║Journal Caninus Denstistry Volume 2, Nomor 1 (Februari 2017): 31 - 39

Konsentrasi Hambat Minimum Dan Konsentrasi Bunuh Minimum Ekstrak Daun Kemangi
(Ocimum Sanctum L.) Terhadap Pertumbuhan Candida Albicans

Silvia Desmara, Sri Rezeki, Sunnati

Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Syiah Kuala

ABSTRAK
Kemangi (Ocimum sanctum L.) merupakan tumbuhan yang memiliki kualitas minyak esensial yang
baik. Minyak esensial Ocimum sanctum L. banyak mengandung eugenol yang berperan aktif sebagai
zat antifungal dan mampu menghambat pertumbuhan jamur yang telah resistensi terhadap obat anti
jamur. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun kemangi (Ocimum sanctum
L.) terhadap pertumbuhan C. albicans. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratoris
dengan desain postest only control group dengan 4 kelompok perlakuan, 1 kelompok kontrol negatif
(akuades) dan 1 kelompok kontrol positif (nistatin). Parameter yang diamati adalah jumlah rata-rata
koloni (CFU). Data dianalisis dengan one way ANOVA yang kemudian dilanjutkan dengan uji
menggunakan uji Kruskal-Walls dengan post hoc uji Mann-Whitney. Hasil menunjukkan semua
konsentrasi berbeda bermakna dengan kontrol negatif, sedangkan konsentrasi ekstrak 100%
dibandingkan dengan kontrol positif tidak ada perbedaan bermakna.. Ekstrak daun kemangi (Ocimum
sanctum L.) memiliki pengaruh terhadap pertumbuhan C. albicans yaitu KBM sebesar 25% dengan
pengenceran ekstrak etanol, sedangkan dengan akuades terdapat KHM sebesar 25% .

Kata kunci: Kandidiasi oral, daun kemangi (Ocimum sanctum L.), Candida albicans

ABSTRACT
Basil (Ocimum sanctum L.) is a plant that has a good quality essential oils. The essential oil Ocimum
sanctum L many contain eugenol which plays an active role as an antifungal agent and is able to
inhibit the growth of fungi that have resistance to antifungal drugs. This study aims to determine the
effect of extracts of basil (Ocimum sanctum L.) on the growth of C. albicans. This research was a
laboratory experimental with posttest only control group design with 4 treatment groups, one
negative control group (distilled water) and one positive control group (Nystatin). The parameters
measured were the Colony Forming Unit (CFU). Data were analyzed by one-way ANOVA followed
by a test using the Kruskal-Walls with post hoc Mann-Whitney test. Result showed that all
concertations significantly different with negative control, while at 100% concertation compared to
positive control did not showed significant difference. Extracts of basil (Ocimum sanctum L.) has an
influence on the growth of C. albicans that is MFC at 25% the ethanol extract dilution, whereas with
distilled water contained MIC 25%.

Key words : Candidiasis oral, basil (Ocimum sanctum L.), Candida albicans

PENDAHULUAN tingkat mortalitas hingga 50%2 dan penyebab

Insidensi dan prevalensi infeksi jamur
telah meningkat sejak tahun 1980-an, khususnya
pada pasien dengan imunocompromised. (cit.
Arendrup dkk, 2005; Espinel-ingroff dkk, 2009)
Lebih dari 90% infeksi jamur pada manusia
disebabkan oleh Candida albicans (C. albicans),
Candida glabrata, Candida parapsilosis,
Candida tropicalis, dan Candida krusei (cit.
Pfaller dkk, 2007).1 Selain itu, C. albicans
merupakan infeksi nosokomial urutan keempat di
beberapa rumah sakit Amerika Serikat dengan
52% kasus kandidemia antara tahun 2000 dan
2005.3 Menurut penelitian yang dilakukan di
Italia selama 16 tahun pada 394 kasus
kandidemia diperoleh 44,2% C. albicans dan
55,8% non-albicans dengan tingkat mortalitas
28,2%.4
Candida albicans ditemukan di rongga
mulut pada lebih dari 75% pada populasi (cit.
Ruhnke M, 2002)2 atau hampir 50% populasi
dunia (cit. Scully C, 2008).5 Candida albicans
adalah spesies Candida tersering penyebab

