Uji Perbandingan Bioavailabilitas Sediaan Tablet

PCT secara In Vitro

Uji Disolusi
1. Pembuatan larutan Dapar Phospat (pH = 5,8 sebanyak 6L)
 Membuat kalium fosfat monobasa 0,2 M dengan melarutkan 27,22 g kalium
fosfat. Monobasa dalam air dan di encerkan hingga 1000 mL.
 Dalam Farmakope Indonesia Edisi III, Larutan Dapar Phospahat pH 5,8 sebanyak
200 mL
 Ambil 50 mL kalium fosfat monobasa 0,2 M, masukkan ke dalam labu
takar 200 mL.
 Tambahkan 3,6 mL natrium hidroksida 0,2 M sampai tanda.
 Perhitungan untuk pembuatan larutan dapar Phospat pH 5,8 sebanyak 6 L
Perhitungan KH2PO4 :
6000 x
=
200 50
x = 6000 x 50/200
x = 1500 mL
Jadi dibutuhkan KH2PO4 0,2 M sebanyak 1500 mL untuk membuat dapar
Phospat pH 5,8 sebanyak 6 L (6000 mL)
Penimbangan serbuk KH2PO4 :
Berat 1000
M= x
Mr volume
berat 1000
0,2 = x
136,084 1500
1500
Berat = 0,2 x 136,084 x = 40,8252 gram
1000
Dibutuhkan 40,8252 gram untuk membuat 1500 mL KH2PO4 0,2 M
Perhitungan NaOH :
6000 x
=
200 3,6
6000
x= x 3,6
200
x = 108 mL
Penimbangan serbuk NaOH :
Berat 1000
M= x
Mr Volume
Berat 1000
0,2 = x
40 108
 108
Berat = 0,2 x 40 x = 0,864 gram
1000
Dibutuhkan 0,864 gram NaOH untuk membuat larutan 108 mL KH2PO4 0,2M.

2. Pembuatan Larutan Induk PCT

 Larutan induk PCT : 100 ppm, sebanyak 100 mL
Prosedur : 100 ppm = 100 mg/1000 mL
= 10 mg/100 mL
Karena menimbang 10 mg terlalu kecil, maka dibuat 1000 ppm (konsentrasi lebih
tinggi) lalu diencerkan 10 kali
Jadi : 1000 ppm = 1000 mg/1000 mL
= 100 mg/100 mL
Pengenceran = V1.M1 = V2.M2
V1.1000 ppm = 100 mL.100 ppm
V1 = 10000 / 1000
V1 = 10 mL
Dipipet 10 mL larutan PCT 1000 ppm, kemudian diencerkan menggunakan dapar
fosfat sampai volume 100 mL, sehingga terbentuk larutan PCT dengan
Konsentrasi 100 ppm sebanyak 100 mL.
3. Pembuatan Kurva Baku PCT

No. Kons. (ppm) Volume (mL) Abs

1. 2 1 mL 0,156
2. 4 2 mL 0,277
3. 6 3 mL 0,422
4. 8 4 mL 0,549
5. 10 5 mL 0,744
6. 12 6 mL 0.802
 Menghitung volume pada tiap konsentrasi kurva baku, jika dibuat 50 mL
1. Konsentrasi 2 ppm sebanyak 50 mL
V1.C1 = V2.C2
V1.100 ppm = 50 mL.2 ppm
100
V1 =
100
V1= 1 mL
2. Konsentrasi 4 ppm, volume 50 mL
V1.M1 = V2.M2
V1.100 = 50.4
V1.100 = 200
V1 = 200/100
V1= 2 mL
3. Konsentrasi 6 ppm, volume 50 mL
 V1.M1 = V2.M2
V1.100 = 50.6
V1.100 = 300
V1 = 300/100
V1 = 3 ml
4. Konsentrasi 8 ppm, volume 50 mL
V1.M1 = V2.M2
V1.100 = 50.8
V1.100 = 400
V1 = 400/100
V1 = 4 mL
5. Konsentrasi 10 ppm, volume 50 mL
V1.M1 = V2.M2
V1.100 = 50.10
V1.100 = 500
V1 = 500/100
V1 = 5 mL
6. Konsentrasi 12 ppm, volume 50 mL
V1.M1 = V2.M2
V1.100 = 50.12
V1.100 = 600
V1 = 600/100
V1 = 6 mL
 Menghitung persamaan regresi linear antara konsentrasi (x) dengan absorbansi (y),
diperoleh hasil sebagai berikut :
a = 0,0159
b = 0,0679
r = 0,9947 ( r² = 0,9894 )
y = a + bx
y = 0,0159 + 0,0679 x

