Uji Aktivitas Antioksidan Pada Teh Daun Sirsak (Annona Muricata L.) TERHADAP VARIASI LAMA Penyeduhan Menggunakan Spektrofotometri Sinar Tampak

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PADA TEH DAUN SIRSAK
(Annona muricata L.) TERHADAP VARIASI LAMA

PENYEDUHAN MENGGUNAKAN SPEKTROFOTOMETRI
SINAR TAMPAK
SKRIPSI
OLEH:
VERAWATI
NIM 151524065
PROGRAM STUDI EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017
1
Universitas Sumatera Utara
SINAR TAMPAK
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh

Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
OLEH:
VERAWATI
NIM 151524065
PROGRAM STUDI EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017
2
LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI

(Annona muricata L.) TERHADAP VARIASI LAMA SEDUHAN
MENGGUNAKAN SPEKTROFOTOMETRI
SINAR TAMPAK
OLEH:
VERAWATI
NIM 151524065
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi

Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 04 Oktober 2017
Disetujui oleh
Pembimbing I, Panitia Penguji,
Dra. Sudarmi, M.Si., Apt. Prof. Dr. rer. nat. Effendy Delux Putra, SU., Apt.
NIP 195409101983032001 NIP 195306191983031001
Pembimbing II,
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. Dra. Sudarmi, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002 NIP 195409101983032001
Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt.

NIP 195401101980032001
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.

NIP 195201041980031002
Medan, Oktober 2017
Fakultas Farmasi
Dekan,
Prof. Dr. Masfria, M.Si., Apt.

NIP 195707231986012001
3
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan
karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi
yang berjudul “Uji Aktivitas Antioksidan pada Teh Daun Sirsak (Annona
muricata l.) terhadap Variasi Lama Penyeduhan Menggunakan Spektrofotometri
Sinar Tampak”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-
besarnya kepada Ibu Prof. Dr. Masfria, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas
Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di
Fakultas Farmasi. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Dra. Sudarmi,
M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., yang telah
meluangkan waktu dan tenaga dalam membimbing penulis dengan penuh
kesabaran dan tanggung jawab, memberikan petunjuk dan saran-saran selama
penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan terima kasih juga penulis
sampaikan kepada Bapak Prof. Dr.rer. nat. Effendy Delux Putra, SU.,Apt., selaku
ketua penguji dan ibu Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt., selaku anggota
penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi ini, dan Ibu
Prof. Dr. Rosidah , M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing akademik serta Bapak
dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah banyak membimbing
penulis selama masa perkuliahan hingga selesai. Penulis juga mempersembahkan
rasa terima kasih yang tak terhingga kepada keluarga, Bapak saya Nahasan
Sianturi, Ibu saya Gestariana dan abang serta adik-adikku tercinta atas limpahan
kasih sayang, doa dan semangat yang tak ternilai dengan apa pun.
iv
Terimakasih juga penulis ucapkan kepada teman-teman Farmasi Ekstensi
angkatan 2015 untuk kebersamaan dan dorongan semangatnya, serta semua pihak
yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah banyak membantu hingga
selesainya penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum
sempurna, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang
membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga
skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.
Medan, Oktober 2017

Penulis,
Verawati
NIM 151524065
v
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan dibawah ini :
Nama : Verawati
NIM : 151524065
Program Studi : S-1 Ekstensi Farmasi
Judul Skripsi : Uji Aktivitas Antioksidan pada Teh Daun Sirsak (annona
muricata l.) terhadap Variasi Lama Penyeduhan
Menggunakan Spektrofotometri Sinar Tampak.
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dan
hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat
karena kutipan yang ditulis setelah disebutkan sumbernya didalam daftar pustaka.
Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam
skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggng jawab pembimbing.
Demikian surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagai mana mestinya.
Medan, Oktober 2017

Yang Membuat Pernyataan
Verawati
NIM 151524065
vi
SINAR TAMPAK
ABSTRAK
Antioksidan adalah senyawa yang mampu menangkal atau merendam

radikal bebas yang terdapat di dalam tubuh sehingga dapat menghambat beberapa
penyakit. Di dalam masyarakat biasanya daun sirsak di gunakan sebagai obat
herbal tradisional untuk pencegahan dan mengobati penyakit seperti kanker, serta
sebagai antioksidan alami yang biasanya di masyarakat digunakan dengan cara
merebus. Pemberian daun sirsak dalam bentuk teh dapat menjadi alternatif bagi
masyarakat karena memiliki kelebihan dibandingkan bentuk segarnya, salah
satunya lebih praktis, mudah dalam penggunaan, dan ekonomis. Tujuan
penelitian ini untuk mengetahui aktivitas antioksidan pada teh daun sirsak
terhadap variasi waktu penyeduhan.
Untuk mengetahui senyawa kimia yang berpotensi sebagai antioksidan
dilakukan pengujian skrining fitokimia pada sampel daun sirsak (Annona
muricata L.). Selain uji skrining fitokimia sampel daun sirsak (Annona muricata
L.) dibuat dalam bentuk sedian teh dengan pengeringan optimal suhu 50 0c
selama 150 menit. Teh diseduh dengan variasi waktu penyeduhan 2 menit, 4
menit, 6 menit, 8 menit dan 10 menit, selanjutnya ditambahkan DPPH (1,1-
diphenyl-2-picrylhydrazyl) dan diukur menggunakan spektrofotometri sinar
tampak pada panjang gelombang 516 nm.
Hasil skrining fitokimia daun sirsak mengandung senyawa kimia golongan
alkaloid, flavonoida, glikosida, tanin, saponin dan steroida. Hasil pengujian
aktivitas antioksidan menunjukkan bahwa teh daun sirsak dengan variasi waktu
penyeduhan 2 menit, 4 menit, 6 menit, 8 menit, dan 10 menit menunjukkan
aktivitas antioksidan lemah. Hasil uji statistika kurskal wallis aktivitas antioksidan
teh daun sirsak dengan variasi lama penyeduhan 2 menit, 4 menit, 6 menit, 8
menit dan 10 menit terdapat perbedaan secara signifikan
Kata kunci: Antioksidan, DPPH, Skrining Fitokimia, Teh Daun Sirsak dan
Variasi Lama Waktu penyeduhan
vii
TEST OF ANTIOXIDANT ACTIVITY OF TEA LEAF LEAVES
(Annona muricata L.) TO OLD VARIATION USING VISIBLE
BEAM SPECTROPHOTOMETRY
ABSTRACK
Antioxidants are compounds that can counteract or soak free radicals

contained in the body so it can inhibit some diseases. In the community usually
soursop leaf is used as a traditional herbal remedy for prevention and treat
diseases such as cancer, as well as a natural antioxidant that is usually in the
community used by boiling. Provision of soursop leaves in the form of tea can be
an alternative for the community because it has advantages over its fresh form,
one of which is more practical, easy to use, and economical. The purpose of this
research is to know the antioxidant activity on soursop leaf tea to sediment time
variation.
To determine the chemical compounds that have the potential as an
antioxidant phytochemical screening tests on soursop leaf samples (Annona
muricata L.). In addition to the phytochemical screening test the soursop leaf
sample (Annona muricata L.) was prepared in the form of tea sedian with optimal
drying temperature 500c for 150 minutes. The tea was brewed with a variation of
brewing time of 2 minutes, 4 minutes, 6 minutes, 8 minutes and 10 minutes, then
added DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) and measured using visible light
spectrophotometry at 516 nm wavelength.
The results of phytochemical screening of soursop leaf contain chemical
compounds of alkaloids, flavonoids, glycosides, tannins, saponins and steroids.
The results of antioxidant activity test showed that soursop leaf tea with variation
of brewing time of 2 minutes, 4 minutes, 6 minutes, 8 minutes, and 10 minutes
showed different antioxidant activity with IC50 classified as week. The result of
statistical test of kurskal wallis antioxidant activity of soursop leaf tea with
variation of brewing time 2 minutes, 4 minutes, 6 minutes, 8 minutes and 10
minutes there was significant difference.
Keywords: Antioxidant, DPPH, Phytochemical Screening, Soursop Tea and

Variety of Sediment Time
viii
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ............................................................................................................. i
HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................... iii
KATA PENGANTAR ..................................................................................... iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT................................................. vi
ABSTRAK ....................................................................................................... vii
ABSTRACK .................................................................................................... vii
DAFTAR ISI ................................................................................................... ix
DAFTAR TABEL ........................................................................................... xi
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xii
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xv
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................ 1
1.2 Perumusan Masalah .................................................................... 3
1.3 Hipotesis .................................................................................... 3
1.4 Tujuan Penelitian ........................................................................ 3
1.5 Manfaat Penelitian ...................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 5
2.1 Tumbuhan Sirsak ........................................................................ 5
2.2 Teh ............................................................................................... 6
2.3 Radikal Bebas .............................................................................. 9
2.4 Antioksidan .................................................................................. 10
2.5 Penentuan Aktivitas Antioksidan Dengan metode DPPH ........... 12
2.6 Spektrofotometer Visibel ............................................................. 13
ix
2.7 Pengukuran Panjang Gelombang ................................................. 15
2.8 Waktu Pengukuran ....................................................................... 16
BAB III METODE PENELITIAN................................................................... 16
3.1 Alat ............................................................................................. 16
3.2 Bahan ........................................................................................... 16
3.3 Pembuatan Pereaksi ..................................................................... 17
3.3.1 Pereaksi Besi (III) Klorida 1% .......................................... 17
3.3.2 Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4M ..................................... 17
3.3.3 Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N ..................................... 17
3.3.4 Pereaksi Asam Klorida 2 N ............................................... 17
3.3.5 Pereaksi Asam Sulfat 2 N ................................................. 17
3.3.6 Pereaksi Mayer .................................................................. 17
3.3.7 Pereaksi Molisch ................................................................ 17
3.3.9 Pereaksi Dragendorff ......................................................... 18
3.3.10 Pereaksi Bouchardat ........................................................ 18
3.3.11 Pereaksi Liebermann-Burchard ....................................... 18
3.4 Skrining Fitokimia ...................................................................... 18
3.4.1 Pemeriksaan Alkaloid ........................................................ 18
3.4.2 Pemeriksaan Flavonoida .................................................... 19
3.4.3 Pemeriksaan Glikosida ...................................................... 19
3.4.4 Pemeriksaan Glikosida Antrakinon ................................... 20
3.4.5 Pemeriksaan Saponin ......................................................... 20
3.4.6 Pemeriksaan Steroida/Triterpenoid.................................... 20
3.4.7 Pemeriksaan Tanin............................................................. 21
3.4.8 Penetapan Kadar Air .......................................................... 21
x
3.5 Pengumpulan dan Pengolahan Bahan Tumbuhan........................ 22
3.5.1 Pengumpulan Bahan .......................................................... 22
3.5.2 Identifikasi Bahan Tumbuhan ............................................ 22
3.5.3 Pembuatan Teh Daun Sirsak .............................................. 22
3.6 Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Spektrofotometer ........ 23
3.6.1 Prinsip Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH .................. 23
3.6.2 Pembuatan Larutan Blanko DPPH 0,5 mM ....................... 23
3.6.3 Pembuatan Larutan Blanko C=40 µg/mL .......................... 23
3.6.4 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum ........ 23
3.6.6 Pembuatan Larutan Induk Baku Teh Daun Sirsak............. 23
3.6.7 Pengujian Antioksidan Seduhan Teh Daun Sirsak ............ 24
3.6.8 Analisis Persen Pemerangkapan Radikal Bebas ................ 24
3.6.9 Analisis Nilai IC50 .............................................................. 24
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 25
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan........................................................ 25
4.2 Hasil Skrining Fitokimia .............................................................. 25
4.3 Hasil Pembuatan Teh ................................................................... 27
4.4 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan ........................................ 28
4.4.1 Hasil Panjang Gelombang Serapan Maksimum .............. 28
4.4.2 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Teh Daun Sirsak .. 28
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 36
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 37
xi
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
2.1 Kategori Nilai IC50 Sebagai Antioksidan ......................................... 13
4.1 Hasil Skrining Fitokimia .................................................................. 25
4.2 Beberapa Hasil Penelitian Skrining Fitokimia ................................. 26
4.3 Penurunan Absorbansi dan Persen Pemerangkapan DPPH oleh

Masing-masing Variasi Lama Seduhan Teh Daun Sirsak ............... 29
4.4 Hasil Persamaan Regresi Linier dan Hasil Analisis IC50 diperoleh dari
Masing-masing Variasi Waktu Teh Daun Sirsak .......................... 33
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Mekanisme Reaksi DPPH Terhadap Senyawa Antioksidan ......... 12
4.1 Kurva Serapan Maksimum DPPH 40 µg/mL dalam Metanol