J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 3 1 - 3 9 | 31
kandidiasis oral dan denture stomatitis (DS).
Candida albicans ditemukan sekitar 80% dari
mikroorganisme yang diisolasi dari lesi oral (cit.
Martinez dkk, 2013; Pereira dkk, 2013).6
Perawatan kandidiasis oral dapat
diberikan baik secara topikal maupun sistemik,
antara lain nistatin, amfoterisin B, klotrimazol,
ketokonazol, flukonazol, dan itrakonazol.7
Amfoterisin B memiliki efek samping kulit
panas, keringatan, sakit kepala, demam, lesu,
anoreksia, kejang dan penurunan fungsi ginjal.
Efek samping klotrimazol dapat terjadi rasa
terbakar, eritema, edema, gatal dan urtikaria.
Ketokonazol memiliki efek samping seperti mual
dan muntah, sakit kepala, nyeri perut, gusi
berdarah, erupsi kulit dan trombositpnea. Nistatin
dapat menimbulkan efek samping mual, muntah,
dan diare ringan. Itrakonazol dapat menimbulkan
efek samping berupa mual dan muntah pada
10%-15% pasien.8
Sebagian kecil obat yang digunakan
untuk pengobatan anti jamur bersifat fungistatik
dan telah mengalami resistensi sehingga
diperlukan pengobatan alternatif (cit. De Oliveira
dkk, 2006).1 Berbagai penelitian telah dilakukan
untuk mengetahui efektifitas antifungal minyak
esensial dari tanaman herbal yang memiliki
khasiat sebagai antifungal (cit. Ahmad A dkk,
20011; Pinto E dkk, 2013)9 Menurut World
Association Organization (WHO) sekitar 80%
penduduk Afrika lebih memilih tumbuhan
sebagai obat dibandingkan obat-obatan sintetik
(cit. WHO, 2002; Wilcox dkk, 2004).10
Sekitar 3000 minyak esensial telah
diisolasi dari 2000 spesies tanaman dan
menunjukkan adanya peningkatan produksi dan
konsumsi minyak esensial di seluruh dunia (cit.
Djilani and Dicko, 2012).11 Daun kemangi
mengandung senyawa tanin, flavonoid, steroid,
dan minyak esensial yang terdiri dari sinalol,
linalool, eugenol, dan asam monosinat (cit.
Sutrisna dkk, 2009).12 Efektifitas minyak esensial
dan komponen-komponenya terhadap obat anti
jamur merupakan hal yang penting dalam
melawan biofilm C. albicans yang telah resistensi
dengan cara menghambat membran ergosterol
dan mengganggu jalur sinyal morfogenesis yeast
menjadi hifa.11
Daun Ocimum sanctum L. juga
menghambat pertumbuhan beberapa jamur
dengan Konsentrasi Hambat Minumum (KHM)
150.00±025.00 pada Trichophyton
mentagrophytes, 400.00±00.00 g/ml pada
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 3 1 - 3 9 | 32
Trichophyton rubrum, 400.00±25.00 g/ml pada
Microsporum gypseum, 400.00±00.00 g/ml pada
Microsporum nanum dan 383.33±52.04 g/ml
pada Epidermophyton flocossum.13
Berdasarkan latar belakang di atas
peneliti tertarik untuk melakukan penelitian
mengenai pengaruh, KHM dan KBM ekstrak
daun Ocimum sanctum L. terhadap pertumbuhan
C. albicans.
BAHAN DAN METODE
Jenis penelitian ini penelitian
eksperimental laboratoris dengan desain postest
only control group untuk mengetahui pengaruh,
KHM dan KBM ekstrak daun Ocimum sanctum
L. terhadap pertumbuhan C. albicans. Sampel
yang digunakan untuk penelitian ini adalah C.
albicans strain ATCC 10231 yang diperoleh dari
Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran
Hewan (FKH) Unsyiah. Bahan uji yang
digunakan dalam penelitian ini adalah daun
Ocimum sanctum L. Sebanyak 10 kg yang
berasal dari Desa Cot Keueng, Kec. Kuta Baro,
Kab. Aceh Besar.
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian
ini adalah Timbangan digital, Colony counter,
Gelas ukur (merk Pyrex), Labu erlenmeyer (merk
Pyrex), Vortex, Cawan petri, Kertas saring no. 1
(merk Whatman), Jarum ose, Rotary vacum
evaporator, Pinset, Pipet tetes, Pipet eppendorf +
tip, Blender, Tabung reaksi, Kaca preparat,
Batang sebar / L, Mikroskop cahaya (merk
Olympus), Sterilisator, Lampu spiritus, Autoklaf
(merk ALP), Inkubator (merk Memmert),
Spektrofotometer, Kamera (merk Cannon
Digital), dan Alat tulis.
Bahan-bahan yang digunakan adalah
Sarung tangan, Masker, Etanol 96% sebanyak 10
ml, Kertas label, Sabouraud Dextrose Agar
(SDA), 80 ml n-Hexana, 40 ml dichloromethana,
Akuades sebanyak 1 ml, Larutan NaCl 0,9%,
Nistatin suspensi oral 100.1000 IU/ml,
Aluminium foil, dan Brom-cresol purple.
CARA PENELITIAN
Pembuatan Ekstrak Daun Ocimum sanctum
L.
Prosedur dilakukan dalam 3 tahap, yaitu:
persiapan bahan, ekstraksi daun Ocimum
sanctum L., dan distilasi.58 Pada tahap persiapan
bahan, daun Ocimum sanctum L. yang segar
ditimbang sebanyak 1 kg dan dicuci sampai
bersih dengan menggunakan air mengalir.
Kemudian 1 kg daun Ocimum sanctum L.
dikeringkan selama 7 hari pada temperatur
ruangan kemudian dihaluskan hingga diperoleh
bubuk halus, selanjutnya diekstraksi dengan
metode maserasi yaitu dengan merendam bubuk
tersebut dengan larutan 80 ml n-Hexana dan 40
ml dichlorometana dalam labu erlenmeyer selama
72 jam, setelah itu dilakukan penyaringan dengan
kertas saring no. 1 (merk Whatman) sampai
didapatkan filtrat, kemudian filtat didistilasi
selama 3 jam dengan suhu vakum evaporator 25-
30 ºC, kemudian didapatkan ekstrak kental daun
Ocimum sanctum L. (100%). Setelah itu
dilakukan penimbangan sampai diperoleh berat
konstan.53
Uji Fitokimia
Uji fitokimia fraksi daun Ocimum
sanctum L. dilakukan untuk mengetahui adanya
kandungan beberapa senyawa kimia, yaitu:14–17
