi tumbuhan, pengolahan tumbuhan,
pemeriksaan karakteristik simplisia, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak secara
maserasi, pembuatan larutan uji dengan berbagai konsentrasi dan uji aktivitas
antibakteri dari ekstrak etanol bayam duri (Amaranthus spinosus L.) terhadap
pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Pengujian aktivitas
antibakteri dilakukan dengan metode difusi agar menggunakan pencadang kertas.
3.1Alat
Alat-alat yang digunakan dilaboratorium fitokimia dan mikrobiologi fakultas
farmasi USU: oven (Memmert), lemari asam, lemari pendingin (Toshiba), lemari
pengering, 23unsen2323r (Memmert),laminar air flow (Astec HLF 1200
L),autoklaf (Express), alat tanur, kompor gas (Rinnai), penguap putar(Haake D),
spektrofotometer visible (Dynamikca HALO Vis-10), analitik (Mettler AE200),
hot plate, blender (Philips), alat vortex, cawan petri (Anumbra), mikroskop
(23unsen23), mikro pipet (Eppendorf), alat-alat gelas, alat penetapan kadar air,
penangas uap, lampu 23unsen, jangka sorong, cawan penguap, jarum ose.
3.2 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun bayam duri
(Amaranthus spinosus L.) bahan dari laboratorium fitokimia fakultas farmasi
USU: α-naftol, amil 23ethano, asam nitrat pekat, asam asetat anhidrida, asam
23
asetat anhidrat, asam klorida pekat, asam klorida 2N, asam sulfat pekat, besi (III)
klorida, bismuth nitrat, iodium, kalium 24ethan, kloralhidrat, n-heksan, raksa (II)
klorida, serbuk magnesium, 24ethano. Bratachem : etanol 96%, etanol 70%.
Rudang Jaya: akuades, dimetilsulfoksida (DMSO), isopropanol, kloroform,
24ethanol, Pb Asetat 0,4M. Laboratorium mikrobiologi fakultas farmasi USU:
Nutrient Agar (NA) (Merck), Nutrient Broth (NB) (Merck).
3.3 Bakteri Uji
Bakteri yang digunakan adalah Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan
Escherichia coli ATCC 25922 diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
Farmasi USU.
3.4Penyiapan Bahan Tumbuhan
3.4.1 Pengumpulan Bahan Tumbuhan
Bayam duri diambil dari Desa Bakkaran Tebing Tinggi Provinsi Sumatera
Utara.Tanggal 8 Agustus 2018
3.4.2Identifikasi Bahan Tumbuhan
Identifikasi sampel (daun) dilakukan di Laboratorium Herbarium
Medanense, Departemen Biologi FMIPA USU.
3.4.3Pengolahan Tumbuhan
Bagian yang digunakan adalah daun bayam duri. Daun dibersihkan dari
kotoran yang melekat, dicuci dengan air bersih, ditiriskan, ditimbang berat basah,
kemudian dikeringkan di lemari pengering hingga kering. Daun telah kering
apabila sudah rapuh (bila diremas menjadi hancur) kemudian simplisia
dihaluskanmenggunakan blender sehingga menjadi serbuk simplisia. Serbuk
24
simplisia disimpan dalam wadah plastik tertutup rapat dan terlindung dari cahaya
matahari.
3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
3.5.1 Pemeriksaan Makroskopik
Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan mengamati bentuk, ukuran
dan warna dari simplisia (Ditjen POM, 1979).
3.5.2Pemeriksaan Mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia. Serbuk
simplisia ditaburkan di atas kaca objek, bahan dapat dijernihkan lebih dahulu
dengan larutan kloralhidrat (Ditjen POM, 1979).
3.5.3 Penetapan Kadar Air
Penetapan kadar air simplisia dilakukan dengan metode Azeotropi
(destilasi toluen).
a. Penjenuhan toluen
Sebanyak 200 mL toluen dan 2 mL air suling dimasukkan ke dalam labu
alas bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian didestilasi selama 2
jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume
air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 mL (WHO, 1992).
b. Penetapan kadar air simplisia
Kadar air= Volume II -Volume IBerat sampel x 100%
Dimasukkan 5 g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama ke dalam
labu alas bulat yang berisi toluen yang telah dijenuhkan, kemudian dipanaskan
hati-hati selama 15 menit. Setelah toluen mendidih, kecepatan tetesan diatur 2
tetes untuk tiap detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan
25
destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik. Setelah semua air terdestilasi, bagian
dalam pendingin dibilas dengan toluen.
Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan
mendingin pada suhu kamar. Setelah air dan toluen memisah sempurna, volume
air dibaca dengan ketelitian 0,05 mL. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai
dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air
dihitung dalam persen (WHO, 1992).
3.5.4 Penetapan Kadar Sari Larut Air
Berat sari 100

Kadar sari= x 20 x 100%
Berat sampel
Sebanyak 5 g serbuk yang telah dikeringkan, dimaserasi selama 24 jam
dalam 100 mL air-kloroform (2,5 mL kloroform dalam air suling 1000 mL) dalam
labu bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, dibiarkan selama
18 jam, kemudian disaring. Diuapkan 20 mL filtrat sampai kering dalam cawan
penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan
pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam air
dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).
3.5.5 Penetapan Kadar Sari Larut Etanol
Berat sari 100