Menggunakan Spektrofotometer UV-Visibel ............................. 28
4.2 Grafik Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Teh Daun Sirsak Variasi
Waktu 2 Menit ............................................................................... 30
4.3 Grafik Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Teh Daun Srsak Variasi
Waktu 4 Menit ............................................................................... 31
Waktu 6 Menit ............................................................................... 31
Waktu 8 Menit ............................................................................... 32
Waktu 10 Menit ............................................................................. 32
4.7 Grafik Hasil Analisis IC50 Masing-masing Variasi Waktu

Penyeduhan Teh Daun Sirsak ...................................................... 33
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Identifikasi Tumbuhan .............................................................. 40
2 Bagan Kerja Penelitian ............................................................. 41
3 Sampel yang Digunakan ........................................................... 42
4 Gambar Seperangkat Alat Spektrofotometer UV-Visibel

(UV-1800 Shimadzu) .............................................................. 43
5 Perhitungan Pembuatan Larutan Blanko DPPH 0,5 mM.......... 44
6 Hasil Pengukuran Operating Time............................................ 45
7 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan ................................................ 47
8 Contoh Perhitungan Persen Pemerangkapan dan Perhitungan

Nilai IC50 .................................................................................. 49
9 Uji Statistika.............................................................................. 79
xiv
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang

Antioksidan merupakan suatu zat yang dapat menetralkan radikal bebas
dengan mencegah dan menghambat pembentukan radikal bebas baru dan
memperbaiki kerusakan oleh radikal dengan cara memberi hidrogen atau elektron
kedalam suatu molekul yang bersifat radikal (Winarsi, 2007).
Radikal bebas adalah setiap molekul yang mengandung satu atau lebih
elektron yang tidak berpasangan. Radikal bebas sangat reaktif dan dengan mudah
menjurus kereaksi yang tidak terkontrol, menghasilkan ikatan silang (cross-link)
pada DNA, protein, lipida atau kerusakan oksidatif pada gugus fungsional yang
akan menyebabkan proses penuaan (Silalahi, 2006).
Salah satu dari kandungan kimia daun sirsak dapat berpotensi sebagai
antioksidan yang dapat menangkal radikal bebas sehingga dapat mengobati
beberapa penyakit seperti kanker, diantaranya flavonoid, kumarin, alkaloid dan
tanin (Astatin, 2014; Salamah dan Widyasari, 2015).
Di dalam masyarakat daun sirsak di gunakan sebagai obat herbal
tradisional untuk pencegahan dan mengobati penyakit salah satunya kanker (Utari
dkk, 2013), yang biasanyanya di masyarakat digunakan dengan cara merebus.
Pengolahan daun sirsak menjadi teh dapat menjadi alternatif bagi masyarakat.
Bentuk teh memiliki kelebihan yaitu lebih praktis, mudah dalam penggunaan,
ekonomis, selain itu daun yang diolah menjadi teh akan memiliki masa simpan
yang lebih lama dan kandungan antioksidan akan lebih stabil hal ini dibuktikan
dalam publikasi jurnal yang menunjukkan bahwa teh herbal india masih memiliki
kapasitas antioksidan setelah disimpan 5 bulan (Naithani, dkk., 2005).
1
Beberapa hal yang perlu diperhatikan dalam pembuatan teh, agar teh
tersebut dapat bermanfaat bagi kesehatan, salah satunya adalah cara penyeduhan
teh. Penelitian yang dilakukan oleh Adri dan Hersoelistyiorini (2013) pada teh
daun sirsak berdasarkan variasi lama pengeringan diperoleh IC 50 terendah pada
menit ke-30 yaitu sebesar 117,86 μg/mL dan yang tertinggi pada menit ke-150
yaitu sebesar 82,16 μg/mL. Aktivitas antioksidan seduhan sepuluh jenis mutu teh
hitam (camelia sinensis (L) O. Kuntze) di indonesia dilakukan penyeduhan
selama 6 menit menunjukkan akitivitas antioksidan sebesar 97-178,56 µg/mL
(Sudaryat, dkk, 2015). Menurut penelitian Putri dan Ulfin (2015) mengatakan
bahwa kebiasaan masyarakat di indonesia penyeduhan teh dilakukan antara 0,5
menit - 4 menit karena dalam keseharian masyarakat tidak membutuhkan waktu
yang lama saat menyeduh teh dalam air panas. Sedangkan menurut Wansi dkk
(2014) waktu penyeduhan yang lebih lama dari 4-8 menit tidak lagi memiliki efek
karena daun teh sudah tidak lagi mengandung komposisi apapun yang dianggap
menenangkan.
Berdasarkan hal tersebut, maka peneliti tertarik untuk melakukan
pengujian aktivitas antioksidan dari teh daun sirsak (Annona muricata L.) dengan
variasi lama penyeduhan menggunakan metode spektrofotometri sinar tampak
menggunakan pemerangkapan DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl).
2
1.2 Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, maka perumusan masalah pada penelitian
ini adalah:
a. Apakah terdapat senyawa antioksidan di dalam teh daun sirsak?
b. Berapakah kekuatan aktivitas antioksidan pada teh daun sirsak berdasarkan
variasi waktu penyeduhan?
c. Apakah terdapat perbedaan secara signifikan aktivitas antioksidan pada teh
daun sirsak berdasarkan variasi lama penyeduhan?
1.3 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah di atas, maka hipotesis pada penelitian ini
adalah:
a. Terdapat senyawa antioksidan dalam teh daun sirsak.
b. Aktivitas antioksidan pada teh daun sirsak dengan variasi waktu
penyeduhan termasuk kategori kuat.
c. Terdapat perbedaan signifikan aktivitas antioksidan teh daun sirsak

