111501159

EFEK IMUNOMODULATOR FRAKSI N-HEKSAN DAUN MAHKOTA
DEWA (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) TERHADAP RESPON

HIPERSENSITIVITAS DAN TITER ANTIBODI SEL IMUN MENCIT
JANTAN
SKRIPSI
OLEH:
SITI KHADIJAH
NIM 111501159
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017
Universitas Sumatera Utara

EFEK IMUNOMODULATOR FRAKSI N-HEKSAN DAUN MAHKOTA
DEWA (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) TERHADAP RESPON
HIPERSENSITIVITAS DAN TITER ANTIBODI SEL IMUN MENCIT
JANTAN
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh

gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
OLEH:
SITI KHADIJAH
NIM 111501159
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017

PENGESAHAN SKRIPSI
EFEK IMUNOMODULATOR FRAKSI N-HEKSAN DAUN MAHKOTA DEWA

(Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl) TERHADAP RESPON
HIPERSENSITIVITAS DAN TITER ANTIBODI SEL IMUN MENCIT JANTAN
OLEH:
SITI KHADIJAH
NIM 11501159
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi

Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 31Maret 2017
Disetujui oleh:
Pembimbing I, Panitian Penguji,
Yuandani, S.Farm., M.Si., Ph.D., Apt. Dr. Poppy Anjelisa Z. Hasibuan. M.Si., Apt.
NIP 198303202009122004 NIP 1975061102005012003
Yuandani, S.Farm., M.Si., Ph.D., Apt.

Pembimbing II, NIP 198303202009122004
Dr. Edy Suwarso, S.U., Apt. Dadang Irfan Husori, S.Si., M.Sc, Apt.
NIP 195209271981031007 NIP 98204112012121001
Dr. Edy Suwarso, S.U., Apt.

NIP 195209271981031007
Medan, April 2017

Fakultas Farmasi
Dekan,
Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.

NIP 195707231986012001

KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan karunia yang
berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi yang
berjudul “Efek Imunomodulator Fraksi n-Heksan Daun Mahkota Dewa (Phaleria
macrocarpa (Scheff) Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas Dan Titer
Antibodi Sel Imun Mencit Jantan”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat
untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Poppy Anjelisa Z. Hasibuan,
M.Si., Apt., selaku Wakil Dekan I Fakultas Farmasi yang telah menyediakan
fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga
mengucapkan terima kasih kepada Ibu Yuandani, S.Farm M.Si, Ph.D., Apt., dan
Bapak Edy Suwarso, S.U., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah
meluangkan waktu dan tenaga dalam membimbing penulis dengan penuh
kesabaran dan tanggung jawab, memberikan petunjuk dan saran-saran selama
penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan terima kasih juga penulis
sampaikan kepada Ibu Dr. Poppy Anjelisa Z. Hasibuan, M.Si., Apt., selaku ketua
penguji, dan Bapak Dadang Irfan Husori, S.Si., Apt., selaku anggota penguji yang
telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi ini, dan Ibu Prof. Dr.
Masfria, M.S., Apt., selaku dosen pembimbing akademik serta Bapak dan Ibu staf
pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah banyak membimbing penulis selama
masa perkuliahan hingga selesai.

Penulis juga mengucapkan rasa terima kasih dan penghargaan yang tulus
dan tak terhingga kepada keluarga tercinta, Alm. Ayahanda Ir. Suyuda,Ibunda
Jamila,dan adikku Siti Nadya Salsabila. Sahabat tercinta Asyrun Alkhairi Lubis
S.Farm., Apt., yang senantiasa memberikan kasih sayang, semangat dan doa yang
tak ternilai dengan apapun. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada
sahabat tersayang jihan, ina, arisya, silvi dan teman-teman tersayang intan, nona,
lisa, maria, neneng, taufik, raissa, serta Mahasiswa/i angkatan 2011 Fakultas
Farmasi USU yang selalu mendoakan, membantu dan memberi semangat dalam
menyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum
sempurna. Oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang
membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga
skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.
Medan, April 2017

Penulis,
Siti Khadijah
NIM 111501159

SURAT PERNYATAAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini,
Nama : Siti Khadijah
Nomor Induk Mahasiswa : 111501159
Program Studi : S-! Reguler
Judul Skripsi : Efek Imunomodulator Fraksi n-Heksan Daun

Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff)
Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas dan Titer
Antibodi Sel Imun Mencit Jantan.
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil
pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bkan plagiat
karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini
ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima
sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, April 2017

Yang membuat pernyataan,
Siti Khadijah
NIM 111501159

EFEK IMUNOMODULATOR FRAKSI N-HEKSAN DAUN
MAHKOTA DEWA (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) TERHADAP
RESPON HIPERSENSITIVITAS DAN TITER ANTIBODI SEL IMUN
MENCIT JANTAN
ABSTRAK
Imunomodulator membantu tubuh untuk mengoptimalkan fungsi sistem

imun. Penggunaan tanaman obat semakin berkembang dimasyarakat, salah
satunya adalah tanaman mahkota dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl)
yang daunnya diduga memiliki aktivitas sebagai imunomodulator. Kandungan
yang terdapat pada tanaman ini meliputi alkaloid, flavonoid, saponin, dan
triterpenoid. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui efek
imunomodulator fraksi n-Heksan daun mahkota dewa (FHDMD) pada mencit
jantan.
Penelitian ini dilakukan secara eksperimental. Uji respon hipersensitivitas
dengan mengukur pembengkakan telapak kaki mencit sedangkan uji titer antibodi
ditentukan dengan hemaglutinasi. 25 ekor mencit dibagi menjadi 5 kelompok
(CMC Na 0,5%, fraksi n-Heksan daun mahkota dewa dengan dosis 25 mg/kg BB,
50 mg/kg BB dan 100 mg/kg BB dan levamisol 25 mg/kg BB) diberikan secara
oral satu kali sehari selama 7 hari yang sebelumnya diinduksi dengan 0,1 ml sel
darah merah sapi 1%.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa FHDMD dosis 25, 50, 100 mg/kg
BB dapat meningkatkan respon hipersensitivitas dan titer antibodi sel imun mencit
jantan dan terdapat perbedaan yang signifikan dengan CMC-Na 0,5% (p<0,05),
respon hipersensitivitas dan titer antibodi yang paling baik ditunjukkan pada
FHDMD dosis 100 mg/kg BB dengan perbedaan yang tidak signifikan dengan
Levamisol 25 mg/kg BB. Hal ini menunjukkan bahwa FHDMD mempunyai efek
imunomodulator.
Kata kunci : Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl., imunomodulator., respon

hipersensitivitas., titer antibodi.

IMMUNOMODULATOR EFFECT OF N-HEKSAN FRACTION OF
MAHKOTA DEWA(Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) LEAVES ON
HYPERSENSITIVITY RESPONSE AND IMMUNE CELLS ANTIBODY
TITER IN MALE MICE
ABSTRACT
Immunomodulator helps the body to optimize the function of the immune

system. The utilization of medicinal plants progressively growing in the society,
one of which is mahkota dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl). The leaves
was reported to have an imunomodulatory activity. This plant contains alkaloids,
flavonoids, saponins, and triterpenoids. The purpose of this study was to
investigate the immunomodulatory effect of n-hexane fraction of Mahkota Dewa
(HFMDL) Leaves in male mice.
The study was conducted by experimental. Hypersensitivity response test
was measured by swelling of the feet of mice while theantibody titers test was
determined byhemagglutination. Twenty five mice were divided into 5 groups
(CMC Na 0,5%, n-hexane fraction of MahkotaDewa leaves at dose of 50 mg/kg
BW, 100 mg/kg BWand levamisole at dose 25 mg/kg BW) were administered
orally once daily for 7 days previously induced by 0.1 ml of 1% cow red blood
cells.
The results showed that HFMDL dose 25, 50, 100 mg/kg BW increased
the hypersensitivity response and antibody titer of the male mice and significantly
different from those produced by CMC-Na 0,5% (p < 0.05), the highest activity
on hypersensitivity response and antibody titer showed at EAEMDL dose 100
mg/kg BW which not significantly different with Levamisol®. This study proved
that the HFMDL has immunomodulatory effect.
Keyword:Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl., immunomodulatory.,

hypersensitivity response., antibody titer.

DAFTAR ISI
Halaman
Judul ............................................................................................................ i
Lembar Pengesahan .................................................................................... iii
Kata Pengantar ............................................................................................ iv
Surat Pernyataan ......................................................................................... vi
Abstrak ........................................................................................................ vii
Abstract ....................................................................................................... viii
Daftar Isi .................................................................................................... ix
Daftar Tabel ................................................................................................ xi
Daftar Gambar............................................................................................. xii
Daftar Lampiran .......................................................................................... xiii
BAB I PENDAHULUAN .......................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................. 1
1.2 Perumusan Masalah ...................................................................... 3
1.3 Hipotesis ....................................................................................... 4
1.4 Tujuan Penelitian .......................................................................... 4
1.5 Manfaat Penelitian ....................................................................... 4
1.6 Kerangka pikir................................................................................ 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................... 6
2.1 Tanaman Mahkota Dewa ............................................................... 6
2.1.1 Sistematika Tanaman ........................................................... 6
2.1.2 Nama Daerah ....................................................................... 6
2.1.3 Deskripsi Tanaman .............................................................. 6

2.1.4 Bagian yang Digunakan ....................................................... 7
2.1.5 Manfaat Daun Mahkota Dewa ............................................. 7
2.2 Sistem Imun ................................................................................... 7
2.2.1Komponen Sistem Imun ....................................................... 8
2.2.1.1 Komponen Selular ................................................... 8
2.2.1.2 Komponen Humoral ................................................ 10
2.3 Respon Imun ................................................................................. 13
2.3.1 Respon Imun Non Spesifik .................................................. 13
2.3.2 Respon Imun Spesifik .......................................................... 13
2.4 Imunomodulator ............................................................................. 14
2.4.1 Imunostimulator ................................................................... 14
2.4.1.1 Levamisol ................................................................ 15
2.4.2 Imunosupresor...................................................................... 15
2.5 Metode Pengujian Efek Imunomodulator ...................................... 16
2.5.1 Uji Respon Hipersensitivitas................................................ 16
2.5.2 Titer Antibodi....................................................................... 16
BAB III METODE PENELITIAN .......................................................... 17
2.1 Alat dan Bahan .............................................................................. 17
2.1.1 Alat-alat ............................................................................... 17
2.1.2 Bahan-bahan ........................................................................ 17
2.2 Hewan percobaan .......................................................................... 18
2.3 Fraksi n-Heksan Daun Mahkota Dewa ......................................... 18
2.4 Penyiapan Hewan Percobaan ........................................................ 18
2.5 Penyiapan Kontrol, Bahan uji, dan Antigen .................................. 19

2.5.1 Penyiapan suspensi CMC Na 0,5% .................................... 19
2.5.2 Penyiapan suspensi Levamisol ......................................... 20
2.5.3 Penyiapan suspensi Fraksi uji .............................................. 20
2.5.4 Penyiapan larutan PBS ......................................................... 20
2.5.5 Penyiapan Sel Darah Merah Sapi ........................................ 21
2.6Uji Respon Hipersensitivitas .......................................................... 21
2.7 Uji Titer Antibodi .......................................................................... 22
2.8 Analisis Data ................................................................................. 23
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................. 24
3.1 Pengujian Efek Imunomodulator .................................................. 24
3.1.1 Respon Hipersensitivitas ..................................................... 27

