Machine Translated by Google

J Neurosurg Spine 19:256–263, 2013

©AANS, 2013

Perubahan perilaku nyeri dan aktivasi glial di kornu

dorsalis tulang belakang setelah pemberian arus
radiofrekuensi berdenyut ke ganglion akar dorsal pada
model tikus herniasi lumbar

Penyelidikan laboratorium

Hee Kyung Cho, MD,1 Yun Woo Cho, MD, Ph.D.,1 Eun Hyuk Kim, MD,1
Menno E. Sluijter, MD, Ph.D.,2 Se Jin Hwang, MD, Ph.D.,3
dan Sang Ho Ahn, MD, Ph.D.1
1
Departemen Kedokteran Fisik dan Rehabilitasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Yeungnam, Daegu,
Republik Korea; 2 Institut Anestesiologi dan Nyeri, Pusat Paraplegia Swiss, Nottwil, Swiss; dan 3
Departemen Anatomi dan Biologi Sel, Fakultas Kedokteran, Universitas Hanyang, Seoul, Republik
Korea

Obyek. Cakram hernia dapat menyebabkan linu panggul dengan kompresi mekanis dan / atau iritasi kimia yang
disebabkan oleh sitokin proinflamasi. Menggunakan metode imunohistokimia di tanduk dorsal model tikus herniasi lumbar,
penulis menyelidiki efek dari frekuensi radio berdenyut (PRF) administrasi saat ini ke ganglion akar dorsal (DRG) pada
perilaku yang berhubungan dengan nyeri dan aktivasi mikroglia, astrosit, dan protein kinase yang diaktifkan oleh mitogen.

Metode. Sebanyak 33 tikus Sprague-Dawley secara acak ditempatkan pada kelompok yang dioperasikan palsu (n =
10) atau kelompok yang terpapar nukleus pulposus (NP) (n = 23). Tikus dalam kelompok yang terpapar NP selanjutnya
dibagi lagi menjadi NP yang terpapar dengan stimulasi palsu (stimulasi NP+sham, n = 10), NP yang terpapar dengan PRF
(NP+PRF, n = 10), atau eutha nasia 10 hari setelah paparan NP ( n = 3). DRG pada tikus NP+PRF diekspos ke gelombang
PRF (2 Hz) selama 120 detik pada 45 V pada hari ke 10 pasca operasi. Tikus diuji untuk alodinia mekanis 10 hari setelah
operasi dan pada 8 jam, 1 hari, 3 hari, 10 hari. hari, 20 hari, dan 40 hari setelah pemberian PRF. Pewarnaan
imunohistokimia astro cytes (protein asam fibrillary glial), mikroglia (OX-42), dan kinase yang diatur sinyal ekstraseluler terfosforilasi
(pERKs) di kornu dorsalis tulang belakang dilakukan pada 41 hari setelah pemberian PRF.
Hasil. Dimulai pada 8 jam setelah pemberian PRF, ambang batas penarikan mekanis meningkat secara dramatis;
respon ini bertahan selama 40 hari (p <0,05). Setelah pemberian PRF, ekspresi imunohistokimia OX-42 dan pERK di
kornu dorsalis tulang belakang berkurang secara kuantitatif (p <0,05).
Kesimpulan. Administrasi frekuensi radio berdenyut ke DRG mengurangi allodynia mekanik dan downregu
aktivitas mikroglia akhir dan ekspresi pERK di tanduk punggung tulang belakang model tikus herniasi lumbar.
(http:// thejns.org/ doi/ abs/ 10.3171/2013.5.SPINE12731)

Kata Kunci • frekuensi radio nadi • herniasi diskus lumbal • mikroglia •

nyeri neuropatik • kinase yang diatur sinyal ekstraseluler terfosforilasi

herniasi diskus dapat melukai akar saraf tulang
Pinggang
belakang dan menyebabkan nyeri radikuler yang parah,
ditandai dengan hiperalgesia, allodynia, penurunan konduksi
kecepatan tion, dan perubahan histologis.30 Studi sebelumnya
Singkatan yang digunakan dalam makalah ini: DRG = ganglion
akar dorsal; GFAP = protein asam fibrilar glial; IL = interleukin; NP =
nukleus pulposus; pERK = kinase yang diatur sinyal ekstraseluler
terfosforilasi; PRF = frekuensi radio berdenyut.
telah menyarankan bahwa tanda-tanda herniasi lumbal disebabkan
oleh faktor kimia dari nukleus pulpo sus dan oleh kompresi
mekanis dari akar saraf lumbal3,18,27,28,30,51 dan bahwa
mereka dimediasi oleh sitokin proinflamasi yang berasal dari
herniated interverte bral disc.13,16,37 Juga terlibat dalam cedera
akar saraf yang diinduksi NP dan nyeri radikular terkait adalah
ekspresi dari cytokines seperti IL-1, IL-6, IL-8, tumor necrosis
factor-a, dan cyclooxygenase -2.2,7,16