berdasarkan variasi lama penyeduhan.
1.4 Tujuan Penelitian

Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah:
a. Untuk mengetahui apakah terdapat senyawa aktivitas antioksidan pada
daun sirsak.
b. Untuk mengetahui kekuatan aktivitas antioksidan pada teh daun sirsak
dengan variasi lama penyeduhan.
c. Untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan secara signifikan aktivitas
antioksidan teh daun sirsak berdasarkan variasi lama penyeduhan.
3
1.5 Manfaat Penelitian
Manfaat dilakukannya penelitian ini adalah:
a. Dapat mengetahui senyawa antioksidan pada teh daun sirsak.
b. Dapat mengetahui kekuatan aktivitas antioksidan pada teh daun sirsak
berdasarkan variasi lama penyeduhan.
c. Dapat mengetahui apakah terdapat perbedaan aktivitas antioksidan teh
daun sirsak berdasarkan variasi lama penyeduhan.
4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tumbuhan Sirsak
Sirsak merupakan tanaman yang berasal dari karibia, Amerika Tengah dan
Amerika Selatan. Namun sirsak sendiri berasal dari bahasa belanda “Zuurzak”
yang berarti kantung yang masam. Tanaman ini ditanam secara komersial dan
dapat tumbuh di sembarang tempat. Di indonesia, sirsak dapat tumbuh dengan
baik pada ketinggian 1000 meter di atas permukaan laut (Joe, 2012).
Menurut Hariana (2011) tanaman sirsak diklasifikasikan sebagai berikut:
Kingdom : Plantae,
Divisio : Spermatophyta,
Sub Divisio : Angiospermae
Class : Dicotyledoneae,
Famili : Annonaceae,
Genus : Annona,
Species : Annona muricata L.
Nama daerah biasanya sering disebut nongko londo, nangka sabrang,
nangka manila, swirsak (jawa), nangka walanda (sunda), deureuyan belanda
(aceh), durian batawi (minangkabau) (Hariana, 2011).
Daun sirsak memiliki bau tajam menyengat dengan tangkai daun pendek
sekitar 3-10 mm. Daun sirsak memiliki panjang 6-18 cm, lebar 3-7 cm,
mempunyai tekstur kasar, ujungnya lancip pendek, daun bagian atas mengilap
hijau dan gundul pucat kusam di bagian bawah daun, berbentuk lateral saraf.
Daun sirsak nomor 4 sampai 5 dari pucuk memiliki kandungan acetogenins
5
tertinggi. Daun sirsak yang terlalu muda belum banyak mengandung acetogenins
yang terbentuk, sedangkan kandungan acetogenins pada daun yang terlalu tua
sudah mulai rusak sehingga kadarnya berkurang. Penelitian di Amerika lebih
menganjurkan untuk menggunakan daun sirsak yang tua, biasanya dipilih daun
nomor 4 atau 5 (Zuhud, 2011).
Sirsak memiliki sumber antioksidan alami yang dapat digunakan untuk
pengobatan berbagai jenis penyakit seperti asma, bronkitis, batuk, diabetes,
hipertensi, gangguan pencernaan, infeksi, cacingan, kanker, disentri dan masih
banyak lagi lainnya. Salah satu dari kandungan kimia daun sirsak dapat berpotensi
sebagai antioksidan yang dapat menangkal radikal bebas sehingga dapat
mengobati beberapa penyakit diantaranya adalah flavonoid, kumarin, alkaloid dan
tanin (Joe, 2012; Astatin, 2014; Salamah dan Widyasari, 2015).
2.2 Teh
Pengertian teh herbal sudah umum dikalangan masyarakat, sehingga
masyarakat sudah menggunakan kata “Teh” untuk minuman yang bukan berasal
dari daun teh (Camelia sinensis). Teh herbal adalah sebutan untuk ramuan bunga,
daun, biji, akar atau buah kering untuk membuat minuman yang juga disebut teh
herbal. Teh adalah minuman yang paling banyak dikonsumsi oleh manusia
sesudah air putih, dalam jumlah kira-kira 120 ml/ kapita per hari (Harun dkk,
2014; Silalahi, 2006).
Pengolahan menjadi bentuk teh dapat meningkatkan nilai tambah, daun
yang diolah menjadi teh akan memiliki masa simpan yang lebih lama, ekonomis,
praktis dan mudah digunakan. Selain itu kandungan antioksidan akan lebih stabil
(Naithani, et al., 2005; Sutisna, 2016).
6
Teh herbal tidak berasal dari daun teh saja, bisa juga dari hasil pengolahan
bunga-bunga, kulit, biji-biji dan akar berbagai tanaman. Potensi antioksidan teh
dapat dikatakan lebih kuat dibandingkan dengan antioksidan dalam sayuran dan
buah-buahan. Banyak penelitian telah membuktikan bahwa polifenol dari teh
mampu mengatasi beberapa penyakit salah satunya kanker.
Berbagai herbal atau tanaman obat sebenarnya dapat diolah menjadi herbal
kering. Pada dasarnya, proses pengolahan semua jenis tanaman obat hampir sama.
Biasanya, perbedaan terletak pada lama dan suhu pengeringan karena disesuaikan
dengan karakteristik bahan segar (Daroini, 2006).
Menurut Sutisna 2016, pengolahan daun sirsak menjadi bentuk teh sama
dengan pengolahan teh pada umunya yaitu dapat dilakukan dengan cara:
1. Pemetikan dan seleksi
Pada tahap ini, dilakukan seleksi bahan yakni dengan memilih daun yang
telah di petik dengan cara memisahkan daun yang masih muda dan terlalu tua dan
menggunakan daun yang muda namun tidak terlalu tua. Daun yang berlubang
akibat hama dan daun yang terkena penyakit dengan ciri-ciri memiliki bintik
putih, Kuning ataupun hitam dibuang dipisahkan dengan daun yang akan
digunakan.
2. Pencucian
Tahap ini bertujuan untuk menghilangkan kotoran yang terdapat pada
permukaan daun kemudian daun ditiriskan hingga air yang menempel pada daun
berkurang. Pencucian ini dilakukan dengan air mengalir.
3. Pelayuan
Pada tahap ini daun yang telah dicuci ditiriskan dan diangin-anginkan pada
suhu kamar. Pelayuan ini dilakukan agar terjadi inaktivasi enzim polifenol
7
oksidase sehingga potensi kerusakan enzimatis senyawa antioksidan dapat di
cegah.
4. Pengeringan
Secara tradisional makanan dikeringkan dengan sinar matahari tetapi
sekarang beberapa makanan didehidrasi dibawah kondisi pengeringan salah
satunya dengan menggunakan oven. Tahap pengeringan bertujuan untuk
mengurangi kadar air pada daun hingga mencapai 4%. Sedangakan proses
pengeringan daun daun sirsak dilakukan pada suhu <60 0C. Pengeringan dilakukan
dibawah 600C karena komponen fenolik pada tanaman sangat rentan terhadap
suhu tinggi. Proses pengeringan yang terbaik ada pada kisaran suhu 50 0C karena
memiliki rendemen fenolik yang tinggi.
5. Penggilingan
Proses penggilingan dapat dilakukan dengan cara berbeda-beda. Salah
satunya menggunakan blender. Proses penggilingan sangat penting karena
bertujuan untuk memperkecil ukuran daun sirsak kering sehingga mudah dalam
proses pengemasan.
6. Penyimpanan
Teh daun sirsak dikemas menggunakan plastik yang ditutup dengan
aluminium foil lalu dimasukkan dalam wadah bertutup dan disimpan pada suhu ±
40C. Tujuannya adalah agar bentuk sedian teh dapat bertahan lebih lama dan
terhindar dari mikroba.
2.3 Radikal Bebas
Radikal bebas adalah molekul yang kehilangan elektron, sehingga molekul
tersebut menjadi tidak stabil dan selalu berusaha mengambil elektron dari molekul
atau sel lain. Paparan radikal bebas yang berlebihan dapat menyebabkan
8
kerusakan sel dan pada akhirnya dapat menyebabkan kematian sel sehingga
menyebabkan timbulnya penyakit. Sumber-sumber radikal bebas yang sering
dijumpai di masyarakat sekarang ini adalah polusi udara. Selain itu, gaya hidup
yang semakin berkembang juga dapat berpengaruh terutama di daerah perkotaan.
Banyak masyarakat yang lebih suka mengkonsumsi makanan cepat saji, banyak
mengandung lemak serta zat-zat kimia berbahaya dan penggunaan rokok
(Ramadhan, 2015).
Radikal bebas memiliki reaktivitas yang sangat tinggi. Hal ini di tunjukkan
oleh sifatnya yang segera menarik atau menyerang elektron di sekelilingnya.
Kemiripan sifat antara radikal bebas dan oksidan terletak pada agresivitas untuk
menarik elektron di sekelilingnya. Berdasarkan sifat ini, radikal bebas dianggap
sama dengan oksidan. Pemahamaan radikal bebas sebagai oksidan merupakan
radikal bebas. Bila senyawa radikal baru tersebut bertemu dengan molekul lain,
akan terbentuk radikal baru lagi, dan seterusnya hingga akan terjadi reaksi
berantai (Winarsi, 2014).
Proses pembentukan radikal bebas dalam tubuh, radikal bebas dapat masuk
dan terbentuk ke dalam tubuh melalui:
a. Melalui Pernapasan
Saat kita melakukan pernapasan akan masuk oksigen (02) yang sangat
dibutuhkan oleh tubuh untuk proses pembakaran gula menjadi CO 2, H2O dan
energi O2 sangat berperan karena bila tidak ada O2 proses kehidupan akan tidak
lancar dan membahayakan bagi tubuh kita sendiri. Tetapi dengan bernafas atau
oksigen yang berlebihan saat olahraga terjadi reaksi yang kompleks dalam tubuh
dan menghasilkan produk-produk sampingan berupa radikal bebas yaitu radikal
oksigen singlet.
9
b. Lingkungan Tidak Sehat
Pembakaran yang tidak sempurna misalnya asap rokok yang tidak
menghasilkan CO2 tetapi CO, asap pembakaran sampah yang sembarangan
tempat, demikian juga asap dari kendaraan bermotor merupakan radikal bebas
yang berbahaya sekali bagi paru-paru. Di samping itu juga dari asupan makanan
yang mengandung logam-logam berat memungkinkan terbentuknya radikal bebas
akibat oksidasi dari luar.
3. Makanan Berlemak
Lemak sangat bermanfaat bagi tubuh tetapi komsumsi lemak yang
berlebihan sangat berpotensi menghasilkan radikal bebas. Biasanya lemak yang
dapat mengakibatkan radikal bebas adalah lemak tak jenuh artinya lemak yang
mempunyai ikatan rangkap pada atom C-nya. Adanya ikatan rangkap tersebut
mudah sekali dioksidasi menjadi radikal bebas.
2.4 Antioksidan
Antioksidan adalah senyawa yang mampu menangkal atau meredam
dampak negatif oksidan dalam tubuh. Antioksidan bekerja dengan cara
mendonorkan satu elektronnya kepada senyawa yang bersifat oksidan sehingga
aktivitas senyawa oksidan tersebut dapat dihambat (Winarsi, 2007).
Khasiat antioksidan untuk mencegah berbagai penyakit akibat pengaruh
oksidatif akan lebih efektif jika kita mengkonsumsi sayur-sayuran dan buah-
buahan yang kaya akan antioksidan daripada menggunakan antioksidan tunggal.
Efek antioksidan dari sayur-sayuran dan buah-buahan, lebih efektif dari pada
suplemen antioksidan yang di isolasi. Hal ini mungkin dikarenakan oleh adanya
10
komponen lain dan interaksinya dalam sayur-sayuran dan buah-buahan yang
berperan secara positif (Silalahi, 2006).
Menurut Winarsi (2007), antioksidan dikelompokkan menjadi 3 kelompok
yaitu:
1. Antioksidan primer biasanya disebut juga antioksidan enzimatis (antioksidan
endogen). Suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan primer, apabila dapat
memberikan atom hidrogen secara cepat kepada senyawa radikal, kemudian
radikal dan antioksidan segera berubah menjadi senyawa yang lebih stabil.
Antioksidan primer bekerja dengan cara mencegah pembentukan senyawa
radikal bebas baru atau mengubah radikal bebas yang telah terbentuk menjadi
molekul yang kurang reaktif. Contoh enzim Katalase, Glutation dan SOD .
2. Antioksidan sekunder disebut juga antioksidan eksogen atau non enzimatis.
Mekanisme kerja antioksidan ini dengan cara memotong reaksi oksidasi
berantai dari radikal bebas atau dengan cara menangkapnya. Akibatnya radikal
bebas tidak bereaksi. Beberapa contoh antioksidan sekunder adalah senyawa
polifenol (flavonoid), vitamin C, vitamin E dll.
3. Antioksidan tersier yang bermanfaat untuk memperbaiki kerusakan
biomolekuler yang disebabkan oleh radikal bebas, misalnya DNA repair enzim.
2.5 Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Aktivitas antioksidan dapat dilakukan dengan DPPH, karena merupakan
radikal bebas yang stabil pada suhu kamar, dan banyak digunakan untuk
mengevaluasi aktivitas antioksidan dari senyawa tumbuhan (Winarsi, 2007).
11
Gambar 2.1 Mekanisme reaksi DPPH terhadap senyawa antioksidan
(Sayuti, 2015).
Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau
radikal hidrogen pada DPPH akan menetralkan radikal bebas dari DPPH. Jika
semua elektron pada radikal bebas pada DPPH menjadi berpasangan, maka warna
larutan berubah dari ungu menjadi kuning terang. Perubahan ini dapat diukur
sesuai dengan jumlah elektron atau atom hidrogen yang di tangkap oleh molekul
DPPH akibat adanya zat antioksidan (Winarsi, 2007).
Panjang gelombang 516 nm yang di dapat, termasuk dalam kisaran
panjang gelombang sinar tampak 400-800 nm, serta termasuk dalam rentang
panjang gelombang DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) yang berkisar antara
515-520 nm (Molyneux, 2004).
Suatu senyawa menunjukkan efeknya sebagai antioksidan jika dapat
menghambat reaksi peroksidasi lipid, yang secara in vitro dapat diketahui dari
besarnya IC50 atau Inhibitor Concentration-50. Parameter yang di pakai untuk
menunjukkan aktivitas antioksidan adalah harga konsentrasi efisiensi atau efficient
concentration (EC50) atau Inhibitory Concentration (IC50) yaitu konsentrasi suatu
zat antioksidan yang dapat menyebabkan 50% DPPH kehilangan karakter radikal
atau konsentrasi suatu zat antioksidan yang memberikan persen peredaman
sebesar 50%. Zat yang mempunyai aktivitas antioksidan tinggi, akan mempunyai
12
harga EC50 atau IC50 yang rendah (Molyneux, 2004). Berikut ini merupakan tabel
kategori nilai IC50 sebagai antioksidan.
Tabel 4.5 Kategori nilai IC50 sebagai antioksidan
No. Kategori Konsentrasi (μg/mL)
1. Sangat kuat ≤50
2. Kuat 50 – 100
3. Sedang 101 – 150
4. Lemah ≥ 150
Sumber: Winarsi, 2014.
IC50 juga didefinisikan sebagai bilangan yang menunjukkan konsentrasi
ekstrak (mikrogram/ mililiter) yang mampu menghambat 50% oksidasi. Semakin
kecil nilai IC50 semakin tinggi aktivitas antioksidannya (Winarsi, 2014).
2.6 Spektrofotometer Visibel
Spektrofotometer UV-Vis adalah pengukuran panjang gelombang dan
intensitas sinar ultraviolet dan cahaya tampak yang diabsorbsi oleh sampel.
Panjang gelombang untuk sinar ultraviolet antara 200-400 nm sedangkan panjang
gelombang untuk sinar tampak/visibel antara 400-800 nm (Gandjar dan Rohman,
2012). Spektrofotometer pada dasarnya terdiri atas sumber sinar monokromator,
tempat sel untuk zat yang diperiksa, detektor, penguat arus dan alat ukur atau
pencatat (Sastrohamidjojo, 1985).
Komponen-komponen pokok dari spektrofotometer meliputi:
1. Sumber tenaga radiasi
Sumber tenaga radiasi terdiri dari benda yang tereksitasi hingga ke tingkat
tenaga yang tinggi oleh sumber listrik bertegangan tinggi. Sumber radiasi
13
ultraviolet yang kebanyakan digunakan adalah lampu hidrogen dan lampu
deutrium. Lampu tersebut terdiri dari sepasang elektroda yang terselubung dalam
tabung gelas dan diisi dengan gas hidrogen atau deutrium pada tekanan yang
rendah. Sumber radiasi terlihat dan radiasi inframerah dekat yang biasa digunakan
adalah lampu filamen tungsten (Sastrohamidjojo, 1985).
2. Monokromotor
Dalam spektrofotometer, radiasi yang polikromatik ini harus diubah menjadi
radiasi monokromatik. Ada dua jenis alat yang digunakan untuk mengurai radiasi
polikromatik menjadi monokromatik yaitu penyaring dan monokromotor.
Penyaring dibuat dengan benda khusus yang hanya meneruskan radiasi pada
daerah panjang gelombang tertentu dan menyerap radiasi dari panjang gelombang
yang lain. Monokromotor merupakan serangkaian alat optik yang menguraikan
radiasi polikromatik menjadi jalur-jalur yang efektif/ panjang gelombang-
gelombang tunggalnya dan memisahkan panjang gelombang-gelombang tersebut
menjadi jalur-jalur yang sangat sempit (Sastrohamidjojo, 1985).
3. Tempat Cuplikan
Cuplikan yang akan dipelajari pada daerah ultraviolet atau terlihat yang
biasa berupa gas atau larutan ditempatkan dalam sel atau cuvet. Sel untuk larutan
mempunyai panjang lintasan tertentu dari 1 hingga 10 cm, sebelum sel dipakai
harus dibersihkan dengan air (Sastrohamidjojo, 1985).
4. Detektor
Detektor menghasilkan sinyal listrik yang dapat mengaktifkan meter atau
pencatat. Setiap mencatat harus menghasilkan sinyal yang secara kuantitatif
berkaitan dengan tenaga cahaya yang mengenainya (Sastrohamidjojo, 1985).
14
2.7 Pengukuran panjang gelombang
Panjang gelombang maksimum (λ maks) yang digunakan dalam
pengukuran sampel uji sangat bervariasi. Menurut beberapa literatur panjang
gelombang maksimum untuk DPPH antara lain 515-520 nm (Molyneux, 2004).
Panjang gelombang yang digunakan untuk analisis kuantitatif adalah
panjang gelombang yang mempunyai absorbansi maksimal. Untuk memilih
panjang gelombang maksimal, dilakukan dengan membuat kurva hubungan antara
absorbansi dengan panjang gelombang dari suatu larutan baku pada konsentrasi
tertentu (Gandjar dan Rohman, 2012).
Menurut Gandjar dan Rohman (2012) Ada beberapa alasan mengapa harus
menggunakan panjang gelombang maksimal, yaitu:
1. Pada panjang gelombang maksimal, kepekaannya juga maksimal karena pada
panjang gelombang maksimal tersebut perubahan absorbansi untuk setiap
satuan konsentrasi adalah yang paling besar.
2. Disekitar panjang gelombang maksimal, bentuk kurva absorbansi datar dan
pada kondisi tersebut hukum lambert-Beer akan terpenuhi.
3. Jika dilakukan pengukuran ulang maka kesalahan yang disebabkan oleh
pemasangan ulang panjang gelombang akan kecil sekali, ketika digunakan
panjang gelombang maksimal.
15
BAB III
METODE PENELITIAN
Metode penelitian ini dilakukan secara Eksperimental. Penelitian meliputi
pengumpulan dan pengolahan bahan, identifikasi, skrining fitokimia daun segar
dan pengujian aktivitas antioksidan pada teh daun sirsak dengan variasi lama
penyeduhan dengan metode pemerangkapan radikal bebas DPPH (1,1-diphenyl-2-
picrylhydrazyl) secara Spektrofotometri visibel. Penelitian ini dilakukan di
Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi dan Laboratorium Fitokimia,
Universitas Sumatera Utara pada bulan Februari 2017 – April 2017.
3.1 Alat
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini terdiri dari alat-alat gelas
laboratorium, blender, hot plate, kertas saring, neraca analitik (Boeco Germany),
oven, vortex, spektrofotometer UV-Visible (Shimadzu UV-1800) dan stopwatch.
3.2 Bahan
Bahan kimia yang digunakan berkualitas pro analisis: DPPH (1,1-
diphenyl-2-picrylhydrazil), metanol p.a. Produksi E-Merck: α-naftol, amil
alkohol, asam asetat anhidrida, asam klorida pekat, asam nitrat, asam sulfat pekat,
besi (III) klorida, benzene, bismuth (III) nitrat, iodida, isopropanol, metanol,
kloroform, natrium hidroksida, raksa (II) klorida, timbal (II) asetat, toluen, serbuk
magnesium, kalium iodida. Bahan kimia berkualitas teknis: air suling dan etanol
96%.
16
3.3 Pembuatan Pereaksi
3.3.1 Pereaksi Besi (III) Klorida 1%
Sebanyak 1 g besi (III) klorida ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air
secukupnya hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes R. I, 1995).
3.3.2 Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4M
Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat ditimbang, kemudian dilarutkan dalam
air suling bebas karbon dioksida seban byak 100 ml (Depkes R. I, 1995).
3.3.3 Pereaksi Natrium Hidroksida 2N
Sebanyak 8 g kristal natrium hidroksida dilarutkan dengan air suling
sebanyak 100 ml (Depkes R. I, 1995).
3.3.4 Pereaksi Asam Klorida 2N
Sebanyak 17 mL larutan asam klorida pekat ditambahkan air suling hingga
diperoleh larutan 100 mL (Depkes R. I, 1995).
3.3.5 Pereaksi Asam Sulfat 2N
Sebanyak 5,5 mL larutan asam sulfat pekat ditambahkan air suling sampai
100 mL (Depkes R. I, 1995).
3.3.6 Pereaksi Mayer
Sebanyak 1,4 g raksa (II) klorida dilarutkan dalam air suling hingga 60 mL
pada wadah lain ditimbang sebanyak 5 g kalium iodida lalu dilarutkan dalam 10
mL air suling, kedua larutan dicampurkan dan ditambahkan air suling hingga
diperoleh larutan 100 mL (Depkes R. I, 1995).
3.3.7 Pereaksi Molisch
Sebanyak 3 g α-naftol ditimbang, dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N
hingga diperoleh larutan 100 mL (Depkes R. I, 1995).
17
3.3.8 Pereaksi Dragendorff
Sebanyak 0,8 g bismut (III) nitrat ditimbang, dilarutkan dalam 20 mL
asam nitrat pekat, pada wadah lain ditimbang sebanyak 27,2 g kalium iodida,
dilarutkan dalam 50 mL air suling, kemudian kedua larutan dicampurkan dan
didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan yang jernih diambil dan
diencerkan dengan air suling hingga volume larutan 100 mL (Depkes R. I, 1995).
3.3.9 Pereaksi Bouchardat
Sebanyak 4 g kalium iodida ditimbang, dilarutkan dalam air suling
secukupnya, lalu ditambahkan 2 g iodium kemudian ditambahkan air suling
hingga diperoleh larutan 100 mL (Depkes R. I, 1995).
3.3.10 Pereaksi Liebermann-Burchard
Sebanyak 5 bagian volume asam sulfat pekat dicampurkan dengan 50
bagian volume etanol 95%. Kemudian ditambahkan dengan hati-hati 5 bagian
volume asam asetat anhidrida ke dalam campuran tersebut dan dinginkan (Depkes
R. I, 1995).
3.4 Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia meliputi pemeriksaan senyawa golongan alkaloid,
glikosida, flavonoida, saponin, tanin, steroida/ triterpenoida, dan antrakuinon.
Skrining dilakukan terhadap daun segar.
3.4.1 Pemeriksaan Alkaloid
Sampel ditimbang sebanyak 0,503 g ditambahkan 1 mL asam klorida 2 N
dan 9 mL air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2 menit, didinginkan
dan disaring, filtrat dipakai untuk uji alkaloida. Diambil 3 tabung reaksi, lalu ke
dalam masing-masing tabung reaksi dimasukkan 0,5 mL filtrat.
18
Pada tabung I : ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer, akan terbentuk endapan
menggumpal berwarna putih atau kuning.
Pada tabung II : ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff, akan terbentuk
endapan berwarna coklat atau jingga kecoklatan.
Pada tabung III : ditambahkan 2 tetes pereaksi Bourchardat, akan terbentuk
endapan berwarna coklat sampai kehitaman.
Alkaloida dinyatakan positif jika terjadi endapan atau kekeruhan paling
sedikit dua atau tiga dari percobaan di atas (Depkes R. I, 1995).
3.4.2 Pemeriksaan Flavonoida
Sampel ditimbang sebanyak 10,021 g, ditambahkan 10 mL air panas,
dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, ke dalam 5 mL
filtrat ditambahkan 0,1034 g serbuk magnesium dan 1 mL asam klorida pekat dan
2 mL amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi
warna merah atau kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth,
1966).
3.4.3 Pemeriksaan Glikosida
Sampel ditimbang sebanyak 3,045 g kemudian disari dengan 30 mL
campuran 7 bagian volume etanol 96% dan 3 bagian volum air suling ditambah
dengan 10 mL asam klorida 2 N. Direfluks selama 30 menit, didinginkan dan
disaring. Diambil 20 mL filtrat, ditambahkan 25 mL air suling dan 25 mL timbal
(II) asetat 0,4 M lalu dikocok selama 5 menit dan disaring. Filtrat disari dengan 20
mL campuran 3 bagian kloroform dan 2 isopropanol dilakukan berulang sebanyak
tiga kali. Kumpulan sari air diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 50 oC.
Sisanya dilarutkan dalam 2 mL metanol. Larutan sisa digunakan untuk percobaan
berikut, yaitu 0,1 mL larutan percobaan dimasukkan ke dalam tabung reaksi,
19
diuapkan di penangas air. Sisa dilarutkan dalam 2 mL air suling dan 5 tetes
pereaksi Molish kemudian secara perlahan ditambahkan 2 mL asam sulfat pekat.
Glikosida positif jika terbentuk cincin ungu (Depkes R. I, 1995).
3.4.4 Pemeriksaan Glikosida Antrakuinon
Sampel ditimbang sebanyak 0,2032 g, kemudian ditambahkan 5 mL asam
sulfat pekat 2 N, dipanaskan sebentar, setelah dingin ditambahkan 10 mL
benzene, dikocok dan didiamkan. Lapisan benzene dipisahkan dan disaring, kocok
lapisan benzene dengan 2 mL NaOH 2 N, didiamkan. Lapisan air berwarna merah
dan lapisan benzene tidak berwarna menunjukkan adanya Antrakinon (Depkes R.
I, 1995).
3.4.5 Pemeriksaan Saponin
Sampel ditimbang sebanyak 0,5024 g dan dimasukkan ke dalam tabung
reaksi, lalu ditambahkan 10 mL air panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-
kuat selama 10 detik. Jika terbentuk busa setinggi 1 sampai 10 cm yang stabil
tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam
klorida 2 N menunjukkan adanya saponin (Depkes R. I, 1995).
3.4.6 Pemeriksaan Steroid/Triterpenoida
Sampel ditimbang sebanyak 1, 0356 g dimaserasi dengan 20 mL n-heksan
selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa
ditambahkan beberapa tetes pereaksi Liebermann-Burchard. Timbulnya warna
biru atau biru hijau menunjukkan adanya steroida, sedangkan warna merah, merah
muda atau ungu menunjukkan adanya triterpenoida (Harbone, 1987).
20
3.4.7 Pemeriksaan Tanin
Sampel ditimbang sebanyak 0,5140 g, disari dengan 10 mL air suling lalu
disaring, filtratnya diencerkan dengan air sampai tidak berwarna. Larutan diambil
sebanyak 2 mL dan ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika
terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth,
1966).
3.4.8 Penetapan Kadar Air
Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluen).
Alat terdiri dari labu alas bulat 500 mL, pendingin, tabung penyambung, tabung
penerima 10 ml, alat penampung dan pemanas listrik.
a. Penjenuhan toluen
Sebanyak 200 mL toluen dan 2 mL air suling dimasukkan ke dalam labu alas
bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian didestilasi selama 2
jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume
air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 mL.
b. Penetapan kadar air simplisia
Sebanyak 5,0113 g serbuk simplisia yang telah di timbang seksama
dimasukkan ke dalam labu yang berisi toluen yang telah dijenuhkan, kemudian
labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluen mendidih, kecepatan
tetesan siatur 2 tetes untuk tiap detik sampai sebagian besar air terdestilasi,
kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik. Setelah semua
air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen. Destilasi
dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada
suhu kamar. Setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan
ketelitian 0,05 mL. Selisih kedua volume air yang di baca sesuai dengan
21
kandungan air yang terdapat dalam bahan yang di periksa. Kadar air di hitung
dalam persen v/b (WHO, 1998).
3.5 Pengumpulan Dan Pengolahan Bahan Tumbuhan
3.5.1 Pengumpulan Bahan
Pengambilan sampel dilakukan secara purposif yaitu pengambilan sampel
dengan pertimbangan khusus sehingga layak dijadikan sampel dan tanpa
membandingkan dengan tumbuhan daerah lain. Sampel yang digunakan adalah
daun sirsak (Annona muricata L) mulai dari daun ke-3 sampai daun ke-5
pengambilan dilakukan pada pagi hari pukul 06.00-07.00 WIB (Sutisna, 2016)
sebanyak 5,179 kg di peroleh dari Simpang Adios III Kelurahan Desa Sei Menciri
m, Kecamatan Sunggal, Kabupaten Deli Serdang, Provinsi Sumatera Utara.
3.5.2 Identifikasi Bahan Tumbuhan
Identifikasi tumbuhan daun sirsak (Annona muricata Linn.) dilakukan di La
boratorium Herbarium Medanese (MEDA) Universitas Sumatera Utara, Medan.
3.5.3 Pembuatan Teh Daun Sirsak
Pemetikan Daun sirsak di ambil mulai dari daun ke-3 sampai daun ke-5
yang masih segar, dicuci daun sirsak dengan air mengalir sampai bersih dan
ditiriskan, kemudian diangin-anginkan dan dilakukan pelayuan selama 18 jam
pada suhu ruangan, lalu dikeringkan dengan oven listrik dengan suhu ± 50 oC
selama 150 menit, selanjutnya di blender, kemudian di ayak dengan ayakan mesh
30 dan di ditimbang berat teh daun sirsak, kemudian di kemas ke dalam wadah,
ditutup dengan Aluminium foil, dan di simpan di refrigerator ± 40C (Sutisna,
2016; Adri dan Hersoelistyorini 2013).
22
3.6 Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Spektrofotometer Visibel
3.6.1 Prinsip Metode Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH
Kemampuan sampel uji dalam meredam proses oksidasi DPPH (1,1-
diphenyl-2-picrylhidrazil) sebagai radikal bebas dalam larutan methanol p.a
(sehingga terjadi peredaman warna ungu DPPH) dengan IC 50 (konsentrasi sampel
uji yang mampu meredam radikal bebas sebesar 50%) digunakan sebagai
parameter menentukan aktivitas antioksidan sampel uji (Molyneux, 2004).
3.6.2 Pembuatan larutan blanko DPPH 0,5 mM
Timbang 20 mg DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) kemudian dilarutkan
dalam methanol hingga volume 100 mL (Molyneux, 2004).
3.6.3 Pembuatan Larutan blanko C = 40 µg/mL
Larutan DPPH 0,5 mM dipipet sebanyak 5 mL, kemudian dimasukkan ke
dalam labu tentukur 25 mL, lalu dicukupkan volumenya dengan metanol sampai
garis tanda untuk mendapatkan konsentrasi 40 μg/mL (Molyneux, 2004).
3.6.4 Pengukuran Panjang Gelombang Serapan Maksimum
Larutan DPPH konsentrasi 40 μg/mL dihomogenkan dan diukur
serapannya pada panjang gelombang 400–800 nm.
3.6.5 Pembuatan Larutan Induk Baku Teh Daun Sirsak
Ditimbang sebanyak 1,0251 g serbuk teh daun sirsak, ditambahkan 100 mL
air panas, didiamkan selama 2 menit, kemudian di saring dan diperoleh larutan
baku induk teh daun sirsak. Dan dilakukaan perlakuan yang sama terhadap
penyeduhan pada menit ke 4, 6, 8 dan 10.
23
3.6.6 Pengujian antioksidan seduhan teh daun sirsak
Larutan induk dipipet sebanyak 3,75 mL; 5 mL; 6,25 mL; dan 7,5 mL;
kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL (untuk mendapatkan
konsentrasi 1500 μg/mL, 2000 μg/mL, 2500 μg/mL dan 3000 μg/mL), ke dalam
masing-masing labu tentukur ditambahkan 5 mL larutan DPPH (1,1-diphenyl-2-
picrylhydrazyl) 0,5 mM, lalu dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda,
dihomogenkan dengan vortex, lalu didiamkan selama 20 menit, kemudian diukur
menggunakan Spektrofotometer UV-VIS pada panjang gelombang 516 nm.
Dilakukaan perlakuan yang sama pada penyeduhan pada menit ke 4, 6, 8 dan 10.
3.6.7 Analisis persen pemerangkapan radikal bebas
Penentuan persen pemerangkapan radikal bebas dihitung dengan rumus
sebagai berikut:
A kontrol - A sampel
Aktivitas pemerangkapan radikal bebas (%) = x 100%
A kontrol
Keterangan: Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel (Rosidah dkk, 2008).
3.6.8 Analisis nilai IC50
Perhitungan yang digunakan dalam penentuan aktivitas pemerangkapan
radikal bebas adalah nilai IC50 (Inhibitory Concentration), nilai IC50 merupakan
bilangan yang menunjukkan konsentrasi sampel uji (µg/mL) yang memberikan
perendaman DPPH sebesar 50%). Hasil perhitungan dimasukkan ke dalam
persamaan regresi dengan konsentrasi serbuk teh daun sirsak (ppm) sebagai absis
(sumbu x) dan nilai persen perendaman (antioksidan) sebagai ordinatnya (sumbu
y). Suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat jika nilai IC 50< 50
μg/mL, kuat (50-100) μg/mL, sedang (100-150) μg/mL, dan lemah ≥150 μg/mL
(Winarsi, 2014).
24
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan
Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan di laboratorium Herbarium
Medanese (MEDA) Universitas Sumatera Utara, Medan menunjukkan bahwa
sampel termasuk kedalam suku Annonaceae, spesies Annona muricata L.
4.2 Hasil Skrining Fitokimia
Hasil pengujian skrining fitokimia terhadap daun sirsak menunjukkan
bahwa daun sirsak berpotensi memiliki aktivitas antioksidan, karena mengandung
golongan senyawa polifenol seperti flavonoid, alkaloid, steroid dan tannin.
Senyawa- senyawa tersebut dapat bertindak sebagai penangkap radikal bebas
karena gugus hidroksil yang dikandungnya dapat mendonorkan hidrogen kepada
radikal bebas sehingga radikal bebas dapat diubah menjadi tidak radikal (Silalahi,
2006). Hasil pemeriksaan skrining fitokimia daun sirsak dapat dilihat pada Tabel
4.1 berikut ini:
Tabel 4.1. Hasil Skrining Fitokimia
No. Pemeriksaan Daun tua segar

