USULAN PENELITIAN

PEMBERIAN GEL EKSTRAK DAUN MANGKOKAN

(Nothopanax scutellarium L.) 25% MENINGKATKAN
JUMLAH FOLIKEL DAN MEMPERCEPAT
PERTUMBUHAN RAMBUT KELINCI JANTAN YANG
TERPAPAR SINAR ULTRAVIOLET B

PUTU INDAH SITARESMI

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2022
 USULAN PENELITIAN

PEMBERIAN GEL EKSTRAK DAUN MANGKOKAN

(Nothopanax scutellarium L.) 25% MENINGKATKAN
JUMLAH FOLIKEL DAN MEMPERCEPAT
PERTUMBUHAN RAMBUT KELINCI JANTAN YANG
TERPAPAR SINAR ULTRAVIOLET B

PUTU INDAH SITARESMI

NIM 1780711038

PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU KEDOKTERAN
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2022

i
 PEMBERIAN GEL EKSTRAK DAUN MANGKOKAN
(Nothopanax scutellarium L.) 25% MENINGKATKAN
JUMLAH FOLIKEL DAN MEMPERCEPAT
PERTUMBUHAN RAMBUT KELINCI JANTAN YANG
TERPAPAR SINAR ULTRAVIOLET B

Tesis untuk Memperoleh Gelar Magister

Pada Program Magister Program Studi Ilmu Biomedik
Fakultas Kedokteran Universitas Udayana

PUTU INDAH SITARESMI

NIM 1780711038

PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2022

ii
 Lembar Pengesahan

TESIS INI TELAH DISETUJUI

TANGGAL :

Pembimbing I : Pembimbing II :

Dr. dr. I Gusti Nyoman Darmaputra ,Sp.KK(K).,FINSDV Dr. dr. Luh Putu Ratna Sundari, M.Biomed
NIP. 198001182009121003 NIP.197509042008012005

Mengetahui,

Koordinator Program Studi Magister Biomedik Dekan

Fakultas Kedokteran Fakultas Kedokteran
Universitas Udayana Universitas Udayana

Dr. dr. I. Made Muliarta, M.Kes Dr. dr. Komang Januartha Putra Pinatih,M.Kes
NIP.197601262003121001 NIP.196701221996011001

iii
 Tesis Ini Telah Diuji Dan Dinilai Oleh Panitia Penguji Pada

Program Magister Fakultas Kedokteran Universitas Udayana

Pada Tanggal :

Berdasarkan SK Rektor Universitas Udayana,

No : ..........................

Tanggal : .....................

Tim Penguji :

Ketua : Dr. dr. I Gusti Nyoman Darmaputra ,Sp.KK(K).,FINSDV

(Pembimbing I)
Anggota : 1. Dr. dr. Luh Putu Ratna Sundari, M.Biomed
(Pembimbing II)
2. Prof. Dr. dr. J. Alex Pangkahila, M.Sc, Sp.And-KSAAM
3. Dr. dr. Ni Made Linawati, S.Ked, M.Si
4. Dr. dr. Putu Ayu Asri Damayanti, S.Ked, M.Kes

iv
 DAFTAR ISI

Halaman
SAMPUL DALAM......................................................................................... i
LEMBAR PRASYARAT GELAR ............................................................... ii
LEMBAR PERSETUJUAN .......................................................................... iii
LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................... iii
PENETAPAN PANITIA PENGUJI ............................................................ iv
DAFTAR ISI................................................................................................... v
DAFTAR GAMBAR......................................................................................viii
DAFTAR SINGKATAN ............................................................................... ix

BAB I PENDAHULUAN .............................................................................. 1

1.1 Latar Belakang ..................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ................................................................................ 7
1.3 Tujuan Penelitian ................................................................................. 7
1.4 Manfaat Penelitian ............................................................................... 8

BAB II KAJIAN PUSTAKA ......................................................................... 9

2.1 Penuaan .............................................................................................. 9
2.1.1 Teori Proses Penuaan.................................................................. 10
2.1.1.1 Wear and Tear Theory ...................................................... 10
2.1.1.2 Programmed Theory ......................................................... 11
2.2 Rambut ............................................................................................. 12
2.2.1 Definisi Rambut .......................................................................... 12
2.2.2 Anatomi Rambut ......................................................................... 13
2.2.2.1 Batang Rambut.................................................................. 14
2.2.2.2 Akar Rambut ..................................................................... 15
2.2.2.3 Folikel Rambut ................................................................ 15
2.2.3 Siklus Pertumbuhan Rambut.......................................................... 17

v
 2.2.4 Faktor Yang Mempengaruhi Pertumbuhan Rambut...................... 19
2.2.4.1 Hormon ............................................................................. 19
2.2.4.2 Nutrisi ............................................................................... 19
2.2.4.3 Vaskularisasi ..................................................................... 20
2.2.4.4 Usia (Penuaan) .................................................................. 20
2.2.5 Rambut Rontok ( Hair Lost) ....................................................... 20
2.3 Sinar Ultraviolet (UV) ......................................................................... 22
2.3.1 Sinar Ultraviolet B....................................................................... 22
2.3.2 Efek UV B Terhadap Rambut...................................................... 23
2.4 Daun Mangkokan (Nothopanax scutellarium L.) ................................ 25
2.4.1 Tanaman Mangkokan .................................................................. 25
2.4.2 Kandungan Daun Mangkokan ..................................................... 26
2.4.3 Manfaat Daun Mangkokan Pada Pertumbuhan Rambut ............. 26
2.5 Hewan Coba : Kelinci Putih ................................................................ 28
2.5.1 Taksonomi Kelinci ...................................................................... 30
2.5.2 Karakteristik Umum Kelinci ....................................................... 30

BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS

PENELITIAN ................................................................................ 32
3.1 Kerangka Berpikir ............................................................................ 32
3.2 Konsep Penelitian.............................................................................. 34
3.3 Hipotesis Penelitian .......................................................................... 35

BAB IV METODE PENELITIAN................................................................ 36

4.1 Rancangan Penelitian ........................................................................... 36
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ............................................................... 37
4.3 Populasi dan Sampel ............................................................................ 38
4.3.1 Populasi Penelitian.................................................................... 38
4.3.2 Sampel Penelitian .................................................................... 38
4.3.2.1 Kriteria Sampel................................................................ 38
4.3.2.2 Besar Sampel dan Teknik Penentuan Sampel................. 38

vi
 4.3.3 Teknik Pengambilan Sampel ................................................... 39
4.4 Variabel Penelitian................................................................................ 40
4.4.1 Identifikasi Variabel ................................................................ 40
4.4.2 Hubungan Antar Variabel ........................................................ 40
4.4.3 Definisi Operasional Variabel ................................................. 41
4.5 Alat, Bahan Penelitian, dan Hewan Percobaan.................................... 43
4.5.1 Alat Penelitian ....................................................................... 43
4.5.2 Bahan Penelitian .................................................................... 44
4.5.3 Hewan Percobaan ................................................................... 44
4.6 Prosedur Penelitian .............................................................................. 45
4.7 Alur Penelitian ..................................................................................... 49
4.8 Analisis Data ....................................................................................... 50

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 51

LAMPIRAN ..............................................................................................

vii
 DAFTAR GAMBAR

Halaman
Gambar 2.1 Anatomi Rambut ........................................................................ 14
Gambar 2.2 Gambaran Histologi Folikel Rambut .......................................... 16
Gambar 2.3 Siklus Pertumbuhan Rambut ...................................................... 18
Gambar 2.4 Efek Radiasi UVB Terhadap Folikel Rambut ............................ 24
Gambar 2.5 Daun Mangkokan (Nothopanax scutellarium L.)........................ 26
Gambar 2.6 Kelinci Putih (Oryctolagus cuniculus)........................................ 31
Gambar 3.1 Konsep Penelitian ....................................................................... 34
Gambar 4.1 Rancangan Penelitian ................................................................. 36
Gambar 4.2 Hubungan Antar Variabel Penelitian ......................................... 40
Gambar 4.3 Alur Penelitian ............................................................................ 49
 DAFTAR SINGKATAN

ACTH = Adrenocorticotropic hormone

AE = Anagen effluvium
bFGF = Basic fibroblast growth factor
CTS = Connective tissue sheath
DHEA = Dehydroepiandrosterone
DM = Diabetes mellitus
DNA = Deoxyribonucleic Acid
EGF = Epidermal growth factor
FGF = Fibroblast growth factor
GF = Growth factor
HE = Hematoxylin Eosin
HGF = Hepatocyte growth factors
IGF-1 = Insulin-like growth factor-1
IL 1 = Interleukin 1
IL 4 = Interleukin 4
KGF = Keratinocyte growth factors
MSH = Melanocyte-stimulating hormone
PDGF = Platelet derived growth factor
ROS = Reactive Oxygen Species
TE = Telogen effluvium
TFG-b2 = Transforming growth factor-b2
TGF-alfa = Transforming growth factor alfa
TGF-beta = Transforming growth factor beta
TNF-alfa = Tumor necrosis factor -alfa
TNF-beta = Tumor necrosis factor -beta
UV = Ultraviolet
UVA = Ultraviolet A
UVB = Ultraviolet B
VEGF = Vascular endothelial factors

ix
VEGF = Vascular endothelial growth factor

x
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Menjadi tua merupakan suatu hal yang alamiah yang pasti terjadi pada

setiap makhluk hidup termasuk manusia. Semua orang akan mengalami proses

penuaan dimana terjadi penurunan fungsi tubuh, sehingga dapat menimbulkan

penyakit degeneratif seperti diabetes melitus, hipertensi, kanker, dan lain-lain

yang kemudian akan berujung pada kematian. Pandangan umum beranggapan

bahwa proses penuaan itu adalah hal yang wajar terjadi dan membiarkan berbagai

tanda dan gejala penuaan muncul.

Penuaan merupakan suatu proses kompleks yang dapat disebabkan oleh

interaksi dari pengaruh lingkungan dan berbagai sistem dalam tubuh dimana

terjadi proses menghilangnya secara perlahan-lahan kemampuan jaringan untuk

memperbaiki diri atau mengganti diri dan mempertahankan struktur dan fungsi

normalnya. Ada banyak faktor yang menyebabkan orang menjadi tua, dan dengan

semakin bertambahnya usia, maka akan terjadi penurunan berbagai fungsi organ

tubuh dan terjadinya perubahan fisik, baik tingkat seluler, organ, maupun sistem

pada tubuh, karena terjadinya proses penuaan. Faktor-faktor penyebab penuaan ini

kemudian dikelompokkan menjadi faktor internal dan eksternal. Faktor internal

meliputi terbentuknya radikal bebas yang dapat merusak sel, penurunan efisiensi

mitokondria, terjadinya ikatan glukosa-protein, penurunan kemampuan membran

1
sel dan penurunan sistem imun, hormon yang berkurang, proses glikolisis,

metilasi

2
 3

DNA dan apoptosis. Faktor eksternal meliputi gaya hidup yang tidak sehat, stress,

polusi lingkungan, kemiskinan dan radiasi sinar ultraviolet (UV) (Pangkahila,

2011).

