PDF

FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI
DARI SEDIAAN GEL HAND SANITIZER EKSTRAK DAUN

BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi L.) TERHADAP
BAKTERI Escherichia coli dan Staphylococcus aureus
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
RETNO GUMALA SARI
NIM 151524010
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2018

SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
OLEH:
RETNO GUMALA SARI
NIM 151524010
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2018
ii
iii
KATA PENGANTAR
Bismillahirrahmanirrahim,
Alhamdulillah, puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah
melimpahkan berkat dan rahmatNya sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan penyusunan skripsi yang berjudul “Formulasi dan Uji Aktivitas
Antibakteri dari Sediaan Gel Hand Sanitizer Ekstrak Daun Belimbing Wuluh
(Averrhoa bilimbi L.) terhadap Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus
aureus”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar
Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) terutama pada bagian daun
merupakan salah satu tanaman yang dapat digunakan sebagai antiseptik kulit.
Belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) mengandung seyawa flavonoid, saponin,
steroid/triterpenoid, tanin. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui aktivitas
sediaan gel hand sanitizer ekstrak daun belimbing wuluh. Hasil penelitian
diperoleh sediaaan gel hand sanitizer ekstrak daun belimbing wuluh dapat
menghambat bakteri Escherichia coli dan Staphylococus aureus. Harapan peneliti
sediaan hand sanitizer gel ekstrak daun belimbing wuluh dapat digunakan sebagai
sediaan praktis menggantikan sabun cuci tangan.
Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dra. Nazliniwaty, M.Si., Apt.,
selaku pembimbing yang telah membimbing dan memberikan petunjuk serta
saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini.
Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara Medan. Bapak Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt., selaku ketua
iv
penguji dan Bapak Drs. Agusmal Dalimuthe, M.S., Apt., selaku dosen penguji
yang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam
menyelesaikan skripsi ini. Bapak dan Ibu Staf Pengajar Fakultas Farmasi USU
Medan yang telah mendidik selama perkuliahan.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada kedua orang tua tercinta,
Ayahanda Suratman dan Ibunda Hermanita segala doa dan dukungannya serta
keridhaannya bagi penulis dalam menempuh dan menyelesaikan pendidikan, juga
untuk keluarga tercinta Abang Adil Firmansyah, adik Abdul Kholis, orang
terkasih dan para sahabat Merytasari, Yenmar, Sarintan atas doa dan nasehatnya.
Penulis juga mengucapkan terimakasih kepada teman-teman Farmasi Ekstensi
2015 atas doa dan dukungannya.
Akhirnya penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi
kita semua.
Medan, Desember 2018

Penulis,
Retno Gumala Sari

NIM 151524010
v
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan dibawah ini:
Nama : Retno gumala Sari
Nomor Induk Mahasiswa : 151524058
Program Studi : S-1 Ekstensi Farmasi
Judul Skripsi : Formulasi dan Uji Aktivitas Antibakteri dari

Sediaan Gel Hand Sanitizer Ekstrak Daun
Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.) pada
Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus
aureus
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari
hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang
lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan di Perguruan Tinggi lain, dan bukan
plagiat karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar
pustaka.
Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena didalam
skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk
dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, Desember 2017

Yang membuat pernyataan,
Retno Gumala Sari

NIM 151524010
vi
ABSTRAK
Latar Belakang: Daun belimbing wuluh mempunyai khasiat sebagai antiseptik

kulit. Ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) yang telah diisolasi
memiliki aktivitas antibakteri pada bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus
aureus. Hal tersebut disebabkan karena ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa
bilimbi L.) mengandung senyawa seperti tanin, flavonoid, steroid/ glikosida, dan
saponin.
Tujuan: Formulasi dan uji aktivitas antibakteri dari sediaan gel hand sanitizer
ekstrak daun belimbing wuluh dan evaluasi mutu fisik sediaan hand sanitizer.
Metode: Ekstrak daun belimbing wuluh dibuat dengan metode maserasi
menggunakan etanol 96%. Kemudian diuapkan menggunakan rotary evaporator
dan sisa pelarut diuapkan sampai terbentuk ekstrak kental. Pengujian aktivitas
antibakteri dengan metode difusi agar menggunakan kertas pencadang terhadap
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan mengukur diameter zona
hambat pertumbuhan bakteri. Konsentrasi ekstrak daun belimbing wuluh dan
formula gel hand sanitizer yang digunakan (F0) blangko; (F1) 30%; (F2) 40%;
(F3) 50%. Evaluasi mutu fisik sediaan hand sanitizer meliputi: uji organoleptik,
uji homogenitas, uji pH, uji viskositas.
Hasil: Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak daun belimbing wuluh terhadap
Escherichia coli diperoleh kadar hambat minimal pada konsentrasi 50 mg/ml
dengan diameter hambat sebesar 6,6 mm, dan Staphylococcus aures pada
konsentrasi 40 mg/ml dengan diameter hambat sebesar 6,8 mm. Sedangkan hasil
uji aktivitas gel hand sanitizer ekstrak daun belimbing wuluh diperoleh daya
hambat bakteri Escherichia coli konsentrasi 500 mg/ml yaitu 6,6 mm dan pada
bakteri Staphylococus aureus pada konsentrasi 300 mg/ml dengan diameter 8,6
mm.
Kesimpulan: Sediaan gel antiseptik tangan hand sanitizer ekstrak daun belimbing
wuluh dapat menghambat pertumbuhan Escherichia coli dan Staphylococcus
aureus.
Kata kunci: Ekstrak daun belimbing wuluh, Escherichia coli dan Staphylococcus
aureus , gel hand sanitizer.
vii
FORMULATION AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF
LEAF PICKLE FRUIT EKSTRACT (Averrhoa bilimbi L.)
HAND SANITIZER GEL ON BACTERIA
Escherichia coli and Staphylococus aureus
ABSTRACT
Background: Leaf pickle fruit have fuction as skin antiseptic. Extract of pickle
fruit (Averrhoa bilimbi L.) isolated have antibacterial activity on Escherichia coli
and Staphylococcus aureus bacteria. It is caused extract of pickle fruit (Averrhoa
bilimbi L.) contains compounds such as tannins, flavonoids, steroid/ glikosida,
and saponins.
Purpose: Formulation and test of antibacterial activity of gel preparation of hand
sanitizer leaves star fruit extract and evaluation of physical quality of hand
sanitizer.
Method: Extract of leaf pickle fruit was made by maceration method using
ethanol 96%. Then thickened extract, using a rotary evaporator to form a viscous
extract. Antibacterial activity test was measured by diffusion method using paper
disk to measuring the diameter of the bacterial growth inhibition zone of
Escherichia coli and Staphylococcus aureus. Concentration extract of leaf pickle
fruit and formula of hand sanitizer gel used (F0) blangko; (F1) 30%; (F2) 40%;
(F3) 50%. Evaluation of physical properties of hand sanitizer gel include of:
organoleptic test, homogeneity test, pH test, viscosity test.
Result: The results showed that antibacterial activity test of leaf pickle fruit
extract on Escherichia coli inhibited at minimal concentration of 50 mg/ml with
diameter of inhibit was 6,6 mm, and Staphylococcus aures at concentration 40
mg/ml with diameter of inhibit was 6,8 mm. while the result of antibacterial
activity of hand sanitizer gel inhibited Escherichia coli at concentration 500
mg/ml diameter of inhibit was 6,6 mm and Staphylococcus aureus at
concentration 300 mg/ml with diameter of inhibit was 8,6 mm.
Conclusion: Hand sanitizer gel of leaf pickle fruit extract have less inhibited
growth against Escherichia coli and Staphylococcus aureus.
Key word : Leaf pickle fruit extract, Escherichia coli and Staphylococcus aureus,
hand sanitizer gel, Averrhoa bilimbi L.
viii
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ..................................................................................................... i
HALAMAN JUDUL ................................................................................ ii
LEMBAR PENGESAHAN .................................................................... iii
KATA PENGANTAR ............................................................................... iv
SURAT PERNYATAAN ........................................................................... vi
ABSTRAK ............................................................................................... vii
ABSTRACT ............................................................................................. viii
DAFTAR ISI ............................................................................................ ix
DAFTAR TABEL .................................................................................... xv
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ xvi
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ........................................................................ 1
1.2 Perumusan Masalah.................................................................. 3
1.3 Hipotesis ................................................................................... 3
1.4 Tujuan Penelitian ..................................................................... 4
1.5 Manfaat Penelitian ................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .......................................................... 5
2.1 Uraian Tumbuhan .............................................................. 5
2.1.1 Sistematika tumbuhan............................................ 5
2.1.2 Nama daerah .......................................................... 5
2.1.3 Morfologi tumbuhan .............................................. 6
2.1.4 Kandungan kimia ................................................... 6
2.1.5 Manfaat tumbuhan ................................................ 6
ix
2.2 Ekstraksi ........................................................................... 7
2.2.1 Cara Dingin ........................................................... 7
2.2.2 Cara Panas ............................................................ 7
2.3 Sterilisasi ........................................................................... 9

2.3.1 Metode Sterilisasi fisik ......................................... 9
2.4 Bakteri ............................................................................. 10
2.4.1 Uraian Umum ........................................................ 10
2.4.2 Ukuran Bakteri ...................................................... 12
2.4.3 Bentuk Bakteri ...................................................... 13
2.4.4 Uraian Escherichia coli ......................................... 14
2.4.5 Uraian Staphylococcus aureus............................... 14
2.5 Fase Pertumbuhan Mikoorganisme ................................... 15
2.6 Pengukuran Aktivitas Bakteri ........................................... 16
BAB III METODE PENELITIAN ............................................................. 18
3.1 Alat dan Bahan ................................................................... 18
3.1.1 Alat ............................................................................. 18
3.1.2 Bahan ......................................................................... 19
3.2 Penyiapan Sampel ............................................................... 19
3.2.1 Pengambilan Sampel .................................................. 19
3.1.2 Identifikasi Sampel .................................................... 19
3.2.3 Pengolahan Sampel .................................................... 19
3.3 Pembuatan Larutan Pereaksi .............................................. 20
3.3.1 Pereaksi Asam Klorida 2N ........................................ 20
3.3.2 Pereaksi Asam Sulfat 2N........................................... 20
3.3.3 Pereaksi Besi (III) Klorida 1% .................................. 20
x
3.3.4 Pereaksi Bouchardat ................................................ 20
3.3.5 Pereaksi Dragendorff .............................................. 20
3.3.6 Pereaksi Kloralhidrat ............................................... 21
3.3.7 Pereaksi Lieberman Burchardat............................... 21
3.3.8 Pereaksi Meyer ....................................................... 21
3.3.9 Pereaksi Molisch .................................................... 21
3.3.10 Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M .......................... 21
3.4 Karakterisasi Simplisia ....................................................... 22
3.4.1 Pemeriksaan Makroskopik ..................................... 22
3.4.2 Pemeriksaan Mikroskopik ...................................... 22
3.4.3 Penetapan Kadar Air ............................................... 23
3.4.4 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air ................... 23
3.4.5 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol .............. 23
3.4.6 Penetapan Kadar Abu Total .................................... 23
3.4.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam ..................... 24
3.5 Skrining Fitokimia .............................................................. 24
3.5.1 Pemeriksaan Alkaloida ........................................... 24
3.5.2 Pemeriksaan Flavonoida ......................................... 25
3.5.3 Pemeriksaan Glikosida ........................................... 25
3.5.4 Pemeriksaan Saponin ............................................... 25
3.5.5 Pemeriksaan Tanin ................................................... 26
3.5.6 Pemeriksaan Steroida/Triterpenoida ....................... 26
3.6 Pembuatan Ekstrak Daun Belimbing Wuluh ...................... 26
3.7 Sterilisasi Alat dan Bahan .................................................. 26
3.8 Pembuatan Media ............................................................... 27
xi
3.8.1 Nutrient Agar (NA) .................................................... 27
3.8.2 Nutrient Broth (NB) ................................................. 27
3.8.3 Muller Hinton Agar ................................................. 28
3.8.4 Pembuatan Agar Miring ............................................ 28
3.8.5 Pembuatan Standart Mc. Farland 0,5 ....................... 28
3.9 Pembiakan Bakteri .............................................................. 29
3.9.1 Pembuatan Stok Kultur Bakteri ................................ 29
3.9.3 Peremajaan Bakteri ................................................... 29
3.9.3 Pembuatan Inokulum Bakteri ....................................... 29
3.10 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Daun Belimbing Wuluh

dengan Berbagai Konsentrasi ............................................. 30
3.11 Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun

Belimbing Wuluh Terhadap Bakteri Staphylococus
Aureus dan Escherichia coli ................................................ 30
3.12 Prosedur Pembuatan Gel Hand sanitizer ............................. 30
3.12.1 Formulasi Dasar gel ................................................ 30
3.12.2 Formulasi Sediaan gel ............................................. 30
3.13 Evaluasi Terhadap Sediaan ................................................. 32
3.13.1 Pemeriksaan Organoleptik ....................................... 32
3.13.2 Penentuan Homogenitas ........................................ 32
3.13.3 Penentuan pH Sediaan ............................................ 32
3.13.4 Pengukuran Viskositas ............................................ 33
3.14 Uji Mikrobiologi Sediaan Gel ........................................... 33
3.15 Pengujian Aktivitas antibakteri .......................................... 33
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................... 35
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan .............................................. 35
xii
4.2 Hasil Karakterisasi Sampel.................................................. 36
4.3 Hasil Ekstraksi ..................................................................... 37
4.4 Hasil Skrining Fitokimia .................................................... 37
4.5 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun

Belimbing Wuluh ................................................................ 38
4.6 Pengamatan Stabilitas Sediaan ........................................... 40
4.7 Pemeriksaan Homogenitas Sediaan .................................... 41
4.8 Hasil Pengukuran pH Sediaan ............................................ 42
4.9 Hasil Pengukuran Viskositas ............................................... 43
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ..................................................... 45
5.1 Kesimpulan ......................................................................... 45
5.2 Saran ................................................................................. 46
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................ 47
LAMPIRAN ............................................................................................... 50
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Hasil Karakterisasi Simplisia Daun Belimbing Wuluh ..................... 36
4.2 Hasil Skrining Fitokimia .................................................................. 38
4.3 Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Belimbing

