USULAN PENELITIAN

VARIASI FORMULASI HANDBODY LOTION

EKSTRAK KULIT JERUK NIPIS (Citrus aurantifolia)
SEBAGAI ANTIOKSIDAN

Diajukan

Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Penulisan Skripsi

Pada Fakultas Kedokteran Universitas Malahayati

Oleh

Meyriska Wahidah Putri

16380047

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS MALAHAYATI
BANDAR LAMPUNG
2020
 LEMBAR PERSETUJUAN

Proposal penelitian skripsi dengan judul:

VARIASI FORMULASI HANDBODY LOTION EKSTRAK KULIT

JERUK NIPIS (Citrus aurantifolia) SEBAGAI ANTIOKSIDAN

Nama : Meyriska Wahidah Putri

Npm : 16380047

Telah diperiksa dan disetujui oleh pembimbing untuk ujian proposal penelitian*/
melaksanakan penelitian*/ ujian hasil penelitian

Ditetapkan di : Bandar Lampung

Tanggal : 05 Februari 2020

Pembimbing I Pembimbing II

Ade Maria Ulfa, M.kes., Apt Angga Saputra Yasir, M.Si., Apt

ii
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan Rahmat dan

Karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan judul

“VARIASI FORMULASI HANDBODY LOTION EKSTRAK KULIT

JERUK NIPIS (Citrus aurantifolia) SEBAGAI ANTIOKSIDAN”. Skripsi ini

ditulis sebagai salah satu syarat meraih gelar Sarjana Farmasi.

Maka dari itu penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada semua

pihak terkait yang telah mengajarkan hal, dorongan, motivasi dan membantu

penulisan dalam menyelesaikan skripsi ini, kepada :

1. Bapak dr. Achmad Farid, MM. selaku rektor Universitas Malahayati.

2. Bapak dr. Toni Prasetya, Sp.PD, selaku Dekan Fakultas Kedokteran

Universitas Malahayati.

3. Ibu Ade Maria Ulfa, M.Kes.,Apt. selaku Ketua Program Studi Farmasi.

4. Ibu Ade Maria Ulfa, M.Kes.,Apt. selaku Pembimbing I yang telah

memberikan bimbingan, saran kritikan, pengarahan dan motivasinya.

5. Bapak Angga Saputra Yasir, M.Si.,Apt. selaku Pembimbing II yang telah

memberikan bimbingan, saran kritikan, pengarahan dan motivasinya.

6. Ibu Dewi Chusniasih, M.Sc. selaku penguji yang telah memberikan saran

kritikan, pengarahan dan motivasinya.

7. Seluruh Dosen dan Staf Laboratorium Prodi Farmasi yang telah

memberikan ilmu pengetahuan dan motivasi selama perkuliahan hingga

terselesainya skripsi ini.

8. Kedua orang tua dan keluarga tersayang yang telah memberikan dukungan

moral dan material selama ini.

iii
9. Teman-teman satu angakatan yang telah memberikan dukungan, motivasi,

dan semangat selama ini sehingga dapat bersama-sama menyelesaikan

skripsi yang dapat bermanfaat bagi seluruh pembaca.

Penulis menyadari bahwa karya tulis ini masih banyak memiliki banyak

kekurangan, maka dari itu penulis sangat berharap kritik dan saran dari semua

pihak untuk penyempurnaan karya tulis ini. Akhir kata penulis sangat berharap

karya tulis ini dapat bermanfaat bagi pembaca dan semua pihak.

Bandar Lampung, Januari 2020

Meyriska Wahidah Putri

iv
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL............................................................................................i

LEMBAR PERSETUJUAN...............................................................................ii

KATA PENGANTAR.........................................................................................iii

DAFTAR ISI .......................................................................................................v

DAFTAR GAMBAR ..........................................................................................vii

DAFTAR TABEL................................................................................................viii

BAB I PENDAHULUAN..................................................................................1

1.1 Latar Belakang.................................................................................1

1.2 Rumusan Masalah............................................................................3

1.3 Tujuan Penelitian.............................................................................3

1.4 Manfaat Penelitian............................................................................4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA........................................................................5

2.1 Landasan Teori.................................................................................5

2.1.1 Tanaman Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia)............................5

2.1.2 Kulit........................................................................................10

2.1.3 Ekstraksi ................................................................................14

2.1.4 Antioksidan ............................................................................16

2.1.5 Handbody Lotion ...................................................................17

2.1.6 Uji Stabilitas Sediaan .............................................................22

2.1.7 Uji Aktivitas Antioksidan ......................................................22

2.1.8 Spektrofotometri UV-Vis ......................................................24

2.1.9 Vitamin C ...............................................................................25

v
 2.2 Hipotesis ..........................................................................................26

2.3 Kerangka Pikir ................................................................................27

BAB III METODOLOGI PENELITIAN..........................................................28

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian..........................................................28

3.2 Alat dan Bahan.................................................................................28

3.2.1 Alat.........................................................................................28

3.2.2 Bahan......................................................................................28

3.3 Subjek Penelitian .............................................................................28

3.3.1 Determinasi Tanaman ............................................................28

3.3.2 Populasi ..................................................................................29

3.3.3 Sampel ...................................................................................29

3.4 Definisi Operasional.........................................................................30

3.5 Prosedur Kerja..................................................................................31

3.5.1 Pengolahan Bahan Baku ........................................................31

3.5.2 Pembuatan Ekstrak Kulit Jeruk Nipis ....................................31

3.5.3 Penetapan Kadar Flavonoid ...................................................32

3.5.4 Pembuatan Losion Ekstrak Kulit Jeruk Nipis.........................33

3.5.5 Evaluasi Kestabilan ................................................................34

3.5.6 Uji Aktivitas Antioksidan ......................................................36

3.6 Analisis Data....................................................................................38

DAFTAR PUSTAKA..........................................................................................39

vi
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Tanaman Jeruk Nipis....................................................................5

Gambar 2.2 Struktur Kimia Flavonoid ............................................................9

Gambar 2.3 Struktur Kimia Saponin ...............................................................9

Gambar 2.4 Struktur Kimia Alkaloid ..............................................................10

Gambar 2.5 Struktur Kulit................................................................................10

Gambar 2.6 Reaksi DPPH dan Antioksidan ....................................................23

Gambar 2.8 Struktur Vitamin C .......................................................................25

Gambar 2.10 Skema Kerangka Pikir Penelitian...............................................27

DAFTAR TABEL

vii
Tabel 3.1 Definisi Operasional.........................................................................30

Tabel 3.2 Formulasi Losion Ekstrak Kulit Jeruk Nipis....................................33

Tabel 3.3. Penilaian Reaksi Pada Kulit ...........................................................36

Tabel 3.4. Tingkat Kekuatan Antioksidan........................................................38

viii
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Diabetes melitus (DM) merupakan suatu kelompok penyakit metabolik

dengan karakteristik hiperglikemia yang terjadi karena kelainan sekresi insulin,

kerja insulin, atau keduanya (American Diabetes Association (ADA, 2017).

Kurangnya insulin dan ketidakmampuan sel untuk merespon insulin menyebabkan

tingginya kadar glukosa darah atau hiperglikemia (International Diabetes

Federation (IDF,2017).

Jumlah penderita diabetes melitus (DM) di dunia sekitar 425 juta orang dan

diperkirakan akan meningkat 48% menjadi 629 juta pada tahun 2045

(International Diabetes Federation (IDF,2017). Berdasarkan hasil riset di

Indonesia tahun 2013 terdapat 6,9 % penderita diabetes melitus (DM) dan

mengalami peningkatan menjadi 8,5 % pada tahun 2018 (Riskesdas, 2018).

Diabetes melitus tipe 1 merupakan diabetes yang disebabkan oleh reaksi

autoimun dimana sistem kekebalan tubuh menyerang sel β penghasil insulin pada

kelenjar pankreas. Penderita diabetes tipe 1 membutuhkan suntikan insulin setiap

hari untuk mempertahankan kadar glukosa dalam kisaran yang tepat dan tanpa

insulin tidak akan bisa bertahan (International Diabetes Federation (IDF, 2017).

Salah satu yang menimbulkan permasalahan pada penderita diabetes adalah

adanya luka pada kaki. Luka yang timbul pada kaki dapat mengakibatkan

amputasi hingga kematian jika tidak dilakukan pencegahan sejak penderita

terdiagnosa diabetes melitus. Prevalensi luka kaki diabetik di Amerika (1,0%-

4,1%), Kenya (4,6%), Nigeria (19,1%), dan Iran (20%) (Desalu et al, 2011). Luka

1
 2

disebabkan dari polineuropati simetrisklinis dengan munculnya penurunan sensasi

tekanan pada kulit, getaran, dan hilangnya reflex lutut, hal ini merupakan

penyebab utama munculnya luka dengan prevalensi 75%-90% pada penderita DM

(Stephen and William, 2011).Terdapat 1785 penderita DM di Indonesia yang

mengalami komplikasi neuropati (63,5%), retinopati (42%), nefropati (7,3%),

makrovaskuler (16%), mikrovaskuler (6%), luka kaki diabetik (15%) (Purwanti,

2013).

Jeruk nipis termasuk suku Rutaceae. Jeruk nipis mempunyai banyak

manfaat dalam kehidupan manusia sebagai bahan minuman danobat tradisional.

Air perasan buah jeruk nipis dapat menyembuhkan penyakit batuk. Selain buah,

kulit buah jeruk nipis jugamempunyai kegunaan karena dalam kulit buah jeruk

nipis tersebut mengandung minyak atsiri dan flavonoid (Guenther, 1987).

