Validasi Dan Penetapan Kadar Asetosal Dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri

VALIDASI DAN PENETAPAN KADAR ASETOSAL DALAM
SEDIAAN TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI

FOURIER TRANSFORM INFRA RED (FTIR)
SKRIPSI
HALAMAN JUDUL
OLEH:
WILDO CAHYA ASHIDIQI TAMBUNAN
NIM 171501118
PROGRAM SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2021
Universitas Sumatera Utara

HALAMAN USULAN PENELITIAN

SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
OLEH:
NIM 171501118
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2021
ii
PENGESAHAN SKRIPSI

OLEH:
171501118
Dipertahankan di Hadapan Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera
Utara pada Tanggal: 3 Januari 2022
Disetujui oleh: Panitia Penguji:

Pembimbing I,
Prof. Dr. Masfria M.S., Apt.

Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, SU., Apt NIP 195707231986012001
NIP 195306191983031001
Pembimbing II,
Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, SU., Apt

NIP 195306191983031001
Henny Sri Wahyuni S.Farm., M.Si., Apt

NIP 198509222018032001
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.
Ketua Program Studi Sarjana Farmasi, NIP 195201041980031002
Dr. Sumaiyah, M.Si., Apt Henny Sri Wahyuni S.Farm., M.Si., Apt
NIP 197712262008122002 NIP 198509222018032001
Medan, 3 Januari 2022

Diahkan oleh:
Dekan
Khairunnisa, S.Si., M.Pharm., Ph.D., Apt.

NIP 197802152008122001
iii
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah yang Maha Kuasa yang telah melimpahkan
rahmat, karunia, dan ridhoNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul “Validasi dan Penetapan Kadar Asetosal dalam sediaan tablet secara
spektrofotometri Fourier Transform Infra Red (FTIR)”. Skripsi ini diajukan sebagai salah
satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini, saya menyampaikan rasa hormat dan terima kasih kepada Ibu
Khairunnisa, S.Si., M.Pharm., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera
Utara yang telah memberikan bantuan dan fasilitas untuk menyelesaikan skripsi penulis,
kepada Ibu Prof. Dr. Masfria, M.Si., Apt., selaku Mantan Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan bantuan dan fasilitas selama masa
Pendidikan. Saya juga ingin menyampaikan rasa terima kasih yang setulus-tulusnya kepada
Bapak Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, SU., Apt., dan Ibu Henny Sri Wahyuni,
S.Farm., M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah membimbing dengan penuh
kesabaran, tulus dan ikhlas selama penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung. Kepada
Ibu Prof. Dr. Masfria, M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.
selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam
menyelesaikan skripsi ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara yang telah mendidik selama perkuliahan dan Ibu Prof. Dr. Poppy Anjelisa
Zaitun Hasibuan S.Si., M.Si., Apt., selaku penasehat akademik yang selalu memberi
bimbingan, perhatian dan motivasi kepada penulis selama masa perkuliahan.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tulus kepada kedua
orangtua, Ayahanda Sahnan Tambunan dan Ibunda Desniwati, abangda Heru Utama
Tambunan, dan juga adik Naufal Tambunan yang telah memberikan cinta dan kasih sayang,
doa, semangat, dorongan motivasi kepada penulis selama ini.
iv
Terima kasih juga penulis ucapkan kepada rekan penelitian Ricky, Karmila, Egik
dan Dandy, kepada Shabrina Alifah Siregar atas waktu, motivasi dan doa yang telah
diberikan kepada penulis selama menjalani pendidikan dan penelitian, kepada teman
seperjuangan Yogik, Kevin, Dika, Dimas, Muliandi, Wildo, Rahmat, Amri, Raja, Jose, Ade,
Enry, Ella, Anggi, Keluarga Bersama, Asisten Laboratorium Statistik dan Metodologi
Penelitian serta sahabat-sahabat stambuk 2017 Fakultas Farmasi USU atas kebersamaan,
perhatian, do’a, dorongan, semangat serta cinta yang diberikan kepada penulis selama ini,
hingga akhirnya penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari
kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis menerima kritik dan
saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis berharap semoga skripsi ini dapat
memberi manfaat bagi kita semua.

Penulis,
Wildo Cahya Ashidiqi Tambunan

171501118
v
SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS
Saya yang bertanda tangan dibawah ini :
Nama : Wildo Cahya Ashidiqi Tambunan
Nomor Induk Mahasiswa : 171501118
Program studi : Sarjana Farmasi
Judul Skripsi : Validasi Dan Penetapan Kadar Asetosal Dalam
Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri Fourier
Transform Infra Red (FTIR)
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi yang saya buat adalah asli karya sendiri dan
bukan plagiat. Apabila di kemudian hari diketahui bahwa skripsi saya tersebut
terbukti plagiat karena kesalahan sendiri, maka saya bersedia diberi sanksi apapun
oleh Program Studi Sarjana Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, Saya
tidak akan menuntut pihak manapun atas perbualan saya tersebut.
Demikian Surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya dan dalam
keadaaan sehat.

Penulis,
Wildo Cahya Ashidiqi Tambunan

171501118
vi
VALIDASI DAN PENETAPAN KADAR ASETOSAL DALAM SEDIAAN
TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI FOURIER TRANSFORM
INFRA RED (FTIR)
ABSTRAK
Latar belakang: Asetosal atau Asam Asetilsalisilat merupakan salah satu obat
antiinlfamasi non steroid yang sering digunakan didunia. Asetosal digunakan untuk
meredakan nyeri ringan sampai sedang dan gangguan inflamasi akut. Fourier
Transform Infra Red (FTIR) memiliki sensitifitas yang lebih baik, pengukuran yang
lebih singkat, persiapan sampel sederhana, dan mudah dalam pengoperasian.
Fourier Transform Infra Red (FTIR) memiliki sifat yang khas sebagai spektrum
sidik jari, yang mana tidak ada dua buah senyawa atau sampel yang berbeda
mempunyai spektrum yang sama. Pemeriksaan kadar zat aktif merupakan syarat
yang harus dipenuhi untuk menjamin kualitas sediaan obat.
Tujuan: Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menetapkan kadar asetosal dalam
sediaan tablet serta untuk mengetahui kesesuaian kadar terhadap persyaratan
Farmakope Indonesia.
Metode: Penetapan kadar asetosal secara spektrofotometri Fourier Transform Infra
Red (FTIR) dilakukan dengan pembuatan kalibrasi dan validasi 5 konsentrasi yang
diukur pada rentang bilangan gelombang 4000-400 cm-1.
Hasil: Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar asetosal dalam sediaan tablet
Aptor® (96,81±0,95) %, tablet Astika® (101,90±1,59) %, tablet Cardioasetosal®
(105,75±1,83)%, dan tablet Farmasal® (98,36±1,50) %. Kadar yang diperoleh
memenuhi persyaratan yang ditetapkan pada Farmakope Indonesia edisi VI tahun
2020. Validasi metode yang dilakukan didapat hasil uji perolehan kembali 100,77
%, RSD 0,57%, dan LOD dan LOQ masing-masing adalah 0,7761% dan 2,5870%.
Hasil ini menunjukkan bahwa metode yang dilakukan memberikan hasil akurat dan
teliti.
Kesimpulan: Hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa penetapan kadar asetosal
dapat dilakukan secara spektrofotometri Fourier Transform Infra Red (FTIR) dan
kadar tablet asetosal telah memenuhi persyaratan Farmakope Indonesia Edisi VI
tahun 2020.
Kata Kunci: Asetosal, FTIR, spektrofotometri, penetapan kadar
vii
VALIDATION AND DETERMINATION OF ASETOSAL IN TABLET BY
FOURIER TRANSFORM INFRA RED SPECTROPHOTOMETRY (FTIR)
ABSTRACT
Background: Acetosal or Acetylsalicylic Acid is one of the most widely used non-
steroidal anti-inflammatory drugs in the world. Acetosal is used to relieve mild to
moderate pain and acute inflammatory disorders. Fourier Transform Infra Red
(FTIR) has better sensitivity, shorter measurements, simple sample preparation, and
is easy to operate. Fourier Transform Infra Red (FTIR) has a characteristic as a
fingerprint spectrum, in which no two compounds or different samples have the
same spectrum. Examination of active substance levels is a requirement that must
be met to ensure the quality of drug preparations.
Objective: The purpose of this study was to determine asetosal levels in tablet and
to determine the suitability of the requirements of Indonesian Pharmacopoeia.
Methods: Determination of asetosal levels by Fourier Transform Infra Red (FTIR)
spectrophotometry used to made a chemometric calibration and validation of each
of the 5 concentrations measured absorbance in the wave number range 4000-400
cm-1.
Results: The results showed that the levels of asetosal in Aptor® tablets
(96,81±0,95)%, Astika® tablets (101,90±1,59)%, Cardioasetosal® tablets
(105,75±1,83)%, and Farmasal® tablets (98,36±1,50)%. The content obtained
meets the requirements set in the Indonesian’s Pharmacopeia 5th edition 2014. The
validation method showed the result of the recovery test was 100.77%, RSD was
0,57%, and LOD and LOQ were 0,7761% and 2,5870% respectively. These results
indicate that the method was accurate and precise.
Conclusion: The results of this study concluded that the determination of asetosal
levels could be carried out by Fourier Transform Infra Red (FTIR)
spectrophotometry and the levels of asetosal tablets had met the requirements of
the Indonesian’s Pharmacopeia 6th edition 2020.
Keywords: Asetosal, FTIR, spectrophotometry, content determination
viii
DAFTAR ISI
HALAMAN SAMPUL ............................................................................................ i

HALAMAN JUDUL............................................................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ................................................... vi
ABSTRAK ............................................................................................................ vii
ABSTRACT ......................................................................................................... viii
DAFTAR ISI .......................................................................................................... ix
DAFTAR ISI ............................................................................................................x
DAFTAR TABEL .................................................................................................. xi
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xii
DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN ...................................................... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xiv
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................................1
1.1 Latar Belakang ...................................................................................................1
1.2 Perumusan Masalah ...........................................................................................3
1.3 Hipotesis .............................................................................................................3
1.4 Tujuan Penelitian ...............................................................................................4
1.5 Manfaat Penelitian .............................................................................................4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..............................................................................5
2.1 Asetosal ..............................................................................................................5
2.1.1 Sifat Fisika Kimia ...........................................................................................5
2.1.2 Farmakologi ....................................................................................................6
2.1.3 Farmakokinetika..............................................................................................6
2.2 Tablet..................................................................................................................7
2.3 Spektrofotometri ................................................................................................7
2.3.1 Definisi ............................................................................................................7
2.3.2 Klasifikasi Spektrofotometri ...........................................................................8
2.4 Spektrofotometri FTIR .....................................................................................11
2.5 Vibrasi Molekul Inframerah .............................................................................15
2.6 Pengolahan Sampel pada FTIR ........................................................................16
2.7 Interpretasi Spektrum Infra Merah ...................................................................19
2.8 Interpretasi Spektrum Infra Merah Asetosal ....................................................21
2.9 Validasi Metode ...............................................................................................21
2.9.1 Akurasi ..........................................................................................................22
2.9.2 Presisi ............................................................................................................22
2.9.3 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi...............................................................22
2.9.4 Linearitas .......................................................................................................23
BAB III METODE PENELITIAN.........................................................................24
3.1 Jenis Penelitian .................................................................................................24
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian ..........................................................................24
3.3 Alat-alat ............................................................................................................24
3.4 Bahan-bahan .....................................................................................................24
3.5 Pengambilan Sampel .......................................................................................25
3.6 Prosedur Penelitian...........................................................................................25
3.6.1 Pembuatan Spektrum Serapan Baku Asetosal ..............................................25
ix
3.6.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi ..........................................................................25
3.6.3 Penetapan Kadar Tablet Asetosal..................................................................26
3.7 Validasi Metode ...............................................................................................26
3.7.1 Linearitas .......................................................................................................26
3.7.2 Akurasi ..........................................................................................................26
3.7.3 Presisi ............................................................................................................27
3.7.4 Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) .......................................27
3.7.5 Analisis Data Penetapan Kadar secara Statistik ............................................28
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................................29
4.1 Penentuan Spektrum Serapan Baku Asetosal ..................................................29
4.2 Penentuan Kurva Kalibrasi Asetosal ................................................................32
4.3 Hasil Pembuatan Kurva Kalibrasi Asetosal .....................................................33
4.4 Hasil Penetapan Kadar Asetosal dalam Sediaan Tablet ..................................35
4.5 Hasil Validasi Metode ......................................................................................38
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .................................................................40
5.1 Kesimpulan ......................................................................................................40
5.2 Saran.................................................................................................................40
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................41
LAMPIRAN ...........................................................................................................42
x
DAFTAR TABEL
4.1 Puncak gugus fungsional asetosal ...................................................................30

4.2 Hasil pengolahan data dari sediaan tablet asetosal dengan nama dagang.. ......36
4.3 Data kadar asetosal dalam sediaan tablet .........................................................37
xi
DAFTAR GAMBAR
2.1 Struktur kimia asetosal .......................................................................................5

2.2 Komponen utama dalam FTIR .........................................................................13
2.3 Jenis-jenis vibrasi molekul ...............................................................................15
2.4 Daerah fundamental pada spektrum infra merah .............................................16
2.5 Vibrasi Bond Strecthing ...................................................................................17
2.6 Vibrasi Bond Bonding ......................................................................................17
2.7 Spektrum inframerah propanol (CH3CH2CH2OH) ........................................... 18
2.8 Daerah-daerah perkiraan frekuensi vibrasi yang mana berbagai jenis ikatan
menyerap sinar IR (disini hanya vibrasi ulur; sementara berbagai jenis vibrasi
tekuk dihilangkan untuk membuat lebih jelas) ...............................................20
4.1 Tampilan puncak daerah gugus fungsional asetosal ..........................................30
4.2 Spektrum Serapan Baku Asetosal 10% ...............................................................31
4.3 Tampilan transmittan spektrum asetosal dengan bilangan gelombang spesifik ..32
4.4 Tampilan transmittan spektrum asetosal dengan bilangan gelombang spesifik
Menurut Literatur ...................................................................................................33
4.5 Tampilan spektrum tumpang asetosal dengan berbagai konsentrasi (6-14%) .....34
4.6 Grafik kurva kalibrasi baku asetosal .......................................................................35
xii
DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN
1. Spektrofotometer Inframerah (IRPrestige-21 Shimadzu) ...............................43

