PDF

Universitas Sumatera Utara
Repositori Institusi USU http://repositori.usu.ac.id

Fakultas Farmasi Skripsi Sarjana
2018
Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol

Buah Okra Hijau (Abelmoschus
esculentus (L.) Moench) Secara
Spektrofotometri UV-Vis
Marpaung, Nona
http://repositori.usu.ac.id/handle/123456789/10670
Downloaded from Repositori Institusi USU, Univsersitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL BUAH
OKRA HIJAU (Abelmoschus esculentus (L.) Moench) SECARA
SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
SKRIPSI
OLEH:
NONA MARPAUNG
NIM 141501190
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2018

SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh

gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
OLEH:
NONA MARPAUNG
NIM 141501190
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2018

PENGESAHAN SKRIPSI

OLEH:
NONA MARPAUNG
NIM 141501190
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi

Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal : 15 Agustus 2018
Disetujui oleh
Pembimbing, Panitia Penguji,
Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt. Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.
NIP 195108161980031002 NIP 195008281976032002
Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt.

NIP 195108161980031002
Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt.

NIP 195406281983031002
NIDK 194811111976031003
Medan, Oktober 2018

Fakultas Farmasi
Dekan,
Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.

NIP 195707231986012001

KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan
karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi
yang berjudul uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol buah okra hijau
(Abelmoschus esculentus (L.) Moench) secara spektrofotometri UV-Vis. Skripsi
ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-
besarnya kepada Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas
Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di
Fakultas Farmasi. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Bapak Prof. Dr.
Ginda Haro, M.Sc., Apt., yang telah meluangkan waktu dan tenaga dalam
membimbing penulis dengan penuh kesabaran dan tanggung jawab, memberikan
petunjuk dan saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan
terima kasih juga penulis sampaikan kepada Ibu Prof. Dr. Siti Morin Sinaga,
M.Sc., Apt., selaku ketua penguji dan Bapak Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt.,
selaku anggota penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan
skripsi ini, dan kepada Ibu Dr. Sumaiyah, S.Si, M.Si., Apt., selaku dosen
pembimbing akademik serta Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU
yang telah banyak membimbing penulis selama masa perkuliahan hingga selesai.
Penulis juga mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga kepada
keluarga, Bapak Uda H. P Marpaung, Inanguda M. Sitorus dan Opung R. Turnip
yang telah memberikan cinta dan kasih sayang yang tidak ternilai dengan apapun,
pengorbanan baik materi maupun motivasi beserta doa yang tulus yang tidak
vi
pernah berhenti. Kepada seluruh keluarga yang selalu mendukung dan
memberikan semangat serta doa kepada penulis.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum
sempurna. Oleh karena itu, penulis mengharapkan saran dan kritik yang
membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga
skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.
Medan, Oktober 2018

Penulis,
Nona Marpaung
NIM 141501190
vi
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama : Nona Marpaung
NIM : 141501190
Program Studi : S-1 Reguler Farmasi
Judul Skripsi : Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Buah Okra
Hijau (Abelmoschus esculentus (L.) Moench.) secara
Spektrofotometri UV-Vis
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dan hasil
pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan orang lain untuk
memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena
kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam
skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
mendapat sanksi apapun oleh Program Studi Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk
dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, Oktober 2018

Penulis
Nona Marpaug
NIM 141501190
vi
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL BUAH OKRA
HIJAU (Abelmoschus esculentus (L.) Moench) SECARA
ABSTRAK
Radikal bebas merupakan atom atau molekul yang mengandung satu
elektron yang tidak berpasangan. Senyawa radikal bebas timbul akibat berbagai
proses kimia kompleks dalam tubuh, berupa hasil samping dari proses oksidasi
atau pembakaran sel. Antioksidan atau senyawa penangkap radikal bebas
merupakan zat yag dapat menetralkan radikal bebas, atau suatu bahan yang
berfungsi mencegah sistem biologi tubuh dari efek yang merugikan yang timbul
dari proses ataupun reaksi yang menyebabkan oksidasi yang berlebihan.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui akivitas antioksidan dari buah
okra. Dilakukan uji skrining fitokimia pada simplisia dan ekstrak etanol buah okra
untuk mengetahui senyawa kimia pada buah okra. Pengujian aktivitas antioksidan
dilakukan dengan metode pemerangkapan DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)
yang diukur dengan menggunakan spektrofotometer UV-Visible.
Hasil skrinning fiokimia buah okra menunjukkan bahwa buah okra
mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tanin, glikosida, dan steroid. Ekstrak
daun okra memiliki aktivitas antioksidan dengan kategori lemah , dengan nilai
IC50 172,92 µg/mL.
Kata kunci : Buah okra, antioksidan, IC50, DPPH.
vii
TEST OF ANTIOXIDANT ACTIVITIES FROM ETHANOL EXTRACT
FRUIT GREEN OKRA (Abelmoschus esculentus (L.) Moench) SPECIALLY
IN UV-VIS SPECTROPHOTOMETRY
ABSTRACT
Free radicals are atoms or molecules containing one unpaired electrons.

Free radical compounds arise due to various complex chemical processes in the
body, in the form of byproducts from the process of oxidation or burning of cells.
Antioxidants or free-radical capture compounds are substances that can neutralize
free radicals, or a substance that prevents the body's biological system from
harmful effects arising from processes or reactions that cause excessive oxidation.
This study aims to determine the antioxidant activity of the okra fruit.
Phytochemical screening test was performed on simplicia and ethanol extract of
okra fruit to know chemical compound on okra fruit. The antioxidant activity test
was performed by DPPH (1.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) capture method
measured using UV-Visible spectrophotometer.
The results of fiochemical screening indicate that okra fruit contains
alkaloids, flavonoids, tannins, glycosides, and steroids. Okra leaf extract has
antioxidant activity with weak category, with IC 50 value 172.92 µg/mL.
Keyword: Okra leaves, antioxidants, IC50, DPPH.
viii
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ................................................................................................... i
HALAMAN JUDUL .............................................................................. ii
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................... iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT ....................................... vii
ABSTRAK ............................................................................................. vii
ABSTRACT ........................................................................................... viii
DAFTAR ISI .......................................................................................... ix
DAFTAR TABEL .................................................................................. xiv
DAFTAR GAMBAR ............................................................................. xv
DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN ......................................... xvi
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................... xvii
BAB I PENDAHULUAN ................................................................. 1
1.1 Latar Belakang ................................................................ 1
1.2 Perumusan Masalah ........................................................ 3
1.3 Hipotesis ......................................................................... 3
1.4 Tujuan Penelitian ............................................................ 4
1.5 Manfaat Penelitian .......................................................... 4
1.6 Kerangka Penelitian ........................................................ 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tumbuhan ........................................................... 6
2.1.1 Sistematika tumbuhan ......................................... 6
ix
2.1.2 Nama lain ............................................................ 6
2.1.3 Morfologi buah ................................................... 6
2.2 Ekstraksi ......................................................................... 7
2.2.1 Metode ekstraksi ..................................................... 7
2.3 Radikal Bebas ................................................................. 10
2.4 Antioksidan...................................................................... 12
2.5 Senyawa Fenol ................................................................ 13
2.6 Flavonoid ........................................................................ 13
2.7 Vitamin C ....................................................................... 14
2.8 Metode Pengujian Antioksidan........................................ 15
2.9 Spektrofotometer UV-VIS............................................... 17
BAB III METODE PENELITIAN ....................................................... 20
3.1 Alat-Alat Dan Bahan ...................................................... 20
3.1.1 Alat-alat .............................................................. 20
3.1.2 Bahan-bahan ....................................................... 20
3.1.2.1 Sampel .................................................... 20
3.1.2.2 Bahan kimia ............................................. 21
3.2 Pembuatan Larutan Pereaksi .......................................... 21
3.2.1 Pereaksi Liebermann-Burchard .......................... 21
3.2.2 Pereaksi asam sulfat 2 N ..................................... 21
3.2.3 Pereaksi asam nitrat 0,5 N .................................. 21
3.2.4 Pereaksi Molisch ................................................. 22
3.2.5 Pereaksi Mayer ................................................... 22
3.2.6 Pereaksi besi (III) klorida 10% ........................... 22
x
3.2.7 Pereaksi Dragendorff .......................................... 22
3.2.8 Pereaksi Bouchardat ........................................... 22
3.2.9 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M ......................... 23
3.2.10 Pereaksi asam klorida 2 N .................................. 23
3.2.12 Larutan kloralhidrat ............................................ 23
3.3 Pengambilan dan Pengolahan Sampel ............................ 23
3.3.1 Pengambilan sampel ........................................... 23
3.3.2 Identifikasi tumbuhan ......................................... 23
3.3.3 Pembuatan simplisia ........................................... 23
3.4 Karakterisasi Simplisia ................................................... 24
3.4.1 Pemeriksaan makroskopik .................................. 24
3.4.2 Pemeriksaan mikroskopik ................................... 24
3.4.3 Penetapan kadar air ............................................. 24
3.4.4 Penetapan kadar sari larut air .............................. 25
3.4.5 Penetapan kadar sari larut etanol ........................ 26
3.4.6 Penetapan kadar abu total ................................... 26
3.4.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam ................. 26
3.5 Skrining Fitokimia .......................................................... 27
3.5.1 Pemeriksaan alkaloid .......................................... 27
3.5.2 Pemeriksaan glikosida ........................................ 27
3.5.3 Pemeriksaan saponin .............................. ............ 28
3.5.4 Pemeriksaan flavonoid ....................................... 28
3.5.5 Pemeriksaan tanin ............................................... 28
3.5.6 Pemeriksaan triterpenoid/steroid ........................ 28
xi
3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Buah Okra ........................... 29
3.7 Uji Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode

Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH .......................... 29
3.7.1 Pembuatan larutan induk baku DPPH ................ 29
3.7.2 Pembuatan arutan blanko .................................... 29
3.7.3 Pengukuran panjang gelombang serapan

maksimum DPPH ............................................... 29
3.7.4 Pembuatan larutan induk baku ekstrak

etanol buah okra................................................... 30
3.7.5 Pembuatan larutan induk baku Vitamin C ........... 30
3.7.6 Pembuatan Larutan Uji ........................................ 30
3.7.6.1 Laruta uji ekstrak etanol buah okra ........ 30
3.7.6.2 Larutan uji pembanding Vitamin C ......... 30
3.8 Analisis Persen Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH .. 31
3.9 Analisis Nilai IC50 ........................................................... 31
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................. 32
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan .......................................... 32
4.2 Hasil Pemeriksaan Makroskopik ..................................... 32
4.3 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik...................................... 32
4.4 Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ..................... 33
4.5 Hasil Pemeriksaan Skrining Fitokimia Simplisia dan

Ekstrak ............................................................................. 34
4.6 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan EEBO dengan

Metode DPPH ................................................................. 35
4.6.1 Hasil penentuan panjang gelombang serapan

maksimum DPPH ................................................... 35
4.6.2 Hasil analisis aktivitas antioksidan dan sampel

uji EEBO ............................................................... 36
xii
4.6.3 Hasil analisis Nilai IC50 (Inhibitory
Concentration)........................................................ 38
4.6.4 Hasil analisis peredaman radikal bebas DPPH oleh

Vitamin C sebagai pembanding.............................. 39
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ............................................. 41
5.1 Kesimpulan ..................................................................... 41
5.2 Saran ............................................................................... 41
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................ 42
LAMPIRAN ........................................................................................... 46
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Hasil Karakterisasi Simplisia Buah Okra ........................... 33
4.2 Hasil Skrining Simplisia Dan Ekstrak Buah Okra .............. 34
4.3 Penurunan Absorbansi dan Persen Pemerangkapan DPPH

oleh EEBO............................................................................ 37
4.4 Nilai IC50 dari EEBO……………………… ...................... 38
4.5 Kategori Nilai IC50 Sebagai Antioksidan ............................ 38
4.6 Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas oleh Vitamin C