1. Glikosida +
2. Tannin +
3. Alkaloida +
4. Antrakuinon -
5. Steroida +
6. Flavonoida +
7. Saponin +
Keterangan: (+) positif : mengandung golongan senyawa kimia
(-) negatif: tidak mengandung golongan senyawa kimia
25
Sedangkan menurut beberapa penelitian yang telah melakukan penelitian
tentang kandungan senyawa kimia daun sirsak dengan berbagai pelarut yang
berbeda-beda memiliki kandungan senyawa kimia yang sama. Berikut Tabel 4.2
data beberapa peneliti yang sudah melakukan penelitian sebelumnya.
Tabel 4.2 Beberapa Hasil Penelitian Skrining Fitokimia
Referensi Flavonoid Tanin Steroid Terpenoid Alkaloid Saponin Pelarut
Mustarian + etanol
(2011)
Chauhan + + + + _ + air
dan mitu
(2015)
Usunobun + + _ + + etanol
(2014)
Arthur + +++ _ +++ air
et al(201)
Gayamulk r T t t T air
uya et al t T t t R etanol
(2014)
George + + _ + - butanol
(201)
Perwatres + + + + + air
na(2012)
Keterangan : + (Terdeteksi), - (Tidak Terdeteksi), +++ (Melimpah), t (Tinggi),
s (Sedang), r (Rendah).
Pada Tabel 4.2 beberapa penelitian telah menganalisis kandungan kimia
dari daun sirsak dengan menggunakan pelarut yang berbeda-beda (Sutisna, 2016).
Dari hasil data yang di peroleh menyatakan bahwa data hasil skrining fitokimia
sesuai dengan beberapa para peneliti sebelumnya .
4.3 Hasil Pembuatan Teh
Daun sirsak yang digunakan sebagai sampel di ambil mulai dari daun ke-3
sampai daun ke-5 yang masih segar. Alasan pengambilan daun urutan ke-3
sampai daun ke-5 karena daun muda belum berkembang penuh dalam arti masih
aktif berfotosintesis, sedangkan daun dewasa merupakan daun yang telah
26
berkembang penuh dan senyawa aktif di dalamnya lebih banyak dibandingkan
daun muda dan menurut Zuhud (2011) antioksidan yang tertinggi pada urutan
daun ke 3-5 selain itu juga banyak mengandung senyawa acetogenin yang cukup
tinggi. Dicuci daun sirsak dengan air mengalir sampai bersih, dan ditiriskan,
kemudian diangin-anginkan dan dilakukan pelayuan selama 18 jam pada suhu
ruangan. Pelayuan dilakukan agar terjadi inaktivasi enzim polifenol oksidase
sehingga potensi kerusakan enzimatis senyawa antioksidan dapat di cegah, lalu
dikeringkan dengan oven listrik dengan suhu ± 50oC selama 150 menit untuk
mengurangi kadar air pada daun hingga mencapai 4% untuk memenuhi syarat
parameter mutu teh daun sirsak. Sedangakan proses pengeringan daun daun sirsak
dilakukan pada suhu <600C. Pengeringan dibawah 600C karena komponen fenolik
pada tanaman sangat rentan terhadap suhu tinggi. Proses pengeringan yang terbaik
ada pada kisaran suhu 500C karena memiliki rendemen fenolik yang tinggi,
selanjutnya di blender untuk memperkecil ukuran daun sirsak kering sehingga
mudah dalam proses pengemasan, kemudian di ayak dengan ayakan mesh 30 dan
di ditimbang berat teh daun sirsak, kemudian di kemas ke dalam wadah, ditutup
dengan Aluminium foil, dan di simpan di refrigerator ± 40C (Sutisna, 2016; Adri
dan Hersoelistyorini 2013).
4.4 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan
4.4.1 Hasil penentuan panjang gelombang serapan maksimum
Hasil pengukuran panjang gelombang serapan maksimum larutan DPPH
(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 40 μg/mL dalam pelarut metanol menghasilkan
serapan maksimum pada panjang gelombang 516 nm. Panjang gelombang 516 nm
yang di peroleh, termasuk salah satu dalam kisaran panjang gelombang sinar
tampak yaitu 400-800 nm, serta termasuk dalam rentang panjang gelombang
27
DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) yang berkisar antara 515-520 nm (Gandjar
dan Rohman, 2012; Molyneux, 2004). Hasil pengukuran panjang gelombang
maksimum dapat dilihat pada Gambar 4.1 berikut ini:
Gambar 4.1 Kurva Serapan Maksimum Larutan DPPH (1,1-diphenyl-2-

