Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Jurnal Produk dan Sumber Daya Alam India Vol.

3(1), Maret 2012, hlm. 28-32

Skrining fitokimia dan antimikroba tanaman obat

untuk pengobatan jerawat

P Nand1, S Drabu1dan RK Gupta2*

1Institut Farmasi Maharaja Surajmal, Janakpuri, New Delhi-110058, India
2Fakultas Bioteknologi Universitas, Universitas Guru Gobind Singh Indraprastha, New Delhi-110 075

Diterima 9 Mei 2011; Diterima 28 Juli 2011

Ekstrak dariCamellia sinensisAir terjun. daun-daun,Glycyrrhiza glabraAir terjun. akar dan rimpang danCalendula
officinalisAir terjun. bunga disaring untuk merekain vitroaktivitas antimikroba menggunakan metode difusi cakram
agar. Aktivitas antimikroba petroleum eter, diklorometana dan ekstrak metanol dari berbagai bagian tanaman ini
dipelajari terhadap bakteri penyebab jerawat, yaituStaphylococcus aureus(MTCC 96),Staphylococcus epidermidis(MTCC
2639) dan Propionibacterium acnes(MTCC *1951). Ekstrak metanol dariC.sinensisdaun memiliki aktivitas antibakteri
tertinggi terhadapS. epidermidis. Konsentrasi hambat minimum terendah (0,625 mg/mL) dan konsentrasi bakterisida
minimum (2,5 mg/mL) terhadapS. epidermidisjuga diamati untuk ekstrak metanolC.sinensisdaun-daun. Skrining
fitokimia mengungkapkan adanya alkaloid, flavonoid, glikosida, dan terpenoid yang mengindikasikan bahwa
fitokonstituen ini mungkin bertanggung jawab atas aktivitas anti-jerawatnya.

Kata kunci: Aktivitas antimikroba,Calendula officinalis, Camellia sinensis, Metode difusi cakram,Glycyrrhiza
glabra, Skrining fitokimia.
kode IPC; Int. kl. (2011.01)—A61K 36/00, A61P 31/10, A61P 17/10

pengantar
Camellia sinensisAir terjun. (Family-Theaceae) yang
dikenal sebagai teh hijau, adalah minuman paling
umum kedua yang dikonsumsi di seluruh dunia
setelah air putih1. Ini adalah semak atau pohon
cemara yang terutama dibudidayakan di India dan
Cina. Tiga varietas utama teh telah dilaporkan yaitu
hijau, hitam, dan oolong. Teh hijau terbuat dari daun
yang tidak difermentasi dan mengandung antioksidan
kuat dengan konsentrasi tertinggi. Teh hijau memiliki
sejumlah aktivitas farmakologis seperti antikanker,
lebih dari 4000 tahun sekarang. Ini berasal dari Asia
tengah dan barat daya, cekungan Mediterania Afrika,
Eropa Selatan dan India. Berbagai spesies akar manis
telah dilaporkan yaituGlycyrrhiza inflataFisch.,
Glycyrrhiza uralensisFisch. danLiquiritia officinalis
Moench6. Dalam sistem pengobatan tradisional, akar
manis digunakan sebagai obat penurun panas, antitusif,
pencahar, pemanis, diuretik, antiarthritis, antibakteri7,
antiinflamasi8, anti jerawat9, afrodisiak, estrogenik,
antioksidan, antineoplastik, antikolinergik dan antiulkus
10. Fitokonstituen yang diisolasi dari tanaman ini adalah