Kadar sari= x 20 x 100%
Berat sampel
Sebanyak 5 g serbuk simplisia yang telah dikeringkan dimaserasi selama
24 jam dalam 100 mL etanol 95% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali
selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, disaring, lalu 20 mL
filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan penguap berdasar rata yang telah
ditara dan sisanya dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar sari
26
larut dalam etanol dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan diudara
(Depkes RI, 1995).
3.5.6 Penetapan Kadar Abu Total
Berat abu
Kadar abu= x 100%
Berat sampel
Sebanyak 2 g serbuk yang telah digerus dan ditimbang
seksamadimasukkan dalam krus platina atau krus silikat yang telah dipijar dan
ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis,
pemijaran dilakukan pada suhu 600 oC selama 3 jam, kemudian didinginkan dan
ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang
telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).
3.5.7 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam
Abu yang telah diperoleh dalam penetapan abu didinginkan dengan 25 mL
asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam
dikumpulkan, disaring dengan kertas masir atau kertas saring bebas abu, dicuci
dengan air panas, dipijarkan sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan
ditimbang (Depkes RI, 1995).
3.6Pembuatan Larutan Pereaksi
3.6.1Larutan Pereaksi Mayer
Campurkan 60 ml larutan raksa(II) klorida P 2,266% b/v dan 10 ml larutan
kalium iodida Larutan dikocok dan ditambahkan air secukupnya hingga 100 ml
(Depkes RI, 1995).
3.6.2 Larutan Pereaksi Dragendorff
Campurkan 20 ml larutan bismuth nitrat P 40% b/v dalam asam nitrat P
dengan 50 ml kalium iodida P 54,4% b/v, diamkan sampai memisah sempurna.
27
ambil larutan jernih dan encerkan dengan air secukupnya hinggal 100 ml (Depkes
RI, 1995).
3.6.3Larutan pereaksi Bouchardat
Sebanyak 2 g iodium dan 4 g kalium iodida P dalam air secukupnya
hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.6.4 Larutan Pereaksi Liebermann-Burchard
Campurkan 5 bagian volume asam sulfat P dengan 50 bagian volume
etanol 95% P. tambahkan hati-hati 5 bagian volume asetat anhidrida kedalam
campuran tersebut, dinginkan (Depkes RI, 1995).
3.6.5 Larutan Pereaksi Molish
Larutan α-naftol 3g dalam asam nitrat 0,5 N secukupnya hingga diperoleh
larutan 100ml (Depkes RI, 1995).
3.6.6 Larutan Pereaksi Besi (III) Klorida 1% (b/v)
Sebanyak 1g besi (III) klorida dilarutkan dalam air suling hingga diperoleh
larutan 100 ml kemudian disaring (Depkes RI, 1995).
3.6.7 Larutan Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M
Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat ditimbang, kemudian dilarutkan dalam
air suling bebas karbondioksida hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.6.8 Larutan Pereaksi Asam Klorida 2 N
Cara pembuatan
Sebanyak 7,293 g diencerkan dengan air sampai 100 ml (Depkes RI,
1995).
3.6.9 Larutan Kloralhidrat
Sebanyak 50 g kloralhidrat dilarutkan dalam 20 ml air suling (Depkes RI,
1995).
28
3.7 Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia ekstrak daun bayam duri meliputi pemeriksaan senyawa
alkaloid, saponin, flavonoid, tanin, glikosida, dan steroid/triterpenoid.Dapat
dilihat pada lampiran
3.7.1 Pemeriksaan Alkaloid
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml
asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2
menit, didinginkan lalu disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan berikut :
a. diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi mayer
b. diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi bouchardat
c. diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi dragendorff
Alkaloida dianggap positif jika terjadi endapan atau paling sedikit dua atau
tiga dari percobaan diatas (Depkes RI, 1995).
3.7.2 Pemeriksaan Glikosida
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 3 g kemudian disari dengan 30 mL
campuran 7 bagian volume etanol 95% dan 3 bagian volume air. Direfluks selama
30 menit, lalu didinginkan dan disaring. Diambil 20 mL filtrat ditambahkan 25
mL air suling dan 25 mL timbal (II) asetat 0,4 M, lalu dikocok selama 5 menit dan
disaring. Kemudian filtrat disari dengan 20 mL campuran 3 bagian kloroform dan
2 isopropanol dilakukan berulang sebanyak tiga kali. Kumpulan sari air diuapkan
pada temperature tidak lebih dari 50oC.
Sisanya dilarutkan dalam 2 mL metanol. Larutan sisa digunakan untuk
percobaan berikut, yaitu 0,1 mL larutan percobaan dimasukkan ke dalam tabung
reaksi, diuapkan di penangas air. Sisa dilarutkan dalam 2 mL air suling dan 5 tetes
29
pereaksi Molish, kemudian secara perlahan ditambahkan 2 mL asam sulfat pekat.
Glikosida positif jika terbentuk cincin ungu (Depkes RI, 1995).
3.7.3 Pemeriksaan Saponin
Sebanyak 0,5 g sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan
ditambahkan 10 mL air panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama
10 detik, timbul busa yang mantap tidak kurang dari 10 menit setinggi 1 sampai
10 cm, pada penambahan 1 tetes asam klorida 2N, buih tidak hilang (Depkes RI,
1995).
3.7.4 Pemeriksaan Flavonoid
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia kemudian ditambahkan 10 mL
airpanas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, filtrat
yang diperoleh kemudian diambil 5 mL lalu ditambahkan 0,1 g serbuk Mg dan 1
mL asam klorida pekat dan 2 mL amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah.
Flavonoid positif jika terjadi warna merah, kuning, jingga pada lapisan amil
alkohol (Farnsworth, 1966).
3.7.5 Pemeriksaan Tanin
Cara pembuatan
Sebanyak 0,5 g sampel disari dengan 10 mL air suling, disaring lalu
filtratnya diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Filtrat yang
diperoleh, diambil 2 mL larutan lalu ditambahkan 1 sampai 2 tetes pereaksi besi
(III) klorida. Terbentuknya warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya
tanin (Farnsworth, 1966).
3.7.6Pemeriksaan Steroid/Triterpenoid
Sebanyak 1 g sampel dimaserasi dengan n-heksana selama 2 jam, lalu
disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap, pada sisa ditambahkan 2 tetes
30
asam asetat anhidrida dan 1 tetes asam sulfat pekat. Timbul warna biru atau hijau
menunjukkan adanya steroid dan timbul warna merah, pink atau ungu
menunjukkan adanya triterpenoid (Farnsworth, 1966).
3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Bayam duri
Serbuk simplisia diekstraksi dengan cara maserasi dengan menggunakan
pelarut etanol 70%, simplisia daun bayam duri ditimbang sebanyak 300g
dimasukkan dalam toples kaca dan direndam dengan 75 bagian etanol 70%,
ditutup, dibiarkan selama 5 hari terlidung dari cahaya sambil sering diaduk,
saring, peras, cuci ampas dengan cairan penyari secukupnya, hingga diperoleh
100 bagian, dibiarkan selama 2 hari terlindung dari cahaya, disaring(Ditjen POM,
1979).
3.9 Pembuatan Media untuk Bakteri Uji
3.9.1Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)
Komposisi :‘Lab-Lemco’ powder 1 g, yeast extract 3 g, peptone 5 g,
sodium chloride 5 g, agar 15 g.
Cara pembuatan:
Sebanyak 20 g serbuk NA dilarutkan dalam 1 L air suling steril kemudian
dipanaskan sampai semua bahan larut sempurna, kemudian disetrilkan di autoklaf
pada suhu 121oC selama 15 menit (Merck, 2016).
3.9.2Pembuatan Media Nutrient Broth (NB)
Komposisi : ‘Lab-Lemco’ powder 1 g, yeast extract 2 g, peptone 5 g,
sodium chloride 5 g. Sebanyak 13 g serbuk NB dilarutkan dalam 1 L air suling
31
steril dan dipanaskan sampai semua bahan larut sempurna, kemudian disterilkan
di autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit (Merck, 2016).
3.9.3Pembuatan Media Agar Miring
Tabung reaksi yang berisi medium agar sebanyak 3 ml di sterilkan di
autoklaf, kemudian dibaringkan horizontal. Setelah medium mengental, dan
tabung reaksi di tegakkan, diperoleh medium miring (Dwidjoseputro, 1978).
3.10Pembiakan Bakteri
3.10.1 Pembuatan Stok Kultur Bakteri
Satu koloni bakteri diambil dengan jarum ose steril, lalu diinokulasikan
pada permukaan media agar miring dengan cara menggores, kemudian
diinkubasikan pada suhu 37oC selama 24 jam (Ditjen POM, 1995).
3.10.2 Pembuatan Inokulum Bakteri
Cara pembuatan
Kultur bakteri yang telah tumbuh diambil dengan menggunakan jarum ose
steril, kemudian disuspensikan ke dalam 10 ml larutan NB steril lalu
diinkubasikan pada suhu 37oC selama 2 jam sampai didapat kekeruhan yang sama
dengan McFarland No. 0,5. Prosedur dilakukan pada kedua bakteri uji (Ditjen
POM, 1995).
3.10.3 Pembuatan Suspensi Standar McFarland No. 0,5
Komposisi : Larutan BaCl2 0.048M sebanyak 0,5 ml, larutan H2SO4 0.18
M 99,5 ml. kedua larutan dicampurkan kedalam tabung reaksi steril, dikocok
sampai homogen dan ditutup. Apabila kekeruhan hasil suspensi bakteri sama
dengan standar McFarland maka konsentrasi bakteri 108 CFU/ml (McFarland,
2010).
32
3.11Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam uji aktivitas antibakteri ini disterilkan
lebih dahulu sebelum dipakai. Media, gelas ukur dan tutup vial disterilkan di
autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit dan alat-alat gelas (cawan petri,
elenmeyer, gelas beker dan vial) disterilkan di oven pada suhu 170 oC selama 1
jam. Jarum ose dipijar dengan lampu bunsen (Pratiwi, 2008).
3.12Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol Daun Bayam DuriDengan