256 J Neurosurg: Tulang Belakang / Volume 19 / Agustus 2013

Machine Translated by Google
Efek frekuensi radio berdenyut pada ganglion akar dorsal
Sejak tahun 1980, metode alternatif untuk mengobati nyeri
radikular kronis yang tidak dapat diobati telah menjadi terapi
termokoagulasi frekuensi radio perkutan.32
Namun, meskipun digunakan secara luas dan kemanjuran yang
terdokumentasi dengan baik, pengobatan ini tampaknya tidak
ideal untuk mengobati nyeri radikular lumbal karena metode
neurodestruktif, pada prinsipnya, dianggap tidak tepat untuk
pengobatan nyeri neuropatik (misalnya, karena disestesia
denervasi). dan efek neurologis merugikan lainnya ).9,35,42,43
Pada tahun 1998, Sluijter et al.36 memperkenalkan
pengobatan frekuensi radio isotermal—PRF—untuk
menghilangkan nyeri kronis. Telah disarankan bahwa PRF
menghasilkan efek klinisnya melalui medan listrik daripada suhu;
Selain itu, PRF tidak secara substansial merusak jaringan
saraf.36 Efek termal mungkin tidak terlalu penting karena hanya
daerah kecil di sekitar ujung elektroda yang terpengaruh dan
suhu turun dengan cepat seiring bertambahnya jarak dari
elektroda. Suhu di sekitar poros dilaporkan tetap jauh di bawah
nilai neurodestruktif;6 dengan demikian, kerusakan jaringan
ringan5 mungkin hasil dari medan listrik yang tinggi di sekitar
ujung elektroda dan poros. Untuk alasan ini, teknik PRF telah
dikembangkan dan diadopsi dengan cepat. Meskipun
mekanismenya kurang dipahami, keefektifan PRF yang
ditunjukkan secara klinis menjadikannya modalitas alternatif
untuk pengiriman arus frekuensi radio.1,4,9,25,45,46
Studi neurobiologi telah menunjukkan aktivitas seluler awal
dan akhir yang tidak bergantung pada suhu di tanduk dorsal
tikus setelah paparan DRG serviks ke PRF.
Secara khusus, setelah pemberian PRF, jumlah neuron
imunoreaktif c fos meningkat secara substansial di lamina
superfisial kornu dorsalis.12,44
Namun, ekspresi c-fos bukanlah fitur unik dari jalur
nosiseptif; dengan demikian, pengetahuan dan bukti mekanistik
tentang perubahan pada kornu dorsalis setelah pemberian PRF
ke DRG untuk mengurangi nyeri radikular masih kurang. Oleh
karena itu, kami menyelidiki efek pemberian PRF ke DRG pada
perilaku yang berhubungan dengan nyeri dan pada aktivasi
mikroglia dan astrosit pada model tikus dengan nyeri radikulopati.
Metode
Hewan
Sebanyak 33 tikus jantan Sprague-Dawley (200-250 g)
secara acak ditempatkan pada kelompok yang dioperasikan
palsu (n = 10) atau kelompok yang terpapar NP (n = 23). Semua
eksperimen dilakukan dengan cara yang manusiawi sesuai
dengan pedoman yang dikeluarkan oleh Institutional Animal
Care and Use Committee di Universitas Yeungnam, Republik
Korea.
Herniasi Lumbar Disc dan Administrasi PRF
Prosedur
Tikus dibius dengan injeksi intraperitoneal Zoletil (Virbac)
dengan dosis 50 mg/kg. Dengan hewan ditempatkan tengkurap,
sayatan sekitar 1 cm dibuat pada permukaan dorsal ekor
proksimal untuk pengambilan NP autologus. Cakram antara coc
kedua dan ketiga
J Neurosurg: Tulang Belakang / Volume 19 / Agustus 2013
vertebra cygeal dari setiap ekor diiris, dan NP dipanen dengan
kuret. Sayatan punggung garis tengah kemudian dibuat di atas
tulang belakang lumbar, otot-otot multifidus dipisahkan sepanjang
proses spinosus L4-S1, dan akar saraf L-5 kiri dan DRG diekspos
melalui laminektomi. NP yang dipanen kemudian ditanamkan di
sebelah akar saraf L-5 kiri tepat di proksimal DRG tanpa
kompresi mekanis. Jumlah NP yang serupa ditanamkan pada
semua hewan. Prosedur palsu dilakukan dengan cara yang
identik dan termasuk pengambilan NP autologus dan paparan
akar saraf tetapi tidak implantasi NP autologus.19,33,34,41
Untuk menentukan aktivitas mikroglia dan astrosit serta
ekspresi pERK, kami menidurkan 3 tikus yang terpapar NP pada
10 hari setelah operasi. Sisanya 20 ekor tikus yang terpajan NP
dibagi menjadi 2 kelompok masing-masing 10 ekor: terpajan NP
dengan stimulasi palsu (stimulasi NP+sham) dan NP yang
terpapar PRF (NP+PRF). Frekuensi radio berdenyut diberikan
dengan menempatkan elektroda (generator Cosman RFG 1A)
di sebelah kiri DRG dan mengalirkan arus PRF 2 Hz selama 120