Wuluh ................................................................................................ 39
4.4 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Gel Hand Antibakteri Ekstrak

Daun Belimbing Wuluh Terhadap Bakteri Staphylococus Aureus
dan Escherichia coli .......................................................................... 40
4.5 Pemeriksaan Stabilitas Organoleptik ................................................ 42
4.6 Pemeriksaan Homogenitas ............................................................... 43
4.7 Penentuan pH Sediaan ...................................................................... 43
4.8 Pengukuran Viskositas....................................................................... 45
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Kurva Pertumbuhan Bakteri ....................................................... 16
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Hasil identifikasi Tumbuhan .................................................... 50
2 Gambar Tumbuhan Daun Belimbing Wuluh ............................ 51
3 Gambar Daun Belimbing Wuluh .............................................. 52
4 Simplisia Daun Belimbing Wuluh ............................................ 53
5 Serbuk Simplisia Daun Belimbing Wuluh .............................. 53
6 Mikroskopik ............................................................................. 53
7 Bagan Kerja Penelitian ............................................................. 54
8 Bagan Pembuatan Ekstrak Daun Belimbing Wuluh................. 55
9 Bagan Pengujian Aktivitas Antibakteri .................................... 56
10 Bagan Formulasi dan Uji Aktivitas Antibakteri Gel Hand

sanitizer Ekstrak Daun Belimbing Wuluh ................................ 57
11 Perhitungan Penetapan Kadar Air Simplisia Daun Belimbing

Wuluh ...................................................................................... 58
12 Perhitungan Penetapan Kadar Sari Laut Air Daun Belimbing

Wuluh ........................................................................................ 58
13 Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut Etanol Simplisia

Daun Belimbing Wuluh ............................................................. 59
14 Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total Simplisia Daun

Belimbing Wuluh ....................................................................... 61
15 Perhitungan Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam

Simplisia Daun Belimbing Wuluh .............................................. 62
16 Hasil Pengukuran Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri dari

Ekstrak Daun Belimbing Wuluh .............................................. 63
17 Gambar Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak

Daun Belimbing Wuluh Terhadap Staphylococus aureus ......... 64

Daun Belimbing Wuluh Terhadap Staphylococus aureus....... 65
xvi
Daun Belimbing Wuluh Terhadap Staphylococus aureus .......... 66
20 Hasil Pengukuran Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri dari

gel Hand sanitizer Ekstrak Daun Belimbing Wuluh Terhadap
Staphylococus aureus dan Escherichia coli ............................. 67
21 Gambar Hasil Pengujian Aktivitas gel Hand sanitizer