2. Timbangan (Sartorius) ....................................................................................43
3. Kalium bromida ..............................................................................................44
4. Tablet Aptor® ..................................................................................................50
5. Spektrum Tumpang Tindih Baku Asetosal dan Tablet Aptor® .....................50
6. Tablet Astika® .................................................................................................55
7. Spektrum Tumpang Tindih Baku Asetosal dan Tablet Astika® .....................55
8. Tablet Cardioasetosal® ....................................................................................60
9. Spektrum Tumpang Tindih Baku Asetosal dan Cardioasetosal® ...................60
10. Tablet Farmasal®.............................................................................................65
11. Spektrum Tumpang Tindih Baku Asetosal dan Tablet Farmasal® .................65
xiii

DAFTAR LAMPIRAN
1. Gambar Alat dan Bahan ..................................................................................43

2. Bagan Alir Prosedur Penelitian .......................................................................45
3. Bagan Alir Prosedur Penelitian secara Keseluruhan.......................................47
4. Data Perhitungan Kalibrasi, Persamaan Regresi, dan Koefisien Korelasi
Asetosal ...........................................................................................................48
5. Hasil Pengujian Asetosal 100 mg Merek Aptor® ...........................................50
6. Hasil Pengujian Asetosal 100 mg Merek Astika® .........................................55
7. Hasil Pengujian Asetosal 100 mg Merek Cardioasetosal® .............................60
8. Hasil Pengujian Asetosal 100 mg Merek Farmasal® ......................................65
9. Perhitungan Validasi Metode ..........................................................................70
10. Perhitungan Simpangan Baku, Batas Deteksi (LOD), dan Batas Kuantitasi
(LOQ) Asetosal ...............................................................................................79
11. Daftar Nilai Distribusi t...................................................................................80
12. Sertifikat Pengujian Asetosal .........................................................................81
xiv

BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Asetosal merupakan obat yang memiliki sifat analgesik, antiinflamasi, dan
antipiretik. Asetosal digunakan untuk meredakan nyeri ringan sampai sedang,
kondisi demam ringan, dan untuk gangguan inflamasi akut dan kronis seperti
osteoartritis, artritis reumatoid, artritis idiopatik remaja, dan spondilitis ankilosa
(Sweetman, 2009). Asetosal merupakan salah satu obat yang paling banyak
digunakan didunia. Selain mempunyai harga yang relatif murah, asetosal
mempunyai banyak kegunaan. Asetosal termasuk dalam golongan obat
antiinflamasi non steroid yang memiliki efek analgesik, antipiretik dan
antiinflamasi (Rahmadanita dan Sumarno, 2019).
Menurut UU Nomor 36 (2009), tentang Kesehatan pada pasal 105 ayat 1,
Sediaan farmasi yang berupa obat dan bahan baku obat harus memenuhi syarat
Farmakope Indonesia atau buku standar lainnya. Pemeriksaan kadar zat aktif
merupakan persyaratan yang harus dipenuhi untuk menjamin kualitas sediaan obat,
dan untuk melakukan penetapan kadar obat dibutuhkan suatu metode yang telah
divalidasi (Uno, dkk., 2015).
Penetapan kadar tablet asetosal dilakukan dengan cara kromatografi cair
kinerja tinggi. Sistem kromatograf cair kinerja tinggi dilengkapi dengan detektor
280 nm dan kolom berukuran 4,0 mm x 30 cm. Laju alir lebih kurang 2 mL per
menit. Lakukan kromatografi terhadap larutan baku, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak seperti tertera pada prosedur, dan simpangan baku relatif tidak lebih
dari 2,0%. (Ditdjen KAK, 2020).

Berdasarkan penelitan terdahulu yang telah dilakukan oleh Murtaza, dkk.,
(2011), penetapan kadar asetosal dilakukan secara spektrofotometri UV
menunjukkan kadar asetosal dalam sediaan tablet yang diuji memliki kadar 99,16
% dan dinyatakan memenuhi syarat Farmakope Indonesia Edisi VI. Selanjutnya,
berdasarkan penelitan terdahulu yang dilakukan Gandhimathi dan Ravi (2007),
penetapan kadar asetosal menggunakan KCKT dengan kolom C18 dengan
perbandingan fase gerak triethylamine (pH 4): acetonitril (25:75). Didapatkan
%Recovery sebesar 101,62% dinyatakan memenuhi syarat Farmakope Indonesia
Edisi VI. Penetapan kadar menggunakan FTIR, antara lain penetapan kadar
isoniazid (Gunasekaran, dkk., 2009), lorazepam (Konoz, dkk., 2012), azitromisin
(Robaina, dkk., 2013), dan asam folat (Raouf dkk., 2014). Menurut Nugrahani, dkk
(2019), pentepanan kadar Kafein, Paracetamol, dan Asetosal dalam tablet
kombinasi dapat dilakukan menggunakan Spektrofotometri FTIR. Namun belum
ada dijumpai penelitan penetapan kadar senyawa tunggal tablet menggunakan
spektofotometri FTIR.
Menurut Mallah, dkk (2012), metode titrasi, spektrofotometri turunan,
spektrofluororimetri, kromatografi cair, kromatografi cairan kinerja tinggi/
spektrofotometri massa membutuhkan prosedur yang panjang dan sejumlah pelarut
organik yang berkontribusi terhadap tingginya biaya analisis dan menghasilkan
limbah.
Salah satu keunggulan spektroskopi IR dengan spektroskopi lainnya yaitu
karena sifatnya yang khas sebagai spektrum sidik jari, yang mana tidak ada dua
buah senyawa atau sampel yang berbeda mempunyai spektrum yang sama
(Rohman, 2014). Spektroskopi IR Juga memiliki sensitifitas yang lebih baik,

pengukuran yang lebih singkat, persiapan sampel sederhana, mudah dalam
pengoperasian. Spektroskopi FTIR juga telah menjadi pilihan utama untuk
meminimalisir isu lingkungan mengenai limbah kimia industri karena tidak
memerlukan banyak pelarut (Mallah, dkk., 2012).
Pemeriksaan kadar sampel senyawa obat menggunakan daerah sidik jari
bertujuan untuk menentukan kesesuaian sampel dengan standar Farmakope.
Spektroskopi Infra merah merupakan teknik analis yang sangat popular untuk
analisis berbagai sampel, baik sampel produk farmasetik, makanan, cairan biologis,
maupun sampel lingkungan dan untuk menentukan tingkat kesesuaian sampel
dengan standar Farmakope bisa dilakukan dengan penyiapan sampel pada daerah
sidik jari menggunakan KBr atau KCl (Gandjar dan Rohman, 2012).
Berdasarkan uraian diatas, peneliti memilih metode FTIR untuk penetapan
kadar asetosal dalam sediaan tablet secara Spektrofotometri Fourier Transform
Infra Red (FTIR) pada daerah sidik jari (1300–900 cm-1) menggunakan serbuk KBr
(Kalium Bromida) sesuai persyaratan kadar yang ditetapkan pada Farmakope
Indonesia edisi VI tahun 2020.

1.1 Perumusan Masalah
Berdasarkan uraian diatas, maka permasalahan pada penelitian ini dapat
dirumuskan sebagai berikut:
a. Apakah daerah sidik jari pada asetosal dapat digunakan untuk
penetapan kadar secara Spektrofotometri Fourier Transform Infra Red
(FTIR)?
b. Apakah metode penetapan kadar dengan pelet KBr menggunakan
daerah sidik jari secara Spektrofotometri Fourier Transform Infra Red
(FTIR) memenuhi persyaratan validasi dengan parameter akurasi,
presisi, batas deteksi dan batas kuantifikasi ?
c. Apakah kadar asetosal dalam sediaan tablet memenuhi persyaratan
yang ditetapkan pada Farmakope Indonesia edisi VI tahun 2020?
1.2 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah diatas, maka hipotesis dari penelitian ini
sebagai berikut:
a. Daerah sidik jari pada asetosal dapat digunakan untuk penetapan kadar
secara Spektrofotometri Fourier Transform Infra Red (FTIR).
b. Metode penetapan kadar dengan pelet KBr menggunakan daerah sidik
jari secara Spektrofotometri Fourier Transform Infra Red (FTIR)
memenuhi persyaratan validasi dengan parameter akurasi, presisi, batas
deteksi dan batas kuantifikasi ?
c. Kadar asetosal dalam sediaan tablet memenuhi persyaratan kadar yang
ditetapkan pada Farmakope Indonesia edisi VI tahun 2020.

1.3 Tujuan Penelitian
Berdasarkan hipotesis di atas, maka tujuan dilakukannya penelitian ini
adalah:
a. Untuk mengetahui bahwa daerah sidik jari pada asetosal dapat digunakan
sebagai penetapan kadar secara Spektrofotometri Fourier Transform
Infra Red (FTIR).
b. Untuk mengetahui bahwa metode penetapan kadar dengan pelet KBr
menggunakan daerah sidik jari secara Spektrofotometri Fourier
Transform Infra Red (FTIR) memenuhi persyaratan validasi dengan
parameter akurasi, presisi, batas deteksi dan batas kuantifikasi ?
c. Untuk mengetahui kesesuaian hasil kadar asetosal dalam sediaan tablet
yang diperoleh dengan persyaratan kadar yang ditetapkan pada
Farmakope Indonesia edisi VI tahun 2020.
1.4 Manfaat Penelitian
Berdasarkan tujuan penelitian di atas, maka manfaat penelitian ini adalah :
a. Untuk memberikan informasi bahwa Spektrofotometri Fourier
Transform Infra Red (FTIR) dapat digunakan sebagai salah satu
penetapan kadar asetosal.
b. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan kontribusi untuk industri
farmasi dan Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM).

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Asetosal
2.1.1 Sifat Fisika Kimia
Rumus Struktur :
Gambar 2.1 Struktur Kimia Asetosal
Berdasarkan Ditjend KAK (2020), Uraian tentang asetosal adalah sebagai
berikut:
Nama Kimia : Asam asetilsalisilat (50-78-2)
Rumus Molekul : 𝐶9 𝐻8 𝑂6
Berat Molekul : 180,16
Persyaratan : Tablet Asam Asetilsalisilat mengandung Asam
Asetilsalisilat tidak kurang dari 90,0 % dan tidak
lebih dari 110% dari jumlah yang tertera pada etiket.
Pemerian : Hablur, seperti jarum atau lempengan tersusun,
atau sebuk hablur; putih; tidak berbau atau berbau
lemah.
Kelarutan : Sukar larut dalam air; mudah larut dalam etanol;
larut dalam kloroform dan dalam eter; agak sukar

larut dalam eter mutlak.
Baku Pembanding : Asam Asetilsalisilat BPFI; lakukan pengeringan
diatas silica gel P selama 5 jam, sebelum digunakan.
Simpan dalam wadah tertutup rapat.
2.1.2 Farmakologi
2.1.3 Farmakokinetika
Asetosal dan salisilat lainnya diserap dengan cepat dari saluran pencernaan
saat diminum tetapi penyerapan setelah dosis rektal kurang dapat diandalkan.
Asetosal dan salisilat lainnya juga bisa diserap melalui kulit. Setelah dosis oral,
absorpsi asetosal yang tidak terionisasi terjadi di lambung dan usus. Beberapa
asetosal dihidrolisis menjadi salisilat di dinding usus. Setelah diserap, asetosal
dengan cepat diubah menjadi salisilat, tetapi selama 20 menit pertama setelah dosis
oral asetosal adalah bentuk obat dalam plasma. Asetosal 80 sampai 90% terikat
pada protein plasma dan didistribusikan secara luas; volume distribusinya
dilaporkan 170 mL / kg pada orang dewasa. Saat konsentrasi obat dalam plasma
meningkat, tempat pengikatan pada protein menjadi jenuh dan volume distribusinya
meningkat. Baik asetosal dan salisilat memiliki aktivitas farmakologis meskipun
hanya asetosal yang memiliki efek anti-platelet. Salisilat terikat secara luas pada
protein plasma dan dengan cepat didistribusikan ke seluruh bagian tubuh. Salisilat
muncul dalam ASI dan melewati plasenta (Sweetman, 2009)
Salisilat terutama dieliminasi oleh metabolisme hati; metabolitnya termasuk
asam salisilat, glukuronida fenolik salisil, asil glukuronida salisilat, asam gentisat,
dan asam gentisurat. Pembentukan metabolit utama, asam salisilat dan glukuronida
fenolik salisil, mudah jenuh dan mengikuti kinetika MichaelisMenten; rute

metabolisme lainnya adalah proses orde pertama. Akibatnya, konsentrasi plasma-
salisilat meningkat secara tidak proporsional dengan dosis. Setelah dosis asetosal
325 mg, eliminasi adalah proses urutan pertama dan waktu paruh salisilat plasma
sekitar 2 sampai 3 jam; pada dosis asetosal tinggi, waktu paruh meningkat menjadi
15 sampai 30 jam. Salisilat juga diekskresikan tidak berubah dalam urin; jumlah
yang dikeluarkan melalui jalur ini meningkat dengan peningkatan dosis dan juga
tergantung pada pH urin, sekitar 30% dosis diekskresikan dalam urin alkali
dibandingkan dengan 2% dosis dalam urin asam. Ekskresi ginjal melibatkan filtrasi
glomerulus, sekresi tubulus ginjal aktif, dan reabsorpsi tubular pasif. Salisilat
dihilangkan dengan hemodialysis (Sweetman, 2009)
2.2 Tablet
Tablet adalah sediaan padat mengandung bahan obat dengan atau tanpa bahan
pengisi. Berdasarkan metode pembuatan, dapat digolongkan sebagai tablet cetak
dan tablet kempa. Tablet dapat dibuat dalam berbagai ukuran, bentuk dan
penandaan, permukaan tergantung pada desain cetakan (Ditjen KAK, 2020).
2.3 Spektrofotometri
2.3.1 Definisi
Spektroskopi Infra merah merupakan teknik analisis yang sangat popular untuk
analisis berbagai jenis sampel, baik sampel produk farmasetik, makanan, cairan
biologis, maupun sampel lingkungan. Instrument infra merah mulai tersedia
dipasaran pada tahun 1940-an. Spektroskopi infra merah merupakan jenis
spektroskopi yang bersifat: (1) spesifik terhadap suatu molekul; yang akan
memberikan informasi yang menyatu (inheren) tentang gugus-gugus fungsional
yang ada dalam molekul, termasuk macamnya, interaksi-interaksinya dan orientasi-