Berbagai Konsentrasi
Sebanyak 5 g ekstrak daun bayam duri dimasukkan kedalam vial, lalu
ditambahkan dimetil sulfoksida (DMSO) hingga volume total 10 ml, diaduk
hingga larut, diperoleh konsentrasi 500 mg/ml atau 50% (b/v), kemudian dibuat
pengenceran dengan konsentrasi 400 mg/ml, 300 mg/ml, 200 mg/ml, 100 mg/ml,
90 mg/ml, 80 mg/ml, 70 mg/ml, 60 mg/ml, 50 mg/ml, 40 mg/ml, 30 mg/ml, 25
mg/ml, 20 mg/ml, 19 mg/ml, 18 mg/ml, 17 mg/ml, 16 mg/ml, 15 mg/ml dan 10
mg/ml.
3.13 Uji aktivitas Antibakteri Terhadap Ekstrak Etanol DaunBayam Duri
Sebanyak 0,1 mL inokulum dimasukkan ke dalam cawan petri steril, dan
setelah itu dituang media NA sebanyak 15 mL, selanjutnya cawan digoyang di
atas permukaan meja agar media dan suspensi bakteri tercampur rata. Pada media
yang telah padat diletakkan pencadang kertas yang telah direndam 15 menit dalam
larutan uji ekstrak etanol daun bayam duri dengan berbagai konsentrasi, kemudian
diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37oC selama 21 jam, lalu diukur diameter
daerah hambatan (zona yang tidak ditumbuhi bakteri) di sekitar pencadang kertas
dengan menggunakan jangka sorong (Ditjen POM, 1995).
33
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Identitas Tumbuhan
Identifikasi sampel (daun) dilakukan di Laboratorium Herbarium
Medanense, Departemen Biologi FMIPA USU menunjukkan bahwa tumbuhan
yang digunakan pada penelitian adalah Amaranthus spinosus L. suku
Amaranthaceae . Hasil identifikasi dapat dilihat pada Lampiran 1, halaman46.
4.2 Hasil Karakteristik
4.2.1 Bentuk Makroskopik
Pemeriksaan makroskopik simplisia yaitu daun berbentuk bular telur,lemas
panjang,5 cm ujung tumpul,pankal runcing serta berwarna hijau.Hasil
pemeriksaan dapat dilihat pada Lampiran 2 halaman 47.
4.2.2 Bentuk Mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia menunjukkan stomata tipe
diastitik dan memiliki bentuk ca oksalat yang berbentuk druse. Hasil pemeriksaan
mikroskopik dapat dilihat pada Lampiran 4, halaman 49.
4.2.3 Karakteristik Simplisia.
Hasil pemeriksaan kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol, kadar abu
total dan kadar abu tidak larut asam serbuk simplisia dari daun bayam
duri(Amaranthus spinosus L) dapat dilihat pada Tabel 3.1.
34
Tabel 3.1 Hasil pemeriksaan kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol,
kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam serbuk simplisia daun
bayam duri
No Karakteristik Hasil (%)
1 Kadar air 8,42
2 Kadar sari larut air 15,95
3 Kadar sari larut etanol 19.98
4 Kadar abu total 6,6
5 Kadar abu tidak larut asam 0,32
Penetapan kadar air pada simplisia dilakukan untuk mengetahui jumlah air
yang terdapat di dalam simplisia tersebut. Hasil yang diperoleh dari penetapan
kadar air kurang dari 10% yaitu 8,42%. Kadar air yang melebihi 10% dapat
menjadi media yang baik untuk pertumbuhan jamur.
Penetapan kadar sari larut air dilakukan untuk mengetahui jumlah senyawa
yang bersifat polar yang dapat tersari dalam pelarut air. Kadar sari larut air yang
diperoleh adalah 15,95%.
Penetapan kadar sari larut etanol dilakukan untuk mengetahui jumlah
senyawa yang bersifat polar maupun non polar yang dapat tersari dalam pelarut
etanol.
Hasil yang diperoleh dari penetapan kadar sari larut etanol adalah
19,98%. Penetapan kadar abu total dilakukan untuk mengetahui jumlah mineral
yang terdapat pada sampel. Kadar abu total yang diperoleh adalah 6.6 %.
Penetapan kadar abu tidak larut asam dilakukan untuk mengetahui jumlah
mineral yang tidak larut dalam asam seperti silikat pasir atau tanah. Kadar abu
tidak larut asam 0,32.
Hasil perhitungan karakteristik simplisia dapat dilihat pada Lampiran 5,
halaman 53-57.
35
4.3 Ekstrak Daun Bayam Duri
Ekstrak etanol daun bayam duri yang diperoleh dari hasil penyarian 300 g
serbuk simplisia sebanyak 30,03 g dengan rendemen sebesar 12%.
4.4 Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak
Hasil skrining fitokimia simplisia dan ekstrak daun bayam duri dapat
dilihat pada Tabel 3.2.
Tabel 3.2 Skrinning simplisia dan ekstrak etanol daun bayam duri
No Senyawa metabolit sekunder Simplisia Ekstrak
1 Alkaloid + +
2 Flavonoid + +
3 Saponin + +
4 Tannin + +
5 Steroid + +
6 Glikosida + +
Keterangan : + = mengandung senyawa metabolit sekunder
- = tidak mengandung senyawa metabolit sekunder
Tabel 3.2 menunjukkan adanya senyawa flavonoid, alkaloid, saponin,
tanin, glikosida dan steroid pada daun bayam duri.Hasil yang diperoleh sesuai
dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Faridah (2013) bahwa ekstrak daun
bayam duri mengandung senyawa metabolit sekunder alkaloid, saponin dan
flavonoid. Berdasarkan penelitian Faridah (2013) ekstrak daun bayam duri
mengandung saponin dan flavonoid, dimana metabolit sekunder tersebut
berfungsi sebagai agen antibakteri.
4.5 Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Bayam Duri Amaranthus
spinosus L. Terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
Uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa ekstrak daun bayam duri

dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Escherichia
coli.Hasil antibakteriv dapat dilihat pada Tabel 3.3.
36
Tabel 3.3 Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun bayam duri
Amaranthus spinosus Lterhadap Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli.
Konsentrasi Diameter daerah hambat pertumbuhan bakteri (mm)
ekstrak daun
bayam duri Staphylococcus aureus Escherichia coli
(mg/ml) D* D*
500 15,26 17,86
400 14,06 16,55
300 12,13 15,55
200 11,28 14,33
100 10,71 13,12
50 06,41 06,29
Blanko - -
Keterangan : * = hasil rata-rata tiga kali pengukuran
- = tidak ada hambatan
(Blanko) = DMSO 10%
Penentuan aktivitas antibakteri dilakukan dengan menggunkan metode
difusi agar menggunakan pencadang kertas sebab lebih praktis namun tetap
memberikan hasil yang diharapkan.Prinsip dari metode ini adalah pengukuran
diameter area jenuhsekitar pencadang kertas.Area jernih ini mengindifikasikan
adanya hambatan pertumbuhan mikrooranisme dan agen antimikroba pada media
agar (Pratiwi, 2008)
Menurut Depkes RI (1995) diameter daerah hambat antibakteri yang
paling efektif terhadap uji antibakteri adalah 13 sampai 16 mm.Ekstrak etanol
daun bayam duri memiliki aktivitas antibakteri pada konsentrasi 400 mg/ml untuk
Staphylococcus aureus dankonsentrasi 100 mg/ml untuk Escherichia colidengan
diameter daerah hambat adalah 14,06 mm dan 13,12 mm. Konsentrasi terkecil
yang mampu menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus adalah 50 mg/ml
dengan diameter 06,41 mm dan Escherichia coli 50 mg/ml dengan diameter 06,29
mm, menggunakan DMSO 10% sebagai blanko.
37
Berdasarkan hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli memperlihatkan bahwa semakin
tinggi konsentrasinya semakin besar diameter daerah hambat bakteri. Menurut
Hastari (2012)digunakan dimethyl-sulfoxide dengan konsentrasi 10% karena pada
konsentrasi ini DMSO tidak mampu menghambat pertumbuhan bakteri. Hasil uji
aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun bayam duri dapat dilihat pada Lampiran
13, halaman 58.
Hasil skring fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun bayam duri
mengandung golongan senyawa kimia berupa steroid/triterpenoid,
flavonoid,saponin, glkosida, dan tannin. Senyawa metabolit sekunder tersebut
memiliki aktivitas antibakteri dengan mekanisme yang berbeda-beda.
Alkaloid memiliki aktivitas antibakteri melalui mekanisme yang diduga
adalah dengan cara mengganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel
bakteri, sehingga lapisan dindingsel tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan
kematian sel
tersebut (Silvia, 2015).
Menurut Karlina (2013) mekanisme saponin sebagai antibakteri adalah
dengan cara merusak membran sel bakteri akibat terjadinya peningkatan
permeabilitas membran oleh karena saponin yang berinteraksi dengan dinding sel
bakteri. Rusaknya membran sel bakteri menyebabkan bocornya membran sel
bakteri dan akhirnya komponen penting dari dalam sel bakteri akan keluar.
Menurut Robinson (1995), flavonoid merupakan senyawa kimia yang
memiliki potensi sebagai antibakteri. Flavonoid merupakan kelompok senyawa
fenol yang mempunyai kecenderungan untuk mengikat protein, sehingga
mengganggu proses metabolism bakteri, selain itu flavonoid juga berfungsi
38
sebagai antibakteri dengan cara membentuk senyawa kompleks terhadap protein
ekstraseluler sehingga mengganggu integritas membrane sel bakteri.
Mekanisme triterpenoid sebagai antibakteri adalah bereaksi dengan protein
transmembran pada membrane luar dinding sel bakteri, membentuk ikatan
polimer yang kuat sehingga mengakibatkan rusaknya protein. Senyawa terpenoid
mudah larut dalam lipid, sifat inilah yang mengakibatkan senyawa ini mudah
menembus dinding sel bakteri gram positif dan gram negative (Ferawaty, 2012)
39
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun bayam duri terhadap
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli diperoleh kesimpulan, yaitu:
a) Ekstraksidaun bayam duri memenuhi persyaratan Farmakope Herbal
Indonesia dengan hasil karakterisasi serbuk simplisia daun bayam duri
diperoleh kadar air 8,42 %, kadar sari yang larut dalam air 15.95%, kadar sari
yang larut dalam etanol 19,98%, kadar abu total 6,6% dan kadar abu yang
tidak larut dalam asam 0,32%.
b) Serbuk simplisia dan ekstrak daun bayam duri menunjukkan adanya senyawa
flavonoid, alkaloid, saponin, tanin, glikosida dan steroid.
c) Ekstrak etanol daun bayam duri mempunyai aktivitas antibakteri. Aktivitas
antibakteri ekstrak etanol daun bayam duri terhadap Staphylococcus aureus
adalah pada konsentrasi 400 mg/ml dengan diameter daerah hambat 14,06
mm, dan Escherichia coli adalah konsentrasi 100 mg/ml dengan diameter
daerah hambat 13,12 mm.
5.2 Saran
Peneliti selanjutnya disarankan untuk melakukan pengujian antibakteri daun
bayam duri (Amaranthus spinosus L.) dengan metode ekstrasi secara fraksinasi
dan isolasi.
40
DAFTAR PUSTAKA
Agoes, A. 2010.Tanamanobat Indonesia. Jilid II. Jakarta. Salemba medika.