Ekstrak Daun Belimbing Wuluh Terhadap Staphylococus
aureus dan Escherichia coli ..................................................... 68
22 Gambar Hasil Uji Homogenitas gel Hand sanitizer ................. 69
23 Gambar Sediaan Gel ................................................................ 70
24 Gambar Alat ........................................................................... 70
xvii
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Kesehatan merupakan aspek yang sangat penting bagi kehidupan, salah
satu cara menjaga kesehatan tubuh yaitu dengan memelihara kebersihan tangan.
Menurut Kementrian Kesehatan RI, (2011) bahwa penyakit yang dapat timbul
karena tidak menjaga kebersihan tangan adalah diare.
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus adalah salah penyebab
penyakit diare yang bersifat patogen. Escherichia coli adalah bakteri gram negatif
yang biasanya terdapat dalam saluran pencernaan sehingga dapat mengakibatkan
infeksi pada sistem saluran pencernaan, sedangkan Staphylococcus aureus
merupakan gram positif yang dapat menyebabkan infeksi kulit pada luka, bisul
dan menyebabkan infeksi lain yaitu keracunan pada makanan (Jawet, dkk., 2007).
Infeksi merupakan masalah yang paling banyak dijumpai pada kehidupan
sehari-hari. Salah satu cara yang dapat dilakukan untuk mencegah infeksi yang
disebabkan oleh bakteri Escherichia coli dan Staphylococus aureus yaitu dengan
menjaga kebersihan tangan sebelum makan dan minum serta menggunakan gel
antiseptik tangan, yang merupakan alternatif praktis untuk menggantikan sabun
dan air untuk mencuci tangan. Antiseptik adalah senyawa kimia yang digunakan
untuk menghambat pertumbuhan atau membunuh mikroorganisme pada jaringan
hidup, mempunyai efek membatasi dan mencegah infeksi agar tidak menjadi lebih
parah. Antiseptik yang ideal dapat menghambat pertumbuhan dan merusak sel-sel
bakteri, spora jamur, virus serta protozoa, tanpa merusak jaringan tubuh
(Siswandono, 1995).
2
Pemakaian antiseptik tangan (hand sanitizer) dalam bentuk sediaan gel di
kalangan masyarakat menengah keatas sudah menjadi suatu gaya hidup. Gel
merupakan sediaan sistem semi padat (massa lembek) terdiri atas suspensi yang di
buat dari partikel anorganik yang kecil atau molekul organik yang besar,
terpenetrasi dalam suatu cairan, bersifat tiksotropi yaitu menjadi cairan ketika
digoyang dan kembali memadat jika dibiarkan tenang (Syamsuni, 2007).
Zat kimia yang dipakai untuk membunuh atau mengurangi jumlah
organisme dan penemuan-penemuan baru terus bermunculan di pasaran tetapi
sebenarnya tidak ada bahan kimia yang ideal, artinya bahan yang dapat dipakai
untuk segala macam keperluan, oleh karena itu dipilih bahan kimia yang mampu
membunuh organisme yang ada, dalam waktu tersingkat, dan tanpa merusak
bahan yang digunakan (Waluyo, 2010).
Indonesia memiliki iklim tropis yang menyebabkan tanahnya subur
sehingga banyak jenis tumbuhan yang dapat tumbuh di antara berbagai jenis
tersebut beberapa jenis tumbuhan berkhasiat sebagai obat, (Hariana, 2008). salah
satu tumbuhan tersebut adalah daun belimbing wuluh yang mempunyai khasiat
sebagai obat demam dan antiseptik kulit (Ditjen POM, 1989).
Menurut Pendit, dkk., (2016), menyatakan bahwa ekstrak daun belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbi L.) yang telah diisolasi memiliki aktivitas antibakteri
pada bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Hal tesebut disebabkan
karena ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) mengandung senyawa
seperti flavonoid, saponin, steroid/triterpenoid, tanin.
Berbagai produk yang mengandung zat antiseptik, khususnya gel
antiseptik tangan, yang pada saat ini telah banyak dikembangkan. Produk-produk
ini dinilai lebih efektif dan praktis dalam membunuh bakteri yang ada pada
3
tangan. Berdasarkan uraian diatas, maka peneliti melakukan penelitian mengenai
formulasi sediaan gel hand sanitizer ekstrak daun belimbing wuluh (Averhoa
bilimbi L.) pada bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Untuk dapat
lebih memanfaatkan penggunaan belimbing wuluh sebagai salah satu buah yang
memiliki khasiat sebagai antibakteri yang dapat diformulasikan ke dalam sediaan
gel antiseptik tangan (hand sanitizer).
1.2 Perumusan Masalah
a. Apakah ekstrak etanol daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Escherichia coli dan
Staphylococcus aureus.
b. Apakah sediaan gel antiseptik tangan (hand sanitizer) ekstrak daun
belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) memenuhi stabilitas parameter
uji, diantaranya uji organoleptik, uji homogenitas, uji pH, uji viskositas.
c. Apakah sediaan gel antiseptik tangan (hand sanitizer) ekstrak daun
belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) mempunyai aktivitas antibakteri
terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.
1.3 Hipotesis
a. Ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) mempunyai
aktivitas antibakteri terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus
aureus.
b. Sediaan gel antiseptik tangan (hand sanitizer) ekstrak daun belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbi L.) memenuhi parameter uji, diantaranya uji
organoleptik, uji homogenitas, uji pH, uji viskositas.
4
c. Sediaan gel antiseptik tangan (hand sanitizer) ekstrak daun belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbi L.) mempunyai aktivitas antibakteri terhadap
bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.
1.4 Tujuan Penelitian
a. Untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbi L.) terhadap bakteri Escherichia coli dan
Staphylococcus aureus.
b. Melakukan formulasi dan evaluasi sediaan gel antiseptik tangan (hand
sanitizer) dari ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
terhadap parameter yaitu uji organoleptik, uji homogenitas, uji pH, uji
viskositas.
c. Untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari sediaan gel antiseptik tangan
(hand sanitizer) ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.
1.5 Manfaat
Mengembangkan produk sediaan gel antiseptik tangan (hand sanitizer) dari
bahan alam yaitu daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.). Selain itu, untuk
meningkatkan pemanfaatan dari tanaman belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
yang memiliki aktivitas antibakteri.
5
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tumbuhan
Belimbing wuluh merupakan tanaman yang termasuk dari keluarga
Oxalidaceae. Pohon ini banyak ditanam sebagai pohon buah atau hanya sebagai
peneduh halaman (Purwaningsih, 2007).
2.1.1 Klasifikasi tumbuhan
Terdapat dua varietas dari tumbuhan belimbimg wuluh (Averrhoa bilimbi
L.) yang menghasilkan buah berwarna hijau dan kuning muda (Thomas, 2007)
Menurut (Purwaningsih, 2007), klasifikasi tumbuhan belimbing wuluh yaitu:
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Sub divisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Oxalidales
Famili : Oxalidaceae
Genus : Averrhoa
Spesies : Averrhoa bilimbi L.
2.1.2 Nama daerah
Di sejumlah daerah, masyarakat setempat menyebutnya dengan nama lain,
di Aceh masyarakat mengenalnya dengan nama limeng, selimeng, atau selemeng.
Masyarakat Batak menyebutnya asom belimbing atau balimbingan. Di Nias
belimbing waluh bernama malimbi, di Minangkabau disebut balimbieng, dan di
jawa disebut belimbing waluh (Purwaningsih, 2007).
6
2.1.3 Morfologi tumbuhan
Pohon belimbing wuluh tingginya bisa mencapai 10 m dengan batang yang
tidak begitu besar dan bergaris tengah sekitar 30 cm, batang kasar berbenjol-
benjol, percabangan sedikit, arah condong ke atas. Daun majemuk menyirip ganjil
dengan 21-45 pasang anak daun. Anak daun bertangkai pendek, berbentuk bulat
telur sampai jorong, ujung runcing, pangkal membulat, tepi rata, panjang 2-10 cm,
lebar 1-3 cm, berwarna hijau, bunga kecil-kecil berwarna ungu kemerahan. Buah
berbentuk bulat lonjong bersegi, panjang 4-6,5 cm, berwarna hijau kekuningan,
berair banyak jika masak, rasa asam dan akar tunggang cukup kuat (Purwaningsih,
2007)
2.1.4 Kandungan kimia tumbuhan
Batang mengandung saponin, tanin, glikosida, kalsium oksalat, sulfur, asam
format, dan peroksidase. Bunga belimbing wuluh mengandung flavonoid,
glikosida, tanin, dan steroid/ terpenoid. Daun belimbing wuluh mengandung
glikosida, flavonoid, saponin, steroid/ triterpenoid dan tanin. Buah belimbing
wuluh mengandung steroid, glikosida, tanin, alkaloid, dan saponin (Katon, dkk.,
2011).
2.1.5. Manfaat tumbuhan
Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.) banyak ditanam sebagai pohon
buah. Tanaman asal Amerika tropis ini dapat digunakan untuk mengobati
bermacam-macam penyakit seperti hipertensi, gondongan. batuk, rematik,
sariawan, jerawat, dan panu. Untuk batuk, potong-potong 25 kuntum bunga
belimbing wuluh, 1 jari rimpang temu giring, 1 jari kulit kayu manis, 1 jari
rimpang kencur, 2 butir bawang merah, pegagan, daun saga, daun inggu, dan daun
7
sendok, masing-masing 1/2 genggam. Rebus dengan 5 gelas air bersih sampai
tersisa separuhnya saring. Minum dengan madu secukupnya sampai 3 kali 1/3
bagian sehari. Untuk rematik, tumbuk 100 g daun muda belimbing wuluh, 10 butir
cengkeh, dan 15 biji merica. Tambahkan cuka secukupnya sampai adonan seperti
bubur, oleskan pada tempat yang sakit. Untuk sariawan rebus segenggam bunga
belimbing wuluh, gula jawa secukupnya, dan 1 cangkir air sampai kental. Saring,
gunakan untuk membersihkan mulut dan mengoles sariawan (Dalimartha, 2008).
2.2 Ekstraksi
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut
sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair. Dengan
diketahui senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah pemilihan
pelarut dengan cara ekstraksi yang tepat. Proses ekstrak dengan pelarut kemudian
terjadi kontak antara bahan dan pelarut sehingga pada bidang datar antarmuka
bahan ekstraksi dan pelarut terjadi pengendapan massa dengan cara difusi
(Sudjadi, 1998).
2.2.1 Cara dingin
2.2.1.1 Maserasi
Proses penyarian sederhana yang dilakukan dengan cara merendam serbuk
simplisia dalam cairan penyari selama beberapa hari pada temperatur kamar dan
terlindung dari cahaya. Metode maserasi digunakan untuk menyari simplisia yang
mengandung komponen kimia yang mudah larut dalam penyari (Sudjadi, 1998).
Keuntungan dari metode ini adalah dapat digunakan secara praktis serta
menggunakan alat dan bahan sederhana serta dapat menghasilkan ekstrak dalam
8
jumlah yang banyak. Selain itu, senyawa dalam simplisia relatif terhindar dari
perubahan kimia oleh senyawa-senyawa atau adanya pemanasan (Pratiwi, 2008).
2.2.1.2 Perkolasi
Ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna (exhaustive
extraction) yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses terdiri dari
tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya
(penetesan/ penampungan ekstrak), terus menerus sampai diperoleh ekstrak
(perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan (Depkes, 2010).
2.2.2. Ekstraksi Panas
2.2.2.1 Dekoktasi
Infudasi pada waktu yang lebih lama (≥ 30 menit) dan temperatur sampai
titik didih air (Depkes, 2010).
2.2.2.2 Soxhletasi
Ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya
dilakukan dengan alat soxhlet sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah
pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik (Depkes, 2010).
2.2.2.3 Digesti
Maserasi kinetik yaitu maserasi dingin yang dilakukan dengan cara
pengadukan kontinu (terus-menerus) pada temperatur yang lebih tinggi dari
temperatur ruangan (kamar), yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-
50oC (Depkes, 2010).
2.2.2.4 Infundasi
2.2.2.5Ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas (bejana infus
tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur 96-98 oC) selama
waktu tertentu (15-20 menit) (Depkes, 2010).
9
2.2.2.6 Refluks
Ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu
tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin
balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama 3-5 kali
sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna (Depkes, 2010).
2.3 Sterilisasi
Steril merupakan keadaan dimana suatu zat terbebas dari mikroba hidup, baik
yang menimbulkan penyakit maupun yang tidak menimbulkan penyakit.
Sterilisasi adalah suatu proses untuk menghilangkan atau mematikan semua
mikroorganisme termasuk spora (Elliott, 2013).
Metode sterilisasi dibagi menjadi dua, yaitu metode fisik dan metode
kimia. Metode sterilisasi kimia dilakukan dengan menggunakan bahan-bahan
kimia, sedangkan metode sterilisasi fisik dapat dilakukan dengan cara panas baik
panas kering maupun panas basah, radiasi dan filtrasi (Pratiwi, 2008).
Metode sterilisasi panas merupakan metode yang paling dapat dipercaya
dan banyak digunakan. Metode sterilisasi ini digunakan untuk bahan yang tahan
panas. Metode sterilisasi panas dengan penggunaan uap air disebut metode
sterilisasi panas lembab atau sterilisasi basah. Metode sterilisasi panas tanpa
kelembapan (tanpa penggunaan uap air) disebut metode sterilisasi panas kering
atau sterlisasi kering (Pratiwi, 2008).
2.3.1 Metode Sterilisasi Fisik
2.3.1.1 Sterilisasi panas kering
Umumnya bahan yang sensitif terhadap kelembapan digunakan metode
sterilisasi panas kering pada temperatur 1600-1800C. Metode ini tidak dapat
10
digunakan untuk bahan yang terbuat dari karet atau plastik, waktu sterilisasinya
lama dan berdaya penetrasi rendah. Metode sterilisasi kering ini tidak memerlukan
air sehingga tidak ada uap air yang membasahi alat atau bahan yang disterilkan.
Sterilisasi panas kering berfungsi untuk mematikan mikroorganisme dengan cara
mengoksidasi komponen sel ataupun mendenaturasi enzim (Pratiwi, 2008).
2.3.1.2 Sterilisasi panas basah
Metode ini biasanya digunakan untuk bahan yang sensitif panas, dengan
pemanasan pada temperatur 100ºC selama 5-10 menit. Tingkat sterilisasi panas
basah pada temperatur kurang dari 1000C tergantung pada temperatur dan/ atau
waktu sterilisasi (Pratiwi, 2008).
Metode sterilisasi panas basah dibagi 2, yaitu:
a. Dengan perebusan menggunakan air mendidih selama 10 menit pada
temperatur 100ºC
b. Menggunakan autoklaf, alat serupa pressure cooker dengan pengatur tekanan
dan klep pengaman dengan temperatur di atas 100ºC yang dilakukan dengan
uap. Prinsip autoklaf adalah terjadinya koagulasi yang lebih cepat dalam
keadaan basah dibandingkan dengan kering. Proses sterilisasi dengan autoklaf
dengan cara mendenaturasi atau mengkoagulasi protein pada enzim dan
membran sel mikroorganisme (Pratiwi, 2008).
2.4 Bakteri
2.4.1 Uraian umum
Nama bakteri berasal dari bahasa Yunani “bacterion” yang berarti tongkat
atau batang. Sekarang nama itu dipakai untuk menyebut sekelompok
mikroorganisme yang bersel satu, berkembangbiak dengan pembelahan diri serta
11
demikian kecilnya sehingga hanya tampak atau dapat diamati dengan mikroskop
(Dwidjoseputro, 1978). Spesies bakteri dapat dibedakan berdasarkan
morfologinya (bentuk), komposisi kimia (umumnya dideteksi dengan reaksi
kimianya), kebutuhan nutrisi, aktivitas biokimia dan sumber energi (Pratiwi,
2008).
Pertumbuhan dan perkembangan bakteri dipengaruhi oleh:
1. Zat makanan (nutrisi)
Sumber zat makanan bagi bakteri diperoleh dari senyawa karbon, nitrogen,
sulfur, fosfor, unsur logam, vitamin dan air untuk fungsi metabolik dan
pertumbuhannya (Pelczar dan Chan, 1988).
2. Temperatur
Proses pertumbuhan bakteri tergantung pada reaksi kimiawi dan laju reaksi
kimia yang dipengaruhi oleh temperatur. Berdasarkan hal tersebut maka bakteri
dapat diklasifikasikan sebagai berikut:
a. Bakteri psikofil, yaitu bakteri yang dapat hidup pada temperatur 0-30ºC,
dengan temperatur optimum adalah 10-20ºC.
b. Bakteri mesofil, yaitu bakteri yang dapat hidup pada temperatur 5-60ºC,
dengan temperatur optimum adalah 25-40º.
c. Bakteri termofil, yaitu bakteri yang dapat hidup pada temperatur optimum yaitu
55-65 oC (Pelczar dan Chan, 1988).
3. Keasaman dan kebasaan (pH)
Kebanyakan bakteri patogen mempunyai pH optimum pertumbuhan antara
7,2-7,6 (Tim Mikrobiologi FK Brawijaya, 2003).
4. Oksigen
Oksigen dapat mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme, berdasarkan
12
kebutuhan oksigen, bakteri dapat dibedakan menjadi 5 kelompok antara lain:
a. Aerob mutlak yaitu bakteri yang membutuhkan oksigen dalam
pertumbuhannya.
b. Anaerob fakultatif yaitu bakteri yang dapat tumbuh dengan atau tanpa adanya
oksigen.
c. Anaerob mutlak yaitu bakteri yang hidup bila tidak ada oksigen.
d. Anaerob aetoleran yaitu bakteri yang tidak mati dengan adanya oksigen.
e. Mikroaerofilik yaitu bakteri yang dapat tumbuh baik dengan adanya sedikit
oksigen (Pratiwi, 2008).
5. Tekanan osmosa
Medium yang baik bagi pertumbuhan bakteri adalah medium isotonis terhadap
isi sel bakteri (Pelczar dan Chan, 1988).
6. Kelembapan
Secara umum bakteri tumbuh dan berkembang biak dengan baik pada
lingkungan yang lembab. Kebutuhan akan air tergantung dari jenis bakterinya
(Pelczar dan Chan, 1988).
2.4.2 Ukuran bakteri
Pada umumnya ukuran tubuh bakteri sangat kecil, umumnya bentuk tubuh
bakteri baru dilihat menggunakan mikroskop dengan pembesaran 1000 kali atau
lebih. Satuan ukuran tubuh bakteri adalah mikrometer atau micron (Waluyo,
2007).
Bakteri berbentuk kokus ada yang berdiameter 0,5 µ sampai 2,5 µ.
Sedangkan bakteri berbentuk basil ada yang lebarnya 0,2 µ sampai 2 µ, namun
ukuran-ukuran tersebut banyak yang menyimpang. Oleh karena itu, pengukuran
besar kecilnya bakteri perlu didasarkan pada standard yang sama. Pada umumnya
13
bakteri yang berumur 2 sampai 6 jam lebih besar dari bakteri yang umurnya lebih
dari 24 jam. Lebar tubuh umumnya 1- 2 mikron, sedangkan panjangnya 2-5
mikron (Waluyo, 2007).
2.4.3 Bentuk bakteri
2.4.3.1 Bentuk basil
Bakteri yang mempunyai bentuk batang atau silinder dan membelah dalam
satu bidang, berpasangan ataupun bentuk rantai pendek atau panjang.
Bentuk basil dapat dibedakan atas:
a. Monobasil yaitu basil yang terlepas satu sama lain dengan kedua ujung tumpul.
Contoh: Eschericia coli.
b. Diplobasil yaitu basil yang bergandeng dua dan kedua ujungnya tumpul.
Contoh: Salmonella typhimurium.
c. Streptobasil yaitu basil yang bergandengan panjang dengan kedua ujung tajam.
Contoh: Bacillus anthracis (Pelczar dan Chan, 1988).
2.4.3.2 Bentuk kokus
Kokus adalah bakteri yang bentuknya seperti bola-bola kecil, ada tunggal
dan ada yang berpasang-pasangan. Bentuk kokus dapat dibedakan atas:
a. Diplokokus yaitu kokus yang bergandeng dua. Contoh: Streptococcus
pneumoniae.
b. Stafilokokus yaitu kokus yang mengelompok dan membentuk anggur. Contoh:
Staphylococus aureus.
c. Tetrakokus yaitu kokus yang mengelompok empat. Contoh: Pediococcus
cerevisiae.
d. Stafilokokus yaitu kokus yang mengelompok dan membentuk anggur. Contoh:
Staphylococus aureus.
14
e. Streptokokus yaitu kokus yang bergandengan panjang menyerupai rantai.
Contoh: Streptococcus pyogenes.
f. Sarsina yaitu kokus yang mengelompok seperti kubus. Contoh: Sarcina
ventriculi (Volk dan Wheeler, 1993).
2.4.3.3 Bentuk spiral
Bentuk spiral dapat dibedakan atas:
a. Spiral yaitu menyerupai spiral atau lilitan.
b. Vibrio yaitu bentuk batang yang melengkung berupa koma.
c. Spirochaeta yaitu menyerupai bentuk spiral, bedanya dengan spiral dalam
kemampuannya melenturkan dan melengkukkan tubuhnya sambil bergerak.
Adapun contoh bakteri dengan bentuk spiral yaitu Vibrio cholerae,
Spirochaeta palida (Volk dan Wheeler, 1993).
2.4.4 Escherichia Coli
Escherichia coli merupakan bakteri Gram negative, berbentuk batang,
merupakan bakteri aerobik atau anaerobik fakultatif yang habitat alaminya adalah
usus besar manusia dan hewan (Jawetz, et al., 2013). Masa inkubasi berlangsung
selama 12 jam hingga 3 hari , gejala timbul 18-24 jam setelah menyantap
makanan (Arisman, 2009).
Adapun sistematika Escherichia coli adalah sebagai berikut:
Divisi : Protophyta
Kelas : Schizomycetes
Ordo : Eubacteriales
Famili : Enterobacteriaceae
Genus : Escherichia
Spesies : Escherichia coli (Dwijoseputro, 1978
15
2.4.5 Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus merupakan bakteri gram positif, berbentuk bulat
(kokus) dengan diameter sekitar 1 µm, secara khas membelah diri pada lebih dari
satu bidang sehingga membentuk gerombolan yang tidak teratur dan menyerupai
buah anggur. Staphylococcus aureus term asuk bakteri anaerob fakultatif, bakteri
mesofil dimana hidup dalam saluran pengeluaran lendir dari tubuh manusia dan
hewan. (Supardi dan Sukamto, 1999). Sistematika Staphylococcus aureus adalah:
Divisi : Protophyta
Kelas : Schizomycetes
Ordo : Eubacteriales
Famili : Micrococcacea
Genus : Staphylococcus
Spesies : Staphylococcus aureus (Dwijoseputro, 1978).
2.5 Fase Pertumbuhan Mikroorganisme
Ada 4 Fase pertumbuhan mikroorganisme, yaitu:
a. Fase lag
Merupakan fase adaptasi, yaitu fase penyesuaian mikroorganisme pada suatu
lingkungan baru. Ciri fase lag adalah tidak adanya peningkatan jumlah sel, yang
ada hanyalah peningkatan ukuran sel. Lama fase lag tergantung pada kondisi dan
jumlah awal mikroorganisme dan media pertumbuhan.
b. Fase log (fase eksponensial)
Fase dimana mikroorganisme tumbuh dan membelah pada kecepatan
maksimum, tergantung pada genetika mikroorganisme, sifat media, dan kondisi
pertumbuhan. Sel baru terbentuk dengan laju konstan dan massa yang bertambah
16
secara eksponensial. Hal yang dapat menghambat laju pertumbuhan adalah nutrisi
dalam kultur habis, sehingga hasil metabolisme bersifat racun tertimbun.
c. Fase stasioner
Merupakan fase dimana pertumbuhan mikroorganisme berhenti dan terjadi
keseimbangan antara jumlah sel yang membelah dengan jumlah sel yang mati.
Pada fase ini terjadi akumulasi produk buangan yang toksik. Pada sebagian besar
kasus, pergantian sel terjadi dalam fase stasioner ini.
d. Fase kematian
Merupakan fase dimana jumlah sel yang mati meningkat. Faktor penyebabnya
adalah ketidaktersediaan nutrisi dan akumulasi produk buangan yang toksik
(Pratiwi, 2008).
Fase stationer
Fase
eksponensial Fase kematian
Fase
log
Gambar 2.1 Kurva Pertumbuhan Bakteri
2.6 Pengukuran Aktivitas Antibakteri
Penentuan kepekaan bakteri patogen terhadap agen antibakteri tertentu dapat
dilakukan dengan salah satu dari dua metode pokok yaitu metode dilusi dan
17
metode difusi. Ada beberapa metode pengukuran bakteri, namun yang paling
umum digunakan adalah metode dilusi dan difusi.
a. Metode dilusi
Metode ini digunakan untuk mengukur kadar hambat minimum (KHM) dan
kadar bunuh minimum (KBM). Cara yang dilakukan dengan membuat seri
pengenceran antimikroba pada media yang telah ditambahkan dengan mikroba uji.
Larutan uji antimkroba pada kadar terkecil yang terlihat jernih tanpa adanya
pertumbuhan mikroba ditetapkan sebagai KHM. Larutan yang ditetapkan sebagai
KHM tersebut selanjutnya dikultur ulang pada media tanpa penambahan mikroba
uji ataupun agen antimikroba dan diinkubasi selama 18-24 jam. Media yang tetap
terlihat jernih setelah diinkubasi ditetapkan sebagai KBM (Pratiwi, 2008).
b. Metode difusi agar
Metode yang paling sering digunakan dalam uji aktivitas antibakteri yaitu
metode difusi agar. Obat dengan jumlah tertentu ditempatkan pada permukaan
media padat yang sebelumnya telah diinokulasi bakteri uji pada permukaannya
dan kemudian diinkubasi selama 18-24 jam. Diameter zona hambatan di sekitar
pencadang kemudian diukur dan digunakan untuk mengukur kekuatan hambatan
obat terhadap mikroorganisme yang diuji.
Metode ini dipengaruhi oleh beberapa faktor fisika dan kimia, misalnya sifat
medium, kemampuan difusi, ukuran molekular dan stabilitas obat. Meskipun
demikian, standarisasi faktor-faktor tersebut memungkinkan melakukan uji
kepekaan dengan baik (Jawetz, 2001).
18
BAB III
METODE PENELITIAN
Metode penelitian yang dilakukan merupakan metode eksperimental
(experimental research), yang meliputi pengumpulan dan identifikasi bahan
tumbuhan, pembuatan simplisia, karakterisasi simplisia, pembuatan ekstrak, serta
pengujian antibakteri ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.).
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Fitokimia, Laboratorium Farmasi Fisik,
Laboratorium Mikrobiologi, dan Laboratorium kosmetologi, Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, Medan.
3.1 Alat dan Bahan
3.1.1 Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah aluminium foil, autoklaf
(Fisons), batang pengaduk, beaker glass (Iwaki pyrex), benang wol, Biological
Safety Cabinet (Astec HLF 1200 L), bunsen, blender, cawan petri, cawan
penguap, desikator, erlenmeyer (Iwaki pyrex), gelas ukur (Iwaki pyrex), inkubator
(Memmert), jangka sorong, jarum ose, kain kassa, kapas, kertas perkamen, kertas
saring, kompor gas (Rinnai), kurs porselin, lumpang dan Alu porselen, lemari
pendingin (Toshiba), lemari pengering, mikro pipet (Eppendorf), mikroskop
(Olympus), neraca analitik (Metler AE 200), oven (Memmert), object glass,
penangas air, pencadang kertas, penangas air, pH meter (Hanna), pinset, pipet
tetes, rotary evaporator (Haake D), spatula, tanur (Gallenkomp) dan vial.
19
3.1.2 Bahan
Bahan yang digunakan adalah ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa
bilimbi), Muller hinton agar (Himedia), nutrient agar (Oxoid), nutrient broth
(Oxoid), pencadang kertas berdiameter 6 mm dan bahan-bahan yang berkualitas
proanalisa: α-naftol, amil alkohol, asam nitrat pekat, asam asetat anhidrat, asam
klorida pekat, asam sulfat pekat, benzena, besi (III) klorida, bismuth nitrat, etanol
96 %, etilasetat, iodium, isopropanol, kalium iodida, kloroform, metanol, natrium
hidroksida, natrium klorida, n-heksana, raksa (II) klorida, serbuk magnesium,
timbal (II) asetat dan toluene, suspensi standar Mc. Farland, Bakteri yang
digunakan adalah Escherichia coli ATCC 8939 dan Staphylococcus aureus
AATC 12228.
3.2 Penyiapan sampel
3.2.1 Pengambilan sampel
Pengambilan sampel dilakukan secara purposif yaitu tanpa
membandingkan dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Sampel di
gunakan adalah daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) yang berwarna hijau
dan masih segar, diambil dari jalan binjai km 10,8 kecamatan sunggal kabupaten
Deli serdang.
3.2.2 Identifikasi Sampel
Identifikasi tumbuhan dilakukan di Laboratorium Herbarium Medanese,
Universitas Sumatera Utara, Medan.
3.2.3 Pengolahan sampel
Sampel daun belimbing wuluh dibersihkan dari kotoran yang melekat
dengan cara dicuci dengan air mengalir, ditiriskan, lalu ditimbang berat basahnya
20
dan dikeringkan dilemari pengering pada suhu 40 - 50º C sampai sampel kering.
Sampel dianggap kering bila sudah rapuh (diremas menjadi hancur), lalu sampel
di blender sampai menjadi serbuk. Hasil dapat dilihat pada Lampiran 5,
halaman 53.
3.3 Pembuatan Larutan Pereaksi
3.3.1 Pereaksi Asam Klorida 2 N
Sebanyak 16,67 ml asam klorida pekat dilarutkan dalam akuades hingga
volume 100 ml (Ditjen POM, 1979).
3.3.2 Pereaksi Asam Sulfat 2 N
Sebanyak 5,4 ml asam sulfat pekat dilarutkan dalam akuades hingga
volume 100 ml (Ditjen POM, 1979).
3.3.3 Pereaksi Besi (III) Klorida 1%
Sebanyak 1 g besi (III) klorida dilarutkan dalam akuades hingga volume
100 ml lalu disaring (Ditjen POM, 1979).
3.3.4 Pereaksi Bouchardat
Sebanyak 4 g kalium iodida dilarutkan dalam sedikit akuades kemudian
ditambahkan 2 g iodium, setelah semuanya larut ditambahkan akuades hingga
100 ml (Depkes, 1995).
3.3.5 Pereaksi Dragendorff
Sebanyak 0,85 g bismut (III) nitrat ditimbang kemudian dilarutkan dalam
100 ml asam asetat glasial ditambahkan 40 ml akuades, kemudian pada wadah
lain ditimbang 8 g kalium iodida lalu dilarutkan dalam 20 ml akuades kemudian
21
dicampurkan kedua larutan sama banyak, kemudian ditambahkan asam asetat
glasial sebanyak 20 ml dan diencerkan dengan akuades hingga volume 100 ml
(Ditjen POM, 1979).
3.3.6 Pereaksi Kloralhidrat
Larutan kloralhidrat dibuat dengan cara melarutkan kloralhidrat sebanyak
50 g dalam 20 ml air (Depkes,1995).
3.3.7 Pereaksi Liebermann-Burchard
Sebanyak 5 ml asam asetat anhidrida dicampurkan dengan 5 ml asam sulfat
pekat kemudian ditambahkan etanol hingga 50 ml (Depkes, 1995).
3.3.8 Pereaksi Meyer
Sebanyak 1,35 g raksa (II) klorida dilarutkan dalam 60 ml akuades.
Kemudian pada wadah lain sebanyak 5 g kalium iodida dilarutkan dalam 10 ml
akuades lalu di campurkan keduanya dan ditambahkan akuades hingga 100 ml
(Depkes, 1995).
3.3.9 Pereaksi Molish
Sebanyak 3 g alfa-naftol ditimbang kemudian dilarutkan dalam asam nitrat
0,5 N hingga volume 100 ml (Depkes, 1995).
3.3.10 Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N
Sebanyak 8,002 g kristal natrium hidroksida dilarutkan dalam akuades
hingga 100 ml (Depkes, 1995).
3.3.11 Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M
Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat dilarutkan dalam air bebas
karbondioksida hingga 100 ml (Depkes, 1995).
22
3.4 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
3.4.1 Pemeriksaan makroskopik
Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan mengamati bentuk luar,
ukuran, warna, bau dari simplisia daun belimbing wuluh.
3.4.2 Pemeriksaan mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia daun
belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.). Serbuk simplisia ditaburkan di atas kaca
objek yang telah ditetesi larutan kloralhidrat dan ditutup dengan kaca penutup,
lalu diamati dibawah mikroskop.
3.4.3 Penetapan Kadar Air
a. Penjenuhan toluen
Sebanyak 200 ml toluen dimasukkan ke dalam labu alas bulat, lalu
ditambahkan 2 ml air suling, kemudian alat dipasang dan dilakukan destilasi
selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama ± 30 menit, lalu
volume air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,1 ml. penetapan
kadar air dilakukan dengan metode destilasi.
b. Penetapan kadar air simplisia
Labu berisi toluen tersebut dimasukkan 5 g serbuk simplisia yang telah
ditimbang seksama, dipanaskan hati-hati selama 15 menit, setelah toluen
mendidih, kecepatan toluen diatur 2 tetes per detik sampai sebagian besar air
terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes per detik dan
setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen.
Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, tabung penerima dibiarkan mendingin pada
suhu kamar. Setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan
ketelitian 0,1 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kadar air
23
yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen
(WHO, 1998).
3.4.4 Penetapan kadar sari larut dalam air
Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air-
kloroform (2,5 ml kloroform dalam aquadest sampai 1:l) dengan menggunakan
botol bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, kemudian
dibiarkan 18 jam dan disaring. Sebanyak 20 ml filtrat diuapkan hingga kering
dalam cawan berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Residu dipanaskan
dalam oven pada suhu 105oC sampai diperoleh bobot tetap. Kadar sari yang larut
dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1995).
3.4.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol
Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml
etanol 96 % dengan menggunakan botol bersumbat sambil sesekali dikocok
selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam dan disaring. Sebanyak
20 ml filtrat diuapkan hingga kering dalam cawan yang berdasar rata yang telah
dipanaskan dan ditara. Residu dipanaskan dalam oven pada suhu 105 oC sampai
diperoleh bobot tetap. Kadar sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan
yang telah dikeringkan (Depkes, 1995).
3.4.6 Penetapan kadar abu total
Sebanyak 2,5 g serbuk simplisia yang telah digerus dan ditimbang
seksama, dimasukkan ke dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara,
kemudian diratakan. Kurs porselin bersama isinya dipijarkan perlahan hingga
arang habis, didinginkan, ditimbang sampai diperoleh bobot yang tetap. Kadar abu
dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes, 1995).
24
3.4.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut asam
Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu total dididihkan dengan 25
ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut asam dikumpulkan,
disaring dengan kertas saring, lalu cuci dengan air panas. Residu dan kertas saring
dipijarkan sampai diperoleh bobot yang tetap, dinginkan, dan ditimbang beratnya.
Kadar abu yang tidak larut asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan
di udara (Depkes, 1995).
3.5 Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui seyawa kimia dari serbuk
simplisia dan ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) yang
terkandung di dalamnya meliputi pemeriksaan terhadap golongan senyawa
alkaloida, flavonoida, glikosida, saponin, tanin dan steroida/triterpenoida (Depkes
RI, 1995; Farnsworth, 1966).
3.5.1 Pemeriksaan Alkaloida
Sampel ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml asam
klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanasakan di atas penangas air selama 2 menit.
Didinginkan dan disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan sebagai berikut:
a. Filtrat sebayak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi Meyer, akan
terbentuk endapan menggumpal bewarna putih atau kuning.
b. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi Bouchardat,
akan terbentuk endapan berwarna coklat sampai hitam.
c. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi Dragendorff,
akan terbentuk endapan merah atau jingga.
Positif jika terjadi endapan atau kekeruhan paling sedikit dua dari tiga percobaan.
25
3.5.2 Pemeriksaan flavonoida
Sebanyak 0,5 g sampel ditambahkan 20 ml air panas, dididihkan selama 10
menit dan disaring dalam keadaan panas, ke dalam 5 ml filtrat ditambahkan 0,1 g
serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok
dan dibiarkan memisah. Flavonoida positif jika terjadi warna merah, kuning,
jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1966).
3.5.3 Pemeriksaan glikosida
Sebanyak 3 g sampel disari dengan 30 ml campuran etanol 96 % dengan
air suling (7:3), ditambahkan asam sulfat pekat hingga diperoleh pH 2, kemudian
direfluks selama 10 menit, didinginkan dan disaring. Sebanyak 20 ml filtrat
ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M dikocok,
didiamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropanol
dan kloroform (2:3), dilakukan berulang sebanyak 3 kali. Kumpulan sari air
diuapkan dengan temperatur tidak lebih dari 50 oC. Sisanya dilarutkan dalam 2 ml
metanol. Sari air dimasukkan ke dalam tabung reaksi lalu diuapkan di atas
penangas air, pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molish.
Ditambahkan hati-hati 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuk
cincin ungu pada batas kedua cairan, menunjukkan adanya ikatan gula; Sari
pelarut organik diuapkan di atas penangas air.Larutkan sisa dalam 5 ml asam
asetat anhidrat. Ditambahkan 10 tetes asam sulfat pekat, akan terjadi warna biru
atau hijau, menunjukkan adanya glikosida (Depkes, 1995).
3.5.4 Pemeriksaan saponin
Sebanyak 0,5 g sampel ditimbang, dimasukkan ke dalam tabung reaksi,
kemudian ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan kemudian dikocok selama 10
detik, jika terbentuk busa setinggi 1 sampai 10 cm yang stabil tidak kurang dari 10
26
menit dan busa tersebut tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2N,
maka hasil tersebut menunjukkan terdapatnya saponin (Depkes, 1995).
3.5.5 Pemeriksaan tanin
Sebanyak 0,5 g sampel disari dengan 10 ml air suling kemudian disaring,
filtratnya diencerkan dengan air sampai tidak berwarna. Larutan diambil sebanyak
2 ml dan ditambahkan 1 sampai 2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1 %. Jika terjadi
warna hijau, biru, atau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966).
3.5.6 Pemeriksaan triterpenoida/steroida
Sebanyak 1 g sampel dimaserasi dengan n-heksana selama 2 jam, lalu
disaring.Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa ditambahkan 2 tetes
asam asetat anhidrida dan 1 tetes asam sulfat pekat. Timbul warna biru atau hijau
menunjukkan adanya steroid dan timbul warna merah, pink atau ungu
menunjukkan adanya triterpenoid (Farnsworth, 1966).
3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh
Pembuatan ekstrak dilakukan dengan cara maserasi menggunakan pelarut
etanol 96%. Masukkan 10 bagian simplisia atau campuran simplisia dengan
derajat halus yang cocok ke dalam sebuah bejana, tuangi dengan 75 bagian cairan
penyari, tutup, biarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk,
serkai, peras, cuci ampas dengan cairan penyari secukupnya hingga diperoleh 100
bagian. Pindahkan ke dalam bejana tertutup, biarkan ditempat sejuk, terlindung
dari cahaya, selama 2 hari. Enap tuangkan atau saring (Ditjen POM, 1979).
3.7 Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat dan bahan yang digunakan dalam suatu uji aktivitas antibakteri disterilkan
27
terlebih dahulu sebelum digunakan dalam percobaan. Media pertumbuhan
disterilkan di autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit dan alat- alat gelas yang
digunakan disterilkan di oven pada suhu 160-170oC selama 1-2 jam. Jarum ose
dan pinset disterilkan dengan cara dibakar dengan nyala bunsen (Lay dan
Sugiyo, 1994)
3.8 Pembuatan media
3.8.1 Pembuatan media nutrient agar (NA)
Komposisi: Lab-Lamco powder 1,0 g
Yeast extract 2,0 g
Peptone 5,0 g
Sodium chloride 5,0 g
Agar 15,0 g
Air suling ad 1 liter
Cara pembuatan:
Sebanyak 28 g nutrient agar dilarutkan dalam air suling steril ad 1000 ml
kemudian dipanaskan hingga semua larut, dalam keadaan panas larutan tersebut
kemudian dimasukkan dalam erlenmeyer. Disterilkan di autoklaf pada suhu 121°C
selama 15 menit (Oxoid, 1982).
3.8.2 Pembuatan media nutrient broth (NB)
Komposisi: Lab-Lamco powder 1,0 g
Yeast extract 2,0 g
Peptone 5,0 g
Sodium chloride 5,0 g
28
Cara pembuatan:
Sebanyak 13 g nutrient broth dilarutkan dalam air suling steril ad 1000 ml
kemudian dipanaskan hingga semua larut, dalam keadaan panas larutan tersebut
kemudian dimasukkan dalam erlenmeyer. Disterilkan di autoklaf pada suhu 121°C
selama 15 menit (Oxoid, 1982).
3.8.3 Pembuatan Media Muller Hinton Agar (MHA)
Komposisi : Casein acid hydrolisate 17,50 g

