PDF

Universitas Sumatera Utara
Repositori Institusi USU http://repositori.usu.ac.id

Fakultas Farmasi Tesis Magister
2017
Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak

Etanol Daun Sambung Rambat (Mikania
micrantha Kunth.) Terhadap
Angiogenesis Luka Eksisi Terinfeksi
Pada Marmut
Harahap, Nina Irmayanti
http://repositori.usu.ac.id/handle/123456789/702
Downloaded from Repositori Institusi USU, Univsersitas Sumatera Utara
TESIS
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI GEL EKSTRAK ETANOL

DAUN SAMBUNG RAMBAT (Mikania micrantha Kunth)
TERHADAP ANGIOGENESIS LUKA EKSISI
TERINFEKSI PADA MARMUT
OLEH:
NINA IRMAYANTI HARAHAP
NIM 147014038
PROGRAM STUDI MAGISTER

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017

TESIS
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh

Gelar Magister dalam Ilmu Farmasi Pada Fakultas Farmasi
OLEH:
NIM 147014038
PROGRAM STUDI MAGISTER

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017

LEMBAR PESETUJUAN TESIS

OLEH:
NIM 147014038
Medan, Desember 2017

Menyetujui:
Komisi Pembimbing, Komisi Penguji,
Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt.
NIP195709091985112001 NIDK 8869040017
Prof. Dr. Urip Harahap, Apt Prof. Dr. Dwi Suryanto, M.Sc.
NIP 195301011983031004 NIP 196404091994031003
Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt

NIP195709091985112001
Prof. Dr. Urip Harahap, Apt

NIP 195301011983031004
Mengetahui : Disahkan Oleh:

Ketua Program Studi Dekan,
Prof. Dr. Urip Harahap, Apt Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195301011983031004 NIP 195707231986012001

LEMBAR PENGESAHAN TESIS
Nama Mahasiswa : Nina Irmayanti Harahap
Nomor Induk Mahasiswa : 147014038
Program Studi : Magister Farmasi
Judul Tesis : Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak Etanol
Daun Sambung Rambat (Mikania Micrantha
Kunth) Terhadap Angiogenesis Luka Eksisi
Terinfeksi Pada Marmut
Telah diuji dan dinyatakan LULUS di depan TIM Penguji pada hari senin tanggal
tiga puluh satu bulan Juli tahun dua ribu tujuh belas.
Mengesahkan
Tim Penguji Tesis
Ketua Tim Penguji Tesis : Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt
Anggota Tim Penguji Tesis : Prof. Dr. Urip Harahap, Apt
Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt.
Prof. Dr. Dwi Suryanto, M.Sc.

SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan di bawah ini,
Nama Mahasiswa : Nina Irmayanti Harahap
Nomor Induk Mahasiswa : 147014038
Program Studi : Magister Farmasi
Judul Tesis : Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak Etanol
Daun Sambung Rambat (Mikania Micrantha
Kunth) Terhadap Angiogenesis Luka Eksisi
Terinfeksi Pada Marmut
Dengan ini menyatakanbahwa tesis yang saya buatadalah aslikarya saya sendiri,
bukan plagiat danapabila dikemudian hari diketahui tesis saya tersebut plagiat
karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia diberi sanksi apapun oleh pihak
Program Studi Magister Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera
Utara.Saya tidak akan menuntut pihak manapun atas perbuatan saya tersebut.
Demikianlah surat pernyataan ini saya buat dengan sebenarnya dan dalam
keadaan sehat.

Yang membuat pernyataan
Matrai 6000
Nina Irmayanti Harahap

NIM 147014038

KATA PENGANTAR
Segala puji kehadirat Allah SWT atas segala nikmat yang tak terhingga
sehingga penulis bisa menyelesaikan penelitian dan penulisan tesis dengan judul
“Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak Etanol Daun Sambung Rambat (Mikania
micrantha Kunth.) Terhadap Angiogenesis Luka Eksisi Terinfeksi Pada Marmut”
sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar Magister Farmasi pada Fakultas
Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Terima kasih yang sebesar-besarnya kepadaIbu Dr. Marline Nainggolan,
M.S., Apt. dan Bapak Prof. Dr. Urip Harahap.,Apt. yang telah membimbing
penulis, mengarahkan, memberikan dorongan dan semangat sehingga penulis
terpacu untuk menyelesaikan penelitian dan penyelesaian tesis ini.
Selama menyelesaikan penelitian dan tesis ini penulis telah banyak
mendapatkan bantuan dan dorongan dari berbagai pihak, untuk itu penulis ingin
menghaturkan penghargaan dan terima kasih yang tiada terhingga kepada:
1. Rektor Universitas Sumatera Utara, Bapak Prof.Dr.Runtung,S.H.,M.Hum.
2. Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi, Bapak Prof.
Dr. Urip Harahap, Apt. dan Ibu Prof. Dra. Rosidah, M.Si., Ph.D., Apt. selaku
ketua dan sekretaris Program Studi Magister dan Doktor Ilmu Farmasi yang
telah memberikan dukungan, fasilitas dan sarana kepada penulis.
3. Bapak Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt. selaku Komisi Penguji I dan
Bapak Prof. Dr. Dwi Suryanto, M.Sc., selaku Komisi Penguji II, yang telah
memberi arahan dan masukkan kepada penulis untuk kesempurnaan tesis ini.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang sebesarnya
kepada Ayahanda AKBP. H. A. Harahap dan Ibunda Hj. N. Siregar, S.Pd., yang

telah memberikan cinta dan kasih sayang, pengorbanan materi, motivasi serta doa
tulus yang tidak pernah berhenti dan kepada ananda M. Anas Khalid atas
pengertian, kesabaran dan doa yang tak henti-hentinya agar penulis bisa
menyelesaikan penelitian dan tulisan ini,serta semua pihak yang tidak dapat
penulis sebutkan satu per satu yang telah banyak membantu dalam penelitian tesis
ini, kiranya Allah SWT memberikan balasan yang berlipat ganda atas kebaikan
dan bantuan yang telah diberikan kepada penulis. Tesis ini masih jauh dari
kesempurnaan, sehingga penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat
membangun. Akhir kata semoga tulisan ini dapat menjadi sumbangan yang berarti
bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi.

Penulis,
Nina Irmayanti Harahap

NIM. 147014038

ABSTRAK
Sambung rambat (Mikania micrantha Kunth.) termasuk suku Compositae,

di daerah Tapanuli Selatan provinsi Sumatera Utara dikenal dengan nama
Siropaspara.Daun tumbuhan ini digunakan oleh masyarakat sebagai obat luka.
Tumbuhan ini diketahui mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tanin, dan
steroid/terpenoid. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari
gel ekstrak etanol daun sambung rambat (GEEDSR) dan efektifitas penyembuhan
luka sayat yang terinfeksi bakteri.
Serbuk simplisia daun sambung rambat dimaserasidengan etanol 80%,
ekstrak yang diperoleh diuji aktifitas antibakterinya terhadap bakteri
Staphylococcus aureus (Sa), Staphylococcus epidermidis(Se) dan Pseudomonas
aeruginosa (Pa) menggunakan metode difusi agar. Ekstrak gel berbasis HPMC
dibuat variasi konsentrasi 12,50%, 15,00% dan 17,50%. Selanjutnya efektifitas
penyembuhan luka sayat ekstrak gel diuji pada punggung marmut yang
diinfeksikan dengan bakteri yang paling peka. Bioplacenton digunakan sebagai
(kontrol positif), basis gel (kontrol negatif).Pengamatan dilakukan dengan
parameter persen kesembuhan luka dan perbedaan jumlah angiogenesis secara
histopatologi pada hari ke-8 dan ke-15.
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sambung rambat
(EEDSR) konsentrasi 100 mg/ml memberi zona hambat terhadap bakteri Se(15,25
mm); Pa(14,32 mm); dan Sa(13,90 mm). Konsentrasi 25 mg/ml memberikan nilai
zona hambat terhadap bakteri Se (9,65 mm), sedangkan bakteri Sa dan Pa tidak
memberikan nilai hambat. Aktivitas antibakteri GEEDSR diuji terhadap bakteri
Se pada konsentrasi 12,50% memberi nilai hambatan(14,10 mm); 15,00%
(15,83mm); dan 17,50% (16,69 mm). Hasil uji efektivitas persen kesembuhan
luka GEEDSR konsentrasi 12,50% (79,18%); 15,00% (82,39%);17,50%
(87,15%); Bioplacenton (82,39%) basis gel (65,06%), tanpa perlakukan (20,00%)
dan luka normal (76,92). Hasil uji statistikTukey menunjukkan persen
kesembuhan luka GEEDSR 15,00% dan Bioplacenton tidak berbeda signifikan
(p>0,05), GEEDSR 12,50%; 17,5%; tanpa perlakuan; basis gel; dan luka
normalmemberikan hasil yang berbeda signifikan. Hasil pemeriksaan
histopatologijumlah angiogenesis dariGEEDSR 17,50 % dan 15,00% pada hari
ke-15 tidak terdapat perbedaan. Hasil penelitian menunjukkan GEEDSR 15,00%
memberikan konsentrasi optimal sebagai sediaan gel luka terinfeksi.
Kata kunci: GEEDSR, uji aktivitas antibakteri,efektifitas penyembuhan luka

sayat terinfeksi,angiogenesis.

ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF ETHANOL EXTRACT GEL OF
SAMBUNG RAMBAT LEAF ( Mikania micrantha Kunth)
AND ANGIOGENESIS OF INFECTEDEXCISED
WOUND HEALING IN GUINEA PIG
ABSTRACT
Sambung rambat (Mikania micrantha Kunth.) is a common plant in
South Tapanuli ofNorth Sumatera province known asSiropaspara. The wild plant
of the family Compositae leaves are used by native as a cure for wounds. Previous
study showed this plant contains alkaloid, flavonoid, tanin, and steroid.The
purpose of this research was to determine the antibacterial activity ethanol extract
gel of sambung rambat (GEEDSR) and its effectiveness to heal infected wound.
The powdered dried leaves of sambung rambat were macerated with
80% ethanol. The resulting extract was tested for antibacterial activity of against
Staphylococcus aureus (Sa), Staphylococcus epidermidis (Se) and Pseudomonas
aeruginosa(Pa) by agar diffusion method, HPMC based gels were prepared with
varied concentration of plant extract, i.e12.50%; 15.00% and 17.50%. The
effectiveness of the extract gel in healing guinea pig back excised wound was
assessed. Bioplacenton was used as positive control, gel base as negative control.
The healing percentage of the wound and the histopathology of angiogenesis
process were measured from day 8th through day 15th.
The result of antibacterial activity testing for EEDSR at concentration of
100 mg/ml gave the inhibition zone diameter for Se (15.25 mm); Pa is (14.32 mm)
and Sa (13.95) mm. At concentration 25 mg/ml Se given inhibition (9.65) mm.
The inhibition zone diameter for GEEDSR for concentration of 12.50% was
(14.10 mm); 15% was(15,83 mm); and 17,50% was(16,69 mm). The effectiveness
of healing infected wound percentation for GEEDSR concentration 12,50% gave
(79.18%); 15.00% (82,39%) and 17.50% (87.15%). The statistical results byTukey
showed no significant difference between 15% GEEDSR and Bioplacenton.The
histopatological result of angiogenesis at day 15th for GEEDSR at concentration
15.00% and 17.50%showed nodifferences.
Keywords:GEEDSR, Antibacterial activity, effectiveness heal infected

wound,angiogenesis.

DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ........................................................................................................ i
LEMBAR .................................................................................................... ii
LEMBAR PERSETUJUAN TESIS ............................................................ iii
LEMBAR PENGESAHAN ....................................................................... iv
LEMBAR PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT ........................................ v
KATA PENGANTAR ................................................................................ vi
ABSTRAK ................................................................................................. viii
ABSTRACT ............................................................................................... ix
DAFTAR ISI ............................................................................................... x
DAFTAR GAMBAR .................................................................................. xiv
DAFTAR TABEL ....................................................................................... xv
DAFTAR LAMPIRAN. ............................................................................. xvi
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................... 1
1.1 Latar Belakang .............................................................................. 1
1.2 Perumusan Masalah ...................................................................... 4
1.3 Hipotesis ....................................................................................... 4
1.4 Tujuan Penelitian .......................................................................... 5
1.5 Manfaat Penelitian ........................................................................ 5
1.6 Kerangka Pikir Penelitian ............................................................. 6
BAB II TINJAUAN PUSTAKA................................................................. 7
2.1 Uraian Tumbuhan .......................................................................... 7
2.1.1 Sistematika tumbuhan .......................................................... 7
2.1.2 Nama asing .......................................................................... 7
2.1.3 Habitat .................................................................................. 7

2.1.4 Morfologi ............................................................................. 8
2.1.5 Kandungan kimia ................................................................. 8
2.2 Ekstraksi ......................................................................................... 8
2.2.1 Metode-metode ekstraksi ..................................................... 9
2.3 Bakteri ........................................................................................... 10
2.3.1 Bakteri Staphylococcus aureus ............................................ 11
2.3.2 Bakteri Staphylococcus epidermidis .................................... 12
2.3.3 Bakteri Pseudomonas aeroginosa........................................ 12
2.3.4 Pertembuhan dan perkembangan mikroorganisme .............. 13
2.3.5 Fase pertumbuhan bakteri ..................................................... 15
2.4 Gel ................................................................................................ 16
2.4.1 Hidroksi propil metil selulosa (HPMC) ............................... 17
2.4.2 Propilen glikol ...................................................................... 18
2.4.3 Metil paraben ....................................................................... 18
2.4.4 Propil paraben ..................................................................... 19
2.5 Kulit ............................................................................................... 20
2.5.1 Epidermis ............................................................................. 21
2.5.2 Dermis .................................................................................. 21
2.5.3 Subkutis................................................................................ 21
2.6 Luka ............................................................................................... 22
2.7 Penyembuhan Luka ........................................................................ 24
2.8 Angiogenesis ................................................................................. 26
2.9 Pengaruh Senyawa Kimia Tumbuhan terhadap Penyembuhan Luka 27
2.9.1 Flavonoid ............................................................................. 27
2.9.2 Tanin .................................................................................... 27
2.9.3 Saponin ................................................................................ 28

2.9.4 Steroid/terpenoid .................................................................. 28
2.10 Neomisin Sulfat............................................................................ 29
BAB III METODE PENELITIAN ............................................................. 30
3.1 Alat dan Bahan .............................................................................. 30
3.1.1 Alat-alat................................................................................ 30
3.1.2 Bahan-bahan ........................................................................ 30
3.2 Hewan Percobaan.......................................................................... 31
3.3 Pengumpulan dan Pengolahan Sampel ......................................... 31
3.3.1 Pengumpulan bahan tumbuhan............................................ 31
3.3.2 Pengolahan bahan tumbuhan .............................................. 31
3.4 Pembuatan Ekstrak....................................................................... 31
3.5 Penetapan Kadar Air .................................................................... 32
3.6 Pembuatan Media.......................................................................... 32
3.6.1 Nutrient agar ........................................................................ 32
3.6.2 Media agar miring ................................................................ 33
3.6.3 Muller Hinton Agar (MHA)................................................. 33
3.6.4 Pembuatan standar Mc. Farland .......................................... 33
3.7. Peremajaan Stok Kultur Bakteri Uji ............................................ 34
3.8. Pembuatan Inokulum Bakteri ....................................................... 34
3.9. Persiapan Pengujian Antibakteri ................................................. 34
3.10 Uji Aktivitas Antibakteri EEDSR................................................ 35
3.11Pembuatan Formula Sediaan ........................................................ 35
3.11.1 Pembuatan basis gel ........................................................... 35
3.11.2 Komposisi formula ............................................................ 36
3.12 Evaluasi Formula ......................................................................... 36
3.12.1 Pemeriksaan stabilitas fisik sediaan ................................... 36

3.12.2 Pemeriksaan homogenitas sediaan ..................................... 36
3.12.3 Pemeriksaan pH ................................................................. 37
3.13 Uji Aktivitas GEEDSR ................................................................ 37
3.14 Penyiapan Hewan Uji dan Pembuatan Luka ............................... 37
3.15 Pengujian Sediaan Gel Terhadap Penyembuhan Luka Sayat ...... 38
3.16 Pembuatan Sediaan Histologi ...................................................... 39
3.17 Analisis Data ............................................................................. 40
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................... 41
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ......................................................... 41
4.2 Hasil Ekstraksi Simplisia Daun Sambung Rambat ....................... 41
4.3 Hasil Uji Kadar Air Simplisia Daun Sambung Rambat ................ 41
4.4 Hasil Evaluasi Sediaan GEEDSR .................................................. 42
4.4.1 Hasil pemeriksaan organoleptis ........................................... 42
4.4.2 Hasil penentuan pH sediaan ................................................. 43
4.5 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri secara invitro EEDSR .................. 43
4.6 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri secara invitro sediaan GEEDSR .. 45
4.7 Hasil Uji Efektivitas Penyembuhan Luka Sayat ............................ 47
4.8 Hasil Uji Analisa Variansi (ANAVA) ........................................... 53
4.9 Hasil Uji Pengamatan Histopatologi (HP) Sediaan GEEDSR ....... 53
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ..................................................... 58
5.1 Kesimpulan .................................................................................. 58
5.2 Saran.............................................................................................. 58
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................ 59
LAMPIRAN ................................................................................................ 66

DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1.1 Diagram kerangka pikir penelitian ................................................. 6
2.1 Grafik pertumbuhan bakteri............................................................. 15
2.2 Rumus bangun HPMC ..................................................................... 17
2.3 Rumus bangun propilen glikol ........................................................ 18
2.4 Rumus bangun metil paraben ........................................................ 19
2.5Rumus bangun propil paraben ......................................................... 19
2.6 Struktur kulit .................................................................................... 20
2.7 Grafik penyembuhan luka ............................................................... 24
3.1 Perhitungan diameter luka ............................................................... 38
4.1 Grafik persentase penutupan luka menggunakan GEEDSR............ 51
4.2 Grafik rata-rata jumlah kepadatan pertumbuhan pembuluh darah

Pada hari ke-8 dan ke-15 perbesaran 400x, 5LP ............................. 54
4.3 Gambar mikroskopik kulit normal ................................................. 55
4.4Gambar hasil mikroskopik kepadatan angiogenesis hari ke-8 ......... 55
4.5Gambar hasil mikroskopik kepadatan angiogenesis hari ke-15 ....... 56

DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
3.1 Komposisi formula gel EEDSR .................................................... 36
4.1 Hasil organoleptis sediaan GEEDSR ............................................ 42
4.2 Hasil penetuan pH ......................................................................... 43
4.3 Hasil pengukuran diameter hambat pertumbuhan bakteri Se

Se,Pa, dari sediaan GEEDSR ....................................................... 44
4.4 Hasil pengukuran diameter hambat bakteri Se sediaan GEEDSR 47
4.5 Nilai persentase peningkatan kesembuhan luka terinfeksi

bakteri Se ...................................................................................... 49
4.6 Data hasil analisis persentase kesembuhan ANAVA ................... 53
4.7 Jumlah pertumbuhan pembuluh darah perbesaran 400x 5LP ........ 54

DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Hasil identifikasi tumbuhan sambung rambat ............................... 66
2 Gambar tumbuhan sambung rambat ............................................. 67
3 Gambar simplisia dan serbuk daun sambung rambat ................... 68
4 Bagan alur penelitian..................................................................... 69
5 Bagan pembuatan ekstrak ............................................................ 70
6 Bagan uji aktivitas antibakteri EEDSR ........................................ 71
7 Bagan pembuatan sediaan GEEDSR ........................................... 72
8 Gambar hasil pengujian hambatan pertumbuhan bakteri EEDSR 73
9Gambar hasil pengujian hambatan pertumbuhan bakteri SE dari ...

sediaan GEEDSR ........................................................................ 74
10 Gambar sediaan GEEDSR dengan variasi dosis ......................... 75
11 Gambar hasil uji homogenitas sediaan GEEDSR ........................ 76
12 Surat izin penelitian dari komite etik penelitian (AREC) ........... 77
13 Sertifikat animal handling ........................................................... 78
14 Sertifikat anlisis Hydroxypropyl metal cellulose (HPMC) ......... 79
15 Data dan hasil perhitungan persentase kesembuhan luka pada

kulit marmut dengan berbagai prlakuan ..................................... 80
16 Perhitungan kadar air simplisia .................................................... 87
17 Perhitungan kadar air ekstrak ....................................................... 88
18 Gambar hewan uji ........................................................................ 89
19 Gambar pengamatan diameter luka sayat .................................... 90
20 Hasil uji beda nyata antar kelompok perlakuan hari ke 1

sampai hari ke 18 ......................................................................... 94

BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Luka didefinisikan sebagai suatu keadaan hilang atau rusaknya sebagian
dari jaringan tubuh. Keadaan tersebut disebabkan oleh multifaktor, seperti trauma
benda tajam, benda tumpul, zat kimia, ledakan, sengatan listrik, gangguan hewan,
koloni mikroba, yang mengenai jaringan. Luka yang biasa terjadi pada mukosa
yaitu abrasi (lecet), kontusio (memar), luka tembus. Luka juga dapat dibuat
sengaja untuk tujuan tertentu, seperti luka pada operasi. Beberapa dampak luka
menurut yaitu hilangnya sebagian atau bahkan seluruh fungsi organ yang terkena
luka, perdarahan, pembekuan darah, kemungkinan terjadinya kontaminasi bakteri,
dan kematian sel (Widiastuti, 2015; Yuhernita, et al., 2014).
Berdasarkan klasifikasinya luka terbagi atas luka terbuka (eksisi) dan luka
tertutup (insisi) (Arun,et al., 2013). Penyembuhan luka merupakan salah satu hal
penting dan merupakan proses yang kompleks dimana terjadinya pergantian
jaringan yang rusak atau mati oleh jaringan yang baru melalui proses degenerasi.
Proses penyembuhan luka dibagi ke dalam fase inflamasi, proliferasi, dan
remodelling jaringan. Proses penyembuhan luka juga dipengaruhi oleh faktor
umur, nutrisi, obat-obatan dan lain lain.
Penyembuhan luka secara histologis memperlihatkan gambaran terjadinya
peningkatan jumlah pembuluh darah (angiogenesis) dan jumlah sel fibroblas. Fase
proliferasi, fibroblas memegang peranan penting. Proliferasi dari fibroblas akan
menentukan hasil akhir dari penyembuhan luka. Fibroblas akan menghasilkan
kolagen yang akan menautkan tepi luka, juga mempengaruhi proses reepitelisasi
yang akan membuat luka menutup dan mempercepat proses penyembuhan luka.