detik pada 45 V; dalam kondisi ini, suhu ujung elektroda tidak
melebihi 42°C.
Untuk tikus dalam kelompok stimulasi NP+sham, penempatan
elektroda dilakukan dengan cara yang persis sama, tetapi mesin
dimatikan dan stimulasi frekuensi radio tidak diterapkan pada
DRG. Skema aliran ditunjukkan pada Gambar. 1.
Evaluasi Perilaku Nyeri
Sensitivitas mekanis permukaan plantar kaki belakang
lateral ipsi diuji pada 10 hari setelah operasi dan pada 8 jam, 1
hari, 3 hari, 10 hari, 20 hari, dan 40 hari setelah pemberian PRF
(Gbr. 1). Allodynia mekanis ditentukan dengan mengukur
respons penarikan terhadap stimulasi mekanis kaki belakang
ipsilateral dengan filamen von Frey (North Coast Medical, Inc.),
yang telah dikalibrasi dalam gram. Tikus ditempatkan dalam
kandang plastik bening dengan lantai mesh logam, disesuaikan
dengan lingkungan pengujian selama 15 menit, setelah itu
permukaan plantar masing-masing kaki belakang dirangsang
untuk menyebabkan sedikit filamen lentur selama 3-5 detik.
Filamen diterapkan dalam menambah dan mengurangi ketebalan,
dimulai dengan probe 0,1-g, sampai filamen menghasilkan
respons penarikan yang konsisten terhadap lebih dari 3 dari 5
rangsangan. Kami menghitung ambang kemungkinan 50% dari
penarikan cakar mekanis. Jika tidak ada respons penarikan
yang ditimbulkan oleh filamen 26-g, ambang mekanis ditetapkan
pada 26 g.
Pemeriksaan Imunohistokimia
Untuk mempelajari aktivasi glial di tanduk dorsal yang
disebabkan oleh herniasi diskus, kami menidurkan 3 tikus yang
terpapar NP pada 10 hari setelah operasi. Untuk menentukan
efek pemberian PRF pada aktivasi glial dan ekspresi pERK yang
disebabkan oleh herniasi diskus, kami menidurkan 6 tikus pada
41 hari setelah pemberian PRF (3 dari kelompok NP+PRF dan
3 dari kelompok NP+sham–stimulasi). Bagian sumsum tulang
belakang diwarnai untuk GFAP (untuk astrosit), OX-42 (untuk
mikroglia), dan pERK. Untuk menginduksi ekspresi pERK dalam
inti saraf sebagai respons terhadap stimulasi panas, kami
menempatkan kaki belakang ipsilateral dalam air panas (45 ° C) selama 20 menit.
257
Machine Translated by Google
Gambar 1. Skema aliran studi.
Hewan-hewan itu diperfusi dengan salin heparinisasi diikuti oleh
500 ml paraformaldehida 4% dalam buffer fosfat (0,1 M, pH
7,4).52 Segmen sumsum tulang belakang L-5 telah dihapus,
pascafiksasi selama 3 jam dalam fiksatif yang digunakan untuk
perfusi, dan cryoprotected dalam 30% sukrosa dalam buffer
fosfat. Potongan melintang sumsum tulang belakang (tebal 20 m)
dipotong pada cryostat, diblokir dengan 10% serum keledai
normal (Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc.) dalam
saline buffer fosfat (0,01 M, pH 7,2) selama 40 menit, dan
diinkubasi semalaman dengan antibodi primer pada suhu kamar.
Untuk imunofluoresensi ganda, bagian diinkubasi semalaman
dengan campuran anti-pERK kelinci poli klonal (p44/p42 mitogen-
activated pro tein kinase, Cell Signaling Technology; 1:500) dan
anti-GFAP kelinci (Dako; 1:1000) atau mouse anti–OX-42 (Chemi
con; 1:200). Bagian kemudian dibilas dan diinkubasi dalam serum
keledai normal 2% selama 10 menit dan kemudian dengan
258
HK Cho dkk.
kombinasi yang tepat dari anti-tikus keledai, anti-
kelinci, atau antibodi sekunder anti-kambing yang terkonjugasi ke
Cy3 (Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc.; 1:200) atau
Alexa 488 (Invitrogen; 1:200) dalam saline buffer fosfat selama 3
jam. Setelah beberapa kali pembilasan, bagian dipasang pada
slide, ditutup dengan media pemasangan Vectashield (Vector
Laboratories), dan diamati di bawah mikroskop Lei ca Digital
Module R. Gambar diperoleh dengan kamera perangkat charge-
coupled (Fluoview, Soft Imaging Solution, Olympus) yang
dipasang pada mikroskop, dan kontras dan kecerahan disesuaikan
dengan menggunakan Photoshop CS2 (Adobe Systems, Inc.).
Analisis Gambar Kuantitatif
Untuk mengukur imunointensitas OX-42 di tanduk punggung,
kami memperoleh gambar mikroskopis dari 6 bagian sumsum
tulang belakang per tikus. Di setiap bagian, kami memperoleh 1 im
J Neurosurg: Tulang Belakang / Volume 19 / Agustus 2013
Machine Translated by Google