Menurut Nogata (2006), terdapat 8 kandungan flavanones dan 9

flavone/flavanols pada kulit jeruk nipis, diantaranya hesperidin, naringin, dan

polymethoxylated flavones (PMFs). Kandungan flavonoid dalam kulit jeruk nipis

antara lain, seperti eriocitrin, nairutin, hesperidin, neohesperidin, neoponcirin,

poncirin, isorhoifolin, diosmin, neodiosmin, sinensetin, nobiletin, tangeretin, dan

heptamethoxyflavone (Lizzo et al., 2012). Senyawa yang terkandung dalam kulit

jeruk tersebut mampu bekerja sebagai zat anti inflamasi, anti bakteri, anti

mikroba, anti virus, anti ulserogenik, anti oksidan, anti kanker, menurunkan kadar

kolesterol, anti neoplastik, antitumor, anti platelet, anti hepatotoksik, serta anti

hipertensi (Rathee et al., 2009).

Senyawa yang terkandung di dalam kulit jeruk nipis seperti alkaloid,

saponin, dan flavonoid merupakan senyawa aktif yang dapat digunakan sebagai
 3

penyembuh luka (Pratiwi et al., 2013). Menurut Ahmad et al., 2013), kulit jeruk

nipis yang mengandung banyak flavonoid dapat digunakan sebagai terapi anti

inflamasi, anti jamur, antibakteri, antiadibetics, dan penyembuhan luka.

Berdasarkan penelitian Rositasari (2019), ekstrak kulit jeruk nipis (Citrus

aurantifolia) yang memiliki kandungan flavonoid, saponin dan alkaloid

mempunyai efektivitas dalam penyembuhan luka sayat stadium II pada tikus galur

wistar dengan diameter luka akhir di hari ke -7.

Salep merupakan sediaan setengah padat ditujukan untuk pemakaian topikal

pada kulit atau selaput lendir. Basis salep hidrokarbon atau salep berlemak

merupakan salep dengan tipe A/M (air dalam minyak). Basis salep hidrokarbon

memiliki sifat emollient (melunakkan lapisan kulit) karena dapat meninggalkan

lapisan dipermukaan kulit. Penggunaan basis salep hidrokarbon untuk

penyembuhan luka dapat meningkatkan hidratasi kulit yang menghambat

penguapan air pada lapisan kulit. Sehingga dapat memperpanjang kontak antara

bahan obat dengan kulit yang akan meningkatkan aktivitas obat (Dirjen POM,

1995). Menurut penelitian Raharjo (2010),tentang efektivitas salep esktrak kulit

buah jeruk nipis dengan konsentrasi 20% menggunakan basis salep hidrokarbon

paling baik digunakan sebagai penyembuhan luka pada tikus jantan dengan

presentase penyembuhan luka akhir sebesar 98,17 %.

Pada penelitian ini menggunakan tikus putih dengan jenis galurwistarjantan.

Penggunaan tikus galur wistar karena jinak dan sering digunakan dalam

penelitian. Pemilihan tikus jantankarenamemilikimetabolisme yang

lebihstabildibandingkantikusbetina (Primadiamanti, 2018).

 4

Berdasarkan uraian diatas, peneliti tertarik untuk melakukan penelitian

mengenai efektivitas ekstrak kulit jeruk nipis (Citrus aurantifolia) dalam bentuk

sediaan salep sebagai penyembuh luka diabetes tipe 1. Hasil dari penelitian ini

diharapkan dengan ekstrak kulit jeruk nipis (Citrus aurantifolia) dalam

bentuksediaan salep dapat memberikan hasil berupa penyembuhan luka diabetes

melitus tipe 1 yang lebih cepat dan menjadi alternatif pengobatan dimasyarakat.

1.2. Rumusan Masalah

Apakah salep ekstrak kulit jeruk nipis (Citrus aurantifolia) dapat

menyembuhkan luka diabetes melitus tipe 1?

1.3. Tujuan Penelitian

Tujuan pada penelitian ini adalah untuk melihat apakah salep dari ekstrak

kulit jeruk nipis (Citrus aurantifolia) efektif untuk menyembuhan luka diabetes

melitus tipe 1.

1.4. Manfaat Penelitian

1. Memberikan informasi kepada pembaca tentang kulit jeruk nipis (Citrus

aurantifolia) sebagai penyembuh luka diabetes melitus tipe 1.

2. Memberikan pengetahuan kepada masyarakat tentang manfaat dari kulit

jeruk nipis (Citrus aurantifolia) yang dapat digunakan sebagai penyembuh

luka diabetes melitus tipe 1.

 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Landasan Teori

2.1.1. TanamanJerukNipis (Citrus aurantifolia)

Jeruk nipis merupakan tanaman yang berasal dari Asia Tenggara, termasuk

bagian barat dan timur laut India, utara Burma, barat daya Cina, dan kearah timur

melewati kepulauan Malay. Jeruk nipis kemungkinan berasal dari persilangan

intergenerik dari tiga spesies hybrid yang berbeda dan setidaknya dari dua genus

yang berbeda (Crane, 2010). Di Indonesia, jeruk nipis mempunyai nama daerah

yang berbeda-beda, antara lain kalangsa (Aceh), limau kapeh (Sumatra Barat),

jeruk pecel (Jawa), jeruk durga (Madura), lemo (Bali), lemo kadasa (Makasar). Di

Eropa dan Amerika jeruk nipis dikenal dengan nama lime, sour lime, ataupun

common lime (Dalimarta, S. 2007).

Gambar2.1, Jeruk Nipis (AprindaPuji, 2016)

5
 6

Klasifikasi tanaman jeruk nipis (Djoenaidi, 2017), sebagai berikut:

Regnum : Plantae

Devisi : Spermatophyta

Sub Divisi : Angiospermae

Class : Dicotyledonae

Subclass : Dialypetalae

Ordo : Rutales

Family : Rutacea

Genus : Citrus

Spesies : Citrus aurantifoliaSwingle

Menurut Crane (2010), jeruk nipis memiliki pohon berukuran kecil,

bersemak belukar, dan jarang mencapai tinggi lebih dari 4,1 m. Pohon jeruk nipis

memiliki dahan yang ramping dan berduri. Daunnya berukuran kecil, berwarna

hijau dengan ujung tumpul. Bunganya berbau harum, berukuran kecil dan

berkelopak putih, memiliki putik yang besar dan sembilan serbuk sari. Tanaman

ini berbunga sepanjang tahun. Tanaman jeruk nipis akan mulai berbuah setelah

2,5 tahun. Buah jeruk nipis berbentuk bulat, berwarna hijau atau kuning dengan

diameter 3-6 cm memiliki daging buah yang tipis dan mengandung cairan yang

berasa asam (Dewi, 2012).

Ada 3 bagian yang terdapat dalam buah jeruk nipis, yaitu exocarp,

mesocarp, dan endocarp. Exocarp merupakan lapisan yang membentuk kulit

terluar buah dan banyak mengandung kelenjar minyak serta pigmen. Lapisan ini

disebut juga dengan flavedo yang terdiri dari bahan selulosik dan terdapat

komponen lain seperti minyak esensial, parafin waxes, steroid, triterpenoid, asam
 7

lemak, pigmen (klorofil, flavonoid, karotenoid), limonen dan enzim. Mesocarp

atau albedo merupakan lapisan berbentuk seperti spons putih yang lunak.

Limonoid yang terkandung di dalam mesocarp memberikan rasa pahit. Lapisan

endocarp yaitu lapisan yang langsung membungkus biji buah, memiliki rmembran

dan bagian utama untuk dikonsumsi (Codner-Franch dan Valls-Belles, 2010).

2.1.2. Kandungan dan Manfaat Kulit Jeruk Nipis

Jeruk nipis mengandung banyak flavonoid, seperti hisperidin, narigin, dan

polumethoxylated flavones (Nogata et al., 2006). Menurut Lizzo et al.,(2012),

kandungan flavonoid yang terdapat pada kulit jeruk nipis, antara lain eriocitrin,

nairutin, hisperidin, neohespeiridin, neoponcirin, poncirin, isorhoirfolin, diosmin,

neodiosmin, sinensetin, nobiletin, dan heptamethoxyflavone. Kandungan lain

yang terdapat di dalam kulit jeruk nipis yaitu apegenin, rutin, quercetin, dan

kaempferol.

Buah jeruk nipis memiliki kandungan mineral, vitamin (vitamin A, C dan

folat), senyawa fitokimia seperti terpene, senyawa fenolik (flavonoid), dan

senyawa lain (lignin, fenilpropanoid, asam p-coumaric dan phytoestrogen. Kulit

jeruk nipis merupakan bagian yang paling banyak mengandung senyawa fenolik,

seperti flavonoid dan asam fenolat. Flavonoid yang terkandung di dalam kulit

jeruk nipis lebih besar dibandingkan dengan biji jeruk nipis (Codner-Franch dan

Valls-Belles, 2010).

Kulit jeruk nipis dapat dimanfaat sebagai obat tradisonal untuk penurunan

berat badan, perawatan kulit, pencernaan yang baik, bantuan dari sembelit,

perawatan mata, dan pengobatan penyakit kudis, tumpukan, tukak lambung,

gangguan pernapasan, asam urat, gusi, gangguan kemih (Mohanapriya, 2013).

 8

Kulit buah jeruk nipis dapat diambil minyak atsiri yang digunakan sebagai

alternatif pengobatan dan di bidang industri makanan, minuman, sabun, kosmetik

dan parfum menggunakan sedikit minyak atsiri ini sebagai pengharum dan juga

dapat digunakan sebagai antirematik, antiseptik, antiracun,astringent, antibakteri,

diuretik, antipiretik, antihipertensi, antijamur,insektisida, tonik, antivirus,

ekspektoran (Agusta, 2000).Kajian Ibnu Sina dalam kitab Al-Qanum Fi Al-Tib

menyatakan bahwa perasan kulit jeruk nipis dapat digunakan sebagai pembalut

luka (Dewi, 2012).

Senyawa aktif flavonoid, alkaloid dan saponin berperan dalam proses

penyembuhan luka. Flavonoid mempunyai aktivitas antioksidan untuk membantu

mengurangi jumlah peroksidasi lipid yang terkonsentrasi pada area luka terbuka

karena terkena paparan dunia luar. Alkaloid yang terdapat pada kulit jeruk nipis

berperan dalam proses penguatan fibril kolagen yang terbentuk dengan mencegah

kerusakan sel melalui sintesis DNA sehingga pertumbuhan jaringan baru padaluka

menjadi lebih cepat, padat, dan kuat (Cahyani, 2018).