Starch 1,50 g
Agar 17,00 g
Cara pembuatan:
Sebanyak 36 g nutrient agar ditimbang, kemudian disuspensikan ke dalam
air suling ad 1000 ml, lalu dipanaskan sampai bahan larut sempurna,
laludisterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121 oC selama 15 menit (Himedia,
2003).
3.8.4 Pembuatan Media Agar Miring
10 ml media nutrient agar (NA) yang telah dimasak dimasukkan ke dalam
tabung reaksi, ditutup dan di bungkus lalu disterilkan di dalam autoklaf selama 15
menit pada suhu 121°C Kemudian tabung yang berisi agar diletakkan pada
kemiringan 30-45°C. Diperhatikan bahwa agar tidak menyentuh tutup tabung.
Agar dibiarkan menjadi dingin dan keras (Lay, 1994).
3.8.5 Suspensi Standar Mc Farland 0,5
Komposisi: Larutan BaCl2 1,175% b/v 0,5 ml
Larutan H2SO4 1% v/v 99,5 ml
Cara pembuatan: Kedua larutan dicampurkan dalam tabung reaksi steril, dikocok
sampai homogen dan ditutup. Apabila kekeruhan hasil suspensi bakteri sama
29
dengan kekeruhan suspensi standar berarti konsentrasi bakteri 10 8 CFU/ml
(Vandepitte, 1991).
3.9 Pembiakan Bakteri
3.9.1 Pembuatan stok kultur bakteri
Dilakukan dalam Biological Safety Cabinet (BSC), satu koloni bakteri
diambil dengan menggunakan jarum ose steril. Koloni bakteri tersebut kemudian
ditanamkan pada media nutrient agar miring dengan cara menggores, setelah itu
diinkubasi dalam inkubator pada suhu 36 ± 1o C selama 18-24 jam (Ditjen POM
RI, 1995).
3.9.2 Peremajaan bakteri
Dilakukan dalam Biological Safety Cabinet (BSC), satu koloni bakteri
diambil dengan menggunakan jarum ose steril, lalu ditanam pada media NA
miring dengan cara menggores, kemudian diinkubasi dalam inkubator pada suhu
36-37oC selama 18-24 jam (Depkes RI, 1995).
3.9.3 Pembuatan Inokulum Bakteri
Dilakukan dalam Biological Safety Cabinet (BSC), bakteri hasil inkubasi
diambil dengan menggunakan jarum ose steril kemudian disuspensikan ke dalam 10 ml nutrient
broth (NB) steril, kemudian diinkubasi selama 1-2 jam hingga diperoleh kekeruhan yang
sama dengan standar Mc Farland (konsentrasi 108 CFU/ml, kemudian dilakukan
pengenceran suspensi bakteri dengan memipet 0,1 ml biakan bakteri (10 8
CFU/ml), dimasukkan ke dalam tabung steril yang berisi nutrient broth (NB) steril
sebanyak 9,9 ml dan divortex hingga homogen maka suspensi bakteri
konsentrasinya sama dengan 106 CFU/ml.
30
3.10 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Daun belimbing wuluh (Averrhoa
bilimbi L.) dengan Berbagai Konsentrasi
Ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) ditimbang 5 g
kemudian dilarutkan dengan pelarut etanol 96% hingga 10 ml maka konsentrasi
ekstrak adalah 500 mg/ml. Larutan tersebut diencerkan kembali dengan pelarut
etanol 96% sehingga didapat konsentrasi 500 mg/ml; 400 mg/ml; 300 mg/ml; 200
mg/ml; 100 mg/ml; 50 mg/ ml; 40 mg/ml; 30 mg/ml.
3.11 Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun belimbing wuluh (Averrhoa