Efek frekuensi radio berdenyut pada ganglion akar dorsal

age (890 × 670 mm) dengan era cam perangkat charge-coupled
(Fluoview 2, Soft Imaging Solution) dengan menggunakan
kecepatan rana tetap dan penguatan digital. Nilai rata-rata abu-abu
dari setiap frame diperoleh dengan menggunakan perangkat lunak
analisis gambar (Analysis Pro, Soft Imaging Solution). Untuk
menghitung jumlah inti pERK-positif di tanduk punggung, kami
memperoleh gambar (890 × 670 mm) dengan era kamera
perangkat yang dipasangkan dengan muatan. Penyelidik tidak
mengetahui identitas gambar, dan data dikumpulkan per tikus dan
dimanipulasi dengan menggunakan Microsoft Excel (versi 2007).
Analisis statistik
Analisis dilakukan dengan menggunakan uji peringkat
bertanda Wilcoxon dan uji Mann-Whitney U di SPSS/
versi PC 15.0. Hasil dinyatakan sebagai sarana plus atau minus
standar deviasi. Signifikansi statistik diterima pada p <0,05.
Hasil
Perilaku Sakit
Untuk tikus dengan herniasi lumbal, ambang batas penarikan
mekanis menurun secara signifikan pada sisi lateral ipsi pada 10
hari setelah operasi. Setelah operasi dan selama sisa penelitian,
tikus dalam kelompok yang dioperasikan palsu tidak menunjukkan
penurunan ambang batas penarikan mekanis dari kaki belakang
ipsilateral. Untuk tikus dalam kelompok NP+PRF, alodinia mekanis
dari cakar belakang ipsilateral secara signifikan dilemahkan pada
8 jam dan 1 hari setelah pemberian PRF (p <0,01) dan bertahan
selama 40 hari lagi (p <0,05) (Gbr. 2), sedangkan , untuk tikus
dalam kelompok stimulasi NP+sham, nyeri dipertahankan pada
sisi ipsilateral.
Mikroglia, Astrosit, dan pERK
Kami sebelumnya telah memverifikasi bahwa, pada kelompok
yang terpapar NP pada Hari 10 setelah operasi, imunohistokimia
mengklarifikasi upregulasi mikroglia positif OX-42,
astrosit GFAP-positif, dan inti pERK-positif di kornu dorsalis
ipsilateral.20 Dalam penelitian yang dilaporkan di sini, pemeriksaan
imunohistokimia sumsum tulang belakang untuk GFAP, OX-42,
dan pERK pada Hari ke 41 setelah pemberian PRF mengungkapkan
astrosit reaktif dengan penebalan proses di kornu dorsalis,
ipsilateral dan kontralateral terhadap herniasi diskus pada kelompok
stimulasi NP+sham; aktivasi astrosit ini tidak terpengaruh oleh
pemberian PRF. Sebaliknya, jumlah mikroglia meningkat pada
kornu dorsalis ipsilateral terhadap herniasi diskus pada kelompok
NP+sham-stimulation (nilai abu-abu rata-rata 29,98 ± 11,09 [±
SD]); peningkatan ini secara signifikan dilemahkan di tanduk dorsal
sumsum tulang belakang L-5 pada kelompok NP+PRF (rata-rata
12,23 ± 3,56 [± SD]; p <0,05). Resensi imunofluo untuk pERK
mengungkapkan bahwa ekspresi pERK pada kelompok NP+PRF
juga secara dramatis dilemahkan di kornu dorsalis ipsilateral (rata-
rata 12,00 sel ± 2,00 [± SD]) dibandingkan dengan kelompok
stimulasi NP+sham (rata-rata 21 ± 4,36 [± SD]) (p < 0,01). Pada
41 hari setelah pemberian PRF, ekspresi pERK menurun secara
signifikan pada kornu dorsalis kontralateral (p <0,05) (Gbr. 3 dan
4).
Diskusi
Dalam model tikus herniasi lumbar, ambang batas penarikan
setelah pemberian PRF meningkat secara nyata selama periode
percobaan (8 jam hingga 40 hari). Selain itu, penurunan regulasi
ekspresi OX-42 dan pERK pada neuron sensorik kornu dorsalis
setelah pemberian PRF melemahkan allo dynia mekanis.
Nyeri radikular yang disebabkan oleh herniasi diskus dimediasi
oleh faktor kimia dan juga faktor mekanik, terutama mediator
inflamasi.17,18,23,27,30 Selanjutnya, telah diusulkan bahwa sitokin
dan kemokin memainkan peran utama dalam patomekanisme
kimia radikula. nyeri lar.2,7,16 Secara umum, kortikosteroid
diketahui terlibat dalam penekanan berbagai inflamasi

Gambar. 2. Efek PRF pada hiperalgesia mekanik pada model tikus herniasi lumbal, yang disebabkan oleh penerapan NP ke
akar saraf L-5 kiri. Radiofrekuensi berdenyut diberikan 10 hari setelah operasi. Peningkatan ambang batas penarikan yang
signifikan pada kaki ipsilateral terbukti pada 8 jam dan 1 hari setelah pemberian PRF dan bertahan selama penelitian (40 hari
setelah pengobatan PRF) (p <0,05). d = hari; h = jam; Ipsi = ipsilateral; palsu = palsu-dioperasikan;
* NP+PRF = NP terpapar
dengan PRF; Stimulasi NP+sham = NP diekspos dengan stimulasi palsu; PO = hari pasca p <operasi.
0,05; p < 0,01.

J Neurosurg: Tulang Belakang / Volume 19 / Agustus 2013 259

Machine Translated by Google

HK Cho dkk.

Gambar 3. Ekspresi imunohistokimia OX-42 (A), GFAP (B), dan pERK (C) pada kornu dorsal kontralateral dan ipsilateral
dari NP yang terpajan dengan tikus stimulasi palsu (stimulasi NP+Sham) dan di ipsilateral tanduk dorsal NP yang terpajan
dengan tikus PRF (NP+PRF) pada 41 hari setelah pemberian PRF. A: Pada kelompok stimulasi NP+sham, peningkatan
mikroglia OX-42-positif dicatat di tanduk punggung ipsilateral. Mikroglia OX-42-positif menurun lebih banyak di tanduk
punggung ipsilateral dari kelompok NP + PRF daripada di kelompok stimulasi NP + palsu. B: Astrosit positif GFAP meningkat
pada kornu dorsal kontralateral dan ipsilateral pada kelompok stimulasi NP+sham tetapi tidak berubah pada kelompok NP+PRF
dibandingkan dengan kelompok stimulasi NP+sham. C: Inti pERK-positif (panah) meningkat di lamina superfisial dari tanduk
dorsal ipsilateral pada kelompok NP+sham-stimulation, tetapi peningkatan itu dilemahkan pada kelompok NP+PRF. Kontra =
kontralateral. Bilah skala = 100 m.