Angiogenesis merupakan pertumbuhan atau pembentukan pembuluh darah
baru yang terjadi secara alami di dalam tubuh, baik dalam kondisi sehat maupun
patologi (sakit). Proses angiogenesis berperan dalam mempertahankan
kelangsungan fungsi berbagai jaringan dan organ yang yang mengalami
kerusakan. Terjadinya hal ini melalui terbentuknya pembuluh darah baru yang
menggantikan pembuluh darah yang rusak (Widiastuti, 2015).
Pembentukan pembuluh darah baru merupakan hal yang penting dalam
proses penyembuhan luka karena luka yang tidak mendapat perawatan yang layak,
akan sangat mudah untuk diinfiltrasi oleh berbagai mikroorganisme sehingga
menyebabkan terjadinya infeksi bakteri patogen antara lain Staphylococcus
(Boyd, 1971; Pradipta, 2010).
Salah satu cara penanganan luka yaitu dengan mengobati luka tersebut
menggunakan sediaan topikal. Pemberian sediaan topikal yang tepat dan efektif
diharapkan dapat mengurangi dan mencegah infeksi pada luka. Bentuk sediaan
topikal yang disukai salah satunya adalah gel karena mudah merata jika dioleskan
pada kulit tanpa penekanan, memberi sensasi dingin, tidak menimbulkan bekas
dikulit, mudah digunakan selain itu, gel juga mudah mengering dan membentuk
lapisan film yang tipis sehingga mudah dicuci (Voigt, 1995; Panjaitan etal., 2012;
Shelke,et al., 2013).
Masyarakat saat ini masih menggunakan obat alternatif atau obat
tradisional sebagai pengobatan penyakit khususnya di negara-negara berkembang
(Thomas, 1995). Salah satu jenis tumbuhan yang berpotensi dan digunakan
sebagai obat tradisional dan telah terbukti secara empirisadalah daun sambung
rambat (Mikania micrantha Kunth.). Nama tradisional tanaman ini di daerah
Tapanuli Selatan provinsi Sumatera Utaraadalah Siropsaspara, pada

umumnyamasyarakatnya menggunakan daun sambung rambat sebagai obat luka
dengan carameremas-remas daunnya atau ditumbuk kasar kemudian ditempel
pada kulit yang luka.
Berdasarkan hasil survey seorang etnobotani Rahmatullah,etal.,
(2011)pada suatu desa di Bangladesh menyatakan bahwa bagian daun tanaman
ini secara tradisional digunakan untuk menghentikan perdarahan secara eksternal.
Suku Kabi di Indiamenggunakan jus daun sambung rambat sebagai penangkal
gigitan serangga dan kalajengking juga untuk mengobati sakit perut,di Malaysia
digunakan sebagai obat gatal-gatal,di Africa digunakan sebagai sayuran untuk
membuat sop.
Daun sambung rambat (Mikania micrantaKunth.) adalah salah satu
tanaman dari keluarga Compositae, dikenal sebagai heartleaf hempvine, tumbuh
merambat di permukaan tanah atau pohon. Hasil skrining menunjukkan daun
sambung rambat mengandung senyawa flavonoid, glikosida, terpenoid/steroid,
saponin, tanin (Chowdry, 2011).
Ekstrak etanol daun sambung rambat (Mikania micrantha Kunth.) menurut
hasil penelitian Anggraini, (2015) memiliki kemampuan menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.Menurut
Nasution, (2015), sediaan gel ekstrak etanol daun sambung rambat memberikan
efek penyembuhan luka sayat eksisi pada kelinci.
Berdasarkanuraian tersebut peneliti tertarik meneruskan penelitian dengan
melakukan pengujian ekstrak etanol daun sambung rambat (EEDSR) dan sediaan
gel ekstrak etanol daun sambung rambat (GEEDSR) (Mikania micrantha Kunth.)
terhadap beberapa bakteri yang dapat menginfeksi pada luka menggunakan
bakteri gram positif Staphylococcus aureus(Sa), Staphylococcus

epidermidis(Se)dan bakteri gram negatif Pseudomonas aeruginosa (Pa)
selanjutnya dilakukan uji penyembuhan luka sayat eksisi pada kulit marmut jantan
yang diinfeksikan dengan salah satu bakteri yang terbukti paling peka dihambat
pertumbuhannyaoleh sediaan GEEDSR. Efektivitas penyembuhan luka diamati
dengan pengukuran diameter luka, persentase kesembuhan dan pembentukan
pembuluh darah baru (angiogenesis) pada kulit marmut jantan yang terinfeksi.
1.2 Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang, maka permasalahan dalam penelitian ini
dapat dirumuskan sebagai berikut:
a. apakah EEDSR mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri penyebab
infeksi pada luka sayat eksisi bakteri Sa, Se dan Pa.
b. apakah EEDSR dapat di formulasikan dalam bentuk sediaan gel.
c. apakah sediaan GEEDSR mempunyai efek penyembuhan luka sayat eksisi
yangterinfeksi bakteri, dengan indikator angiogenesis, diameter luka dan
persentase penyembuhan luka.
d. pada konsentrasi berapakah EEDSR dalam sediaan gel memberikan efek
penyembuhan paling efektif pada luka sayat eksisi yang terinfeksi bakteri.
1.3 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah, maka hipotesis penelitian ini adalah:
a. EEDSR mempunyai aktivitas antibakteri terhadap beberapa bakteri gram
positif (+) dan gram negatif (-) penyebab infeksi pada luka sayat eksisi
(bakteri Sa, Se dan Pa).
b. EEDSR dapat di formulasikan dalam bentuk sediaan gel.

c. sediaan GEEDSR mempunyai efek penyembuhan luka sayat eksisi yang
terinfeksi bakteri, dengan indikator angiogenesis, diameter luka, dan keadaan
fisik luka.
d. sediaan GEEDSR pada konsentrasi tertentu memberikan efek penyembuhan
paling cepat pada luka sayat eksisi yang terinfeksi bakteri.
1.4 Tujuan Penelitian
Berdasarkan hipotesis di atas maka tujuan penelitian ini adalah untuk:
a. mengetahui aktivitas antibakteri EEDSR terhadap bakteri penyebab infeksi
pada luka sayat eksisi (bakteri Sa, Se dan Pa).
b. mengetahui EEDSR dapat di formulasikan dalam bentuk sediaan gel.
c. mengetahui sediaan GEEDSR mempunyai efek penyembuhan luka sayat eksisi
yang terinfeksi bakteri, dengan indikator angiogenesis, diameter luka dan
persentase penyembuhan luka.
d. mengetahui konsentrasi EEDSR di dalam sediaan gel yang memberikan efek
penyembuhan paling cepat pada luka sayat eksisi yang terinfeksi bakteri.
1.5 Manfaat Penelitian
Berdasarkan tujuan penelitian diatas, diharapkan penelitian ini
memberikan informasi ilmiah khususnya di bidang ilmu kefarmasian bahwa
EEDSR mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri gram positif (+) dan
gram negatif (-) penyebab infeksi pada luka dan sediaan GEEDSR dapat
digunakan sebagai obat penyembuhan luka yang terinfeksi.

1.6 Kerangka Penelitian
Penelitian dilakukan terhadap marmut jantan yang dibuat luka sayat eksisi
pada bagian punggungnya. Kerangka penelitian ini dibagi menjadi variabel bebas
dan variabel terikat (Gambar 1.1).
Variabel bebas Variabel terikat Parameter
Simplisia daun
sambung rambat
Aktivitas anti Diameter (mm)

Ekstrak etanol bakteriStaphylococcus daya hambat
daun sambung aureus(Sa); Staphylococcus masing-masing
rambat (EEDSR) epidermidis(Se),Pseudomo
bakteri
nas aeruginosa (Pa)
1.Stabilitas fisik
Sediaan gel Sediaan gel ekstrak 2. pH
ekstrak etanol etanol daun sambung 3. Homogenitas
daun sambung rambat
rambat, dengan 3
konsentrasi : Penyembuhan hewan Diameter luka
12,50%, 15,00%, luka (cm) dan keadaan
17,50% 1. Kelompok kontrol fisik luka.
(Basis gel)
2.Kelompok 1. Histopatologi
pembanding angiogenesis.
(Bioplacenton) 2.Jumlah
3.Kelompok uji sedian pembuluh
Gel EEDSR dengan darah baru (5
konsentrasi 12,50%, lapang
15,00% dan 17,50% pandang)
Gambar 1.1 Diagram kerangka pikir penelitian

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tumbuhan
2.1.1 Sistematika tumbuhan
Sistematika dari tumbuhan Sambung Rambat (Mikania micrantha Kunth.)
dalam klasifikasi sebagai berikut (APFISN, 2012):
Kingdom : Plantae
Super divisi : Spermatophyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Bangsa : Asterales
Familia : Compositae (Asteraceae)
Genus : Mikania
Spesies : Mikania micranthaKunth.
2.1.2 Nama asing
Tumbuhan Mikania micrnthaKunth. di Indonesia memiliki nama
sambung rambat, nama daerah di Tapanuli Selatan Sumatera Utara dikenal dengan
nama Siropaspara. Nama asing menurut CABI (2016) adalahAmerican rope
(America),mile a minute weed,Chinese creeper (Cina), Dhritharashta pacha
(India), dan Ulam tikus (Malaysia).
2.1.3 Habitat

Sambung rambat biasanya tumbuh di tempat yang lembab, ditepi sungai,
dihutan,area perkebunan, tanah tandus bahkan ditepi jalan raya. Penyebarannya
dapat terjadi melalui hembusan angin, hewan dan air, tumbuh subur dipadang
pasir yang memiliki sedikit zat hara dan dapat tumbuh dalam jumlah yang besar,
pertumbuhannya sangat mudah dan cepat, umumnya menggunakan pohon sebagai
dukungan tempat tumbuhnya, banyak tumbuh melilit pada tumbuhan kelapa
sawit, karet, ubi kayu, kelapa, pisang (APFISN, 2012; CABI, 2016).
2.1.4 Morfologi
Tumbuhan sambung rambat merupakan tumbuhan membelit/menjalar,
bercabang banyak yang kuat, tumbuh dan menyebar dengan cepat. Berbunga pada
bulan Agustus hingga Januari (APFISN, 2012). Batang sambung rambat berwarna
hijau muda dan ditumbuhi rambut-rambut halus. Tiap ruas batang terdapat dua
helai daun yang saling berhadapan. Daun sambung rambat berbentuk segitiga
yang menyerupai bentuk hati dengan panjang 4-13 cm dan lebar 2-9 cm.
Permukaan daun menyerupai mangkok dengan tepi daun bergerigi. Bunga
tumbuhan sambung rambat berwarna putih, berukuran kecil, serta tumbuh dari
ketiak daun atau pada ujung tunas (DEEDI, 2011).
2.1.5 Kandungan kimia
Daun sambung rambat memiliki kandungan flavonoid, alkaloid, tanin dan
steroid (Haisya, et. al., 2013) Kandungan terpenoid dari daun sambung rambat
adalah golongan seskuiterpene yang terdiri dari mikanolid, dihidromikanolid
(Tripathi, et. al., 2012).
2.2 Ekstraksi
Ekstraksi adalah penarikan kandungan kimia yang dapat larut sehingga
terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan menggunakan suatu pelarut cair.

Senyawa aktif dapat digolongkan ke dalam golongan minyak atsiri, alkaloid,
flavonoid dan lain-lain. Senyawa aktif simplisia akan mempermudah pemilihan
pelarut dan cara ekstraksi yang tepat (Depkes RI., 2000).
2.2.1 Metode-metode ekstraksi
Ekstraksi adalah proses pemisahan bahan dari campurannya dengan
menggunakan pelarut yang sesuai (Mukhriani, 2014). Senyawa aktif yang terdapat
dalam berbagai simplisia dapat digolongkan ke dalam golongan minyak atsiri,
alkaloida, flavonoida, dan metabolit sekunder lainnya. Jenis ekstraksi bahan alam
yang sering dilakukan adalah ekstraksi dingin,melalui cara maserasi, perkolasi
dan sokletasi dan ekstraksi panasdengan cara refluks dan penyulingan uap air.
(Depkes RI, 2000).
Maserasi
Maserasi adalah proses pengektraksian simplisia menggunakan pelarut
dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan,
sedangkan remaserasi berarti dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah
dilakukan penyaringan maserat pertama dan seterusnya.
Perkolasi
Perkolasiadalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna
(exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan.
Proses terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap
perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak) terus-menerus sampai
diperoleh ekstrak (perkolat).
Refluksadalah proses penyarian simplisia dengan menggunakan alat pada
temperatur titik didihnya dalam waktu tertentu dimana pelarut akan terkondensasi
menuju pendingin dan kembali ke labu.

Sokletasi
Sokletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang
umumnya dilakukan dengan alat soklet dimana pelarut akan terkondensasi dari
labu menuju pendingin, kemudian jatuh membasahi sampel.
Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada lebih
temperatur tinggi dari temperatur ruangan, yaitu secara umum dilakukan pada
temperatur 40-50°C.
Infundasi
Infundasi adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut air pada
temperatur 900C selama 15 menit.
Dekoktasi
Dekoktasi adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut air pada
temperatur 900C selama 30 menit.
2.3 Bakteri
Nama bakteri berasal dari kata “bakterion” (bahasa yunani) yang berarti
tongkat atau batang. Sekarang nama itu dipakai untuk menyebut sekelompok
mikroorganisme yang bersel satu, tidak berklorofil, berkembang dengan
membelah diri, serta demikian kecilnya sehingga hanya dapat dilihat dengan
menggunakan mikroskop (Dwijoseputro, 1994).
Ukuran bakteri bervariasi baik penampang maupun panjangnya, tetapi
pada umumnya penampang bakteri adalah sekitar 0,7-1,5 µm dan panjangnya
sekitar 1-6 µm. Tubuh bakteri yang terdiri dari satu sel mempunyai bentuk yang

beraneka ragam. Ada yang berbentuk peluru atau bola (kokus), berbentuk batang
(basil), berbentuk koma dan spiral (Tjitrosoepomo, 2005).
Berdasarkan perbedaannya di dalam menyerap zat warna gram, bakteri
dibagi atas dua golongan yaitu bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif.
Bakteri Gram positif menyerap zat warna pertama yaitu kristal violet yang
menyebabkan berwarna ungu, sedangkan bakteri Gram negatif menyerap zat
warna kedua yaitu safranin dan menyebabkan berwarna merah (Dwijoseputro,
1994).Bakteri Gram positif memiliki kandungan peptidoglikan lebih tinggi dari
pada bakteri Gram negatif sebaliknya kandungan lipid dinding sel bakteri Gram
positif lebih rendah dari bakteri Gram negatif yaitu berkisar 11-22% (Lay, 1994).
2.3.1 Bakteri Staphylococcus aureus
Sistematika bakteriStaphylococcus aureusmenurut Dwidjoseputro (1994)
adalah sebagai berikut :
Divisio : Protophyta
Kelas : Schizomycetes
Bangsa : Eubacteriales
Suku : Micrococcaceae
Marga : Staphylococcus
Jenis : Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus merupakan bakteri Gram positif yang bersifat
aerob atau anaerob dan tahan hidup dalam lingkungan yang mengandung garam
dengan konsentrasi tinggi, misalnya NaCl 10%. Hasil pewarnaan yang berasal
dari pembenihan padat akan memperlihatkan susunan bakteri yang bergerombol
seperti buah anggur. Bakteri ini terdapat pada kulit, selaput lendir, bisul dan luka.
(Jawetz, et al., 2001).

2.3.2 Bakteri Staphylococcus epidermidis
Sistematika bakteri Staphylococcus epidermidis menurut Irianto (2006)
adalah sebagai berikut:
Divisi : Protophyta
Bangsa : Eubacteriales
Famili : Micrococaceae
Genus : Staphylococcus
Spesies : Staphylococcus epidermidis
Bakteri Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri Gram positif,
aerob atau anaerob fakultatif berbentuk bola atau kokus berkelompok tidak
teratur, diameter 0,8 - 1,0 μm tidak membentuk spora dan tidak bergerak, koloni
berwarna putih bakteri ini tumbuh cepat pada suhu 37oC. Koloni pada
pembenihan padat berbentuk bulat halus, menonjol, berkilau, tidak menghasilkan
pigmen, berwarna putih porselen(Jawetz, et al., 2001).
Bakteri ini terdapat pada kulit, selaput lendir, bisul dan luka, dapat
menimbulkan penyakit melalui kemampuannya berkembang biak dan menyebar
luas dalam jaringan (Jawetz, et al., 2001).
2.3.3 Bakteri Pseudomonas aeruginosa
Sistematika bakteriPseudomonas aeruginosamenurut Dwidjoseputro,
(1994) adalah sebagai berikut:
Divisio : Protophyta
Bangsa : Pseudomonadales
Suku : Pseudomonadaceae

Marga : Pseudomonas
Jenis : Pseudomonas aeruginosa
Pseudomonas aeruginosa merupakan bakteri Gram negatif aerob obligat,
berbentuk batang, bergerak, berukuran sekitar 0,6 x 2 µm, terlihat sebagai bakteri
tunggal, berpasangan dan kadang-kadang membentuk rantai yang pendek.
Pseudomonas aeruginosa membentuk koloni halus bulat dengan warna floresensi
kehijauan. Bakteri ini menghasilkan piosianin, suatu pigmen kebiru-biruan yang
tak berfloresensi, yang berdifusi ke dalam agar.
Pseudomonas aeruginosa tersebar luas di alam dan biasanya terdapat di
lingkungan yang lembab. Bakteri dalam jumlah kecil sering terdapat dalam flora
usus normal dan pada kulit manusia serta merupakan patogen utama dari
kelompok Pseudomonas. Bakteri ini menimbulkan infeksi pada luka, meningitis,
infeksi saluran kemih, dan infeksi mata (Jawetz, et. al., 2001).
2.3.4 Pertumbuhan dan perkembangan mikroorganisme
Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan
mikroorganisme meliputi :
a. Suhu
Suhu adalah suatu faktor terpenting mempengaruhi pertumbuhan dan
kelangsungan hidup dari semua organisme hidup (Irianto, 2006).Suhu pada
pertumbuhan optimal akan menyebabkan kecepatan pertumbuhan optimal dan
dihasilkan jumlah sel yang maksimal (Pratiwi, 2008), oleh karena itu spesies
mikroba yang berbeda membutuhkan suhu optimal yang beragam untuk
pertumbuhannya. Bentuk psikrofil tumbuh paling baik pada suhu rendah (15-
200C), bentuk mesofil tumbuh terbaik pada suhu 30-370C dan bentuk termofil
tumbuh terbaik pada suhu 50-600C (Jawetz, et. al., 1996).

b. pH
pH merupakan indikasi konsentrasi ion hidrogen. Peningkatan dan
penurunan konsentrasi ion hidrogen dapat menyebabkan ionisasi gugus-gugus
dalam protein, amino dan karboksilat, sehingga menyebabkan denturasi protein
yang mengganggu pertumbuhan sel (Pratiwi, 2008), oleh karena itu
pertumbuhan sel memerlukan pH tertentu dimana sebagian besar organisme
memiliki kisaran pH optimal yang sempit, secara empirik pH optimal harus
ditentukan untuk masing-masing spesies (Jawetz, et al., 1996).
Mikroorganisme asidofil tumbuh pada kisaran pH optimal 1,0-5,5,
mikroorganisme neutrofil tumbuh pada kisaran pH optimal 5,5-8,0,
mikroorgansime alkalofil tumbuh pada pH optimal 8,5-11,5, sedangkan
≥ 10
mikroorganisme alkalofil ekstrem tumbuh pada kisaran pH optimal
(Pratiwi, 2008).
c. Tekanan osmosis
Tekanan osmosis adalah laju air dari larutan dengan konsentrasi rendah ke
larutan dengan konsentrasi tinggi (Volk dan Wheeler, 1989) misalnya peristiwa
terjadinya plasmolisis yang disebabkan karena sel mikroorganisme berada
dalam larutan dengan konsentrasinya lebih tinggi daripada konsentrasi di dalam
sel, maka akan terjadi keluarnya cairan dari dalam sel melalui membran
sitoplasma (Tim Mikrobiologi FK Brawijaya, 2003), oleh karena itu untuk
mempertahankan kehidupan sel agar tetap hidup harus diciptakan tekanan
osmosis (Irianto, 2006).
d. Oksigen
Berdasarkan kebutuhan oksigen, bakteri digolongkan menjadi:

i. bakteriaerob mutlak: bakteri yang memerlukan oksigen untuk
pertumbuhannya.
ii. bakteri anaerob mutlak: bakteri yang tidak membutuhkan oksigen didalam
pertumbuhannya.
iii. bakteri anaerob fakultatif: bakteri yang dapat tumbuh, baik ada oksigen
maupun tanpa adanya oksigen.
iv. bakteri mikroaerofilik : bakteri yang kebutuhan oksigennya rendah (Tim
Mikrobiologi FK Brawijaya, 2003).
e. Nutrisi
Nutrisi merupakan substansi yang diperlukan untuk biosintesis dan
pembentuk energi. (Pratiwi, 2008).
f. Media kultur
Media kultur merupakan bahan nutrisi yang digunakan untuk pertumbuhan
mikroorganisme. Berdasarkan konsistensinya, media dikelompokkan menjadi dua
macam yaitu media cair dan media padat (Pratiwi, 2008).
2.3.5Fase pertumbuhan bakteri
Fase pertumbuhan bakteri menurut Irianto (2006) meliputi: fase
pertumbuhan lambat (lag), fase eksponensial (log), fase konstan (stasioner) dan
fase kematian atau penurunan (Gambar 2.1)
Gambar 2.1 Grafik pertumbuhan bakteri (dikutip dari : Irianto, 20

a. Fase pertumbuhan lambat (slow grouth) atau fase lag.
Fase ini merupakan fase penyesuaian bakteri terhadap suatu lingkungan baru
dimana jumlah bakteri mulai bertambah sedikit demi sedikit, akan tetapi
kecepatan berkembang biak menjadi berkurang. Ini bukan karena keadaan
medium memburuk, tapi terjadi peningkatan ukuran sel sehingga tampak
menyusut jumlah sel-sel yang segar. Lama fase lag tergantung pada kondisi
dan jumlah awal mikroorganisme dan media pertumbuhan.
b. Fase eksponensial (log)
Fase ini terjadi setelah sel bakteri menyesuaikan diri terhadap lingkungan
baru, dimana pembiakan bakteri berlangsung paling cepat, jumlah sel bakteri
baru meningkat secara eksponensial. Bakteri dalam fase ini baik sekali untuk
dijadikan inokulum.
c. Fase konstan (stationary)
Dalam fase ini kecepatan tumbuh bakteri yang berkembang biak sama dengan
kecepatan bakteri yang mati. Kurva menunjukkan garis yang hampir
horizontal, sehingga jumlah sel yang hidup menjadi tetap.
d. Fase Penurunan (period of decline) atau fase kematian
Pada fase ini bakteri mengalami penurunan, dimana jumlah bakteri yang mati
bertambah. Hal ini tergantung kepada spesies dan keadaan medium serta
faktor-faktor lingkungan, maka besar kemungkinan bakteri tidak dapat
dihidupkan kembali dalam medium baru.
2.4 Gel
Gel merupakan sistem semi padat terdiri dari suspensi yang dibuat dari
partikel anorganik yang kecil atau molekul organik yang besar, terpenetrasi oleh

suatu cairan. Gel dapat digunakan untuk obat yang diberikan secara topikal atau
dimasukkan ke dalam lubang tubuh (Depkes RI., 1995).
Beberapa keuntungan sediaan gel (Voigt, 1995) adalah sebagai berikut:
a. kemampuan penyebarannya baik pada kulit
b. efek dingin, yang dijelaskan melalui penguapan lambat dari kulit
c. tidak ada penghambatan fungsi rambut secara fisiologis
d. kemudahan pencuciannya dengan air yang baik
Tingginya kandungan air dalam sediaan gel dapat menyebabkan terjadinya
kontaminasi mikroba, yang secara efektif dapat dihindari dengan penambahan
bahan pengawet seperti metil dan propil paraben (Voigt, 1995).
2.4.1 Hidroksi propil metil selulosa (HPMC)
Hidroksi propil metil selulosa dengan nama lain hypromellosum (Rowe, et
al., 2009), memiliki ciri-ciri serbuk atau granul putih, tidak berbau dan tidak
berasa, larut dalam air dingin, membentuk larutan koloid kental, larut dalam air
panas, kloroform, etanol (96%) dan eter, tetapi larut dalam campuran etanol dan
diklorometana, campuran metanol dan diklorometana, serta campuran air dan
alkohol. Rumus bangun HPMC dapat dilihat pada Gambar 2.2.
Gambar 2.2 Rumus bangun HPMC (dikutip dari : Rowe, et al., 2009)
PenggunaanHPMCdalamformulasifarmasi adalahsebagaizat
penyalut,zatpendispersi,zatpengemulsi,penstabilemulsi,zatpembentukfilm,memba
ntuprosesgranulasi,pengikattablet,

peningkatviskositasdandigunakanuntukmengaturkecepatanpelepasanobat juga
digunakansecaraluasdalamkosmetikdanproduk makanan.HPMC bersifat
nontoksikdantidak menyebabkaniritasi serta memiliki viskositas yang stabil pada
penyimpanan jangka panjang dan memiliki pH 5,5-8,0 (Rowe, et. al., 2009).
2.4.2Propilen glikol
Propilenglikolmerupakancairanbening,tidak
berberwarna,kental,praktistidakberbau,manisdanmemilikirasa yangsedikit
tajammenyerupaigliserin.Propilenglikollarutdalam aseton,kloroform,etanol
(95%),gliserindanair; mudah larut dalam eter,tidaklarutdenganminyak. Rumus
bangun propilen glikol dapat dilihat pada Gambar 2.3.
Gambar 2.3Rumus bangun propilen glikol (dikutip dari : Rowe, et al., 2009)
Propilenglikoltelahbanyakdigunakansebagaipelarutdanpengawetdalamberba
gaiformulasifarmasi parenteraldannonparenteral,
melarutkanberbagaimacambahan,seperti kortikosteroid,vitamin (A dan D),
alkaloiddanbanyakanestesilokal.Propilenglikol juga digunakan sebagaihumektan
pada sediaan topikal dengan konsentrasi 15% (Rowe, et. al., 2009).
2.4.3 Metil paraben
Metilparabenbanyakdigunakansebagai pengawet antimikrobadalam
kosmetik, produk makanandanformulasisediaanfarmasi. Konsentrasi metil
paraben untuk penggunaan topikal adalah 0,02-0,3% dan 0,18% jika
dikombinasikan dengan propil paraben (Rowe, et. al., 2009). Rumus bangun metil
paraben dapat dilihat pada Gambar 2.4.