3.1.2 Titer Antibodi ...................................................................... 29
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN .................................................. 33
4.1 Kesimpulan ................................................................................... 33
4.2 Saran .............................................................................................. 33
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................ 34
LAMPIRAN ............................................................................................... 37

DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
3.1 Volume pembengkakan kaki mencit dan titer antibodi ................... 27

DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1.1 Kerangka pikr penelitian ............................................................. 5
3.1 Diagram Volume pembengkakan kaki mencit ............................ 28
3.2 Diagram Titer antibodi sel imun mencit ....................................... 30

DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Surat identifikasi tumbuhan ........................................................ 37
2. Surat ethical clearance............................................................... 38
3. Bagan alur penelitian .................................................................. 39
4. Perhitungan serbuk levamisol yang ditimbang ........................... 40
5. Contoh perhitungan dosis.......................................................... 41
6. Perhitungan federer ................................................................... 42
7. Gambar alat-alat ........................................................................ 43
8. Gambar hewan percobaan ......................................................... 45
9. Pembengkakan kaki mencit dan hemaglutinasi ........................ 46
10. Hasil Uji Statistik ...................................................................... 49

BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Tumbuhan merupakan keragaman hayati yang selalu ada di sekitar kita, baik
yang tumbuh secara liar maupun yang sengaja dibudidayakan. Sejak zaman
dahulu, tumbuhan sudah digunakan sebagai tanaman obat walaupun
penggunaannya disebarkan secara turun-temurun. Penggunaan tanaman obat
dalam hal ini obat tradisional dipandang lebih ekonomis dan memiliki efek
samping yang lebih kecil daripada obat sintetik (Yuniarti, 2008).
Salah satu upaya pencegahan penyakit adalah melalui peningkatan daya
tahan tubuh yaitu dengan meningkatkan efektivitas sistem imunitas tubuh supaya
sel-sel imun dapat terus melawan penyebab penyakit dan tubuh dapat terhindar
dari berbagai penyakit. Manusia sejak dilahirkan telah dilengkapi dengan sistem
pertahanan tubuh yang spesifik maupun non spesifik. Dengan sistem pertahanan
tubuh yang disebut sistem imun ini diharapkan manusia dapat menangkal berbagai
bakteri, virus, jamur, dan zat-zat asing lain yang dapat menimbulkan berbagai
gangguan penyakit (Kumala, et al., 2012).
Sistem imun adalah suatu sistem dalam tubuh yang dapat melindungi tubuh
dari unsur-unsur patogen, misalnya bakteri, virus, dan parasit yang dapat
menyebabkan infeksi pada manusia. Respon imun terhadap patogen tergantung
dari kemampuan sistem imun mengenal dan melakukan reaksi yang tepat untuk
menyingkirkan patogen tersebut (Kresno, 2011). Bila sistem imun bekerja pada

zat yang dianggap asing, maka ada dua jenis respon imun yang mungkin terjadi,
yaitu respon imun nonspesfik dan respon imun spesifik (Kresno, 2010).
Imunomodulator merupakan zat ataupun obat yang dapat mengembalikan
ketidakseimbangan sistem kekebalan yang terganggu dengan cara merangsang
dan memperbaiki fungsi sistem kekebalan (Kumala, et al., 2012). Imunostimulator
adalah senyawa yang dapat meningkatkan respon imun. Imunostimulator dapat
mereaktivasi sistem imun dengan berbagai cara seperti meningkatkan jumlah dan
aktivitas sel T, NK-cells dan makrofag (Tan dan Rahardja, 2007).
Indonesia yang beriklim tropis menyebabkan tanahnya subur sehingga
banyak jenis tumbuhan yang dapat tumbuh. Salah satu tumbuhan yang berkhasiat
obat adalah tanaman mahkota dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl).
Merupakan salah satu tanaman asli indonesia yang akhir-akhir ini populer sebagai
tanaman yang secara empiris dapat menobati berbagai macam penyakit, yaitu
kanker dan penyakit kulit seperti alergi (Hariana, 2009).
Pada penelitian Rahayu (2013) menyatakan bahwa daun mahkota dewa
mempunyai efek imunostimulan yang diuji efeknya terhadap respon humoral
menggunakan metode ELISA berdasarkan parameter titer IgM dan IgG pada
mencit. Berdasarkan hasil penelitian Salsabila (2013) menunjukkan bahwa salah
satu tumbuhan tradisional yang dapat digunakan sebagai tumbuhan obat yaitu
daun mahkota dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl). Manfaatnya dapat di
temui hampir di setiap bagian tumbuhan, meliputi batang, daun, biji, daging dan
kulit buah yang didalamnya terkandung senyawa-senyawa alkaloid, saponin,
flavonoid, terpenoid, resin, tannin, polifenol, fenol, lignan, minyak asiri dan
sterol. Hal ini sesuai dengan pernyataan Wagner (1984) yang secara umum

menyebutkan bahwa golongan terpenoid, alkaloid atau polifenol mempunyai sifat
imunostimulator.
Ada beberapa metode yang digunakan dalam pengujian efek
imunomodulator. Beberapa di antaranya adalah uji respon hipersensitivitas,
pengukuran antibodi (titer antibodi), uji transformasi limfosit T, uji komplemen,
indeks migrasi makrofag, uji granulosit, bioluminisensi radikal, respon fagositik,
respon profilerasi limfosit (Roit, 1989). Metode yang digunakan dalam dalam
pengujian efek imunomodulator secara spesifik adalah hipersensitivitas dan titer
antibodi. Menurut Makare et al., (2001), metode tersebut mempunyai keuntungan
diantaranya memungkinkan dua komponen respon imun diukur pada spesies yang
sama dibawah kondisi ideal, relatif sederhana dan tidak mahal.
Berdasarkan uraian di atas, peneliti tertarik untuk melakukan uji efek
imunomodulator fraksi n-Heksan daun mahkota dewa terhadap respon
hipersensitivitasdan titer antibodi sel imunmencit jantan.
1.2 Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas maka perumusan masalah pada penelitian
ini adalah:
a Apakah fraksi n-heksan daun mahkota dewa dapat mempengaruhi respon
hipersensitivitas pada mencit jantan?
b Apakah fraksi n-heksan daun mahkota dewa dapat mempengaruhi titer
antibodi sel imun mencit jantan?
c Apakah fraksi n-heksan daun mahkota dewa mempunyai efek
imunostimulator?

1.3 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah di atas, maka hipotesis pada penelitian ini
adalah:
a Fraksi n-heksan daun mahkota dewa dapat mempengaruhi respon
hipersensitivitas mencit jantan.
b Fraksi n-heksan daun mahkota dewa dapat mempengaruhi titer antibodi sel
imun mencit jantan.
c Fraksi n-heksan daun mahkota dewa mempunyai efek imunostimulator.
1.4 Tujuan Penelitian
Adapun tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui sebagai berikut:
a Untuk mengetahui efek imunomodulator fraksi n-heksan daun mahkota
dewa dengan mempengaruhi respon hipersensitivitas mencit jantan.
b Untuk mengetahui efek imunomodulator fraksi n-heksan daun mahkota
dewa dengan mempengaruhi titer antibodi sel imun mencit jantan.
c Untuk mengetahui efek imunostimulator fraksi n-heksan daun mahkota
dewa.
1.5 Manfaat Penelitian
Adapun manfaat dari penelitian ini adalah sebagai berikut:
a Mengembangkan daun mahkota dewa menjadi suatu sediaan herbal
terstandar dengan efek imunomodulator.
b Menambah inventaris tanaman obat yang berkhasiat sebagai
imunomodulator

1.6 Kerangka Pikir Penelitian
Adapun kerangka pikir penelitian ini ditunjukkan pada Gambar 1.1
Variabel Bebas Variabel Terikat Parameter
Fraksi n-Heksan
Daun mahkota
dewa 25; 50; 100
mg/kg BB
Respon Volume
hipersensitivitas pembengkakan
Suspensi
Levamisol 25
mg/kg BB
Titer antibodi Hemaglutinasi

Suspensi
CMC-Na 0,5%
Gambar 1.1 Diagram Kerangka Pikir Penelitian

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tanaman Mahkota Dewa
Berikut adalah sistematika tanaman, daerah, deskripsi tanaman, bagian yang
digunakan dan manfaat tanaman mahkota dewa.
2.1.1 Sistematika Tanaman
Sistematika tanaman mahkota dewa adalah sebagai berikut:
Divisi : Spermatophyta
Sub Divisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Malvales
Familia : Malvaceae
Genus : Phaleria
Spesies : Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.
2.1.2 Nama Daerah
Sumatera : simalakama (Melayu),
Jawa : makutadewa (Jawa) (Depkes, 1999).
2.1.3 Deskripsi Tanaman
Tanamanmahkota dewa berbentuk perdu yang berumur tahunan. Tinggi
tanaman umumnya 1-3 m, tetapi ada yang bisa mencapai 5 m. Kulit batang
mahkota dewa berwarna coklat kehijauan, sementara kayunya berwarna putih.
Batangnya bulat dan bergetah dengan diameter batang tanaman dewasa mencapai
15 cm. Tanaman ini akan mengeluarkan bunga dan diikuti dengan munculnya

buah setelah 9-12 bulan kemudian. Buahnya berwarna hijau saat muda dan
menjadi merah marun setelah berumur 2 bulan. Buahnya berbentuk bulat dengan
ukuran bervariasi mulai dari sebesar bola pingpong sampai sebesar buah apel.
Daun mahkota dewa merupakan daun tunggal bentuknya lonjong, memanjang dan
berujung lancip dengan letak daun berhadapan, bertangkai pendek, ujung dan
pangkal runcing, tepi rata, pertulangan menyirip, permukaan licin, warnanya hijau
tua, panjang 7-10 cm, dan lebar 2-5 cm (Harmanto, 2001).
2.1.4 Bagian yang digunakan
Daun dan kulit buah mahkota dewa dapat digunakan dalam keadaan segar
atau setelah dikeringkan (Hariana, 2009). Daun mahkota dewa yang berwarna
hijau dengan permukaan licin juga digunakan sebagai pengobatan alergi dengan
cara direbus (Dyah, 2007).
2.1.5 Manfaat daun mahkota dewa
Tanaman mahkota dewa berkhasiat antara lain sebagai antitumor, analgesik,
antiradang (antiinflamasi), antivirus, antibakteri dan antidiare (Salsabila, 2013).
2.2 Sistem Imun
Sistem imun adalah sistem pertahanan tubuh yang terdiri dari sel atau
gabungan sel, molekul-molekul, dan atau jaringan yang berperan dalam penolakan
mikroorganisme penyebab infeksi. Sistem imun berguna sebagai perlindungan
terhadap infeksi molekul lain seperti virus, bakteri, protozoa dan parasit (Salmon,
1989).
Semua makhluk hidup vertebrata mampu memberikan tanggapan dan
menolak benda-benda atau konfigurasi yang dianggap asing oleh tubuhnya.