tokin dan kemokin. Atas dasar alasan ini, injeksi kortikosteroid
epidural transforaminal di bawah fluoroskopi biasanya diberikan pada
pasien dengan nyeri radikular lumbal; namun, beberapa dari pasien
ini terus mengalami nyeri neuropatik yang persisten. Baru-baru ini,
PRF telah dianjurkan untuk pengobatan nyeri neuropatik akut dan
kronis dari akar saraf tulang belakang.4,46 Namun , mekanisme yang
mendasari kemanjuran pengobatan PRF untuk pengendalian nyeri
masih belum jelas.
Studi yang dilaporkan di sini menunjukkan bahwa pemberian
PRF ke DRG ipsilateral membalikkan allodynia mekanis yang
diinduksi oleh implantasi NP autologus ke akar saraf dan bahwa efek
ini dipertahankan selama 40 hari. Transplantasi NP autologus dekat
akar saraf tulang belakang sering digunakan pada hewan model
herniasi diskus intervertebralis lumbalis, 17,19,29,31,33,34,41 dan
aplikasi NP tanpa kompresi akar saraf dan DRG menghasilkan
morfologi dan perubahan fungsional dan gangguan aliran darah
,18,30,51 meningkatkan respons neuron sekunder terhadap
rangsangan berbahaya,3 dan menyebabkan alodinia di tungkai
belakang.
Baru-baru ini, kami melaporkan bahwa implantasi NP autologus pada
akar saraf pada tikus menyebabkan peningkatan regulasi fraktalkin
di kornu dorsalis tulang belakang, yang menunjukkan bahwa fraktalkin
dikaitkan dengan nyeri radikular . Hasil kami konsisten dengan
gagasan bahwa respons inflamasi, bukan daripada kompresi mekanis,
yang disebabkan oleh NP bertanggung jawab atas rasa sakit dan
menunjukkan bahwa beberapa perubahan seluler terjadi
skr setelah pemberian PRF ke DRG pada model tikus herniasi lumbar.
Dalam penelitian yang dilaporkan di sini, OX-42 dan pERK
berkurang di kornu dorsalis tulang belakang 41 hari setelah
pemberian PRF ke DRG, dan pengurangan ini mengikuti perjalanan
waktu yang serupa dengan pengurangan perilaku nyeri. Hasil kami
menunjukkan bahwa penurunan regulasi OX-42 dan pERK di neuron
sensorik kornu dorsalis dikaitkan dengan penurunan aktivasi
mikroglial. Telah disarankan bahwa aktivasi astrosit dan mikroglia
oleh mediator inflamasi dapat menyebabkan hipersensitivitas
nosiseptif selama perkembangan nyeri neuropatik.5,11,21,24,40,49
Mikroglia adalah makrofag penduduk SSP dan berkontribusi pada
perkembangan kronis nyeri neuropatik dengan melepaskan berbagai
mediator, termasuk sitokin proinflamasi dan kemokin yang
mempengaruhi sinyal nyeri.22,39,47,48 Berbagai sitokin dan kemokin,
termasuk IL-1, IL-6, IL-8, TNF-a, dan siklooksigenase-2, diproduksi
pada herniasi lumbar disc dan dikenal sebagai mediator perifer dalam
respon inflamasi.2,7,13,16,17,26,28,38 Banyak faktor dan zat lain
juga dapat terlibat dalam patofisiologi nyeri disebabkan oleh herniasi
diskus lumbal. Mito gen-activated protein kinase, keluarga serin/
treonin protein kinase yang mentransduksi rangsangan ekstraselular
ke dalam respon transkripsi traselular, terdiri dari ERK, p38 mitogen-
activated protein kinase, c-Jun N-terminal kinase, dan ERK5.
Selanjutnya, ERK memediasi beberapa seluler

