Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Jafari dkk. Jurnal Ilmu Farmasi DARU2013, 21:37 http://

www.darujps.com/content/21/1/37

ARTIKEL PENELITIAN Akses terbuka

Evaluasi sitotoksik Melia azedarach

dibandingkan dengan, Azadirachta indica
dan penyelidikan fitokimianya
Samineh Jafari1,2, Soodabeh Saeidnia3, Homa Hajimehdipoor4, Mohammad Reza Syams Ardekani1,5,
Mohammad Ali Faramarzi6, Abbas Hadjiakhoondi1,3 dan Mahnaz Khanavi1,5*

Abstrak
Latar belakang: Melia azedarach L. merupakan tanaman obat penting yang digunakan untuk berbagai penyakit dalam pengobatan
tradisional Iran. Azadirachta indica A. Juss adalah spesies sekutunya dan memiliki sifat dan efek yang serupa. Penelitian ini
dilakukan untuk menyelidiki aktivitas antikanker dariM. azedarach dibandingkan dengan A. indikasipada garis sel kanker dan juga
untuk mengevaluasi keamanannya pada manusia dengan mengujinya pada garis sel normal. Penelitian ini juga bertujuan untuk
menentukan komponen aktif yang bertanggung jawab untuk efek obat dariM. azedarach dalam penggunaan tradisional.

Metode: Dalam penelitian ini, aktivitas sitotoksik ekstrak kasar dari M. azedarach dan A. indikasi daun, pulp dan
biji serta tiga fraksi utama dari ekstrak daunnya diuji terhadap garis sel HT-29, A-549, MCF-7 dan HepG-2 dan
MDBK. Uji MTT digunakan untuk mengevaluasi aktivitas sitotoksiknya. Fraksi daun metanol dariM. azedarach
sebagai fraksi daun teraman dalam hal sitotoksisitas menjadi sasaran studi fitokimia.
Hasil: Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak biji biji M. azedarach memiliki aktivitas sitotoksik dan selektivitas
tertinggi terhadap garis sel kanker (IC50 kisaran 8,18- 60,10 g mL-1). Berbeda dengan ekstrak biji mentah dariA. indika, pulp
mentah dan ekstrak daun kasar tanaman ini menunjukkan aktivitas anti-proliferatif (IC .) yang sangat kuat50 kisaran 83,45 -
212,16 g mL-1 dan 34,11- 95,51 g mL-1 masing-masing) dibandingkan dengan M. azedarach (semua IC50
nilai kedua tanaman > 650 g mL-1). Analisis fitokimia mengarah pada isolasi empat flavonol 3-HAI-glikosida termasuk rutin,
kaempferol-3-HAI-robinobioside, kaempferol-3-HAI-rutinoside dan isoquercetin bersama dengan nukleosida purin,
-adenosin.
Kesimpulan: Potensi anti-proliferatif ekstrak dari bagian yang berbeda dari M. azedarach dan A. indikasi ditentukan.
Sebagai perbandingan, fraksi daun metanol dariM. azedarach tampaknya lebih aman dalam hal sitotoksisitas. Studi kami
menunjukkan bahwa flavonol berlimpah di daunM. azedarach dan senyawa ini tampaknya bertanggung jawab atas
banyak efek obat yang dieksploitasi dalam penggunaan tradisional.

Kata kunci: Aktivitas anti-proliferatif, azadirachta indica, Flavonoid, Melia azedarach, MTT, Mimba, Obat Tradisional

* Korespondensi: khanavim@tums.ac.ir
1Departemen Farmakognosi, Fakultas Farmasi, Universitas Ilmu Kedokteran
Universitas Teheran, Teheran, Iran
5Departemen Farmasi Tradisional, Fakultas Pengobatan Tradisional Persia dan

Pusat Penelitian Farmasi dan Pengobatan Tradisional Persia, Universitas Ilmu

Kedokteran Universitas Teheran, Teheran, Iran
Daftar lengkap informasi penulis tersedia di akhir artikel