1. Uji flavonoid dilakukan dengan meletakkan
beberapa tetes Magnesium dan HCl pada
ekstrak. Setelah beberapa menit adanya
perubahan warna merah muda menunjukkan
adanya kandungan flavonoid.14
2. Uji tanin dan fenol dilakukan dengan
meletakkan FeCl3 2% sebanyak 2 ml ke
ekstrak. Adanya perubahan warna biru
kehijauan atau hitam menunjukkan adanya
kandungan tanin.15
3. Uji saponin dilakukan dengan meletakkan 20
ml air ke ekstrak sebanyak 2 ml kemudian
dikocok menggunakan tabung selama 15
menit. Terbentuknya busa pda tabung tersebut
menunjukkan adanya kandungan saponin.15
4. Uji alkaloid dilakukan dengan meletakkan
beberapa tetes Dragendroff’s reagent
(solution of Potassium Bismuth Iodide) ke
ekstrak, adanya perubahan warna menjadi
merah menunjukkan adanya alkaloid dan
Wagner’s reagent (Iodine in Potassium
Iodide), adanya perubahan warna menjadi
coklat kemerahan menunjukkan adanya
alkaloid.15
5. Uji eugenol dilakukan dengan mentetesi 1
tetes minyak atsiri ekstrak kemangi ke
masing-masing dua gelas objek. Pada salah
satu gelas objek ditambahkan setetes larutan
NaOH 3 %. Kemudian dijenuhkan dengan
KBr serbuk. Tutup dengan kaca preparat.
Amati kristal Natrium Eugenolat yang
terbentuk di bawah mikroskop. Pada gelas
objek yang lain tambahkan 2 tetes larutan
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 3 1 - 3 9 | 33
FeCl3. Amati perubahan warna yang terjadi.
Eugenol menunjukkan cairan bening sampai
kuning muda.16
6. Uji minyak atsiri dilakukan dengan
mengambil larutan uji sebanyak 1 ml di pipet
lalu diuapkan di atas cawan porselin hingga
diperoleh residu. Hasil positif minyak atsiri
ditandai dengan bau khas yang dihasilkan oleh
residu tersebut. (cit. Ciulei, 1984).17
Pembuatan Media Sabouraud Dextrose Agar
(SDA)
Bubuk SDA dilarutkan dan dipanaskan
dalam 1000 ml akuades pada labu erlenmeyer.
Lalu bungkus dengan aluminium foil dan
disterilkan pada autoklaf dengan suhu 121ºC
selama 15 menit.18
Pembuatan Konsentrasi Ekstrak Daun
Ocimum sanctum L.
Ekstrak kental daun Ocimum sanctum L.
(konsentrasi 100%) yang diencerkan dengan
menggunakan etanol 96%, kemudian
dihomogenkan dengan menggunakan vortex
hingga diperoleh konsentrasi 25%, 50%, dan
75%, adapun rumus pengenceran yang digunakan
adalah:
C1.V1 = C2.V2
Keterangan:
C1 : konsentrasi awal V1: volume awal
C2 : konsentrasi akhir V2 : volume akhir
Kultur Candida albicans
Kultur C. albicans dilakukan pada
media SDA untuk dikultur. Setelah itu diinkubasi
dengan suhu 37 ºC selama 48 jam.19 Kultur
dilakukan dengan teknik goresan T (streak T)
dengan cara membagi petri disk menjadi 3 bagian
menggunakan spidol. Pertama-tama pijari jarum
ose menggunakan lampu spiritus dan ditunggu
dingin, lalu mengambil 1 ose biakan murni untuk
diinokulasi pada daerah 1 dengan goresan zig-zag
dan goresan dibuat sepadat mungkin. Lalu
dilanjutkan pada daerah 2 dengan goresan zig-
zag (tegak lurus pada goresan pertama) dengan
goresan yang lebih renggang dari daerah goresan
1dan sebanyak 2-3 goresan pertama harus
dikenakan pada daerah goresan 1. Selanjutnya
pada daerah 3 lakukan hal serupa yaitu goresan
zig-zag tegak lurus terhadap daerah 2 dengan
goresan yang lebih renggang dari daerah goresan
2. Cawan petri yang sudah digores biakan C.
albicans ditutup rapat kemudian diinkubasi di
dalam inkubator selama 48 jam (2 hari) pada
suhu 37ºC.20
Pewarnaan Gram
Untuk memastikan bahwa
mikroorganisme yang tumbuh adalah benar C.
albicans, maka perlu dilakukan konfirmasi awal
dengan melakukan pewarnaan Gram.
Pewarnaan Gram diawali dengan mengambil 1
jarum ose koloni C. albicans yang telah dikultur
dan diolesi pada kaca preparat, lalu dikeringkan
dan difiksasi diatas api spiritus. Preparat tersebut
ditetesi larutan kristal violet sebagai pewarna
utama, setelah dibiarkan selama 1 menit preparat
dicuci dengan air mengalir. Setelah itu, larutan
lugol ditetesi pada preparat, setelah dibiarkan
selama 1 menit preparat dicuci dengan air
mengalir, kemudian ditetesi dengan etanol 96%
sedikit demi sedikit sehingga etanol yang jatuh
berwarna bening, lalu preparat dicuci kembali
dengan air mengalir.setelah dicuci, preparat
diberi tetesan larutan safranin dan dibiarkan
selama 1 menit, kemudian dicuci dengan air
mengalir. Preparat kemudian dikeringkan
menggunakan kertas tisu dengan cara
menempelkan kertas tisu di samping ulasan.
Setelah kering preparat selanjutnya diamati di
bawah mikroskop dengan pembesaran 1000x
untuk konfirmasi warna C. albicans.20,21
Uji Fermentasi
Kemudian dilanjutkan uji fermentasi
terhadap bahan pembenihan karbohidrat
(glukosa, maltosa, sukrosa, laktosa) dan ditambah
Brom-cresol purple sebagai indikator.
Terbentuknya asam pada reaksi fermentasi
ditandai dengan adanya perubahan warna kuning
pada indikator. Terbentuknya gas diketahui
dengan menggunakan tabung durham yang
diletakkan terbalik dalam tabung reaksi, ruang
kosong dalam tabung durham menunjukkan
adanya gas.20 C. albicans menunjukkan adanya
fermentasi asam dan gas pada glukosa dan
maltosa, terbentuknya asam pada sukrosa dan
pada laktosa tidak ada reaksi fermentasi.22
Pembuatan Suspensi Candida albicans
Pembuatan suspensi dilakukan dengan
mengambil C. albicans dengan menggunakan