picrylhydrazyl) 40 μg/mL Dalam Metanol p.a Menggunakan
Spektrofotometer UV-Visibel.
4.3.2 Hasil analisis aktivitas antioksidan teh daun sirsak
Hasil uji aktivitas antioksidan larutan teh daun sirsak dengan variasi waktu
penyeduhan yaitu 2 menit, 4 menit, 6 menit, 8 menit dan 10 menit menggunakan
perangkap DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) yang diukur pada panjang
gelombang maksimum 516 nm terlihat adanya penurunan nilai absorbansi DPPH
(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) sebanding dengan peningkatan konsentrasi
masing-masing teh. Penurunan absorbansi DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)
dan persen pemerangkapan dengan penambahan masing-masing dapat dilihat
pada Tabel 4.3 berikut:
28
Tabel 4.3 Penurunan absorbansi dan persen pemerangkapan DPPH oleh masing
masing variasi lama seduhan teh daun sirsak.
Larutan Uji Konsentrasi Absorbansi % Pemerangkapan

(μg/mL) I II III I II III Rata-
rata
Penyeduhan Blanko 0,864 0,867 0,864 0 0 0 0
2 menit 1500 0,487 0,485 0,487 42,43 44,05 43,634 43,37
2000 0,344 0,334 0,332 59,33 61,476 61,574 60,79
2500 0259 0,240 0,244 69,38 72,318 72,222 71,30
3000 0,207 0,206 0,201 75,53 76,239 76,736 76,16
4 menit 1500 0,409 0,404 0,407 53,73 54,401 54,320 54,15
2000 0,308 0,305 0,309 65,15 65,575 65,319 65,35
2500 0,203 0,233 0,238 77,03 73,702 73,288 74,67
3000 0,159 0,165 0,168 82,01 81,376 81,144 81,51
6 menit 1500 0,350 0,351 0,352 60,36 60,606 60,315 60,42
2000 0,208 0,207 0,205 76,44 77,441 76,888 76,92
2500 0,104 0,102 0,103 88,22 88,552 88,387 88,38
3000 0,070 0,071 0,071 92,07 92,031 91,995 92,03
8 menit 1500 0,289 0,290 0,297 67,19 67,342 66,478 67,00
2000 0,230 0,238 0,233 73,89 73,198 73,702 73,59
2500 0,092 0,088 0,100 89,55 90,090 88,713 89,45
3000 0,051 0,049 0,048 94,21 94,481 94,582 94,42
10 menit 1500 0,281 0,291 0,293 68,39 67,303 67,115 67,60
2000 0,227 0,211 0,208 74,46 76,292 76,655 75,80
2500 0,091 0,094 0,091 89,76 89,438 89,786 89,66
3000 0,048 0,041 0,039 94,60 95,393 95,622 95,20
Penurunan nilai absorbansi terjadi karena teh daun sirsak mampu
menetralisir DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) dengan memberikan elektron
kepada DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) sehingga atom dengan elektron
yang tidak berpasangan mendapat pasangan elektron dan tidak lagi menjadi
radikal (Silalahi, 2006).
Hal ini ditandai dengan warna larutan yang berubah dari ungu tua menjadi
kuning terang dan absorbansi pada panjang gelombang maksimumnya yang
menurun (Molyneux, 2004). Perubahan warna tersebut disebabkan oleh reaksi
antara radikal bebas DPPH dengan satu atom hidrogen yang dilepaskan senyawa
29
yang terkandung dalam bahan uji untuk membentuk senyawa 1,1-difenil-2-
picrilhidrazin yang berwarna kuning. Hubungan antara konsentrasi dengan persen
pemerangkapan radikal bebas DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) oleh masing-
masing variasi waktu seduhan teh daun sirsak dapat dilihat pada gambar berikut
ini:
Gambar 4.2 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Teh Daun Sirsak

Variasi Waktu Penyeduhan 2 Menit

30


31
Hasil analisis persamaan regresi linier dan hasil analisis nilai IC50 (μg/mL)
yang diperoleh dari larutan uji teh daun sirsak masing-masing dengan variasi
waktu seduhan dapat dilihat pada Tabel 4.4 dibawah ini:
Tabel 4.4 Hasil persamaan regresi linier dan hasil analisis IC 50 (μg/mL) yang
diperoleh dari masing-masing penyeduhan
Larutan Uji Persamaan regresi IC50 (μg/mL) Standart