Proses penuaan ini terjadi pada seluruh jaringan dan organ di dalam tubuh,

termasuk pada rambut. Rambut pada orang yang lebih tua akan mengalami

penipisan dan batang rambut menjadi lebih rapuh oleh karena menurunnya

regenerasi pertumbuhan rambut (Buffoli et al., 2014). Pada usia 40-50 tahun

terdapat perubahan pada batang rambut, diameter rambut, densitas rambut,

elastisitas rambut dan kutikula rambut juga menjadi lebih rapuh sehingga rambut

mulai mudah rontok (Takahashi et al., 2015). Rambut yang mengalami proses

penuaan non androgen pada umur diatas 60 tahun terdapat penurunan progresif

dalam jumlah folikel anagen dan diameter rambut (Fischer et al., 2012). Pada

orang usia lanjut akan cenderung mengalami penurunan diameter folikel rambut

dan ketebalan rambut (Matsumura et al., 2016). Selain itu, penelitian

membuktikan bahwa penuaan menyebabkan berkurangnya jumlah folikel rambut

akibat dari berkurangnya jumlah dan aktivitas dari stem cell folikel rambut

sehingga menimbulkan fenotip kebotakan atau alopecia (Garza et al., 2011).

Selain penuaan secara alamiah, paparan terhadap sinar UV juga dapat

menyebabkan penuaan pada rambut. Di antara berbagai penyebab penuaan

eksternal, sinar matahari khususnya ultraviolet (UV), memberikan efek yang

menonjol pada kulit. Radiasi UV telah banyak diketahui bertanggung jawab atas

banyak efek biologis mulai dari sengatan matahari akut hingga kanker kulit

(Piérard-Franchimont et al., 2010). Menurut efek utama dan panjang gelombang

 4

mereka, radiasi UV dibagi menjadi UVC (200-280 nm), UVB (280-315 nm), dan

UVA (315-400 nm) (Fischer et al., 2012). Karena UVB memiliki lebih banyak

energi intrinsik daripada UVA, sinar UVB telah lama dianggap bertanggung

jawab atas sebagian besar fotoaging pada manusia. Sementara konsekuensi dari

paparan UV kronis pada kulit yang tidak terlindungi, terutama fotokarsinogenesis

dan elastosis telah diketahui dan diakui secara general, efek UV terhadap penuaan

rambut sangat jarang diperhatikan. Namun, beberapa pengamatan klinis dan

morfologis serta pertimbangan teoritis menunjukkan bahwa radiasi UV memiliki

beberapa efek penuaan rambut (Fischer et al., 2012; Trueb, 2015).

Sejauh ini, hanya telah ditunjukkan bahwa UV menginduksi inflamasi

kronis pada kulit dapat memberikan efek merusak tidak langsung pada

pertumbuhan rambut, misalnya pada kulit kepala yang botak dan terbakar

matahari (Hengl et al., 2018).

Untuk mencegah efek penuaan rambut yang diakibatkan oleh radiasi sinar

UV, dapat dilakukan berbagai upaya seperti menghindari paparan sinar UV

menggunakan pelindung rambut dan mengunakan bahan-bahan yang memiliki

efek stimulasi pertumbuhan rambut atau antioksidan yang mencegah kerusakan

folikel rambut akibat radikal bebas.

Minoxidil merupakan salah satu bahan sintetik yang beredar di pasaran

yang digunakan untuk menumbuhkan rambut. Namun penggunaan Minoxidil

berpotensi menimbulkan efek samping pada penggunaannya seperti alergi kulit,

sakit kepala, vertigo, edema sampai hipotensi (Messenger and Rundegren, 2009).

Penggunaan bahan herbal telah diterima secara luas di negara berkembang dan
 5

negara maju pada bidang pengobatan maupun pada bidang kosmetik. Hal ini

karena dipercaya bahwa bahan herbal alamiah memiliki potensi yang cukup baik

dengan efek samping yang sangat minimal (Wiraguna, 2013).

Mangkokan (Nothopanax scutellarium L.) merupakan tanaman yang

banyak tumbuh di Indonesia, biasanya tanaman ini tumbuh di pekarangan rumah

masyarakat. Tanaman mangkokan tidak hanya digunakan sebagai tanaman hias,

tetapi juga memiliki efek dalam mempercepat proses penyembuhan luka, anti

inflamasi dan membantu pertumbuhan rambut (Aini, 2017). Manfaat daun

mangkokan sebagai penumbuh rambut sudah dibuktikan bahwa pada konsentrasi

25% ekstrak daun mangkokan sudah memiliki aktivitas pertumbuhan rambut

(Setyoningsih, 2004). Penelitian yang lebih baru menunjukkan bahwa hair tonic

yang mengandung ekstrak etanol daun mangkokan (Nothopanax scutellarium L.)

dengan variasi konsentrasi 25%, 35% dan 45% menemukan bahwa konsentrasi

25% adalah konsentrasi yang paling efektif dalam meningkatkan pertumbuhan

rambut kelinci jantan (Aini, 2017).

Kemampuan ekstrak etanol daun mangkokan dalam meningkatkan

aktivitas pertumbuhan rambut diduga karena adanya kandungan senyawa

flavonoid, vitamin A, B1 dan C. Flavonoid dapat berfungsi sebagai antimikroba,

antivirus dan antioksidan (Panche et al., 2016). Radikal bebas merupakan salah

satu penyebab kerontokan rambut, sehingga senyawa flavonoid dapat mencegah

radikal bebas tersebut dan mempercepat pertumbuhan rambut (Jubaidah et al.,

2018). Berdasarkan beberapa penelitian, flavonoid berkontribusi pada aktivitas

pertumbuhan rambut dengan memperkuat dinding kapiler di folikel rambut, serta

 6

meningkatkan sirkulasi darah untuk menyuburkan folikel rambut yang dapat

meningkatkan pertumbuhan rambut (Awe dan Makinde, 2009). Studi lain juga

menunjukkan bahwa flavonoid dapat memperpendek fase telogen dan dapat

memperpanjang fase anagen. Berdasarkan penelitian, flavonoid dapat

memperpanjang fase anagen dengan memperpanjang kelangsungan hidup sel

papilla dermal di folikel rambut dengan meningkatkan proliferasi dan efek anti-

apoptosis yang dapat merangsang pertumbuhan rambut pada fase anagen (Rifkia

et al., 2017). Peran flavonoid pada aktivitas pertumbuhan rambut disebabkan oleh

beberapa faktor pertumbuhan rambut, seperti insulin-like growth factor-1 (IGF-1),

vascular endothelial growth factors (VEGF), keratinocyte growth factors (KGF),

dan hepatocyte growth factors (HGF), faktor-faktor ini memiliki efek merangsang

pertumbuhan rambut (Awe dan Makinde, 2009; Rifkia et al., 2017).

Kandungan vitamin A, B1 dan C merupakan faktor nutrisi yang berperan

dalam pertumbuhan rambut (Goluch-Koniuszy et al., 2016). Selain itu, daun

mangkokan juga mengandung saponin yang mempunyai kemampuan untuk

membentuk busa yang berarti mampu membersihkan kulit dari kotoran serta

sifatnya sebagai counter iritan, yang dapat meningkatkan sirkulasi darah perifer

sehingga dapat meningkatkan pertumbuhan rambut. Daun mangkokan juga

mengandung Alkaloid yang merupakan metabolit sekunder yang dapat

meningkatkan pertumbuhan rambut dan memperbesar tangkai rambut karena

suplai zat makanan bertambah (Purwantini et al., 2008; Jubaidah et al., 2018).

Banyaknya bukti ilmiah mengenai efek positif ekstrak etanol daun

mangkokan dalam meningkatkan aktivitas pertumbuhan rambut menjadi dasar

 7

ilmiah dilakukannya penelitian ini. Penelitian sebelumnya cenderung hanya

mengukur pertumbuhan rambut saja tanpa melihat efeknya terhadap jumlah

folikel rambut. Selain itu, penelitian sebelumnya menggunakan kelinci yang tidak

mengalami penuaan dan tidak diinduksi penuaan seperti induksi radiasi sinar

UVB. Maka dari itu, perlu dilakukan penelitian yang menguji efek gel ekstrak

etanol daun mangkokan 25% dalam meningkatkan pertumbuhan rambut dan

jumlah folikel rambut kelinci jantan yang terpapar sinar ultraviolet B. Penggunaan

konsentrasi 25% didasarkan atas penelitian yang telah dilakukan sebelumnya yang

membuktikan konsentrasi ini adalah yang paling efektif untuk merangsang

pertumbuhan rambut (Sadiah et al., 2015; Aini, 2017).

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan, dapat dirumuskan

beberapa masalah penelitian sebagai berikut:

1. Apakah pemberian gel ekstrak daun mangkokan (Nothopanax

scutellarium L.) 25% meningkatkan jumlah folikel rambut kelinci

jantan yang terpapar sinar ultraviolet B?

2. Apakah pemberian gel ekstrak daun mangkokan (Nothopanax

scutellarium L.) 25% mempercepat pertumbuhan rambut kelinci jantan

yang terpapar sinar ultraviolet B?

1.3 Tujuan Penelitian

 8

1. Untuk membuktikan bahwa pemberian gel ekstrak daun mangkokan

(Nothopanax scutellarium L.) meningkatkan jumlah folikel rambut kelinci

jantan yang terpapar sinar ultraviolet B.

2. Untuk membuktikan bahwa pemberian gel ekstrak daun mangkokan

(Nothopanax scutellarium L.) mempercepat pertumbuhan rambut kelinci

jantan yang terpapar sinar ultraviolet B.

1.4 Manfaat Penelitian

Hasil penelitian ini secara umum dapat dijadikan dasar teoritik mengenai

manfaat gel ekstrak daun mangkokan (Nothopanax scutellarium L.) untuk

mencegah timbulnya salah satu gejala penuaan oleh karena paparan ultraviolet,

yaitu rambut rontok dan kebotakan. Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat

menjadi dasar ilmiah untuk penelitian selanjutnya pada manusia (uji klinis)

sebelum dapat diaplikasikan pada masyarakat secara luas.

 BAB II

KAJIAN PUSTAKA

2.1 Penuaan

Setiap mahluk hidup pasti akan menua atau menjadi tua. Proses ini tidak

dapat dihindari dan dijauhi. Di mana dengan bertambahnya usia seseorang , secara

alami berbagai fungsi tubuh akan mengalami penurunan, sehingga kita harus

menghambat maupun memperbaiki fungsi serta struktur tersebut.

Ada banyak faktor yang menyebabkan orang menjadi tua yaitu melalui

proses penuaan, sakit, dan akhirnya membawa kepada kematian. Pada dasarnya

faktor itu di kelompokan menjadi dua yaitu faktor internal dan faktor eksternal.

Beberapa faktor internal yaitu radikal bebas, hormon yang berkurang, proses

glikosilasi, metilasi, apoptosis, sistem kekebalan yang menurun dan genetik.

Faktor eksternal yang utama yaitu gaya hidup , diet yang tidak sehat, kebiasaan

yang salah, polusi lingkungan, stres, dan kemiskinan. Dengan melihat faktor di

atas maka kita dapat menentukan faktor mana yang dapat dihindari atau di atasi

sehingga penuaan dapat dicegah dan dihambat (Pangkahila, 2011).

Proses penuaan tidak terjadi begitu saja dengan langsung menampakan

perubahan fisik dan psikis. Proses penuaan dapat berlangsung melalui tiga tahap

sebagai berikut (Pangkahila, 2011) :

1. Tahap subklinik (usia 25-35 tahun)

9
 10

Pada tahap ini, sebagian besar hormon di dalam tubuh mulai menurun,

yaitu hormon testosteron, growth hormon, dan hormon estrogen. Pembentukan

radikal
 11

bebas dapat merusak sel dan DNA mulai mempengaruhi tubuh. Kerusakan ini

biasanya tidak tampak dari luar, karena itu pada usia ini dianggap usia muda dan

normal.

2. Tahap transisi (usia 35-45 tahun)

Pada tahap ini kadar hormon menurun sampai 25%. Massa otot berkurang

sebanyak satu kilogram tiap tahunnya. Pada tahap ini orang mulai merasa tidak

muda lagi dan tampak lebih tua. Kerusakan oleh radikal bebas mulai merusak

ekspresi genetik yang dapat mengakibatkan penyakit seperti kanker, radang sendi,

berkurangnya memori, penyakit jantung koroner dan diabetes.

