Revisi Bu Dian

SEMINAR KELAYAKAN PENELITIAN TESIS
OPTIMASI SUHU PENYIMPANAN URIN TERHADAP

ANALISIS METAMFETAMIN SERTA
METABOLITNYA DENGAN
GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY
Imam Mahmudi
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN

ALAM / PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2021
OPTIMASI SUHU PENYIMPANAN URIN TERHADAP

ANALISIS METAMFETAMIN SERTA
METABOLITNYA DENGAN
GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY
Imam Mahmudi
2082011001
PROGRAM STUDI MAGISTER KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN
ALAM / PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2021
ii
Lembar Persetujuan Pembimbing

PADA TANGGAL 22 FEBRUARI 2022
Pembimbing I Pembimbing II
(Dr. Dra. Ni Made Suaniti, M.Si.) (Dr. Ni Putu Diantariani, S.Si., M.Si.)
NIP. 196409171992032009 NIP. 1970061819972001
Mengetahui
Koordinator Program Studi Kimia

Pascasarjana
Universitas Udayana,
Dr. Drs. I Gusti Gede Agung Bawa, M.Si

NIP. 196712311994031013
iii
DAFTAR ISI
Halaman
COVER I...................................................................………………………………i
COVER II................................................................................................................ii
LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING.........................................................iii
DAFTAR ISI...........................................................................................................iv
DAFTAR GAMBAR............................................................................................viii
DAFTAR TABEL ..................................................................................................ix
DAFTAR SINGKATAN DAN LAMBANG..........................................................x
DAFTAR LAMPIRAN...........................................................................................xi
BAB I PENDAHULUAN......................................................................................1
1.1 Latar belakang..........................................................................................1
1.2 Rumusan masalah.....................................................................................7
1.3 Tujuan penelitian......................................................................................7
1.3.1 Tujuan umum..................................................................................7
1.3.2 Tujuan khusus.................................................................................8
1.4 Manfaat penelitian....................................................................................8
1.4.1 Manfaat teoritis...............................................................................8
1.4.2 Manfaat praktis...............................................................................9
BAB II KAJIAN PUSTAKA...............................................................................10
2.1 Narkoba...................................................................................................10
2.2 Metamfetamin.........................................................................................12
2.2.1 Jenis sediaan dan cara penyalahgunaan..........................................13
2.2.2 Ciri-ciri pengguna...........................................................................15
2.2.3 Biotransformasi metamfetamin.......................................................16
2.3 Urin.........................................................................................................18
2.3.1 Pemeriksaan metamfetamin dalam urin..........................................18
a. Pemeriksaan skrining.........................................................................18
b. Pemeriksaan konfirmasi.....................................................................19
2.4 Ekstraksi urin..........................................................................................20
iv
2.4.1 Ekstraksi cair-cair...........................................................................20
2.4.2 Ekstraksi padat-cair.........................................................................20
2.5 Kromatografi gas....................................................................................21
2.6 Spektrometer massa................................................................................23
2.7 Validasi metode......................................................................................25
2.7.1 Linieritas.........................................................................................26
2.7.2 Batas deteksi dan batas kuantifikasi................................................26
2.7.3 Akurasi............................................................................................27
2.7.4 Presisi..............................................................................................27
2.7.5 Stabilitas..........................................................................................28
2.7.6 Selektifitas.......................................................................................28
BAB III KERANGKA, KONSEP PENELITIAN, DAN HIPOTESIS...............30
3.1 Kerangka berfikir....................................................................................30
3.2 Konsep penelitian...................................................................................31
3.3 Hipotesis................................................................................................32
BAB IV METODE PENELITIAN......................................................................34
4.1 Rancangan penelitian dan perlakuan penelitian .....................................34
4.2 Lokasi dan waktu penelitian...................................................................35
4.3 Ruang lingkup penelitian........................................................................35
4.4 Penentuan sumber sampel data...............................................................35
4.5 Variabel penelitian..................................................................................36
4.6 Alat dan bahan penelitian.......................................................................36
4.7 Kondisi GC-MS......................................................................................36
4.8 Prosedur penelitian.................................................................................37
4.8.1 Pengumpulan dan uji pendahuluan sampel urin...........................37
4.8.2 Uji konfirmasi sampel urin...........................................................38
4.8.3 Preparasi larutan standar MA.......................................................39
4.8.4 Validasi metode............................................................................39
a. Linieritas.........................................................................................40
b. Uji akurasi dengan persen perolehan kembali...............................40
c. Uji presisi.......................................................................................40
v
d. Batas deteksi (LOD) dan batas penetapan (LOQ).........................41
e. Selektifitas......................................................................................41
BAB V HASIL PENELITIAN............................................................................42
5.1 Uji pendahuluan sampel urin..................................................................42
5.2 Uji konfirmasi sampel urin.....................................................................43
5.2.1 Sampel urin normal ......................................................................43
5.2.2 Sampel urin normal yang ditambahkan sabu-sabu......................50
5.2.3 Sampel urin pengguna sabu-sabu ................................................58
5.2.4 Pecahan spektroskopi massa MA dan metabolitnya ...................66
5.3 Uji kadar sampel urin..............................................................................67
5.4 Validasi metode......................................................................................69
5.4.1 Resolusi.......................................................................................69
5.4.2 Linieritas......................................................................................71
5.4.3 Ketelitian......................................................................................72
5.4.4 Batas deteksi (LoD) dan batas kuantifikasi (LoQ) .....................72
5.4.5 Recovery......................................................................................73
BAB VI PEMBAHASAN...................................................................................74
6.1 Uji pendahuluan sampel urin..................................................................74
6.2 Uji konfirmasi sampel urin.....................................................................75
6.2.1 Sampel urin normal.......................................................................75
6.2.2 Sampel urin normal yang ditambahkan sabu-sabu dan urin
pengguna...............................................................................................76
6.3 Uji kadar MA sampel urin......................................................................80
6.4 Validasi metode......................................................................................83
6.4.1 Resolusi.......................................................................................83
6.4.2 Linieritas......................................................................................83
6.4.3 Ketelitian......................................................................................83
6.4.4 Batas deteksi (LoD) dan batas kuantifikasi (LoQ) .....................83
6.4.5 Recovery.......................................................................................84
vi
BAB VII KESIMPULAN....................................................................................85
7.1 Kesimpulan.............................................................................................85
7.2 Saran.......................................................................................................86
DAFTAR PUSTAKA .........................................................................................87
LAMPIRAN ........................................................................................................92
vii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Struktur molekul metamfetamin.....................................................13
Gambar 2.2 Kristal metamfetamin......................................................................14
Gambar 2.3 Metabolisme metamfetamin............................................................17
Gambar 2.4 Skema kromatografi gas.................................................................22
Gambar 2.5 Skema spektrometer massa.............................................................24
Gambar 5.1 Kromatogram sampel urin normal dengan kode (UN X)...............44
Gambar 5.2 Kromatogram sampel urin normal dengan kode (UN Y)...............47
Gambar 5.3 Kromatogram sampel urin normal dengan kode (UN Z)................49
Gambar 5.4 Kromatogram sampel urin normal + MA dengan kode (UN X +
MA)...............................................................................................................52
Gambar 5.5 Kromatogram sampel urin normal + MA dengan kode (UN Y +
MA)...............................................................................................................54
Gambar 5.6 Kromatogram sampel urin normal + MA dengan kode (UN Z +
MA)...............................................................................................................57
Gambar 5.7 Kromatogram sampel urin pengguna dengan kode UP1................60
Gambar 5.10 Spektra massa MA (mode full scan) m/z 44, 58, 91, dan 134.....66
Gambar 5.11 Spektra massa amfetamin (mode full scan) m/z 44, 65, 91, dan
120 ...............................................................................................................67
Gambar 5.12 Pemisahan puncak kromatogram senyawa MA dan MDMA........70
Gambar 5.13 Kurva Kalibrasi MA (mode ion extraction chromatogram)..........71
Gambar 6.1 Jalur retrosintesis senyawa MA.......................................................79
Gambar 6.2 Jalur retrosintesis senyawa amfetamin.............................................80
viii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 5.1 Hasil uji pendahuluan masing-masing sampel urin.............................42
Tabel 5.2 Hasil library senyawa dalam urin normal kode UN X .......................45
Tabel 5.3 Hasil library senyawa dalam urin normal kode UN Y........................48
Tabel 5.4 Hasil library senyawa dalam urin normal kode UN Z........................50
Tabel 5.5 Hasil library senyawa dalam urin normal yang ditambahkan MA kode
(UN X + MA)...............................................................................................53
(UN Y + MA)...............................................................................................55
(UN Z + MA)................................................................................................58
Tabel 5.8 Hasil library senyawa dalam urin pengguna sabu-sabu kode UP1.....61
Tabel 5.9 Hasil library senyawa dalam urin pengguna sabu-sabu kode UP2.....63
Tabel 5.10 Hasil library senyawa dalam urin pengguna sabu-sabu kode UP3. . .66
Tabel 5.11 Hasil perhitungan kadar MA pada sampel UN + MA dan UP di
berbagai suhu penyimpanan.........................................................................67
Tabel 5.12 Data nilai resolusi..............................................................................70
Tabel 5.13 Data Pengukuran Linieritas...............................................................71
Tabel 5.14 Data Ketelitian Metode Analisis pada Senyawa Metamfetamina.....72
Tabel 5.15 Data Pengukuran Nilai LoD dan LoQ..............................................72
Tabel 5.16 Data Recovery Senyawa MA.............................................................73
ix
DAFTAR SINGKATAN DAN LAMBANG
MA : Metamfetamin
NAPZA : Narkotika, Psikotropika, dan Zat Adiktif
UU : Undang-Undang
ADHD : Attention Deficit Hyperactivity Disorder
GC-MS : Gas Chromatography-Mass Spektrometry
SPE : Solid Phase Extraction
CMR : Certified Reference Material
UN : Urin Normal
UT : Urin normal yang ditambahkan sabu-sabu
UP : Urin Pengguna sabu-sabu
p.a : Pro Analysis
SIM : Selection Ion Monitoring
LOD : Limit of Detection
LOQ : Limit of Quantitation
Bareskrim : Badan Reserse Kriminal
Polri : Polisi Republik Indonesia
Polda : Polisi Daerah
BNN : Badan Narkotika Nasional
NTB : Nusa Tenggara Barat
NTT : Nusa Tenggara Timur
mm : Milimeter
m : Meter
mg : Miligram
ml : Mililiter
μL : Mikroliter
mL/min : Mililiter per Menit
ppm : Parts per million
USP : United States Pharmacopeia
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Jadwal penelitian ...............................................................................92

Lampiran 2 Preparasi sampel urin..........................................................................92
Lampiran 3 Perhitungan pembuatan larutan..........................................................93
Lampiran 4 Tabel data SPSS................................................................................101
Lampiran 5 Dokumentasi.....................................................................................104
xi
Halaman ini kosong
xii
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar belakang
Di jaman globalisasi kemajuan teknologi, komunikasi, dan transportasi
bukan hanya memudahkan penyebaran informasi, tetapi juga gerbang utama untuk
peredaran ilegal narkotika, kemudahan peredaran narkotika ini menyebabkan
melonjaknya kasus penyalahgunaan narkotika. Kasus penyalahgunaan narkotika
telah lama menjadi masalah serius yang dihadapi banyak negara di dunia, bukan
hanya negara-negara maju tetapi merambah hingga negara-negara berkembang,
salah satunya Indonesia (Widayanto, 2016).
Provinsi Bali merupakan tujuan destinasi utama baik bagi wisatawan
domestik maupun mancanegara, sektor pariwisata merupakan penyumbang
terbesar bagi pemasukan Provinsi Bali menyebabkan semakin mudahnya
peredaran narkotika khususnya di Provinsi Bali. Berdasarkan Keputusan Menteri
Kesehatan Republik Indonesia Nomor: 194/ Menkes/ SK/VI/ 2012 Tentang
Penunjukan Laboratorium Pemeriksaan Narkotika dan Psikotropika,
Laboratorium Forensik Polda Bali mempunyai Subbidang Narkoba yang
melaksanakan pemeriksaan sampel Narkoba bukan hanya diwilayah Provinsi Bali
tetapi mencakup area pelayanan Polda NTB, Polda NTT, BNN, dan Instansi
lainnya (Depkes, 2012).
1
2
Salah satu jenis narkotika yang sering disalahgunakan yaitu metamfetamin
yang biasa dikenal dengan nama sabu-sabu. Dari 23 ribu barang bukti yang telah
diperiksa di Loboratorium Forensik Polda Bali, 16 ribu diantaranya merupakan
Metamfetamin. Pada rentang waktu 4 tahun terakhir (2017-2020) jumlah kasus
penyalahgunaan sabu-sabu terus mengalami peningkatan hal ini dibuktikan
dengan jumlah barang bukti yang diperiksa pada tahun 2017 sekitar 3000 plastik
klip sabu-sabu, jumlah ini terus meningkat hingga 5000 plastik klip sabu-sabu
yang diperiksa di Laboratorium Forensik Polda Bali. Sitaan barang bukti ini juga
disertai dengan pengambilan sampel biologis terduga pengguna narkotika seperti
urin, darah, maupun rambut. Selain dilakukan pemeriksaan terhadap barang bukti
fisik sabu juga penting dilakukan pemeriksaan terhadap sampel biologis guna
mengkonfirmasi penggunaan sabu-sabu oleh terduga (Bidlabfor, 2021).
Metamfetamin (MA) sering juga disebut sabu-sabu merupakan jenis
senyawa narkotika yang mampu memberikan efek stimulan terhadap tubuh dan
memiliki kecendrungan yang sangat besar untuk menyebabkan kecanduan,
merusak susunan saraf pusat dan bahkan menyebabkan kematian sehingga
dilarang penggunaannya. Dalam menjaring penyalahgunaan narkotika terdapat
banyak kendala yang dihadapi oleh aparat penegak hukum khususnya di
kepolisian selaku penyidik untuk pembuktian bagi pelaku baik sebagai pengedar,
pembuat, pemasok, maupun pengguna. Selain pembuktian metamfetamin melalui
alat bukti yang dikumpulkan berupa tablet atau serbuk, juga diperlukan
pembuktian melalui cairan tubuh berupa darah atau urin sebagai hasil yang
diekskresikan (Indrati, 2015).

3
Pemeriksaan obat-obatan terlarang di dalam urin lebih umum dilakukan
dibandingkan di dalam darah karena pengambilan urin lebih mudah dan kadar
senyawa obat di urin cukup tinggi (Ganjar dan Abdul, 2014). Kelemahan
pemeriksaan urin adalah mudahnya dilakukan pemalsuan dengan cara
menambahkan bahan narkotika atau bahan lain yang memiliki struktur yang
hampir mirip dengan senyawa narkotika sehingga dapat mengacaukan hasil
pemeriksaan (Ernawati, 2016). Untuk itu diperlukan suatu metode atau cara untuk
mengenali adanya substitusi bahan narkotika dengan bahan lain dengan struktur
yang mirip maupun adanya penambahan bahan narkotika yang sengaja ke dalam
sampel urin. Sehingga nantinya dapat di ketahui perbedaan hasil yang di dapatkan
pada pemeriksaan di laboratorium. Hal ini sebagai upaya untuk mencegah
terjadinya penambahan narkotika secara langsung kedalam urin yang mungkin
dapat dilakukan oleh pihak yang tidak bertanggung jawab.
Dalam tubuh beberapa senyawa obat dapat mengalami biotransformasi
menjadi metabolitnya seperti halnya senyawa metamfetamin dalam tubuh sangat
mudah mengalami biotransformasi menjadi beberapa metabolitnya, sekitar 70%
dari metamfetamin yang diekskresikan melalui urin akan dikeluarkan dalam
bentuk utuhnya, sedangkan sekitar 30% akan diekskresikan dalam bentuk
metabolit mayornya yaitu amfetamin, 4-hidroksi metamfetamin ataupun metabolit
lainnya (Kunalan, 2009). Urin normal (urin negatip narkotika), urin normal yang
ditambahkan metamfetamin di luar tubuh memiliki perbedaan hasil analisis
dengan urin pengguna metamfetamin, pada urin yang ditambahkan metamfetamin
saat analisis dengan GC (Gas Chromatography) tidak akan memunculkan puncak

4
kromatogram dari metabolit mayornya sebab tidak adanya proses biotransformasi,
selain itu senyawa metamfetamin serta metabolitnya yang dari hasil pemeriksaa
memiliki hasil dan karaterisrik dari pecahan MS (Mass Spectrometry) yang
berbeda serta kadar yang lebih tinggi dibandingkan kadar metamfetamin pada urin
pengguna metamfetamin (Mei dkk, 2009).
Pada sampel urin hal yang perlu diperhatikan adalah penyimpanan sampel
urin pada waktu pengiriman hingga sampai diterima dilaboratorium serta prosedur
pemeriksaan urin di laboratorium. Hal ini penting karena setiap obat memiliki
stabilitas yang berbeda-beda sehingga nantinya akan mempengaruhi hasil analisis
(David, 2005). Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, senyawa
metamfetamin dalam sampel urin yang disimpan pada suhu 25oC mengalami
degradasi yang signifikan setelah 7 hari penyimpanan ditandai dengan
menurunnya kadar metamfetamin (Manuela dkk., 2017). Penelitian lain yang
dilakukan oleh Kei Zaitsu, dkk (2008) menyebutkan degradasi metamfetamin
dapat dicegah dengan penambahan NaN3 sebagai bahan pengawet sehingga urin
dapat disimpan pada suhu penyimpanan 25oC hasil dari penelitian ini
menunjukkan penambahan zat berupa pengawet dapat mencegah kerusakan
matrik urin sehingga puncak kromatogram metamfetamin yang muncul dapat
dianalisis tanpa adanya puncak kromatogram reference, penelitian ini juga
membandingkan dengan sampel urin disimpan pada suhu 4oC tanpa penambahan
apapun, menunjukkan hasil tidak adanya degradasi metamfetamin secara
signifikan ditandai dengan kadar metamfetamin yang tidak mengalami penurunan
yang drastis.
5
Melalui penelitian tersebut penyimpanan sampel urin yang baik yaitu pada
suhu yang rendah agar dapat mengurangi resiko terjadinya degradasi pada
senyawa metamfetamin, pada penelitan tersebut diatas masih sebatas pemeriksaan
urin pengguna metamfetamin dan belum dilakukan pada urin normal dan urin
yang sengaja ditambahkan metamfetamin secara langsung pada urin normal.
Penyimpanan sampel merupakan hal yang penting diperhatikan sebab seiring
dengan meningkatnya kasus penyalahgunaan narkotika, pemeriksaan terhadap
urin tidak dapat dirampungkan pada hari yang sama (Manela, 2015). Begitupun
saat pengambilan sampel urin membutuhkan waktu kirim dari penyidik
kewilayahan baik dari Poda Bali, NTB dan NTT hingga sampai di Laboratorium
Forensik Polda Bali, sehingga penyimpanan sampel urin kurang diperhatikan
terutama untuk suhu penyimpanan.
Proses penyidikan tindak pidana narkoba dari mulai penyitaan barang bukti
memerlukan waktu 3 hari hingga sampai ke laboratorium, sementara pemeriksaan
di laboratorium rampung dalam waktu 7 hari dihitung dari barang bukti diterima
di Laboratorium Forensik, sedangkan apabila terdapat hambatan dalam
pengiriman seperti faktor geografi dan transportasi maka hasil pemeriksaan akan
rampung maksimal 14 hari dihitung dari mulai penyitaan barang bukti hingga
hasil pengujian barang bukti di laboratorium, hal ini disebabkan dalam waktu 14
hari dari penyitaan barang bukti oleh penyidik, barang bukti tersebut harus sudah
ditetapkan status kebenarannya mengandung senyawa narkotika untuk selanjutnya
akan dilakukan pemusnahan (UU Narkotika dan Perkap, 2009). Sehingga perlu
dilakukan penelitian dengan memperlakukan urin normal, urin normal yang di