error
Penyeduhan 2 y = 0,0264x + 2,6916 1787.7295 ±18.8180
menit
Penyeduhan 4 y = 0,0276x + 5,3359 1614.4716 ±6.81986
menit
Penyeduhan 6 y = 0,0319x + 6,07745 1375.5414 ±2.4078
menit
Penyeduhan 8 y = 0,0321x + 6,9753 1338.9451 ±3.0332
menit
Penyeduhan y = 0,0324x + 7,3353 1316.8222 ±1.8342
10 menit
Hasil perbandingan analisis IC50 (μg/mL) pada larutan uji teh daun sirsak
dengan masing-masing variasi waktu 2 menit, 4 menit, 6 menit, 8 menit dan 10
menit dapat dilihat pada Gambar 4.7 dibawah ini:
Gambar 4.7 Grafik hasil analisis IC50 (µg/mL) uji teh daun sirsak
dengan variasi waktu penyeduhan
32
Dari Tabel 4.4 menunjukkan aktivitas antioksidan larutan uji teh daun
sirsak dengan variasi waktu penyeduhan 2 menit, 4 menit, 6,menit 8 menit dan 10
menit menunjukkan kekuatan aktivitas antioksidan sangat lemah yaitu IC50 lebih
besar 150 (μg/mL) diduga karena belum lama kontak dengan pelarut sehingga
belum semua senyawa yang berpotensi sebagai antioksidan dapat terekstrak,
(Putri, dan Ulfin., 2015); Labbe dkk, 2006). Selain itu juga karena adanya
senyawa flavonoid dan polifenol yang masih berikatan dengan gugus glikosida.
Gugus glikosida yang berikatan dengan senyawa tersebut dapat menurunkan
aktivitas antioksidan. Aktivitas antioksidan akan meningkat dengan bertambahnya
gugus hidroksil dan akan menurun dengan adanya gugus glikosida. Selain itu
diduga karena glikosida flavonoid dalam bentuk aglikon yang bersifat non-polar
memiliki aktivitas antioksidan yang lebih tinggi jika dibandingkan dengan bentuk
glikonnya yang bersifat polar (Ridho, dkk., 2013; Satria, dkk., 2013).
Aktivitas antioksidan pada menit ke 6,8 dan 10 menunjukkan angka nilai
IC50 yang lebih baik dibandingkan penyeduhan menit ke 2 dan 4. Hal ini
dikarenakan lama kontak dengan pelarut lebih lama sehingga solubilitas senyawa
terekstrak lebih banyak dibandingkan penyeduhan menit ke 2 dan 4 (Mario dkk,
2010). Selain itu menurut Wansi dkk (2014) waktu seduhan yang lebih lama dari
4-8 menit tidak lagi memiliki efek yang menyenangkan karena daun teh sudah
tidak lagi mengandung komposisi apapun yang dianggap menenangkan.
Dari hasil uji statistika aktivitas antioksidan teh daun sirsak berdasarkan
variasi waktu seduhan di menit 2, 4, 6, 8 dan 10 menggunakan uji non parametrik
yaitu kurskal wallis karena dilihat dari uji normalitasnya terdapat satu data tidak
normal yaitu nilai shapiro-wilk data di penyeduhan 2 menit 0,018. Jika nilai
shapiro-wilk < 0,05 maka data tidak normal dan sebaliknya. Selain itu data
33
pengujian lebih dari dua kelompok bukan data tunggal sehingga menggunakan uji
statistika kurskal wallis. Dimana hasil uji kurskal wallis nilai a-symp sig yaitu
0,009. Jika nilai a-symp sig < batas kritis (0,05) maka keputusan hipotesis adalah
menerima H1 dan menolak H0 yang berarti terdapat perbedaan variabel bebas
terhadap variabel terikat. Untuk melihat perbedaan uji statistika terhadap teh
dilanjutkan dengan uji mann whitney dari masing-masih data sampel, dimana
hasil uji mann whitney yaitu dari seduhan 2 menit, 4 menit, 6 menit, 8 menit dan
10 menit menunjukkan Nilai Sig atau P Value sebesar 0,05. Apabila nilai p value
< batas kritis 0,05 maka terdapat perbedaan bermakna antara dua kelompok atau
yang berarti H1 diterima. Sehingga dapat disimpulkan berdasarkan uji statistika
teh daun sirsak berdasarkan variasi lama seduhan terdapat perbedaan secara
signifikan.
34
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan:
a. Hasil pemeriksaan skrining fitokimia pada teh daun sirsak terdapat
senyawa yang berpotensi sebagai antioksidan adalah senyawa polifenol
seperti flavonoid, tannin dan alkaloid.
b. Hasil pemeriksaan aktivitas antioksidan teh daun sirsak dengan variasi
waktu seduhan memiliki aktivitas antioksidan tergolong lemah di lihat dari
nilai IC50 diperoleh lebih dari 150 µg/ mL.
c. Hasil uji statistika kurskal wallis aktivitas antioksidan teh daun sirsak
dengan variasi lama penyeduhan 2 menit, 4 menit, 6 menit, 8 menit dan
10 menit terdapat perbedaan secara signifikan.
5.2 Saran
Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk melakukan pengujian
aktivitas antioksidan dari fraksi ekstrak daun sirsak menggunakan
spektrofotometri sinar tampak.
35
DAFTAR PUSTAKA
Adri, D., dan Hersoelistyorini, W. (2013). Aktivitas Antioksidan dan Sifat Organo
leptik Teh Daun Sirsak (Annona Muricata Linn) Berdasarkan Variasi Lama
Pengeringan. Jurusan Teknologi Pangan. Fakultas Pertanian. Universitas
Muhammadiyah Semarang.Vol. 04 No 7 Tahun 2013. Halaman 1-12.
Astatin, G. R. (2014). Pemanfaatan Daun Sirsak (Annona muricata Linn) dan

Kulit Jeruk Purut (Cytrus hystrix) Sebagai Bahan Dasar Pembuatan Teh
Dengan Variasi Lama Pengeringan. Skripsi. Surakarta: Universitas
Muhammadiyah Surakarta. Halaman 10-13.
Daroini, O. S. (2006). Kajian Proses Pembuatan The Herbal Dari Campuran The
Hijau (Camelia sinensis), Rimpang Bangle (Zingiber cassumunar Roxb.)
dan Daun Ceremai (Phyllantusacidus (L.) Skeels). Fakultas Teknologi
Pertanian IPB. Halaman 12.
Depkes, R. I. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 1,10-11
Farnworth, N. R. (1966). Biological and Phytochemical Screening of Plants. J.

Pharm. Sci. Halaman 55.
Gandjar, I. G., dan Rohman, A. (2012). Kimia Farmasi Analisis. Cetakan Ketiga.
Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 222, 254-255.
Harborne, J. B. (1987). Metode Fitokimia. Penuntun Cara Modern Menganalisa

Tumbuhan. Terjemahan Kosasih Padmawinata. Edisi II. Bandung: ITB
Press. Halaman 147
Hariana, H. A. (2011). Tumbuhan Obat dan Khasiatnya Seri 3. Edisi 1. Jakarta:

Penebar Swadaya. Halaman 89
Harun, N., Efendi, R., dan Simanjuntak, L. (2014). Penerimaan Panelis terhadap
Teh Herbal Dari kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.) Dengan
Perlakuan Suhu Pengeingan. Universitas Riau Pekan Baru, Program Studi
Teknologi Hasil Pertanian. ISSN Vol. 13 No. 2. Halaman: 7-18.
Joe, W. (2012). Dahsyatnya Khasiat Sirsak Untuk Banyak Penyakit Yang

Mematikan. Yogyakarta: Andi Offset. Halaman 1-5.
Labbe D., Tremblay A., dan Bazinet L. (2006). Effect Of Bewing Temperature and
Duration On Green Tea Catechin Solubilization: Basis Of Roduction
Of EGC and EGCG Enriched Fractions. Separation and Purification Tech
nology. 49:1 - 9.
36
Molyneux, P. (2004). The Use of the Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl
(DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J. Sci.
Technol. 26(2): 211-219.
Naithani, V., Nair, S., Kakkar, P., (2005). Decline In Antioxidant Capacity Of Indi
an Herbal Teas During Storage And Its Relation To Phenolic Content. Foo
d Research International 39 (2006) 176–181.
Putri, D. D dan Ulfin, I. (2015). Pengaruh Suhu dan Waktu Ekstraksi Terhadap
Kadar Kafein Dalam Teh Hitam. Journal Program Studi Kimia Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Teknologi Sepuluh
Nopember, Surabaya Vol 4. Halaman 105.
Ramadhan, P. (2015). Mengenal Antioksidan. Yogyakarta: Graha ilmu. Halaman

1-5.
Ridho, E. A., Sari, R., dan Wahdaningsih, S. (2013). Uji Aktivitas Antioksidan
Ekstrak Metanol Buah Lakum Dengan Metode DPPH. Program Studi
Farmasi Fakultas Kedokteran, Universitas Tanjung Pura, Pontianak.
Halaman 1-9.
Rosidah, Y. M., Sadikun, A., dan Asmawi, M. (2008). Antioxidant Potential of

Gynura Procumbens. Pharmaceutical Biology. 46(9): 616-625.
Sastrohamidjojo, H. (1985). Spektroskopi. Yogyakarta: Liberty Yogyakarta.

Halaman 39-42.
Satria, M. D., Sari, R., dan Wahdaningsih, S. (2013). Uji Aktivitas Antioksidan
Ekstrak n-Heksan Buah Lakum (Cayratiatrifolia) dengan Metode DPPH
(2,2Difenil1-pikrilhidrazil). Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran,
Universitas Tanjung Pura, Pontianak.Halaman 1-10.
Salamah, N dan Widyasari, E. (2015). Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol

Daun Kelengkeng (Euphoria longan L Steud.) Dengan Metode
Penangkapan Radikal 2,2’ Difenil-1-Pikrilhidrazil. Yogyakarta: Fakultas
Farmasi Universitas Ahmad Dahlan. Halaman 26-27.
Sayuti, K. (2015). Antioksidan Alami dan Sintetik. Padang: Perguruan Tinggi

Indonesia (APPTI). Halaman 63.
Silalahi, J. (2006). Makanan Fungsional. Yogyakarta: Kanisius. Halaman 41, 47-

48, 121.
Sudaryat,Y., Kusmiyati, M., Pelangi C. R, dan Rustamsyah, A., Rohdiana, D.

(2015). Aktivitas Antioksidan Seduhan Sepuluh Jenis Mutu Teh Hitam
(Camellia sinensis (L) o. Kuntze) Indonesia. Jurusan Farmasi Politeknik
Kesehatan Kementerian Kesehatan Bandung. Halaman 99.
37
Sutisna, N. (2016). Pengaruh pH Larutan Penyeduh dan Lama Penyeduhan
Terhadap Kapasitas Antioksidan Ekstrak Teh Daun Sirsak (Annona
muricata Linn). Journal Institut Pertanian Bogor Vol 1. IPB. Halaman 10-
15.
Utari K., Nursafitri, E., Sari A, I., Sari, R., Winda A. K., Harti, A. (2013).
Kegunaan Daun Sirsak (Annona muricata L) Untuk Membunuh Sel
Kanker Dan Pengganti Kemoterapi. Surakarta: Program S-1 Keperawatan
STIKes Kusuma Husada. Halaman 2 - 3.
Wansi, S., Theopilus, W dan Syahran W. (2014). Analisis Kadar Klorin Pada Teh
Celup Berdasarkan Waktu Seduhan. Alumni Program Studi Pendidikan
Biologi. Halaman 25.
Winarsi, H. (2007). Antioksidan Alami dan Radikal Bebas Potensi dan
Aplikasinya Dalam Kesehatan. Yogyakarta: Kanisius. Halaman 12, 17.
Winarsi, H. (2014). Antioksidan Daun Kapulaga Aplikasinya di Bidang

Kesehatan. Yogyakarta: Graha Ilmu. Halaman 38, 42-43.
WHO. (1998). Quality Control Methods for Medicinal Plant Materials.

Hongkong: Printed in England. Halaman 36
Zuhud, E. A. M. (2011). Kanker Lenyap Berkat Sirsak. Jakarta: Agromedia

Pustaka. Halaman 25, 35, 48.
38
Lampiran 1. Identifikasi Tumbuhan
39
Lampiran 2. Bagan kerja penelitian
1. Uji Tanin
2. Uji Flavonoid
3. Uji Alkaloid
Uji skrining
4. Uji Glikosidik
fitokimia
5. Uji Saponin
6. Uji Steroid dan
Daun Sirsak
Terpenoid
1. Sortasi daun sirsak dan
Pengolahan dibersihkan dengan air
pembuatan teh mengalir
daun sirsak 2. Pelayuan daun sirsak
selama 18 jam pada
suhu kamar.
3. Pengeringan daun
sirsak dengan oven
listrik suhu ± 500c
selama ± 150 menit.
4. Diblender dan diayak
dengan mess 30 untuk
membuat bubuk teh
Bubuk tehsirsak
daun dengan variasi
penyeduhan
5. di simpan di
refrigerator ± 40C
Penyeduhan Penyeduhan Penyeduhan Penyeduhan Penyeduhan

2 menit 4 menit 6 menit 8 menit 10 menit
Pengenceran Pengenceran Pengenceran Pengenceran Pengenceran
-1500 µg/mL -1500 µg/mL -1500 µg/mL -1500 µg/mL -1500 µg/mL
Uji Aktivitas Antioksidan dengan

Perangkap DPPH dengan Alat
Spektrofotometer Uv-Vis
40
Lampiran 3. Sampel yang digunakan
2 1
3
4
5
6
Pohon Sirsak Urutan Daun Sirsak
Daun Sirsak Segar Daun Sirsak Kering

Keterangan Gambar :
1. Daun sirsak urutan 1
Teh Daun Sirsak
41
Lampiran 4. Gambar Seperangkat Alat Spektrofotometer UV-Visibel
(UV 1800 - Shimadzu)
42
Lampiran 5. Perhitungan Pembuatan larutan blanko DPPH 0,5 mM
≈ 20 mg
Jadi, serbuk DPPH yang ditimbang adalah 20 mg untuk membuat larutan

blanko DPPH 0,5 mM didalam volume 100 ml.
43
Lampiran 6. Hasil Pengukuran Operating Time
Time Raw Data