Sebagai Pembanding........................................... ................. 39
4.7 Nilai IC50 dari Vitamin C ..................................................... 40
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1.1 Kerangka Pikir Penelitian ........................................................... 5
2.1 Struktur Dasar Flavonoid ........................................................... 13
2.2 Reaksi Radikal DPPH dengan Antioksidan ............................... 16
4.1 Kurva Panjang Gelombang Maksimum DPPH ........................... 36
xv
DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN
Gambar Halaman
1 Buah Okra .................................................................................. 47
2 Simplisia Buah Okra .................................................................. 47
3 Mikroskopik Simplisia Buah Okra ............................................. 48
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Surat Hasil Identifikasi Tumbuhan ..................................... 46
2 Sampel yang Digunakan ..................................................... 47
3 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik .......................................... 48
4 Bagan Kerja Penelitian ........................................................ 49
5 Perhitungan karakterisasi simplisia buah okra ................. 50
6 Penentuan Waktu Kerja (Operating Time) .......................... 53
7 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan ........................................... 54
8 Perhitungan Nilai IC50.......................................................... 62
xvii
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Radikal bebas merupakan atom atau molekul yang mengandung satu
elektron yang tidak berpasangan pada orbital terluarnya. Senyawa radikal bebas
timbul akibat berbagai proses kimia kompleks didalam tubuh, berupa hasil
samping dari proses oksidasi atau pembakaran sel yang berlangsung pada waktu
bernafas, metabolisme sel, olahraga yang berlebihan, peradangan atau ketika
tubuh terpapar polusi lingkungan seperti asap kendaraan bermotor, asap rokok,
bahan pencemar dan radiasi matahari. Radikal bebas dalam tubuh bersifat sangat
reaktif dan akan berinteraksi secara destruktif melalui reaksi oksidasi dengan
bagian tubuh maupun sel-sel tertentu yang tersusun atas lemak, protein,
karbohidrat, deoxyribonucleic acid (DNA), dan ribonucleic acid (RNA) sehingga
memicu berbagai penyakit seperti jantung koroner, penuaan dini dan kanker. Oleh
sebab itu dibutuhkan antioksidan untuk mengatasi radikal bebas. Antioksidan atau
senyawa penangkap radikal bebas merupakan zat yang dapat menetralkan radikal
bebas, atau suatu bahan yang berfungsi mencegah sistem biologi tubuh dari efek
yang merugikan yang timbul dari proses ataupun reaksi yang menyebabkan
oksidasi yang berlebihan. Berbagai bukti ilmiah menunjukkan bahwa senyawa
antioksidan mengurangi resiko terhadap penyakit kronis seperti kanker dan
penyakit jantung koroner (Rosahdi, dkk., 2013).
Studi epidemiologi telah menunjukkan hubungan antara antioksidan yang
terdapat di dalam tanaman dengan pengurangan penyakit kronis. Manfaat ini
1
diduga terjadi karena komponen antioksidan didalam tanaman seperti vitamin,
flavonoid dan karotenoid. Studi beberapa tahun terakhir menunjukkan bahwa
polifenol pada tanaman memerangkap oksigen yang aktif dan efektif dalam
mencegah kerusakan sel (Bag, dkk., 2015).
Berdasarkan sejumlah penelitian, banyak manfaat yang terdapat didalam
tanaman okra. Penelitian sebelumnya telah dilakukan analisa flavonoid dari
ekstrak etanol 96% kulit buah okra merah (Abelmoschus Esculentus (L.) Moench)
secara kromatografi lapis tipis dan spektrofotometri UV-Vis. Hasil analisa
menujukkan bahwa ekstrak etanol kulit buah okra merah mengandung flavonoid
dengan kadar sebesar 0,84339% (Lisnawati, dkk., 2016).
Penelitian lain Delviana (2017), melaporkan bahwa ekstrak etanol daun
okra memiliki aktivitas antioksidan. Aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun
okra menggunakan metode pemerangkapan radikal bebas 1,1–diphenyl-2-
picrylhydrazil DPPH menghasilkan nilai IC50 75,68 µg/mL.
Penelitian lain juga telah dilakukan oleh Yusdiana (2018), Yusdiana
melakukan penelitian mengenai analisis kadar protein pada okra (Abelmoschus
esculentus (L.) Moench) dengan metode kjeldahl. Hasil penelitian didapatkan
bahwa terdapat kandungan protein pada okra segar dengan kadar sebesar 0,49
g/100g dan okra rebus 0,45 g/100g.
Berdasarkan uraian diatas, maka peneliti tertarik untuk melakukan
pengujian aktivitas antioksidan dari buah. Pengujian aktivitas antioksidan dapat
dilakukan dengan beberapa metode yaitu oxygen radical capacity (ORAC), total
radical-trapping antioxidant parameter (TRAP), trololox equivalent antioxidant
capacity (TEAC), peroxyl radical scavenging capacity (PSC), ferric
2
reducing/antioxidant power (FRAP), follin-ciocalteau, dan 1,1,-diphenyl-2-
picrylhydrazil (DPPH). Pada penelitian ini peneliti menggunakan metode DPPH.
DPPH adalah radikal bebas relatif yang tidak ditemukan didalam tubuh. Pada
pengujian menggunakan DPPH, kemampuan antioksidan dari DPPH dalam
menangkap radikal bebas diukur meggunakan spektrofotometer UV-Vis dimana
DPPH sudah dilarutkan didalam metanol, etanol, aseton dan warna larutan DPPH
adalah warna ungu (Santoso, 2016).
1.2 Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang tersebut, maka perumusan masalah pada
penelitian ini adalah:
a. Golongan senyawa kimia apa yang terkandung dalam simplisia dan
ekstrak etanol buah okra?
b. Apakah ekstrak etanol buah okra memiliki aktivitas antioksidan?
c. Berapakah kekuatan antioksidan dari ekstrak etanol buah okra
dibandingkan dengan vitamin C?
1.3 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah diatas, maka hipotesis dalam penelitian
ini adalah:
a. Simplisia dan ekstrak etanol buah okra mengandung senyawa alkaloid,
flavonoid, glikosida, saponin, tanin dan triterpenoid/steroid.
b. Ekstrak etanol buah okra memiliki aktivitas antioksidan.
3
c. Ekstrak etanol buah okra memiliki aktivitas antioksidan yang lebih
kecil dari vitamin C.
1.4 Tujuan Penelitian
Tujuan dilakukannya penelitian ini antara lain untuk mengetahui:
a. Untuk mengetahui golongan senyawa kimia yang terkandung dalam
simplisia dan ekstrak etanol buah okra.
b. Untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol buah okra.
c. Untuk mengetahui besar kekuatan aktivitas antioksidan dari ekstrak
etanol buah okra dibandingkan dengan vitamin C.
1.5 Manfaat Penelitian
Diharapkan dari hasil penelitian ini, dapat diperoleh informasi tentang
golongan senyawa kimia dari simplisia dan ekstrak etanol buah okra serta
aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol buah okra.
4
1.6 Kerangka Pikir Penelitian
Karakterisasi 1. Makroskopik
Buah okra 2. Mikroskopik
3. Penetapan kadar air
4. Penetapan kadar sari larut
air
5. Penetapan kadar sari larut
Simplisia buah etanol
okra 6. Penetapan kadar abu total
7. Penetapan kadar abu tidak
larut asam
Ekstrak etanol
1. Alkaloid
buah okra
2. Flavonoid
Skrining 3. Tanin
Fitokimia
4. Saponin
5. Steroid/Triterpenoid
6. Glikosida
Pengujian Nilai IC50