jarum ose, kemudian dimasukkan ke dalam
tabung reaksi yang sudah berisi NaCl 0,9%,
kemudian dihomogenkan. Suspensi C. albicans
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 3 1 - 3 9 | 34
disesuaikan dengan alat spektrofotometer yang
kekeruhannya setara dengan Mc. farland 0,5 (1,5
x 106 CFU/ml) dengan panjang gelombang 530
nm.23
Pengeceran Bertingkat Candida albicans
Pengenceran dilakukan dengan cara
mengambil 1 ml suspensi C. albicans yang telah
dilakukan pengukuran dengan spektrofotometer
menggunakan pipet eppendorf, lalu dicampurkan
dengan larutan 9 ml NaCl sehingga diperoleh
larutan dengan tingkat pengenceran 10-1. Larutan
pada tingkat pengenceran 10-1 diambil sebanyak
1 ml dan dihomogenkan dengan 9 ml NaCl,
sehingga diperoleh larutan dengan tingkat
pengenceran 10-2, begitu seterusnya sampai
tingkat pengenceran 10-6. Masing-masing
suspensi sebanyak 0,1 ml disebarkan dan
diratakan pada cawan petri berisi media SDA
dengan menggunakan batang sebar.24 Setiap
suspensi diinkubasikan pada suhu 37ºC selama
24 jam dan diamati jumlah koloninya. Jumlah
koloni C. albicans yang dipilih memiliki jumlah
koloni antara 30-300 koloni.20
Uji Aktivitas Antifungal Ekstrak Daun
Ocimum sanctum L. Menggunakan
Metode Dilusi dengan Standart Plate Count
(SPC)
Pengaruh, KHM, dan KBM pada
penelitian ini didapatkan dengan enam kelompok
perlakuan yang terdiri dari satu kelompok kontrol
positif (nistatin suspensi oral 100.000 IU/ ml),
satu kelompok kontrol negatif (akuades) dan
empat kelompok perlakuan. Suspensi C.albicans
yang digunakan untuk uji aktivitas antifungal
adalah berdasarkan SPC yaitu berjumlah 30-300
koloni.20
Kelompok perlakuan 1 terdiri dari 1 ml
ekstrak daun Ocimum sanctum L. dengan
konsentrasi 25 % ditambahkan dengan 0,1 ml
suspensi C. albicans. Kelompok perlakuan 2
terdiri dari 1 ml ekstrak daun Ocimum sanctum L.
dengan konsentrasi 50 % ditambahkan dengan
0,1 ml suspensi C. albicans. Kelompok perlakuan
3 terdiri dari 1 ml ekstrak daun Ocimum sanctum
L. dengan konsentrasi 75 % ditambahkan dengan
0,1 ml suspensi C. albicans. Kelompok perlakuan
4 terdiri dari 1 ml ekstrak daun Ocimum sanctum
L. dengan konsentrasi 100 % ditambahkan
dengan 0,1 ml suspensi C. albicans. Kelompok
kontrol positif (K+) terdiri dari 1 ml nistatin
ditambahkan dengan 0,1 ml suspensi C. albicans.
Kelompok kontrol negatif (K-) terdiri dari 1 ml
akuades ditambahkan dengan 0,1 ml suspensi C.
albicans.
Kemudian masing-masing tabung
diambil 0,1 ml suspensi dengan menggunakan
pipet Eppendorf dan ditanam dengam metode
spread plate pada media SDA, kemudian
diinkubasi pada suhu 37°C selama 48 jam, koloni
yang terbentuk pertumbuhannya dihitung dengan
colony counter. Konsentrasi Hambat Minimum
(KHM) dari ekstrak daun Ocimum sanctum L.
adalah yang menunjukkan jumlah koloni C.
albicans paling sedikit pada SDA dan
Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) adalah
pada SDA yang sama sekali tidak terdapat
pertumbuhan C. albicans.21
Analisis Data
Penelitian ini selanjutnya dianalisa
dengan menggunakan uji menggunakan uji
Kruskal-Walls kemudian dilanjutkan post hoc uji
Mann-Whitney untuk melihat KHM dan KBM
dengan bantuan perangkat SPSS (Statistical
Package for The Social Sciences).
HASIL PENELITIAN
Bahan uji yang digunakan dalam
penelitian ini adalah daun Ocimum sanctum L.
yang diekstraksi dengan metode maserasi
menggunakan larutan 80 ml n-Hexana dan 40 ml
dichlorometana. Hasil ekstraksi yang didapat
sebanyak 27 gr ekstrak kental daun Ocimum
sanctum L. (konsentrasi 100%)
Hasil uji fitokimia menunjukkan bahwa
ekstrak daun Ocimum sanctum L. mengandung
senyawa tanin, fenol, minyak esensial, eugenol,
steroid, dan terpenoid. (Tabel 1)
Hasil kultur C. albicans pada media SDA
setelah diinkubasi dengan suhu 37º C selama 48
jam menunjukkan koloni berwarna krem
keputihan. Hasil pewarnaan Gram diperoleh
koloni berbentuk budding (tunas) berwarna ungu
yang diamati dengan menggunakan mikroskop
cahaya pada pembesaran 1000x.
Hasil uji fermentasi karbohidrat (glukosa,
maltosa, sukrosa, laktosa) yang sudah
ditambahkan Brom-cresol purple ditemukan
bahwa glukosa dan maltosa menunjukkan
perubahan warna menjadi kuning yaitu
terbentuknya asam dan gas, pada sukrosa hanya
menunjukkan adanya asam sedangkan pada
laktosa tidak menghasilkan asam maupun gas.
Hal ini menunjukkan bahwa spesies tersebut
adalah C.albicans.
Suspensi C. albicans yang telah disesuaikan
dengan alat spektrofotometer pada panjang
gelombang 530 nm (1,5 x 106 CFU/ml) yang
kekeruhannya setara dengan Mc. Farland 0,5.
Pengenceran bertingkat Candida albicans
dilakukan sebanyak 6 kali, pada pengenceran 10-
3 ditemukan jumlah koloni sebanyak 120
koloni/cawan sehingga dipilih untuk pengujian
sampel karena memenuhi kriteria jumlah koloni
yaitu 30-300 koloni/cawan.
Pengujian KHM dan KBM ekstrak daun
Ocimum sanctum L. terhadap pertumbuhan C.
albicans dilakukan pada media SDA dengan
pengulangan sebanyak 3 kali. Pada konsentrasi
25% tidak ada koloni yang tumbuh sama seperti
yang dihasilkan oleh kontrol positif (nistatin
suspensi oral 100.000 IU/ml), sementara jumlah
rata-rata koloni yang tumbuh pada kelompok
kontrol negatif (akuades) yaitu sebanyak 193 x
104 CFU/ml. (Tabel 2)

Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Daun Ocimum Tabel 2. Jumlah koloni C.albicans setelah pengujian
sanctum L. dengan Ekstrak Daun Ocimum sanctum L. dengan
Kandungan Kimia Hasil Uji berbagai konsentrasi
Flavonoid - Jumlah Koloni Jumlah
Kelompok (CFU/ml) Rata-rata
Tanin +
Perlakuan P1 P2 P3 Koloni
Fenol + (CFU/ml)
Saponin - 25% 0 0 0 0
50% 0 0 0 0
Alkaloid -
75% 0 0 0 0
Minyak esensial + 100% 0 0 0 0
Eugenol + Akuades (K-) 118 238 225 193x104
Nistatin 0 0 0 0
Steroid +
suspensi oral
Terpenoid +
Keterangan: + : Ada kandungan; - : Tidak ada kandungan

J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 3 1 - 3 9 | 35
Tabel 3. Jumlah koloni C.albicans setelah pengujian Tabel 4. Hasil Uji Kruskal-Wallis
dengan Ekstrak Daun Ocimum sanctum L. dengan Nilai
pengenceran pelarut akuades. Signifikasi
Pertumbuhan Candida
Jumlah Koloni albicans pada berbagai
Kelompok (CFU/ml) 0,005
konsentrasi ekstrak dan
Perlakuan Akuades kelompok control
25% 262 x 104
50% 247 x 104 Uji Kruskal-Wallis menunjukkan nilai
Keterangan:CFU/ml Colony Forming Unit/ml p=0,005 yang artinya p<0,05. Hal ini
menunjukkan ekstrak daun Ocimum sanctum L.
Uji statistik penelitian ini menggunakan berpengaruh terhadap pertumbuhan C. albicans
one way ANOVA dengan syarat terdiri atas lebih (Tabel 5.5).
dari dua kelompok, distribusi data normal, dan Hasil analisis dengan uji Mann-Whitney
varian data sama (homogen). Penelitian ini menunjukkan bahwa semua konsentrasi tidak
memiliki 6 kelompok dengan 4 kelompok berbeda bermakna dengna kontrol positif.
perlakuan dan 2 kelompok kontrol. Uji Pada penelitian ini terdapat kesalahan
normalitas menggunakan Shapiro-Wilk pada prosedur pengenceran. Larutan pengencer
menghasilkan sebaran data normal pada p>0,05. seharusnya menggunakan akuades, tapi karena
Hasil uji menunjukkan bahwa data tidak tidak menyatu dengan ekstraknya (tidak larut),
homegen, maka dilakukan uji alternatif maka diganti dengan etanol dan didapatkan hasil
menggunakan uji Kruskal-Wallis dengan post hoc seperti table 2 Sehingga dilakukan pengulangan
uji Mann-Whitney. menggunakan sisa ekstrak, dibuat konsentrasi
50% dan 25% dengan pengenceran air.

