PEMANFAATAN EKSTRAK BUNGA TELANG (Clitoria

ternatea L.) SEBAGAI SUMBER ANTIOKSIDAN PADA

FORMULASI MINUMAN SUPLEMEN

PROPOSAL

Oleh:

ERVINA MARGARETHA ZEBUA

1701011188

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI DAN KESEHATAN
INSTITUT KESEHATAN HELVETIA
MEDAN
2021
 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha ESA atas segala berkat dan
anugerah-Nya yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal
yang berjudul “Pemanfaatan Ekstrak Bunga Telang (Clitoria ternatea L.)
Sebagai Sumber Antioksidan Pada Formulasi Minuman Suplemen”.
Proposal ini disusun dalam rangka memenuhi salah satu syarat untuk
mendapatkan gelar Sarjana Institut Kesehatan Helvetia. Penulis menyadari
sepenuhnya bahwa proposal ini tidak dapat diselesaikan tanpa bantuan berbagai
pihak, baik dukungan moril, materil dan sumbangan pemikiran. Untuk itu, penulis
mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Dr. dr. Hj. Razia Begum Suroyo , M.Sc., M.Kes., selaku Pembina Yayasan
Helvetia Medan.
2. Iman Muhammad, S.E., S.Kom., M.M., M.Kes., selaku Ketua Yayasan
Helvetia Medan.
3. Drs. Dr. Ismail Effendy, M.Si., selaku Rektor Institut Kesehatan Helvetia
Medan.
4. apt. H. Darwin Syamsul, S.Si., M.Si., selaku Dekan Fakultas Farmasi dan
Kesehatan Helvetia.
5. apt. Adek Chan, S.Si., M.Si., selaku Ketua Prodi S1 Farmasi Institut
Kesehatan Helvetia Medan.
6. apt. Evi Ekayanti Ginting, S.Farm., M.Si., selaku Pembimbing I yang telah
memberikan bimbingan dan mencurahkan waktu, perhatian, ide, dan
motivasi selama penyusunan skripsi ini.
7. Andi Josep Nicolas H, S.Farm., M.Si., selaku Pembimbing II yang telah
meluangkan waktu dan memberikan pemikiran dalam membimbing penulis
selama penyusunan skripsi ini.
8. apt. Loura Novilia, S.Farm., M.Si., selaku Penguji yang telah meluangkan
waktunya untuk memberikan kritik dan saran yang membangun dalam
penyempurnaan skripsi ini.
9. Seluruh Dosen Program Studi S1 Farmasi yang telah mendidik dan
mengajarkan berbagai ilmu yang bermanfaat bagi penulis.
10. Teristimewa kepada Ayahanda Lalaziduhu Zebua dan Ibunda Firmina
Sarumaha yang selalu memberikan pandangan, mendukung baik moril
maupun materil, mendoakan dan selalu memotivasi penulis dalam
penyelesaian skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa proposal ini masih memiliki banyak kekurangan.
Oleh karena itu, penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan proposal
ini. Semoga Allah SWT selalu memberikan rahmat dan hidayah-Nya atas segala
kebaikan yang telah diberikan.

Medan, Juni 2021

Penulis,

(Ervina Margaretha Zebua)

i
 DAFTAR ISI

Halaman

KATA PENGANTAR ............................................................................... i

DAFTAR ISI .............................................................................................. ii
DAFTAR GAMBAR ................................................................................. iv
DAFTAR TABEL ..................................................................................... v
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. vi

BAB I PENDAHULUAN ................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ................................................................ 1
1.2 Rumusan Masalah ........................................................... 5
1.3 Hipotesis ......................................................................... 5
1.4 Tujuan Penelitian ............................................................ 5
1.5 Manfaat Penelitian .......................................................... 6
1.6 Kerangka Konsep ............................................................ 7

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ......................................................... 8

2.1. Tanaman Bunga Telang .................................................. 8
2.1.1. Bunga Telang (Clitoria ternatea L.) ................... 8
2.1.2. Klasifikasi Bunga Telang (Clitoria ternatea L.). 9
2.1.3. Kandungan Fitokimia Bunga Telang (Clitoria
ternatea L.) ......................................................... 9
2.1.4. Morfologi Tanaman Bunga Telang (Clitoria
ternatea L.) ......................................................... 10
2.1.5. Manfaat Bunga Telang (Clitoria ternatea L.)..... 10
2.2. Ekstraksi ......................................................................... 12
2.3. Antioksidan ..................................................................... 13
2.3.1. Pengertian Antioksidan ................................................... 13
2.3.2. Manfaat Antioksidan ........................................... 15
2.3.3. Fungsi Antioksidan ............................................. 16
2.3.4. Radikal Bebas ..................................................... 17
2.3.5. Golongan Antioksidan ........................................ 18
2.4. Antosianin ........................................................... 21
2.5. Mekanisme Antioksidan ................................................. 22
2.6. Metode Pengujian Antioksidan....................................... 24
2.6.1. Metode DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl) .. 25
2.7. Spektrofotometri UV-Vis ............................................... 27
2.8. Minuman Suplemen Ekstrak Bunga Telang (Clitoria
ternatea L.) ..................................................................... 28
2.9. Bahan – Bahan Tambahan Minuman Suplemen Ekstrak
Bunga Telang (Clitoria ternatea L.) ............................... 29
2.9.1. Gula Pasir (Sukrosa) ........................................... 29
2.9.2. Limonene ............................................................ 29
2.10. Destilasi .......................................................................... 30

ii
BAB III METODE PENELITIAN ...................................................... 32
3.1 Jenis Penelitian ............................................................... 32
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian .......................................... 32
3.2.1 Lokasi .................................................................. 32
3.2.2 Waktu .................................................................. 32
3.3 Sampel Penelitian ........................................................... 32
3.4 Alat dan Bahan ............................................................... 32
3.4.1 Alat ...................................................................... 32
3.4.2 Bahan .................................................................. 33
3.5 Prosedur Kerja ................................................................ 33
3.5.1 Penyiapan Simplisia ............................................ 33
3.5.2 Pembuatan Ekstrak Bunga Telang ...................... 33
3.5.3 Penyiapan Larutan Sampel ................................. 34
3.5.4 Analisa Kuantitatif .............................................. 34
3.6. Rancangan Formulasi Minuman Suplemen Ekstrak
Bunga Telang .................................................................. 36
3.7. Pembuatan Minuman Suplemen Ekstrak Bunga Telang 36
3.8. Evaluasi Mutu Fisik Sediaan .......................................... 37
3.8.1. Uji Derajat Keasaman (pH Meter) ...................... 37
3.8.2. Uji Organoleptik ................................................. 37
3.9. Analisis Data ................................................................... 38

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................ 39

LAMPIRAN

iii
 DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1.1. Kerangka Konsep ................................................................ 7

Gambar 2.1. (a) Bunga Telang dan (b) Bagian-bagian Bunga Telang
(Dokumen Pribadi) .............................................................. 8
Gambar 2.2. Mekanisme antioksidan dalam menghambat otooksidan .... 23
Gambar 2.3. Mekanisme antioksidan dalam menghambat proses
ketengikan............................................................................ 24
Gambar 2.4. Struktur kimia 1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl ..................... 25
Gambar 2.5. Reaksi Radikal DPPH dengan Antioksidan ........................ 26

iv
 DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 2.1. Kandungan Senyawa Aktif Pada Bunga Telang (15) ............ 10
Tabel 2.2. Mekanisme Aktivitas Antioksidan (22) ................................. 15
Tabel 2.3. Antioksidan-antioksidan yang diizinkan untuk pangan (23) . 15
Tabel 2.4. Tingkat Kekuatan Antioksidan (29) ...................................... 27
Tabel 3.1. Rancangan Formulasi Minuman Suplemen Ekstrak Bunga
Telang .................................................................................... 36

v
 DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Lembar Penilaian Panelis .................................................... 42

vi
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Kesehatan merupakan masalah yang cukup serius. Pentingnya antioksidan

dalam melindungi tubuh terhadap radikal bebas. Antioksidan adalah senyawa yang

dapat mendonorkan elektron dengan molekul stabil, kepada radikal bebas yang

memiliki elektron tidak berpasangan sehingga radikal bebas menjadi stabil.

Menurut Hery Winarsi, antioksidan didefinisikan sebagai senyawa yang mampu

melindungi sel dari bahaya radikal bebas oksigen aktif. Dalam melindungi sel dari

reaksi yang disebabkan oleh radikal bebas, antioksidan berperan penting karena

antioksidan akan menangkap radikal bebas. Radikal bebas bersifat sangat reaktif

dengan molekul disekitarnya karena mengandung elektron tidak berpasangan

dalam orbitalnya (1,2).

Banyak penyakit yang disebabkan oleh radikal bebas. Reactive oxygen

species (ROS) merupakan salah satu radikal bebas. Keadaan yang tidak seimbang

antara ROS dan mekanisme pertahanan antioksidan akan menyebabkan stres

oksidatif dimana dibandingkan antioksidan, radikal bebas memiliki jumlah lebih

banyak di dalam tubuh. Aktivitas radikal bebas dapat diredam dengan

menggunakan antioksidan. Antioksidan mampu mempertahankan tubuh terhadap

kerusakan yang disebabkan oleh senyawa oksigen reaktif dan mampu mencegah

terjadinya penyakit degeneratif. Tubuh membutuhkan antioksidan eksogen bila

terkena paparan radikal bebas yang berlebih karena tubuh manusia tidak

mempunyai cadangan antioksidan dalam jumlah berlebih (2–4).