antioksidan ekstrak
etanol buah okra
Gambar 1.1 Kerangka Pikir Penelitian
5
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tumbuhan
2.1.1 Sistematika tumbuhan
Menurut United States Department of Agriculture (USDA) (2018),
klasifikasi okra adalah sebagai berikut:
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Malvales
Famili : Malvaceae
Genus : Abelmoschus
Spesies : Abelmoschus esculentus (L.) Moench.
2.1.2 Nama Lain
Nama daerah dari tumbuhan okra adalah jagung belanda. Tumbuhan okra
ini juga biasa dikenal dengan nama lain seperti: Bendi, Gumbo, Kopi Arab,
Kacang Lendir (Malaysia), Okura (Jepang), Lady’s finger (Iggris) (Aswara, dkk.,
2017; Heyne, 1987).
2.1.3 Morfologi Buah
Buah okra adalah buah yang memiliki panjang 10-25 cm, berdiameter 1,5-
3 cm, bentuk meruncing di atas dan berisi biji yang berbentuk ginjal (Roy, dkk.,
2014). Dan salah satu ciri utama dari buah okra yaitu bahwa buah okra adalah
buah yang banyak mengandung lendir.
6
2.2 Ekstraksi
Ekstraksi adalah suatu proses penyarian zat aktif dari bagian tanaman obat
yang bertujuan untuk menarik komponen kimia yang terdapat dalam bagian
tanaman obat tersebut. Pemilihan pelarut yang digunakan dalam ekstraksi sangat
dipengaruhi oleh kepolaran pelarut itu sendiri. Senyawa dengan kepolaran yang
sama akan lebih mudah larut dalam pelerut yang sama pula (like disolves like)
(Marjoni, 2016).
Ekstrak adalah suatu produk hasil pengambilan zat aktif melalui proses
ekstraksi menggunakan pelarut, dimana pelarut yang digunakan diuapkan kembali
sehingga zat aktif ekstrak menjadi pekat. Bentuk dari ekstrak yang dihasilkan
dapat berupa ekstrak kental atau ekstrak kering tergantung jumlah pelarut yang
diuapkan. Ekstrak kental adalah ekstrak yang mengalami proses penguapan dan
sudah tidak mengandung cairan pelarut lagi, tapi konsistensinya tetap cair pada
suhu kamar (Marjoni, 2016).
2.2.1 Metode Ekstraksi
Menurut Marjoni (2016) ada beberapa metode ekstraksi berdasarkan
penggunaan suhu yaitu:
a. Ekstraksi secara dingin
Metode ekstraksi secara dingin bertujuan untuk mengekstrak senyawa-
senyawa yang terdapat dalam simplisia yang tidak tahan terhadap panas atau
bersifat thermolabil. Ekstrasi secara dingin dapat dilakukan dengan beberapa cara
berikut ini:
7
(i) Maserasi
Maserasi adalah proses ekstraksi sederhana yang dilakukan hanya dengan
cara merendam simplisia dalam satu atau campuran pelarut selama waktu tertentu
pada temperatur kamar dan terlindungi dari cahaya.
(ii) Perkolasi
Perkolasi adalah proses penyarian zat aktif secara dingin sesuai dengan
cara mengalirkan pelarut secara kontinu pada simplisia selama waktu tertentu.
b. Ekstraksi secara panas
Metode panas digunakan apabila senyawa-senyawa yang terkandung
dalam simplisia sudah dipastikan tahan panas. Metode ekstraksi yang
membutuhkan panas diantaranya :
(i) Seduhan
Merupakan metode ekstraksi paling sederhana hnaya dengan merendam
simplisia dengan air panas selama waktu tertentu (5-10 menit).
(ii) Penggodokan
Merupakan proses penyarian dengan cara menggodok simplisia
menggunakan api langsung dan hasilnya dapat langsung digunakan sebagai obat
baik secara keseluruhan termasuk ampasnya atau hanya hasil godokannya saja
tanpa ampas.
(iii) Infusa
Infusa merupakan sediaan cair yang dibuat dengan cara menyari simplisia
nabati dengan air pada suhu 900C selama 15 menit. Kecuali dinyatakan lain,
infusa dilakukan dengan cara sebagai berikut :
8
“Simplisia dengan derajat kehalusan tertentu dimasukkan kedalam panci infusa,
kemudian ditambahkan air secukupnya. Panaskan campuran di atas penangas air
selama 15 menit, dihitung mulai suhu 900C sambil sekali-sekali diaduk. Serkai
selagi panas menggunakan kain flanel, tambahkan air panas secukupnya melalui
ampas sehingga diperoleh volume infus yang dikehendaki”.
(iv) Digestasi
Digestasi adalah proses ekstraksi yang cara kerjanya hampir sama dengan
maserasi, hanya saja digesti menggunakan pemanasan rendah pada suhu 30-400C.
(v) Dekokta
Proses penyarian secara dekokta hampir sama dengan infusa,
perbedaannya hanya terletak pada lamanya waktu pemanasan. Waktu pemanasan
pada dekokta lebih lama dibanding metode infusa, yaitu 30 menit dihitung setelah
suhu mencapai 900C. Metode ini sudah sangat jarang digunakan karena selain
proses penyariannya yang kurang sempurna dan juga tidak dapat digunakan untuk
mengekstraksi senyawa yang bersifat termolabil.
(vi) Refluks
Refluks merupakan proses ekstraksi dengan pelarut dengan titik didih
pelarut selama waktu dan jumlah pelarut tertentu dnegan adanya pendingin balik
(kondensor). Proses ini umumnya dilakukan 3-5 kali pengulangan pada residu
pertama, sehingga termasuk proses ekstraksi yang cukup sempurna.
(vii) Soxhletasi
Proses soxhletasi merupakan proses ekstraksi panas menggunakan alat
khusus berupa ekstraktor soxhlet. Suhu yang digunakan lebih rendah
dibandingkan dengan suhu pada metode refluks.
9
2.3 Radikal Bebas
Radikal bebas merupakan molekul yang tidak stabil dan sangat reaktif
karena mengandung satu elektron tidak berpasangan pada orbit terluarnya. Untuk
mencapai kestabilan, radikal bebas akan bereaksi dengan molekul disekitarnya
untuk memperoleh pasangan elektron. Reaksi ini akan berlangsung terus menerus
dalam tubuh dan apabila tidak dihentikan akan menimbulkan berbagai penyakit
seperti penuaan dini, kanker, lever serta penyakit degeneratif lainnya. Karena
sangat reaktif, radikal bebas sangat mudah menyerang sel-sel sehat di dalam
tubuh, oleh karena itu tubuh memerlukan pertahanan untuk menetralkan radikal
bebas tersebut (Huliselan, dkk., 2015).
Secara biokimia, oksidasi merupakan proses pelepasan elektron dari suatu
senyawa. Sedangkan reduksi adalah proses penangkapan elektron. Senyawa yang
dapat menarik atau menerima elektron disebut oksidan atau oksidator, sedangkan
senyawa yang dapat melepaskan atau memberikan elektron disebut reduktan atau
reduktor. Dalam ilmu kimia, pengertian oksidan adalah senyawa penerima
elektron (electron acceptor), yaitu senyawa yang dapat menarik elektron (Sayuti
dan Yenrina, 2015).
Para ahli biokimia menyebutkan bahwa radikal bebas merupakan salah
satu bentuk senyawa oksigen reaktif, yang secara umum diketahui sebagai
senyawa yang memiliki elektron yang tidak berpasangan. Radikal bebas adalah
atom, molekul atau senyawa yang dapat berdiri sendiri yang mempunyai elektron
tidak berpasangan, oleh karena itu bersifat sangat reaktif dan tidak stabil. Elektron
yang tidak berpasangan selalu berusaha untuk mencari pasangan baru, sehingga
10
mudah bereaksi dengan zat lain (protein, lemak maupun deoxyribonucleic acid
(DNA) dalam tubuh (Sayuti dan Yenrina, 2015).
Pembentukan radikal bebas terjadi secara terus menerus di dalam tubuh.
Hal ini terjadi melalui proses metabolisme sel normal, proses peradangan,
kekurangan nutrisi, maupun sebagai respons adanya radiasi sinar gama, ultraviolet
(UV), polusi lingkungan dan asap rokok. Faktor yang menyebabkan timbulnya
radikal bebas dalam tubuh antara lain sinar X, asap mobil, bahan kimia dalam
makanan (pengawet, pewarna sintetik, residu pestisida, dan bahan tambahan
makanan lainnya), bahan kimia termasuk obat-obatan. Diet (pola makan sendiri)
juga dapat menyebabkan terbentuknya radikal bebas (Sayuti dan Yenrina, 2015).
Radikal bebas yang bereaksi dengan komponen biologis akan
menghasilkan senyawa teroksidasi yang dapat digunakan sebagai penanda
kerusakan oksidatif. Komponen endogen yang dapat diserang oleh radikal bebas
adalah lipid, protein dan deoxyribonucleid acid (DNA) (Sayuti dan Yenrina,
2015).
Tubuh manusia memiliki sistem pertahanan endogen terhadap serangan
radikal bebas terutama terjadi melalui peristiwa metabolisme sel normal dan
peradangan. Jumlah radikal bebas dapat mengalami peningkatan yang diakibatkan
faktor stres, radiasi, asap rokok dan polusi lingkungan menyebabkan sistem
pertahanan tubuh yang ada tidak memadai, sehingga tubuh memerlukan tambahan
antioksidan dari luar yang dapat melindungi dari serangan radikal bebas
(Werdhasari, 2014).
11
2.4 Antioksidan
Antioksidan yakni senyawa pereduksi yang dapat mencegah oksidasi suatu
molekul menjadi radikal bebas atau menghentikan reaksi berantai radikal bebas
agar tidak menjadi liar merusak sistem yang bekerja di dalam tubuh kita. Satu-
satunya cara untuk menjinakkan bahaya radikal bebas adalah dengan
menggunakan antioksidan yang memadai untuk melawannya (Halimatussa’diah,
dkk., 2014).
Antioksidan dapat menetralkan radikal bebas dengan cara mendonorkan
satu atom protonnya sehingga membuat radikal bebas stabil dan tidak reaktif.
Terdapat sistem enzim dalam tubuh manusia misalnya enzim superoksida
dismutase yang dapat berfungsi sebagai antioksidan, namun jika jumlah radikal
bebas lebih banyak daripada enzim yang terdapat dalam tubuh maka tubuh perlu
tambahan antioksidan dari luar. Berdasarkan sumbernya antioksidan terbagi
menjadi dua jenis, yaitu antioksidan buatan dan antioksidan alami (Huliselan,
dkk., 2015).
Antioksidan buatan seperti asam benzoat, Butil Hidroksi Anisol (BHA),
Butil Hidroksi Toluen (BHT) dan Tert-Butil Hidroksi Quinon (TBHQ) dapat
menimbulkan efek samping pada kesehatan tubuh. BHA dan BHT telah diteliti
dapat menimbulkan tumor pada hewan uji jika digunakan dalam jangka waktu
yang lama dan juga dapat menimbulkan kerusakan hati jika dikonsumsi secara
berlebihan. Efek samping yang ditimbulkan oleh penggunaan antioksidan buatan
mendorong perkembangan penelitian terhadap antioksidan alami yang lebih aman
dan lebih mampu dalam mengurangi radikal bebas dalam tubuh. Antioksidan
12
alami dapat diperoleh dari tumbuh-tumbuhan atau buah-buahan (Huliselan, dkk.,
2015).
Berdasarkan penelitian, senyawa golongan fenolik menunjukkan aktivitas
antioksidan yang poten. Korelasi antara kadar senyawa golongan fenolik atau
flavonoid dengan aktivitas antioksidan dengan metode DPPH sangat tinggi
(Wahdaningsih, 2011).
2.5 Senyawa Fenol
Senyawa fenol merupakan senyawa yang memiliki cincin aromatik yang
mengandung satu atau lebih gugus hidroksil. Flavonoid merupakan salah satu
golongan terbesar dari fenol. Senyawa fenolat dalam tumbuhan dapat berupa fenol
sederhana, antraquinon, asam fenolat, kumarin, flavonoid, lignin dan tanin
(Harborne, 1987).
2.6 Flavonoid
Senyawa flavonoid merupakan salah satu senyawa polifenol yang
mengandung 15 atom karbon dalam inti dasarnya, yang tersusun dalam
konfigurasi C6 - C3 - C6, yaitu dua cincin aromatik yang dihubungkan oleh satuan
3 karbon yang dapat atau tidak dapat membentuk cincin ketiga. Struktur dasar
flavonoid dapat dilihat pada Gambar 2.1 berikut :
Gambar 2.1 Struktur Dasar Flavonoid (Markham, 1988).
13
Flavonoid mempunyai sifat antioksidan dimana senyawa ini berperan
sebagai penangkap radikal bebas karena mengandung gugus hidroksil. Karena
bersifat reduktor, flavonoid dapat bertindak sebagai donor hidrogen terhadap
radikal bebas. Flavonoid dapat membentuk kompleks (kelat) dengan ion logam
transisi, misalnya besi, alumunium, sehingga tidak lagi bertindak sebagai
prooksidan. Dengan demikian, oksidasi dapat dicegah (Silalahi, 2006).
2.7 Vitamin C
Salah satu contoh antioksidan alami yaitu vitamin C. Vitamin C terdapat
dalam seluruh jaringan hidup dan dapat mempengaruhi reaksi oksidasi-reduksi
dalam jaringan tersebut. Sumber utama vitamin C terdapat pada sayuran dan
buah-buahan. Manusia dan kelinci untuk percobaan merupakan satu-satunya jenis
primata yang tidak dapat mensintesis vitamin C. Kebutuhan manusia akan vitamin
C belum dapat ditentukan secara pasti. Namun, telah diketahui rata-rata kebutuhan
vitamin C pada manusia per hari antara 45 sampai 75 mg. Keadaan stres yang
berkelanjutan dan terapi obat-obatan bisa meningkatkan kebutuhan akan vitamin
C (Sayuti dan Yenrina, 2015).
Vitamin C merupakan antioksidan alami yang mudah dan murah bila
dikonsumsi dari alam. Vitamin C sebagai antioksidan berfungsi untuk mengikat O 2
sehingga tidak mendukung reaksi oksidasi (oxygen scavanger). Vitamin C
mempunyai berat molekul 178 dengan rumus molekul C6H8O6, dalam bentuk kristal
tidak berwarna, bersifat larut dalam air, sedikit larut dalam aseton/alkohol yang
mempunyai berat molekul rendah. Vitamin C sukar larut dalam kloroform, eter dan
benzen (Sayuti dan Yenrina, 2015).
14
2.8 Metode Pengujian Antioksidan
Salah satu metode yang paling umum digunakan untuk menguji aktivitas
antioksidan adalah dengan menggunakan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-
picrylhydrazil (DPPH). Pengukuran antioksidan dengan metode DPPH adalah
metode pengukuran antioksidan yang sederhana, cepat dan tidak membutuhkan
banyak reagen seperti halnya metode lain (Sayuti dan Yenrina, 2015).
Hasil pengukuran dengan metode DPPH menunjukkan kemampuan
antioksidan sampel secara umum, tidak berdasarkan pada jenis radikal yang
dihambat. Pada metode lain selain DPPH membutuhkan reagen kimia yang cukup
banyak, waktu analisis yang lama, biaya yang mahal dan tidak selalu dapat
diaplikasikan pada semua sampel (Sayuti dan Yenrina, 2015).
Pada metode ini, larutan DPPH berperan sebagai radikal bebas yang akan
bereaksi dengan senyawa antioksidan sehingga DPPH akan berubah menjadi 1,1-
diphenyl-2-picrylhydrazin yang bersifat non-radikal. Peningkatan jumlah 1,1-
diphenyl-2-picrylhydrazin akan ditandai dengan berubahnya warna ungu tua
menjadi warna merah muda atau kuning pucat dan bisa diamati dan dilihat
menggunakan spektrofotometer sehingga aktivitas peredaman radikal bebas oleh
sampel dapat ditentukan (Sayuti dan Yenrina, 2015).
Radikal DPPH adalah suatu senyawa organik yang mengandung nitrogen
tidak stabil dengan absorbansi kuat pada λmax 517 nm dan berwarna ungu gelap.
Setelah bereaksi dengan senyawa antioksidan, DPPH tersebut akan tereduksi dan
warnanya akan berubah menjadi kuning. Perubahan tersebut dapat diukur dengan
spektrofotometer, dan diplotkan terhadap konsentrasi. Penurunan intensitas warna
yang terjadi disebabkan oleh berkurangnya ikatan rangkap terkonjugasi pada
15
DPPH. Hal ini dapat terjadi apabila adanya penangkapan satu elektron oleh zat
antioksidan, menyebabkan tidak adanya kesempatan elektron tersebut untuk
beresonansi. Reaksi antara radikal bebas DPPH dengan antioksidan dapat dilihat
pada Gambar 2.2 berikut:
Gambar 2.2 Reaksi Radikal DPPH dengan Antioksidan (Sayuti dan Yenrina,
2015).
Aktifitas antioksidan dinyatakan dalam % penghambatan. Menurut Sayuti
dan Yenrina (2015) besarnya daya antioksidan dihitung dengan rumus:
Daya antioksidan = × 100%
Keberadaan antioksidan dalam ekstrak tumbuhan akan menetralisasi
radikal DPPH dengan memberikan elektron kepada DPPH, menghasilkan
perubahan warna dari ungu menjadi kuning atau intensitas warna ungu larutan
jadi berkurang (Molyneux, 2004).
Parameter yang dipakai untuk menunjukkan aktivitas antioksidan adalah
harga konsentrasi efisien atau efficient concentrtion (EC50) atau Inhibition
Concentration (IC50) yaitu konsentrasi suatu zat antioksidan yang dapat
menyebabkan 50% DPPH kehilangan karakter radikal atau konsentrasi zat suatu
antioksidan yang memberikan % penghambatan 50%. Zat yang mempunyai
16
aktivitas antioksidan yang tinggi, akan mempunyai nilai EC 50 atau IC50 yang
rendah (Molyneux, 2004).
2.9 Spektrofotometer UV-Vis
Spektrofotometer UV-Vis atau spektrofotometer ultraviolet-sinar tampak
memanfaatkan sinar dengan panjang gelombang 180-380 nm untuk daerah UV
dan 380-780 nm untuk daerah visible atau sinar tampak. Secara umum sistem
spektrofotometer terdiri atas sumber radiasi, monokromator, sel, foto sel, detektor,
dan tampilan (display) (Warono dan Syamsudin, 2013).
Sumber radiasi berfungsi memberikan energi radiasi pada daerah panjang
gelombang yang tepat untuk pengukuran dan mempertahankan intensitas sinar
yang tetap pada pengukuran. Sumber radiasi untuk spektrofotometer UV-Vis
adalah lampu hidrogen atau deuterium dan lampu filamen. Lampu hidrogen
digunakan untuk mendapatkan radiasi di daerah ultraviolet sampai 350 ran
(Warono dan Syamsudin, 2013).
Lampu filamen digunakan untuk daerah sinar tampak sampai inframerah
dekat dengan panjang gelombang 350 nm sampai sekitar 250 nm. Monokromator
berfungsi menghasilkan radiasi monokromatis yang diperoleh dilewatkan melalui
kuvet yang berisi sampel dan blanko secara bersaman dengan bantuan cermin
berputar (Warono dan Syamsudin, 2013).
Sel atau kuvet adalah tempat bahan yang akan diukur serapannya. Kuvet
harus dibuat dari bahan yang tidak menyerap radiasi pada daerah yang digunakan,
umumnya terbuat dari kaca tembus sinar tetapi bisa pula terbuat dari plastik. Sel
yang terbuat dari kuarsa baik untuk spektroskopi UV-Vis. Kuvet dari bahan kaca
17
silikat biasa tidak dapat digunakan untuk spektroskopi ultraviolet karena bahan
kaca silikat dapat menyerap ultraviolet (Warono dan Syamsudin, 2013).
Fotosel berfungsi menangkap cahaya yang diteruskan zat dan kemudian
mengubahnya menjadi energi listrik yang kemudian akan disampaikan ke
detektor. Detektor adalah material yang dapat menyerap energi dari foton dan
mengubahnya dalam bentuk lain, yaitu energi listrik (Warono dan Syamsudin,
2013).
Display atau tampilan mengubah sinar listrik dari detektor menjadi
pembacaan yang berupa meter atau angka yang sesuai dengan hasil yang
dianalisis. Prinsip kerja spektrofotometer adalah berdasarkan hukum Lambert-
Beer, yaitu seberkas sinar dilewatkan suatu larutan pada panjang gelombang
tertentu, sehingga sinar tersebut sebagian ada yang diteruskan dan sebagian
lainnya diserap oleh larutan. Besarnya sinar (A) berbanding lurus dengan
konsentrasi zat penyerap (C) dan jarak yang ditempuh sinar (a) dalam larutan
(tebal larutan, b) (Warono dan Syamsudin, 2013).
Menurut Gandjar dan Rohman (2008), ada beberapa hal yang harus
diperhatikan dalam analisis spektrofotometri UV-Vis terutama untuk senyawa
yang semula tidak berwarna yang akan dianalisis dengan spektrofotometri visibel
karena senyawa tersebut harus dirubah terlebih dahulu menjadi senyawa yang
berwarna, yaitu:
a. Pembentukan molekul yang dapat yang dapat menyerap sinar UV-Vis
Hal ini perlu dilakukan jika senyawa tersebut tidak menyerap pada daerah
tersebut. Cara yang digunakan adalah dengan merubah menjadi senyawa lain atau
direaksikan dengan pereaksi tertentu.
18
b. Waktu operasional (operating time)
Cara ini biasanya digunakan untuk pengukuran hasil reaksi atau
pembentukan warna. Tujuannya adalah untuk mengetahui waktu pengukuran yang
stabil. Waktu operasional ditentukan dengan mengukur hubungan antara waktu
pengukuran dengan absorbansi larutan.
c. Pemilihan panjang gelombang
Panjang gelombang yag digunakan untuk analisis kuantitatif adalah
panjang gelombang yang mempunyai absorbansi maksimal. Untuk memilih
panjang gelombang maksimal, dilakukan dengan membuat kurva hubugan antara
absorbansi dengan panjang gelombang dari suatu larutan baku pada konsentrasi
tertentu.
19
BAB III
METODE PENELITIAN
Metode penelitian ini dilakukan secara eksperimental meliputi
pengumpulan, pengolahan sampel, skrining fitokimia dan pembuatan ekstrak.
Dilakukan pengujian aktivitas antioksidan ekstrak etanol buah okra dengan
metode pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)
menggunakan spektrofotometer UV-Visibel. Penelitian dilakukan di
Laboratorium Fitokimia dan Laboratorium Penelitian, Fakultas Farmasi,
Universitas Sumatera Utara.
3.1 Alat-Alat dan Bahan
3.1.1 Alat-alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini terdiri dari alat-alat gelas
laboratorium, cawan penguap berdasar rata, krus porselin, lemari pengering,
mikroskop, alat maserasi, neraca analitis (Vibra), oven listrik (Memmert),
penangas air, rotary evaporator (Stuart), spektrofotometer UV-Visibel (Shimadzu
UV-1800) dan tanur (Gallenkamp).
3.1.2 Bahan-bahan
3.1.2.1 Sampel
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah okra
(Abelmoschus esculentus (L.) Moench.) secara purposif yaitu tanpa
membandingkan tumbuhan yang sama dengan daerah lain. Sampel diambil dari
20
Pasar 10 Dusun Sopoyono, Desa Saentis, Kecamatan Percut, Sei Tuan, Medan,
Sumatera Utara.
3.1.2.2. Bahan Kimia
Bahan-bahan kimia yang digunakan yaitu: 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl
(DPPH), vitamin C, metanol, toluen, kloroform, etanol 96%, asam klorida 2N,
Mayer, Bouchardat, Dragendorff, timbal (II) asetat 0,4M, isopropanol, Molisch,
serbuk magnesium, asam klorida pekat, amil alkohol, besi (III) klorida 10%, n-
heksana, Liebermann-Burchard (LB).
3.2 Pembuatan Larutan Pereaksi
Pembuatan larutan pereaksi yang digunakan untuk penelitian ini meliputi
pereaksi Liebermann-Bouchard, asam sulfat 2 N, asam nitrat 0,5 N, Molisch,
Mayer, besi (III) klorida 10%, Dragendorff, Bouchardat, natrium hidroksida 2 N,
timbal (II) asetat 0,4 M, asam klorida 2 N, larutan kloralhidrat (Depkes RI, 1995)
3.2.1 Pereaksi Liebermann-Burchard
Sebanyak 5 ml asam asetat anhidrida dicampur perlahan dengan 5 ml asam
sulfat pekat tambahkan etanol hingga 50 ml (Depkes RI, 1995).
3.2.2 Pereaksi Asam Sulfat 2 N
Sebanyak 5,5 ml asam sulfat pekat diencerkan dengan akuades hingga
volume 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.2.3 Pereaksi Asam Nitrat 0,5 N
Sebanyak 4,2 ml asam nitrat pekat diencerkan dengan akuades hingga
volume 100 ml (Depkes RI, 1995).
21
3.2.4 Pereaksi Molisch
Sebanyak 3 g α-naftol ditimbang, dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N
hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.2.5 Pereaksi Mayer
Sebanyak 1,359 g raksa (II) klorida ditimbang dan dilarutkan dalam
akuades hingga diperoleh volume larutan 60 ml. Sebanyak 5 g kalium iodida
ditimbang, dilarutkan dalam 10 ml akuades pada wadah yang berbeda, kemudian
kedua larutan dicampurkan dalam satu wadah. Campuran larutan tersebut
ditambahkan dengan akuades hingga diperoleh volume larutan sebanyak 100 ml
(Depkes RI, 1995).
3.2.6 Pereaksi Besi (III) Klorida 10%
Sebanyak 10 g besi (III) klorida ditimbang, dilarutkan dalam akuades
hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.2.7 Pereaksi Dragendorff
Sebanyak 8 g bismuth (III) nitrat ditimbang, dilarutkan dalam 20 ml asam
nitrat pekat. Dilarutkan 27,2 g kalium iodida dalam 50 ml akuades pada wadah
lain. Kedua larutan dicampurkan dan didiamkan sampai memisah sempurna.
Larutan yang jernih diambil dan diencerkan dengan akuades hingga volume
larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.2.8 Pereaksi Bouchardat
Sebanyak 4 g kalium iodida dilarutkan dalam akuades, kemudian 2 g
iodium dilarutkan dalam larutan kalium iodida dan dicukupkan dengan akuades
hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).
22
3.2.9 Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M
Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat dilarutkan dalam akuades bebas CO 2
hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.2.10 Pereaksi Asam Klorida 2 N
Sebanyak 17 ml asam klorida pekat ditambahkan dengan akuades hingga
diperoleh 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.2.11 Larutan Kloralhidrat
Sebanyak 50 g kristal kloralhidrat ditimbang lalu dilarutkan dalam 20 ml
akuades (Depkes RI, 1995).
3.3 Pengambilan dan Pengolahan Sampel
3.3.1 Pengambilan Sampel
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah adalah buah okra
(Abelmoschus esculentus (L.) Moench) secara purposif yaitu tanpa
membandingkan tumbuhan yang sama dengan daerah lain. Sampel diambil dari
Pasar 10 Dusun Sopoyono, Desa Saentis, Kecamatan Percut, Sei Tuan, Medan,
Sumatera Utara.
3.3.2 Identifikasi Tumbuhan
Identifikasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Medanense Universitas
Sumatera Utara.
3.3.3 Pembuatan Simplisia
Simplisia buah okra dibuat dengan cara pemilihan buah yang baik,
kemudian di cuci dengan alir yang mengalir, diangin-anginkan, dipotong-potong
23
menjadi beberapa potong, lalu di keringkan selama 7 hari di dalam lemari
pengering, selanjutnya dihaluskan menggunakan blender sampai menjadi serbuk.
3.4 Karakterisasi Simplisia Buah Okra
Pemeriksaan karakteristik simplisia meliputi pemeriksaan makroskopik,
pemeriksaan mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari yang larut
dalam air, penetapan kadar sari yang larut dalam etanol, penetapan kadar abu total
dan penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam.
3.4.1 Pemeriksaan Makroskopik Simplisia Buah Okra
Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan mengamati bentuk luar dari
simplisia buah okra kemudian diambil gambar simplisia dengan menggunakan
kamera dengan posisi melintang.
3.4.2 Pemeriksaan Mikroskopik Simplisia Buah Okra
Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia buah okra.
Serbuk ditaburkan di atas kaca objek yang telah ditetesi kloralhidrat, ditutup
dengan kaca penutup kemudian diamati di bawah mikroskop.
3.4.3 Penetapan Kadar Air
Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluen).
Alat terdiri dari labu alas bulat 500 ml, pendingin, tabung penyambung, tabung
penerima 5 ml berskala 0,05 ml, alat penampung dan pemanas listrik.
a. Penjenuhan toluen
Sebanyak 200 ml toluen dan 2 ml air suling dimasukkan ke dalam labu
alas bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian didestilasi selama 2
24
jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume
air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml.
b. Penetapan kadar air simplisia
Sebanyak 5 g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama dimasukkan
ke dalam labu berisi toluen yang telah dijenuhkan, kemudian labu dipanaskan
hati-hati selama 15 menit, setelah toluen mendidih, kecepatan tetesan diatur 2
tetes per detik sampai sebagian besar air terdestilasi. Kecepatan destilasi
dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik, setelah semua air terdestilasi, bagian dalam
pendingin dibilas dengan toluen. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian
tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar, setelah air dan toluen
memisah sempurna, lalu volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih
kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam
bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (WHO, 1992).
3.4.4 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air
Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dengan 100 ml
air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling sampai 1 liter) dalam labu
bersumbat, dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18
jam, kemudian disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering
dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara.Sisa
dipanaskan pada suhu 105ºC sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang
larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI,
1995).
25
3.4.5 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol
Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml
etanol 96% di dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam
pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, setelah itu disaring cepat untuk
menghindari penguapan etanol. Sejumlah 20 ml filtrat diuapkan dalam cawan
penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara sampai kering. Sisa
yang diperoleh dipanaskan pada suhu 105ºC sampai bobot tetap. Kadar dalam
persen sari yang larut dalam etanol 96% dihitung terhadap bahan yang telah
dikeringkan (Depkes RI, 1995).
3.4.6 Penetapan Kadar Abu Total
Sebanyak 2 g serbuk simplisia yang telah digerus dan ditimbang
seksama dimasukkan ke dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara,
kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pijaran
dilakukan pada suhu 600ºC selama 3 jam kemudian didinginkan dan ditimbang
sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah
3.4.7 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam
Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu total dididihkan dalam
asam klorida encer sebanyak 25 ml selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam
asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring bebas abu, dicuci dengan air
panas, lalu dipijar sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang.
Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah
26
3.5 Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia serbuk simplisia meliputi pemeriksaan senyawa alkaloid,
glikosida, saponin, flavonoid, tanin serta triterpenoid/steroid.
3.5.1 Pemeriksaan Alkaloid
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml
asam klorida 2N dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2
menit, didinginkan dan disaring. Filtrat yang diperoleh dipakai untuk uji
alkaloida: diambil 3 tabung reaksi, lalu ke dalamnya dimasukkan 0,5ml filtrat.
Pada masing-masing tabung reaksi :
a. Ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer
b. Ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat
c. Ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff
Alkaloida positif jika terjadi endapan atau kekeruhan pada paling sedikit
dua dari tiga percobaan di atas (Depkes RI, 1995).
3.5.2 Pemeriksaan Glikosida
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 2 g, lalu disari dengan 20 ml
campuran etanol 95% dengan air (7:2) dan 10 ml asam klorida 2N, direfluks
selama 2 jam, didinginkan dan disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml
air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan 5 menit lalu
disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropanol dan kloroform (2:2),
dilakukan berulang kali sebanyak 2 kali. Sari air dikumpulkan dan diuapkan pada
temperatur tidak lebih dari 500C. Sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan
sisa digunakan untuk percobaan berikut: 0,1 ml larutan percobaan dimasukkan
dalam tabung reaksi dan diuapkan di atas penangas air. Pada sisa ditambahkan 2
27
ml air dan 5 tetes pereaksi Molisch. Kemudian secara perlahan-lahan ditambahkan
2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuknya cincin berwarna
ungu pada batas kedua cairan menunjukkan glikosida (Depkes RI, 1995).
3.5.3 Pemeriksaan Saponin
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g dan dimasukkan ke dalam
tabung reaksi, lalu ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan kemudian dikocok
kuat-kuat selama 10 detik. Jika terbentuk busa setinggi 1-10 cm yang stabil tidak
kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida
2N menunjukkan adanya saponin (Depkes RI, 1995).
3.5.4 Pemeriksaan Flavonoid
Sebanyak 10 g serbuk simplisia ditambah air panas, dididihkan selama 5
menit dan disaring dalam keadaan panas. Ke dalam 5 ml filtrat ditambahkan 0,1 g
serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 1 ml amil alkohol, dikocok
dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi warna merah kekuningan
atau jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1966).
3.5.5 Pemeriksaan Tanin
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 1 g, dididihkan selama 2 menit
dalam 100 ml air suling lalu didinginkan dan disaring. Pada filtrat ditambahkan 1-
2 tetes pereaksi besi (III) kolrida 1%. Jika terjadi warna biru kehitaman atau hijau
kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966).
3.5.6 Pemeriksaan Triterpenoid/Steroid
Sebanyak 1 g serbuk simplisia dimaserasi dengan 20 ml n-heksan selama 2
jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa ditambahkan
beberapa tetes pereaksi Liebermann-Burchard. Terbentuk warna biru atau biru
28
hijau menunjukkan adanya steroid sedangkan warna merah, merah muda atau
ungu menunjukkan adanya triterpenoid (Harborne, 1987).
3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Buah Okra
Serbuk simplisia buah okra dimaserasi menggunakan pelarut etanol 96%.
Masukkan 10 bagian simplisia ke dalam wadah berwarna gelap, tuang 75 bagian
cairan penyari, tutup, biarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering
diaduk, serkai, peras, cuci ampas dengan cairan penyari secukupnya hingga
diperoleh 100 bagian. Pindahkan ke dalam bejana tertutup, biarkan di tempat
sejuk, terlindung dari cahaya, selama 2 hari. Enap tuangkan atau saring (Depkes
RI, 1979). Maserat diuapkan dengan rotary evaporator pada temperatur ±60oC
sampai diperoleh ekstrak kental.
3.7 Uji Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode Pemerangkapan