3. Tahap klinik (usia 45 tahun ke atas)

Pada tahap ini penurunan kadar hormon terus berlanjut yang meliputi

DHEA, melatonin, growth hormon, testosteron, estrogen, dan juga hormon tiroid.

Terjadi penurunan bahkan hilangnya kemampuan penyerapan bahan makanan,

vitamin, dan mineral. Penyakit kronis menjadi lebih nyata, sistem organ tubuh

mulai mengalami kegagalan.

2.1.1 Teori Proses Penuaan

Teori proses penuaan dibagi menjadi dua kelompok yaitu wear and tear

theory dan programmed theory (Pangkahila, 2011).

2.1.1.1 Wear and Tear Theory

Teori ini pertama kali diperkenalkan oleh ahli biologi dari jerman, Dr

August Weismann pada tahun 1882. Menurut beliau, tubuh dan sel akan rusak jika

digunakan secara berlebihan dan di salah gunakan. Saat usia muda, sistem

pemeliharaan dan perbaikan sel bekerja dengan normal. Seiring dengan

 12

bertambahnya usia, tubuh mulai kehilangan kemampuan itu diakibatkan oleh diet,

lingkungan, toksin, bakteri atau virus. Teori ini menyatakan pentingnya suplemen

nutrisi yang dapat merangsang tubuh agar supaya tetap memiliki kemampuan

perbaikan dan pemeliharaan. Wear and Tear Theory meliputi :

1. Proses penuaan

Berarti proses penyembuhan di tingkat molekuler yang tidak sempurna

dan sebagai akibat dari penimbunan kerusakan molekul yang terus menerus.

Keseimbangan antara kerusakan DNA dan keberhasilan penyembuhan DNA

menentukan rentang usia seseorang.

2. Teori Penuaan Radikal Bebas

Radikal bebas adalah suatu atom atau molekul yang mempunyai susunan

elektron tidak berpasangan sehingga bersifat amat tidak stabil. Untuk menjadi

stabil, radikal bebas menyerang sel-sel untuk mendapatkan elektron pasangannya

dan terjadilah reaksi berantai yang menyebabkan kerusakan jaringan yang luas.

3. Glikosilasi

Glikosilasi berkaitan erat dan merupakan faktor penting yang berkaitan

dengan DM Tipe 2 di mana glikosilasi menyebabkan kekakuan arteri, katarak dan

hilangnya fungsi saraf yang merupakan komplikasi yang umum terjadi pada

diabetes.

2.1.1.2 Programmed Theory

Teori ini menganggap bahwa di dalam tubuh manusia terdapat jam

biologik mulai dari proses konsepsi sampai pada tahap kita mati dalam suatu

model terprogram. Proses ini terprogram mulai dari sel sampai embrio, janin,
 13

masa bayi, anak-anak, remaja, dewasa, menjadi tua dan akhirnya meninggal

(Pangkahila, 2011). Teori ini terdiri dari:

1. Terbatasnya replikasi sel

Pada ujung chromosome strands terdapat struktur yang disebut telomer.

Dalam setiap replikasi sel telomere memendek pada setiap pembelahan sel.

Setelah sejumlah pembelahan sel, telomer telah dipakai dan pembelahan sel

berhenti

2. Proses Imun

Sistem imun merupakan komponen penting dalam pertahanan melawan zat

asing dari luar. Seiring bertambahnya usia kemampuan sistem untuk

menghasilkan antibodi mengalami penurunan.

3.Teori Hormon

Teori ini berdasarkan peranan berbagai hormon bagi fungsi organ tubuh.

Pada usia muda, berbagai hormon bekerja dengan baik mengendalikan berbagai

fungsi organ tubuh agar optimal. Sedangkan ketika usia tua, tubuh hanya mampu

memproduksi hormon lebih sedikit sehingga levelnya menurun. Akibatnya

berbagai fungsi tubuh terganggu. Dengan demikian terdapat hubungan erat antara

perubahan hormon dengan proses penuaan (Pangkahila, 2011).

2.2 Rambut

2.2.1 Definisi Rambut

Rambut merupakan struktur yang berasal dari epidermis kulit namun

berubah bentuk dan fungsinya (adneksa kulit) yang tumbuh pada hampir seluruh
 14

permukaan kulit manusia kecuali telapak tangan dan telapak kaki. Berbeda dengan

binatang yang berbulu, pertumbuhan rambut di beberapa bagian kulit manusia

tidak sama lebat dan panjangnya, ada yang tumbuh terus sampai panjang misalnya

pada kepala dan ada pula yang hanya terbatas pada kepanjangan tertentu misalnya

pada badan (Sari dan Wibowo, 2016).

Rambut sehat memiliki ciri-ciri tebal, berwarna hitam, berkilau, tidak

kusut dan tidak rontok menjadi kebutuhan semua orang. Rambut terdapat hampir

pada seluruh bagian tubuh dan memiliki berbagai fungsi, antara lain fungsi

estetika bagi manusia (Sari dan Wibowo, 2016). Jenis rambut pada manusia pada

garis besarnya dapat digolongkan 2 jenis yaitu, rambut terminal dan rambut velus.

Rambut terminal adalah rambut kasar yang mengandung banyak pigmen.

Terdapat di kepala, alis, bulu mata, ketiak, dan genitalia eksterna. Rambut

terminal diproduksi oleh folikel-folikel rambut besar yang ada di lapisan subkutis.

Secara umum diameter rambut terminal > 0,03 mm. Sedangkan rambut velus

adalah rambut halus yang sedikit mengandung pigmen, rambut velus diproduksi

oleh folikelfolikel rambut yang sangat kecil yang ada di lapisan dermis,

diameternya < 0,03 mm (Soepardiman, 2010).

2.2.2 Anatomi Rambut

Rambut tumbuh pada bagian epidermis kulit, berdistribusi merata pada

seluruh bagian tubuh. Komponen rambut terdiri dari keratin, asam nukleat,

karbohidrat sistein, lemak, arginin, sitrulin dan enzim. Secara anatomi rambut

dibagi menjadi dua bagian, yaitu bagian batang rambut dan akar rambut, yang

dihasilkan oleh folikel rambut (Soepardiman, 2010).

 15

Gambar 2.1
Anatomi Rambut
(Sumber Gambar : dictio.id)

2.2.2.1 Batang Rambut

Bagian rambut yang ada di bagian luar kulit dinamakan batang rambut.

Jika batang rambut dipotong melintang, maka akan terlihat tiga lapisan dari luar

kedalam yaitu (Sari dan Wibowo, 2016) :

1. Kutikula rambut, terdiri dari sel-sel keratin yang pipih dan saling

bertumpuk. Lapisan ini keras dan berfungsi untuk melindungi rambut

dari kekeringan dan masuknya bahan asing ke dalam batang rambut.

2. Korteks rambut, adalah lapisan yang lebih dalam (antara kutikula dan

medulla), terdiri dari sel-sel yang memanjang, tersusun rapat. Lapisan

ini sebagian besar terdiri dari pigmen rambut dan rongga berisi udara.
 16

3. Medula rambut, terdiri dari tiga atau empat lapis sel yang berbentuk

kubus, berisikan keratohyalin, droplet lemak dan rongga udara.

2.2.2.2 Akar Rambut

Bagian rambut yang terletak di dalam lapisan dermis kulit disebut akar

rambut dan folikel rambut. Folikel rambut dikelilingi oleh pembuluh darah yang

memberikan nutrisi. Akar rambut terdiri dari dua bagian yaitu (Sari dan Wibowo,

2016) :

1. Umbi rambut, yaitu bagian rambut yang akan terbawa jika rabut

dicabut

2. Papila rambut, merupakan bagian rambut yang tetinggal di dalam kulit

meskipun rambut dicabut sehingga akan selalu terjadi pertumbuhan

rambut baru kecuali jika papilla rambut tersebut rusak.

2.2.2.3 Folikel Rambut

Folikel rambut adalah suatu insersi sel-sel epidermal ke dalam dermis yang

membentuk selubung akar bagian sebelah luar dari sehelai rambut. Berada di

tengah-tengah dari selubung akar bagian sebelah luar adalah selubung akar bagian

sebelah dalam yang mengelilingi berkas rambut. Bergerak secara vertikal ke

bawah dari folikel rambut, ditemukan sejumlah struktur anatomis. Bukaan pada

epidermis, yang disebut kanal rambut, diikuti oleh saluran kelenjar sebasea. Di

bawahnya adalah otot arrector pili. Folikel rambut terletak membentuk suatu

sudut dengan kulit, dan ketika kulit dikenai suhu dingin, otot arrector pili menarik

folikel rambut hingga bergerak secara vertikal. Piloereksi meningkatkan ketebalan

relatif kulit, yang lebih lanjut melindungi kulit terhadap cedera akibat dingin.
 17

Pada bagian dasar dari folikel adalah papila, yang di dalamnya terjadi

pertumbuhan sel (Lai-Cheong dan McGrath, 2009; Taub dan Pham, 2018).

Gambar 2.2
Gambaran Histologi Folikel Rambut
(Kazem et al., 2014)

Folikel rambut tidak terus-menerus memproduksi rambut. Sebaliknya

mereka melalui tiga siklus pertumbuhan, degenerasi, dan istirahat. Kecuali folikel

janggut dan kulit kepala, siklus yang umum bertahan selama beberapa bulan;

folikel kulit kepala melalui suatu siklus yang bertahan rata-rata 1.100 hari.

Walaupun jumlahnya beragam kurang lebih 10% tergantung warna rambut, rata-

rata kulit kepala mengandung kurang lebih 100.000 folikel. Kurang lebih 100

rambut rontok dari kulit kepala setiap harinya. Rambut kulit kepala tumbuh pada

laju kurang lebih 35 hingga 37 mm/hari, tetapi pertumbuhan ini dapat dipengaruhi

oleh beragam obat, seperti hormon seks laki-laki dan perempuan, hormon tiroid,

dan kortikosteroid (Lai-Cheong dan McGrath, 2009).

Setiap rambut individu disusun oleh sel-sel epitelial yang terkeratinasi, yang

dipersatukan satu sama lain oleh beragam protein khusus. Latar belakang etnik

menghasilkan perbedaan-perbedaan pada struktur dan tekstur rambut kulit kepala,

 18

tetapi efek keetnisan ini tidak ditemukan pada rambut bagian-bagian tubuh yang

lain (Lai-Cheong dan McGrath, 2009).

2.2.3 Siklus Pertumbuhan Rambut

Masa hidup atau daur tiap helai rambut berbeda dengan helai rambut

lainnya, oleh karena itu secara berulang mengalami pertumbuhan, kerontokan, dan

pertumbuhan kembali. Daur ini dibagi menjadi tiga bagian: anagen

(pertumbuhan), katagen (terhentinya pertumbuhan), dan telogen (periode istirahat)

mekanismenya dijelaskan dalam Gambar 2.3 (Gestetner, 2013).

Fase anagen (pertumbuhan) adalah saat terjadinya sintesis batang rambut

dan pigmentasi, lamanya menentukan panjang rambut. Pada rambut kepala

berlangsung selama 2-8 tahun (Cotsarelis dan Botchkarev, 2008). Katagen atau

fase peralihan/regresi yang ditandai dengan menurunnya produksi melanin di

bulbus terjadi selama 2-3 minggu. Pada fase telogen (istirahat) rambut gada akan

terdorong keluar, yang tampak sebagai batang rambut yang terdepigmentasi pada

bagian proksimal (Sari dan Wibowo, 2016).