1. Flavonoid

Flavonoid merupakan salah satu kelompok senyawa metabolit sekunder

yang paling banyak ditemukan di dalam jaringan tanaman. Flavonoid terdiri atas

satu cincin aromatik A, satu cincin aromatik B, dan cincin tengah berupa

heterosiklik yang mengandung oksigen dan bentuk teroksidasi cincin ini dijadikan

dasar pembagian flavonoid ke dalam sub-sub kelompoknya. Flavonoid termasuk

dalam golongan senyawa phenolik denganstruktur kimia C 6-C3-C6. Kandungan

dan aktivitas antioksidatif flavonoid sebagai salah satu kelompok antioksidan

alami yang terdapat pada sereal, sayur-sayuran dan buah, telah banyak
 9

dipublikasikan. Flavonoid berperan sebagaiantioksidan dengan caramendonasikan

atom hidrogennya atau melalui kemampuannya mengkelat logam, berada dalam

bentuk glukosida (mengandung rantai samping glukosa) atau dalam bentuk bebas

yang disebut aglikon (Redha, 2013).

2. Alkaloid

Alkaloid merupakan suatu golongan senyawa organik yang terbanyak

ditemukan di alam. Hampir seluruh alkaloid berasal dari tumbuh-tumbuhan dan

tersebar luas dalam berbagai jenis tumbuhan tingkat tinggi. Sebagian besar

alkaloid terdapat pada tumbuhan dikotil sedangkan untuk tumbuhan monokotil

dan pteridofita mengandung alkaloid dengan kadar yang sedikit. Alkaloid bersifat

basa atau alkali yang disebabkan karena adanya atom N (Nitrogen) dalam molekul

senyawa tersebut dalam struktur lingkar heterosiklik atau aromatis, dan dalam

dosis kecil dapat memberikan efek farmakologis pada manusia dan hewan

(Asriadi, 2017)

3. Saponin

Saponin merupakan senyawa glikosida steroid atau triterpen ditemukan

dalam berbagai tanaman.Saponin yang terkandung dalam tanaman telah lama

digunakan untuk pengobatan tradisional. Saponin memiliki berbagai kelompok

glikosil yang terikat pada posisi C3, tetapi beberapa saponin memiliki dua

rantaigula yang menempel pada posisi C3 dan C17, struktur tersebut

menyebabkan saponin bersifat seperti sabun atau deterjen sehingga saponin

disebut sebagai surfaktan alami.Saponin memiliki berbagai macam sifat biologis

seperti kemampuan hemolitik,aktivitas antibakterial, antimolluska, aktivitas

 10

antivirus,efek hipokolesterolemia, aktivitas sitotoksik atau anti kanker dan

antiprotozoa (Yanuartono, 2017)

2.2. Ekstrasi

Ekstraksi merupakan suatu proses pemisahan senyawa dari campurannya

dengan menggunakan pelarut yang sesuai.Setelah proses ekstraksi, pelarut

dipisahkan dari sampel dengan penyaringan (Mukhriani, 2014).

Ekstraksi merupakan kegiatan penarikan kandungan kimia yang terdapat

pada simplisa. Ragam ekstraksi yang tepat sudah tentu bergantung pada tekstur

dan kandungan air bahan tumbuhan yang diekstraksi dan pada jenis senyawa yang

diisolasi. Ekstrak adalah sedian kental yang di peroleh dengan mengekstraksi

senyawa aktif dari simplisa nabati atau simplisa hewani menggunakan pelarut

yang sesuai. Tahap proses ekstraksi dapat dilakukan mulai dari pembuatan

serbuk, pembasahan, penyariran, dan pemekatan (Depkes RI Dirjen POM, 2000).

2.2.1. Metode Ekstraksi

Menurut Ditjen POM (2000), metode ekstraksi dapat dilakukan dengan

beberapa cara:

1. Cara Dingin

a. Maserasi

Maserasi adalah proses penyarian simplisia menggunakan pelarut dengan

perendaman dan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada

temperatur ruangan (kamar).Proses ini berulang sehingga terjadi

keseimbangan konsentrasi antara larutan didalam dan diluar sel. Cairan

penyari yang digunakan dapat berupa air, etanol, metanol, etanol-air atau
 11

pelarut lainnya. Keuntungan cara penyarian dengan maserasi adalah cara

pengerjaan dan peralatan yang digunakan sederhana yang mudah

diusahakan (Ditjen POM, 2000)

b. Perkolasi

Perkolasi merupakan cara penyarian yang dilakukan dengan mengalirkan

cairan penyari melalui serbuk simplisia yang telah dibasahi. Tahapan

perkolasi terdiri dari pengembang bahan, tahap maserasi antara, tahap

perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak), terus menerus

sampaidiperoleh ekstrak (perkolat) (Ditjen POM, 2000).

2. Cara Panas

a. Sokletasi

Sokletasi merupakan proses yang dilakukan dengan meletakkan serbuk

sampel dalam sarung selulosa yang ditempatkan di atas labu dan di bawah

kondensor. Keuntungan metode ini adalah proses ektraksi yang kontinyu,

sampel terekstraksi oleh pelarut murni hasil kondensasi sehingga tidak

membutuhkan banyak pelarut dan tidak memakan banyak waktu

(Mukhriani, 2012).

b. Refluks

Menurut Ditjen POM (2000), refluks adalah proses ekstraksi dengan

menggunakan pelarut sesuai dengan temperatur tititk didihnya, selama

waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan

adanya pendingin balik.

Sampel pada metode refluks dimasukkan bersama pelarut ke dalam labu

yang dihubungkan dengan kondensor. Pelarut dipanaskan hingga mencapai

 12

titik didih. Uap terkondensasi dan kembali ke dalam labu (Mukhriani,

2012).

c. Digesti

Digesti adalah metode ekstraksi dengan pemanasan lemah yaitu pada suhu

400-500C. Cara ini hanya dapat digunakan untuk simplisia yang zat aktifnya

tahan terhadap pemanasan. Dengan pemanasan diperoleh keuntungan antara

lain Kekentalan pelarut berkurang yang dapat mengakibatkan berkurangnya

lapisan-lapisan batas (Saridewi, 2011)

d. Dekok

Dekok merupakan ekstrasi menggunakan pelarut air dengan temperatur 900-

1000 C selama 30 menit (Ditjen POM, 2000).

2.3. Salep

Menurut FI. IV, salep adalah sediaan setengah padat ditujukan untuk

pemakaian topikal pada kulit atau selaput lendir. Salep tidak boleh berbau

tengik.Menurut Formularium Nasional salepadalah sedian berupa masa lembek,

mudah dioleskan, umumnya lembek dan mengandung obat,digunakan sebagai

obat luar untuk melindungi atau melemaskan kulit, tidak berbau tengik. Saleptidak

boleh berbau tengik. Kecuali dinyatakan lain kadar bahan obat dalam salep

yangmengandung obat keras atau narkotik adalah 10 % ( Anief, 2005).

Salep terdiri dari bahan obat atau zat aktif dan basis salep atau biasa dikenal

dengan sebutan zat pembawa bahan aktif. Salep memiliki fungsi sebagai bahan

pembawa zat aktif untuk mengobati penyakit pada kulit, sebagai pelumas pada

kulit dan sebagai pelindung kulit(Anief, 2007).

 13

Menurut FI. IV, dasar salep yang digunakan sebagai pembawa dibagi dalam

4 kelompok, yaitu dasar salep senyawa hidrokarbon, dasar salep serap, dasar salep

yang dapat dicuci dengan air, dasar salep larut dalam air. Setiap salep obat

menggunakan salah satu dasar salep tersebut.

Dasar salep hidrokarbon dikenal sebagai dasar salep berlemak antara lain

vaselin putih dan salep putih. Hanya sejumlah kecil komponen berair dapat

dicampurkan kedalamnya. Salep ini dimaksudkan untuk memperpanjang kontak

bahan obat dengan kulit dan bertindak sebagai pembalut penutup. Dasar

salephidrokarbon digunakan terutama sebagai emolien, dan sukar dicuci. Tidak

mengering dan tidak tampak berubah dalam waktu lama. Contoh dasar salep

hidrokarbon yaitu vaseline putih, vaseline kuning, dan parafin cair (Dirjen POM,

1995).

Dasar salep serap dapat dibagi menjadi dua kelompok. Kelompok pertama

terdiri atas dasar salep yang dapat bercampur dengan air membentuk emulsi air

dalam minyak (Parrafin hidrofilik dan Lanolin anhidrat), dan kelompok kedua

terdiri atas emulsi air dalam minyak yang dapat bercampur dengan

sejumlahlarutan air tambahan (Lanolin). Dasar salep serap juga bermanfaat

sebagai emolien. Contoh dasar salep serap antara lain adeps lanae, unguentum

simpleks (cera flava : oleum sesami) (Dirjen POM, 1995).

Dasar salep yang dapat dicuci dengan air adalah emulsi minyak dalam air

antara lain salep hidrofilik dan lebih tepat disebut “Krim”. Dasar ini

dinyatakanjuga dapat dicuci dengan air karena mudah dicuci dari kulit dan dilap

basah, sehingga lebih dapat diterima untuk dasar kosmetik. Beberapa bahan obat
 14

dapatmenjadi lebih efektif menggunakan dasar salep ini daripada dasar salep

hidrokarbon. Keuntungan lain dari dasar salep ini adalah dapat diencerkan dengan

air dan mudah menyerap cairan yang terjadi pada kelainan termatologik (Dirjen

POM, 1995).

