UJI BARFOED

(Glukosa 0,01M, Fruktosa 0,01M, Laktosa 0,01M, Laktosa 0,03M, Sukrosa 0,01M,
Sukrosa 0,03M, Filtrat Pisang Mentah, Filtrat Pisang Matang)

I. TUJUAN
Mengetahui adanya kemampuan mereduksi pada sampel (larutan glukosa 0,01M;
larutan fruktosa 0,01M; larutan laktosa 0,01M; larutan laktosa 0,03M; larutan sukrosa
0,01M; larutan sukrosa 0,03M; filtrat pisang mentah; dan filtrat pisang matang dengan uji
Barfoed dan memahami prinsipnya

II. METODE PERCOBAAN

A. Bahan
- Glukosa 0,01M (5mL)
- Fruktosa 0,01M (5mL)
- Sukrosa 0,01M (5mL)
- Sukrosa 0,03M (5 mL)
- Laktosa 0,01M (5mL)
- Laktosa 0,03M (5mL)
- Filtrat pisang mentah (5mL)
- Filtrat pisang matang (5mL)
- Larutan Benedict (40mL)
B. Alat
- Tabung reaksi (8)
- Rak tabung reaksi (1)
- Gelas beaker 50mL (8)
- Gelas beaker 1000mL (1)
- Pipet ukur 10mL (9)
- Propipet (1)
- Penangas air (1)
- Stopwatch (1)
C. Cara Kerja
Larutan Glukosa 0,01M, Fruktosa 0,01M, Laktosa 0,01M, Laktosa 0,03M, Sukrosa
0,01M, Sukrosa 0,03M, filtrat pisang mentah, filtrat pisang matang

Pemasukan dalam tabung reaksi masing-masing 5 ml

Penambahan 5 mL larutan Barfoed pada masing-masing tabung

Pemanasan tabung reaksi dalam penangas air selama 10 menit

Pendinginan dengan pengaliran air melalui dinding luar tabung

Pengamatan pembentukan endapan merah bata dan intensitasnya

D. Fungsi Perlakuan
- Larutan Barfoed ditambahkan untuk menjadi indikator dalam mengidentifikasi
adanya gugus reduksi pada monosakarida di sampel. Asam asetat yang terkandung
dalam larutan Barfoed berguna untuk memberikan suasana asam pada reaksi.
- Pemanasan dalam penangas air berfungsi untuk membuka cincin puran dan puran
pada monosakarida dan isomerase pada C1 dan C2 dan dapat digunakan untuk
mempercepat reaksi dengan meningkatkan energi kinetik molekul dalam larutan
- Pendinginan dilakukan untuk menghambat terbentuknya anhidra gula, asam
linoleate, dan turunan furfural karena adanya pemanasan berlebih dan
menghambat hidrolisis disakarida
- Pengamatan warna dan endapat digunakan untuk mengetahui perbedaan masing-
masing sampel.
III. TINJAUAN PUSTAKA
Uji Barfoed berfungsi untuk membedakan monosakarida dan disakarida.
Monosakarida akan dioksidasi oleh ion Cu2+ membentuk endapan karboksil dan tembaga
(I) oksida yangberwarna merah bata dan mengendap. Munculnya endapan merah
menunjukkan reaksi positif. Reaksi dilakukan dalam suasana asam pada pH 4 dan 6
sehingga asam asetat digunakan untuk membuat reagen Barfoed. Hasil menunjukkan
tidak ada endapan merah dan larutan tetap biru.
Disakarida pereduksi dapat juga bereaksi dengan reagen barfoed (menghasilkan
endapan merah pula) namun dalam waktu pemanasan yang lebih lama. Oleh karena itu,
ketepatan waktu dalam uji ini sangat penting untuk membuahkan hasil yang valid. NaCl
dan beberapa zat lainnya dapat menjadi penghambat dalam reaksi yang terjadi.

(Schreck and Loffredo, 1994)

Tembaga oksida akan bereaksi dengan gula reduksi, dan ion Cu2 + dalam oksida
tembaga akan direduksi menjadi Cu +, yang terakhir akan diendapkan dalam bentuk
oksida tembaga, dan aldosa akan teroksidasi menjadi aldehida. Mengamati waktu
pembentukan endapan merah juga dapat membedakan antara reduksi monosakarida dan
reduksi disakarida. Diantaranya, monosakarida akan membentuk endapan tembaga merah
dalam waktu 2-3 menit, sedangkan disakarida harus dihidrolisis terlebih dahulu selama
lebih dari 10 menit. Endapan tembaga-merah terbentuk dalam jangka waktu tertentu
(Welker, 1915).
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel hasil percobaan Uji Barfoed
No Sampel Hasil Akhir Intensitas

1. Glukosa 0.01 M Larutan biru, terdapat endapan merah bata +1

sangat sedikit
2. Fruktosa 0.01 M Larutan biru, terdapat endapan merah bata +3
3. Laktosa 0.01 M Larutan biru, tidak terdapat endapan merah bata 0
4. Laktosa 0.03 M Larutan biru, tidak terdapat endapan merah bata 0
5. Sukrosa 0.01 M Larutan biru, tidak terdapat endapan merah bata 0
6. Sukrosa 0.03 M Larutan biru, tidak terdapat endapan merah bata 0