bilimbi L.)
Dilakukan dalam Biological Safety Cabinet (BSC), sebanyak 0,1 ml
suspensi inokulum bakteri Escherichia coli dimasukkan ke dalam cawan petri
steril, kemudian tuangkan 15 ml media MHA ke dalam cawan, lalu dihomogenkan
dan didiamkan pada suhu kamar hingga media memadat. Cakram kertas yang
telah dicelupkan dalam larutan uji dengan berbagai perbandingan diletakkan pada
permukaan media sedangkan cakram yang dicelupkan ke dalam etanol 96%
digunakan sebagai kontrol. Cawan didiamkan pada suhu kamar selama 10-15
menit, kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam, kemudian
diameter zona hambat di sekitar cakram diukur dengan menggunakan jangka
sorong. Pengujian dilakukan dengan tiga kali pengulangan (triplo). Perlakuan
yang sama dilakukan terhadap inokulum bakteri Staphylococcus aureus (Ditjen
POM , 1995).
3.12 Prosedur Pembuatan Gel Antiseptik Tangan
3.12.1 Formula Dasar Gel
a. formula dasar gel (widaningsih, dkk., 2016)
31
R/ HPMC 5 g
Propilen glikol 15 ml
Nipagin 0,02 g
Pewangi 15 tetes
Air suling ad 100 ml
b. Formula dasar sediaan gel
R/ Ekstrak daun belimbing wuluh (konsentrasi) x g
HPMC 1 g
Propilen glikol 15 ml
Nipagin 0,02 g
Pewangi 15 tetes
Air suling ad 100 ml
Cara pembuatan :
Diawali dengan menaburkan HPMC di dalam lumpang yang berisi
aquades selama 15–30 menit hingga mengembang digerus sampai terbentuk dasar
gel (massa I), kemudian nipagin dilarutkan dengan propilenglikol (massa II) lalu
ditambahkan ekstrak daun belimbing wuluh dan di campur dengan (massa I),
diaduk tambahkan bahan pewangi belimbing kemudian diaduk secara homogen.
3.12.2 Formulasi Sediaan Gel Antiseptik Tangan
Sediaan gel dibuat ke dalam 4 sediaan, yaitu satu sediaan blanko (dasar
gel) dan sediaan yang mengandung ekstrak daun belimbing wuluh. Konsentrasi
ekstrak daun belimbing wuluh yang digunakan dalam penelitian ini yaitu: 50%,
40%, 30%. Adapun formula yang digunakan dalam penelitian ini dapat dilihat
pada Tabel 2.1.
32
Tabel 2.1 Rancangan formula Gel Hand sanitizer ekstrak daun belimbing wuluh
(Averrhoa bilimbi L.)
Formula
Komposisi
F0 F1 F2 F3
Ekstrak daun belimbing
wuluh (g) - 30 40 50
Dasar gel (g) 100 70 60 50
Keterangan
F0 = basis gel (blangko)
F1 = Konsentrasi gel ekstrak daun belimbing (30%)
Cara pembuatan: Ekstrak daun belimbing wuluh digerus di dalam
lumpang, lalu ditambahkan sedikit demi sedikit dasar krim ke dalam lumpang
sambil terus digerus sampai homogen.
3.13 Evaluasi Terhadap Sediaan
3.13.1 Pengamatan Organoleptik
Sediaan gel dievaluasi secara fisik meliputi bau, warna, konsistensi selama
12 minggu dengan pengamatan setiap1minggu sekali. Pengamatan ini dilakukan
pada gel antiseptik tangan (hand sanitizer) yang disimpan pada suhu kamar
(Ansel, 2008).
3.13.2 Pemeriksaan Homogenitas Sediaan
Sejumlah tertentu sediaan jika dioleskan pada sekeping kaca, sediaan
harus menunjukkan susunan yang homogen dan tidak terlihat adanya butiran kasar
(Ditjen. POM, 1979).
3.13.3 Penentuan pH
Penentuan pH sediaan dilakukan dengan menggunakan alat pH meter.
33
Cara: Alat terlebih dahulu dikalibrasi dengan menggunakan larutan dapar
standar netral (pH 7,01) dan larutan dapar pH asam (pH 4,01) hingga alat
menunjukkan harga pH tersebut. Kemudian elektroda dicuci dengan air suling,
lalu dikeringkan dengan tissue. Sampel dibuat dalam konsentrasi 1% yaitu
ditimbang 0,25 gram sediaan dan dilarutkan dalam 25 ml air suling. Kemudiaan
elektroda dicelupkan dalam larutan tersebut. Dibiarkan alat menunjukkan harga
pH sampai konstan. Angka yang ditunjukkan pH meter merupakan pH sediaan
(Rawlins, 2003).
3.13.4 Uji viskositas
Pengukuran viskositas dilakukan dengan cara sediaan gel antiseptik
dimasukkan ke dalam beker gelas 100 ml dan dipilih nomor spindle yang sesuai.
Pengukuran ini dilakukan dengan tiga kali pengulangan dengan menggunakan
viskometer Brookfield DV-E.
3.14 Uji Mikrobiologi Sediaan Gel Antiseptik
Uji mikrobiologi aktivitas antibakteri sediaan gel ekstrak daun belimbing
wuluh dilakukan dengan metode difusi agar yang menggunakan pencadang kertas
dengan cara mengukur diameter hambat pertumbuhan bakteri pada Escherichia
coli dan Staphylococcus aureus di sekitar pencadang kertas.
3.15 Pengujian Aktivitas Antibakteri Sediaan Gel Antiseptik
Dilakukan dalam Biological Safety Cabinet (BSC), sebanyak 0,1 ml
suspensi inokulum bakteri Escherichia coli dimasukkan ke dalam cawan petri
steril, kemudian dituang 15 ml media MHA ke dalam cawan, lalu dihomogenkan
dan didiamkan pada suhu kamar hingga media memadat. Cakram kertas yang
34
telah dicelupkan dalam larutan sediaan gel dengan konsentrasi 40%, 30%, 50%
diletakkan pada permukaan media sedangkan cakram yang dicelupkan ke dalam
dasar gel digunakan sebagai blangko. Cawan didiamkan pada suhu kamar selama
10-15 menit, kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam, kemudian
diameter zona hambat di sekitar cakram diukur dengan menggunakan jangka
sorong. Pengujian dilakukan dengan tiga kali pengulangan (triplo). Perlakuan
yang sama dilakukan terhadap inokulum bakteri Staphylococcus aureus (Ditjen
POM, 1995)
35
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan
Identifikasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Medanense, Laboratorium
Herbarium Medanese, Universitas Sumatera Utara. Hasil identifikasi dapat dilihat
pada Lampiran 1, halaman 50.
4.2 Hasil Pemeriksaan Karakterisasi
Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia daun belimbing wuluh berwarna
hijau muda sampai hijau tua, bentuk bundar panjang sampai jorong, panjang 2 cm
sampai 10 cm, lebar 0,7 cm sampai 3 cm, ujung daun runcing, pangkal daun
membundar, dan pinggir daun rata. Tangkai daun 1 mm sampai 2 mm, permukaan
bawah daun berambut lebih banyak dari pada permukaan atas, jika diraba terasa
halus. Hasil dapat dilihat pada Lampiran 3, halaman 52.
Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia daun belimbing dapat
dilihat pada Tabel 4.1 dibawah ini :
Tabel 4.1 Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Serbuk Simplisia Daun Belimbing

Wuluh wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
Persyaratan dalam Materi