Kemampuan ini disebabkan oleh sel-sel khusus yang mampu mengenali dan
membedakan konfigurasi asing (non-self) dari konfigurasi yang berasal dari
tubuhnya sendiri (self). Sel khusus tersebut adalah limfosit yang merupakan sel
imunokompeten dalam sistem imun. Konfigurasi asing tersebut dinamakan
antigen atau imunogen, sedangkan proses serta fenomena yang menyertainya
dinamakan respon imun (Subowo, 1993)
Bila sistem imun bekerja pada zat yang diangap asing, maka ada dua jenis
respon imun yang mungkin terjadi, yaitu respon imun nonspesifik dan respon
imun spesifik (Kresno, 2010).
2.2.1 Komponen Sistem Imun
Adapun komponen dari sistem imun terdiri dari komponen humoral dan
komponen seluler.
2.2.1.1 Komponen Selular
Komponen seluler ini terdiri dari:
1. Sel limfoid
Sel limfoid bertugas untuk mengenali antigen. Terdapat beberapa sel
limfoid yang terkait dalam mengenali antigen, yaitu limfosit T, limfosit B, dan sel
natural killer (NK). Kecuali sel NK, limfosit dilengkapi dengan molekul reseptor
untuk mengenali antigen (Subowo, 2009). Limfosit T atau sel T memegang
peranan penting dalam mengontrol respon imun secara keseluruhan (Kresno,
2001). Limfosit B adalah sel yang dapat membentuk imunoglobulin (Ig) (Kresno,
2001).

a. Limfosit T
Sel T adalah sel yang bertanggung jawab dalam respon imun selular. Sel T
dapat dibedakan sebagai berikut:
• Sel Thelper (Sel Th)
Sel Th adalah sel yang membantu meningkatkan perkembangan sel B aktif
menjadi sel plasma, memperkuat aktivitas sel T sitotoksik dan sel T supresor yang
sesuai, dan mengaktifkan makrofag. Sel Th dapat dibedakan menjadi sel Th1 dan
Th2. Sel Th1 berperan sebagai limfosit yang akan melepaskan sitokin yang
bersifat proinflamasi, sedangkan sel Th2 berperan dalam memproduksi antibodi
dengan menstimulasi sel B menjadi sel plasma (Sherwood, 2001).
• Sel Tsuppresor (Sel Ts)
Sel Ts adalah sel yang berperan dalam membatasi reaksi imun melalui
mekanisme “check and balance” dengan limfosit yang lain. Sel Ts menekan
aktivitas sel T lainnya dan sel B. Sel Th dan sel Ts akan berinteraksi dengan
adanya metode umpan balik. Sel Th membantu sel Ts beraksi dan sel Ts akan
menekan sel T lainnya. Dengan demikian sel Ts dapat menghambat respon imun
yang berlebihan dan bersifat antiinflamasi (Sherwood, 2001).
• Sel Tcytotoxic (Sel Tc)
Sel Tc adalah sel yang mampu menghancurkan sel cangkokan dan sel yang
terinfeksi virus dengan mengeluarkan zat-zat kimiawi sebelum replikasi virus
terjadi (Sherwood, 2001).
b. Limfosit B
Sel B adalah sel yang dapat membentuk imunoglobulin (Ig) dan merupakan 5-
15% dari limfosit dalam sirkulasi darah. Sel B dapat mengenal antigen yang

berkadar sangat rendah. Hal ini disebabkan sel B mempunyai sIg (Surface
immunoglobulin) yang berfungsi sebagai reseptor untuk antigen (Kresno, 1991).
c. Sel Natural Killer (NK)
Sel Natural Killer (NK) memegang peranan penting dalam pertahanan
alamiah terhadap pertumbuhan sel kanker dan berbagai penyakit infeksi, tanpa
sensitisasi sebelumnya (Kresno, 2001). Sel NK diperkirakan dapat mengenal
struktur-struktur glikoprotein yang muncul pada permukaan sel terinfeksi virus
sehingga dapat dibedakan dari sel-sel normal. Pengenalan ini mungkin terjadi
melalui reseptor serupa lektin pada permukaan sel NK yang menghantar sel
pembunuh dan sasaran saling berhadapan pada jarak yang dekat (Roitt, 2002).
2. Sel fagosit
Sel fagosit terbagi atas fagosit mononuklear dan fagosit polimorfonuklear
yang berperan sebagai sel efektor dalam respon imun non spesifik (Subowo,
2009).
2.2.1.2 Komponen Humoral
Komponen humoral ini terdiri dari:
a. Komplemen
Komplemen merupakan mediator terpenting dalam reaksi antigen-
antibodi, dan terdiri atas sekitar 20 jenis protein yang berbeda satu dengan yang
lain baik dalam sifat kimia maupun dalam fungsi imunologik. Jika komplemen
diaktifkan akan memberikan proteksi terhadap infeksi dan berperan dalam respon
inflamasi. Komplemen juga berperan sebagai opsonin yang dapat meningkatkan
fagositosis (Kresno, 2001).

b. Sitokin
Sitokin adalah suatu molekul protein yang dikeluarkan oleh sel T ketika
diaktifkan oleh antigen. Sitokin tersebut akan menarik makrofag masuk ke tempat
terjadinya induksi. Sitokin terlibat dalam komunikasi sel-sel, bertindak sebagai
mediator untuk meningkatkan respon imun melalui interaksi dengan reseptor
permukaan sel tertentu pada leukosit (Fulzele, et al., 2003).
c. C-Reactive Protein (CRP)
CRP merupakan zat yang dibentuk oleh tubuh pada saat infeksi. Perannya
adalah sebagai opsonin (zat yang dapat meningkatkan proses fagositosis) dan
dapat mengaktifkan komplemen (Roitt, 2002).
d. Antibodi
Antibodi adalah imunoglobulin (Ig) yang merupakan golongan yang
dibentuk oleh sel plasma yang berasal dari poliferasi sel B akibat adanya kontak
dengan antigen. Menurut perbedaan struktur dan aktivitas biologis, antibodi
dibedakan menjadi 5 subkelas:
• Imunoglobulin G
Paling banyak ditemukan dalam cairan tubuh terutama ekstravaskular untuk
memerangi mikroorganisme dan toksiknya. IgG merupakan komponen utama
imunoglobulin serum, kadarnya dalam serum merupakan 75% dari semua
imunoglobulin. IgG dapat menembus plasenta masuk ke janin dan berperan pada
imunitas bayi sampai umur 6-9 bulan. IgG dan komplemen bekerja saling
membantu sebagai opsonin pada pemusnahan antigen.

• Imunoglobulin A
IgA kadarnya terbanyak ditemukan dalam cairan sekresi saluran nafas, cerna
dan kemih, air mata, keringat, ludah, dan air susu ibu yang lebih berupa IgA
sekretori (sIgA) yang merupakan bagian terbanyak. IgA dapat bekerja sebagai
opsonin, yaitu dapat meningkatkan efek bakteriolitik komplemen dan
menetralisasi toksin serta dapat mengaglutinasikan kuman, mengganggu
motilitasnya sehingga memudahkan fagositosis.
• Imunoglobulin M
IgM merupakan imunoglobulin paling efisien dalam aktivitas komplemen.
IgM dibentuk paling dahulu pada respon imun primer terhadap kebanyakan
antigen dibanding dengan IgG. IgM dapat mencegah gerakan mikroorganisme
patogen, memudahkan fagositosis dan merupakan aglutinator poten antigen.
• Imunoglobulin D
IgD ditemukan dalam serum dengan kadar yang sangat rendah. IgD
merupakan komponen permukaan utama sel B dan pertanda dari diferensiasi sel B
yang lebih matang. IgD merupakan 1% dari total imunoglobulin dan banyak
ditemukan pada membran sel B bersama IgM yang dapat berfungsi sebagai
reseptor antigen pada aktivitas sel B.
• Imunoglobulin E
IgE mudah diikat sel mast, basfil dan eosinofil yang memiliki reseptor untuk
fraksi Fc dari IgE. IgE dibentuk setempat oleh sel plasma dalam selaput lendir
saluran nafas dan cerna.

2.3 Respon Imun
Respon imun adalah tanggapan sistem imun terhadap zat asing, setelah
terjadi proses pengenalan oleh sel-sel pengenal (limfosit). Secara umum
dinyatakan bahwa respon imun seseorang terhadap patogen terdiri atas respon
imun alami atau respon imun non spesifik dan respon imun adaptif atau respon
imun spesifik (Subowo, 2009).
2.3.1 Respon Imun Nonspesifik
Respon imun nonspesifik pada umumnya merupakan imunitas bawaan
(innate immunity), artinya bahwa respon terhadap zat asing yang masuk ke dalam
tubuh dapat terjadi walaupun tubuh belum pernah terpapar pada zat tersebut
(Kresno, 2010). Respon imun nonspesifik dapat mendeteksi adanya zat asing dan
melindungi tubuh dari kerusakan yang diakibatkannya, tetapi tidak mampu
mengenali dan mengingat zat asing tersebut. Komponen-komponen utama respon
imun nonspesifik adalah pertahanan fisik, kimiawi, humoral dan selular.
Pertahanan ini meliputi epitel dan zat-zat antimikroba yang dihasilkan
dipermukaannya, berbagai jenis protein dalam darah termasuk komplemen-
komplemen sistem komplemen, mediator inflamasi lainnya dan berbagai sitokin,
sel-sel fagosit yaitu sel-sel polimorfonuklear, makrofag dan sel natural killer
(NK) (Kresno, 2010).
2.3.2 Respon Imun Spesifik
Berbeda dengan respon imun non spesifik yang sel-selnya dalam
menghadapi antigen asing tidak memerlukan reseptor khusus, maka dalam respon
imun spesifik ini diperlukan sel khusus (spesifik) dalam menghadapi antigen
asing. Di dalam respon imun ini paling sedikit melibatkan 3 jenis sel, yaitu

limfosit T, limfosit B, dan sel makrofag yang bertindak sebagai sel pelengkap
(Subowo, 2009).
Respon imun spesifik merupakan imunitas yang didapat (adaptive
immunity) dimulai dari pengenalan zat asing hingga penghancuran zat asing
tersebut dengan berbagai mekanisme (Subowo, 1993). Dalam respon imun
spesifik, limfosit merupakan sel yang memainkan peranan penting karena sel ini
mampu mengenali setiap antigen yang masuk ke dalam tubuh, baik yang terdapat
intraseluler maupun ekstraseluler. Secara umum, limfosit dibedakan menjadi dua
jenis yaitu limfosit T dan limfosit B (Kresno, 2010).
Limfosit T atau sel T yang berpoliferasi atas rangsangan antigen larut dan
berfungsi memicu sel B untuk memproduksi antibodi, dan subset yang lain yaitu
sel Ts (T suppresor-inducer) yang berpoliferasi atas rangsangan antibodi serta
berfungsi untuk menghambat atau menekan produksi antibodi oleh sel B (Kresno,
1991).
2.4 Imunomodulator
Imunomodulator adalah senyawa tertentu yang dapat meregulasi sistem
imun dengan tujuan menormalkan atau membantu mengoptimalkan sistem imun.
Mekanisme pertahanan spesifik maupun non spesifik umumnya saling
berpengaruh. Imunomodulator dapat dibagi menjadi 2, yaitu imunostimulator dan
imunosupresor.
2.4.1 Imunostimulator
Imunostimulator adalah senyawa yang dapat meningkatkan respon imun.
Imunostimulator dapat mereaktivasi sistem imun dengan berbagai cara seperti