6
tambahkan metamfetamin dan urin pengguna metamfetamin pada suhu
penyimpanan 25oC dan 4oC selama 14 hari.
Pemeriksaan di Laboratorium sederhana juga masih mengandalkan metode
test kit dengan tingkat kepercayaan yang kecil. Metode Test kit hanya dapat
digunakan untuk skrining awal, kelemahan test kit urin narkotika dapat
memberikan hasil positif palsu jika dalam urin terdapat senyawa obat lain yang
memiliki struktur hampir mirip dengan struktur metamfetamin, selain itu test kit
tidak dapat digunakan untuk menghitung kadar metamfetamin dalam sampel urin.
Sehingga metode test kit biasanya digunakan untuk uji awal (screening) yang
kemudian akan dilanjutkan dengan uji konfirmasi dengan menggunakan metode
GC-MS sehingga data hasil bisa cepat dilaporkan (Rahayu dkk, 2014).
Teknik analisis menggunakan GC-MS (Gas Chromatography -Mass
Spectrometry) memiliki keunggulan diantara teknik analisis lainnya, GC-MS
mampu menganalisis senyawa-senyawa yang mudah menguap selain itu jika
membandingkan dari ketiga teknik yang biasa digunakan dalam analisis narkotika
dalam urin, teknik GC-MS tidak membutuhkan waktu yang lama dalam preparasi
jika dibandingkan dengan teknik analisis menggunakan LC-MS dan hasil analisis
GC-MS lebih akurat dibandingkan dengan teknik RIA. (Alfian dkk., 2017).
Analisis MA dengan GC-MS pecahan MS untuk MA ditunjukkan pada m/z 58, 91,
dan 134, sementara untuk metabolitnya yaitu amfetamin akan muncul m/z 44, 65,
dan 91 (Kumazawa dkk, 2011).

7
Berdasarkan uraian di atas, maka perlu dilakukan optimasi suhu
penyimpanan pada suhu penyimpanan 25oC dan 4oC selama 14 hari, hal ini
berguna untuk menemukan suhu optimal penyimpanan sampel urin agar tidak
mempengaruhi hasil analisis kandungan metamfetamin serta metabolitnya dalam
urin normal, urin normal yang sengaja ditambahkan MA secara langsung dan urin
pengguna sabu-sabu dengan Gas Chromatography-Mass Spectrometry serta kadar
metamfetamin pada urin pengguna sabu-sabu dan urin normal yang sengaja
ditambahkan MA dengan Gas Chromatography.
1.2 Rumusan masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, dirumuskan beberapa masalah sebagai
berikut :
1. Bagaimana hasil analisis metamfetamin dan metabolitnya pada sampel urin
normal pada suhu penyimpanan 25 dan 4oC selama 14 hari dengan Gas
Chromatography-Mass Spectrometry?
2. Bagaimana hasil analisis metamfetamin dan metabolitya pada sampel urin
normal yang ditambahkan metamfetamin pada suhu penyimpanan 25 dan 4oC
selama 14 hari dengan Gas Chromatography-Mass Spectrometry?
3. Bagaimana hasil analisis metamfetamin dan metabolitnya pada sampel urin
pengguna sabu-sabu pada suhu penyimpanan 25 dan 4oC selama 14 hari
dengan Gas Chromatography-Mass Spectrometry?
4. Berapa kadar metamfetamin dalam sampel urin pengguna sabu-sabu dan urin
normal yang ditambahkan metamfetamin pada suhu 25 dan 4oC selama 14 hari
dengan Gas Chromatography?

8
1.3 Tujuan penelitian
1.3.1 Tujuan umum
Tujuan umum pada penelitian ini adalah untuk mengetahui kandungan urine
normal (negatip narkotika) dan perbedaan hasil analisis sampel urin pengguna
metamfetamin dan urin normal yang sengaja ditambahkan metamfetamin
berdasarkan karakteristik kandungan metamfetamin dan metabolitnya, serta
pengaruh suhu penyimpanan sampel urin terhadap kadar metamfetamin yang
terkandung dalam kedua sampel urin pengguna metamfetamin dan urin normal
yang di tambahkan metamfetamin tersebut.
1.3.2 Tujuan khusus
Adapun tujuan yang ingin dicapai dari penelitian ini yaitu :
1. Mengetahui hasil analisis metamfetamin dan metabolitnya pada sampel urin
normal pada suhu penyimpanan 25 dan 4oC selama 14 hari dengan Gas
Chromatography-Mass Spectrometry.
2. Mengetahui hasil analisis metamfetamin dan metabolinya pada sampel urin
normal yang ditambahkan metamfetamin pada suhu penyimpanan 25 dan 4oC
selama 14 hari dengan Gas Gas Chromatography-Mass Spectrometry.
3. Mengetahui hasil analisis metamfetamin dan metabolitya pada sampel urin
pengguna sabu-sabu pada suhu penyimpanan 25 dan 4 oC selama 14 hari
dengan Gas Chromatography-Mass Spectrometry.
4. Mengetahui kadar metamfetamin dalam sampel urin pengguna sabu-sabu dan
urin normal yang ditambahkan metamfetamin pada suhu penyimpanan 25 dan
4oC selama 14 hari dengan Gas Chromatography.

9
1.4 Manfaat
1.4.1 Manfaat teoritis
Manfaat penelitian ini secara teoritis adalah sebagai sumber informasi dalam
memperkaya khasanah ilmu pengetahuan tentang perbedaan sampel urin
pengguna sabu-sabu dengan urin normal yang ditambahkan metamfetamin
berdasarkan hasil analisis kandungan metamfetamin dan metabolitnya dalam urin,
serta pengaruh suhu penyimpanan sampel urin pengguna metamfetamin dan urin
normal yang ditambahkan metamfetamin terhadap kadar dan karakteristik
kandungan senyawa metamfetamin dan metabolitnya.
1.4.2 Manfaat praktis
Manfaat praktis dari penelitian ini adalah sebagai masukan bagi pihak
kepolisian mengenai kondisi suhu penyimpanan urin yang optimum terhadap
kadar dan karakteristik kandungan metamfetamin dan metabolitnya sehingga
dapat menjadi acuan saat melakukan penyimpanan terhadap sampel urin serta saat
melakukan analisis deteksi senyawa metamfetamin dalam urin baik melalui
senyawa utamanya metamfetamin maupun berdasarkan adanya metabolitnya
sebagai hasil dari biotransformasi, dan sebagai upaya untuk mencegah terjadinya
penambahan narkotika secara langsung kedalam urine yang mungkin dapat
dilakukan oleh pihak yang tidak bertanggung jawab. Serta sebagai acuan dalam
menentukan kadar metamfetamin pada sampel urin pengguna narkotika sehingga
dapat dipertanggungjawabkan guna keperluan persidangan selanjutnya.

BAB II
KAJIAN PUSTAKA
2.1 Narkoba
Narkoba merupakan singkatan dari Narkotika, Psikotropika dan Bahan
Adiktif. Sebutan lainnya yang kerapkali digunakan oleh para praktisi kesehatan
dan rehabilitasi adalah NAPZA yang merupakan akronim dari Narkotika,
Psikotropika dan Zat Adiktif. Meskipun sedikit berbeda, pada intinya pemaknaan
dari kedua istilah tersebut tetap merujuk pada tiga jenis zat yang sama yaitu
narkotika, psikotropika dan bahan adiktif (Badan Narkotika Nasional, 2019).
Narkoba merupakan suatu obat yang bila digunakan untuk tujuan indikasi
medis (pengobatan), namun bila disalahgunakan diistilahkan dengan drug abuse,
yang dapat mengubah pikiran, suasana hati atau perasaan, dan perilaku seseorang
(Nasution, 2007). Azmiyati sebagaimana dikutip oleh Sholihah (2015)
menyebutkan bahwa NAPZA adalah bahan atau zat atau obat yang apabila
dikonsumsi oleh manusia mampu mempengaruhi tubuh terutama susunan saraf
pusat atau otak, sehingga menyebabkan gangguan kesehatan fisik, psikis serta
fungsi sosialnya karena terjadi kebiasaan, ketagihan (adiksi) serta ketergantungan
(dependensi) terhadap NAPZA. Selain itu, pengertian narkotika berdasarkan UU
Republik Indonesia No. 35 Tahun 2009 tentang narkotika pasal 1 ayat 1 adalah zat
atau obat yang berasal dari tanaman atau bukan tanaman, baik sintetis maupun
semisintetis, yang dapat menyebabkan penurunan atau perubahan kesadaran,
hilangnya rasa, mengurangi sampai menghilangkan rasa nyeri, dan dapat
menimbulkan ketergantungan, yang dibedakan ke dalam golongan-golongan.
10
11
Permenkes Nomor 2/2017 tentang Perubahan Penggolongan Narkotika secara
lebih rinci menjelaskan tiga jenis golongan narkotika, yaitu:
a. Narkotika Golongan I adalah narkotika yang hanya dapat digunakan untuk
tujuan pengembangan ilmu pengetahuan dan tidak digunakan dalam terapi,
serta mempunyai potensi sangat tinggi mengakibatkan ketergantungan
seperti opium, ganja, heroin, amfetamin, metamfetamin, etkatinon,
tanaman KHAT dan lain-lain.
b. Narkotika Golongan II adalah narkotika berkhasiat pengobatan yang bisa
digunakan sebagai pilihan terakhir dan dapat digunakan dalam terapi atau
untuk tujuan pengembangan ilmu pengetahuan serta mempunyai potensi
tinggi mengakibatkan ketergantungan seperti dekstromoramid, metadon,
morfin, petidin, dihidroetorfin, oripavin dan lain-lain.
c. Narkotika golongan III hanya berbeda dalam potensi ringan dalam
mengakibatkan ketergantungan seperti kodein, narkodein, buprenorfin dan
lain-lain.
Berdasarkan uraian di atas maka dapat disimpulkan bahwa narkoba yang
merupakan akronim dari narkotika, psikotropika dan bahan adiktif adalah zat atau
bahan yang diperoleh secara alami maupun sintetis yang mampu menyebabkan
penurunan kesadaran, menimbulkan ketagihan (adiksi) serta ketergantungan
(dependensi), mempunyai fungsi sebagai obat dengan kadar tertentu serta
penggunaannya diatur dalam undang-undang dan diawasi oleh badan yang
berwenang.
12
2.2 Metamfetamin
Metamfetamin (metilamfetamina atau desoksiefedrin) yang lebih dikenal
dengan sebutan sabu-sabu, merupakan obat psikostimulan bersifat adiktif yang
pertama kali disintesis oleh kimiawan asal Jepang bernama Nagai Nagayoshi pada
tahun 1893. Metamfetamin tersebut dikembangkan untuk keperluan medis seperti
pengobatan untuk penyakit gangguan hiperaktivitas atau ADHD (Attention Deficit
Hyperactivity Disorder), narkolepsi dan obesitas dengan nama dagang Desoxyn
(Grobler dkk, 2011). Metamfetamin dengan nama sistematik N-metil-1-
fenilpropan-2-amina termasuk ke dalam golongan I narkotika. Metamfetamin
adalah senyawa kiral dengan dua enansiomer.
Pada suhu kamar, basa bebas metamfetamin berupa cairan bening dan tidak
berwarna dengan bau khas daun geranium. Basa bebas metamfetamin mudah larut
dalam dietil eter dan etanol serta larut dengan kloroform. Sebaliknya, garam
metamfetamin hidroklorida tidak berbau dan memiliki rasa pahit. Garam
metamfetamin memiliki titik leleh antara 170 dan 175°C (338 dan 347°F) dan,
pada suhu kamar berbentuk kristal putih atau bubuk kristal putih. Garam
metamfetamin hidroklorida juga mudah larut dalam etanol dan air. Metamfetamin
termasuk dalam kelompok feniletilamin tersubstitusi dan amfetamin tersubstitusi
dengan rumus kimia C10H15N1 (European Monitoring Centre for Drugs and Drug
Addiction, 2015) dengan struktur molekul seperti yang diperlihatkan pada
Gambar 2.1.
13
Gambar 2.1 Struktur Molekul Metamfetamin (BNN, 2011)
Dalam dosis rendah hingga sedang, metamfetamin dapat meningkatkan
suasana hati, meningkatkan kewaspadaan atau konsentrasi, mengurangi nafsu
makan, serta membantu penurunan berat badan. Pada dosis yang sangat tinggi
metamfetamin dapat menyebabkan psikosis, kerusakan otot rangka, kejang dan
pendarahan di otak. Penggunaan dosis tinggi yang kronis dapat memicu
perubahan suasana hati yang tidak terduga dan cepat, psikosis stimulan seperti,
paranoia, halusinasi, dan delusi serta perilaku kekerasan.
Metamfetamin juga memiliki kecenderungan kecanduan dan
ketergantungan yang tinggi. Metamfetamin pada dosis tinggi dapat bersifat
neurotoksik terhadap neuron dopaminergik pada otak tengah manusia.
Metamfetamin memiliki afinitas yang lebih tinggi dibandingkan dengan
amfetamin sehingga, metamfetamin memiliki tingkat toksisitas yang lebih tinggi
terhadap neuron serotonergik daripada amfetamin. Neurotoksisitas metamfetamin
menyebabkan kerusakan dalam struktur dan fungsi otak, seperti penurunan
volume materi abu-abu di beberapa daerah otak (Yu dkk, 2015).
2.2.1 Jenis sediaan dan cara penyalahgunaan
Metamfetamin dibuat secara sintesis dan dapat berupa kristal (Gambar 2.2.),
bubuk kristal berwarna putih, kuning atau coklat, serta dapat juga berbentuk
sediaan farmasi seperti tablet, kapsul, dan kaplet. Metamfetamin dalam bentuk
14
kristal dapat dikonsumsi dengan cara dihisap, sedangkan metamfetamin dalam
bentuk bubuk kristal dapat masuk ke dalam tubuh dengan cara dihirup melalui
hidung (inhalasi), ditelan, disuntikkan ke pembuluh vena (intravena), atau dihisap.
Metamfetamin dalam bentuk pil maupun tablet dikonsumsi dengan cara ditelan
(oral). (Badan Narkotika Nasional, 2016).
Gambar 2.2 Kristal Metamfetamin/Crystal meth
Cara masuknya metamfetamin ke dalam tubuh memengaruhi efek yang
ditimbulkan terhadap tubuh penggunanya. Penggunaan metamfetamin dengan
cara dihisap dan disuntikkan dapat memberi efek yang kuat dan memabukkan.
Efeknya dapat dirasakan dalam waktu singkat yaitu sekitar 10-30 detik setelah
pemakaian. Pengguna metamfetamin dengan cara ini merasakan sensasi euphoria
hingga 12-14 jam, kemudian diikuti dengan perasaan percaya diri yang tinggi
hingga merasa marah dan melakukan hal-hal yang kasar. Metamfetamin yang
dikonsumsi dengan cara ini dapat memicu rusaknya susunan sistem saraf pusat
atau otak dan menimbulkan ketergantungan yang berkepanjangan. Sementara itu,
penggunaan secara oral dan inhalasi dapat menyebabkan euphoria yang tinggi dan
bertahan lama, namun efek yang ditimbulkan tidak berlangsung cepat. Efeknya
15
baru muncul setelah 3-5 menit dengan penggunaan secara inhalasi dan
membutuhkan waktu 20-25 menit dengan penggunaan secara oral. Rasa euphoria
yang timbul akan berlangsung sekitar 6-12 jam. Menghirup bubuk kristal
metamfetamin dalam jangka waktu lama akan mengakibatkan kerusakan dan
infeksi hidung (Mehling, 2008).
Metamfetamin lebih banyak dipilih oleh para penyalahguna narkoba
karena norepinefrin yang dibebaskan lebih sedikit dibandingkan dengan
Amfetamin, pelepasan norephinefrin ke dalam peredaran darah dapat
menyebabkan meningkatnya tekanan darah, detak jantung dan kadar gula, selain
itu, metamfetamin lebih mudah dibakar dan dihirup. Efek yang dihasilkan dengan
cara menghirup metamfetamin lebih besar dibandingkan efek yang dihasilkan
dengan cara mengonsumsinya secara oral. Hal ini mungkin dikarenakan oleh
cepatnya peningkatan kadar dopamin di dalam otak (Kelly dan Bell, 2018).
2.2.2 Ciri-ciri pengguna
Ciri-ciri fisik yang dapat dilihat secara langsung dari pengguna
metamfetamin yaitu pupil mata yang membesar, kulit memerah, keringat
berlebihan, mulut kering dan gigi bergemeretak, tremor, kulit kering, jerawat, dan
penampilan yang pucat. Pengguna metamfetamin juga akan mengalami beberapa
penyakit diantaranya, sakit kepala, kehilangan nafsu makan, detak jantung tidak
teratur, pernapasan yang cepat, tekanan darah tinggi, suhu tubuh tinggi, diare,
sembelit dan penglihatan yang kabur. Pengguna sabu dalam jangka panjang
kerapkali mengalami luka di kulit mereka yang disebabkan oleh garukan karena
16
rasa gatal berlebihan atau halusinasi akan serangga yang merayapi tubuh mereka
(Krasnova dan Cadet, 2016).
Ciri khas lainnya dari pengguna metamfetamin adalah kehilangan gigi
dengan cepat secara tidak normal, kondisi ini dikenal dengan sebutan “mulut
sabu”. Kondisi ini umumnya paling parah pada pengguna yang menyuntikkan
obat, daripada menelan, merokok, atau menghirupnya. Menurut American Dental
Association, mulut sabu kemungkinan besar disebabkan oleh kombinasi dari
perubahan psikologis dan fisiologis akibat obat yang mengakibatkan xerostomia
(mulut kering), kebersihan mulut yang buruk dalam waktu lama, sering
mengonsumsi minuman berkalori tinggi, berkarbonasi, dan bruksisme (kebiasaan
menggeretakkan gigi) (Krasnova and Cadet, 2016).
2.2.3 Biotransformasi metamfetamin
Metamfetamin dalam tubuh dapat mengalami metabolisme menjadi
metabolitnya yang terjadi dalam hati, tetapi tidak seluruh metamfetamin akan
berubah menjadi metabolitnya sebagian akan tetep dalam bentuk utuhnya
sehingga saat dieksresikan melalui seperti urin sehingga selain metabolitnya
senyawa metamfetamin utuh masih dapat dideteksi dalam urin. Kecepatan dan
jumlah zat yang dikeluarkan dalam bentuk aslinya bergantung pada pH urin.
Keasaman urin akan meningkatkan kecepatan ekskresi atau waktu paruh serta
persentase eksresi zat dalam bentuk asli.
Waktu paruh metamfetamin sedikit lebih panjang dibandingkan dengan
amfetamina yaitu sekitar 9-15 jam. Waktu pendeteksian metamfetamin dalam urin
dipengaruhi oleh lama penggunaannya. Penggunaan tidak rutin atau sekali pakai
17
dapat dideteksi dalam 1-3 hari setelah pemakaian, sedangkan penggunan rutin
atau berulang dapat dideteksi dalam 2-6 hari setelah pemakaian. Sementara itu,
untuk pecandu metamfetamin dapat dideteksi beberapa minggu setelah
pemakaiannya. Proses hasil metabolisme dari metamfetamin dalam tubuh dapat
dilihat pada Gambar 2.3 (Badan Narkotika Nasional, 2019).
Gambar 2.3 Metabolisme Metamfetamin (BNN, 2019)
Proses metabolisme metamfetamin dalam tubuh melalui beberapa jalur
diantaranya, (i) N-Demetilasi yang dikatalisasi oleh sitokrom P450 2D6 akan
menghasilkan amfetamin (ii) Hidroksilasi aromatik oleh sitokrom P450 2D6 akan
menghasilkan 4-hidroksimetamfetamin dan (iii) ß-hidroksilasi yang menghasilkan
norephedrine. Sekitar 70% dari metamfetamin yang diekskresikan melalui urin
dalam 24 jam akan dikeluarkan dalam bentuk aslinya sekitar 30% dalam bentuk
18
metabolit mayornya yaitu amfetamin sekitar 6-20% serta dalam bentuk 4-
hidroksimethamfetamin sekitar 10% (Badan Narkotika Nasional, 2019).
2.3 Urin
Urin merupakan cairan sisa yang diekskresikan oleh ginjal yang kemudian
dikeluarkan tubuh melalui proses urinasi. Tubuh melakukan ekskresi urin untuk
membuang molekul-molekul sisa dalam darah yang telah disaring oleh ginjal
(Corein, 2000). Proses pembentukan urin di dalam ginjal melalui 3 tahapan yaitu
filtrasi (penyaringan), reabsorbsi (penyerapan kembali), dan augmentasi
(penambahan). Secara umum urin noemal memiliki warna kekuningan, urin yang
didiamkan agak lama akan berwarna kuning keruh. Urin memiliki bau yang khas
yaitu berbau amoniak. pH urin berkisar 4,8-7,5 dan dapat menjadi lebih asam jika
mengkonsumsi banyak protein serta dapat menjadi lebih basa jika mengkonsumsi
banyak sayuran, volume urin normal yang dapat dikumpulkan selama 24 jam
adala 800-1600 mL (Uliyah, 2008).
2.3.1 Pemeriksaan metamfetamin dalam Urin
a. Pemeriksaan skrining
Pemeriksaan skrining merupakan pemeriksaan awal pada metamfetamin
dalam urin dengan hasil presumtif positif atau negatif. Secara umum, pemeriksaan
skrining merupakan pemeriksaan yang cepat, sensitif, tidak mahal dengan tingkat
presisi dan akurasi yang masih dapat diterima, walaupun kurang spesifik dan
dapat menyebabkan hasil positif palsu karena terjadinya reaksi silang dengan
substansi lain dengan struktur kimia yang mirip dengan metamfetamin. Salah satu
alat yang sering digunakan pada pemeriksaan skrining adalah strip test. Pada
19
pemiriksaan skrining, metode yang sering digunakan adalah immunoassay dengan
prinsip pemeriksaan yaitu reaksi antigen dan antibodi secara kompotisi. Hasil dari
strip test narkotika ditunjukkan oleh beberapa garis yang tertera pada alat. Prinsip
pembacaan strip test berbeda dengan pembacaan hasil pada test pack kehamilan.
Pada strip test narkotika jika hanya menunjukkan 1 garis merah pada area kontrol
(C) yang berarti urin positif mengandung metamfetamin, tetapi jika pada strip test
yang tertera berupa 2 garis pada area kontrol (C) dan test (T) menunjukkan sampel
urin negatif metamfetamin. Salah satu kelemahan penggunaan strip test yaitu
pembacaan hasil tidak dapat dilihat dalam jangka waktu yang lama, yakni hanya
perlu waktu 5-10 menit setelah pemeriksaan (Indrati, 2015).
Urin merupakan spesimen yang paling sering digunakan untuk
pemeriksaan metamfetamin, karena ketersediaannya dalam jumlah besar dan
memiliki kadar metamfetamin dalam jumlah yang besar. Kelebihan specimen urin
adalah pengambilannya yang tidak invasif dan dapat dilakukan oleh petugas yang
bukan medis. Urin juga merupakan matriks yang stabil dan dapat disimpan dalam
keadaan beku tanpa merusak matriksnya. Kelemahan pemeriksaan urin adalah
mudahnya dilakukan pemalsuan dengan cara substitusi dengan sabu-sabu maupun
diencerkan sehingga mengacaukan hasil pemeriksaan (Chairlan dan Mahode,
2011).
b. Pemeriksaan konfirmasi
Pemeriksaan konfirmasi merupakan pemeriksaan lanjutan yang digunakan
untuk mendukung pemeriksaan sampel urin dengan hasil positif pada pemeriksaan
skrining. Pemeriksaan konfirmasi biasanya dilakukan dengan instrument yang