orientasinya; (2) selektif terhadap isomer, yang disebabkan oleh adanya kisaran
daerah sidik jari (fingerprint); (3) bersifat kuantitatif dan non-destruktif (tidak
merusak) bahkan terhadap senyawa-senyawa yang sangat labil dengan kisaran kerja
yang utama antara 0,1-100% dan (4) bersifat universal, dalam persyaratan
pengambilan sampelnya, baik sampel padat, cair, gas, sampel antara padat dan cair
atau gas, sampel permukaan, maupun sampel ruahan (bulk) (Gandjar dan Rohman,
2012).
Tujuan analisis kuantitatif pada Spektorskopi Infra Merah adalah untuk
menentukan konsentrasi analit dalam suatu sampel. Tinggi puncak atau luas puncak
suatu spektrum IR dalam bentuk absorbansi secara langsung berhubungan dengan
konsentrasinya. Analisis kuantitatif dilakukan dengan membuat rajah (plot)
hubungan antara konsentrasi analit dengan absorbansinya yang disebut kalibrasi.
Untuk membuat hubungan antara absorbansi dengan konsentrasi, spektra IR analit
dengan konsentrasi tertentu yang telah diketahui, yang disebut dengan standar
disiapkan (Gandjar dan Rohman, 2012)..
2.3.2 Klasifikasi Spektrofotometri
a. Spektrofotometri UV-VIS
Spektrofotometer UV-Vis adalah pengukuran bilangan gelombang dan
intensitas sinar ultraviolet dan cahaya tampak yang diabsorbsi oleh sampel. Sinar
ultraviolet dan cahaya tampak memiliki energi yang cukup untuk mempromosikan
elektron pada kulit terluar ke tingkat energi yang lebih tinggi. Spektroskopi UV-Vis
biasanya digunakan untuk molekul dan ion anorganik atau kompleks di dalam
larutan. Spektrum UV-Vis mempunyai bentuk yang lebar dan hanya sedikit
informasi tentang struktur yang bisa didapatkan dari spektrum ini. Tetapi spektrum

ini sangat berguna untuk pengukuran secara kuantitatif. Konsentrasi dari analit di
dalam larutan bisa ditentukan dengan mengukur absorban pada bilangan gelombang
tertentu dengan menggunakan hukum Lambert-Beer (Dachriyanus, 2004)
b. Spektroskopi Infra Merah
Spektroskopi infra merah (infrared, untuk selanjutnya disingkat IR)
merupakan spektroskopi vibrasional (getaran). Spektrum IR merupakan jenis
spektrum yang bersifat: (1) spesifik terhadap suatu molekul; yang akan
memberikan informasi yang menyatu (inheren) tentang gugus-gugus fungsional
yang ada dalam molekul, termasuk jenis dan interaksi-interaksinya; (2) sidik jari
(fingerprint); (3) bersifat kuantitatif, yang mana intensitas puncak berkorelasi
dengan konsentrasi, (4) non-destruktif (tidak merusak), yang berarti bahwa pada
jenis penanganan sampel tertentu seperti dengan attenuated total reflectance (ATR),
sampel yang dianalisis dapat dianalisis dengan metode analisis yang lain, dan (5)
bersifat universal, baik sampel padat, cair, gas, sampel antara padat dan cair atau
gas (Rohman, 2014).
c. Spektrometer massa
Jika suatu benda yang bergerak lurus diberi tenaga dari luar, maka
gerakannya tidak akan lurus lagi seperti biasanya karena akan terjadi defleksi atau
perubahan arah. Besarnya perubahan arah ini tergantung dari massa benda yang
bergerak itu. Jika kita mengetahui besar benda yang bergerak, kecepatannya, dan
jumlah tenaga luar yang diberikan; maka kita bisa menghitung massa benda
tersebut. Makin besar perubahan arah gerak, makin ringan benda tersebut. Prinsip
ini bisa diaplikasikan dalam menentukan massa suatu molekul.
10

Gerakan suatu atom atau molekul bisa didefleksikan oleh medan magnet.
Agar bisa dipengaruhi oleh medan magnet maka atom atau molekul ini harus diubah
menjadi bentuk ion. Partikel yang bermuatan dapat dipengaruhi oleh medan magnet
sedangkan yang tidak bermuatan tidak dipengaruhi. Spektrometer massa pada
umumnya digunakan untuk: 1. Menentukan massa suatu molekul. 2. Menentukan
rumus molekul dengan menggunakan Spektrum Massa Beresolusi Tinggi (High
Resolution Mass Spectra) 3. Mengetahui informasi dari struktur dengan melihat
pola fragmentasinya (Dachriyanus, 2004).
d. Spektroskopi Resonansi Magnet Inti / Spektroskopi H1-NMR
Spektroskopi H1-NMR paling banyak digunakan oleh kimiawan organic.
Spektroskopi ini didasarkan pada kenyataan bahwa setiap kelompok proton (H)
dalam molekul organic akan beresonansi pada frekwensi yang tidak identic atau
beresonansi pada frekwensi yang spesifik. Hal ini disebabkan kelompok proton
suatu molekul organic dikelilingi electron yang berbeda (lingkungan elektroniknya
berbeda). Makin besar kerapatan electron yang mengelilingi inti maka makin besar
pula medan magnet yang digunakan. Karena setiap atom H (proton) suatu molekul
organic mempunyai lingkungan elektronik (kimia) yang berbeda maka akan
menyebabkan frekwensi resonansi yang berbeda (Sitorus, 2017).
e. Spektroskoskopi Resonansi Inti Karbon 13C RMI
Seperti diketahui bahwa spektroskopi RMI tidak hanya terbatas terhadap
inti hidrogen. Setiap inti yang memiliki jumlah proton dan atau neutron yang ganjil
bisa diukur dengan spektroskopi RMI. Nukleus yang biasa dipakai adalah karbon.
Karena karbon memiliki nomor proton yang genap maka yang digunakan adalah
isotopnya, yaitu karbon-13. Pada spektrum 1H RMI, sinyal yang dilihat berasal dari
11

hidrogen yang hadir pada karbon tertentu dan pola spin kopling tergantung pada
atom hidrogen yang terletak pada karbon tetangga (H-C-C-H). Pada spektrum RMI
karbon, sinyal karbon dapat dilihat secara langsung. Spektrometer resonansi magnet
inti karbon pada umumnya digunakan untuk: 1. Menentukan jumlah karbon yang
memiliki lingkungan kimia yang sama pada suatu senyawa organik 2. Mengetahui
informasi mengenai struktur suatu senyawa organic (Dachriyanus, 2004).
f. Spektrofotometri emisi nyala dan spektrofotometri absorbsi atom
Spektroskopi serapan atom (SSA) dan spektroskopi emisi atom (SEA), disebut juga
dengan fotometri nyala, merupakan 2 metode pengukuran analitik yang
mendasarkan pada proses eksitasi dan emisi. Pada analisis kuantitatif, metode ini
digunakan untuk mengukur kurang lebih 70 elemen (logam atau non-logam).
Dengan beberapa model instrumen fotometer nyala ini, dimungkinkan untuk
melakukan pengukuran dengan kedua teknik ini (serapan atom dan emisi atom),
meskipun prinsipnya berbeda. Dalam SSA, konsentrasi dapat diperoleh dari
pengukuran serapan sinar oleh atom yang tertinggal dalam keadaan dasar ketika
atom disinari dengan sumber sinar yang menyebabkan eksitasi yang sesuai. Dalam
SEA, konsentrasi dapat diperoleh dari intensitas radiasi yang diemisikan oleh
sebagian atom yang telah melewati keadaan tereksitasi (Gandjar dan Rohman,
2012)
2.4 Spektrofotometer FTIR
Spektofotometer FTIR didasarkan pada ide adanya interforensi radiasi antara
2 berkas sinar untuk menghasilkan suatu interferogram. Inteferogram merupakan
sinyal yang dihasilkan sebagai fungsi perubahan pathlength antara 2 berkas sinyal.
Dua domain (jarak dan frekuensi) dapat ditukar balikkan dengan metode matematik
12

yang disebut tranformasi Fourier (Rohman, 2014).
Komponen – komponen utama dalam FTIR :
Sumber Interferometer Sampel

Sinar
Pengubah
Detektor analog ke
digital
Komputer
Gambar 2.2 Komponen utama dalam FT-IR
(Sumber: Rohman, 2014)
a. Sumber sinar
Sumber cahaya yang umum digunakan adalah batang yang dipanaskan oleh listrik
berupa Nerst Glower yang merupakan campuran logam: Zr, Y, Er dan lain-lain;
Globar yang merupakan silikon karbida: dan berbagai bahan keramik lainnya (Sitrous,
2017).
b. Interferometer Michelson
Tujuan interferometer adalah untuk membawa berkas sinar, lalu memecahnya ke
dalam dua berkas sinar, dan membuat salah satu berkas sinar berjalan dengan jarak
yang berbeda dengan yang lain. Interferometer Michelson mempunyai 2 buah cermin,
yakni cermin statik/tetap (tidak bergerak) dan cermin yang selalu bergerak. Diantara
2 cermin ini terdapat pemecah berkas sinar (beam splitter), yang dirancang untuk
mentransmisikan setengah radiasi yang mengenainya dan merefleksikan atau
memantulkan yang setengahnya. Berkas sinar yang muncul dari interferometer pada
sudut 90o ke berkas sinar yang ditransmisikan merupakan berkas sinar yang terdeteksi
dalam spektrofotometer FTIR (Gandjar dan Rohman, 2012).
13

c. Detektor
Ada 2 jenis detektor yang umum digunakan pada spektrofotometer FTIR.
Detektor normal pada penggunaan rutin adalah alat piroelektrik yang didalamnya
terdapat deuterium triglisin sulfat (DTGS) pada jendela alkali halida yang tahan
terhadap panas. Untuk pekerjaan yang memerlukan sensistifitas lebih, dapat
digunakan detektor merkuri kadmium tellurida (MCT). Untuk pengukuran spektra IR
di daerah dekat (NIR), detektor yang digunakan adalah fotokonduktor timbal sulfida
(Rohman, 2014).
d. Komputer
Komputer akan mengendalikan instrumen, misalkan dalam hal kecepatan,
batas, serta awal dan akhir scanning. Komputer akan membaca spektra dari
instrumen begitu spektrum di-scanning. Hal ini bermakna bahwa spektrum telah
digitalisasikan. Komputer juga dapat digunakan untuk memanipulasi spektrum,
misalkan untuk melakukan derivatisasi, pengurangan, dan penjumlahan spektra,
serta untuk overlay antar spektra (Rohman, 2014).
Spektrofotometer FTIR merupakan instrumen single beam. Pengukuran
background dilakukan sebelum pengukuran sampel. Pengukuran background ini
merupakan pengukuran spektrum lingkungan, yang terdiri dari gas yang mampu
mengabsorpsi sinar inframerah seperti gas karbon dioksida dan uap air. Perangkat
lunak komputer akan mengurangi spektra hasil pengukuran dengan spektra
background secara otomatis untuk menghasilkan spektra sampel yang dianalisis
(Rohman, 2014).
14

Ada beberapa keunggulan spektrofotometer FTIR dibandingkan
spektrofotometer dispersif, dua keuntungan utama adalah: (1) keuntungan Felgett
(multiplex) disebabkan karena adanya peningkatan pengukuran rasio signal to noise
(SNR), dan (2) keuntungan Jacquinot adalah spektrofotometer FTIR tidak
memerlukan penggunaan celah monokromator dimana output sumber total dapat
dilewatkan secara terus menerus sehingga menghasilkan energi yang sampai ke
detektor cukup tinggi dan meningkatkan signal to noise (SNR) (Rohman, 2014).
2.5 Vibrasi Molekul Inframerah
Bila suatu molekul dilewatkan sinar pada panjang daerah IR, maka atom-atom
yang terikat dalam molekul mengalami vibrasi (Bergetar). Vibrasi molekul terdiri
atas vibrasi ulur dan vibrasi tekuk. Vibrasi ulur (Strecthing) terjadi antara dua atom
sepanjang sumbu ikatan (Gerakan Simetri dan anti simetri), sedangkan vibrasi
tekuk terjadi akibat berubahnya sudut antara dua ikatan (Khaldun, 2018).
Gambar 2.3 Jenis-jenis Vibrasi Molekul
15