1
 2

Masyarakat lebih menyukai antioksidan dari bahan alami karena tergolong

substansi yang aman dibandingkan dengan antioksidan sintesis yang terbukti

memiliki efek samping bagi manusia. Salah satu alternatif antioksidan alami adalah

menggunakan bunga telang. Tidak hanya dimanfaatkan sebagai tanaman hias,

bunga telang juga dapat dimanfaatkan sebagai obat tradisional (4,5)

Bunga telang atau dalam bahasa latin disebut Clitoria ternatea Linn

merupakan tanaman jenis kacang-kacangan yang merambat serta tumbuh subur di

bawah sinar matahari dan mudah untuk ditanam. Bunga telang (Clitoria ternatea

L), sering disebut juga sebagai butterfly pea merupakan bunga yang khas dengan

kelopak tunggal berwarna ungu. Tanaman telang dikenal dengan tumbuhan

merambat yang sering ditemukan di pekarangan atau tepi persawahan/perkebunan.

Selain warna ungu, bunga telang juga dapat ditemui dengan warna pink, biru muda

dan putih (6,7).

Metode uji menggunakan radikal bebas DPPH merupakan metode

pengukuran antioksidan yang sering digunakan. DPPH adalah radikal bebas yang

dapat bereaksi dengan senyawa yang dapat mendonasikan atom hidrogen dan dapat

digunakan untuk pengujian aktivitas antioksidan komponen tertentu dikarenakan

adanya elektron yang tidak berpasangan. Senyawa peredam radikal bebas yang

telah bereaksi dengan DPPH akan menjadi radikal baru yang stabil atau senyawa

bukan radikal. Aktivitas antioksidan dengan pengukuran dengan metode ini

dinyatakan sebagai nilai IC50. IC50 adalah bilangan yang menunjukan konsentrasi

ekstrak (𝜇g/ml) yang mampu menghambat proses oksidasi sebesar 50%. Semakin

kecil nilai IC50 berarti semakin tinggi aktivitas antioksidan (8,9).

 3

Pada masa sekarang, telah banyak industri makanan dan minuman dalam

bentuk suplemen yang bermanfaat bagi kesehatan tubuh, namun masih sedikit

industri yang menggunakan pangan tradisional. Salah satu contoh pangan

tradisional yaitu bunga telang. Manfaat farmakologi bunga telang antara lain

sebagai antioksidan, antibakteri, antiinflamasi dan analgesik, antiparasit,

antidiabetes, antikanker, antihistamin, immunomodulator, dan potensi berperan

dalam susunan saraf pusat. Dalam penelitian ini potensi farmakologis yang akan

dibahas adalah manfaat antioksidan. Menurut penelitian yang dilakukan, bunga

telang memiliki kandungan bioaktif antara lain fenolik, flavonoid, antosianin,

flavonol glikosida, terpenoid, tanin, dan steroid. Aktivitas antioksidan memiliki

korelasi positif dengan senyawa fenolik, sehingga polifenol merupakan senyawa

yang paling berpotensi menyumbangkan aktivitas antiradikal pada bunga telang

(4,7).

Clitoria ternatea L. mengandung antioksidan yang tinggi dapat

diformulasikan menjadi minuman suplemen yang bermanfaat untuk kesehatan.

Minuman suplemen merupakan minuman yang termasuk ke dalam suplemen

makanan sebagai penambah energi, merupakan komposisi pelengkap kebutuhan zat

gizi makanan, mengandung beberapa vitamin, mineral, asam amino atau bahan lain

yang mempunyai nilai gizi dan/atau efek fisiologis dalam jumlah terkonsentrasi.

Dalam meningkatkan antioksidan dan meningkatkan kesehatan secara keseluruhan,

minuman multivitamin dari minuman herbal dapat dikonsumsi sebagai bagian dari

diet. Sebagian besar glukosa, vitamin B, vitamin C, dan zat non-gizi lainnya (seperti

stimulan dan plavour) merupakan kandungan yang terdapat dalam minuman

 4

suplemen. Salah satu kelebihan minuman suplemen sari bunga telang ini yaitu

terletak pada warnanya yang membuat minuman suplemen menjadi menarik.

Komponen utama pada bunga telang yang berperan sebagai pewarna disebabkan

oleh adanya kandungan pigmen antosianin. (8,10–12).

Antosianin memiliki fungsi fisiologis yaitu sebagai antioksidan. Antosianin

memiliki sifat mudah larut dalam air. Semakin lama perendaman dan banyak

pelarut yang digunakan, maka semakin banyak senyawa antioksidan yang tertarik

atau keluar mengingat antosianin larut dalam air (6).

Gula (sukrosa) dan limonene merupakan bahan pendukung yang digunakan

dalam pembuatan minuman suplemen sari bunga telang (Clitoria ternatea L.).

Penambahan sukrosa bertujuan agar minuman suplemen sari bunga telang dapat

meningkat cita rasanya dengan takaran yang sudah ditentukan. Penambahan

limonene pada minuman ini bertujuan untuk mengurangi bau yang tidak sedap atau

bau langu dari bunga telang. Limonene juga dapat meningkatkan cita rasa dan

aroma yang segar pada minuman. Penambahan limonene juga meningkatkan

kestabilan antosianin (13,14).

Berdasarkan uraian diatas, penelitian ini bertujuan untuk melakukan

pemanfaatan ekstrak bunga telang sebagai sumber antioksidan pada formulasi

minuman suplemen.
 5

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka rumusan masalah dalam penelitian

ini adalah sebagai berikut:

a. Bagaimana bentuk formulasi sediaan minuman suplemen ekstrak bunga

telang (Clitoria ternatea L.)?

b. Berapakah nilai IC50 yang tedapat dalam ekstrak bunga telang (Clitoria

ternatea L.)?

c. Bentuk formulasi berapa sediaan minuman suplemen ekstrak bunga telang

yang paling disukai volunter?

1.3 Hipotesis

Berdasarkan perumusan masalah di atas, maka dibuat hipotesis sebagai

berikut:

a. Bentuk formulasi sediaan minuman suplemen ekstrak bunga telang (Clitoria

ternatea L.) yaitu berbentuk larutan minuman.

b. Nilai IC50 dari ekstrak bunga telang (Clitoria ternatea L.) memiliki kisaran

kadar 80-90 ppm.

c. Bentuk formulasi yang paling disukai volunter adalah pada konsentrasi 6 %.

1.4 Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah:

a. Untuk mengetahui bentuk formulasi sediaan minuman suplemen ekstrak

bunga telang (Clitoria ternatea L.).

b. Untuk mengetahui berapa nilai IC50 dalam ekstrak bunga telang (Clitoria

ternatea L.) secara spektrofotometri UV-Vis.

 6

c. Untuk mengetahui bentuk formulasi minuman suplemen ekstrak bunga

telang yang paling disukai volunter.

1.5 Manfaat Penelitian

Manfaat penetiaan ini adalah untuk menambah informasi dan pemahaman

tentang pemanfaatan ekstrak bunga telang (Clitoria ternatea L.) yang diformulasi

menjadi sediaan minuman suplemen yang berfungsi sebagai antioksidan. Bagi

industri, sebagai bahan evaluasi dalam penggunaan ekstrak bunga telang (Clitoria

ternatea L.) untuk diformulasikan sebagai sediaan minuman suplemen.

 7

1.6 Kerangka Konsep

Variabel Bebas Variabel Terikat Parameter

Ekstrak Bunga Telang Uji aktivitas antioksidan

Nilai IC50
(Clitoria ternatea L.) ekstrak bunga telang

Formulasi minuman
suplemen ekstrak bunga
⁻ Uji organoleptis
telang
pada volunter
F1 Ekstrak =3g Uji evaluasi sediaan
(rasa, warna,
Gula =3g minuman suplemen ekstrak
aroma)
Limonene = 5 tetes bunga telang.
⁻ Derajat Keasaman
F2 Ekstrak =6g
(pH meter)
Gula = 3,5 g
Limonene = 7 tetes

Gambar 1.1. Kerangka Konsep

 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Tanaman Bunga Telang

2.1.1. Bunga Telang (Clitoria ternatea L.)

Bunga telang (Clitoria ternatea L.) sesuai dengan namanya Clitoria

ternatea berasal dari daerah Ternate, Maluku. Tanaman ini dapat tumbuh di daerah

tropis seperti di Asia sehingga penyebarannya telah sampai Amerika Selatan,

Afrika, Brazil, Pasifik Utara, dan Amerika Utara. Bunga telang juga dikenal dengan

berbagai nama seperti Butterfly Pea (Inggris), bunga teleng (Jawa), Mazerion Hidi

(Arab) (15).

Bunga telang merupakan bunga majemuk yang identik dengan warna ungu

pada kelopaknya. Bunga telang termasuk tanaman merambat yang dapat ditemukan

dipekarangan rumah, diperkebunan, maupun di pinggir sawah. Selain bunganya

yang identik dengan warna ungu, tanaman ini menghasilkan kacang yang berwarna

hijau, sehingga tergolong sebagai polong-polongan (Fabaceae). Selain bunga ungu,

bunga telang juga dapat ditemui dengan warna pink, biru muda dan putih (7,15).

(a) (b)

Gambar 2.1. (a) Bunga Telang dan (b) Bagian-bagian Bunga Telang
(Dokumen Pribadi)

8
 9

2.1.2. Klasifikasi Bunga Telang (Clitoria ternatea L.)

Klasifikasi tanaman bunga telang ialah sebagai berikut:

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Kelas : Dicotyledoneaea

Ordo : Fabales

Famili : Fabaceae

Genus : Clitoria

Spesies : Clitoria ternatea L.

2.1.3. Kandungan Fitokimia Bunga Telang (Clitoria ternatea L.)

Bunga telang memiliki kandungan fitokimia, diantaranya tanin, flobatanin,

karbohidrat, saponin, triterpenoid, fenol flavanoid, flavanol glikosida, protein,

alkaloid, antrakuinon, antosianin, stigmasit 4-ena-3,6 dion, minyak volatil dan

steroid. Komposisi asam lemak pada bunga telang yaitu asam palmitat, stearat, oleat

lonoleat, dan linolenat (16).

