Curriculum Vitae

Nama: Dr. Lucia Herminawati, Apt.

TTL: Jakarta, 19 Agt 1979
Pekerjaan: QA Manager di PT Prodia Diagnostic Line (ProLine)

Riwayat Pendidikan:
1997 – 2001 : S1 Farmasi Universitas Surabaya
2001 – 2002 : Program Profesi Apoteker
2010 – 2012 : S2 Kimia Klinik Universitas Hassanudin Makassar
2012 – 2015 : S3 Biomedik Universitas Hassanudin Makassar
VALIDASI
METODE
REAGEN KIMIA
KLINIK

Lucia Herminawati
Purwokerto, 06 Oktober 2019
VALIDASI
Konfirmasi, melalui penyediaan bukti
objektif, bahwa persyaratan bagi
pemakaian atau persyaratan formal
dimaksud telah dipenuhi.

what?
akreditasi
Pengakuan formal kepada suatu lembaga untuk
melakukan kegiatan tertentu, yang telah memenuhi
standar yang ditetapkan.

why?
 Apa persyaratan ISO 15189?
5.5.1.3 Validasi prosedur pemeriksaan
Laboratorium harus mem-validasi prosedur pemeriksaan yang berasal dari sumber-
sumber berikut:
a) Metode non-standar;
b) Metode yang dirancang atau dikembangkan oleh laboratorium;
c) Metode standar yang digunakan di luar lingkup yang dimaksudkan;
d) Metode tervalidasi yang kemudian dimodifikasi,
Validasi harus seluas yang diperlukan dan memastikan, dengan memberikan bukti
obyektif (dalam bentuk spesifikasi kinerja), bahwa persyaratan tertentu untuk
penggunaan yang diinginkan dari pemeriksaan telah terpenuhi.
Non standard method Existing method
Laboratory design by developed
with defined performance
method
Modified validated methode
Existing methode used after repair

VALIDATION VERIFICATION
Before use as diagnostic Before use as diagnostic
test method test method

Compare performance
Define performance
characteristics with
characteristic
specification
REAGEN KIMIA KLINIK?
 Manufaktur sudah melakukan validasi metode, kemudian
mengapa laboratorium harus melakukan uji performa lagi ?

Beberapa faktor yang dapat mempengaruhi performa:

- Efek pengiriman dan penyimpanan
- Perbedaan lot kalibrator dan reagen
- Perubahan pada persediaan & distributor komponen instrumen
- Kondisi kontrol terhadap iklim lokal
- Kualitas air
- Stabilitas arus listrik
- Ketrampilan operator

Verifikasi diperlukan untuk membuktikan bahwa metode yang digunakan

bekerja dengan baik sesuai kondisi di Laboratorium  memberikan hasil
tes yang terpercaya bagi pasien.
 A practical validation approach
Performance CLIA CAP

Accuracy
+ +
Method comparison
Precision
+ +
Replication experiment
Reportable range
+ +
Linearity experiment
Reference range - Established + +
Analytical sensitivity
Not required Not required
Limit of detection study
Analytical specifity
Not required Not required
Interference study
Recovery to determine proportional systematic error Not required Not required
precision
standard
 presisi
– Hitung Mean, SD, dan CV untuk setiap tes  CV yang
diperoleh secara statistik dibandingkan dengan klaim
manufaktur menggunakan signifikansi tes ANOVA
(umumnya pada tingkat kepercayaan 95%)

– Diterima jika CV within run < 1/4 TEa

CV intermediate < 1/3 TEa
  
Assume TEa = 10%, CV within run < 2.5%, CV Between Day < 3%
 METHOD
COMPARISON
standard
 Westgard JO, Basic Method Validation, 3rd, 2008.

Studi minimal yang direkomendasikan

 Dilakukan terhadap 40 sampel pasien

(bisa menggunakan 20 sampel jika memiliki rentang analitik
yang lebar)
 Pengujian pada ≥ 5 hari yang berbeda;
 Plot data pada grafik perbandingan;
 Gunakan statistik regresi atau t-test
Studi minimal yang direkomendasikan
Periksa nilai r (koefisien korelasi):

r < 0.975  analisis regresi linier mungkin tidak

valid;
Mungkin indikasi rentang data terlalu terbatas
(r dipengaruhi rentang nilai).

r hanya dipengaruhi oleh RE, tidak oleh SE.

r = istilah statistik = derajat hubungan linier
antar metoda.

y = ax + b
a = slope (indikasi proportional error)
b = intercept (indikasi constant error)
Studi minimal yang direkomendasikan
– Jika r > 0.975
Hitung SE pada kadar yang penting untuk membuat keputusan
klinis (medical decision level)

– y = ax + b
Contoh: y = 0.985 x - 4.69.
Pada decision level x = 200 mg/dL  y = 192.31 mg/dL  SE =
7.69 mg/dL atau 3.85 %.
SE = standard error
Studi minimal yang direkomendasikan
Perbandingan Metode
Nama Produk : Glucose Hexokinase FS
Material sampel : serum pasien, serum kontrol
Instrument : respons 910
X: Hitachi 911 Glucose Hexokinase FS Unit: mg/dL

Y: respons 910 Glucose Hexokinase FS Unit: mg/dL

y = 1.05 x + 0.680
r = 0.9992

Pada decision level x = 120 mg/dL  y = 126.68

mg/dL  SE = 6.68 mg/dL atau 5.57 %.
linearity
CLSI Guidelines
 Linearity = Reportable Range / HOW
Analytical Measurement Range (AMR)

Reportable range = the span of test result

values over which the laboratory can
establish or verify the accuracy of the
system.

AMR = range of analyte where results are

proportional to the TRUE concentration of
analyte in the sample.

Westgard JO, Basic Method Validation, 3rd, 2008.

 Linearity = Analytical Measurement Range (AMR)

Example:
Rentang pengukuran : 0 – 500 mg/dL Asumsi TEa yang ditetapkan untuk
Buat sampel dengan dilusi dari 500 hingga 0 Cholesterol = 10% dan CV 3%

Assigned Sampel 500 mg

Measured value
value TEa = 50 mg/dL;
Rep. 1 Rep. 2 Rep.3 Mean SD = 15 mg/dL  RE =  30 mg/dL (2SD)
0 0 5 10 5 Nilai terukur = 470 mg/dL
 SE = -30 mg/dL
100 95 100 105 100
200 200 195 205 200
TE = 60 mg/dL > TEa (50 mg/dL) 
300 310 300 290 300
Sampel 400 mg
400 380 390 400 390 TEa = 40 mg/dL;
500 470 460 480 470 SD = 12 mg/dL  RE =  24 mg/dL (2SD)
Nilai terukur = 390 mg/dL
Rentang dapat dilaporkan hingga 300 mg/dL   SE = -10 mg/dL
hasil valid. TE = 34 mg/dL < TEa (40 mg/dL) 
Bagaimana untuk hasil 400 mg/dL dan 500 mg/dL?
TE = SE + RE
 Characteristic of RE and SE
Random Error (RE) Systematic Error (SE)

Affect Precision Affect Accuracy

May be caused by (e.g.): Types of SE:

o Variability in volume of sample or reagent o Proportional- indicated by Slope
delivered; o Constant – indicated by Intercept
o Changes in environment; o Combination
o Inconsistent handling of materials.

Estimated by: Caused by (e.g.):

− Standard Deviation (SD) Bad calibrators, bad reagents,
− Coefficient of variation (CV) interference
− Correlation coefficient (r)

Yusmiati, HKKI, 2016

 Terima Kasih

Do the Right Thing, From the First

Time and Every Time!