Gambar 2.4Rumus bangun metil paraben (dikutip dari : Rowe, et al., 2009)
Metilparabenberbentukkristaltakberwarnaatau bubukkristalputih dan
tidakberbau. Metilparaben lebih efektif terhadap jamur dari pada bakteri.
Aktivitas antimikrobameningkat jika dikombinasi dengan parabenyang memiliki
efeksinergis jugadengan penambahaneksipienlainseperti:propilenglikol. Aktivitas
pH 4-8 dan efeknya berkurang dengan kenaikan pH (Rowe, et al.,2009).
2.4.4 Propil paraben
Propil parabenberbentukbubukputih,kristal,
tidakberbau,dantidakberasa.Propil parabenbanyakdigunakan
sebagaipengawetantimikrobadalamkosmetik,produkmakanan,
danformulasisediaanfarmasi. Konsentrasi propil paraben untuk penggunaan
topikal adalah 0,01-0,6% dan 0,02% jika dikombinasikan dengan metil paraben
(Rowe, et. al., 2009). Gambar rumus bangun propil paraben dapat dilihat pada
Gambar 2.5.
Gambar 2.5 Rumus bangun propil paraben (dikutip dari : Rowe, et al., 2009)
Propil parabenmenunjukkan aktivitasantimikroba pada pH4-
8.Parabenaktifterhadapjamur dan lebihaktifterhadapgram positif

dibandingkanbakterigram negatif. Aktivitas antimikrobanya meningkat jika
dikombinasikan dengan paraben lainnya (Rowe, et. al., 2009).
2.5 Kulit
Kulit merupakan pembungkus yang elastis yang terletak paling luar dan
berfungsi melindungi tubuh dari pengaruh lingkungan hidup, ukurannya kira-kira
15% dari berat tubuh (Djuanda, 2007). Fungsi utama kulit adalah sebagai
pelindung. Kulit terdiri atas 650 kelenjar kelenjar keringat, 20 pembuluh darah,
60.000 melanosit, dan ribuan ujung saraf tepi. Kulit memiliki bagian pelengkap
seperti rambut, kuku dan kelenjar keringat/sebasea. Pembagian kulit secara garis
besar tersusun atas tiga lapisan utama yaitu lapisan epidermis atau kutikel, lapisan
dermis, dan lapisan subkutis. Lapisan dermis dan subkutan tidak mempunyai
garis tegas yang memisahkan, subkutan ditandai dengan adanya jaringan ikat
longgar, sel dan jaringan lemak (Arisanty, 2014). Gambar Struktur bagian kulit
dapat dilihat pada Gambar 2.6.
Gambar 2.6Struktur bagian kulit (dikutip dari : Graham,2002)
2.5.1 Epidermis
Epidermis adalah lapisan paling luar dan paling tipis dari kulit, tidak
memiliki pembuluh darah dan sistem persarafan. Fungsi epidermis adalah sebagai
sistem imun yang pertama dari tubuh manusia atau dikenal dengan istilah First
Skin Immune System. Epidermis memiliki variasi ketebalan antara 0,4-0,6mm dan

epidermis terbagi atas 5 stratum dan menurut Arisanty (2014), epidermisterdiri
atas lima lapisan (dari lapisan yang paling atas sampai yang terdalam) :
a. stratum korneum adalah lapisan paling atas dari epidermis, terdiri dari sel
keratinosit yang bisa mengelupas dan berganti.
b. stratum lusidum: hanya terdapat pada telapak kaki dan telapak tangan. Tidak
tampak pada kulit tipis, terdapat sel mati yang tidak memiliki inti.
c. stratum granulosum: mengandung sel granular (granula lamelar) dan keratin.
Lapisan ini, sel berinti mulai mati dan terus terdorong ke atas.
d. stratum spinosum: memiliki inti sel keratinosit besar. Lapisan ini merupakan
e. hasil pembelahan sel yang berikatan dan melakukan migrasi sel ke arah atas.
f. stratum basale (stratum germinativum) adalah lapisan paling dalam dari
epidermis yang berlokasi dekat dermis. Sel ini merupakan sel hidup berinti
karena mendapatkan difusi oksigen dan nutrisi dari dermis,dan sel yang
melakukan pembelahan sel (mitosis) pada proses regenerasi sel keratinosit
epidermis.
2.5.2 Dermis
Dermis adalah lapisan kedua dari kulit yang merupakan jaringan ikat,
memiliki banyak pembuluh darah dan sistem persarafan.Dermis terdiri
atasjaringan ikat, protein kolagen dan elastin, fibroblas, sistem imun dan sistem
saraf.Dermis juga memiliki dua lapisan utama, yaitu papilare berfungsi sebagai
penguat dari epidermis dalam satu ikatan membran dan lapisan retikuler yang
memiliki pembuluhdarah perifer yang berikatan serta terdiri dari jaringan ikat
padat.Bagian pelengkap kulit terdapat di dermis seperti akar rambut, kelenjar
ekrin, apokrin dan sebasea (Arisanty,2014).
2.5.3 Subkutan

Merupakan lapisan paling tebal dari kulit, terdiri atas jaringan lemak
(paling besar), jaringan ikat dan pembuluh darah. Hipodermis memiliki fungsi
sebagai penyimpan lemak, kontrol temperatur dan penyangga organ di sekitarnya
(Arisanty, 2014).
2.6 Luka
Luka adalah kerusakan kontinuitas kulit atau membran mukosa yang dapat
menyebabkan terganggunya fungsi tubuh (Zederfeldt, et. al., 1986). Klasifikasi
luka berdasarkan waktu penyembuhannya menurut Nagori dan Solanki (2011);
Prabakti (2005) yaitu :
a. luka akut : merupakan luka yang proses perbaikan jaringan normal, tepat
waktu, pemulihan integritas jaringan secara anatomi dan fungsi dapat
dipertahankan. Kriteria luka akut adalah luka baru, mendadak, dan
penyembuhannya sesuai dengan waktu yang diperkirakan., contoh : luka
sayat, luka bakar dan luka tusuk.
b. luka kronis : luka mengalami kegagalan dalam penyembuhan, dapat terjadi
karena faktor endogen dan eksogen. Luka kronik gagal sembuh pada waktu yang
diperkirakan, membutuhkan periode waktu penyembuhan yang lama dan punya
tedensi untuk kembali lagi. Luka kronis merupakan sebab utama ketidak
mampuan secara fisik, contoh : Infeksi lokal, hipoksia, gangguan sistemik seperti
diabetes mellitus, malnutrisi dan defisiensi fungsi imun.
Berdasarkan kedalaman dan luasnya luka dapat dibagi menjadi 4 jenis:
a. stadium I, luka superfisial (Non-Blanching Erithema): yaitu luka yang terjadi
pada lapisan epidermis kulit.
b. stadium II, luka partial thickness: yaitu hilangnya lapisan kulit pada lapisan
epidermis dan bagian atas dari dermis.

c. stadium III, luka full thickness: yaitu hilangnya kulit keseluruhan meliputi
kerusakan atau nekrosis jaringan subkutan yang dapat meluas sampai bawah
tetapi tidak melewati jaringan yang mendasarinya. Lukanya sampai pada
lapisan epidermis, dermis dan fasia tetapi tidak mengenai otot. Luka timbul
secara klinis sebagai suatu lubang yang dalam dengan atau tanpa merusak
jaringan sekitarnya.
d. stadium IV, luka full thickness: yang telah mencapai lapisan otot, tendon dan
tulang dengan adanya destruksi/kerusakan yang luas (Baroroh, 2011).
Berdasarkan mekanisme terjadinya, menurut (Prabakti, 2005) luka dibagi atas:
a. luka insisi (Incised wouds) terjadi karena teriris oleh instrument yang tajam.
misalnya pembedahan.
b. luka memar (contusion wound), terjadi akibat benturan sesuatu tekanan dan
cedera pada jaringan lunak, pendarahan dan bengkak.
c. luka lecet (abraded wound) terjadi akibat kulit bergesekan dengan benda lain
yang biasanya benda tidak tajam.
d. luka tusuk (punctured wound) terjadi akibat adanya benda seperti peluru atau
pisau yang masuk kedalam kulit dengan diameter yang kecil.
e. luka gores (lacerated wound) terjadi akibat benda yang tajam seperti terkena
kaca atau kawat.
f. luka tembus (penetrating wound) adalah luka yang menembus organ tubuh,
biasanya pada bagian awal luka masuk dengan diameter kecil tetapi pada
bagian ujungnya luka akan melebar.
g. luka bakar (combustio)
h. luka gigitan hewan, disebabkan akibat dari gigitan hewan liar atau hewan
peliharaan

i. luka eksisi (exicised wound) luka akibat terpotongnya jaringan oleh benda
tajam (Partogi, 2008)
2.7 Penyembuhan Luka
Penyembuhan luka adalah proses penggantian dan perbaikan fungsi
jaringan yang rusak (Boyle, 2009). Tubuh yang sehat mempunyai kemampuan
alami untuk melindungi dan memulihkan dirinya, peningkatan aliran darah ke
daerah yang rusak, membersihkan sel dari benda-benda asing serta perkembangan
awal selular merupakan bagian dari proses penyembuhan luka. Proses
penyembuhan dapat terjadi secara normal tanpa bantuan.
Pemberian bahan perawatan dapat membantu untuk mendukung proses
penyembuhan (Taylor, 1997), menurut Soni danSinghai (2012), proses
penyembuhan lukamerupakan proses biologik dimulai dari adanya trauma dan
berakhir dengan terbentuknya luka parut.
Tujuan pengobatan luka adalah mengurangi faktor-faktor risiko yang
menghambat penyembuhan luka, mempercepat proses penyembuhan luka yang
terinfeksi. Proses penyembuhan luka menurut Arisanti (2014), dibagi menjadi tiga
fase yaitu fase inflamasi, fase proliferasidan fase remodeling (Gambar 2.7).
FASE INFLAMASI FASE PROLIFERASI FASE MATURASI
Luka melakukan Akumulasi
Kontraksi Luka Kolagen
%
RE
SP
ON
S
M
AXI
M
U
M
WAKTU (HARI)
Gambar 2.7 Fase Inflamasi,fase proliferasi, fase maturasi

(dikutip dari : Arisanty, 2014)

a. Fase inflamasi
Fase ini terjadi pada saat awal terjadinya luka hingga hari ke-3 atau ke-5,
pada fase ini terjadi dua respons yaitu respons vaskular dan respons inflamasi.
Respons vaskular diawali dengan respons hemostatik tubuh selama 5 detik pasca
luka yaitu pembuluh darah akan berkonstriksi di sekitar luka sehingga
vasokonstriksi akan mengurangi pendarahan, kemudian pengaktifan trombosit dan
pembentukan lapisan fibrin. Lapisan fibrin ini membentuk scab (keropeng) di atas
permukaan luka. Respon inflamasi ditandai dengan pelepasan substansi vasoaktif
seperti prostaglandin dan histamin yang mengakibatkan peningkatan vasodilatasi
dan peningkatan permeabilitas pembuluh darah.
Vasodilatasi menyebabkan semakin banyaknya aliran darah ke sekitar luka
yang menyebabkan bengkak, kemerahan, hangat/demam,nyeri. Sel darah putih
(neutrofil) sebagai pertahanan seluler pertama kemudian melakukan fagositosis
jaringan yang mati, benda-benda asing dan bakteri, yang tidak dapat
terfagositosis neutrofil akan diteruskan oleh makrofag sebagai sel pertahanan
seluler kedua. Makrofag selanjutnya akan memfagositosis neutrofil. Proses ini
disebut dengan proses debris (cleaning) (Boyle, 2009; Febram, et. al., 2010;
Arisanty, 2014).
b. Fase proliferasi atau granulasi (pelepasan sel-sel baru).
Fase ini umumnya berlangsung pada hari ke-2 sampai ke-24. Pada fase ini
makrofag akan mengeluarkan fibroblast growth factor (FGF) dan faktor
angiogenesis (AGF). FGF akan menstimulasi fibroblas untuk menghasilkan
kolagen dan elastin. AGF akan merangsang pembentukan pembuluh darah yang

baru. Kolagen dan elastin yang dihasilkan menutupi luka dengan membentuk
matriks/ikatan jaringan baru yang dikenal dengan proses granulasi yang
menghasilkan jaringan granulasi. Jaringan granulasi berproliferasi sehingga luka
yang tadinya memiliki kedalaman, permukaannya menjadi rata dengan tepi luka.
Terjadinya proses epitelisasi sdimulai dari tepi luka yang mengalami proses
migrasi membentuk lapisan tipis (warna merah muda) menutupi luka. Sel pada
lapisan ini sangat rentan dan mudah rusak. Sel mengalami kontraksi (pergeseran),
tepi luka menyatu hingga ukuran luka mengecil (Febram, et al., 2010; Arisanty,
2014).
c. Fase remodeling atau maturasi.
Fase ini mulai terjadi hari ke-21 sampai lebih dari 2 bulan bahkan beberapa
tahun setelah luka. Aktivitas utama yang terjadi adalah penguatan jaringan bekas
luka dengan aktivitas remodeling kolagen dan elastin pada kulit. Kontraksi sel
kolagen dan elastin terjadi sehingga menyebabkan penekanan ke atas permukaan
kulit. Kolagen akan menguatkan ikatan sel kulit baru karena kulit masih rentan
terhadap gesekan dan tekanan. Serabut-serabut kolagen akan menyebar dengan
saling terikat dan menyatu sehingga berangsur-angsur menyokong pemulihan
jaringan.
Kondisi lembab akan menyebabkan luka lebih cepat sembuh karena
meningkatkan produksi faktor pertumbuhan seperti Fibroblas Growth Factor
yang akan merangsang pembentukan fibroblas. Selain itu proses angiogenesis
juga lebih terangsang pada kondisi lembab (Arisanty, 2014).
2.8 Angiogenesis
Angiogenesisatau neovaskularisasi merupakan pertumbuhan atau
pembentukan pembuluh darah baru yang terjadi secara alami di dalam tubuh, baik

dalam kondisi sehat maupun patologi (sakit). Proses angiogenesis berperan dalam
mempertahankan kelangsungan fungsi jaringan dan organ yang rusak, terjadinya
hal ini melalui terbentuknya pembuluh darah baru yang menggantikan pembuluh
darah yang rusak yang berasal dari kapiler-kapiler yang muncul dari pembuluh
darah kecil di sekitarnya. Angiogenesis terjadi segera setelah terjadi luka yang
diinisiasi oleh multiple molecular signals yangmeliputi faktor hemostasis,
inflamasi, cytokine growth factors, cell matrix interactions.Proliferasi kapiler baru
ini melalui peristiwa biologi yang berurutan membentuk jaringangranulasi pada
dasar luka.
Proses ini terjadi hingga tahap akhir pada prosespenyembuhan,
angiogenesis akan dihentikan oleh levelgrowth factorsberkurangnya inflamasi,
stabilisasi matriks jaringan. Kerusakan pada jalur angiogenesis akan merusak
granulasi dan menunda proses penyembuhan, sehingga akan menjadi luka kronis
(Kalangi, 2011).
2.9 Pengaruh Senyawa Kimia Tumbuhan Terhadap Penyembuhan Luka
2.9.1 Flavonoid
Flavonoid bertindak sebagai penampung radikal hidroksi dan
superhidroksi atau memperlambat timbulnya sel nekrosis sehingga melindungi
lipid membran terhadap reaksi yang merusak (Robinson,1995). Flavonoid dapat
juga untuk mempercepat proses penyembuhan luka karena memiliki aktivitas
antimikroba dan astringen, yang memiliki peran dalam penyusutan luka dan
peningkatan laju epitelisasi (Barku, et al., 2013).
2.9.2 Tanin

Tanin merupakan komponen yang banyak terdapat dalam ekstrak tanaman,
bersifat antioksidan. Antioksidan berperanmencegah dan memperbaiki
kerusakanjaringan dengan merangsang proses penyembuhan luka (Barku, et al.,
2013). Tanin juga berkhasiat sebagai astringen yang mampu menciutkan luka,
menghentikan pendarahan dan mengurangi peradangan (Wijaya, et al., 2014),
meningkatkan pembentukan fibroblas dan pembuluh darah baru yang berfungsi
sebagai transportasi pasokan makanan dan oksigen yang dibutuhkan oleh sel-sel
yang sedang dalam perbaikan sehingga dapat mempercepat penyembuhan luka
(Choudhary, 2011)
2.9.3 Saponin
Saponin dapat memacu pembentukan kolagen yang berperan dalam proses
penyembuhan luka (Mappa, etal., 2013), saponin juga memiliki kemampuan
sebagai antimikroba yang berfungsi membunuh atau mencegah pertumbuhan
mikroorganisme yang biasa timbul pada luka sehingga luka tidak mengalami
infeksi yang berat. Saponin juga dapat meningkatkan laju epitelisasi sehingga
dapat mempercepat penutupan luka (Arun, etal., 2013).
2.9.4 Terpenoid
Terpenoid dikenal untuk mempercepat proses penyembuhan luka terutama
karena memiliki aktivitas antimikroba dan astringen, yang memiliki peran dalam
penyusutan luka dan peningkatan laju epitelisasi (Barku, et al., 2013). Menurut
Aguinaldo (1995) Terpenoid yang terdapat pada daun sambung rambat adalah
seskuiterpen lakton seperti mikanolide, dihydromikanolide, deoxymikanolide dan
scandenolide. Mikanolide, dihydromikanolide dan deoxymikanolide memiliki
aktivitas antibakteri (Bakir, et al., 2004; Facey, et al., 2010). Menurut Ahmed,
etal., (2001) bahwa deoxymikanolide memiliki aktivitas analgetik terhadap mencit

yang diinduksi oleh asam asetat sedangkan scandenolide memiliki aktivitas
antiinflamasi.
2.10 Neomisin Sulfat
Neomisin Sulfat adalah garam sulfat dari neomisin merupakan zat
antibakteri yang dihasilkan oleh pertumbuhan Streptomyces fradiae Waksman
(Familia Streptomycetaceae). Pemeriannya adalah serbuk putih sampai agak
kuning, tidak berbau atau praktis tidak berbau, higroskopik dengan
kelarutanmudah larut dalam air, sangat sukar larut dalam etanol, tidak larut dalam
aseton, kloroform dan eter. pH antara 5,0 dan 7,5.
Neomisin merupakan antibiotik berspektrum luas digunakan secara luas
untuk penggunaan topikal dan berbagai infeksi kulit yang disebabkan oleh
mikroorganisme. Antibiotik ini bersifat bakterisidal dengan mekanisme
penghambatan pada sintesis protein. Secara invitro neomisin aktif terhadap
organisme gram negatif. Neomisin juga aktif terhadap gram positif yaitu
Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis (Wattimena, 1991).