Tabel 4. Hasil Uji Mann-Whitney ekstrak Daun Ocimum sanctum L. Terhadap Pertumbuhan C. albicans
Nistatin
suspensi oral
Kel Perlakuan Akuades (K-) 25% 50% 75% 100%
100.000 IU/ml
(K+)

Akuades - 0,037* 0,037* 0,037* 0,037* 0,037*

25% 1,000 - 1,000 1,000 1,000 1,000

50% 1,000 1,000 - 1,000 1,000 1,000

75% 1,000 1,000 1,000 - 1,000 1,000

100% 1,000 1,000 1,000 1,000 - 1,000

Nistatin suspensi
oral 100.000 0,037* 1,000 1,000 1,000 1,000 -
IU/ml (K+)

Keterangan: * = p<0,05, terdapat perbedaan bermakna

merupakan metode yang paling sederhana,

PEMBAHASAN murah, dan mudah. Prosesnya dengan
diekstrak dengan metode maserasi menempatkan bahan tanaman atau bubuk kasar
menggunakan larutan 80 ml n-Hexana dan 40 ml dalam wadah tertutup dan menambahkan pelarut
dichlorometana.25 Metode maserasi untuk pencair. Proses ini didiamkan selama
dipergunakan dalam penelitian ini karena tujuh hari, dengan sesekali diaduk.26