20
lebih spesifik seperti GC-MS ataupun HPLC hal ini dilakukan untuk mendapatkan
informasi mengenai struktur dari metamfetamin maupun metabolitnya dalam
sampel urin serta menghindari terjadinya hasil positif palsu (Chairlan dan
Mahode, 2011).
2.4 Ekstraksi urin
2.4.1 Ekstraksi cair-cair
Ekstraksi cair-cair menggunakan dua fase pelarut yang tidak saling
bercampur, yang disebut dengan fase air untuk pelarut yang bersifat polar dan fase
organik untuk pelarut yang bersifat nonpolar. Prosedur umum ekstraksi cair-cair
melibatkan ekstraksi analit dari fase air ke dalam pelarut organik yang bersifat
non polar atau semi polar seperti n-heksana, metilbenzen dan diklorometan, akan
tetapi proses sebaliknya juga mungkin terjadi (Khopkar, 1990).
Ekstraksi urin dengan metode ini pada umumnya dilakukan dengan cara
mengekstraksi sejumlah volume sampel urin dalam pelarut organik yang sesuai
dengan penambahan reagen asam/enzim dan reagen pengendap protein. Filtrat
yang didapat setelah divorteks merupakan larutan yang mengandung analit.
Kelemahan dari metode ini adalah apabila jumlah sampel terbatas atau sangat
sedikit dengan kadar kandungan analitnya yang sangat kecil, maka perolehan
kembali (recovery) sejumlah analitnya akan sangat sedikit sehingga sulit untuk
ditentukan kandungannya (Rahmatia, 2016).

21
2.4.2 Ekstraksi fase padat
Ekstraksi fase padat atau SPE merupakan metode ekstraksi fase padat yang
dapat digunakan untuk analisis, pemisahan, purifikasi sampel dalam bidang
industri, farmasi, maupun analisis toksikologi. Metode ekstraksi ini relatif lebih
mudah untuk analisis terhadap senyawa dari materi biologis seperti darah dan urin
yang mengandung banyak matriks (Rahmatia, 2016).
Ekstraksi fase padat memiliki keunggulan jika dibandingkan dengan
ekstraksi cair-cair yaitu proses ekstraksi yang lebih sempurna, pemisahan analit
dari matriks lebih efisien, serta penggunaan pelarut organik yang lebih sedikit.
Metode ekstraksi fase padat merupakan proses pemisahan yang memiliki perentae
recovery yang tinggi yaitu sekitar >99% dan jauh lebih mudah dicapai jika
dibandingkan dengan ekstraksi cair-cair. Pada ekstraksi cair-cair masih diperlukan
ekstraksi beberapa kali untuk memperoleh persentase recovery yang tinggi,
sedangkan dengan ekstraksi fase padat hanya dibutuhkan satu tahap saja
(Rohman, 2009). Adapun kelemahan metode ekstraksi ini adalah banyaknya jenis
cartridge (berisi penjerap tertentu) yang beredar di pasaran sehingga
reprodusibilitas hasil bervariasi jika digunakan cartridge yang berbeda. Selain itu,
dapat terjadi adsorpsi yang bolak-balik pada cartridge (Gandjar dan Rohman,
2014).
22
2.5 Kromatografi gas
Kromatografi adalah suatu metode pemisahan campuran yang didasarkan
pada perbedaan distribusi dari komponen-komponen campuran tersebut diantara
dua fase, yaitu fase diam dan fase gerak. Berdasarkan fase gerak yang digunakan,
kromatografi dibedakan menjadi dua golongan besar yaitu kromatografi gas dan
kromatografi cair (Braithwaite dan Smith, 1999). Pada kromatografi gas, analit
tersekat antara fasa gerak yang berupa gas dan fasa diam yang berupa cairan pada
permukaan padat yang inert atau pada dinding tabung kapiler (Skoog, 2004).
Prinsip kerja dari kromatografi gas adalah sampel yang mudah menguap dan
stabil terhadap panas akan bermigrasi melalui kolom yang mengandung fase diam
dengan suatu kecepatan yang tergantung pada rasio distribusinya. Pada umumnya
solut akan terelusi berdasarkan pada peningkatan titik didih dan afinitasnya
terhadap fase diam. Fase gerak yang berupa gas akan mengelusi solut dari ujung
kolom lalu menghantarkannya ke detektor (Gandjar dan Rohman, 2014). Skema
alat kromatografi gas ditunjukkan pada Gambar 2.4.
Gambar 2.4 Skema Kromatografi Gas (Gandjar dan Rohman, 2014)

23
Komponen dari instrumentasi kromatografi gas terdiri atas beberapa
bagian, sebagai berikut (Vogel, 1994) :
a. Gas pembawa
Gas pembawa (carrier gas) yang digunakan dapat berupa helium, nitrogen,
hidrogen, maupun argon. Gas-gas tersebut dipilih berdasarkan ketersediaannya,
kemurniannya serta tipe detektor yang digunakan.
b. Injektor sampel
Jarum suntik mikro digunakan sebagai injektor sampel. Sampel dimasukkan
secara hati-hati ke dalam blok logam pemanas pada bagian depan kolom. Suhu
pada port sampel harus sama dengan suhu ketika cairan menguap dengan cepat,
tetapi tanpa menguraikan sampel.
c. Kolom
Pemisahan komponen sampel yang sebenarnya teradi di dalam kolom.
Beberapa faktor yang dapat memengaruhi resolusi hasil adalah sifat dasar padatan,
jenis dan jumlah fase cair, metode packing, serta panjang dan suhu kolom.
d. Detektor
Fungsi detektor adalah untuk mengukur sejumlah kecil keberadaan komponen
yang terpisah dari aliran gas pembawa yang meninggalkan kolom. Keluaran dari
detektor akan menuju recorder yang menghasilkan grafik yang disebut
kromatogram. Detektor yang banyak digunakan dalam kromatografi gas antara
lain: detektor konduktivitas termal, detektor ionisasi nyala, dan detektor
penangkap elektron.
24
2.6 Spektrometer massa
Spektrometer massa adalah metode yang meliputi produksi ion-ion dalam
fase gas dari suatu sampel dan hasil pemisahan ion-ion tersebut menurut
massanya. Prinsip kerja spektrometer massa yaitu analit diuapkan dalam keadaan
vakum kemudian dialirkan menuju ruang pengion. Pada ruang pengion, analit
ditembak dengan arus partikel berenergi tinggi menghasilkan ion dengan
kelebihan energi (radikal ion) yang bisa memecah dan tidak bisa memecah. Ion
yang bisa memecah disebut ion induk (parent ion), ion induk akan memecah
menjadi ion positif, negatif dan pecahan yang netral. Ion negatif akan tertarik ke
anoda untuk dinetralkan dan terhisap oleh pompa vakum bersama-sama dengan
fragmen netral, sedangkan partikel bermuatan positif menuju ke tabung analisator
dan dibelokkan oleh medan magnet sehingga lintasannya melengkung
(Dachriyanus, 2004).
Gambar 2.5 Skema Spektrometer Massa (Dachriyanus, 2004)

25
Pada spektrometer massa, hanya ion-ion positif yang terdeteksi dan
dipresentasikan sebagai tabel atau grafik yang memuat puncak m/z
(massa/muatan) ion-ion yang intensitasnya tergantung pada kelimpahan relatif ion
tersebut. Puncak spektrum tinggi disebut base peak yang intensitasnya dianggap
100%, sedangkan puncak-puncak dengan intensitas relatif di berbagai nlai m/z
dinamakan spektrum massa dan untuk setiap senyawa sifatnya sangat spesifik.
Pecahnya suatu ion-ion atau molekul menjadi fragmen-fragmen bergantung pada
kerangka karbon dan gugus fungsional yang ada. Oleh karena itu, struktur dan
massa fragmen memberikan petunjuk mengenai struktur molekul induknya
(Dachriyanus, 2004).
2.7 Validasi metode
Validasi metode analisis merupakan proses yang dilakukan melalui
percobaan laboratorium guna mengetahui karakteristik suatu prosedur telah
memenuhi persyaratan untuk aplikasi analisis (USP XXXVII, 2014). Validasi
metode juga merupakan suatu proses untuk memastikan bahwa prosedur yang ada
memenuhi standar reliabilitas, akurasi, dan presisi sesuai tujuan yang diharapkan
(Ahuja dan Dong, 2005). Validasi metode dilakukan untuk menjamin bahwa
metode analisis akurat, spesifik, reprodusibel dan tahan pada kisaran analit yang
akan dianalisis (Gandjar dan Rohman, 2014). Menurut Harmita (2004) validasi
metode analisis adalah suatu tindakan parameter tertentu, berdasarkan percobaan
laboratorium untuk membuktikan bahwa parameter tersebut memenuhi
persyaratan dalam penggunaannya.

26
Metode analisis harus divalidasi dengan tujuan memastikan bahwa
parameter kerjanya cukup mampu untuk mengatasi masalah analisis, karenanya
suatu metode harus divalidasi ketika (Gandjar dan Rohman, 2014) :
1. Metode baru dikembangkan untuk mengatasi masalah analisis tertentu
2. Metode yang sudah baku direvisi untuk menyesuaikan perkembangan atau
karena munculnya suatuu masalah yang mengarah bahwa metode baku
tersebut harus direvisi
3. Penjaminan mutu mengindikasikan bahwa metode baku telah berubah
seiring berjalannya waktu
4. Metode baru yang digunakan di laboratorium yang berbeda, dikerjakan
oleh analis yang berbeda, atau dikerjakan dengan alat yang berbeda
5. Untuk mendemonstrasikan kesetaraan antara dua metode seperti metode
baru dan metode baku.
2.7.1 Linieritas
Linieritas adalah kemampuan suatu metode untuk memperoleh hasil-hasil
uji yang secara langsung proposional dengan konsentrasi analit pada kisaran yang
diberikan. Linieritas suatu metode merupakan ukuran seberapa baik kurva
kalibrasi yang menghubungkan antara respon (y) dengan konsentrasi (x). linieritas
dapat diukur dengan melakukan pengukuran tunggal pada konsentrasi yang
berbeda-beda. Data yang diperoleh selanjutnya ditentukan nilai kemiringan
(slope), intersep, dan koefisien korelasinya (Gandjar dan Rohman, 2014).