7. Filtrat pisang mentah Larutan biru kehijauan, terdapat +4

endapan merah bata
8. Filtrat pisang matang Larutan biru, terdapat endapan merah bata +5

Berdasarkan percobaan didapatkan hasil bahwa glukosa, fruktosa, filtrat pisang

mentah dan filtrat pisang matang menghasilkan endapan berwarna merah, sedangkan
pada sukrosa dan laktosa tidak ditemukan endapan. Endapan merah menandakan bahwa
sampel mampu mereduksi.
Urutan sampel gula berdasarkan dari intensitas endapan paling tinggi yaitu
fruktosa 0.01 M dengan intensitas endapan +3 dan berwarna menjadi biru, serta glukosa
0.01 M dengan intensitas +1 dan berwarna menjadi biru. Pada sampel laktosa dan sukrosa
tidak ditemukan endapan. Fruktosa memiliki intensitas sedimen merah bata tertinggi, dan
glukosa juga membentuk sedimen bata merah, tetapi intensitasnya terlalu tinggi dan
terlalu rendah. Fruktosa dan glukosa adalah monosakarida, tetapi fruktosa adalah ketosa
karena memiliki gugus keton, dan glukosa adalah aldosa karena memiliki gugus aldehida.
Gugus keto lebih tidak stabil dan rantai fruktosa (cincin furan) lebih pendek, sehingga
fruktosa lebih reaktif daripada glukosa (cincin piran) dan akan bereaksi lebih cepat
dengan oksida tembaga dalam pereaksi Barfoed. Glukosa memiliki gugus aldehida yang
lebih stabil, dan cincin pyran yang lebih panjang juga menyebabkan lebih sedikit reaksi
dengan cuprous oxide dibandingkan fruktosa. Laktosa merupakan disakarida pereduksi,
namun kemampuan pereaksi Barfoed untuk menghidrolisis dan mereduksi disakarida dan
oligosakarida sangat lemah, sehingga kecuali pemanasan dalam waktu lama untuk
 menghidrolisis laktosa, hasilnya akan negatif. Sukrosa adalah disakarida yang tersusun
atas glukosa dan fruktosa, di mana kedua karbon anomerik tersebut membentuk ikatan
glikosidik satu sama lain, sehingga tidak terdapat gugus pereduksi OH reaktif bebas
untuk membentuk endapan. Hasil percobaan sesuai dengan teori (Nollet and Toldra,
2015).
Pada sampel filtrat pisang intensitas endapan pisang matang lebih tinggi daripada
filtrat pisang mentah. Pisang matang memiliki intensitas endapan +5, sedangkan pisang
mentah memiliki intensitas endapan +4. Pematangan pisang menginduksi produksi gas
etilen, sehingga meningkatkan produksi amilase. Pisang yang tidak diolah memiliki
kandungan pati tidak larut yang tinggi dan kandungan monosakarida yang rendah.Selama
proses pemasakan, amilase memecah pati menjadi gula yang lebih sederhana (seperti
monosakarida), sehingga pisang yang matang memiliki kandungan monosakarida yang
tinggi dan banyak lagi. Kandungan pati rendah. Pisang mentah juga mengandung permen
karet poli, yang merupakan polimer dari asam galakturonat. Pada pisang matang, akibat
degradasi pati, kandungan sukrosa, fruktosa dan glukosa tinggi, pektin juga terdegradasi
menjadi asam galakturonat, yang juga merupakan gula pereduksi. Oleh karena itu filtrat
pisang yang matang akan menghasilkan endapan merah bata yang lebih tinggi karena
kandungan gula reduksi yang lebih tinggi dapat mereduksi tembaga oksida (Jahangirpuria
et al, 2017).

V. KESIMPULAN
Urutan sampel gula berdasarkan dari intensitas endapan paling tinggi yaitu
fruktosa 0.01 M dengan intensitas endapan +3 dan berwarna menjadi biru, serta glukosa
0.01 M dengan intensitas +1 dan berwarna menjadi biru. Pada sampel laktosa dan sukrosa
tidak ditemukan endapan. Pada sampel filtrat pisang intensitas endapan pisang matang
lebih tinggi daripada filtrat pisang mentah. Pisang matang memiliki intensitas endapan
+5, sedangkan pisang mentah memiliki intensitas endapan +4
VI. DAFTAR PUSTAKA
Jahangirpuria., S.A. Makwana, dan C.G. Patel. 2017. Identification of carbohydrates. The
World Journal of Engineering & Applied Science, Vol 3(6) : 1-17.
Katoch, R. (2011). Analytical Techniques in Biochemistry and Molecular Biology. New
York: Springer Science+Business Media.
Nollet, L., & Toldrá, F. (2015). Handbook of Food Analysis. Boca Raton: CRC Press.
Schreck, J.O., dan W.M. Loffredo. 1994. Qualitative testing for carbohydrates. Chemical
Education Resources, Vol 22(8) : 220 – 357.
Welker, W.H. 1915. A disturbing factor in Barfoed’s test. J. Am. Chem. Soc, Vol 37(9) :
2227-2230

VII. LEMBAR PENGESAHAN

Yogyakarta, 27 November 2020

Asisten, Praktikan,

(Hammam P.) (M Wildan Ash Shiddieqy) (Pascalis Prayudi Agung Atmana)

VIII. HASIL DISKUSI