J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 3 1 - 3 9 | 36
 Hasil uji fitokimia ekstrak Daun Ocimum
sanctum L. pada penelitian ini menunjukkan
adanya kandungan senyawa tanin, fenol, steroid,
terpenoid, minyak esensial, dan eugenol. Hasil
ini sesuai dengan penelitian Sutrisna dkk (2009)
bahwa hasil skrining fitokimia daun kemangi
mengandung tanin, steroid, terpenoid, minyak
esensial, dan eugenol.27
Hasil kultur pada penelitian ini
menunjukkan koloni C. albicans yang tumbuh
berwarna krem keputihan, agak mengkilat dan
halus. Hal ini sesuai pernyataan Kusumaningtyas
(2014) bahwa koloni C. albicans berwarna krem,
agak mengkilat dan halus (cit. Lodder, 1970).28
Kultur C. albicans dilakukan pada media SDA
yang merupakan media selektif untuk
pertumbuhan fungal karena konsentrasi dekstrosa
yang tinggi dan pH yang bersifat asam.
Penambahan antibiotik juga dilakukan pada
media SDA untuk mencegah pertumbuhan
bakteri agar media lebih selektif sehingga sangat
baik digunakan untuk isolasi jamur.29
Penambahan glukosa pada media SDA sangat
baik sebagai media pertumbuhan jamur.30 Pada
penelitian teknik isolasi atau penanaman C.
albicans dilakukan dengan cara Streak Plate
Method (cara gores). Kesalahan yang muncul
pada penelitian ini karena hasil kultur C.
albicans bertumpuk pada satu daerah. Hal ini
disebabkan oleh penggoresan yang tidak
sempurna, sehingga menghasilkan koloni yang
tidak terpisah. Untuk mencegah hal itu harus
digunakan lempengan media agar yang benar-
benar kering permukaannya (cit. Lay, 1994).31
Pada penelitian ini uji konfirmasi C.
albicans dilakukan dengan perwarnaan Gram dan
uji fermentasi karbohidrat. Hasil perwarnaan
Gram menunjukkan koloni berwarna ungu dan
berbentuk budding (tunas). Hasil penelitian ini
sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh
Haw dkk (2013) bahwa C.albicans berwarna
ungu dan berbentuk budding (tunas).32
Pewarnaan Gram pada C. albicans dilakukan
karena C. albicans memiliki struktur dinding
yang mirip dengan bakteri Gram-positif yaitu
memiliki peptidoglikan yang mampu menahan
zat warna krital violet.33
Pada penelitian ini uji fermentasi
menunjukkan glukosa dan maltosa menunjukkan
perubahan warna menjadi kuning yaitu
terbentuknya asam dan gas, pada sukrosa hanya
menunjukkan adanya asam sedangkan pada
laktosa tidak menghasilkan asam maupun gas.
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 3 1 - 3 9 | 37
Hasil ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan
oleh Prahatamaputra (2009) bahwa hasil
fermentasi C. albicans ditunjukkan dengan
terbentunya asam dan gas pada glukosa, maltosa
dan terbentuknya asam pada sukrosa dan tidak
memfermentasi laktosa.34
Berdasarkan Tabel 2 menunjukkan bahwa
ekstrak daun Ocimum sanctum L. memiliki
pengaruh terhadap pertumbuhan C. albicans. Hal
ini disebabkan kandungan zat-zat aktif yang
terkandung dalam ekstrak daun Ocimum sanctum
L. berperan sebagai antifungal. Ekstrak daun
Ocimum sanctum L. memiliki efektifitas minyak
esensial dan komponen-komponennya terhadap
obat anti jamur yang merupakan hal penting
dalam melawan biofilm C. albicans yang telah
resistensi dengan cara menghambat C. albicans
melalui membran ergosterol dan mengganggu
jalur sinyal morfogenesis yeast menjadi hifa.11
Tetapi pada penelitian ini menggunakan
pengenceran ekstrak dengan etanol sehingga
tidak ada pertumbuhan koloni Candida albicans.
Etanol memiliki sifat tidak berwarna,
mudah menguap dan dapat bercampur dengna
air.35 Pengenceran menggunakan pelarut akudes
tidak dapat melarutkan ekstrak daun Ocimum
sanctum L. Tetapi karena hasil menunjukkan
tidak ada pertumbuhan koloni sama sekali dari
konsentrasi terendah (25%). Maka dilakukan
pengulangan penelitian dengan menggunakan
pengenceran ekstrak dengan akuades sehingga
ditemukan konsentrasi daya hambat sebesar
25%. Hal ini sesuai dengan penelitian Khoirani
(2013) bahwa pengujian ekstrak daun kemangi
dalam pelarut etanol dan air didapatkan bahwa
ekstrak lebih terlarut di dalam etanol yaitu 69% ±
0,70%, sedangkan air sebesar 11,30% ± 2,92%.
Hal ini menunjukan bahwa kandungan
senyawa aktif yang terdapat di dalam ekstrak
kemangi lebih banyak bersifat semi polar dan
non polar.36
KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah
dilakukan dapat disimpulkan bahwa:
1. Ekstrak daun Ocimum sanctum L.
berpengaruh terhadap pertumbuhan C.
albicans.
2. Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM)
ekstrak daun Ocimum sanctum L. terhadap
pertumbuhan C. albicans dengan
pengenceran menggunakan pelarut 25%.
3. Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)
ekstrak daun Ocimum sanctum L. terhadap
pertumbuhan C. albicans dengan
pengenceran menggunakan pelarut akuades
25%.
SARAN
1. Diharapkan dapat dilakukan penelitian efek
ekstrak daun Ocimum sanctum L. terhadap
C. albicans menggunakan metode ekstraksi
lain seperti sokletasi dan perkolasi
2. Diharapkan dapat dilakukan penelitian lebih
lanjut mengenai KHM dan KBM ekstrak
daun Ocimum sanctum L. terhadap
pertumbuhan C. albicans dengan
konsentrasi yang lebih rendah.
DAFTAR PUSTAKA
1. Sardi JCO, Scorzoni L, Bernardi T, et al.
Candida species: current epidemiology,
pathogenicity, biofilm formation, natural
antifungal products and new therapeutic
options. J Med Microbiol 2013; 62: 10–24.
2. Mayer FL, Wilson D, Hube B. Candida
albicans pathogenicity mechanisms.