Vibrasi tekuk hanya terjadi pada pada molekul yang mempunyai lebih dari dua
atom. Vibrasi ini terdiri atas scissoring, rocking, wagging, dan twisting. Bilangan
gelombang setiap gugus fungsi dalam molekul bersifat khas, oleh sebab itu dapat
dipakai sebagai dasar analisis kualitatif untuk mengidentifikasinya. Secara umum,
daerah IR tengah (4000-400 cm-1) dapat dikelompokkan menjadi empat daerah
penting yang terdiri dari (1) vibrasi ulur ikatan tunggal (Strecthing single bond), (2)
ikatan rangkap tiga (triple bonds), (3) ikatan ganda (double bonds), dan daerah sidik
jari (fingerprint region) (Khaldun, 2018).
Gambar 2.4 Daerah fundamental pada spektrum infra merah
Setiap frekuensi cahaya, termasuk inframerah, mempunyai energi tertentu.
Apabila frekuensi cahaya yang dilewatkan diserap oleh senyawa yang diinvestigasi,
berarti energi tersebut ditransfer pada senyawa. Besarnya energi yang diserap
senyawa akan mempengaruhi kondisi molekul senyawa tersebut. Energi radiasi
inframerah berhubungan dengan energi yang dibutuhkan untuk terjadinya vibrasi
dari suatu ikatan (Dachriyanus, 2009).
16

a) Peregangan Ikatan (Bond Stretching)
Pada suatu ikatan kovalen, atom tidak terikat dengan suatu hubungan yang
rigid. Dua atom yang berhubungan satu sama lain disebabkan karena kedua inti
atom terikat pada pasangan elektron yang sama. Kedua inti ini bisa mengalami
vibrasi kedepan-kebelakang dan atau kesamping-keatas satu sama lain
(Dachriyanus, 2009).
Gambar 2.5 Vibrasi Bond Strecthing
Energi yang terlibat pada vibrasi tergantung pada panjang ikatan dan massa
atom-atom yang saling berikatan. Ini berarti bahwa setiap ikatan yang berbeda akan
tervibrasi dengan cara yang berbeda dan jumlah energi yang berbeda pula. Pada
dasarnya, ikatan-ikatan akan bervibrasi sepanjang waktu. Apabila ikatan tersebut
diberi sejumlah energi yang tepat sama dengan besarnya energi pada ikatan maka
energi ini akan menyebabkan vibrasi pada keadaan yang lebih tinggi. Jumlah energi
yang dibutuhkan bervariasi pada setiap ikatan sehingga setiap ikatan akan menyerap
pada frekuensi yang berbedabeda pada radiasi inframerah (Dachriyanus, 2009).
b) Pengerutan Ikatan (Bond Bending)
Seperti halnya peregangan, ikatan juga bisa bergerak naik-turun (bend).
17

Gambar 2.6 Vibrasi Bond Bending
Ikatan bisa bervibrasi naik-turun sepanjang waktu dan jika diberikan energi
yang tepat pada ikatan ini maka vibrasinya akan semakin kuat. Naik turunnya suatu
ikatan melibatkan sejumlah energi sehingga setiap ikatan akan menyerap energi
pada frekuensi yang berbedabeda dari radiasi inframerah (Dachriyanus, 2009).
Gambar 2.7 Spektrum inframerah propanol (CH3CH2CH2OH)
Pada spektrum diatas, terlihat adanya tiga jenis serapan yang disebabkan
karena adanya vibrasi ikatan (Dachriyanus, 2009).
2.6 Pengolahan Sampel pada FTIR
Teknik transmisi berdasarkan jenis sampel yang akan dianalisis sebagai berikut:
a. Spektra transmisi sampel padat
Ada tiga cara umum untuk mengolah sampel yang berupa padatan, yaitu:
(1) dengan lempeng kalium bromida, (2) “mull”, dan (3) lapisan tipis. (1) Pelet KBr
digunakan dengan cara menumbuk cuplikan (0,1-2,0%) lalu ditekan dengan
18

tekanan tinggi sampai membentuk pelet KBr yang transparan dalam cetakan, (2)
Mull atau pasta digunakan dengan mencampur cuplikan dengan minyak pasta
kemudian dilapis pada dua keping NaCl, (3) Lapisan Tipis digunakan dengan
melarutkan padatan dalam pelarut yang mudah menguap, lalu diteteskan pada pelat
NaCl. Bila pelarut sudah menguap maka akan diperoleh lapisan tipis pada pelat
(Sitorus, 2017).
b. Spektra transmisi cairan
Sebelum memperoleh spektrum IR sampel dalam larutan, maka pelarut yang
sesuai harus dipilih. Faktor-faktor yang harus diperhatikan ketika memilih pelarut,
yakni: pelarut harus melarutkan sampel, pelarut yang digunakan sedapat mungkin
non-polar untuk meminimalkan interaksi solut-pelarut, serta pelarut tersebut tidak
menyerap spektrum IR secara kuat. Sebanyak 1-5% larutan dimasukkan dalam sel
larutan yang mempunyai jendela transparan dengan alat pengatur ketebalan. Tebal
sel biasanya antara 0,1-1,0 mm. Selain itu, dengan mengatur konsentrasi dan tebal
sel maka bentuk dan pita serapan yang penting dapat ditonjolkan dengan jelas
(Rohman, 2014).
c. Spektra transmisi gas
Untuk pengolahan sampel berbentuk gas, sampel dimasukkan pada sel khusus
yang menghadap langsung pada sumber sinar IR. Dalam bentuk modifikasi, cermin
internal digunakan untuk memantulkan berkas sinar berulangkali untuk menaikkan
sensitivitas (Sastrohamidjojo, 2013).
Teknik-teknik reflektans (pantulan) dapat digunakan untuk sampel-sampel
yang susah dianalisis dengan teknik transmitans. Metode pantulan dapat dibagi
menjadi 2 kategori, yaitu: (1) pengukuran pantulan internal dengan menggunakan sel
19

attenuated total reflectance (ATR) yang bersinggungan (kontak) langsung dengan
sampel; dan (2) pengukuran pantulan eksternal yang melibatkan berkas sinar IR yang
dipantulkan secara langsung dari permukaan sampel (Rohman, 2014).
2.7 Interpretasi Spektrum Inframerah
Berdasarkan Rohman (2014), spektrum daerah Inframerah tengah dapat dibagi
menjadi 4 daerah, dan sifat frekuensi gugus secara umum dapat ditentukan dengan
daerah-daerah serapan, yang mana gugus-gugus tersebut terdapat didalamnya.
Daerah-daerah tersebut adalah sebagai berikut: daerah ulur X–H (4000-2500 cm-1),
yang mana X berupa O, N dan C daerah ikatan rangkap tiga (2500-2000 cm-1),
daerah ikatan rangkap dua (2000-1500 cm-1) dan daerah sidik jari (1500-600 cm1).
Secara visual daerah serapan gugus-gugus fungsional yang utama dapat dilihat
pada Gambar 2.3 berikut:
Frekuensi (cm-1)
4000 2500 2000 1800 1650 1550 650
C≡C Sangat C=O C=N C–Cl

O–H
C≡N sedikit pita C=C C–O
C–H
X=C=Y N=O C–N
N–H
(C, O, N, S) C–C
N=O
2,5 4,0 5,0 5,5 6,1 6,5 15,4
Panjang gelombang (mikron)
Gambar 2.8 Daerah-daerah perkiraan frekuensi vibrasi yang mana berbagai jenis
ikatan menyerap sinar IR (disini hanya vibrasi ulur; sementara
berbagai jenis vibrasi tekuk dihilangkan untuk membuat lebih jelas)
(Sumber: Rohman, 2014)
20

Spektroskopi IR memiliki salah satu keunggulan dengan spektroskopi lainnya
yaitu karena sifatnya sebagai spektrum sidik jari, yang mana tidak ada dua buah
senyawa atau sampel yang berbeda mempunyai spektrum yang sama (Rohman,
2014). Menurut Sitorus, (2017) serapan sidik jari pada daerah sekitar 1200-500 cm-1
memiliki molekul dan serapan yang sangat kompleks dan biasanya digunakan untuk
mengkonfirmasi apakah gugus fungsinya ada. Misalkan bila molekul mempunyai
gugus fungsional hidroksi (-OH) pada sekitar 3400 an cm-1 biasanya intentitasnya kuat
dengan puncak melebar, diperkuat serapan C-O tunggal pada sekitar 1200 cm-1 yang
tajam dan intensitasnya kuat.
Sampel yang disiapkan untuk penentuan sidik jari bertujuan untuk
meningkatkan kesesuaian sampel dengan standar farmakope, penyiapan sampel
untuk tujuan ini dilakukan dalam pelet KBr atau KCl (Gandjar dan Rohman, 2012).
2.8 Interpretasi Spektrum Inframerah Asetosal
Menurut Moffat dkk., (2011) Asetosal atau aspirina mempunyai bilangan
gelombang spesifik, yaitu 1183 cm-1, 1688 cm-1, 1305 cm-1, 1755 cm-1, 925 cm-1,
1219 cm-1. Daerah sidik jari berada dalam daerah 1300-600 cm-1 daerah yang
memasuki rentang tersebut yaitu 925 cm-1, 1183 cm-1, 1219 cm-1 dan 1305 cm-1.
2.9 Validasi Metode
Validasi metode merupakan suatu tahapan penting dalam penjaminan mutu
analisis kuantitatif. Validasi metode menurut United States Pharmacopeia (USP)
dilakukan untuk menjamin bahwa metode analisis bersifat akurat, spesifik,
reprodusibel, dan tahan pada kisaran analit yang akan dianalisis. Validasi metode
analisis ditujukan untuk menjamin bahwa metode analisis memenuhi spesifikasi
yang dapat diterima sesuai dengan tujuan yang diharapkan (Rohman, 2019).
21

2.8.1 Akurasi
Akurasi adalah kedekatan antara nilai terukur (measured value) dengan
nilai sebenarnya yang diterima (accepted true value), baik nilai konvensi, nilai
sebenarnya, maupun nilai rujukan. Kriteria keberterimaan akurasi dengan 3
replikasi untuk pengujian ±2% (98,0%-102,0%) (Rohman, 2019).
2.8.2. Presisi
Presisi diukur sebagai simpangan baku atau simpangan baku relative
berdasarkan penelitian yang dilakukan terhadap replikasi sampel yang diambil dari
campuran yang homogen. Presisi dapat menghasilkan nilai rata-rata yang sangat
dekat dengan nilai yang sebenarnya, simpangan baku relatif atau disebut juga
Relatif Standard Deviasi (RSD) digunakan sebagai parameter ukur dari presisi
(Arikalang dkk., 2018).
2.8.3. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi
Batas deteksi adalah nilai parameter, yaitu konsentrasi analit terendah yang
dapat dideteksi yang masih memberikan respon signifikan dibandingkan dengan
blanko (Harmita, 2004).
Batas deteksi dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut (Harmita, 2004):
3 ×𝑆𝐵
Batas deteksi (LOD) = 𝑠𝑙𝑜𝑝𝑒
Menurut Harmita (2004), batas kuantitasi adalah jumlah analit terkecil
dalam sam pel yang masih dapat diukur dalam kondisi percobaan yang sama dan
memenuhi kriteria cermat dan seksama.

10 ×𝑆𝐵
Batas kuantitasi (LOQ) = 𝑠𝑙𝑜𝑝𝑒
22

Penentuan batas deteksi dan batas kuantifikasi dilaku kan berdasarkan
kemiringan (slope) kurva kalibrasi (Arikalang dkk., 2018).
2.8.4. Linearitas
Linieritas merupakan kemampuan suatu metode untuk memperoleh hasil-hasil
uji yang secara langsung proporsional dengan konsentrasi analit pada kisaran yang
diberikan. Pada uji linieritas paling tidak 5 konsentrasi yang berbeda digunakan pada
pengujian (Rohman, 2019).
Persamaan garis yang digunakan pada kurva kalibrasi diperoleh dari
persamaan y = ax + b. Persamaan ini yang akan menghasilkan koefisien korelasi
(r). Koefisien korelasi inilah yang digunakan untuk parameter linearitas (Ryanto,
2016).
23

BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Jenis Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian deskriptif dengan metode
Spektrofotometri Fourier Transform Infra Red (FTIR) terhadap penetapan kadar
asetosal yang terkandung dalam sediaan tablet, dilakukan di Laboratorium
Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian dilaksanakan ada bulan Februari sampai Juni 2021 di
Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
3.3 Alat–alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah spektrofotometer
inframerah (IRPrestige-21 Shimadzu) yang dilengkapi dengan Komputer dan
Software IRsolution, software Minitab versi 18.2.4.4., Neraca Analitik (Sartorius),
Lumpang dan Alu, serta alat-alat lainnya yang diperlukan dalam penyiapan sampel.
3.4 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Baku Asetosal
(BPFI), Kalium Bromida (KBr), tablet Aptor® (PT. Nicholas), dan tablet Astika®
(PT.Ikapharmindo Putramas), tablet Cardioasetosal® (PT. Bayer Healthcare), dan
tablet Farmasal® (PT. Fahrenheit).
24

3.5 Pengambilan Sampel
Pengambilan sampel secara purposif yaitu tanpa membandingkan antara
satu tempat dengan tempat yang lain, karena tempat pengambilan sampel dianggap
homogen.
Menurut Sudjana (2002), sampling purposif dikenal juga sebagai sampling
pertimbangan peneliti.
3.6 Prosedur Penelitian
3.6.1 Pembuatan Spektrum Serapan Baku Asetosal
Ditimbang baku Asetosal (BPFI) sebanyak 30 mg dicukupkan dengan KBr
hingga 300 mg dan digerus sampai homogen. Kemudian diukur serapan pada
bilangan gelombang 4000-400 𝑐𝑚−1
3.6.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi
Kurva kalibrasi dibuat dari enam standar internal yang berbeda konsentrasi
dalam kisaran 1:10 b / b sebanyak 18 mg, 24 mg, 30 mg, 36 mg, 42 mg dan masing-
masing dicukupkan dengan KBr hingga 300 mg dan digerus untuk mengurangi
ukuran partikelnya. Inframerah spektra dari setiap pengukuran dikonversi ke
spektrum turunan pertama. Absorbansi dari setiap kalibrasi standar diukur dalam
range bilangan gelombang 1755 cm-1, 1688 cm-1, 1305 cm-1, 1219 cm-1, 1183 cm-1
dan 925 cm-1.
3.6.3 Penetapan Kadar Tablet Asetosal
Ditimbang 20 tablet, kemudian digerus dalam lumpang sampai halus dan
homogen. Ditimbang seksama sejumlah serbuk setara 30 mg Asetosal dan
dicukupkan dengan KBr sampai 300 mg dan dihomogenkan. Diukur serapannya
pada bilangan gelombang 4000- 400 𝑐𝑚−1 .
25