Halaman 17- 18.
Angelica, N. 2013.Aktivitas Antimikroba Ekstrak Daun Soma (Ploiarium
Alternifolium Melch) Terhadap Jamur Malassezia furfur dan Bakteri
Staphylococcus aureus.Surabaya: Jurnal Ilmiah Mahasiswa Universitas
Surabaya. 2(2):6.
Depkes RI. 1995.Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen
Kesehatan RI. Halaman 1-6, 323-325.
Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Cetakan
Pertama. Jakarta. Departemen Kesehatan RI. Halaman 1, 9-10.
Ditjen POM. 1979. Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Departemen
Kesehatan RI. Halaman 91.
Ditjen POM. 1995. Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen
Kesehatan RI. Halaman 7-8,854-855,891.
Dwidjoseputro, D. 1978. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Penerbit
Djambatan. Halaman 17, 103-119
Dzen, S.M., Santoso, S., Roekistiningsih., dan Winarsih S. 2003. Bakteriologi
Medik. Malang: Bayumedia Publishing. Halaman 31-32, 120.
Farnsworth, N.R. 1966. Biological and Phytochemical Screening of
Plants.Journal of Pharmaceutical Science.55(3):262-264.
Ferawaty, A.S., Agus, S., dan Delianis, P. (2012).Potensi Antibakteri Ekstrak
Rumput Laut Terhadap Bakteri Penyakit Kulit Psedumonas aerufinosa,
Staphylococcus epidermis, dan Micrococcus luteus.Journal of Marine
Research. 1(2): 152-155.
Gazali, A. M. F., Syariful, A., dan Akhmad, K. 2016.Isolasi Senyawa Antibakteri
Ekstrak Etanol Akar Krokot (Portulaca oleraceaLinn) Menggunakan
Bakteri Uji Staphylococcus aureus.Online Jurnal of Natural Science Vol
5(1): 49.
Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia. Penuntun Cara Modern Menganalisa
Tumbuhan. Terjemahan Kosasih Padmawinata. Edisi II. Bandung: ITB
Press. Halaman 69, 102-103, 147-149, 234.
Hastari.2012. Uji aktivitas antibakteri ekstrak pelepah dan batang tanaman pisang
ambon. Skripsi.Fakultas kedokteran. Semarang. UNDIPpress.
Heni., Savante, A., dan Titin, A. 2015. Efektivitas antibakteri ekstrak kulit batang
belimbing hutan (baccaurea angulata merr.) terhadap Staphylococcus
aureus dan Escherichia coli.JKK.4(1).Halaman 84.
Jawetz, E. Melnick. J . L. 1995. Mikrobiologi Kedokteran. ed. 20, University of
California, San Francisco. Halaman 115-117.
Jawetz, E. Melnick.J . L. 2001. Mikrobiologi Kedokteran. Edisi Kedua puluh.
Jakarta: Penerbit EGC. Halaman 239-240, 259.
Karlina. C. Y,.Muslimin, I dan Guntur, T. 2013.Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Herba Krokot (Portulaca Oleracea L.) TerhadapStaphylococcus aureus
dan Escherichia coli.ejournal LenteraBio. 2(1): 88.
Markham, K.R. 1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid. Bandung : ITB.Hal. 56.
Mursito.(2001). Ramuan Tradisional Untuk Kesehatan Anak. Jakarta: Penebar
Swadaya. Hal. 26.
41
Merck KgaA. 2016. Merck millipore. http:/www.merck-chemical.com diakses 20
November 2018.Halaman 45.
Oxoid. 2013. Nutrient Agar and Nutrient Browth. England: Oxoid LTD. Halaman
34.
Pelczar, M.J., dan Chan, E.C.S. 1986. Dasar-Dasar Mikrobiologi.
Penterjemah:Ratna, S.H., T. Imas, S. S. Tjitrosomo dan S. L. Jakarta: UI
Press. Halaman 144.
Pratiwi, S. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga. Halaman 24, 29-30,
106-108, 110, 138, 174.
Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi VI.
Bandung:Penerbit ITB. Halaman 72, 157, 191.
Silvia., Savante, A., Muhamad, A. 2015. Aktivitas Antimikroba Ekstrak Daun
Soma (Ploiarium Alternifolium Melch) Terhadap Jamur Malassezia furfur
dan Bakteri Staphylococcus aureus. JKK: 4(3):89-91.
SNI. 2009. Batas Maksimum Cemaran Mikroba Dalam Pangan. Badan Standar-
isasi Nasional. Halaman 25, 31.
Syamsuni, H.A. 2006.Ilmu Resep. Editor Ella Elviana dan Winny R.
Syarief.Jakarta: EGC. Halaman 243,249.
Tyler, E., Brady, L.R., Robber, J.E. 1976. Pharmocognosy. Edisi
kesembilan.Philadelphia: Lea and Febiger Publisher. Halaman 197-200.
Volk, W.A. dan Wheeler, M.F. 1993. Mikrobiologi Dasar. Jilid I. Alih
Bahasa:Markam. Jakarta: Erlangga. Halaman 33-40, 218-219, 266.
Waluyo, L. (2010). Teknik dan Metode Dasar Mikrobiologi. Malang: UMM
Press. Halaman 128-133
Winarto, P. 2003. Tanaman obat untuk mencegah SARS. Bogor: Penebar
swadana. Halaman 50-51.
World Health Organization. 1992. Quality Control Methods For Medical Plant
Materils. Journal of WHO.92(4): 24-25.
42
Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan
43
Lampiran 2. Gambar Tumbuhan Bayam Duri Dan Daun Bayam Duri
Tumbuhan bayam duri
Daun bayam duri
44
Lampiran 3. Serbuk Simplisia Daun Bayam Duri
45
Lampiran 4. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik Serbuk Simplisia Daun Bayam
Duri
Keterangan :
1.Tipe stomata diasitik
2.Bentuk Ca oksalat berbentuk druse
46
Lampiran 5. Bagan Kerja Penelitian
Daun Bayam Duri