Warna pada bunga telang selain ungu juga berupa biru dan merah yang

disebabkan oleh adanya senyawa antosianin. Kandungan senyawa fitokimia

antosianin pada bunga telang memiliki kestabilan yang baik sehingga dapat

digunakan sebagai pewarna alami lokal pada industri pangan. Kandungan fitokimia

lain yang terdapat pada bunga telang seperti flavanoid. Kandungan flavanoid pada

bunga telang dapat berperan sebagai sumber antioksidan. Kandungan flavanoid

tersebut dapat dikembangkan pada berbagai industri pangan. Sehingga selain

meningkatkan atribut mutu terhadap warna juga dapat memberikan efek terhadap

kesehatan (15).
 10

Kandungan senyawa aktif yang terdapat pada bunga telang dapat dilihat

pada tabel berikut:

Tabel 2.1. Kandungan Senyawa Aktif Pada Bunga Telang (15)

Senyawa Mmol/mg bunga

Flavanoid 20,07 ± 0,55
Antosianin 5,40 ± 0,23
Flavonol glikosida 14,66 ± 0,33
Kaempferol glikosida 12,71 ± 0,46
Quersetin glikosida 1,92 ± 0,12
Mirisetin glikosida 0,04 ± 0,01

2.1.4. Morfologi Tanaman Bunga Telang (Clitoria ternatea L.)

Tanaman berbentuk herba memanjat, melata atau tidak beraturan dengan

rimpang berkayu. Batang berbulu atau gundul, kadang-kadang pangkalnya agak

tegak. Daun menyirip 5-7 helai, berbentuk menjorong, lonjong sampai lanset atau

hampir membundar, permukaan daun bagian atasnya gundul, sedangkan

permukaan bawahnya berbulu. Panjang daunnya berkisar 3-5 cm, lebar 2-3 cm, dan

panjang tangkai daun 5-10 cm. Bunga berwarna putih atau putih kehijauan dengan

pinggiran biru dan bagian dasar tengah berwarna kuning atau kehijauan, berbulu

tebal. Bunga telang memiliki lebar hingga 3,5 cm. Polong berbentuk memita sampai

lonjong, gundul atau dengan campuran rambut panjang dan rambut yang sangat

pendek. Biji berjumlah 8-10, menjorong, lonjong atau lonjong-mengginjal,

berwarna hijau zaitun, cokelat muda atau cokelat kemerahan tua dengan loreng

gelap atau hampir gelap. Biji bunga telang memiliki panjang 6 mm (17,18).

2.1.5. Manfaat Bunga Telang (Clitoria ternatea L.)

Selain sebagai tanaman hias, tanaman bunga telang (Clitoria ternatea L.)

memiliki manfaat farmakologis yang baik untuk kesehatan, diantaranya yaitu

 11

sebagai antioksidan, antibakteri, antiinflamasi dan analgesik, antiparasit dan

antisida, antidiabetes, antikanker, antihistamin, immunomodulator, dan potensi

berperan dalam susunan saraf pusat (16).

Manfaat lain dari bunga telang (Clitoria ternatea L.) yaitu dalam bidang

pangan, seperti pemanfaatan antosianin dari bunga telang sebagai pewarna alami

telah digunakan dalam penelitian (Hartono, 2013), antosianin yang terdapat pada

bunga telang dapat dimanfaatkan sebagai salah satu pigmen alami yaitu sebagai

pewarna alami. Misalnya dalam pembuatan es lilin dimana warna yang dihasilkan

hampir sama dengan warna dari pewarna sintetis food grade biru berlian Cl 42090,

pekat, dan tidak pudar setelah dibekukan dalam freezer (19).

Penggunaan antosianin dari bunga telang (Clitoria ternatea L.) juga sudah

digunakan pada penelitian lainnya seperti pada penelitian (Palimbong, 2020),

ekstrak antosianin dari bunga telang yang menghasilkan warna biru sampai biru

keunguan yang digunakan sebagai pewarna alami untuk produk tape ketan. Produk

pangan lainnya yang memanfaatkan antosianin bunga telang sebagai pewarna alami

yaitu pada produk permen jelly, sirup bunga telang dan pada produk-produk

tradisional seperti onde-onde, putu, dan roti berre (6).

Masyarakat Arab Saudi memanfaatkan daun, biji dan bunga telang untuk

mengobati penyakit liver atau hati. Di Madagaskar, daun telang digunakan untuk

meredakan nyeri sendi. Di Myanmar campuran jus bunga telang dan susu

digunakan untuk menyembuhkan sakit mata. Sementara itu di Indonesia, khususnya

masyarakat Betawi, bunga telang digunakan untuk membuat jernih mata bayi (3).
 12

2.2. Ekstraksi

Ekstraksi adalah merupakan salah satu teknik pemisahan kimia untuk

memisahkan atau menarik satu atau lebih komponen atau senyawa-senyawa (analit)

dari suatu sampel dengan menggunankan pelarut teretentu yang sesuai (20).

Pelarut ekstraksi umumnya dikategorikan berdasarkan polaritasnya, pelarut

polar dapat mengekstraksi analit yang bersifat polar. Bila analit yang akan

diekstraksi bersifat nonpolar, maka pelarut yang lebih sesuai bersifat nonpolar

mengikuti kaidah “like dissolved like”. Secara umum, pelarut dikategorikan

menjadi pelarut polar, semipolar, dan nonpolar (21).

a. Pelarut polar

Memiliki tingkat kepolaran yang tinggi, cocok untuk mengekstraksi senyawa-

senyawa yang polar. Pelarut polar cenderung universal digunakan karena

biasanya walaupun polar tetap dapat menyari senyawa-senyawa dengan tingkat

kepolaran lebih rendah. Contoh pelarut polar adalah air, metanol, etanol dan

asam asetat (21).

b. Pelarut semipolar

Pelarut semipolar memiliki tingkat kepolaran yang lebih rendah dibandingkan

dengan pelarut polar. Pelarut ini baik untuk mendapatkan senyawa-senyawa

semipolar. Contoh pelarut semipolar adalah aseton, etil asetat, dan kloroform

(21).

c. Pelarut nonpolar

Pelarut nonpolar baik untuk mengekstraksi senyawa-senyawa yang sama sekali

tidak larut dalam pelarut polar. Pelarut ini baik untuk mengekstraksi berbagai

jenis minyak dan lemak. Contoh pelarut nonpolar adalah heksana dan eter (21).
 13

2.3. Antioksidan

2.3.1. Pengertian Antioksidan

Secara kimia senyawa antioksidan adalah senyawa pemberi elektron

(elektron donor). Secara biologis, pengertian antioksidan adalah senyawa yang

dapat menangkal atau meredam dampak negatif oksidan. Antioksidan adalah

komponen yang dapat menghambat atau mencegah terjadinya oksidasi.

Antioksidan digunakan untuk mencegah atau menghambat terjadinya reaksi

oksidasi di dalam lemak, minyak, dan produk-produk pangan yang mengandung

lemak tinggi (9,22).

Tubuh manusia tidak mempunyai cadangan antioksidan dalam jumlah

berlebih, sehingga apabila terbentuk banyak radikal maka tubuh membutuhkan

antioksidan eksogen. Adanya kekhawatiran kemungkinan efek samping yang

belum diketahui dari antioksidan sintetik menyebabkan antioksidan alami menjadi

alternatif yang sangat dibutuhkan (22).

Senyawa fenolik mempunyai berbagai efek biologis seperti aktivitas

antioksidan melalui mekanisme sebagai pereduksi, penangkap radikal bebas,

pengkhelat logam, peredam terbentuknya singlet oksigen serta pendonor elektron.

Flavanoid merupakan salah satu dari kelompok senyawa fenolik yang ditemukan

dalam buah dan sayur. Beberapa tahun belakangan ini, telah dibuktikan bahwa

flavanoid memiliki potensi yang besar melawan penyakit yang disebabkan oleh

pengangkap radikal (22).

Antioksidan yang digunakan dalam pengolahan pangan harus memenuhi

syarat-syarat sebagai berikut: dapat larut dalam lemak; tidak memberikan bau, rasa,
 14

maupun warna pada makanan; harus efektif paling tidak satu tahun pada suhu kamar

(25-30 oC); harus stabil terhadap suhu pengolahan dan melindungi produk (carry-

through effect); harus mudah bercampur; harus efektif pada konsentrasi rendah;

ekonomis dan mudah diperoleh (22,23).

Suatu antioksidan dapat dianggap aman bila jika memenuhi dua syarat, yaitu

mempunyai LD50 tidak kurang dari 1000 mg/kg berat badan dan antioksidan harus

tidak memberikan efek yang signifikan pada pertumbuhan hewan percobaan dalam

studi jangka lama pada level 100 kali level yang akan digunakan untuk konsumsi

manusia (23).

Antioksidan merupakan senyawa yang terdapat secara alami dalam bahan

pangan. Senyawa ini berfungsi untuk melindungi bahan pangan dari kerusakan

yang disebabkan oleh terjadinya reaksi oksidasi lemak atau minyak yang sehingga

bahan pangan yang berasa dan beraroma tengik. Menurut Wildman, antioksidan

merupakan agen yang dapat membatasi efek dari reaksi oksidasi dalam tubuh.

Secara langsung efek yang diberikan oleh antioksidan dalam tubuh, yaitu dengan

mereduksi radikal bebas dalam tubuh, dan secara tidak langsung, yaitu dengan

mencegah terjaidnya pembentukan radikal. Antioksidan pertama kali digunakan

sebelum Perang Dunia II yang digunakan untuk pengawetan makanan (22).