Konsentrasi sampel (X) dapat dihitung dengan mensubstitusikan vibrasi
yang diperoleh pada (Y) dari persamaan regresi: Y = aX + b, sehingga diperoleh X
dan ini disebut dengan konsentrasi perolehan.
3.7 Validasi Metode
3.7.1 Linearitas
Baku asetosal yang telah dibuat, diukur absorbansinya pada bilangan
gelombang yang telah ditentukan. Nilai absorbansi ditentukan dengan
menggunakan persam-aan regresi yang dioperasikan pada data konsentrasi dan
absorbansi masing-masing komponen pada setiap bilangan gelombang pengukuran.
Dari persamaan regresi yang diperoleh :
Y = aX + b
Keterangan:
Y = Absorbansi
a = Koefisien regresi yang menunjukkan nilai luas area
X = Kadar (mg/mL)
b = Konstanta
3.7.2 Akurasi
Menurut Harmita (2004), uji akurasi dilakukan dengan metode penambahan
baku (Standart Addition Method), yaitu dengan membuat konsentrasi analit sampel
pada tiga rentang spesifik, yakni: 80%, 100% dan 120% dihitung dari kesetaraan
penimbangan pada penetapan kadar sampel, masing-masing rentang spesifik terdiri
dari tiga kali pengulangan yang mengandung 70% analit asetosal dari tablet yang
dianalisis dan 30% penambahan baku. Pada metode penambahan bahan baku,
sejumlah sampel yang dianalisis ditambah analit dengan konsentrasi yang
26

diperlukan dari kadar analit yang diperkirakan, dicampur dan dianalisis kembali.
Selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya. Kadar yang
diperoleh dinyatakan sebagai rasio antara hasil yang diperoleh dengan hasil yang
sebenarnya:
CF − CA
%Perolehan Kembali = × 100%
C* A
Keterangan:
CF = Konsentrasi perolehan sampel setelah penambahan baku
CA = Konsentrasi teoritis sampel sebelum penambahan baku
C*A = Konsentrasi baku yang ditambahkan
3.7.3 Presisi
Menurut Harmita (2004), penentuan presisi berdasarkan nilai Relative
Standard Deviation (RSD) dengan persyaratan simpangan baku relatif bernilai
kurang dari 2% dan dirumuskan sebagai:

SD
RSD = X̅  100%
Keterangan:
RSD = Standar deviasi relatif (%)
SD = Standar deviasi
̅=
X Kadar rata-rata zat dalam sampel
3.7.4 Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)
Menurut Harmita (2004), berdasarkan absorbansi pada bilangan gelombang
analisis dilakukan pula perhitungan LOD dan LOQ.
SY ∑(Y − Yi)2
= SB = √
X n−2
SY
LOD = 3  X / Slope
27

SY
LOQ = 10  X / Slope
Keterangan:
SY
= SB = Simpangan baku
X
Slope = a (pada persamaan garis Y = aX + b)
3.7.5 Analisis Data Penetapan Kadar secara Statistik
Data perhitungan kadar asetosal dianalisis secara statistik dengan
menggunakan uji ttabel.
Menurut Sudjana (2002), rumus yang digunakan adalah:
̅ )2
∑(X −X
SD = √
n−1
Untuk mencari thitung digunakan rumus:

̅
X −X
thitung = |SD⁄ n|
√
Data diterima jika thitung< ttabel pada taraf kepercayaan 99% dengan nilai α =
0,01.
Keterangan:
SD = Standar deviasi/simpangan baku
x = Kadar dalam satu perlakuan
̅ = Kadar rata-rata dalam satu sampel

X
n = Jumlah pengulangan
α = Tingkat kepercayaan
Menurut Sudjana (2002), untuk menghitung kadar Asetosal sebenarnya dapat
digunakan rumus:
SD
X ±ttabel 
μ= ̅
√n
28

Keterangan:
SD = Standar deviasi/simpangan baku
̅
X = Kadar rata-rata dalam satu sampel
n = Jumlah pengulangan
t =Harga tabel sesuai dengan derajat kepercayaan
29

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Penentuan Spektrum Serapan Baku Asetosal
Penelitian ini diawali dengan melakukan pengukuran serapan baku pada
konsentrasi 10%. Penentuan spektrum serapan baku dilakukan pada bilangan
gelombang 4000-500 cm-1. Pengukuran spektrum baku asetosal dilakukan dengan
menentukan spektrum vibrasi asetosal konsentrasi 10% dalam KBr. Tampilan
puncak gugus fungsional asetosal konsentrasi 10% dapat dilihat pada Gambar 4.1.
Gambar 4.1 Tampilan Puncak Daerah Gugus Fungsional Asetosal
Tabel 4.1 Puncak Gugus Fungsional Asetosal
No. Peak No. Peak

1. 2870,07 6.. 1462,04
2. 2588,47 7. 1303,97
3. 1755,22 8. 1219,01
4. 1689,64 9. 1184,29
5. 1604,77 10. 925,83
30

Menurut Gandjar dan Rohman (2012), pada spekturm IR asetosal
bilangan gelombang 3300-2400 cm-1 (2870,07 cm-1 dan 2588,47 cm-1)memiliki
gugus fungsional O-H karboksilat ulur yang memiliki pita serapan yang sangat
lebar, bilangan gelombang 1757 cm-1 (1755,22 cm-1) memiliki gugus fungsional
C=O Ester ulur, bilangan gelombang 1690 cm-1 (1689,64 cm-1) memiliki gugus
fungsional C=O asam karboksilat terkonjugasi ulur, bilangan gelombang 1608 cm -

1
(1604,77 cm-1 ) memiliki gugus fungsional C=C aromatic ,bilangan gelombang
1460 cm-1 (1462,04 cm-1) memiliki gugus fungsional C=C aromatic tekuk, bilangan
gelombang 1325-1285 cm-1 (1303,87 cm-1 dan 1219,01 cm-1) memiliki gugus
fungsional C-O ulur dan bilangan gelombang 1200-900 cm-1 (1184,29 cm-1 dan
925,83 cm-1) memiliki gugus fungsional C-O (Fessenden dan Fessenden, 1986).
Menurut Moffat dkk., (2011) asetosal mempunyai bilangan gelombang
spesifik, yaitu 1755 cm-1, 1688 cm-1, 1305 cm-1, 1219 cm-1, 1183 cm-1 dan 925 cm-
1
. Menurut Sitorus, (2017) daerah sidik jari berada dalam daerah 1200-500 cm-1
daerah yang memasuki rentang tersebut yaitu 925 cm-1, 1183 cm-1, dan 1219 cm-1.
Sehingga dilakukan analisis pada titik spesifik yang memenuhi rentang daerah sidik
jari saja. Spektrum vibrasi asetosal konsentrasi 10% dapat dilihat pada gambar 4.2.
31

Gambar 4.2 Spektrum Serapan Baku Asetosal 10%
Spektroskopi IR memiliki salah satu keunggulan dengan spektroskopi lainnya
yaitu karena sifatnya sebagai spektrum sidik jari, yang mana tidak ada dua buah
senyawa atau sampel yang berbeda mempunyai spektrum yang sama (Rohman,
2014). Menurut Sitorus, (2017) serapan sidik jari pada daerah sekitar 1200-500 cm-
1
memiliki molekul dan serapan yang sangat kompleks dan biasanya digunakan
untuk mengkonfirmasi apakah gugus fungsinya ada. Misalkan bila molekul
mempunyai gugus fungsional hidroksi (-OH) pada sekitar 3400 an cm-1 biasanya
intentitasnya kuat dengan puncak melebar, diperkuat serapan C-O tunggal pada
sekitar 1200 cm-1 yang tajam dan intensitasnya kuat.
Kebanyakan sampel yang disiapkan untuk penentuan sidik jari bertujuan untuk
meningkatkan kesesuaian sampel dengan standar farmakope, penyiapan sampel
untuk tujuan ini dilakukan dalam pelet KBr atau KCl (Gandjar dan Rohman, 2012).
Berikut ini merupakan perbandingan antara spektrum transmitan dan bilangan
gelombang hasil penelitian dengan spektrum transmitan berdasarkan literatur.
32

Gambar 4.3 Tampilan transmitan spektrum asetosal dengan bilangan gelombang
spesifik 925,83 cm-1
Gambar 4.4 Tampilan transmitan spektrum asetosal dengan bilangan
gelombang spesifik menurut literatur (Sumber: Moffat dkk.,
2011).
33

Berdasarkan Gambar 4.3 dan Gambar 4.4 tersebut, terlihat bahwa terdapat
perbedaan antara pergeseran bilangan gelombang atau pita absorbansi spektrum
transmitan yang diperoleh dari penelitian dengan spektrum transmitan berdasarkan
literatur.
Sebelum dilakukan penetapan kadar, terlebih dahulu baku asetosal dianalisis
secara kualitatif dengan cara membandingkan bilangan gelombang dari serapan
baku asetosal konsentrasi 10% dengan bilangan gelombang dari literatur. Hal ini
dilakukan untuk memastikan bahwa sampel yang digunakan pada penelitian ini
adalah sampel asetosal di mana terdapat kesesuaian pada beberapa bilangan
gelombang asetosal dengan literatur yaitu 1755,23 cm-1, 1689,64 cm-1, 1307,737,
cm-1, 1219,01 cm-1, 1184,29 cm-1 dan 925,83 cm-1.
Menurut Rohman, (2014), semua pengukuran mengandung kesalahan dalam
level tertentu, tanpa memperhatikan seberapa baik kita melakukan suatu percobaan
ataupun seberapa hebat instrumen yang kita gunakan. Akurasi dari bilangan
gelombang spektrum atau pita absorbansi spektrum IR adalah ± 2 cm-1. Sehingga
hal ini memberikan perbedaan bentuk antara spektrum transmitan atau pita
absorbansi hasil penelitian dengan spektrum berdasarkan literatur.
4.2 Penentuan Kurva Kalibrasi Asetosal
Spektrum vibrasi standar asetosal yang dibuat dengan 4 variasi konsentrasi
masing-masing ditentukan pada daerah bilangan gelombang spesifik pada rentang
925 cm-1, 1183 cm-1, dan 1219 cm-1. Dilakukan analisis kuantitatif pada bilangan
gelombang tersebut.
34

Pengukuran kurva kalibrasi asetosal secara kuantitatif telah diorientasikan pada
3 bilangan gelombang spesifik sidik jari baku asetosal konsentrasi 10%. Hasil
pengujian yang diperoleh menunjukkan pada bilangan gelombang 1219,01 cm-1
dengan koefisien korelasi yaitu 0,9974 , bilangan gelombang 1184,29 cm-1 dengan
koefisien korelasi yaitu 0,9982 , dan bilangan gelombang 925,83 cm-1 dengan
koefisien korelasi yaitu 0,9997.
Menurut penelitian yang dilakukan oleh Robaina dkk, (2017), pemilihan
bilangan gelombang didasarkan pada bilangan gelombang yang memberikan
puncak spesifik, karena pada daerah ini memberikan selektifitas dan sensitifitas
yang paling baik untuk penetapan kadar sediaan farmasi.
Berdasarkan hal tersebut dipilih bilangan gelombang 925,83 cm-1 untuk
penetapan kadar sediaan asetosal dimana bilangan tersebut memiliki linieritas
yang paling baik daripada bilangan gelombang spesifik lainnya dengan koefisien
korelasi r = 0,9997.
Selain itu, pemilihan bilangan gelombang 925,83 cm-1 untuk penetapan kadar
asetosal didasari pada sifatnya sebagai sidik jari. Hal ini dibuktikan dengan adanya
vibrasi C-O yang muncul pada daerah 1200-900 cm-1 yaitu pada bilangan
gelombang 925,83 cm-1, dan sebagai bentuk konfirmasi adanya gugus fungsi O-H
yang muncul pada daerah 3700-3000 cm-1 yaitu 3491,15 cm-1 (Ewing, 1975;
Fesssenden dan Fessenden, 1986).
4.3 Hasil Pembuatan Kurva Kalibrasi Asetosal
Baku Asetosal ditimbang dalam berbagai konsentrasi, diukur serapannya pada
wilayah spesifik asetosal. Spektrum asetosal pada berbagai konsentrasi dapat dilihat
pada Gambar 4.5.
35

Gambar 4.5 Tampilan spektrum tumpang tindih Asetosal dengan berbagai
konsentrasi (6-14%)
Dari gambar diatas dapat dilihat bahwa semakin tinggi konsentrasi maka
semakin tinggi pula absorbansi yang dihasilkan. Spektrum vibrasi asetosal pada
berbagai konsentrasi dalam KBr menunjukkan bahwa konsentrasi tidak mengubah
bentuk spektrum dari masing-masing zat, sehingga dapat dikatakan penggunaan
analisis dengan KBr stabil terhadap asetosal.
Pembuatan kurva kalibrasi baku asetosal dilakukan dengan memplot
konsentrasi (sumbu x) dengan absorbansi (sumbu y), kemudian titik tersebut
dihubungkan dengan garis lurus. Berdasarkan kurva diatas, diperoleh persamaan
regresi Asetosal Y = 0,070299527X + 0,000888916 dengan koefisien korelasi (r)
0,9997. Dari gambar berikut dapat dilihat bahwa semakin tinggi konsentrasi maka
36

semakin tinggi pula absorbansi yang dihasilkan. Kurva kalibrasi asetosal dapat
dilihat pada Gambar 4.6.
1.2
0.8
ABSORBANSI
0.6
0.4
0.2
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16
KONSENTRASI (%)
Gambar 4.6 Grafik kurva kalibrasi baku Asetosal
Pengukuran kurva kalibrasi juga dilakukan pada absorbansi pada bilangan
gelombang yang lain dan tidak didapatkan hasil yang memenuhi persyaratan
koefisien korelasi. Sehingga, dalam penelitian ini dipilih bilangan gelombang yang
memberikan linearitas yang paling baik yaitu absorbansi pada bilangan gelombang
925,83 cm-1. Data kalibrasi, persamaan regresi dan koefisien korelasi dapat dilihat
pada Lampiran 4.
4.4 Hasil Penetapan Kadar Asetosal dalam Sediaan Tablet
Penetapan kadar asetosal dilakukan secara spektrofotometri Fourier Transform
Infra Red (FTIR). Konsentrasi asetosal dalam sampel ditentukan berdasarkan
persamaan regresi kurva kalibrasi pada bilangan gelombang 925,83 cm -1 dari baku
yaitu Y = 0,070299527X + 0,000888916. Sediaan asetosal yang digunakan untuk
analisis adalah tablet Aptor® (PT. Nicholas), dan tablet Astika® (PT.Ikapharmindo
Putramas), tablet Cardioasetosal® (PT. Bayer Healthcare), dan tablet Farmasal®
(PT. Fahrenheit). Perolehan kadar tiap tablet dapat dilihat pada Tabel 4.2
37