meningkatkan jumlah dan aktivitas sel T, NK-cells dan makrofag serta
melepaskan interferon dan interleukin (Tan dan Rahardja, 2007). Bahan yang
dapat merangsang sistem imun, seperti: levamisole, isoprenosin, hidroksiklorokin,
dan arginin (Bratawidjaja, 2012).
2.4.1.1 Levamisole
Levamisol adalah derivat tetramizol, obat cacing yang dapat meningkatkan
poliferasi sitotoksisitas sel T serta mengembalikan energi pada beberapa penderita
dengan kanker (imunostimulasi nonspesifik). Levamisol dapat meningkatkan efek
antigen, mitogen, limfokin, dan faktor kemotaktik untuk merangsang limfosit,
granulosit dan makrofag (Bratawidjaja, 2012).
Levamisol adalah salah satu imunopotensiator nonspesifik yang telah
diketahui mampu meningkatkan respon imunitas tubuh, baik selular maupun
humoral. Levamisol lebih berperan dalam imunitas selular yaitu merangsang
poliferasi limfosit T (Widjaja, 1999).
2.4.2 Imunosupresor
Imunosupresor adalah senyawa yang dapat menurunkan respon imun.
Imunosupresor mampu menghambat traskripsi dari sitokin dan memusnahkan sel
T (Tan dan Rahardja, 2007). Kegunaannya di klinik terutama pada transplatasi
untuk mencegah reaksi penolakan dan pada berbagai penyakit inflamasi yang
menimbulkan kerusakan atau gejala sistemik, seperti autoimun atau auto-
inflamasi. Obat-obat imunosupresi digunakan pada penderita yang akan menjalani
transplatasi dan penyakit autoimun oleh karena kemampuannya yang dapat
menekan respon imun seperti azatioprin, dan siklofosfamid (Bratawidjaja, 2012).

2.5 Metode Pengujian Efek Imuomodulator
Ada beberapa metode yang digunakan dalam pengujian efek
imunomodulator. Beberapa di antaranya adalah uji respon hipersensitivitas,
pengukuran antibodi (titer antibodi), uji transformasi limfosit T, uji komplemen,
indeks migrasi makrofag, uji granulosit, bioluminisensi radikal,respon fagositik,
respon proliferasi limfosit.
2.5.1 Uji Respon Hipersensitivitas
Uji respon hipersensitivitas merupakan pengujian efek imunomodulator
terkait dengan respon imun spesifik. Respon hipersensitivitas tipe lambat
merupakan respon imun seluler yang melibatkan aktivasi sel Th yang akan
melepaskan sitokin yang bersifat proinflamasi dan meningkatkan aktivitas
makrofag yang ditandai dengan pembengkakan kaki hewan (Roit, 1989).
2.5.2 Titer Antibodi
Respon imun spesifik dapat berupa respon imun seluler dan respon imun
humoral. Penilaian titer antibodi merupakan pengujian terhadap respon imun
humoral yang melibatkan pembentukan antibodi. Peningkatan nilai titer antibodi
terjadi karena peningkatan aktivasi sel Th yang menstimulasi sel B untuk
pembentukan antibodi dan peningkatan aktivasi sel B dalam pembentukan
antibodi (Roit, 1989).

BAB III
METODE PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan tahapan
penelitian yaitu penyiapan sampel, skrining simplisia, karakterisasi simplisia,
penyiapan hewan percobaan dan pengujian respon hipersensitivitas tipe dan titer
antibodi pada hewan percobaan. Data hasil penelitian dianalisis secara ANAVA
(analisis variansi) dan Kruskal-Wallis dan dilanjutkan dengan uji Post Hoc Tukey
menggunakan SPSS (Statistical Product and Service Solution) versi 17.0 dan
Mann Whitney.
2.1. Alat dan Bahan
2.1.1 Alat-alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat-alat gelas
laboraturium,microtiration plate96, microtube, mortir dan stamfer, neraca hewan,
neraca listrik, oral sonde, mikro pipet, plethysmometer digital,spuit 1ml, dan
centrifuge PLC series, kandang mencit.
2.1.2 Bahan-bahan
Bahan-bahan yang digunnakan dalam penelitian ini adalah fraksi n-Heksan
daun mahkota dewa, Natrium Carboxy Methyl Cellulose (CMC) Na, akuades, sel
darah merah sapi (SDMS), larutan Phosphate Buffered Saline (PBS), larutan
tritron, tablet levamisol, heparin (inviclot®).

2.2 Hewan percobaan
Hewan percobaan yang digunakan dalam penelitian adalah mencit jantan
dengan berat badan 20-35 gram yang berumur 8-12 minggu.Sebelum digunakan,
mencit dipelihara selama 2 minggu dalam kandang yang baik untuk menyesuaikan
diri dengan lingkungannya, dan diberi makan pelet hewan serta air.
2.3 Fraksi n-heksan Daun Mahkota Dewa (FHDMD)
Fraksi diperoleh dari Amos P. Lumban Tobing pada Juni 2016. Metode
fraksinasi yang digunakan yaitu metode maserasi, sesuai dengan yang tertera
dalam Farmakope Indonesia Edisi III (1979).
Serbuk simplisia dan mahkota dewa dimaserasi dengan 75 bagian pelarut n-
heksan sampai seluh serbuk terendam, ditutupi dan dibiarkan selama 5 hari
terlindung dari cahaya, sambil sesekali diaduk. Kemudian sampel disaring dan
filtat diproleh, sedangkan residu di rendam kembali menggunakan 25 bagian n-
heksan, dimasukkan dalam wadah dan disimpan ditempat yang terlindung dari
cahaya selama 2 hari (Ditjen POM, 1979). Seluruh maserat digabung dan
dipekatkan dengan bantuan alat rotary evaporator pada temperature ±40ºC,
kemudian dikeringkan dengan freeze dryer pada suhu -40ºC sampai diperoleh
fraksi kental.
2.4 Penyiapan Hewan Percobaan
Hewan yang digunakan adalah mencit jantan dengan berat 20-35 g dibagi 5
kelompok, 1 kelompok untuk kontrol pembawa, 1 kelompok untuk kontrol positif,
dan 3 kelompok uji. Tiap kelompok terdiri dari 5 ekor mencit.Sebelum digunakan

sebagi hewan percobaan, semua mencit dipelihara terlebih dahulu selama kurang
lebih satu minggu dalam kandang yang baik pada suhu ruangan untuk
penyesuaian lingkungan, pengontrolan kesehatan dan berat badan. Mencit diberi
makan pelet hewan dan tetap diberi air minum.
Penentuan besar sampel dihitung dengan rumus Federer (Arkeman dan
David, 2006) sebagai berikut:

(n-1) (t-1) ≥ 15
Keterangan:
n= besar sampel
t= jumlah kelompok perlakuan
jumlah hewan yang digunakan 5 ekor. Perhitungan jumlah hewan yang digunakan
dapat dilihat pada (Lampiran 6).
2.5 Penyiapan Kontrol, Bahan Uji, dan Antigen
Penyiapan kontrol, bahan uji, dan antigen meliputi penyiapan CMC
0,5%,penyiapan suspensi levamisol, penyiapan suspensi fraksi n-heksan daun
mahkota dewa dan penyiapan sel darah merah sapi.
2.5.1 Penyiapan Suspensi CMC Na 0,5%
Sebanyak 0,5 gNa-CMC ditaburkan dalam lumpang yang berisi aquadest
yang dipanaskan. Didiamkan selama 15 menit lalu digerus hingga diperoleh
massa yang transparan, diencerkan dengan aquadest, dihomogenkan dan
dimasukkan ke labu tentukur 100 ml,dicukupkan volumenya dengan aquadest
hingga 100 ml.

2.5.2 Penyiapan Suspensi levamisol
Pengambilan tablet levamisol yaitu dengan cara ditimbang dan digerus tidak
kurang dari 20 tablet. Ditimbang serbuk yang telah dihaluskan tersebut kemudian
ditimbang seksama sejumlah serbuk setara dengan lebih kurang 25 mg levamisol
(Depkes, 1995).
Pembuatan suspensi levamisol dilakukan dengan cara sebagai berikut:
levamisol 29,46 mg (setara dengan 25 mg levamisol) sebanyak 0,25 mg ditimbang
dan dimasukkan kedalam lumpang. Digerus serbuk kemudian ditambahkan
suspensi CMC Na 0,5% secukupnya. Digerus hingga homogen dan dituangkan
kedalam labu tentukur 25 ml,ditambahkan suspensi CMC Na 0,5% sampai batas
tanda. Perhitungan serbuk levamisol yang ditimbang dapat dilihat pada (Lampiran
4).
2.5.3 Penyiapan Suspensi Fraksi n-heksan Daun Mahkota Dewa (FHDMD)
Untuk dosis 100 mg/kg BB dibuat dengan cara sebagai berikut; Ditimbang
100 mg fraksi n-heksan daun mahkota dewa, kemudian dimasukkan ke dalam
lumpang. Kemudian tuang sedikit demi sedikit suspensi CMC Na 0,5% sambil
digerus hingga homogen, setelah homogen dituangkan ke dalam labu tentukur 10
ml dan dicukupkan dengan suspensi CMC Na 0,5% hingga garis tanda. Begitu
juga untuk pembuatan dosis 25 mg/kg BB dan 50 mg/kg BB dilakukan hal yang
sama.
2.5.4 Penyiapan Phosphate Buffered Saline (PBS)
Pembuatan PBS dilakukan dengan cara sebagai berikut: melarutkan 1 tablet
PBS dalam 200 ml aquadest (sigma).