Radikal Bebas DPPH
3.7.1 Pembuatan Larutan Induk Baku DPPH
Sebanyak 20 mg DPPH ditimbang, kemudian dilarutkan dalam metanol
hingga volume 100 mL (200 µg/mL).
3.7.2 Pembuatan Larutan Blanko
Larutan DPPH (konsentrasi 200 µg/mL) dipipet sebanyak 5 mL, kemudian
dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL, dicukupkan volumenya dengan
metanol sampai garis tanda (konsentrasi 40 µg/mL) (Molyneux, 2004).
3.7.3 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum DPPH
Panjang gelombang maksimum ditentukan dengan menggunakan larutan
DPPH konsentrasi 40 µg/mL dan diukur serapannya pada panjang gelombang
29
400-800 nm. Larutan DPPH 40 µg/mL ini juga digunakan sebagai larutan kontrol
(larutan uji dengan konsentrasi 0 µg/mL).
3.7.4 Pembuatan Larutan Induk Baku Ekstrak Etanol Buah Okra
Sebanyak 25 mg sampel ditimbang kemudian dilarutkan dalam labu
tentukur 25 mL dengan metanol, lalu volumenya dicukupkan dengan metanol
sampai garis tanda (konsentrasi 1000 µg/mL).
3.7.5 Pembuatan Larutan Induk Baku Vitamin C
Sebanyak 2,5 mg serbuk vitamin C ditimbang, dimasukkan ke dalam labu
tentukur 25 mL dilarutkan dengan metanol lalu volumenya dicukupkan dengan
metanol sampai garis tanda (konsentrasi 100 µg/mL).
3.7.6 Pembuatan Larutan Uji
3.7.6.1 Larutan Uji Ekstrak Etanol Buah Okra
Larutan induk baku ekstrak dipipet sebanyak 0,3 mL; 0,45 mL; 0,6 mL;
0,75 mL dan 0,9 mL kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL (untuk
mendapatkan konsentrasi 60 µg/mL, 90 µg/mL, 120 µg/mL, 150 µg/mL, dan 180
µg/mL), kemudian kedalam masing-masing labu tentukur ditambahkan 1 mL
larutan induk baku DPPH 200 µg/mL, lalu volume dicukupkan dengan metanol
sampai garis tanda dan dihomogenkan.
3.7.6.2 Larutan Uji Pembanding Vitamin C
Larutan induk baku vitamin C dipipet sebanyak 0,1 mL; 0,2 mL; 0,3 mL;
0,4 mL dan 0,5 mL kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL (untuk
mendapatkan konsentrasi 2 µg/mL, 4 µg/mL, 6 µg/mL, 8 µg/mL dan 10 µg/mL),
kemudian ke dalam masing-masing labu tentukur ditambahkan 1 mL larutan
30
induk baku DPPH 200 µg/mL, lalu volume di cukupkan dengan metanol sampai
garis tanda.
3.8 Analisis Persen Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH
Larutan uji yang telah dipersiapkan, segera diinkubasi pada suhu 370C
selama 31 menit. Selanjutnya kontrol dan sampel uji diukur pada panjang
gelombang 516 nm. Menurut Fitriana, dkk (2015), penentuan persen
pemerangkapan radikal bebas oleh sampel uji, ekstrak etanol buah okra dengan
vitamin C sebagai kontrol positif, menggunakan metode pemerangkapan radikal
bebas 1,1-diphenyl-2-picryhydrazil (DPPH), yaitu dihitung dengan rumus sebagai
berikut:
Aktivitas pemerangkapan radikal bebas (%) =
Keterangan: Ab = Absorbansi blanko