Pertumbuhan dan perkembangan folikel rambut dipengaruhi oleh beberapa

sitokin dan growth factor (GF) yang diproduksi oleh sel papilla dermis. Substansi

ini memulai dan mengontrol epitel intrafolikular dan interaksi mesenkimal. Juga

mempengaruhi proliferasi dan diferensiasi sel matriks folikel rambut dengan

mengeluarkan sinyal spesifik yang menginduksi berbagai stadium siklus rambut.

Molekul bioaktif tersebut antara lain interleukin-1 alfa, FGF, EGF, KGF,

substansi P, IGF-1, hormone tiroid, paratiroid, dan androgen. Aktivitas sel papilla
 19

dermis sendiri dikontrol oleh substansi yang diproduksi oleh lapisan spinosum

sarung akar luar dan hormon. Beberapa peptida yang dihasilkan lapisan spinosum

dan mempengaruhi papilla dermis antara lain basic fibroblast growth factor

(bFGF), platelet derived growth factor (PDGF), dan transforming growth factor

beta (TGF-beta) (Kubanov et al., 2017).

Gambar 2.3
Siklus Pertumbuhan Rambut
(Gestetner, 2013)

Berbagai macam molekul sinyal yang mengontrol siklus rambut tersebut

digolongkan ke dalam 3 kelompok (Gestetner, 2013; Kubanov et al., 2017):

1. Memulai fase anagen, IGF 1, bFGF, EGF, VEGF, TGF-alfa yang

merupakan faktor mitogenik kuat untuk keratinosit dan sel endotel.

2. Mempertahankan folikel anagen matang, IGF 1, VEGF, yang

menstimulasi proliferasi vaskularisasi dan proses diferensiasi.

 20

3. Menginduksi fase katagen dan degradasi folikel rambut, IL 1, IL 4, TNF-

alfa, TNF-beta, merupakan sitokin pro-apoptotic dan penghambat

pertumbuhan.

2.2.4 Faktor yang Mempengaruhi Pertumbuhan Rambut

2.2.4.1 Hormon

Hormon yang berperan adalah androgen, estrogen, tiroksin, dan

kortikosteroid. Masa pertumbuhan rambut 0,35 mm/hari, lebuh cepat pada wanita

daripada pria. Hormon androgen dapat mempercepat pertumbuhan dan

menebalkan rambut di daerah janggut, kumis, ketiak, kemaluan, dada, tungkai

laki-laki, serta rambut-rambut kasar lainnya. Namun, pada kulit kepala penderita

alopesia androgenetik hormone androgen bahkan memperkecil diameter batang

rambut serta memperkecil waktu pertumbuhan rambut anagen. Pada wanita

aktivitas hormon androgen akan menyebabkan hirsutisme, sebaliknya hormon

estrogen dapat memperlambat pertumbuhan rambut, tetapi memperpanjang

anagen, (Soepardiman, 2010).

2.2.4.2 Nutrisi

Malnutrisi berpengaruh pada pertumbuhan rambut terutama malnutrisi

protein dan kalori. Pada keadaan ini rambut menjadi kering dan suram. Adanya

kehilangan pigmen setempat sehingga rambut tampak berbagai warna.

Kekurangan vitamin B12, asam folat, dan zat besi juga dapat menyebabkan

kerontokan rambut. (Soepardiman, 2010).

 21

2.2.4.3 Vaskularisasi

Vaskularisasi dapat mempengaruhi pertumbuhan rambut, namun bukan

merupakan penyebab primer dari gangguan pertumbuhan rambut, karena destruksi

bagian 2/3 bawah folikel sudah berlangsung sebelum susunan pembuluh darah

mengalami perubahan. Salah satu factor nevaskularisasi yang disebut sebagai

vascular endothelial growth factor (VEGF) merupakan factor yang sangat

berperan untuk meningkatkan diameter folikel rambut dan mempercepat proses

pertumbuhan rambut dengan menyediakan lebih banyak pembuluh darah dan

vaskularisasi folikel rambut (Yano et al., 2011).

2.2.4.4 Usia (penuaan)

Manusia baik pria maupun wanita sama-sama akan menderita kerontokan

rambut karena penuaan yang merupakan akibat dari menurunnya proses

pertumbuhan rambut. Kerontokan pada umumnya dimulai di ubun-ubun, dahi, dan

pelipis, lalu bergeser ke belakang. Di bagian-bagian ini fase anagen rambut

menjadi singkat, rambut lebih cepat rontok dan rambut halus tumbuh sebagai

gantinya, folikel rambut mengalami atrofi, fase pertumbuhan bertambah singkat,

rambut lepas lebih cepat dan densitas rambut juga berkurang (Monselise et al.,

2017).

2.2.5 Rambut Rontok (hair lost)

Rambut rontok (hair loss) adalah suatu kelainan di mana jumlah rambut

lebih sedikit atau terlepas lebih banyak dari normal, dengan atau tanpa penipisan

yang tampak. Orang dewasa rata-rata mempunyai 90 ribu sampai 150 ribu helai
 22

rambut di kepala. Normalnya rambut kepala terlepas sebanyak 80–120 helai/hari

(Paus et al., 2008). Jumlah folikel rambut kepala normalnya sekitar 100.000, dan

disebut sebagai kelainan jika jumlahnya mencapai 50% yang berarti sekitar

50.000 helai (Umborowati and Rahmadewi, 2012). Mekanisme atau proses

kerontokan rambut dapat terjadi melalui kerontokan atau efluvium (telogen

efluvium (TE) adalah kerontokan rambut berlebih yang disebabkan karena

peningkatan proporsi folikel rambut fase telogen dan anagen efluvium (AE)

adalah kerontokan rambut yang disebabkan oleh perawatan medis untuk kanker,

penyebab rambut rontok parah paling sering oleh kemoterapi), patahnya batang

rambut yang rusak serta kebotakan atau alopecia (sikatrik artinya permanen dan

non sikatrik artinya masih ada harapan untuk tumbuh) (Soepardiman, 2010).

Efluvium hampir selalu terjadi karena adanya gangguan pada siklus pertumbuhan

rambut karena sebab apa pun. Kerusakan pada batang rambut dapat menyebabkan

rambut patah yang tampak sebagai rambut rontok. Alopesia non sikatrik terjadi

karena gangguan siklus pertumbuhan rambut, sementara proses regenerasi folikel

yang tidak sempurna dapat memicu alopesia sikatrik (Paus et al., 2008)

Rambut yang rontok karena faktor lingkungan (ekstrinsik) memiliki tahapan

yaitu patahnya batang rambut yang rusak, kemudian telogen efluvium, setelah itu

anagen efluvium, dan terakhir terjadi alopecia sikatrikalis. Faktor lingkungan

(ekstrinsik) bisa menyebabkan kerontokkan karena polusi lingkungan yang ada di

udara dan air, begitu juga dengan paparan klorin, logam, dan mineral berat bisa

menyebabkan ketidakseimbangan hormon yang bisa berkontribusi dalam rambut

 23

rontok. Paparan sinar UV dan radikal bebas juga bisa membuat sel kulit kepala

dan rambut menua sebelum waktunya (Soepardiman, 2010).

2.3 Sinar Ultraviolet (UV)

Penuaan dini pada rambut merupakan penuaan yang terjadi akibat efek

buruk kronis dari sinar ultraviolet yang menumpuk dengan gejala penuaan

kronologis. Radiasi ultraviolet dengan panjang gelombang 100-400 nm

merupakan 5% dari seluruh radiasi sinar yang ada. Radiasi ultra violet terbagi atas

tiga golongan yaitu UVA (320-400nm), UVB (280-320nm) dan UVC (100-

280nm). UVC biasanya tidak sampai ke permukaan bumi kecuali pada dataran

tinggi sekali dimana UVC ini diserap oleh lapisan ozon pada atmosfer. Yang

paling banyak berpengaruh kepada kesehatan kulit adalah UVB, karena panjang

gelombangnya yang lebih pendek dan paling banyak menembus bumi. UVB

memiliki lebih banyak energi intrinsik daripada UVA, sinar UVB telah lama

dianggap bertanggung jawab atas sebagian besar fotoaging pada manusia.

Sementara konsekuensi dari paparan UV kronis pada kulit yang tidak terlindungi,

terutama fotokarsinogenesis dan elastosis telah diketahui dan diakui secara

general, efek UV terhadap penuaan rambut sangat jarang diperhatikan. Namun,

beberapa pengamatan klinis dan morfologis serta pertimbangan teoritis

menunjukkan bahwa radiasi UV memiliki beberapa efek penuaan rambut (Fischer

et al., 2012; Trueb, 2015).

2.3.1 Sinar Ultraviolet B

Ultraviolet B (UVB) merupakan spektrum radiasi ultra violet dengan

panjang gelombang 280 – 315 nm, dan merupakan sinar ultraviolet yang paling
 24

efektif menembus bumi dan mengakibatkan kerusakan pada kulit manusia.

Kerusakan yang terjadi oleh karena ultraviolet B lebih sering berdampak pada

kerusakan DNA sel yang merupakan kromofornya. Sinar UVB yang banyak

terserap ke epidermis dan menembus ke papila dermis (Jeong et al., 2013).

2.3.2 Efek UVB terhadap Rambut

Sementara konsekuensi dari paparan UV kronis pada kulit yang tidak

terlindungi, terutama fotokarsinogenesis dan elastosis telah diketahui dan diakui

secara general, efek UV terhadap penuaan rambut sangat jarang diperhatikan.

Namun, beberapa pengamatan klinis dan morfologis serta pertimbangan teoritis

menunjukkan bahwa radiasi UV memiliki beberapa efek penuaan rambut (Fischer

et al., 2012; Trueb, 2015).

Sejauh ini, hanya telah ditunjukkan bahwa UV menginduksi inflamasi

kronis pada kulit dapat memberikan efek merusak tidak langsung pada

pertumbuhan rambut misalnya, pada kulit kepala yang botak dan terbakar

matahari (Trueb, 2015). Pada tikus, radiasi UVB dapat menginduksi apoptosis

pada folikel rambut (Zhong and Li, 2016). Pada paparan sinar UV dosis 20

mJ/cm2, terjadi apoptosis (aktivasi casp-3/p53) pada folikel rambut, sedangkan

pada paparan dosis 50 mJ/cm2, kematian sel nekrotik lebih dominan (laktat

dehidrogenase meningkat) (Lu et al., 2009). Kerusakan oksidatif pada

mitokondria dan DNA genomik ditandai dengan peningkatan kadar 8-OH-dG

terutama diamati pada radiasi UVB 20 mJ/cm2

 25

(Gambar 2.4).

Gambar 2.4
Efek Radiasi UVB terhadap Folikel Rambut. (A) Radiasi UVB dosis rendah,
20mJ/cm2 menginduksi apoptosis, sedagkan (B) dosis tinggi, 50 mJ/cm2
menginduksi nekrosis
(Lu et al., 2009)

Melanogenesis folikel dan imunoreaktivitas ACTH menurun secara drastis,

tetapi melanocyte-stimulating hormone (MSH) tetap tidak berubah, sedangkan

ekspresi transforming growth factor-b2 (TFG-b2) bergeser dari luar menuju

selubung akar rambut bagian dalam. Baik jumlah sel mast dan tingkat degranulasi

sel mast meningkat pada connective tissue sheath (CTS), dan immunoreaktivitas

CD117 sel CTS dan matriks keratinosit diregulasi. Dengan demikian, UVR secara

berbeda memodifikasi pertumbuhan dan siklus rambut, mempromosikan kematian

sel, dan menginduksi kejadian regulasi yang kompleks dalam folikel rambut

manusia (Lu et al., 2009). Peneliti melaporkan bahwa pemberian UVB 280-310
 26

nm ke kulit tikus memberikan efek penghambatan pertumbuhan rambut in vivo

sehingga menimbulkan alopesia telogen (Lu et al., 2009).