(Minute)
0.0000 0.8484
1.0000 0.8458
2.0000 0.8422
3.0000 0.8394
4.0000 0.8356
5.0000 0.8336
6.0000 0.8321
7.0000 0.8309
8.0000 0.8300
9.0000 0.8292
10.0000 0.8286
11.0000 0.8291
12.0000 0.8289
13.0000 0.8286
14.0000 0.8288
15.0000 0.8288
16.0000 0.8288
17.0000 0.8293
18.0000 0.8292
19.0000 0.8293
20.0000 0.8301
21.0000 0.8309
22.0000 0.8323
23.0000 0.8344
24.0000 0.8370
25.0000 0.8378
26.0000 0.8388
27.0000 0.8400
28.0000 0.8403
29.0000 0.8408
30.0000 0.8417
31.0000 0.8422
32.0000 0.8424
33.0000 0.8421
34.0000 0.8421
35.0000 0.8422
36.0000 0.8427
37.0000 0.8448
38.0000 0.8438
39.0000 0.8447
40.0000 0.8456
41.0000 0.8468
42.0000 0.8475
44
Lampiran 6. (Lanjutan)
43.0000 0.8485
44.0000 0.8496
45.0000 0.8499
46.0000 0.8506
47.0000 0.8506
48.0000 0.8507
49.0000 0.8508
50.0000 0.8513
51.0000 0.8517
52.0000 0.8527
53.0000 0.8529
54.0000 0.8531
55.0000 0.8534
56.0000 0.8536
57.0000 0.8539
58.0000 0.8542
59.0000 0.8544
60.0000 0.8551
45
Lampiran 7. Hasil uji aktivitas antioksidan.
7.1 Tabel Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Teh Daun Sirsak Pada Waktu 2 Menit
8 Laruta Konsentrasi Absorbansi % Pemerangkapan
n Uji (μg/mL) I II III I II III Rata-
rata
2 menit 1500 0,487 0,485 0,487 42,43 44,05 43,634 43,37
2000 0,344 0,334 0,332 59,33 61,476 61,574 60,79
2500 0259 0,240 0,244 69,38 72,318 72,222 71,30
3000 0,207 0,206 0,201 75,53 76,239 76,736 76,16
rata
4 menit 1500 0,409 0,404 0,407 53,73 54,401 54,320 54,15
2000 0,308 0,305 0,309 65,15 65,575 65,319 65,35
2500 0,203 0,233 0,238 77,03 73,702 73,288 74,67
3000 0,159 0,165 0,168 82,01 81,376 81,144 81,51
rata
6 menit 1500 0,350 0,351 0,352 60,36 60,606 60,315 60,42
2000 0,208 0,207 0,205 76,44 77,441 76,888 76,92
2500 0,104 0,102 0,103 88,22 88,552 88,387 88,38
3000 0,070 0,071 0,071 92,07 92,031 91,995 92,03
rata
8 menit 1500 0,289 0,290 0,297 67,19 67,342 66,478 67,00
2000 0,230 0,238 0,233 73,89 73,198 73,702 73,59
2500 0,092 0,088 0,100 89,55 90,090 88,713 89,45
3000 0,051 0,049 0,048 94,21 94,481 94,582 94,42
46
7.5 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Teh Daun Sirsak Pada Waktu 10 Menit
rata
10 menit 1500 0,281 0,291 0,293 68,39 67,303 67,115 67,60
2000 0,227 0,211 0,208 74,46 76,292 76,655 75,80
2500 0,091 0,094 0,091 89,76 89,438 89,786 89,66
3000 0,048 0,041 0,039 94,60 95,393 95,622 95,20
47
Lampiran 8. Perhitungan Persen Pemerangkapan Dan Perhitungan Nilai IC 50
8.1 Perhitungan persen pemerangkapan teh daun sirsak variasi waktu 2 menit.
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 1
No. Konsentrasi Larutan Uji (μg/mL) Absorbansi
1 0 0,846
2 1500 0,487
3 2000 0,344
4 2500 0259
5 3000 0,207
Aktivitas pemerangkapan (%) = x 100%
A kontrol
Keterangan : Akontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel

Asampel = Absorbansi sampel
1. Konsentrasi 1500 µg/mL

0,846 - 0,487
0,846
= 42,4349
0,846 - 0,344
0,846
= 59,3380
0,846 - 0,259
0,846
= 69,3853
0,846 - 0,207
0,846
= 75,5319
48
Tabel IC50 dari teh daun sirsak pengukuran 1 waktu 2 menit
X Y
XY X2
(µg/mL) (% pemerangkapan)
0 0 0 0
1500 42,4349 63652,35 2250000
2000 59,3380 118676 4000000
2500 69,3853 173463,25 6250000
3000 75,5319 226595,7 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 246,6901 ΣXY = ΣX2 =

X = 1800 Y = 49,33802 582387,3 21500000
Keterangan: X = Konsentrasi (μg/mL)

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(582387,3)  (9000)(246,6901) / 5 138345,12

=   0,0261
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 49,33802 – (0,0261)(1800) = 2,3580
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,0261x +2,3580
Nilai IC50 = y = 0,0261x + 2,3580
50 = 0,0261x +2,3580
X = 1825,3639
IC50 = 1825,3639 µg/mL
49
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 2 waktu 2 menit
No. Konsentrasi Larutan Uji (µg/mL) Absorbansi
1 0 0,867
2 1500 0,485
3 2000 0,334
4 2500 0,240
5 3000 0,206
A kontrol


0,867 - 0,485
0,867
= 44,0599
0,867 - 0,334
0,867
= 61,4763
0,867 - 0,240
0,867
= 72,3183
0,867 - 0,206
0,867
= 76,2399
50
X Y
XY X2
(µg/mL) (%Pemerangkapan)
0 0 0 0
1500 44,0599 65655 2250000
2000 61,4763 122140 4000000
2500 72,3183 178400 6250000
3000 76,2399 228990 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 254,0935 ΣX2 =

ΣXY = 598557,9
X = 1800 Y = 50,8187 21500000

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(598557,9)  (9000)(254,0935) / 5 141189.6

=   0,0266
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 50,8187 – (0,0266)(1800) = 2,9387
Nilai IC50 = y = 0,0266x + 2,9387
50 = 0,0266x +2,9387
X = 1769,2218
IC50 = 1769,2218 µg/mL
51
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 3 waktu 2 menit
1 0 0,864
2 1500 0,487
3 2000 0,332
4 2500 0,244
5 3000 0,201
A kontrol


0,864 - 0,487
0,864
= 43,6342
0,864 - 0,332
0,864
= 61,5740
0,864 - 0,240
0,864
= 72,2222
0,864 - 0,201
0,864
= 76,7361
52
X Y
XY X2
0 0 0 0
1500 43,6342 65655 2250000
2000 61,5740 122140 4000000
2500 72,2222 178400 6250000
3000 76,7361 228990 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 254,1665
ΣXY = 599363,1 ΣX2 = 21500000
X = 1800 Y = 50,8383

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(599363,1)  (9000)(254,1665) / 5 141863,4

=   0,0267
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 50,8383 – (0,0267)(1800) = 2,7783
Nilai IC50 = y = 0,0267x + 2,7783
50 = 0,0267x +2,7783
X = 1768,6069
IC50 = 1768,6069 µg/mL
53
Lampiran 8.( Lanjutan)
8.2 Perhitungan persen pemerangkapan teh daun sirsak waktu 4 menit
1 0 0,884
2 1500 0,409
3 2000 0,308
4 2500 0,203
5 3000 0,159
A kontrol


0,884 - 0,409
0,884
= 53,7330
0,884 - 0,308
0,884
= 65,1583
0,884 - 0,203
0,884
= 77,0361
0,884 - 0,159
0,884
= 82,0135
54
X Y
XY X2
0 0 0 0
1500 53,7330 80599,5 2250000
2000 65,1583 130316,6 4000000
2500 77,0361 192590,25 6250000
3000 82,0135 246040,5 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 277,9409 ΣXY = ΣX2 =

X = 1800 Y = 55,5818 649540,9 21500000

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(649540,9)  (9000)(277,9409) / 5 149247.28

=   0,0281
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 55,5818 – (0,0281)(1800) = 5,0018
Nilai IC50 = y = 0,0281x + 5,0018
50 = 0,0281x +5,0018
X = 1601,3594
IC50 = 1601,3594 µg/mL
55
Tabel data absorbansi DPPH pengukuran 2 pada waktu 4 menit
1 0 0,886
2 1500 0,404
3 2000 0,305
4 2500 0,233
5 3000 0,165
A kontrol

0,886 - 0,404
0,886
= 54,4018
0,886 - 0,305
0,886
= 65,5756
0,886 - 0,233
0,886
= 73,7020
0,886 - 0,165
0,886
= 81,3769
56
X Y
XY X2
0 0 0 0
1500 54,4018 81602,7 2250000
2000 65,5756 131151,2 4000000
2500 73,7020 184255 6250000
3000 81,3769 244130,7 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 275,0563 ΣXY = ΣX2 =

X = 1800 Y = 55,0112 641139,6 21500000

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(641139,6)  (9000)(275,0563) / 5 146038,26

=   0,0275
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 55,0112 – (0,0275)(1800) = 5,5112
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,0275x + 5,5112
Nilai IC50 = y = 0,0275x + 5,5112
50 = 0,0275x + 5,5112
X = 1617,7745
IC50 = 1617,7745 µg/mL
57
Lampiran 8. Lanjutan Perhitungan nilai IC50
1 0 0,891
2 1500 0,407
3 2000 0,309
4 2500 0,238
5 3000 0,168
A kontrol

0,891 - 0,407
0,891
= 54,3209
0,891 - 0,309
0,891
= 65,3198
0,891 - 0,238
0,891
= 73,2884
0,891 - 0,168
0,891
= 81,1447
58
Tabel IC50 dari teh daun sirsak pengukuran waktu 4 menit
X Y
XY X2
0 0 0 0
1500 54,3209 81481,35 2250000
2000 65,3198 130639,6 4000000
2500 73,2884 183221 6250000
3000 81,1447 243434,1 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 274,0738 ΣX2 =

ΣXY = 638776
X = 1800 Y = 54,8147 21500000

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(638776)  (9000)(274,0738) / 5 145443,16

=   0,0274
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 54,8147 – (0,0274)(1800) = 5,4947
Nilai IC50 = Y = 0,0274x + 5,4947

50 = 0,0274x + 5,4947
X = 1624,2810
IC50 = 1624,2810 µg/mL
59
1 0 0,883
2 1500 0,350
3 2000 0,208
4 2500 0,104
5 3000 0,070
A kontrol

1.Konsentrasi 1500 µg/mL

0,883 - 0,350
0,883
= 60,3624
0,883 - 0,208
0,883
= 76,4439
0,883 - 0,104
0,883
= 88,2219
0,883 - 0,070
0,883
= 92,0724
60
X Y
XY X2
0 0 0 0
1500 60,3624 90543,6 2250000
2000 76,4439 152887,8 4000000
2500 88,2219 220554,75 6250000
3000 92,0724 276217,2 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 371,1006 ΣX2 =

ΣXY = 740203,4
X = 1800 Y = 63,4201 21500000

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(740203,4)  (9000)(371,1006) / 5 72222.32

=   0,0319
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 63,4201 – (0,0319)(1800) = 6,0001
Nilai IC50 = y = 0,0319x + 6,0001
50 = 0,0319x + 6,0001
X = 1379,3079
IC50 = 1379,3079 µg/mL
61
1 0 0,891
2 1500 0,351
3 2000 0,207
4 2500 0,102
5 3000 0,071
A kontrol


0,891 - 0,351
0,891
= 60,6060
0,891 - 0,201
0,891
= 77,4410
0,891 - 0,102
0,891
= 88,5521
0,891 - 0,071
0,891
= 92,0314
62
X Y
XY X2
0 0 0 0
1500 60,6060 90909 2250000
2000 77,4410 154882 4000000
2500 88,5521 221380,25 6250000
3000 92,0314 276094,2 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 318,6305 ΣXY = ΣX2 =

X = 1800 Y = 63,7261 743265,5 21500000

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(743265,5)  (9000)(318,6305) / 5 169730,6

=   0,0320
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 63,7261 – (0,0320)(1800) = 6,1261
Nilai IC50 = y = 0,0320x + 6,1261
50 = 0,0320x +6,1261
X = 1371,0593
IC50 = 1371,0593 µg/mL
63
1 0 0,887
2 1500 0,352
3 2000 0,205
4 2500 0,103
5 3000 0,071
A kontrol

0,887 - 0,352
0,887
= 60,3156
2.Konsentrasi 2000 µg/mL
0,887 - 0,205
0,887
= 76,8883
0,887 - 0,103
0,887
= 88,3878
0,887 - 0,071
0,887
= 91,9954
64
X Y
XY X2
0 0 0 0
1500 60,3156 90470,4 2250000
2000 76,8883 153776,6 4000000
2500 88.3878 220969,5 6250000
3000 91,9954 275986,2 9000000
ΣX =
9000 ΣY = 317,5871
ΣXY = 741205,7 ΣX2 = 21500000
X = Y = 63,5174
1800
Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(741205,7)  (9000)(317,5871) / 5 72348,92

=   0,0319
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 63,5174 – (0,0319)(1800) = 6,0974
Nilai IC50 = Y = 0,0319x + 6,0974