As = Absorbansi senyawa uji
3.9 Analisis Nilai IC50 (Inhibition Concentration)
Aktivitas antioksidan dapat dihitung menggunakan nilai konsentrasi
efisien atau inhibition concentration (IC50). Menurut penelitian Delviana (2017),
hasil perhitungan dimasukkan kedalam persamaan regresi dengan konsentrasi
ekstrak (µg/mL) sebagai absis (sumbu X) dan nilai % peredaman dari antioksidan
sebagai ordinatnya (sumbu Y). Zat yang mempunyai aktivitas antioksidan yang
tinggi, akan mempunyai nilai EC50 yang rendah (Molyneux, 2004).
31
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan
Identifikasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Medanense (MEDA)
Universitas Sumatera Utara, hasilnya adalah buah okra dengan nama spesies
Abelmoschus esculentus (L.) Moench, suku Malvaceae. Hasil identifikasi dapat
dilihat pada Lampiran 1 halaman 46.
4.2 Hasil Pemeriksaan Makroskopik
Hasil pemeriksaan makroskopik dari buah okra menunjukkan bahwa buah
okra memiliki warna hijau, berbentuk lonjong dan memiliki ujung yang sedikit
meruncing serta memiliki bulu halus dipermukaannya, tidak berbau, memiliki
lendir, rasa agak pahit. Buah okra juga memiliki biji yang berbentuk ginjal
Gambar buah okra dapat dilihat pada Lampiran 2 halaman 47.
Hasil pemeriksaan makroskopik dari simplisia buah okra menunjukkan
simplisia buah okra berwarna hijau kecoklatan, tidak berbau, dan rasa agak pahit.
Gambar simplisia buah okra dapat dilihat pada Lampiran 2 halaman 47.
4.3 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik
Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia buah okra diperoleh
adanya kristal Ca-oksalat druse, rambut penutup, dan penebalan xylem bentuk
spiral. Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia buah okra dapat dilihat
pada Lampiran 3 halaman 48.
32
4.4 Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
Hasil pemeriksaan kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol,
kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam dapat dilihat pada Tabel 4.1.
Tabel 4.1 Hasil Karakterisasi Simplisia Buah Okra
No Parameter Hasil (%)

