Nama : Lasma Roham Morning Eryne Parapat

NIM : 17051103020
M.K : Isolasi Substansi Bioaktif

TUGAS

1. Perbandingan tanggapan saya mengenai hubungan kromatografi dengan isolasi bahan

bioaktif, dengan fakta di dalam PDF
2. 2 Jenis kromatografi berdasarkan video ke-2

JAWABAN

1. Tanggapan Saya :
Kromatografi dan isolasi bahan bioaktif memiliki hubungan dalam proses untuk
menghasilkan ekstrak murni. Hal ini dikarenakan kromatografi yang merupakan salah
satu tahapan dalam proses isolasi. Dalam hal ini kromatografi adalah tahap lanjut dari
partisi. Tujuan kromatografi sendiri ialah untuk memisahkan zat-zat penyusun suatu
campuran berdasarkan perbedaan kemampuan melarut dalam suatu pelaru dengan
menggunakan media kertas , salah satu contohnya analytical cromatografi silica gel F
254 .

Fakta berdasarkan materi PDF :

Kromatografi berasal dari Bahasa yunani, yaitu Chroma yang artinya warna, dan
Graphein yang artinya menulis. Kromatografi memiliki 3 tahap analisis yaitu
pemisahan, identifikasi dan kuantitatif.

Tujuan kromatografi dapat dilihat berdasaran 2 tujuan yaitu

1) Analitik : Untuk menentukan komposisi kimia dari sampel

2) Preparatif :Untuk memurnikan dan mengisolasi salah satu komponen
dari sampel

Penggunaan metode kromatografi sendiri memiliki kemampuan untuk memisahkan

sampel/konstituen yang sangat kecil (semi mikro & mikro) , dapat memisahkan molekul-
molekul besar seperti polimer, dapat memisahkan senyawa-senyawa organik multi
 komponen/kompleks, waktu pengerjaan singkat, murah dan sederhana, serta daoat
memisahkan senyawa-senyawa yang tida stabil.

Kromatografi memiliki prinsip dasar untuk memisahkan senyawa berdasasrkan

migrasi differensial komponen zar atara 2 fase yaitu fasa diam (stasioner) yang berupa
cair atau padat dan fasa gerak(mobile) yang dapat berupa gas atau cair.

2. Jenis kromatografi berdaasarkan video

1) Kromatografi Lapis Tipis
Yaitu metode yang dilakukan pada tahap pemantauan fraksi. Yang hasilnya
berupa kromatrom yang menampilkan bercak/spot senyawa kimia, dengan
menggunakan kromatogram, kita dapat memilih senyawa mana yang akan dijadikan
target isolasi .untuk mempermudah proses dapat dipilih senyawa yang memberikan
bentuk bercak yang jelas dan paling besar serta berwarna kuning, merah atau ungu.
a) Alat dan bahan
 Chamber
 Fraksi
 Plat KLT
 Eluen/pelarut
b) Metode Kerja
 Ambil sejumlah fraksi dengan menggunakan pipa kapiler
 Totolkan sampel fraksi pada plat KLT dengan cara menempelkan pipa
kapiler pada plat dan ditunggu hingga fraksi turun dan menempel pada plat
 Tunggu beberapa saat hingga bercak mongering
 Masukkan plat kedalam chamber
 Posisi bercak harus diatas permukaan eluen dan jangan sampai bercak
terendam
 Chamber kemudian ditutup hingga proses kromatografi berjalan
  Setalah mencapai batas atas plat KLT , maka proses kromatografi
dihentikan dengan cara mengeluarkan plat dari chamber
 Pilih senyawa target sebagai bahan isolasi

2) Metode Kromatografi Kolom

Yaitu metode yang dilakukan pada tahap Sub fraksinasi yang bertujuan untuk
memsiahkan senyawa berdasarkanperbedaan urutan warna. Pada tahap sub
fraksinasi juga bias menggunkan metode kromatografi cair vakum.
a) Alat dan bahan
 Tabung kaca penampung sub fraksi
 Kolom
b) Metode Kerja
 Kolom kromatografi dipasang pada staff
 Masukkan kapas kedalam kolom
 Dorong kapas hingga mencapai dasar dengan menggunakan batang
 Tambahkan pasir kedalam kolom untuk menjaga supaya silica tidak
menyumbat lobang kolom
 Fase diam silica disiapkan, kemudian siapkan eluanny (fase gerak)
 Campurkan eluen dengan silica gel untuk membuat bubur silica
 Masukkan bubur silica ke dalam kromatografi
 Dinding kolom diketuk secara hati-hati dengan alat pemukul untuk
menghilangkan gelembung udara
 Kurangi volume eluen didalam kolom
 Keluarkan kelebihan pelarut hingga jarak antara permukaan silica dan
permukaan silica dan pelarut sekitar 5 mm – 1 cm
 Masukkan sampel fraksi ke dalam kolom
Proses kromatografi kolom di jalankan dengan membuka keran kolom tampung
setiap tetesan sub fraksi dengan tabung kaca . Sub fraksi hasil kromatografi
ditampung pada tabung penampung untuk selanjutnya dianalisis menggunakan KLT
Analitic