2.5.5 Penyiapan Sel Darah Merah Sapi (SDMS)
Penyiapan dan pembuatan SDMS dilakukan dengan cara sebagai berikut:
Darah segar dikumpulkan dari sapi yang disembelih, diperoleh 500 ml. Kemudian
ditambahkan 1,5 ml antikoagualan dan dimasukkan ke dalam termos yang berisi
es.
Darah sapi segar yang telah diberi antikoagulan dimasukkan dalam tabung
sentrifus sebanyak 5 ml dan disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm selama 5
menit untuk memisahkan plasma dari sel darah merah. Lapisan atas yang berupa
plasma dibuang dan lapisan bawah yang berupa endapan sel darah merah
ditambahkan larutan PBS sebanyak 3 ml. Tabung kemudian dibolak-balik dengan
perlahan-lahan sampai SDMS tercampur secara homogen, kemudian
disentrifugasi lagi dengan kecepatan 3000 rpm selama 5 menit. Lapisan atas yang
jernih dibuang dan lapisan bawah adalah SDMS murni. SDMS ditambahkan PBS
sebanyak 3 ml homogenkan sehingga diperoleh SDMS 50%. Kemudian diambil
0,2 ml SDMS 50%, ditambahkan larutan PBS sebanyak 10 ml sehingga diperoleh
SDMS 1% (Emelda, 2015).
2.6 Uji Respon Hipersensitivitas
Efek imunomodulator fraksi n-heksan daun mahkota dewa ditentukan
dengan mengukur volume respon hipersensitivitasmenggunakan uji
pembengkakan telapak kaki hewan uji (foot paw swelling test) (Lakshmi, 2003;
Ray, 1996).
Sebanyak 25 ekor mencit dibagi menjadi 5 kelompok dengan pembagian
sebagai berikut:

a Kelompok I diberi suspensi CMCNa 0,5%sebagai kontrol pelarut.
b Kelompok II diberi suspensi fraksi n-heksan Daun Mahkota Dewa
(FHDMD) dengan dosis 25 mg/kg bb.
c Kelompok III diberi FHDMD dengan dosis 50 mg/kg bb.
d Kelompok IV diberi FHDMD dengan dosis 100 mg/kg bb.
e Kelompok V diberi suspensi levamisol dengan dosis 25 mg/kg bb sebagai
kontrol positif.
Tiap kelompok diinjeksikan dengan 0,1 ml sel darah merah sapi (SDMS)
1%secara intraperitoneal pada hari ke-0. Kemudian pada hari berikutnya diberikan
perlakuan satu kali setiap hari selama 7 hari. Pada hari ke-7, sendi kaki mencit
sebelah kanan diberi tanda batas pengukuran volume kaki mencit.Volume kaki
mencit diukur sebagai volume awal (V0).Kemudian mencit diinjeksikan dengan
0,1 ml sel darah merah sapi (SDMS) 1% secara intraplantar pada telapak kaki
sebelah kanan.
Pada hari kedelapan (setelah 24 jam) diukur volume pembengkakan kaki
mencit dengan plethysmometer digital. Pengukuran dilakukan dengan
mencelupkan kaki mencit ke dalam tabung yang berisi larutan triton terlihat pada
kenaikan skala pada plethysmometer sebagai volume waktu tertentu (Vt) kaki
mencit. Volume pembengkakan kaki mencit ditentukan berdasarkan selisih antara
volume waktu tertentu (Vt) dengan volume awal (V0) (Shivaprasad, 2006).
2.7 Uji Titer Antibodi
Tiap kelompok diinjeksikan dengan 0,1 ml sel darah merah sapi (SDMS)
1% secara intraperitoneal pada hari ke-0. Kemudian diberikan perlakuan satu kali

setiap hari selama 7 hari. Pada hari ke-7, sampel darah masing-masing mencit
diambil melalui pembuluh darah vena di bagian ekor. Sampel darah dikumpulkan
dalam tabung mikro (microtube), kemudian dilakukan pemusingan 1900 rpm
dengan alat sentrifugasi selama 10 menit dan diambil serumnya.
Nilai titer atibodi ditentukan dengan metode hemaglutinasi. Duapuluh lima
mikroliter (25 µl) serum diteteskan ke dalam lubang microtitration plate96
lubang, ditambahkan larutan PBS dengan volume yang sama, dan diencerkan dua
kali lipat (1:2; 1:4; 1:8; 1:16; 1:32; 1:64; 1:128; 1:256; 1:512; 1:1024; 1:2048)
kemudian ditambahkan SDMS dengan volume yang sama dengan volume serum
dan PBS. Kemudian diamati penggumpalan yang terjadi (Makare, et al., 2001;
Puri, et al., 1993). Nilai titer antibodi ditentukan berdasarkan pengenceran terakhir
dimana antibodi masih terdeteksi melalui hemaglutinasi terlihat secara visual.
Nilai titer antibodi tersebut selanjutnya ditransformasikan dengan [2log(titer)+1]
(Hargono, 2000).
2.8 Analisis Data
Data hasil penelitian dianalisis dengan menggunakan program SPSS versi
17.0.Data ditentukan homogenitas dan normalitasnya untuk menentukan analisis
statistik yang digunakan.Data dianalisis dengan menggunakan uji ANAVA satu
arah (One-Way ANOVA) dan Kruskal-Wallis untuk menentukan perbedaan rata-
rata diantara perlakuan. Dilanjutkan dengan menggunakan uji Post Hoc Turkey
pada data yang normal dan uji Mann Whitney pada data yang tidak normal untuk
mengetahui variabel mana yang memiliki perbedaan. Berdasarkan nilai signifikan,
P<0,05 dianggap signifikan.

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada penelitian ini digunakan fraksin-Heksan daun mahkota dewa yang
sama dengan fraksi yang digunakan Amos P. Lumban Tobing pada Juni 2016.
Hasil skrining fitokimia yang telah dilakukan Amos P. Lumban Tobing diperoleh
bahwa serbuk simplisia dan fraksi n-Heksan memiliki kandungan senyawa kimia
yang berbeda. Simplisia memiliki kandungan senyawa kimia alkaloid, flavonoid,
tanin, saponin, steroid dan triterpenoid. Sedangkan fraksi n-Heksan hanya
memiliki kandungan steroid/triterpenoid. Hal ini disebabkan oleh pelarut n-
Heksan bersifat non polar sehingga hanya dapat melarutkan senyawa metabolit
skunder non polar (Harbone, 1987). Hasil pemeriksaan karakteristik diperoleh
kadar air 7,2 %, kadar sari larut air 26,52 %, kadar sari larut etanol 55,98 %,
kadar abu total 10,83 % dan kadar abu tidak larut asam 0,24 %.
3.1 Pengujian Efek Imunomodulator
Pada penelitian ini, pengujian efek imunomodulator fraksin-Heksan Daun
Mahkota Dewa dilakukan dengan metode respon hipersensitivitas dan titer
antibodi yang digunakan untuk melihat pengaruh fraksi terhadap aktivitas dan
mekanisme sistem imun humoral yang melibatkan sel T dan sel B.Menurut
Makare et al., (2001), metode tersebut mempunyai keuntungan diantaranya
memungkinkan dua komponen respon imun diukur pada spesies yang sama
dibawah kondisi ideal, relatif sederhana dan tidak mahal. Pembanding

yangdigunakan adalah levamisol dengan dosis 25 mg/kg bb. Dosis dipilih
berdasarkan penelitian yang telah dilakukan oleh Razdan, et all., (2008).
Pengujian dilakukan dengan cara menginduksi sel imun mencit dengan sel
darah merah sapi(SDMS)sebagai antigen secara intraperitoneal pada hari ke-0.
Antigen yang telah diinduksikan ke dalam tubuh hewan coba mencit akan dikenal
oleh sistem imun spesifik dengan membentuk sel B memori. Antigen akan
merangsang sel B untuk berubah menjadi sel plasma dan mensekresi antibodi
spesifik (Hendarsula,2011). Antibodi pertama yang terbentuk adalah
Imunoglobulin M (IgM). Pada hari keenam dan hari ketujuh dalam serum mulai
dapat dideteksi antibodi IgG (Srihidayati, et all., 2012). Pemberian sel darah
merah sapi (SDMS) yang digunakan sebagai antigen pada mencit dimaksudkan
untuk merangsang pembentukan antibodi spesifik. Pada pembuatan sel darah
merah sapi (SDMS) digunakan PBS (Phosphate Buffered Saline) sebagai larutan
pencuci dan larutahn pengencer. Pencucian sel darah merah sapi (SDMS)
bertujuan untuk memperoleh sel darah merah sapi yang murni artinya tidak
dicemari oleh protein serum (Kumala, et al., 2012).
Respon hipersensitivitas diketahui dari volume pembengkakan kaki mencit
yang diukur pada hari ke-8 setelah sehari sebelumnya sel imun mencit
diinduksikan kembali dengan SDMS secara intraplantar. Pengukuran nilai titer
antibodi dilakukan pada hari ke-7 dengan menggunakan metode hemaglutinasi.
Hemaglutinasi adalah ikatan antara sel darah merah sebagai antigen dengan
antibodi sehingga menimbulkan suatu gumpalan yang dapat dilihat. Pada
lingkungan dengan pH netral, sel darah merah bermuatan negatif sehingga akan
terjadi aksi tolak-menolak antar sel. Oleh karena itu sel darah merah yang

digunakan disuspensikan dalamlarutan penyangga dengan pH ±7 (PBS) untuk
menjaga agar sel darah merah tetap dalam kondisi pH netral, sehingga tetap
bermuatan negatif.
Hemaglutinasi terbentuk karena adanya ikatan silang antara sel darah merah
dengan antibodi. Antibodi yang mempunyai kemampuan lebih besar untuk
berikatan dengan sel darah merah adalah IgM. IgM mempunyai ukuran yang besar
dan valensi yang tinggi, sehingga dapat melawan rintangan elektrik dan
membentuk ikatan silang dengan sel darah merah sehingga menyebabkan
terjadinya aglutinasi. Antibodi lainnya seperti IgG mempunyai ukuran dan valensi
yang lebih kecil, sehingga kemampuannya melawan rintangan elektrik lebih
lemah dibandingkan dengan IgM (Kuby, 1994).
Terkait dengan prinsip hemaglutinasi di atas, maka dalam penelitian inisel
darah merah yang digunakan sebagai antigen adalah sel darah merah sapi (SDMS)
karena memiliki muatannegatif yang lebih kuat, sehingga kemampuannya untuk
berikatan dengan antibodi semakin kuat. Dengan demikian, hasil hemaglutinasi
yang diperoleh dapat diketahui dengan mudah. Data hasil penelitian dapat dilihat
pada tabel 4.1

Tabel 4.1 Volume Pembengkakan Kaki Mencit dan Nilai Titer
Antibodi(Rerata±SEM)
No Kelompok Perlakuan Volume kaki mencit Nilai titer antibodi

(ml) (µl)
1 CMC Na 0,5 % 0,0900±0,0469 2,5700±0,14697
2 Suspensi FHDMD 25 0,2560±0,03789 3,7700±0,14697
mg/kg bb
3 Suspensi FHDMD 50 0,5260±0,03655 4,8500±0,24000
mg/kg bb
4 Suspensi FHDMD 100 0,7280±0,04176 5,6900±0,44091
mg/kg bb
5 Suspensi Levamisol 25 0,5640±0,05758 3,7700±0,14697
mg/kg bb
3.1.1 Respon Hipersensitivitas
Pembengkakan terkait langsung dengan cell mediated immunity(CMI),
karena antigen mengaktivasi sel T terutama sel Th1. Aktivasi sel T menyebabkan
pelepasan beberapa sitokin yang bersifat proinflamasi. Sitokin tersebut akan
menarik makrofag ke tempat terjadinya induksidan mengaktivasinya sehingga
menyebabkan peningkatan aktivitas fagositik untuk melawan antigen yang masuk
(Fulzele, et al.,2003). Penarikan makrofag inilah yang menyebabkan terjadinya
pembengkakan. Semakin besar pembengkakan menunjukkan semakin tinggi
respon hipersensitivitas sehingga dapat menggambarkan peningkatan aktivitas
sistem imun.
Hasil pengukuran volume pembengkakan kaki kanan mencit sebagai
respon terhadap hipersensitivitas dapat dilihat pada Gambar 4.1 dan Tabel 4.1.