© 2013 Jafari dkk.; pemegang lisensi BioMed Central Ltd. Ini adalah artikel Akses Terbuka yang didistribusikan di bawah persyaratan Lisensi
Atribusi Creative Commons (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0), yang mengizinkan penggunaan, distribusi, dan reproduksi tanpa
batas dalam media apa pun, asalkan karya asli dikutip dengan benar.
Jafari dkk. Jurnal Ilmu Farmasi DARU2013, 21:37 http://
www.darujps.com/content/21/1/37
Latar belakang
Melia azedarach L. (Meliaceae), umumnya dikenal sebagai
lilac Persia atau chinaberry, telah lama dikenal di Iran
sebagai tanaman obat dengan berbagai efek obat dan
disebutkan dalam literatur medis kuno sebagai“Azad
derakht” [1,2]. Tabel 1 menyajikan ulasan tentang literatur
kuno Iran tentang berbagai penggunaan tradisional dari
bagian yang berbedaM. azedarach. Lilac Persia tersebar
luas di hutan utara Iran dan juga ditemukan memiliki
aktivitas antifeedant, anti-serangga, dan sitotoksik yang
luar biasa. Sebagian besar penelitian sebelumnya
melaporkan limonoid sebagai senyawa yang bertanggung
jawab untuk aktivitas yang disebutkan di atasM. azedarach
[3,4], Azadiracta indica A. Juss (Mimba), spesies lain dari
Meliaceae, adalah kerabat dekat dari M. azedarach. Mimba
aslinya berasal dari India Selatan dan Myanmar. Namun,
itu tumbuh subur di pantai selatan Iran dan dikenal
sebagai "sayang” ada [3,5]. Mimba dan lilac Persia sangat
mirip dalam morfologi, konstituen dan sifat [6,7] sehingga
mereka keliru dicampur satu sama lain berkali-kali [1,4].
Mimba juga dikenal di seluruh dunia sebagai insektisida
alami komersial, pestisida dan agrokimia [5] dan
berlimpah dalam limonoid sitotoksik [4].
Dalam pengobatan tradisional Iran, hanya tanaman utuh atau
campurannya yang digunakan dan ada kepercayaan bahwa
senyawa murni bahkan yang berasal dari tumbuhan tidak memiliki
sifat alami seperti tanaman utuh [8]. Oleh karena itu, evaluasi
sitotoksik dari ekstrak kasar dapat memberi kita wawasan yang
lebih baik tentang efek sitotoksik dari seluruh tanaman. Dalam
semua sastra tradisional yang dipelajari kecuali satu [9], buah-
buahanM. azedarachtelah disebutkan sebagai bagian tanaman
yang beracun dan mematikan [2,10-12]. Telah dinyatakan bahwa
mereka berbahaya bagi otot perut dan dada [10,11]. Studi terbaru
juga mendukung toksisitas buah [13]. Tetranortriterpena
Tabel 1 Penggunaan tradisional dari M. azedarach
Bagian tanaman Penggunaan tradisional
Bunga Obat untuk gangguan otak [2,10-12]
Normalizer temperamen pada orang tua dan orang-orang
yang menderita distemperamen dingin; sakit kepala dan
pereda nyeri kepala lainnya (melalui inhalasi yang dikirim) [2];
Daun Penangkal segala jenis racun [2-11]; Obat untuk
obstruksi usus kronis [9-12]; Luka bernanah [2,
10];
Obat cacing; obat untuk batu ginjal; pengobatan
kusta dan vitiligo [2];
pereda nyeri punggung bawah; diuretik; emmenagogue [2,12];
Penginduksi pertumbuhan rambut [2,9-12]; Pembunuh kutu [2,10-12];
Buah Pengobatan kusta dan vitiligo; obat untuk tinea dan luka di kepala;
penginduksi pertumbuhan rambut [2];
Pereda demam dan batuk berdahak [9].
Halaman 2 dari 7
dikenal sebagai meliatoxins telah dilaporkan sebagai
prinsip toksik buah [14]. Berbeda dengan
pembatasan konsumsi buah, daun tanaman telah
diresepkan untuk berbagai indikasi. Oleh karena itu,
untuk penyelidikan rinci daun, fraksi utamanya juga
dipelajari dan fraksi daun metanol dariM. azedarach
dipilih untuk isolasi senyawa aktif.
Dalam penelitian ini, ekstrak kasar daun, pulp dan biji M.
azedarach dan A. indikasi serta fraksi yang berbeda dari
daunnya dipelajari terhadap empat garis sel kanker (HT29,
A549, MCF7 dan HepG2) dan satu garis sel normal (MDBK).
Patut dicatat bahwa penelitian kami adalah laporan
pertama tentang aktivitas sitotoksik dariM. azedarach biji.
Metode
Prosedur percobaan umum
Spektrum UV direkam pada spektrofotometer
Optizen 2120UV plus UV/VIS. NMR dijalankan pada
spektrometer Bruker DRX-500 (1H, 500 MHz; 13C,
125MHz). HPLC semi-preparatif dilakukan dengan
sistem KNAUERHPLC (Jerman) dan kolom Eurospher
100– 7 RP C18 (250 × 20 mm; Macherey Nagel). Silika
gel (35–70, 70–230 dan 230–400 mesh, Merck) dan
Sephadex LH20 (Fluka BioChemika, 25–100 m)
digunakan untuk kromatografi kolom. Analisis KLT
dilakukan pada silika gel 60 F254 atau Silica gel 60
RP-18 F254S; Pelat Merck (10 × 10 cm).
bahan tanaman
Daun dan buah M. azedarach dan A. indikasi dikumpulkan
dari Gorgan (Provinsi Golestan) dan Bandar Abbas
(Provinsi Hormozgan). Kemudian, spesimen voucher
mereka disimpan di Herbarium Fakultas Farmasi,
Universitas Ilmu Kedokteran Universitas Teheran, Teheran,
Iran (Nomor VoucherM.azedarach:6710 THE; Nomor
Voucher dariA. indikasi: 6640 INI).
Daun dan buah yang dikumpulkan dikeringkan secara
terpisah di tempat teduh, pada suhu kamar. Buah-buahan
kering dikupas dan didekorasi dan biji bijinya dipisahkan dari
kulit dan daging buahnya. Daun, bubur buah (bersama
dengan kulitnya), dan biji biji dari setiap tanaman dihancurkan
secara terpisah menjadi bubuk halus.
Persiapan ekstrak untuk uji sitotoksik
Teknik perkolasi dengan metanol/air (80:20, v/v) pada suhu
kamar digunakan untuk ekstraksi total daun, pulp dan biji
biji dari dua spesies. Prosedur ekstraksi meliputi tiga kali
ekstraksi berturut-turut selama 48 jam, menggunakan
pelarut segar setiap kali. Pelarut diuapkan pada tekanan
tereduksi hingga kering. Kedua ekstrak daun kering
difraksinasi dengan n-heksana (untuk menghilangkan
bahan lemak dan klorofil), kloroform, etil asetat dan