27
2.7.2 Batas deteksi dan batas kuantifikasi
Batas deteksi merupakan konsentrasi analit terendah yang masih dapat
dideteksi meskipun tidak selalu dapat dikuantifikasi. Batas kuantifikasi adalah
konsentrasi analit terendah dalam sampel yang dapat ditentukan dengan presisi
dan akurasi pada kondisi analisis yang digunakan (Yuwono dan Indrayanto,
2005).
2.7.3 Akurasi
Akurasi merupakan ketepatan metode analisis atau kedekatan antara nilai
terukur dengan nilai sebenarnya. Akurasi diukur sebagai banyaknya analit yang
diperoleh kembali pada suatu pengukuran dengan melakukan spiking pada suatu
sampel. Untuk pengujian senyawa obat, akurasi diperoleh dengan
membandingkan hasil pengukuran dengan bahan standar. Terdapat tiga cara yang
dapat digunakan untuk menentukan akurasi suatu metode analisis yaitu :
1. Membandingkan hasil analisis dengan CMR dari organisasi internasional
2. Uji perolehan kembali (recorvery) dengan memasukkan analit ke dalam
matriks blanko
3. Penambahan baku pada matriks sampel yang mengandung analit (metode
adisi standar).
2.7.4 Presisi
Presisi merupakan ukuran keterulangan metode analisis dan biasanya
diwakilkan sebagai simpangan baku relative dari sejumlah sampel yang berbeda
signifikan secara statistik. Penentuan presisi dapat dibagi menjadi tiga kategori
yaitu keterulangan (repeatability), presisi antara (intermediate precision), dan

28
ketertiruan (reproducibility). Keterulangan merupakan ketepatan yang ditentukan
pada laboratorium yang sama oleh satu analis serta menggunakan peralatan dan
dilakukan pada hari yang sama. Presisi antara merupakan ketepatan pada kondisi
percobaan pada laboratirum yang sama oleh analis, peralatan, reagen, kolom dan
pada hari yang berbeda. Ketertiruan mempresentasikan presisi hasil yang didapat
pada tempat percobaan yang lain dengan tujuan untuk memverifikasikan bahwa
metode akan menghasilkan hasilyang sama pada fasilitas tempat yang berbeda
(Yuwono dan Indrayanto, 2005). Ukuran ketelitian (presisi) biasanya dilihat dari
nilai simpangan baku (SD) dan standar deviasi relative (RSD).
2.7.5 Stabilitas
Memperoleh hasil-hasil analisis yang reprodusible dan reliable, maka
sampel, reagen, dan baku yang digunakan harus stabil pada waktu tertentu.
Stabilitas merupakan tahap prevalidasi yang penting untuk menunjukkan stabilitas
yang cukup selama jangka waktu analisis. Variasi area puncak analit harus
berkisar ±1-2% bila dibandingkan dengan area puncak awal (Indrayanto, 2011).
Menurut USP XXXVIII (2014) rentang kriteria penerimaan stabilitas larutan
standar yaitu antara 98%-102% dibandingkan dengan hasil analisis awal.
2.7.6 Selektifitas
Selektifitas adalah kemampuan suatu metode untuk mengukur analit yang
dituju secara tepat dan spesifik dengan adanya komponen-komponen dalam
matriks sampel seperti ketidakmurnian, produk degradasi dan komponen matriks
(Lehotay dkk, 2005). Selektifitas dalam dua kategori yaitu:

29
1. Uji identifikasi, selektifitas ditunjukkan dengan kemampuan suatu metode
analisis untuk membedakan antara senyawa yang memiliki struktur
molekul yang hampir sama.
2. Uji kemurnian atau pengukuran, selektifitas ditunjukkan oleh daya pisah
dua senyawa yang berdekatan. Senyawa-senyawa tersebut biasanya adalah
komponen utama atau komonen aktif, ataupun pengotor. Jika dalam suatu
uji terdapat pengotor maka metode uji harus tidak berpengaruh dengan
adanya pengotor ini (Lehotay dkk, 2005)

BAB III
KERANGKA BERPIKIR, KONSEP PENELITIAN DAN HIPOTESIS
3.1 Kerangka berfikir
Jumlah kasus penyalahgunaan obat di Indonesia dalam 5 tahun terakhir
paling didominasi oleh MA, dimana jumlah kasusnya meningkat lebih dari 1000
kasus per tahun. Pembuktian yang dilakukan di laboratorium bukan hanya
terhadap barang bukti fisik seperti kristal, serbuk, atau tablet tetapi juga sampel
berupa hasil metabolisme berupa urin. Setiap senyawa obat dalam tubuh dapat
mengalami biotransformasi menjadi metabolitnya, senyawa MA sendiri dalam
tubuh mampu berubah menjadi beberapa metabolitnya seperti amfetamin dan 4-
hidroksimetamfetamin yang kemudian diekskresikan melalui urin, sehingga untuk
membuktikan keberadaan MA dalam urin tidak hanya berdasarkan munculnya
puncak MA tetapi juga dari puncak metabolitnya (Hornbeck, 2001). Pengujian
kandungan MA dalam urin memiliki kelemahan untuk dimanipulasi dengan
menambahkan sabu-sabu ke dalam urin normal sehingga akan mempengaruhi
hasil analisis (Asya, 2009).
Hasil analisis sampel urin pengguna sabu-sabu dengan sampel urin normal
yang ditambahkan metamfetamin di luar tubuh memiliki perbedaan, dimana urine
notmal yang ditambahkan langsung metamfetamin di luar tubuh tidak mengalami
proses biotransformasi menjadi metabolitnya, sehingga saat dianalisis dengan GC-
MS puncak kromatogram dari metabolinya seperti amfetamin, 4-hidroksi
metamfetamin, maupun metabolit MA lainnya tidak muncul, namun dalam
praktiknya kendala yang dihadapi yaitu stabilitas senyawa MA dan metabolitnya
30
31
pada waktu penyimpanan dan suhu yang berbeda-beda dikhawatirkan akan
mempengaruhi stabilitas MA didalam urin tersebut, sehingga akan mempengaruhi
hasil analisis. Enzim yang dieksresikan bersama dengan urin masih dapat bekerja
mendegradasi obat, selain itu penyimpanan sampel urin pada suhu ruang akan
menyebabkan pertumbuhan mikroorganisme yang dapat menghasilkan enzim
yang menyebabkan terjadinya degradasi obat (Kerrigan, 2008).
Salah satu enzim yang dapat mendegradasi MA yaitu sitokrom P450, enzim
ini dapat bekerja pada suhu ruang dan bekerja secara efisien dalam suhu yang
relatif tinggi, sitokrom P450 dapat mendegradasi MA menjadi metabolit
mayornya salah satunya menjadi amfetamin, 4-hidroksimetamfetamin, ataupun
norephedrine, selain itu keberadaan enzim sitokrom P450 dapat menyebabkan
menurunnya kadar MA maupun metabolitnya dalam sampel urin. Penyimpanan
urin yang tidak tepat juga menyebabkan kerusakan matrik sampel urin sehingga
saat analisis akan memunculkan banyak puncak kromatogram baru dari reference
(pengganggu) yang akan mempersulit dalam menganalisis ada tidaknya puncak
kromatogram dari MA maupun metabolitnya (Jimenez dkk, 2006).
Berdasarkan uraian di atas, penelitian ini dilakukan untuk mencari suhu
optimal penyimpanan sampel urin pengguna sabu-sabu dan sampel urin normal
yang ditambahkan sabu-sabu terhadap karakteristik kandungan MA dan
metabolitnya serta menghitung kadar senyawa MA dalam sampel urin dengan
berbagai kondisi suhu penyimpanan dalam waktu 14 hari penyimpanan, serta
sebagai acuan dalam pemeriksaan dalam menentukan kadar metamfetamin pada
sampel urin pengguna MA.

32
3.2 Konsep penelitian
Untuk mengetahui suhu optimal penyimpanan urin terhadap

kandungan metamfetamin serta metabolitnya dan kadar MA
dengan GC-MS
Prosses persiapan pengumpulan sampel urin normal,

urin normal yang di tambhkan MA, dan urin pengguna
Metamfetamin untuk dilakukan pemeriksaan di
laboratorium.
Proses pengiriman sampel urin ke laboratorium dan

pemeriksaan pengujian di laboratorium pun tidak dapat
dirampungkan dalam waktu sehari, namun dalam batas
waktu maksimal 14 hari sampel harus dianalisis dan
didapatkan hasil.
Suhu penyimpanan mempengaruhi kandungan MA dan

metabolitnya dalam urin sengingga dilakukan
penyimpanan pada suhu penyimpanan sampel 4 0C dan
250C selama 14 hari
Perbedaan hasil analisis puncak kromatogram MA dan

karakeristik metabolitnya dalam sampel urin normal
urin pengguna sabu-sabu dan urin normal yang
ditambahkan sabu-sabu dengan GC-MS Hasil analisis ini digunakan
sebagai acuan metode
pemeriksaan di
laboratotium untuk sampel
Hasil analisis puncak kromatogram MA dan metabolitnya
urin normal, urin pengguna
serta suhu optimum penyimpanan terhadap kadar MA
MA dan urin normal yang
pada sampel urin pengguna dan sampel urin normal
ditambahkan MA .
yang ditambahkan MA dengan GC
33
3.3 Hipotesis
Berdasarkan tinjauan pustaka dan rumusan masalah diatas dapat diajukan
hipotesis sebagai berikut:
1. Pada urin normal tidak terdeteksi kandungan narkotika dan tidak adanya
karakteristik puncak pada kromatogram GC dari senyawa metamfetamin
maupun metabolitnya.
2. Pada urin normal yang sengaja ditambahkan metamfetamin hanya terdeteksi
puncak kromatogram dari senyawa MA sedangkan karakteristik puncak
kromatogram metabolitnya tidak muncul. Serta kadar MA stabil pada suhu 4oC
ditandai dengan tidak terjadinya penurunan intensitas secara signifikan pada
puncak kromatogram MA maupun metabolitnya.
3. Pada urin pengguna sabu-sabu terdeteksi puncak kromatogram dari MA dan
karakteristik puncak kromatrogram pada metabolitnya, serta MA stabil pada
suhu 4oC ditandai dengan tidak terjadinya penurunan intensitas secara
signifikan pada puncak kromatogram MA maupun metabolitnya.
4. Adanya perbedaan karakteristik puncak kromatrogram GC pada MA dan
metabolitnya serta penurunan kadar MA pada suhu penyimpanan sampel urin
25oC.
BAB IV
METODE PENELITIAN
4.1 Rancangan penelitian

Sampel urin normal dikumpulkan dari 3
orang dengan jenis kelamin yang
berbeda sebanyak 120 mL masing-
masing orang
Urin Normal (UN) Urin Normal + MA (UN + MA)

sebanyak 60 mL sebanyak 60 mL
Sampel urin masing-masing diuji Sampel urin masing-masing diuji

awal dengan test kit MA dan awal dengan test kit MA dan
dibagi menjadi 3 bagian dibagi menjadi 3 bagian
20 mL urin 20 mL urin 20 mL urin 20 mL urin 20 mL urin 20 mL urin

normal normal normal normal normal normal (UN3
(UN1) (UN2) (UN3) (UN1 + MA) (UN2 + MA) + MA)
Disimpan Disimpan Disimpan Disimpan

dalam 4oC dalam 25oC dalam 4oC dalam 25oC
selama 14 selama 14 selama 14 selama 14
hari hari hari hari
Diekstraksi dan dianalisis dengan GCMS Diekstraksi dan dianalisis dengan GCMS
60 mL urin Test kit MA 60 mL urin Test kit MA 60 mL urin

pengguna pengguna pengguna
(UP1) (UP2) (UP3)
Kelompok 1 Kelompok 2 Kelompok 3

- 20 mL UP1 - 20 mL UP1 - 20 mL UP1
- 20 mL UP2 - 20 mL UP2 - 20 mL UP2
- 20 mL UP3 - 20 mL UP3 - 20 mL UP3
Langsung Disimpan dalam suhu 4oC Disimpan dalam suhu 25oC

diekstraksi dan selama 14 hari kemudian selama 14 hari kemudian
dianalisis dengan diekstraksi dan dianalisis diekstraksi dan dianalisis
GC-MS dengan GC-MS dengan GC-MS
34
35
4.2 Lokasi dan waktu penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Narkoba Forensik Bidlabfor Polda
Bali, lama waktu penelitian sesuai dengan tahapan penelitian yang meliputi tahap
pertama proses pengumpulan sampel urin dari beberapa kelompok yaitu urin
normal, urin yang ditambahkan metamfetamin, dan urin pengguna sabu-sabu,
yang membutuhkan waktu kurang lebih 2 bulan. Tahap berikutnya yaitu optimasi
suhu penyimpanan sampel urin serta menentukan karakteristik kandungan MA
maupun metabolitnya dan menentukan kadar MA dalam urin pengguna sabu-sabu
aktif dan urin normal yang ditambahkan metamfetamin, tahap ini membutuhkan
waktu kurang lebih 2 bulan. Sehingga enelitian dilakukan membutuhkan waktu 4
bulan pada bulan November 2021 s/d Februari 2022.
4.3 Ruang lingkup penelitian
Penelitian ini difokuskan pada optimasi suhu penyimpanan sampel urin
selama 14 hari terhadap analisis karakteristik kandungan MA serta metabolitnya
dalam sampel urin normal, urin pengguna sabu-sabu dan urin normal yang
ditambahkan metamfetamin dan menentukan kadar MA dalm urin pengguna sabu-
sabu.
4.4 Penentuan sumber sampel data
Analisis kandungan Metamfetamin serta metabolitnya dalam sampel urin
yang disimpan pada suhu penyimpanan yang berbeda-beda diamati di
laboratorium menggunakan GC-MS dan kadar metamfetamin dalam urin
menggungakan GC. Sampel urin didapatkan dari hasil pengumpulan sampel urin
pengguna sabu-sabu oleh penyidik Narkoba dan jajaran SatRes Narkoba Polda
36
Bali, sampel urin normal di kumpulkan dari sukarelawan yang negatif narkotika
dan urin normal tersebut ditambahkan metamfetamin dan selanjutnya di preparasi
di laboratorium menggunakan ekstraksi padat-cair atau SPE (solid phase
extraction).
4.5 Variabel penelitian
Variabel penelitian yang dianalisis pada penelitian ini yaitu :
a) Variabel bebas : suhu penyimpanan sampel urin
b) Variabel terkontrol : waktu penyimpanan dan pH ekstraksi
c) Variabel terikat : analisis MA dan metabolitnya serta kadar MA
4.6 Alat dan bahan penelitian
Peralatan kulkas bersuhu 4 dan 25oC. Sementara untuk ekstraksi sampel urin
antara lain gelas beker ukuran 50 mL, pipet tetes, tabung (catridge) SPE, rak
tabung SPE, gelas beker ukuran 50 mL, spatula, pinset, lemari asam, pipet mikro,
tabung centrifuge, alat centrifuge dan GC-MS.
Bahan yang digunakan pada penelitian tersebut yaitu sampel urin normal,
urin normal yang ditambahkan metamfetamin, dan urin pengguna sabu-sabu yang
didapat dari hasil pengumpulan oleh penyidik Narkoba dan jajaran SatRes
Narkoba Polda Bali, test kit MA yang digunakan untuk uji pendahuluan terhadap
sampel urin yang didapat dari PT Rasani Medika, serta NaOH 2N, kertas pH,
kloroform p.a, metanol p.a, exterlude silika gel.

37
4.7 Kondisi GC-MS
Instrumen analisis yaitu GC-MS Aligent seri 7890 A dengan tipe kolom
HP5-MS dengan panjang kolom 30 meter dengan diameter 0,25 mm, fase gerak
berupa gas He. Kondisi GC-MS suhu injector dan suhu interfase 250 oC, suhu ion
source 230oC, laju alir 1,3 mL/min, splitless, solven delay 3 menit, mass scanning
30 to 600, volume injector 1μL, suhu awal oven 70 oC ditahan selama 3 menit,
kenaikan suhu 60oC/min sampai 280oC ditahan selama 4 menit.
4.8 Prosedur penelitian
4.8.1 Pengumpulan dan uji pendahuluan sampel urin
Sampel urin yang digunakan yaitu sampel urin yang berasal dari 2
kelompok orang normal dan pengguna sabu-sabu. Kelompok satu berisi 3 orang
normal yang akan diambil urinnya sebanyak 120 mL masing-masing orang,
setelah itu urin ini akan dibagi menjadi 2 kelompok urin normal yang akan diberi
kode UN dan urin yang ditambahkan metamfetamin sebanyak 0,001 gram yang
akan diberi kode UN+MA. Sementara kelompok dua merupakan sampel urin
sebanyak masing-masing 60 mL yang berasal dari pengguna sabu-sabu dengan
kode UP1, UP2, dan UP3. Semua kelompok sampel urin yang telah dikumpulkan
tersebut diuji pendahuluan terlebih dahulu menggunakan test kit MA.
Sampel urin pada masing-masing kelompok diambil sebanyak kurang lebih
2 mL kemudian dimasukkan dalam gelas beker, selanjutnya test kit dicelupkan
secara vertikal (arah panah menunjuk tegak lurus kearah sampel) ke dalam sampel
urin tersebut selama 10-15 detik. Perlu diperhatikan saat mencelupkan test kit
jangan sampai sampel urin melewati batas garis paling bawah sample zone (S).
38
Test kit lalu diletakkan di permukaan datar yang bersih, hasil yang diperoleh dapat
dibaca antara 10-30 menit setelah pencelupan dalam sampel. Sampel urin normal
yang ditambahkan sabu-sabu dan urin pengguna sabu-sabu yang dikumpulkan
harus menunjukkan hasil yang positif pada test kit dengan ditandai terbentuknya
satu pita berwana merah muda pada kontrol (C), sementara urin normal harus
menunjukkan hasil negatif pada test kit dengan ditandai terbentuknya dua pita
berwarna merah muda pada kontrol dan test (T). Setelah itu dilanjutkan dengan
tahap penyimpanan urin.
Sampel urin pada masing-masing kelompok dibagi menjadi 3 untuk
selanjutnya masing-masing disimpan pada suhu yang berbeda yaitu suhu 4 dan
250C selama 14 hari dan ada pula yang langsung diekstraksi dan dianalisis dengan
GC-MS. Setelah 14 hari penyimpanan masing-masing sampel urin tersebut
diekstraksi menggunakan metode ekstraksi padat-cair dan dilakukan uji
konfirmasi menggunakan instrumen MS untuk melihat karakteristik kandungan
MA serta metabolitnya dan kadar MA dengan GC.
4.8.2 Uji konfirmasi sampel urin
Ekstraksi sampel urin dilakukan dengan perlakuan yang sama menggunakan
metode ekstraksi padat-cair. Tabung SPE disiapkan dengan melapisi bagian
bawah tabung menggunakan kertas saring, kemudian exterlude (silika gel)
ditambahkan ke dalam tabung SPE hingga memenuhi 3/4 bagian tabung.
Selanjutnya masing-masing urin pada tiap kelompok dimasukkan ke dalam tabung
SPE, dan dibiarkan beberapa menit agar seluruh urin membasahi exterlude (silika
39
gel) dalam tabung, kemudian ditambahkan 20 mL kloroform ke dalam tabung,
filtrat yang di dapat ditampung dalam gelas beker (1), untuk selanjutnya diuapkan.
Setelah seluruh kloroform menguap ke dalam gelas beker (1) ditambahkan
sekitar ±175 μL metanol sambil sesekali gelas beker digoyangkan, kemudian
ekstrak dipindahkan ke dalam tabung centrifuge. Selanjutnya sampel di
sentrifugasi selama 5 menit dengan kecepatan 3000 rpm. Kemudian sampel
dianalisis dengan GC-MS dan dianalisis puncak kromatrogam dan pecahan ion
MS yang mengidentifikasikan keberadaan senyawa MA serta metabolitnya pada
masing-masing sampel urin dengan suhu penyimpanan yang berbeda selain itu,
ditentukan kadar MA dalam sampel urin normal yang ditambahkan metamfetamin
dan urin pengguna sabu-sabu menggunakan GC.
4.8.3 Preparasi larutan standar MA
Sebanyak 1 mg standar MA ditimbang, kemudian dilarutkan dengan
metanol dalam labu ukur 10 mL hingga tanda batas sehingga diperoleh larutan
standar MA dengan konsentrasi 100 ppm. Kemudian larutan standar MA 100 ppm
dipipet berturut-turut 5, 4, dan 2 mL dan dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL,
kemudian ditambahkan metanol hingga tepat tanda batas sehingga didapatkan
larutan standar dengan konsentrasi masing-masing 50, 40, dan 20 ppm. Larutan 10
ppm akan dibuat dengan memipet larutan standar 20 ppm sebanyak 5 mL dan
dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL, kemudian ditambahkan metanol hingga
tepat tanda batas. Setelah itu, dari konsentrasi 10 ppm dipipet berturut-turut 0,8 ;
0,4 ; dan 0,2 mL akan dibuat seri konsentrasi 8, 4, dan 2 ppm sebanyak 1 mL.
40
4.8.4 Validasi metode
Validasi metode dilakukan meliputi linearitas, uji akurasi, presisi, batas
deteksi (LOD), dan batas kuantisasi (LOQ).
a) Linieritas
Uji linieritas dilakukan dengan cara satu seri konsentrasi larutan standar
dengan konsentrasi 50, 40, 20, 10, 8, 4, dan 2 ppm masing-masing diinjeksikan
sebanyak 1,0 μL ke dalam injektor kromatografi gas, kemudian dilakukan
pengamatan luas puncak. Data yang diperoleh dibuat regresi linier y = bx + a dan
ditentukan koefisien determinasinya, r2 ≥ 0,95 maka metode tersebut memenuhi
parameter linieritas (Widya dkk., 2018).
b) Uji Akurasi dengan persen perolehan kembali (%recorvery)
Uji perolehan kembali dilakukan dengan metode adisi. Metode ini
dilakukan dengan cara menambahkan sejumlah larutan standar MA masing-
masing ke dalam sampel urin pengguna narkotika. Kemudian diinjeksikan ke
dalam injektor dan dihitung %recorvery dengan persamaan berikut:
(C F −C A )
%recorvery= ¿ x 100 %
CA
Keterangan :
CF = konsentrasi total sampel + standar
CA = konsentrasi sampel
CA* = konsentrasi standar yang ditambahkan
c) Uji Presisi
Uji presisi dilakukan melalui uji perolehan kembali dengan tiga kali
ulangan menggunakan standar MA 10 ppm. Standar diinjeksikan ke dalam GS. Uji
presisi dilihat dari nilai RSD, syarat RSD ≤ 2%. Nilai SD dan RSD dihitung
41
dengan persamaan berikut:
SD=
√ ∑ ( Xi−X )2
n−1
RSD=
SD
X
x 100 %
Keterangan :
Xi = hasil analisis ke-1
X = rata-rata pengukuran
n = jumlah ulangan
d) Batas Deteksi (LOD) dan Batas Penetapan (LOQ)
LOD dan LOQ ditentukan berdasarkan nilai standar deviasi. Batas deteksi
(LOD) dihitung sebesar tiga kali standar deviasi dibagi nilai slope. Batas
penetapan (LOQ) dihitung sebesar sepuluh kali standar deviasi dibagi slope.
3 ( SD ) 10 (SD )
LOD= LOQ=
b b
e) Selektifitas
Dalam kromatografi gas (GC) selektivitas dapat dihitung sebagai resolusi
(Rs) yaitu perbedaan antara waktu retensi 2 puncak yang saling berdekatan (ΔtR =
tR2-tR1) dibagi dengan rata-rata lebar puncak.
Nilai Rs harus mendekati atau lebih dari 1,5 karena akan memberikan
pemisahan puncak yang baik (base line resolution).
BAB V
HASIL PENELITIAN
5.1 Uji pendahuluan sampel urin
Uji pendahuluan terhadap masing-masing sampel urin dilakukan
menggunakan test kit MA, pengujian merupakan uji skrining awal untuk
mengetahui sampel urin positif dan negatif MA. Hasil uji pendahuluan masing-
masing sampel urin disajikan pada Tabel 5.1.
Tabel 5.1 Hasil uji pendahuluan masing-masing sampel urin