1 Kadar air 7,28
2 Kadar sari larut dalam air 96,66
3 Kadar sari larut dalam etanol 42,6
4 Kadar abu total 9
5 Kadar abu tidak larut asam 4,8
Tabel 4.1 menunjukkan kadar air pada simplisia buah okra sebesar 7,28%,
kadar tersebut memenuhi persyaratan umum yaitu lebih kecil dari 10%. Menurut
literatur, kadar air dalam ekstrak tidak boleh melebihi 10%. Tujuan pemeriksaan
kadar air adalah untuk memberi batasan minimal besarnya kandungan air dalam
bahan baik ekstrak maupun simplisia, makin tinggi kadar air, makin mudah untuk
ditumbuhi jamur dan kapang sehingga dapat menurunkan aktivitas biologi
simplisia dalam masa penyimpanan (Salim, dkk., 2016).
Penetapan kadar sari yang larut dalam air menyatakan jumlah zat yang
tersari dalam pelarut air (bersifat polar) yang terkandung dalam simplisia, dari
penelitian ini diperoleh hasil penetapan kadar sari yang larut dalam air yaitu
96,66%. Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol menyatakan jumlah zat
yang tersari dalam pelarut etanol (bersifat polar atau non polar), dari penelitian ini
diperoleh hasil penetapan kadar sari yang larut dalam etanol yaitu 42,6%
Penetapan kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam dari serbuk
simplisia berturut-turut adalah 9% dan 4,8%. Kadar abu dan kadar abu tak larut
33
asam hendaknya menghasilkan nilai rendah karena uji ini merupakan indikator
adanya cemaran logam yang tidak akan hilang pada suhu tinggi (Salim, dkk.,
2016). Perhitungan karakterisasi simplisia dapat dilihat pada Lampiran 5 halaman
50.
4.5 Hasil Pemeriksaan Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak
Hasil pemeriksaan skrining fitokimia simplisia dan ekstrak etanol buah
okra dapat dilihat pada Tabel 4.2.
Tabel 4.2 Hasil Skirining Simplisia dan Ekstrak Buah Okra
No Identifikasi Simplisia Ekstrak
1 Flavonoid + +
2 Alkaloid + +
3 Saponin - -
4 Tanin + +
5 Glikosida + +
6 Steroid/Terpenoid + +
Keterangan : (+) positif = mengandung golongan senyawa
(-) negatif = tidak mengandung golongan senyawa
Berdasarkan hasil skrining fitokimia dapat dilihat, golongan senyawa
metabolit sekunder yang terdapat di dalam simplisia buah okra adalah flavonoid,
alkaloid, glikosida, tanin, dan steroid/terpenoid, dan metabolit sekunder yang
terdapat di dalam ekstrak buah adalah flavonoid, alkaloid, tanin, glikosida, dan
steroid/terpenoid.
Menurut Huliselan, dkk (2015) tumbuhan mengandung metabolit
sekunder yang dapat berpotensi sebagai antioksidan, diantaranya adalah alkaloid,
flavonoid, senyawa fenol, steroid, dan terpenoid. Flavonoid merupakan salah satu
senyawa fenol. Senyawa fenol dapat meredam radikal bebas dengan
34
menyumbangkan elektronnya melalui atom hidrogen gugus hidroksil
(Halimatussa’diah, dkk., 2014).
4.6 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan EEBO dengan Metode

Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH
Salah satu metode yang sekarang ini sedang popular adalah
pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl (DPPH) (Molyneux,
2004). Aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol buah okra diperoleh dari hasil
pengukuran absorbansi radikal bebas DPPH dengan adanya penambahan larutan
uji ekstrak etanol buah okra dengan menggunakan vitamin C sebagai pembanding.
Serapan diukur dengan waktu pengukuran yang digunakan adalah 31 menit
(Operating Time), kemudian serapan diamati. Hasil penentuan waktu kerja
(Operating Time) dapat dilihat pada Lampiran 6 halaman 53.
4.6.1 Hasil penentuan panjang gelombang serapan maksimum DPPH
Pengukuran serapan maksimum larutan DPPH dengan konsentrasi 40
µg/mL dalam methanol menggunakan spektrofotometri UV-Visibel. Data hasil
pengukuran panjang gelombang maksimum dapat dilihat pada Gambar 4.1.
35
Gambar 4.1 Kurva Panjang Gelombang Maksimum DPPH (515.5 nm)
Pengukuran ini menunjukkan bahwa DPPH dalam metanol menghasilkan
serapan maksimum pada panjang gelombang 515.5 nm.
4.6.2 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Sampel Uji EEBO
Aktivitas antioksidan ekstrak etanol buah okra diperoleh hasil pengukuran
absorbansi DPPH pada menit ke-31 dengan adanya penambahan larutan uji
dengan konsentrasi 60 µg/mL; 90 µg/mL; 120 µg/mL;150 µg/mL dan 180 µg/mL.
Kemampuan ekstrak etnol buah okra untuk menangkap radikal DPPH
merupakan suatu indikasi bahwa sampel uji tersebut beraktivitas antioksidan
(Rosahdi, dkk., 2013)
Penurunan absorbansi DPPH dan persen pemerangkapan DPPH oleh
EEBO dapat dilihat pada Tabel 4.3. Perhitungan Hasil Uji Aktivitas Antioksidan
EEBO dapat dilihat pada Lampiran 7 halaman 54.
36
Tabel 4.3 Penurunan Absorbansi dan Persen Pemerangkapan DPPH Oleh EEBO
Konsen- Absorbansi % Pemerangkapan

trasi
Rata-
EEBO I II III I II III
rata
(ppm)
60 0,975 0,975 0,975 19,88 19,88 19,88 19,88
90 0,884 0,884 0,884 27,36 27,36 27,36 27,36
120 0,782 0,782 0,782 35,74 35,74 35,74 35,74
150 0,688 0,688 0,688 43,46 43,46 43,46 43,46
180 0,596 0,595 0,596 51,02 51,10 51,02 51,04
Dari Tabel 4.3 di atas, dapat kita lihat bahwa terjadi penurunan absorbansi
DPPH. Hal ini disebabkan karena adanya aktivitas pemerangkapan oleh larutan
uji yaitu ekstak etanol buah okra.
Prinsip dari metode uji aktivitas antioksidan ini adalah pengukuran
aktivitas antioksidan secara kuantitatif yaitu dengan melakukan pengukuran
penangkapan radikal DPPH oleh suatu senyawa yang mempunyai aktivitas
antioksidan dengan menggunakan spektrofotometri UV-Vis sehingga dengan
demikian akan diketahui nilai aktivitas peredaman radikal bebas yang dinyatakan
dengan nilai IC50 (Inhibitory Concentration). Prinsip kerja dari pengukuran ini
adalah adanya radikal bebas stabil yaitu DPPH yang dicampurkan dengan
senyawa antioksidan yang memiliki kemampuan mendonorkan hidrogen,
sehingga radikal bebas dapat diredam (Ridho, dkk., 2013).
4.6.3 Hasil Analisis Nilai IC50 (Inhibitory Concentration)
Nilai IC50 didefinisikan sebagai besarnya konsentrasi senyawa uji yang
dapat meredam radikal bebas DPPH sebanyak 50%. Semakin kecil nilai IC50
maka aktivitas peredaman radikal beba ssemakin tinggi (Ridho, dkk., 2013). Nilai
IC50 dari EEBO dapat di lihat pada Tabel 4.4 dan kategori nilai IC50 sebagai
37
antioksidan dapat dilihat pada Tabel 4.5. Perhitungan nilai IC50 EEBO dapat
dilihat pada Lampiran 8 halaman 62.
Tabel 4.4 Nilai IC50 dari EEBO
Larutan Uji Persamaan Regresi IC50 (µg/mL)
EEBO Y = 0,28 X + 1,58 172,92
Tabel 4.5 Kategori Nilai IC50 Sebagai Antioksidan (Utami, 2017).
No. Kategori Konsentrasi (µg/mL)

1. Sangat Kuat < 50
2. Kuat 50-100
3. Sedang 101-150
4. Lemah 151-200
Nilai dari IC50 ekstrak etanol buah okra adalah 172,92 µg/mL. Dari Tabel
kategori nilai IC50 diatas, dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol buah okra
masuk kedalam kategori lemah (151-200 µg/mL) sebagai antioksidan.
Nilai IC50 ini berbanding terbalik dengan aktivitas antioksidan, semakin
tinggi aktivitas antioksidannya, maka nilai IC 50 semakin rendah (Molyneux,
2004).
Menurut Samosir, dkk (2012) besarnya angka antioksidan tersebut erat
hubungannya dengan kandungan flavonoid. Semakin banyak senyawa flavonoid
yang terkandung maka semakin besar pula total aktivitas antioksidannya. Jenis
pelarut ekstraksi pada larutan sampel sangat berpengaruh terhadap perolehan
kadar zat tersari dan aktivitas antioksidan pada larutan sampel (Rivai, dkk., 2012).
38
4.6.4 Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas DPPH Oleh Vitamin C
Sebagai Pembanding
Pada pengujian aktivitas antioksidan digunakan larutan pembanding yaitu
asam askorbat. Penggunaan pembanding pada pengujian aktivitas antioksidan ini
adalah untuk mengetahui seberapa kuat potensi antioksidan yang ada pada ekstrak
etanol buah okra jika dibandingkan dengan vitamin C. Apabila nilai IC50 sampel
sama atau mendekati nilai IC50 pembanding maka dapat dikatakan bahwa sampel
berpotensi sebagai salah satu alternatif antioksidan yang sangat kuat (Ridho, dkk.,
2013). Hasil analisis peredaman radikal bebas oleh vitamin C dapat dilihat pada
Tabel 4.6. Perhitungan Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Vitamin C dapat dilihat
pada Lampiran 7 halaman 54.
Tabel 4.6 Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas Oleh Vitamin C Sebagai
Pembanding
No. Konsentrasi (µg/mL) % Peredaman Vitamin C