4. Analisa data
T = Tablet generik
R = Tablet paten

Tablet Waktu Absorbansi Faktor Konsentrasi K

(menit) pengenceran
 T 5’ 0,288 100x 400,73 ppm 360,63mg
(Generik) 10’ 0,337 100x 472,90 ppm 425,61mg
20’ 0,352 100x 494,99 ppm 445,49mg
30’ 0,372 100x 524,45 ppm 472,01mg
R 5’ 0,277 100x 384,54 ppm 346,08mg
(Paten) 10’ 0,314 100x 439,03 ppm 395,13 mg
20’ 0,318 100x 444,92 ppm 400,42 mg
30’ 0,322 100x 450,81 ppm 405,73 mg

 Perhitungan konsentrasi tablet generik setelah pengenceran

y = a + bx

Menit ke-5 : y = a + bx

0,288 = a + bx

0,288 = 0,0159 + 0,0679 x

0,288−0,0159
x=
0,0679
x = 4,0073 ppm
Konsentrasi = 4,0073 x faktor pengenceran
= 4,0073 x 100
= 400,73 ppm
Menit ke 10 ; y = a + bx
0,337 = 0,0159 + 0,0679x
0,337 – 0,0159 = 0,0679x
0,3211 = 0,0679x
0,3211
=x
0,0679
X = 4,7290
Konsentrasi = 4,7290 x Faktor pengenceran
= 4,7290 x 100 = 472,90 ppm
Menit ke 20 : y = a + bx
0,352 = 0,0159 + 0,0679 x
0,352−0,0159
=x
0,0679
0,3361
=x
0,0679
x = 4,9499
Konsentrasi = 4,9499 x 100 = 494,99 ppm
 Menit ke 30 ; y = a + bx
0,372 = 0,0159 + 0,0679x
0,372−0,0159
=x
0,0679
0,3561
=x
0,0679
x= 5,2445
Konsentrasi = 5,2445 x 100 = 524,45 ppm
 Perhitungan konsentrasi tablet paten setelah pengenceran ;
Menit ke 5 ; y = a + bx
0,277 = 0,0159 + 0,0679 x
0,277 – 0,0159 = 0,0679x
0,2611 = 0,06797x
0,2611
=x
0,0679
x = 3,8454
Konsentrasi = 3,8454 x 100 = 384,54 ppm
Menit ke 10 ; y = a + bx
0,314 = 0,0159 + 0,0679 x
0,314 – 0,0159 = 0,0679x
0,314−0,0159
=x
0,0679
0,2981
=x
0,0679
x = 4,3903
Konsentrasi = 4,3903 x 100 = 439,03 ppm
Menit ke 20 ; y = a + bx
0,318 = 0,0159 + 0,0679 x
0,318 – 0,159 = 0,0679 x
0,3021 = 0,0679x
0,3021
=x
0,0679
X = 4,4492
Konsentrasi = 4,4492 x 100 = 444,92 ppm
Menit ke 30 ; y = a + bx
0,322 = 0,0159 + 0,0679 x
0,322 – 0,159 = 0,0679x
0,3061 = 0,0679x
0,3061
=x
0,0679
X = 4,5081
 Konsentrasi = 4,5081 x 100 = 450,81 ppm

 Menghitung jumlah obat generik yang terdisolusi (K)