No. Parameter Hasil (%)
Medika Indonesia (MMI)
1. Kadar Air 7,28 10%
2. Kadar Sari Larut Air >18%
3. Kadar Sari Larut Etanol 14,67 >11%
4. Kadar Abu Total 4,19 <7,5%
5. Kadar Abu Tidak Larut 0,57 < 1%
Asam
36
Berdasarkan Tabel 4.1, Kadar air yang didapat yaitu sebesar 7,28%,
penetapan kadar air pada simplisia dilakukan untuk mengetahui jumlah air yang
terkandung dalam simplisia yang digunakan. Kadar air simplisia ditetapkan untuk
menjaga kualitas simplisia karena kadar air berkaitan dengan kemungkinan
pertumbuhan jamur/kapang. Hasil penetapan kadar air yang diperoleh lebih kecil
dari 10%, berdasarkan persyaratan dalam Materi Medika Indonesia (MMI), kadar
air yang melebihi 10% dapat menjadi media yang baik untuk pertumbuhan
mikroba, keberadaan jamur atau serangga, serta mendorong kerusakan mutu
simplisia (WHO, 1998).
Penetapan kadar sari dilakukan menggunakan dua pelarut, yaitu air dan
etanol. Penetapan kadar sari larut air adalah untuk mengetahui kadar senyawa
kimia bersifat polar yang terkandung di dalam simplisia, sedangkan kadar sari
larut dalam etanol dilakukan untuk mengetahui kadar senyawa larut dalam etanol,
baik senyawa polar maupun non polar. Hasil karakterisasi simplisia daun
belimbing wuluh menunjukkan kadar sari yang larut dalam air sebesar 21,56%
sedangkan kadar sari yang larut dalam etanol sebesar 14,67%.
Penetapan kadar abu dimaksudkan untuk mengetahui kandungan mineral
internal (abu fisiologis) yang berasal dari jaringan tanaman itu sendiri yang
terdapat di dalam sampel. Kadar abu tidak larut asam untuk menunjukkan jumlah
silikat, khususnya pasir yang ada pada simplisia dengan cara melarutkan abu total
dalam asam klorida (WHO, 1998). Penetapan kadar abu pada simplisia daun
belimbing menunjukkan kadar abu total sebesar 4,19% dan kadar abu tidak larut
dalam asam sebesar 0,57%.
Hasil perhitungan karakterisasi simplisia daun belimbing wuluh (Averrhoa
bilimbi L.) meliputi penetapan kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut
37
etanol, kadar abu dan kadar abu tidak larut asam dapat dilihat pada lampiran,
halaman 59-63.
4.3 Hasil Ekstraksi
Hasil ekstraksi 1 kg simplisia daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 96% diperoleh ekstrak etanol
daun belimbing sebanyak 135,60 g. Ekstrak etanol yang diperoleh, dilakukan
skrining fitokimia dan kemudian diuji aktivitas antibakteri terhadap bakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.
4.4 Hasil Skrining Fitokimia
Penentuan golongan senyawa kimia simplisia dan ekstrak daun belimbing
wuluh dilakukan untuk mendapatkan informasi golongan senyawa metabolit
sekunder yang terdapat di dalamnya. Adapun pemeriksaan yang dilakukan adalah
pemeriksaatriterpenoid, flavonoid, tanin dan saponin. Hasil skrining fitokimia
serbuk simplisia, ekstrak etanol belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) dapat
dilihat pada Tabel 4.2 dibawah ini :
Tabel 4.2 Hasil Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia, Ekstrak Daun

No Pemeriksaan Simplisia Ekstrak etanol
1 Alkaloid - -
2 Saponin + +
3 Tanin + +
4 Flavonoid + +
5 Glikosida + +
6 Triterpenoid/ Steroid + +
Keterangan:
(+) positif : mengandung golongan senyawa
(-) negatif : tidak mengandung golongan senyawa
38
Hasil skrining fitokimia simplisia dan ekstrak daun belimbing wuluh
menunjukkan adanya senyawa flavonoid, saponin, triterpenoid/steroid dan tanin.
Adanya Flavonoid ditentukan dengan penambahan serbuk Mg atau Zn dengan
HCl pekat terjadi warna kuning atau jingga. Keberadaan saponin ditunjukkan
dengan terbentuknya busa yang bertahan selama 30 menit setelah pengocokan
dengan air panas selama 3-5 menit (Farnsworth, 1966). Tanin dengan penambahan
pereaksi FeCl3 1% terjadi warna biru kehitaman (Farnsworth, 1966).
Triterpenoid/steroid ditandai dengan timbulnya warna hijau biru dengan pereaksi
Liebermann Buchard (Harborne, 1987).
4.5 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh
(EEDBW)
Penentuan hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun belimbing
wuluh (EEDBW) dilakukan dengan metode difusi agar menggunakan pencadang
kertas. Hasil pengukuran diameter rata-rata daerah hambatan pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aures dan Escherichia coli dapat dilihat pada Tabel 4.3.
Tabel 4.3 Hasil pengukuran diameter rata-rata daerah hambatan pertumbuhan

bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus oleh ekstrak daun
belimbing wuluh
Konsentrasi Diameter Rata-rata Daerah hambatan (mm)*

No
(mg/ml) Staphylococcus aureus Escherichia coli
1 500 15,0 ± 0,64 13,1 ± 0,25
2 400 14,1 ± 0,26 12,6 ± 0,25
3 300 12,7 ± 0.38 11,5± 0,32
4 200 11,9 ± 0,21 9,9 ± 0.25
5 100 10,8 ± 0,25 8,6 ± 0,25
6 50 8,4 ± 0,36 6,6 ± 0,45
7 40 6,8 ± 0,26 -
9 30 - -
10 Blanko - -
39
Keterangan :
* = Diameter rata- rata daerah hambatan pertumbuhan bakteri tiga kali
pengulangan
- = Tidak terdapat daerah hambatan pertumbuhan bakteri
Blanko = etanol 96 %
Berdasarkan hasil pengukuran aktivitas antibakteri yang terlihat pada
Tabel 4.3 diperoleh konsentrasi hambat minimum (KHM) ekstrak daun belimbing
wuluh pada bakteri Escherichia coli konsentrasi 50 mg/ml dengan diameter
hambat sebesar 6,6 mm, pada bakteri Staphylococcus aures pada konsentrasi 40
mg/ml dengan diameter hambat sebesar 6,8 mm.
Tabel 4.4 Hasil pengukuran diameter rata-rata daerah hambatan pertumbuhan

bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus oleh sediaan gel
hand sanitizer ekstrak daun belimbing wuluh
Diameter Rata-rata Daerah Hambatan

Konsentrasi (mg/ml)
No (mm)*
Staphylococcus aureus Escherichia coli
1 500 11,9 ± 0,6 6.6 ± 0,37
2 400 9,5 ± 0,18 -
3 300 8,6 ± 0,24 -
4 Blanko - -
Keterangan :
* = Diameter rata- rata daerah hambatan pertumbuhan bakteri tiga kali
pengulangan
- = Tidak terdapat daerah hambatan pertumbuhan bakteri
Blanko = Basis gel
Berdasarkan hasil pengukuran aktivitas antibakteri yang terlihat pada
Tabel 4.4 diperoleh konsentrasi hambat minimum (KHM) ekstrak daun belimbing
wuluh pada bakteri uji aktivitas gel hand sanitizer ekstrak daun belimbing wuluh
diperoleh daya hambat bakteri Escherichia coli konsentrasi 500 mg/ml yaitu 6,6
mm dan pada bakteri Staphylococus aureus pada konsentrasi 300 mg/ml dengan
diameter 8,6 mm.
40
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pada bakteri Staphylococcus aureus
memiliki zona hambat lebih besar dibandingkan dengan bakteri Escherichia coli
dan pada berbagai variasi konsentrasi larutan uji.
Menurut Volk (1992), perbedaan tersebut terjadi karena kedua bakteri uji
tersebut memilki komposisi dan struktur dinding sel yang berbeda sehingga
mengakibatkan bakteri gram positif lebih rentan terhadap senyawa-senyawa kimia
dibandingkan gram negatif. Struktur dinding sel bakteri gram positif lebih
sederhana, yaitu berlapis tunggal dengan kandungan lipid yang rendah (1-4%)
sehingga memudahkan bahan bioaktif masuk ke dalam sel. Struktur dinding sel
bakteri gram negatif lebih kompleks, yaitu berlapis tiga terdiri dari lapisan luar
lipoprotein, lapisan tengah lipopolisakarida yang berperan sebagai penghalang
masuknya bahan bioaktif antibakteri, dan lapisan dalam berupa peptidoglikan
dengan kandungan lipid tinggi (11-12%).
4.6 Pengamatan Stabilitas Sediaan
Hasil pengamatan stabilitas sediaan menunjukkan bahwa gel antiseptik
tangan (hand sanitizer) tanpa ekstrak (blanko) F0 yang disimpan pada suhu kamar
tetap jernih hingga 12 minggu, warna dan bau tidak berubah, sedangkan hasil
pengamatan stabilitas dengan konsentrasi ekstrak 50%, 40% dan 30% disimpan
pada suhu kamar selama 12 minggu, warna dan baunya tidak berubah serta stabil.
41
Tabel 4.5 Data pengamatan stabilitas gel hand sanitizer
Lama Stabilitas
Penyim- Warna Bau Konsistensi
panan
(minggu) F0 F1 F2 F3 F0 F1 F2 F3 F0 F1 F2 F3
1 T C C C K Ks Ks Ks Ks K K K
Keterangan:
F0 : Basis gel (blangko)
F1 : Konsentrasi gel ekstrak daun belimbing (30%)
T : Transparan
C : Coklat
K : Kental
Ks : Khas
4.7 Hasil pengamatan homogenitas sediaan
Menurut Ditjen POM (1979), pengamatan homogenitas dapat
dilakukan dengan mengoleskan sediaan pada sekeping kaca atau bahan transparan
lain, lalu diratakan, jika tidak ada butiran-butiran maka sediaan dapat dikatakan
homogen. Hasil pengamatan homogenitas dapat dilihat pada Tabel 4.6 dan hasil
gambar pada Lampiran 22, halaman 69. Pemeriksaan homogenitas menunjukkan
hasil bahwa semua sediaan homogen.
42
Tabel 4.6 Data pengamatan homogenitas sediaan
Pengamatan selama (minggu)
Sediaan
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
F0 + + + + + + + + + + + + +
F1 + + + + + + + + + + + + +
F2 + + + + + + + + + + + + +
F3 + + + + + + + + + + + + +
Keterangan:
F0: Basis gel (blangko)
F1: Konsentrasi gel ekstrak daun belimbing (30%)
(+) Homogen
(-) Tidak homogen
4.8 Hasil penentuan pH sediaan
Hasil pengukuran pH dapat dilihat pada tabel 4.7. Penentuan pH sediaan
dilakukan dengan tiga kali pengulangan. Berdasarkan hasil pengukuran pH yang
diperoleh, pH sediaan gel formula dari F0 (blanko), F1 (40%), F2 (30%), F3
(50%), lebih rendah pH sediaan gel yang dibuat masih memenuhi batas pH
fisiologis kulit, menurut literatur pH kosmetik diusahakan sama atau sedekat
mungkin dengan pH fisiologis kulit yaitu 4,5 – 6,5 (Tranggono dan Latifah, 2007)
Tabel 4.7 Data pengamatan pH sediaan

Pengamatan pH selama (minggu)
F
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
F0 6,2 6,2 6,2 6,4 6,4 6,4 6,4 6,4 6,4 6,4 6,4 6,4 6,4
F1 4,8 4,8 4,8 4,8 4,8 4,8 4,9 4,9 5,0 5,0 5,0 5,0 5,0
F2 4,6 4,6 4,6 4,6 4,6 4,6 5,0 5,0 5,0 5,0 5,0 5,0 5,0
F3 4,9 4,9 4,9 4,9 4,9 4,9 4,9 4,9 4,9 5,0 5,0 5,0 5,0
Keterangan:
F : Formula
43
4.9 Hasil Viskositas Sediaan
Penentuan viskositas sediaan dilakukan dengan menggunakan viskometer
Brookfield DV-E dengan nomor spindle yang sesuai, sebelum dan setelah
penyimpanan pada suhu kamar selama 12 minggu.
Pengujian viskositas bertujuan untuk menentukan nilai kekentalan suatu
zat.Semakin tinggi nilai viskositasnya maka semakin tinggi kekentalan zat
tersebut (Martin, dkk., 1993). Hasil pengamatan viskositas sediaan gel selama
penyimpanan 12 minggu menunjukkan bahwa sediaan mengalami peningkatan
viskositas. Hal ini disebabkan karena konsentrasi ekstrak yang terkandung dalam
sediaan dan juga lama penyimpanan, sehingga sediaan terpengaruh oleh
lingkungan seperti udara. Hasil pengamatan viskositas dapat dilihat pada Tabel
4.8 Data pengamatan Viskositas sediaan
44
Tabel 4.8 Data pengamatan Viskositas sediaan
Lama Viskositas (cp)

Penyimpanan
F0 F1 F2 F3
(minggu)
0 38500 46000 48500 49500
1 38500 46000 48500 49500
2 38500 46000 48500 49500
3 38500 46000 48500 49500
4 38500 46000 48500 49500
5 38500 46000 48500 49500
6 38500 46000 48500 49500
7 38500 46000 48500 50000
8 38500 46000 48500 50000
9 38500 46000 49000 50000
10 38500 46000 49000 50000
11 38500 46000 49000 50000
12 38500 46000 49000 50000
Keterangan :
F : Formula
45
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
a. Ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) mempunyai aktivitas
antibakteri terhadap bakteri Escherichia coli menghambat pada
konsentrasi 500 mg/ml dengan diameter daerah hambat sebesar 13,1 mm.
konsentrasi hambat minimum (KHM) bakteri Escherichia coli pada
konsentrasi 50 mg/ml dengan diameter hambat sebesar 6,6 mm. Sedangkan
bakteri Staphylococcus aures mempunyai daya hambat pada konsentrasi
500 mg/ml dengan diameter daerah hambat sebesar 15,0 mm dan memiliki
konsentrasi hambat minimum bakteri Staphylococcus aures pada
konsentrasi 40 mg/ml dengan diameter hambat sebesar 6,8 mm. Hasil uji
aktivitas antibakteri dari ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi
L.) menunjukan kurang efektif menghambat pertumbuhan bakteri
Escherichia coli
b. Sediaan gel antiseptik hand sanitizer ekstrak daun belimbing wuluh dapat
menghambat aktivitas bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus
pada konsentrasi 500 mg/ml dengan daya hambat 6,6 mm pada bakteri
Escherichia coli dan 11,9 mm terhadap Staphylococcus aureus.
c. Sediaan gel antiseptik tangan Hand sanitizer ekstrak daun belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbi L.) memiliki konsistensi yang kental dan
memenuhi persyaratan dalam evaluasi mutu fisik sediaan.
46
5.2 Saran
Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk melakukan formulasi sediaan
menggunakan ekstrak tanaman lain yang memiliki aktivitas antibakteri yang lebih
efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan
Staphylococus aureus serta dilakukan pengujian secara invivo kepada hewan.
47
DAFTAR PUSTAKA
Adam, S. (1992). Dasar-Dasar Mikrobiologi dan Parasitologi. Jakarta : EGC.