50 = 0,0192x + 6,0974
X = 1376,2570
IC50 = 1376,2570µg/mL
65
1 0 0,881
2 1500 0,289
3 2000 0,230
4 2500 0,092
5 3000 0,051
A kontrol


0,881 - 0,289
0,881
= 67,1963
0,881 - 0,230
0,881
= 73,8933
0,881 - 0,092
0,881
= 89,5573
0,881 - 0,051
0,881
= 94,2111
66
Tabel IC50 dari teh daun sirsak pengukuran 1waktu 8 menit
Y
X(µg/mL) XY X2
(%Pemerangkapan)
0 0 0 0
1500 67,1963 100794,45 2250000
2000 73,8933 147786,6 4000000
2500 89,5573 223893,25 6250000
3000 94,2111 282633,3 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 324,858 ΣXY = ΣX2 =

X = 1800 Y = 64,9716 755107,6 21500000

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(755107,6)  (9000)(324,858) / 5 170363,2

=   0,0321
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 64,9716 – (0,0321)(1800) = 7,1124
Nilai IC50 = y = 0,0321x + 7,1124
50 = 0,0321x +7,1124
X = 1336,0623
IC50 = 1336,0623 µg/mL
67
1 0 0,888
2 1500 0,290
3 2000 0,238
4 2500 0,088
5 3000 0,049
A kontrol


0,888 - 0,290
0,888
= 67,3423
0,888 - 0,238
0,888
= 73,1981
0,888 - 0,088
0,888
= 90,0900
0,888 - 0,049
0,888
= 94,4819
68
Y
X(µg/mL) XY X2
(%Pemerangkapan)
0 0 0 0
1500 67,3423 101013,45 2250000
2000 73,1981 146396,2 4000000
2500 90,0900 225225 6250000
3000 94,4819 283445,7 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 325,1123 ΣXY = ΣX2 =

X = 1800 Y = 65,0224 756080,4 21500000

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(756080,4)  (9000)(325,1123) / 5 170878,26

=   0,0322
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 65,0224 – (0,0322)(1800) = 6,9884
Nilai IC50 = y = 0,0322x + 6,9884
50 = 0,0322x + 6,9884
X = 1335,7639
IC50 = 1335,7639 µg/mL
69
1 0 0,886
2 1500 0,297
3 2000 0,233
4 2500 0,100
5 3000 0,048
A kontrol

0,886 - 0,297
0,886
= 66,4785
0,886 - 0,233
0,886
= 73,7020
0,886 - 0,100
0,886
= 88,7133
4 Konsentrasi 3000 µg/mL
0,886 - 0,048
0,886
= 94,5823
70
Y
X(µg/mL) XY X2
(%Pemerangkapan)
0 0 0 0
1500 66,4785 99717,75 2250000
2000 73,7020 147404 4000000
2500 88,7133 221783,25 6250000
3000 94,5823 283746,9 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 323,4761 ΣXY = ΣX2 =

X = 1800 Y = 64,6952 752651,9 21500000

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(752651,9 )  (9000)(323,4761) / 5 170394,92

=   0,0321
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 64,6952 – (0,0321)(1800) = 6,8252
Nilai IC50 = Y = 0,0322x +6,8252

50 = 0,0321x + 6,8252
X = 1345,0093
IC50 = 1345,0093 µg/mL
71
1 0 0,889
2 1500 0,281
3 2000 0,227
4 2500 0,091
5 3000 0,048
A kontrol


0,889 - 0,281
0,889
= 68,3914
0,889 - 0,227
0,889
= 74,4656
0,889 - 0,091
0,889
= 89,7637
0,889 - 0,048
0,889
= 94,6006
72
Tabel IC50 dari teh daun sirsak waktu 10 menit
X(µg/mL) Y(%) XY X2
0 0 0 0
1500 68,3914 102587,1 2250000
2000 74,4656 148931,2 4000000
2500 89,7637 224409,25 6250000
3000 94,6006 283801,8 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 327,2213
ΣXY = 759729,4 ΣX2 = 21500000
X = 1800 Y = 65,4442

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(759729,4)  (9000)(327,2213) / 5 170731,06

=   0,0322
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 65,4442 – (0,0322)(1800) = 7,4842
Nilai IC50 = y = 0,0322x + 7,4842
50 = 0,0322x + 7,4842
X = 1320,3664
IC50 = 1320, 3664 µg/mL
73
1 0 0,890
2 1500 0,291
3 2000 0,211
4 2500 0,094
5 3000 0,041
A kontrol


0,890 - 0,291
0,890
= 67,3033
0,890 - 0,211
0,890
= 76,2921
0,890 - 0,094
0,890
= 89,4382
0,890 - 0,041
0,890
= 95,3932
74
X(µg/ml) Y(%) XY X2
0 0 0 0
1500 67,3033 100954,95 2250000
2000 76,2921 152584,2 4000000
2500 89,4382 223595,5 6250000
3000 95,3932 286179,6 9000000
ΣX = 9000 ΣY = 3284268
ΣXY = 763314,3 ΣX2 = 21500000
X = 1800 Y = 65,6853

Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(763314,3)  (9000)(328,4268) / 5 172146,06

=   0,0324
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 65,6853 – (0,0324)(1800) = 7,3658
Nilai IC50 = y = 0,0324x + 7,3658
50 = 0,0324x + 7,3658
X = 1315,8703
IC50 = 1315,8703 µg/mL
75
1 0 0,891
2 1500 0,293
3 2000 0,208
4 2500 0,091
5 3000 0,039
A kontrol

0,891 - 0,293
0,891
= 67,1156
0,891 - 0,208
0,891
= 76,6554
0,891 - 0,091
0,891
= 89,7867
0,891 - 0,039
0,891
= 95,6228
76
Y
X(µg/mL) XY X2
(%Pemerangkapan)
0 0 0 0
1500 67,1156 100673,4 2250000
2000 76,6554 153310,8 4000000
2500 89,7867 224466,75 6250000
3000 95,6228 286868,4 9000000
ΣX =
ΣY = 329,1805 ΣX2 =
9000 ΣXY = 765319,4
Y = 65,8361 21500000
X = 1800
Y = % Pemerangkapan
( XY) - ( X)( Y) / n
a =
( X 2 )  ( X) 2 / n
(765319,4 )  (9000)(329,1805) / 5 172794,5

=   0,0326
(21500000)  (9000) 2 / 5 5300000
b = Y  aX
= 65,8361 – (0,0326)(1800) = 7,1561
Nilai IC50 = Y = 0,0326x + 7,1561

50 = 0,0326x + 7,1561
X = 1314,2300
IC50 = 1314,2300 µg/mL
77
Lampiran 9. Uji statistika
Descriptives
Perlakuan Statistic Std. Error
2 menit Mean 1787.729533 18.8180315
95% Confidence Lower Bound 1706.762079
Interval for Mean Upper Bound 1868.696988
5% Trimmed Mean .
Median 1769.221800
Variance 1062.355
Std. Deviation 32.5937866
Minimum 1768.6029
Maximum 1825.3639
Range 56.7610
Interquartile Range .
Skewness 1.731 1.225
Kurtosis . .
4 menit Mean 1614.471633 6.8198639
5% Trimmed Mean .
Median 1617.774500
Variance 139.532
Minimum 1601.3594
Maximum 1624.2810
Range 22.9216
Skewness -1.160 1.225
Kurtosis . .
6 menit Mean 1375.541400 2.4078976
5% Trimmed Mean .
Median 1376.257000
Variance 17.394
Minimum 1371.0593
Maximum 1379.3079
Range 8.2486
Skewness -.749 1.225
8 menit Mean 1338.945167 3.0332900

5% Trimmed Mean .
Median 1336.062300
78
Variance 27.603
Minimum 1335.7639
Maximum 1345.0093
Range 9.2454
Kurtosis . .
Mean 1316.822233 1.8342559
95% Confidence Interval for Lower Bound 1308.930067
Mean Upper Bound 1324.714399
5% Trimmed Mean .
Median 1315.870300
Variance 10.093
Minimum 1314.2300
Maximum 1320.3664
Range 6.1364
Kurtosis . .
Tests of Normality
perlaku Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
an Statistic df Sig. Statist Df Sig.
ic
kadar 2 menit .382 3 . .758 3 .018
4 menit .277 3 . .941 3 .533
6 menit .235 3 . .978 3 .715
8 menit .375 3 . .774 3 .054
10 .284 3 . .933 3 .499
menit
Kruskal-Wallis Test
a,b
Test Statistics
kadar
Chi-Square 13.500
df 4
Asymp. Sig. .009
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable: perlakuan
79
Mann-Whitney Test
Ranks
perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
kadar 2 menit 3 5.00 15.00
4 menit 3 2.00 6.00
Total 6
Test Statisticsa
kadar
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 6.000
Z -1.964
Asymp. Sig. (2-tailed) .050
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .100b
a. Grouping Variable: perlakuan
b. Not corrected for ties.
Mann-Whitney Test
Ranks
kadar 4 menit 3 5.00 15.00
6 menit 3 2.00 6.00
Total 6
Test Statisticsa
kadar
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 6.000
Z -1.964
Asymp. Sig. (2- .050
tailed)
Exact Sig. [2*(1- .100b
tailed Sig.)]
80
Mann-Whitney Test
Ranks
kadar 6 menit 3 5.00 15.00
8 menit 3 2.00 6.00
Total 6
Test Statisticsa
kadar
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 6.000
Z -1.964
Exact Sig. [2*(1-tailed .100b
Sig.)]
Mann-Whitney Test
Ranks
kadar 8 menit 3 5.00 15.00
10 menit 3 2.00 6.00
Total 6
Test Statisticsa
kadar
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 6.000
Z -1.964
Exact Sig. [2*(1-tailed .100b
Sig.)]
81

Uji Aktivitas Antioksidan Pada Teh Daun Sirsak (Annona Muricata L.) TERHADAP VARIASI LAMA Penyeduhan Menggunakan Spektrofotometri Sinar Tampak

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Uji Aktivitas Antioksidan Pada Teh Daun Sirsak (Annona Muricata L.) TERHADAP VARIASI LAMA Penyeduhan Menggunakan Spektrofotometri Sinar Tampak

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PADA TEH DAUN SIRSAK

(Annona muricata L.) TERHADAP VARIASI LAMA

PROGRAM STUDI EKSTENSI SARJANA FARMASI

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh

PROGRAM STUDI EKSTENSI SARJANA FARMASI

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PADA TEH DAUN SIRSAK

Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi

Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt.

Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.

Prof. Dr. Masfria, M.Si., Apt.

karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi

muricata l.) terhadap Variasi Lama Penyeduhan Menggunakan Spektrofotometri

gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-

Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di

meluangkan waktu dan tenaga dalam membimbing penulis dengan penuh

kesabaran dan tanggung jawab, memberikan petunjuk dan saran-saran selama

penulis selama masa perkuliahan hingga selesai. Penulis juga mempersembahkan

selesainya penulisan skripsi ini.

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum

skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.

Medan, Oktober 2017

Saya yang bertanda tangan dibawah ini :

Program Studi : S-1 Ekstensi Farmasi

menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggng jawab pembimbing.

digunakan jika diperlukan sebagai mana mestinya.

Medan, Oktober 2017

Antioksidan adalah senyawa yang mampu menangkal atau merendam

Antioxidants are compounds that can counteract or soak free radicals

Keywords: Antioxidant, DPPH, Phytochemical Screening, Soursop Tea and

HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................... iii

KATA PENGANTAR ..................................................................................... iv

SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT................................................. vi

ABSTRAK ....................................................................................................... vii

ABSTRACK .................................................................................................... vii

DAFTAR ISI ................................................................................................... ix

DAFTAR TABEL ........................................................................................... xi

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xii

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xv

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1

1.1 Latar Belakang ............................................................................ 1

1.2 Perumusan Masalah .................................................................... 3

1.3 Hipotesis .................................................................................... 3

1.4 Tujuan Penelitian ........................................................................ 3

1.5 Manfaat Penelitian ...................................................................... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 5

2.1 Tumbuhan Sirsak ........................................................................ 5

2.2 Teh ............................................................................................... 6

2.3 Radikal Bebas .............................................................................. 9

2.4 Antioksidan .................................................................................. 10

2.5 Penentuan Aktivitas Antioksidan Dengan metode DPPH ........... 12

2.6 Spektrofotometer Visibel ............................................................. 13

2.8 Waktu Pengukuran ....................................................................... 16

BAB III METODE PENELITIAN................................................................... 16

3.1 Alat ............................................................................................. 16

3.2 Bahan ........................................................................................... 16

3.3 Pembuatan Pereaksi ..................................................................... 17

3.3.1 Pereaksi Besi (III) Klorida 1% .......................................... 17

3.3.2 Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4M ..................................... 17

3.3.3 Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N ..................................... 17

3.3.4 Pereaksi Asam Klorida 2 N ............................................... 17

3.3.5 Pereaksi Asam Sulfat 2 N ................................................. 17