KEMENTERIAN KESEHATAN RI

POLITEKNIK KESEHATAN YOGYAKARTA

JURUSAN KESEHATAN LINGKUNGAN
PRODI DI PLOMA TIGA SANITASI

JAWABAN UJIAN AKHIR SEMESTER GENAP TAHUN 2021/20222

NAMA : MUHAMAT NUR FAUZI A.F

NIM : P07133121009
PRODI : DIII SANITASI A

Jawablah pertanyaan di bawah ini dengan jawaban yang singkat dan benar!

1. Bila anda akan memindahkan biakan bakteri dari satu tabung ke tabung lainnya.dengan
menggunakan pipet, supaya terhindar dari kontaminasi maka harus dilakukan secara aseptis.
Coba jelaskan Bagaiman caranya ?
JAWABAN :
• Sebelum memulai cucilah tangan dengan menggunakan air sabun, setelah itu cuci juga dengan
menggunakan alkohol 70% atau menggunakan hansanitaizer
• Setelah itu pakailah sarung tangan atau handscoon
• Selanjutnya siapkan lah alat dan bahan, alat yang digunakan disini pastikan sudah di
sterilisasikan.
• Hidup kan api bunsen, setelah itu bakar ujung pipet, lalu buka tutup tabung lalu dibakar bagian
luar bibir tabung a
• setelah itu ambil cairan dari tabung a dengan menggunakan pipet yang sudah di sterilkan tadi,
setelah di ambil, tabung a dibakar lagi ujung bibir dan ditutup
• Buka penutup tabung B lalu bakar bagian bibir tabung b, lalu masukan cairan yang di ambil dari
tabung A, setelah itu bakar lagi ujung bibir tabung b dan tutup kembali
• setelah memindahkan jangan lupa untuk membakar kembali ujung pipet tadi

2. Seorang Mahasiswa diberi tugas oleh dosen Mata Kuliah untuk memeriksa kandungan bakteri
Coliform dan Eschericia coli air sungai .dengan metode MPN (Most Probable Number)., untuk
keperluan pemeriksaan tersebut diperlukan peralatan dan media biakan.
a. Media apa saja yang perlu dibuat oleh mahasiwa tsb dan bagaimana cara pembuatannya.
b. Berapa jumlah media Laktosa Brotth yang diperlukan untuk pemeriksaan tersebut,
JAWABAN :
A. Media laktosa dengan tabung durham didalamnya dan Media EMBA dan BGLB
B. Jumlah media laktosa broth yaitu 15 tabung, dengan pembagian (5 lactosa broth 1,5%, 5
lactosa broth 0,5%, 5 lactosa broth 0,5%).
3. Pada pemeriksaan angka kuman makanan dengan metode plate, kalau sampelnya
diperkirakan jumlah kumannya tinggi, maka sampel perlu diencerkan.terlebih dahulu
Coba jelaskan Bagaimana cara membuat pengenceran sampel makanan sampai sampai
10.000 kali secara aseptis!
JAWABAN :
Cara membuat pengenceran sampel makanan secara aseptis yaitu
• Sebelum memulai cucilah tangan dengan menggunakan air sabun, setelah itu cuci juga dengan
menggunakan alkohol 70% atau menggunakan hansanitaizer Setelah itu pakailah sarung
tangan atau handscoon
• Haluskan dulu sampel makananya, setelah itu ambil 1ml sari dari sampel tadi dimasukan
kedalam tabung pengenceran 10-1, Homogenkan
• Lalu ambil 1ml dengan pipet dari tabung pengenceran 10-1 dan pindahkan ke tabung
pengenceran 10-2, Homogenkan
• Lakukan hal tersebut sampai ke tabung pengenceran terakhir

4. Untuk mempercepat identifikasi bakteri, kadang diperlukan pengamatan bakteri dengan

pewarnaan , diantaranya adalah pewarnaan gram..
a. Bagaimana cara pewarnaan gram pada bakteri!
b. Apa tujuan dilakukannya fiksasi dalam tahapan pengecatan bakteri?
c. Apa perbedaan antara bakteri gram negatif dengan bakteri gram positif
JAWABAN :
A. 1. Siapkan semua alat dan bahan.
2. Ambil obyek glass. Semprotkan alkohol 70% ke kaca objek, lalu lap dengan tissue.
3. Buat 2 lingkaran di obyek glass, kemudian panaskan kaca objek di atas busen. Hal
ini dilakukan agar kaca objek menjadi steril.
4. Selanjutnya ambil sampel dengan jarum ose yang steril, kemudian goreskan ke
objek glass ( untuk media padat, objek glass diberi NaCL terlebih dahulu).
5. Lakukanlah fiksasi preparat dia tas Bunsen.
6. Langkah selanjutnya adalah meneteskan 2-3 tetes cat gram A pada objek.
Biarkanlah selama kurang lebih 30 detik, setelah itu cucilah dengan aquades
mengalir, dan keringkan.
7. Lalu teteskan cat gram B 2-3 tetes pada objek, kemudian diamkan selama kurang
lebih 30 detik. Jika sudah cucilah dengan aquades mengalir, lalu keringkan dan
anginkan.
8. Setelah itu teteskan cat gram C 2-3 tetes pada objek, kemudian diamkan selama
kurang lebih 30 detik. Jika sudah cucilah dengan aquades mengalir, lalu keringkan.
9. Kemudian teteskan cat gram D 2-3 tetes pada objek, diamkan kurang lebih 1 menit.
Jika sudah cucilah dengan aquades mengalir, lalu keringkan dengan cara
meletakkan tissue di atas preparat dan tidak menggores tissue.
10. Berikutnya, teteskan minyak imersi pada objek
11. Terakhir amatilah dengan mikroskop
B. berguna merekatkan sel bakteri pada objek glass, membunuh bakteri, melepaskan granula
(butiran) protein menjadi gugusan reaktif (NH3+) membuat sel-sel lebih kuat, mencegah
terjadinya otolisis sel, mengubah avinitas, fiksasi dapat dilakukan secara fisik atau dengan
bahan kimia.
C. Bakteri gram positif akan mempertahankan zat pewarna kristal violet dan karenanya akan
tampak berwarna ungu tua di bawah mikroskop Adapun bakteri gram negatif akan
kehilangan zat pewarna kristal violet setelah dicuci dengan alkohol dan sewaktu diberi zat
pewarna tandingannya yaitu dengan zat pewarna air fuchsin atau safranin akan tampak
berwarna merah.