1. 0 0,00
2. 2 17,33
3. 4 37,82
4. 6 53,49
4. 8 76,63
5. 10 95,42
Aktivitas antioksidan dari pembanding vitamin C dengan konsentrasi
2 µg/mL, 4 µg/mL, 6 µg/mL, 8 µg/ mL dan 10 µg/mL, diperoleh dari hasil
pengukuran absorbansi radikal bebas DPPH pada menit ke-31. Kemudian
dibandingkan dengan kontrol DPPH (tanpa penambahan larutan uji). Nilai IC 50
dari Vitamin C dapat dilihat pada Tabel 4.7.
39
Tabel 4.7 Nilai IC50 dari Vitamin C
Larutan Uji Persamaan Regresi IC50 (µg/mL)
Vitamin C Y = 9,58 X – 1,12 5,33
Dari hasil perhitungan didapat nilai IC50 vitamin C adalah 5,33 µg/mL,
sedangkan nilai IC50 dari ekstrak adalah sebesar 172,92 µg/mL sehingga ekstrak
etanol buah okra memiliki aktivitas antioksidan yang lemah bila dibandingkan
dengan vitamin C. Perhitungan nilai IC50 vitamin C dapat dilihat pada Lampiran
8 halaman 63.
40
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
a. Hasil pemeriksaan skrining fitokimia golongan senyawa kimia yang
terkandung dalam simplisia dan ekstrak etanol buah okra menujukkan adanya
senyawa kimia golongan flavonoid, alkaloid, tanin, glikosida, dan steroid.
b. Hasil pengujian aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode
pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)
diperoleh ekstrak etanol buah okra memiliki aktivitas antoksidan yang
tergolong lemah dengan nilai IC50 172,92 µg/mL.
c. Hasil pengujian aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode
pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)
diperoleh Vitamin C memiliki aktivitas antioksidan paling kuat dibandingkan
dengan ekstrak etanol buah okra dengan nilai IC50 yaitu 5,33 µg/mL.
5.2 Saran
Berdasarkan pembahasan dan kesimpulan, maka penulis menyarankan untuk
menguji aktivitas antioksidan buah okra dengan metode ekstraksi dan pelarut yang
berbeda.
41
DAFTAR PUSTAKA
Aswara, B., Syahrudin, Chotimah, H. E. N. C. (2017). Penggunaan Berbagai Jenis

Bokashi Limbah Pasar Terhadap Pertumbuhan Dan Hasil Tanaman Okra
(Abelmoschus esculentus) Pada Tanah Gambut. Jurnal AGRI PEAT. 18(2):
125-133.
Bag, G. C., Devi, G., and Bhaigyabati, Th. (2015). Assessment of Total Flavonoid
Content and Antioxdant Activity of Methanolic Rhizome Extract of Three
Hedychium species of Manipur Valley. Int. J. Phar. Sci. Rev. Res. 30(1):
154-159.
Delviana. (2017). Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Daun Okra

(Abelmoschus Esculentus Moench.). Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara. Halaman 1-2.
Depkes RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen

Kesehatan RI. Halaman 33.
Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid Keenam. Jakarta:

Departemen Kesehatan RI. Halaman 299-305, 334-335.
Farnsworth, N. R. (1996). Biological and Phytochemical Screening of Plants.

Journal of Pharmaceutical Sciences. 55(3): 263.
Fitriani, W. D., Fatmawati, S., Ersam, T. (2015). Uji Aktivitas Antioksidan

terhadap DPPH dan ABTS dari Fraksi-fraksi Daun Kelor (Moringa
oleifera). Prosiding Simposium Nasional Inovasi dan Pembelajaran Sains
2015. Bandung. Halaman 658.
http://portal.fmipa.itb.ac.id/snips2015/files/snips_2015_wiwit_denny_fitri
ana_563cff97d1863d41e1fe188daae1e9c1.pdf
Gandjar, I. G., Rohma, A. (2008). Kimia Farmasi Analisis. Cetakan Ketiga.

Yogyakarta : Pustaka Belajar. Halaman 252-254.
Halimatussa’diah, F., Fitriani, V. Y., Rijai, L. (2014). Aktivitas Antioksidan

Kombinasi Daun Cempedak (Artocarpus champedan) Dan Daun Bandotan
(Ageratum conyzoides L). J. Trop. Pharm. Chem. 2(5): 248-251.
42
Harborne, J. B. (1984). Phytochemical Methods. Terjemahan: Padmawinato, K.,
dan Soediro, I. (1987). Metode Fitokimia. Edisi kedua. Bandung: Penerbit
ITB. Halaman 47-49, 71, 153.
Heyne, K. (1913). Nuttige Planten Van Nederlandsch Indie. Terjemahan: Badan

Litbang Departemen Kehutanan. Tumbuhan Berguna Indonesia III.
Jakarta: Koperasi Karyawan Depar temen Kesehatan. (1981). Halaman
1314.
Huliselan, Y. M., Runtuwene, M. R. J., Wewengkang, D. S. (2015). Aktivitas

Antioksidan Ekstrak Etanol, Etil Asetat, Dan N-Heksan Dari Daun
Sesewanua (Clerodendron Squamatum Vahl.). Pharmacon Jurnal Ilmiah
Farmasi-UNSRAT. 4(3): 156.
Lisnawati, N., Handayani, I. A., Fajrianti, N. 2016. Analisa Flavonoid Dari

Ekstrak Etanol 96% Kulit Buah Okra Merah (Abelmoschus esculentus L.
Moench) Secara Kromatografi Lapis Tipis Dan Spektrofotometri UV-Vis.
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina. 1(1): 105-112.
Marjoni, M. R. (2016). Dasar-Dasar Fitokimia. Cetakan Pertama. Jakarta : CV.

Trans Info Media. Halaman 15,16,20-24.
Markham, K. R. (1982). Techniques of Flavonoid Identification. Terjemahan :

Padmawinata, K. (1988). Cara Mengidentifikasi Flavonoid. Bandung:
Penerbit ITB. Halaman 1-3.
Molyneux, P. (2004). The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl

(DPPH) for estimating antioxidant activity. Songklanakarin J. Sci.
Technol. 26(2) : 211-219.
Ridho, E. A., Sari, F., Wahdaningsih, S. (2013). Uji Aktivitas Antioksidan

Ekstrak Metanol Buah Lakum Dengan Metode DPPH (2-2-Difenil-1-
Pikrilhidrazil). Naskah Publikasi. Halaman 8.
https://www.neliti.com/publications/193217/uji-aktivitas-antioksidan-
ekstrak-metanol-buah-lakum-Cayratia-Trifolia-Dengan-Me
Rivai, H., Putra, R. Y., Krisyanella. (2012). Penentuan Pengaruh Jenis Pelarut
Pengekstrak Terhadap Perolehan Kadar Senyawa Fenolat Dan Aktifitas
Antioksidan Dari Daun Jambu Biji (Psidium guajava L.). Jurnal Farmasi
Higea, 4(1): 16-22.
43
Rosahdi, T. D., Kusmiyati, M., Wijayanti, F. R. (2013). Uji Aktivitas Daya
Antioksidan Buah Rambutan Rapiah Metode DPPH.
Journal.uinsgd.ac.id.istek. 7(1): 1-15.
Roy, A., Shrivastava, S. L., dan Mandal, S. M. (2014). Functional Properties of

Okra Abelmoschus esculentus L. (Moench): traditional claims and
scientific evidences. Mini Review: Plant Science Today. 1(3): 121-130.
Horizon e-Publishing Group.
Salim, M., Sulityaningrum, N., Isnawati, A., Sitorus, H., Yahya., Ni’mah, T.
(2016). Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak Kulit Buah Duku (Lansium
domesticum Corr) dari Provinsi Sumatera Selatan dan Jambi. Jurnal
Kefarmasian Indonesia. 6(3): 117-128.
Samosir, A. P., Runtuwene, M., R., J., Citraningtyas, G. (2012). Uji Aktivitas
Antioksidan Dan Total Flavonoid Pada Ektrak Etanol Pinang Yaki (Areca
vestiaria). Halaman 5.
https://ejournal.unsrat.ac.id/index.php/pharmacon/article/view/460
Santoso, U. (2016). Antioksidan Pangan. Cetakan Pertama. Yogyakarta : Gajah

Mada University Press. Halaman 1-5.
Sayuti, K dan Yenrina, R. (2015). Antioksidan Alami dan Sintetik. Cetakan

Pertama. Padang : Andalas University Press. Halaman 15-20, 76-77.
Silalahi, J. (2006). Makanan Fungsional. Yogyakarta: Kanisius. Halaman 39-41.
United States Departement of Agriculture (USDA). (2018). Classification for

Kingdom Plantae Down to Species Abelmoschus esculentus (L.) Moench.
https://plants.usda.gov/java/ClassificationServlet?source=display&classi=
ABES. Diakses pada tanggal 07 Oktober 2018.
Utami, N. H. (2017). Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Herba Poguntano

(Picria fel-terrae Lour.) Secara In Vitro. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara. Halaman 34, 43.
Wardaningsih, S., Setyowati, E. P., Wahyuno, S. (2011). Aktivitas Penangkap

Radikal Bebas Dari Batang Pakis (Alsophila Glauca J. Sm). Majalah Obat
Tradisional. 16(3): 156-160.
https://jurnal.ugm.ac.id/TradMedJ/article/view/8053/6244
44
Warono, D., Syamsudin. (2013). Unjuk Kerja Spektrofotometer Untuk Analisa
Zat Aktif Ketoprofen. Konversi. 2(2): 57-56.
https://media.neliti.com/media/publications/108482-ID-unjuk-kerja-
spektrofotometer-untuk-anali.pdf
Werdhasari, A. (2014). Peran Antioksidan Bagi Kesehatan. Jurnal Biotek

Medisiana Indonesia . 3(2): 59-68.
WHO. (1992). Quality Control Methods For Medicinal Plant Material.

Switzerland: World Health Organization. Halaman 35-39.
Yusdiana, N. (2018). Analisis Kadar Protein Pada Okra (Abelmoschus esculentus

(L.) Moench.) Dengan Metde Kjeldahl.. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara. Halaman 5.
45
Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan
46
Lampiran 2. Sampel yang Digunakan
Gambar 1. Buah Okra
Gambar 2. Simplisia Buah Okra
47
Lampiran 3. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik
1
2
Gambar 3. Mikroskopik Simplisia Buah Okra (Abelmoschus

esculentus (L.) Moench) pada Pembesaran 10x40
Keterangan Gambar : 1. Kristal Ca-oksalat druse

2. Penebalan xilem bentuk spiral
3.Rambut Penetup
48
Lampiran 4. Bagan Kerja Penelitian
Buah Okra
Dicuci di air mengalir

Ditiriskan
Ditimbang berat basahnya
Dipotong-potong
Dikeringkan
Ditimbang berat keringnya
Simplisia
Dihaluskan dengan blender

Disimpan
Serbuk simplisia
Karakterisasi Skrining fitokimia Pembuatan ekstrak
Dimaserasi
dengan
 Makroskopik  Alkaloid
 etanol 96%
 Mikroskopik Glikosida
 Penetapan kadar air  Flavonoid Ekstrak
 Triterpenoid/ etanol
 Penetapan kadar sari
Steroid
yang larut air
 Saponin
 Penetapan kadar sari  Tanin
yang larut etanol
 Penetapan kadar abu
Uji aktivitas
total
 Penetapan kadar abu antioksidan
yang tidak larut
asam
49
Lampiran 5. Perhitungan Karakterisasi Simplisia Buah Okra
1. Penetapan kadar air simplisia buah okra
% Kadar air simplisia = x 100%
Berat Sampel Volume Awal Volume Akhir

No.
(g) (ml) (ml)
1. 5,03 3,4 3,7
2. 5,05 3,7 4,0
3. 5,03 4,0 4,5
1. Kadar air = x 100% = 5,96 %