dipisahkan dari pengotor
dicuci dan ditiriskan
ditimbang berat basahnya
dikeringkan dalam lemari pengering
pada suhu 40-50°C
ditimbang berat keringnya
Simplisia (500 g)
diperiksa secara organoleptis

dihaluskan dengan blender
disimpan dalam wadah yang tertutup
rapat sebelum digunakan
Serbuk simplisia (500 g)
Karakteristik Skrining fitokimia Ekstrak
1. Makroskopik Senyawa golongan :

2. Mikroskopik 1. Alkaloid
3. Kadar air 2. Flavonoid
4. Kadar sari larut 3. Glikosida
dalam air 4. Saponin
5. Kadar sari larut 5. Steroid/Triterpenoid.
dalam etanol 6. Tanin
6. Kadar abu total
7. Kadar abu tidak
larut asam
47
Lampiran 6. Bagan Pembuatan Ekstrak Daun Bayam Duri
300 g serbuk simplisia

dimasukkan ke dalam wadah
ditambahkan dengan 75 bagian etanol 96%
dan ditutup rapat
dibiarkan selama 5 hari terlindung dari
cahaya matahari, sambil sesekali diaduk
disaring
Filtrat I Ampas
ditambahkan 25 bagian etanol
96% hingga diperoleh 100
bagian
disaring
Filtrat II Ampas
digabung filtrat I dengan filtrat II
dibiarkan selama 2 hari sambil sesekali
diaduk
didekantasi
dipekatkan dengan rotary evaporator
Ekstrak bayam duri
uapkan di penangas uap
Ekstrak kental
Skrining Fitokimia Uji aktivitas antibakteri
Senyawa golongan : Hasil