2.4 Daun Mangkokan (Nothopanax scutellarium L.)

2.4.1 Tanaman Mangkokan

Merupakan perdu tahunan, tumbuh tegak, tinggi 1-3 meter. Batang

bercabang, bulat, panjang, dan lurus. Daun tunggal, bertangkai, agak tebal, bentuk

bulat berlekuk seperti mangkok, pangkal berbentuk jantung, tepi bergerigi,

diameter 6-12 cm, pertulangan menyirip, warnanya hijau tua. Bunga mangkokan

merupakan bunga majemuk, bentuk payung, warnanya hijau. Buahnya buah buni,

pipih, hijau. Biji kecil, keras, dan berwarna cokelat.

Ditanam sebagai tanaman hias atau tanaman pagar, walaupun dapat

ditemukan tumbuh liar. Mangkokan di sini jarang atau tidak pernah berbunga,

menyukai tempat terbuka yang terkena sinar matahari atau sedikit terlindung, dan

dapat tumbuh pada ketinggian 1 - 200 m dpl (Sadiah et al., 2015; Aini, 2017).

Klasifikasi dari tanaman mangkokan (Sadiah et al., 2015; Aini, 2017) :

Kingdom : Plantae

Subkingdom : Tracheobionta

Super Divisi : Spermatophyta

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Sub Kelas : Rosidae

Ordo : Apiales
 27

Famili : Araliaceae

Genus : Nothopanax

Spesies : Nothopanax scutellarium L.

Gambar 2.5
Daun Mangkokan (Nothopanax scutellarium L.)
(Sumber : kompasiana.com)

2.4.2 Kandungan Daun Mangkokan

Daun mangkokan mengandung senyawa flavonoid dan fenolik yang

beraktivitas sebagai antioksidan (Andarwulan et al., 2010). Selain itu, penelitian

lain menunjukkan bahwa daun mangkokan mengandung alkaloid, saponin,

flavanoid, polifenol, lemak, kalsium, fosfor, besi, serta vitamin (A, B, dan C)

(Hariana, 2008).

2.4.3 Manfaat Daun Mangkokan pada Pertumbuhan Rambut

Kemampuan ekstrak etanol daun mangkokan dalam meningkatkan aktivitas

pertumbuhan rambut diduga karena adanya kandungan senyawa flavonoid,

 28

vitamin A, B1 dan C. Flavonoid dapat berfungsi sebagai antimikroba, antivirus

dan antioksidan (Panche et al., 2016). Radikal bebas merupakan salah satu

penyebab kerontokan rambut, sehingga senyawa flavonoid dapat mencegah

radikal bebas tersebut dan mempercepat pertumbuhan rambut (Jubaidah et al.,

2018). Berdasarkan beberapa penelitian, flavonoid berkontribusi pada aktivitas

pertumbuhan rambut dengan memperkuat dinding kapiler di folikel rambut, serta

meningkatkan sirkulasi darah untuk menyuburkan folikel rambut yang dapat

meningkatkan pertumbuhan rambut (Awe dan Makinde, 2009). Studi lain juga

menunjukkan bahwa flavonoid dapat memperpendek fase telogen dan dapat

memperpanjang fase anagen. Berdasarkan penelitian, flavonoid dapat

memperpanjang fase anagen dengan memperpanjang kelangsungan hidup sel

papilla dermal di folikel rambut dengan meningkatkan proliferasi dan efek anti-

apoptosis yang dapat merangsang pertumbuhan rambut pada fase anagen (Rifkia

et al., 2017). Peran flavonoid pada aktivitas pertumbuhan rambut disebabkan oleh

beberapa faktor pertumbuhan rambut, seperti insulin-like growth factor-1 (IGF-1),

vascular endothelial growth factors (VEGF), keratinocyte growth factors (KGF),

dan hepatocyte growth factors (HGF), faktor-faktor ini memiliki efek merangsang

pertumbuhan rambut (Awe dan Makinde, 2009; Rifkia et al., 2017).

Kandungan vitamin A, B1 dan C merupakan faktor nutrisi yang berperan

dalam pertumbuhan rambut (Goluch-Koniuszy et al., 2016). Selain itu, daun

mangkokan juga mengandung saponin yang mempunyai kemampuan untuk

membentuk busa yang berarti mampu membersihkan kulit dari kotoran serta

sifatnya sebagai counter iritan, yang dapat meningkatkan sirkulasi darah perifer
 29

sehingga dapat meningkatkan pertumbuhan rambut. Daun mangkokan juga

mengandung Alkaloid yang merupakan metabolit sekunder yang dapat

meningkatkan pertumbuhan rambut dan memperbesar tangkai rambut karena

suplai zat makanan bertambah (Purwantini et al., 2008; Jubaidah et al., 2018).

Banyaknya bukti ilmiah mengenai efek positif ekstrak etanol daun

mangkokan dalam meningkatkan aktivitas pertumbuhan rambut menjadi dasar

ilmiah dilakukannya penelitian ini. Sebelumnya, penelitian-penelitian tersebut

cenderung hanya mengukur pertumbuhan rambut saja tanpa melihat efeknya

terhadap jumlah folikel rambut. Selain itu, penelitian sebelumnya menggunakan

kelinci yang tidak mengalami penuaan dan tidak diinduksi penuaan seperti induksi

radiasi sinar UVB. Maka dari itu, perlu dilakukan penelitian yang menguji efek

gel ekstrak etanol daun mangkokan 25% dalam meningkatkan pertumbuhan

rambut dan jumlah folikel rambut kelinci jantan yang terpapar sinar ultraviolet B.

Penggunaan konsentrasi 25% didasarkan atas dua penelitian yang telah dilakukan

sebelumnya yang membuktikan konsentrasi ini adalah yang paling efektif untuk

merangsang pertumbuhan rambut (Sadiah et al., 2015; Aini, 2017).

2.5 Hewan Coba: Kelinci Putih

Hewan laboratorium atau hewan percobaan adalah hewan yang sengaja

dipelihara dan diternakkan untuk dipakai sebagai hewan model guna mempelajari

serta mengembangkan berbagai macam bidang ilmu dalam skala penelitian atau

pengamatan laboratorium. Para ahli sering menggunakan hewan yang memiliki

karakteristik kebutuhan biologi untuk menjawab pertanyaan dalam penelitian

 30

tersebut. Umumnya hewan yang digunakan dalam penelitian adalah rodensia dan

kelinci (Mapara et al., 2012). Jenis hewan lain yang dapat digunakan untuk

penelitian ialah reptil, amfibi, ikan, ayam, babi, kambing, anjing, kucing, dan

monyet (Leary et al., 2013).

Hewan percobaan adalah hewan yang digunakan dalam penelitian biologis

maupun biomedis atau jenis hewan yang dipelihara secara intensif di

laboratorium. Sebagai hewan percobaan, hewan laboratorium harus memiliki

persyaratan-persyaratan, antara lain (1) mudah diperoleh dengan jumlah yang

memadai; (2) mudah dipelihara, diproduksi dan ditangani; (3) mudah

diamati/dimonitor; (4) memberikan responss fisiopatologi yang cenderung sama;

(5) tersedia cukup informasi tentang positif dan negatifnya hewan tersebut

menjadi model; (6) tidak tergantikan dengan model non-hewan seperti simulasi

komputer ataupun oleh studio in vitro (Ogden et al., 2016).

Kelinci merupakan satu diantara mamalia yang bermanfaat. Kelinci

biasanya dimanfaatkan untuk produksi daging, hewan percobaan, dan hewan

peliharaan. Jenis kelinci untuk beberapa tujuan berbeda-beda. Banyak jenis kelinci

yang tersedia, satu diantara yang umum dipakai di laboratorium adalah New

Zealand White (Mapara et al., 2012).

Kelinci (Oryctolagus cuniculus) yang dipelihara sekarang berasal dari

kelinci liar di Eropa. Kelinci yang dipelihara di Indonesia sebagian besar adalah

keturunan kelinci yang dibawa dari Belanda dan termasuk jenis kelinci kecil

dengan bobot badan kurang dari 2 kg. Jenis inilah yang sering digunakan sebagai

hewan percobaan. Selain kelinci kecil terdapat juga kelinci yang lebih besar (± 5
 31

kg) yang sengaja diimpor dari Eropa, Selandia Baru, Australia, dan Amerika

untuk tujuan produksi daging bagi konsumsi manusia. Hasil persilangan antara

kedua jenis kelinci tersebut sudah banyak dipelihara oleh petani dan biasanya

kelinci jenis besar digunakan untuk produksi antiserum, sedangkan kelinci jenis

kecil digunakan untuk uji-uji kualitatif (Brahmantiyo dan Raharjo, 2012).

2.5.1 Taksonomi Kelinci

Secara umum taksonomi kelinci (Oryctolagus cuniculus) adalah sebagai

berikut:

Phylum : Chordata

Subphylum : Vertebrata

Class : Mamalia

Order : Lagomorpha

Family : Leporidae

Genus : Oryctolagus

Species : Oryctolagus cuniculus

2.5.2 Karakteristik Umum Kelinci

Selain karakteristik sepasang gigi seri atas, ada perbedaan yang

membedakan kelinci dari hewan rodensia lainnya (Brahmantiyo dan Raharjo,

2012). .

Bobot badan :

Jantan dewasa 2-5 kg

Betina dewasa 2-6 kg

Bobot lahir 30-80 g

 32

Pemeriksaan Klinis

Temperatur rektal 38.5OC (101.3OF-104.OF)

Jantung normal 180-250 kali/menit

Respirasi normal 30-60 kali/menit

Umur Pubertas dan kawin

Kematangan sexual (jantan) 22-52 minggu

(betina) 22-52 minggu

Kawin (jantan) 60-72 bulan

(betina) 24-36 bulan

Gambar 2.6
Kelinci Putih (Oryctolagus cuniculus)
( Sumber : www.sciencedirect.com)
 BAB III

KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN

3.1 Kerangka Berpikir

Menjadi tua merupakan suatu hal yang alamiah yang pasti terjadi pada

setiap makhluk hidup termasuk manusia. Proses penuaan ini terjadi pada seluruh

jaringan dan organ di dalam tubuh, termasuk pada rambut. Pada orang usia lanjut

akan cenderung mengalami penurunan diameter folikel rambut dan ketebalan

rambut. Selain itu, penuaan menyebabkan berkurangnya jumlah folikel rambut

akibat dari berkurangnya jumlah dan aktivias dari stem cell folikel rambut

sehingga menimbulkan fenotip kebotakan atau alopecia.

Selain penuaan secara alamiah, paparan terhadap sinar UV juga dapat

menyebabkan penuaan pada rambut. Karena UVB memiliki lebih banyak energi

intrinsik daripada UVA, sinar UVB telah lama dianggap bertanggung jawab atas

sebagian besar fotoaging pada manusia. UV menginduksi inflamasi kronis pada

kulit dapat memberikan efek merusak tidak langsung pada pertumbuhan rambut.

Pada tikus, iradiasi UVB dapat menginduksi apoptosis pada folikel rambut dengan

aktivasi casp-3/p53. Radiasi UVB menyebabkan stres oksidatif pada mitokondria

dan DNA genomik pada folikel rambut. Peneliti melaporkan bahwa pemberian

UVB 280-310 nm ke kulit tikus memberikan efek penghambatan pertumbuhan

rambut in vivo sehingga menimbulkan alopesia telogen.