BAB III
METODE PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan tahapan
penelitian, pengumpulan dan pengolahan sampel, pembuatan simplisia,
pembuatan ekstrak, pengujian antibakteri gram positif dan gram negatif,
pembuatan sediaan gel ekstrak etanol,evaluasi sediaan gel, pengujiaan sediaan gel
terhadap luka sayat terinfeksi, pengamatan efek penyembuhan luka sayat secara
visual terhadap diameter luka, pembuatan preparat sediaan histopatologidan
perhitungan jumlah pembentukan pembuluh darah baru (angiogenesis).
3.1 Alat dan Bahan
3.1.1 Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat-alat gelas
laboratorium,autoclaf, blender (Philips), cawan petri, gunting bedah, inkubator
(Memert), jarum ose, jangka sorong, kaca objek, kaca arloji, kertas saring,
kandang marmut, labu alas bulat, lemari pengering, mortir, mikrotom, mikroskop
(Olympus), neraca analitik (Vibra AJ), oven listrik (Memert), pH meter, pencukur
bulu, pinset bedah, rotary evaporator(Stuart), stamfer, spatula, sarung tangan,
termometer.
3.1.2 Bahan
Bahan tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun
sambung rambat (Mikania micrantha Kunth.), akuades, bakteri Sa, Sedan Pa,
etanol pro analitik, etanol 70% dan 80%, formalin, hidroksi propilmetilselulosa

(HPMC), hematoksiklin-eosin (HE), metil paraben, Muller Hinton Agar (MHA),
nutrient agar, neomisin, propilen glikol, propil paraben, dan parafin block.
3.2 Hewan Percobaan
Hewan uji yang digunakan pada penelitian ini adalah marmut jantan dengan
bobot ± 350 g yang di peroleh dari Jalan Bintang Kota Medan.Hewan uji
diaklimatisasi selama7 hari sebelum dibuat perlakuan di Laboratorium
Farmakologi Farmasi USU.
3.3 Pengumpulan dan Pengolahan Sampel
3.3.1 Pengumpulan bahan tumbuhan
Pengambilan bahan tumbuhan dilakukan secara purposif, yaitu tanpa
membandingkan tumbuhan yang sama dengan daerah lain, bagian yang diambil
adalah daun segar yang diperolehdariDesa Sigama Dalan, Kecamatan Padang
Bolak,Kabupaten Padang Lawas Utara Provinsi Sumatera Utara.
3.3.2 Pengolahan bahan tumbuhan
Daun sambung rambat yang masih segar dicuci hingga bersih kemudian
ditirisdan ditimbang,selanjutnya dikeringkan dalam lemari pengering temperatur ±
400C. Simplisia yang telah kering diserbuk dengan blender, disimpan dalam
wadah tertutup rapat pada suhu kamar.
3.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sambung Rambat (EEDSR)
Pembuatan ekstrak menggunakan pelarut etanol 80%, (Yuliati., 2014)
dengan metode maserasi menurut (Depkes RI., 1979) dimana sebanyak 1 kg

serbuk simplisia dimasukkan dalam bejana, dituangi dengan 75 bagian etanol,
ditutup, dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sesekali diaduk,
diserkai, diperas, kemudian melalui ampas dicukupkan hingga diperoleh 100
bagian dengan etanol. Pindahkan maserat ke dalam bejana tertutup, dibiarkan di
tempat sejuk terlindung dari cahaya selama 2 hari, enap tuangkan. Pemekatan
ekstrak dilakukan dengan alat rotary evaporator pada suhu ±50oC sampai
diperoleh ekstrak kental, selanjutnya dilakukan pengeringan beku dengan freeze
dryersehingga diperoleh ekstrak kental.
3.5 Penetapan Kadar Air
Penetapan kadar air dilakukan menurut metode azeotropi (destilasi toluen)
dengan cara 200 mL toluendan 2 mL air suling dimasukkan kedalam labu alas
bulat, lalu didestilasi selama 2 jam setelah itu toluen dibiarkan mendingin selama
30 menit, dan dibaca volume air pada tabung penerima dengan ketelitian 0,05 mL,
padalabu tersebut kemudian dimasukkan 5 g serbuk simplisia yang telah
ditimbang seksama,labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Kecepatan diatur
setelah toluen mendidih, lebih kurang 2 tetes tiap detik sampai sebagian besar air
terdestilasi, kemudian kecepatan tetesan dinaikkan hingga 4 tetes tiap detik,
setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen.
Destilasi dilanjutkan kembali selama 5 menit dantabung penerima dibiarkan
mendingin pada suhu kamar hingga terlihat air dan toluen terpisah secara
sempurna, lalu volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 mL. Selisih kedua
volume air yang dibaca menunjukkan kandungan air yang terdapat dalam bahan
yang diperiksa (WHO, 1992).

3.6 Pembuatan Media
3.6.1 Nutrient Agar
Pembuatan media nutrien agar dengan cara serbuk nutrient agar (Merck)
ditimbang sebanyak 23 g dimasukkan ke dalam erlenmeyer kemudian
ditambahkan akuades sedikit demi sedikit dengan akuades 1000 mL, dipanaskan
hingga mendidih sambil diaduk sampai bahan larut sempurna dan jernih,
selanjutnya ditutup dengan kapas yang dilapisi dengan aluminiumfoil dan
disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit.
3.6.2 Media agar miring
Media agar yang telah dimasak diambil 10 mL kemudian dimasukkan ke
dalam tabung reaksi, ditutup, dibungkus selanjutnya disterilkan di dalam autoklaf
selama 15 menit pada suhu 1210C. Tabung yang telah berisi agar diletakkan pada
kemiringan 30-450C dan diamati kemiringan media agar tidak menyentuh tutup
tabung. Media agar dibiarkan menjadi dingin dan keras (Lay, 1994).
3.6.3Muller Hinton Agar (MHA)
Serbuk Muller Hinton Agar (MHA) ditimbang sebanyak 38 g dimasukkan
ke dalam erlenmeyer kemudian disuspensikan dengan akuades sedikit demi
sedikit hingga 1000 mL, dipanaskan hingga mendidih sambil diaduk sampai
bahan larut sempurna dan jernih. Selanjutnya erlenmeyer ditutup dengan kapas
yang dilapisi dengan aluminium foil dan disterilkan di dalam autoklaf pada suhu
121oC selama 15 menit (Lay, 1994)

3.6.4 Suspensi standar Mc.Farland
Suspensi standar yang menunjukkan konsentrasi kekeruhan suspensi
bakteri sama dengan 108 colony forming unit (CFU/mL).
Komposisi: Larutan asam sulfat 1% 9,5 mL

Larutan barium klorida 1,175% b/v 0,5 mL
Cara pembuatan:
Kedua larutan dicampurkan dalam tabung reaksi steril, dikocok sampai homogen
dan ditutup. Apabila kekeruhan hasil suspensi bakteri sama dengan kekeruhan
suspensi standar berarti konsentrasi bakteri 108 CFU/mL.
3.7 Peremajaan Stok Kultur Bakteri Uji
Masing- masing sebanyak satu ose stok kultur dari biakan murni bakteri
digoreskan dengan metode goresan sinambung pada permukaan nutrient agar
miring, ditutup mulut tabung reaksi dengan kapas kemudian diinkubasi selama
18-24 jam pada suhu 37oC.
3.8 Pembuatan Inokulum Bakteri
Bakteri hasil inkubasi peremajaan diambil dengan menggunakan jarum ose
steril lalu di suspensikan ke dalam tabung yang berisi 10 mL larutan NaCl 0,9%.
Suspensi bakteri tersebut dihomogenkan dengan vortex hingga diperoleh
kekeruhan yang sama dengan kekeruhan standar Mc.Farland, hal ini berarti
konsentrasi suspensi bakteri adalah 108 CFU/mL. Selanjutnya dilakukan
pengenceran suspensi dengan memipet 0,1 mL biakan bakteri (108 CFU/mL),
dimasukkan ke dalam tabung steril yang berisi larutan NaCl 0,9% sebanyak 9,9
mL dan dikocok hingga homogen, maka diperoleh suspensi bakteri dengan

konsentrasi 106 CFU/mL.
3.9 Persiapan Pengujian Anti Bakteri
Sebanyak 5 g ekstrak ditimbang seksama dan dilarutkan dalam 5 mL dimetil
sulfoksida (DMSO) lalu dimasukkan ke dalam labu takar 10 mL hingga garis
tanda sehingga diperoleh konsentrasi ekstrak 50% (500 mg/mL). Larutan tersebut
kemudian diencerkan kembali hingga diperoleh ekstrak dengan berbagai
konsentrasi.
3.10 Uji Aktivitas Antibakteri EEDSR
Metode pengujian antibakteri menggunakan metode difusi sumuran
dengan cara 0,1 mL suspensi bakteri yang telah disamakan kekeruhannya dengan
standar Mc. Farland konsentrasi 106 CFU/mL dimasukkan ke dalam cawan petri,
kemudian ditambahkan 10 mL media MHA cair, dihomogenkan dan didiamkan
hingga media memadat. Tiap cawan dibuat sumuran, kemudian 0,1 mL larutan
pembanding DMSO dan larutan ekstrak dari masing-masing konsentrasi
diteteskan pada lubang sumuran. Cawan petri kemudian ditutup dan dibungkus,
didiamkan selama 10-15 menit lalu diinkubasi pada suhu 37oC selama 18-24 jam.
Diameter hambatan pertumbuhan bakteri diamati dengan cara mengukur daerah
bening di sekitar lubang sumuran dengan menggunakan jangka sorong.
3.11 Pembuatan Formula Sediaan
3.11.1 Pembuatan basis gel
Formulasi gel yang dipakai adalah menurut Kusumawati, (2012), yang
terdiri dari :

R/ Hidroksi propil metil selulosa (HPMC) 3,5%
Propilen glikol 15%
Metil paraben 0,2%
Propil paraben 0,05%
Akuades ad 100
Cara pembuatan :
Lumpang yang telah dipanaskan dimasukkan akuades sebanyak 20 kali
beratHPMC, kemudian dikembangkan HPMC di dalamnya (campuran I).Metil
paraben dan propil paraben dilarutkan dalam propilen glikol (campuran II).
campuran I yang diperoleh ditambahkan sedikit demi sedikit ke dalam campuran
II yang telah terdispersi dengan baik sambil digerus, kemudian ditambahkan sisa
akuades dan digerus homogen.
3.11.2 Komposisi formula EEDSR dengan basis gel HPMC
Sediaan gel dibuat dalam 4 formula terdiri dari 1 fomula sebagai basis gel
dan 3 formula dengan berbagai variasi konsentrasi sediaan GEEDSR dan masing-
masing darisediaan tersebut dibuat sebanyak 100g. Komposisi formula dapat
dilihat pada Tabel 3.1.
Tabel 3.1 Komposisi formula gel

Komposisi
NO Formula
EEDSR (g) Basis gel (g)
1 Basis gel - 100
2 GEEDSR 12,50% 12,5 87,5
3 GEEDSR 15,00% 15 85
4 GEEDSR17,50% 17,5 82,5
3.12 Evaluasi Formula Sediaan GEEDSR

Evaluasi formula sediaan meliputi homogenitas, pemeriksaan pH dan
uji stabilitas sediaan.
3.12.1 Pemeriksaan stabilitas fisik sediaan

Evaluasi stabilitas fisik sediaan meliputi pengujian organoleptik seperti
bau, warna dan bentuk sediaan.Sediaan dinyatakan stabil apabila pengujian
organoleptik tidak berubah secara visual selama penyimpanan dan pengamatan
dilakukan selama 12 minggu.
3.12.2 Pemeriksaan homogenitas sediaan
Pemeriksaan homogenitas sediaan dilakukan dengan cara sejumlah
tertentu
sediaan dioleskan pada sekeping kaca,sediaan harus menunjukkan susunan yang
homogen dan tidak adanya butiran kasar (Depkes RI., 1979).
3.12.3 Pemeriksaan pH
Penentuan pH sediaan dilakukan dengan menggunakan pH meter,
sebelumnya alat terlebih dahulu dikalibrasi menggunakan larutan dapar pH netral
(pH 7,01) dan larutan dapar pH asam (pH 4,01). pH meter kemudian dicuci
dengan akuades dan dikeringkan dengan tissue. Sampel dibuat dalam konsentrasi
1% dengan cara 1 g sediaan ditimbang, dilarutkan dalam 100 mL air suling, lalu
pH meter dicelupkan dalam larutan tersebut. Alat dibiarkan hingga menunjukkan
nilai pH yang konstan. Angka yang ditunjukkan pH meter merupakan pH sediaan
(Rawlins, 2003).
3.13. Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan GEEDSR
Uji antibakteri dilakukan untuk mengetahui aktivitas antibakteri sediaan
GEEDSR menggunakan metode difusi sumuran dengan mengukur diameter
hambatan pertumbuhan bakteri terhadap bakteri yang paling aktif dalam
pengujian anti bakteri pada ekstrak.

3.14. Penyiapan Hewan Uji dan Pembuatan Luka
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah marmut jantan
sebanyak 42 ekor dengan berat 300-350g (Ibad, 2013). Pengujian dilakukan
terlebih dahulu dengan mencukur bulu pada bagian punggung marmut,
selanjutnya kulitnya didesinfeksikan dengan alkohol 70% dan dianestesi lokal
dengan 0,5 mL lidokain HCl (2%) (Jamila, et al., 2015). Luka dibuat sesuai
ukuran pola berbentuk lingkaran pada bagian punggungnyamenggunakanpisau
bedah dengan cara mengangkat kulit hewan uji dengan pinset. Suspensi bakteri
yang diperoleh dari pembuatan suspensi inokulum bakteri dengan konsentrasi 106
CFU/ml diberikan sebanyak 0,2mLpada masing-masing hewan yang telah dilukai
(Jeanly, et al., 2014). Pemberian suspensi bakteri dilakukan sampai kondisi luka
sayat terinfeksi dengan kondisi luka merah, bengkak, dan bernanah (Fatimah,
2004).
3.15. Pengujian Sediaan GEEDSR Terhadap Penyembuhan Luka Sayat
Perlakuan dan pengamatan pada penelitian ini adalah :
a. hewan-hewan yang terinfeksi dibagi 7 kelompok secara acak. Tiap kelompok
terdiri atas 6 hewan uji dan diberi tanda menurut perlakuannya masing-masing.
perlakuan I : luka infeksi diberi GEEDSR12,50%
perlakuan II : luka infeksi diberi GEEDSR 15,00%
perlakuan III : luka infeksi diberi GEEDSR 17,50%
perlakuan IV : luka infeksi diberi gel Bioplacenton (kontrol positif)
Perlakuan V : luka infeksi diberi basis gel (kontrol negatif)
Perlakuan VI : luka infeksitanpa perlakuan

perlakuan VII : luka normal (tanpa infeksi dan tanpa diobati)
b. luka dibersihkan lebih dahulu dengan NaCl 0,9% steril, kemudian gel
dioleskan secara merata pada luka yang terinfeksi 2 kali sehari, pagi dan sore
hari sesuai dengan kelompok perlakuannya (Yuhernita, etal., 2014).
c. pengamatan dilakukan setiap hari, diukur diameter penutupan luka dan
pengamatan fisik luka secara visual.
d. kulit yang telah terinfeksi dan telah diberi masing-masing perlakuan, dianastesi
kembali dan diambil sampel kulitnya pada hari ke-8 dan hari ke-15, diamati
perubahan histopatologinyauntuk melihat angiogenesis dengan cara foto
mikroskopis menggunakan pewarnaan Hematosiklin-eosin (HE) (Jamila, et al.,
2015).
e. pengamatan pada proses penyembuhan luka menurut Hamzah, s(2013)
dilakukan dengan cara mengukur diameter penutupan luka yang dihitung
dengan rumus: 𝑑𝑑1 + 𝑑𝑑2 + 𝑑𝑑3 + 𝑑𝑑4

𝑑𝑑 =
4
Keterangan :d: diameter rata-rata; d1: diameter pertama; d2: diameter kedua
d3: diameter ketiga; d4: diameter keempat
Perhitungan persentase penyusutan diameter luka dilakukan dengan rumus:

d0−dx
Persentase penyusutan diameter luka (%)= 𝑥𝑥 100%
𝑑𝑑0
Keterangan: d0 : diameter pada hari 0

dx : diameter pada hari pengamatan.

Perhitungan diameter luka sayat pada punggung marmut pada Gambar 3.1.
d1
d2
d3
d4
Gambar 3.1. Perhitungan diameter luka
3.16Pembuatan Sediaan Histologi
Spesimen diambil pada waktu bersamaan dengan cara eksisi kembali pada
punggung marmut. Spesimen diambil pada hari ke-8 dan hari ke-15. Kemudian
preparat kulit dimasukkan kedalam larutan buffer formalin 10 % untuk fiksasi
jaringan.Jaringan kulit yang telah di fiksasi selanjutnya dilakukan proses dehidrasi
alkohol mengunakan konsentrasi alkohol bertingkat 70%, 80%, 90%, alkohol
absolut I dan alkohol absolut II, selanjutnya dilakukan penjernihan (clearing)
menggunakan xylol I dan xylol II.
Proses pencetakan (parafinisasi) dilakukan dengan menggunakan paraffin
I dan paraffin II. Sediaan dimasukkan ke dalam alat pencetak yang berisi paraffin
setengah volume dan sediaan diletakkan ke arah vertical dan horizontal sehingga
potongan melintang melekat pada dasar paraffin, setelah mulai membeku paraffin
ditambahkan kembali hingga alat pencetak penuh dan dibiarkan sampai paraffin
mengeras. Blok-blok paraffin kemudian dipotong tipis setebal 5 mikrometer
menggunakan mikrotom. Hasil potongan yang berbentuk pita (ribbon)
dibentangkan diatas air hangat bersuhu 46oC dan langsung diangkat yang
bertujuan untuk merenggangkan potongan agar tidak berlipat atau terlipat akibat
dari pemotongan. Sediaaan tersebut kemudian diangat dan dikeringkan

semalaman dalam inkubator bersuhu 60oC. Kemudian diwarnai dengan
Hematoxyllin-Eosin (HE) untuk pemeriksaan mikroskopik.
3.17 Analisis Data
Data yang diperoleh dari efek penyembuhan luka dapat dianalisis dengan
uji ANOVA (Analysis Of Variant) menggunakan program piranti lunak SPSS dan
dilanjutknan dengan analisi Tukeyuntuk melihat efek berbeda dari masing-masing
perlakuan.

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan
Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan oleh Pusat Penelitian Biologi-
LIPI Bogor No.1964/IPH.1.01/If.07/IX/2016 tanggal 09 September 2016 adalah
daun sambung rambat (Mikania micrantha
Kunth.)FamiliCompositae(Asteraceae), dapat dilihat pada Lampiran1 dan Gambar
tumbuhan pada Lampiran 2 halaman 66 dan 67.
4.2 Hasil Ekstraksi Simplisia Daun Sambung Rambat
Hasil maserasi serbuk simplisia daun sambung rambat sebanyak 2 kg
diperoleh EEDSR sebesar 256,3g (12,82%). Cairan penyari yang digunakan
adalah etanol yang merupakan cairan bersifat universal, yang mampu menarik
semua jenis zat aktif, baik bersifat polar, semi polar dan non polar juga kadar
toksisitasnya rendah (Ulviani, 2016). EEDSR yang diperoleh kemudian digunakan
untuk uji aktivitas antibakteri. Bagan pembuatan EEDSR dapat dilihat pada
Lampiran 6 halaman 71.
4.3 Hasil Uji Kadar Air Simplisia dan EEDSR
Berdasarkan monografi persyaratan untuk kadar air simplisia tidak lebih
dari 10% (WHO, 1998; Depkes RI, 1995) untuk ekstrak tidak lebih dari 30%
(Voigt, 1995). Hasil uji kadar air simplisia dan ekstrak daun sambung rambat
(Mikania micrantha Kunth.) memenuhi persyaratan yaitu sebesar 7,65% (<10%)
dan 13,68% (<30%). Semakin tinggi kadar air akan semakin mudah ditumbuhi
jamur karena air merupakan media yang baik untuk pertumbuhan jamur.

4.4 Hasil Evaluasi Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Sambung Rambat
(GEEDSR)
4.4.1 Hasil pemeriksaan organoleptis
Hasil pemeriksaan organoleptis stabilitas fisik pada sediaan GEEDSR
selama penyimpanan 12 minggu dapat dilihat pada Tabel 4.1.
Tabel 4.1 Data hasil pengamatan organoleptis stabilitas fisik sediaan GEEDSR
Waktu penyimpanan
Pengamatan Formula (minggu ke-)
0 4 8 12
Bening Basis gel - - - -
GEEDSR12,50% - - - -
Warna Coklat
GEEDSR 15,00% - - - -
kehitaman
GEEDSR 17,50% - - - -
Tidak berbau Basis gel - - - -
GEEDSR12,50% - - - -
Bau
Beraroma GEEDSR 15,00% - - - -
GEEDSR 17,50% - - - -
Basis gel - - - -
Homogen GEEDSR12,50% - - - -
Homogen
GEEDSR 15,00% - - - -
Tidak homogen GEEDSR 17,50% - + + +
Keterangan:(−)= stabil, (+) = tidak stabil
Pengamatan pada sediaan basis gel (tanpa penambahan ekstrak),
menghasilkan warna yang bening dan tidak memberikan aroma.Dasar gel dengan
penambahan ekstrak (GEEDSR) konsentrasi 12,50%, 15,00%, dan 17,50%
menghasilkan sediaan gel berwarna coklat sampai coklat kehitaman. Hal ini
disebabkan intensitas warna yang dihasilkansemakin meningkat seiring dengan
meningkatnya konsentrasi ekstrak.
Uji homogenitas pada sediaan bertujuan untuk mengetahui apakah sediaan
gel terdistribusisecara merata. Sediaan basis gel, GEEDSR 12,50% dan 15,00%
memenuhi persyaratan homogenitas selama penyimpanan12 minggu. Sediaan
GEEDSR 17,50%pada hari ke-23 minggu ke-4 pengamatan terjadi pemisahan
fase gel. Hal ini terjadi karena gel merupakan sistem dispersi yang tersusun dari

air sehingga sangat rentan dengan terjadinya instabilitas bentuk sediaan (sinersis).
Sinersis dapat terjadi karena faktor perubahan suhu pada penyimpanan, serta
konsentrasi gelling agent yang rendah (Gad, 2008; Kaur dan Guleri, 2013;
Wijoyo, 2016).
4.4.2 Hasil pengukuran pH sediaan GEEDSR
Penentuan pH sediaan bertujuan untuk mengetahui pH formula sediaan
yang dibuat. Hasil pengukuran pH sediaan GEEDSR dapat dilihat pada Tabel 4.2.
Tabel 4.2 Data pengukuran pH sediaan GEEDSR

Nilai pH Pada minggu Ke- pH rata-
Sediaan
0 4 8 12 rata
Basis gel 6,2 6,2 6,2 6,2 6,2
GEEDSR 12,50% 6,2 6,2 6,2 6,2 6,2
GEEDSR 15,00% 6,2 6,2 6,2 6,2 6,2
GEEDSR 17,50% 6,2 5,9 5,8 5,6 5,9
Sediaan topikal yang baik adalah memiliki pH sesuai dengan pH kulit
sekitar 4,5-6,5 karena semakin alkalis atau asam pH bahan yang mengenai kulit,
maka kulit akan semakin sulit untuk menetralisirnya sehingga kulit menjadi
kering dan pecah-pecah(Tranggono dan Latifah, 2007; Yoghestinaga, 2016).
Berdasarkan Tabel 4.2 hasil pengukuran pH sediaan GEEDSR12,50%; 15,00%
dan basis gel memiliki nilai pH rata-rata 6,2 dan tidak mengalami perubahan
selama penyimpanan namun pada sediaan GEEDSR 17,50% terjadi penurunan
nilai pH rata-rata yaitu 5,9. Hal ini menurut Septiani (2012) disebabkan karena
adanya pengaruh CO2 dari udara yang bereaksi dengan fase air pada gel sehingga
membentuk asam, namun perubahan pH ini tidak terjadi secara signifikan, karena
pH sediaaan masih berada dalam range pH normal kulit yaitu 4,5-6,5.
4.5 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Secara Invitro dari EEDSR
Pengukuran diameter hambatan bakteri ujiStaphylococus aureus(Sa),

Staphylococus epidermidis (Se) dan Psedomonas aeroginos (Pa) dapat dilihat
pada Tabel 4.3 dan Gambar pada lampiran 8 halaman 73.
Tabel 4.3 Hasil pengukuran diameter hambat aktivitas bakteri Sa, Se, dan Pa
sediaan EEDSR
Konsentrasi Diameter Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri (mm)*
NO Ekstrak
Sa Se Pa
(mg/mL)
1 500 19,31 20,82 20,11
2 400 17,38 19,82 18,65
3 300 15,03 18,49 17,71
4 200 14,33 16,42 15,20
5 100 13,95 15,25 14,32
6 75 9,75 11,12 10,74
7 50 8,20 10,73 9,25
8 25 - 9,65 -
9 20 - - -
10 Neomycin 25,60 27,14 26,11
11 DMSO - - -
Keterangan: Rata-rata pengukuran dilakukan 3 kali; DMSO = kontrol negatif,
Neomycin = kontrol positif
Menurut Parekh (2007)zona hambat antibakteri adalah zona yang memiliki
diameter daerah hambat14 mmatau lebih besar.Hasil pengukuran diameter hambat
Dimetil sulfoksida (DMSO) tidak menunjukkan adanya aktivitas antibakteri.
EEDSR konsentrasi 100 mg/ml dengan bakteri Sa dan Pa secara berurutan
memberikan nilai hambatan sebesar 13,90 mm dan 14,32 mm, sementara bakteri
Se memberi nilai hambatan sebesar 15,12 mm. Hal ini menunjukkan bahwa
bakteri Se merupakan bakteri uji yang peka dengan konsentrasi 100 mg/mL dan
merupakan konsentrasi hambat minimal (KHM). Pengamatan pada konsentrasi
25,00 mg/mL bakteri uji Se memberikan nilai hambatan sebesar 9,65 sementara
Sa dan Pa tidak memberikan nilai hambat, dan pada pengujian konsentrasi 20,00
mg/mL bakteri Se tidak lagi memberikan nilai hambatan.
Berdasarkan hasil data yang diperoleh EEDSR lebih efektif menghambat
pertumbuhan bakteri Se. Hal ini disebabkan struktur dinding sel bakteri Se(gram

positif) lebih sederhana dibandingkan gram negatifsehingga senyawa aktif yang
diduga terdapat di dalam EEDSR yang berperan sebagai antibakterilebih mudah
masuk ke dalam sel bakteri gram positif dibandingkan bakteri gram negatif.
Berdasarkan penelitian Anggraini (2015), EEDSR mengandung senyawa
golongam flavonoid, terpenoid, alkaloid, saponin dan tannin. Flavonoid adalah
senyawa bersifat polar sehingga lebih mudah menembus lapisan peptidoglikan
pada bakteri gram positif yang juga bersifat polar, selain itu, dinding sel bakteri
gram positif juga mengandung polisakarida (asam teikoat) merupakan polimer
yang larut dalam air. Sifat larut ini juga yang menunjukkan bahwa dinding sel
gram positif bersifat lebih polar (Magdalena, 2015). Terpenoid mampu
melarutkan lipid dan menggumpalkan protein dinding sel bakteri sehingga
keutuhan dinding sel bakteri terganggu dan menurunkan permeabilitas dinding sel
bakteri, dan menyebabkan kematian bakteri (Wijaya dan Hendra, 2016). Alkaloid
bekerja sebagai antibakteri dengan cara merusak komponen penyusun
peptidoglikan sehingga lapisan dinding sel bakteri tidak terbentuk secara utuh dan
menyebabkan kematian sel (Sudarno, et al., 2011).Saponin merupakan senyawa
aktif bersifat seperti sabun dengan cara menurunkan tegangan permukaan sel
(Komala, et al., 2012), sehingga zat antibakteri mudah masuk ke dalam sel,
mengganggu metabolisme hingga terjadilah bakteri mati (Karlina, et al., 2013).
Tanin bersifat sebagai antibakteri dimana dinding sel bakteri yang telah lisis
akibat senyawasaponin dan flavonoid mempermudah senyawa tanin masuk ke
dalam sel bakteri mengkoagulasi protoplasma sel bakteri (Karlina, et al., 2013).
4.5 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Secara Invitro Pada Sediaan GEEDSR.