Dasar salep larut dalam air merupakan kelompok yang sering juga disebut

sebagai dasar salep tak berlemak dan terdiri dari konstituen larut air. Dasar

salepjenis ini memberikan banyak keuntungan seperti dasar salep yang dapat

dicuci dengan air dan tidak mengandung bahan tak larut dalam air seperti parafin,

lanolinanhidrat atau malam. Dasar salep ini lebih tepat disebut “gel”. Poly ethylen

glycol (PEG), campuran PEG, tragacanth, gummi arabicum merupakan bahan

yang termasuk ke dalam dasar salep larut air (Dirjen POM,1995).

Pemilihan dasar salep tergantung pada beberapa faktor yaitu khasiat yang

diinginkan, sifat bahan obat yang dicampurkan, ketersediaan hayati, stabilitas dan

ketahanan sediaan jadi. Dalam beberapa hal perlu menggunakan dasar salep yang

kurang ideal untuk mendapatkan stabilitas yang diinginkan. Misalnya obat-obat

yang cepat terhidrolisis, lebih stabil dalam dasar salep hidrokarbon daripada dasar

salep yang mengandung air, meskipun obat tersebut bekerja lebih efektif dalam

dasar salep yang mangandung air (Ramadhani, 2016).

2.3.1. Penggolongan Salep

1. Berdasarkan konsistensinya salep dapat dibagi menjadi:

a. Unguenta adalah salep yang mempunyai konsistensinya seperti mentega,

tidak mencair pada suhu biasa, tetapi mudah dioleskan tanpa memakai

tenaga.
 15

b. Cream (krim) adalah salep yang banyak mengandung air, mudah diserap

kulit, suatu tipe yang dapat dicuci dengan air.

c. Pasta adalah salep yang mengandung lebih dari 50% zat padat (serbuk),

suatu salep tebal karena merupakan penutup atau pelindung bagian kulit

yang diolesi.

d. Cerata adalah salep lemak yang mengandung presentase lilin (wax) yang

tinggi sehingga konsistensinya lebih keras (ceratum labiale).

e. Gelones/spumae/jelly adalah salep yang lebih halus, umumnya cair dan

sedikit mengandung atau tanpa mukosa, sebagai pelicin atau basis, biasanya

terdiri atas campuran sederhana dari minyak dan lemak dengan titik lebur

rendah.

2. Menurut efek farmakolog/terapeutiknya, salep terbagi atas: (Wardani, 2014)

a. Salep epidermis digunakan untuk melindungi kulit dan menghasilkan efek

lokal, tidak diabsorpsi, kadang-kadang ditambahkan antiseptikanstrigensia

untuk meredakan rangsangan atau anasteti lokal. Dasar salep yang baik

adalah dasar salep senyawa hidrokarbon.

b. Salep endodermis adalah salep yang bahan obatnya menembus ke dalam

kulit, tetapi tidak melalui kulit, terabsorpsi sebagian, digunakan untuk

melunakkan kulit atau selaput lendir. Dasar salep yang terbaik adalah

minyak lemak.

c. Salep diadermis s adalah salep yang bahan obatnya menembus ke dalam

tubuh melalui kulit dan mencapai efek yang diinginkan, misalnya salep yang

mengandung senyawa merkuri iodida, beladona

 16

3. Menurut dasar salepnya, salep terbagi atas:

a. Salep hidrofobik adalah salep dengan dasar salep berlemak (greasy bases)

atau tidak suka air dan tidak dapat dicuci dengan air (Syamsuni, 2006).

b. Salep hidrofilik merupakan salep dengan tipe M/A atau salep yang suka air

(Syamsuni, 2006).

2.3.2. Preformulasi

Eksipien dalam sediaan salep, sebagai berikut (Priadiamanti, 2018) :

1. Gliserin (HOPE, edisi 6 hal 283)

Pemerian : Cairan jernih seperti sirup, tidak berwarna, rasa manis,

hanya boleh berbau khas lemah, higroskopis, netral

terhadap lakmus.
Kelarutan : Dapat bercapur dengan air dan dengan etanol, tidak larut

dalam kloroform, dalam eter, dalam minyak lemak dan

dalam minyak menguap.

Konsentrasi : 30-50%
Kegunaan : Sebagai pelarut
OTT : Gliserin dapat meledak jika bercampur dengan oksidator

kuat, seperti kromium trioksida, potasium klorat atau

potasium permanganat. Gliserin membentuk kompleks

asam borat, asam gliseroborat yang merupakan asam

yang lebih kuat dari asam borat.

Stabilitas : Gliserin bersifat higroskopis. Campuran gliserin dengan

air, etanol 95% dan propilen glikol secara kimiawi stabil

2. Propilen Glikol (FI IV hal 712)

Pemerian : Cairan kental, jernih, tidak berwarna, rasa khas, praktis

tidak berbau.
 17

Kelarutan : Dapat bercampur dengan air, dengan aseton dan dalam

kloroform, larut dalam eter dan beberapa minyak

esensial, tetapi tidak dapat bercampur dalam inyak

lemak.
Konsentrasi : 10-60%
Kegunaan : Pengawet (antimikroba), pelarut atau kosolven yang

dapat bercampur dengan air.

OTT : Dengan bahan pengoksidasi seperti kalium

permanganat.
Stabilitas : Stabil ketika bercampur dengan etanol 95% dan air.

Stabil pada suhu sejuk dan dalam wadah tertutup rapat.

3. Nipagin (HOPE, hal 310)

Pemerian : Massa hablur atau serbuk tidak berwarna atau kristal

putih, tidak berbau atau berbau khas lemah, dan

mempunyai rasa sedikit panas.

Kelarutan : Mudah larut dalam etanol, eter, praktis tidak larut dalam

minyak, larut dalam 400 bagian air.

Konsentrasi : 0,02-0,3%
Kegunaan : Antimikroba, pengawet
OTT : Non ionik surfaktan seperti polisorbat 80, bentonit,

magnesium trisilikat, talk, tragakan, sodium alginate.

Stabilitas : Stabil terhadap pemanasan dan dalam bentuk larutan.

4. Vaseline Album (Handbook of Excipients, hal 331)

Pemerian : Putih atau kekuningan, massa berminyak, transparan

dalam lapisan tipis setelah didinginkan pada suhu 00C.

Kelarutan : Tidak larut dalam air, sukar larut dalam etanol dingin,

atau panas dan dalam etanol mutlak dingin, mudah larut

dalam benzene, karbon disulfit, dalam kloroform, larut

 18

dalam heksan dalam sebagian besar minyak lemak dan

minyak atsiri.
Konsentrasi : 10-30%
Kegunaan : Basis salep
OTT : Merupakan bahan inert yang tidak dapat bercampur

dengan banyak bahan.

Stabilitas : Jika teroksidasi dapat menimbulkan warna dan bau yang

tidak dikehendaki. Untuk mencegah ditambahkan

antioksidan.

5. Alkohol (HOPE, hal 7)

Pemerian : Cairan mudah menguap, jernih, tidak berwarna, bau

khas dan menyebabkan rasa terbakar pada lidah. Mudah

menguap meskipun pada suhu rendah dan mendidih

pada suhu 78ºC dan mudah terbakar.

Kelarutan : Cairan mudah menguap, jernih, tidak berwarna, bau

khas dan menyebabkan rasa terbakar pada lidah. Mudah

menguap meskipun pada suhu rendah dan mendidih

pada suhu 78ºC dan mudah terbakar.

Konsentrasi : 60-90%
Kegunaan : Anti mikroba, desinfektan, pelarut, penetrasi kulit.
OTT : Bahan pengoksidasi. Bila dicampur dengan alkali,

warna akan menjadi gelap.

Stabilitas : Mudah menguap walaupun pada suhu rendah.

6. Oleum Citri (FI III, hal 455)

Pemerian : Cairan, kuning pucat/kuning kehijauan, bau khas, rasa

pedas dan agak pahit.

Kelarutan : Larut dalam 12 bagian volume etanol (90%), larutan

agak berepalesensi ; dapat bercampur dengan etanol

 19

mutlak.
Kegunaan : Essence, pewangi

2.3.3. Evaluasi Sediaan Salep

Menurut Sari (2016), evaluasi sediaan salep antara lain:

1. Uji Organoleptik

Pengujian organoleptik dilakukan dengan mengamati sediaan salep dari

bentuk, bau dan warna sediaan. Spesifikasi salep yang harus dipenuhi

adalah memilih bentuk setengah padat, warna harus sesuai dengan

spesifikasi pada saat pembuatan awal salep dan baunya tidak tengik (Depkes

RI, 1995).

2. Uji Homogenitas

Uji homogenitas sediaan dilakukan dengan cara mengoleskan salep pada

sekeping kaca atau bahan transparan lain yang cocok. Salep yang homogen

ditandai dengan tidak terdapatnya gumpalan pada hasil pengolesan, struktur

yang rata dan memiliki warna yang seragam dari titik awal pengolesan

sampai titik akhir pengolesan.

3. Uji Daya Sebar

Pengujian daya sebar dilakukan dengan cara meletakkan 0,5 g salep di

antara dua lempeng objek transparan yang diberi beban. Pengukuran

diameter daya sebar dilakukan lebih kurang 1 menit setelah pemberian

beban. Diameter daya sebar salep yang baik antara 5-7 cm.

4. Uji pH Salep

Pengukuran nilai pH menggunakan alat bantu stik pH universal yang

dicelupkan ke dalam 0,5 g salep yang telah diencerkan dengan 5 mL

 20

aquadest. Nilai pH salep yang baik adalah 4,5-6,5 atau sesuai dengan nilai

pH kulit manusia.

2.3.4. Cara Pembuatan Salep

Pembuatan salep menurut Syamsuni (2007), sebagai berikut:

1. Zat yang dapat larut dengan dasar salep dilarutkan, bila perlu dilakukan

pemanasan pada suhu rendah.

2. Zat yang tidak larut dalam dasar salep, terlebih dahulu di ayak dengan

pengayak no. 100.

3. Zat yang mudah larut dalam air dan stabil serta dasar salep mampu

menyerap air tersebut, dilarutkan ke dalam air yang tersedia dan

ditambahkan bagian dasar salep.