260 J Neurosurg: Tulang Belakang / Volume 19 / Agustus 2013

Machine Translated by Google
Efek frekuensi radio berdenyut pada ganglion akar dorsal
Gambar 4. Analisis semikuantitatif imunoreaktivitas OX-42
(A) dan pERK (B) pada kornu dorsalis tikus yang menerima
stimulasi NP dan sham (kelompok stimulasi NP+sham) dan tikus
yang menerima NP dan PRF (NP +PRF), diukur pada 41 hari
setelah pemberian PRF. Atas: Untuk kuantifikasi intensitas
imunostaining OX 42, rata-rata nilai abu-abu di tanduk punggung
3 hewan per kelompok. Bawah: Untuk kuantifikasi ekspresi
pERK, jumlah inti pERK-positif di tanduk punggung 3 hewan per
kelompok dihitung dan dirata-rata. Nilai dinyatakan sebagai
sarana ± SEM. *p < 0,05; p <0,01 versus kelompok NP+sham–stimulasi.
tanggapan terhadap sinyal mitogenik dan diferensiasi50 dan
merupakan mediator plastisitas neuron pada nyeri neuropatik.14,15
Lebih khusus, ligasi saraf tulang belakang dilaporkan menginduksi
pERK pada mikroglia tulang belakang di kornu dorsalis ipsilateral
pada Hari 10 setelah operasi.52 Dengan demikian, dapat diduga
OX-42 dan pERK di sumsum tulang belakang juga merupakan
penanda yang terkait dengan perilaku nyeri setelah herniasi diskus lumbal. .
Studi sebelumnya telah menemukan bahwa tingkat kerusakan
dan gangguan setelah pemberian PRF ke DRG tampaknya lebih
besar untuk serat C dan Ad daripada untuk serat Ab.8,10 Tidak seperti
penelitian sebelumnya yang menggunakan model naif nonpain,
penelitian yang dilaporkan di sini menunjukkan bahwa akar saraf yang
cedera diregenerasi secara alami selama tahap kronis, tetapi
regenerasi ini tidak lengkap dan bahwa serat saraf bermielin diganti
dengan serat saraf demielinasi.19 Dengan demikian, pemberian PRF
akan bekerja pada serat saraf yang tidak bermielin, yang dapat
mengirimkan nyeri neuropatik ketika nyeri radikuler kronis hadir.
Meskipun sitokin dan kemokin yang mempengaruhi herniasi diskus
lumbal memainkan peran penting dalam timbulnya nyeri neuropatik,
apakah PRF mempengaruhi ekspresi sitokin dan kemokin pada diskus
lumbal yang mengalami hernia masih belum ditentukan. Namun, data
dan pengamatan kami mengenai efek pemberian PRF terhadap DRG
dalam meningkatkan pemahaman tentang peristiwa patofisiologis yang
J Neurosurg: Tulang Belakang / Volume 19 / Agustus 2013
menyebabkan linu panggul dan harus membantu evaluasi masa
depan modalitas pengobatan baru untuk herniasi dan linu panggul.
Kesimpulan
Hasil kami menguatkan laporan sebelumnya dengan menunjukkan
bahwa aktivasi mikroglial dan ekspresi pERK dalam model tikus
herniasi lumbar dilemahkan oleh pemberian PRF ke DRG. Sepanjang
periode percobaan (8 jam sampai 40 hari setelah pemberian PRF),
alodinia mekanik sangat menurun, menurut ambang batas penarikan.
Sejauh pengetahuan kami, ini adalah laporan pertama tentang
perubahan aktivitas mikroglial dan ekspresi protein kinase yang
diaktifkan mitogen di tanduk punggung setelah pemberian PRF ke
DRG dalam model nyeri radikulopati. Hasil kami menunjukkan bahwa
pemberian PRF ke DRG menurunkan regulasi aktivitas mikro glial dan
ekspresi pERK di kornu dorsalis tulang belakang dan bahwa
downregulasi ini mungkin melemahkan rasa sakit. Studi yang lebih
rinci tentang mekanisme yang bertanggung jawab atas pelemahan
nyeri radikuler ini oleh pemberian PRF ke DRG diperlukan.
Penyingkapan
Studi ini didukung oleh Proyek Penelitian & Pengembangan
Teknologi Kesehatan Korea, Kementerian Kesehatan, Kesejahteraan &
Urusan Keluarga, Republik Korea (hibah no. A084177).
Kontribusi penulis untuk studi dan persiapan naskah meliputi berikut
ini. Konsepsi dan desain: Ahn. Analisis dan interpretasi data: Ahn, YW
Cho, Kim, Hwang. Penyusunan artikel: Ahn, HK Cho. Merevisi artikel
secara kritis: semua penulis.
Meninjau versi naskah yang dikirimkan: semua penulis. Menyetujui versi
final naskah atas nama semua penulis: Ahn.
Dukungan administratif/teknis/material: Kim, Hwang. Supervisi studi: Ahn,
YW Cho, Sluijter.
Referensi
1. Abejón D, Garcia-del-Valle S, Fuentes ML, Gómez-Arnau JI, Reig E,
van Zundert J: Frekuensi radio berdenyut pada nyeri radikular lumbal:
efek klinis pada berbagai kelompok etiologi.
Latihan Nyeri 7:21–26, 2007
2. Ahn SH, Cho YW, Ahn MW, Jang SH, Sohn YK, Kim HS: ekspresi
mRNA sitokin dan kemokin pada herniasi diskus intervertebralis
lumbal. Tulang Belakang (Phila Pa 1976) 27:911–917, 2002
3. Anzai H, Hamba M, Onda A, Konno S, Kikuchi S: Aplikasi epidural
nukleus pulposus meningkatkan nocirespons neuron tanduk dorsal
tikus. Tulang Belakang (Phila Pa 1976) 27:E50–E55, 2002
4. Chao SC, Lee HT, Kao TH, Yang MY, Tsuei YS, Shen CC, dkk:
Frekuensi radio berdenyut perkutan dalam pengobatan nyeri radikular
serviks dan lumbar. Surg Neurol 70:59–65, 2008
5. Colburn RW, Rickman AJ, DeLeo JA: Pengaruh situs dan jenis cedera
saraf pada aktivasi glial tulang belakang dan perilaku nyeri neuropatik.
Exp Neurol 157:289–304, 1999
6. Cosman ER Jr, Cosman ER Sr: Efek medan listrik dan termal pada
jaringan di sekitar elektroda frekuensi radio. Obat Sakit 6:
405–424, 2005