Virulence 2013; 4: 119–28.
3. Pfaller M, Diekema D. Epidemiology of
invasive mycoses in North America. Crit
Rev Microbiol 2010; 36: 1–53.
4. Caggiano G, Coretti C, Bartolomeo N, et al.
Candida Bloodstream Infections in Italy:
Changing Epidemiology during 16 Years of
Surveillance. Biomed Res Int 2015; 10: 1–
10.
5. Mobeen N. Oral Candidiasis-A Short
Review. Int J Cur Res Rev 2014; 6: 89–92.
6. Javed F, Samaranayakeb LP, Romanos GE.
Treatment of oral fungal infections using
antimicrobial photodynamic therapy: a
systematic review of currently available
evidence. Photochem Photobiol Sci 2014;
13: 726–34.
7. Ghom AG, Ghom SA. Treatment of Oral
Candidiasis. In: Textbook of Oral Medicice.
India: Jaypee Brothers Medical Publishers
PVT. Ltd., 2014, p. 159.
8. Setiabudy R, Bahry B. Obat Jamur. In:
Fakmakologi dan Terapi. Jakarta: Fakultas
Kedokteran Universitas Indonesia, 2005, pp.
571–81.
9. Khan A, Ahmad A, Khan LA, et al.
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 3 1 - 3 9 | 38
Ocimum sanctum (L.) essential oil and its
lead molecules induce apoptosis in Candida
albicans. Res Microbiol 2014; 20: 1–9.
10. World Health Organization. Bulletin of The
World Health Organization. In: Herbal
Medicine Research and Global Health: An
Ethical Analysis. 2008, pp. 577–656.
11. Raut JS, Karuppayil SM. A status review on
the medicinal properties of essential oils.
Ind Crops Prod 2014; 62: 250–64.
12. Restiyani D, Yuniarni U, Hazar S. Uji
aktivitas anti inflamasi dari ekstrak etanol
herba kemangi terhadap tikus jantan wistar.
In: Prosiding Penelitian SPeSIA.
Universitas Islam Bandung, 2015, pp. 1–7.
13. Balakumar S, Rajan S, Thirunalasundari T,
et al. Antifungal activity of Ocimum
sanctum Linn. (Lamiaceae) on clinically
isolated dermatophytic fungi. Asian Pac J
Trop Med 2011; 654–7.
14. Mustika AD. Uji Aktivitas Antibakteri
Fraksi Etanol Daun Kemangi Terhadap
Pertumbuhan Salmonella typhi Secara In
Vitro. Universitas Tanjungpura, 2014.
15. Ntezurubanza L, Scheffer J, Looman A.
Composition of the essential oil of Ocimum
canum grown in Rwanda. Pharm Weekbl Sci
1985; 7: 273–7.
16. Raaman N. Phytochemical Technique. New
Delhi: New India Publishing Agency, 2006,
pp. 9–24.
17. National Library of Medicine. Eugenol.
National Institues of Health.
18. Astarina N, Astuti K, Warditiani N. Skrining
Fitokimia Ekstrak Metanol Rimpang Bangle
(Zingiber purpureum Roxb.). Universitas
Udayana, 2013.
19. Maharani S, Santoso O. Pengaruh
pemberian larutan ekstrak Siwak (Salvadora
persica) pada berbagai konsentrasi terhadap
pertumbuhan Candida albicans. In: Jurnal
PDGI. 2012, pp. 61–4.
20. Kurtzman C, Fell J, Boekhout T. The Yeast:
A Taxonomic Study. San Diego: Elsevier,
2011, p. 100.
21. Bibiana W. Analisa Mikroba di
Laboratorium. PT. Raja Grafindo Persada,
1994, p. 20,38,51.
22. Brooks G, Butel J, Morse S. Medical
Mycology. In: Jawetz, Melnick &
Adelberg’s Medical Microbiology. United
States of America: McGraw Hill, 2010, p.
694.
23. Parija S. Textbook of Microbiology & Candida albicans Berbasis Fermentasi
Immunology. India: Elsevier, 2009. Karbohidrat Pada Air Bak WC Sekolah
24. Chess B. Laboratory Applications Menengah di Kelurahan Alalak Utara. J
microbiology. New York: McGraw-Hill, Wahana-Bio 2009; 2: 1–13.
2012. 35. Anonymous. Ethanol Science &
25. Singh S, Tewari G, Pande C, et al. Variation Technology. In: Etanol-Blended Fuels.
in essential oil composition of Ocimum United States: Nebraska Ethanol Board, p.
americanum L. from north-western 12.
Himalayan region. J Essent Oil Res 2013; 36. Khoirani N. Karakterisasi Simplisia dan
25: 278–90. Standardisasi Ekstrak Etanol Herba
26. Singh J. Maceration, Percolation and Kemangi (Ocimum americanum L.). UIN
Infusion Techniques for the Extraction of Syarif Hidayatullah Jakarta, 2013.
Medicinal and Aromatic Plants. In:
Extraction Technologies for Medicinal and
Aromatic Plants. Italy: United Nations
Industrial Development Organization and
the International Centre for Science and
High Technology, 2008, pp. 67–82.
27. Sutrisna E, Wahyuni E. Potensi efek
antipiuretik daun kemangi (Ocimum
Sanctum.L) dan daun dewa (Gyrnura
pseudochia (L). Pharmacon 2009; 1: 9.
28. Kusumaningtyas E. Mekanisme Infeksi
Candida albicans Pada Permukaan Sel. In:
Lokakarya Nasional Penyakit Zoonosis.
Kalimantan Tengah: Badan Litbang, 2014,
pp. 305–315.
29. Conda. Sabouraund Dextrose Agar
(European Pharmacopeia). Pronadisa Micro
Mol Biol; 1–2.
30. Getas IW, Wiadnya IBR, Waguriani LA.
Pengaruh Penambahan Glukosa dan Waktu
Inkubasi Pada Media SDA (Sabaroud
Dextrose Agar) Terhadap Pertumbuhan
Jamur Candida albicans. Media Bina Ilm
2014; 8: 51–7.
31. Anonymous. Panduan Praktikum
Mikrobiologi. Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma, 2016, p. 32.
32. Haw B, Asma I, Eugene O, et al.
Phenotyping Identification of Candida
albicans for Production of in House
Helicase for Nucleic Acid-based Detections
for Fast Diagnosis. RJPBCS 2013; 4: 576–
83.
33. Haw B, Venugopal B, Eugene O, et al.
Isolation and identification of Candida
albicans to produce in house helicase for
PCR. In: Proceedings of The 2nd Annual
International Conference Syiah Kuala
University. Banda Aceh: Uninet Biosciences
Conference, 2012, pp. 1–6.
34. Prahatamaputra A. Karakteristik Jamur

J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 3 1 - 3 9 | 39