Aktivitas antioksidan dipengaruhi oleh banyak faktor seperti kandungan

lipid, konsentrasi antioksidan, suhu, tekanan oksigen, dan komponen kimia dari

makanan secara umum seperti protein dan air. Proses penghambatan antioksidan

berbeda-beda tergantung dari struktur kimia dan variasi mekanisme. Dalam

mekanisme ini yang paling penting adalah reaksi dengan radikal bebas lipid, yang
 15

membentuk produk non-aktif. Mekanisme dari aktivitas antioksidan dapat dilihat

pada Tabel 2.2.

Tabel 2.2. Mekanisme Aktivitas Antioksidan (22)

Jenis Mekanisme Aktivitas

Contoh Antioksidan
Antioksidan Antioksidan
Hidroperoxide ⁻ Menonaktifkan radikal Senyawa Fenol
Stabeliser bebas lipid
⁻ Mencegah penguraian
hidroperoxida menjadi
radikal bebas
Sinergis ⁻ Meningkatkan aktivitas Asam sitrat dan Asam
antioksidan Askorbat
Chelators ⁻ Mengikat berat logam Asam Fosfat dan Asam Sitrat
Logam menjadi senyawa
nonaktif
Unsur ⁻ Mengurangi Protein, Asam Amino
Mengurangi Hidroperoksida
Hidroperoksida

Tabel 2.3. Antioksidan-antioksidan yang diizinkan untuk pangan (23)

Asam askorbat, garam-garam Na dan Ca nya Glisin

Ascorbyl palmitate dan stearate Guaiat gam
Anoxomir Lesitin
Butylated hydroxyanisole (BHA) Ionox-100
Butylated hydroxytolune (BHT) Polifosfat
Propil, oktil, dan dodesil
tert-Butyl hydroquinone (TBHQ)
galat
Asam sitrat, ester-ester stearil, dan isopropil Asam tartarat
Asam dipropionat, ester
Asam eritorbat dan garam Na-nya dilauril
dan distearil
Etoksiquin Tokoferol-tokoferol
Etilen diamin tetra asam asetat (EDTA),
garam Trihidroksi butirofenon
Na dan Ca-nya

2.3.2. Manfaat Antioksidan

Antioksidan penting untuk mempertahankan mutu produk pangan serta

kesehatan dan kecantikan. Pada bidang kesehatan dan kecantikan, antioksidan

 16

berfungsi untuk mencegah penyakit kanker dan tumor, penyempitan pembuluh

darah, pemuaan dini, dan lain-lain. Antioksidan juga mampu menghambat reaksi

oksidasi dengan cara mengikat radikal bebas dan molekul yang sangat reaktif

sehingga kerusakan sel dapat dicegah. Reaksi oksidasi dengan radikal bebas sering

terjadi pada molekul protein, asam nukleat, lipid dan polisakarida. (22)

Di bidang industri pangan, antioksidan dapat digunakan untuk mencegah

terjadinya proses oksidasi yang dapat menyebabkan kerusakan, seperti ketengikan,

perubahan warna dan aroma, serta kerusakan fisik lainnya. Antioksidan sangat

penting sebagai inhibitor peroksidasi lipid sehingga bisa digunakan untuk

mencegah terjadinya peroksidasi lipid pada bahan pangan. Peroksidasi lipid

merupakan reaksi kimia yang sering terjadi pada bahan pangan yang memproduksi

asam, aroma tak sedap dan toksik selama proses pengolahan dan penyimpanan

sehingga mempengaruhi mutu dan keamanan produk pangan. (22)

Resiko terkena penyakit degeneratif seperti kardiovaskuler, kanker,

aterosklerosis, osteoporosis dan penyakit degeneratif lainnya bisa diturunkan

dengan mengkonsumsi antioksidan dalam jumlah yang cukup. Konsumsi makanan

yang mengandung antioksidan dapat meningkatkan status imunologi dan

menghambat timbulnya penyakit degeneratif akibat penuaan. Kecukupan

antioksidan secara optimal dibutuhkan oleh semua kelompok usia (22).

2.3.3. Fungsi Antioksidan

Fungsi utama dari antioksidan adalah untuk memperkecil terjadinya proses

oksidasi baik dalam makanan maupun dalam tubuh. Dalam makanan, antioksidan

diharapkan dapat menghambat oksidasi dari lemak dan minyak, memperkecil

 17

terjadinya proses kerusakan dalam makanan, memperpanjang masa pemakaian

dalam industri makanan, meningkatkan stabilitas lemak yang terkandung dalam

makanan serta mencegah hilangnya kualitas sensori dan nutrisi. Peroksidasi lipid

adalah salah satu faktor yang cukup berperan dalam kerusakan selama dalam

penyimpanan dan pengolahan makanan. Selain digunakan dalam industri farmasi,

antioksidan juga digunakan secara luas dalam industri makanan, industri petroleum,

industri karet dan sebagainya. Dalam tubuh antioksidan diharapkan juga mampu

menghambat proses oksidasi. Proses oksidasi yang terjadi secara terus menerus

dapat menimbulkan berbagai penyakit degeneratif dan penuaan dini (22).

2.3.4. Radikal Bebas

Radikal bebas merupakan atom atau molekul yang mengandung elektron

yang tidak berpasangan pada orbital terluarnya, bersifat tidak stabil dan sangat

reaktif yakni cenderung bereaksi dengan molekul lainnya untuk mencapai

kestabilan. Radikal dengan kereaktifan yang tinggi ini dapat memulai sebuah reaksi

berantai dalam sekali pembentukannya sehingga menimbulkan senyawa yang tidak

normal dan memulai reaksi berantai yang dapat merusak sel-sel penting dalam

tubuh (24).

Radikal bebas didefinisikan sebagai suatu molekul, atom atau beberapa grup

atom yang mempunyai satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan pada orbital

terluarnya. Kondisi tersebut membuat radika bebas memiliki reaktivitas yang

sangat tinggi, mampu beraksi dengan protein, lipid, karbohidrat, atau asam

deoksiribonukleat (DNA) sehingga terjadi perubahan struktur dan fungsi sel (24).
 18

Radikal bebas sangat mudah menarik atau menyerang elektron

disekelilingnya sehingga dapat mengubah molekul menjadi radikal dan

menyebabkan radikal bebas berantai. Reaksi ini dapat berakhir jika ada molekul

yang memberikan elektron yang dibutuhkan oleh radikal bebas tersebut atau dua

buah gugus radikal bebas yang membentuk ikatan non-radikal (24). Akibat

terbentuknya radikal bebas adalah sebagai berikut: (25)

1. Reaksi rantai akan dimulai, dimana radikal bebas yang lain juga akan dibentuk.

Peristiwa akhir yang umum terjadi adalah kerusakan asam lemak tidak jenuh

yang merupakan komponen utama membran sel.

2. Radikal bebas akan dicari oleh antiksidan endogen atau eksogen, misalnya

senyawa sulfidril, seperti sistein.

3. Radikal superoksida akan dibuat tidak aktif oleh enzim yang mengandung

tembaga, superoksid dismutase, yang menghasilkan hidrogen peroksida,

kemudian akan disingkirkan oleh katalase dan terbentuk air.

Pada proses oksidasi biologis yang terjadi pada sel (jaringan) tubuh manusia

yang normal, dapat terbentuk oksigen reaktif (oksidan). Oksidan, disebut juga

radikal bebas, pada proses oksidasi (metabolisme sel) terutama dihasilkan dari

proses yang dilakukan oleh enzim oksidase yaitu hidrogen peroksida (H2O2), ion

superoksida (O2), radikal peroksil (OOH), radikal peroksil (OH) dan oksigen singlet

(26).

2.3.5. Golongan Antioksidan

Secara alami sistem antioksidan tubuh sebagai mekanisme perlindungan

terhadap serangan radikal bebas, telah ada didalam tubuh. Ada dua macam
 19

antioksidan, yaitu antioksidan endogen dan eksogen. Antioksidan endogen

merupakan antioksidan yang diproduksi oleh tubuh sendiri. Secara alami tubuh

mampu menghasilkan antioksidan sendiri, akan tetapi kemampuan ini ada batasnya.

Antioksidan eksogen merupakan antioksidan yang diproduksi diluar tubuh. (22)

Ada beberapa pengelompokan antioksidan, yaitu:

a. Antioksidan enzimatis dan non enzimatis (22)

(1) Antioksidan enzimatis misalnya enzim superoksida dismutase (SOD),

katalase dan glutation peroksidase.

(2) Antioksidan non enzimatis dibagi menjadi dua kelompok, yaitu:

a) Antioksidan larut lemak, seperti tokoferol, karatenoid, flavanoid,

quinon, dan bilirubin.

b) Antioksidan larut air, seperti asam askorbat, protein pengikat logam.

b. Berdasarkan fungsinya, dibagi menjadi antioksidan primer, sekunder dan

tersier (22)

(1) Antioksidan primer, adalah antioksidan yang sifatnya sebagai pemutus

reaksi berantai (chain-breaking antioxidant) yang bisa bereaksi dengan

radikal-radikal lipid dan mengubahnya menjadi produk-produk yang lebih

stabil. Contoh antioksidan primer adalah superoksida dismutase (SOD),

Glutation Peroksidase (GPx), katalase dan protein pengikat logam.

Superoksida Dismutase (SOD) GPx disebut juga dengan antioksidan

enzimatis yaitu antioksidan endogenus yang melindungi jaringan dari

kerusakan oksidatif yang disebabkan oleh radikal bebas oksigen seperti

 20

anion superoksida (O2), radikal hidroksil (OH) dan hidrogen peroksida (H-

2O2).