0,9
+
0,8 *
Volume pembengkakan (ml) 0,7
0,6 *
*
0,5
0,4
0,3 +
0,2
+
0,1
0
CMC Na 0,5% FHDMD 25 FHDMD 50 FHDMD 100 Levamisol 25
mg/kg bb mg/kg bb mg/kg bb mg/kg bb
Perlakuan
Gambar 4.1 Volume pembengkakan kaki mencit pada berbagai

perlakuan(Rerata±SEM). * = p < 0,05 dengan CMC-Na 0,5%, + =
p < 0,05 dengan Levamisol 25 mg/kgbb.
Pada Gambar 4.1 dan Tabel 4.1 terlihat bahwa FHDMD dosis 25, 50 dan
100 mg/kg bb, dan suspensi levamisol dosis 25 mg/kg bb menunjukkan volume
pembengkakan yang jauh berbeda dengan suspensi CMC 0,5% sebagai kontrol
pelarut. FHDMD dosis 100 mg/kg bb dengan volume pembengkakan 0,728ml
menunjukkan volume pembengkakan yang lebih besar dibandingkan dengan
FHDMD dosis 25, 50 mg/kg bb dan suspensi levamisol 25 mg/kg bb yang
masing-masing bernilai 0,256, 0,526 dan 0,564 ml. Untuk melihat ada tidaknya
perbedaan dari setiap perlakuan pada tiap kelompok hewan coba, maka dilakukan
analisis variansi (ANAVA) menggunakan program SPSS versi 17.0 terhadap
volume pembengkakan kaki mencit. Hasil uji Anava menunjukkan adanya
perbedaan yang signifikan antara kelompok perlakuan terhadap volume
pembengkakan kaki mencit dengan nilai signifikansi (p < 0,05).

Untuk mengetahui kelompok perlakuan mana yang memiliki efek yang
sama atau berbeda antara satu perlakuan dengan perlakuan yang lain dilakukan uji
Post Hoc Tukey terhadap semua perlakuan dimana hasil uji tersebut dapat dilihat
pada (lampiran 10).
Berdasarkan uji statistik menunjukkan bahwa volume pembengkakan kaki
mencit kelompok perlakuan FHDMD dosis 25 mg/kg bb tidak berbeda signifikan
dengan kontrol pelarut CMC Na 0,5%. FHDMD 50, 100 mg/kg bb dan suspensi
Levamisol 25 mg/kg bb berbeda signifikan dengan kontrol pelarut CMC Na 0,5.
Suspensi Levamisol tidak berbeda signifikan dengan FHDMD 100 mg/kg bb dan
FHDMD 50 mg/kg bb, dan berbeda signifikan dengan FHDMD 25 mg/kg bb.
FHDMD 100 mg/kg bb dan FHDMD 50 mg/kg bb berbeda signifikan dengan
FHDMD 25 mg/kg bb.
Peningkatan volume pembengkakan kaki mencit merupakan gambaran
adanya peningkatan respon hipersensitivitas mencit tersebut. Peningkatan respon
ini mengindikasikan adanya peningkatan kemampuan sel imun mencit dalam
menanggapi antigen terutama peningkatan respon imun spesifik selular. Sel yang
berperan dalam respon imun selular adalah sel T terutama sel Th. Sel Th
memproduksi IFN-y yang kemudian mengaktivasi makrofag (Kresno, 2010).
Dengan demikian, fraksin-Heksan daun mahkota dewa menunjukkan efek
stimulan terhadap sel T terutama sel Th.
3.1.2 Titer Antibodi
Titer antibodi ditentukan dengan metode hemaglutinasi. Penentuan
hemaglutinasi titer antibodi bertujuan untuk mengetahui respon imun humoral
melawan SDMS. Peningkatan respon imun humoral dibuktikan dengan adanya

peningkatan titer antibodi mencit yang mengindikasikan peningkatan kepekaan
sel T dan sel B terkait dengan produksi antibodi.
Efek pemberian FHDMD dan suspensi levamisol menunjukkan hasil yang
tidak berbeda pada titer antibodi. Titer antibodi sel imun mencit dapat dilihat pada
Gambar 4.2 dan Tabel 4.1
7
+
6 *
+
*
Titer Antibodi (µl)
4 * *
3 +
0
CMC Na 0,5% FHDMD 25 FHDMD 50 FHDMD 100 Suspensi
mg/kg bb mg/kg bb mg/kg bb Levamisol 25
mg/kg bb
Perlakuan
Gambar 4.2Titer Antibodi Sel Imun Mencit pada berbagai perlakuan

(Rerata±SEM). * = p < 0,05 dengan CMC-Na 0,5%,+ = p < 0,05
dengan Levamisol 25 mg/kgbb.
Pada Gambar 4.2 dan Tabel 4.1 terlihat bahwa FHDMD dosis 25, 50, dan
100 mg/kg bb menujukkan nilai titer antibodi yang jauh berbeda dengan CMC Na
0,5% sebagai kontrol pelarut. Pemberian FHDMD dosis 100 mg/kg bb
menunjukkan peningkatan nilai titer antibodi senilai 5,69. Nilai ini lebih besar
dibandingkan dengan FHDMD dosis 25, 50 mg/kg bb dan suspensi Levamisol 25
mg/kg bb yang bernilai 3,77, 4,85 dan 3,77.Untuk melihat ada atau tidaknya
perbedaan dari setiap perlakuan pada tiap kelompok hewan percobaan, dilakukan

analisis uji Mann Whitneyterhadap titer antibodi. Hasil uji Mann Whitney
menunjukkan adanya perbedaan yangsignifikan antara kelompok perlakuan
terhadap titer antibodi sel imun, dengan nilai signifikansi (p < 0,05). Berdasarkan
uraian di atas dapat disimpulkan bahwa pemberian FHDMD dosis 25, 50, dan 100
mg/kg bb memberikan efek peningkatan titer antibodi sel imun mencit.
Berdasarkan uji statistik menunjukkan bahwa nilai titer antibodi mencit
kelompok perlakuan FHDMD dosis 25, 50, 100 mg/kg bb dan suspensi Levamisol
25 mg/kg bb berbeda signifikan dengan kontrol pelarut CMC Na 0,5. Suspensi
Levamisol tidak berbeda signifikan dengan FHDMD25mg/kg bb. FHDMD 100
mg/kg bb berbeda signifikan dengan FHDMD 25mg/kg bb dan suspensi
Levamisol 25 mg/kg bb. FHDMD 100 mg/kg bb tidak berbeda signifian dengan
FHDMD 50 mg/kg bb.
Peningkatan titer antibodi terjadi karena peningkatan aktivitas sel Th, yaitu
sel Th2 untuk menstimulasi produksi dan meningkatkan aktivitas sel B dalam
pembentukkan antibodi (Roit,1989). Antibodi akan berikatan dengan antigen yang
menginfeksi tubuh. Ikatan antigen dan antibodi memberikan gambaran adanya
efek stimulasi fraksi n-Heksan daun mahkota dewa terhadap respon imun humoral
yang berikatan dengan stimulasi.
Maka dapat disimpulkan bahwa FHDMD dapat meningkatkan sistem imun,
FHDMD memberikan efek yang lebih baik dibandingkan dengan levamisol.
Levamisol merupakan salah satu imuopotensiator nonspesifik yang telah diketahui
mampu meningkatkan respon imunitas tubuh, baik selular mapun humoral
(Widjaja, 1999). Sehingga suspensi fraksi n-Heksan Daun Mahkota Dewa
(FHDMD) dapat digunakan sebagai imunostimulator. Berdasarkan pengamatan

tersebut, daun mahkota dewa dapat digunakan sebagai imunostimulator terkait
dengan pengaruhnya dalam meningkatkan respon hipersensitivitas dan titer
antibodi sel imun mencit.
Menurut wagner (1985), senyawa yang mempunyai bioaktifitas sebagai
imunostimulan adalah golongan senyawa polisakarida, terpenoid, alkaloid, dan
polifenol. Berdasarkan penelitian sebelumnya, penelitian Kumala, et all., (2012)
menemukan bahwa ekstrak etanol Pegagang (Centella asiatica (I.)
Urban.)mengandung senyawa alkaloid dan terpenoid yang bersifat
imunostimulator. Maka dapat disimpulkan bahwa efek suatu bahan sangat erat
kaitannya dengan senyawa kimia yang terkandung dalam bahan tersebut.
Berdasarkan hasil penelitian, daun mahkota dewa dianggap memiliki efek
imunostimulan berdasarkan kerjanya yang mampu meningkatkan respon
hipersensitivitas dan titer antibodi secara signifikan.

BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
4.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil dari penelitian ini, diperoleh kesimpulan bahwa :

a. Pemberian fraksin-Heksan daun mahkota dewa dapat mempengaruhi
respon hipersensitivitas pada mencit jantan, pada dosis 100 mg/kg bb
dan 50 mg/kg bb diperoleh volume pembengkakan rata-rata 0,728ml dan
0,526 ml sebanding dengan kontrol positif (levamisol) volume
pembengkakan yang diperoleh 0,564ml.
b. Pemberian fraksin-Heksan daun mahkota dewa dapat mempengaruhi
respon titer antibodi sel imun mencit jantan, pada dosis100 mg/kg bb dan
50 mg/kg bb diperoleh nilai titer antibodi rata-rata5,69 µl dan 4,85 µl
lebih tinggi dibandingkan kontrol positif (levamisol) nilai titer antibodi
yang diperoleh 3,77 µl.
c. Fraksin-Heksan daun mahkota dewa menunjukkan aktivitas
imunomodulatorsebagai imunostimulan
4.2 Saran
Disarankan kepada peneliti selanjutnya agar dapat melanjutkan penelitian
ini terkait dengan efek daun mahkota dewaterhadap sistem imun.

DAFTAR PUSTAKA
Agoes, A.H. (2010). Tanaman Obat Indonesia. Buku 2. Jakarta: Penerbit Salemba
Medika. Halama 71.
Amos, P. L. (2016). Efek Imunomodulator Ekstrak N-Heksan Daun Mahkota
Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl) Pada Mencit Jantan. Sripsi
Universitas Sumatera Utara.
Bellanti, J.A. (1993). Immunology III. Washington. D.C: Georgetown University
School of Medicine. Halaman 18.
Bratawidjaja, K. (2012). Sistem Imun. Dalam: Imunologi Dasar. Edisi 7. Jakarta:
Balai Penerbit FKUI. Halaman 158-166.
Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Depkes RI.
Halaman: 333
Depkes RI. (1999). Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jilid V. Jakarta:
Departemen Kesehatan RI dan Kesejahteraan Sosisal RI Badan Penelitian
dan Pengembangan Kesehatan. Halaman 147.
Ditjen POM RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Departemen
Kesehatan RI. Halaman: 33.
Dyah, N., dan Firman. (2007). Mahkota Dewa dan Manfaatnya. Bekasi: Ganeca
Exact. Halaman 5-7.
Emelda, A., Rahman, S., dan Hardianti. (2015). Efek Imunostimulan Infus Buah
Mahkota Dewa (Phaleria Macrocarpa (Scheff.) Boerl.) Asal Kab. Sidrab
Sulawesi Selatan Terhadap Sekresi Antibodi Tikus Putih (Rattus
Norvegicus) Jantan Dengan Teknik Hemaglutinasi. Jurnal Universitas
Muslim Indonesia. Halaman: 38
Faradilla, M., dan Immaculata, M. (2014). Efek Immunomodulator Polisakarida
Rimpang Temu Putih (Curcuma Zedoaria (Christm.) Roscoe). Jurnal Ilmu
Kefarmasian. 12(2): 2.
Fulzele, S.V., Satturwar, P.M.., Joshi, S.B., dan Dorle, A.K. (2003). Study Of The
Immunomodulatory activity Of Haridradi Ghirta in Rats. Indian Journal of
Pharmacol. 35: 53.
Handojo, I. (2003). Pengantar Imunologi Dasar. Surabaya: Airlangga University
Press. Halaman 1.
Hargono, D., Winarso, M.W., dan Werawati, A. (2000).. Pengaruh Perasan Daun
Ngokilo (Gynura procumbens Lour. Merr.) Terhadap Aktivitas Sistem
Imun Mencit Putih. Cermin dunia Kedokteran.

Hariana, A.H. (2009). Tumbuhan Obat dan Khasiatnya. Seri kedua. Jakarta:
Penerbit Penebar Swadaya. Halaman 109.
Harmanto, N. (2001). Mahkota Dewa Obat Pusaka Para Dewa. Jakarta: Agro
Media Pustaka. Halaman 4.
Hendarsula, A.R. (2011). Uji Aktivitas Immunostimulan Ekstrak Etanol Sarang
Semut pada Tikus Putih Jantan. Depok: Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam.
Kuby, J. (1994). Imunology. Edisi ke-2. New York: W.H. Freeman and Company.
Halaman 23-45.
Kumala, S., Dewi, T.A., dan Nugroho, A.Y. (2012). Efek Imunostimulan Ekstrak
Etanol Herba Pegagan (Centell asiatica (L.) Urban.) Terhadap Ig G Mencit
Jantan Yang Diinduksi Sel Darah Merah Domba.Jakarta: Jurnal
Universitas Pancasila.
Kresno, B.S. (1991). Imunologi: Diagnosis dan Proses Laboraturium. Edisi
Kedua. Jakarta: Balai Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
Halaman 13-14
Kresno, B.S. (2001). Suplemen I: Diagnosis dan Proses Laboratorium. Edisi
Keempat. Jakarta: Balai Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas
Indonesia. Halaman: 10-11.
Kresno, B.S. (2010). Imunology: Diagnosis dan Proses Laboraturium. Edisi
Kelima. Jakarta: Balai Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas
Indonesia. Halaman 179.
Lakshmi, V., Pandey, K., Puri, A., Saxena, R.P., dan Saxena, K.C. (2003).
Immunostimulant Principles from Curculigo orchioides.
J.Eth.Pharmacol89(2): 181-184.
Makare, N., Bodhankar, S., and Rastogi, V. (2001). Immunomodulatory Activity

Of Alcoholic Extract Of Mangifera indica L. In Mice. J.
Ethanopharmacol. 78(2): 133-137
Puri, A., Saxena, R., Saxena, R.P., Saxena, K.C., Srivastava, V., dan Tandon, J.S.
(1993). Imunostimulant Agents from Andrographis paniculata. J.
Nat.Prod. 56(7): 995-999.
Ray, A., Banerjee, B.D., dan Sen, P. (1996). Modulation of Humoral and Cell-
mediated Immune Response by Azadirachta indica in Mice. Ind. J. Exp
Biol. 34(7): 698-701.
Razdan, R dan Roy, S. (2008). Study of The Immunomodulatory Activity of A
Polyherbal Drug. J. Dept. Of Pharmacology, Karmataka, India. (3) 336.

Roit, I., Brostoff, J., dan Male, D. (1989). Imunology. Edisi Kedua. London:
Gower Medical Publishing. Halaman 1-10.
Salmon, E.S. (1989). Obat-obatan dan Sistem Imun. Dalam buku: Farmakologi
Dasar dan Klinik. Editor: Bertram G.Katzung. Jakarta: Penerbit Buku
Kedokteran EGC. Halaman 836-840.
Salsabila, D, T., Wuisan, J., Mambo, C. (2013). Uji Efek Analgesik Ekstrak Daun
Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa) pada Mencit (Mus musculus).
JurnalFakultas Kedokteran Universitas Sam Patulangi. Halaman 873.
Sherwood, L. (2001). Fisiologi Manusia Dari Sel ke Sistem.Edisi 2. Jakarta:
Penerbit Buku Kedokteran EGC. Halaman 378-384.
Shivaprasad, H.N., Kharya, M.D., Ranna, A.C., dan Mohan, S. (2006).

Preliminary Immunomodulatory Activities of Aqueous Extract of
Terminalia chebula. J. Chem. Department of Pharmacy. 44(1): 32-34.
Srihidayati, M., Dwiyana., Zaraswati., Alie., Karunia. (2010). Efek Imuostimulan

Dari Kultur Kering Lactobacillus Casei pada Hewan Uji Kelinci
(Oryctolagus cuniculus) Jantan. Jurnal FMIPA Universitas Hasanuddin
Makasar.
Subowo. (1993). Imunobiologi. Bandung: Angkasa. Halaman 134-137.
Tan, H.T., dan Rahardja, K. (2007). Obat-Obat Penting, Khasiat, Penggunaan
dan Efek-Efek Sampingnya. Edisi Kelima. Jakarta: Penerbit PT. Elex
Media Komputindo. Halaman: 164-166.
Wagner, H. (1984). Immunostimulants of Fungi and Higher Plants. Definition
Scope Aims Stimulants. Halaman: 26.
Widjaja, S., Magdalena, M., dan Salim, Z. (1999). Efek Imunopotensial Levamisol
Terhadap Sintetis Zat Anti Pada Mahasiswa Yang Diiumunisasi Hepatitis
B. J. Kedokteran Trisakti. Halaman 70
Yuniarti, T. (2008). Ensiklopedia Tanaman Obat Tradisional. Jakarta: Penerbit
PT. Buku Kita. Halaman: 83-85.

Lampiran 1. Surat Hasil Identifikasi Tumbuhan

Lampiran 2. Surat Ethical Clearance

Lampiran 3. Bagan Alur Penelitian
Uji Hipersensitivitas
25 ekor mencit jantan

Diinduksi dengan SDMS 1% sebanyak 0,1 ml secara i.p
FHDMD :
• Dosis 25 mg/kg bb
(5 ekor)
• Dosis 50 mg/kg bb Kontrol negatif : Kontrol positif :
(5 ekor) CMC Na 0,5 % Levamisol 25 mg/kg bb
(5 ekor) (5 ekor) (5 ekor)
Diberikan perlakuan selama 7 hari secara per oral

Diberikan tanda batas pada sendi kaki mencit sebelah kanan
Dilakukan pengukuran volume kaki mencit (V0) pada kaki
yang telah diberi tanda batas
Diinjeksikan dengan 0,1 ml SDMS 1% secara intraplantar
pada telapak kaki sebelah kanan
Dilakukan pengukuran volume pembengkakan kaki mencit
pada hari kedelapan (setelah 24 jam) (Vt)
Hasil

Lampiran 3. Lanjutan
Uji Titer Antibodi
25 ekor mencit jantan

Diinduksi dengan SDMS 1% sebanyak 0,1 ml secara i.p
FHDMD :
(5 ekor)
• Dosis 50 mg/kg bb Kontrol negatif : Kontrol positif :
(5 ekor)
CMC Na 0,5 % Levamisol 25 mg/kg bb
(5 ekor) (5 ekor) (5 ekor)
Diberikan perlakuan selama 7 hari secara per oral

Diambil darah melalu vena ekor dan masukkan ke
dalammicrotube
Disentrifus dengan kecepatan 1900 rpm selama 10 menit
Diambil serumnya sebanyak 25 µl dan diteteskan ke dalam
lubang microtitration plate 96
Ditambahkan larutan PBS dan SDMS 1% sebanyak 25 µl
Dilakukan pengenceran sebanyak dua kali (1:2; 1:4; 1:8; 1:16;
1:32; 1:64; 1:128; 1:256; 1:512; 1:1024; 1:2048; 1:4096)
Diamati penggumpalan yang terjadi
Ditentukan nilai titer antibodi berdasarkan pengenceran yang
terakhir
Ditransformasikan nilai titer antibodi dengan [2log(titer)+1]
Hasil

Lampiran 4. Perhitungan Serbuk Levamisol Yang ditimbang
Bobot 20 tablet = 5,97 g
Kandungan Levamisol / Tablet = 29,46 mg
Serbuk yang ditimbang setara 25 mg Levamisol :
25 mg
= x 5,97 g = 0,25 gr
20 x 29,46 mg

Lampiran 5. Contoh Perhitungan Dosis untuk dosis 100 mg/kg bb
Misalnya BB mencit = 25 gram

100 𝑚𝑚𝑚𝑚
- Konsentrasi EHDMD : = 10𝑚𝑚𝑚𝑚/𝑚𝑚𝑚𝑚
10 𝑚𝑚𝑚𝑚
100 𝑚𝑚𝑚𝑚
- Jumlah yang diberikan : 𝑥𝑥 25 𝑔𝑔 = 2,5 𝑚𝑚𝑚𝑚
1000 𝑔𝑔
2,5 𝑚𝑚𝑚𝑚
- Jumlah suspensi yang diberikan : = 0,25 𝑚𝑚𝑚𝑚
10 𝑚𝑚𝑚𝑚 /𝑚𝑚𝑚𝑚

Lampiran 6. Perhitungan federer
(n-1)(t-1) ≥ 15
(n-1)(5-1) ≥ 15
(n-1) 4 ≥ 15
4n-1 ≥ 15
4n ≥ 16
16
n≥
4
n≥4
n=4
artinya dimulai dari 4 ekor.