Tabel 4.2 Hasil pengolahan data dari sediaan tablet asetosal dengan nama dagang
No. Nama Sampel Pengulangan Absorbansi Kadar

1 I 0,688143 96,49479 %
2 II 0,692901 97,16284 %
3 III 0,682816 95,74684 %
Aptor
4 IV 0,688981 96,61820 %
5 V 0,685788 96,16413 %
6 VI 0,681932 95,62272 %
1 I 0,731275 102,55079%
2 II 0,722467 101,31409%
3 III 0,720981 101,10545%
Astika
4 IV 0,719637 100,91674%
5 V 0,737434 103,41555%
6 VI 0,728084 102,10275%
1 I 0,747774 104,86735%
2 II 0,741428 103,97633%
3 III 0,760663 106,67705%
Cardioasetosal
4 IV 0,758663 106,39624%
5 V 0,761580 106,80580%
6 VI 0,754427 105,80147%
1 I 0,708403 99,33942%
2 II 0,699705 98,11816%
3 III 0,692901 97,16284%
Farmasal
4 IV 0,706537 99,07742%
5 V 0,705970 98,99781%
6 VI 0,694905 97,44421%
Berdasarkan Tabel 4.2 perhitungan statistik, maka diperoleh kadar asetosal
dalam sediaan tablet sebagai berikut:
Tabel 4.3 Data kadar asetosal dalam sediaan tablet
No. Nama Obat Penetapan Kadar

1. Asetosal Dagang Aptor 96,80531 ± 0,95 %
2. Asetosal Dagang Astika 101,90089 ± 1,59 %
3. Asetosal Dagang Cardioasetosal 105,75404 ± 1,83%
4. Asetosal Dagang Farmasal 98,35664 ± 1,50%
Sediaan tablet asetosal dalam sediaan tablet yang di tentukan kadarnya
berdasarkan absorbansi, keseluruhannya sesuai dengan persyaratan yang tertera
38

pada Farmakope Indonesia edisi VI tahun 2020, yaitu tablet asetosal mengandung
asetosal tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang
tertera pada etiket.
4.5 Hasil Validasi Metode
Parameter validasi yang diuji adalah akurasi (kecermatan), presisi
(keseksamaan), batas deteksi (LOD), dan batas kuantitasi (LOQ). Uji akurasi
dinyatakan dalam persen perolehan kembali (%recovery) yang ditentukan dengan
metode adisi standar. Uji presisi dinyatakan dalam simpangan baku relatif (RSD).
Pada penelitian ini dilakukan uji validasi dengan metode adisi standar pada sampel
tablet asetosal dagang yaitu Astika® (PT.Ikapharmindo Putramas).
Uji akurasi dilakukan dengan membuat tiga konsentrasi sampel dengan rentang
spesifik 80%, 100%, dan 120% dihitung dari kesetaraan penimbangan pada
penetapan kadar sampel, masing-masing rentang spesifik terdiri dari tiga kali
pengulangan yang mengandung 70% analit dan 30% baku. Perhitungan persen
perolehan kembali (%recovery) dapat dilihat pada Lampiran 13 halaman 77 .
Menurut Rohman (2014), %recovery dinyatakan memenuhi syarat akurasi
untuk validasi metode dengan 3 replikasi jika berada pada rentang 98%-102%.
Metode analisis kadar asetosal dinyatakan akurat dengan perolehan rata-rata
%recovery 100.77%. Simpangan baku relatif (RSD) asetosal yang diperoleh 0,57%,
hasil ini memenuhi syarat presisi untuk validasi metode karena kurang dari 2%.
Batas deteksi dan batas kuantitasi asetosal berturut-turut adalah 0,7761% dan
2,5870%. Berdasarkan hal tersebut dapat disimpulkan bahwa penetapan kadar
asetosal secara spektrofotometri Fourier Transform Infra Red (FTIR) dapat
diterima pada kondisi operasional metode yang digunakan di mana seluruh nilai
39

konsentrasi analit sampel berada di atas LOD dan LOQ. Hasil perhitungan RSD,
LOD dan LOQ dapat dilihat pada Lampiran 10 halaman 72-73.. Dari hasil di atas,
dapat disimpulkan bahwa metode yang digunakan untuk menganalisis asetosal telah
memenuhi persyaratan validasi metode untuk akurasi dan presisi.
40

BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan penelitian yang dilakukan, maka dapat disimpulkan:
a. Penetapan kadar tablet asetosal dapat dilakukan secara spektrofotometri
Fourier Transform Infra Red (FTIR) menggunakan daerah sidik jari pada
bilangan gelombang 925,83 cm-1.
b. Metode penetapan kadar dengan pelet KBr menggunakan daerah sidik jari
secara Spektrofotometri Fourier Transform Infra Red (FTIR) memenuhi
persyaratan validasi dengan parameter akurasi (100,77%), presisi (0,57%),
batas deteksi (0,7761% ) batas kuantifikasi (2,5870%).
c. Kadar asetosal dalam sediaan tablet Aptor® (96,81±0,95) %, tablet Astika®
(101,90±1,59) %, tablet Cardioaspirin® (105,75±1,83)%, dan tablet
Farmasal® (98,36±1,50)% yang ditentukan dengan metode
spektrofotometri Fourier Transform Infra Red (FTIR) memenuhi
persyaratan kadar yang ditetapkan pada Farmakope Indonesia edisi VI tahun
2020.
5.2 Saran
Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk melakukan penetapan kadar
terhadap obat lain, misalnya Metilprednisolon secara spektrofotometri Fourier
Transform Infra Red (FTIR).
41

DAFTAR PUSTAKA
Arikalang, T.G., Sudewi, S., Rorong, J.A. 2018. Optimasi dan Validasi Metode
Analisis dalam Penentuan Kandungan Total Fenolik pada Ekstrak Daun
Gedi Hijau (Abelmoschus Manihot L.) yang Diukur dengan
Spektrofotometer Uv-Vis. Jurnal Ilmiah Farmasi. 7(3): 19.
Dachriyanus. 2004. Analisis Struktur Senyawa Organik Secara Spektroskopi.
Cetakan I. Padang: Lembaga Pengembangan Teknologi Informasi dan
Komunikasi (LPTIK) Universitas Andalas. Halaman 1, 39, 111.
Ditjend KAK. 2020. FARMAKOPE INDONESIA. EDISI VI. Jakarta: Kementrian
Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 62, dan 170-171.
Ewing, G.W. 1975. Instrumental Methods of Chemical Analysis. Fourth Edition.
Tokyo: McGraw-Hill Kogakusha. Halaman 120.
Fessenden, R.J., Fessenden, J.S. 1986. Kimia Organik Jilid 1. Edisi ketiga.
Penerjemah: Pudjaatmaka A.H. Jakarta: Erlangga. Terjemahan dari Organic
Chemistry 1. Halaman 320.
Gandhimathi, M., Ravi, T.K. 2007. High Performance Liquid Chromatographic
Determination of Asetosal and Clopidogrel in Tablets. Indian Journal of
Pharmaceutical Sciences. 123-125.
Gandjar, I.G., Rohman, A. 2012. Analisis Obat Secara Spektrofotometri dan
Kromatografi. Cetakan I. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 155, 156,
181-182, 230,233,235-236, 245-247, dan 253.
Gunasekaran, S., Sailatha, E., Seshadri, S., Kumaresan, S. 2009. FTIR, FT Raman
spectra and molecural structural confirmation of isoniazid. Indian Journal
of Pure & Applied Physycs. 47: 1.
Harmita. 2004. Petunjuk pelaksanaan validasi metode dan cara perhitungannya.
Majalah Ilmu Kefarmasian. 1(3): 117-135.
Khaldun, I. 2018. Kimia Analisis Instrumen.Cetakan pertama. Banda Aceh: Syiah
Kuala University Press. Halaman 106, dan 114.
Konoz, E., Sarrafi, A.H.M., Samadizadeh, M., Boreiri, S. 2012. Quantitaive
Analysis of Lorazepam in Pharmaceutical Formulation Through FTIR
Spectroscopy. Journal of Chemistry. 9(4): 1.
Mallah, M.A., Sherazi S.T.H., Bhanger M.I., Mahesar S.A., Bajeer M.A. 2015. A
rapid Fourier-transform infrared (FTIR) spectroscopic method for direct
quantification of paracetamol content in solid pharmaceutical formulations.
Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy.
141(2015): 65.
Moffat, A.C., Osselton, M.D., Widdop, B. 2011. Clarke’s Analysis of Drugs and
Poisons. Fourth Edition. London : Pharmaceutical Press. Halaman 924.
Murtaza, G., Ali Khan, S.A., Shabbir, A., Mahmood, A., Bin Asad, M.H.H.B.,
Farzana, K., dkk. 2011. Development of a UV-spectrophotometric method
for the simultaneous determination of asetosal and paracetamol in tablets.
Scientific Research and Essays. 6(2): 417-421.
Nugrahani, I., Manosa, E.Y., Chyntya, W. 2019. FTIR-derivative as a green
method for simultaneous content determination of caffeine, paracetamol,
and acetosal in a tablet compared to HPLC. Vibrational Spectroscopy. 104
(2019) : 1-5.
42

Rahmadanita, F.F., Sumarno. 2019. Kajian Pustaka Efek Samping Asetosal :
Asetosal-Exacerbated Respiratory Disease (AERD). Pharmaceutical
Journal of Indonesia. 5(1) : 1-5.
Raouf, A.L.M., Hammud, K.K., Mohammed, J.M., Al-Dulimyi, E.M.K. 2014.
Qualitative and Quantitative Determination of Folic acid in Tablets by FTIR
Spectroscopy. International Journal of Advances in Pharmacy, Biology And
Chemistry. 3(3): 773-780.
Ryanto. 2016. Validasi & Verifikasi Metode Uji: Sesuai dengan ISO/IEC 17025
Laboratorium Pengujian dan Kalibrasi. Cetakan III. Sleman: Depublish.
Halaman 54.
Robaina, N.F., De Paula, C.E.R., Brum, D.M., De La Guardia, M., Garrigues, S.,
Cassella, R.J. 2013. Novel approach for the determination of azitromycin in
pharmaceutical formulation by Fourier transform infrared spectroscopy in
film-through transmission mode. Microchemical Journal. 110 (2013): 306.
Rohman, A. 2014. Spektroskopi Inframerah dan Kemometrika untuk Analisis
Farmasi. Yogyakarta: Pustaka pelajar. Halaman 1-2, 48-52, 59-60, 66-67,
dan 79-81.
Rohman, A. 2019. Validasi dan Penjaminan Mutu Metode Analisis Kimia. Cetakan
III. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Halaman 96-98, dan 105.
Sastrohamidjojo, H. 2013. Dasar-Dasar Spektroskopi. Yogyakarta: Gadjah Mada
University Press. Halaman 104 dan 108.
Sitorus, M. 2017. Spektroskopi Elusidasi Struktur Molekul Organik. Cetakan
Kedua. Yogyakarta: Graha Ilmu. Halaman 35,46,47 dan 56-57.
Sudjana. 2002. Metode Statistika. Cetakan ulang kedua. Edisi Keenam. Bandung:
Penerbit Tarsito. Halaman 93, 168.
Sweetman, S.C. 2009. Martindale The Complete Drug Reference. Third-Sixth
Edition. Grayslake: Pharmaceutical Press. Halaman 552-555.
Uno, N.R., Sudewi, S., Lolo, W.A. 2015. Validasi Metode Analisis Untuk
Penatapan Kadar Tablet Asam Mefenamat Secara Spektrofotometri
Ultraviolet. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT. 4(4): 156-167.
UU Nomor 36. 2009. Tentang Kesehatan. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik
Indonesia. Halaman 40.
43

Lampiran 1. Gambar Alat dan Bahan
Spektrofotometer Inframerah (IRPrestige-21 Shimadzu)
Timbangan (Sartorius)
44

Lampiran 1. Lanjutan
Kalium bromida
45

Lampiran 2. Bagan Alir Prosedur Penelitian
1. Pembuatan Spektrum Serapan Baku Asetosal
Baku Asetosal
Ditimbang sebanyak 30 mg
Dicukupkan dengan KBr hingga 300 mg
Digerus sampai homogen
Diukur serapan pada bilangan gelombang
500-4000 𝑐𝑚−1
Spektrum Serapan
Baku Asetosal
2. Pembuatan Kurva Kalibrasi Asetosal
Baku Asetosal
Ditimbang sebanyak 18 mg, 24 mg, 30

mg, 36 mg, 42 mg.
Dicukupkan masing-masing dengan KBr
hingga 300 mg
Digerus sampai homogen
Diukur serapannya pada wilayah
spesifik Asetosal pada bilangan
gelombang 500-4000 𝑐𝑚−1
Spektrum Kurva
Kalibrasi Asetosal
46

3. Penetapan Kadar Asetosal dalam Sediaan Tablet
20 tablet
Ditimbang bobotnya
Digerus hingga homogen
Serbuk Asetosal
dalam sediaan
Tablet
Ditimbang seksama sejumlah serbuk
setara 30 mg asetosal
Dihitung kesetaraan asetosal dengan
metode adisi standar (Standart Addition
Method)
Dicukupkan dengan KBr dan
dihomogenkan
Diukur serapannya pada bilangan
gelombang 500-4000 𝑐𝑚−1
Spektrum Serapan Sampel
Dihitung absorbansi pada bilangan
gelombang spesifik 925,83 𝑐𝑚−1
Kadar
47