metanol secara berurutan. Setelah menguap
Jafari dkk. Jurnal Ilmu Farmasi DARU2013, 21:37 http://
www.darujps.com/content/21/1/37
pelarut, fraksi benar-benar dikeringkan untuk menghilangkan
jejak pelarutnya. Untuk menyiapkan konsentrasi yang berbeda
dari setiap ekstrak (650 atau 1000 g/mL) untuk uji sitotoksik,
digunakan DMSO 10%.
Ekstraksi dan isolasi
Daun bubuk (1,20 kg) dari Melia azedarach diekstraksi tiga kali
(setiap 48 jam) dengan metanol 80% pada suhu kamar. Pelarut
diuapkan pada tekanan tereduksi untuk menghasilkan 332,4 g
ekstrak kasar. Ekstrak ini difraksinasi pada silika gel (35-70
mesh) menggunakan empat pelarut - heksana, kloroform, etil
asetat dan metanol- berturut-turut. Pelarut dalam masing-
masing ekstrak diuapkan seluruhnya di bawah tekanan
tereduksi untuk menghasilkan 28,9 g (8,70%), 56,5 g (16,99%),
14,3 g (4,31%), dan 220,0 g (66,18%), masing-masing.
Kemudian, untuk mengisolasi senyawa murni, fraksi metanol
dilakukan kromatografi pada kolom silika gel (70–230 mesh;
10x15 cm) yang dielusi dengan gradien AcOEt/MeOH (100%
AcOEt hingga 100% MeOH). Proses kromatografi dipantau
dengan KLT. Lembar TLC dikembangkan menggunakan sistem
BAW (n-BuOH/HOAc/H2O, 3:3:1), dilihat di bawah sinar UV
kemudian disemprot dengan pereaksi anisaldehida-asam
sulfat. Fraksi serupa dikumpulkan bersama untuk
menghasilkan lima fraksi (M1-M5). Fraksi M3 (28,7 g),
dikumpulkan dengan AcOEt/MeOH (5:5), dikromatografi
kembali pada kolom silika gel (230–400 mesh; 5×15 cm)
dengan gradien AcOEt/MeOH (9:1 hingga 1 :9) untuk
memberikan tiga pecahan (M3a- M3d). Penyemprotan dengan
reagen anisaldehida-asam sulfat mengungkapkan
sekelompok bintik kuning pada pelat KLT M3b.
Fraksi ini berulang kali dikromatografi di atas
Sephadex LH 20 (dielusi dengan MeOH) dan dipantau
dengan KLT sampai pemisahan bintik kuning dari
senyawa non-target (misalnya polisakarida). Akhirnya,
tiga fraksi diperoleh: M3b1- M3b3.
Fraksi M3b2 (272,7 mg) difraksinasi dengan HPLC fase
terbalik dengan gradien langkah asetonitril/air (9:1, 8:2, 7:3,
1:9) menghasilkan senyawa berikut: 1 (2,3 mg),2 (101,9 mg), 3 (
20,1 mg) dan 4 (16,1 mg). M3b3 dimurnikan kembali dengan
kromatografi Sephadex LH 20 untuk menghasilkan senyawa5 (
14,1 mg);
(1) 9β-D-ribofuranosyladenine (β-adenosine)
Rf nilai ×100: 52 (sistem: BAW(n-BuOH: HOAc: H2O,
3:3:1)); senyawa ninhidrin dan dragendrof-positif;1H-
NMR (DMSO-d6): 8.34 (1H, S, H-8), 8.12 (1H, S, H-2), 7,34
(2H, bs, NH2) 5,85 (1H, d, J = 6 Hz, H-1'α), 5,46 (2H, bs,
OH-2', OH-5'), 5,25 (2H, bs,OH-3'), 4,59 (1H, bs, H-2'),
4.12 (1H, bs, H-3'), 3,94 (1H, d, J = 3, H-4'), 3,66 (1H, bs,
H-5'a), 3,52 (1H, bs, H-5'b). 13CNMR (DMSO-D6): 156.23
(C-6), 152,49 (C-2), 149,11 (C-4), 140,03 (C-8), 119,41
(C-5), 87,98 (C-1'), 85,99 (C- 4'), 73,53 (C-2'), 70,74 (C-3'),
61,75 (C-5').
Halaman 3 dari 7
(2) Quercetin-3-O-rutinoside (Rutin)Bubuk
kuning amorf, Rf nilai ×100: 57 (sistem:
BAW (n-BuOH: HOAc: H2O, 3:3:1);
1H-NMR (DMSO-D6): 12,52 (1H, S, OH-5), 7,55 (2H, d, J
= 8 Hz, H-2' dan H-6'), 6,85 (1H,
d, J = 8 Hz, H-5'), 6,39 (1H, J = 2 Hz, H-8), 6.20 (1H, J =
2 Hz, H-6), 5,34 (1 H, d, J = 7 Hz, H-1'' proton anomer
glukosil), 4,40 (1H, bs, H-1''' proton anomerik dari
rhamnosyl), 3,06-3,72 (M, sisa gula proton) dan 0,99
(3H, d, J = 6 Hz, CH3 rhamnosil).
13C NMR (DMSO-D6): 177,36 (C-4); 164.45 (C-7);
161,25 (C-5); 156.65 (C-9);
156.47 (C-2); 148,50 (C-4'), 144,81 (C-3'); 133.30
(C-3); 121,64 (C-6'); 121,18 (C-1'); 116,27 (C-5');
115,27 (C-2'); 103,88 (C-10); 101,24 (C-1''); 100,80
(C-1'''); 98,82 (C-6); 93,69 (C-8); 76,46 (C-3''); 75,92
(C-5''); 74.11 (C-2'');
71,87 (C-4'''), 70,59 (C-2'''), 70,41 (C-3'''), 70,02 (C-4'');
68,31 (C-5''), 67,04 (C-6''); dan 17,80 (C-6''').
(3) Kaempferol-3-O-robinobiosideBubuk kuning
amorf, Rf nilai ×100: 60 (sistem: BAW (n-
BuOH: HOAc: H2O, 3:3:1));
1H-NMR (DMSO-D6): 12,52 (1H, S, OH-5), 8,04 (2H, d, J
= 8 Hz, H-2' dan H-6'), 6,86 (2H,
d, J = 8 Hz, H-3' dan H-5'), 6,34 (1H, bs, H-8), 6.13 (1H,
bs, H-6), 5,28 (1H, h, J= 7,7 Hz, H-1'' proton anomer
galaktosil), 4,40 (1H, bs, H-1''' proton anomerik dari
rhamnosyl), 3,08 - 3,61 (M, sisa gula proton) dan
1,07 (3H, d, J = 6 Hz, CH3 rhamnosil).13C NMR
(DMSO-D6): 177,10 (C-4); 164.4 (C-7); 161.10 (C-5);
160.00 (C-4'), 156.64 (C-9); 156.23 (C-2); 133,23 (C-3);
130,90 (C-2', C-6'); 120,87 (C-1');
115,08 (C-3', C-5'); 103.4 (C-10); 102,31 (C-1'');
100,07 (C-1''); 98,8 (C-6); 94,06 (C-8); 73,49 (C-5'');
73,03 (C-3''); 71,92 (C-4'''), 71,12 (C-2''), 70,42, 70,62
(C-2''',C-3'''), 68,29 (C-5'''), 68,01 ( 4''); 65,32 (C-6''); dan
17,92 (C-6''').
(4) Kaempferol-3-O-rutinoside
kristal kuning, Rf nilai ×100: 65 (sistem: BAW(n-
BuOH: HOAc: H2O, 3:3:1));1H-NMR (DMSO-D6): 12,54
(1H, S, OH-5), 7,98 (2H, d, J = 9 Hz, H-2' dan H-6'),
6,88 (2H, d, J = 9 Hz, H-3' dan H-5'), 6,38 (1H, bs, H-8),
6.18 (1H, bs, H-6), 5,30 (1H, d, J = 7,5 Hz, H-1'' proton
anomer glukosil), 4,38 (1H, bs, H-1''' proton
anomerik dari rhamnosyl), 3,04 - 3,86 (M, sisa gula
proton) dan 0,98 (3H, d, J = 6 Hz, CH3 rhamnosil). 13C
NMR (DMSO-D6): 177,29 (C-4); 165,28 (C-7); 161,21
(C-5); 160,00 (C-4'), 156,78 (C-9); 156.66 (C-2); 133,22
(C-3); 130,94 (C-2', C-6'); 120,94 (C-1'); 115,18 (C-3',
C-5'); 103.67 (C-10); 101,50 (C-1''); 100,85 (C-1''');
99.10 (C-6); 93,98 (C-8); 76,41 (C-3''); 75,76 (C-5'');
74,24 (2''), 71,87 (C-4'''), 70,65 (C-3'''), 70,41 (C-2'''),
69,96 (C-4''), 68,33 (C- 5'''); 66,97 (6''); dan 17,82
(C-6''').
Jafari dkk. Jurnal Ilmu Farmasi DARU2013, 21:37 http://
www.darujps.com/content/21/1/37