Lampiran 7. Gambar alat-alat
(oral sonde & spuit) (pipet mikro)
(timbangan hewan)

Lampiran 7. (Lanjutan)
(centrifuge PLC series)
(plethysmometer digital)

Lampiran 8. Gambar Hewan Percobaan
(mencit jantan)

Lampiran 9. Pembengkakan Kaki Mencit dan Hemaglutinasi
(sebelum di induksi antigen)
(24 jam setelah di induksi antigen)

Hemaglutinasi CMC Na 0,5 %
Hemaglutinasi (+)
(-)
Hemaglutinasi Levamisol 25 mg/kg bb
Hemaglutinasi (+)

Hemaglutinasi FHDMD 25 mg/kg bb
Hemaglutinasi (+)
Hemaglutinasi (+)
Hemaglutinasi (+)

Lampiran 10. Uji Statistik
Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Kelompok Statistic df Sig. Statistic df Sig.
VolumeKakiMencit CMC-Na 0,5% .415 4 . .716 4 .017
Dosis25mg/kgbb .245 5 .200* .892 5 .368
Dosis50mg/kgbb .270 5 .200* .923 5 .551

*
Dosis100mg/kgbb .167 5 .200 .967 5 .855
Levamisol25mg/kgbb .317 5 .111 .833 5 .146
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variances
VolumeKakiMencit
Levene Statistic df1 df2 Sig.
.459 4 19 .765
Descriptives
VolumeKakiMencit
95% Confidence Interval for Mean
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum
CMC-Na 0,5% 4 .0900 .09381 .04690 -.0593 .2393 .03 .23
Dosis25mg/kgbb 5 .2560 .08473 .03789 .1508 .3612 .17 .36
Dosis50mg/kgbb 5 .5260 .08173 .03655 .4245 .6275 .44 .64
Dosis100mg/kgbb 5 .7280 .09338 .04176 .6121 .8439 .62 .86
Levamisol25mg/kgbb 5 .5640 .12876 .05758 .4041 .7239 .46 .77
Total 24 .4471 .24403 .04981 .3440 .5501 .03 .86
ANOVA
VolumeKakiMencit
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 1.187 4 .297 30.794 .000
Within Groups .183 19 .010
Total 1.370 23

Multiple Comparisons
Dependent Variable:VolumeKakiMencit
95% Confidence Interval

Mean Difference
(I) Kelompok (J) Kelompok (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
Tukey HSD CMC-Na 0,5% Dosis25mg/kgbb -.16600 .06584 .127 -.3640 .0320
Dosis50mg/kgbb -.43600* .06584 .000 -.6340 -.2380

*
Dosis100mg/kgbb -.63800 .06584 .000 -.8360 -.4400
*
Levamisol25mg/kgbb -.47400 .06584 .000 -.6720 -.2760
Dosis25mg/kgbb CMC-Na 0,5% .16600 .06584 .127 -.0320 .3640
Dosis50mg/kgbb -.27000* .06208 .003 -.4567 -.0833
Dosis100mg/kgbb -.47200* .06208 .000 -.6587 -.2853

*
*
Dosis50mg/kgbb CMC-Na 0,5% .43600 .06584 .000 .2380 .6340
*
Dosis25mg/kgbb .27000 .06208 .003 .0833 .4567
Dosis100mg/kgbb -.20200* .06208 .030 -.3887 -.0153
Levamisol25mg/kgbb -.03800 .06208 .971 -.2247 .1487
Dosis100mg/kgbb CMC-Na 0,5% .63800* .06584 .000 .4400 .8360
Dosis25mg/kgbb .47200* .06208 .000 .2853 .6587

*
Dosis50mg/kgbb .20200 .06208 .030 .0153 .3887
Levamisol25mg/kgbb .16400 .06208 .102 -.0227 .3507
Levamisol25mg/kgbb CMC-Na 0,5% .47400* .06584 .000 .2760 .6720

*
Dosis25mg/kgbb .30800 .06208 .001 .1213 .4947
Dosis50mg/kgbb .03800 .06208 .971 -.1487 .2247
Dosis100mg/kgbb -.16400 .06208 .102 -.3507 .0227

*
LSD CMC-Na 0,5% Dosis25mg/kgbb -.16600 .06584 .021 -.3038 -.0282
Dosis50mg/kgbb -.43600* .06584 .000 -.5738 -.2982

*
Dosis100mg/kgbb -.63800 .06584 .000 -.7758 -.5002
*

*
Dosis50mg/kgbb -.27000 .06208 .000 -.3999 -.1401
Dosis100mg/kgbb -.47200* .06208 .000 -.6019 -.3421

*
*
Dosis50mg/kgbb CMC-Na 0,5% .43600 .06584 .000 .2982 .5738
Dosis25mg/kgbb .27000* .06208 .000 .1401 .3999

*
Dosis100mg/kgbb -.20200 .06208 .004 -.3319 -.0721

Levamisol25mg/kgbb -.03800 .06208 .548 -.1679 .0919
Dosis25mg/kgbb .47200* .06208 .000 .3421 .6019

*
Dosis50mg/kgbb .20200 .06208 .004 .0721 .3319
Levamisol25mg/kgbb .16400* .06208 .016 .0341 .2939

*
Levamisol25mg/kgbb CMC-Na 0,5% .47400 .06584 .000 .3362 .6118
*
Dosis25mg/kgbb .30800 .06208 .000 .1781 .4379
Dosis50mg/kgbb .03800 .06208 .548 -.0919 .1679

*
Dosis100mg/kgbb -.16400 .06208 .016 -.2939 -.0341
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Homogeneous Subsets
VolumeKakiMencit
Subset for alpha = 0.05
Kelompok N 1 2 3
Tukey HSDa,,b CMC-Na 0,5% 4 .0900
Dosis25mg/kgbb 5 .2560
Levamisol25mg/kgbb 5 .5640 .5640
Sig. .108 .974 .115
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 4,762.
b. The group sizes are unequal. The harmonic mean of the group sizes is used. Type I error levels are not
guaranteed.

Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Kelompok Statistic df Sig. Statistic df Sig.
TiterAntibodi CMC-Na 0,5% .367 5 .026 .684 5 .006
Dosis25mg/kgbb .367 5 .026 .684 5 .006
Dosis50mg/kgbb .349 5 .046 .771 5 .046
Dosis100mg/kgbb .367 5 .026 .684 5 .006
Levamisol25mg/kgbb .367 5 .026 .684 5 .006
a. Lilliefors Significance Correction
Test of Homogeneity of Variances
TiterAntibodi
Levene Statistic df1 df2 Sig.
14.595 4 20 .000
Descriptives
TiterAntibodi
95% Confidence Interval for Mean

Std.
N Mean Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum
CMC-Na 0,5% 5 2.5700 .32863 .14697 2.1619 2.9781 2.21 2.81
Dosis25mg/kgbb 5 3.7700 .32863 .14697 3.3619 4.1781 3.41 4.01
Dosis50mg/kgbb 5 4.8500 .53666 .24000 4.1837 5.5163 4.01 5.21
Dosis100mg/kgbb 5 5.6900 .98590 .44091 4.4658 6.9142 4.61 6.41
Levamisol25mg/kgbb 5 3.7700 .32863 .14697 3.3619 4.1781 3.41 4.01
Total 25 4.1300 1.20000 .24000 3.6347 4.6253 2.21 6.41
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Kelompok N Mean Rank
TiterAntibodi CMC-Na 0,5% 5 3.00
Dosis25mg/kgbb 5 10.80

Levamisol25mg/kgbb 5 10.80
Total 25
Test Statisticsa,b
TiterAntibodi
Chi-Square 20.718
df 4
Asymp. Sig. .000
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok
MANN WHITNEY
a. Kelompok CMC-Na dan dosis 25 mg/kgbb
Ranks
Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks
TiterAntibodi CMC-Na 0,5% 5 3.00 15.00
Dosis25mg/kgbb 5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
TiterAntibodi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.694
Asymp. Sig. (2-tailed) .007
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
b. Kelompok CMC-Na dan dosis 50 mg/kgbb

Ranks

Ranks
Total 10
Test Statisticsb
TiterAntibodi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.685
c. Kelompok CMC-Na dan dosis 100 mg/kgbb

Ranks
Dosis100mg/kgbb 5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
TiterAntibodi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.694

d. Kelompok CMC-Na dan levamisol 25 mg/kgbb
Ranks
Levamisol25mg/kgbb 5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
TiterAntibodi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.694
e. Kelompok dosis 25 mg/kgbb dan dosis 50 mg/kgbb

Ranks
Total 10
Test Statisticsb
TiterAntibodi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.694

f. Kelompok dosis 25 mg/kgbb dan dosis 100 mg/kgbb
Ranks
TiterAntibodi Dosis25mg/kgbb 5 3.00 15.00
Dosis100mg/kgbb 5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
TiterAntibodi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.694
g. Kelompok dosis 25 mg/kgbb dan levamisol 25 mg/kgbb

Ranks
Total 10
Test Statisticsb
TiterAntibodi
Mann-Whitney U 12.500
Wilcoxon W 27.500
Z .000
Asymp. Sig. (2-tailed) 1.000
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 1.000a


h. Kelompok dosis 50 mg/kgbb dan dosis 100 mg/kgbb
Ranks
Dosis100mg/kgbb 5 6.60 33.00
Total 10
Test Statisticsb
TiterAntibodi
Wilcoxon W 22.000
Z -1.193
i. Kelompok dosis 50 mg/kgbb dan levamisol 25 mg/kgbb

Ranks
Total 10
Test Statisticsb
TiterAntibodi
Wilcoxon W 16.500
Z -2.410

j. Kelompok dosis 100 mg/kgbb dan levamisol 25 mg/kgbb
Ranks
Total 10
Test Statisticsb
TiterAntibodi
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 15.000
Z -2.694
Homogeneous Subsets
TiterAntibodi
Subset for alpha = 0.05
Kelompok N 1 2 3
Tukey HSDa CMC-Na 0,5% 5 2.5700
Levamisol25mg/kgbb 5 3.7700
Sig. 1.000 1.000 .168
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

111501159

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

111501159

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

EFEK IMUNOMODULATOR FRAKSI N-HEKSAN DAUN MAHKOTA

DEWA (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) TERHADAP RESPON

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

EFEK IMUNOMODULATOR FRAKSI N-HEKSAN DAUN MAHKOTA DEWA

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi

Yuandani, S.Farm., M.Si., Ph.D., Apt.

Dr. Edy Suwarso, S.U., Apt.

Medan, April 2017

Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.

Universitas Sumatera Utara

berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi yang

berjudul “Efek Imunomodulator Fraksi n-Heksan Daun Mahkota Dewa (Phaleria

macrocarpa (Scheff) Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas Dan Titer

untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas

Pada kesempatan ini, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan

fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga

meluangkan waktu dan tenaga dalam membimbing penulis dengan penuh

kesabaran dan tanggung jawab, memberikan petunjuk dan saran-saran selama

masa perkuliahan hingga selesai.

Universitas Sumatera Utara

menyelesaikan skripsi ini.

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum

skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.

Medan, April 2017

Universitas Sumatera Utara

Saya yang bertanda tangan di bawah ini,

Nama : Siti Khadijah

Nomor Induk Mahasiswa : 111501159

Program Studi : S-! Reguler

Judul Skripsi : Efek Imunomodulator Fraksi n-Heksan Daun

Medan, April 2017

Universitas Sumatera Utara

Imunomodulator membantu tubuh untuk mengoptimalkan fungsi sistem

Kata kunci : Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl., imunomodulator., respon

Universitas Sumatera Utara

Immunomodulator helps the body to optimize the function of the immune

Keyword:Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl., immunomodulatory.,

Universitas Sumatera Utara

Lembar Pengesahan .................................................................................... iii

Kata Pengantar ............................................................................................ iv

Surat Pernyataan ......................................................................................... vi

Abstrak ........................................................................................................ vii

Abstract ....................................................................................................... viii

Daftar Isi .................................................................................................... ix

Daftar Tabel ................................................................................................ xi

Daftar Gambar............................................................................................. xii

Daftar Lampiran .......................................................................................... xiii

BAB I PENDAHULUAN .......................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ............................................................................. 1

1.2 Perumusan Masalah ...................................................................... 3

1.3 Hipotesis ....................................................................................... 4

1.4 Tujuan Penelitian .......................................................................... 4

1.5 Manfaat Penelitian ....................................................................... 4

1.6 Kerangka pikir................................................................................ 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................... 6

2.1 Tanaman Mahkota Dewa ............................................................... 6

2.1.1 Sistematika Tanaman ........................................................... 6

2.1.2 Nama Daerah ....................................................................... 6

2.1.3 Deskripsi Tanaman .............................................................. 6

Universitas Sumatera Utara