(2) Antioksidan sekunder, merupakan antioksidan yang bekerja dengan cara

mengkhelat logam yang bertindak sebagai pro-oksidan, menangkap

radikal dan mencegah terjadinya reaksi berantai. Antioksidan sekunder

berperan sebagai pengikat ion-ion logam, penangkap oksigen, pengurai

hidroperoksida menjadi senyawa non radikal, penyerap radiasi UV atau

deaktivasi singlet oksigen. Contoh antioksidan sekunder yaitu vitamin E,

vitamin C, β-caroten, isoflavon, bilirubin dan albumin.

(3) Antioksidan tersier, merupakan antioksidan yang bekerja memperbaiki

kerusakan biomolekul yang disebabkan radikal bebas. Contoh antioksidan

tersier yaitu enzim-enzim yang memperbaiki DNA dan metionin sulfida

reduktase.

c. Berdasarkan sumbernya, antioksidan dibagi menjadi dua, yaitu antioksidan

sintetik dan antioksidan alami.

(1) Antioksidan alami dapat dikategorikan menjadi dua golongan yakni

golongan zat gizi dan non gizi. Fungsi antioksidan alami adalah sebagai

senyawa pereduksi, penangkap radikal bebas, pengompleks logam

peroksidan, dan quencher dari bentuk singlet oksigen. Beberapa contoh

antioksidan alami yang tergolong zat gizi adalah vitamin A dan karotenoid,

vitamin E, vitamin C, vitamin B2, seng (Zn), tembaga (Cu), Selenium (Se),

dan protein. Antioksidan alami yang termasuk nongizi adalah biogenik

amin, senyawa fenol (seperti tirosol, hidroksitirosol, vanilin, asam vanilat,

 21

timol, karvakrol, gingerol, zingeron), senyawa polifenol (seperti flavanoid,

flavon, flavonol, heterosida flavonoat, kalkon, auron), bioflavanoid

(seperti asam galat, asam elegat, protoantosianin), dan komponen

tetrapirolik (seperti klorofil dan feofitin) (9).

(2) Antioksidan sintetik yang lebih populer digunakan adalah senyawa fenolik

seperti butylated hydroxyanisol (BHA), terbutilasi hidroksi-toluena

(BHT), butylhydroquinone tersier (TBHQ) dan ester dari asam galat,

misalnya gallate propil (PG). Antioksidan sintetik utama yang digunakan

mempunyai batas pengunaan yaitu 0,02 % dari kandungan lemak atau

minyak. (22)

2.4. Antosianin

Antosianin adalah kelompok besar pigmen tanaman yang berwarna merah-

biru. Antosianin terdapat pada semua tumbuhan tingkat tinggi, terutama di bunga

dan buah-buahan, tetapi juga di daun, batang dan akar. Dalam bagian ini, mereka

ditemukan terutama di lapisan luar sel. Warna antosianin tergantung pada struktur

dan juga pada keasaman buah. Lebih dari 500 antosianin yang berbeda telah

diisolasi dari tanaman. Mereka semua didasarkan pada struktur inti tunggal dasar,

ion flavyllium. (27)

Antosianin merupakan salah satu dari kelompok pigmen utama pada

tanaman. Pigmen ini berada pada sebagian besar tanaman tingkat tinggi dan

terdapat pada seluruh bagian tanaman. Pigmen antosianin sebagian besar terdapat

pada tanaman yang berbunga dan menghasilkan warna dari merah tua sampai biru

pada bunga, buah dan daun (27).

 22

Menurut Talavera (dalam Fanany 2020:12), “Antosianin memiliki struktur

cincin aromatik yang berisi komponen polar dan residu glikosil sehingga

menghasilkan molekul polar. Antosianin akan lebih mudah terlarut dalam air

dibandingkan dengan pelarut non-polar, karena air memiliki sifat polar. Antosianin

stabil pada suhu 50˚C, memiliki berat molekul 207,08 gram/mol, rumus molekul

C15H11O, rentan terhadap cahaya dan terdegradasi pada suhu diatas 70˚C” (28).

Antosianin memiliki fungsi fisiologis yaitu sebagai antioksidan,

perlindungan terhadap sel-sel hati. Antosianin bermanfaat bagi kesehatan tubuh

karena dapat berfungsi sebagai antioksidan, antihipertensi, dan pencegah gangguan

fungsi hati, jantung koroner, kanker, dan penyakit-penyakit degeneratif, seperti

arteosklerosis. Antosianin juga mampu menghalangi laju perusakan sel radikal

bebas akibat nikotin, polusi udara, dan bahan kimia lainnya.

2.5. Mekanisme Antioksidan

Antioksidan tubuh mempunyai mekanisme tertentu dalam aktivitasnya.

Konsumsi antioksidan yang cukup dapat menekan aktivitas oksidasi. Senyawa

flavanoid diketahui banyak terdapat dalam sayuran dan buah-buahan, serta lebih

berpotensi sebagai antioksidan dibandingan vitamin C dan E. Antioksidan dapat

menghentikan proses perusakan sel dengan cara memberikan elektron kepada

radikal bebas. Antioksidan akan menetralisir radikal bebas sehingga tidak

mempunyai kemampuan lagi mencuri elektron dari sel dan DNA.

Mekanisme antioksidan dalam menghambat oksidasi atau menghentikan

reaksi berantai pada radikal bebas dari lemak yang teroksidasi, dapat disebabkan

oleh 4 (empat) macam mekanisme reaksi, yaitu:

 23

a. Pelepasan hidrogen dari antioksidan.

b. Pelepasan elektron dari antioksidan.

c. Adisi asam lemak ke cincin aromatik pada antioksidan.

d. Pembentuk senyawa kompleks antara lemak dan cincin aromatik dari

antioksidan.

Prinsip kerja dari pada antioksidan dalam menghambat otooksidan pada

lemak yaitu sebagai berikut: oksigen bebas di udara akan mengoksidasi ikatan

rangkap pada asam lemak yang tidak jenuh. Kemudian radikal bebas yang terbentuk

akan beraksi dengan oksigen sehingga akan menghasilkan peroksida aktif.

Gambar 2.2. Mekanisme antioksidan dalam menghambat otooksidan

Apabila dalam suatu asam lemak yang terdapat dalam minyak tidak

mengandung antioksidan, maka peroksida aktif akan bereaksi dengan ikatan

rangkap lemak. Apabila ditambah suatu antioksidan, maka peroksida aktif akan

bereaksi dengan antioksidan tersebut. Sehingga pembentukan radikal bebas dapat

dihentikan dengan penambahan suatu antioksidan.

Menurut Pokorny (1971), mekanisme kerja antioksidan dalam menghambat

proses ketengikan adalah sebagai berikut:

 24

Gambar 2.3. Mekanisme antioksidan dalam menghambat proses ketengikan

Reaksi (1) sampai (3) menunjukan perubahan prinsip yang terjadi selama

reaksi oksidasi. Radikal bebas yang terbentuk dari asam lemak tidak jenuh sebagai

akibat pengaruh panas, cahaya, dan logam berat (1). Radikal bebas bereaksi dengan

oksigen membentuk radikal peroksida (2). Radikal peroksida mengikat semua atom

hidrogen dari molekul asam lemak membentuk radikal asam lemak yang baru dan

hidroperoksida (3). Zat antioksidan bereaksi dengan radikal asam lemak dan radikal

peroksida (4) dan (5). Radikal bebas menjadi kurang aktif dan radikal antioksidan

yang terbentuk tidak mampu melanjutkan rantai oksidasi lebih lanjut (22).

2.6. Metode Pengujian Antioksidan

Metode pengujian aktivitas antioksidan dikelompokkan menjadi 3

golangan. Golongan pertama adalah Hydrogen Atom Transfer Methods (HAD),

misalnya Oxygen Radical Absorbance Capacity Method (ORAC) dan Lipid

Peroxidation Inhibiton Capacity Assay (LPIC). Golongan kedua adalah Electron

Transfer methods (ET), misalnya Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP) dan

1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil (DPPH) dan Free Radical Scavenging Assay.

Golongan ketiga adalah metode lain seperti Total Oxidant Scavenging Capacity

(TOSC) dan Chemiliminescence (22).

 25

Salah satu metode yang paling umum digunakan untuk menguji aktivitas

antikoksidan adalah dengan menggunakan radikal bebas DPPH. Pengukuran

antioksidan dengan metode DPPH adalah metode pengukuran antioksidan yang

sederhana, cepat dan tidak membutuhkan banyak reagen seperti halnya metode lain.

2.6.1. Metode DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl)

Metode DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl) merupakan salah satu uji

untuk menentukan aktivitas antioksidan penangkap radikal. Radikal DPPH adalah

suatu senyawa organik yang mengandung nitrogen tidak stabil dengan absorbansi

kuat pada λmaks 517 nm dan berwarna ungu gelap. Setelah bereaksi dengan senyawa

antioksidan, DPPH tersebut akan tereduksi dan warnanya akan berubah menjadi

kuning. Perubahan tersebut dapat diukur dengan spektrofotometer, dan diplotkan

terhadap konsentrasi. Penurunan intensitas warna yang terjadi disebabkan oleh

berkurangnya ikatan rangkap terkonjugasi pada DPPH. Hal ini dapat terjadi apabila

adanya penangkapan satu elektron oleh zat antioksidan, menyebabkan tidak adanya

kesempatan elektron tersebut untuk beresonansi (22,24).

Gambar 2.4. Struktur kimia 1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl

 26

Gambar 2.5. Reaksi Radikal DPPH dengan Antioksidan

Peredaman warna DPPH terjadi disebabkan oleh adanya senyawa yang bisa

memberikan radikal hidrogen kepada radikal DPPH sehingga tereduksi menjadi

DPPH-H (1,1-difenil-2-pikrihidrazin).

