D.

SKEMA KERJA

a. Pembuatan larutan stok paracetamol

Ditimbang paracetamol 50,0 mg

Dilarutkan dalam aquadest panas ad 50,0ml

b. Diperoleh
Pembuatan kurva baku kadar paracetamol 1mg/l atau 1000µg/ml
Heparin + 250µl darah + 250µl larutan stok paracetamol dibuat kadar 0
(blanko), 100µg/ml, 200µg/ml, 300µg/ml, 400µg/ml, dan 500µg/ml,

Ditambahkan 2,0ml TCA 20% dengan vortexing (disentrifuge 10’ 2500

rpm)

Diambil supernatan dimasukkan kedalam labu takar 10,0ml

Ditambahkan 0,5ml HCl 6N dan 1,0ml NaNO2 10% , campur (didiamkan 15

menit ditempat dingin dengan suhu <15oC

Ditambahkan 1,0ml larutan asam sulfamat 15% dengan hati hati melalui
dinding labu takar

Ditambahkan 3,5ml NaOH 10% lalu ad dengan aquadest

Dibaca intensitas warna pada λ maks, dibuat kurva hubungan antara resapan
vs kadar

Dibuat persamaan garis menggunakan kuadrat kecil y=bx+a, dihitung nilai r

dari grafik tersebut
c. Uji Pendahuluan untuk Farmakokinetika Paracetamol

Tikus yang sudah dihitung Vp

Diberikan paracetamol secara peroral

Dilakukan pencuplikan darah pada menit 5, 10, 15, 20 , 30, 45, 60, 75, 90,
120, 150, 180 , dan 210

250µl darah + heparin

Ditambahkan 2 ml TCA 20% kemudian disentrifuge selama 10 menit kec

2500 rpm

Ditambah 1,5 ml supernatan, masukan labu takar 10,0 ml

Tambahkan 0,5 HCl 6N dan 1,0 ml NaNO2 10% dicampur, kemudian

didiamkan selama 15 menit pada suhu kurang dari 15o C

Tambahkan 1,5 ml asam sulfamat + 3,5 ml NaOH 10% dengan aquadest,

homogenkan

Diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimal dan ditetapkan

kadarnya
E. DATA PENGAMATAN

Data Penimbangan Tikus

Tikus Ke- Berat Badan (gram)

Tikus 1 199,5 g
Tikus 2 192 g
Tikus 3 224 g
Tikus 4 202 g
Tikus 5 234 g
Tikus 6 201 g

Data Kurva Baku Paracetamol

Konsentrasi Sebenarnya Absorbansi

(ppm)
98,8000 -0,143
197,6000 -0,071
296,4000 0,247
395,2000 0,234
494,000 0,240

Data absorbansi pengukuran Paracetamol Kelp 3 dengan dosis 750 mg (pada manusia BB 70
Kg) yang diujikan pada tikus putih dengan BB 224 gram, dimana diketahui ketersediaan
hayati Paracetamol sebesar 80%

Waktu (Menit) Absorbansi Dosis Paracetamol 750 mg

5 -0,160
10 -0,100
15 -0,167
20 -0,161
30 -0,181
45 -0,166
60 -0,141
 75 -0,108
90 -0,172
120 -0,125
180 -0,154

F. PERHITUNGAN

1. Perhitungan Larutan Cstock

Dosis Paracetamol = 750mg/70kgBB

70𝑘𝑔
Dosis BB 70kg Manusia = 50𝑘𝑔 𝑥 750𝑚𝑔 = 1050mg/70kg BB manusia

Konversi dosis tikus 200g = 1050mg x 0,018 = 18,9 mg/200g BB tikus

1000 𝑔
Dosis per Kg BB tikus = 𝑥 18,9𝑚𝑔= 94,5 mg/kg BBtikus
200𝑔

BB tikus terbesar = 234 g

234 𝑔
Dosis tikus terbesar = 1000𝑔 𝑥 94,5𝑚𝑔 = 22,113 mg/kg BBtikus

𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 𝑡𝑖𝑘𝑢𝑠 𝑡𝑒𝑟𝑏𝑒𝑠𝑎𝑟 22,113𝑚𝑔

Cstok = 1 = 1
.𝑉𝑝 𝑥 5𝑚𝑙
2 2

= 8,8452 mg/ml

PCT yang dibutuhkan = Cstok x vol stok

= 8,8462 mg/ml x 25 ml

= 221,13 mg

BR tablet = 0,6053 gram = 605,3mg

Etiket = 500 mg
𝑥 𝑚𝑔
PCT yang harus ditimbang = 𝑥 𝐵𝑅
𝑒𝑡𝑖𝑘𝑒𝑡

221,13𝑚𝑔
= 𝑥 0,6053 𝑔
500 𝑚𝑔

= 0,2677 gram (range ± 5% :0,2543 gram- 0,2811 gram)