K = Volume disolusi x Konsentrasi ( mg )
Menit ke-5
K = 900 mL x 400,73 ppm ( 0,4007 mg /ml ) = 360,63 mg
Menit ke 10 :
K = 900 mL x 472,90 ppm ( 0,4729 mg/mL ) = 425,61 mg
Menit ke 20 ;
K = 900 mL x 494,99 ppm ( 0,49499 mg/mL )= 445,491 mg
Menit ke 30 ;
K = 900 mL x 524,45 ppm ( 0,52445mg/mL) = 472,005 mg

 Menghitung jumlah obat paten yang terdisolusi (K)

Menit ke 5 ;
K = Volume Disolusi x Konsentrasi
= 900 mL x 384,54 ppm ( 0,3845 mg/mL ) = 346,08 mg
Menit ke 10 ;
K = 900 mL x 439,03 ppm ( 0,43903 mg/L ) = 395,13 mg
Menit ke 20 ;
K = 900 mL x 444,92 ppm ( 0,44492 mg/mL)= 400,42 mg
Menit ke 30 ;
K = 900 mL x 450,81 ppm ( 0,45081 mg/mL )= 405,73 mg

5. Perhitungan faktor koreksi & kadar terkoreksi

Waktu Faktor Koreksi Kadar Terkoreksi

(menit) T (generik) R (paten) T (generik) R(paten)
5’ 0 0 360,63 mg 346,08 mg
10’ 2,0035 mg 1,9711 mg 427,61 mg 397,1 mg
20’ 2,3645mg 2,1952 mg 447,85 mg 402,62 mg
30’ 2,4749mg 2,2245 mg 474,48 mg 407.95 mg
Volume Sampling
 Faktor Koreksi = x Kadar menit sebelumnya
Volume Media Disolusi
 Faktor Koreksi Obat Generik ;
Menit ke 5 : 0
Menit ke 10 :
5 mL
Faktor Koreksi = x 360,63 mg = 2,0035 mg
900 mL
Menit ke 20 :
 5 mL
Faktor koreksi = x 425,61 mg = 2,3645 mg
900 mL
Menit ke 30 :
5 mL
Faktor koreksi = x 445,491 mg = 2,4749 mg
900 mL
 Faktor Koreksi Obat Paten ;
Menit ke 5 : 0
Menit ke 10 :
5 mL
Faktor Koreksi = x 346,08 mg = 1,9711 mg
900 mL
Menit ke 20 :
5 mL
Faktor Koreksi = x 395,13 mg = 2,1952 mg
900 mL
Menit ke 30 :
5 mL
Faktor Koreksi = x 400,42 mg = 2,2245 mg.
900 mL
 Kadar Terkoreksi Obat Generik ;
Kadar Terkoreksi = K + Faktor Koreksi
Menit ke-5 :
K = 360,63mg + 0 = 360,63 mg
Menit ke 10 ;
Kadar terkoreksi = 425,61 mg + 2,00 mg = 427,61 mg
Menit ke 20 ;
Kadar Terkoreksi = 445,49 mg + 2,36 mg = 447,85 mg
Menit ke 30 ;
Kadar Terkoreksi = 472,01mg + 2,47 mg = 474,48 mg
 Kadar Terkoreksi Obat Paten
Menit ke 5
Kadar Terkoreksi = K + Faktor Koreksi
= 346,08 mg + 0 = 346,08 mg
Menit ke 10 ;
Kadar Terkoreksi = 395,13 mg + 1,9711 mg = 397,1 mg
Menit ke 20 ;
Kadar terkoreksi = 400,42 mg + 2,1952 mg = 402,62 mg
Menit ke 30 ;
Kadar Terkoreksi = 405,73 mg + 2,2245 mg = 407.95 mg

Grafik waktu (t) vs K terkoreksi baik tablet generik & paten

 Kadar terkoreksi Generik dan Paten
500
450
400
350
300 kadar terkoreksi generik
kadar (mg )

kadar terkoreksi paten

250
200
150
100
50
0
5' 10' 20' 30'

6. Perhitungan % disolusi (Q) Obat Generik ;

Kadar terkoreksi
Q= x 100%
dosis PCT

Menit ke 5 ;
360,63.
Q= x 100% = 72,126 %
500 mg
Menit ke 10 ;
427,61
Q= x 100% = 85,522%
500