Aktivitas antioksidan dinyatakan dalam persen inhibisi. Besarnya daya

antioksidan dihitung dengan rumus:

Absorban blanko − absorban sampel

% Inhibisi = × 100%
Absorban blanko
Hasil persen (%) inhibisi (penghambatan) tersebut disubstitusikan dalam

persamaan linear. Hasil dari substitusi persen (%) inhibisi tersebut kemudian

diinterpretasikan sebagai IC50. IC50 didefinisikan sebagai jumlah antioksidan yang

diperlukan untuk menurunkan konsentrasi awal DPPH sebesar 50% (24).

Nilai IC50 diperoleh dengan menghitung konsentrasi larutan uji yang bisa

menghasilkan hambatan radikal bebas (% inhibisi) sebesar 50 berdasarkan

persamaan garis regresi linear korelasi I dengan K menggunakan rumus:

𝑦 = 𝑎𝑥 + 𝑏
dengan harga y = 50 dan x = konsentrasi larutan uji (K), maka:

50 − 𝑏
𝑥=
𝑎
Keterangan: a = intercept (perpotongan garis di sumbu y); b = slope (kemiringan)
 27

Data yang diperoleh dari alat spektrofotometer UV-Vis berupa absorbansi

DPPH kontrol dan DPPH setelah direaksikan dengan larutan uji sampel dan

pembanding pada berbagai konsentrasi, digunakan untuk menghitung % inhibisi.

% inhibisi digunakan untuk memperoleh IC50. IC50 adalah bilangan yang

menunjukan konsentrasi ekstrak (µg/ml) yang mampu menghambat proses oksidasi

sebesar 50%. Semakin kecil nilai IC50 berarti semakin tinggi aktivitas antioksidan

(9,24). Tingkat kekuatan antioksidan dengan metode DPPH dapat dilihat pada

Tabel 2.4.

Tabel 2.4. Tingkat Kekuatan Antioksidan (29)

Intensitas Antioksidan Nilai IC50

Sangat Kuat <50
Kuat 50 - 100
Sedang 100 -150
Lemah 151 - 200

2.7. Spektrofotometri UV-Vis

Spektrofotometri UV-Vis adalah pengukuran panjang gelombang dan

intensitas sinar ultraviolet dan cahaya tampak yang diabsorbsi oleh sampel. Sinar

ultraviolet dan cahaya tampak memiliki energi yang cukup untuk mempromosikan

elektron pada kulit terluar ke tingkat energi yang lebih tinggi. Sinar ultraviolet

berada pada panjang gelombang 200-400 nm sedangkan sinar tampak berada pada

panjang gelombang 400-800 nm. Spektrofotometri UV-Vis biasanya digunakan

untuk molekul dan ion anorganik atau kompleks di dalam larutan. Spektrofotometri

UV-Vis melibatkan energi elektronik yang cukup besar pada molekul yang

dianalisis, sehingga spektrofotometri UV-Vis lebih banyak dipakai untuk analisis

kuantitatif ketimbang kualitatif. Spektrofotometri terdiri atas spektrometer dan

 28

fotometer. Spektrofotometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang

gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang

ditransmiskan atau yang diabsorbsi (30,31).

Sumber sinar untuk pengukuran UV digunakan lampu hidrogen atau

deudeterium dan lampu tungsen atau sering disebut lampu wolfram untuk

pengukuran cahaya tampak. Monokromator pada spektrometer UV-Vis digunakan

lensa prima dan filter optik. Sel sampel berupa kuvet yang terbuat dari kuarsa atau

gelas dengan lebar yang bervariasi. Detektor berupa detector foto atau deterctor

panas atau detector dioda foto, berfungsi menangkap cahaya yang diteruskan dari

sampel dan mengubahnya menjadi arus listrik. Konsentrasi dari analit di dalam

larutan bisa ditentukan dengan mengukur absorban pada panjang gelombang

tertentu dengan menggunakan hukum Lambert-Beer (30,31).

Hukum Lambert-Beer (Beer’s Law) adalah hubungan linearitas antara

absorban dengan kosentrasi larutan analit. Biasanya hukum Lambert-Beer ditulis

dengan:

A = E.b.C

A = Absorban (serapan)

E = Koefisien ekstingsi molar (ml g-1 cm-1)

B = Tebal kuvet (cm)

C = Konsentrasi (gram/100 ml) (30).

2.8. Minuman Suplemen Ekstrak Bunga Telang (Clitoria ternatea L.)

Minuman suplemen merupakan minuman penambah energi yang termasuk

ke dalam kategori suplemen makanan, merupakan produk pelengkap kebutuhan zat

 29

gizi makanan, mengandung satu atau lebih bahan berupa vitamin, mineral, asam

amino atau bahan lain yang mempunyai nilai gizi dan/atau efek fisiologis dalam

jumlah terkonsentrasi (8).

Minuman suplemen ekstrak bunga telang dapat digunakan sebagai minuman

sumber antioksidan yang membantu tubuh menghadapi keadaan stres oksidatif

yang berpotensi menyebabkan terjadinya berbagai penyakit degeneratif (12).

2.9. Bahan – Bahan Tambahan Minuman Suplemen Ekstrak Bunga Telang

(Clitoria ternatea L.)

2.9.1. Gula Pasir (Sukrosa)

Sukrosa adalah suatu karbohidrat (gula). Bubuk kristal berwarna putih, tidak

berbau, dengan rasa manis, terkenal karena perannya dalam makanan. Gula pasir

(sukrosa) secara kimia disusun oleh glukosa dan fruktosa. Tingkat kemanisan

sukrosa adalah 100%, dijadikan standar untuk membandingkan tingkat kemanisan

gula yang lain. Gula dapat dibuat dari tebu dan air nira (32).

Kelarutan gula dalam air meningkat dengan meningkatnya suhu. Kelarutan

yang relatif tinggi ini merupakan parameter penting untuk efek bulkingnya di

banyak makanan dan minuman. Gula terlarut meningkatkan viskositas larutan atau

campuran berbahan dasar air, menghasilkan rasa di mulut yang lebih baik. Secara

kandungan gizi, gula pasir memiliki kandungan energi paling tinggi dibandingkan

gula kelapa, gula aren dan madu. Ini sejalan dengan tingginya kadar karbohidrat

dari gula pasir dibanding gula yang lainnya (32).

2.9.2. Limonene

Limonene merupakan cairan bening sampai kuning muda pada suhu ruang

dengan bau jeruk yang kuat. Limonene pada umumnya ditemui pada beberapa jenis
 30

buah, utamanya adalah jeruk. Limonene pada umumnya digunakan sebagai pelarut

pada industri, perasa dan wangi-wangian pada makanan. Limonen juga berfungsi

untuk aditif bahan makanan, kosmetik, bahan tambahan perasa dan aroma

tambahan (14).

Limonene didapatkan dengan mengekstrak minyak jeruk dari buah dan kulit

jeruk. Minyak jeruk ini kemudian didestilasi untuk mendapatkan limonene.

Limonene adalah senyawa yang tahan terhadap hidrolisis, akan tetapi limonene

dapat mengalami proses biodegredasi pada kondisi aerob. Limonene memiliki dua

isomer opstis yaitu d-limonene dan l-limonene serta campuran dipentene (33).

2.10. Destilasi

Destilasi adalah salah satu metode pemisahan suatu senyawa dari

campurannya yang didasarkan pada perbedaan titik didih dari campuran senyawa

tersebut. Perbedaan titik didih senyawa tersebut merupakan titik didih dari masing-

masing senyawa yang akan dipisahkan. Titik didih pada proses destilasi berkisar

antara 40 ˚C sampai 150 ˚C. Prinsip metode destilasi didasarkan pada perbedaan

titik didih antara senyawa yang diinginkan dengan campuran senyawa (sampel),

dimana senyawa yang mempunyai titik didih terendah akan teruapkan terlebih

dahulu. Kemudian uap akan masuk ke dalam kondensor (pendingin balik) sehingga

terjadi proses kondensasi dimana terjadi perubahan wujud uap menjadi cair. Hasil

dari destilasi disebut sebagai destilat. Ada berbagai jenis destilasi yaitu destilasi

sederhana, destilasi bertingkat, destilasi uap, destilasi vakum, destilasi destruktif

dan destilasi azetrop. Pada penelitian ini, penulis akan menggunakan destilasi uap

(34).
 31

Destilasi uap merupakan pemisahan/destilasi dengan menggunakan

temperatur titik didih 200 ˚C atau lebih. Bahan/senyawa yang dapat digunakan pada

destilasi ini adalah campuran senyawa dimana pada berbagai temperatur bersifat

tidak larut dalam air, akan tetapi campuran tersebut dapat didestilasi dengan air.

Prinsip destilasi ini adalah mengalirkan uap air ke dalam campuran senyawa,

dimana pada temperatur yang lebih rendah dibandingkan dengan pemanasan

langsung maka senyawa yang dapat menguap akan berubah menjadi uap. Destilasi

ini dapat diaplikasikan pada beberapa bahan alam, seperti destilasi minyak

limonene dari lemon. Prosedur awal adalah melakukan persiapan sampel yaitu

mengecilkan ukuran kulit jeruk lemon. Ditimbang 10 gram, lalu dimasukkan ke

dalam labu alas bulat 250 ml. Labu diisi dengan aquades hingga setengah volume

total labu, ditambahkan batu didih. Dipasang kembali labu pada alat destilasi.

Dipanaskan labu pada mantel pemanas secara perlahan-lahan. Dinyalakan pompa

air untuk pendingin pada kondensor. Dibiarkan destilat beberapa saat hingga

diperoleh minyak atsiri limonene (34,35)

 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Jenis Penelitian

Penelitian ini menggunakan metode penelitian eksperimental yaitu

membuat sediaan minuman suplemen dan pengujian kadar antioksidan dari sari

bunga telang (Clitoria ternatea L.).