7. Cuellar JM, Montesano PX, Carstens E: Peran TNF-alpha dalam
sensitisasi neuron kornu dorsalis nosiseptif yang diinduksi oleh
penerapan nukleus pulposus ke ganglion akar dorsal L5 pada tikus.
Sakit 110:578–587, 2004
8. Erdine S, Bilir A, Cosman ER, Cosman ER Jr: Perubahan ultrastruktural
pada akson setelah terpapar medan frekuensi radio berdenyut.
Latihan Sakit 9:407–417, 2009
261
Machine Translated by Google
9. Geurts JW, van Wijk RM, Wynne HJ, Hammink E, Buskens E, Lousberg R,
dkk: Lesi frekuensi radio ganglia akar dorsal untuk nyeri radikular lumbosakral
kronis: uji coba terkontrol secara acak, tersamar ganda. Lancet 361:21–26,
2003
10. Hamann W, Abou-Sherif S, Thompson S, Hall S: Frekuensi ra berdenyut
yang diterapkan pada ganglia akar dorsal menyebabkan peningkatan selektif
ATF3 di neuron kecil. Eur J Pain 10:171–176, 2006
11. Hashizume H, DeLeo JA, Colburn RW, Weinstein JN: Aktivasi glial tulang
belakang dan ekspresi sitokin setelah akar lumbal di juri pada tikus. Tulang
Belakang (Phila Pa 1976) 25:1206–1217, 2000
12. Higuchi Y, Nashold BS Jr, Sluijter M, Cosman E, Pearlstein RD: Paparan
ganglion akar dorsal pada tikus terhadap arus frekuensi radio yang berdenyut
mengaktifkan neuron lamina kornu dorsalis I dan II. Bedah Saraf 50:850–
856, 2002
13. Igarashi T, Kikuchi S, Shubayev V, Myers RR: 2000 Pemenang Volvo Award
dalam studi sains dasar: faktor-alfa tumor ne crosis eksogen meniru patologi
saraf yang diinduksi oleh nukleus pulposus. Perbandingan molekuler,
histologis, dan perilaku pada tikus. Tulang Belakang (Phila Pa 1976)
25:2975–2980, 2000
14. Impey S, Obrietan K, Storm DR: Membuat koneksi baru: peran pensinyalan
ERK/MAP kinase dalam plastisitas neuron.
Neuron 23:11–14, 1999
15. Ji RR, Woolf CJ: Plastisitas neuron dan transduksi sinyal di neuron nosiseptif:
implikasi untuk inisiasi dan pemeliharaan nyeri patologis. Neurobiol Dis
8:1-10, 2001
16. Kallakuri S, Takebayashi T, Ozaktay AC, Chen C, Yang S, Wooley PH, et al:
Efek aplikasi epidural dari allo grafted nucleus pulposus pada tikus pada
ekspresi sitokin, penarikan anggota badan dan pelepasan akar saraf. Eur
Spine J 14:956–
964, 2005
17. Kawakami M, Tamaki T, Weinstein JN, Hashizume H, Ni shi H, Meller ST:
Patomekanisme perilaku terkait nyeri yang dihasilkan oleh allografts dari
diskus intervertebralis pada tikus. Tulang Belakang (Phila Pa 1976)
21:2101–2107, 1996
18. Kayama S, Konno S, Olmarker K, Yabuki S, Kikuchi S: Insisi dari anulus
fibrosus menginduksi perubahan morfologi akar saraf, vaskular, dan
fungsional. Sebuah studi eksperimental.
Tulang Belakang (Phila Pa 1976) 21:2539–2543, 1996
19. Kim SJ, Kim WR, Kim HS, Park HW, Cho YW, Jang SH, dkk: Aktivitas spontan
abnormal pada elektromiografi jarum dan hubungannya dengan perilaku
nyeri dan patologi serabut saraf pada model tikus herniasi lumbal. Tulang
Belakang (Phila Pa
1976) 36:E1562–E1567, 2011
20. Kim SJ, Park SM, Cho YW, Jung YJ, Lee DG, Jang SH, dkk: Perubahan
ekspresi mRNA untuk interleukin-8 dan efek penghambat reseptor
interleukin-8 di kornu dorsalis tulang belakang pada model tikus herniasi
diskus lumbal. Tulang Belakang (Phila Pa 1976)
36:2139–2146, 2011
21. Ledeboer A, Sloane EM, Milligan ED, Frank MG, Mahony JH, Maier SF, dkk:
Minocycline melemahkan allo dynia mekanis dan ekspresi sitokin proinflamasi
pada model tikus yang memfasilitasi nyeri. Sakit 115:71–83, 2005
22. Marchand F, Perretti M, McMahon SB: Peran sistem kekebalan dalam nyeri
kronis. Nat Rev Neurosci 6:521–532, 2005
23. McCarron RF, Wimpee MW, Hudkins PG, Laros GS: Efek inflamasi nukleus
pulposus. Elemen yang mungkin dalam patogenesis nyeri punggung bawah.
Tulang Belakang (Phila Pa 1976) 12:
760–764, 1987
24. McMahon SB, Cafferty WB, Marchand F. Faktor imun dan sel glial sebagai
mediator dan modulator nyeri. Exp Neurol
192:444–462, 2005
25. Munglani R: Efek jangka panjang dari frekuensi radio berdenyut untuk nyeri
neuropatik. Sakit 80:437–439, 1999
26. Ohtori S, Takahashi K, Aoki Y, Doya H, Ozawa T, Saito T, dkk: Spinal neural
cyclooxygenase-2 memediasi nyeri yang disebabkan pada model tikus
herniasi lumbar disk. J Sakit 5:385–391, 2004
27. Olmarker K, Brisby H, Yabuki S, Nordborg C, Rydevik B: The
262
HK Cho dkk.
efek nukleus pulposus yang normal, beku, dan tercerna hyaluronidase pada
struktur dan fungsi akar saraf. Tulang Belakang (Phila
Pa 1976) 22:471–476, 1997
28. Olmarker K, Larsson K: Faktor nekrosis tumor alfa dan cedera akar saraf yang
diinduksi oleh nukleus-pulposus. Tulang Belakang (Phila Pa
1976) 23:2538–2544, 1998
29. Olmarker K, Nordborg C, Larsson K, Rydevik B: Perubahan ultrastruktural
pada akar saraf tulang belakang yang diinduksi oleh nukleus pulposus
autologus. Tulang Belakang (Phila Pa 1976) 21:411–414, 1996
30. Olmarker K, Rydevik B, Nordborg C: nukleus pulposus autologus menginduksi
perubahan neurofisiologis dan histologis pada akar saraf babi cauda equina.
Tulang Belakang (Phila Pa 1976) 18:
1425–1432, 1993
31. Omarker K, Myers RR: Patogenesis nyeri sciatic: peran hernia nukleus