1. Alkaloid
2. Flavonoida
3. Glikosida
4. Saponin
5. Steroid/Triterpenoid
6. Tanin
48
Lampiran 7. Bagan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Bayam Duri
Biakan murni bakteri
diambil dengan jarum ose steril

digores pada media nutrient agar miring
diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam
Stok kultur bakteri
diambil dengan jarum ose steril

disuspensikan dalam 10 ml media nutrient
broth steril dan inkubasi selama ± 2 jam
divorteks hingga diperoleh kekruhan yang
sama dengan standar Mc. Farland 108
CFU/ml
Suspensi bakteri 108
dipipet 0,1 ml ke dalam tabung reaksi

ditambahkan 9,9 ml media nutrient broth
steril dan divorteks hingga homogen
Suspensi bakteri 106
dipipet 0,1 ml ke dalam cawan petri

ditambahkan 15 ml media nutrient agar ke
dalam cawan petri
dihomogenkan dan dibiarkan hingga
memadat
Media padat
diletakkan pencadang kertas yang telah

ditetesi 0,1 ml larutan uji dengan berbagai
konsentrasi dan pelarut DMSO sebagai
kontrol pelarut
diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam
diukur diameter daerah hambatan di sekitar
pencadang kertas dengan menggunakan
jangka sorong
Hasil
49
Lampiran 8. Perhitungan Penetapan Kadar Air Simplisia Daun Bayam Duri
Penjenuhan dengan 2 ml akuades
Volume penjenuhan = 1,8 ml
a. Berat sampel = 5,01 g
Volume I = 3,4 ml
Volume II = 4,4 ml
3,4 ml-4,4 ml
Kadar air = x 100%=19,98%
5,01 g
b. Berat sampel = 5,09 g
Volume I = 4,4 ml
Volume II = 4,5 ml
4,4 ml-4,5 ml
Kadar air = x 100%=1,99%
5,09 g
c. Berat sampel = 5,01 g
Volume I = 4,5 ml
Volume II = 6,0 ml
4,5 ml-6,0ml
Kadar air = x 100%=3,30%
5,01 g
19,98%+1,99%+3,30%
Kadar air rata-rata = =8,42%
3
Lampiran 9. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Air Simplisia Daun
50
Bayam Duri
Berat sari = 0,15 g
0,15 g 100
Kadar sari = 5,00 g x x 100%=15%
20
Berat sari = 0,16 g
0,16 g 100
Kadar sari = 5,00 g x x 100%=15,96%
20
Berat sari = 0,17 g
0,17 g
Kadar sari = 5,03 g x 100
20
x 100%=16,89%
15%+15,96%+16,89%
Kadar sari rata-rata = =15,95%
3
51
Lampiran 10. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Etanol Simplisia
Daun Bayam Duri
Berat sari = 0,06 g
0,06 g
Kadar sari = 5,00 g x 100
20
x100%=6%
Berat sari = 0,13 g

0,13 g 100
Kadar sari = 5,00 g x x 100%=13%
20
Berat sari = 0,11 g
0,11 gr 100
Kadar sari = 5,02 g x x 100%=10,95%
20
6%+13%+10,95%
Kadar sari rata-rata = =19,98%
3
52
Lampiran 11. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total Simplisia Daun Bayam
Duri
Berat abu = 0,52 g
0,52
Kadar abu = 3,08 x 100%=6,4%
g
Berat abu = 0,47 g

0,47
Kadar abu = 3,04 g x 100%=7,5%
Berat abu = 0,58 g
0,57
Kadar abu = 3,07 x 100%=6%
g
6,4%+7,5%+6%
Kadar abu total rata-rata = =6,6%
3
53
Lampiran 12. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam Simplisia
Daun Bayam Puri
Berat abu = 0,01 g
0,01
Kadar abu = 3,03 x 100%=0,33%
g
Berat abu = 0,01 g

0,01
Kadar abu = 3,04 x 100%=0,32 %
g
Berat abu = 0,01 g
0,01
Kadar abu = 3,07 x 100%=0,33%
g
0,33%+0,32%+0,33%
Kadar abu tidak larut asam rata-rata = =0,32%
3
54
Lampiran 13. Hasil Pengukuran Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri Dari
Ekstrak Etanol Daun Bayam Duri
Konsentrasi Diameter Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri (mm)

Ekstrak Staphlococcus aureus Escherichia coli
(mg/ml) D1 D2 D3 D* D1 D2 D3 D*
500 15,45 15,15 15,20 15,26 18,10 17,95 17,55 17,86
400 13,95 14,10 14,15 14,06 16,40 16,50 16,75 16,55
300 12,10 12,30 12,00 12,13 15,30 15,55 15,80 15,55
200 11,30 11,35 11,20 11,28 14,13 14,32 14,55 14,33
100 10,80 10,60 10,75 10,71 13,30 13,12 12,95 13,12
50 06,50 06,30 06,45 06,41 06,55 06,25 06,13 06,29
Kontrol - - - - - - - -
pelarut
55
Lampiran 14. Gambar Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Bayam Duri Terhadap Bakteri Escherichia coli
A2 F1
A1 C1
E2 D1 D2 B1
C2 F2
E2 B2
Keterangan
A1 dan A2 konsentrasi 500 mg/ml

B1 dan B2 konsentrasi 400 mg/ml
C1 dan C2 konsentrasi 300 mg/ml
D1 dan D2 konsentrasi 200 mg/ml
E1 dan E2 konsentrasi 100 mg/ml
F1 dan F2 konsentrasi 50 mg/ml
56
Lampiran 15. Gambar Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Bayam Duri Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
B1 C1 A2 E2
Blanko
E1 F1
D1 B2
F2 A2
C2 D2
Keterangan
A1 dan A2 konsentrasi 500 mg/ml