Pengujian aktivitas antibakteri pada penelitian ini menggunakan
metode sumuran, karena pada metode ini memungkinkan bahan uji sediaan gel
langsung bersentuhan dengan dinding media agar, sehingga pengukuran diameter
zona hambat akan lebih mudah dan dapat dilihat secara visual (Jawetz, et
al.,2005).
Berdasarkan hasil uji diameter hambatan antibakteri EEDSR yang
diperoleh, bakteri Se paling efektif terhadap formula uji dengan nilai hambatan
15,12 mm pada konsentrasi 100 mg/mL. Tahap penelitian selanjutnya dilakukan
dengan menguji sediaan GEEDSR menggunakan bakteri uji Se. Bioplacenton
(Kalbe Farma) yang berada dipasaran digunakan sebagai kontrolpositif dan basis
gel sebagai kontrol negatif.
Formula sediaan GEEDSR terdiri dari ekstrak kental EEDSR, HPMC,
propilen glikol, metil paraben, propil paraben, dan akuades. EEDSR berfungsi
sebagai zat aktif yang memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Se.HPMC
berfungsi sebagai gelling agent yang merupakan bahan pembentuk gel. Propilen
glikol berfungsi sebagai humektan yang akan menjaga kestabilan sediaan dengan
cara mengurangi penguapan air dari sediaan dan dapat menjaga kelembaban kulit
sehingga kulit tidak kering (Martin, et al., 1993; Barel, et al., 2009; Arikumalasari
et al.,2015).Penambahan Metil paraben dan Propil paraben berfungsi sebagai
pengawet, mengingat akuades berfungsi sebagai pelarut dalam formulasi gel yang
kemungkinan besar akan menyebabkan terjadinya kontaminasi (Depkes RI, 1979).
Hasil pengukuran diameter hambatan pertumbuhan bakteri Se dengan sediaan
GEEDSR dapat dilihat Tabel 4.4 Lampiran 9 halaman 74.

Tabel4.4 Hasil pengukuran diameter hambat pertumbuhan bakteri Se dengan
sediaan GEEDSR
Konsentrasi Gel Diameter Daerah Hambat
NO Ekstrak Pertumbuhan Bakteri Se
(% b/b) (mm)*
1 30,0 21,20
2 27,5 20,45
3 25,0 19,39
4 22,5 18,53
4 20,0 17,83
5 17,5 16,69
6 15,0 15,83
7 12,5 14,10
8 10 13,07
9 Bioplacenton 26,99
10 Basis gel -
Keterangan: Rata-rata pengukuran dilakukan 3 kali; Basis gel = kontrol negatif,
Bioplacenton = kontrol positif
Berdasarkan data hasil uji aktivitas antibakteri pada EEDSR mengalami
penurunan setelah dibuat dalam bentuk sediaan GEEDSR.Menurut Sinko, (2011)
penurunan nilai diameter hambat ini disebabkan karena semakin besarnya
konsentrasi HPMC, maka semakin kecil daya hambat yang dihasilkan,tingkat
viskositas sediaan menjadi lebih besar, daya sebar semakin kecilsehingga semakin
sulit zat aktif untuk berdifusi atau melepaskan zat aktifnya, menyebabkan daya
hambat yang dihasilkanpun semakin kecil sementara Bioplacenton mempunyai
daya hambat lebih besar dibanding formula uji, hal ini disebabkan karena
Bioplacenton mengandung neomycin yang merupakan antibakteri berspektrum
luas sedangkan basis gel tidak mempunyai aktivitas antibakteri dan tidak
mengandung zat aktif EEDSR.
4.7 Hasil Uji Efektivitas Penyembuhan Luka Sayat
Hewan uji yang digunakan terhadap pengamatan penyembuhan luka sayat
eksisi stadium III atau full thickness adalah marmut jantan yang kemudian
diinfeksikan dengan bakteri Se. Menurut Kozier (1995) dan Taylor (1997), gejala

infeksi sering muncul setelah 2 sampai 7 hari perlukaan. Selama pengamatan
hewan uji mengalami infeksi setelah 3 hari, ditandai dengan kondisi luka melebar,
dasar luka menjadi kuning dan hitam(Aristanti, 2014).Kondisi ini disebabkan
karena terjadi ketidak utuhan jaringan yang mudah diinfiltrasi oleh bakteri sehinga
terjadi infeksi yang menyebabkan bertambahnya diameter atau pelebaran pada
luka (Boyd,1971; Pradipta, 2010; Arisanty, 2014).
Pengamatan selanjutnyadilakukan selama 15 hari setelah hewan terinfeksi
(Cuazitl, et al., (2014); Jamila, et al., (2015 ) dan diberikan perlakuan sesuai
dengan kelompoknya masing-masing.Perhitungan persentase terjadinya
penyembuhan luka yang terinfeksi dihitung pada hari ke-3 setelah terjadinya
infeksi (hari ke-3 dinyatakan sebagai hari ke-0), karena pada hari tersebut terjadi
penambahan pelebaran diameter pada luka, namun pada luka normal (tanpa
infeksi dan perlakuan) persentase penyembuhan luka dihitung berdasarkan pola
diameter awal (2 cm) pada saat terjadinya luka.
Berdasarkan pengamatan yang dilakukan diperolehnilai persentase
peningkatan kesembuhan luka terinfeksi bakteri Se yang ditunjukkan pada Tabel
4.5 dan Gambar 4.1.

Tabel4.5Nilaipersentase peningkatan kesembuhan luka terinfeksi bakteri Se
Tanpa
Ha Infeksi Luka terinfeksi bakteri Se dengan perlakuan
ri Luka Tanpa BASIS GEEDSR GEEDSR GEEDSR BIOPLA
Normal perlakuan GEL 12,50% 15,00% 17,50% CENTON
0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
1 0.33 -2.67 -2.25 -1.75 -2.33 -2.58 -2.42
2 2.00 -2.83 -2.58 -1.92 -2.50 -2.67 -2.75
3 11.83 -3.83 -3.75 -3.25 -3.67 -3.75 -4.17
4 12.17 -4.75 2.65 3.07 4.02 7.87 4.64
5 13.33 -5.75 5.79 12.99 14.23 19.60 15.84
6 17.75 -6.50 6.59 14.20 16.96 23.78 18.08
7 18.75 -7.33 8.41 18.97 25.16 36.07 25.92
8 22.08 -8.25 9.90 21.63 30.87 41.53 29.77
9 29.25 -8.92 14.58 30.59 33.68 47.63 32.28
10 32.50 -9.75 19.54 39.96 43.49 50.76 39.92
11 34.17 -9.17 22.69 43.42 50.35 54.86 48.33
12 37.15 -8.33 25.90 50.17 59.00 65.22 54.64
13 42.59 -7.25 30.22 60.37 62.22 67.15 63.36
14 47.42 -6.50 40.89 63.92 66.40 69.72 65.44
15 53.42 -1.17 49.65 66.75 68.25 72.54 68.30
16 58.42 5.42 55.58 69.33 72.43 75.27 73.92
17 68.17 15.67 60.24 71.83 77.33 81.69 76.96
18 76.92 20.00 65.06 79.18 82.39 87.15 80.56
Berdasarkan Tabel hasil pengamatan pada awal terjadinya luka yang
terinfeksi mengalami penurunan nilai persentase kesembuhan, hal ini disebabkan
terjadinya perluasan pada diameter luka, akan tetapi pada luka normal terlihat
persen kesembuhan semakin meningkat, hal ini disebabkan karena pada luka
normal tidak diganggu bakteri penyebab terjadinnya infeksi sehingga proses
penyembuhan berjalan normal. Kondisi ini sesuai menurut Gurtner, et al., (2008)
yang menyatakan bahwa mekanisme penyembuhan lukatergantung dari perluasan
dan kedalaman luka, serta ada tidaknya komplikasi yang mengganggu proses
penyembuhan luka yang menyebabkan penyembuhan luka menjadi lama
danmenyebabkan infeksi menjadi lebih besar, dan menurut Kozier (1995) dan

Taylor (1997), sumber utama infeksi adalah bakteri. Keadaaan infeksi pada luka
menyebabkan fase penyembuhan luka berjalan lambat, bahkan luka gagal untuk
menyatu dengan cepat karena ketika luka terinfeksi, respon inflamatori
berlangsung lama dan penyembuhan luka menjadi lambat.
Hasil pengamatan pada hari ke-11 (hari ke-8 infeksi) persen kesembuhan
GEEDSR konsentrasi 12,50% (43,42%); kosentrasi 15,00% (50,35%); konsentrasi
17,50% (54,86%); Bioplacenton (48,33%); basis gel (22,69%); luka normal
(34,17%); dan luka infeksi tanpa perlakuan masih belum memberikan nilai
kesembuhan (-9,17%).
Hari ke-18 pengamatan (hari ke-15 infeksi), nilai persentase kesembuhan
luka pada masing-masing perlakuan semakin meningkat. Sediaan GEEDSR
konsentrasi 12,50 % (79,18); konsentrasi 15,00% (82,39%) mendekati
pembanding Bioplacenton (80,56%), konsentrasi 17,50% memberikan persen
kesembuhan yang lebih tinggi (87,15%), basis gel dan luka normal kesembuhan
meningkat akan tetapi lebih lambat dengan nilai berturut-turut (65,06%) dan
(76.92%), dan pada luka infeksi tanpa perlakuan mulai menunjukkan nilai
kesembuhan (20,00%). Hal ini menurut Wijaya, et al., (2014) dan Taylor, (1997)
disebabkan karena tubuh yang sehat mempunyai kemampuan alami untuk
melindungi dan memulihkan dirinya sendiri sehingga proses penyembuhan dapat
terjadi secara normal. Grafik peningkatan persentase penutupan luka terinfeksi
dapat dilihat pada Gambar 4.1.

100,00
Persen Kesembuhan Luka

80,00
60,00
40,00
20,00
0,00
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
-20,00
Hari Pengamatan
Gambar 4.1 Grafik persentase penutupan luka terinfeksi bakteri Se
Meningkatnya persentase kesembuhan luka seiring dengan terjadinya
penutupan luka, Peningkatan persentase kesembuhan luka ini diduga berdasarakan
senyawa zat aktif yang terkandung pada sediaan GEEDSR.
Aktivitas farmakologi yang dibutuhkan dalam penyembuhan luka adalah
antiinflamasi, antimikroba, antioksidan, analgetik dan astrigen. Antiinflamasi
diperlukan untuk mencegah terjadinya respon inflamasi yang berkepanjangan
pada luka seperti radang dan nyeri. Antimikroba untuk menghambat pertumbuhan
mikroba yang dapat menyebabkan infeksi sehingga memperlambat proses
penyembuhan luka. Antioksidan untuk menangkap radikal bebas yang dapat
merusak protein, kolagen yang dibutuhkan dalam penyembuhan luka. Analgetik
untuk mengurangi rasa nyeri yang disebabkan oleh luka. Astringen untuk
menciutkan pori-pori kulit sehingga pendarahan pada luka dapat berhenti dengan
cepat dan luka cepat mengering (Arun, et al., 2013).
Efektivitas sediaan GEEDSR dalam mempercepat penyembuhan luka
sayat diduga karenakan adanya kandungan terpenoid/steroid yang bertindak
sebagai astringen, antimikroba serta meningkatkan laju epitelisasi. Tanin sebagai

astringen yang mampu menciutkan pori-pori kulit, antimikroba, antioksidan
(Arun, et al., 2013), meningkatkan pembentukan pembuluh kapiler dan fibroblas
(Choudhary, 2011). Saponin bertindak sebagai antioksidan, antimikroba,
meningkatkan laju epitelisasi dan memacu pembentukan kolagen yang berperan
dalam proses penyembuhan luka (Arun, et al., 2013; Mappa, et al., 2013).
Flavonoid memiliki aktivitas antimikroba, antioksidan, antiinflamasi, astrigen
yang berperan dalam penyusutan luka dan peningkatan laju epitelisasi (Arun, et
al., 2013; Barku, et al., 2013).
Kandungan terpenoid/steroid dari daun sambung rambat adalah golongan
sesquiterpen lakton yang terdiri dari mikanolide dan dihydromikanolide memiliki
aktivitas antibakteri (Bakir, et al., 2004; Facey, et al., 2010), deoxymikanolide
memiliki aktivitas analgetik dan antibakteri yang sangat kuat (Ahmed, et al.,
2001; Facey, et al., 2010) dan scandenolide sebagai antiinflamasi (Ahmed, et al.,
2001), sedangkan flavonoid dari daun sambung rambat adalah mikanin-3-O-sulfat
yang bertindak sebagai antivirus (Rufatto, et al., 2012) serta nepetin sebagai
antioksidan (Nixon, 1995).Alkaloid berfungsi sebagai antiinflamasi dan dapat
melawan infeksi microbial (Nafsiah, 2015).
Gel Bioplacenton diketahui mengandung ekstrak plasenta yang berperan
menstimulasi proses regenerasi sel dan neomisin sulfat berperan sebagai
bakterisidal dalam hal ini aktivitas Bioplacenton dapat berperan menstimulasi
proses regenerasi sel seperti merangsang epitelisasi, pembentukan jaringan ikat
fibrokolagen serta mencegah timbulnya infeksi yang dapat menghambat proses
penyembuhan luka (Dewi, 2010).

4.8. Hasil uji analisis variansi (ANAVA)
Pengukuran diameter luka kelompok hewan uji dilakukan setiap hari
selama 18 hari pengamatan dan penutupan luka dihitung sebagai persentase
kesembuhan luka. Perbedaan signifikankansi dari persentase penutupan luka
menggunakan Anova dengan metode Tukey terhadap nilai persentase
(%)penyembuhan luka (α < 0,05).Hasil analisis dimulai dari hari ke-0 sampai hari
ke- 18. (Tabel 4.5)
Tabel 4.6 Data hasil analisis persentase kesembuhan ANNAVA
Tukey HSD Persen Kesembuhan

Subset
Perlakuan N 1 2 3 4 5 6
Tanpa Perlakuan 114 -2,7325
BASIS GEL 114 21,5305
Luka Normal 114 30,4338
GEEDSR 12,50% 114 33,6561
BIOPLACENTON 114 36,2436
GEEDSR 15,00% 114 36,7518
GEEDSR 17.50% 114 41,6758
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 ,295 1,000
Berdasarkan Tabel hasil SPSS Anova dapat diketahui bahwa secara
keseluruhan hasil persen kesembuhan tiap perlakuan mempunyai perbedaan yang
signifikan kecuali pada GEEDSR konsentrasi 15,00% dan Bioplacenton, data
tersebut sesuai dengan pengamatan hasil penelitian dimana konsentrasi 15,00%
memberikan daya penyembuhan yang hampir sama dengan Bioplacenton.
Kesimpulanini diperoleh dari databerada pada kolom yang sama, sedangkan
konsentrasi 17,50% memberikan hasil penyembuhan yang lebih baik
dibandingkan Bioplacenton dan konsentrasi 15,00%.

4.9 Hasil Pengamatan Histopatologi (HP) sediaan GEEDSR
Pengamatan HP dilakukan pada preparat kulitkelompok perlakuan yang
diambil pada hari ke-8 dan hari ke-15 dengan melihat jumlah pertumbuhan
pembuluh darah baru dandibandingkan dengan kondisi kulit yang normal.
Pengukuran jumlah pembuluh darah ini menggunakan pewarnaan
Hematoxylin-Eosin dan dilihat menggunakan mikroskop cahaya (Olympus Type
CX31) pada 5 lapang pandang (LP) pembesaran 400 kali (Lab Histologi FKUSU,
2017). Jumlah pertumbuhan pembuluh darah(angiogenesis) diurai pada Tabel 4.6.
Tabel 4.7Jumlah pertumbuhan pembuluh darah dengan 5 LP
Jumlah pembuluh darah pada hari ke-

Perlakuan
8 15
Kulit normal 4 4
GEEDSR 12,50% 11 14
GEEDSR 15,00% 15 17
GEEDSR 17,50% 16 17
Bioplacenton 12 15
Basis gel 4 6
Tanpa perlakuan 0 2
Luka normal 3 5
Pembentukan pembuluh darah baru dengan 5 LP pada masing-masing
kelompok perlakuan dapat dilihat pada Gambar 4.2.
Hari ke-8 Hari ke-15

Persen Kesembuhan
20
15
10
5
0
Perlakuan
Gambar 4.2 Grafik rata-rata jumlah kepadatan pertumbuhan pembuluh darah

pada hari ke-8 dan 15 perbesaran 400x dengan5 LP.

Gambar 4.2 menunjukkan bahwa pertumbuhan pembuluh darah baru pada
hari ke-15 lebih banyak dibandingkan dengan hari ke-8, maka dapat dikatakan
jumlah pembuluh darah mengalami peningkatan seiring dengan bertambahnya
waktu. Pengamatan hasil mikroskopik keadaan kulit normal dari hewan uji dapat
dilihat pada Gambar 4.3 dan pengamatan setelah pemberian sediaan GEEDSR
pada hari ke 8 dan hari ke-15 pada Gambar 4.4 dan Gambar 4.5.
Gambar 4.3. Gambar mikroskopik yang menunjukkan keadaan kulit normal

Keterangan : A. epitel squamous berlapis keratin; B. Folikel rambut
Gambar pengamatan hasil mikroskopik kepadatan jumlah angiogenesis

pada hari ke-8 berbagai kelompok perlakuan (Gambar 4.4)
Gambar 4.4. Gambar hasil mikroskopik kepadatan angiogenesis hari ke-8

Keterangan : a. GEEDSR 12,50%; b. GEEDSR 15,00%; c. GEEDSR 17,50 %; d.
basis gel; e. gel Bioplacenton; f. tanpa perlakuan; g. luka normal.
: pembuluh darah baru (angiogenesis)

Pengamatan histopatologi selanjutnya dilakukan pada hari ke-18. Hasil
mikroskopik kepadatan jumlah angiogenesis dapat dilihat pada Gambar 4.5
Gambar 4.5 Gambar hasil mikroskopik kepadatan angiogenesis hari ke-15

Keterangan : A. GEEDSR 12,50%;B. GEEDSR 15,00%;C. GEEDSR 17,50%;D;
Bioplacenton;E; Dasar gel; F; tanpa perlakuan G; luka normal
: pembuluh darah baru (angiogenesis)
Berdasarakan pengamatan mikroskopik preparat histopatologi
pembentukan pembuluh darah (angiogenesis) pada Tabel 4.12memperlihatkan
bahwa pada hari ke-8 sampai hari ke-15 pada masing-masing kelompok
perlakuanterjadi pertumbuhan pembuluh darah baru. GEEDSR konsentrasi
12,50% (11 menjadi 14); konsentrasi 15,00% (15 menjadi 17); konsentrasi
17,50% (16 menjadi 17); Bioplacenton (12 menjadi 15); basis gel (4 menjadi 6);
luka normal (3 menjadi 5); luka infeksi tanpa perlakuan 0 menjadi 2.
Menurut Yuhernita (2014) jumlah angiogenesis dapat meningkat dengan
meningkatnya konsentrasi ekstrak. Terjadinya pertumbuhan pembuluh darah baru
pada kulit hewan yang diberi perlakuan, didugakarena adanya zat aktif yang
terkandung dalam GEEDSR yang dapat mempercepat proses

angiogenesisterhadap jaringan luka, begitu juga pada luka tanpa diberi perlakuan
dan luka normal terlihatadanya pertumbuhan pembuluh darah baru karena
kemamampuan alami tubuh untuk melindungi dan memulihkan dirinya sendiri
Kulit hewan yang terinfeksi tanpa diberi perlakuan (diobati) pada akhir
pengamatan, terlihat sedikit penambahan pembuluh darah yang baru, hal ini
karena luka yang terinfeksi mengalami proses penyembuhan yang lebih lama
disebabkan adanya bakteri yang merupakan sumber infeksi (Taylor, 1997).
Jumlah pembentukan pembuluh darah baru pada kulit hewan yang telah
diberi bahan uji sampai hari ke-15menunjukkan bahwa GEEDSR konsentrasi
15,00% tidak jauh berbeda dengan konsentrasi 17,50% dan Bioplacenton, maka
dapat disimpulkan bahwa konsentrasi 15,00% lebih baik dibandingkan
17,50%yang memiliki efektivitas penyembuhan luka lebih tinggi namun selama
penyimpanan 12 minggu memiliki tekstur yang kurang stabil karena terjadi
pemisahan fase sediaan.
Berdasarkan hasil pembahasan di atas dapat disimpulkan bahwa GEEDSR
konsentrasi 15,00% merupakan konsentrasi yang baik dikarenakan efektivitas
penyembuhan luka memberikan hasil yang sama dan lebih baik dari Bioplacenton
sebagai kontrol positif, selain itu konsistensi sediaan selama penyimpanan dan
pengukuran pH memenuhi persyarat.

BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil dan pembahasan maka kesimpulan dari penelitian ini
adalah:
a. ekstrak etanol daun sambung rambat mempunyai aktifitas terhadap bakteri
gram positif dan gram negatif.
b. ekstrak etanol daun sambung rambat dapat di formulasikan dalam bentuk
sediaan gel.
c. sediaan gel ekstrak etanol daun sambung rambat dapat memberikan efek
penyembuhan luka sayat eksisi yang terinfeksi bakteri Staphylococcus
epidermis(Se) dengan indikator angiogenesis, diameter luka dan persentase
kesembuhan luka.
d. konsentrasi GEEDSR yang paling efektif adalah 15,00% dimana pada
konsentrasi tersebut tidak memberikan efek yang berbeda signifikan dengan
gel Bioplacenton yang di pasaran dan stabil selama penyimpanan 12 minggu.
5.2 Saran
Berdasarkan hasil penelitian, disarankan kepada peneliti selanjutnya agar
sediaanGEEDSR dapat dikembangkan lagi menjadi sediaan antibakteri dengan
bentuk formulasi yang berbeda seperti salep atau krem dan dapat dilakukan uji
lebih lanjut efektifitasnya terhadap manusia (uji klinis).

DAFTAR PUSTAKA
Aguinaldo, A.M., Padolina, W.G., Abe, F., dan Yamauchi, T. (1995).

Germacranolides of Mikania cordata. Phytochemistry. 38(6): 1441-1443.
Ahmed, M., Rahman, M.T., Alimuzzaman, M., dan Shilpi, J.A. (2001).
Analgesic sesquiterpene dilactone from Mikania cordata. Fitoterapia.
72(8): 919-921.
Anggraini, R.H. (2015). Uji Aktivi tas Antibakteri Ekstrak n-Heksana, Etilasetat
dan Etanol Daun Sambug Rambat (Mikania micrantha Kunth) Terhadap
Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Skripsi Fakultas
Farmasi USU: 32,42
Arisanty, I.P. (2014). Konsep Dasar Manajemen Perawatan Luka. Jakarta:

Penerbit Buku Kedokteran EGC. Halaman 29-33
Arikumalasari, J., Dewantara, I.G.N.A., Wijayanti, N.P.A.D. (2015). Optimasi

HPMC sebagai Gelling Agent Dalam Formulasi Gel Ekstrak Kulit Buah
Manggis (Garcinia mangostana L.) FMIPA. Farmasi.Unud, Jimbaran-
Bali. Halaman: 146-148
Arun, M., Satish, S., dan Anima, P. (2013). Herbal Boon for Wounds.
International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 5(2):1-12.
[APFISN] Asia-Pasific Forest Invasive Species Network. (2012). Mikania

micrantha, Mile-a-minute weed [Internet]. Kerala (IN): Kerala Forest
Research Institute.
Bakir, M., Facey, P.C., Hassan, I., Mulder, W.H., Porter, R.B. (2004). Mikanolide
from Jamaican Mikania micrantha. Acta Crystallographica Section C.
C(60): 798-800.
Barku, Y.A., Boye, A., dan Ayaba, S. (2013). Phytochemical Screening and
Assessment of Wound Healing Activity of The Leaves of Anogeissus
leiocarpus. European Journal of Experimental Biology. 3(4): 25.
Baroroh, D.B. (2011). Konsep Luka. Malang: Basic Nursing Department PSIK
FIKES UMM. Halaman. 2.
Barel, A. O., M. Paye, dan H.I. Maibacah. (2009). Handbook of Cosmetic Science
and Technology. 3rdEdition. New York: Informa Healthcare USA, Inc. Pp.
233, 261-262
Boyle, M. (2009). Wound Healing in Midwifery. United Kingdom: Radcliffe

Publishing Ltd. Halaman. 14.

Boyd, W. (1971). An Introduction to the study of Disease. Ed 6. Philadelphia :
Lea and Febiger. Halaman 96-101
CABI (Centre for Agriculture and Biosciences International), (2016).

Mikania micrantha (bitter vine). WallingfordOxonUK, diunduh
dari http://www.cabi.org/isc/datasheet/34095 pada tanggal 12
Juli 2017
Choudhary, G.P. (2011). Wound Healing activity of The Ethanolic Extract of
Terminalia chebula Retz.Int. J. of Pharma and Bio Sciences. 2(1): 48-52.
Cuazitl, A. M. (2014). Effect of Metatera Extract on Wound Closure. Int. J. of

Chemical, Biological and Physical Sciences. Halaman. 19-20
Depkes RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Depkes RI.
Halaman.7,33.
Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Depkes RI.
Halaman. 299-306, 321-322, 325, 333-337.
Depkes RI. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:
Depkes RI. Halaman 14, 17.
Dewi, S.P. (2010). Perbedaan Efek Pemberian Lendir Bekicot (Achatina fulica)
dan Gel Bioplacenton Terhadap Penyembuhan Luka Bersih Pada Tikus
Putih. Surakarta: FK UNS. Halaman. 40-43
Djuanda Adhi., 2007., Ilmu Penyakit Kulit Dan Kelamin. Edisi kelima.Balai
Penerbit FKUI.Jakarta.
Dwidjoseputro. (1994). Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Penerbit D.

Jambatan. Halaman. 118-134.
[DEEDI] Department of Employment, Economic Development and

Innovation,Queensland Government. (2011). Mikania Vine, Mikania
micrantha [Internet].Queensland (AU): The State of Queensland,
DepartmentofAgricultureandFisheries,
(2016).[diakses2017Jan10].Availableat:https://www.daf.qld.gov.au/__data
/assets/pdf_file/0011/75539/IPAMikania-Vine-PP143.pdf
Facey, P.C., Peart, P.C., dan Porter, R.B.R. (2010). The Antibacterial Activities of
Mikanolide and its Derivatives.West Inndian Med J. 59(3): 249-252.
Fatimah Cut. (2004).Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Angsana (Pterocarpus

Indicus Willd.) Secara In Vitro dan Efek Penyembuhan Sediaan Salap
Terhadap Luka Buatan Kulit Marmut Yang Diinfeksi. Tesis Program Pasca
Sarjana Program Magister Ilmu Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Febram, B., Wientarsih, dan L., Pontjo, B. (2010). Aktivitas Sediaan Salep
Ekstrak Batang Pohon Pisang Ambon (Musa paradisiaca var sapientum)

dalam Proses Penyembuhan Luka pada Mencit (Mus musculus albinus).
Majalah Obat Tradisional. 15(3): 121-137.
Graham, R.B., Burns T., (2005). Lecture Notes Dermatology. 8th ed. Jakarta:
Erlangga, 8-9
Gurtner, Geoffrey, C. (2008). Wound Repair and Regeneration. Nature. 453, 314-
321
Hamzah, H., Fatimawali, dan Mongi, J. (2013). Formulasi Salep Ekstrak Etanol
Daun Nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) dan Uji Efektivitas
Terhadap Penyembuhan Luka Terbuka pada Kelinci. 2(3): 62-66.
Haisya NBS, Latifah AR, Suratno RP, Sa’diah S, Afiff U. (2013). Sambung
Rambat (Mikania micrantha H.B.K) as Natural Alternative Antibacterial
and Its Study Against Bacterial commonAs Causative AgentIn Cattle
MastitisIn Indonesia. (Seminar).6th Conf. Indonesia Student at Korea.
Daejon, South Korea.
http://www.clinimed.co.uk/Wound-Care/Education/Wound-Essentials/Phases-of-
Wound-Healing.aspx
Ibad, M.R, Nasution, T.H, Andarini, S., (2013). Pengaruh

Ekstrak Daun Kersen (Muntingia Calabura) Terhadap
Derajat Eritema Pada Proses Inflamasi Marmut (Cavia
Porcellus) Dengan Luka Bakar Derajat II Dangkal.
Halaman : 159
Irianto, K. (2006). Mikrobiologi Menguak DuniaMikroorganisme. Jilid I.
Bandung: CV. Yrama Widya. Halaman. 56-58, 147-148.
Jamila, A., (2015). Topical Application of Acheflan On Rat Skin Injury

Accelerates Wound Healing: A Histopatological, Immunohistochemical
and Biochemical Study. BMC Research Article 2-3
Jawetz E, Melnick GE, dan Adelberg CA. (2001). Mikrobiologi Kedokteran. Edisi
I. Penerjemah: Bagian Mikrobiologi Kedokteran Universitas Airlangga.
Surabaya: Penerbit Salemba Medika. Halaman. 211-249.
Jawetz, E., Melnick, J.L., dan Adelberg, E.A. (1996). Mikrobiologi untuk Profesi
Kesehatan. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran. Halaman 63, 291, 612,
627.
Jawetz, E., Melnick, J.L., dan Adelberg, E.A. (2005). Mikrobiologi Kedokteran.
Jakarta: Penerbit Salemba Medika, Jakarta. Halaman 31-326, 352-360.

Jeanly V. Apono, Paulina V.Y.Yamlean, dan Hamidah S. Supriati (2014). Uji
Efektivitas Sediaan Gel Ekstrak Daun Jambu Biji (Psidium guajava Linn)
Terhadap penyembuhan Luka Yang Terinfeksi Staphylococcus Aureus
Pada Kelinci (Orytolagus cuniculus). Pharmacon jurnal ilmiah Farmasi-
UNSRAT Vol.3 No.3. 281-282.
Kalangi, Sonny John Ruddy. (2011). Peran Integrin pada

AngiogenesisPenyembuhan Luka.Bagian Anatomi-Histologi Fakultas
Kedokteran Universitas Sam Ratulangi Manado. Cermin Dunia
Kedokteran (CDK), Vol.38 (3). Halaman 178
Karlina, C.Y., Ibrahim, M., dan Guntur, T. (2013). Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Herba Krokot (Portulaca oleracea L.) Terhadap Staphylococcus aureus
dan Escherichia coli. Lentera Bio. 1(1): 87-93.
Kaur, L.P., Guleri, T.K., (2013). Topical Gels: A Recent Approach for Novel
Drug Delivery. Asian Journal of Biomedical and Pharmaceutical Scienses.
3(17), 1-5
Komala, O., Ike, Y., dan Rita, P. (2012). Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Daun
Lidah Mertua (Sansevieria trifasciata Prain) terhadap Khamir Candida
albicans. Jurnal Ilmiah Farmasi Fitofarmaka. 2(2) : 146-145.
Kozier, B. gtal. (1995). Fundamental of Nursing, Concepts, Process and

Practice. 4th edition. Addition Wesle. Publishing company Inc. Hal.
1359-1367.
Lay, BW. (1994). Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta: PT. Raja Grafindo
Persada. Halaman. 67-71.
Magdalena, N. V., dan Kusnadi. J., (2015). Antibakteri dari Ekstrak Daun Gambir
(Uncaria gambir var Cubadak) Metode Microwave-Assisted Extraction
terhadap Bakteri Patogen) Jurnal Pangan Industri Vol.3 No 1p. Halaman
131-134.
Mappa, T., Edy, H.J., dan Kojong, N. (2013). Formulasi Gel Ekstrak Daun
Sasaladahan (Peperomia Pellucida (L.) H.B.K) Dan Uji Efektivitasnya
Terhadap Luka Bakar Pada Kelinci (Oryctolagus Cuniculus). Jurnal
Ilmiah Farmasi – UNSRAT Vol. 2 No. 02. Halaman. 50-53.
Martin, A., J.Swarbrick, dan A. Cammarata. 1993. Farmasi Fisik: Dasar-Dasar

Farmasi Fisik Dalam Ilmu Farmasetik. Edisi ketiga. Penerjemah: Yosita.
Jakarta: UI-Press. Halaman. 1176-1182
Mukhriani, (2014), Ekstraksi Pemisahan SenyawaDan Identifikasi Senyawa Aktif.

Jurnal Kesehatan,Vol. VII No. 2.

Nagori, B.D. and Solanki, R.( 2011). Role of Medicinal Plants in Wound
Healing.Research Journal of Medicinal Plant 5 (4). Halaman. 392-405.
Nasution L.P.S (2015). Uji Efektifitas Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Sambung
Rambat (Micania cordata (Burn.f B.L.Rob.) Terhadap Penyembuhan Luka
Sayat). Skripsi Fakultas Farmasi USU. 43
Nafsiah. L., Sudrajat, Sudiastuti (2015) Pengaruh Ekstrak Batang Karamunting

(Melastoma Malabathricum Linn.) Terhadap Proses Penyembuhan Luka
Pada Kulit Mencit (Mus musculusL). Program Studi Biologi, FMIPA,
Universitas Mulawarman.Halaman 2-8
Nixon, D.W. (1995). Chemoprevention of Cancer. Charleston: CRC Press.
Halaman 38.
Panjaitan, E.N., Saragih, A., dan Purba, D. (2012). Formulasi Gel dari Ekstrak
Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Roscoe). Journal of
Pharmaceutics and Pharmacology. 1(1): 9-20.
Parekh, J., dan Chanda . S., (2007). In vitro Antimicrobial Activity of Trapa
Natans L. fruit Rind Extracted in Different Solvent. Halaman. 767
Pradipta, Oka, I.G.N.D. (2010). Pengaruh Pemberian Propolis Secara Topikal

Terhadap Migrasi Sel Poliformonuklear Pada Luka Sayat Tikus. Skripsi
Fakultas Kedokteran Universitas Jember. Halaman: 2
Pratiwi, S.T. (2008). Mikrobiologi Farmasi. Jogjakarta: Erlangga. Halaman 2, 38,

174-176, 190.
Pratogi, Donna. (2008). Teknik Eksisi. Departemen Kesehtan Kulit dan Kelamin
Fk. Universitas Sumatera Utara/ RSUP. H. Adam Malik/RS. Dr. Pirngadi
Medan.http://repository.usu.ac.id/bitstream/123456789/3404/1/08E00850.
pdf.
Prabakti, Y. (2005). Perbedaan Jumlah Fibroblast Disekitar Luka Insisi pada

Tikus yang Diberi Infiltrasi Nyeri Levobupivakain dan Tidak Diberi
Levobupivakain. Semarang. UNDIP, Halaman. 25.
Rahmatullah M, Mollik AH, Ali M, Abbas FB, Jahan R, Khatun A, et al.,. (2011).
An Ethnomedicinal survey of Vitbilia village in Sujanagar sub-district of
Pabna district, Bangladesh. AmericanEurasian Journal of Agricultural
and EnvironmentalSciences. 10, 106-111.
Rawlins, E.A. (2003). Bentleys of Pharmaceutics, Edition 18. London: Baillierre

Tindall. Halaman. 22, 35.
Rufatto, L.C., Gower, A., Schwambach, J., Moura, S. (2012). Genus Mikania:
chemicak composition and phytotherapeutical activity. Brazilian Journal
of Pharmacognosy. 22(6): 1384-1403.

Rowe, R.C., Sheskey, P.J., dan Weller, P.J. (2009). Handbook of Pharmaceutical
Excipients. Sixth edition. London: Pharmaceutical Press. Halaman 326,
441, 517, 596.
Robinson, T. 1995. Kandungan Kimia Organik Tumbuhan Tingkat Tinggi.

Bandung: Penerbit ITB.
Septiani, S., N. Wathoni, dan S.R.Mita.(2011). Formulasi Sediaan Gel
Antioksidan dari Ekstrak Etanol Biji Melinjo (Gnetum gnemon Linn.)
Jurnal Unpad. 1(1): 4-24.
Shelke, S.J., Shinkar, D.M., dan Saudagar, R.B. (2013). Topical Gel: A Novel
Approach for Development of Topical Drug Delivery System. International
Journal Of Pharmacy&Technology. 5(3): 2739-2763.
Sinko, P. J (2011). Martin Farmasi Fisika dan Ilmu Farmasetik edisi 5,

diterjemahkan oleh Tim Ahli Bahasa Farmasi ITB, 706, Penerbit buku
kedokteran EGC, Jakarta.
Sudarno, Fabi, A.S., dan Hari, S. (2011). Efektifitas Ekstrak Tanaman Meniran
(Phyllanthus niruri) Sebagai Antibakteri Edwardsiella tarda Secara In-
Vitro. Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan. 3(1) : 103-108.
Soni, H. dan Singhai, A.K. (2012). A Recent Update of Botanicals for Wound
Healing Activity.International Research Journal of Pharmacy, 3.Halaman.
1-6.
Taylor, C., Lils C., LeMono, P. (1997). Fundamental of Nursing The Art and
Science of Nursing Care. 4th edition. Philadelpia : JB Lippincoff. 699-705.
Tim Mikrobiologi FK Brawijaya. (2003). Bakteriologi Medik. Cetakan Pertama.

Malang: Bayu Media Publishing. Hal. 29,32,33,132,133.
Thomas SC. (1995). Medicinal plants culture, utilization and phytopharmacology,

United States: CRC Press, 119-154 P.
Tjitrosoepomo, G. (2005). Taksonomi Tumbuhan (Schizophyta, Thallophyta,

bryophyte, Pteridophyta). Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Halaman. 4-20.
Tranggono, R.I., F. Latifah (2007). Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik.

Jakarta. Gramedia.
Tripathi RS, Khan ML, Yadaf AS. (2012). Biology of Mikania micrantha H.B.K.:
A Review. CAB International.
Voigt, R. (1995). Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Cetakan Kedua

Penerjemah: Soendani Noerono S. Yogyakarta: UGM Press. 580.

Volk, W.A., dan Wheeler, M.F. (1984). Mikrobiologi Dasar. Edisi Kelima. Jilid
Dua. Jakarta: Penerbit Erlangga. Halaman 94.
Widiastuti I. G.A.A. (2015). Ekstrak Pasta Ubi Jalar Ungu (Ipomea batatas L)
mempercepat Angiogenesis dan Meningkatkan Jumlah Fibroblas Soket
Mandibula Pada Penyembuhan Luka Pasca Pencabutan Gigi Marmut
Jantan (Cavia Cobaya). Univ. Udayana. Halaman. 9-40
Wattimena, 1991, Farmakodinamik dan Terapi antibiotik, Gajah Mada
UniversityPress, Yogyakarta. (1-7).
Wijaya, B.A., Citraningtyas, G., dan Wehantouw, F. (2014). Potensi

Ekstrak Etanol Tangkai Daun Talas (Colocasia esculenta [L])
sebagai Alternatif Obat Luka pada Kulit Kelinci (Oryctolagus
cuniculus). Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi. 3(3): 211-219
Wijoyo, V. (2016). Optimasi Formula Sediaan Gel Hand Sanitizer Minyak

Atsiri jeruk Bergamot Dengan Gelling Agent Carbopol dan
Humektan Propilen Glikol. Univ. Sanata Darma. Jogjakarta
Wijaya, S., dan Hendra, N. (2016). Uji Invitro Efek Antibakteri Ekstrak Daging
Muda Buah Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa) terhadap Klebsiella
Pneumoniae. Penelitian Asli. Halaman 10.
World Health Organization. (1992). Quality Control Methods For Medicinal

Plant Material. Switherland: WHO. Halaman 19-25.
Yuhernita, Juniarti, dan Aryenti. (2014). Pengaruh Pemberian Gel dari Ekstrak
Metanol Daun Jarak Tintir (Jatropha Multifida L) terhadap Kepadatan
Serabut Kolagen dan Jumlah Angiogenesis dalam Proses Penyembuhan
Luka. Prosiding Seminar Nasional dan Workshop “Perkembangan Terkini
Sains Farmasi dan Klinik IV”. 47-55.
Yulianti, D., Susilo, B., Yulianingsih, R., (2014). Pengaruh Lama Ekstraksi Dan
Konsentrasi PelarutEtanol Terhadap Sifat Fisika-Kimia Ekstrak Daun
Stevia (Stevia Rebaudiana Bertoni M.) Dengan Metode Microwave
Assisted Extraction (Mae). Jurnal Bioproses Komoditas TropisVol. 2 No.
1. Halaman: 36, 37 dan 41.
Yogestinaga, Y.W. (2016). Optimasi Gelling Agent Carbopol dan Humektan

Propilen Glikol Dalam Formulasi Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun
Binahong (Andredera Cardifolia (Ten) Steenis). Skripsi. Halaman : 40
Zederfeldt, B., Jacobsson, dan S., Ahonen, J. (1986). Wounds and Wound
Healing. London: Wolfe Medical Publications Ltd. 1.

Lampiran 1.Hasil identifikasi tumbuhan

Lampiran 2.Gambartumbuhan dan daun segar sambung rambat
A. Tumbuhan sambung rambat
B. Daun segar sambung rambat

Lampiran 3. Gambarsimplisia dan serbuk simplisia daun sambung rambat
Simplisia daun sambung rambat
Serbuk simplisia daun sambung rambat

Lampiran 4. Bagan alur penelitian
Serbuk simplisia Etanol 80%
Maserasi
Pemeriksaan kadar air
Maserat
Hasil Diupakan dengan rotary

Difreeze dryer
Ekstrak Kental
HPMC, nipagin,
Aktivitas Formulasi Sediaan Gel
Antibakteri nipasol, parafin
% KBM/KHM
Evaluasi sediaan aktivitas antibakteri Penyembuhan Luka
Stabilitas Fisik Luka sayat punggung marmut

sediaan Infeksi/tanpa infeksi
pH
Homogenitas Infeksi (GEEDSR;KN:KP) Tanpa Infeksi/Luka Normal
Diukur diameter Diukur diameter
Hasil Diambil kulit pada hari Diambil kulit pada hari
ke-8 dan 15 ke-8 dan 15
Dihistopatologi Dihistopatologi
Diukur angiogenesis Diukur angiogenesis
Analisis Analisis
Hasil Hasil

Lampiran5.Bagan pembuatan ekstrak
Daun segar sambung rambat

(Micania micrantha Kunth)
Dicuci sampai bersih

Ditiriskan
Ditimbang
Dikeringkan dalam lemari pengering
Simplisia
Dihaluskan
Serbuk simplisia
Diekstraksi secara maserasi

menggunakan etanol 80%
Maserat I Ampas
Dimaserasi kembali menggunakan

pelarut etanol 80%
Maserat II
Maserat I dan maserat II di kumpulkan

Dipekatkan dengan rotary evaporator
Difreeze dryer
Ekstrak kental etanol

Lampiran 6. Bagan uji aktivitas antibakteri dari EEDSR
Biakan murni bakteri
Diambil dengan jarum ose steril

Ditanamkan pada media nutrient agar miring dengan cara menggores
Diinkubasi pada suhu 37⁰C selama 24 jam
Stok kultur bakteri
Diambil 1 ose
Disuspensikan kedalam 10 mL larutan NaCl 0,9%
Dihomogenkan dengan vorteks
Diukur kekeruhan sesuai standart Mc. Farland 108CFU
Biakan bakteri
Diencerkan dengan memipet 0,1 mL

Dimasukkan dalam tabung steril berisi larutan NaCl 0,9% 9,9 mL (106 CFU)
Diaduk homogen
Inokulum bakteri
Dimasukkan 0,1mL inokulum kedalam cawan petri

Ditambahkan 15 mL media MHAcairkedalam cawan petri
Dihomogenkan dan dibiarkan memadat
Media padat
Dibuat lubang sumuran

Di teteskan larutan ekstrak dengan berbagai konsentrasi, sebagai kontrol
digunakan etanol 96%,
Diinkubasi pada suhu 37⁰C selama 18-24 jam
Hasil inkubasi
Diukur diameter zona hambat disekitar lubang sumuran
Hasil(Diameter Zona
Hambat Minimum)
Keterangan : EEDSR : Ekstrak etanol daun sambung rambat.

