LAPORAN PRAKTIKUM BAKTERI

Pertemuan : V Nama: Abdul Wahid

Tkt/semester : 1/2
Hari/Tanggal : Rabu/28 Februari 2024

1. Judul : Pembiakan pada media TSI dan SIM

2. Bahan : Biakan bakteri Klebsiella pada bouillon
3. Media : Endo agar dan Agar darah
4. Komposisi Media
a. TSI
1. Lab-Lemco powder,3 gram
2. Ekstrak yeast, 3 gram
3. Pepton, 20 gram
4. Glukosa, 1 gram
5. Laktosa, 10 gram
6. Sukrosa 10 gram
7. NaCl, 5 gram
8. Ferric sitrat, 0,2 gram
9. Sodium Thiosulfat, 0,3 gram
10. Phenol red, 0,024 gram
11. Agar, 13 gram
12. Aquadest 1000 ml

Prinsip Media TSI

Bakteri dapat memfermentasi salah satu atau ketiga karbohidrat yang ada dalam
media disertai pembentukan gas. Hasil fermentasi merubah warna media menjadi
kuning karena adanya perubahan pH. Indikator yang digunakan adalah phenol red
(suasana netral warna merah, suasana asam warna kuning). Jika hasil fermentasi
positif bakteri menghasilkan gas atau tanpa gas. Gas yang terbentuk menunjukkan
adanya rongga pada media atau media terangkat dari dasar tabung. Apabila bakteri
mampu menguraikan senyawa protein, sulfur dibebaskan dan bereaksi dengan Fe
 yang ada dalam media menjadi FeS yang berwarna hitam. Jika terdapat warna hitam
pada bekas tusukan, dapat disimpulkan bakteri membentuk H2S.

b. SIM
1. Trypton, 20 gram
2. Pepton, 6,1 gram
3. Ferrous ammonium sulfat, 0,2 gram
4. Natrium thiosulfat, 0,2 gram
5. Agar, 3,5 gram

Prinsip media SIM

Indol yang terbentuk direaksikan dengan Reagensia Kovac (yang mengandung asam
klorida dan para dimetilaminobenzaldehida dalam amil alkohol) larutan berubah dari
kuning menjadi merah ceri. Karena amil alkohol tidak larut dalam air, warna merah akan
terbentuk pada lapisan berminyak di bagian atas kaldu.

5. Alat :
 Ose jarum
 Lampu Bunsen
 Rak tabung
 Tabung reaksi

6. Cara kerja:
a. Media TSI
1. Pijarkan ose jarum sampai membara
2. Setelah dingin, disentuhkan ose jarum pada koloni bakteri tersangka kemudian
ditusukkan pada bagian tangah sampai kedasar tabung, ose dicabut dan
langsung di gores secara zigzag pada permukaan media.
3. Ose dipijarkan kembali
4. Inkubasi pada suhu 370C selama 24 jam
b. Media SIM
1. Pijarkan Ose sampai merah, setelah dingin
2. Ambil koloni tersangka dari media padat, kemudian diinokulasikan kedalam
media Indol.
3. Bakar ose kembali sampai membara
4. Inkubasi media pada suhu 370 selama 24 jam
5. Kemudian ditetesi reagensia Kovacs, 3-5 tetes

Setelah 24 jam diamati pertumbuhan koloni sbb:

a. TSI :
Fermentasi: Apabila bakteri memfermentasikan ketiga gula, maka warna media
berubah menjadi kuning pada bagian miring dan tegak, disebabkan pH media berubah
menjadi asam (A/A)
Gas: Jika media terangkat atau terdapat rongga => Gas positip
H2S: Jika pada bekas tusukan terbentuk warna hitam => H2S positip

b. SIM :
Sulfur: Tidak terbentuk endapan berwarna hitam => Negatif
Indol + Reagensia Kovacs: Terbentuk cincin berwarna merah => Positif
Motility: Tidak ada pergerakan bakteri => Negatif

Kesimpulan:
Ditemukan bakteri Klebsiella friedlender

Diketahui: Medan, 28 Februari 2024

Dosen penanggungjawab Praktikan:

(Suryani M.F. Situmeang, S.Pd, M.Kes) (Abdul Wahid)