3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian

3.2.1 Lokasi

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakognosi dan Laboratorium

Spektrofotometri Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Helvetia Medan.

3.2.2 Waktu

Penelitian ini dilakukan pada Juli - Oktober 2021.

3.3 Sampel Penelitian

Pengambilan sampel dalam penelitian ini dilakukan secara purposive

sampling yaitu tanpa membandingkan dengan tanaman di daerah lain. Sampel yang

digunakan pada penelitian ini adalah bunga telang (Clitoria ternatea L.) dengan

warna bunga biru, yang diperoleh dari Kecamatan Sunggal, Kabupaten Deli

Serdang.

3.4 Alat dan Bahan

3.4.1 Alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain glass jar, botol,

batang pengaduk, kertas perkamen, kertas saring, aluminium foil, lemari pengering,

32
 33

wadah, timbangan analitik, spektrofotometer UV-Vis, pH meter, alat-alat gelas,

destilasi uap dan vacuum rotary evaporator.

3.4.2 Bahan

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain air demineral,

bunga telang (Clitoria ternatea L.), gula pasir (food grade), limonene, air suling

(akuades), etanol 96%, dan vitamin C.

3.5 Prosedur Kerja

3.5.1 Penyiapan Simplisia

Tahap awal yaitu pengumpulan bahan baku bunga telang, kemudian

dilakukan sortasi basah terhadap kotoran dan bahan-bahan asing. Bunga telang

yang sudah disortasi basah kemudian dicuci bersih dengan air mengalir, lalu

ditiriskan. Dilakukan perubahan bentuk bunga telang dengan cara perajangan.

Kemudian simplisa dikeringkan dalam lemari pengering dengan suhu 50 ˚C.

Simplisia yang sudah kering disortasi kembali terhadap kotoran-kotoran yang

tertinggal pada saat sortasi basah. Kemudian simplisia disimpan pada wadah yang

tertutup (36,37).

3.5.2 Pembuatan Ekstrak Bunga Telang

Bunga telang kering ditimbang 50 gram, setelah itu direndam dengan air

suling sebanyak 500 ml dengan rasio perbandingan sampel dan pelarut 1:10 selama

24 jam pada suhu ruangan (25˚C). Filtrat hasil ekstraksi dikumpulkan dan

dipekatkan dengan vacuum rotary evaporator pada suhu 40˚C sampai didapatkan

ekstrak kental (6).

 34

3.5.3 Penyiapan Larutan Sampel

a. Pembuatan Larutan Stok Ekstrak Bunga Telang

Dibuat larutan stok ekstrak bunga telang dengan konsentrasi 1000 ppm

dengan menimbang 100 mg ekstrak bunga telang dan dimasukan ke dalam

labu ukur 100 ml kemudian dilarutkan dengan etanol 96% sampai tanda

batas, dikocok hingga homogen (38).

b. Pembuatan Sampel Uji

Pembuatan larutan ekstrak bunga telang konsentrasi 40, 50, 60, 70, dan 80

ppm. Dari larutan stok ekstrak bunga telang dipipet sebanyak 0,4 ml, 0,5

ml, 0,6 ml, 0,7 ml, 0,8 ml masing-masing dimasukan dalam labu ukur 10

ml, ditambahkan etanol 96% sampai tanda batas, kemudian dikocok sampai

homogen (38).

c. Pembuatan Larutan Baku Induk DPPH konsentrasi 100 ppm

Ditimbang 10 mg serbuk DPPH, kemudian dimasukan ke dalam labu ukur

100 ml, ditambahkan etanol 96% sampai tanda batas, dikocok hingga

homogen (38).

d. Pembuatan Larutan Baku Kerja DPPH konsentrasi 40 ppm

Dari larutan baku induk DPPH 100 ppm dipipet sebanyak 40 ml, kemudian

dimasukan dalam labu ukur 100 ml dan ditambahkan etanol 96% sampai

tanda batas, dikocok hingga homogen (38).

3.5.4 Analisa Kuantitatif

a. Penentuan Panjang Gelombang DPPH 40 ppm Maksimum

Dipipet larutan baku DPPH 40 ppm sebanyak 4 ml, kemudian dimasukkan

ke dalam kuvet dan diukur dengan spektofotometer UV-Vis, lalu dicatat

 35

absorbansinya pada panjang gelombang yang diperoleh pada pencarian

panjang gelombang maksimum (38).

b. Pengukuran Absorbansi Larutan Blanko

Dipipet 1 ml larutan DPPH 40 ppm ke dalam labu ukur 5 ml, kemudian

dilarutkan dengan etanol 96% sampai tanda batas, dihomogenkan dan

didiamkan selama 30 menit kemudian diukur absorbansinya pada panjang

gelombang (λ) max yang didapat pada pengukuran absorbansi max (39).

c. Pengukuran Absorbansi Vitamin C

Ditimbang vitamin C sebanyak 10 mg, kemudian dilarutkan di labu ukur 10

ml dan ditambahkan etanol 96% sampai tanda batas (larutan stok) sehingga

konsentrasi yang diperoleh yaitu 1000 ppm. Dilakukan pengenceran

bertingkat dengan vitamin C masing-masing 0,4 ml, 0,5 ml, 0,6 ml, 0,7 ml,

0,8 ml dari larutan stok vitamin C dan dilarutkan dalam labu ukur 5 ml dan

ditambahkan etanol 96% sampai tanda batas. Kemudian ditiap konsentrasi

diambil 1 ml dan ditambahkan 2 ml larutan DPPH 40 ppm. Selanjutnya

dihomogenkan dan didiamkan selama 30 menit, kemudian diukur

absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada

panjang gelombang (λ) maksimum 517 nm. Pengukuran pada setiap

konsentrasi dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan (39).

d. Pengukuran Absorbansi DPPH

Dipipet sebanyak 2 ml larutan DPPH 40 ml, dimasukkan ke dalam labu

ukur, ditambahkan 2 ml etanol 96%, dikocok dan didiamkan selama 30

menit, selanjutnya dimasukkan ke dalam kuvet. Diamati dengan

 36

spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang (λ) max yang didapat

pada pengukuran absorbansi max (38).

e. Pengukuran Aktivitas Peredaman Radikal Bebas DPPH dengan

Spektrofotometer UV-Vis

Larutan sampel uji dengan konsentrasi 40, 50, 60, 70, dan 80 ppm masing-

masing dipipet sebanyak 2 ml, kemudian dimasukan pada masing-masing

tabung reaksi, ditambah larutan baku kerja DPPH 40 ppm sebanyak 2 ml ke

dalam masing-masing tabung reaksi, kemudian semua larutan dalam tabung

reaksi dikocok hingga homogen dan didiamkan selama 30 menit. Setelah itu

diukur serapannya dengan spektrofotometer UV-Vis. Pengukuran aktivitas

peredaman radikal bebas dilakukan 3 kali pengulangan (39).

3.6. Rancangan Formulasi Minuman Suplemen Ekstrak Bunga Telang

Rancangan formulasi pembuatan minuman suplemen ekstrak bunga telang

yaitu sebagai berikut:

Tabel 3.1. Rancangan Formulasi Minuman Suplemen Ekstrak Bunga Telang

Ekstrak Bunga Telang Gula Pasir

Formula Limonene
(g) (g)
1 3 3 5 tetes
2 6 3,5 7 tetes

3.7. Pembuatan Minuman Suplemen Ekstrak Bunga Telang

Formula 1:

Dicampurkan ekstrak bunga telang 3 gram ditambahkan hingga 100 ml

dengan air demineral. Tambahkan gula pasir sebanyak 3 gram dan 5 tetes
 37

limonene, aduk hingga homogen. Kemudian letakan pada wadah gelas yang

tertutup.

Formula 2:

Dicampurkan ekstrak bunga telang 6 gram ditambahkan hingga 100 ml

dengan air demineral. Tambahkan gula pasir sebanyak 3,5 gram dan 7 tetes

limonene, aduk hingga homogen. Kemudian letakan pada wadah gelas yang

tertutup (13).

3.8. Evaluasi Mutu Fisik Sediaan

3.8.1. Uji Derajat Keasaman (pH Meter)

Uji pH dari suatu produk pangan merupakan salah satu faktor penting yang

menentukan tingkat ketahanan terhadap pertumbuhan mikroorganisme pembusuk

selama pengolahan, distribusi dan penyimpanan. Standar pH yang dianjurkan untuk

produk minuman adalah 7 (netral) (40,41).

3.8.2. Uji Organoleptik

Pengujian dilakukan dengan metode uji hedonik untuk mengetahui tingkat

penerimaan panelis terhadap produk. Pengujian ini menggunakan 15 panelis

mahasiswa Fakultas Farmasi dan Kesehatan Umum Institut Kesehatan Helvetia

Medan. Pengujian organoleptik menggunakan panca indra untuk mendeskripsikan

bentuk, warna, rasa dan bau dari minuman suplemen sari bunga telang.

Pengambilan kesimpulan pada pengujian hedonik dapat dilihat dari tingkat

kesukaan volunter terhadap parameter yang diuji (42).

 38

3.9. Analisis Data

Dari hasil absorbansi yang diperoleh dari masing-masing konsentrasi,

selanjutnya digunakan untuk menghitung nilai persentase inhibisi dengan rumus:

absorbansi blanko − absorbansi sampel uji

% Inhibisi = × 100%
absorbansi blanko

Berdasarkan nilai persentase peredaman pada masing-masing konsentrasi,

selanjutnya dibuat kurva regresi, sehingga didapatkan persamaan y = bx + a dimana

konsentrasi (ppm) sebagai absis (sumbu x) dan nilai persentase inhibisi sebagai

ordinatnya (sumbu y) (38).