4. Jika dasar salep dibuat dengan cara peleburan, maka campuran tersebut

harus diaduk sampai dingin.

2.4. Kulit

Gambar 2.4, Struktur Kulit (Hadi, 2015)

Kulit merupakan suatu pembungkus yang melindungi tubuh dari pengaruh

lingkungan, kulit juga merupakan alat tubuh terberat dan terluasukurannya yaitu

15% dari berat tubuh manusia, rata rata tebal kulit 1-2 mm, kulit terbagi atas 3
 21

lapisan pokok yaitu, epidermis, dermis dan subkutan atau subkutis(Wibisono,

2008).

Kulit sangat kompleks, elastis dan sensitif, serta sangat bervariasi pada

keadaan iklim, umur, seks, ras, dan juga bergantung pada lokasi tubuhserta

memiliki variasi mengenai lembut, tipis, dan tebalnya. Tebal rata-rata kulit sekitar

1-2m. Kulit paling tebal (6 mm) terdapat di telapak tangan dan kaki, sedangkan

kulit paling tipis (0,5 mm) terdapat di penis. Kulit merupakanorgan yang vital dan

esensial serta merupakan cermin kesehatan dankehidupan (Djuanda, 2007).

2.4.1. Fungsi Kulit

Fungsi utama dari kulit sebagai proteksi, absorbsi, ekskresi, persepsi,

pengaturan suhu tubuh (termoregulasi), pembentukan pigmen, pembentukan

vitamin D dan keratinisasi. Kulit yang sehat tidak mudah menyerap air, larutan

dan benda padat, tetapi cairan yang mudah menguap lebih mudah diserap,

begitupun yang larut lemak. Absorbsi pada kulit dipengaruhi oleh tebal tipisnya

kulit, hidrasi, kelembaban, metabolisme dan jenis vehikulum. Penyerapan dapat

berlangsung memlalui celah antara sel, menembus sel-sel epidermis atau melalui

muara saluran kelenjar, tetapi lebih banyak yang melalui sel sel epidermis

daripada yang melalui muara kelenjar (Wasitaatmadja, 2010). Menurut Lachman

(2007), fungsi kulit sebagai proteksi terhadap serangan fisika-kimia. Selain itu,

kulit berfungsi sebagai thermostat dalam mempertahankan suhu tubuh,

melindungi tubuh dari serangan mikroorganisme, sinar ultraviolet.

2.4.2. Bagian-Bagian Kulit

Kulit dapat mempertahankan karakteristik fisikokimia seperti struktur, suhu,

pH dan keseimbangan O2 dan CO2. Permukaan kulit mempunyai pH sebesar 4,5 -

 22

6,5. Apabila suatu produk memiliki pH yang tidak sesuai, maka tidak hanya

berpengaruh pada kelarutan dan stabilitasnya saja, melainkan dapat menyebabkan

iritasi pada kulit. Kulit terdiri dari banyak lapisan jaringan secara anatomi, tapi

umumnya dibagi menjadi tiga lapisan yaitu epidermis, dermis, dan endodermis

(Benson dan Watkinson, 2012).

1. Epidermis

Epidermis merupakan bagian kulit terluar yang tersusun dari 15-25 sel

dengan ketebalan yang bervariasi antara 50µm - 1,5mm. Epidermis terbentuk dari

lima lapisan sel epitel skuamosa, diantaraanya yang paling umum adalah

keratinosit. Keratinosit merupakan sel-sel yang memiliki tanggung jawab dalam

pembentukan keratin, protein struktural dari kulit, rambut, dan kuku. Sel-sel ini

diyakini terlibat dalam proses imun dengan melepaskan IgA dan kemudian IL-1

yang menyebabkan sel-sel T aktif. Fungsi epidermis yaitu bagian penting dalam

menghalangi hilangnya air , elektrolit, dan atau nutrisi tubuh, serta menghalangi

senyawa asing dari luar yang masuk (Ismail, 2013).

2. Dermis

Dermis atau korium merupakan lapisan kulit yang berada antara epidermis

dan jaringan lemak subkutan. Tebalnya bagian ini tergantung tubuh bisa sekitar 1-

4 mm. Dermis tersusun dari bahan mukopolisakarida. Kandungan dermis yaitu

jaringan padat dari serabut protein, seperti kolagen, retikulum, dan elastin yang

disimpan dalam kelenjar dasar amorf dari mukopolisakarida. Dermis memiliki

 23

fungsi sebagai pelindung tubuh dari luka, membuat epidermis jadi

fleksibel,menghalangi infeksi mikroba dan sebagai organ penyimpan air. Dalam

dermis terdapat kapiler darah, ujung-ujung saraf, pembuluh limfa, kelenjar

keringat, folikelrambut, dan kelenjar sebasea (Ismail, 2013).

3. Endodermis

Endodermis merupakan lapisan paling dalam dari kulit, tebalnya tergantung

umur, ras dan daerah tubuh yaitu sekitar 0,5 - 2cm. Lapisan ini merupakan

lanjutan dari dermis yang terdiri dari jaringan ikat longgar berisi sel-sel lemak,

penghubung antara dermis dengan jaringan lain di bawahnya seperti otot.

Endodermis memiliki banyak jaringan penghubung yang didalamnya terdapat

beberapa serat elastik. Pada beberapa bagian tubuh tertentu terdapat otot polos.

Lapisan ini yang melindungi organ sebelah dalam tubuh dari benturan mekanik.

Jaringan berlemak memengaruhi regulasi panas tubuh dan memberika efek

bantalan terhadap tekanan eksternal dan cedera (Ismail, 2013).

2.5. Luka (Vulvus)

Luka menurut Ryan (2014) adalah suatu kerusakan pada fungsi

perlindungan kulit yang disetai dengan hilangnya kontinuitas jaringan epitel tanpa

adanya kerusakan pada jaringan lainnya seperti otot, tulang dan nervus yang

disebabkan oleh beberapa faktor, yaitu: tekanan, sayatan dan luka karena operasi.

Luka sayat merupakan jenis luka terbuka atau luka bersih yang disebabkan

oleh pisau bedah (bisturi) dengan meminimalkan kerusakan kulit (Mair, 2013).

Luka sayat memiliki resiko infeksi yang tinggi sehingga perlu adanya teknik
 24

antiseptik saat preoperatif untuk mengurangi infeksi pada area operasi dengan

menggunakan bahan Iodine, alkohol dan klorheksidine (Dumville, 2013).

Pada penderita diabetes melitus sering terjadi komplikasi luka yang disebut

denga ulkus diabetik. Ulkus diabetik merupakan luka terbuka pada lapisan kulit

sampai ke bagian dermis, biasanya terjadi pada telapak kaki (Hariani et al., 2015).

Penderita diabetes melitus di Indonesia pada tahun 2000 sekitar 8 juta orang dan

50% mengalami komplikasi ulkus diabetik (Guntur, 2012)

Menurut Baroroh (2011), kedalaman luka dan luasnya dapat dikategorikan

sebagai berikut:

1. Stadium I : Luka Superfisial Non-Blanching Erithemamerupakan luka yang

terjadi pada lapisan epidermis kulit.

2. Stadium II : Luka Partial Thickness yaitu hilangnya lapisan kulit pada

epidermis dan bagian atas dermis. Merupakan luka superfisial dan adanya

tanda klinis seperti abrasi, blister atau lubang yang dangkal.

3. Stadium III : Luka Full Thickness : yaitu hilangnya kulit keseluruhan

meliputi kerusakan atau nekrosis jaringan subkutan yang dapat meluas

sampai bawah tetapi tidak melewati jaringan yang mendasarinya. Lukanya

sampai pada lapisan epidermis, dermis dan fasia tetapi tidak mengenai otot.

Luka timbul secara klinis sebagai suatu lubang yang dalam dengan atau

tanpa merusak jaringan sekitarnya.

4. Stadium IV : Luka Full Thickness yang telah mencapai lapisan otot, tendon

dan tulang dengan adanya destruksi/kerusakan yang luas.

2.5.1. Proses Penyembuhan Luka

 25

Proses penyembuhan luka secara umum terdiri dari beberapatiga fase utama

yaitu fase inflamasi, fase proliferasi, fase maturasi. Fase penyembuhan luka dapat

dijabarkan sebagai berikut:

1. Fase Inflamasi

Fase inflamasi ditandai dengan adanya nyeri, bengkak, panas, kemerahan

dan hilangnya fungsi jaringan (Hess, 2008). Fase inflamasi terjadi pada awal

kejadian atau pada saat luka terjadi hari ke-0 sampai hari ke-3 atau hari ke-5.

Terdapat dua kegiatan utama pada fase ini, yaitu respon vaskuler dan respon

inflamasi. Respon vaskuler diawali dengan respon hemostatic tubuh selama 5

detik pasca luka. Sekitar jaringan yang luka mengalami iskemia yang merangsang

pelapisan histamine dan vasoaktif yang menyebabkan vasodilatasi, pelepasan

trombosit, reaksi vasodilatasi dan vasokontriksi, dan pembentukan lapisan fibrin

(Arisanty, 2013).

Respon inflamasi adalah reaksi non spesifik tubuh dalam mempertahankan

atau memberi perlindungan terhadap benda asing yang masuk kedalam

tubuh.Tubuh mengalami aktifitas biokimia dan bioseluler, dimana reaksi tubuh

memperbaiki kerusakan sel kulit, leukosit memberikan perlindungan dan

membersihkan makrofag (Arisanty, 2013).

Fungsimakrofagselaindarifagositosisadalahsintesakolagen, bersama-

samadengan fibroblast membentukjaringangranulasi, memproduksi growth factor

danberperandalamreepitelisasidanmelakukan angiogenesis atau pembentukan

kapiler-kapiler baru(Black & Hawks,2009).

2. Fase Proliferasi
 26

Fase proliferasi terjadi pada hari ke-5 sampai hari ke-7 setelah 3 hari

penutupan luka sayat. Fase ini ditandai dengan pengeluaran makrofak dan

neutrofil sehingga area luka dapat melakukan sintesis dan remodelling pada

mariks sel ekstraselular (Hubrecht & Kirkwood, 2010).

Pada fase proliferasi, makrofak berfungsi menstimulasi fibroblas untuk

menghasilkan kolagen dan elastin kemudian terjadi prose angiogenesis. Pada

proses granulasi kolagen dan elastin yang dihasilkan menutupi luka dan

membentuk matriks jaringan baru. Epitelasi terjadi setelah tumbuh jaringan

granulasi dan dimulai dari tepi luka yang mengalami proses migrasi membentuk

lapisan tipis yang menutupi luka. Sel pada lapisan ini sangat rentan dan mudah

rusak. Sel mengalami kontraksi sehingga tepi luka menyatu dan ukuran luka

mengecil (Arisanty, 2013).

3. Fase Remodeling

Fase remodeling terjadi pada hari ke-8 hingga satu sampai dua tahun. Pada

fase ini terbentuknya jaringan kolagen pada kulit untuk penyembuhan luka

(Hubrecht & Kirkwood, 2010). Jaringan kolagen ini akan membentuk jaringan

fibrosis atau bekas luka dan terbentuknya jaringan baru. Sitokin pada sel

endothelial mengaktifkan faktor pertumbuhan sel dan vaskularisasi pada daerah

luka sehingga bekas luka dapat diminimalkan (Piraino & Selemovic, 2015).

Aktifitas yang utama pada fase ini adalah penguatan jaringan bekas luka

dengan aktifitas remodeling kolagen dan elastin pada kulit. Kontraksi sel kolagen

danelastin terjadi sehingga menyebabkan penekanan ke atas kulit. Kondisi umum

pada fase remodeling adalah rasa gatal dan penonjolan epitel di permukaan kulit.
 27

Pada fase ini kulit masih rentan terhadap gesekan dan tekanan sehingga

memerlukan perlindungan (Arisanty, 2013).

2.6. Pankreas

Pankreas merupakan organ pipih yang terletak dibelakang dan sedikit

dibawah lambung (Syarifuddin, 2009). Pankreas memiliki panjang 15 cm, mulai

dari duodenum sampai limpa. Ada tiga bagian pankreas yaitu kepala, badan dan

ekor. Kepala pankreas terletak di sebelah kanan rongga abdomen dan di dalam

lekukan duodenum. Badan pankreas merupakan bagian utama dari pankreas

terletak di belakang lambung dan di depan vertebrata lumbalis pertama. Ekor

pankreas berbentuk runcing dan di sebelah kiri menyentuh limpa (Pearce, 1979).

Pankreas adalah suatu organ yang terdiri dari jaringan eksokrin dan

endokrin. Bagian eksokrin mengeluarkan larutan encer alkalis serta enzim

pencernaan melalui duktus pankreatikus ke dalam lumen saluran cerna. Dia antara

sel-sel eksokrin di seluruh pankreas tersebar kelompok-kelompok atau “pulau” sel

endokrin yang dikenal sebagai pulau Langerhans. Sel endokrin pankreas yang

terbanyak adalah sel β (beta), tempat sintesis dan sekresi insulin, dan sel α (alfa)

yang menghasilkan glukagon. Sel D (delta), yang lebih jarang adalah tempat

sintesis somatostatin (Sherwood L,2009).

 28

Gambar 2.6, Anatomi Pankreas (Ryan, 2017)

2.7. Aloksan Monohidrat

Aloksan merupakan bahan kimia yang digunakan sebagai penginduksi

diabetes melitus. Penginduksian aloksan menyebabkan kondisi diabetes melitus

dengan karateristik mirip pada diabetes melitus tipe 1. Aloksan adalah derivat

urea yang secara selektif merusak sel β (beta) pankreas yang memproduksi insulin

pada hewan tikus, mencit dan kelinci. Pemberian aloksan dapat dilakukan secara

intravena, intraperitoneal atau subkutan (Szkudelski, 2001).

Bentuk molekul aloksan menyerupai glukosa. Saat aloksan diinduksikan

kedalam tubuh hewan uji, maka reseptor GLUT 2 yang terdapat pada sel β

(beta)pankreas akan mengenali aloksan sebagai glukosa. Aloksan yang dianggap

sebagai glukosa akan dibawaa menuju sitosol sel β (beta) pankreas, sehingga akan

terjadi reaksi redoks yang menghasilkan ROS dan supreoksida (Lenzen, 2008).

Terbentuknya ROS akan menyebabkan depolarisasi membran sel β (beta)

dan peningkatan Ca2+, sehingga sitosol akan mengaktivasi berbagai enzim yang

menyebabkan peroksidasi lipid, fragmentasi DNA dan fragmentasi protein.

Akibatnya sel β (beta) pankreas menjadi nekrosis dan fungsi sebagai sintesis

insulin menurun (Lenzen, 2008).

2.8. Tikus Putih (Rattus novergicus)

 29

Gambar 2.8, Tikus Putih (Rattus novergicus) galur wistar (Artiyo, 2018)

Penelitian berbasis kesehatan semakin dikembangkan, untuk mendukung

kegiatan penelitian digunakan hewan coba salah satunya tiku (Ratus novergicus).

Tikus putih (Ratus novergicus) dapat diklasifkasikan sebagai berikut:

Kingdom : Animalia

Filum : Chordata

Kelas : Mamalia

Ordo : Rodentia

Famili : Muridae

Genus : Rattus

Spesies : Rattus novergicus

Tikus merupakan hewan mamalia yang memiliki peran penting bagi peneliti

untuk tujuan ilmiah karena memiliki adaptasi yang baik. Jenis tikus yang sering

digunakan dalam penelitian yaitu tikus putih (Ratus novergicus). Keuntungan

menggunakan tikus putih (Ratus novergicus) yaitu penanganan dan pemeliharaan

yang mudah, sehat dan bersih serta memiliki karakteristik produksi dan

reproduksi sama dengan mamalia lain (Pribadi, 2008).

Tikus putih jantan digunakan sebagai binatang percobaan karena dapat

memberikan hasil penelitian yang lebih stabil dan tidak dipengaruhi oleh adanya

siklus menstruasi dan kehamilan seperti pada tikus putih betina. Tikus putih jantan

juga mempunyai kecepatan metabolisme obat yang lebih cepat dan kondisi

biologis tubuh yang lebih stabil dibanding tikus betina (Pujiatiningsih, 2014).

2.9. Hipotesis
 30

H0 : Sediaan salep ekstrak kulit jeruk nipis (Citrus aurantifolia) tidak

memiliki efektivitas sebagai penyembuhan luka diabetes melitus tipe 1

pada tikus jantan.

H1: Sediaan salep ekstrak kulit jeruk nipis (Citrus aurantifolia) memiliki

efektivitas sebagai penyembuhan luka diabetes melitus tipe 1 pada

tikus jantan.

2.10. Kerangka Pikir

Kulit jeruk nipis

Ekstraksi dengan metode maserasi

Kandungan kulit jeruk nipis

Alkaloid Flavonoid Saponin

Sebagai penyembuhan luka Diabetes Melitus tipe 1

Formulasi sediaan salep

dengan konsentrasi 10%, 15% dan 20 %

Evaluasi sediaan salep:

 Uji Organoleptik
 Uji Homogenitas
 Uji Daya Sebar
 Uji pH
 31

Tikus di induksi
Aloksan Monohidrat

Diberikan luka sayat

Mempercepat penyembuhan luka

Gambar 2.10, Kerangka Pikir Penelitian

 BAB III
METODOLOGI PENELITIAN

3.1. Waktu dan Tempat Penelitian

3.1.1. Waktu Penelitian

Penelitian akan dilakukan pada bulan Februari 2020

3.1.2. Tempat Penelitian

Penelitiandilakukan di LaboratoriumBiologi FMIPA Universitas Lampung,

BalaiVeteriner Lampung, danLaboratoriumBiokimiaUniversitasMalahayati

Bandar Lampung.

3.2. Alat dan Bahan

3.2.1. Alat

Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah pisau bedah (bisturi), neraca

analitik, jarum suntik, alat-alat gelas, glucometer, cotton buds, handskoon, plat

kaca,masker,mortir dan stamper.

3.2.2. Bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah kulitjeruknipis (Citrus

aurantifolia), tikus jantan galur Wistar, eter, etanol 96%, aloksan monohidrat,

aquadest, NaCl, alkohol swab, gliserin, propilen glikol, alkohol, nipagin, vaselin

album, oleum citri, betadine salep.

32
33
 33

3.3. Populasi dan Sampel

3.3.1. Populasi

Populasi pada penelitian ini adalah kulitjeruknipis (Citrus aurantifolia).

Kulit jeruk nipis diambil dari

3.3.2. Sampel

Pengambilansampelpadapenelitianinimenggunakan metode

purposive sampling. Metode ini menggunakan kriteria yang telah dipilih

oleh peneliti dalam memilih sampel. Kriteria pemilihan sampel kulit jeruk

nipis (Citrus aurantifolia)yang diambil dari satu pohon, sebagai berikut:

a. Kriteria Inklusi

1. Kulit jeruk nipis yang berwarna hijau

2. Berkulit tebal

3. Dalam keadaan segar

b. Kriteria Eksklusi

1. Kulit jeruk nipis yang tipis

2. Berwarna kuning

3. Kulit jeruk nipis yang busuk

3.4. Variabel Penelitian

Variabel independen : Konsentrasi salep ekstrak kulit jeruk nipis (Citrus

aurantifolia)dan tikus jantan galur wistar.

Variabel dependen : Penurunan diameter luka diabetes tipe 1 pada tikus

jantan galur wistar.

 34

3.5. Definisi Operasional Penelitian

Tabel 3.1 Definisi Operasional

Variabel Definisi Cara Hasil Skala

Ukur Ukur
Variabel Konsentrasi salep ekstrak jeruk nipis Menimba Numer Interv
independ dinyatakan dalam bentuk persen (%). ng ik al
en: Masing-masing konsentrasi salep ekstrak
Konsentra ekstrak kulit jeruk nipis dicari kental
si salep konsentrasi terbaik sebagai salep kulit
ekstrakkul penyembuhan luka diabetes melitus jeruk
it jeruk tipe 1. nipis
nipis sesuai
yang
dibutuhka
n.

Alat ukur
: Neraca
analitik
Tikus Tikusgalurwistarberupatikus outbred Melihat Numer Interv
putih tikus albino dengankepalalebar, dan ik al
jantan panjangtelinga, memilikiekor yang menimba
galur kurangpanjangdaritubuhnyaberatbada ng tikus
wistar ndewasa 200-350 gram
Alat
ukur:
Neraca
analitik
Variabel Penurunan diameter luka diabetes Menghitu Numer Rasio
dependen melitus tipe 1 pada punggung tikus ng dan ik
: mulai dari hari ke 1 sampai 15 setelah menguku
Penurunan pemberian salep ekstrak kulit jeruk r
diameter nipis diameter luka menjadi 0 mm penuruna
 35

luka n luka
diabetes diabetes
melitus melitus
tipe 1 tipe 1
pada
punggung
tikus

Alat
ukur:
Kalkulato
r
Penggaris

3.6. Prosedur Kerja

3.6.1. Proses Pengolahan Simplisia

Kulit jeruk nipis yang diambil dalam keadaan segar dan berwarna hijau.

Kemudian dilakukan sortasi basah dan dipotong kecil (dirajang). Setelah itu, kulit

jeruk nipis yang telah dipotong kecil (dirajang) dicuci menggunakan air mengalir.

Proses selanjutnya dilakukan pengeringan dengan cara dianginkan selama satu

hari, dilanjutkan dengan pengeringan menggunakan oven pada suhu 400 C. Kulit

jeruk nipis yang telah dikeringkan kemudian disortasi kering untuk memisahkan

kulit jeruk nipis yang mengalami kerusakan saat proses pengeringan. Kulit jeruk

nipis yang telah disortasi kering siap untuk diekstraksi.

3.6.2. Pembuatan Ekstrak Kulit Jeruk Nipis (Hindun et al., 2017)

Metode ektraksi yang digunakan adalah metode maserasi, yaitu

ekstraksi yang dilakukan pada suhu ruang dan tanpa menggunakan panas.
 36

Pelarut yang digunakan etanol 96 %. Serbuk simplisia kulit jeruk nipis

ditimbang sebanyak 500 gram kemudian dimasukan kedalam maserator

yang bagian dasarnya telah dilapisi kapas, kemudian dimasukan pelarut

etanol 96 % sebanyak 1,5 liter kedalam maserator hingga simplisia

tersebut terendam seluruhnya. Proses maserasi dilakukan selama 3 x 24

jam, dan setiap 24 jam pelarut diganti dengan pelarut yang baru hingga

filtrat yang dihasilkan jernih. Hasil ekstraksi yang diperoleh dipekatkan

dengan menggunakan alat vacuum rotary evaporator.

3.6.3. Skrining Fitokimia

1. Identifikasi Flavonoid

Larutan uji sebanyak 2 ml dimasukkan kedalam tabung reaksi, lalu

ditambahkan beberapa miligram serbuk Mg dan 1 ml larutan HCL pekat.

Perubahan warna larutan menjadi warna merah jingga sampai merah ungu

menunjukan adanya flavonoid. Perubahan warna menjadi kuning jingga

menunjukkan adanya flavon, kalkon dan auron.

2. Identifiikasi Alkaloid

Ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan direaksikan dengan larutan

5 ml HCL larutan dibagi menjadi dua bagian masing-masing ditambah dengan

pereaksi mayer dan dragendrof. Adanya kabut putih atau endapan putih saat

ditambah pereaksi mayer menandakan sampel positif alkaloid, sedangkan adanya

endapan merah bata saat penambahan dragendrof menandakan positif alkaloid

(Sa’adah, 2010).

3. Identifikasi Saponin
 37

Larutan uji sebanyak 10 ml dikocok vertikal didalam tabung reaksi selama

10 detik, kemudian dibiarkan selama 10 menit. Apabila busa tidak hilang setelah

ditambahkan HCl 2 N, maka larutan uji dinyatakan positif mengandung saponin.

3.6.4. Pembuatan Salep Ekstrak Kulit Jeruk Nipis

Vasline album dan gliserin dilarutkan di atas waterbath hingga meleleh.

Campurkan vaselin album dan gliserin yang sudah dilelehkan ke dalam mortar

gerus hingga homogen. Tambahkan nipagin, alkohol dan propilen glikol, gerus

hingga homogen. Tambahkan ekstrak kulit jeruk nipis , gerus hingga homogen.

Kemudian tambahkan oleum citri.

Tabel 3.2 Rencana Formulasi Salep Ekstrak Kulit Jeruk Nipis

Jumlah
No Bahan
A B C
1 Ekstrak kulit jeruk nipis 10% 15% 20%
2 Gliserin 5% 5% 5%
3 Alkohol 0,10% 0,10% 0,10%
4 Propilen Glikol 10% 10% 10%
5 Nipagin 0,10% 0,10% 0,10%
6 Vaselin Album 100% 100% 100%
7 Oleum Citri 0,10% 0,10% 0,10%

3.6.5. Evaluasi Sediaan Salep (Sari, 2016)

1. Uji Organoleptik

Pengujian dilakukan dengan melihat warna, bentuk dan bau sediaan salep.

Salep harus memiliki warna spesifikasi pada awal pembuatan salep, salep

memiliki bentuk setengah padat dan bau salep tidak tengik.

2. Uji Homogenitas

Pengujian ini dilakukan dengan cara mengoleskan salep pada sekeping kaca.

Salep yang diuji diambil dari 3 bagian yaitu bagian atas, tengah dan bawah. Salep
 38

yang homogen ditandai dengan tidak terdapatnya gumpalan pada hasil

pengolesan, struktur yang rata dan memiliki warna yang seragam dari titik awal

pengolesan sampai titik akhir pengolesan.

3. Uji Daya Sebar

Pengujian dilakukan dengan cara meletakkan 0,5 gram diantara dua

lempeng kaca yang diberi beban 100 gram. Pengukuran dilakukan setelah salep

tidak menyebar lagi atau satu menit setelah pemberian beban. Daya sebar yang

baik memiliki diameter 5-7 cm.

4. Uji pH

Pengukuran menggunakan stik pH universal. 0,5 gram salep dilarutkan

dalam 5 ml aquadest. Kemudian stik pH universal dicelupkan kedalam salep yang

telah diencerkan. pH salep yang baik yaitu 4,5-6,5 atau sesuai dengan pH kulit

manusia.

3.7. Perhitungan Jumlah Sampel Tikus

BerdasarkankriteriaWHO jumlah sampel yang digunakan minimal 5

ekor.

PenentuanbesaranulanganditentukandenganmenggunakanrumusFrederer

(1967) :

t (n-1) ≥ 15

5(n-1)≥ 15

5n-5≥ 15

5n ≥ 20

n≥4

Keterangan :
 39

n :Jumlahsampeltiapkelompok

t :Jumlahkelompok

Jadijumlah tikus yang digunakantiapkelompokpercobaansebanyak 4

ekordanjumlahkelompok yang

digunakanadalah6kelompoksehinggapenelitianinimenggunakan

24ekortikusdaripopulasi yang ada. Untukmengantisipasiterjadinyatikus

yang matimakadilakukandengankoreksi :

N = n / (1-f)

Keterangan :

N :besarsampelkoreksi

n :besarsampelawal

f :perkiraanproporsidropoutsebesar 10%

Sehingga,

N = n / (1-f)

N = 4 / (1-10%)

N = 4 / (1-0,1)

N = 4 / 0,9

N = 4,44 (dibulatkanmenjadi 5)

Jadisampel yang digunakantiapkelompokpercobaansebanyak 5

ekor.Olehkarenaitu, penelitianinimenggunakan30ekortikus yang

dibagikedalam6kelompok.
 40

3.8. Perlakuan Hewan Coba (Aprilliani et al., 2015)

Hewan percobaan dalam penelitian ini berjumlah 30 ekor dikelompokan

menjadi lima kelompok dan masing-masing kelompok terdiri atas lima ekor.

Tikus dikandangkan secara individu beralaskan sekam. Tikus diberi pakan standar

20 g /ekor/ hari dengan air minum ad libitum. Sebelum percobaan, tikus

diadaptasi selama 7 hari untuk menyeragamkan cara hidup dan pola makan

dengan pakan standar, serta membiasakan diri dengan lingkungannya. Kelima

kelompok tikus diberi pakan standar selama penelitian.

3.8.1. Pengelompokan Hewan Coba

Sebelum dilakukan perlakuan terjadap hewan coba, dilakukan adaptasi

selama 7 hari untuk menyeragamkan pola hidup. Hewan coba dibagi kedalam 5

kelompok perlakuan, sebagai berikut :

a. Kelompok I merupakan kontrol normal (K0) yang hanya diberikan pakan

standar selama penelitian dan tidak mendapat perlakuan.

b. Kelompok II merupakan kontrol negatif (KN) yang diinduksi dengan

aloksan monohidrat dengan dosis 150 mg/BB diberi basis salep tanpa

ekstrak kulit jeruk nipis.

c. Kelompok III merupakan kontrol positif (KP) yang diinduksi dengan

aloksan monohidrat dengan dosis 150 mg/BB dan diberi betadine salep.

d. Kelompok IV merupakan kontrol uji 1 yang diinduksi dengan aloksan

monohidrat dengan dosis 150 mg/BB dan diberikan ekstrak kulit jeruk nipis

dengan konsentrasi 10%.

 41

e. Kelompok V merupakan kontrol uji 2 yang diinduksi dengan aloksan

monohidrat dengan dosis 150 mg/BB dan diberikan ekstrak kulit jeruk nipis

dengan konsentrasi 15%.

f. Kelompok VI merupakan kontrol uji 3 yang diinduksi dengan aloksan

monohidrat dengan dosis 150 mg/BB dan diberikan ekstrak kulit jeruk nipis

dengan konsentrasi 20%.

Kelompok II sampai VIdiinduksi aloksan monohidrat dengan dosis 150

mg/BB secara intraperitoneal, diberikan sebelum perlakuan eksisi pada hewan uji

(Akinola et al., 2012). Perbedaan konsentrasi ekstrak kulit jeruk nipis

dimaksudkan untuk membandingkan konsentrasi manakah yang lebih cepat dalam

penurunan diameter luka sayat diabetes melitus tipe 1 pada tikus jantan galur

wistar. Salep ekstrak kulit jeruk nipis diberikan setiap hari selama 15 hari.

Pengukuran luas area luka pada hari ke-1,3,5,7,9,1,13,15 selama pemberian salep

ekstrak kulit jeruk nipis (Kurniawan et al., 2015). Pemberian dosis 150 mg/BB

karena pada dosis tersebut aloksan monohidrat dapat merusak sel β (beta)

pankreas pada tikus jantan galur wistar yang menyebabkan kondisi diabetes

melitus tipe 1.

3.8.2. Eksisi Hewan Uji (Karuniawan et al., 2015)

Sebelum dilakukan perlakuan, tikus dianastesi menggunakan ketamin.

Kemudian bulu disekitar punggung dicukur dengan diameter 3 cm dan

dibersihkan menggunakan alkohol 70%. Sayatan dilakukan pada punggung tikus

dengan membuat luka sayatan sepanjang 2 cm dengan kedalaman 2 mm

menggunakan pisau bedah (bisturi) no 11.

 42

3.9. Analisis Data

Untuk mengetahui pengaruh pemberian salep ekstrak kulit jeruk nipis

(Citrus aurantifolia) terhadap penurunan diameter luka sayatan pada punggung

tikus dengan kondisi diabetes melitus tipe 1, hasil data yang diperoleh dari

pengukuran penurunan diameter luka sayatan pada punggung tikus dengan

kondisi diabetes melitus tipe 1 diuji komparatif menggunakan uji ANOVA

(Analysis of varians) dengan nilai signifikan pada P<0,05. Pengujian dimulai

dengan uji distribusi normalitas dengan uji saphiro wilk, uji homogenitas varian

dan dilanjutkan ke uji ANOVA.

 DAFTAR PUSTAKA

Abdi Redha. 2013. Flavonoid: Struktur, Sifat Antioksidatif Dan Peranannya

Dalam Sistem Biologis

Adhi, Djuanda. 2007. Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin. Edisi kelima. Jakarta :

Balai Penerbit FKUI

Agusta, A. 2000. Minyak Atsiri Tumbuhan Tropika Indonesia. Bandung: Penerbit

Institut Teknologi Bandung. Hal. 101

Ahmad M, Ansari M.N, Alam A, Khan T.H. 2013. Oral Dose of Citrus Peel
Extracts Promotes Wound Reapair in Diabetic Rats. 16(20);1086-1094

Akinola, O., Gabrieal, M., Suleiman, A.A., Olorunsogbon, F. 2012. Treatment of

Alloxan-Induced Diabetic Rats with Metformin or Glitazones is Associated
with Amelioration of Hyperglycemia and Neuroprotection. The Open
Diabetes Journal, Volume 5.

Allen, L. V., 2009, Handbook of Pharmaceutical Excipients, Sixth Edition, Rowe

R. C., Sheskey, P. J., Queen, M. E., (Editor), London, Pharmaceutical Press
and American Pharmacists Assosiation

American Diabetes Association. 2017. “Standards of Medical Care in Diabetes

2017”. Vol. 40. USA : ADA

Anief M., 2007, Farmasetika, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.

Apriliani D, Anna P.Roswiem, Waras Nurcholi. 2015. Aktivitas Hepatoproteksi

Ekstrak Polifenol Buah Delima (Punica granatum L.) Terhadap Tikus Putih
Yang Diinduksi Parasetamol. Jurnal Kedokteran Yarsi 23 (3) : 128-142

Arisanty, Irma P. (2014). Manajemen Perawatan Luka: Konsep Dasar. Jakarta:

EGC

Baroroh, Dwi. ‘Konsep Luka’. Psikfikes UMM. 2011. Hal:2

Cahyani Y.D, Mita S.R. 2018. Aktivitas Biologis Tanaman Bandotan (Ageratum
Conyzoides Linn.) Sebagai Terapi Luka Terbuka. Volume 16 Nomor 2

Codoner-Franch, P., Valls-Belles, V., 2010, Citrus as Functional Foods, Ctnr 8

(4), 173-84

Crane, J.H., 2010, Key Lime Growing in the Florida Landscape, University of
Florida, IFAS Extention, 1-9.
Dalimartha S., 2007, Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 3, Puspa Swara,
Jakarta

Departemen Kesehatan RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan

Obat. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan Direktorat
Pengawasan Obat Tradisional. Jakarta

Departemen Kesehatan RI. 1979. Farmakope Indonesia edisi III. Jakarta

DepartemenKesehatan RI. 1995. Farmakope Indonesia edisi IV. Jakarta

Desalu O. O, Salawu F. K, Jimoh A. K, Adekoya A. O, Busari O. A, Olokoba A.

B, 2011. Diabetic Foot Care: Self Reported Knowledge And Practice
Among Patients Attending Three Tertiary Hospital In Nigeria. Ghana
Medical jurnal.

Dewi, D., 2012, Jeruk Nipis : Khasiat dan Manfaat, Surabaya, Stomata, 3, 14-7

Federer, W.T. 1967. Experimental Design: Theory and Application. Oxford and
IBH Publ. Delhi.

Guenther, E. 1987, Minyak Atsiri. Jilid I. Jakarta : UI Press. Hal. 44-484

Hindun S., Rusdiana T., Abdasah M., Hindritiani R., 2017, Potensi Limbah Kulit
Jeruk Nipis (Citrus auronfolia) Sebagai Inhibitor Tirosinase. Vol. 4. No. 2

International Diebetes Federation. (2017). IDF Diabetes Atlas – Eighth edition

2017.

Ismail, Isriany. 2013. FormulasiKosmetik (ProdukPerawatanKulitdanRambut). Jf

UINAM. Vol. 3 no.3

Kurniawan, M.A., Andrie M., Riza, H. 2016. Uji Efek Penyembuhan Luka Sayat
Salep Ekstrak Ikan Toman (Channa micropeltes) Secara Topikal Pada Tikus
yang Diinduksi Streptozotocin. Universitas Tanjungpura. Pontianak

Lizzo, M.R., Tundis, R., Bonesi, M., 2012. Evaluation of Citrus aurantifolia Peel
and Leaves Extract for Their Chemical Composition, Antioxidant, and Anti-
Cholinesterase Activities, J Sci Food Agric. 92(15), 2960-7.

McPhee, Stephen J &Ganong, William F. 2011.PatofisiologiPenyakit

:PengantarMenujuKedokteranKlinis.Alihbahasa Bram U. Pendit.Jakarta :
EGC

Mohanapriya, M., Ramaswamy, L., Rajendran, R., 2013, Health and Medicinal
Properties of Lemon (Citrus limonum), IJAAM, 3(1):1095–1100.
Mukhriani, 2014, Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa Aktif,
Jurnal Kesehatan, 7(2)

Nogata, Y., K. Sakamoto., H. Shiratsuchi., T. Ishii., M. Yano., and H. Ohta. 2006.

Flavonoid composition of fruit tissues of citrus species. Biosci. Biotechnol.
Biochem. 70(1):178-192.

Pratiwi, Donna, Irma Suswati, danMariyam Abdullah. 2013. Efek Anti

BakteriEkstrakKulitJerukNipis (Citrus Aurantifolia L.)TerhadapSalmonella
TyphiSecaraIn Vitro. VOLUME 9 NO 2 DESEMBER 2013Ramadhinta,
TalithaMaghfira, M. Yanuar.

Primadiamanti, A., Winahyu, A.D., Jaulin, A. 2018. UjiEfektifitasSediaanSalep

Batang Pepaya (Carica Papaya L.) Sebagai Penyembuh Luka.
FarmasiMalahayati Vol. 1 No. 2.

Purwanti, O.S. 2013. AnalisisFaktor-FaktorRisikoTerjadinyaUlkus Kaki

padaPasien Diabetes Mellitus di RSUD DR.Moewardi Surakarta, Prosiding
Seminar Ilmiahnasional, ISSN: 2338-2694

Raharjo S.S., Maryani. Kisrini. 2010. Penggunaan Salep Minyak Atsiri Kulit
Buah Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia L.) Sebagai Antibakteri Infeksi Kulit
oleh Staphylococcus aureus Pada Tikus Putih (Rattus norvegicus). Vol. 3.
No. 1

Rathee P, Chaudhary H, Rathee S, Rathee D, Kumar V, Kohli K., 2009,

Mechanism of action of flavonoid as antiinfalamatory agents: a review,
Inflammation & Allergy Drug Targets, 8, 229-235

Riskesdas. 2013. Badan Penelitian Pengembangan Kesehatan Kementerian

Kesehatan RI 2013. Riset Kesehatan Daerah. Jakarta

Ryan, K. 2014, Nursing & Health Wound Care: Survival Guide. New York :
Rouledge

Syamsuni, 2006, Farmasetika Dasar Dan Hitungan Farmasi, Penerbit Buku

Kedokteran EGC, Jakarta. 29 – 31

Wasitaatmadja, S. 2010. Akne Vulgaris.Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin. ed.6.

Jakarta: Balai Penerbit FK UI, 254-60

Wibisono. 2008. Perbedaan Lama Penyembuhan Luka Bersih Antara Perawatan

Luka Dengan Menggunakan Gerusan Bawang Merah (Allium cepa L.)
Dibandingkan Dengan Providone Iodin 10% Pada Tikus Putih (Rattus
novergicus) Strain Wistar. Fakultas Kedokteran, Jurusan Keperawatan
Universitas Brawijaya Malang