Sampel urin Hasil pengamatan Gambar
Urin normal
(UN) Negatip MA
Urin normal + Positip MA

MA (UN + MA)
Urin pengguna
(UP) Positip MA
42
43
Hasil uji pendahuluan sampel urin menggunakan test kit MA dapat dikatakan
mengandung MA (positif MA) jika pada test kit MA menunjukkan hanya satu
garis berwarna merah muda, sementara jika pada test kit terbaca dua garis
berwarna merah muda maka urin dapat dikatakan tidak mengandung MA (negatif
MA).
5.2 Uji konfirmasi sampel urin
5.2.1 Sampel urin normal
Uji konfirmasi sampel urin normal dilakukan menggunakan instrumen GC-
MS, pengujian ini bertujuan sebagai kontrol untuk membandingkan kromatogram
urin normal sebelum penambahan MA dan sesudah penambahan MA, guna
mencegah adanya indikasi kecurangan yang dilakukan pada sampel urin.
a. Urin normal kode UN X
Gambar kromatogram hasil injeksi sampel urin normal dengan kode UN X
pada GC-MS dengan mode full scan disajikan pada Gambar 5.1.
(a)
44
(b)
(c)
Gambar 5.1 Kromatogram sampel urin normal dengan kode (UN X) hari-1 (a),
kromatogram sampel urin normal (UN X) hari ke-14 pada suhu 4 0C
(b), dan kromatogram sampel urin normal (UN X) hari ke-14 pada
suhu 250C (c).
45
Kromatogram dari sampel urin normal (UN X) pada berbagai suhu
penyimpanan tidak menunjukkan adanya puncak kromatogram pada waktu retensi
5,27-5,28 menit yang merupakan puncak kromatogram khas MA. Hasil library
senyawa yang terkandung dalam urin normal dengan kode UN X disajikan pada
Tabel 5.2.
Tabel 5.2 Hasil library senyawa dalam urin normal kode UN X

Suhu (oC) Nama Senyawa TR
Tanpa Penyimpanan Bentazepam 4,937
Lauric acid methyl ester 6,139
Caffeine 6,882
Oleamide 8,040
Promethazine
4 oC selama 14 hari Nonanamide 6,642
Dodecanamide
Tetradecanamide
Caffeine 6,881
Tetradecanamide 7,050
Hexadecanamide
9-Octadecenamide 7,476
8,042
Dodecanamide 7,510
25 C selama 14 hari
o
Cotinine 6,607
Caffeine 6,881
Dodecanamide
Hexadecanamide 7,510
8,043
Androsterone 8,884
Benzoic acid 8,948
Epiandrosterone 9,059
Dehydrostestosterone 9,353
Hydroxyandrosterone 10,024
46
b. Urin normal Y kode UN Y
Gambar kromatogram hasil injeksi sampel urin normal dengan kode UN Y
(a)
(b)
47
(c)
Gambar 5.2 Kromatogram sampel urin normal dengan kode (UN Y) hari-1 (a),
kromatogram sampel urin normal (UN Y) hari ke-14 pada suhu 4 0C
(b), dan kromatogram sampel urin normal (UN Y) hari ke-14 pada
suhu 250C (c).
Kromatogram dari sampel urin normal kode UN Y pada berbagai suhu
senyawa yang terkandung dalam urin normal dengan kode UN Y disajikan pada
Tabel 5.3.
48
Tabel 5.3 Hasil library senyawa dalam urin normal kode UN Y

Suhu (oC) Nama Senyawa tR
Tanpa Penyimpanan Dodecanoic acid 6,210
4 oC selama 14 hari Dodecanoid acid 6,138
Octanamide 6,491
9 Octadecenamide
9-octadecenamide 8,044
25 oC selama 14 hari Dodecanamide 6,487
Octanamide
Nonanamide
Hexadecanamide
Undecanamide 7,051
Tetradecanamide
Hexadecanol 7,266
Nonadecanol
9-Octadecanamide 7,740
8,060
c. Urin normal kode UN Z
Gambar kromatogram hasil injeksi sampel urin normal dengan kode UN Z
49
(a)
(b)
50
(c)
Gambar 5.3 Kromatogram sampel urin normal dengan kode (UN Z) hari-1 (a),
kromatogram sampel urin normal (UN Z) hari ke-14 pada suhu 40C
(b), dan kromatogram sampel urin normal (UN Z) hari ke-14 pada
suhu 250C (c).
Kromatogram dari sampel urin normal kode UN Z pada berbagai suhu
senyawa yang terkandung dalam urin normal dengan kode UN Z disajikan pada
Tabel 5.4.
Tabel 5.4 Hasil library senyawa dalam urin normal kode UN Z

Tanpa Penyimpanan Dodecanoic acid 6,210
Dodecanamide 6,642
Caffeine 6,881
Tetradecanamide
4 C selama 14 hari
o
Caffein 6,881
51
Theobromin 6,993
Tetradecanamide
25 oC selama 14 hari Octanamide 6,487

Nonanamide
Hexadecanamide
Caffein 6,882
Hexanamide 7,509
Tetradecanamide
9-Octadecenamid 8,43
5.2.2 Sampel urin normal yang ditambahkan sabu-sabu
Uji konfirmasi dilakukan menggunakan instrumen GC-MS terhadap sampel
urin normal UN yang ditambahkan MA, pengujian ini bertujuan untuk melihat
puncak kromatogram MA pada sampel urin tersebut jika dilakukan penambahan
MA dari luar tubuh, juga sebagai acuan apabila terjadi kecurangan yang diduga
dilakukan terhadap sampel urin.
a. Urin normal yang ditambahkan sabu-sabu kode UN X + MA
Gambar kromatogram hasil injeksi sampel urin normal yang ditambahkan
sabu-sabu dengan kode UN X + MA pada GC-MS dengan mode full scan
disajikan pada Gambar 5.4.

52
(a)
(b)
53
(c)
Gambar 5.4 Kromatogram sampel urin normal + MA dengan kode (UN X +

MA) hari-1 (a), kromatogram sampel urin normal + MA (UN X +
MA) hari ke-14 pada suhu 40C (b), dan kromatogram sampel urin
normal + MA (UN X + MA) hari ke-14 pada suhu 250C (c).
Kromatogram dari sampel urin normal ditambahkan sabu-sabu pada berbagai
suhu penyimpanan menunjukkan adanya puncak kromatogram pada waktu retensi
senyawa yang terkandung dalam urin normal yang ditambahkan MA dengan kode
UN X + MA disajikan pada Tabel 5.5.

54
(UN X + MA)
Methamphetamine 5,280
Tributil phosphate 6,125
Tanpa Penyimpanan
Caffeine 6,881
Dodecanoic acid 6,138
4 oC selama 14 hari Methyl ester undecanoic acid
Caffeine 6,881
25 C selama 14 hari
o
Caffeine 6,880
b. Urin normal yang ditambahkan sabu-sabu kode UN Y + MA
sabu-sabu dengan kode UN Y + MA pada GC-MS dengan mode full scan
(a)
55
(b)
(c)
Gambar 5.5 Kromatogram sampel urin normal + MA dengan kode (UN Y +

MA) hari-1 (a), kromatogram sampel urin normal + MA (UN Y +
normal + MA (UN Y + MA) hari ke-14 pada suhu 250C (c).
56
UN Y + MA disajikan pada Tabel 5.6.
(UN Y + MA)
Tanpa Penyimpanan Methamphetamine 5,276
Dodecanoid acid 6,213
Hexadecanoic acid 6,998
Hexadecanamide
9-octadecanamide 8,045
4 C selama 14 hari
o
Tetradecanamide
Oktadecanamide 8,104
25 oC selama 14 hari Methamphetamine 5,277
Cyclohexanone 5,900
tetradecanamide
9-octadecanamide 8,053
Androstenedione 9,728
13-docosenamide 10,062
c. Urin normal yang ditambahkan sabu-sabu kode UN Z + MA
sabu-sabu dengan kode UN Z + MA pada GC-MS dengan mode full scan

57
(a)
(b)
58
(c)
Gambar 5.6 Kromatogram sampel urin normal + MA dengan kode (UN Z +

MA) hari-1 (a), kromatogram sampel urin normal + MA (UN Z +
normal + MA (UN Z + MA) hari ke-14 pada suhu 250C (c).
UN Z + MA disajikan pada Tabel 5.7.

59
(UN Z + MA)
Tetradecanoic acid 6,606
Tanpa Penyimpanan
Caffeine 6,879
n-Hexadecanoic acid 6,997
Methyl ester phenol
4 oC selama 14 hari Caffeine 6,881
13-Docosenamide 10,050
Caffeine 6,880
25 oC selama 14 hari Hexadecanoic acid 6,933
13-Docosenamide 10,055
5.2.3 Sampel urin pengguna sabu-sabu
Uji konfirmasi juga dilakukan terhadap sampel urin pengguna sabu-sabu
dengan kode UP1, UP2, dan UP3 pengujian ini bertujuan untuk mengetahui
metabolit MA yang terbaca sebagai kromatogram dan juga mengetahui stabilitas
MA dan metabolinya.
a) Urin pengguna sabu-sabu dengan kode UP 1
Gambar kromatogram hasil injeksi sampel urin pengguna sabu-sabu dengan
kode UP pada GC-MS dengan mode full scan disajikan pada Gambar 5.7.
60
(a)
(b)
61
(c)
Gambar 5.7 Kromatogram sampel urin pengguna dengan kode UP1 hari-1 (a),
kromatogram sampel urin pengguna (UP1) hari ke-14 pada suhu
40C (b), dan kromatogram sampel urin pengguna (UP1) hari ke-14
pada suhu 250C (c).
Kromatogram dari sampel urin pengguna sabu-sabu pada berbagai suhu
penyimpanan menunjukkan adanya puncak kromatogram pada waktu retensi 5,27-
5,28 menit yang merupakan puncak kromatogram khas MA selain itu juga muncul
puncak pada waktu retensi 5,07-5,08 menit yang merupakan puncak dari
amfetamin yaitu salah satu metabolit mayor dari MA. Hasil library senyawa yang
terkandung dalam urin pengguna sabu-sabu dengan kode UP1 disajikan pada
Tabel 5.8.
62
Tabel 5.8 Hasil library senyawa dalam urin pengguna sabu-sabu kode UP 1

Tanpa Penyimpanan Amphetamine 5,080
Cotinine 6,609
Caffeine 6,886
4 oC selama 14 hari Amphetamine 5,077

Cotinine 6,608
Caffeine 6,886

Phentermine 6,209
n-Hexadecanoic acid 6,606
Cotinine 6,881
Caffeine 8,038
b) Urin pengguna sabu-sabu dengan kode UP 2
kode UP2 pada GC-MS dengan mode full scan disajikan pada Gambar 5.8.
(a)
63
(b)
(c)
pada suhu 250C (c).
64
Bardasarkan kromatogram pada Gambar 5.8 sampel urin pengguna sabu-sabu
dengan kode UP2 menunjukkan adanya puncak kromatogram pada waktu retensi
5,27-5,28 menit yang merupakan puncak kromatogram khas MA selain itu juga
muncul puncak pada waktu retensi 5,09-5,10 menit yang merupakan puncak dari
amfetamin yaitu salah satu metabolit mayor dari MA. Hasil library senyawa yang
terkandung dalam urin normal yang ditambahkan MA dengan kode UP2 disajikan
pada Tabel 5.9.

Tanpa Penyimpanan Amphetamine 5,096
Cotinine 6,612

25 oC selama 14 hari Amphetamine, 3-methoxyamphetamine 5,104

Cyclotetrasiloxane 5,346
Cyclopentasiloxane 5,774
c) Urin pengguna sabu-sabu dengan kode UP 3
kode UP3 pada GC-MS dengan mode full scan disajikan pada Gambar 5.9.
65
(a)
(b)
66
(c)
pada suhu 250C (c).
Bardasarkan kromatogram pada Gambar 5.9 sampel urin pengguna sabu-sabu
dengan kode UP3 menunjukkan adanya puncak kromatogram pada waktu retensi
5,29-5,30 menit yang merupakan puncak kromatogram khas MA selain itu juga
muncul puncak pada waktu retensi 5,10-5,11 menit yang merupakan puncak dari
amfetamin yaitu salah satu metabolit mayor dari MA.. Hasil library senyawa yang
terkandung dalam urin normal yang ditambahkan MA dengan kode UP3 disajikan
pada Tabel 5.10.

67
Tanpa Penyimpanan Amfetamin 5,109
Methamphetamine, methoxyphenamine 5,293
4 C selama 14 hari
o
Amfetamin 5,110
25 oC selama 14 hari Amfetamin 5,110
Benzamide 6,155
5.2.4 Pecahan spektroskopi massa MA dan metabolitnya
Berdasarkan hasil kromatogram sampel urin pengguna sabu-sabu dan urin
normal yang ditambahkan MA, spektra massa untuk MA dalam sampel urin yang
diinjeksikan pada GC-MS mode full scan terlihat pada m/z 44, 58, 91, dan 134.
Spektra massa senyawa MA disajikan pada Gambar 5.10.
Gambar 5.10 Spektra massa MA (mode full scan) m/z 44, 58, 91, dan 134
Berdasarkan hasil kromatogram sampel urin pengguna sabu-sabu
menunjukkan adanya metabolit mayor dari MA yaitu amfetamin pada tR 5,07-
5,08 menit. Spektra massa untuk amfetamin dalam sampel urin yang diinjeksikan
68
pada GC-MS mode full scan terlihat pada m/z 44, 65, 91, dan 120. Spektra massa
senyawa MA disajikan pada Gambar 5.11.
Gambar 5.11 Fragmen ion amfetamin (mode full scan) m/z 44, 65, 91, dan 120
5.3 Uji kadar metamfetamin dalam sampel urin
Penentuan kadar metamfetamin dilakukan pada sampel urin yang
ditambahkan MA dan sampel urin pengguna sabu-sabu pada berbagai suhu
penyimpanan sampel urin. Hasil perhitungan kadar MA untuk sampel urin yang
ditambahkan MA dengan kode UN + MA dan sampel urin pengguna sabu-sabu
dengan kode UP di berbagai suhu penyimpanan, disajikan pada Tabel 5.11.

69
Tabel 5.11 Hasil perhitungan kadar MA pada sampel UN + MA dan UP di

berbagai suhu penyimpanan
Sampel Kondisi Penyimpanan Hasil uji Area Kadar
pendahuluan MA
dan
konfirmasi
GCMS
UN X Tanpa penyimpanan Negatif 0 0
Suhu 4oC selama 14 hari Negatif 0 0
UN Y Tanpa penyimpanan Negatif 0 0

UN Z Tanpa penyimpanan Negatif 0 0

UNX + Tanpa penyimpanan Positif 35688515 37,3089

MA Suhu 4oC selama 14 hari Positif 19075848 20,0971
Suhu 25oC selama 14 hari Positif 67659478 70,4327
UNY + Tanpa penyimpanan Positif 209201042 217,0784

UNZ + Tanpa penyimpanan Positif 10121503 10,8198

UP1 Tanpa penyimpanan Positif 49136967 51,2423

UP2 Tanpa penyimpanan Positif 8787397 9.4333

Suhu 4oC selama 14 hari Positif 6121085 6.6464
UP3 Tanpa penyimpanan Positif 685091 1.0431

70
Berdasarkan Tabel 5.11 area MA sampel urin yang ditambahkan MA dengan
kode UN X + MA dan UN Z + MA yang paling besar ditunjukkan oleh sampel
urin yang disimpan pada suhu 25oC berturut-turut sebesar 67659478 dan
35891707 sehingga menghasilkan kadar MA paling tinggi masing-masing
70,4327 dan 37,5194 ppm. Sementara untuk sampel urin yang ditambahkan MA
kode UN Y + MA menunjukkan area MA terbesar pada sampel urin yang
dianalisis langsung tanpa penyimpanan yaitu sebesar 209201042 dengan kadar
217,0784 ppm.
Sampel urin dari 3 pengguna sabu-sabu dengan kode UP 1, UP 2, dan UP 3
menunjukkan area MA tertinggi pada sampel urin tanpa penyimpanan, masing-
masing sebesar 49136967, 8787397, dan 685091. Area senyawa MA mengalami
penurunan pada analisis sampel urin yang disimpan pada suhu 4 dan 25 oC, area
senyawa MA terkecil ditunjukkan pada data hasil analisis sampel urin yang
disimpan di suhu 25oC, penurunan area MA ini menyebabkan penurunan pada
kadar MA dalam sampel urin pengguna.
5.4 Validasi Metode
5.4.1 Selektivitas
Tingkat pemisahan komponen dalam suatu larutan campuran MA 10 ppm
dan MDMA 10 ppm dengan GC-MS direfleksikan dalam puncak kromatogram
yang dihasilkan, puncak kromatogram senyawa MA muncul pada tR 5,288 menit
sementara puncak kromatogram senyawa MDMA muncul pada tR 6,239 menit.
Puncak pemisahan senyawa MA dan MDMA dapat dilihat pada Gambar 5.12.
71
Selektivitas kolom kromatografi gas dalam memisahkan senyawa dilihat dari
perolehan nilai resolusi (Rs) ≤ 1,5 sehingga menunjukkan pemisahan yang baik
(Raharjo dkk, 2013). Berdasarkan perhitungan, nilai resolusi (Rs) senyawa MA
dan MDMA pada penelitian ini adalah sebesar 5,423 nilai ini telah memenuhi
syarat selektivitas yaitu lebih dari 1,5. Data nilai resolusi disajikan pada Tabel
5.12.
Gambar 5.12 Pemisahan puncak kromatogram senyawa MA dan MDMA
Tabel 5.12 Data nilai resolusi
Senyawa Waktu Retensi Resolusi (Rs)

(tR)
Metamfetamina (MA) 5,250 5,423
Metilendioksimetamfetamin(MDMA) 6,355
72
5.4.2 Linieritas
Kromatogram pada mode ion extraction chromatogram menghasilkan
persamaan garis regresi linier metamfetamina Y = 965194x - 321770 dengan
koefisien korelasi (r) = 0,9964. Data pengukuran linieritas disajikan pada Tabel
5.13.
Tabel 5.13 Data pengukuran linieritas

Koefisien
Konsentrasi Luas Persamaan Garis
Mode Analisis Korelasi
(ng/mL) Puncak Linier
(r)
0 0
2 1787037
Ion Extraction 8 6002505
chromatogra 10 8643573 Y= 965194x - 321770 0,9964
m 20 20720848
40 39219513
50 46849390
Persamaan garis regresi linier dapat dibuat kurva kalibrasi. Kurva kalibrasi
standar MA dengan mode ion extraction chromatogram disajikan pada Gambar
5.13.
Linieritas Baku Metamfetamin

50000000
45000000 f(x) = 965194.294371197 x − 321770.324036513
40000000 R² = 0.996374921445303
35000000
30000000
25000000
20000000
15000000
10000000
5000000
0
0 10 20 30 40 50 60
Gambar 5.13 Persamaan garis dan linieritas metamfetamin (mode ion extraxtion
chromatogram)
73
5.4.3 Ketelitian
Hasil analisis pada kromatogram dan perhitungan ketelitian disajikan pada
Tabel 5.14.
Tabel 5.14 Data Ketelitian Metode Analisis pada Senyawa Metamfetamina

Waktu retensi
Mode analisis Replikan SD %RSD
TR
1 5,27
2 5,27
Ion Extraction 3 5,27
0,0015 0,0285
chromatogram 4 5,27
5 5,27
6 5,27
Hasil pengukuran didapat simpangan baku (SD) sebesar 0,0015 dengan
%RSD adalah 2,85 x 10-2%.
5.4.4 Batas Deteksi (LoD) dan Batas Kuantisasi (LoQ)
Hasil perhitungan untuk senyawa MA diperoleh batas deteksi (LoD)
adalah 3,4 x 10-6 ppm atau 3,4 ppt dan batas kuantitasi (LoQ) adalah 0,000011
ppm atau 11 ppt. Data pengukuran nilai LoD dan LoQ disajikan pada Tabel 5.15.
Tabel 5.15 Data Pengukuran Nilai LoD dan LoQ

LoQ
Konsentrasi LoD
Mode analisis Area SD (ppm)
(ppm) (ppm)
0 0
2 1787037
Ion Extraction 8 6002505
0,000003
chromatogra 10 8643573 1,0823 0,000011
4
m 20 20720848
40 39219513
50 46849390
74
5.4.5. Recovery
Hasil persentase perolehan kembali (recovery) senyawa MA pada sampel
urin pengguna disajikan pada Tabel 5.16. Recovery senyawa MA pada hasil
pengukuran adalah 101,83 %.
Tabel 5.16 Data Recovery Senyawa MA
Mode Analisis Kode UP Konsentrasi Konsentrasi % recovery

sampel sampel + STD
Simplo 34,7759 73,9814
Ion Extraction
Duplo 34,7759 73,9814 101,83
chromatogram
Triplo 34,7759 73,9814
BAB VI
PEMBAHASAN
6.1 Uji pendahuluan sampel urin
Uji pendahuluan dilakukan terhadap semua sampel urin yang telah
dikumpulkan dengan menggunakan test kit MA pengujian awal dengan test kit
dipilih karena dapat memberikan hasil dengan cepat. Hasil skrining dilakukan
interpretasi hasil sebagai berikut, setelah test kit dicelupakan ke dalam sampel urin
dan terdapat 1 garis merah pada zona kontrol maka urin diduga positif
mengandung senyawa MA, sementara jika setelah test kit dicelupkan ke dalam
urin terdapat 2 garis merah pada zona kontrol dan zona test maka sampel urin
tidak mengandung senyawa MA, jika hanya terbentuk satu garis pada zona tes
atau tidak terbentuk garis merah sama sekali maka hasil dikatakan invalid
(Rambe, 2017).
Berdasarkan data hasil penelitian ketiga urin menunjukkan hasil yang
diharapkan, urin normal (UN) menunjukkan dua garis merah pada test kit
sehingga urin normal dapat dijadikan kontrol untuk profil sampel urin yang tidak
mengandung MA. Sementara ketika sampel urin normal ini ditambahkan sabu-
sabu (UN + MA) menunjukkan hasil yang sama dengan sampel urin pengguna
sabu-sabu (UP) yaitu hanya terdapat satu garis merah pada test kit maka kedua
sampel ini positif mengandung MA. Tetapi uji pendahuluan menggunakan test kit
memiliki kelemahan yaitu tidak dapat digunakan untuk membedakan sampel urin
pengguna sabu-sabu dengan sampel urin normal yang ditambahkan sabu-sabu,
sehingga metode test kit tidak dapat digunakan untuk mengungkap kecurangan
74
75
yang diduga dilakukan pada sampel urin. Pengujian dengan test kit pun
kemungkinan besar memberikan hasil yang positif palsu (Moeller dkk, 2008)
6.2. Uji konfirmasi sampel urin
6.2.1 Urin normal
Sampel urin normal yang digunakan yaitu berasal dari tiga orang yang tidak
menggunakan sabu-sabu. Berdasarkan data kromatogram ketiga urin yang diberi
kode UN X, UN Y, dan UN Z pada hari pertama tanpa penyimpanan menunjukan
tidak adanya puncak serapan dari MA maupun metabolitnya melainkan
munculnya puncak kromatogram dari senyawa 9-octadecenamide,
hexadecanamide, dodecanamide, dan tetradecanamide yang merupakan senyawa
hasil biotransformasi dari lemak esensial yang tidak dapat diproduksi oleh tubuh
melainkan didapatkan dari makanan yang mengandung minyak nabati dan
hewani, seperti asam lemak linoleat dan asam lemak oleamide (Hiley dan Pui,
2007). Setelah dilakukan penyimpanan terhadap sampel urin selama 14 hari pada
dua suhu yang berbeda yaitu suhu kulkas 4oC dan suhu ruangan 25oC puncak
serapan senyawa-senyawa turunan asam lemak tersebut masih terbaca, bedanya
pada suhu penyimpanan ruangan 25oC kromatogram urin menunjukkan jumlah
puncak baru serapan yang lebih banyak, tetapi puncak-puncak baru tersebut
terkonfirmasi melalui MS bukan senyawa MA maupun amfetamin.
Pada dua urin normal dengan kode UN X dan UN Z menunjukkan adanya
puncak serapan pada kromatogram untuk senyawa kafein yaitu pada waktu retensi
6,882 menit. Puncak serapan caffein masih muncul pada kromatogram urin yang
telah diberlakukan penyimpanan selama 14 hari pada suhu 4 dan 25 oC hal ini
76
menandakan bahwa senyawa kafein merupakan senyawa yang cukup stabil
sehingga masih dapat dideteksi keberadaan pada sampel urin dengan masa
penyimpanan 14 hari. Berbeda hal dengan senyawa cotinine yang memunculkan
puncak serapan pada analisis sampel urin X yang disimpan pada suhu 25 oC
selama 14 hari, hal ini menunjukkan bahwa proses biotransformasi masih dapat
berlangsung di luar tubuh, senyawa cotinine merupakan senyawa hasil
biotransformasi dari senyawa nikotin yang didapat dari aktivitas merokok. Dari
ketiga sampel urin yang diperiksa dapat diketahui bahwa kromatogram urin pada
suhu penyimpanan 25oC selama 14 hari memunculkan lebih banyak puncak
serapan, hal ini dikarenakan masih adanya enzim yang mampu mendegradasi
senyawa dalam urin pada penyimpanan suhu ruangan, selain itu juga dapat
dipengaruhi karena tumbuhnya bakteri yang dapat berperan dalam mendegradasi
senyawa dalam urin sehingga menghasilkan puncak serapan yang baru. Dalam
pengujian kandungan MA dalam urin munculnya banyak puncak serapan ini
mampu mempersulit dalam analisis keberadaan puncak serapan dari senyawa MA.
6.2.2 Urin normal yang ditambahkan MA dan urin pengguna sabu-sabu
Ketiga sampel urin normal dengan kode UN X, UN Y, dan UN Z
ditambahkan MA sebanyak 0,001 g. Berdasarkan hasil yang didapat, pada
kromatogram ketiga urin normal setelah ditambahkan MA, muncul puncak
serapan baru pada waktu retensi 5,27-5,28 menit yang merupakan puncak serapan
senyawa metamfetamin. Puncak serapan MA tetap muncul pada kromatogram
sampel urin yang disimpan selama 14 hari pada suhu 4 dan 25 oC, tetapi dengan
intensitas yang berbeda-beda.

77
Pada kromatogram ketiga sampel urin baik yang diperiksan langsung (hari 1)
maupun yang disimpan selama 14 hari pada suhu yang berbeda tidak
menunjukkan puncak serapan yang menandakan adanya metabolit mayor dari
senyawa MA yaitu amfetamin atau 4-hidroksimetamfetamin hal ini dikarenakan
senyawa MA tidak melalui metabolisme dalam tubuh menjadi metabolitnya. Jika
dibandingkan dengan kromatogram urin pengguna sabu-sabu, dalam sampel urin
pengguna sabu-sabu dengan kode UP1, UP2, dan UP3 bukan hanya muncul
puncak kromatogram dari senyawa metamfetamin muncul pula puncak
kromatogram dari metabolit MA yaitu amfetamin yaitu pada waktu retensi 5,09-
5,11 menit. Berdasarkan kormatogram sampel urin pengguna sabu-sabu dengan
kode UP 1, 2, dan 3 berturut-turut pada Gambar 5.7, 5.8, dan 5.9 dapat dilihat
bahwa dalam suhu penyimpanan yang berbeda baik senyawa MA maupun
amfetamin mengalami penurunan puncak kromatogram, hal ini diperkirakan
terjadi karena masih ada proses degradasi di luar tubuh terhadap senyawa MA
maupum amfetamin sebagai metabolitnya oleh enzim.
Dalam tubuh, senyawa MA mengalami metabolisme di hati oleh sitokrom
isoenzim (CYP2D6) melalui beberapa jalur yaitu para hidroksilasi aromatik, alfa
beta hidroksilasi alifatik, N-oksidasi, N-dealkilasi, dan deaminasi. Hasil
metabolisme MA dalam hati akan dieksresi melalui urin dalam bentuk utuhnya
dan sebagai metabolit mayor ataupun minornya, salah satu metabolit mayor dari
MA yang terdeteksi pada analisis sampel urin pengguna sabu-sabu yaitu
amfetamin. Sitokrom isoenzim (CYP2D6) dalam metabolisme MA menjadi
amfetamin melalui jalur N-dealkilasi yaitu memutus ikatan gugus metil dengan
78
amina sehingga pada kromatogram sampel urin pengguna sabu-sabu muncul
puncak serapan senyawa amfetamin pada rentang tR 5,07-5,08 menit (Toolaney,
2007).
Berdasarkan data tersebut dapat dijadikan acuan adanya indikasi kecurangan
yang dilakukan terhadap sampel urin. Puncak kromatogram MA dan amfetamin
didukung oleh data pecahan MS pada m/z 44, 58 , 91, dan 134 yang merupakan
pecahan MS khas untuk senyawa MA, berdasarkan analisis sintesis MA jalur
leucart diduga bahwa pecahan m/z yang mencirikan senyawa MA berturut-turut
yaitu asetaldehida, N-metilformamida, metilbenzena, dan fenil aseton yang
merupakan prekusor sintesis MA (Ginting dkk, 2021). Jalur retrosintesis dari
senyawa MA dapat dilihat pada Gambar 6.1.
Gambar 6.1 Jalur Retrosintesis senyawa MA

79
Berdasarkan Gambar 6.1 metamfetamin jika diretrosintesis menjadi masing-
masing sintonnya sesuai dengan jalur sintesis leucart akan menghasilkan dua
sinton yaitu fenilaseton yang merupakan hasil dari reaksi antara fenil dan
asetaldehida, sementara N-metilformamida berasal dari reaksi metilamina dengan
asam format (Ginting dkk, 2021).
Pecahan MS pada m/z 44, 65, 91, dan 120 menunjukkan pecahan khas
senyawa amfetamin. Berdasarkan analisis sintesis amfetamin jalur laucart diduga
pecahan m/z tersebut berturut-turut asetaldehida atau formamide, siklopentadienil,
fenil, dan propil benzena, selain itu masih muncul juga pecahan dari prekusor
metamfetamin yaitu pada m/z 134 yang diduga fenilaseton. Jalur retrosintesis
senyawa amfetamin dapat dilihat pada Gambar 6.2.
Gambar 6.2 Jalur Retrosintesis senyawa amfetamin

80
Berdasarkan Gambar 6.2 amfetamin jika diretrosintesis menjadi masing-
masing sintonnya sesuai dengan jalur sintesis leucart akan menghasilkan dua
sinton yang sama dengan metamfetamin yaitu fenilaseton yang merupakan hasil
dari reaksi antara fenil dan asetaldehida, sementara formamida berasal dari reaksi
amonia dan formaldehida (Allen dan Ely, 2009).
6.3 Uji kadar MA dalam sampel urin
Indikasi kecurangan pula dapat diketahui melalui kadar MA dalam sampel
urin, urin normal yang ditambahkan sabu-sabu di luar tubuh memiliki kadar yang
berbeda-beda. Pada ketiga sampel urin normal yang ditambahkan kadar urin
berubah-ubah baik pada analisis pada hari pertama maupun anaisis pada hari ke-
14 dengan suhu penyimpanan 4 dan 25oC hal ini disebabkan sabu-sabu yang
dicampurkan ke dalam sampel urin tidak homogen sehingga menghasilkan
pengukuran kadar yang berbeda-beda pada tiap perlakuannya. Berbeda dengan
sampel urin pengguna sabu-sabu yang menunjukkan penurunan kadar MA pada
hari dan suhu penyimpanan sampel urin yang berbeda.
Kadar MA pada sampel urin pengguna sabu-sabu yang disimpan pada suhu
4 dan 25oC menunjukkan adanya pengurangan jika dibandingkan dengan kadar
MA pada hari pertama analisis. Eksresi senyawa MA dan metabolitnya juga
disertai dengan terekskresinya enzim CYP2D6 sehingga senyawa MA dalam
sampel urin masih mengalami degradasi di luar tubuh oleh enzim tersebut hal ini
ditandai dengan menurunnya puncak serapan MA. Penurunan kadar MA yang
signifikan terjadi pada sampel urin yang disimpan dalam suhu 250C yaitu sebesar
38,6466 ppm jika dibandingkan dengan kadar MA dalam urin pengguna pada hari
81
pertama analisis yaitu sebesar 51,2423 ppm, sementara kadar MA dalam sampel
urin yang diseimpan pada suhu 4oC mengalami penurunan kadar MA yang tidak
terlalu signifikan jika dibandingkan dengan kadar MA pada hari pertama yaitu
sebesar 47,5649 ppm.
Mengacu pada hasil analisis SPSS pada Lampiran 4 terdapat tiga aspek yang
dibandingkan, yaitu kadar MA dalam masing-masing sampel urin (urin normal,
urin normal yang ditambahkan sabu-sabu, dan urin pengguna sabu-sabu)
dibandingkan akan menghasilkan data yang berbeda signifikan, artinya terdapat
perbedaan yang mencolok terhadap kadar MA dalam ketiga kelompok sampel
urin. Sementara jika dibandingkan berdasarkan waktu dan suhu penyimpanan,
hanya kadar MA dalam sampel urin yang disimpan pada suhu 25 oC selama 14 hari
yang menunjukkan adanya perbedaan secara signifikan, artinya kadar MA dalam
sampel urin normal, urin normal yang ditambahkan sabu-sabu, maupun urin
pengguna sabu-sabu memiliki perbedaan yang signifikan pada sampel yang
disimpan di suhu 25oC. Kadar MA juga dibandingkan untuk masing-masing
sampel terhadap waktu dan suhu penyimpanan yang berbeda, pada seluruh sampel
urin yang digunakan tidak menunjukkan adanya perbedaan kadar MA yang
signifikan baik pada sampel urin yang langsung dianalisis maupun sampel urin
yang disimpan pada suhu 4 dan 25oC.
Berdasarkan hal tersebut dapat diketahui bahwa analisis kadar MA dalam
sampel urin utamanya urin pengguna sabu-sabu masih memberikan hasil yang
baik walaupun sampel urin disimpan dalam suhu 4 maupun 25 oC. Namun jika
mengharuskan dilakukannya penyimpanan terhadap sampel urin pengguna

82
kondisi yang paling baik yaitu dengan menyimpan sampel urin pada suhu 4oC
sebab dalam penyimpanan sampel urin pengguna pada suhu yang rendah dapat
menghambat kerja enzim dalam mendegradasi senyawa MA. Penyimpanan
sampel urin yang dilakukan pada suhu 4oC juga meminimalisasi munculnya
puncak-puncak lain dari referance yang dapat mengganggu proses analisis
kandungan MA maupun amfetamin sebagai metabolitnya dalam sampel urin.
6.4 Validasi metode
6.4.1 Selektivitas
Campuran standar MA dan MDMA memberikan nilai Resolusi (R s) yang
baik. Hasil perhitungan Rs yang didapat memenuhi syarat, yaitu Rs ≥ 1,5, hal ini
menunjukkan bahwa kolom dapat memisahkan senyawa tersebut dengan baik.
Berdasarkan data pada Tabel 5.12 resolusi yang didapat sebesar 5,423, hal ini
disebabkan karena adanya perbedaan waktu retensi antara senyawa MA dan
MDMA serta lebar puncak MA dengan MDMA yang sempit.
Efisiensi kolom yang baik akan menghasilkan resolusi yang memenuhi
syarat. Tingkat pemisahan komponen dalam suatu campuran dengan metode
kromatografi dapat dilihat dari kromatogram yang dihasilkan. Untuk hasil
pemisahan yang baik, suatu campuran harus menghasilkan puncak kromatogram
yang terpisah secara sempurna (Raharjo, 2013).
6.4.2 Linieritas
Berdasarkan hasil perhitungan pada Tabel 5.13 dapat diketahui bahwa
terdapat korelasi linier antara konsentrasi dan luas area puncak, karena persamaan
regresi linier pada analisis tersebut memiliki nilai korelasi linier (r) ≤ 1.
83
6.4.3 Ketelitian
Ketelitian ditentukan dengan menghitung harga simpangan baku (SD) dan
simpangan baku standar relatif (RSD). Nilai simpangan baku standar relatif
(RSD) menunjukkan suatu ketidaktelitian pengukuran. Berdasarkan Tabel 5.14
nilai waktu retensi dari enam kali pengukuran standar MA dengan konsentrasi 10
ppm telah memberikan hasil yang teliti, yaitu nilai tR yang sama pada masing-
masing pengukuran.
Simpangan baku standar reatif (RSD) untuk analisis mode ion extraction
sebesar 0,0285%, nilai RSD senyawa standar telah memenuhi syarat yaitu ≤ 2%
(Suaniti, 2011). Hal tersebut menunjukkan bahwa pengukuran dengan GC telah
memberikan hasil yang teliti.
6.4.4 Batas deteksi (LoD) dan batas kuantisasi (LoQ)
Berdasarkan hasil penetian pada Tabel 5.15 menunjukkan bahwa analisis
dengan GC-MS mode ion chromatography memiliki nilai LoD dan LoQ yang
lebih rendah, hal ini disebabkan mode ion chromatography pada GC-MS hanya
merekam sinyal karakteristik dari ion-ion senyawa MA. Keuntungan dari metode
ini adalah lebih sensitif karena tidak merekam spektra seluruh senyawa yang
terkandung dalam sampel serta mempermudah mengetahui keberadaan suatu
senyawa berdasarkan masing-masing ion (Moffat dkk., 2011). Spektra massa
dimonitor pada m/z 58, 91, dan 134 yang merupakan m/z khas dari senyawa
metamfetamin.
6.4.5 Recovery
84
Hasil persentase perolehan kembali senyawa MA pada sampel urin
pengguna disajikan pada Tabel 5.16 recovery senyawa MA pada hasil pengukuran
adalah berkisar 101,83%. Nilai tersebut memenuhi syarat ketentuan persen
recovery yaitu sebesar 97-103% sehingga metode pemeriksaan yang digunakan
memiliki akurasi yang baik.

BAB VII
KESIMPULAN
7.1 Kesimpulan
1. Pada sampel urin normal baik pada pengukuran hari pertama maupun
pengukuran setelah dilakukan penyimpanan selama 14 hari tidak ditemukan
adanya puncak serapan dari senyawa MA dan metabolitnya, puncak
kromatogram yang teranalisis merupakan puncak kromatogram dari 9-
octadecenamide, hexadecanamide, dodecanamide, dan tetradecanamide yang
merupakan senyawa hasil biotransformasi dari lemak esensial.
2. Pada sampel urin normal yang ditambahkan sabu-sabu pada puncak
kromatogramnya muncul puncak baru pada waktu retensi 5,27-5,28 menit yang
merupakan puncak serapan senyawa metamfetamin tetapi tidak teranalisis
adanya puncak kromatogram dari metabolit mayor MA.
3. Pada sampel urin pengguna sabu-sabu puncak kromatogram yang muncul yaitu
puncak kromatogram senyawa MA dan puncak kromatogram salah satu
metabolit mayornya yaitu amfetamin pada waktu retensi 5,07-5,08 menit.
4. Kadar senyawa MA dalam urin normal yang ditambahkan sabu-sabu tidak
mengalami degradasi pada saat dilakukan penyimpanan terhadap sampel urin
selama 14 hari pada suhu 4oC dan 25oC. Tetapi pada sampel urin pengguna
sabu-sabu senyawa MA mengalami degradasi pada sampel urin yang disimpan
pada suhu 25oC yang ditandai dengan menurunnya kadar MA.
85
86
7.2 Saran
Melalui penelitian ini diharapkan dapat menjadi acuan untuk mengungkap
adanya indikasi kecurangan yang dilakukan terhadap sampel urin yang telah
dikumpulkan, dengan melihat adanya perbedaan yang cukup signifikan pada
kromatogram sampel urin normal yang ditambahkan sabu-sabu dengan sampel
urin pengguna sabu-sabu. Selain itu juga dapat dijadikan acuan sebagai dasar
untuk prosedur penyimpanan sampel urin yang baik sehingga tidak
mempengaruhi hasil analisis terhadap kandungan MA di dalam urin.

DAFTAR PUSTAKA
Ahuja, S., dan Dong, M, W, Eds. 2005. Handbook of Pharmaceutical Analysis by

HPLC. Edisi Pertama. Elsevier Inc. London.
Alfian, Zul., Harlem M., dan Muhammad T. 2017. Analisis Cepat Metamfetamin
pada Rambut Pengguna Sabu-Sabu Menggunakan Kromatografi Gas
Spektroskopi Massa. Jurnal STIKNA. Vol 1(1). Hal 22-25.
Allen, A dan R. Elly., 2009, Synthetic Methods for Amphetamine, Array

BioPharma Inc, Colorado.
Azmiyati, SR, dkk. 2014. Gambaran penggunaan NAPZA pada anak jalanan di
Kota Semarang. Jurnal Kesehatan Masyarakat (KEMAS). 9 (2). Hal
137-143.
Badan Narkotika Nasional. 2019. Pedoman Pemeriksaan Laboratorium

Narkotika, Psikotropika dan Obat Berbahaya. Badan Narkotika
Nasional. Jakarta.
Bidang Laboratorium Forensik. 2021. Data Kasus dan Jumlah Barang Bukti
Tahun 2017-2020. Laboratorium Narkoba BIDLABFOR Polda Bali.
Denpasar.
Braithwaite, A. dan Smith, F.J. 1999. Chromatographic Methods. Edisi Kelima.

Kluwer Academic Press. Dordrecht.
Budiartha. 2017. Narkoba dan Psikotropika dalam Hukum Pidana. Mandar Maju.
Bandung.
Chairlan, Estu Lestari dan Albertus Mahode. 2011. Pedoman Klinik Dasar Untuk
Laboratorium Kesehatan. Edisi Kedua. EGC. Jakarta.
Dachriyanus. 2004. Analisis Struktur Senyawa Organik Secara Spektrofotometri.

Andalas University Press. Padang.
David, G Watson. 2005. Analisis Farmasi. EGC. Jakarta.
Gandjar, Ibnu Gholib dan Abdul Rohman. 2014. Kimia Farmasi Analisis. Pustaka
Pelajar. Yogyakarta.
Ginting, Hendri Dermawan., Tamrin., dan Mimpin Ginting. 2021. Penentuan Jalur
Sintesa dari Jenis Impuritis yang ditemukan pada Metamfetamin
dengan Metode GC-MS. JC-T (Jaournal Cis-Trans) : Jurnal Kimia
dan Terapannya. Vol 5(2). Hal 18-24
Harmita. 2004. Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya.

Majalah Ilmu Kefarmasian. Vol I (3). Hal 6-10
87
88
Hiley, C. Robin dan Pui Man Hoi., 2007. Oliamide : A Fatty Acid Amide
Signaling Molecule in the Cardiovaskular System. Cardiovasc Drug
Rev. Vol 25(1). Hal 46-60.
Hornbeck, P.V. 2015. Enzym-linked Immunosorbent Assay. Mc. Graw-Hill Book.

New York.
Indrati, Agnes Rengga. 2015. Pemeriksaan Laboratorium Patologi Klinik

Narkoba. Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran. Bandung.
Indrayanto, G. 2011. Validation of Chromatographic Method of Analysis. Profile

of Drug Substances, Excipients, and Related Methodologi. Vol 37.
Hal 440 – 465.
Kementerian Kesehatan RI. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia

Nomor 2 Tahun 2017 Tentang Perubahan Penggolongan Narkotika.
Kementerian Kesehatan RI. Jakarta.
Kelly, K., & Bell, S. (2018). Evaluation of the reproducibility and repeatability of
GC-MS retention indices and mass spectra of novel psychoactive
substances. Forensic Chemistry. Vol 7. Hal 10–18.
Khopkar, S.M. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik. Ul-press. Jakarta.
Kumazawa, Takeshi., Kenji Hara, Chika Hasegawa, Seisaku Uchigasaki, Xiao-

Pen Lee, Hiroshi Seno, Osamu Suzuki, dan Keizo Sato. 2011.
Fragmentation Pathways of Trifluoroacetyl Derivatives of
Metamphetamine, Amphetamine, and
Methylenedioxyphenylalkylamine Designer Drugs by Gas
Chromatography/Mass Spectroscopy. International Journal of
Spectroscopy. Article Research.
Kunalan, Nic Daeid N., Kerr W. J. 2009. Characterization of Route Specific

Impurities Found in Methamphetamine Synthesized by the Leuckart
and Reductive Amination Methods. Anal Chem. Vol 81. Hal 17-18
Krasnova, Irina N dkk. 2016. Methamphetamine addiction: involvement of CREB

and neuroinflammatory signaling pathways. Psychopharmacology.
Vol 10. Hal 233-235.
Lehotay, Steven., Andre De Kok, Maurice Hiemstra, Peter Van Bodregaven.

2005. Validation of Fast and Easy Method for the Determination of
Residues From 229 Pesticide in Fruits and Vegetable Using Gas and
Liquid Chromatography and Mass Spectroscopy Detection. Journal of
AOAC International. Vol 8. Hal 20-21.
89
Makino, Y., Urano, T., Nagano. 2003. Impurity Profiling of Ephedrines in

Methamphetamine by HighPerformance Liquid Chromatography. J.
Of Chrom. 947. Hal 151-154.
Manela, Adianus. 2015. Badan Nakotika Nasional dan Jebakan Kelembagaan.

Jurnal Peradilan Indonesia. Vol 5. Hal 15-18.
Manuela, Pellegrini., Graziano Silvia, Mastrobattista Luisa, Minutillo Adele

Busardò Francesco dan Scarsella Gianfranco. 2017. Stability of Drugs
of Abuse in Urine Samples at Room Temperature by Use of a Salts
Mixture. Current Pharmaceutical Biotechnology. Vol 19(10). Hal 123
Mehling, H. and Cabeza, L.F. 2008. Heat and Cold Storage with PCM: An up to
Date Introduction into Basics and Applications. Springer. Berlin.
Mei-Chich HSU, Daptine Chen, dan Ray H. Liu. 2009. Detection of Abused
Drugs in Urine by GC-MS. Journal of Food and Drugs Analysis. Vol
4(17). Hal 12-13.
Menteri Kesehatan. 2012. Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia

NOMOR 194/Menkes/SK/VI/2012 Tentang Penunjukkan
Laboratorium Pemeriksaan Narkotika dan Psikotropika. Departemen
Kesehatan Jakarta.
Moeller, K. E., Lee K.C., Kissac J.C. 2008. Urine Drugs Screening : Practical
Guide for Clinicians. Mayo Clin Proc. Vol 83(1). Hal 66-70.
Moffat, A. C., David M. O., dan Brian W. 2011. Clake’s Analysis of Drugs and
Poisons. Edisi 4. Pharmaceutical Press. London.
Mulyani, Endang dkk. 2016. Survei Prevalensi Penyalahgunaan Narkoba pada

Kelompok Rumah Tangga di 20 Provinsi Tahun 3015. Pusat Penelitian
Data dan Informasi Badan Narkotika Nasional. Jakarta.
Nasution. 2007. Perilaku Merokok pada Remaja. Program Studi Psikologi

Fakultas Kedokteran Universitas Sumatra Utara. Medan.
Osamu, Suzuki dan Kanako Watanabe. 2005. Metabolic Precursors to

Amphetamine and Methamphetamine. Drugs and Poissons in
Humans: A Handbook of Practical Analysis. Springer, J.T Cody.
Tokyo.
Raharjo, Tri Joko., Bambang Sutriyanto, Mai Anugrahwati, dan Nurul Hidayat
Aprilita. 2013. Validasi Metode Analisis Multiresidu Pestisida
Organoklor dalam Salak Menggunakan Kromatografi Gas-Detektor
Penangkap Elektron. Agritech. Vol 33(2). Hal 192.
90
Rahayu, Yunita Suci., Yayuk Astuti, dan Eko Fery Prasetya. 2020. Identifikasi
Sabu-Sabu/Metamfetamin Menggunakan Analisis Tes Warna dan Gas
Chromatography-Spektroscopy Mass (GCMS). Jurnal Sains dan
Edukasi Sains. Vol 3(2). Hal 45-47.
Rambe, E. S. D. 2017. Analisa Narkotika Jenis Morfin, Amfetamin, dan THC

(Tetrahidrokanabinol) Menggunakan Strip Test. Universitas Sumatera
Utara. Medan.
RI, 2009, Undang-Undang Nomor 35 tahun 2009 tentang Narkotika.
RI. 2009. Peraturan Kapolri : Tata Cara Pemeriksaan Laboratorium Pasal 6 Ayat 2
dan Pasal 10 Ayat 2.
Sholihah, Qomariyatus. 2015. Efektivitas Program P4GN Terhadap Pencegahan

Penyalahgunaan NAPZA. Jurnal Kesehatan Masyarakat. Vol 10. Hal
153.
Skoog DA, West DM, Holler FJ, Crouch SR. 2004. Fundamentals of Analytical
Chemistry 8 th Edition. Brooks/Cole. Belmont.
Suaniti, N. M. 2011. Aldehid Dehidrogenase dalam Tikus Wistar Sebagai

Biomarker Awal Konsumsi Alkohol Secara Akut. Jurnal Biologi. Vol
5(1). Hal 6-8.
Toolaney, G. H. 2007. New Research on Methamfetamine Abuse. Nova Science

Publisher. New York.
Uliyah, Musrifatul., & Hidayat, A. Aziz Alimul. 2008. Keterampilan Dasar

Praktik Klinik untuk Kebidanan. Ed. 2. Salemba Medika. Jakarta.
USP. 2014. The United States Pharmacopeia : the National Formulary. USP 37
NF 32 Supplement 1. Rockville, Md: United States Pharmacopeial
Convention;.
Vogel. 1994. Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik. Edisi Keempat. Penerbit

Buku Kedokteran EGC. Jakarta.
Widayanto, Yusuf. 2016. Upaya Kepolisian dalam Penanggulangan Kenakalan

Remaja di Surakarta. UMS Library Catalog. Surakarta.
Yu, A., Shargel L., dan Wu S. 2005. Biofarmasetika dan Farmakokinetika

Terapan. Edisi kedua. Airlangga University Press. Surabaya.
Yuwono, M., dan Indrayanto, G. 2005. Validation of Chromatographic Methodes

of Analysis. Profiles of Drugs Substances, Excipients and Related
Methodology. Vol 32. Hal 34-36.
91
Zaitsu, Kei., Akihiro Miki, Munehiro Katagi, Hitoshi Tsuchihashi. 2007. Long-
term Stability of Various Drugs and Metabolites in Urine and
Preventive Measures Against Their Decomposition with Special
Attention to Filtration Sterilization. Forensic Science International.
Vol 174. Hal 120-123.
LAMPIRAN
Lampiran 1. Jadwal kegiatan
No Kegiatan Penelitian Jadwal Penelitian

1. Persiapan sampel urin November - Desember 2021
2. Pembuatan standard an uji Desember 2021
validasi metode
3. Ekstraksi sampel urin Desember 2021
4. Analisis data Desember – Januari 2021
5. Pengolahan data Januari - Februari 2021
Lampiran 2. Preparasi sampel urin untuk ekstraksi
Masing-masing sampel urin

sebanyak 20 mL
Dimasukkan
Ditunggu hingga urin

Tabung SPE + Esterlude
membasahi esterlude
+ 10 mL kloroform
Filtrat Kloroform diuapkan
+ 175 μL metanol
Ekstrak
Analisis dengan GC-MS
92
93
Lampiran 3. Perhitungan pembuatan larutan
1. Pembuatan larutan standar metamfetamin 100 ppm dalam 10 mL
100 mg 1 mg
100 ppm= =
1000 mL 10 mL
Jadi, standar metamfetamin ditimbang sebanyak 1 mg ≈ 0,001 g kemudian
ditambahkan metanol hingga volume tepat 10 mL.
2. Pembuatan larutan standar metamfetamin untuk linieritas
a) Larutan standar 50 ppm
M 1 X V 1 =M 2 x V 2
100 ppm x V 1=50 ppm x 10 mL
50 ppm x 10 mL
V 1= =5 mL
100 ppm
Jadi, larutan standar metamfetamin dengan konsentrasi 100 ppm dipipet
sebanyak 5 mL kemudian ditambahkan metanol hingga volume tepat 10 mL.
b) Larutan standar 40 ppm
M 1 X V 1 =M 2 x V 2
100 ppm x V 1=40 ppm x 10 mL
40 ppm x 10 mL
V 1= =4 mL
100 ppm
c) Larutan standar 20 ppm
M 1 X V 1 =M 2 x V 2
40 ppm x V 1=20 ppm x 10 mL

94
20 ppm x 10 mL
V 1= =5 mL
40 ppm
d) Larutan standar 10 ppm
M 1 X V 1 =M 2 x V 2
10 ppm x 10 mL
V 1= =5 mL
20 ppm
e) Larutan standar 8 ppm
M 1 X V 1 =M 2 x V 2
10 ppm x V 1=8 ppm x 1mL
8 ppm x 1 mL
V 1= =0,8 mL
10 ppm
sebanyak 0,8 mL ≈ 800 μL kemudian ditambahkan metanol 200 μL.
f) Larutan standar 4 ppm
M 1 X V 1 =M 2 x V 2
4 ppm x 1 mL
V 1= =0,4 mL
10 ppm

95
g) Larutan standar 2 ppm
M 1 X V 1 =M 2 x V 2
2 ppm x 1 mL
V 1= =0,2 mL
10 ppm
3. Pembuatan larutan NaOH 1 N
N=M x b
N=M =1
g 1000
M= x
Mr V
g 1000
1= x
40 50 mL
g=2 gram
Jadi, sebanyak 2 gram kristal NaOH ditimbang kemudian dilarutkan dalam
50 mL akuabides.
4. Pembuatan larutan HCl 1 N
Larutan HCl pekat
Konsentrasi : 37%
Berat jenis : 1,19 g/mL
Berat molekul (Mr) : 36,5 g/mol
Normalitas HCl 37%
10 x % x berat jenis
N=
Mr
96
10 x 37 x 1,19
N=
36,5
N=12,06
Pengenceran HCl 37%
N 1 x V 1=N 2 x V 2
12,06 x V 1=1 x 50
50
V 1= =4,15 mL
12,06
Jadi, dipipet sebanyak 4,15 mL HCl 37% kemudian dilarutkan dalam 50 mL
akuabides.
5. Perhitungan validasi metode
a) Linieritas
No Konsentrasi (X) Area (Y) X2 Y2 XY
1 0 0 0 0 0
2 2 1787037 4 3,1935 x 1012 3574074
3 8 6002505 64 3,6030 x 1013 48020040
4 10 8643573 100 7,4711 x 1013 86435730
5 20 20720848 400 4,2935 x 1014 4,14 x 108
6 40 39219513 1600 1,5381 x 1015 1,57 x 109
7 50 46849390 2500 2,1948 x 1015 2,34 x 109
Ʃ 130 123222866 4668 4,2763 x 1015 4463696824
a=
∑ Y ∑ X 2−∑ X ∑ XY
n ∑ X −( ∑ X )
2 2
(123222866 x 4668 )− ( 130 x 4463696824 )

a=
( 7 x 4668 )−( 130 x 130 )
97
a=−321770
n ∑ XY −∑ X ∑ Y
b=
n ∑ X −( ∑ X )
2 2
(7 x 4463696824 )−( 130 x 123222866 )

b=
( 7 x 4668 )−( 130 x 130 )
b=965194
Regresi linier y = bx + a, sehingga berdasarkan perhitungan di atas nilai
regresi yang didapat yaitu y = 965194x – 321770
b) Selektifitas
No MA MDMA ∆t2-t1 ∆W2+W

1
Start time End W1 Start End time W2
(t1) time time (t2)
1 5,248 5,515 0,267 6,208 6,352 0,144 1,104 0,411
2 5,253 5,499 0,246 6,214 6,357 0,143 1,104 0,389
3 5,248 5,526 0,278 6,208 6,352 0,144 1,104 0,422
4 5,243 5,510 0,267 6,208 6,358 0,15 1,115 0,417
5 5,254 5,504 0,25 6,203 6,358 0,155 1,104 0,405
6 5,253 5,515 0,262 6,213 6,352 0,139 1,099 0,401
Rata- 5,250 5,512 0,262 6,209 6,355 0,146 1,105 0,407
rata
2 x ∆t 2−t 1 2 x 1,105
Rs= = =5,423
∆ W 2−W 1 0,407
c) Perhitungan LoD dan LoQ
No X Y Regresi linier Xi (X-Xi) (X-Xi)2

1 0 0 y = 965194x – 0,333373394 -0,333373394 0,11113782
2 2 1787037 321770 2,184852993 -0,184852993 0,034170629
3 8 6002505 6,552335593 1,447664407 2,095732236
4 10 8643573 9,288643527 0,711356473 0,506028032
5 20 20720848 21,80143888 -1,801438882 3,245182045
6 40 39219513 40,96718691 -0,967186908 0,935450514
7 50 46849390 48,872206 1,127793998 1,271919302
98
Ʃ(X-Xi)2 8,199620578
Sy /x =
√ 8,199620578
7
=1,082300498
3 x Sy /x 3 x 1,082300498
LoD= = =0,0000033640
slope 965194
10 x Sy /x 10 x 1,082300498
LoQ= = =0,0000112133
slope 965194
d) Ketelitian
Standar Baku Waktu

No X Xi− X ( Xi− X )2
10 ppm Retensi (Xi)
1 Replikan 1 5,276 5,274 0,0023 0,000005444
2 Replikan 2 5,274 5,274 0,0003 0,000000111
3 Replikan 3 5,272 5,274 -0,0017 0,000002778
4 Replikan 4 5,274 5,274 0,0003 0,000000111
5 Replikan 5 5,272 5,274 -0,0017 0,000002778
6 Replikan 6 5,274 5,274 0,0003 0,000000111
Jumlah (Ʃ) 0,000011333
SD=
√ ∑ ( Xi−X )2
n−1
SD=
√ 0.000011333
5
SD = 0,00150555
SD 0,00150555
%RSD= x 100 %= x 100 %=0,0285484
X 5,274
99
e) Persen Recovery
I II III
Area Sampel 33243800 33243800 33243800
Area Sampel + Standar 71084697 71084697 71084697
Konsentrasi Sampel (Ca) 34,77598286 34,7759828 34,77598286
6
Konsentrasi Sampel + 73,9814659 73,9814659 73,9814659
Standar (Cf)
Konsentrasi Standar Adisi 38.5 38.5 38.5
% Recorvery 101,832423 101,832423 101,832423
Untuk mencari konsentrasi sampel (Ca) nilai masing-masing area sampel
disubstitusi sebagai y pada persamaan regresi berikut
y = 965194x – 321770
33243800+321770
x= =34,77598286
965194
Sehingga untuk analisis pertama didapatkan konsentrasi sampel sebesar
34,77598286. Untuk analisis kedua dan ketiga memiliki konsentrasi sampel yang
sama karena memiliki area sampel yang sama seperti analisis pertama.
Untuk konsentrasi sampel + standar (Cf) dicari dengan cara yang sama
dengan mensubstitusi nilai area sampel + standar ke dalam persamaan regresi
linier sebagai nilai y, sehingga didapat konsentrasi sampel + standar (Cf) analisis
sebesar 73,9814659.
[ C ] sampel +spike− [ C ] sampel

% Recovery = x 100 %
[ C ] spike
73,9814659−34,77598286
% Recovery = x 100 %=101,832423
38.5
Dengan cara yang sama didapat %Recovery untuk ketiga analisis tersebut
sebesar 101,832423 untuk ketiga pengulangan.

100
6. Perhitungan mencari kadar MA dalam sampel urin normal + sabu-sabu
dan urin pengguna sabu-sabu
Untuk mencari konsentrasi MA dalam sampel urin dilakukan dengan
mesubstitusikan nilai area sampel ke dalam persamaan regresi linier y = 965194x –
321770.
y=965194 x−321770
35688515+321770
x= =37,3089 ppm
965194
Dengan cara yang sama didapatkan konsentrasi MA pada masing-masing
sampel dapat dilihat pada tabel di bawah.
Sampel Kondisi Area Regresi Linier Konsentrasi

Penyimpanan MA
UNX + Tanpa penyimpanan 35688515 y = 965194x 37,3089
MA Suhu 4oC 14 hari 67659478 – 321770 70,4327
Suhu 25oC 14 hari 19075848 20,0971
UNY + Tanpa penyimpanan 209201042 217,0784

MA Suhu 4oC 14 hari 66385172 69,1125
Suhu 25oC 14 hari 22491018 23,6354
UNZ + Tanpa penyimpanan 10121503 10,8198

MA Suhu 4oC 14 hari 35891707 37,5194
Suhu 25oC 14 hari 13057335 13,8616
UP1 Tanpa penyimpanan 49136967 51,2423

Suhu 4oC 14 hari 45587591 47,5649
Suhu 25oC 14 hari 36979653 38,6466
UP2 Tanpa penyimpanan 8787397 9.4333

Suhu 4oC 14 hari 6121085 6.6464
Suhu 25oC 14 hari 4468951 4.9646
UP3 Tanpa penyimpanan 685091 1.0431

Suhu 4oC 14 hari 460162 0.8101
Suhu 25oC 14 hari 336895 0.6821
101
Lampiran 4. Data Perhitungan SIPSS
a) Perbandingan nilai kadar MA ketiga sampel urin
Dependent Variable: Kadar MA

Source Type III df Mean F Sig. Partia
Sum of Square l Eta
Squares Squar
ed
Correcte 21756.991a 8 2719.624 1.657 .178 .424
d Model
Intercept 16176.384 1 16176.384 9.857 .006 .354
KR 14466.667 2 7233.333 4.408 .028* .329
Error 29539.537 18 1641.085
Total 67472.912 27
Correcte 51296.527 26
d Total
a. R Squared = .424 (Adjusted R Squared = .168)
Kategori Responden (KR*) menunjukkan nilai Sig. < 0.05 (0.028<0.05)
menyatakan perbedaan nilai rerata jika ditinjau dari KR. Artinya, sampel urin
normal, normal+MA, dan pengguna memiliki rata-rata kadar MA yang berbeda
signifikan.
Tabel Pendukung
Kategori Responden
Dependent Variable: Kadar MA
95% Confidence Interval
Kategori Responden Mean Std. Error
Lower Bound Upper Bound
Urine Normal .000 13.503 -28.370 28.370
Urine Normal + MA 55.540 13.503 27.170 83.910
Urine Pengguna 17.891 13.503 -10.479 46.261
Data ini (menurut SPSS) dinilai menunjukkan perbedaan yang signifikan,
sehingga variabel KR dinyatakan memiliki perbedaan nilai kadar MA yang
signifikan.
102
b) Perbandingan nilai kadar MA ketiga sampel urin pada suhu penyimpanan

yang berbeda
Kadar MA
Waktu Penyimpanan & Suhu Sum of df Mean F Sig.
Squares Square
H1 - Between Groups 12839.635 2 6419.818 1.446 .307
Tidak Within Groups 26633.556 6 4438.926
disimpan Total 39473.192 8
14 hari Between Groups 705.601 2 352.801 1.572 .283
(4C) Within Groups 1346.716 6 224.453
Total 2052.317 8
14 hari Between Groups 5659.969 2 2829.984 10.890 .010
(25C) Within Groups 1559.265 6 259.877
Total 7219.234 8
Analisa berdasarkan waktu penyimpanan dan suhu, hanya waktu
penyimpanan 14 hari suhu 25oC menunjukkan nilai Sig. <0.05, sehingga ada
perbedaan kadar MA pada urin normal, normal+MA, dan pengguna saat disimpan
selama 14 hari dalam suhu 25oC. Sementara, pada sampel urin tanpa penyimpanan
dan dengan penyimpanan pada suhu 4oC tidak menunjukkan perbedaan kadar MA
yang sig (>0.05).

103
c) Perbandingan nilai kadar MA masing-masing sampel urin pada suhu

penyimpanan yang berbeda
Kode Responden Kadar MA Area MA

UNX Chi-Square .000 .000
df 2 2
Asymp. Sig. 1.000 1.000
UNY Chi-Square .000 .000
df 1 1
Asymp. Sig. 1.000 1.000
UNZ Chi-Square .000 .000
df 2 2
Asymp. Sig. 1.000 1.000
UP1 Chi-Square 2.000 2.000
df 2 2
Asymp. Sig. .368 .368
df 2 2
Asymp. Sig. .368 .368
df 2 2
Asymp. Sig. .368 .368
UNXMA Chi-Square 1.800 1.800
df 2 2
Asymp. Sig. .407 .407
UNYMA Chi-Square 2.000 2.000
df 2 2
Asymp. Sig. .368 .368
UNZMA Chi-Square 2.000 2.000
df 2 2
Asymp. Sig. .368 .368
Berdasarkan data tersebut, dapat dikatakan tidak ada perbedaan kadar pada
masing-masing sampel baik yang langsung di analisis tanpa penyimpanan maupun
sampel disimpan selama 14 hari pada suhu 4oC dan 25oC.

104
Lampiran 5. Dokumentasi
a. Dokumentasi kegiatan
Proses pembagian sampel urin untuk selanjutnya disimpan dalam suhu

penyimpanan 4oC dan 25oC
Proses pengukuran pH sampel urin sebelum ditambahkan basa

105
Proses pengukuran pH sampel urin setelah ditambahkan basa
Proses ekstraksi sampel urin

106
Hasil ekstraksi sampel urin

107
Proses injeksi sampel urin dengan GCMS DPX
b. Dokumentasi hasil penelitian
Kromatogram sampel urin normal dengan kode UNX hari pertama

108
Kromatogram sampel urin normal dengan kode UNX hari 14 suhu 4oC
Kromatogram sampel urin normal dengan kode UNX hari 14 suhu 25oC
109
Kromatogram sampel urin normal dengan kode UNY hari pertama
Kromatogram sampel urin normal dengan kode UNY hari hari 14 suhu 4oC
110
Kromatogram sampel urin normal dengan kode UNY hari hari 14 suhu 25oC
Kromatogram sampel urin normal dengan kode UNZ hari hari pertama
111
Kromatogram sampel urin normal dengan kode UNZ hari hari 14 suhu 4oC
Kromatogram sampel urin normal dengan kode UNZ hari 14 suhu 25oC
112
Kromatogram sampel urin normal yang ditambahkan MA dengan kode

UNX+MA hari pertama

UNX+MA hari 14 suhu 4oC
113

UNX+MA hari 14 suhu 25oC

UNY+MA hari pertama
114

UNY+MA hari 14 suhu 4oC

UNY+MA hari 14 suhu 25oC
115

UNZ+MA hari pertama

UNZ+MA hari 14 suhu 4oC
116

UNZ+MA hari 14 suhu 25oC
Kromatogram sampel urin pengguna sabu-sabu dengan kode UP1 hari

pertama
117
Kromatogram sampel urin pengguna sabu-sabu dengan kode UP1 hari 14

suhu 4oC

suhu 25oC
118

pertama

suhu 4oC
119

suhu 25oC

pertama
120

suhu 4oC

suhu 25oC
121
Spektra massa MA (mode full scan) m/z 44, 58, 91, dan 134
Spektra massa amfetamin (mode full scan) m/z 44, 65, 91, dan 120

Revisi Bu Dian

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Revisi Bu Dian

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

SEMINAR KELAYAKAN PENELITIAN TESIS

OPTIMASI SUHU PENYIMPANAN URIN TERHADAP

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN

OPTIMASI SUHU PENYIMPANAN URIN TERHADAP

PROGRAM STUDI MAGISTER KIMIA

SEMINAR KELAYAKAN PENELITIAN TESIS

Koordinator Program Studi Kimia

Dr. Drs. I Gusti Gede Agung Bawa, M.Si

Lampiran 1 Jadwal penelitian ...............................................................................92

1.1 Latar belakang

Di jaman globalisasi kemajuan teknologi, komunikasi, dan transportasi

peredaran ilegal narkotika, kemudahan peredaran narkotika ini menyebabkan

melonjaknya kasus penyalahgunaan narkotika. Kasus penyalahgunaan narkotika

hanya negara-negara maju tetapi merambah hingga negara-negara berkembang,

salah satunya Indonesia (Widayanto, 2016).

Provinsi Bali merupakan tujuan destinasi utama baik bagi wisatawan

domestik maupun mancanegara, sektor pariwisata merupakan penyumbang

terbesar bagi pemasukan Provinsi Bali menyebabkan semakin mudahnya

peredaran narkotika khususnya di Provinsi Bali. Berdasarkan Keputusan Menteri

Kesehatan Republik Indonesia Nomor: 194/ Menkes/ SK/VI/ 2012 Tentang

Penunjukan Laboratorium Pemeriksaan Narkotika dan Psikotropika,

Laboratorium Forensik Polda Bali mempunyai Subbidang Narkoba yang

melaksanakan pemeriksaan sampel Narkoba bukan hanya diwilayah Provinsi Bali

lainnya (Depkes, 2012).

Salah satu jenis narkotika yang sering disalahgunakan yaitu metamfetamin

diperiksa di Loboratorium Forensik Polda Bali, 16 ribu diantaranya merupakan

Metamfetamin. Pada rentang waktu 4 tahun terakhir (2017-2020) jumlah kasus

penyalahgunaan sabu-sabu terus mengalami peningkatan hal ini dibuktikan

disertai dengan pengambilan sampel biologis terduga pengguna narkotika seperti

mengkonfirmasi penggunaan sabu-sabu oleh terduga (Bidlabfor, 2021).

Metamfetamin (MA) sering juga disebut sabu-sabu merupakan jenis

memiliki kecendrungan yang sangat besar untuk menyebabkan kecanduan,

merusak susunan saraf pusat dan bahkan menyebabkan kematian sehingga

dilarang penggunaannya. Dalam menjaring penyalahgunaan narkotika terdapat

banyak kendala yang dihadapi oleh aparat penegak hukum khususnya di

pembuat, pemasok, maupun pengguna. Selain pembuktian metamfetamin melalui

diekskresikan (Indrati, 2015).

Pemeriksaan obat-obatan terlarang di dalam urin lebih umum dilakukan

pemeriksaan urin adalah mudahnya dilakukan pemalsuan dengan cara

hampir mirip dengan senyawa narkotika sehingga dapat mengacaukan hasil

pada pemeriksaan di laboratorium. Hal ini sebagai upaya untuk mencegah

terjadinya penambahan narkotika secara langsung kedalam urin yang mungkin

dapat dilakukan oleh pihak yang tidak bertanggung jawab.

Dalam tubuh beberapa senyawa obat dapat mengalami biotransformasi

menjadi metabolitnya seperti halnya senyawa metamfetamin dalam tubuh sangat

mudah mengalami biotransformasi menjadi beberapa metabolitnya, sekitar 70%

dari metamfetamin yang diekskresikan melalui urin akan dikeluarkan dalam

bentuk utuhnya, sedangkan sekitar 30% akan diekskresikan dalam bentuk

metabolit mayornya yaitu amfetamin, 4-hidroksi metamfetamin ataupun metabolit

ditambahkan metamfetamin di luar tubuh memiliki perbedaan hasil analisis

dengan urin pengguna metamfetamin, pada urin yang ditambahkan metamfetamin

saat analisis dengan GC (Gas Chromatography) tidak akan memunculkan puncak

kromatogram dari metabolit mayornya sebab tidak adanya proses biotransformasi,

memiliki hasil dan karaterisrik dari pecahan MS (Mass Spectrometry) yang

pengguna metamfetamin (Mei dkk, 2009).

stabilitas yang berbeda-beda sehingga nantinya akan mempengaruhi hasil analisis

(David, 2005). Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, senyawa

degradasi yang signifikan setelah 7 hari penyimpanan ditandai dengan

menurunnya kadar metamfetamin (Manuela dkk., 2017). Penelitian lain yang

dilakukan oleh Kei Zaitsu, dkk (2008) menyebutkan degradasi metamfetamin

menunjukkan penambahan zat berupa pengawet dapat mencegah kerusakan

matrik urin sehingga puncak kromatogram metamfetamin yang muncul dapat

dianalisis tanpa adanya puncak kromatogram reference, penelitian ini juga