Lampiran 7. Bagan pembuatan sediaan GEEDSR
HPMC Nipagin dan nipasol dilarutkan
Ditaburkan dalam air panas Dicampurkan dengan

di dalam lumpang, dan propilen glikol
digerus sampai tranparan
Massa I Massa II
Dicampurkan, digerus homogen

Dasar gel
Ditambahkan ekstrak daun sambung rambat di dalam

lumpang yang telah digerus dengan sedikit etanol
Sediaan gel ekstrak Dilakukan berbagai uji fisik, uji aktivitas

daun sambung rambat antibakteri dan uji penyembuhan luka
terinfeksi pada hewan

Lampiran 8.Gambar hasil pengujian hambatan pertumbuhan bakteri dari ekstrak
daun sambung rambat (mm) dengan bakteri Se, Sa dan Pa.
500 75
400 100 50 KN 20
200 KP
300 25
A B
500 75
400 100 50 KN 20
200 KP
300 25
C D
500 75
400 100 50 20
KN
200 KP
300 25
E F
Keterangan :
Gambar A. Staphylococcus epidermidis(Se); EEDSR 100;200;300;400;500 mg/ml
Gambar B.Staphylococcus epidermidis(Se); Kontrol Negatif (KN); kontrol positif (KP); EEDSR
20;25;50;75 mg/ml
Gambar C. Staphylococcus aureus(Sa),EEDSR 100;200;300;400;500 mg/ml
Gambar D. Staphylococcus aureus(Sa), Kontrol Negatif (KN); kontrol positif (KP); EEDSR
20;25;50;75 mg/ml
Gambar E. Psedomonas aeroginosa(Pa) EEDSR 100;200;300;400;500 mg/ml
Gambar F. Psedomonas aeroginosa(Pa) Kontrol Negatif (KN); kontrol positif (KP); EEDSR
20;25;50;75 mg/ml

Lampiran9.Gambar hasil pengujian hambatan pertumbuhan
bakteriStaphylococcus epidermis (Se)darisediaan GEEDSR
25% 15% 27,5%

30%
12,5%
17,5% 20% KP
B
A
KN
10%
22,5%
Keterangan:
A. GEEDSR25%; 15%; 17,5% dan 20%

B. GEEDSR 27,5%; 15%; 30%;12,5% dan KP: Kontrol Positif (Bioplacenton)
C. GEEDSR 10%; 22,5% dan KN: kontrol negatif (dasar gel)

Lampiran 10.Gambar sediaan GEEDSR dengan variasi dosis

Lampiran 11. Gambar hasil uji homogenitas sediaan GEEDSR

Lampiran 12.Surat izin penelitian dari komite etik penelitian (AREC)

Lampiran 13.Sertifikat animal handling

Lampiran 14.Sertifikat analisis hydroxypropyl methyl cellulose (HPMC)
Lampiran

Lampiran 15.Data dan hasil perhitungan persenkesembuhan luka pada kulit marmut dengan berbagai perlakuan
DIAMETER LUKA (CM) DAN PERSENTASE

PENUTUPAN LUKA (%) DIAMETER LUKA (CM) DAN PERSENTASE PENUTUPAN LUKA (%)
Hari Infeksi Tanpa Infeksi BASIS GEL GEEDSR 12,5% GEEDSR 15% GEEDSR 17,5% BIOPLACENTON
Ulangan
-ke
% % % % % %
Ø luka % penutu Ø luka Ø luka Ø luka Ø luka Ø luka Ø luka
penutupa penutupan penutupan penutupa penutupa penutupa
(cm) pan luka (cm) (cm) (cm) (cm) (cm) (cm)
n luka luka luka n luka n luka n luka
Marmut I 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00
Marmut 2 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00
Marmut 3 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00
Marmut 4 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00
0
Marmut 5 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00
Marmut 6 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00
2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00 2,00 0,00
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
Marmut I 2,00 0,00 1,98 1,00 2,05 -2,50 2,04 -2,00 2,06 -3,00 2,05 -2,50 2,05 -2,50
Marmut 2 2,00 0,00 2,00 0,00 2,04 -2,00 2,03 -1,50 2,05 -2,50 2,06 -3,00 2,04 -2,00
Marmut 3 2,08 -4,00 1,99 0,50 2,06 -3,00 2,04 -2,00 2,03 -1,50 2,06 -3,00 2,05 -2,50
Marmut 4 2,05 -2,50 1,99 0,50 2,03 -1,50 2,02 -1,00 2,05 -2,50 2,06 -3,00 2,04 -2,00
1
Marmut 5 2,10 -5,00 2,00 0,00 2,03 -1,50 2,04 -2,00 2,04 -2,00 2,04 -2,00 2,05 -2,50
Marmut 6 2,09 -4,50 2,00 0,00 2,06 -3,00 2,04 -2,00 2,05 -2,50 2,04 -2,00 2,06 -3,00
2,05 -2,67 1,99 0,33 2,05 -2,25 2,04 -1,75 2,05 -2,33 2,05 -2,58 2,05 -2,42
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,04 2,23 0,01 0,41 0,01 0,69 0,01 0,42 0,01 0,52 0,01 0,49 0,01 0,38
Marmut I 2,07 -3,50 1,95 2,50 2,05 -2,50 2,04 -2,00 2,06 -3,00 2,06 -3,00 2,05 -2,50
Marmut 2 2,07 -3,50 1,96 2,00 2,05 -2,50 2,03 -1,50 2,05 -2,50 2,06 -3,00 2,06 -3,00
2
Marmut 3 2,05 -2,50 1,96 2,00 2,04 -2,00 2,04 -2,00 2,05 -2,50 2,06 -3,00 2,05 -2,50
Marmut 4 2,04 -2,00 1,96 2,00 2,05 -2,50 -2,00 2,05 -2,50 2,06 -3,00 2,05 -2,50

Ulangan
-ke
% % % % % %
Marmut 5 2,08 -4,00 1,97 1,50 2,04 -2,00 2,04 -2,00 2,04 -2,00 2,04 -2,00 2,06 -3,00
Marmut 6 2,03 -1,50 1,96 2,00 2,08 -4,00 2,04 -2,00 2,05 -2,50 2,04 -2,00 2,06 -3,00
2,06 -2,83 1,96 2,00 2,05 -2,58 2,04 -1,92 2,05 -2,50 2,05 -2,67 2,06 -2,75
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,02 0,98 0,01 0,32 0,01 0,74 0,00 0,20 0,01 0,32 0,01 0,52 0,01 0,27
Marmut I 2,08 -4,00 1,77 11,50 2,07 -3,50 2,06 -3,00 2,08 -4,00 2,08 -4,00 2,10 -5,00
Marmut 2 2,09 -4,50 1,76 12,00 2,08 -4,00 2,06 -3,00 2,08 -4,00 2,07 -3,50 2,08 -4,00
Marmut 3 2,08 -4,00 1,76 12,00 2,06 -3,00 2,07 -3,50 2,07 -3,50 2,08 -4,00 2,07 -3,50
Marmut 4 2,06 -3,00 1,78 11,00 2,07 -3,50 2,07 -3,50 2,06 -3,00 2,08 -4,00 2,08 -4,00
3
Marmut 5 2,08 -4,00 1,75 12,50 2,07 -3,50 2,06 -3,00 2,07 -3,50 2,06 -3,00 2,07 -3,50
Marmut 6 2,07 -3,50 1,76 12,00 2,10 -5,00 2,07 -3,50 2,08 -4,00 2,08 -4,00 2,10 -5,00
2,08 -3,83 1,76 11,83 2,08 -3,75 2,07 -3,25 2,07 -3,67 2,08 -3,75 2,08 -4,17
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,01 0,52 0,01 0,52 0,01 0,69 0,01 0,27 0,01 0,41 0,01 0,42 0,01 0,68
Marmut I 2,09 -4,50 1,76 12,00 2,00 3,38 2,00 2,91 2,00 3,85 1,91 8,17 2,02 3,81
Marmut 2 2,10 -5,00 1,75 12,50 2,03 2,40 1,99 3,40 2,00 3,85 1,89 8,70 1,98 4,81
Marmut 3 2,11 -5,50 1,75 12,50 2,02 1,94 2,01 2,90 1,98 4,35 1,90 8,65 1,96 5,31
Marmut 4 2,10 -5,00 1,77 11,50 2,02 2,42 2,00 3,38 2,00 2,91 1,92 7,69 2,00 3,85
4
Marmut 5 2,08 -4,00 1,75 12,50 2,03 1,93 1,99 3,40 1,98 4,35 1,93 6,31 1,96 5,31
Marmut 6 2,09 -4,50 1,76 12,00 2,02 3,81 2,02 2,42 1,98 4,81 1,92 7,69 2,00 4,76
2,10 -4,75 1,76 12,17 2,02 2,65 2,00 3,07 1,99 4,02 1,91 7,87 1,99 4,64
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,01 0,52 0,01 0,41 0,01 0,78 0,01 0,40 0,01 0,65 0,01 0,88 0,02 0,67
Marmut I 2,13 -6,50 1,72 14,00 1,98 4,35 1,82 11,65 1,80 13,46 1,67 19,71 1,78 15,24
5
Marmut 2 2,11 -5,50 1,73 13,50 1,92 7,69 1,80 12,62 1,79 13,94 1,68 18,84 1,74 16,35

Ulangan
-ke
% % % % % %
Marmut 3 2,11 -5,50 1,73 13,50 1,90 7,77 1,80 13,04 1,78 14,01 1,68 19,23 1,74 15,94
Marmut 4 2,15 -7,50 1,75 12,50 1,96 5,31 1,78 14,01 1,78 13,59 1,66 20,19 1,76 15,38
Marmut 5 2,09 -4,50 1,73 13,50 1,96 5,31 1,78 13,59 1,76 14,98 1,64 20,39 1,74 15,94
Marmut 6 2,10 -5,00 1,74 13,00 2,01 4,29 1,80 13,04 1,76 15,38 1,68 19,23 1,76 16,19
2,12 -5,75 1,73 13,33 1,96 5,79 1,80 12,99 1,78 14,23 1,67 19,60 1,75 15,84
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,02 1,08 0,01 0,52 0,04 1,57 0,02 0,82 0,02 0,78 0,02 0,61 0,02 0,44
Marmut I 2,15 -7,50 1,65 17,50 1,97 4,83 1,78 13,59 1,74 16,35 1,59 23,56 1,72 18,10
Marmut 2 2,12 -6,00 1,64 18,00 1,90 8,65 1,77 14,08 1,74 16,35 1,60 22,71 1,70 18,27
Marmut 3 2,13 -6,50 1,64 18,00 1,87 9,22 1,78 14,01 1,73 16,43 1,60 23,08 1,68 18,84
Marmut 4 2,15 -7,50 1,65 17,50 1,94 6,28 1,76 14,98 1,74 15,53 1,57 24,52 1,72 17,31
6
Marmut 5 2,11 -5,50 1,65 17,50 1,97 4,83 1,76 14,56 1,68 18,84 1,56 24,27 1,70 17,87
Marmut 6 2,12 -6,00 1,64 18,00 1,98 5,71 1,78 14,01 1,70 18,27 1,57 24,52 1,72 18,10
2,13 -6,50 1,65 17,75 1,94 6,59 1,77 14,20 1,72 16,96 1,58 23,78 1,71 18,08
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,02 0,84 0,01 0,27 0,04 1,91 0,01 0,49 0,03 1,29 0,02 0,78 0,02 0,50
Marmut I 2,16 -8,00 1,63 18,50 1,93 6,91 1,68 18,45 1,59 23,56 1,36 34,62 1,58 24,76
Marmut 2 2,15 -7,50 1,62 19,00 1,85 11,06 1,66 19,42 1,52 26,92 1,22 41,06 1,52 26,92
Marmut 3 2,15 -7,50 1,62 19,00 1,87 9,22 1,70 17,87 1,48 28,50 1,38 33,65 1,56 24,64
Marmut 4 2,16 -8,00 1,63 18,50 1,89 8,89 1,66 19,81 1,52 26,21 1,32 36,54 1,50 27,88
7
Marmut 5 2,13 -6,50 1,64 18,00 1,91 7,63 1,66 19,42 1,60 22,71 1,30 36,89 1,54 25,60
Marmut 6 2,13 -6,50 1,61 19,50 1,96 6,76 1,68 18,84 1,60 23,08 1,38 33,65 1,56 25,71
2,15 -7,33 1,63 18,75 1,90 8,41 1,67 18,97 1,55 25,16 1,33 36,07 1,54 25,92
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,01 0,68 0,01 0,52 0,04 1,64 0,02 0,72 0,05 2,38 0,06 2,81 0,03 1,26
8 Marmut I 2,16 -8,00 1,56 22,00 1,89 8,60 1,62 21,36 1,45 30,29 1,29 37,98 1,50 28,57

Ulangan
-ke
% % % % % %
Marmut 2 2,18 -9,00 1,54 23,00 1,86 10,38 1,60 22,33 1,42 31,73 1,06 48,79 1,45 30,29
Marmut 3 2,16 -8,00 1,57 21,50 1,87 9,03 1,65 20,29 1,45 29,95 1,17 43,75 1,45 29,95
Marmut 4 2,18 -9,00 1,56 22,00 1,85 10,53 1,60 22,71 1,40 32,04 1,25 39,90 1,46 29,81
Marmut 5 2,16 -8,00 1,56 22,00 1,86 10,14 1,60 22,33 1,42 31,40 1,25 39,32 1,42 31,40
Marmut 6 2,15 -7,50 1,56 22,00 1,88 10,71 1,64 20,77 1,46 29,81 1,26 39,42 1,50 28,57
2,17 -8,25 1,56 22,08 1,87 9,90 1,62 21,63 1,43 30,87 1,21 41,53 1,46 29,77
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,01 0,61 0,01 0,49 0,01 0,87 0,02 0,97 0,02 0,97 0,09 4,06 0,03 1,08
Marmut I 2,20 -10,00 1,41 29,50 1,79 13,62 1,40 32,04 1,47 29,33 1,15 44,71 1,39 33,81
Marmut 2 2,17 -8,50 1,43 28,50 1,80 13,70 1,38 33,01 1,32 36,54 1,00 51,69 1,35 35,10
Marmut 3 2,17 -8,50 1,44 28,00 1,77 13,98 1,45 29,95 1,35 34,78 1,05 49,52 1,40 32,37
Marmut 4 2,19 -9,50 1,41 29,50 1,77 14,54 1,44 30,43 1,33 35,44 1,11 46,63 1,42 31,54
9
Marmut 5 2,19 -9,50 1,40 30,00 1,74 15,99 1,46 29,13 1,40 32,37 1,10 46,60 1,48 28,50
Marmut 6 2,15 -7,50 1,40 30,00 1,77 15,62 1,47 28,99 1,38 33,65 1,11 46,63 1,42 32,38
2,18 -8,92 1,42 29,25 1,77 14,58 1,43 30,59 1,38 33,68 1,09 47,63 1,41 32,28
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,02 0,92 0,02 0,82 0,02 1,01 0,04 1,62 0,06 2,57 0,05 2,51 0,04 2,24
Marmut I 2,21 -10,50 1,31 34,50 1,64 20,72 1,26 38,83 1,25 39,90 1,00 51,92 1,24 40,95
Marmut 2 2,18 -9,00 1,35 32,50 1,73 16,88 1,24 39,81 1,08 48,08 0,90 56,52 1,25 39,90
Marmut 3 2,20 -10,00 1,33 33,50 1,72 16,75 1,21 41,55 1,15 44,44 1,00 51,92 1,26 39,13
10
Marmut 4 2,20 -10,00 1,37 31,50 1,61 22,37 1,23 40,58 1,15 44,17 1,08 48,08 1,26 39,42
Marmut 5 2,20 -10,00 1,36 32,00 1,69 18,45 1,24 39,81 1,20 42,03 1,05 49,03 1,20 42,03
Marmut 6 2,18 -9,00 1,38 31,00 1,64 22,05 1,26 39,18 1,20 42,31 1,10 47,12 1,30 38,10
2,20 -9,75 1,35 32,50 1,67 19,54 1,24 39,96 1,17 43,49 1,02 50,76 1,25 39,92
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,01 0,61 0,03 1,30 0,05 2,52 0,02 0,98 0,06 2,79 0,07 3,45 0,03 1,39

Ulangan
-ke
% % % % % %
Marmut I 2,18 -9,00 1,31 34,50 1,59 23,29 1,15 44,17 1,28 38,46 0,90 56,73 1,15 45,24
Marmut 2 2,19 -9,50 1,30 35,00 1,69 18,80 1,14 44,66 0,85 59,13 0,82 60,39 1,08 48,08
Marmut 3 2,18 -9,00 1,31 34,50 1,64 20,24 1,16 43,96 1,04 49,81 0,95 54,33 0,98 52,66
Marmut 4 2,19 -9,50 1,31 34,50 1,54 25,70 1,21 41,55 1,00 51,65 1,00 51,92 1,15 44,71
11
Marmut 5 2,19 -9,50 1,34 33,00 1,61 22,27 1,17 43,20 1,10 46,86 0,95 53,88 1,05 49,28
Marmut 6 2,17 -8,50 1,33 33,50 1,56 25,86 1,18 43,00 0,91 56,20 1,00 51,92 1,05 50,00
2,18 -9,17 1,32 34,17 1,60 22,69 1,17 43,42 1,03 50,35 0,94 54,86 1,08 48,33
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,01 0,41 0,02 0,75 0,06 2,86 0,02 1,11 0,15 7,31 0,07 3,24 0,07 3,00
Marmut I 2,17 -8,50 1,28 35,95 1,54 25,80 0,98 52,43 0,96 53,85 0,78 62,50 1,00 52,38
Marmut 2 2,17 -8,50 1,26 37,00 1,54 26,06 1,08 47,48 0,73 64,90 0,68 67,15 0,98 52,88
Marmut 3 2,16 -8,00 1,21 39,50 1,58 23,30 0,99 52,17 0,76 63,29 0,76 63,46 0,90 56,52
Marmut 4 2,16 -8,00 1,28 36,00 1,48 28,65 1,09 47,54 0,92 55,34 0,70 66,35 0,99 52,40
12
Marmut 5 2,17 -8,50 1,28 35,95 1,55 24,93 0,97 52,91 0,92 55,56 0,70 66,02 0,90 56,52
Marmut 6 2,17 -8,50 1,23 38,50 1,54 26,67 1,07 48,50 0,81 61,06 0,71 65,87 0,90 57,14
2,17 -8,33 1,26 37,15 1,54 25,90 1,03 50,17 0,85 59,00 0,72 65,22 0,95 54,64
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,01 0,26 0,03 1,52 0,03 1,78 0,05 2,59 0,10 4,67 0,04 1,82 0,05 2,30
Marmut I 2,14 -7,00 1,15 42,50 1,41 31,74 0,84 59,22 0,90 56,73 0,70 66,35 0,74 64,76
Marmut 2 2,17 -8,50 1,12 44,00 1,43 31,15 0,83 59,71 0,70 66,35 0,66 68,12 0,78 62,50
Marmut 3 2,12 -6,00 1,17 41,35 1,53 25,68 0,84 59,42 0,68 67,15 0,74 64,42 0,76 63,29
13
Marmut 4 2,14 -7,00 1,18 40,90 1,39 32,75 0,80 61,35 0,82 60,19 0,70 66,35 0,76 63,46
Marmut 5 2,15 -7,50 1,13 43,50 1,47 29,08 0,81 60,68 0,84 59,42 0,62 69,90 0,74 64,25
Marmut 6 2,15 -7,50 1,13 43,30 1,45 30,90 0,79 61,84 0,76 63,46 0,67 67,79 0,80 61,90
2,15 -7,25 1,15 42,59 1,45 30,22 0,82 60,37 0,78 62,22 0,68 67,15 0,76 63,36
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,02 0,82 0,02 1,24 0,05 2,53 0,02 1,08 0,09 4,12 0,04 1,88 0,02 1,06

Ulangan
-ke
% % % % % %
Marmut I 2,13 -6,50 1,08 46,00 1,23 40,55 0,80 61,17 0,87 58,17 0,64 69,23 0,72 65,71
Marmut 2 2,15 -7,50 1,02 49,00 1,23 40,80 0,76 63,11 0,64 69,23 0,59 71,50 0,74 64,42
Marmut 3 2,10 -5,00 1,07 46,50 1,21 41,21 0,67 67,63 0,62 70,05 0,64 69,23 0,74 64,25
Marmut 4 2,14 -7,00 1,07 46,50 1,25 39,61 0,78 62,32 0,68 66,99 0,66 68,27 0,70 66,35
14
Marmut 5 2,14 -7,00 1,04 48,00 1,20 42,03 0,76 63,11 0,72 65,22 0,60 70,87 0,70 66,18
Marmut 6 2,12 -6,00 1,03 48,50 1,24 41,13 0,70 66,18 0,65 68,75 0,64 69,23 0,72 65,71
2,13 -6,50 1,05 47,42 1,23 40,89 0,75 63,92 0,70 66,40 0,63 69,72 0,72 65,44
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,02 0,89 0,02 1,24 0,02 0,80 0,05 2,47 0,09 4,39 0,03 1,21 0,02 0,89
Marmut I 2,03 -1,50 0,95 52,50 1,06 48,65 0,72 65,05 0,70 66,35 0,61 70,67 0,69 67,14
Marmut 2 2,04 -2,00 0,92 54,00 1,03 50,58 0,69 66,50 0,62 70,19 0,50 75,85 0,68 67,31
Marmut 3 2,01 -0,50 0,93 53,50 1,05 49,27 0,62 70,05 0,60 71,01 0,59 71,63 0,67 67,49
Marmut 4 2,00 0,00 0,92 54,00 1,05 49,42 0,75 63,77 0,68 66,99 0,65 68,75 0,68 67,31
15
Marmut 5 2,04 -2,00 0,93 53,50 1,02 50,75 0,70 66,02 0,70 66,18 0,52 74,76 0,60 71,01
Marmut 6 2,02 -1,00 0,94 53,00 1,07 49,24 0,64 69,08 0,65 68,75 0,55 73,56 0,64 69,52
2,02 -1,17 0,93 53,42 1,04 49,65 0,69 66,75 0,66 68,25 0,57 72,54 0,66 68,30
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,02 0,82 0,01 0,58 0,02 0,83 0,05 2,40 0,04 2,06 0,06 2,67 0,03 1,60
Marmut I 1,91 4,50 0,85 57,50 0,94 54,59 0,67 67,48 0,58 72,12 0,51 75,48 0,58 72,38
Marmut 2 1,91 4,50 0,82 59,00 0,91 56,25 0,61 70,39 0,59 71,63 0,42 79,71 0,51 75,48
Marmut 3 1,89 5,50 0,83 58,50 0,89 56,80 0,54 73,91 0,55 73,43 0,57 72,60 0,52 74,88
16
Marmut 4 1,89 5,50 0,82 59,00 0,96 53,62 0,71 65,70 0,56 72,82 0,65 68,75 0,54 74,04
Marmut 5 1,86 7,00 0,83 58,50 0,93 55,07 0,66 67,96 0,58 71,98 0,43 79,13 0,55 73,43
Marmut 6 1,89 5,50 0,84 58,00 0,90 57,14 0,61 70,53 0,57 72,60 0,50 75,96 0,56 73,33
1,89 5,42 0,83 58,42 0,92 55,58 0,63 69,33 0,57 72,43 0,51 75,27 0,54 73,92
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,02 0,92 0,01 0,58 0,03 1,37 0,06 2,90 0,01 0,65 0,09 4,12 0,03 1,12