Untuk mencegah efek penuaan rambut yang diakibatkan oleh radiasi sinar

UV, dapat dilakukan berbagai upaya seperti menghindari paparan sinar UV

33
 34

menggunakan pelindung rambut dan mengunakan bahan-bahan yang memiliki

efek stimulasi pertumbuhan rambut atau antioksidan yang mencegah kerusakan

folikel rambut akibat radikal bebas.

Mangkokan (Nothopanax scutellarium L.) merupakan tanaman yang banyak

tumbuh di Indonesia, dan manfaat 25% ekstrak daun mangkokan sudah

dibuktikan sebagai penumbuh rambut. Selain itu, hasil penelitian lain

menunjukkan bahwa daun mangkokan mempunyai efek mempercepat

pertumbuhan rambut pada kelinci jantan. Jika dibandingkan dengan konsentrasi

35% dan 45%, konsentrasi 25% lebih efektif dalam meningkatkan pertumbuhan

rambut kelinci jantan. Efek ini karena ekstrak etanol daun mangkokan

mengandung senyawa flavonoid, vitamin A, B1 dan C, saponin dan alkaloid.

Banyaknya bukti ilmiah mengenai efek positif ekstrak etanol daun

mangkokan dalam meningkatkan aktivitas pertumbuhan rambut menjadi dasar

ilmiah dilakukannya penelitian ini. Sebelumnya, penelitian-penelitian tersebut

cenderung hanya mengukur pertumbuhan rambut saja tanpa melihat efeknya

terhadap jumlah folikel rambut. Selain itu, penelitian sebelumnya menggunakan

kelinci yang tidak mengalami penuaan dan tidak diinduksi penuaan seperti induksi

radiasi sinar UVB. Maka dari itu, perlu dilakukan penelitian yang menguji efek

gel ekstrak etanol daun mangkokan dalam meningkatkan pertumbuhan rambut

dan jumlah folikel rambut kelinci jantan yang terpapar sinar ultraviolet B.

34
 35

3.2 Konsep Penelitian

Berdasarkan rumusan masalah dan kajian pustaka maka disusun konsep

penelitian sebagai berikut:

Gel Ekstrak Etanol Daun

Mangkokan

Faktor Internal Faktor Eksternal

 Hormon  Nutrisi
 Usia  Lingkungan
 Jenis Kelamin  Stres Sosial
 Genetik

Kelinci Jantan yang Terpapar

Sinar Ultraviolet B
 Jumlah Folikel Rambut
 Pertumbuhan Rambut
 36

Gambar 3.1
Konsep Penelitian

Diteliti

Tidak diteliti

3.3 Hipotesis Penelitian

Berdasarkan kerangka berpikir dan konsep yang telah diuraikan, dapat

dirumuskan beberapa hipotesis penelitian sebagai berikut:

1. Pemberian gel ekstrak daun mangkokan (Nothopanax scutellarium L.) 25%

meningkatkan jumlah folikel rambut kelinci jantan yang terpapar sinar

ultraviolet B.

2. Pemberian gel ekstrak daun mangkokan (Nothopanax scutellarium L.) 25%

mempercepat pertumbuhan rambut kelinci jantan yang terpapar sinar

ultraviolet B.
 BAB IV

METODE PENELITIAN

4.1. Rancangan Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menggunakan

post test only control group design (Federer, 2008). Pada kelompok subjek

penelitian yang memenuhi persyaratan inklusi kemudian dilakukan randomisasi

dan dibagi menjadi 2 kelompok. Kelompok kontrol negatif dengan radiasi sinar

UVB dan gel plasebo (P0) dan kelompok perlakuan dengan radiasi sinar UVB dan

diberikan gel ekstrak daun mangkokan (Nothopanax scutellarium L.) 25% (P1).

Rancangan penelitian dapat digambarkan dengan skema sebagai berikut:

1
P0

P1

Gambar 4.1
Rancangan Penelitian
Keterangan :

P = Populasi

S = Sampel

R = Randomisasi

P0 = Perlakuan pada kelompok kontrol dengan radiasi sinar UVB dan

gel placebo.

37
 38

P1 = Perlakuan pada kelompok perlakuan dengan radiasi sinar UVB dan

diberikan gel ekstrak daun mangkokan 25%.

O1 = Pemeriksaan jumlah folikel rambut dan pertumbuhan rambut pada

kelompok P0.

O2 = Pemeriksaan jumlah folikel rambut dan pertumbuhan rambut pada

kelompok P1.

4.2. Lokasi dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Biomedik Terpadu, Fakultas

Kedokteran Universitas Udayana. Pemeliharaan, perlakuan hewan coba dan

pemeriksaan pertumbuhan rambut dilakukan di Laboratory Animal Unit, Bagian

Farmakologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Udayana. Pemeriksaan jumlah

folikel rambut dilakukan di Laboratorium Patologi, Fakultas Kedokteran Hewan,

Universitas Udayana. Pembuatan ekstrak daun mangkokan, pemeriksaan fitokimia

dan pembuatan gel konsentrasi 25% dilakukan di Laboratorium Fakultas

Teknologi Pertanian, Universitas Udayana.

Penelitian ini dilakukan selama 8 minggu dengan rincian sebagai berikut :

1. Minggu I : persiapan, pemilihan dan adaptasi hewan coba.

2. Minggu II- V : perlakuan sesuai dengan kelompok masing-

masing selama 4 minggu.

3. Minggu VI-VII : pemeriksaan jumlah folikel rambut dan

pertumbuhan rambut.

4. Minggu VIII : analisis data

 39

4.3. Populasi dan Sampel

4.3.1. Populasi Penelitian

Populasi pada penelitian ini adalah:

a. Populasi target pada penelitian ini adalah seluruh kelinci yang dipelihara dan

menerima perlakuan di kandang hewan Laboratorium Biomedik Terpadu,

Fakultas Kedokteran, Universitas Udayana.

b. Populasi terjangkau adalah kelinci putih jantan yang berumur 3-4 bulan

dengan berat badan rata-rata 1.8– 2.5 kg (Aini, 2017).

4.3.2. Sampel Penelitian

Sampel dalam penelitian ini adalah kelinci, yang memenuhi kriteria inklusi

dan kriteria eksklusi.

4.3.2.1. Kriteria Sampel

Kriteria inklusi :

a. Kelinci sehat (aktif dan tidak menunjukkan kelainan anatomi)

b. Jenis kelamin jantan

c. Umur 3-4 bulan (Aini, 2017)

d. Berat badan rata-rata 1.8– 2.5 kg (Aini, 2017).

e. Mau makan dan minum

Kriteria drop out : apabila kelinci mati pada saat penelitian.

4.3.2.2. Besar Sampel dan teknik penentuan sampel

Penentuan jumlah sampel yang digunakan dalam penelitian ini

menggunakan rumus penentuan replikasi yang dilakukan oleh Federer (2008)

sebagai berikut:
 40

(t-1)(n-1) ≥ 15, dimana t = banyaknya perlakuan,

n = banyaknya ulangan

Dalam perhitungan rumus diatas diketahui banyak perlakuan adalah 2

kelompok, sehingga t = 2, maka didapatkan jumlah sampel (n) minimum yang

digunakan adalah 16 ekor per kelompok. Untuk mengantisipasi terjadinya drop

out pada sampel, maka dalam penelitian jumlah sampel ditambah 10%. Dengan

demikian jumlah sampel masing-masing kelompok adalah 18 ekor kelinci.

Sehingga total kelinci yang diperlukan dalam penelitian ini adalah 36 ekor.

4.3.3 Teknik pengambilan sampel

Semua sampel yang memenuhi kriteria penelitian (yang memenuhi kriteria

inklusi) dimasukkan dalam sampel peneltian. Teknik penentuan sampel dilakukan

dengan cara sebagai berikut :

a. Dari populasi kelinci diadakan pemilihan sampel berdasarkan kriteria

inklusi.

b. Dari jumlah sampel yang telah memenuhi syarat, diambil secara random

sesuai dengan jumlah sampel.

c. Dari sampel yang telah dipilih kemudian dibagi menjadi 2 kelompok

secara random yaitu kelompok kontrol dengan radiasi sinar UVB dan gel

placebo; dan kelompok perlakuan dengan radiasi sinar UVB dan diberikan

gel ekstrak daun mangkokan 25% masing-masing berjumlah 18 ekor.

 41

4.4 Variabel

4.4.1 Identifikasi Variabel

1. Variabel bebas yaitu gel placebo dan gel ekstrak etanol daun

mangkokan 25%

2. Variabel tergantung yaitu jumlah folikel rambut dan pertumbuhan

rambut.

3. Variabel prakondisi yaitu radiasi sinar UVB

4. Variabel kendali yaitu jenis kelinci yang digunakan, umur kelinci,

berat badan kelinci, jenis kelamin kelinci, nutrisi, kondisi lingkungan

(suhu, kelembaban, cahaya), kesehatan kelinci, makanan dan minuman.

4.4.2 Hubungan antar Variabel

Variabel Prakondisi
Radiasi sinar UVB

Variabel Bebas Variabel Tergantung

 Gel placebo Kelinci Jantan  Jumlah Folikel Rambut
 Gel ekstrak etanol daun  Pertumbuhan Rambut
mangkokan 25%

Variabel Kendali
Jenis kelinci, umur, berat badan,
jenis kelamin, nutrisi, kondisi
lingkungan, kesehatan, makanan
dan minuman.
 42

Gambar 4.2
Hubungan antar Variabel

4.4.3 Definisi Operasional Variabel

Variabel bebas

1. Gel placebo adalah sediaan gel yang hanya mengandung bahan dasar gel

(sodium lauryl sulphate, proylene glycol, stearyl alcohol, white petrolatum,

purified water) tanpa penambahan zat aktif, diaplikasikan dengan jumlah

0.2mg/cm2 sehari 2 kali yaitu 20 menit sebelum radiasi sinar UVB dan 4

jam setelah radiasi UVB. Pada hari yang tidak diberi radiasi sinar UVB juga

diberikan gel placebo dalam jumlah yang sama pada waktu yang sama.

2. Gel ekstrak etanol daun mangkokan 25% adalah sediaan Gel dengan

formulasi sodium lauryl sulphate, propylene glycol, stearyl alcohol, white

petrolatum, purified water ditambah ekstrak maserasi bertingkat daun

mangkokak (pelarut etanol 96% dan etil asetat) dengan konsentrasi 25%,

diaplikasikan dengan jumlah 0.2mg/cm2 sehari 2 kali yaitu 20 menit

sebelum radiasi sinar UVB dan 4 jam setelah radiasi UVB. Pada hari yang

tidak diberi radiasi sinar UVB juga diberikan gel ekstrak etanol daun

mangkokan 25% dalam jumlah yang sama pada waktu yang sama.

Variabel tergantung
 43

1. Jumlah folikel rambut pada penelitian ini adalah jumlah folikel rambut pada

lapisan dermis kulit yang sebelumnya telah dicukur, diberikan radiasi sinar

UVB dan diberikan gel placebo atau gel ekstrak etanol daun mangkokan

25% yang diperiksa secara histologis. Folikel rambut dihitung dari

sediaan/preparat histologi jaringan dermis yang telah diwarnai dengan

pewarnaan Haematoxilin Eosin. Setiap preparat diamati pada 3 lapangan

pandang yaitu pada kedua sudut dan bagian tengah preparat dengan

perbesaran lensa objektif 400x, difoto, kemudian jumlah folikel rambut

dihitung, dijumlahkan dan dirata-rata. Data yang didapatkan berskala rasio

dengan satuan folikel/lapang pandang.

2. Pertumbuhan rambut pada penelitian ini adalah panjang rambut yang

tumbuh pada kulit yang sebelumnya telah dicukur, diberikan radiasi sinar

UVB dan diberikan gel placebo atau gel ekstrak etanol daun mangkokan

25%. Pajang rambut diukur dengan menggunakan penggaris. Data yang

didapatkan berskala rasio dengan satuan mm.