Lampiran 3. Bagan Alir Prosedur Penelitian secara Keseluruhan
Pembuatan Spektrum
Serapan Baku Asetosal
Pembuatan Spektrum
Serapan Kurva Kalibrasi
Asetosal
Diperoleh persamaan regresi dan
Penentuan bilangan gelombang
spesifik asetosal pada daerah
sidik jari
Pengukuran Spektrum
Serapan Sampel Asetosal
Dagang dan Generik
Diplot nilai absorbansi pada

persamaan regresi untuk
memperoleh konsentrasi
Penetapan Kadar Sampel
Pengujian Validasi
Metode
48

Lampiran 4, Data Perhitungan Kalibrasi, Persamaan Regresi, dan Koefisien
Korelasi Asetosal
No. Konsentrasi (X) Absorbansi (Y)

1, 0 0
2, 6 0,411142
3, 8 0,569277
4, 10 0,711256
5, 12 0,847540
6, 14 0,975228
No Konsentrasi (X) Absorbansi X² Y² XY

(Y)
1 0 0 0 0 0
2 6 0,411142 36 0,1690377442 2,466852
3 8 0,569277 64 0,3240763027 4,554216
4 10 0,711256 100 0,5058850975 7,11256
5 12 0,847540 144 0,7183240516 10,17048
6 14 0,975228 196 0,951069652 13,653192
∑ 50 3,514443 540 2,668392848 37,9573
̅
X= 8,333333333 ̅
Y =0,5857405 90 0,4447321413 6,3262166667
a = 0,069279192
∑ XY − (∑ X)(∑ Y)/n
a= ∑ X2 − (∑X)2 /n
37,9573 − (50)(3,514443/6)
= 540 − (50)2 /6
37,9573 – 29,287025
= 540 − 416,6666666667
8,670275
= 123,3333333333
= 0,070299527
49

Lampiran 4, Lanjutan
̅ ̅+ b
Y = aX
b=̅ ̅
Y −aX
b = 0,5857405– (0,070299527)( 8,333333333)
= 0,000888916
Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = 0,070299527X + 0,000888916
∑ XY − (∑ X)(∑ Y)/n
r=
√(∑ X2 − (∑X)2 /n)(∑ Y2 − (∑Y)2 /n)
37,9573 − (50)(3,514443)/6
r=
√(540 −(50)2 /6)( 2,668392848− (3,514443)2 /6)
37,9573−29,287025
r=
√(540 − 416,66666)(2,668392848 – 2,0585516)
8,670275
r=
8,6725865799
r = 0,9997334613
r = 0,9997
50

Lampiran 5. Hasil Pengujian Asetosal 100 mg Merek Aptor
Tablet Aptor
Nama sampel : Aptor
Wadah/kemasan : Strip/100 mg
No. Reg : DBL9417805715A1
Komposisi : Tiap tablet mengandung Asetosal 100 mg
Kadaluarsa : September 2021
Produksi : PT. Nicholas
Berat 20 tablet : 3251,1 mg
Spektrum Tablet Aptor
51

Berat 20 tablet adalah 3251,1 mg
Ditimbang analit setara dengan 30 mg Asetosal, maka jumlah analit yang ditimbang
adalah
30 𝑚𝑔
= 20 𝑥 100 𝑚𝑔 x 3251,1 mg
= 48,7665 𝑚𝑔
1. Data Absorbansi Sampel
Pengulangan Absorbansi (Y)
I 0,688143
II 0,692901
III 0,682816
IV 0,689022
V 0,685788
VI 0,681932
2. Perhitungan Konsentrasi Sampel dengan Persamaan Regresi
Y = 0,070299527X + 0,000888916
Y = Absorbansi
X = Konsentrasi (mg)
Sampel 1 (Y = 0,688143)
0,688143−0,000888916
X= = 9,776084
0,070299527
52

Sampel 2 (Y = 0,692901)
0,692901−0,000888916
X= = 9,843765
0,070299527
Sampel 3 (Y=0,699801)
0,682816−0,000888916
X= = 9,700308
0,070299527
Sampel 4 (Y=0,689022)
0,689022−0,000888916
X= = 9,788587
0,070299527
Sampel 5 (Y=0,685788)
0,685788−0,000888916
X= = 9,742584
0,070299527
Sampel 6 (Y=0,681932)
0,681932−0,000888916
X= = 9,687733
0,070299527
3, Perhitungan Kadar Sampel pada Bilangan Gelombang 925,83 cm-1

𝐶𝑝𝑟𝑎𝑘𝑡𝑒𝑘
%Kadar = x Standar Kemurnian Baku (%)
𝐶𝑡𝑒𝑜𝑟𝑖
𝐶𝑝𝑟𝑎𝑘𝑡𝑒𝑘 = Konsentrasi sam
Sampel 1
9,776084
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 96,49479 %
Sampel 2
9,843765
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 97,16284 %
Sampel 3
9,700308
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 95,74684 %
53

Sampel 4
9,788587
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 96,61820 %
Sampel 5
9,742584
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 96,16413 %
Sampel 6
9,687733
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 95,62272 %
4,Analisis Statistika untuk Mencari Kadar Sampel yang Sesungguhnya
No. X (%) X−̅ X (X − ̅

X)2
1, 96,49479 19,320 0,0373275
2, 97,16284 86,125 0,7417573
3, 95,74684 -55,475 0,3077438
4, 96,61820 31,661 0,1002440
5, 96,16413 -13,746 0,0188943
6, 95,62272 -67,887 0,4608599
∑ 577,80952
̅
X 96,30158 1,6668269
̅ )2
∑(X − X
SD = √ n−1
1,6668269
=√ 5
= 0,577378
SD
RSD = ̅
X
100%
0,57737
= 96,30158 100%
= 0,599551 %
54

Pada interval kepercayaan 99%, dengan nilai α = 0,01, dk = n-1 = 6-1 = 5
Diperoleh ttabel = 4,03214, Data diterima jika thitung< ttabel

̅
X−X
thitung = |SD⁄ n|
√
0,19320
thitung Sampel 1 = |0,577378⁄ 6| = 0,8196387
√
0,86125
thitung Sampel 2 =|0,577378⁄ 6| = 3,6537987
√
−0,55475
thitung Sampel 3 = |0,577378⁄ 6|= 2,3534918
√
0,31661
thitung Sampel 4 = | |= 1,3431979
0,577378⁄√6
−0,13746
thitung Sampel 5 = |0,577378⁄ 6|= 0,5831653
√
−0,67887
thitung Sampel 6 = |0,577378⁄ 6|= 2,8800631
√
Dari data diatas, thitung< ttabelmaka semua data diterima,
Kadar Asetosal sebenarnya dapat digunakan rumus:
SD
̅ ± ttabel 
μ=X
√n
0,577378
μ = 96,30158 ± 4,03214 
√6
= (96,80531 ± 0,95043 %)
55

Lampiran 6. Hasil Pengujian Asetosal 100 mg Merek Astika
Gambar 4, Tablet Astika
Nama sampel : Astika
No. Reg : DKL 9609311615 A1
Kadaluarsa : September 2021
Produksi : PT.Ikapharmindo Putramas
Spektrum Tablet Astika
56

adalah
30 𝑚𝑔
= 20 𝑥 100 𝑚𝑔 x 4569,1 mg
= 68,5365 𝑚𝑔
I 0,731275
II 0,722467
III 0,720981
IV 0,719637
V 0,737434
VI 0,728084
Y = 0,070299527X + 0,000888916
Y = Absorbansi
Sampel 1 (Y = 0,731275)
0,731275−0,000888916
X= = 10.344238
0,070299527
Sampel 2 (Y = 0,722467)
0,722467−0,000888916
X= = 10.264337
0,070299527
57

Lampiran 6, Lanjutan
Sampel 3 (Y=0,720981)
0,720981−0,000888916
X= = 10.243199
0,070299527
Sampel 4 (Y=0,719637)
0,719637−0,000888916
X= = 10.224081
0,070299527
Sampel 5 (Y=0,737434)
0,737434−0,000888916
X= = 10.477240
0,070299527
Sampel 6 (Y=0,728084)
0,728084−0,000888916
X= = 10.344238
0,070299527

Sampel 1
10.344238
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 102,55079 %
Sampel 2
10.264337
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 101,31409 %
Sampel 3
10.243199
%Kadar = x 99,74 % = 101,10545 %
10,1048629246
Sampel 4
10.224081
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 100,91674 %
58

Sampel 5
10.477240
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 103,41555 %
Sampel 6
10.344238
%Kadar = x 99,74 % = 102,10275 %
10,1048629246
No. X (%) ̅
X−X ̅)2
(X − X
1, 102,55079 0,64990 0,4223635
2, 101,31409 -0,58681 0,3443401
3, 101,10545 -0,79545 0,6327327
4, 100,91674 -0,98416 0,9685610
5, 103,41555 1,51466 2,2941797
6, 102,10275 0,20186 0,0407454
∑ 611,40537
̅
X 101,90089 4,7029226
̅ )2
∑(X − X
SD = √ n−1
4,7029226
=√
5
= 0,969837
SD
RSD = ̅
X
100%
0,969837
= 101,90089 100%
= 0,951745 %
59


̅
X−X
thitung = |SD⁄ n|
√
0,64990
thitung Sampel 1 = |0,969837⁄ 6| = 1,6161767
√
−0,58681
thitung Sampel 2 =|0,969837⁄ 6| = 1,4820888
√
−0,79545
thitung Sampel 3 = |0,969837⁄ 6|= 2,0090447
√
−0,98416
thitung Sampel 4 = | |= 2,4856641
0,969837⁄√6
−1,51466
thitung Sampel 5 = |0,969837⁄ 6|= 3,8255324
√
0,20186
thitung Sampel 6 = |0,969837⁄ 6|= 0,5098318
√
SD
̅ ± ttabel 
μ=X
√n
0,969837
μ = 101,90089 ± 4,03214 
√6
= (101,90089 ± 1,59646 %)
60

Lampiran 7. Hasil Pengujian Asetosal 100 mg Merek Cardioasetosal
Gambar 4, Tablet Cardioasetosal
Nama sampel : Asetosal
No. Reg : DKL 9451600515 A1
Kadaluarsa : Juli 2022
Produksi : PT. Bayer Healthcare
Berat 20 tablet : 2735,9,1 mg
Spektrum Tablet Cardioasetosal
61

adalah
30 𝑚𝑔
= 20 𝑥 100 𝑚𝑔 x 2735,9 mg
= 41,0385 𝑚𝑔
I 0,747774
II 0,741428
III 0,760663
IV 0,758663
V 0,761580
VI 0,754427
Y = 0,070299527X + 0,000888916
Y = Absorbansi
Sampel 1 (Y = 0,747774)
0,747774−0,000888916
X= = 10.624325
0,070299527
62

Sampel 2 (Y = 0,741428)
0,741428−0,000888916
X= = 10.534055
0,070299527
Sampel 3 (Y=0,760663)
0,760663−0,000888916
X= = 10.807669
0,070299527
Sampel 4 (Y=0,758663)
0,758663−0,000888916
X= = 10.779220
0,070299527
Sampel 5 (Y=0,761580)
0,761580−0,000888916
X= = 10.820714
0,070299527
Sampel 6 (Y=0,754427)
0,728084−0,000888916
X= = 10.718963
0,070299527

%Kadar = 𝐶𝑡𝑒𝑜𝑟𝑖
x Standar Kemurnian Baku (%)
Sampel 1
10.624325
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 104,86735 %
Sampel 2
10.534055
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 103,97633 %
Sampel 3
10.807669
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 106,67705 %
Sampel 4
10.779220
%Kadar = x 99,74 % = 106,39624 %
10,1048629246
63

Sampel 5
10.820714
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 106,80580 %
Sampel 6
10.718963
%Kadar = x 99,74 % = 105,80147 %
10,1048629246
No. X (%) X−X ̅ ̅)2

(X − X
1, 104,86735 -0,88669 0,7862191
2, 103,97633 -1,77771 3,1602528
3, 106,67705 0,92301 0,8519474
4, 106,39624 1,05176 1,1061990
5, 106,80580 0,64220 0,4124208
6, 105,80147 0,04743 0,0022496
∑ 634,52424
̅
X 105,75404 6,3192890
̅ )2
∑(X − X
SD = √ n−1
6,3192890
=√ 5
= 1,124214
SD
RSD = ̅
X
100%
1,12421
= 105,75404 100%
= 1,063046 %
64


̅
X−X
thitung = |SD⁄ n|
√
−0,88669
thitung Sampel 1 = |1,124214⁄ 6| = 1.9524417
√
−1,77771
thitung Sampel 2 =|1,124214⁄ 6| = 3,9144179
√
0,92301
thitung Sampel 3 = |1,124214⁄ 6|= 2,0324163
√
1,05176
thitung Sampel 4 = | |= 2,3159166
1,124214⁄√6
0,64220
thitung Sampel 5 = |1,124214⁄ 6|= 1,4140884
√
0,04743
thitung Sampel 6 = |1,124214⁄ 6|= 0,1044382
√
SD
̅ ± ttabel 
μ=X
√n
1,124214
μ = 105,75404 ± 4,03214 
√6
= (105,75404 ± 1,83117 ) %
65

Lampiran 8. Hasil Pengujian Asetosal 100 mg Merek Farmasal
Gambar 4, Tablet Farmasal
Nama sampel : Asetosal
No. Reg : DKL 9231502715 A1
Kadaluarsa : November 2021
Produksi : PT. Fahrenheit
SpektrumTablet Farmasal
66

adalah
30 𝑚𝑔
= 20 𝑥 100 𝑚𝑔 x 2605,0 mg
= 39,075 𝑚𝑔
I 0,708403
II 0,699705
III 0,692901
IV 0,706537
V 0,705970
VI 0,694905
Y = 0,070299527X + 0,000888916
Y = Absorbansi
Sampel 1 (Y = 0,708403)
0,708403−0,000888916
X= = 10.064279
0,070299527
67