penurun lipid, aksi penghambatan neuromuskular,
efek imunomodulator, antivirus, antibakteri2,
antispasmodik, antioksidan3, antiinflamasi4, dll.
Sejumlah besar phytoconstituents seperti alkaloid
(kafein, teobromin), protein, enzim, karbohidrat, lipid,
polifenol, katekin (epicatechin, epicatechin-3-gallate,
epigallocatechin
dan epigallocatechin-3-gallate), karbohidrat,
tanin, vitamin dan mineral telah dilaporkan hadir
di tanaman ini5.
Glycyrrhiza glabraAir terjun. (Family-Fabaceae) dikenal
sebagai akar manis, telah digunakan dalam pengobatan untuk
_______________
* Penulis koresponden: E-mail: rkg67ap@yahoo.com ;
Telepon: +91 9871263252 (Mob.);
Faks: +91 11 23865941/2.
glisirrhizin, asam glisirrhizinat, glabrin A dan B,
glisirrhetol, glabrolida, isoglabrolida, isoflavon, kumarin,
sterol triterpen liquiritin, isoliquiritin, flavon, chalcones
dan isoflavonoid, seperti
glabridin7-11.
Calendula officinalisAir terjun. (Family-Asteraceae)
yang dikenal sebagai Pot marigold merupakan
tanaman obat penting bagi penduduk asli India,
Eropa, AS dan China. Daun dan bunganya dilaporkan
memiliki banyak aktivitas farmakologis yang meliputi
antioksidan,aktivitas anti-inflamasi, antibakteri dan
antivirus12-14. Fitokonstituen yang diisolasi dari
tanaman ini adalah sitosterol, stigmasterol, ψ-
taraxasterol, lupeol, faradiol-3-HAI-palmitate,
 NANDet al.: STUDI ANTIMIKROBA TANAMAN OBAT JERAWAT
faradiol-3-HAI-miristat, faradiol-3-HAI-laurat,
quercetin, isorhamnetin, isoquercetin, calendoflaside,
α-tocopherol dan minyak atsiri kaya akan monoterpen
dan seskuiterpen15.
Karena literatur yang ada hanya menunjukkan
penelitian terbatas mengenai pemanfaatan ekstrak ini
dalam pengobatan jerawat, upaya dilakukan untuk
mengevaluasi aktivitas antimikroba dari ekstrak
petroleum eter, diklorometana dan metanol dari daun,
akar, stolon dan bunga dari tanaman ini. masing-masing
dengan metode difusi agar dan mikrodilusi kaldu.
Bahan dan metode
Bahan tanaman
Sampel dariC.sinensisdaun-daun,G. glabraakar dan
stolon danC.officinalisbunga dikumpulkan dari kebun
obat dan toko herbal resmi di Delhi dan disahkan oleh
NISCAIR, Kampus Pusa, New Delhi dengan spesimen
voucher (NISCAIR/RHM/ konsultasi/2008-09/978/09)
dan telah disimpan di departemen kami untuk masa
depan referensi.
Ekstraksi dan skrining fitokimia awal
Daun, akar, stolon dan bunga tanaman yang
dikeringkan di tempat teduh (200 g) dihaluskan secara
terpisah dan dilakukan ekstraksi pelarut berurutan
dengan metode ekstraksi panas terus menerus (soxhlet).
Ekstraksi dilakukan dengan pelarut yang berbeda dalam
urutan kepolarannya yang meningkat seperti petroleum
eter (PE), diklorometana(DCM) dan metanol(ME) dan
ekstrak disingkat menjadi:Camellia sinensis (CSPE,
CSDCM, dan CSME),Glycyrrhiza glabra (GGPE, GGDCM,
GGME) danCalendula officinalis (COPE, CODCM, dan
COME). Setiap kali, marc dikeringkan di udara pada suhu
kamar dan kemudian digunakan untuk ekstraksi dengan
pelarut lain. Semua ekstrak diuapkan menggunakan
rotary evaporator dan persentase hasil dicatat. Ekstrak
kering disimpan pada suhu 4°C dalam wadah kedap
udara untuk penelitian lebih lanjut. Ekstrak pekat
menjadi sasaran berbagai uji kimia untuk mendeteksi
keberadaan phytoconstituents yang berbeda16.
mikroorganisme dan media
Bakteri aerobik:Staphylococcus aureus(MTCC
96),Staphylococcus epidermidis(MTCC 2639) dan
bakteri anaerob:Propionibacterium acnes
(MTCC*1951) diperoleh dari Pusat Pengumpulan
Budaya Jenis Mikroba, Institut Teknologi
Mikroba, Chandigarh. Kultur segar dari isolat
bakteri aerob dan anaerob
29
tersuspensi dalam kaldu nutrisi dan media clostridium yang
diperkuat, masing-masing.S.aureusdanS. epidermidis biakan
diinkubasi selama 24 jam masing-masing pada suhu 37 dan
30°C.P.acneskultur diinkubasi dalam ruang anaerobik pada
suhu 37 ° C yang terdiri dari 10% CO2,
10% H2dan 80% N2selama 48 jam.
Skrining antimikroba menggunakan metode difusi cakram
Aktivitas antibakteri ekstrak diuji menggunakan
metode difusi cakram agar17. Suspensi kultur segar
(100μl) bakteri uji disebarkan secara merata pada
agar nutrisi dan pelat agar klostridial yang diperkuat.
Konsentrasi kultur adalah 5 × 105CFU/mL. Untuk
penyaringan, diameter 6 mm. kertas saring cakram,
diresapi dengan 20 µl larutan ekstrak setara dengan
0,2 mg ekstrak ditempatkan pada permukaan media
agar piring diinokulasi. Inkubasi dilakukan pada suhu
37°C atau 30°C selama 24 dan 48 jam tergantung
jenis bakteri pada kondisi optimum. Zona hambat
bening diukur dalam mm, termasuk diameter cakram.
Zona berukuran 10 mm atau lebih dianggap efektif
melawan organisme uji. Klindamisin (10 µg/cakram)
digunakan sebagai kontrol positif dan masing-masing
pelarut, yang digunakan untuk ekstraksi, berfungsi
sebagai kontrol negatif.
Konsentrasi hambat minimum menggunakan metode
mikrodilusi
Konsentrasi hambat minimum (MIC) aktif
ekstrak metanol (AME) dipelajari dengan menggunakan
metode mikrodilusi kaldu dengan sedikit modifikasi18.
Ekstrak dilarutkan dalam (DMSO) dimetil sulfoksida (10%
dari volume total) dan pengenceran dua kali lipat
dilakukan dengan menggunakan kultur kaldu pra-
sterilisasi untuk memberikan konsentrasi akhir berkisar
antara 5-0,078 mg/ml. 100 µl dari setiap pengenceran
didistribusikan di 96 pelat sumur. Kontrol sterilitas (kaldu
nutrisi yang disterilkan) dan kontrol pertumbuhan (kaldu
kultur dengan DMSO) juga disiapkan. Setiap sumur uji
dan kontrol pertumbuhan diinokulasi dengan 5 µl
suspensi bakteri (5x105CFU/ml). Semua percobaan
dilakukan dalam rangkap tiga dan pelat mikrodilusi
diinkubasi dalam kondisi optimal. Pertumbuhan bakteri
terdeteksi setelah penambahan 20 µl larutan alkohol
70% INT (0,5 mg/ml) ke dalam masing-masing sumur
diikuti dengan inkubasi selama 30 menit. Perubahan
warna dari kuning menjadi ungu menunjukkan adanya
adanya pertumbuhan mikroba.
Penentuan konsentrasi bakterisida minimum
Konsentrasi bakterisida minimum (MBC) didefinisikan
sebagai konsentrasi terendah suatu senyawa
30 INDIAN J NAT PROD RESOUR, MARET 2012

yang membunuh mikroorganisme. KMB dari ekstrak aktivitas antimikroba yang signifikan terhadap
ditentukan dengan melapisi 10 µl sampel dari masing- organisme uji kecuali GGPE yang tidak
masing sumur MIC tanpa pertumbuhan yang terlihat menunjukkan aktivitas antimikroba terhadapS.
pada media kultur.19. Setelah inkubasi untuk periode epidermidis (Gambar 2-4).
optimal, lempeng diperiksa untuk pertumbuhan
koloni dan MBC dicatat.

Hasil dan Diskusi

Dalam penyelidikan ini, persentase hasil sembilan
ekstrak menunjukkan bahwa GGME menunjukkan
hasil persentase tertinggi (20,11) diikuti oleh COME
(11,22) dan CSME (9,55) (Gambar 1). Skrining fitokimia
menunjukkan adanya phytoconstituents berikut:
C.sinensis(alkaloid, flavonoid, terpenoid dan tanin),G.
glabra(karbohidrat, glikosida, flavonoid, saponin,
terpen dan sterol) danC.officinalis(flavonoid, saponin
dan terpenoid).In vitroskrining antimikroba
menggunakan klindamisin fosfat sebagai kontrol
positif jelas menunjukkan bahwa CSME, GGME dan
Gambar 2—Aktivitas antimikroba dari ekstrak tanaman terhadapS.aureus
COME menunjukkan aktivitas antimikroba yang
menjanjikan terhadap ketiga organisme tersebut
(Tabel 1). Diamati bahwa semua ekstrak dariC.sinensis
danG. glabramenunjukkan

Gambar 3—Aktivitas antimikroba dari ekstrak tumbuhan terhadap

Gambar 1—Persentase hasil ekstrak tanaman S. epidermidis

Tabel 1—Skrining antimikroba tanaman terhadapS.aureus(MTCC 96),S. epidermidisMTCC 2639) danP.acnes(MTCC *1951)
menggunakan metode difusi cakram.

Zona penghambatan ekstrak dalam mm

S.aureus* S.epidermidis* P.jerawat*
pe DCM AKU pe DCM AKU pe DCM AKU
Bunga kamelia 7,5 ± 0,28 9,0±0,06 14,4±0,27 7,4±0,05 10,0±0,06 17,8±0,16 7,6±0,18 7,8±0,1 13,8±0,2
sinensis(Le)
Glycyrrhiza 7,66±0,16 9,06±0,06 11,5±0,28 NA 8,0±0,12 11,8±0,15 7,1±0,05 13±0,05 13,9±0,15
glabra(R&S)
Calendula NA 9,06±0,12 NA NA 9,06±0,17 11,8±0,15 9,13±0,08 NA 12,4±0,18
officinalis(Fl)
Klindamisin 14,94±0,08 18±0,11 18±0,05
fosfat
Le = Daun; R & St = Akar dan Stolon; Fl = Bunga; PE = Ekstrak petroleum eter; DCM = Ekstrak diklorometana; ME =
Ekstrak metanol; NA = Tidak ada aktivitas antibakteri. Nilai adalah Mean ± SEM (mm) dari tiga pengukuran; * P <0,05.
 NANDet al.: STUDI ANTIMIKROBA TANAMAN OBAT JERAWAT 31

Tabel 2: Konsentrasi penghambatan minimum dan bakterisida minimum dari AME dan Klindamisin

Ekstrak metanol aktif S.aureus(MTCC 96) S. epidermidis(MTCC 2639) P.acnes(MTCC*1951)

MICMBCMICMBC MIC MBC
(mg/ml) (mg/ml)(mg/ml)(mg/ml) (mg/ml) (mg/ml)

CSME 1.25 2.5 0,625 2.5 1.25 2.5

GGME 2.5 >5 2.5 5 1.25 5
DATANG NA NA 2.5 >5 2.5 5
Klindamisin 0,312 0,63 0,078 0,156 0,078 0,156

CSME = Ekstrak metanol dariCamellia sinensis; GGME = Ekstrak metanol dariGlycyrrhiza glabra; COME = Ekstrak metanol dari Calendula
officinalis; NA = Tidak ada aktivitas antibakteri. Hasil rata-rata dari tiga pengukuran.

asam8. Kehadiran triterpenoid diC.officinalisdikenal

untuk memberikan aktivitas anti-inflamasi. Juga
dilaporkan bahwa ester asam faradiol-3-miristat,
asam faradiol-3-palmitat dan 4-taraxasterol adalah
tiga senyawa paling aktif untuk mengurangi edema
dan flavonoid, kaempferol, menunjukkan aktivitas
antibakteri terhadapP.acnes21. Oleh karena itu,
aktivitas antimikroba AME menunjukkan potensi
spektrum yang luas karena senyawa aktif lebih
terkonsentrasi pada fraksi ME daripada fraksi PE dan
DCM yang mendukung skrining fitokimia.

Gambar 4—Aktivitas antimikroba dari ekstrak tanaman terhadapP.acnes
CODCM dan COME ditemukan aktif melawanS.
epidermidis,Namun, mereka tidak menunjukkan
aktivitas penghambatan terhadapS.aureusdan
P.acnes. Zona penghambatan tertinggi 17,8 ± 0,016
mm diamati untuk CSMES. epidermidis.Hasilnya,
setelah skrining antimikroba awal,
mengungkapkan bahwa ekstrak metanol aktif
memiliki potensi dalam pengobatan jerawat
karenanya, mereka dievaluasi lebih lanjut untuk
MIC dan MBC mereka. MIC terendah terhadapS.
epidermidis(0,625 mg/ml),S.aureus (1,25 mg/ml)
danP.acnes(1,25 mg/ml) tercatat di CSME (Tabel 2).
Demikian pula terhadap MBC terendahS.aureus(2,5
mg/ml),S. epidermidis (2,5 mg/ml) danP.acnes(2,5
mg/ml) juga diamati pada CSME (Tabel 2).
Meskipun ada kekurangan literatur untuk
memberikan bukti aktivitas antimikroba dari tanaman
obat ini melawan bakteri penyebab jerawat, namun
temuan kami dapat didasarkan pada aksi bakterisidal
dari epigallocatechin gallate dan epicatechin di
C.sinensis20. Efek antibakteri dan anti-inflamasi dari
G. glabradisebabkan oleh adanya glycyrrhizin dan
produk hidrolisisnya, glycyrrhetinic
Kesimpulan
Hasilnya dengan jelas menunjukkan bahwa studi ilmiah
yang dilakukan pada tanaman obat ini, yang memiliki klaim
efektif secara tradisional dalam gangguan kulit,
memberikan hasil yang bermanfaat. Oleh karena itu, ekstrak
metanol dariC.sinensis,G. glabradanC. resmi, memiliki
aktivitas spektrum luas dapat digunakan dalam mengobati
acne vulgaris dan merumuskan produk herbal anti jerawat.
Fokus utama dari pekerjaan kami adalah pada potensi
herbal anti-jerawat yang kami rencanakan untuk dipelajari
lebih lanjut dengan tujuan akhir untuk menyediakan
pengobatan herbal yang divalidasi secara ilmiah untuk
melawan jerawat. Lebih lanjut dalam hal ini, karakterisasi
diperlukan untuk mengetahui jenis senyawa yang
bertanggung jawab terhadap aktivitas antibakteri.
Terima kasih
Kami sangat berterima kasih kepada Prof. Mullika
Traidej Chomnawang, Fakultas Farmasi, Universitas
Mahidol, Thailand untuk meninjau naskah ini dan atas
komentar dan sarannya yang sangat berharga. Kami
berterima kasih kepada Prof. Rama Choudhary, HOD,
Microbiology, All India Institute of Medical Sciences
yang telah menyediakan fasilitas untuk melakukan
aktivitas antibakteri ekstrak tumbuhan terhadap
mikroorganisme anaerob. Kami mengakui keuangan
32 INDIAN J NAT PROD RESOUR, MARET 2012
dukungan dari All India Council for Technical
Education (8023/BOR/RID/RPS-27/2008-09) & UGC
untuk dana SAP-DRS-1 (F. 3-23/2011).
Referensi
1 Weisburger JH, Teh dan kesehatan: perspektif sejarah,
Surat Kanker, 1997,114(1-2), 315-317.
2 Yen GC dan Chen HY, Hubungan antara aktivitas
antimutagenik dan komponen utama berbagai teh,
Mutagenesis, 1996,11(1), 37-41.
3 Davis AL, Lewis JR, Cai Y, Powell C, Davis APet al, Pigmen
polifenol dari teh hitam,Fitokimia, 1997,46(8),
1397-1402.
4 Chattopadhyay P, Besra SE, Gomes A, Das M, Sur P, Mitra
S dan Vedasiromoni JR, Aktivitas anti-inflamasi teh (
Camellia sinensis) ekstrak akar,Sains Kehidupan.2004;74
(15), 1839-49.
5 Harold N dan Graham PD, Komposisi teh hijau,
konsumsi dan kimia polifenol, Sebelumnya Kedokteran,1992,21,
334-350.
6 Mills SY dan Bone K, Prinsip dan Praktek
Phytotherapy: Pengobatan Herbal Modern (Churchill
Livingstone, London), 2000, 313-318.
7 Fukai T, Marumo A, Kaitou K, Kanda T, Terada S dan
Nomura T, Aktivitas antimikroba flavonoid licorice
terhadap methicillin-resistantStaphylococcus aureus,
Fitoterapia, 2002,73(6), 536-539 .
8 Capasso F, Mascolo N, Autore G dan Duraccio MR,
Asam Glycyrrhetinic, leukosit dan prostaglandin,J Pharm
Farmakol, 1983,35, 332-335.
9 Saeedi M, Morteza-Semnani K and Ghoreishi MR.
Pengobatan dermatitis atopik dengan gel licorice,
Perawatan Dermatolog J,2003,14(3), 153-157.
10 Dehpour AR, Zolfaghari ME dan Samadian T, Efek
perlindungan komponen licorice dan turunannya terhadap,
tukak lambung yang diinduksi oleh aspirin pada tikus,J Farmasi
Pharmacol, 1994,46(2), 148-149.
11 Srinivasan V, Stres oksidatif melatonin dan penyakit
neurodegeneratif,India J Exp Biol.2002,40, 668-679.
12 Della LR, Tubaro A, Sosa S, Becker H, Saar S dan Issac OT. Peran
triterpenoid dalam aktivitas antiinflamasi topikalCalendula
bunga-bunga,Planta Med, 1994,60, 516-520. Chandran PK dan
13 Kutton R, Efek dariCalendula officinalis ekstrak bunga pada
protein fase akut, mekanisme pertahanan antioksidan dan
pembentukan granuloma selama luka bakar termal,J Clin
Biochem Nutr, 2008,43, 58-64.
14 Preethi KC, Kuttan G dan Kuttan R, Potensi antioksidan
dari Calendula officinalisbunga-bungain vitrodanin vivo,
Bio Farmasi, 2006,44(9), 691-697.
15 Vidal-Ollivier E, glikosida Flavonol dariCalendula
officinalisbunga-bunga,Planta Med, 1989,55, 73-75.
16 Harbone JB, metode Fitokimia: Panduan untuk teknik
analisis tanaman modern (Chapman dan Hall London),
1973, 279-280.
17 Bauer AW, Kirby WMM, Sherris JC dan Turck M,
Uji kepekaan antibiotik dengan metode cakram tunggal
standar,Am J Clinic Pathol, 1966,45,493-496.
18 de Souza SM, Delle-Monache F dan Smânia Jr A,
Aktivitas antibakteri kumarin,Z Naturforsch C, 2005, 60,
693-700.
19 Kartnig T, Still F and Reinthaler F. Aktivitas antimikroba
minyak atsiri pucuk pinus muda (Picea abies L), J
Etnofarmakol, 1991,35, 155-157.
20 Kono K, Tatara I, Takeda S, Arakawa K dan Hara
Y, Aktivitas antibakteri epigallocatechin gallate terhadap
methicillin-resistantStaphylococcus aureus, Kansenshogaku
Zasshi, 1994,68, 1518-1522.
21 HL Muda, In-Hwan K dan Jung-Ju S,In vitroaktivitas dari
kaempferol diisolasi dariImpatiens balsaminasendiri dan
dalam kombinasi dengan eritromisin atau klindamisin
Propionibacterium acnes, J Microbiol, 2007,10, 473-477.