2. Kadar air = x 100% = 5,94 %
3. Kadar air = x 100% = 9,94 %
% Rata-rata kadar air = = 7,28 %
2. Penetapan kadar sari larut etanol simplisia buah okra
% Kadar sari larut dalam etanol = 100%
No. Berat Sampel (g) Berat Sari (g)

1. 5 0,15
2. 5 0,1
3. 5 0,1
1. Kadar sari larut etanol = x x 100% = 72 %

% Rata-rata kadar sari larut etanol = = 42,6%
50
Lampiran 5. (Lanjutan)
3. Penetapan kadar sari larut air simplisia buah okra
% Kadar sari larut dalam air = 100%
No. Berat Sampel (g) Berat Sari (g)

1. 5,03 1,27
2. 5,05 0,96
3. 5,03 0,71
1. Kadar sari larut air = x x 100% = 125 %

2. Kadar sari larut air = x x 100% = 95%
3. Kadar sari larut air = x x 100% = 70%
% Rata-rata kadar sari larut air = = 96,66 %
4. Penetapan kadar abu total simplisia buah okra
% Kadar abu total = 100%
No. Berat Sampel (g) Berat Abu (g)

1. 2,0 0,20
2. 2,0 0,21
3. 2,0 0,13
0,20
1. Kadar abu total = 100% = 10%
2,0
0,21
2. Kadar abu total = 100% = 10,5%
2,0
0,13
3. Kadar abu total = 100% = 6,5%
2,0
% Rata-rata kadar abu total = = 9%
51
5. Penetapan kadar abu tidak larut dalam asam simplisia buah okra
% Kadar abu tidak larut dalam asam = x100%
No. Berat Sampel (g) Berat Abu (g)

1. 2,0 0,1
2. 2,0 0,09
3. 2,0 0,1
0,1
1. Kadar abu tidak larut dalam asam = 100% =5%
2,0
0,09
2. Kadar abu tidak larut dalam asam = 100% = 4,5%
2,0
0,1
3. Kadar abu tidak larut dalam asam = 100% =5%
2,0
% Rata-rata kadar abu tidak larut asam = = 4.8 %
52
Lampiran 6. Penentuan Waktu Kerja (Operating Time)
Menit Absorbansi Menit Absorbansi Menit Absorbansi

ke- ke- ke-
1 1,0172 22 1.0205 46 1,0261
2 1,0169 23 1.0208 47 1,0260
3 1,0168 24 1.0210 48 1,0266
4 1,0171 25 1.0207 49 1,0268
5 1,0168 26 1.0204 50 1,0267
6 1,0169 27 1.0207 51 1,0270
7 1,0171 28 1.0218 52 1,0273
8 1,0175 29 1.0224 53 1,0276
9 1,0174 30 1.0234 54 1,0274
10 1,0175 31 1.0236 55 1,0276
11 1,0178 32 1.0236 56 1,0281
12 1,0179 33 1.0240 57 1,0284
13 1,0179 34 1.0243 58 1,0287
14 1,0179 35 1.0243 59 1,0287
15 1,0180 36 1.0244 60 1,0294
16 1,0183 37 1.0251 61 1,0294
17 1,0184 38 1.0250 62 1,0295
18 1,0191 39 1.0246 63 2,0298
19 1,0197 40 1.0247 64 1,0302
20 1,0199 41 1.0250 65 1,0302
21 1,0201 42 1.0259
22 1,0205 43 1.0263
23 1,0208 44 1.0264
24 1,0210 45 1.0262
53
Lampiran 7. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan
1. Ekstrak etanol buah okra
Data absorbansi pengukuran pertama
Konsentrasi larutan
uji (µg/mL)
Absorbasi % Pemerangkapan
0 1,217 -
60 0,975 19,88
90 0,884 27,36
120 0,782 35,74
150 0,688 43,46
180 0,596 51,02
% pemerangkapan = × 100%
Keterangan:
= Absorbansi tidak mengandung sampel
= Absorbansi sampel
Perhitungan % Pemerangkapan Ekstrak Etanol Buah Okra
- Konsentrasi 60 µg/ml
% pemerangkapan = × 100% = 19,88%
% pemerangkapan = × 100% = 27,36%
% pemerangkapan = × 100% = 35,74%
% pemerangkapan = × 100% = 43,46%
54
% pemerangkapan = × 100% = 51,02
Data absorbansi pengukuran kedua
Konsentrasi
Absorbansi % Pemerangkapan
larutan uji (µg/mL)
0 1,217 -
60 0,975 19,88
90 0,884 27,36
120 0,782 35,74
150 0,688 43,46
180 0,595 51,10
Keterangan:

= Absorbansi sampel
% pemerangkapan = × 100% = 19,88%
% pemerangkapan = × 100% = 27,36%
% peredaman = × 100% = 35,74%
55
% pemerangkapan = × 100% = 43,46%
% pemerangkapan = × 100% = 51,10%
Data absorbansi pengukuran ketiga
Konsentrasi Larutan
Uji (µg/mL)
0 1,217 -
60 0,975 19,88
90 0,884 27,36
120 0,782 35,74
150 0,688 43,46
180 0,596 51,02
Keterangan:

= Absorbansi sampel
% pemerangkapan = × 100% = 19,88%
% pemerangkapan = × 100% = 27,36%
56
% pemerangkapan = × 100% = 35,74%
% pemerangkapan = × 100% = 43,46%
% pemerangkapan = × 100% = 51,02%
Data Nilai Rata-Rata % Pemerangkapan Ekstrak Etanol Buah Okra
Konsentrasi % Pemerangkapan
Larutan Uji
I II III Rata-rata
(µg/mL)
0 - - - -
60 19,88 19,88 19,88 19,88
90 27,36 27,36 27,36 27,36
120 35,74 35,74 35,74 35,74
150 43,46 43,46 43,46 43,46
180 51,02 51,10 51,02 51,04
57
2. Vitamin C pembanding
Data absorbansi pengukuran pertama
Konsentrasi
Larutan Uji Absorbansi % Pemerangkapan
(µg/mL)
0 1,217 -
2 1,006 17,33
4 0,757 37,79
6 0,566 53,49
8 0,284 76,66
10 0,055 95,48
% peredaman = × 100%
Keterangan:

= Absorbansi sampel
Perhitungan % Pemerangkapan Vitamin C Pembanding
- Konsentrasi 2µg/ml
% pemerangkapan = × 100% = 17,33%
% pemerangkapan = × 100% = 37,79%
% pemerangkapan = × 100% = 53,49%
% pemerangkapan = × 100% = 76,66%
58
% pemerangkapan = × 100% = 95,48%
Data absorbansi pengukuran kedua
Konsentrasi
Larutan Uji Absorbansi % Pemerangkapan
(µg/mL)
0 1,217 -
2 1,006 17,33
4 0,757 37,79
6 0,566 53,49
8 0,285 76,58
10 0,056 95,39
Keterangan:

= Absorbansi sampel
% pemerangkapan = × 100% = 17,33%
% pemerangkapan = × 100% = 37,79%
% pemerangkapan = × 100% = 53,49%
59
% pemerangkapan = × 100% = 76,58%
% pemerangkapan = × 100% = 95,39%
Data absorbansi pengukuran ketiga
Konsentrasi Larutan
Uji (µg/mL)
0 1,217 -
2 1,006 17,33
4 0,756 37,88
6 0,566 53,49
8 0,284 76,66
10 0,056 95,39
Keterangan:

= Absorbansi sampel
% pemerangkapan = × 100% = 17,33%
% pemerangkapan = × 100% = 37,88%
60
% pemerangkapan = × 100% = 53,49%
% pemerangkapan = × 100% = 76,66%
% pemerangkapan = × 100% = 95,39%
Data nilai rata-rata % Pemerangkapan Vitamin C Pembanding
Konsentrasi % Pemerangkapan
Larutan Uji (µg/mL) I II III Rata-Rata
0 - - - -
2 17,33 17,33 17,33 17,33
4 37,79 37,79 37,88 37,82
6 53,49 53,49 53,49 53,49
8 76,66 76,58 76,66 76,63
10 95,48 95,39 95,39 95,42
61
Lampiran 8. Perhitungan Nilai IC50
1. Ekstrak etanol buah okra
X Y XY
0 0 - -
60 19,88 1192,8 3600
90 27,36 2462,4 8100
120 35,74 4288,8 14400
150 43,46 6519 22500
180 51,04 9187,2 32400
= 600 = 177,48 = 23650,2 = 81000
= 100 = 29,58
X = Konsentrasi (µg/ml)
Y = % Pemerangkapan
a=
a=
a=
a= 0,28
b= -a
b= 29,58 – (0,28)(100)
b= 1,58
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,28X + 1,58
62
Nilai IC50 : Y = 0,28X + 1,58
50 = 0,28X + 1,58
X = 172,92 µg/ml
IC50 ekstrak etanol buah okra= 172,92 µg/ml
2. Vitamin C pembanding
X Y XY
0 0 0 0
2 17,33 34,66 4
4 37,82 151,28 16
6 53,49 320,94 36
8 76,63 613,04 64
10 95,42 954,2 100
= 30 = 280,69 = 2074,12 = 220
=5 = 46,78
X = Konsentrasi (µg/ml)
Y = % Peredaman
a=
a=
a=
a= 9,58
b= - a
63
b= 46,78 – (9,58)(5)
b= -1,12
Jadi, persamaan garis regresi Y = 9,58X – 1,12
Nilai IC50 : Y = 9,58X –1,12
50 = 9,58X –1,12
X = 5,33 µg/ml
IC50 vitamin C pembanding = 5,33µg/ml
64

PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Universitas Sumatera Utara

Repositori Institusi USU http://repositori.usu.ac.id

Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL BUAH

Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi

Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt.

Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt.

Medan, Oktober 2018

Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.

Universitas Sumatera Utara

karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi

(Abelmoschus esculentus (L.) Moench) secara spektrofotometri UV-Vis. Skripsi

Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-

Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di

membimbing penulis dengan penuh kesabaran dan tanggung jawab, memberikan

selaku anggota penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan

keluarga, Bapak Uda H. P Marpaung, Inanguda M. Sitorus dan Opung R. Turnip

memberikan semangat serta doa kepada penulis.

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum

skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.

Medan, Oktober 2018

Saya yang bertanda tangan di bawah ini:

Nama : Nona Marpaung

Program Studi : S-1 Reguler Farmasi

Judul Skripsi : Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Buah Okra

Hijau (Abelmoschus esculentus (L.) Moench.) secara

kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.

mendapat sanksi apapun oleh Program Studi Fakultas Farmasi Universitas

Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.

Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk

dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.

Medan, Oktober 2018

Free radicals are atoms or molecules containing one unpaired electrons.

HALAMAN JUDUL .............................................................................. ii

LEMBAR PENGESAHAN ................................................................... iii

KATA PENGANTAR ........................................................................... iv

SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT ....................................... vii

ABSTRAK ............................................................................................. vii

ABSTRACT ........................................................................................... viii

DAFTAR ISI .......................................................................................... ix

DAFTAR TABEL .................................................................................. xiv

DAFTAR GAMBAR ............................................................................. xv

DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN ......................................... xvi

DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................... xvii

BAB I PENDAHULUAN ................................................................. 1

1.1 Latar Belakang ................................................................ 1

1.2 Perumusan Masalah ........................................................ 3

1.3 Hipotesis ......................................................................... 3

1.4 Tujuan Penelitian ............................................................ 4

1.5 Manfaat Penelitian .......................................................... 4

1.6 Kerangka Penelitian ........................................................ 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tumbuhan ........................................................... 6

2.1.1 Sistematika tumbuhan ......................................... 6

2.1.3 Morfologi buah ................................................... 6

2.2 Ekstraksi ......................................................................... 7

2.2.1 Metode ekstraksi ..................................................... 7