B1 dan B2 konsentrasi 400 mg/ml
C1 dan C2 konsentrasi 300 mg/ml
D1 dan D2 konsentrasi 200 mg/ml
E1 dan E2 konsentrasi 100 mg/ml
F1 dan F2 konsentrasi 50 mg/ml
57
Lampiran16.PerhitunganPembuatanVariasiKonsentrasiLarutanUji
1. Konsentrasi 500 mg/ml
3 gram ekstrak
= 500 mg/ml
5 ml pelarut DMSO
 Konsentrasi 500 mg/ml dibuatdenganmelarutkan 3 gram ekstrakdalam 5
ml DMSO
400 mg/ml
x 1 ml = 0,8 ml larutan uji konsentrasi 500 mg/ml
500 mg/ml
 Konsentrasi 400 mg/ml dibuatdari 0,8 ml larutanujikonsentrasi 500 mg/ ml
dandicukupkandengan 0,2 ml pelarut DMSO.
300 mg/ml
500 mg/ml
 Konsentrasi 300 mg/ml dibuatdari 0,6 ml larutanujikonsentrasi 500 mg/ ml
200 mg/ml
400 mg/ml
 Konsentrasi 200 mg/ml dibuatdari 0,4 ml larutanujikonsentrasi400 mg/ ml

100 mg/ml
200 mg/ml
58
Lampiran 17.(Lanjutan)
50 mg/ml
100 mg/ml
59

Staphylococcus Aureus DAN Escherichia Coli SECARA IN VITRO

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi Asli:

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Staphylococcus Aureus DAN Escherichia Coli SECARA IN VITRO

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN

BAYAM DURI (Amaranthus spinosus L.) TERHADAP

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi

(Amaranthus spinous L.) terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. S

Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.Pada kesempatan

menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi.

Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Bapak Dr.Panal

Sitorus,M.Si.,Apt., yang telah meluangkan waktu dan tenaga dalam membimbing

selama masa perkuliahan hingga selesai.Ibu Kepala Laboratorium Farmakognosi

dan Bapak Kepala Laboratorium Mikrobiologi yang telah memberikan fasilitas,

petunjuk dan membantu selama penelitian.

Penulis juga mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga

kepada bapak tercinta,M.Simanjuntak dan Ibunda M.Lumban Tobing serta adik-

bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi

Medan, Januari 2019

Riani Ivana Mei Lintang Simanjuntak

Latar Belakang: Tumbuhan di Indonesia banyak dimanfaatkan oleh masyarakat

Kata kunci: Antibakteri, daun bayam duri, Staphylococcus aureus, Escherichia

Keywords:Antibacterial, thorn spinach leaves, Staphylococcus aureus, Escherichia

JUDUL ............................................................................................... ........... i

1.1 Kerangka Pikir Peneliti ................................................................... ........ 5

1. Hasil Identifikasi Tumbuhan ............................................................. ........ 43

1.1 Latar Belakang

Indonesia merupakan pusat keragaman hayati dunia dan menduduki urutan

terkaya di dunia setelah Brasil. Di Indonesia di perkirakan hidup sekitar 40.000

spesies tumbuhan dimana dari seluruh spesies tumbuhan tersebut diperkirakan

penelitian tentang khasiat tumbuhan obat dan adanya istilah back to

nature.Pendayagunaan obat tradisional merupakan salah satu alternatif untuk

memenuhi kebutuhan penduduk di bidang kesehatan, maka perlu diupayakan

pengenalan, penelitian, pengujian, pengembangan khasiat dan keamanan obat

tradisional (Mursito, 2001).Banyak tumbuh-tumbuhan mengandung golongan

senyawa kimia seperti flavonoid yang menunjukkan sifat antimikroba.Salah satu

tumbuhanyang telah dimanfaatkan oleh masyarakat adalah daun bayam duri.

Bayam duri merupakan tanaman liar. Menurut jurnal penelitian (Faridah,

diperoleh bahwa daunbayam duri mengandung bebeberapa metabolit sekunder

seperti flavonoid, glikosida, steroid/tri terpenoid, saponin dan tanin.

Berdasarkan informasi yang diperoleh peneliti dari masyarakat di Desa

Bakkaran Batu Mala Sore Kota Tebing Tinggi Provinsi Sumatera

Utara,menggunakan bayam duri sebagai obat tradisional untuk mengatasi

dari mikroorganisme seperti bakteri.Penyakit tersebut dapat disembuhkan dengan

menggunakan antibiotik.Penggunaan antibiotik yang tidak rasional dapat

menyebabkan bakteri patogen menjadi resisten (Heni, 2015).

Menurut Jawetz dkk., (2001), ada beberapa bakteri yang dapat

menyebabkan infeksi pada manusia, diantaranya adalah Escherichia coli yang

merupakan bakteri gram negatif penyebab penyakit diare dan Staphylococcus

Staphylococcus aureus dan Escherichia coli merupakan 2 dari 12 bakteri

populasinya melebihi dan keberadaannya diluar habitat aslinya, kedua bakteri

mempersulit pemilihan antibakteri yang sesuai untuk pengobatan (Jawetz dkk.,

penting dan memberikan harapan baru untuk penelitian selanjutnya. Antibakteri

Melihat potensi tanaman bayam duri sebagai tanaman obat, maka

dilakukan karakterisasi simplisia dan standardisasi ekstrak daun bayam duri

digunakan dalam menunjang kesehatan. Tujuan dari standarisasi simplisia adalah

menjaga konsistensi dan keseragaman khasiat dari obat herbal, menjaga

keamanannya dan stabilitas ekstrak/bentuk sedian terkait dengan efikasi dan

Proses standarisasi daun bayam duri (Amaranthus spinosus L.)memerlukan

Departemen Kesehatan (Materia Medika Indonesia) dan ekstrak yang memenuhi

tercantum dalam monografi terbitan resmi Departemen Kesehatan (Materia

Medika Indonesia dan Monografi ekstrak tumbuhan obat). Pengujian standarisasi