Ulangan
-ke
% % % % % %
Marmut I 1,64 18,00 0,65 67,50 0,83 59,90 0,58 71,84 0,46 77,88 0,40 80,77 0,49 76,67
Marmut 2 1,66 17,00 0,62 69,00 0,82 60,58 0,58 71,84 0,50 75,96 0,38 81,64 0,43 79,33
Marmut 3 1,72 14,00 0,63 68,50 0,84 59,22 0,54 73,91 0,47 77,29 0,36 82,69 0,46 77,78
Marmut 4 1,72 14,00 0,62 69,00 0,82 60,39 0,60 71,01 0,44 78,64 0,40 80,77 0,48 76,92
17
Marmut 5 1,68 16,00 0,63 68,50 0,83 59,90 0,60 70,87 0,47 77,29 0,37 82,04 0,52 74,88
Marmut 6 1,70 15,00 0,67 66,50 0,81 61,43 0,59 71,50 0,48 76,92 0,37 82,21 0,50 76,19
1,69 15,67 0,64 68,17 0,83 60,24 0,58 71,83 0,47 77,33 0,38 81,69 0,48 76,96
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,03 1,63 0,02 0,98 0,01 0,75 0,02 1,10 0,02 0,90 0,02 0,79 0,03 1,50
Marmut I 1,58 21,00 0,43 78,50 0,70 66,18 0,41 80,10 0,38 81,73 0,28 86,54 0,42 80,00
Marmut 2 1,64 18,00 0,41 79,50 0,73 64,90 0,40 80,58 0,30 85,58 0,26 87,44 0,41 80,29
Marmut 3 1,64 18,00 0,42 79,00 0,75 63,59 0,42 79,71 0,32 84,54 0,20 90,38 0,40 80,68
Marmut 4 1,58 21,00 0,42 79,00 0,71 65,70 0,44 78,74 0,36 82,52 0,31 85,10 0,40 80,77
18
Marmut 5 1,56 22,00 0,45 77,50 0,74 64,25 0,42 79,61 0,43 79,23 0,27 86,89 0,38 81,64
Marmut 6 1,60 20,00 0,64 68,00 0,72 65,71 0,49 76,33 0,40 80,77 0,28 86,54 0,42 80,00
1,60 20,00 0,46 76,92 0,73 65,06 0,43 79,18 0,37 82,39 0,27 87,15 0,41 80,56
Rata2 dan
± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±
Std. deviasi
0,03 1,67 0,09 4,42 0,02 0,99 0,03 1,52 0,05 2,36 0,04 1,77 0,02 0,62

Lampiran 16.Perhitungan kadar air simplisia
1. Perlakuan I
Berat sampel = 5,010 g
Volume awal air = 2,00 ml
Volume akhir air = 2,40 ml
(𝑉𝑉𝑉𝑉𝑉𝑉𝑉𝑉𝑉𝑉𝑉𝑉 𝑎𝑎𝑎𝑎 ℎ𝑖𝑖𝑖𝑖 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 −𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 ) 𝑚𝑚𝑚𝑚

Kadar air (%) = x 100%
𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵𝐵 𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠 (𝑔𝑔)
(2,40−2,00) 𝑚𝑚𝑚𝑚
Kadar air (%) = x 100% = 7,9840%
5,010 𝑔𝑔
2. Perlakuan II

(2,40−2,00) 𝑚𝑚𝑚𝑚
Kadar air (%) = x 100% = 7,9792%
5,013 𝑔𝑔
3. Perlakuan III

(2,35−2,00) 𝑚𝑚𝑚𝑚
Kadar air (%) = x 100% = 6,9860%
5,011 𝑔𝑔
sampel 1+sampel 2+sampel 3

Maka, kadar air rata-rata (%)=
3
(7,9840%+7,9792%+6,9860%)
=
3
= 7,65%

Lampiran 17. Perhitungan kadar air ekstrak
1. Perlakuan I

(2,67−2,00) 𝑚𝑚𝑚𝑚
Kadar air (%) = x 100% = 13,336%
5,024 𝑔𝑔
2. Perlakuan II
Volumeawal air = 2,00 ml
Volumeakhir air = 2,70 ml

(2,70−2,00) 𝑚𝑚𝑚𝑚
Kadar air (%) = x 100% = 13,966%
5,012 𝑔𝑔
3. Perlakuan III
Volumeakhir air = 2,69 ml

(2,69−2,00) 𝑚𝑚𝑚𝑚
Kadar air (%) = x 100% = 13,75%
5,018 𝑔𝑔
sampel 1+sampel 2+sampel 3

Maka, kadar air rata-rata (%) =
3
(13,336%+13,966%)+13,75%)
=
3
= 13,684%

Lampiran 18.Gambarhewan uji
Luka sebelum infeksi Luka setelah infeksi
Pengukuran diameter luka

Lampiran 19. Gambar pengamatan diameter luka
1. Gel EEDSR 12,50 %
Hari ke-1 Hari ke- 3 Hari ke- 5 Hari ke- 7
Hari ke-9 Hari ke-11 Hari ke-13 Hari ke-15
2. Gel EEDSR 15,00 %

Lampiran19(Lanjutan)
3. Gel EEDSR 17,5 %
Hari ke- 9 Hari ke-11 Hari ke-13 Hari ke-15
4. Kontrol positif (Bioplacenton)

4. Basis gel
6. Luka tanpa perlakuan

7. Luka normal

Lampiran 20.Hasil uji beda nyata antar kelompok perlakukan dari Hari ke-1
sampai hari ke- 18
Between-Subjects Factors
Value Label N
Perlakuan ,00 Luka Normal 114
1,00 BASIS GEL 114
2,00 GEEDSR 12,5% 114
3,00 GEEDSR 15% 114
4,00 GEEDSR 17.5% 114
5,00 BIOPLACENTON 114
6,00 Tanpa Perlakuan 114

Hari ,00 Hari 0 42
1,00 Hari 1 42
2,00 Hari 2 42
3,00 Hari 3 42
4,00 Hari 4 42
5,00 Hari 5 42
6,00 Hari 6 42
7,00 Hari 7 42
8,00 Hari 8 42
9,00 Hari 9 42
10,00 Hari 10 42
11,00 Hari 11 42
12,00 Hari 12 42
13,00 Hari 13 42
14,00 Hari 14 42
15,00 Hari 15 42
16,00 Hari 16 42
17,00 Hari 17 42
18,00 Hari 18 42

Lampiran 20.lanjutan
Descriptive Statistics
Dependent Variable: Persen_Kesembuhan
Perlakuan Hari Mean Std. Deviation N
Luka Normal Hari 0 ,0000 ,00000 6
Hari 1 ,3333 ,40825 6
Hari 2 2,0000 ,31623 6
Hari 3 11,8333 ,51640 6
Hari 4 12,1667 ,40825 6
Hari 5 13,3333 ,51640 6
Hari 6 17,7500 ,27386 6
Hari 7 18,7500 ,52440 6
Hari 8 22,0833 ,49160 6
Hari 9 29,2500 ,82158 6
Hari 10 32,5000 1,30384 6
Hari 11 34,1667 ,75277 6
Hari 12 37,1500 1,52118 6
Hari 13 42,5917 1,24275 6
Hari 14 47,4167 1,24164 6
Hari 15 53,4167 ,58452 6
Hari 16 58,4167 ,58452 6
Hari 17 68,1667 ,98319 6
Hari 18 76,9167 4,42060 6
Total 30,4338 22,34383 114

BASIS GEL Hari 0 ,0000 ,00000 6
Hari 1 -2,2500 ,68920 6
Hari 2 -2,5833 ,73598 6
Hari 3 -3,7500 ,68920 6
Hari 4 2,6467 ,77670 6
Hari 5 5,7867 1,56938 6
Hari 6 6,5867 1,90925 6
Hari 7 8,4117 1,64255 6
Hari 8 9,8983 ,87039 6
Hari 9 14,5750 1,01264 6
Hari 10 19,5367 2,51989 6
Hari 11 22,6933 2,85587 6
Hari 12 25,9017 1,78280 6
Hari 13 30,2167 2,52783 6
Hari 14 40,8883 ,80271 6
Hari 15 49,6517 ,82949 6

Hari 16 55,5783 1,37497 6

Hari 17 60,2367 ,75176 6
Hari 18 65,0550 ,99287 6
Total 21,5305 22,20387 114
GEEDSR 12,5% Hari 0 ,0000 ,00000 6
Hari 1 -1,7500 ,41833 6
Hari 2 -1,9167 ,20412 6
Hari 3 -3,2500 ,27386 6
Hari 4 3,0683 ,39771 6
Hari 5 12,9917 ,81705 6
Hari 6 14,2050 ,48919 6
Hari 7 18,9683 ,72220 6
Hari 8 21,6317 ,97514 6
Hari 9 30,5917 1,61776 6
Hari 10 39,9600 ,98415 6
Hari 11 43,4233 1,10574 6
Hari 12 50,1717 2,59064 6
Hari 13 60,3700 1,08425 6
Hari 14 63,9200 2,46197 6
Hari 15 66,7450 2,39518 6
Hari 16 69,3283 2,89884 6
Hari 17 71,8283 1,09813 6
Hari 18 79,1783 1,52239 6
Total 33,6561 28,30749 114
GEEDSR 15% Hari 0 ,0000 ,00000 6
Hari 1 -2,3333 ,51640 6
Hari 2 -2,5000 ,31623 6
Hari 3 -3,6667 ,40825 6
Hari 4 4,0200 ,65296 6
Hari 5 14,2267 ,77717 6
Hari 6 16,9617 1,29000 6
Hari 7 25,1633 2,37674 6
Hari 8 30,8700 ,96910 6
Hari 9 33,6850 2,57397 6
Hari 10 43,4883 2,78730 6
Hari 11 50,3517 7,30540 6
Hari 12 59,0000 4,67353 6

Hari 13 62,2167 4,12311 6

Hari 14 66,4017 4,38924 6
Hari 15 68,2450 2,05492 6
Hari 16 72,4300 ,65109 6
Hari 17 77,3300 ,90186 6
Hari 18 82,3950 2,36055 6
Total 36,7518 29,66289 114
GEEDSR 17.5% Hari 0 ,0000 ,00000 6
Hari 1 -2,5833 ,49160 6
Hari 2 -2,6667 ,51640 6
Hari 3 -3,7500 ,41833 6
Hari 4 7,8683 ,88155 6
Hari 5 19,5983 ,60592 6
Hari 6 23,7767 ,77699 6
Hari 7 36,0683 2,81456 6
Hari 8 41,5267 4,05540 6
Hari 9 47,6300 2,51567 6
Hari 10 50,7650 3,44365 6
Hari 11 54,8617 3,24365 6
Hari 12 65,2250 1,81990 6
Hari 13 67,1550 1,87860 6
Hari 14 69,7217 1,20944 6
Hari 15 72,5367 2,66885 6
Hari 16 75,2717 4,11759 6
Hari 17 81,6867 ,78589 6
Hari 18 87,1483 1,76246 6
Total 41,6758 30,75683 114
BIOPLACENTON Hari 0 ,0000 ,00000 6
Hari 1 -2,4167 ,37639 6
Hari 2 -2,7500 ,27386 6
Hari 3 -4,1667 ,68313 6
Hari 4 4,6417 ,67143 6
Hari 5 15,8400 ,44141 6
Hari 6 18,0817 ,50030 6
Hari 7 25,9183 1,26270 6
Hari 8 29,7650 1,08085 6
Hari 9 32,2833 2,24265 6

Hari 10 39,9217 1,39283 6

Hari 11 48,3283 3,00517 6
Hari 12 54,6400 2,30398 6
Hari 13 63,3600 1,06190 6
Hari 14 65,4367 ,89196 6
Hari 15 68,2967 1,59965 6
Hari 16 73,9233 1,12511 6
Hari 17 76,9617 1,50295 6
Hari 18 80,5633 ,62047 6
Total 36,2436 29,19639 114
Tanpa Perlakuan Hari 0 ,0000 ,00000 6
Hari 1 -2,6667 2,22860 6
Hari 2 -2,8333 ,98319 6
Hari 3 -3,8333 ,51640 6
Hari 4 -4,7500 ,52440 6
Hari 5 -5,7500 1,08397 6
Hari 6 -6,5000 ,83666 6
Hari 7 -7,3333 ,68313 6
Hari 8 -8,2500 ,61237 6
Hari 9 -8,9167 ,91742 6
Hari 10 -9,7500 ,61237 6
Hari 11 -9,1667 ,40825 6
Hari 12 -8,3333 ,25820 6
Hari 13 -7,2500 ,82158 6
Hari 14 -6,5000 ,89443 6
Hari 15 -1,1667 ,81650 6
Hari 16 5,4167 ,91742 6
Hari 17 15,6667 1,63299 6
Hari 18 20,0000 1,67332 6
Total -2,7325 8,05709 114
Total Hari 0 ,0000 ,00000 42
Hari 1 -1,9524 1,32430 42
Hari 2 -1,8929 1,70914 42

Hari 3 -1,5119 5,54086 42
Hari 4 4,2374 4,88880 42
Hari 5 10,8610 7,92865 42

Hari 6 12,9802 9,44066 42
Hari 7 17,9924 13,20549 42
Hari 8 21,0750 15,26990 42
Hari 9 25,5855 16,96120 42
Hari 10 30,9174 19,22828 42
Hari 11 34,9512 21,12949 42
Hari 12 40,5364 23,86451 42
Hari 13 45,5229 25,19954 42
Hari 14 49,6121 25,36481 42
Hari 15 53,9607 24,17539 42
Hari 16 58,6236 23,21220 42
Hari 17 64,5538 21,27472 42
Hari 18 70,1795 21,79008 42
Total 28,2227 28,93297 798
Levene's Test of Equality of Error Variancesa

F df1 df2 Sig.
5,712 132 665 ,000
Tests the null hypothesis that the error variance of the

dependent variable is equal across groups.
a. Design: Intercept + Perlakuan + Hari + Perlakuan * Hari

Tests of Between-Subjects Effects

Type III Sum of

Source Squares df Mean Square F Sig.
a
Corrected Model 665165,418 132 5039,132 1661,639 ,000
Intercept 635625,028 1 635625,028 209595,521 ,000
Perlakuan 154525,142 6 25754,190 8492,370 ,000
Hari 436710,150 18 24261,675 8000,217 ,000
Perlakuan * Hari 73930,126 108 684,538 225,725 ,000
Error 2016,697 665 3,033
Total 1302807,143 798
Corrected Total 667182,115 797
a. R Squared = ,997 (Adjusted R Squared = ,996)
Post Hoc Tests
Perlakuan
Multiple Comparisons
Tukey HSD
Mean 95% Confidence Interval
Difference (I- Lower

(I) Perlakuan (J) Perlakuan J) Std. Error Sig. Bound Upper Bound
*
Luka Normal BASIS GEL 8,9032 ,23066 ,000 8,2211 9,5854
GEEDSR 12,5% -3,2223* ,23066 ,000 -3,9044 -2,5401

*
GEEDSR 15% -6,3181 ,23066 ,000 -7,0002 -5,6359
GEEDSR 17.5% -11,2420* ,23066 ,000 -11,9242 -10,5599

*
BIOPLACENTON -5,8098 ,23066 ,000 -6,4920 -5,1277
Tanpa Perlakuan 33,1662* ,23066 ,000 32,4841 33,8484

*
BASIS GEL Luka Normal -8,9032 ,23066 ,000 -9,5854 -8,2211
*
GEEDSR 12,5% -12,1255 ,23066 ,000 -12,8077 -11,4434
GEEDSR 15% -15,2213* ,23066 ,000 -15,9035 -14,5392
*
GEEDSR 17.5% -20,1453 ,23066 ,000 -20,8274 -19,4631
*
BIOPLACENTON -14,7131 ,23066 ,000 -15,3952 -14,0309
*
Tanpa Perlakuan 24,2630 ,23066 ,000 23,5808 24,9451
GEEDSR Luka Normal 3,2223* ,23066 ,000 2,5401 3,9044
*
12,5% BASIS GEL 12,1255 ,23066 ,000 11,4434 12,8077
*
GEEDSR 15% -3,0958 ,23066 ,000 -3,7779 -2,4136

Multiple Comparisons
Tukey HSD
Mean 95% Confidence Interval
Difference (I- Lower

(I) Perlakuan (J) Perlakuan J) Std. Error Sig. Bound Upper Bound
GEEDSR 17.5% -8,0197* ,23066 ,000 -8,7019 -7,3376

*
BIOPLACENTON -2,5875 ,23066 ,000 -3,2697 -1,9054
*
Tanpa Perlakuan 36,3885 ,23066 ,000 35,7064 37,0707
*
GEEDSR 15% Luka Normal 6,3181 ,23066 ,000 5,6359 7,0002
BASIS GEL 15,2213* ,23066 ,000 14,5392 15,9035
*
GEEDSR 12,5% 3,0958 ,23066 ,000 2,4136 3,7779
*
GEEDSR 17.5% -4,9239 ,23066 ,000 -5,6061 -4,2418
BIOPLACENTON ,5082 ,23066 ,295 -,1739 1,1904
Tanpa Perlakuan 39,4843* ,23066 ,000 38,8021 40,1664
*
GEEDSR Luka Normal 11,2420 ,23066 ,000 10,5599 11,9242
*
17.5% BASIS GEL 20,1453 ,23066 ,000 19,4631 20,8274
*
GEEDSR 12,5% 8,0197 ,23066 ,000 7,3376 8,7019
GEEDSR 15% 4,9239* ,23066 ,000 4,2418 5,6061
*
BIOPLACENTON 5,4322 ,23066 ,000 4,7500 6,1143
*
Tanpa Perlakuan 44,4082 ,23066 ,000 43,7261 45,0904
*
BIOPLACENT Luka Normal 5,8098 ,23066 ,000 5,1277 6,4920
ON BASIS GEL 14,7131* ,23066 ,000 14,0309 15,3952
*
GEEDSR 12,5% 2,5875 ,23066 ,000 1,9054 3,2697
GEEDSR 15% -,5082 ,23066 ,295 -1,1904 ,1739
*
GEEDSR 17.5% -5,4322 ,23066 ,000 -6,1143 -4,7500
Tanpa Perlakuan 38,9761* ,23066 ,000 38,2939 39,6582
*
Tanpa Luka Normal -33,1662 ,23066 ,000 -33,8484 -32,4841
Perlakuan *
BASIS GEL -24,2630 ,23066 ,000 -24,9451 -23,5808
GEEDSR 12,5% -36,3885* ,23066 ,000 -37,0707 -35,7064

*
GEEDSR 15% -39,4843 ,23066 ,000 -40,1664 -38,8021
GEEDSR 17.5% -44,4082* ,23066 ,000 -45,0904 -43,7261

*
BIOPLACENTON -38,9761 ,23066 ,000 -39,6582 -38,2939
Based on observed means.

The error term is Mean Square(Error) = 3,033.
*. The mean difference is significant at the ,05 level.

Homogeneous Subsets
Persen_Kesembuhan
a,b
Tukey HSD
Subset
Perlakuan N 1 2 3 4 5 6
Tanpa Perlakuan 114 -2,7325

BASIS GEL 114 21,5305
Luka Normal 114 30,4338
GEEDSR 12,5% 114 33,6561
BIOPLACENTON 114 36,2436
GEEDSR 15% 114 36,7518
GEEDSR 17.5% 114 41,6758
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 ,295 1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Based on observed means.
The error term is Mean Square(Error) = 3,033.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 114,000.
b. Alpha = ,05.

PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Universitas Sumatera Utara

Repositori Institusi USU http://repositori.usu.ac.id

Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak

Harahap, Nina Irmayanti

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI GEL EKSTRAK ETANOL

PROGRAM STUDI MAGISTER

Universitas Sumatera Utara

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh

PROGRAM STUDI MAGISTER

Universitas Sumatera Utara

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI GEL EKSTRAK ETANOL

Medan, Desember 2017

Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt

Prof. Dr. Urip Harahap, Apt

Mengetahui : Disahkan Oleh:

Universitas Sumatera Utara

Nama Mahasiswa : Nina Irmayanti Harahap

Nomor Induk Mahasiswa : 147014038

Program Studi : Magister Farmasi

Judul Tesis : Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak Etanol

Daun Sambung Rambat (Mikania Micrantha

Kunth) Terhadap Angiogenesis Luka Eksisi

Terinfeksi Pada Marmut

Tim Penguji Tesis

Ketua Tim Penguji Tesis : Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt

Anggota Tim Penguji Tesis : Prof. Dr. Urip Harahap, Apt

Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt.

Prof. Dr. Dwi Suryanto, M.Sc.

Universitas Sumatera Utara

Saya yang bertanda tangan di bawah ini,

Nama Mahasiswa : Nina Irmayanti Harahap

Nomor Induk Mahasiswa : 147014038

Program Studi : Magister Farmasi

Judul Tesis : Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak Etanol

Daun Sambung Rambat (Mikania Micrantha

Kunth) Terhadap Angiogenesis Luka Eksisi

Terinfeksi Pada Marmut

Program Studi Magister Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera

Medan, Desember 2017

Nina Irmayanti Harahap

Universitas Sumatera Utara

micrantha Kunth.) Terhadap Angiogenesis Luka Eksisi Terinfeksi Pada Marmut”

Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Terima kasih yang sebesar-besarnya kepadaIbu Dr. Marline Nainggolan,

penulis, mengarahkan, memberikan dorongan dan semangat sehingga penulis

terpacu untuk menyelesaikan penelitian dan penyelesaian tesis ini.

Selama menyelesaikan penelitian dan tesis ini penulis telah banyak

menghaturkan penghargaan dan terima kasih yang tiada terhingga kepada:

1. Rektor Universitas Sumatera Utara, Bapak Prof.Dr.Runtung,S.H.,M.Hum.

telah memberikan dukungan, fasilitas dan sarana kepada penulis.

Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang sebesarnya

Universitas Sumatera Utara

kesempurnaan, sehingga penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat

bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi.

Medan, Desember 2017

Nina Irmayanti Harahap

Universitas Sumatera Utara

Sambung rambat (Mikania micrantha Kunth.) termasuk suku Compositae,

Kata kunci: GEEDSR, uji aktivitas antibakteri,efektifitas penyembuhan luka

Universitas Sumatera Utara

Keywords:GEEDSR, Antibacterial activity, effectiveness heal infected

Universitas Sumatera Utara

LEMBAR PERSETUJUAN TESIS ............................................................ iii