Penimbangan K + Z = 0,7508 g
 K + S = 0,4850 g

Zat = 0,2658 g

𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑒𝑏𝑒𝑛𝑎𝑟𝑛𝑦𝑎
Cstok Sebenarnya = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑦𝑔 ℎ𝑟𝑠 𝑑𝑖𝑡𝑖𝑚𝑏𝑎𝑛𝑔 𝑥 𝐶𝑠𝑡𝑜𝑘 𝑡𝑒𝑜𝑟𝑖𝑡𝑖𝑠

0,2658 𝑔
= 0,2677 𝑔 𝑥 8,8452 𝑚𝑔/𝑚𝑙

= 8,78 mg/ml

0,5 𝑔
CMC Na 0,5 % (0,1%-1% HPe hal 19) = 100 𝑚𝑙 𝑥 25 𝑚𝑙 = 0,125 gram

Air Corpus = 20 x 0,125 gram = 2,5 ml

➢ Pembuatan Baku Induk Paracetamol 1000 ppm

mg
Ppm = L
50 mg
= 0,05L

= 1000 ppm
Range ± 5% = 47,5 mg – 52,5 mg
➢ Penimbangan Baku Induk Sebenarnya
K + Z = 0,5575 g
K + S = 0,5017 g
Z = 0,0494 g = 49,4 mg

➢ Kadar Paracetamol Sebenarnya

mg
Ppm = L
49,4 mg
=
0,05L

= 988,0000 ppm

➢ Deret Baku Paracetamol

Konsentrasi Deret baku Koreksi kadar

100 ppm V1 . C1 =V2 . C2 V1 . C1 =V2 . C2
250µl.100 ppm = V2.1000 ppm 250 µl . C1= 25ml. 988 ppm
V2=25µl C2 = 98,8000 ppm
 Volume darah yang diambil=
250µl-25µl = 225µl
200 ppm V1 . C1 =V2 . C2 V1 . C1 =V2 . C2
250µl.200 ppm = V2.1000 ppm 250 µl . C1= 50ml. 988 ppm
V2=50µl C2 = 197,6000 ppm
Volume darah yang diambil=
250µl-50µl = 200µl
300 ppm V1 . C1 =V2 . C2 V1 . C1 =V2 . C2
250µl.300 ppm = V2.1000 ppm 250 µl . C1= 75ml. 988 ppm
V2=75µl C2 = 296,4000 ppm
Volume darah yang diambil=
250µl-75µl = 175µl
400 ppm V1 . C1 =V2 . C2 V1 . C1 =V2 . C2
250µl.400 ppm = V2.1000 ppm 250 µl . C1= 100ml. 988 ppm
V2=100µl C2 = 395,2000ppm
Volume darah yang diambil=
250µl-100µl =1505µl
500 ppm V1 . C1 =V2 . C2 V1 . C1 =V2 . C2
250µl.500 ppm = V2.1000 ppm 250 µl . C1= 125ml. 988 ppm
V2=125µl C2 = 494,0000 ppm
Volume darah yang diambil=
250µl-125µl = 125µl

➢ Konsentrasi Sebenarnya Baku Paracetamol

Konsentrasi Kadar Konsentrasi sebenarnya Absorbansi

100 ppm 98,8000 ppm -0,143
200 ppm 197,6000 ppm -0,071
300 ppm 296,4000 ppm 0,247
400 ppm 395,2000ppm 0,234
500 ppm 494,0000 ppm 0,240

Regresi Linier
a = -0,2199
b = 1,0840 x 10−3
r = 0,8890
y = bx+a
y = 0,001084 x + -0,2199
 Kurva Baku Paracetamol Konsentrasi vs Absorbansi
0,3

ABSORBANSI 0,2

0,1

0
98,8000 ppm 197,6000 ppm 296,4000 ppm 395,2000ppm 494,0000 ppm
-0,1

-0,2
KONSENTRASI (PPM)

Kurva Baku Paracetamol Konsentrasi vs Absorbansi

2. Kurva Semi Logaritmik Cp vs t

Waktu Absorbansi Cp (ppm) Log Cp

5 -0,160 55,2583 1,7423975
10 -0,100 110,6089 2,0437901
15 -0,167 48,8007 1,6884261
20 -0,161 54,3358 1,7350861
30 -0,181 35,8856 1,5549202
45 -0,166 49,7232 1,6965591
60 -0,141 72,7859 1,8620473
75 -0,108 103,2287 2,0138005
90 -0,172 44,1881 1,6453053
120 -0,125 87,5461 1,9422368
180 -0,154 61,0185 1,7854615
Keterangan :
: Absorbsi
: Distribusi
: Eliminasi

Kurva Semi Logaritmik Cp vs t

120
100
Cp (ppm)

80
60
40
20
0
5 10 15 20 30 45 60 75 90 120 180
Waktu ( menit )

kurva Cp vs t
 3. Fase Absorbsi
Waktu Cp’ Cp” Cp res 2 Ln cp res a b r
sampling 2
5 55,78739 0,760329 1,289421 0,254193 0,508386 -0,05084 -1
10 56,06724 0,873363 -53,6683 0