Halaman 23-25.
Ansel, H.C. (2008). Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Edisi Keempat. Jakarta:
UI Press. Halaman 382-389.
Athindehou, M., Latifou, L., dan Bernard, G. (2013).Isolation and Identification
Two Antibacterial Agents From Chromolaena odorata L. active against
four Diaarheal Strains.Scientific Research. 3:115-121.
Dalimartha, S. (2008). Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid 5. Jakarta: Pustaka

Bunda. Halaman 6-10.
Depkes. (1989). Materia Medika Indonesia. Jilid Kelima. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Halaman, 92,96,333-337.
Depkes. (2010). Farmakope Herbal Indonesia. Jakarta: : Departemen Kesehatan

Republik Indonesia.
Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta : Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 9, 32, 896.
Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi Keempat. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 7, 891 - 898, 1035.
Dwijoeputro. (1978). Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Penerbit Djambatan.

Halaman 15-17.
Dzen, S.M., Roekistiningsih, Santoso. S., dan Winarsih, S. (2003). Bakteriologi

Medik. Malang: Penerbit Bayumedia Publishing. Halaman 186, 197-
198, 204, 231.
Elliot, Tom, Suzana A, Jhon. (2013). Mikrobiologi Kedokteran dan Infeksi Edisi
4. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Farnsworth, N.R. (1966). Biologycal and Phytochemical Screening of Plants.

Journal of Pharmaceutical Science. 55(3): 225-276.
Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia. Edisi Kedua. Penerjemah: Kosasih

Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 6, 48-
49, 240.
Hariana, A. (2008). Tumbuhan Obat dan Khasiatnya Seri 1. Jakarta: Penerbit

Swadaya. Halaman 1-2.
Himedia. (2003). The Himediad Manual of Culture Media, Ingredients and Other
Laboratory Service. Himedia Ltd. Halaman 2.
48
Jawetz, E., Melnick, J.L., dan Adelberg E.A. (2007). Mikrobiologi untuk Profesi
Kesehatan. Edisi ke-20. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran. Halaman
256, 319.
Kementerian kesehatan republik Indonesia. (2011). Situasi diare di Indonesia,

bulletin jendela data informasi kesehatan, ISSN 2088-270
Karon, B., Ibrahim, M., Mahmood, A.,dan Huq, M. (2011). Preliminary

Antimicrobial, Cytotoxic and Chemical Investigation Averrhoa bilimbi
Linn and Zyzyphus mauritiana Lam. Bangladesh Pharmaceutical
Journal. 14(2): 5.
Lay, B.W., dan Sugiyo, H. (1994). Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta :

PT. Raja Grafindo Persada. Halaman 34, 72-73.
Martin, A., Swarbrick., J., dan Cammarata, A. (1993). Farmasi Fisik. Edisi III.
Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia. Halaman 1077.
Pelczar, M. J. Dan E. C. S. Chan. (1998). Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jilid 2.

Terjemahan Ratna Siri Hadioetomo, UI-Press. Jakarta. Halaman 88-100.
Pendit, Riana, Fitri. (2016). Karakteristik ekstrak daun belimbing wuluh, jurnal
pangan dan agroindustri.vol 4 no.1, 400- 409.
Pratiwi, S, T., (2008). Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Penerbit Erlangga. Halaman

137.
Purwaningsih, E. (2007). Multiguna Belimbing Wuluh. Jakarta: Ganeca Exact.

Halaman 2.
Rawlins, E.A., (2003). Bentley’s Textbook of Pharmaceutics. 18th ed. London:

Bailierre Tindall. Halaman 355.
Sari, R., dan Isdiartuti, D. (2006). Studi efektivitas sediaan gel antiseptik tangan
ekstrak daun sirih (Piper betle Linn)., majalah farmasi indonesia 17
(14),163-169.
Siswandono. (1995). Kimia Medisinal. Surabaya: Airlangga University Press.

Halaman 10-17.
Sudjadi. (1988). Metode Pemisahan. Fakultas Farmasi. Yogyakarta: Universitas

Gajah Mada. Halaman 167-169.
Supardi, I., dan Sukamto. (1999). Mikrobiologi dalam Pengolahan dan Keamanan
Pangan. Bandung: Penerbit Alumni. Halaman 175-177.
Syamsuni. (2005). Ilmu Resep. Jakarta: Buku Kedokteran EGC. Halaman 77.
Tim Mikrobiologi FK Brawijaya. (2003). Bakteriologi Medik. Cetakan I. Malang:

Bayu Media Publishing. Halaman 29.
49
Thomas, A. N. (2007). Tanaman obat Tradisional 2. Yogyakarta. Halaman 17.
Oxoid. (1982). The Oxoid Manual of Culture Media, Ingredients and Other
Laboratory Service. Edisi V. Basingstoke: Oxoid Ltd. Halaman 20.
Vandepitte, J., Engback, K., Piot, P., dan Heuck, CC. (1991). Basic Laboratory
Procedures in Clinical Bacteriology. Geneva: WHO Library. Pages 78,
96.
Volk, W.A., dan Wheeler, M.F. (1993). Mikrobiologi Dasar. Jilid I. Jakarta:
Erlangga. Halaman 33-40, 218-219.
Wahyudianingsih, Firmansyah, Septi A. (2016). Formulasi dan uji aktivitas

antibakteri gel pembersih tangan ekstrak etanol daun kembang bulan
(tithonia difersifolia (hemsley) A Gray12 (2). 56.
Waluyo, L. (2010). Teknik Metode Dasar dalam Mikrobiologi. Cetakan Kedua.

Malang: UMM Press. Halaman 48, 194.
World Health Organization.(1998). Quality Control Methods for Medicinal Plant

Material. Switherland: WHO. Halaman 27-30.
50
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
a. Ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) mempunyai aktivitas
antibakteri terhadap bakteri Escherichia coli menghambat pada
konsentrasi 500 mg/ml dengan diameter daerah hambat sebesar 13,1 mm.
konsentrasi hambat minimum (KHM) bakteri Escherichia coli pada
konsentrasi 50 mg/ml dengan diameter hambat sebesar 6,6 mm. Sedangkan
bakteri Staphylococcus aures mempunyai daya hambat pada konsentrasi
500 mg/ml dengan diameter daerah hambat sebesar 15,0 mm dan memiliki
konsentrasi hambat minimum bakteri Staphylococcus aures pada
konsentrasi 40 mg/ml dengan diameter hambat sebesar 6,8 mm. Hasil uji
aktivitas antibakteri dari ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi
L.) menunjukan kurang efektif menghambat pertumbuhan bakteri
Escherichia coli
b. Sediaan gel antiseptik hand sanitizer ekstrak daun belimbing wuluh dapat
menghambat aktivitas bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus
pada konsentrasi 500 mg/ml dengan daya hambat 6,6 mm pada bakteri
Escherichia coli dan 11,9 mm terhadap Staphylococcus aureus.
c. Sediaan gel antiseptik tangan Hand sanitizer ekstrak daun belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbi L.) memiliki konsistensi yang kental dan
memenuhi persyaratan dalam evaluasi mutu fisik sediaan.
51
5.3 Saran
Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk melakukan formulasi sediaan
menggunakan ekstrak tanaman lain yang memiliki aktivitas antibakteri yang lebih
efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan
Staphylococus aureus serta dilakukan pengujian secara invivo kepada hewan.
52
DAFTAR PUSTAKA
Adam, S. (1992). Dasar-Dasar Mikrobiologi dan Parasitologi. Jakarta : EGC.

Halaman 23-25.
Ansel, H.C. (2008). Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Edisi Keempat. Jakarta:
UI Press. Halaman 382-389.
Athindehou, M., Latifou, L., dan Bernard, G. (2013).Isolation and Identification
Two Antibacterial Agents From Chromolaena odorata L. active against
four Diaarheal Strains.Scientific Research. 3:115-121.
Dalimartha, S. (2008). Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid 5. Jakarta: Pustaka

Bunda. Halaman 6-10.
Depkes. (1989). Materia Medika Indonesia. Jilid Kelima. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Halaman, 92,96,333-337.
Depkes. (2010). Farmakope Herbal Indonesia. Jakarta: : Departemen Kesehatan

Republik Indonesia.
Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta : Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 9, 32, 896.
Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi Keempat. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 7, 891 - 898, 1035.
Dwijoeputro. (1978). Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Penerbit Djambatan.

Halaman 15-17.
Dzen, S.M., Roekistiningsih, Santoso. S., dan Winarsih, S. (2003). Bakteriologi

Medik. Malang: Penerbit Bayumedia Publishing. Halaman 186, 197-
198, 204, 231.
Elliot, Tom, Suzana A, Jhon. (2013). Mikrobiologi Kedokteran dan Infeksi Edisi
4. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Farnsworth, N.R. (1966). Biologycal and Phytochemical Screening of Plants.

Journal of Pharmaceutical Science. 55(3): 225-276.
Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia. Edisi Kedua. Penerjemah: Kosasih

Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 6, 48-
49, 240.
Hariana, A. (2008). Tumbuhan Obat dan Khasiatnya Seri 1. Jakarta: Penerbit

Swadaya. Halaman 1-2.
Himedia. (2003). The Himediad Manual of Culture Media, Ingredients and Other
Laboratory Service. Himedia Ltd. Halaman 2.
53
Jawetz, E., Melnick, J.L., dan Adelberg E.A. (2007). Mikrobiologi untuk Profesi
Kesehatan. Edisi ke-20. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran. Halaman
256, 319.
Kementerian kesehatan republik Indonesia. (2011). Situasi diare di Indonesia,

bulletin jendela data informasi kesehatan, ISSN 2088-270
Karon, B., Ibrahim, M., Mahmood, A.,dan Huq, M. (2011). Preliminary

Antimicrobial, Cytotoxic and Chemical Investigation Averrhoa bilimbi
Linn and Zyzyphus mauritiana Lam. Bangladesh Pharmaceutical
Journal. 14(2): 5.
Lay, B.W., dan Sugiyo, H. (1994). Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta :

PT. Raja Grafindo Persada. Halaman 34, 72-73.
Martin, A., Swarbrick., J., dan Cammarata, A. (1993). Farmasi Fisik. Edisi III.
Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia. Halaman 1077.
Pelczar, M. J. Dan E. C. S. Chan. (1998). Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jilid 2.

Terjemahan Ratna Siri Hadioetomo, UI-Press. Jakarta. Halaman 88-100.
Pendit, Riana, Fitri. (2016). Karakteristik ekstrak daun belimbing wuluh, jurnal
pangan dan agroindustri.vol 4 no.1, 400- 409.
Pratiwi, S, T., (2008). Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Penerbit Erlangga. Halaman

137.
Purwaningsih, E. (2007). Multiguna Belimbing Wuluh. Jakarta: Ganeca Exact.

Halaman 2.
Rawlins, E.A., (2003). Bentley’s Textbook of Pharmaceutics. 18th ed. London:

Bailierre Tindall. Halaman 355.
Sari, R., dan Isdiartuti, D. (2006). Studi efektivitas sediaan gel antiseptik tangan
ekstrak daun sirih (Piper betle Linn)., majalah farmasi indonesia 17
(14),163-169.
Siswandono. (1995). Kimia Medisinal. Surabaya: Airlangga University Press.

Halaman 10-17.
Sudjadi. (1988). Metode Pemisahan. Fakultas Farmasi. Yogyakarta: Universitas

Gajah Mada. Halaman 167-169.
Supardi, I., dan Sukamto. (1999). Mikrobiologi dalam Pengolahan dan Keamanan
Pangan. Bandung: Penerbit Alumni. Halaman 175-177.
Syamsuni. (2005). Ilmu Resep. Jakarta: Buku Kedokteran EGC. Halaman 77.
Tim Mikrobiologi FK Brawijaya. (2003). Bakteriologi Medik. Cetakan I. Malang:

Bayu Media Publishing. Halaman 29.
54
Thomas, A. N. (2007). Tanaman obat Tradisional 2. Yogyakarta. Halaman 17.
Oxoid. (1982). The Oxoid Manual of Culture Media, Ingredients and Other
Laboratory Service. Edisi V. Basingstoke: Oxoid Ltd. Halaman 20.
Vandepitte, J., Engback, K., Piot, P., dan Heuck, CC. (1991). Basic Laboratory
Procedures in Clinical Bacteriology. Geneva: WHO Library. Pages 78,
96.
Volk, W.A., dan Wheeler, M.F. (1993). Mikrobiologi Dasar. Jilid I. Jakarta:
Erlangga. Halaman 33-40, 218-219.
Wahyudianingsih, Firmansyah, Septi A. (2016). Formulasi dan uji aktivitas

antibakteri gel pembersih tangan ekstrak etanol daun kembang bulan
(tithonia difersifolia (hemsley) A Gray12 (2). 56.
Waluyo, L. (2010). Teknik Metode Dasar dalam Mikrobiologi. Cetakan Kedua.