(5) Quercetin-3-OD-glucopyranoside (Isoquercetin)
Bubuk kuning amorf, Rf nilai ×100: 70 (sistem:
BAW (n-BuOH: HOAc: H2O, 3:3:1)); 1H-NMR
(DMSO-D6): 12,6 (1H, S, OH-5), 7,58 (2H, d, J = 9
Hz, H-2' dan H-6'), 6,84 (2H, d, J = 9 Hz, H-5'), 6,40
(1H, d, J = 2 Hz, H-8), 6.19 (1H, d, J = 2 Hz, H-6),
5,43 (1H, d, J = 7 Hz, H-1'' proton anomer
glukosil), 3,09 - 3,70 (M, sisa gula proton).
13C NMR (DMSO-D6): 177,56 (C-4); 164.45 (C-7);
161,33 (C-5); 156.49, 156.35
(C-2, C-9); 148,64 (C-4'); 144,97 (C-3'); 133. 45 (C-3);
121,78 (C-6'); 121,25 (C-1'); 116,29 (C-5'); 115,36
(C-2'); 104,05 (C-10); 101,02 (C-1''); 98,89 (C-6); 93,73
(C-8); 77,65 (C-5''); 76,56 (C-3''); 74,19 (C-2''); 70,01
(C-4''); 61,05 (C-6'').
Penentuan kandungan flavonoid total
Kandungan total flavonoid ditentukan menggunakan
metode spektrofotometri yang dijelaskan oleh Tomczyk
dkk. [15]. Hasilnya dinyatakan sebagai mg setara
quercetin (QE) per 100 mg fraksi.
Garis sel
Empat garis sel tumor, HT-29 (adenokarsinoma usus besar
manusia), A-549 (karsinoma garis sel non-kecil), HepG-2
(karsinoma hepatoseluler) dan MCF-7 (adenokarsinoma
payudara manusia) dan satu garis sel normal, MDBK ( sel
ginjal sapi) diperoleh dari Pasture Institute of Iran, Tehran,
Iran.
Semua garis sel ditumbuhkan dalam media yang sesuai yang
dilengkapi dengan 10% serum janin sapi (FBS) dan 1% penisilin-
streptomisin dan dipertahankan pada suhu 37°C dalam 5% CO2
inkubator.
uji MTT
MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium
bromide) uji kolorimetri digunakan untuk menilai viabilitas sel
dengan adanya ekstrak yang berbeda [16]. Sel-sel
diunggulkan ke dalam piring 96-sumur dan diinkubasi selama
24 jam pada 37 ° C. Kemudian media diganti dengan media
segar yang mengandung ekstrak uji dengan konsentrasi yang
berbeda. Setelah 72 jam inkubasi pada 37°C, media diganti
dengan media segar yang mengandung MTT dan diinkubasi
lagi selama 4 jam. Setelah itu, MTT dihilangkan dan kristal
formazan yang tersisa benar-benar larut dalam DMSO. Setelah
itu, absorbansi dicatat pada 570 nm, menggunakan pembaca
ELISA. Tingkat penghambatan dihitung dengan rumus berikut:
Viabilitas relatif (%) = (Absorbansi tes/Daya serap kontrol)
×100. IC50 nilai didefinisikan sebagai konsentrasi ekstrak
untuk menghasilkan 50% pengurangan viabilitas sel
relatif terhadap kontrol negatif (sumur terkena pelarut
tanpa ekstrak apapun). Semua percobaan dilakukan
dalam rangkap tiga. Tamoxifen digunakan sebagai
kontrol positif.
Halaman 4 dari 7
hasil dan Diskusi
Hasil uji MTT disajikan pada Tabel 2 sebagai IC50
nilai dalam g mL-1 dan indeks selektivitas. Berdasarkan hasil
ini, aktivitas antikanker tertinggi terungkap dalam ekstrak biji
mentah lilac Persia terhadap HT29 (IC50: 8,18 g mL-1), fraksi etil
asetat daun mimba terhadap HT29 (IC50: 18,63 g mL-1) dan
ekstrak kasar daun mimba terhadap MCF7 (IC50: 34,11 g mL-1).
Terlihat bahwa ekstrak yang disebutkan menunjukkan
selektivitas yang relatif lebih tinggi terhadap garis sel kanker
yang disebutkan dibandingkan dengan tamoxifen.
Selanjutnya, di antara dua belas sampel yang diuji, ekstrak inti
bijiM. azedarach menunjukkan aktivitas sitotoksik dan
selektivitas terbaik. Hong-Bingdkk. melaporkan tiga limonoid
dan dua triterpen dari biji lilac Persia [17]. Selain itu,
triterpenoid eufan baru yang dilaporkan oleh Kelecomdkk. [
18]. cabraldkk. menunjukkan adanya empat lignan dalam biji
lilac Persia, yang memiliki aktivitas anti-moulting [19]. Namun,
sejauh ini tidak ada aktivitas sitotoksik yang dilaporkan dari
senyawa terisolasi atau ekstrak kasar biji lilac Persia.
Hasil pada Tabel 2 juga menunjukkan bahwa pulp kasar dan
ekstrak daun kasar dari A. indika, berbeda dengan ekstrak bijinya,
menunjukkan aktivitas anti-proliferatif yang jauh lebih kuat
daripada M. azedarach. Selain itu, dibandingkan dengan lilac
Persia, sebagian besar sampel mimba menunjukkan IC . yang
relatif lebih rendah50 pada garis sel normal, yang menunjukkan
bahwa mimba lebih berbahaya daripada lilac Persia dan resepnya
dalam dosis tinggi perlu lebih hati-hati.
Juga terlihat bahwa fraksi daun metanol dari kedua
spesies tidak aktif terhadap garis sel kanker yang dipelajari
pada konsentrasi pukulan 1000 g mL-1 dan toksisitasnya
pada garis normal terutama lilac Persia kurang dari fraksi
daun lainnya. Berdasarkan hasil tersebut serta hasil fraksi,
fraksi metanol lilac Persia dipilih untuk isolasi senyawa
aktif. Hal lain adalah bahwa obat-obatan herbal tradisional
umumnya disiapkan sebagai infus, decoctions, formulasi
mandi dan sebagainya di mana senyawa polar sebagian
besar diekstraksi dan menyebabkan efek farmakologis.
Fraksi metanol sebagai fraksi paling polar dari daun
diharapkan mengandung komponen aktif tersebut di atas
lebih dari yang lain.
Studi fitokimia menyebabkan isolasi empat flavonoid
termasuk rutin, kaempferol-3-O-robinobioside, kaempferol-3-
O-rutinoside dan isoquercetin bersama dengan nukleosida
purin, -adenosin (Gambar 1). Semua turunan diidentifikasi
dengan membandingkan data kimia dan spektral mereka
dengan literatur yang diterbitkan [20,21].
Seperti disebutkan, sebagian besar penyelidikan
fitokimia dan farmakologis sebelumnya telah difokuskan
pada limonoid dan triterpenoid lainnya sebagai komponen
aktif dari M. azedarach. Namun demikian, senyawa fenolik
khususnya glikosida flavonol terdapat dalam tanaman ini
dalam kadar tinggi dan tampaknya mereka terlibat secara
signifikan dalam efek obat dari tanaman ini. Analisis total
Jafari dkk. Jurnal Ilmu Farmasi DARU2013, 21:37 http:// Halaman 5 dari 7