4. Fase distribusi
Waktu cp Ln cp Cp’ Cp res Ln cp a b r
sampling res

15 48,8007 3,887745 56,34849 -7,54779 0 -0,41261 0,02772 0,493623

20 54,3358 3,995183 56,63116 -2,29536 0

30 35,8856 3,580336 57,20074 -21,3151 0
45 49,7232 3,906472 58,06588 -8,34268 0
60 72,7859 4,287522 58,94411 13,84179 2,627693
75 103,229 4,636947 59,83561 43,39309 3,7703
90 44,1881 3,788456 60,7406 -16,5525 0

5. Fase eliminasi
Waktu sampling cp Ln cp a b r
120 87,5461 4,472166 5,194142 -0,00602 -1
180 61,0185 4,111177

6. Perhitungan Farmakokinetik

Perhitungan Hasil
eliminasi A Eliminasi (B) = anti ln a 180,2135 µg/ml
Kecepatan Eliminasi (β) = abs (b) 0,00602/menit
t1/2 eliminasi = 0,693 / kecepatan eliminasi 115,1838 menit
distribusi A Distribusi (A) = Anti ln a 0,6619 µg/ml
Kecepatan Distribusi (α) = abs (b) 0,02772/ menit
t1/2 distribusi = 0,693 / kecepatan distribusi 25 menit
absorbsi A Absorbsi (C) = Anti ln a 1,6626 µg/ml
Kecepatan Absorbsi (Ka) = abs (b) 0,05084/menit
t1/2 absorsi = 0,693 / kecepatan absorbsi 13,6309 menit
Waktu AUC trapesium
Cp AUC Model
(Menit) (µg. menit/ ml)

5 55,2583 138,1458

10 110,6089 414,668

15 48,8007 -154,5205

20 54,3358 13,8378
𝐴 𝐵 𝐶
= 𝛼 + 𝛽 - 𝐾𝑎
30 35,8856 -92,2645
0,6619 180,2135 1,6626
= 0,02772 + 0,00602
- 0,05084
45 49,7232 103,782
= 23,8781 + 29935,7973 – 32,7026
60 72,7859 172,9703
= 29.926,9728 μg.menit/ml
75 103,2287 228,321

90 44,1881 -442,8045

120 87,5461 650,37

180 61,0185 10.135,9635

Total 11.168,4689
 𝐶𝑝 𝑤𝑎𝑘𝑡𝑢 𝑡𝑒𝑟𝑎𝑘ℎ𝑖𝑟
= 𝛽

AUC tak 61,0185

= 0,00602
hingga
= 10135,9635 μg.menit/ml

𝑘𝑎
𝐿𝑛 ( )
α
= (𝑘𝑎−α)

0,05084
tmax 𝐿𝑛 (
0,02772
)
= (0,05084−0,02772)

= 26,2340 menit
= A . e-α.tmax + B. e-β.tmax – C. e-ka.tmax

= 0,6619 . e-0,02772.26,2340 +180,2135. e-0,00602. 26,2340 – 1,6626.e-0.05084.26,2340

Cmax = 0,6691 x 1,9768 + 180,2135 x 0,4293 – 1,6626 x 3,6255

= 1,3227 + 77,3657 – 6,0278

= 72,6606 μg /ml
𝐴 × 𝐵 (𝛽 − 𝛼)2
k12 = (
𝐴+𝐵) (𝐴 × 𝛽+𝐵 × 𝛼)

0,6691× 180,2135 (0,00602−0,02772)2

= (0,6691+180,2135) × (0,6691𝑥0,00602+ 180,2135x 0,02772)

120,580853x0,00047
k12 = (180,8826) × (0,00402798+4,995518)

0,056673
= 900,330876

= 0,000062/menit

𝐴 × 𝛽+𝐵 × 𝛼
= 𝐴+𝐵

(0,6691× 0,00602) +( 180,2135 × 0,02772)

= 0,6691 + 180,2135
k21
0,00402798+ 4,995518
= 180,8826

= 0,002764/menit
 𝛼×𝛽
= 𝐾21

0,02772 × 0,00602
k = 0,002764

= 0,060374/menit

𝐹𝑥𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 𝑒𝑣
= 𝐴𝑈𝐶 𝑀𝑜𝑑𝑒𝑙

0,8𝑥22,113
ClAUC Model = 29926,9728

= 0,00059 ml/menit

𝐶𝑙
= 𝛽

Vd area 0,00059
= 0,00602

= 0,0980 ml
𝐹𝑥𝐷𝑒𝑣
= K x AUC 𝑚𝑜𝑑𝑒𝑙
0,8𝑥22,113
=0,060374x29926,9728
Vs
= 0,0098 ml

(Vs x k12)/k21
𝑉𝑠 𝑥 𝐾12
= K 21
Vp 0,0098𝑥 0,000062
= 0,002764

= 0,000220 ml
= Vp + Vs
Vdss = 0,0098 ml + 0,000220 ml
= 0,01002 ml