PEMBUATAN PREPARAT

Prosedur kerja
1. Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2. Siapkan objek glass bersih bebas lemak
3. Sterilkan ose yang akan digunakan
4. Ambil air atau Pz atau aquades dengan ose letakkan pada objek glass
5. Sterilkan ose yang telah digunakan
6. Ambil biakan atau sampel kuman
7. Letakkan pada objek glass kemudian ratakan
8. Sterilkan ose yang telah digunakan
9. Keringkan kemudian Fiksasi preparat tersebut
10. Preparat siap dilakukan pengecatan
Catatan : jika dari bahan sampel cair langkah 4 dan 5 tidak dilakukan

Tujuan fiksasi
Melekatkan kuman pada objek glass
Mempertahankan stuktur kuman saat dilakukan pengecatan
Mempermudah pengecatan
DD SEL BAKTERI GRAM (+) DAN GRAM (-)
REAGEN GRAM
1. Pemberian cat warna utama (cairan kristal
violet) berwarna ungu.
2. Pengintesifan cat utama dengan penambahan
larutan Lugol (perekat).
3. Pencucian (dekolarisasi) dengan larutan
alkohol asam.
4. Pemberian cat lawan (pembanding) yaitu cat
warna safranin
PENGECATAN GRAM
Prosedur kerja
1. Menyiapkan preparat olesan bakteri kemudian keringkan lalu fiksasi pada
pembakar spirtus.
2. Meneteskan larutan gram A , membiarkan selama 1 menit.
3. Mencuci dengan air mengalir
4. Meneteskan larutan gram B, membiarkan selama 1 menit.
5. Mencuci dengan air.
6. Meneteskan larutan gram C, membiarkan selama 25 detik.
7. Mencuci dengan air.
8. Menetesi dengan larutan gram D, membiarkan selama 1 menit, mencuci
dengan air dan mengeringkan dengan tissue.
9. Mengamati dibawah mikroskop dengan pembesaran 100x dan menggunakan
minyak imersi
HASIL PENGECATAN GRAM S. AUREUS DAN E. COLI
REAGEN
Pewarna Zeil Nelsen :
Zeil Nelsen 1 : carbol fucsin 0,3%
Zeil Nelsen 2 : HCl Alkohol 3%
Zeil Nelsen 3 : Methylen Blue 0,3%

PENGECATAN BTA
Cara kerja
1. Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2. Ambil kuman dengan ose steril pada objek glass
keringkan
3. Setelah sediaan kering lakukan fiksasi
4. Lakukan pewarnaan denngan cara genangi preparat
dengan cat ZN 1 selama 1 menit dan panaskan jangan
sampai mendidih biarkan lebih dari 5 menit bilas
dengan air
5. Genangi preparat dengan cat ZN 2 selama 30 60 detik
bilas dengan air
6. Genangi preparat dengan cat ZN 3 selama 1 menit
bilas dengan air
7. Keringkan preparat tersebut
8. Lihat dibawah mikroskop dengan pembesaran 100x