Variabel prakondisi

1. Radiasi sinar UVB pada penelitian ini bersumber dari lampu UVB PL-

S9W/01/2P medical merk Philips dengan gel–nb-uvb-311 yang diberikan

sebanyak 3 kali seminggu yaitu hari Senin, Rabu dan Jumat dengan dosis

65mJ/cm2 yaitu dipapar selama 65 detik setiap sesi, sehingga total UVB

yang diterima selama 2 minggu adalah 390 mJ/cm.

Variabel kendali
 44

1. Jenis kelinci yang digunakan pada penelitian ini adalah kelinci putih,

strain lokal yang didapatkan dari Laboratory Animal Unit, Bagian

Farmakologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Udayana.

2. Umur kelinci yang digunakan adalah umur 3-4 bulan (Aini, 2017)

3. Berat badan kelinci normal pada kelinci umur 3-4 bulan adalah rata-rata

1.8– 2.5 kg (Aini, 2017).

4. Jenis kelamin kelinci yang digunakan adalah jantan untuk mencegah efek

fluktuasi hormone anablik akibat siklus menstruasi.

5. Nutrisi yang dimaksudkan adalah makanan dan minuman yang diberikan

secara ad libitum. Makanan yang diberikan adalah rumput lapang ad

libitum dan 60 g kosentrat. Konsentrat (Herbafeed ®) yang digunakan pada

penelitian ii mengandung air (maksimal 12%), protein (12—18%), lemak

(maksimal 4%), serat kasar (maksimal 14%), kalsium (1,36%), dan fosfor

(0,7%). Minuman adalah aquabidest yang juga diberikan ad libitum

(Marhaeniyanto dan Susanti, 2017).

6. Kondisi lingkungan pada penelitian ini dijaga agar kondusif untuk kelinci

yang meliputi suhu kendang , kelembaban, dan cahaya dijaga agar

memiliki siklus 12 jam terang dan 12 jam gelap.

7. Kesehatan kelinci pada penelitian ini dijaga agar tetap sehat yang

ditunjukkan dengan aktivitas yang aktif dan tidak menunjukkan kelainan

anatomi.

4.5. Alat, Bahan Penelitian dan Hewan percobaan

 45

4.5.1 Alat penelitian

Alat yang digunakan dalam penelitian ini, adalah :

1. Kandang kelinci.

2. Tempat minum.

3. Alat cukur.

4. Timbangan digital.

5. Lampu UVB merk Phillips.

6. Alat cukur silet merk Goal.

7. Timbangan digital merk Tanita.

8. Peralatan bedah seperti gunting anatomis untuk bedah, skalpel merk B

Braun.

9. Peralatan untuk membuat sediaan histopatologi seperti mikrotom, gelas

objek dan gelas penutup merk Yena.

10. Mikroskop merk Olympus Cx40.

11. Kamera merk Optilab Pro.

12. Penggaris besi merk Joyko.

4.5.2 Bahan penelitian

1. Reagen Haematoxilin Eosin.

2. Gel plasebo.

3. Gel ekstrak etanol daun mangkokan 25%.

4. Rumput lapang dan Konsentrat (Herbafeed®)

5. Aquabidest

4.5.3 Hewan percobaan

 46

Hewan percobaan yang digunakan dalam percobaan ini adalah kelinci putih

jantan yang berumur 3-4 bulan dengan berat badan rata-rata 1.8– 2.5 kg. Kelinci

ditempatkan dalam kandang bertingkat system bateray terbuat dari besi, dengan

ukuran petak kendang adalah panjang 60 cm, lebar 50 cm, dan tinggi 50 cm.

Kandang tersebut diletakkan pada ketingian minimal 30 cm dari permukaan tanah.

Dibawah kendang dipasang papan aluminium . Satu kandang di huni oleh 1 ekor

kelinci. Kandang harus cukup kuat, tidak mudah rusak, tahan gigitan, hewan tidak

mudah lepas, tapi hewan harus tampak jelas dari luar. Kandang ditempatkan

dalam ruangan berventilasi dan udara alami (Marhaeniyanto and Susanti, 2017).

4.6. Prosedur Penelitian

1. Sebanyak 36 ekor kelinci diadaptasi selama 1 minggu.

2. Secara random kelinci dibagi menjadi 2 kelompok. Kelompok kontrol

dengan radiasi sinar UVB dan gel placebo (P0); dan kelompok perlakuan

dengan radiasi sinar UVB dan diberikan gel ekstrak daun mangkokan 25%

(P1) masing-masing berjumlah 18 ekor.

3. Semua kelinci dari kelompok P0 dan P1 dicukur bulu punggungnya.

Kemudian dioleskan gel plasebo pada kelompok P0, dan gel ekstrak daun

mangkokan 25% pada kelompok P1, masing-masing krim dioleskan

sebanyak 0.2 mg/cm2 luas permukaan kulit kelinci.

4. Paparan UVB terhadap kulit yang sudah dicukur pada kelinci dari

kelompok P0 dan kelompok P1. Paparan sinar UVB diberikan 3 kali

seminggu yaitu hari Senin, Rabu dan Jumat dengan dosis 65 mJ/cm 2
 47

selama 65 detik setiap kelinci, selama 2 minggu.

5. Gel placebo dan gel ekstrak daun mangkokan 25% diaplikasikan 2 kali

sehari, yaitu 20 menit sebelum dipapar UVB (untuk memberikan waktu

absorpsi bahan topikal masuk ke dalam kulit) dan 4 jam setelah

penyinaran UVB (terbentuknya ROS dimulai 4 jam setelah paparan).

Aplikasi bahan topikal tetap dilakukan pada hari tanpa penyinaran.

6. Pada 48 jam setelah penyinaran terakhir (untuk menyingkirkan pengaruh

penyinaran akut), dilakukan pemeriksaan panjang rambut dengan

menggunakan penggaris besi merk Joyko dandilakukan pegambilan

sampel kulit untuk pemeriksaan jumlah folikel rambut.

7. Pemeriksaan panjang rambut dilakukan dengan penggaris besi merk Joyko

pada 10 rambut/kelinci pada area yang sebelumnya telah dicukur,

diberikan radiasi sinar UVB dan diberikan gel placebo atau gel ekstrak

etanol daun mangkokan 25%. Panjang 10 rambut ini kemudian dirata-rata

untuk masing-masing kelinci dan didapatkan panjang rambut dalam satuan

mm.

8. Pada proses pengambilan sampel kulit, hewan percobaan di bius dengan

menggunakan kombinasi ketamin (25 mg/kg BB) dan xylazin (3 mg/kg

BB) secara intramuskuler (Yudaniayanti et al., 2011).

9. Daerah punggung yang akan diambil jaringan kulitnya, dibersihkan dari

rambut dan dilakukan punch biopsy dengan diameter 4 mm hingga

kedalaman subkutan lalu dimasukkan kedalam pot plastic steril berisi

larutan PBS formalin 10% untuk selanjutnya dibuat sediaan histologis

 48

untuk pemerksaan jumlah folikel rambut sebagai data posttest.

10. Kelinci kemudian dikembalikan ke Laboratory Animal Unit, Bagian

Farmakologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Udayana.

11. Pembuatan sediaan histologis

a. Tahap fiksasi. Jaringan kulit kelinci direndam dalam larutan formalin

buffer fosfat 10% selama 1 hari. Kemudian dilakukan trimming bagian

jaringan yang akan diambil.

b. Tahap dehidrasi. Jaringan kulit kelinci direndam dengan alkohol

bertingkat berturut-turut 30%, 40%, 50%, 70%, 80%, 90%, 96%

masing-masing 3 kali selama 25 menit.

c. Tahap clearing. Jaringan dimasukkan ke dalam clearing agent

(alkohol: toluene = 1 : 1) selama 30 menit dan dicelupkan ke dalam

toluol murni sampai transparan.

d. Tahap embedding. Setelah dilakukan infiltrasi sebanyak 4 kali dengan

paraffin murni, kemudian jaringan ditanam kedalam paraffin cair,

dibiarkan membentuk blok (± 1 hari) agar mudah diiris dengan

mikrotom.

e. Tahap pemotongan. Proses pemotongan jaringan dengan menggunakan

mikrotom, tebal 4μ, secara serial, diambil irisan ke-5, 10, 15 untuk

dibuat slide dengan pewarnaan HE, ditempelkan pada gelas objek yang

sudah diolesi pelekat, ditetesi aquades dan dikeringkan.

12. Pewarnaan Hematoxylin Eosin (HE):

 49

a. Jaringan pada gelas objek yang telah siap untuk diwarnai kemudian

dideparafinisasi dengan xylol I, xylol II, xylol III untuk

menghilangkan parafin masing-masing selama 5 menit.

b. Kemudian sediaan histologis dihisap xylolnya dengan menggunakan

kertas saring. Selanjutnya berturut-turut dicelupkan ke dalam alkohol

96%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40% dan 30%, masing-masing

selama 5 menit, lalu dicelupkan ke dalam aquades selama 5 menit.

Setelah itu dicuci dengan air mengalir kurang lebih 2 menit.

c. Sediaan dimasukkan ke dalam larutan hematoxylin selama 15 menit.

d. Kemudian dicuci dengan air mengalir selama 10 menit.

e. Sediaan kembali dimasukkan ke dalam aquades dan alkohol 50%,

60%, 70%, 80%, 90%, 96% masing-masing beberapa celupan.

f. Kemudian diwarnai dengan larutan eosin selama 15 menit.

g. Dicelupkan ke dalam alkohol 70%, 80%, 90%, 95% masing-masing 3

menit.

h. Selanjutnya sediaan dikering-anginkan dan dicelupkan ke larutan

xylol IV dan V masing-masing 5 menit.

i. Sediaan histologi ditetesi dengan canada balsam lalu ditutup dengan

cover glass. Dilanjutkan dengan penutupan sediaan dan labelling.

13. Analisis Jumlah Folikel Rambut

Folikel rambut dihitung dari sediaan/preparat histologi jaringan dermis

yang telah diwarnai dengan pewarnaan Haematoxilin Eosin. Setiap

preparat diamati pada 3 lapangan pandang yaitu pada kedua sudut dan
 50

bagian tengah preparat dengan perbesaran lensa objektif 400x, difoto,

kemudian jumlah folikel rambut dihitung, dijumlahkan dan dirata-rata.

Data yang didapatkan berskala rasio dengan satuan folikel/lapang

pandang.

4.7 Alur Penelitian

36 ekor kelinci jantan, umur 3-4 bulan, berat badan 1.8– 2.5 kg, diadaptasi selama 7 hari.

Dibagi menjadi 2 kelompok secara random

Kelompok P0 Kelompok P1
18 ekor kelinci 18 ekor kelinci

Pemberian gel plasebo 20 menit Pemberian gel ekstrak daun

sebelum paparan sinar UVB. mangkokan 25%, 20 menit sebelum
Dan 2 kali setiap hari pada saat tidak paparan sinar UVB.
mendapat paparan Dan 2 kali setiap hari pada saat tidak
mendapat paparan

Paparan sinar UVB 3x seminggu dosis Paparan sinar UVB 3x seminggu dosis
65 mJ/cm2 selama 65 detik 65 mJ/cm2 selama 65 detik

Pemberian gel placebo, 4 jam Pemberian gel ekstrak daun

sesudah paparan sinar UVB mangkokan 25%, 4 jam sesudah
paparan sinar UVB

Setelah 2 minggu perlakuan Setelah 2 minggu perlakuan

Pemeriksaan panjang rambut Pemeriksaan panjang rambut

Punch Biopsi Jaringan Kulit dan Punch Biopsi Jaringan Kulit dan
Pemeriksaan jumlah folikel rambut Pemeriksaan jumlah folikel rambut
 51

Gambar 4.3
Alur Penelitian

4.8 Analisis Data

Data yang diperoleh pada penelitian ini dianalisis menggunakan program

SPSS Version 23.0 for Windows dengan langkah-langkah sebagai berikut :

1. Analisis deskriptif meliputi rerata, simpangan baku, nilai maksimum dan

nilai minimum.

2. Uji normalitas data dengan Shapiro-wilk Test karena jumlah sampel masing-

masing kelompok <50. Data hasil penelitian dikatakan berdistribusi normal

bila (p>0,05).

3. Uji homogenitas data dengan Lavene’s Test. Varian data hasil disebut

homogen bila (p>0,05).

4. Uji komparasi dilakukan dengan independent T test bila data berdistribusi

normal. Bila tidak normal akan dilakukan transformasi dengan square root,

dan bila masih tidak normal akan dianalisis dengan Mann Whitney test.
52
 DAFTAR PUSTAKA

Aini, Q. 2017. Uji aktivitas pertumbuhan rambut kelinci jantan dari sediaan hair
tonic yang mengandung ekstrak etanol daung mangkokan. Jurnal Farmasi
Lampung. 6(2): 1-12

Alonso, L., and Fuchs, E. 2006. Cell Science at a Glance: The hair cycle. Journal
of Cell Science. 119: 391-393.

Andarwulan, N., Batari, R., Sandrasari., D. A., Bolling, B., Wijaya, H. 2010,
Flavonoid Content and Antioxidant Activity of Vegetables from Indonesia,
Journal Food Chem, 121.

Awe, E.O., and Makinde, J.M. 2009. The hair growth promoting effect of
Russelia equisetiformis (Schclect&Chan). Journal of Natural Products
(India). 2:70-3.

Brahmantiyo, B., dan Raharjo, Y.C. 2012. Pengembangan Pembibitan Kelinci Di

Pedesaan Dalam Menunjang Potensi Dan Prospek Agribisnis Kelinci.
Available from: https://peternakan.litbang.pertanian.go.id/index.php/.
AccessedFeb 8, 2019.

Buffoli, B., Rinaldi, F., Labanca, M., Sorbellini, E., Trink, A., Guanziroli, E.,
Rezzani, R., and Rodella, L.F. 2014. The human hair: from anatomy to
physiology. Int J Dermatol. 53(3):331-41.

Cotsarelis, G., Botchkarev, V. 2008. Biology of hair follicles. In: Wolff K,

Goldsmith, L.A., Katz, S.I., Gilchrest, B.A., Paller, A.S., and Leffell, D.J.,
editors. Fitzpatrick's dermatology in general medicine.7th ed. USA:
McGraw-Hills Company; 2008. p. 739-48.

Federer, W. 2008. Statistics and Society: Data Collection and Interpretation.

Second Edition. New York: Marcel Dekker.

Fischer, T.W., Trueb, R.M., Hanggi, G., Mosenti, M., and Elsner, P. 2012.
Topical Melatonin For Treatment of Androgenetic Alopecia. Int. J.
Trichology. 4(4): 236-245.

Garza, L.A., Yang, C.C., Zhao, T., Blatt, H.B., Lee, M., He, H., Stanton, D.C.,
Carrasco, L., Spiegel, J.H., Tobias, J.W., Cotsarelis, G. 2011. Bald scalp in
men with androgenetic alopecia retains hair follicle stem cells but lacks
CD200-rich and CD34-positive hair follicle progenitor cells. The Journal of
clinical investigation. 121:613–22.

53
 54

Gestetner, C. 2013. Alopecia Areata : An Overview. The Science Journal of The

Lander College of Arts and Sciences. 6(2): 42.

Goluch-Koniuszy, Z.S. 2016. Nutrition of women with hair loss problem during
the period of menopause. Prz Menopauzalny. 15(1):56-61.

Hariana, H. A. 2008. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya, Seri 2; Jakarta: Penebar

Swadaya, 2008

Jeong, Y.M., Sung, Y.K., Kim, W.K., Kim,J.H., Kwack, M.H., Yoon, I., Kim,
D.D., Sung, H.H. 2013. Ultraviolet B preconditioning enhances the hair
growth-promoting effects of adipose-derived stem cells via generation of
reactive oxygen species. Stem Cells Dev. 2012;22(1):158-68.

Jubaidah, S., Indriani, R., Sa’adah, H., Wijaya, H. 2018. Formulasi dan Uji
Pertumbuhan Rambut Kelinci dari Sediaan Hair Tonic Kombinasi Ekstrak
Daun Seledri (Apium graveolens Linn) Dan Daun Mangkokan (Polyscias
scutellaria (Burm.F.) Fosberg). Jurnal Ilmiah Manuntung, 4(1), 8-14, 2018

Kazem, S., van der Meijden, E., Wang, R.C., Rosenberg, A.S., Pope, E., Benoit,
T., Fleckman, P., and Feltkamp, M.C. 2014. Polyomavirus-associated
Trichodysplasia spinulosa involves hyperproliferation, pRB phosphorylation
and upregulation of p16 and p21. PLoS One. 9(10):e108947.

Kubanov, A. A., Gallyamova, Y. A., Korableva, O. A., Kalinina, P. A. 2017. The

Role of the VEGF, KGF, EGF, and TGF-Β1Growth factors in the
Pathogenesis of Telogen Effluvium in Women. Biomed Pharmacol J 10(1).

Lai-Cheong, J.E., and McGrath, J.A. 2009. Structure and function of skin, hair
and nails. Medicine. 37(5): 223-226.

Mapara, M., Thomas, B.S., Bhat, K.M. 2012. Rabbit as an animal model for
experimental research. Dent Res J (Isfahan). 2012;9(1):111-8.

Marhaeniyanto, E., and Susanti, S. 2017. Penggunaan Konsentrat hijau untuk

Meningkatkan Produksi Ternak Kelinci New Zealand White. Jurnal Imlu
Peternakan 27(1): 28-39.

Matsumura, H., Mohri, Y., Bihn, N.T., Morinaga, H., Fukuda, M., Ito, M., Kurata,
S., Hoeijmakers, J., and Nishimura, E.K. 2016. Hair follicle aging is driven
by transepidermal elimination of stem cells via COL17A1 proteolysis.
Journal of Advanced Scientific Research 351(6273)

Messenger, A.G., and Rundegren, J. 2009. Minoxidil: mechanisms of action on

hair growth. Br J Dermatol. 150(2):186-94.
 55

Monselise, A., Cohen, D.E., Wanser, R., and Shapiro, J. 2017. What Ages Hair?.
Int J Womens Dermatol. 3(1 Suppl): S52-S57.

Ogden, B.E., Pang, W., Agui, T., Lee, B.H. 2016. Laboratory Animal Laws,
Regulations, Guidelines and Standards in China Mainland, Japan, and
Korea. ILAR Journal, 57(3): 301–311.

Panche, A.N., Diwan, A.D., and Chandra, S.R. 2016. Flavonoids: an overview. J
Nutr Sci. 2016(5): e47.

Pangkahila, W. 2011.Tetap Muda dan Sehat. 1st Edition. Jakarta: Kompas. p 11-
37.

Paus, R., Olsen, E.A., and Messenger, A.G. 2008. Hair growth disorders. In:
Wolff, K., Goldsmith, L.A., Katz, S.I., Gilchrest, B.A., Paller, A.S., Leffell,
D.J., editors. Fitzpatrick’s dermatology in general medicine. 7th ed. USA:
McGraw-Hills Company. p. 753–77

Piérard-Franchimont, C., Quatresooz, P., and Piérard, G.E. 2010. Effect of UV

Radiation on Scalp and Hair Growth. In: Trüeb R., Tobin D. (eds) Aging
Hair. Springer, Berlin, Heidelberg.

Purwantini, I., Rima M., dan Naniek D. 2008. Kombinasi Daun Teh dan Daun
Mangkokan Sebagai Penumbuh Rambut. Majalah Obat Tradisional.13(43).

Rifkia, V., Jufri, M., Mun’im, A. Hair Growth Promoting Activity of Nothopanax
scutellarium Merr. Leaves. J.Young.Pharm. 9(3): 436-440

Roh, S.S., Kim, C.D, Lee, M.H., Hwang, S.L., and Rang, M.J. 2007. The hair
growth promoting effect of Sophora flavescens extract and its molecular
regulation. Journal of dermatological science. 30(1):43-9.

Sari, D.K., and Wbowo, A. 2016. Perawatan Herbal pada Rambut Rontok.
Majority. 5(5): 129-134

Sadiah, S., Herlina, N., and Indriati, D. 2015. Efektivitas Sedaan Emulsi Ekstrak
Etanol 70% Daun Mangkokan (Northopanax scutellarius (Burm F) Merr)
Sebagai Perangsang Pertumbuhan Rambut. Fitofarmaka. 4(1): 10-17.

Sigit, H. 2005. Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Mangkokan (Nothopanax

scutellarium L.) Terhadap Pertumbuhan Rambut Kelinci Jantan dan Profil
Kromatogram Lapis Tipisnya, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah, Surakarta.
Soepardiman, L. 2010. Kelainan Rambut. Dalam: Djuanda A, Ilmu Penyakit Kulit
dan Kelamin. Jakarta: Badan Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas
Indonesia; 2010. hlm 301-311
 56

Takahashi, T., Mamada, A., Breakspear, S., Itou, T., and Tanji, N. 2015 Age
Dependent Changes in Damage Process of Hair Cuticle. Cosmetic
Dermatology Journal. 14(1): 2-8

Taub, A.F., and Pham, K. 2018. Stem Cells in Dermatology and Anti-aging Care
of the Skin. Facial Plast Surg Clin North Am. 26(4):425-437.

Tranggono, R.I., and Latifah, F. 2007. Buku pegangan Imu Pengetahuan

Kosmetik. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.

Trueb, R.M. 2015. Effect of ultraviolet radiation, smoking and nutrition on hair.
Curr Probl Dermatol.47:107-20.

Umborowati, M.A., and Rahmadewi. 2012. Rambut Rontok Akibat Lingkungan

dan Kosmetik. Berkala Ilmu Kesehatan Kulit & Kelamin. 24(1): 35-42

Vitorino, C., Sousa, J., and Pais, A. 2015. Overcoming The Skin Permeation
Barrier : Challenges and Opportunities. Current Pharmaceutical Design.
Vol.21.

Wiraguna, A. A. G. P. 2013. Pemberian Gel Ekstrak Bulung Boni (Caulerpa spp.)

Topikal Mencegah Penuaan Kulit Melalui Peningkatan Ekspresi Kolagen,
Penurunan Kadar dan Ekspresi MMP-1 Serta Ekspresi 8-OHdG pada Tikus
Wistar yang Dipapar Sinar Ultra Violet-B. (disertasi). Denpasar:
Universitas Udayana.

Yano, K., Brown, L.F., and Detmar, M. 2011. Control of hair growth and follicle
size by VEGF-mediated angiogenesis. J Clin Invest. 107(4):409-17.

Yudaniayanti, I.R., Maulana, E., Ma’ruf, A. 2011. Profil Penggunaan Kombinasi

Ketamin-Xylazine dan Ketamin-Midazolam Sebagai Anestesi Umum
Terhadap Gambaran Fisiologis Tubuh pada Kelinci Jantan. Veteraniria
Medika. 3(1): 23-30.

Zhong, J., and Li, L. 2016. Skin Derived Precursors Against UVB Induced
Apoptosis via Bcl-2 and Nrf2 Upregulation. Biomed Research International.
p1-11.