pulposus dan deformasi akar saraf tulang belakang dan ganglion akar dorsal.
Sakit 78:99–105, 1998
32. Pagura JR: Rhizotomi tulang belakang frekuensi radio perkutan.
Appl Neurophysiol 46:138–146, 1983
33. Park HW, Ahn SH, Kim SJ, Seo JM, Cho YW, Jang SH, dkk: Perubahan
ekspresi sumsum tulang belakang fraktalkin dan reseptornya dalam model
tikus herniasi diskus oleh nukleus pulposus autologus. Tulang Belakang
(Phila Pa 1976) 36:E753–E760, 2011
34. Sasaki N, Sekiguchi M, Shishido H, Kikuchi S, Yabuki S, Konno S:
Perbandingan perilaku terkait nyeri setelah aplikasi lokal nukleus pulposus
dan/atau kompresi mekanis pada ganglion akar dorsal. Fukushima JMedSci
57:
46–53, 2011
35. Slappendel R, Crul BJ, Braak GJ, Geurts JW, Booij LH, Vo erman VF, dkk:
Kemanjuran lesi frekuensi radio dari ganglion akar dorsal tulang belakang
leher dalam studi acak tersamar ganda: tidak ada perbedaan antara 40
derajat C dan 67 derajat C perawatan. Sakit 73:159-163, 1997
36. Sluijter ME, Cosman ER, Rittman WB, van Kleef M: Efek medan frekuensi
radio berdenyut yang diterapkan pada ganglion akar dorsal—laporan awal.
Klinik Sakit 11:109–117, 1998
37. Sweitzer S, Martin D, DeLeo JA: antagonis reseptor interleukin-1 intratekal
dalam kombinasi dengan reseptor faktor nekrosis tumor terlarut menunjukkan
tindakan anti-alodinik pada model tikus dengan nyeri neuropatik. Ilmu saraf
103:529–539, 2001
38. Takahashi H, Suguro T, Okazima Y, Motegi M, Okada Y, Kakiuchi T: sitokin
inflamasi pada disk hernia tulang belakang lumbar. Tulang Belakang (Phila
Pa 1976) 21:218–224, 1996
39. Tsuda M, Inoue K, Salter MW: Nyeri neuropatik dan mikroglia tulang belakang:
masalah besar dari molekul di glia "kecil".
Tren Neurosci 28:101–107, 2005
40. Twining CM, Sloane EM, Schoeniger DK, Milligan ED, Mar tin D, Marsh H,
dkk: Aktivasi kaskade pelengkap sumsum tulang belakang mungkin
berkontribusi pada allodynia mekanis yang disebabkan oleh tiga model
hewan dari sensitisasi tulang belakang. J Sakit
6:174–183, 2005
41. Uesugi K, Sekiguchi M, Kikuchi S, Konno S: Pengaruh stres pengekangan
berulang dalam perilaku terkait nyeri yang disebabkan oleh nukleus pulposus
diterapkan pada akar saraf pada tikus. Eur Spine J 20:1885–1891, 2011
42. van Kleef M, Liem L, Lousberg R, Barendse G, Kessels F, Sluijter M: Lesi
frekuensi radio yang berdekatan dengan ganglion akar dorsal untuk nyeri
cervicobrachial: studi acak prospektif double blind. Bedah saraf
38:1127-1132, 1996
43. van Kleef M, Spaans F, Dingemans W, Barendse GA, Lantai E, Sluijter ME:
Efek dan efek samping dari lesi termal perkutan dari ganglion akar dorsal
pada pasien dengan sindrom nyeri serviks. Sakit 52:49–53, 1993
44. Van Zundert J, de Louw AJ, Joosten EA, Kessels AG, Honig W, Dederen PJ,
dkk: Arus frekuensi radio berdenyut dan terus menerus yang berdekatan
dengan ganglion akar dorsal serviks tikus menginduksi aktivitas seluler akhir
di tanduk dorsal. Prosedur anestesi 102:125-131, 2005
45. Van Zundert J, Lamé IE, de Louw A, Jansen J, Kessels F, Patijn J, dkk:
Perawatan frekuensi radio berdenyut perkutan dari
J Neurosurg: Tulang Belakang / Volume 19 / Agustus 2013
Machine Translated by Google
Efek frekuensi radio berdenyut pada ganglion akar dorsal
ganglion akar dorsal serviks dalam pengobatan sindrom nyeri
serviks kronis: audit klinis. Neuromodulasi 6: 6–14, 2003
46. Van Zundert J, Patijn J, Kessels A, Lamé I, van Suijlekom H, van Kleef
M: Frekuensi radio berdenyut yang berdekatan dengan ganglion akar
dorsal serviks pada nyeri radikular serviks kronis: uji klinis acak
terkontrol pura-pura buta ganda. Rasa sakit
127:173–182, 2007
47. Watkins LR, Maier SF: Beyond neurons: bukti bahwa sel imun dan
glial berkontribusi pada keadaan nyeri patologis.
Physiol Rev 82:981–1011, 2002
48. Watkins LR, Maier SF: Glia: target penemuan obat baru untuk nyeri
klinis. Nat Rev Drug Discov 2:973–985, 2003
49. Watkins LR, Milligan ED, Maier SF: Glia sumsum tulang belakang:
pemain baru kesakitan. Sakit 93:201-205, 2001
50. Widmann C, Gibson S, Jarpe MB, Johnson GL: Mitogen-activated
protein kinase: konservasi modul tiga-kinase dari ragi ke manusia.
Physiol Rev 79: 143–180, 1999
J Neurosurg: Tulang Belakang / Volume 19 / Agustus 2013
51. Yabuki S, Kikuchi S, Olmarker K, Myers RR: Efek akut nukleus
pulposus pada aliran darah dan tekanan cairan endoneurial pada
ganglia akar dorsal tikus. Tulang Belakang (Phila Pa 1976) 23:2517–
2523, 1998
52. Zhuang ZY, Gerner P, Woolf CJ, Ji RR: ERK diaktifkan secara
berurutan di neuron, mikroglia, dan astrosit oleh ligasi saraf tulang
belakang dan berkontribusi pada alodinia mekanis dalam model nyeri
neuropatik ini. Sakit 114:149–159, 2005
Naskah diserahkan 30 Juli 2012.
Diterima 7 Mei 2013.
Harap sertakan informasi ini saat mengutip makalah ini: pub
dipublikasikan secara online pada 7 Juni 2013; DOI: 10.3171/2013.5.SPINE12731.
Alamat korespondensi ke: Sang Ho Ahn, MD, Ph.D., Kedokteran Fisik
dan Rehabilitasi, Fakultas Kedokteran Universitas Yeungnam, 317-1,
Daemyung-dong, Nam-gu, Daegu 705-717, Re -
publik Korea. email: spineahn@yumail.ac.kr.
263