www.darujps.com/content/21/1/37

Tabel 2 Aktivitas antikanker M. azedarach dan A. indikasi ekstrak dan fraksi pada garis sel yang berbeda
Sampel Garis sel
MCF7 HepG2 A549 HT29 MDBK
IC50* SI IC50 SI IC50 SI IC50 SI IC50
C. Biji E. 1 33.41 1.20 34.91 1.15 60.10 0,67 8.18 4.90 40.13

2 270,58 - > 650 - 370.69 - 343.28 - > 650

C. Pulp E. 1 > 650 ** - > 650 - > 650 - > 650 - > 650

2 139 0.83 212.16 0,54 83,45 1.38 83,49 1.38 115,47

C. Daun E. 1 > 650 - > 650 - > 650 - 218,61 0,89 195.8

2 34.11 2.06 95.51 0.73 55.84 1.25 38.44 1.82 70.27

Kloroform F 1 ND - ND - ND - ND - ND
2 38.94 1.13 74,94 0,59 54.59 0,81 46.22 0,95 44.11

Etil asetat F 1 147.9 0,59 210.3 0,42 146,26 0,60 48.91 1.79 87.56

2 56.29 0.93 49.11 1.07 55 0,95 18.63 2.82 52.55

Metanol F. 1 > 1000*** - > 1000 - > 1000 - > 1000 - 493,81

2 > 1000 - > 1000 - > 1000 - > 1000 - 193.3

tomoksifen 3.60 1.22 5.8 0,76 10.7 0,41 2.5 1.79 4.4
SI indeks selektivitas, C. mentah, E. ekstrak, F. pecahan, 1: M. azedarach L., 2: A. indica, ND tidak terdeteksi karena sifatnya yang tidak dapat larut;
* IC50 nilai dihitung dalam g mL-1.
* * Sampel tidak beracun dalam konsentrasi kurang dari 650 g mL-1 dan tidak larut dalam konsentrasi lebih dari itu.
* * * Sampel tidak beracun dalam konsentrasi kurang dari 1000 g mL-1.

kandungan flavonoid dalam fraksi metanol daun lilac dan racun (misalnya Microcystin, botulinum neurotoxin)
mimba Persia menunjukkan bahwa keduanya mengandung [25,26], mustard [27], bisphenol A [28], arsenik [29]. Selain
flavonol tingkat tinggi (masing-masing 72,6 mg QE/100 mg itu, rutin dan quercetin dilaporkan memperbaiki penyakit
fraksi dan 77,8 mg QE/100 mg fraksi). Melihat laporan radang usus [30]. Efek ini mungkin terkait dengan resep
sebelumnya tentang efek obat dari flavonol terisolasi tradisional lilac Persia untuk obstruksi usus kronis. Selain
menunjukkan bahwa mereka dapat bertanggung jawab untuk itu, rutin dan quercetin mampu meningkatkan
banyak efek yang tercantum dalam Tabel 1. Misalnya, flavonol penyembuhan luka [31,32] sehingga efektif dalam
sebagai quercetin, kaempferol dan glikosidanya dapat pengobatan luka supuratif [33]. Rutin telah menunjukkan
digunakan sebagai penawar untuk berbagai bahan beracun aktivitas anthelmintik terhadap filariasis limfatik manusia
seperti bisa ular [22,23], logam berat, toksin T2 [24], bakteri [34] danHaemonchus contortus [35]. Lebih-lebih lagi,

(1): -adenosin (2): R1- OH, R2-HAI-α-L-rhamnopyranosyl-(1 6)-

-D-glucopyranoside

(3): R1-H, R2-HAI-α-L-rhamnopiranosil -

(1 6)-β-D-galactopyranoside

(4):R1= H, R2-HAI-α-L-rhamnopyranosyl-(1 6)-β-

D-glucopyranoside

(5): R1-OH, R2-HAI-β-D-glukopiranosida

Gambar 1 Struktur molekul senyawa hasil isolasi dari M. azedarach.