Malang: UMM Press. Halaman 48, 194.
World Health Organization.(1998). Quality Control Methods for Medicinal Plant

Material. Switherland: WHO. Halaman 27-30.
55
Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan
56
Lampiran 2. Gambar Tumbuhan Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
57
Lampiran 3. Gambar Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
Daun segar Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
Lampiran 4. Simplisia Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
Simplisia Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
58
Lampiran 5. Serbuk Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
Lampiran 6. Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun belimbing

wuluh (Averrhoa bilimbi L.) (perbesaran 10 x 40)
B
A
Keterangan :
A : Rambut penutup
B : Hablur kalsium oksalat
C : Stomata tipe anisositik
59
Lampiran 7. Bagan Kerja Penelitian
Daun Belimbing
wul
Dicuci dari pengotor sampai bersih
Ditiriskan
Ditimbang berat basahnya
Dikeringkan di lemari pengering
Ditimbang berat keringnya
Simplisia
Dihaluskan dengan blender

Disimpan dalam wadah yang
tertutup rapat sebelum digunakan
Serbuk Simplisia
Karakterisasi Pembuatan ekstrak
Skrining Fitokimia
 Pemeriksaan :
- Makroksopik
- Mikroskopik
 .Penetapan : Senyawa golongan :
 Alkaloid
- Kadar Air
- Kadar Sari Larut Air  Glikosida
- Kadar Sari Larut  Flavonoid
Etanol  Steroid/Triterpenoid
- Kadar Abu Total  Saponin
- Kadar Abuyang  Tanin
Tidak Larut Asam
60
Lampiran 8. Bagan Pembuatan Ekstrak Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa
bilimbi L.)
1 kg Serbuk Simplisia
Dimasukkan ke dalam wadah
Ditambahkan dengan 7,5 L etanol 96%
Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya,

sambil sesekali diaduk
Disaring
Ampas Maserat I
Dicuci dengan etanol 96%

hingga diperoleh 10 L
Ampas Maserat II
Didiamkan 2 hari/
dienaptuangkan
Diuapkan dan dipekatkan
dengan rotary evaporator.
Dikumpulkan dan diuapkan
kembali diatas water bath
dan dipekatkan dalam
freeze dryer
Ekstrak kental
61
Lampiran 9. Bagan Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak daun belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
Biakan murni bakteri
Diambil dengan jarum ose steril
Ditanam pada media Nutrient Agar miring
Diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam
Stok kultur bakteri
Disuspensikan dalam 10 ml media Nutrient Broth

steril
Disesuaikan kekeruhan dengan standar Mc Farland
Inokulum bakteri
Dimasukkan 0,1 ml inokulum ke dalam cawan petri
Ditambahkan 15 ml media Muller hinton agar

kedalam cawan petri
Dihomogenkan dan biarkan hingga memadat
Media Padat
Diletakkan pencadang kertas yang telah di celupkan

larutan uji ekstrak dengan berbagai konsentrasi dan
pelarut Etanol 96 % sebagai blanko
Diinkubasi pada suhu 37oC selama 18-24 jam
Diukur Diameter daerah hambatan disekitar

pencadang kertas dengan menggunakan jangka
sorong
Hasil
62
Lampiran 10. Bagan Formulasi gel antiseptik hand sanitizer Ekstrak daun
belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
HPMC
Ditaburkan didalam lumpang yang berisi

akuades
Dibiarkan 15-30 menit sampai mengembang

kemudian di gerus (massa I)
Ditambahkan nipagin yang telah dilarutkan

dengan propilenglikol (massa II)
Dicampurkan massa II ke massa I
Digerus homogen
Dasar gel
Ditambahkan ekstrak daun belimbing

wuluh dengan konsentrasi 50 %,40%,30%
Ditambahkan bahan pewangi
Digerus homogen
Di uji aktivitas antibakteri
63
Lampiran 11. Bagan Pengujian Aktivitas Antibakteri sediaan gel hand sanitizer
Ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
Biakan murni bakteri
Diambil dengan jarum ose steril
Ditanam pada media Nutrient Agar miring
Diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam
Stok kultur bakteri
Disuspensikan dalam 10 ml media Nutrient Broth

steril
Disesuaikan kekeruhan dengan standar Mc Farland
Inokulum bakteri
Dimasukkan 0,1 ml inokulum ke dalam cawan petri
Ditambahkan 15 ml media Muller hinton agar

kedalam cawan petri
Dihomogenkan dan biarkan hingga memadat
Media Padat
Diletakkan pencadang kertas yang telah di celupkan

sediaan gel hand sanitizer ekstrak daun belimbing
wuluh dengan konsentrasi 30%, 40%, 50%, blanko
Diinkubasi pada suhu 37oC selama 18-24 jam
Diukur Diameter daerah hambatan disekitar

pencadang kertas dengan menggunakan jangka
sorong
Hasil
64
Lampiran 12. Perhitungan kadar air serbuk simplisia daun belimbing wuluh
(Averrhoa bilimbi L.)
Volume akhir− volume awal

Kadar air simplisia = x 100%
Berat sampel
No Berat sampel (g) Volume awal (ml) Volume akhir (ml)

1 5,050 2,8 3,2
2 5,010 3,6 3,3
3 5,037 3,6 4,0
a. Berat simplisia = 5,050 g
Volume air = 3,2 – 2,8 = 0,4 ml
ml
Kadar air = g
x 100% = 7,92%
b. Berat simplisia = 5,010 g
Volume air = 3,6 – 3,2= 0,4 ml
ml
Kadar air = x 100% = 5,98%
g
c. Berat simplisia = 5,0370 g
Volume air = 4,0 – 3,6= 0,4 ml
ml
Kadar air = x 100% = 7,96%
g
Kadar air rata-rata = = 7,28%
65
Lampiran 13. Perhitungan kadar sari larut air serbuk simplisia daun Daun
Belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
Berat cawan sari−berat cawan kosong 100

Kadar sari = x x 100%
berat sampel 20
No Berat sampel (g) Berat cawan kosong (g) Berat cawan sari (g)
1 5,030 62,402 62,621
2 5,011 60,176 60,393
3 5,026 64,251 64,465
Berat sari = 0,219g
g
Kadar sari = 100% = 21,77%
g
Berat sari = 0,217 g
g
Kadar sari = 100% = 21,65%
g
c. Berat simplisia = 5,026g
Berat sari = 0,214g
g
Kadar sari = 100% =21,28%
g
Kadar sari rata-rata = = 21,56%
66
Lampiran 14. Perhitungan kadar sari larut etanol serbuk simplisia Daun
Berat cawan sari−berat cawan kosong 100

Kadar sari = x x 100%
berat sampel 20
No Berat sampel (g) Berat cawan kosong (g) Berat cawan sari (g)
1 5,016 57,058 57,205
2 5,042 64,475 64,624
3 5,034 60,281 60,429
g
Kadar sari = 100% = 14,65%
g
g
Kadar sari = 100% = 14,67%
g
c. Berat simplisia = 5,034g
g
Kadar sari = 100% = 14,70%
g
Kadar sari rata-rata = = 14,67%
67
Lampiran 15. Perhitungan kadar abu total serbuk simplisia Daun Belimbing
wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
Berat abu
Kadar abu total = x 100%
Berat sampel
No Berat sampel (g) Berat abu (g)

1 2,091 0,089
2 2,052 0,094
3 2,019 0,076
Berat abu = 0,089 g
Kadar abu = x 100% = 4,25%
Berat abu = 0,094 g
Kadar abu = x 100% = 4,58%
Berat abu = 0,076 g
Kadar abu = x 100% = 3,76%
Kadar abu total rata-rata = = 4,19%
68
Lampiran 16. Perhitungan kadar abu total tidak larut asam serbuk simplisia
Daun Belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.)
Berat abu
Kadar abu tidak larut asam = x 100%
Berat sampel
No Berat sampel (g) Berat abu (g)

1 2,091 0,011
2 2,052 0,016
3 2,019 0,009
Berat abu = 0,011 g
Kadar abu = x 100% = 0,52%
b. Berat simplisia = 2,052g
Berat abu = 0,016g
Kadar abu = x 100% = 0,77%
Berat abu = 0,009 g
Kadar abu = x 100% = 0,44%
Kadar abu total tidak larut asam rata-rata = = 0,57%
69
Lampiran 17. Hasil Pengukuran Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri
Staphylococus aureus dan Escerichia Coli dari Ekstrak Daun
Konsentrasi Diameter Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri (mm)

ekstrak
(mg/ml) Staphylococus aureus Escherichia coli
D1 D2 D3 D* D1 D2 D3 D*
500 15,8 14,7 14,7 15,0 13,2 12,8 13,1 13,1
400 14,2 13,8 14,3 14,1 12,6 12,9 12,4 12,6
300 13,2 12,5 12,6 12,7 11,7 11,2 11,8 11,5
200 12,0 12,1 11,7 11,9 10,2 9,9 9,7 9,9
100 11,1 10,6 10,9 10,8 8,4 8,9 8,7 8,6
50 8,1 8,8 8,3 8,4 6,7 6,2 7,1 6,6
40 6,9 7,4 7,3 7,2 0 0 0 0
30 6,8 6,2 6,0 6,8 0 0 0 0
20 0 0 0 0 0 0 0 0
Blanko 0 0 0 0 0 0 0 0
Keterangan :
D1 : Diameter perlakuan ke-1
D* : Diameter rata-rata
70
Lampiran 18. Gambar Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun
Belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi) terhadap Staphylococus
aureus
(A)
(B)
Keterangan :
A = Konsentrasi 50 % (500mg/ ml), 40 % (400mg/ ml), 30 % (300 mg/ ml),
20% (200mg/ ml) , Blangko etanol 96%
B = Konsentrasi 10 % (100mg/ ml), 5 % (50 mg/ ml), 4% (40 mg/ ml), 3%
(30mg/ ml) , Blangko etanol 96%
71
Lampiran 19. Gambar Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun
Belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi) terhadap Escherichia coli
40 %
30%
(A)
10 %
4%
20 %
(B)
Keterangan :
A = Konsentrasi 50 % (500mg/ ml), 40 % (400mg/ ml), 30 % (300 mg/ ml),
20% (200mg/ ml) , Blangko etanol 96%
B = Konsentrasi 10 % (100mg/ ml), 5 % (50 mg/ ml), 4% (40 mg/ ml), 3%
(30mg/ ml) , Blangko etanol 96%
72
Lampiran 20. Hasil Pengukuran Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri dari gel
antiseptik hand sanitizer ekstrak daun Belimbing wuluh
(Averrhoa bilimbi) Bakteri Escherichia coli dan Staphylococus
aureus
Konsentrasi Diameter Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri (mm)

ekstrak
Escherichia coli Staphylococus aureus
(mg/ml)
D1 D2 D3 D* D1 D2 D3 D*
500 7,1 6,5 6,4 6,6 11,9 12,7 11,2 11,9
400 - - - - 9,4 9,8 9,4 9,5
300 - - - - 8,9 8,3 8,7 8,6
Keterangan :
D1 : Diameter pengulangan ke-1
D2 : Diameter pengulangan ke-2
D3 : Diameter pengulangan ke -3
D* : Diameter rata-rata
73
Lampiran 21. Gambar Hasil Pengujian Aktivitas gel hand sanitizer
Antibakteri Ekstrak Daun ekstrak daun Belimbing wuluh
(Averrhoa bilimbi L.) Bakteri Escherichia coli dan
Staphylococus aureus
EC
SA
Keterangan:
Blanko = Dasar gel
50% = Sediaan dengan konsentrasi ekstrak daun belimbing wuluh
500mg/ml
40% = Sediaan dengan konsentrasi ekstrak daun belimbing wuluh 400
mg/ml
mg/ml
EC = Escerichia coli
SA = Staphylococus aureus
74
Lampiran 22. Gambar Hasil Uji Homogenitas
Blanko
50%
40%
30%
Keterangan:
Blanko = Dasar gel
50% = Sediaan dengan konsentrasi ekstrak daun belimbing wuluh
500mg/ml
mg/ml
mg/ml
75
Lampiran 23. Gambar Sediaan
Blanko 50% 40% 30%
Lampiran 24. Gambar alat
(A) (B)
76
(C) (D)
(E) (F)
(E) (F)
77
(G)
Keterangan: A: Oven; B: Lemari pengering; C: Jangka sorong; D. pH meter

(Hanna); E: Rotary evaporator; F: Timbangan analitik; G: Viskometer
(Brookfield).
78

PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI

DARI SEDIAAN GEL HAND SANITIZER EKSTRAK DAUN

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

Alhamdulillah, puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah

melimpahkan berkat dan rahmatNya sehingga penulis dapat menyelesaikan

(Averrhoa bilimbi L.) terhadap Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus

Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) terutama pada bagian daun

Belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) mengandung seyawa flavonoid, saponin,

steroid/triterpenoid, tanin. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui aktivitas

menghambat bakteri Escherichia coli dan Staphylococus aureus. Harapan peneliti

sediaan praktis menggantikan sabun cuci tangan.

Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan

selaku pembimbing yang telah membimbing dan memberikan petunjuk serta

saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini.

Medan yang telah mendidik selama perkuliahan.

Penulis mengucapkan terima kasih kepada kedua orang tua tercinta,

keridhaannya bagi penulis dalam menempuh dan menyelesaikan pendidikan, juga

Penulis juga mengucapkan terimakasih kepada teman-teman Farmasi Ekstensi

2015 atas doa dan dukungannya.

Medan, Desember 2018

Retno Gumala Sari

Saya yang bertanda tangan dibawah ini:

Nama : Retno gumala Sari

Nomor Induk Mahasiswa : 151524058

Program Studi : S-1 Ekstensi Farmasi

Judul Skripsi : Formulasi dan Uji Aktivitas Antibakteri dari

Medan, Desember 2017

Retno Gumala Sari

Latar Belakang: Daun belimbing wuluh mempunyai khasiat sebagai antiseptik

HALAMAN JUDUL ................................................................................ ii

LEMBAR PENGESAHAN .................................................................... iii

KATA PENGANTAR ............................................................................... iv

SURAT PERNYATAAN ........................................................................... vi

ABSTRAK ............................................................................................... vii

ABSTRACT ............................................................................................. viii

DAFTAR ISI ............................................................................................ ix

DAFTAR TABEL .................................................................................... xv

DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ xvi

BAB I PENDAHULUAN ........................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ........................................................................ 1

1.2 Perumusan Masalah.................................................................. 3

1.3 Hipotesis ................................................................................... 3

1.4 Tujuan Penelitian ..................................................................... 4

1.5 Manfaat Penelitian ................................................................... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA .......................................................... 5

2.1 Uraian Tumbuhan .............................................................. 5

2.1.1 Sistematika tumbuhan............................................ 5

2.1.2 Nama daerah .......................................................... 5

2.1.3 Morfologi tumbuhan .............................................. 6

2.1.4 Kandungan kimia ................................................... 6

2.1.5 Manfaat tumbuhan ................................................ 6

2.3 Sterilisasi ........................................................................... 9

2.4 Bakteri ............................................................................. 10

2.4.1 Uraian Umum ........................................................ 10

2.4.2 Ukuran Bakteri ...................................................... 12

2.4.3 Bentuk Bakteri ...................................................... 13

2.4.4 Uraian Escherichia coli ......................................... 14

2.4.5 Uraian Staphylococcus aureus............................... 14