Menit ke 20 ;
447,85
Q= x 100% = 89,57%
500
Menit ke 30 ;
474,48
Q= x 100% = 94,89 %
500
Perhitungan % disolusi (Q) Obat Paten
Kadar terkoreksi
Q= x 100%
dosis PCT
Menit ke 5
346,08.
Q= x 100% = 69,22 %
500 mg
Menit ke 10 ;
397,1
Q= x 100% = 79,42 %
500
Menit ke 20 ;
402,62
Q= x 100% = 80,52 %
500
Menit ke 30 ;
407.95
Q= x 100%= 81,59%
500

Perhitungan nilai Q baik tablet generik / paten

Waktu (menit) Tablet % disolusi AUC

(Q) (mg.menit)
5’ T (generik) 72,126 % 901,575
10’ 85,522% 1970,6
20’ 89,57% 4377,3
30’ 94,89 % 4611,65
Ʃ 342,108% 11861,125
5’ R (paten) 69,22 % 865,2
10’ 79,42 % 1857,95
20’ 80,52 % 3998,6
30’ 81,59% 4052,85
Ʃ 310,75% 10774,6

( Kn+ Knt ) . ( tnt−tn )

 Perhitungan AUC =
2
 AUC obat generic :
Menit ke 0 - 5 :
( 0+ K 5' ) . ( t 5 ' −t 0 ) ( 0+360,63 ) . ( 5−0 )
AUC = = = = 901,575
2 2
Menit ke 5 - 10
( K 10 ' + K 5 ' ) . ( t 10 ' −t 5 ' ) ( 360,63+ 427,61 ) . ( 10−5 )
AUC = =
2 2
= 394,12 x 5 = 1970,6
Menit ke 10 - 20 :
( K 20 ' + K 10 ' ) . 10 ' ( 447,85+ 427,61 ) . ( 20−10 )
AUC = =
2 2
= 437,73 x 10 = 4377,3
Menit ke 20 - 30 :
( K 30 ' + K 20 ' ) . ( t 30 '−t 20 ' ) ( 474,48+ 447,85 ) . ( 20−10 )
AUC = =
2 2
 922,33 .10
= = 4611,65
2
 AUC obat paten :
Menit ke 0 -5 :
( K 10 ' + K 5 ' ) . ( t 10 ' −t 5 ' ) ( 0+346,08 ) . ( 5−0 )
AUC = =
2 2
346,08. 5
=
2
= 865,2
Menit ke 5 -10 :
( K 10 ' + K 5 ' ) . ( t 10 ' −t 5 ' ) ( 397,1+346,08 ) . ( 10−5 )
AUC = =
2 2
743,18. 5
= = 1857,95
2
Menit ke 10 -20
( K 20 ' + K 10 ' ) . ( t 20 '−t 10 ' ) ( 402,62+397,1 ) . ( 20−10 )
AUC = =
2 2
799,72. 10
= = 3998,6
2
Menit ke 20 -30 :
( K 30 ' + K 20 ' ) . ( t 30 '−t 20 ' ) ( 407,95+ 402,62 ) . ( 30−20 )
AUC = =
2 2
810,57 .10
= = 4052,85
2

7. Perhitungan nilai f1 & f2

t (menit) %R %T | R – T |% | R – T |² %

5’ 69,22 % 72,126 % 2,91 8,47

10’ 79,42 % 85,52% 6,10 37,21
20’ 80,52 % 89,57% 9,05 81,90
30’ 81,59% 94,89 % 13,3 176,89
Ʃ 310,75% 342,106 31,36 304,47

Perhitungan f1 dan f2

Ʃ [R−T ]
f1 = x 100
ƩR
31,36
= x 100 = 10,09%
310,75
 100

√
2
f2 = 50 x log ( Ʃ ( R−T ) )
1+[ ]
n

100
= 50 x log (
√ 1+[
304,47 )
4
]

100
= 50 x log ( )
8,78

= 50 x log 11,39

= 50 x 1,057

= 52,85%