Jafari dkk. Jurnal Ilmu Farmasi DARU2013, 21:37 http://
www.darujps.com/content/21/1/37
3-HAI-glikosida kaempferol dan quercetin menunjukkan aktivitas
diuretik [36] yang ditemukan dimediasi oleh aksi pada reseptor
adenosin A1 seperti kafein dan teofilin [37]. Kegiatan ini dapat
menjadi faktor yang membantu dalam pengobatan batu ginjal
juga [38]. Sebagai obat untuk vitiligo, quercetin memiliki potensi
untuk meningkatkan melanogenesis pada epidermis manusia
dengan mempengaruhi pematangan melanosom [39] dan
meningkatkan aktivitas dan biosintesis tirosinase dalam sel
melanoma dan melanosit manusia [40]. Mengenai pertumbuhan
rambut, senyawa ini dilaporkan dapat mengobati dan mencegah
alopecia areata [41] dan menghambat 5 -reduktase [42].
Kesimpulan
Studi kami menentukan potensi anti-proliferatif ekstrak dari
berbagai bagian M. azedarach dan A. indika.Beberapa ekstrak
seperti ekstrak biji M. azedarach kuat dan selektif mampu
menginduksi kematian sel dari garis sel yang dipelajari. Fraksi
daun metanol ditemukan lebih aman dalam hal sitotoksisitas
dan berlimpah flavonol. Meskipun tanaman ini terkenal
dengan limonoidnya, tampaknya flavonol bertanggung jawab
atas banyak efek obat dari daun tanaman. Oleh karena itu,
penelitian ini dapat memberikan konteks baru untuk
penelitian lebih lanjut.
Perlu dicatat bahwa dalam penelitian ini, uji sitotoksik
dengan cara kultur sel sebagai In vitro model tidak dapat
memastikan keamanan atau toksisitas ekstrak [43].
Meskipun tanaman tersebut telah digunakan sebagai obat
tradisional selama berabad-abad, mereka kaya akan
senyawa sitotoksik, insektisida dan pestisida. Jadi, tampil
lebih jauhin vivo pengujian hewan dan manusia
disarankan untuk mengkonfirmasi keamanan tanaman ini
dalam aspek yang berbeda.
Kepentingan bersaing
Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki konflik kepentingan.
Kontribusi penulis
SJ melakukan isolasi senyawa tanaman, meninjau literatur tradisional dan
menyusun naskah. SS berpartisipasi dalam desain studi fitokimia dan
melakukan interpretasi data NMR dan identifikasi senyawa. HH melakukan
tes sitotoksik dan analisis data mereka. MRSA bertanggung jawab atas
konsepsi dan desain penelitian. MAF menyarankan tes sitotoksik dan
analisisnya. AH menyarankan metode untuk isolasi dan identifikasi senyawa.
MK menyusun dan merancang penelitian dan menyunting naskah. Semua
penulis membaca dan menyetujui naskah akhir.
Ucapan Terima Kasih
Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada Pusat Penelitian Pengobatan Tradisional
dan Materia Medica, Universitas Ilmu Kedokteran Universitas Shahid Beheshti yang telah
menyediakan fasilitas untuk penelitian ini. Penelitian ini telah didukung oleh Tehran
University of Medical Sciences and Health Services (Grant No. 16977-33-01-91).
Detail penulis
1Departemen Farmakognosi, Fakultas Farmasi, Universitas Ilmu Kedokteran
Teheran, Teheran, Iran. 2Departemen Farmakognosi, Fakultas Farmasi,
Universitas Ilmu Kedokteran Zanjan, Teheran, Iran. 3Pusat Penelitian Tanaman
Obat, Fakultas Farmasi, Universitas Ilmu Kedokteran Universitas Teheran,
Teheran, Iran. 4Pusat Penelitian Obat Tradisional dan Materia Medica dan
Departemen Farmasi Tradisional, Fakultas Kedokteran Tradisional, Universitas
Ilmu Kedokteran Shahid Beheshti, Teheran, Iran.
Halaman 6 dari 7
5Departemen Farmasi Tradisional, Fakultas Pengobatan Tradisional Persia dan
Pusat Penelitian Farmasi dan Pengobatan Tradisional Persia, Universitas Ilmu
Kedokteran Universitas Teheran, Teheran, Iran. 6Departemen Bioteknologi
Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Ilmu Kedokteran Universitas Teheran,
Teheran, Iran.
Diterima: 7 Februari 2013 Diterima: 11 Mei 2013
Diterbitkan: 16 Mei 2013
Referensi
1. Puri HS: Neem: Pohon Ilahi Azadirachta indica. Australia: Penerbit
Harwood Academic; 1999.
2. Aghili Alavi Khorasani MH: Makhzan al-Advieh. Di Diedit oleh Syams Ardakani
MR, Rahimi R, Farjadmand F. Tehran: Sabz-arang dan Tehran University of
Medical Sciences; 2009.
3. Zagari A: Tanaman obat, Volume 1. Teheran: Pers Universitas Teheran; 1990.
4. Carpinella MC, Defagó MT, Valladares G, Palacios SM: Peran dari Melia azedarach L.
(Meliaceae) untuk pengendalian serangga dan acari: status sekarang dan prospek
masa depan. Di dalam Kemajuan dalam Seri Phytomedicine: Senyawa Bioaktif
yang Terjadi Secara Alami, Volume Volume 3. Diedit oleh Rai M, Carpinella MC.
Amsterdam: Elsevier; 2006:81.
5. Koul O, Seema W: Neem: Hari ini dan di Milenium Baru. New York:
Penerbit Akademik Kluwer; 2004.
6. Rishi K, Ram S, Suhag MP, Kalidhar SB: Komponen kimia dan sifat
insektisida bakain (Melia azedarach L.) - ulasan. Rev Pertanian2003, 24(
2):101–115.
7. Trudel RE, Bomblies A: Efek larvasida dari chinaberry (Melia azederach)bedak
tabur Anopheles arabiensis di Etiopia. Vektor Parasit 2011, 4:72.
8. Dousti M, Ram MH: Pengobatan persia tradisional berbasis bukti. Di dalamPraktek
Berbasis Bukti dalam Pengobatan Pelengkap dan Alternatif. Diedit oleh Chiappelli F,
Ramchandani MH, Singh RH, Rastogi S. Berlin, Heidelberg: Springer-Verlag; 2012:79–
96.
9. Ansarishirazi A: Ekhtiarat Badie. Di Diedit oleh Mir MT. Teheran: Perusahaan
distribusi obat Razi; 1993.
10. Avicenna: Al-Qanoon Fit-Tib (Canon in Medicine), buku 2. Diterjemahkan oleh
Sharafkandi A. Teheran: Soroush Press; 1991.
11. Jorjani SE: Zakhireh-ye Kharazmshahi (Buku kedokteran komprehensif
Persia tertua). Jilid 3.Di Diedit oleh Mohhareri MR. Teheran: Akademi
Ilmu Kedokteran IR Iran; 2002.
12. Tonekaboni MM: Tohfatul Mukminin. Di Diedit oleh Syams Ardakani MR,
Rahimi R, Farjadmand F. Tehran: Nashre shahr; 2008.
13. Ksatria AP: Panduan Tanaman Rumah dan Kebun Beracun. AS: Media Baru
Teton; 2007.
14. Oelrichs PB, Bukit MW, Vallely PJ, Macleod JK, Molinski TF: Tetranortriterpen
beracun dari buah melia azedarach. firokimia 1983,22(2):531–534.
15. Tomczyk M, Pleszczynska M, Wiater A: Variasi kandungan polifenol
total dari bagian udara potensi spesies dan aktivitas
antikariogeniknya. Molekul 2010, 15:4639–4651.
16. Alley MC, Scudiero DA, Monkes A, Hursey ML, Czerwinski MJ, Fine DL, Abbott BJ,
Mayo JG, Shoemaker RH, Boyd MR: Kelayakan skrining obat dengan panel
garis sel tumor manusia menggunakan uji tetrazolium mikrokultur. Res
Kanker 1988, 48:589–601.
17. Liu HB, Zhang CR, Dong SH, Dong L, Wu Y, Yue JM: Limonoid dan
triterpenoid dari biji Melia azedarach. Chem Pharm Bull 2011,59:
1003–1007.
18. Kelecom A, MMO Cabral, Garcia ES: Triterpen eufan baru dari Brasil
Melia azedarach. J Braz Chem Soc 1996, 7(1):39–41.
19. MMO Cabral, Garcia ES, Kelecom A: Lignan dari Brasil Melia azedarach dan
aktivitas mereka di Rhodnius prolixus (Hemiptera, Reduviidae).Mem Inst
Oswaldo Cruz 1995, 90(6):759–763.
20. Agrawal PK: Karbon-13 NMR Flavonoid. New York: Elsevier; 1989.
21. Ciuffreda P, Casati S, Manzocchi A: Penugasan spektral dan data
referensi: Selesai 1Tangan 13Penetapan spektral C NMR dari - dan
-adenosine, 2'-deoxyadenosine dan turunan asetatnya.Magn Reson
Chem 2007, 45:781–784.
22. Mors WB, Nascimento MC, Ruppelt Pereira BM, Pereira NB: Tumbuhkan
produk alami yang aktif melawan gigitan ular - pendekatan molekuler.
fitokimia 2000, 55(6):627–642.
23. Cintra-Francischinelli M, Silva MG, Andréo-Filho N, Gerenutti M, Cintra ACO,
Giglio JR, Leite GB, Cruz-Höfling MA, Rodrigues-Simioni L, Oshima-Franco Y:
Jafari dkk. Jurnal Ilmu Farmasi DARU2013, 21:37 http:// Halaman 7 dari 7

www.darujps.com/content/21/1/37

Tindakan antibotropik dari Casearia sylvestris sw. (Flacourtiaceae) ekstrak.Sumber

Phytother 2008, 22(6):784–790.
24. El-Sawia NM, Al-Seenia MN: Penilaian flavonoid sebagai rutin untuk
detoksifikasi T-2 Toxin. J Appl Anim Res 2009, 35(1):57–60.
25. Jayaraj R, Deb U, Bhaskar ASB, Prasad GBKS, Lakshmana Rao PV:Kemanjuran
hepatoprotektif dari flavonoid tertentu terhadap toksisitas yang diinduksi
microcystin pada tikus. Racun Lingkungan 2007, 22(2):472–479.
26. Sakane I, Sawamura SI, Ohno T, Nishimura M, Umehara K: Isolasi dan
penentuan antidot untuk botulinum neurotoxin dari ekstrak teh hitam.
Nihon Yakurigaku Zasshi 2002, 120(1):116P–118P.
27. Vijayaraghavan R, Gautam A: Pengobatan flavonoid untuk toksisitas agen
mustard. Di dalam Stres Oksidatif – Induksi Lingkungan dan Antioksidan Diet.
Diedit oleh Lushchak V. Kroasia: InTech; 2012:249–262.
28. Verma RJ, Sangai NP: Efek perbaikan ekstrak teh hitam dan quercetin pada
sitotoksisitas yang diinduksi bisphenol A. Acta Pol Farma 2009,66(1):41–
44.
29. Ghosh A, Mandal AK, Sarkar S, Panda S, Das N: Nanoenkapsulasi quercetin
meningkatkan kemanjuran dietnya dalam memerangi kerusakan oksidatif yang
diinduksi arsenik di hati dan otak tikus. Ilmu Kehidupan 2009, 84:75–80.
30. Kim H, Kong H, Choi B, Yang Y, Kim Y, Lim MJ, Neckers L, Jung Y: Sifat
metabolik dan farmakologis dari rutin, glikosida quercetin diet,
untuk pengobatan penyakit radang usus. Res Farmasi 2005,22(
9):1499–1509.
31. Akkol EK, Acɪkara OB, Süntar I, CitoGlu GS, KeleS H, Ergen B: Peningkatan
penyembuhan luka dengan aplikasi topikal dari Scorzonera spesies:
Penentuan konstituen dengan HPLC dengan metode fase terbalik baru yang
divalidasi. J Etnofarmaka 2011, 137:1018–1027.
32. Gomathi K, Gopinath D, Rafiuddin Ahmed M, Jayakumar R: Quercetin memasukkan
matriks kolagen untuk proses penyembuhan luka dermal pada tikus. Biomaterial
2003, 24:2767–2772.
33. Timofeev AA, Maksiutina NP, VoSayatenko GN, Dobrovol'skiSaya DI DALAM:
Penggunaan butiran quercetin untuk mengobati luka jaringan lunak supuratif
pada daerah maksilofasial dan leher. Stomatologi (Mosk) 1989, 68(6):11–13.
34. Lakshmi V, Joseph SK, Srivastava S, Verma SK, Sahoo MK, Dube V, Mishra SK, Murthy
PK: Aktivitas antifilaria in vitro dan in vivo dari beberapa flavonoid yang diuji
terhadap Brugia melayu. Akta Trop 2010, 116:127–133.
35. Barrau E, Fabre N, Fouraste I, Hoste H: Pengaruh senyawa bioaktif dari
Sainfoin (Onobrychis viciifolia Lingkup.) pada in vitro migrasi larva
Haemonchus contortus: peran tanin dan glikosida flavonol.Parasitologi
2005, 131:531–538.
36. Brantner AH, Pria Z: penilaian kualitas dari Paliurus spina-christi ekstrak.J
Etnofarmaka 1999, 66:175–179.
37. Alexander SPH: Flavonoid sebagai antagonis pada reseptor adenosin a1.Sumber
Phytother 2006, 20:1009–1012.
38. Yuliana ND, Khatib A, Link-Struensee AMR, Ijzerman AP, Rungkat-Zakaria F,
Choi YH, Verpoorte R: Aktivitas pengikatan reseptor adenosin A1 dari
flavonoid metoksi dari Orthosiphon stamineus. Planta Med 2009, 75:132–136.
39. Takeyama R, Takekoshi S, Nagata H, Yoshiyuki Osamura R, Kawana S:Melanogenesis
yang diinduksi quercetin dalam model epidermal manusia tiga dimensi yang
disusun kembali. J Mol Histol 2004, 35:157–165.
40. Nagata H, Takekoshi S, Takeyama R, Homma T, Yoshiyuki Osamura R:Quercetin
meningkatkan melanogenesis dengan meningkatkan aktivitas dan sintesis
tirosinase dalam sel melanoma manusia dan melanosit manusia normal. Resolusi
Sel Pigm 2004, 17:66–73.
41. Wikramanayake TC, Villasante AC, Mauro LM, Perez CI, Schachner LA, Jimenez
JJ: Pencegahan dan pengobatan alopecia areata dengan quercetin pada
model tikus C3H/HeJ. Pendamping Stres Sel 2012, 17:267–274.
42. Hiipakka RA, Zhang HZ, Dai W, Dai Q, Liao S: Hubungan struktur-aktivitas
untuk penghambatan 5α-reduktase manusia oleh polifenol.Biochem
Kirimkan naskah Anda berikutnya ke BioMed Central dan
Pharmacol 2002, 63:1165–1176. manfaatkan sepenuhnya:
43. Shetab-Boushehri SV, Abdollahi M: Kekhawatiran saat ini tentang validitasin vitro
model yang menggunakan sel neoplastik yang diubah dalam farmakologi dan • Pengiriman online yang nyaman
toksikologi. Int J Pharmacol 2012, 8:594–595.
• Tinjauan sejawat yang menyeluruh

doi:10.1186/2008-2231-21-37 • Tidak ada batasan ruang atau biaya figur warna

Kutip artikel ini sebagai: Jafari dkk.: Evaluasi sitotoksik Melia azedarach • Publikasi langsung tentang penerimaan
dibandingkan dengan, Azadirachta indica dan penyelidikan
fitokimianya. Jurnal Ilmu Farmasi DARU 2013 21:37. • Penyertaan dalam PubMed, CAS, Scopus, dan Google Cendekia

• Penelitian yang tersedia secara bebas untuk didistribusikan kembali

Kirimkan naskah Anda di

www.biomedcentral.com/submit