Kemudian dilakukan perhitungan nilai IC50 (inhibitory concentration) yaitu

konsentrasi sampel yang memiliki penghambatan absorbansi sebesar 50%.

Berdasarkan persamaan regresi linear akan diperoleh nilai IC50, dimana semakin

rendah nilai IC50 menunjukan aktivitas antioksidan yang semakin tinggi. Penentuan

nilai IC50 dilakukan menggunakan rumus:

50 − b
IC50 =
a

Keterangan: a = intercept (perpotongan garis di sumbu y); b = slope (kemiringan)

Dari hasil pengukuran aktivitas antioksidan sampel uji dan baku

pembanding dikatakan sangat kuat apabila memiliki nilai IC50 kurang dari 50, kuat

apabila nilai IC50 berada pada kisaran 50 sampai 100, sedang apabila nilai IC50

berada pada kisaran 100 sampai 150, dan lemah apabila nilai IC50 berada pada

kisaran 151 sampai 200.

 DAFTAR PUSTAKA

1. Winarsi H. Antioksidan Daun Kapulaga. Yogyakarta: Graha Ilmu; 2014. 26

p.
2. Mareta CA. Efektifitas Pegagan (Centella asiatica) Sebagai Antioksidan.
2020. 2020;2:390–394.
3. Marpaung AM, Information A. Tinjauan manfaat bunga telang ( clitoria
ternatea l.) bagi kesehatan manusia. 2020;1(2):47–69.
4. Megawati A, Palupi DA, Hastuti ED, Pujiastuti E, Sugiarti L, Widjojo P, et
al. Cendekia Journal Of Pharmacy. 2018;2(1):32–38.
5. Choiriyah NA. Kandungan Antioksidan pada Berbagai Bunga Edible di
Indonesia. 2017;136–143.
6. Palimbong S, Pariama AS. Potensi Ekstrak Bunga Telang (Clitoria Ternatea
L.) Sebagai Pewarna Pada Produk Tape Ketan. 2(3):228–235.
7. Budiasih KS. Kajian Potensi Farmakologis Bunga Telang (Clitoria ternatea).
2017;(4):201–206.
8. Tukiran, Miranti MG, Dianawati I, Sabila F. Aktivitas Antioksidan Ekstrak
Daun Kelor (Moringa oleifera Lam. ) Dan Buah Bit (Beta vulgaris L.)
Sebagai Bahan Tambahan Minuman Suplemen Tukiran. 2020;5(2):113–119.
9. Yasni S. Teknologi Pengolahan dan Pemanfaatan Produk Ekstraktif Rempah
[Internet]. PT Penerbit IPB Press; 2013. 97–106 p.
10. Sumartini, Ikrawan Y, Muntaha FM. Analisis Bunga Telang ( Clitoria
ternatea ) Dengan Variasi Ph Metode Liquid Chromatograph-Tandem Mass
Spectrometry ( LC-MS / MS ) Abstrak. 2020;7(2):70–77.
11. dr. Adji Suranto SA. Khasiat & Manfaat Madu Herbal [Internet].
AgroMedia; 2004. 30 p.
12. Marpaung AM. Menakar Potensi Bunga Telang Sebagai Minuman
Fungsional. FoodReview Indones. 2020;15(2):1–6.
13. Alfitra P, Setiawan B, Damanik MR. Formulasi Minuman Suplemen Daun
Torbangun ( Coleus amboinicus Lour .) Untuk Wanita Yang Menderita PMS
( Premenstrual Syndrome ). 2010;5(2):95–102.
14. Cahyati S, Kurniasih Y, Khery Y. Efisiensi Isolasi Minyak Atsiri Dari Kulit
Jeruk Dengan Metode Destilasi Air-Uap Ditinjau Dari Perbandingan Bahan
Baku Dan Pelarut Yang Digunakan. Hydrog J Kependidikan Kim.
2016;4(2):103–108.
15. Angriani L. Potensi Ekstrak Bunga Telang (Clitoria ternatea) Sebagai
Pewarna Alami Lokal Pada Berbagai Industri Pangan. 2019;2(1):32–37.
16. Pratiwi ER, Rahmandani SOA, Ibrahim AR, Isbandiyah. Potensi Ekstrak
Bunga Telang ( Clitoria ternatea ) Sebagai Pencegah Acute Kidney Injury (
AKI ). 2020;1(2):92–100.
17. Ir. R. Syamsul Hidayat MS, Rodame M. Napitupulu SPMM. Kitab
Tumbuhan Obat [Internet]. AgriFlo; 2015. 209 p.
18. Ong HC. Tanaman hiasan: khasiat makanan & ubatan [Internet]. Utusan
Publications & Distributors; 2006. 106–107 p. (Siri terapi alami).

39
 40

19. Hartono MA, Purwijantiningsih E, Pranata S. Pemanfaatan Ekstrak Bunga

Telang (Clitoria ternatea L.) sebagai Pewarna Alami Es Lilin Utilization of
Extract Butterfly Pea Flowers (Clitoria ternatea L.) As Natural Colorant of
Ice Lolly. J Biol. 2012;1–15.
20. Leba MAU. Buku Ajar: Ekstraksi dan Real Kromatografi [Internet].
Deepublish; 2017. 1 p.
21. Prof. Dr. Ir. Latifah K Darusman MSDIB, Sari AM. Domestikasi Buah
Merah [Internet]. PT Penerbit IPB Press; 2019. 20 p.
22. Sayuti K, Yenrina R. Antioksidan Alami dan Sintetik. Padang: Andalas
University Press; 2015. 7–76 p.
23. Santoso U. Antioksidan Pangan [Internet]. UGM PRESS; 2021. 1–11 p.
24. Erlindawati, Safrida, Mukhlis. Potensi Antioksidan Sebagai Antidiabetes
[Internet]. Syiah Kuala University Press; 2018. 8–19 p.
25. Underwood JC. Patologi Umum dan Sistematik [Internet]. Sarjadi, editor.
Penerbit Buku Kedokteran Indonesia; 1999. 119 p.
26. Yuslianti ER. Pengantar Radikal Bebas dan Antioksidan [Internet].
Deepublish; 2018. 2–11 p.
27. Nugraheni M. Pewarna Alami; Sumber dan Aplikasinya pada Makanan &
Kesehatan. Yogyakarta: Graha Ilmu; 2014. 57 p.
28. Fanany MR. Ekstraksi Antosianin Dari Bunga Telang (Clitoria Ternatea)
Dengan Metode Maserasi. 2020;12.
29. Saputra SH. Mikroemulsi Ekstrak Bawang Tiwai Sebagai Pembawa Zat
Warna, Antioksidan Dan Antimikroba Pangan [Internet]. Deepublish; 2020.
38 p.
30. Dachriyanus. Analisis Struktur Senyawa Organik Secara Spektroskopi.
2004. 1–8 p.
31. apt. Fajrin Noviyanto MS. Penetapan Kadar Ketoprofen dengan Metode
Spektrofotometri UV-Vis [Internet]. Media Sains Indonesia; 2020. 5–8 p.
32. Rahmi Y, Kusuma TS. Ilmu Bahan Makanan [Internet]. Universitas
Brawijaya Press; 2020. 243 p.
33. Yuliana M, Natan FA. Pra Rencana Pabrik Limonene Oksida Dari Bahan
Baku Kulit Jeruk Keprok Kapasitas: 889,4 Ton Per Tahun. 2008;6–7.
34. Anindi Lupita Nasyanka AMF, Janatun Na’imah MSRAAMFK, Riskha
Aulia Apt. MFK. Pengantar Fitokimia: D3 Farmasi 2020 [Internet]. Penerbit
Qiara Media; 2020. 55–60 p.
35. Suprianto, Afriadi, Purnomo DS. Modul Praktikum Kimia Organik. 2017;15.
36. Ikhlas N. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Herba Kemangi ( Ocimum
americanum Linn) dengan Metode DPPH (2,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil).
2013;22.
37. Martini NKA, Ekawati IGA, Ina PT. Pengaruh Suhu Dan Lama Pengeringan
Terhadap Karakteristik Teh Bunga Telang ( Clitoria ternatea L .).
2020;9(September):327–340.
38. Cahyaningsih E, Sandhi PE, Santoso P. Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas
Antioksidan Ekstrak Etanol Bunga Telang (Clitoria ternatea L.) Dengan
Metode Spektrofotometri UV-VIS. 2019;5(1):51–57.
 41

39. Moilati VO, Yamlean PV., Rundengan G. Formulasi Sediaan Krim Ekstrak
Etanol Daun Bayam Merah (Amaranthus tricolor L.) Dan Uji Aktivitas
Antioksidan Menggunakan Metode DPPH (1.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl).
2020;9:372–380.
40. Batubara siti C, Pratiwi NA. Pengembangan Minuman Berbasis Teh Dan
Rempah Sebagai Minuman Fungsional. 2018;1(2):109–123.
41. Mutiarahma S, Pramono YB, Nurwantoro. Evaluasi Kadar Gula, Kadar Air,
Kadar Asam dan pH pada Pembuatan Tablet Effervescent Buah Nangka. J
Teknol Pangan [Internet]. 2019;3(1):36–41.
42. Hutahean E, Abadi H. Formulasi Pulvis Effervescent Serbuk Sari Daun
Pucuk Merah ( Syzygium myrtifolium Walp .) Dengan Penambahan Pemanis
Stevia Sebagai Minuman Kesehatan. 2020;4.
 42

Lampiran 1. Lembar Penilaian Panelis

Tingkat Kesukaan
Aspek
Formulasi Sangat Tidak Keterangan
Penilaian Suka
Suka Suka
Rasa
Formula I Warna
Aroma
Rasa
Formula II Warna
Aroma