Sampel 2 (Y = 0,699705)
0,699705−0,000888916
X= = 9.9405517
0,070299527
Sampel 3 (Y=0,692901)
0,692901−0,000888916
X= = 9,843765
0,070299527
Sampel 4 (Y=0,706537)
0,706537−0,000888916
X= = 10,037735
0,070299527
Sampel 5 (Y=0,705970)
0,705970−0,000888916
X= 0,070299527
= 10,029670
Sampel 6 (Y=0,694905)
0,694905−0,000888916
X= = 9,872272
0,070299527

Sampel 1
10.064279
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 99,33942 %
Sampel 2
9.9405517
%Kadar = x 99,74 % = 98,11816 %
10,1048629246
Sampel 3
9,843765
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 97,16284 %
Sampel 4
10,037735
%Kadar = x 99,74 % = 99,07742 %
10,1048629246
68

Sampel 5
10,029670
%Kadar = 10,1048629246 x 99,74 % = 98,99781 %
Sampel 6
9,872272
%Kadar = x 99,74 % = 97,44421 %
10,1048629246
No. X (%) X−X ̅ ̅)2

(X − X
1, 99,33942 0,98278 0,9614390
2, 98,11816 -0,23848 0,0516425
3, 97,16284 -1,19380 1,4305356
4, 99,07742 0,72078 0,5162853
5, 98,99781 0,64117 0,4082187
6, 97,44421 -0,91243 0,8366395
∑ 590,13986
̅
X 98,35664 4,2047608
̅ )2
∑(X − X
SD = √ n−1
4,2047608
=√ 5
= 0,917718
SD
RSD = ̅
X
100%
0,917718
= 98,35889 100%
= 0,933052 %
69


̅
X−X
thitung = |SD⁄ n|
√
0,98053
thitung Sampel 1 = |0,917718⁄ 6| = 2,6248614
√
−0,23848
thitung Sampel 2 =|0,917718⁄ 6| = 0,6369451
√
−1,19605
thitung Sampel 3 = |0,917718⁄ 6|= 3,1884649
√
0,72078
thitung Sampel 4 = |0,917718⁄ 6|= 1,9250977
√
0,64117
thitung Sampel 5 = |0,917718⁄ 6|= 1,7124711
√
−0,91243
thitung Sampel 6 = |0,917718⁄ 6|= 2,4369668
√
SD
̅ ± ttabel 
μ=X
√n
0,917718
μ = 98,35889 ± 4,03214 
√6
= (98,35889 ± 1,50968 ) %
70

Lampiran 9. Perhitungan Validasi Metode
Berat 20 tablet = 4569,1 mg
Berat kesetaraan penimbangan sampel pada penetapan kadar = 30 mg
Perolehan 80%
Asetosal = 80/100 x 30 mg = 24 mg
Analit Asetosal = 70/100 x 24 mg = 16,8 mg
Sampel yang ditimbang = = 16,8/(20 x 100) x 4569,1 mg = 38,38044 mg
Baku asetosal 30% yang ditambahkan = 30/100 x 24 mg = 7,2 mg
Perolehan 100%
Asetosal = = 100/100 x 30 mg = 30 mg
Analit Asetosal = 70/100 x 30 mg = 21 mg
Sampel yang ditimbang = 21/(20 x 100) x 4569,1 mg = 47,97555 mg
Baku asetosal 30% yang ditambahkan = = 30/100 x 30 mg = 9 mg
Perolehan 120%
Asetosal = = 120/100 x 30 mg = 36 mg
Analit Asetosal = 70/100 x 36 mg = 25,2 mg
Sampel yang ditimbang = 25,2/(20 x 100) x 4569,1 mg = 57,57066 mg
Baku asetosal 30% yang ditambahkan = 30/100 x 36 mg = 10,8 mg
Persentase perolehan kembali :
𝐶𝑓−𝐶𝑎
% recovery = 𝐶𝐴∗
Keterangan :
Cf = Konsentrasi sampel setelah penambahan bahan baku
Ca = Konsentrasi sampel sebelum penambahan bahan baku
CA*= Jumlah baku yang ditambahkan x standart kemurnian baku
71

N Rentan Baku yang Absorbansi Konsentrasi (%)

o g ditambahk Sebelum Setelah Sebelum Setelah
Spesifi an (mg) x penambah penambah penambah penambaha
k standart an baku an baku an baku n baku
kemurnian
baku
1 80% 7,18128 0,369782 0,538923 5,2474475 7,6534524
2 7,18128 0,370144 0,537193 5,2525969 7,6288434
3 7,18128 0,368865 0,537954 5,2344034 7,6396685
4 100% 8,97660 0,473532 0,684941 6,7232754 9,7305360
5 8,97660 0,471659 0,685788 6,6966323 9,7425845
6 8,97660 0,468263 0,682816 6,6568880 9,7003082
7 120% 10,77192 0,560604 0,816071 7,9618613 11,5958402
8 10,77192 0,566100 0,820262 8,0400410 11,6554565
9 10,77192 0,561719 0,816138 7,9777220 11,5967933
Y = 0,070299527X + 0,000888916
Y = Absorbansi
I. Rentang Spesifik 80%
Sebelum penambahan baku
Sampel 1 (Y = 0,369782)
0,369782−0,000888916
X= 0,070299527
= 5,2474475 %
Sampel 2 (Y = 0,370144)
0,370144−0,000888916
X= = 5,2525969 %
0,070299527
Sampel 3 (Y=0,368865)
0,368865−0,000888916
X= = 5,2344034 %
0,070299527
72

Setelah penambahan baku
Sampel 1 (Y=0, 538923)
0,538923−0,000888916
X= = 7,65345240 %
0,070299527
Sampel 2 (Y=0,537193)
0,537193−0,000888916
X= = 7,6288434 %
0,070299527
Sampel 3 (Y=0,537954)
0,537954−0,000888916
X= = 7,6396685 %
0,070299527
II. Rentang Spesifik 100%
Sampel 1 (Y = 0,473532)
0,473532−0,000888916
X= = 6,7232754 %
0,070299527
Sampel 2 (Y = 0,471659)
0,471659−0,000888916
X= = 6,69663231 %
0,070299527
Sampel 3 (Y=0,468263)
0,468263−0,000888916
X= = 6,6568880 %
0,070299527
Sampel 1 (Y=0,684941)
0,684941−0,000888916
X= = 9,7305360 %
0,070299527
Sampel 2 (Y=0,685788)
0,685788−0,000888916
X= = 9,7425845 %
0,070299527
73

Sampel 3 (Y=0,682816)
0,682816−0,000888916
X= = 9,7003082 %
0,070299527
III. Rentang Spesifik 120%
Sampel 1 (Y = 0,560604)
0,560604−0,000888916
X= = 7,9618613 %
0,070299527
Sampel 2 (Y = 0,566100)
0,566100−0,000888916
X= = 8,0400410 %
0,070299527
Sampel 3 (Y=0,561719)
0,561719−0,000888916
X= 0,070299527
= 7,9777220 %
Sampel 1 (Y=0,816071)
0,816071−0,000888916
X= = 11,59584024 %
0,070299527
Sampel 2 (Y=0,820262)
0,820262−0,000888916
X= = 11,65545657 %
0,070299527
Sampel 3 (Y=0,816138)
0,816138−0,000888916
X= = 11,596793300 %
0,070299527
3. Perhitungan Bobot Sampel
Bobot sampel = Konsentrasi sampel dengan persamaan regresi ´ Bobot
Keseluruhan
Bobot Keseluruhan = 300 mg
74

I. Rentang spesifik 80%
Sampel 1 = 5,2474475 % x 300 mg = 15,7423425 mg
Sampel 2 = 5,2525969 % x 300 mg = 15,7577907 mg
Sampel 3 = 5,2344034 % x 300 mg = 15,7032102 mg
Sampel 1 = 7,6534524 % x 300 mg = 22,9603572 mg
Sampel 2 = 7,6288434 % x 300 mg = 22,8865302 mg
Sampel 3 = 7,6396685 % x 300 mg = 22,9190055 mg
Sampel 1 = 6,7232754 % x 300 mg = 20,1698262 mg
Sampel 2 = 6,6966323 % x 300 mg = 20,0898969 mg
Sampel 3 = 6,6568880 % x 300 mg = 19,970664 mg
Sampel 1 = 9,7305360 % x 300 mg = 29,191608 mg
Sampel 2 = 9,7425845 % x 300 mg = 29,2277535 mg
Sampel 3 = 9,7003082 % x 300 mg = 29,1009246 mg
Sampel 1 = 7,96186130 % x 300 mg = 23,8855839 mg
Sampel 2 = 8,04004106 % x 300 mg = 24,1201231 mg
Sampel 3 = 7,97772201 % x 300 mg = 23,93316603 mg
75

Sampel 1 = 11,59584024 % x 300 mg = 34,7875207 mg
Sampel 2 = 11,65545657 % x 300 mg = 34,9663697 mg
Sampel 3 = 11,59679330 % x 300 mg = 34,7903799 mg
4. Perhitungan % Recovery
Bobot setelah penambahan baku(mg)−Bobot sebelum penambahan baku(mg)

%Re = x 100%
Baku yang ditambahkan (mg)
22,96035722− 15,74234277
%Re Sampel 1 = x 100% = 100,5115307 %
7,18128
22,8865302− 15,7577907
%Re Sampel 2 = x 100% = 99,2683686 %
7,18128
22,9190055 − 15,7032102
%Re Sampel 3= x 100% = 100.4806288 %
7,18128
II. Rentang Spesifik 100%

29,1916082− 20,1698262
%Re Sampel 1 = x 100% = 100,5033313 %
8,97660
29,2277535− 20,0898969
%Re Sampel 2 = x 100% = 101,7964113 %
8,97660
28,8638677 − 19,970664
%Re Sampel 3= x 100% = 101,7117933 %
8,97660
III. Rentang Spesifik 120%

34,7875207− 23,8855839
%Re Sampel 1 = x 100% = 101,2069975 %
10,77192
34,9663697− 24,1201232
%Re Sampel 2 = x 100% = 100,6900025 %
10,77192
34,7903799 − 23,9331660
%Re Sampel 3= x 100% = 100,7918168 %
10,77192
76

5. Data Hasil Persen Perolehan Kembali
No. Bobot Bobot setelah Baku yang %Recovery

sebelum penambahan ditambahkkan
penambahan baku x standart
baku kemurnian
baku
80% 15,7423427 22,9603572 7,18128 100,51%
15,7577907 22,8865302 7,18128 99,26%
15,7032102 22,9190055 7,18128 100.48%
100% 20,1698262 29,1916082 8,97660 100,50%
20,0880806 29,2277535 8,97660 101,79%
19,9706640 28,8638677 8,97660 101.71%
120% 23,8855839 34,7875207 10,77192 101,20%
24,1201232 34,9663697 10,77192 100,69%
23,9331660 34,7903799 10,77192 100,79%
6. Perhitungan RSD
No. X (%) X−X ̅ ̅)2

(X − X
1, 100,51% -0.26% 0,0676
2, 99,26% -1.51% 2,2801
3, 100.48% -0.29% 0,0841
4, 100,50% -0.27% 0,0729
5, 101,79% 1.02% 1,0404
6, 101,71% 0.94% 0,8836
101,20% 0.43% 0,1849
100,69% -0.08% 0,0064
100,79% 0.02% 0,0004
∑ 906,93% 4,6204
̅
X 100,77%
̅ )2
∑(X − X
SD = √ n−1
4,6204
=√ 8
= 0,57755
77

SD
RSD = ̅
X
100%
0,57755
=  100%
100,77
= 0,57 %
78

Lampiran 10. Perhitungan Simpangan Baku, Batas Deteksi (LOD), Dan Batas
Kuantitasi (LOQ) Asetosal.
No Konsentrasi Absorbansi Yi (Y - Yi) (Y - Yi)2

(X) (Y)
1 0 0 0,000888916 -0,000888916 7.90172E-07
2 6 0,411142 0,422686078 -0,011544078 0.000133266
3 8 0,569277 0,563285132 0,005991868 3.59025E-05
4 10 0,711256 0,703884186 0,007371814 5.43436E-05
5 12 0,847540 0,84448324 0,00305676 9.34378E-06
6 14 0,975228 0,985082294 -0,009854294 9.71071E-05
∑ 50 3,514443 3,520309846 -0,005866846 0.000330753
̅
X= 8,333333 ̅
Y =0,5857405
Y = 0,070299527X + 0,000888916
1. X = 0 ; Yi = 0,070299527 (0) + 0,000888916
Yi = 0,000888916
2. X = 6 ; Yi = 0,070299527 (6) + 0,000888916
Yi = 0,422686078
3. X = 8 ; Yi = 0,070299527 (8) + 0,000888916
Yi = 0,563285132
4. X = 10 ; Yi = 0,070299527 (10) + 0,000888916
Yi = 0,703884186
5. X = 12 ; Yi = 0,070299527 (12) + 0,000888916
Yi = 0,84448324
6. X = 14 ; Yi = 0,070299527 (14) + 0,000888916
Yi = 0,985082294
79

SD ̅ )2
∑(Y − Y
̅ = √
X n−2
0,000330753
= √ 4
= 0,018186616 %
SY
LOD = 3 x X
/ Slope
0,018186616 %
=3x 0,070299527
= 0,776105478 %
= 0,7761 %
SY
LOQ = 10 x X
/ Slope
0,018186616 %
= 10 x
0,070299527
= 2,58701826 %
= 2,5870 %
80

Lampiran 11. Daftar Nilai D istribusi t
81

Validasi Dan Penetapan Kadar Asetosal Dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Validasi Dan Penetapan Kadar Asetosal Dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

VALIDASI DAN PENETAPAN KADAR ASETOSAL DALAM

SEDIAAN TABLET SECARA SPEKTROFOTOMETRI

PROGRAM SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

HALAMAN USULAN PENELITIAN

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI