FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN SEDIAAN LOSION

EKSTRAK ETANOL DAUN MAREME (Glochidion arborescens Blume.)

DENGAN METODE FRAP ( Ferric Reducing Antioxidant Power )

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat guna menempuh Ujian Sarjana Program

Studi S1 Farmasi STIKes Bakti Tunas Husada

WIDIYA LESTARI

31115171

PROGRAM STUDI S 1 FARMASI

STIKes BAKTI TUNAS HUSADA
TASIKMALAYA
2019
 KATA PENGANTAR

Assalamualaikum Warahmatullahiwabarakatuh

Puji syukur Alhamdulillah penulis ucapkan kepada Allah S.W.T karena berkat

rahmat dan hidayahnya akhirnya penulis dapat menyelesaikan Proposal Penelitian tak

lupa sholawat serta salam tercurah limpahkan pada baginda alam Nabi besar Nabi

Muhammad S.A.W karena berkat cerminan perilakunya penulis dapat menyelesaikan

ide tugas penelitian ini.

Penulisan Proposal Penelitian ini dicetuskan untuk memenuhi salah satu

syarat guna menempuh ujian Sarjana Program Study S-I Farmasi Sekolah Tinggi

Ilmu Kesehatan Bakti Tunas Husada Tasikmalaya. Dengan judul penulis ajukan

“Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Sediaan Losion Ekstrak Etanol Daun

Mareme (Glochidion arborescens Blume.) Dengan Metode FRAP (Ferric Reducing

Antioxidant Power )”

Dalam penulisan tugas proposal penelitian ini penulis menyadari bahwa baik

kualitas maupun kuantitas dari materi terbatas, oleh karena itu penulis ingin

memohon maaf kepada pembaca.

Dalam penulisan tugas proposal penelitian ini penulis banyak dibantu oleh

berbagai pihak. Oleh karena itu penulis ingin menyampaikan ucapan terimakasih

kepada :

i
1. Allah S.W.T Tuhan segala Alam dimana penulis selalu berlindung

kepadaNya.

2. Dosen Pembimbing satu yaitu Bapak Indra, M.Si yang bersedia

memberikan saran dan nasehat dalam membimbing dan mengarahkan

penulis selama penyusunan proposal ini.

3. Dosen Pembimbing dua yaitu Bapak Hendy Suhendy, M.Si. yang bersedia

memberikan saran dan nasehat dalam membimbing dan mengarahkan

penulis selama penyusunan proposal ini.

4. Teman-teman seperjuangan penulis dimana mereka selalu memberikan

cerita, support dan dorongan agar penulis dapat berhasil dan cepat

menyelesaikan tugas proposal ini.

Tasikmalaya, Juni 2019

Widiya Lestari

ii
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR..................................................................................................i
DAFTAR ISI...............................................................................................................iii
BAB I............................................................................................................................1
PENDAHULUAN........................................................................................................1
1.1 Latar Belakang........................................................................................................1
1.2 Identifikasi Masalah...............................................................................................3
1.3 Batasan Masalah.....................................................................................................4
1.4 Rumusan masalah...................................................................................................4
1.5 Tujuan.....................................................................................................................5
1.6 Manfaat Penelitian..................................................................................................5
1.7 Lokasi dan waktu penelitian.....................................................................................5
1.8 Rancangan penelitian................................................................................................6
BAB II...........................................................................................................................7
TINJAUAN PUSTAKA..............................................................................................7
2.1 Mareme....................................................................................................................7
2.1.1 Klasifikasi Tanaman......................................................................................7
2.2 Ekstraksi..................................................................................................................8
2.3 Kromatografi Lapis Tipis..........................................................................................9
2.4 Flavonoid................................................................................................................10
2.5 Fenolik.....................................................................................................................11
2.6 Radikal Bebas........................................................................................................12
2.7 Antioksidan............................................................................................................13
2.8 Metode Uji Antioksidan dengan FRAP................................................................16
2.9 Spektrofotometri UV –Vis....................................................................................17
2.10 Sediaan Losion......................................................................................................19
2.11 Kerangka Pemikiran............................................................................................19
2.12 Hipotesis................................................................................................................20

iii
 a. Senyawa fenolik total dan flavonoid total ekstrak daun mareme memiliki
kontributor utama terhadap aktivitas antioksidan....................................................20
BAB III.......................................................................................................................21
METODOLOGI PENELITIAN...............................................................................21
3.1 Alat dan Bahan Penelitian....................................................................................21
3.1.1 Alat Penelitian..............................................................................................21
3.3.2 Bahan Penelitian..........................................................................................21
3.2 Sampel Penelitian..................................................................................................25
3.3 Determinasi Tanaman..........................................................................................25
3.4 Pengolahan Simplisia.................................................................................................25
Pengolahan bahan daun mareme mulai dari sortasi basah untuk menghilangkan pengotor
yang berupa daun cacat atau bahan - bahan asing lainnya. Kemudian dilakukan
pencucian dengan air mengalir sampai pengotor hilang, Lalu ditiriskan dan
dikeringkan dengan oven simplisia pada suhu 40ºC proses pengeringan bertujuan
untuk mengurangi kadar air dan mencegah pertumbuhan bakteri dan jamur.
Kemudian dilakukan sortasi kering untuk memisahkan benda-benda asing dan
bagian-bagian yang tidak diinginkan. Selanjutnya dihaluskan dengan blender
sampai diperoleh serbuk simplisia..........................................................................25
3.5 Pembuatan Ekstrak Etanol daun Mareme................................................................23
3.6 Pengujian Makroskopik dan Mikroskopik...................................................................23
3.6.1 Pengujian Makroskopik...............................................................................23
3.6.2 Pemeriksaan Mikroskopik.......................................................................................27
3.7.1 Pemeriksaan Golongan Senyawa Alkaloid...............................................................27
3.7.2 Pemeriksaan Golongan Senyawa Tanin dan Polifenol.......................................27
3.7.3 Pemeriksaan Golongan Senyawa Flavonoid.......................................................28
3.7.4. Pemeriksaan Golongan Senyawa Saponin...............................................................28
3.7.5 Pemeriksaan Golongan Senyawa Steroid dan Triterpenoid.............................28
3.7.6 Pemeriksaan Golongan Senyawa Monoterpenoid dan Seskuiterpenoid...........29
3.7.7 Pemeriksaan Golongan Senyawa Kuinon...........................................................29
3.8 Pemantauan Ekstrak dan Uji Kualitatif Aktivitas Antioksidan dengan
Kromatografi Lapis Tipis (KLT).............................................................................29
3.9 Penentuan kadar Flavonoid total.........................................................................30

iv
 3.10 Penentuan Kadar Fenolik Total...........................................................................30
3.11 Pengujian Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Mareme.....................27
3.12 Penetapan EC50 Ekstrak Daun Mareme...................................................................27
3. 13 Formulasi Sediaan Losion Ekstrak Daun Mareme...................................................27
3.14 Pembuatan Sediaan Losion..................................................................................30
3.15 Evaluasi Sediaan Losion Ekstrak Daun Mareme......................................................30
3.15.1 Organoleptik dan Homogenitas...................................................................30
3.15.2 Daya Sebar....................................................................................................30
3.15.3 Uji PH...........................................................................................................30
3.15.4 Viskositas...........................................................................................................30
Pengukuran viskositas dilakukan dengan menggunakan viskometer Brookfield. Sediaan
losion disimpan dalam wadah, lalu spindel diturunkan ke dalam...................................30
sediaan hingga batas yang ditentukan. Pengukuran dilakukan dengan viskometer
Brookfield dengan kecepatan diatur mulai dari 2, 4, 5, 10, 20, 50 dan 100 rpm, lalu
dibalik dari 100, 50, 20, 10, 5, 4, dan 2 rpm. Dari masing-masing pengukuran dengan
perbedaan rpm dibaca skalanya ketika jarum merah yang bergerak telah stabil. Nilai
viskositasnya lalu dihitung.............................................................................................30
3.15.5 Uji Cycling test..............................................................................................30
3.15.6 Uji Sentrifugasi............................................................................................30
3.16 Penentuan Aktivitas Antioksidan Losion Ekstrak Daun Mareme
(Glochidion arborescens Blume.)..........................................................................30
3.17 Analisis Data..........................................................................................................30
BAB IV........................................................................................................................30
HASIL DAN PEMBAHASAN..................................................................................30
4.1 Determinasi Tanaman.............................................................................................30
4.2 Preparasi Sampel.....................................................................................................30
4.3 Pengujian Makroskopik dan Mikroskopik...............................................................30
4.3.1 Pengujian Makroskopik.......................................................................................30
4.3.2 Pengujian Mikroskopik......................................................................................30
4.4 Hasil Ekstraksi......................................................................................................30
4.5 Hasil Skrining Fitokimia......................................................................................38

v
 4.6 Hasil Pemantauan Ekstrak dan Uji Kualitatif Aktivitas Antioksidan dengan
Kromatografi Lapis Tipis (KLT).............................................................................39
4.7 Hasil Penentuan Kadar Flavonoid Total....................................................................40
4.8 Hasil Penentuan Kadar Fenolik Total......................................................................41
4.9 Hasil Uji Kuantitatif Antioksidan Ekstrak Daun Mareme (Glochidion arborescens.
Blume) dengan Menggunakan Metode FRAP.........................................................43
4.10 . Hasil Pembuatan Sediaan Losion Ekstrak Daun Mareme (Glochidion arborescens
Blume.)...................................................................................................................46
4.11 Hasil Evaluasi Sifat Fisik dan Kimia Sediaan Losion Ekstrak Daun Mareme
(Glochidion arborescens Blume.)...........................................................................48
4.12 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan Sediaan Losion Esktrak Daun Mareme
(Glochidion arborescens Blume.)...........................................................................30
BAB V.........................................................................................................................21
KESIMPULAN DAN SARAN..................................................................................21
5.1 Kesimpulan..........................................................................................................21
5.2 Saran...................................................................................................................21
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai uji aktivitas antioksidan sediaa losion
sebagai tabir surya, pemutih ataupun yang lainnya dari daun mareme (Glochidion
arborescens Blume.)......................................................................................................21
DAFTAR PUSTAKA................................................................................................21
Abdi Redha. 2010. Flavonoid: Struktur, Sifat Antioksidatif Dan Peranannya
Dalam Sistem Biologis. Pontianak : Jurusan Teknologi Pertanian Politeknik
Negeri Pontianak Jurnal Belian Vol. 9 No. 2 Sep. 2010: 196 – 202......................21
Adawiyah, U., Indra., NLD Hidayanti. 2018. “Formulasi Masker Gel peel-of
dari Ekstrak Daun Mareme (Glodhidion borneense, (Mull. Arg.) boerl) dan
UjiAktivitas Antioksidan menggunakan Metode DPPH (1,1-Dipenil-2
pikrihidrazil),” Prodi S1 Farmasi STIKes BTH Tasikmalaya...............................21
Agung Darmawati 2014. Kajian Antioksidan Ekstrak Daun Lima Spesies dari
Famili Cucurbitaceae dengan Metode FRAP dan DPPH [Tesis] Bandung :
Program Studi Magister Farmasi ITB....................................................................21
Akhyar. 2010. Uji Daya Hambat dan Analisis Klt Bioautografi Ekstrak Akar
dan  Buah  Bakau (rhizophora stylosagriff.) terhadap vibrio harveyi. Makassar :
Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin...................21

vi
Amanda Angelina Sinaga, Sri Luliana, Andhi Fahrurroji1 2015. Uji Efektivitas
Antioksidan Losion Ekstrak Metanol Buah Naga Merah (Hylocereus polyrhizus
Britton dan Rose). Tanjungpura : Program Studi Farmasi Fakultas kedokteran,
Universitas Tanjungpura..........................................................................................21
Ansel, C.H. 2011. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Jakarta : Universitas
Indonesia.....................................................................................................................21
Ardhie, M.A., 2011. Radikal bebas dan peran antioksidan dalam mencegah
penuaan, Scientific Journal Of Pharmaceutical Developmentand Medical
Application, 24(1).......................................................................................................21
Azizah, Dyah Nur, Endang Kumolowati dan Fahrauk Faramayuda. 2014.
Penetapan Kadar Flavonoid Metode Alcl3 Pada Ekstrak Metanol Kulit Buah
Kakao (Theobroma cacao L.). Jurnal Ilmiah Farmasi. 2 (2) 45-49......................22
Benzi, I.F.F., dan Strain, J.J. 1996. The Ferric Reducing Ability of Plasma
(FRAP) as a Measure of “Antioxidant Power”: the FRAP Assay, Analitycal
Biochemitical, 239 : 70-76..........................................................................................22
Bogadenta, A., 2012. Antisipasi Gejala Penuaan Dini dengan Kesaktian Ramuan
Herbal. Yogyakarta : Buku Biru. Hal 7, 26.............................................................22
Departemen Kesehatan RI, 2008. Farmakope Herbal Indonesia Edisi 1. Jakarta :
Departemen Kesehatan Republik Indonesia...........................................................22
Dirjen POM. Farmakope Indonesia, Edisi III. Jakarta : Departemen Kesehatan
RI, 1979. Hal 7............................................................................................................22
Chang C, Yang M, Wen H, Chern J 2002 Estimation of total flavonoid content
in propolis by two complementary colorimetric methods. J. Food Drug
Analaysis, 10: 178-182...............................................................................................22
Endarini, L. H. 2016. Farmakognisi dan Fotokimia. Jakarta : Kementrian
Kesehatan Republik Indonesia.................................................................................22
Fidrianny, I. S. H. dan I. M. 2018. “Correlation of phytochemical content with
antioxidant potential of various sweet potato ( Ipomoea batatas ) in West Java,
Indonesia,” 8(1), hal. 25-30. doi: 10.4103/2221-1691.221131.................................22
Ganjar I.G dan Rohaman A. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta :
Pustaka Pelajar..........................................................................................................22
Gholib, G., Rohman, A. 2007. Kimia Farmasi: Analisis. Pustaka Pelajar.
Yogyakarta.................................................................................................................22

vii
Grafianita. 2011 Kadar kurkuminoid, total fenol dan aktivitas antioksidan
simplisia temulawak (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) pada berbagai teknik
pengeringan. Skripsi. Surakarta: Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret.
.....................................................................................................................................22
Halvorsen, B.L., Holte,Kari., Myhrstad, Mari C. W., Barikmo, I.,Hvattum
Erlend, Remberg Siv Fagertun, Wold Anne-Brit, Haffner Karin, Baugerød
Halvard , Andersen Lene Frost , Moskaug Jan, Jacobs David R , Blomhoff Rune
,2002. A Systematic Screening of Total Antioxidant in Dietary Plants, Journal of
Nutrition......................................................................................................................23
Harborne, J. B., 1987, Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan, Edisi kedua, Hal 5, 69-76, diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata
dan Iwang Soedira, ITB Press, Bandung................................................................23
Hanani Endang.S,.2015. Analisis Fitokimia. Jakarta : EGC.................................23
Handayaniy, Gemy. 2016. Pengaruh metode ekstraksi terhadap aktivitas
antimikroba ekstrak methanol daun mimba (azadirachata indica juss) Makassar
: Universitas Negeri (UIN) ALAUDDIN Makassar...............................................23
Harmita, 2014. Analisis Fisikokimia Kromatografi Volume 2 Jakarta : EGC.. .23
Hassanbaglou, B., Hamid, A. A., Roheeyati, A. M., Saleh, N. M., Abdulamir, A.
S., Khatib, A., Sabu, M. C, 2012. Antioxidant Activity of Different Extracts
From Leaves of Pereskia bleo (Cactaceae), Journal of Medicinal Plants Research
Volume 6 (15): 2932-2937..........................................................................................23
Irawan, B., 2010. Peningkatan Mutu Minyak Nilam dengan Ekstraksi dan
Destilasi pada Berbagai Komposisi Pelarut. Semarang : Tesis Universitas
Diponegoro Semarang Indonesia............................................................................23
Jain, S.K., Jain, N. K. 2010. No Title. Multiparticulate Carriers for
SunScreening Agents. Int. J. Cosmet. Sci. Jansen, R., Wang, S.Q., Burn, 89–98.
.....................................................................................................................................23
Kardinan, A., & Mulyani, S., 2010. Potensi Adas (FoeniculumVulgare) Sebagai
Bahan Aktif Lotion Anti Nyamuk Demam Berdarah (Ades aegypti), Bul. Littro.
Vol 21 No. 1................................................................................................................24
Khoddami, A., Wilkes, MA., Roberts, TH., 2013. Techniques for Analysis of
Plant Phenolic Compounds, Molecules, 18 : 2328-2375.........................................24
Masaki, H. 2010. Role of antioxidants in the skin : anti-aging effects. Journal of
Dermatological science. Volume 58, 85 – 90............................................................24

viii
Melly Komala Dewi. 2016. Uji Aktivitas Antioksidan Daun Mareme (Glochidion
arborescens Blume.) Metode DPPH ( I,I- dipenil-2-pikrilhidrazil ) Dengan
Ekstraksi Refluks Bertingkat Menggunakan Spektrofotometri UV-Vis [Skripsi].
Tasikmalaya : Prodi Farmasi STIKes BTH............................................................24
Muchtadi, D. 2013. Antioksidan dan Kiat Sehat di Usia Produktif. Bandung :
Alfabeta. Halaman 91-95..........................................................................................24
Pouillot A, Polla LL, Tacchini P, Neequaye A, Polla A, Polla B 2011. Natural
Antioxidants and their Effects on the Skin. Formulating, Packaging, and
Marketing of Natural Cosmetic Products. Chapter 13, First Edition. Ed. by
Nava Dayan and Lambros Kromidas., John Wiley & Sons, Inc., pp. 239 – 257. 24
Pourmorad, F., Hosseimimehr SJ., S. N. 2006. “No Title,” Antioxidan activity,
phenol and flavonoid content of some selected iranian medical plant, 5(11), hal.
1142–1145...................................................................................................................24
Ramadhan P. 2015. Mengenal Antioksidan. Yogyakarta : Graha Ilmu: 1-9, 19,
22- 23...........................................................................................................................25
Ririn Karina Hasibuan, Andhi Fahrurroji, Eka Kartika Untari 2014. Formulasi
Dan Uji Sifat Fisikokimia Sediaan Losion Dengan Berbagai Variasi Konsentrasi
Vitamin E. Tanjungpura : Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran,
Universitas Tanjungpura..........................................................................................25
Sandra Aulia Mardikasari, Andi Nafisah Tendri Adjeng Mallarangeng, Wa Ode
Sitti Zubaydah, Endeng Juswita 2017. Formulasi dan Uji Stabilitas Lotion dari
Ekstrak Etanol Daun Jambu Biji (Psidium guajava L.) Sebagai Antioksidan.
Kendari : Program Studi Farmasi STIK Avicenna...............................................25
Sandya, dkk 2010. An Update Review On The Genus Glochidion Plant.
Departemen of Pharmacognocy, Nalanda College of Pharmacy Cherlapally
Nalgonda Andhra Pradesh, India Vol 2..................................................................25
Sari A.n, 2015. Antioksidan Alternatif Untuk Menangkal Bahaya Radikal Bebas
Pada Kulit Banda Aceh : Journal of Islamic Science and Technology Vol. 1, No.1
.....................................................................................................................................25
Sayuti, K.; Rina Yenrina 2015. Antioksidan Alami dan Sintetik. Padang : Andalas
Univesity Press...........................................................................................................25
Sochor, J., Zitka O., Skutkova, H., Pavlik, D.,Babula, P., Kriska., B.,Horna, A.,
Adam, V., Provaznik, I., Kizek, R., 2010. Content of Phenolic Compundsand

ix
Antioxidant Capacity in Fruits of Apricot Genotypes, Molecules, 15 (9) : 6285-
6305.............................................................................................................................25
Winarti, Sri. 2010. Makanan Fungsional : Yogyakarta Graha Ilmu...................26
Winarsi, Hery. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta :
Kanisius Deresan.......................................................................................................26
Winston, David G. 2013. Analisis Farmasi. Jakarta : EGC..................................26
Zulkarnain, A.K dan Hidayatu H.S. 2013. Stabilitas fisik dan aktivitas krim w/o
ekstrak etanolik buah mahkota dewa (Phaleria macrocarpha (scheff.) Boerl,)
sebagai tabir surya. Traditional Medicine Journal. Vol.18(2). Hal. 109-117........26

x
xi
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Sinar matahari sebagai sumber kehidupan dibumi ternyata tidak selalu

memberikan dampak yang menguntungkan akan tetapi dapat juga menimbulkan

berbagai kerugian seperti pada kulit manusia. Sinar ultraviolet merupakan komponen

utama sinar matahari menyebabkan terbentuknya radikal bebas yang dapat

mengalami kerusakan pada kulit (Zulkarnain, et al., 2013).

Dalam kondisi yang berlebih sinar UV dapat menimbulkan beberapa masalah

terhadap kulit seperti penuaan dini, penurunan respon imun bahkan dalam waktu

yang lama dapat menyebabkan resiko kanker. Radikal bebas yang dihasilkan akan

menyebabkan kerusakan DNA, yang berdampak pada proliferasi sel secara terus

menerus sehingga menjadi awal terbentuknya kanker. Efek buruk tersebut timbul

karena adanya stress oksidatif yang terjadi setelah adanya paparan sinar UV. Stres

oksidatif merupakan hasil dari ketidakseimbangan antara prooksidan (Reactive

Oxygen Speciest) dan antioksidan (Sari, 2015).

1
 Untuk membantu memulihkan penampilan kulit, dapat dilakukan dengan

penggunaan antioksidan, antioksidan digunakan untuk melindungi kulit dari

kerusakan oksidasi sehingga dapat mencegah penuaan dini (Masaki, 2010).

2
 Antioksidan dapat menghambat produksi ROS dengan cara membelah

langsung, menurunkan jumlah oksidan didalam dan disekitar sel, mencegah ROS

untuk mencapai target biologisnya, membatasi penyebaran oksidan seperti yang

terjadi selama peroksidasi lipid dan menggagalkan stress oksidatif sehingga

mencegah penuaan (Pouillot, et al., 2011).

Mareme (Glochidion arborescens Blume.) dikenal sebagai tumbuhan liar

yang banyak tumbuh di hutan. Bagian kayu dari tumbuhan ini dimanfaatkan sebagai

bahan bangunan, sedangkan bagian daunnya dijadikan sebagai bahan makanan

ataupun lalapan. Menurut hasil penelitian Melly Komala Dewi (2016) bahwa tanaman

daun mareme memiliki aktivitas sebagai antioksidan dengan metode DPPH (I,I-

dipenil-2-pikrilhidrazil) yang diekstraksi menggunakan metode refluks bertingkat

dengan pelarut berbeda kepolaran dan menghasilkan uji aktivitas antioksidan dari

ekstrak N-hexan dengan IC50 91,43 ppm, etil asetat IC50 12,79 ppm dan methanol

dengan IC50 4,45 ppm. Dan menurut hasil penelitian Ulfah Adawiyah (2018),

dihasilkan kadar flavonoid total ekstrak daun mareme sebesar 6,12 mg QE/gr ekstrak

sedangkan kadar fenolik totalnya sebesar 72,28 mg GAE/gr ekstrak. Dan jumlah total

aktivitas antioksidan daun mareme (Glochidion arborescens Blume.) didapat nilai

IC50 sebesar 5,35 ppm.

Penampilan kulit yang halus tanpa keriput dan berseri meski umur seseorang

sudah tidak remaja lagi, menjadi dambaan setiap wanita (Bogadenta, 2012). Berbagai

cara diupayakan untuk mencegah ataupun memperbaiki dampak penuaan.

Penggunaan kosmetik antioksidan merupakan salah satu upaya yang sering dilakukan

untuk mencegah penuaan (Ardhie, 2011).

Salah satu kosmetik perawatan kulit untuk mencegah penuaan dini yaitu

dibuat dalam bentuk sediaan losion, dimana sediaan losion memiliki keunggulan

yaitu mudah menyebar rata, mudah dibersihkan dan dicuci oleh air dan juga tipe

losion yang paling banyak digunakan untuk dermatologi topikal kerena losion dapat

diformulasikan menjadi produk kosmetik yang elegan (Mardikasari,et al.,2017).

Berdasarkan uraian tersebut, maka perlu dilakukan penelitian dengan

menentukan flavonoid total dan fenolik total ekstrak etanol daun mareme

(Glochidion arborescens Blume.) Selanjutnya dibuat formula sediaan losion dari

ekstrak tersebut dan diuji aktivitas antioksidan sediaannya menggunakan metode

FRAP.

1.2 Identifikasi Masalah

1.2.1 Sinar ultraviolet yang terkandung dalam sinar matahari dapat berdampak

buruk pada kulit

1.2.2 Paparan sinar UV menyebabkan terbentuknya radikal bebas dari ROS

(Radical Oxygen Species) yang merupakan molekul tidak stabil.

1.2.3 Kerusakan komponen sel menyebabkan penuaan dini pada kulit yang ditandai

dengan kulit kering, keriput dan kusam

1.2.4 untuk mengetahui aktivitas kandungan antioksidan daun mareme dengan

metode Ferric Reducing Antioxidant Power ( FRAP )

1.2.5 untuk mengetahui apakah sediaan losion akan berpengaruh terhadap aktivitas

antioksidan.

1.3 Batasan Masalah

Batasan masalah penelitian lebih dititik beratkan kepada melakukan

ujiaktivitas antioksidan dari ekstrak etanol daun mareme (Glochidion arborescens

Blume.) yang kemudian dijadikan formulasi sediaan losion dengan menggunakan

metode FRAP dan pembanding vitamin C.

1.4 Rumusan masalah

Rumusan masalah dari penelitian ini adalah :

1.4.1 Apakah senyawa flavonoid dan fenolik memberikan kontributor utama

terhadap aktivitas antioksidan daun mareme (Glochidion arborescens

Blume.)?

1.4.2 Berapa nilai EC50 dari ekstrak etanol daun mareme (Glochidion arborescens

Blume.) dengan menggunakan metode FRAP ?

1.4.3 Apakah ada perubahan nilai EC50 dari ekstrak etanol daun mareme (Glochidion

arborescens Blume.) sebelum dan sesudah dibuat sediaan losion ?

1.5 Tujuan

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui senyawa flavonoid dan

fenolik apakah memberikan kontributor utama terhadap aktivitas antioksidan daun

mareme dan berapa nilai EC50 dari ekstrak etanol daun mareme (Glochidion

arborescens Blume.) dengan menggunakan metode FRAP. Apakah ada perubahan

nilai EC50 dari sebelum dan sesudah dibuat sediaan losion.

1.6 Manfaat Penelitian

Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai

stabilitas aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun mareme (Glochidion arborescens

Blume.).

1.7 Lokasi dan waktu penelitian

Penelitian dilakukan di Laboratorium Farmakognosi dan Kimia STIKes Bakti

Tunas Husada Tasikmalaya pada bulan November – Juni 2019

 1.8 Rancangan penelitian

Tabel 1.1 Rancangan Pelaksanaan penelitian

Kegiatan November Februari Maret April Mei Juni

1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
Pengumpulan bahan

Determinasi
Tanaman
Ekstraksi

Skrining fitokimia

Penentuan flavonoid
total dan fenolik
total
Pengujian
antioksidan metode
FRAP
Formulasi sediaan
losion dan evaluasi

Pengujian
antioksidan sediaan
losion dengan
metode FRAP
pengolahan data
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

.1 Mareme

.1.1 Klasifikasi Tanaman

Gambar 2.1 Daun mareme

Kingdom : Plantae

Divisi : Magnoliophyta

Class : Magnoliopsida

Ordo : Euphorbiales

Famili : Euphorbiaceae / Phyllanthaceae

Genus : Glochidion

Species : Glochidion arborescens Blume.

7
 Sinonim Glochidion arborescens Blume, terdiri dari Glochidion microbotrys

Hook. f.,Glochidion trilobum ridley, Phyllanthus borneensis Muell.Arg. Nama umum

diantaranya, Mareme (Sunda), Dempul Lelet (Jawa). Mareme termasuk dalam marga

Glochidion. Kandungan senyawa yang terkandung dalam tumbuhan bermarga

Glochidio diantaranya sesquiterpenoid, triterpenoid, glochidonol, glochidiol,

glochidon, serta glikosida (Sandhya, 2010).

.2 Ekstraksi

Ekstraksi atau penyarian merupakan proses pemisahan senyawa dari matriks

atau simplisia dengan menggunakan pelarut yang sesuai. Tujuan ekstraksi adalah

menarik atau memisahkan senyawa dari campurannya atau simplisia. Sifat fisik dan

sifat kimia dari senyawa yang terkandung dalam simplisia, pelarut yang digunakan

dan alat tersedia merupakan hal yang harus diperhatikan dalam penentuan metode

ekstraksi yang akan digunakan. Faktor yang perlu diperhatikan dalam melakukan

ekstraksi adalah struktur untuk setiap senyawa, tekanan dan suhu (Hanani, 2015).

Ekstraksi refluks merupakan metode ekstraksi yang dilakukan pada titik didih

pelarut tersebut, selama waktu dan sejumlah pelarut tertentu dengan adanya

pendingin balik (kondensor). Kelebihan metode refluks adalah padatan yang memiliki

tekstur kasar dan tahan terhadap pemanasan langsung dapat diekstrak dengan metode

ini. Kelemahan metode ini adalah membutuhkan jumlah pelarut yang banyak (Irawan,

B., 2010).
 Prinsip kerja pada metode refluks yaitu Penarikan komponen kimia yang

dilakukan dengan cara sampel dimasukkan ke dalam labu alas bulat bersama-sama

dengan cairan penyari lalu dipanaskan, uap-uap cairan penyari terkondensasi pada

kondensor bola menjadi molekul-molekul cairan penyari yang akan turun kembali

menuju labu alas bulat, akan menyari kembali sampel yang berada pada labu alas

bulat, demikian seterusnya berlangsung secara berkesinambungan sampai penyarian

sempurna, penggantian pelarut dilakukan sebanyak 3 kali setiap 3-4 jam. Filtrat yang

diperoleh dikumpulkan dan dipekatkan. (Akhyar, 2010).

2.3 Kromatografi Lapis Tipis

Teknik kromatografi lapis tipis (KLT) sangat bermanfaat untuk analisis obat

dan bahan lain dalam labolatorium karena hanya memerlukan peralatan sederhana,

waktu cukup singkat (15-60 menit), dan jumlah zat yang diperiksa cukup kecil (kira-

kira 0,01 g senyawa murni atau 0,1 g simplisia). Selain itu, KLT tidak memerlukan

ruang yang besar dan teknik pengerjaannya sederhana.

Kebaikan teknik KLT antara lain: Proses lebih cepat dan lebih terulang dari

pada kromatografi kertas, untuk menyempurnakan pemisahan lempeng dapat dibuat

dengan campuran adsorben, daerah bercak lebih mampat dan jenis pereaksi

penyemprot lebih banyak, termasuk yang bersifat korosif dapat digunakan bila

adsorben bukan selulosa. Keburukan teknik ini kemungkinan hanya pada prosedur
pembuatan lempeng yang memerlukan tambahan waktu, kecuali apabila telah tersedia

lempeng yang diproduksi secara komersial

Penggunaan KLT digunakan untuk memeriksa komposisi campuran secara

cepat, untuk menentukan kondisi percobaan kromatografi kolom, untuk mengetahui

kesempurnaan suatu reaksi, untuk mengidentifikasi obat, ekstrak tanaman, preparat

biokimia, mendeteksi kontaminan, pemalsuan dan lain-lain.

Kromatografi lapis tipis merupakan metode pemisahan fisikokimia yang

didasarkan atas penyerapan, partisi (pembagian), atau gabungannya. Lapisan pemisah

tipis yang terdiri atas butir penyerap atau penyangga dilapiskan pada lempeng kaca,

logam dan lain-lain. Untuk mendapatkan kondisi jenuh dalam bejana kromatografi,

dinding bejana dilapisi dengan lembaran kertas saring, fase gerak dituang kedalam

bejana sehingga kertas saring basah dan dalam bejana terdapat fase gerak setinggi 5-

10 mm. Bejana ditutup dan dibiarkan selama satu jam (Harmita, 2014)

2.4 Flavonoid

Flavonoid merupakan salah satu kelompok senyawa metabolit sekunder yang

paling banyak ditemukan didalam jaringan tanaman. Flavonoid termasuk dalam

golongan senyawa phenolik dengan struktur kimia C6-C3-C6. Yaitu dua cincin

aromatik yang dihubungkan dengan 3 atom C, biasanya dengan ikatan atom O yang

berupa ikatan heterosiklik yang mengandung oksigen dan bentuk teroksidasi cincin

ini dijadikan dasar pembagian flavonoid kedalam sub-sub kelompoknya. Sistem

penomoran digunakan untuk membedakan posisi karbon disekitar molekulnya

(Redha, 2010).

Flavonoid mempunyai aktivitas antioksidan yang paling potensial, karena

struktur kimianya, yaitu mengandung grup o-difenol, suatu ikatan rangkap 2-3 yang

berkonjugasi dengan fungsi 4-okso, dan grup hidroksil pada posisi 3 dan 5. Aktivitas

antioksidan flavonoid dipengaruhi oleh hidroksilasi dan terdapatnya gugus gula.

Flavonoid merupakan antioksidan yang efektif untuk inaktivasi radikal hidroksil dan

peroksil. Flavonoid dapat membentuk ikatan kompleks dengan ion logam, dan

menghambat inisiasi metal untuk melakukan oksidasi lipid. Senyawa flavonoid

tertentu yang memiliki struktur mirip dengan vitamin E mempunyai aktivitas

antioksidan pada sistem lipid, yaitu melalui reaksi dengan anion superoksida dan

radikal peroksil lipid, serta membentuk kompleks dengan besi, sehingga mencegah

pembentukan ROS. Flavonoid juga dapat menjaga vitamin C, khususnya dengan

adanya ion logam, yang secara normal mengoksidasi vitamin C. Sebagai contoh,

kuersetin, morin, mirisetin, kaemferol, asam tanat, asam ellagat memiliki aktivitas

antioksidan yang dimaksud (Muchtadi, 2013).

2.5 Fenolik

Senyawa fenolik ini merupakan molekul yang dapat bertindak sebagai

antioksidan untuk mencegah penyakit jantung, mengurangi peradangan, menurunkan

kejadian kanker dan diabetes, serta mengurangi tingkat mutagenesis pada sel
manusia. Perlindungan yang diperoleh dari mengonsumsi produk tanaman seperti

buah-buahan, sayuran dan kacang-kacangan sebagian besar terkait dengan adanya

senyawa fenolik pada tanaman tersebut (Khoddami, et al.,2013).

Senyawa fenolik dapat memberikan perlindungan sebagai antioksidan

dikarenakan senyawa fenolik dapat bereaksi dengan reactive oxygen species (ROS)

dan menghilangkan aktivitas radikalnya sehingga tidak berbahaya lagi terhadap sel

tubuh manusia (Sochor, 2010).

2.6 Radikal Bebas

Radikal bebas adalah molekul yang kehilangan elektron, sehingga molekul

tersebut menjadi tidak stabil dan selalu berusaha mengambil elektron dari molekul

atau sel lain. Radikal bebas dapat dihasilkan dari hasil metabolisme tubuh seperti

pada waktu kita bernapas (hasil samping proses oksidasi atau pembakaran), pada saat

terjadi infeksi. Pada saat terjadi infeksi, radikal bebas diperlukan untuk membunuh

mikroorganisme penyebab infeksi. Tetapi paparan radikal bebas yang berlebihan

dapat menyebabkan kerusakan sel dan pada akhirnya dapat menyebabkan kematian

sel. Radikal bebas bersifat reaktif, dapat menyebabkan kerusakan sel, mengurangi

kemampuan adaptasi sel, bahkan kematian sel sehingga menyebabkan timbulnya

penyakit (Ramadhan, 2015).

Radikal bebas dapat diklasifikasi berdasarkan sumbernya yaitu dari sumber

endogen dan eksogen. Secara endogen yaiu, sebagai respon normal dari rantai
peristiwa biokimia dalam tubuh, radikal bebas yang terbentuk dan berpengaruh di

dalam sel (intrasel) maupun ekstrasel. Radikal endogen terbentuk sebagai sisa proses

metabolisme (proses pembakaran) protein, karbohidrat, dan lemak pada mitokondria,

proses inflamasi atau peradangan, reaksi antara besi logam transisi dalam tubuh,

fagosit, xantin oksidase, peroksisom, maupun pada kondisi iskemia. Secara endogen,

radikal bebas dapat timbul melalui beberapa mekanisme yaitu : oto-oksidasi, aktivitas

oksidasi (misalnya: siklooksigenase, lipoksigenase, dehidrogenase dan peroksidase),

sistem transpor elektron (Sayuti, 2015).

Sumber eksogen, pencemaran udara, penipisan lapisan ozon, sumber radiasi,

bahan kimia, toksin, asap rokok, mikroorganisme yang patologik, sinar UV yang

akan menigkatkan kadar radikal bebas secara mendadak. Dan pada sebagian obat

seperti anastesi dan pestisida serta pelarut yang digunakan untuk industri merupakan

sumber eksogen radikal bebas (Ramadhan, 2015).

2.7 Antioksidan

Secara kimia senyawa antioksidan adalah senyawa pemberi elektron (elektron

donor). Secara biologis, pengertian antioksidan adalah senyawa yang dapat

menangkal atau meredam dampak negatif oksidan. Antioksidan bekerja dengan cara

mendonorkan satu elektronnya kepada senyawa yang bersifat oksidan sehingga

aktivitas senyawa oksidan tersebut dapat dihambat (Winarti, 2010).

 Antioksidan dibutuhkan tubuh untuk melindungi tubuh dari serangan radikal

bebas. Antioksidan adalah suatu senyawa atau komponen kimia yang dalam kadar

atau jumlah tertentu mampu menghambat atau memperlambat kerusakan akibat

proses oksidasi. Tubuh manusia tidak mempunyai cadangan antioksidan dalam

jumlah berlebih, sehingga apabila terbentuk banyak radikal maka tubuh

membutuhkan antioksidan eksogen. Adanya kekhawatiran kemungkinan efek

samping yang belum diketahui dari antioksidan sintetik menyebabkan antioksidan

alami menjadi alternatif yang sangat dibutuhkan (Sayuti, 2015).

Berdasarkan fungsi dan mekanisme kerjanya, yaitu antioksidan terdiri dari

antioksidan primer, sekunder dan tersier.

A. Antioksidan primer

Antioksidan primer bekerja untuk mencegah pembentukan senyawa radikal

baru, yaitu mengubah radikal bebas yang ada menjadi molekul yang berkurang

dampak negatifnya sebelum senyawa radikal bebas bereaksi. Antioksidan primer

mengikuti mekanisme pemutusan rantai reaksi radikal dengan mendonorkan atom

hidrogen secara cepat pada suatu lipid yang radikal, produk yang dihasilkan lebih

stabil dari produk awal. Antioksidan primer adalah antioksidan yang sifatnya sebagai

pemutus reaksi berantai (chain-breaking antioxidant) yang bisa bereaksi dengan

radikal-radikal lipid dan mengubahnya menjadi produk-produk yang lebih stabil.

Suatu molekul dapat beraksi sebagai antioksidan primer jika dapat memberikan atom

hidrogen secara cepat kepada radikal lipid dan radikal yang berasal dari antioksidan
ini lebih stabil dari pada radikal lipidnya, atau diubah menjadi produk-produk lain

yang stabil. Contoh antioksidan primer adalah Superoksida Dismutase (SOD), enzim

katalase, glutation peroksidase (Sayuti, 2015).

B. Antioksidan sekunder

Antioksidan sekunder bekerja dengan cara mengkelat logam yang

bertindak sebagai prooksidan, menangkap radikal dan mencegah terjadinya reaksi

berantai. Antioksidan sekunder berperan sebagai pengikat ion-ion logam, penangkap

oksigen, pengurai hidroperoksida menjadi senyawa non radikal, penyerap radiasi UV

atau deaktivasi singlet oksigen. Contoh antioksidan sekunder adalah vitamin E,

vitamin C, β-caroten, isoflavon, bilirubin dan albumin. Potensi antioksidan ini dengan

cara memotong reaksi oksidasi berantai dari radikal bebas atau dengan cara

menangkapnya (scavenger free radical) sehingga radikal bebas tidak beraksi dengan

komponen seluler (Sayuti, 2015).

C. Antioksidan Tersier

Kelompok antioksidan tersier meliputi sistem enzim DNA-Repair dan

metionin sulfoksida reduktase. Enzim-enzim ini berperan dalam perbaikan

biomolekuler yang rusak akibat reaktivitas radikal bebas. Kerusakan DNA yang

terinduksi senyawa radikal bebas dicirikan oleh rusaknya Single dan Double strand

baik gugus non-basa maupun basa (Winarsi, 2007).

2.8 Metode Uji Antioksidan dengan FRAP

Beragam metode pengukuran telah dikembangkan untuk mengukur

karakteristik total antioksidan, tetapi tidak ada yang benar-benar ideal. Metode

pengukuran aktivitas antioksidan tersebut akan mendeteksi karakteristik yang berbeda

dari antioksidan dalam sampel, hal ini menjelaskan mengapa metode pengukuran

aktivitas yang berbeda akan mengacu pada pengamatan mekanisme kerja antioksidan

yang berbeda pula (Hasannbaglou, et al., 2012).

Benzie & Strain (1996) mengemukakan bahwa metode FRAP adalah metode

yang digunakan untuk menguji antioksidan dalam tumbuh-tumbuhan. Kelebihan

metode FRAP ini yaitu metodenya murah, reagennya mudah disiapkan dan cukup

sederhana dan cepat. Metode ini dapat menentukan kandungan antioksidan total dari

suatu bahan berdasarkan kemampuan senyawa antioksidan untuk mereduksi ion Fe3+

menjadi Fe2+ sehingga kekuatan antioksidan suatu senyawa dianalogikan dengan

kemampuan mereduksi dari senyawa tersebut (Halvorsen, et al., 2002).

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan sebelumnya pada penelitian ini

akan dilakukan pengujian aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol daun mareme

(Glochidion arborescens Blume.) dengan menggunakan metode FRAP (Ferric

Reducing Antioxidant Power). Prinsip dari uji FRAP adalah reaksi transfer elektron

dari antioksidan ke senyawa Fe3+ TPTZ. Senyawa Fe3+ TPTZ sendiri mewakili

senyawa oksidator yang mungkin terdapat dalam tubuh dan dapat merusak sel-sel

(Hasannbaglou, et al.,2012).
2.9 Spektrofotometri UV –Vis

Spektrofotometri UV-Visible merupakan hasil interaksi antara radiasi

elektromagnetik (REM) dan molekul REM merupakan bentuk energi yang

mempunyai sifat gelombang dan partikel. Karena bersifat sebagai gelombang,

beberapa parameter perlu diketahui misalnya panjang gelombang, frekuensi, bilangan

gelombang, dan serapan REM mempunyai vektor elektrik dan vektor magnetik yang

bergetar dalam bidang-bidang yang tegak lurus atau satu sama lain masing-masing

tegak lurus pada arah perambatan radiasi (Harmita, 2014).

Radiasi elektromagnetik sinar ultraviolet dan sinar tampak merupakan energi

yang merambat dalam bentuk gelombang. Jika suatu molekul dikenai suatu radiasi

elektromagnetik pada frekuensi yang sesuai maka energi molekul tersebut

ditingkatkan ke level yang lebih tinggi dan terjadi penyerapan (absrobsi) energi oleh

molekul. Spektrum UV-Vis merupakan korelasi antara absorbansi dan panjang

gelombang membentuk pita spektrum. Terbentuknya pita spektrum UV-Vis

disebabkan oleh terjadinya eksitasi elektronik lebih dari satu macam pada gugus

molekul yang sangat kompleks. Secara kualitatif data yang diperoleh dari

spektroskopi UV-Vis adalah panjang gelombang maksimal, intensitas, efek pH dan

pelarut. Sedangkan secara kuantitatif, suatu berkas radiasi dikenakan pada cuplikan

(larutan sampel) dan intensitas sinar radiasi yang diteruskan diukur besarannya.

Radiasi yang diserap oleh cuplikan ditentukan dengan membandingkan intensitas

sinar yang diteruskan dengan intensitas sinar yang diserap. Spektrofotometer yang
sesuai untuk pengukuran didaerah spektrum ultraviolet dan sinar tampak terdiri atas

suatu sistem optik dengan kemampuan menghasilkan sinar monokromatis dalam

jangkauan panjang gelombang 200 – 800 nm (Ganjar dan Rohman, 2007).

Gambar 2.2 Diagram skematik spektrofotometer UV-Vis (Watson,2013)

Komponen- komponen spektrofotometri UV-Vis terdiri dari :

1. sumber cahaya lampu deuterium untuk daerah UV dari 190 sampai 350 nm dan

lampu halogen kuartz atau lampu tungsten untuk daerah visibel dari 350-900

nm.

2. Monokromator digunakan untuk menghamburkan cahaya kedalam panjang

gelombang dan unsur-unsurnya, yang diseleksi lebih lanjut dengan celah.

Monokromator berotasi sehingga rentang panjang gelombang dilewatkan

melalui sampel ketika instrumen tersebut memindai sepanjang spektrum.

3. Optik dirancang untuk memisahkan berkas cahaya sehingga berkas tersebut

melewati dua kompartemen sampel, dan pada instrumen berkas rangkap

 tersebut, larutan blanko dapat digunakan dalam satu kompartemen untuk

memperbaiki pembacaan atau spektrum sampel tersebut. Blangko umumnya

adalah pelarut yang dapat melarutkan sampel.

2.10 Sediaan Losion

Losion adalah sediaan cair berupa suspensi atau disfersi. Dapat berbentuk

suspensi zat padat dalam bentuk serbuk halus dengan bahan pensuspensi yang cocok

atau emulsi tipe minyak dalam air dengan surfaktan yang cocok. Pemelihan sediaan

losion karena merupakan sediaan yang berbentuk emulsi yang mudah dicuci dengan

air dan tidak lengket dibandingkan dengan sediaan topikal lainnya (Depkes, 1979).

Losion digunakan untuk permukaan luar kulit sebagai pelindung, dengan

konsistensi yang dihasilkan memungkinkan pemakaian yang cepat dan merata pada

permukaan kullit, sehingga mudah menyebar dan dapat segera kering setelah

pengolesan serta meninggalkan lapisan tipis pada permukaan kulit. (Kardinan dan

Mulyani, 2010).

2.11 Kerangka Pemikiran

Antioksidan alami lebih diminati dibandingkan antioksidan sintetik sehingga

antioksidan alami dapat menjadi salah satu alternatif yang digunakan. Antioksidan

adalah senyawa yang mampu melindungi sel dari bahaya radikal bebas reaktif.
Antioksidan merupakan senyawa pemberi elektron atau reduktan. Senyawa ini

memiliki berat molekul kecil tetapi mampu menginaktivasi berkembangnya reaksi

oksidasi dengan cara mencegah terbentuknya radikal (Winarsi,2007). Antioksidan

sangat bermanfaat bagi tubuh sebagai penangkal radikal bebas. Salah satu bahan alam

yang memiliki potensi antioksidan yang kuat yaitu daun mareme. Menurut hasil

penelitian Melly Komala Dewi (2016) bahwa tanaman daun mareme memiliki

akivitas sebagai antioksidan yang sangat kuat dengan nilai IC50 sebesar 4,457 ppm.

Untuk menarik senyawa metabolit dari daun mareme dilakukan ekstraksi

menggunakan metode refluks dengan pelarut etanol 96 % yang kemudian diuji

aktivitas dari ekstrak. Permasalahan Paparan sinar UV menimbulkan banyak efek

samping pada kulit, seperti penuaan dini, kanker kulit dan penurunan kemampuan

respon imun. Penggunaan kosmetik antioksidan merupakan salah satu upaya yang

sering dilakukan untuk mencegah penuaan. Salah satu kosmetik perawatan kulit

untuk mencegah penuaan kulit yaitu losion.

2.12 Hipotesis

a. Senyawa fenolik total dan flavonoid total ekstrak daun mareme memiliki

kontributor utama terhadap aktivitas antioksidan

b. Ekstrak etanol daun mareme memiliki aktivitas antioksidan berdasarkan

metode FRAP

c. Daun mareme bisa dibuat formula sediaan losion dengan nilai EC 50 yang

dengan nilai EC50 ekstrak.

 BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

.1 Alat dan Bahan Penelitian

.1.1 Alat Penelitian

Alat yang digunakan dalam penelitian adalah blender (Philip®), neraca

analitik (Excellen®), corong pisah, erlenmeyer (pyrex®), batang pengaduk, spatula,

labu ukur, gelas ukur, gelas kimia, cawan porselin, pH meter universal, cawan petri,

pipet tetes, mikropipet, tabung reaksi (pyrex®), mortar, stemper, rotary evaporator

(Eyela®), viskometer Brookfield, spektrofotometer UV-Vis (Genesis).

.3.2 Bahan Penelitian

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun mareme,

TPTZ 2,4,6-tripyridil, s -triazine, asam askorbat (Merck), etanol 96 %, asam

galat (Merck), folin-ciocalteu (Merck), kuersetin (Merck), etil asetat, N-

hexan, aquadest, kloroform, HCl, amil alkohol, gelatin, FeCl 3, ammonia

encer, serbuk Zn, CH3COOH glasial, H2SO4, gliserin, paraffin cair, natrium,

asam stearat, trietanolamin, setil alkohol, metil paraben, parfum.

.2 Sampel Penelitian

Sampel yang digunakan dalam penelitian adalah daun mareme (Glochidion

arborescens Blume.) yang diambil dari Desa Sindangkerta, Kecamatan Cipatujah,

Kabupaten Tasikmalaya.

.3 Determinasi Tanaman

Daun mareme (Glochidion arborescens Blume.) yang diambil dari Desa

Sindangkerta, Kecamatan Cipatujah, Kabupaten Tasikmalaya yang dideterminasi di

Labolatorium Taksonomi Tumbuhan Fakultas Biologi FMIPA UNPAD.

3.4 Pengolahan Simplisia

Pengolahan bahan daun mareme mulai dari sortasi basah untuk

menghilangkan pengotor yang berupa daun cacat atau bahan - bahan asing lainnya.

Kemudian dilakukan pencucian dengan air mengalir sampai pengotor hilang, Lalu

ditiriskan dan dikeringkan dengan oven simplisia pada suhu 40ºC proses pengeringan

bertujuan untuk mengurangi kadar air dan mencegah pertumbuhan bakteri dan jamur.

Kemudian dilakukan sortasi kering untuk memisahkan benda-benda asing dan

bagian-bagian yang tidak diinginkan. Selanjutnya dihaluskan dengan blender sampai

diperoleh serbuk simplisia.

3.5 Pembuatan Ekstrak Etanol daun Mareme

Pembuatan ekstrak kental etanol daun mareme dilakukan dengan metode

refluks. Serbuk simplisia daun mareme ditimbang 250 gram, dimasukkan kedalam

labu alas bulat yang diisi dengan cairan penyari etanol 96% sampai serbuk simplisia

terendam kurang lebih 2 cm diatas permukaan simplisia, atau 2/3 volume labu

kemudian labu alas bulat dipasang kuat pada statif dan ditempatkan diatas hot plate

lalu dipasang kondensor pada labu alas bulat yang dikuatkan pada klem dan statif.

Aliran air dan pemanas dijalankan sesuai dengan suhu pelarut yang digunakan.

Setelah 4 jam dilakukan penyaringan, filtrat ditampung dalam wadah penampung dan

ampasnya ditambah lagi dengan etanol 96% dan dikerjakan seperti semula. Ekstraksi

dilakukan selama 3-4 jam. Filtrat yang diperoleh dipekatkan dengan rotary

evaporator (Handayany, 2016).

3.6 Pengujian Makroskopik dan Mikroskopik

.6.1 Pengujian Makroskopik

Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan menggunakan alat seperti kaca

pembesar atau tanpa menggunakan alat, dengan mengamati secara visual meliputi

bentuk, warna bau dan rasa (Depkes RI, 2008).

3.6.2 Pemeriksaan Mikroskopik

Pemeriksaan mikroskopik dilakukan dengan mengamati menggunakan alat

misalnya mikroskop untuk mengetahui fragmen khas yang terdapat dalam daun

mareme. Proses pemeriksaan dilakukan dengan meletakan serbuk simplisia diatas

kaca objek, serbuk tersebut ditetesi dengan larutan kloralhidrat 70%. Kemudian

diamati dengan menggunakan mikroskop (Depkes RI, 2008).

3.7 Skrining Fitokimia

3.7.1 Pemeriksaan Golongan Senyawa Alkaloid

Ekstrak yang telah disiapkan digerus dalam mortar, kemudian ditambahkan

ammonia encer dan beberapa ml kloroform sambil digerus. Kemudian disaring

dikocok dengan HCl 2N, lapisan asam diambil kemudian dibagi 3 tabung. Tabung

pertama sebagai blanko, tabung kedua ditetesi pereaksi Mayer, terdapatnya endapan

putih menunjukan adanya alkaloid, tabung ketiga direaksikan dengan dragendrop,

terbentuknya endapan jingga yang berarti terdapat senyawa alkaloid (Endarini, 2016).

.7.2 Pemeriksaan Golongan Senyawa Tanin dan Polifenol

Dengan cara ekstrak digerus dalam mortir ditambahkan air kemudian

dipanaskan, filtrat dibagi 2, bagian pertama ditambahkan FeCl3 terbentuk warna

hitam positif adanya tanin dan polifenolat dan pada filtrat yang kedua ditambahkan

gelatin 1% adanya endapan putih positif adanya tanin (Endarini, 2016).

.7.3 Pemeriksaan Golongan Senyawa Flavonoid

Ekstrak digerus dalam mortir dan dipanaskan dengan air diatas penangas air,

kemudian disaring. Filtrat yang dihasilkan dimasukkan kedalam tabung reaksi.

Setelah itu, ditambahkan serbuk Zn, larutan alkohol asam klorida (1:1) dan amil

alkohol. Kemudian campuran dikocok kuat-kuat. Adanya flavonoid akan

menyebabkan filtrat berwarna merah kuning atau jingga yang dapat ditarik oleh amil

alkohol (Endarini, 2016)

3.7.4. Pemeriksaan Golongan Senyawa Saponin

Ekstrak masukan kedalam tabung reaksi kemudian tambahkan 10 ml air

panas, dinginkan lalu kocok kuat-kuat dengan selama 10 detik. Kemudian amati ada

tidaknya buih jika terbentuk buih ± 3 cm dan dengan penambahan 1 tetes HCl 2N

buih tidak hilang maka menunjukan adanya saponin (Endarini, 2016).

.7.5 Pemeriksaan Golongan Senyawa Steroid dan Triterpenoid

Ekstrak disari dengan eter, kemudian diuapkan sampai kering, residu yang

dihasilkan diteteskan pereaksi Lieberman Burchad, terbentuknya warna hijau - biru

menunjukan adanya steroid, dan jika terbentuk warna ungu positif mengandung

senyawa triterpenoid (Endarini, 2016).

.7.6 Pemeriksaan Golongan Senyawa Monoterpenoid dan Seskuiterpenoid

Ekstrak disari dengan eter, kemudian diuapkan sampai kering. Penambahan

pereaksi vanillin asam sulfat atau anisaldehid-asam sulfat pada residu yang terbentuk

menghasilkan warna-warna yang menunjukan adanya senyawa monoterpenoid dan

seskuiterpenoid (Endarini, 2016).

.7.7 Pemeriksaan Golongan Senyawa Kuinon

Ekstrak digerus dan dipanaskan diatas penangas air, kemudian disaring.

Menunjukan adanya senyawa kuinon ketika filtrat yang diperoleh ditetesi larutan

NaOH, terbentuknya warna kuning sampai merah (Endarini, 2016).

.8 Pemantauan Ekstrak dan Uji Kualitatif Aktivitas Antioksidan dengan

Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Pengujian ini dilakukan untuk mengetahui pola kromatografi dari senyawa

yang terkandung pada ekstrak. Serta mencari eluent yang cocok untuk memisahkan

senyawa yang ditandai dengan timbulnya bercak dan juga mengetahui jumlah

komponen senyawa yang terdapat dalam ekstrak yang nantinya ekstrak etanol akan di
totolkan pada lempeng silika gel GF254 kemudian dielusi dengan menggunakan fase

gerak yang sesuai lalu diamati pada sinar tampak, sinar UV λ 254 nm dan UV λ 366

nm. Serta identifikasi dengan menggunakan larutan FRAP 0,8 %. Jika positif

mengandung antioksidan maka akan terbentuk bercak berwarna kuning sampai hijau

dengan latar belakang warna biru pada silika.

.9 Penentuan kadar Flavonoid total

Total konten flavonoid diukur menggunakan metode Chang dengan sedikit

modifikasi. Absorbansi dibaca pada λ 415 nm. Tiga replikasi pengulangan dilakukan

pada ekstrak. Larutan kuersetin (40-120 μg/mL) digunakan untuk mendapatkan kurva

kalibrasi. Total kandungan flavonoid dinyatakan sebagai setara gram kuersetin per

100 g ekstrak (g QE / 100 g) (Fidrianny, 2018).

.10 Penentuan Kadar Fenolik Total

Penetapan kadar Fenolik total ditentukan menggunakan reagen Folin-

Ciolcalteu. Absorbansi diamati pada panjang gelombang 765 nm. Analisis dilakukan

dalam tiga kali pengulangan pada ekstrak. Larutan standar asam galat (80-200

μg/mL) digunakan untuk mendapatkan kurva kalibrasi. Total konten fenolik

dilaporkan sebagai setara gram asam galat per 100 g ekstrak (g GAE /100 g)

(Pourmorad, 2006).
.11 Pengujian Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Mareme

Untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak daun mareme maka

dilakukan pengukuran aktivitas dengan menggunakan spektrofotometri UV-Vis

Sampel berupa ekstrak daun mareme dan pembandingnya asam askorbat (vitamin C).

Dibuat lima variasi konsentrasi sampel uji atau pembanding, kemudian diambil 1 mL

dicampurkan dengan 1 mL FRAP 50 ppm dengan perbandingan volume 1:1.

Campuran tersebut diinkubasi selama 30 menit dan absorbansi diukur pada panjang

gelombang 593 nm. Buffer asetat digunakan sebagai blanko, analisis dilakukan

pengulangan tiga kali untuk masing-masing ekstrak dan pembanding. Proses inkubasi

ini bertujuan untuk memberikan waktu pada larutan sampel dan larutan pembanding

untuk bereaksi dengan FRAP (Fidrianny, 2018).

3.12 Penetapan EC50 Ekstrak Daun Mareme

Parameter yang bisa digunakan untuk menginterpretasikan hasil uji aktivitas

antioksidan dengan metode FRAP adalah nilai EC50, yaitu bilangan yang menunjukan

konsentrasi ekstrak yang mampu menghambat aktivitas FRAP sebesar 50%. Untuk

Menghitung nilai EC50 diperlukan data persen kapasitas yaitu dengan rumus:

% Kapasitas = ( 1 – T S ) x 100 %
 Konsentrasi sampel dan persen kapasitas yang diperoleh disubstitusi pada

masing - masing sumbu x dan y pada persamaan regresi linier. Persamaan tersebut

didapatkan dari absorbansi dan persen kapasitas yang digunakan untuk menentukan

nilai y sebesar 50 dan nilai x yang diperoleh sebagai nilai EC50 (Darmawati, 2014).

3. 13 Formulasi Sediaan Losion Ekstrak Daun Mareme.

Tabel 3.1 Formula Losion

Formula % (b/v)
Bahan FI

Ekstrak etanol daun mareme x

Parafin Cair 4
Asam Stearat 4,5
Trietanolamin 1
Gliserin 5
Setil Alkohol 0,5
Metil Paraben 0,1
Parfum 3 gtt
Aquades ad 100
(Sinaga, 2015)
Keterangan : Ad = auris dekstra (hingga)
gtt = gutae (tetes)
x = hasil optimasi
.14 Pembuatan Sediaan Losion

Bahan - bahan yang digunakan dalam pembuatan sediaan losion dipisahkan

menjadi dua bagian yaitu bahan yang larut minyak (fase 1) dan bahan yang larut air

(fase 2). Fase 1 diantaranya asam stearat, setil alkohol, dan paraffin cair dan

dimasukan kedalam cawan penguap. Bahan yang termasuk fase 2 seperti gliserin,

TEA dan aquades dicampurkan. Fase 1 dan 2 dipanaskan dan diaduk pada suhu 70 -

75ºC secara terpisah hingga homogen. Sediaan yang telah homogen tersebut

dicampur dan diaduk dengan pengaduk.

Proses pencampuran fase air dan fase minyak tersebut dilakukan pada suhu

70ºC. Proses pengadukan dilakukan sampai campuran kedua fase homogen dan

mencapai suhu 40ºC. Pengawet (nipagin) dan parfum, serta zat aktif yaitu ekstrak

etanol daun mareme (Glochidion arborescens Blume.) dimasukan kedalam sediaan

pada suhu 35ºC kemudian dilakukan pengadukan selama kurang lebih satu menit

(Ansel CH, 2011).

3.15 Evaluasi Sediaan Losion Ekstrak Daun Mareme

Evaluasi formula meliputi evaluasi sifat fisikokimia. Evaluasi fisik meliputi

pemeriksaan organoleptik dan homogenitas, daya sebar sediaan. Evaluasi kimia

meliputi penentuan nilai pH.

3.15.1 Organoleptik dan Homogenitas

Pemeriksaan organoleptik meliputi tekstur, warna dan bau yang diamati

secara visual. Pemeriksaan homogenitas dilakukan dengan meletakkan sediaan

diantara dua kaca lalu diperhatikan adanya partikel yang kasar atau ketidak

homogenan dibawah cahaya (Hasibuan et al., 2014).

3.15.2 Daya Sebar

Pemeriksaan dilakukan dengan menekankan dua lempengan kaca pada 0,5 g

sediaan, diukur daya sebarnya pada permukaan kaca pada tiap penambahan beban,

yaitu sebesar 50, 100, dan 200 g. Dihitung diameter penyebaran formula yang diambil

dari panjang rata-rata diameter dari beberapa sisi (Hasibuan, et al.,2014).

3.15.3 Uji PH

Pengukuran pH menggunakan pH universal, stick dicelupkan ke dalam

sediaan losion kemudian didiamkan sesaat dan bandingkan pada tabel pH universal

(Hasibuan, et al., 2014).

3.15.4 Viskositas

Pengukuran viskositas dilakukan dengan menggunakan viskometer

Brookfield. Sediaan losion disimpan dalam wadah, lalu spindel diturunkan ke

dalam
sediaan hingga batas yang ditentukan. Pengukuran dilakukan dengan viskometer

Brookfield dengan kecepatan diatur mulai dari 2, 4, 5, 10, 20, 50 dan 100 rpm, lalu

dibalik dari 100, 50, 20, 10, 5, 4, dan 2 rpm. Dari masing-masing pengukuran dengan

perbedaan rpm dibaca skalanya ketika jarum merah yang bergerak telah stabil. Nilai

viskositasnya lalu dihitung

3.15.5 Uji Cycling test

Stabilitas losion dievaluasi dengan metode cycling test. Pada metode

cycling test, sampel losion disimpan pada suhu 4ºC selama 24 jam, lalu

dipindahkan ke dalam oven dengan suhu 40°C selama 24 jam (satu siklus).

Uji ini dilakukan selama 6 siklus (Sinaga, 2015).

3.15.6 Uji Sentrifugasi

Sampel losion disentrifugasi dengan kecepatan putaran 3750 rpm pada

radius sentrifugasi selama 5 jam atau 10000 rpm selama 30 menit, karena

hasilnya ekivalen dengan efek gravitasi selama 1 tahun kemudian diamati

apakah terjadi pemisahan atau tidak.

3.16 Penentuan Aktivitas Antioksidan Losion Ekstrak Daun Mareme

(Glochidion arborescens Blume.)

Sampel sediaan losion daun mareme dilarutkan dalam methanol

dengan konsentrasi yang telah ditentukan. Sebanyak 1 ml sampel

ditambahkan 1 ml FRAP dengan perbandingan volume 1:1. Campuran

kemudian didiamkan selama 30 menit pada suhu ruang. Pengukuran

absorbansi sampel dilakukan dengan spektrofotometri UV-Vis dengan

panjang gelombang yang telah ditentukan sebelumnya. Hitung persen

kapasitas serta nilai EC50 sediaan losion.

Sedangkan untuk kontrol positif digunakan vitamin C dengan perlakuan yang

sama dengan sampel uji. Aktivitas antioksidan sampel ditentukan oleh besarnya

hambatan serapan radikal FRAP melalui perhitungan persentase % kapasitas serapan

FRAP.

.17 Analisis Data

Data dianalisis dengan SPSS statistik dengan uji T berpasangan untuk

mengetahui nilai EC50 sebelum dibuat sediaan dan sesudah di buat sediaan.
 BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Determinasi Tanaman

Determinasi dilakukan di Labolatorium Taksonomi Tumbuhan Fakultas

Biologi FMIPA UNPAD. Hasil determinasi menyatakan bahwa tumbuhan yang

digunakan benar adalah daun mareme (Glochidion arborescens Blume.) hasil

determinasi terlampir pada lampiran 1.

4.2 Preparasi Sampel

Preparasi daun mareme (Glochidion arborescens Blume.) pada penelitian ini

meliputi proses sortasi basah, pencucian, pengeringan, sortasi kering dan penghalusan

sehingga diperoleh serbuk simplisia daun mareme. Proses sortasi basah dilakukan

untuk memisahkan kotoran - kotoran atau benda - benda asing seperti tanah, kerikil,

rumput, bagian tanaman lain atau bahan yang rusak lainnya. Proses pencucian dengan

menggunakan air mengalir unuk memaksimalkan proses pembersihan simplisia

sampai pengotor hilang. Pengeringan dilakukan untuk memperoleh simplisia yang

dapat disimpan dalam kurun waktu yang lebih lama dan untuk mengurangi kadar air

yang dapat mencegah terjadinya reaksi enzimatik sehingga mencegah terjadinya

kerusakan simplisia, penurunan kualitas mutu dan meminimalisir terjadinya

 30

pertumbuhan bakteri dan jamur. Sortasi kering bertujuan untuk memisahkan benda-

benda asing yang tidak diinginkan. Penghalusan serbuk simplisia bertujuan untuk

memperoleh bentuk yang seragam, selain itu untuk memperbesar luas permukaan

sehingga dapat mempermudah proses penarikan zat aktif pada saat ekstraksi. Serbuk

simplisia yang telah kering disimpan dalam wadah yang bersih, kering, dan

terlindung dari cahaya supaya mutu simplisia tetap terjaga.

4.3 Pengujian Makroskopik dan Mikroskopik

4.3.1 Pengujian Makroskopik

Pengujian makroskopik dilakukan untuk mengamati bentuk organoleptik

menggunakan pancaindra dengan mengamati warna, bau dan rasa. Berdasarkan hasil

pengujian makroskopik daun mareme (Glochidion arborescens Blume.) daun

berwarna hijau, berbentuk lonjong, ujung daun berbentuk runcing, batang lurus atau

berliku-liku, permukaan kulit halus, warna daun akan berubah dari mulai hijau

sampai coklat muda, serbuk simplisia berwarna hijau dengan bau yang khas dan tidak

berasa. Hasil dapat dilihat pada gambar 4.1.

 (a) (b) (c)
Gambar 4.1 : Makroskopik daun mareme (Glochidion arborescens Blume.) (a) daun
mareme (b) simplisia kering daun mareme (c) serbuk simplisia daun mareme

4.3.2 Pengujian Mikroskopik

Pengujian mikroskopik dilakukan untuk mengetahui fragmen khas dari suatu

tumbuhan. Hasil pengujian mikroskopik daun mareme (Glochidion arborescens.

Blume) terdapat stomata tipe diasitik, rambut penutup, berkas pembuluh dan mesofil.

Hasil dapat dilihat pada gambar 4.2

(a) (b) (c) (d)

Gambar 4.2 : mikroskopik daun mareme (Glochidion arborescens. Blume). (a) Stomata
tipe diasitik, (b) rambut penutup, (c) berkas pembuluh, (d) mesofil.
4.4 Hasil Ekstraksi

Ekstraksi daun mareme (Glochidion arborescens Blume.) dilakukan ekstraksi

menggunakan pelarut etanol 96% dengan metode refluks. Hasil dapat dilihat pada

tabel 4.1.

Tabel 4.1 Perolehan Rendemen Ekstrak Daun Mareme (Glochidion arborescens

Blume.)

Serbuk Simplisia (gram) Ekstrak Kental (gram) Rendemen (%)

1050 217 20,6

Metode ekstraksi dengan refluks pelaksanaannya sederhana, sehingga dapat

mempercepat kerja, suhu yang digunakan sesuai dengan pelarut yang digunakan dan

sangat cocok digunakan untuk mengekstraksi sampel yang mempunyai tekstur keras

dan komponen kimianya tahan terhadap pemanasan, dengan menggunakan metode ini

maka proses ekstraksi dapat dilakukan dalam waktu yang relatif lebih singkat.

Hasil rendemen yang diperoleh dengan metode refluks ini cukup besar yaitu

20,6 %. Adanya pengaruh perlakuan panas pada refluks dapat meningkatkan

kemampuan pelarut untuk mengekstraksi senyawa-senyawa yang tidak larut di dalam

kondisi suhu kamar sehingga aktivitas penarikan senyawa lebih maksimal atau dapat

memberikan peningkatan pada rendemen (Harbone, 1987).

4.5 Hasil Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan kimia senyawa

metabolit sekunder yang dimiliki oleh daun mareme (Glochidion arborescens

Blume.). Senyawa metabolit yang diujikan yaitu alkaloid, flavonoid, saponin, kuinon,

tanin dan polifenol, monoterpenoid dan seskuiterpenoid, steroid dan triterpenoid.

Hasil skrining fitokimia dapat dilihat pada table 4.2.

Tabel 4.2 Hasil Skrining Fitokimia Daun Mareme (Glochidion arborescens

Blume.)

Pemeriksaan Hasil

Alkaloid -
Flavonoid +
Saponin +
Kuinon -
Tanin dan Polifenol +
Monoterpenoid dan Seskuiterpenoid +
Steroid dan Triterpenoid +

Keterangan : (-) Tidak teridentifikasi

(+) Teridentifikasi

Berdasarkan tabel 4.1 ekstrak daun mareme (Glochidion arborescens Blume)

mengandung senyawa metabolit sekunder yaitu flavonoid, saponin, tanin dan

polifenol, monoterpenoid dan seskuiterpenoid, steroid dan triterpenoid. Senyawa-

senyawa golongan metabolit sekunder ini yang diduga berkontribusi terhadap

aktivitas antioksidan ekstrak daun mareme

4.6 Hasil Pemantauan Ekstrak dan Uji Kualitatif Aktivitas Antioksidan

dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Pemantauan ekstrak dengan KLT dilakukan untuk memisahkan senyawa

dari campurannya sehingga dapat diperkirakan jumlah komponen senyawa yang

terdapat pada ekstrak secara kualitatif dengan memilih eluen yang terbaik yang

dapat memisahkan senyawa. Pola kromatogram yang dihasilkan untuk uji

pendahuluan aktivitas antioksidan secara kualitatif. Hasil dapat dilihat pada gambar

4.3

(1) (2) (3) (4)

Gambar 4.3 : Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Etanol Daun Mareme. Fase diam silika gel
GF254, fase gerak N-Hexan : Aseton (7:3). (1). Disemprot dengan H 2SO4 10%, (2). Disemprot
dengan sitroborat dibawah UV λ 366 nm, (3). Disemprot dengan besi (III) klorida,
(4).Disemprot dengan FRAP 0,8 %.
 Hasil pengujian kualitatif menggunakan KLT pada ekstrak daun mareme

(Glochidion arborescens Blume.) Komponen antioksidan di dalam ekstrak yang

bereaksi positif terhadap H2SO4 berupa bercak berwarna hitam atau kecoklatan.

Komponen antioksidan yang bereaksi positif terhadap sitroborat berupa florosensi

kebiruan di bawah sinar UV λ 366 nm, Komponen antioksidan yang bereaksi positif

terhadap FeCl3 berupa bercak berwarna dengan latar belakang kuning dan komponen

antioksidan yang bereaksi positif terhadap FRAP 0,8% berupa bercak berwarna biru

dengan latar belakang putih. Hasil uji kualitatif aktivitas antioksidan ekstrak dengan

penampak bercak H2SO410 %, FeCl3, sitroborat dan FRAP 0,8% dapat dilihat pada

Gambar 4.3. Dari hasil KLT senyawa yang memberikan kontribusi sebagai

antioksidan adalah senyawa golongan fenol yang nampak pada spot dengan nilai

RF 0,33 dan 0,47.

4.7 Hasil Penentuan Kadar Flavonoid Total

Analisis kuantitatif ini sangat penting dilakukan karena flavonoid berperan

sebagai antioksidan melalui kemampuannya mendonasikan atom hidrogen, mengkelat

logam, berada dalam bentuk glukosida atau dalam bentuk bebas (Chang, et al., 2002).

Pada pengukuran senyawa flavonoid total, larutan sampel ditambahkan AlCl 3 yang

dapat membentuk kompleks, sehingga terjadi pergeseran panjang gelombang ke arah

visible (tampak) yang ditandai dengan larutan menghasilkan warna yang lebih

kuning. Dan penambahan kalium asetat yang bertujuan untuk mempertahankan

panjang gelombang pada daerah visible (tampak) (Chang, et al., 2002). Senyawa yang

digunakan sebagai standar adalah kuersetin. Karena kuersetin merupakan flavonoid

golongan flavonol yang mempunyai gugus keto pada C-4 dan memiliki gugus

hidroksil pada atom C-3 atau C-5 yang bertetangga dari flavon dan flavonol (Azizah,

at al.,2014). Hasil penentuan kadar flavonoid dapat dilihat pada tabel 4.3

Tabel 4.3 Hasil Penentuan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Daun Mareme
(Glochidion arborescens Blume.)

Sampel Total Flavonoid (gr QE/100 gr ± SD)

Ekstrak daun mareme 27,57 ± 0,30

Berdasarkan hasil yang diperoleh total flavonoid memberikan nilai yang

cukup tinggi tetapi bila dibandingkan dengan pengujian kualitatif KLT (Kromatografi

lapis tipis) nilai yang tinggi ini tidak berkorelasi linear dengan aktivitas antioksidan

daun mareme jadi bisa diambil hipotesa bahwa tidak semua flavonoid mengandung

aktivitas antioksidan. Flavonoid dengan gugus hidroksi bebas mempunyai aktivitas

penangkap radikal dan adanya gugus hidroksi lebih dari satu tertutama pada cincin B

akan meningkatkan aktivitas antioksidannya (Sunarni, at al.,2007)

4.8 Hasil Penentuan Kadar Fenolik Total

Senyawa polifenol berpotensi sebagai antioksidan karena mampu

menyumbangkan ion H+ atau elektron pada senyawa radikal bebas. Hal ini yang
menunjukkan adanya hubungan kandungan total fenol dan aktivitas antioksidan

dengan kandungan senyawa fenol suatu bahan tinggi maka aktivitas antioksidan

dalam bahan tersebut tinggi (Meenakshi, et al. 2009)

Uji kandungan total fenol dilakukan dengan metode Folin Ciocalteu reaksi

yang terjadi adalah reaksi reduksi-oksidasi. Senyawa fenolik mereduksi

fosfomolibdat fosfotungstat dalam folin Ciocalteu membentuk molybdenum yang

berwarna biru. Penggunaan asam galat sebagai standar, disebabkan karena asam galat

adalah turunan dari hidroksibenzoat yang merupakan suatu asam fenol sederhana

yang bersifat murni dan stabil (Viranda, 2009). Hasil penentuan kadar flavonoid

dapat dilihat pada tabel 4.4

Tabel 4.4. Hasil Penentuan Kadar Fenolik Total Ekstrak Daun Mareme
(Glochidion arborescens Blume.)

Sampel Total Fenolik (gr GAE /100 gr ± SD)

Ekstrak daun mareme 6,27 ± 0,12

Berdasarkan hasil yang diperoleh hasil kadar total fenolik tidak cukup besar

tetapi golongan fenolik ini berkontribusi terhadap aktivitas antioksidan dengan

melihat hasil pengujian kualitatif KLT (kromatografi lapis tipis) terbukti bahwa

senyawa fenolik berkorelasi terhadap aktivitas antioksidan. Sedikitnya aktivitas

antioksidan senyawa fenolik dalam ekstrak daun mareme kemungkinan senyawa

fenolik ini masih terikat dengan gugus glikosida. Menurut Harborne (1987), bahwa
senyawa fenolik sering kali berikatan dengan gula sebagai glikosida, jadi dengan

adanya gugus glikosida yang berikatan dengan senyawa fenolik menyebabkan

aktivitas antioksidan senyawa fenolik dalam ekstrak daun mareme ini sedikit.

4.9 Hasil Uji Kuantitatif Antioksidan Ekstrak Daun Mareme (Glochidion

arborescens. Blume) dengan Menggunakan Metode FRAP

Uji kuantitatif aktivitas antioksidan ekstrak daun mareme menggunakan

metode FRAP. Metode ini adalah salah satu metode penentuan kandungan

antioksidan secara spektrofotometri yang berdasarkan pada reduksi Fe3+ menjadi Fe2+.

Reaksi yang berwarna biru intensif oleh antioksidan pada suasana asam sehingga

kekuatan antioksidan suatu senyawa dianalogikan dengan kemampuan mereduksi dari

senyawa tersebut (Halvorsen, et al., 2002). Hasil pengujian diukur pada panjang

gelombang 593 nm. Perubahan dapat dilihat dari terbentuknya warna biru pada

larutan. Semakin tinggi absorbansi yang terukur maka semakin tinggi kemampuan

reduksinya.

Penentuan nilai aktivitas antioksidan dilakukan dengan mencampurkan reagen

FRAP dengan ekstrak daun mareme. Dalam reagen FRAP terdapat campuran TPTZ,

FeCl3 dan buffer asetat. Aktivitas antioksidan dapat dilihat dari kemampuan-nya

mereduksi Fe3+-TPTZ yang tidak berwarna menjadi Fe2+ yang berwarna biru.

Senyawa Fe3+-TPTZ mewakili senyawa oksidator yang mungkin terdapat di

dalam tubuh dan dapat merusak sel-sel tubuh, sedangkan ekstrak sampel mengandung
antioksidan yang kemudian dapat mereduksi Fe3+-TPTZ menjadi Fe2+-TPTZ sehingga

senyawa Fe3+-TPTZ tidak akan melakukan reaksi yang merusak sel-sel tubuh.

Semakin banyak konsentrasi Fe3+-TPTZ yang direduksi oleh sampel menjadi Fe2+-

TPTZ, maka aktivitas antioksidan dari sampel juga semakin besar ( Istiningrum, at

al., 2013 )

Penambahan FeCl3 dalam reagen yaitu untuk membentuk senyawa kompleks

Fe3+ dan memperlambat reaksi reduksi Fe3+ menjadi Fe2+ yang terjadi sangat cepat

oleh pengaruh cahaya. Sedangkan penambahan buffer asetat adalah karena buffer ini

memiliki pH efektif dari 3,6-5,6 ( Gholib, 2007 )

Senyawa yang mempunyai daya reduksi kemungkinan dapat berperan sebagai

antioksidan karena dapat menstabilkan radikal dengan mendonorkan elektron atau

atom hidrogen sehingga senyawa radikal berubah menjadi lebih stabil.

Pengukuran aktivitas antioksidan menggunakan uji FRAP ini dengan larutan

asam askorbat sebagai standar karena asam askorbait ini berfungsi sebagai

antioksidan sekunder yang mampu menangkal berbagai radikal bebas ekstraselular.

Hal ini dikarenakan vitamin C mempunyai gugus hidroksil bebas yang bertindak

sebagai penangkal radikal bebas dan jika mempunyai gugus polihidroksil akan

meningkatkan aktivitas antioksidan (Kim, 2005). Hasil uji kuantitatif vitamin C dan

ekstrak daun mareme dapat dilihat pada tabel 4.8

 Tabel 4.8 Hasil nilai EC50 Pembanding Vitamin C dengan Sampel

Sampel Nilai EC50 (ppm) ± SD Ak Aktivitas Antioksidan

Vitamin C 2,75 ± 0.93 Sangat Kuat

Ekstrak 1,59 ± 0.01 Sangat Kuat

Berdasarkan tabel diatas baik vitamin C maupun ekstrak daun mareme

(Glochidion arborescens Blume.) memberikan nilai EC50 yaitu pada rentang < 50

ppm yang artinya keduanya memberikan aktivitas antioksidan sangat kuat.

Nilai EC50 ekstrak daun mareme (Glochidion arborescens Blume.) lebih

rendah dari vitamin C sehingga bisa dikatakan aktivitas antioksidan lebih baik

dibandingkan vitamin C oleh sebab itu esktrak daun mareme (Glochidion

arborescens Blume.) bisa menjadi salah satu alternatif antioksidan alami.

Beberapa hal yang mempengaruhi aktivitas antioksidan vitamin C diantaranya

yaitu oleh sinar, alkali, enzim, oksidator serta oleh katalis tembaga dan besi yang

dapat mengoksidasi struktur dari vitamin C. Selama penyimpanan juga dapat

berpengaruh yang disebabkan oleh suhu penyimpanan dan sinar atau cahaya langsung

karena penggunaan kemasan botol yang berwarna bening atau tembus cahaya,

sehingga sinar matahari sangat mudah menembus bahan dan mengoksidasi vitamin C

( Winarno, 1992 )
4.10 . Hasil Pembuatan Sediaan Losion Ekstrak Daun Mareme (Glochidion

arborescens Blume.)

Losion adalah emulsi cair yang terdiri dari fase minyak dan fase air yang

distabilkan oleh emulgator. Komponen-komponen dasar pembentuk losion antara lain

bahan pengental, surfaktan, humektan, serta emulgator. Formula sediaan losion ini

menggunakan ekstrak daun mareme (Glochidion arborescens Blume.)

Sediaan losion cocok sebagai kosmetik antipenuaan yang mempunyai

beberapa keunggulan, antara lain kemampuannya dalam mempertahankan

kelembaban kulit, melembutkan kulit, mencegah kehilangan air, mempertahankan

bahan aktif, pelarut pewangi dan pengawet, serta pemakaian yang merata dan cepat

pada permukaan kulit yang luas dibandingkan dengan sediaan semi padat lainnya

(Ansel CH, 2005 )

Antioksidan ini bekerja dengan menghambat produksi ROS dengan cara

membelah langsung, menurunkan jumlah oksidan didalam dan disekitar sel,

mencegah ROS untuk mencapai target biologisnya, membatasi penyebaran oksidan

yang terjadi selama peroksidasi lipid dan menggagalkan stress oksidatif sehingga

mencegah penuaan ( Pouillot, et al., 2011)

Konsentrasi zat aktif ekstrak daun mareme (Glochidion arborescens Blume.)

yang diformulasikan sebagai sediaan losion dihitung berdasarkan perhitungan nilai

AEAC (Ascorbid Acid Equivalent Antioxidant Capacity). Perhitungan AEAC dilihat

pada lampiran 8.

Zat tambahan yang digunakan sebagai sediaan yaitu paraffin cair sebagai

pengental, asam stearat sebagai pengemulsi, trietanolamin sebagai pengemulsi,

gliserin sebagai humektan, setil alkohol sebagai pengental, metil paraben sebagai

pengawet, parfum sebagai pengaroma dan aquades sebagai pembawa. Setelah

dilakukan optimasi dihasilkan konsentrasi masing-masing dan bisa dilihat pada tabel

4.9

Tabel 4.9 Formula Sediaan Losion Ekstrak Daun Mareme (Glochidion

arborescens Blume.)

Bahan Formula % (b/v)

Ekstrak etanol daun mareme 1,25

Parafin Cair 4
Asam Stearat 4,5
Trietanolamin 1
Gliserin 5
Setil Alkohol 0,5
Metil Paraben 0,1
Parfum 3 tts
Aquades ad 100
4.11 Hasil Evaluasi Sifat Fisik dan Kimia Sediaan Losion Ekstrak Daun

Mareme (Glochidion arborescens Blume.)

Evaluasi sediaan losion bertujuan untuk menghasilkan suatu sediaan dengan

sifat fisik dan kimia yang baik yaitu memenuhi persyaratan evaluasi kualitas losion

sesuai farmasetik serta sediaan dapat diterima oleh konsumen. Evaluasi sediaan

losion meliputi uji organoleptis, uji homogenitas, uji PH, uji daya sebar, uji

sentrifugasi, uji cycling test dan uji viskositas.

Tabel 4.10 Hasil Sifat Fisik dan Kimia Sediaan Losion Ekstrak Daun Mareme

( Glochidion arborescens .Blume )

Evaluasi Hasil Pengamatan

Organoleptis : Warna Hijau kecoklatan

bau bau khas daun mareme
Homogenitas Homogen
PH 6
Daya Sebar 5-7 cm
Sentrifugasi Tidak terjadi pemisahan
Cycling test masih stabil
Viskositas Pseudoplastis tiksotropik

Uji organoleptis dilakukan dengan memeriksa tampilan fisik dari sediaan

losion. Pemeriksaan yang dilakukan meliputi bentuk, bau, dan warna. Pengujian

organoleptis terhadap tampilan fisik losion didapatkan hasil bahwa sediaan berbentuk

massa semi padat, berbentuk agak kental hingga kental berbau khas mareme, agak

dingin dan sediaan berwarna hijau kecoklatan.

 Uji homogenitas bertujuan untuk mengetahui tercampurnya bahan-bahan

sediaan losion. Hasil pengujian homogenitas menunjukkan bahwa formula memiliki

karakteristik yang homogen, Dikatakan homogen sebab pada saat pengujian tidak ada

partikel-partikel kasar atau gumpalan yang ada losion, tercampur secara merata serta

terlihat persamaan warna yang merata.

Uji pH sediaan menggunakan pH universal. Uji ini dilakukan untuk

menentukan pH pada sediaan losion yang sesuai dengan pH kulit agar tidak

menimbulkan iritasi pada kulit saat pemakaian. pH yang rendah atau bersifat asam

dapat menyebabkan iritasi pada kulit sedangkan pH yang terlalu tinggi dapat

menyebabkan kulit kering saat pemakaian. Berdasarkan SNI 16-4399-1996 bahwa

nilai pH produk pelembab kulit disyaratkan berkisar antara 4,5-8,0 dan pH yang

dihasilkan pada sediaan losion daun mareme ini yaitu 6. Berdasarkan hasil tersebut

pH sediaan losion ini memenuhi syarat yang ditentukan.

Uji daya sebar bertujuan untuk melihat kemampuan losion menyebar pada

permukaan kulit. Kemampuan penyebaran yang baik akan memberikan kemudahan

pengaplikasian pada permukaan kulit, selain itu penyebaran bahan aktif pada kulit

lebih merata sehingga efek yang ditimbulkan bahan aktif menjadi lebih optimal.

Sediaan yang baik memiliki daya sebar yang besar sehingga dapat diaplikasikan pada

permukaan kulit yang luas tanpa penekanan yang berlebihan. Kemampuan daya sebar

sediaan dilihat dari diameter sebaran yang dihasilkan yaitu berkisar 5-7 cm yang
berarti memenuhi syarat menurut ketentuan SNI 16-4399-1996 yaitu berada dalam

kisaran 4,5-8 cm.

Uji mekanik atau sentrifugasi dilakukan untuk mengetahui terjadinya

perubahan fase dari emulsi yang mana hasilnya ekivalen dengan gaya gravitasi

selama 1 tahun. Hasil pengamatan organoleptis pada losion setelah disentrifugasi

pada kecepatan 3750 rpm selama 5 jam tidak mengalami perubahan warna, bau, dan

tekstur sediaan tetap lembut dan juga tidak menimbulkan pemisahan fase. Hal ini

menunjukan bahwa sediaan losion yang dihasilkan stabil dan tidak berpengaruh gaya

gravitasi untuk penyimpanan selama setahun.

Pengujian cycling test bertujuan untuk mengetahui kestabilan emulsi apakah

terjadi kristalisasi atau pengendapan maupun proses oksidasi dalam sediaan dalam

suhu yang ekstrim dengan tingkat stress yang tinggi. Pengamatan dilakukan pada

suhu rendah (4ºC) selama 24 jam lalu dipindahkan pada suhu tinggi (40ºC) selama 24

jam (satu siklus) dilakukan selama 6 siklus. Hasil pengamatan organolepis pada

sediaan tidak menunjukan adanya perubahan warna, namun terlihat bahwa losion

yang disimpan pada suhu rendah dan tinggi berwarna lebih terang atau muda

dibandingkan dengan yang disimpan pada suhu kamar, tidak menimbulkan bau

selama penyimpanan yaitu tetap berbau khas dan tidak menimbulkan bau tengik yang

menunjukan bahwa fase minyak dalam sediaan losion ini tidak mengalami oksidasi,
tidak terjadi pemisahan fase dan tekstur sediaan tetap lembut. Hasil pengamatan uji

Cycling test dapat dilihat pada Tabel 4.11

4.11 Tabel Hasil Pengamatan Uji Cycling Test

Suhu Hari Warna Bau Homogenitas

25°C 0 Hijau kecoklatan Khas Homogen

4°C 1 Hijau kecoklatan Khas Homogen
3 Hijau kecoklatan Khas Homogen
5 Hijau kecoklatan Khas Homogen
7 Hijau kecoklatan Khas Homogen
9 Hijau kecoklatan Khas Homogen
11 Hijau kecoklatan Khas Homogen
40°C 2 Hijau kecoklatan Khas Homogen
4 Hijau kecoklatan Khas Homogen
6 Hijau kecoklatan Khas Homogen
8 Hijau kecoklatan Khas Homogen
10 Hijau kecoklatan Khas Homogen
12 Hijau kecoklatan Khas Homogen

Viskositas (kekentalan) adalah suatu ungkapan dari resistensi zat cair untuk

mengalir. Hasil rheogram menunjukan sifat aliran losion ini memiliki sifat alir

pseudoplastis tiksotropik karena sediaan ini dapat mudah dituang dan tersebar dengan

mudah serta mampu berpenetrasi dengan baik dalam kulit.

Viskositas cairan pseudoplastis akan berkurang dengan naiknya shear rate

dan tidak ada yield value. Viskositas yang menurun terjadi karena adanya

peningkatan shear rate yang menyebabkan rantai polimer tersusun menjadi rantai
panjang yang lurus sehingga akan terjadi penurunan resisten sistem ( Sinko, at al.,

2011 )

. Sifat alir disebut tiksotropik karena kurva aliran menurun disebelah kiri

kurva menaik, karena perubahan struktur yang tidak kembali ke keadaan semula

dengan segera, apabila tekanan dikurangi.

1.8
1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000

Gambar 4.4 Rheogram Losion

4.12 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan Sediaan Losion Esktrak Daun

Mareme (Glochidion arborescens Blume.)

Pengujian aktivitas antioksidan sediaan losion sama halnya dengan pengujian

ekstrak daun mareme penentuan kandungan total antioksidan nya dilakukan dengan

metode FRAP. Metode FRAP dapat menentukan kandungan total antioksidan dari

suatu sediaan berdasarkan kemampuan senyawa tersebut untuk mereduksi ion Fe 3+

menjadi Fe2+. Secara kualitas konsentrasi total antioksidan dapat diamati melalui
intensitas warna biru yang terbentuk yang merupakan warna dari kompleks TPTZ-

Fe2+. Semakin pekat warna yang dihasilkan, semakin besar pula kemampuan

antioksidan dalam mereduksi ion Fe2+ atau dengan kata lain semakin besar

konsentrasi antioksidan pada sediaan yang digunakan.

Tabel 4.12 Hasil Nilai EC50 Aktivitas Sediaan Losion Ekstrak Daun Mareme
(Glochidion arborescens Blume.)

Sampel Nilai EC50 (ppm) ± SD Aktivitas Antioksidan

Losion 28,26 ± 0,114 Sangat Kuat

Berdasarkan hasil pengujian aktivitas antioksida sediaan losion nilai tersebut

dalam rentang sangat kuat karena < 50 ppm yang artinya berpotensi sebagai

antioksidan sangat kuat. Namun jika dibandingkan dengan ekstrak sebelum dibuat

sediaan losion nilai ini menunjukan adanya peningkatan dan setelah dilakukan uji

pree test diperoleh nilai sig (2-tailed) < 0,05 artinya terdapat perbedaan yang

bermakna antara nilai EC50 sebelum dibuat sediaan dan seudah dibuat sediaan. Hal

tersebut bisa disebabkan adanya pengaruh dari basis dan eksipien yang ditambahkan

pada formula losion ataupun proses pemanasan pada saat peleburan eksipien yang

dapat berpengaruh pada aktivitas antioksidan sediaan losion

Penurunan aktivitas antioksidan sediaan losion juga dikarenakan oleh sifat

fenol yang merupakan metabolit sekunder utama dari sampel, dimana kadar fenol

akan menurun antara lain dengan perlakuan pencucian, perebusan, dan proses
pengolahan lebih lanjut untuk dijadikan produk yang siap dikonsumsi (Grafianita,

2011).

Kehilangan total fenol selama pemanasan dapat terjadi melalui dua cara yaitu

terlarut dalam cairan pengolah dan melalui proses oksidasi. Dengan adanya panas dan

oksigen, senyawa total fenol dapat teroksidasi dalam larutan alkali atau karena

aktivitas enzim polifenol oksidase membentuk radikal orto-semiquinon yang bersifat

reaktif dan dapat bereaksi lebih lanjut dengan senyawa amino membentuk produk

berwarna coklat dengan berat molekul tinggi (Pratt, 1992).

Pemanasan juga diduga menyebabkan pemutusan ikatan kimia dari suatu

makromolekul menghasilkan molekul-molekul yang relatif lebih kecil berat

molekulnya. Beberapa senyawa antioksidan akan lebih aktif jika dipanaskan karena

peranannya dalam reaksi pencoklatan non enzimatik, Semua hal tersebut menjadi

alasan tingginya kandungan total antioksidan.( Reische, et al., 2002 )

 BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Ekstrak daun mareme (Glochidion arborescens Blume.) memiliki aktivitas

antioksidan sangat kuat dengan metode FRAP. Kadar total flavonoid dan fenol pada

ekstrak ini secara berturut-turut yaitu sebesar (27,57 gr QE/g ekstrak) dan (6,27 gr

GAE/g ekstrak). Senyawa golongan fenol merupakan kontributor utama pada

aktivitas antioksidan ekstrak daun mareme.

Ekstrak daun mareme dapat diformulasikan menjadi sediaan losion yang

memenuhi syarat evaluasi losion. Aktivitas antioksidan sediaan losion termasuk

kedalam kriteria sangat kuat meskipun nilai EC 50 nya lebih besar dibanding sebelum

dibuat sediaan.

5.2 Saran

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai uji aktivitas antioksidan

sediaa losion sebagai tabir surya, pemutih ataupun yang lainnya dari daun mareme

(Glochidion arborescens Blume.).

 DAFTAR PUSTAKA

Abdi Redha. 2010. Flavonoid: Struktur, Sifat Antioksidatif Dan Peranannya

Dalam Sistem Biologis. Pontianak : Jurusan Teknologi Pertanian
Politeknik Negeri Pontianak Jurnal Belian Vol. 9 No. 2 Sep. 2010:
196 – 202
Adawiyah, U., Indra., NLD Hidayanti. 2018. “Formulasi Masker Gel peel-of
dari Ekstrak Daun Mareme (Glodhidion borneense, (Mull. Arg.) boerl)
dan UjiAktivitas Antioksidan menggunakan Metode DPPH (1,1-
Dipenil-2 pikrihidrazil),” Prodi S1 Farmasi STIKes BTH Tasikmalaya.
Agung Darmawati 2014. Kajian Antioksidan Ekstrak Daun Lima Spesies dari
Famili Cucurbitaceae dengan Metode FRAP dan DPPH [Tesis]
Bandung : Program Studi Magister Farmasi ITB.
Akhyar. 2010. Uji Daya Hambat dan Analisis Klt Bioautografi Ekstrak Akar
dan  Buah  Bakau (rhizophora stylosagriff.) terhadap vibrio harveyi.
Makassar : Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas
Hasanuddin
Amanda Angelina Sinaga, Sri Luliana, Andhi Fahrurroji1 2015. Uji
Efektivitas Antioksidan Losion Ekstrak Metanol Buah Naga Merah
(Hylocereus polyrhizus Britton dan Rose). Tanjungpura : Program
Studi Farmasi Fakultas kedokteran, Universitas Tanjungpura.
Ansel, C.H. 2011. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Jakarta : Universitas
Indonesia
Ardhie, M.A., 2011. Radikal bebas dan peran antioksidan dalam mencegah
penuaan, Scientific Journal Of Pharmaceutical Developmentand
Medical Application, 24(1).
Azizah, Dyah Nur, Endang Kumolowati dan Fahrauk Faramayuda. 2014.
Penetapan Kadar Flavonoid Metode Alcl3 Pada Ekstrak Metanol Kulit
Buah Kakao (Theobroma cacao L.). Jurnal Ilmiah Farmasi. 2 (2) 45-
49.
Benzi, I.F.F., dan Strain, J.J. 1996. The Ferric Reducing Ability of Plasma
(FRAP) as a Measure of “Antioxidant Power”: the FRAP Assay,
Analitycal Biochemitical, 239 : 70-76.
Bogadenta, A., 2012. Antisipasi Gejala Penuaan Dini dengan Kesaktian
Ramuan Herbal. Yogyakarta : Buku Biru. Hal 7, 26.
Departemen Kesehatan RI, 2008. Farmakope Herbal Indonesia Edisi 1.
Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia
Dirjen POM. Farmakope Indonesia, Edisi III. Jakarta : Departemen
Kesehatan RI, 1979. Hal 7
Chang C, Yang M, Wen H, Chern J 2002 Estimation of total flavonoid
content in propolis by two complementary colorimetric methods. J.
Food Drug Analaysis, 10: 178-182
Endarini, L. H. 2016. Farmakognisi dan Fotokimia. Jakarta : Kementrian
Kesehatan Republik Indonesia.
Fidrianny, I. S. H. dan I. M. 2018. “Correlation of phytochemical content with
antioxidant potential of various sweet potato ( Ipomoea batatas ) in
West Java, Indonesia,” 8(1), hal. 25-30. doi: 10.4103/2221-
1691.221131
Ganjar I.G dan Rohaman A. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta :
Pustaka Pelajar
Gholib, G., Rohman, A. 2007. Kimia Farmasi: Analisis. Pustaka Pelajar.
Yogyakarta.
Grafianita. 2011 Kadar kurkuminoid, total fenol dan aktivitas antioksidan
simplisia temulawak (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) pada berbagai
 teknik pengeringan. Skripsi. Surakarta: Fakultas Pertanian Universitas
Sebelas Maret.
Halvorsen, B.L., Holte,Kari., Myhrstad, Mari C. W., Barikmo, I.,Hvattum
Erlend, Remberg Siv Fagertun, Wold Anne-Brit, Haffner Karin,
Baugerød Halvard , Andersen Lene Frost , Moskaug Jan, Jacobs David
R , Blomhoff Rune ,2002. A Systematic Screening of Total
Antioxidant in Dietary Plants, Journal of Nutrition.
Harborne, J. B., 1987, Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern
Menganalisis Tumbuhan, Edisi kedua, Hal 5, 69-76, diterjemahkan
oleh Kosasih Padmawinata dan Iwang Soedira, ITB Press, Bandung.
Hanani Endang.S,.2015. Analisis Fitokimia. Jakarta : EGC
Handayaniy, Gemy. 2016. Pengaruh metode ekstraksi terhadap aktivitas
antimikroba ekstrak methanol daun mimba (azadirachata indica juss)
Makassar : Universitas Negeri (UIN) ALAUDDIN Makassar.
Harmita, 2014. Analisis Fisikokimia Kromatografi Volume 2 Jakarta : EGC.
Hassanbaglou, B., Hamid, A. A., Roheeyati, A. M., Saleh, N. M., Abdulamir,
A. S., Khatib, A., Sabu, M. C, 2012. Antioxidant Activity of Different
Extracts From Leaves of Pereskia bleo (Cactaceae), Journal of
Medicinal Plants Research Volume 6 (15): 2932-2937
Irawan, B., 2010. Peningkatan Mutu Minyak Nilam dengan Ekstraksi dan
Destilasi pada Berbagai Komposisi Pelarut. Semarang : Tesis
Universitas Diponegoro Semarang Indonesia.
Istiningrum, Reni. 2013. Analysis total antioxsidant capacity on ingredients

olotek menu by ferric reducing antioxsidant power assay. Eksakta. Vol

13 : 40-48
 Jain, S.K., Jain, N. K. 2010. No Title. Multiparticulate Carriers for
SunScreening Agents. Int. J. Cosmet. Sci. Jansen, R., Wang, S.Q.,
Burn, 89–98.
Kardinan, A., & Mulyani, S., 2010. Potensi Adas (FoeniculumVulgare)
Sebagai Bahan Aktif Lotion Anti Nyamuk Demam Berdarah (Ades
aegypti), Bul. Littro. Vol 21 No. 1
Khoddami, A., Wilkes, MA., Roberts, TH., 2013. Techniques for Analysis of
Plant Phenolic Compounds, Molecules, 18 : 2328-2375
Kim,O.S., 2005, Radical Scavenging Capacity and Antioxidant Activity of

The Vitamin Fraction In rice bran. J Food Sci. (3): 208-213

Masaki, H. 2010. Role of antioxidants in the skin : anti-aging effects. Journal

of Dermatological science. Volume 58, 85 – 90
Melly Komala Dewi. 2016. Uji Aktivitas Antioksidan Daun Mareme
(Glochidion arborescens Blume.) Metode DPPH ( I,I- dipenil-2-
pikrilhidrazil ) Dengan Ekstraksi Refluks Bertingkat Menggunakan
Spektrofotometri UV-Vis [Skripsi]. Tasikmalaya : Prodi Farmasi
STIKes BTH
Meenakshi S, Gnanambigai DM, Mozhi ST, Arumugam M, Balasubramanian T.

2009. Total flavonoid and in vitro antioksidant activity of two seaweeds of

Rameshwaram Coast. Global Journal of Pharmacology. 3(2): 59-62.

Muchtadi, D. 2013. Antioksidan dan Kiat Sehat di Usia Produktif. Bandung :

Alfabeta. Halaman 91-95.
Pouillot A, Polla LL, Tacchini P, Neequaye A, Polla A, Polla B 2011. Natural
Antioxidants and their Effects on the Skin. Formulating, Packaging,
and Marketing of Natural Cosmetic Products. Chapter 13, First
 Edition. Ed. by Nava Dayan and Lambros Kromidas., John Wiley &
Sons, Inc., pp. 239 – 257.
Pourmorad, F., Hosseimimehr SJ., S. N. 2006. “No Title,” Antioxidan
activity, phenol and flavonoid content of some selected iranian
medical plant, 5(11), hal. 1142–1145.
Pratt, D. E. 1992. Natural Antioxidant from Plant Material. Di dalam Huang,

M. T., Ho, C. T. dan Lee, C. Y. (eds). Effect on Health II : Antioxidant

and Cancer Prevention. American Chem. Soc., Washington, DC.

Ramadhan P. 2015. Mengenal Antioksidan. Yogyakarta : Graha Ilmu: 1-9, 19,

22- 23.
Reische, D.W., D.A. Lillard., dan R.R. Etenmiller. 2002. Antioxidant. Dalam

Akoh, C.C., dan D.B. Min. Food Lipids. Marcel Dekker. New York.

Ririn Karina Hasibuan, Andhi Fahrurroji, Eka Kartika Untari 2014. Formulasi
Dan Uji Sifat Fisikokimia Sediaan Losion Dengan Berbagai Variasi
Konsentrasi Vitamin E. Tanjungpura : Program Studi Farmasi Fakultas
Kedokteran, Universitas Tanjungpura.
Sandra Aulia Mardikasari, Andi Nafisah Tendri Adjeng Mallarangeng, Wa
Ode Sitti Zubaydah, Endeng Juswita 2017. Formulasi dan Uji
Stabilitas Lotion dari Ekstrak Etanol Daun Jambu Biji (Psidium
guajava L.) Sebagai Antioksidan. Kendari : Program Studi Farmasi
STIK Avicenna
Sandya, dkk 2010. An Update Review On The Genus Glochidion Plant.
Departemen of Pharmacognocy, Nalanda College of Pharmacy
Cherlapally Nalgonda Andhra Pradesh, India Vol 2
 Sari A.n, 2015. Antioksidan Alternatif Untuk Menangkal Bahaya Radikal
Bebas Pada Kulit Banda Aceh : Journal of Islamic Science and
Technology Vol. 1, No.1
Sayuti, K.; Rina Yenrina 2015. Antioksidan Alami dan Sintetik. Padang :
Andalas Univesity Press
Sochor, J., Zitka O., Skutkova, H., Pavlik, D.,Babula, P., Kriska., B.,Horna,
A., Adam, V., Provaznik, I., Kizek, R., 2010. Content of Phenolic
Compundsand Antioxidant Capacity in Fruits of Apricot Genotypes,
Molecules, 15 (9) : 6285-6305.
Sunarni, Titiek, Suwidjiyo Pramono dan Ratna Asmah. 2007. Flavonoid

Antioksidan Penangkap Radikal Dari Daun Kepel (Stelechocarpus

burahol (Bl.) Hook F. & Th.). Majalah Farmasi Indonesia. 18(3): 111-

116.

Viranda P.M, 2009, Pengujian kandungan Senyawa yang terdapat dalam

Tomat, Jurnal P. Universitas Indonesia.

Winarno, F.G. 1992. Kimia Pangan dan Gizi. PT. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.

Winarti, Sri. 2010. Makanan Fungsional : Yogyakarta Graha Ilmu.

Winarsi, Hery. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta :
Kanisius Deresan.
Winston, David G. 2013. Analisis Farmasi. Jakarta : EGC
Zulkarnain, A.K dan Hidayatu H.S. 2013. Stabilitas fisik dan aktivitas krim
w/o ekstrak etanolik buah mahkota dewa (Phaleria macrocarpha
(scheff.) Boerl,) sebagai tabir surya. Traditional Medicine Journal.
Vol.18(2). Hal. 109-117.