Teknologi Dan Rekayasa

Kompetensi Keahlian
Analisis Kimia
Analisis Mikrobiologi Terapan

Oleh : Nina Dewi Koswara, S.Pd

SMK Negeri 13 Bandung
 ANALISIS
AIR DAN MAKANAN METODE MPN
( MOST PROBABLE NUMBER )

Oleh : Nina Dewi Koswara, S.Pd

SMK Negeri 13 Bandung
 Tujuan Pembelajaran
 Setelah melakukan pembelajaran, siswa
diharapkan dapat :
1. Mendeskripsikan teori dasar tentang
analisis air dan makanan metode MPN.
2. Bekerja dengan jujur, teliti, aseptis,steril
dan bertanggungjawab serta peduli
terhadap lingkungan sekitarnya.
3. Menyusun rencana dan alur kerja
pemeriksaan kualitas air/makanan
dengan metoda MPN.
4. Melakukan persiapan pemeriksaan
kualitas air/makanan metoda MPN.
5. Melakukan sampling air dan makanan
untuk analisis mikrobiologi secara
aseptis.
Teknologi dan Rekayasa
 Tujuan Pembelajaran
6. Melakukan pemeriksaan kualitas air dan
makanan cara mikrobiologi (MPN).
7. Melakukan proses inkubasi sampel yang
diuji.
8. Mengamati dan mencatat hasil inkubasi
dan menyimpulkan.
9. Mengolah dan melaporkan hasil
pengamatan MPN.

Teknologi dan Rekayasa

 Istilah Lain dari MPN

Angka Paling Mungkin (APM)

Jumlah Perhitungan Terdekat (JPT)

Teknologi dan Rekayasa

 Tujuan Metode MPN

Menentukan angka E.coli atau

Coliform total dalam sampel air
dan makanan.

Teknologi dan Rekayasa

 Mikroorganisme Indikator
Istilah Mikroorganisme Indikator
sebagaimana digunakan dalam
analisis air mengacu pada sejenis
mikroorganisme yang kehadirannya di
dalam air merupakan bukti bahwa air
tersebut terpolusi oleh bahan tinja
dari manusia atau hewan berdarah
panas.

Teknologi dan Rekayasa

 Ciri-Ciri Mikroorganisme Indikator

 Terdapat dalam air tercemar dan tidak ada

dalam air yang tidak tercemar
 Terdapat dalam air bila ada patogen
 Jumlah mikroorganisme indikator
berkolerasi dengan kadar polusi
 Mempunyai kemampuan bertahan hidup
yang lebih besar daripada patogen
 Mempunyai sifat yang seragam dan mantap
 Tidak berbahaya bagi manusia dan hewan
 Terdapat dalam jumlah yang lebih banyak
daripada patogen
 Mudah dideteksi dengan teknik-teknik
laboratorium yang sederhana
Teknologi dan Rekayasa
Contoh Bakteri Indikator

Coliform

Teknologi dan Rekayasa

 Pengertian Coliform

Coliform merupakan kelompok

bakteri yang hidup pada usus
hewan berdarah panas dan
manusia.

Teknologi dan Rekayasa

 Sifat-Sifat Coliform
 Termasuk kelompok bakteri Gram
negatif
 Termasuk kelompok bakteri
penghuni usus
 Berbentuk Batang (Bacil)
 Tidak Berspora
 Mampu melakukan fermentasi
laktosa menghasilkan asam dan
gas yang terbentuk setelah
diinkubasi selama 24 jam pada suhu
37°C

Teknologi dan Rekayasa

Pengelompokkan Coliform

 Fecal Coli ( E. coli )

 Non Fecal Coli ( E. aerogenes )

Teknologi dan Rekayasa

 Tahapan Tes MPN

Tes Penduga (Presumtive Test)

Tes Penentu (Confirmed Test)
Tes Kesempurnaan (Complete
Test)

Teknologi dan Rekayasa

 Alat dan Bahan
 Tes Penduga
Alat
 Botol sampel steril 1 buah
 Pipet ukur steril 4 buah
(volume minimal 1 mL)
 Cawan Petri steril 2 buah
 Rak tabung 1 buah
 Pembakar
 Inkubator
 Sampel air atau makanan
yang diambil secara aseptis
Bahan
 Media Lauryl
Sulphate Tryptose
Broth (LSTB) 5 mL
atau Lactose Broth
5 mL sebanyak 9
tabung
 Air steril 9 mL
sebanyak 3 tabung
Teknologi dan Rekayasa
 Alat dan Bahan
 Tes Penentu
Alat Bahan
 Rak tabung 1 buah  Media Brilliant Green
 Pembakar Lactose Bile Broth
2% 10 mL dengan
 Jarum Ose bulat
jumlah sesuai hasil
 Inkubator positif pada media
LSTB/LB

Teknologi dan Rekayasa

 Alat dan Bahan
 Tes Kesempurnaan

Alat Bahan
 Rak tabung 1 buah  NA Slant
 Pembakar  Lactose Broth 5 mL
 Jarum Ose
 Inkubator

Teknologi dan Rekayasa

Bagan Kerja MPN
• Tiap-tiap tabung Lactose
Broth (LB) yang
menunjukan hasil positif
gas masing-masing
ditanam kedalam media
Brilliant Green Lactose Bile
Broth (BGLBB) kemudian
diinkubasi pada temperatur
37ºC selama 24-48 jam
( Tahap Tes Penentu ).

• Tiap-tiap tabung BGLBB

yang menunjukan hasil
positif gas, masing-masing
ditanam pada media
Lactose Broth dan Nutrien
Agar slant dan diinkubasi
pada temperatur 37ºC
selama 24 jam. ( Tahap Tes
Kesempurnaan )

• Untuk mendapatkan indek

MPN coliform, digunakan
tabel MPN berdasarkan
tabung-tabung BGLBB
positif gas.

Teknologi dan Rekayasa

Bagan Kerja MPN

Teknologi dan Rekayasa

 Pengamatan Hasil Inkubasi
Tahapan MPN Hasil Positif
Tes Penduga Terdapat gelembung gas
pada tabung durham,
warna media dari ungu
menjadi kuning
Tes Penentu Terdapat gelembung gas
pada tabung durham

Tes Kesempurnaan Terdapat gelembung gas

pada tabung durham,
warna media dari ungu
menjadi kuning
Teknologi dan Rekayasa
 Keterangan
 Setiap kita melakukan pengerjaan MPN kita
juga harus melakukan pengerjaan TPC
untuk sampel yang sama, hal ini bertujuan
untuk menghitung persentase bakteri coli
yang ada pada sampel tersebut. Persentase
coli dihitung menggunakan rumus berikut :

% Coli =(APM/(ALT x 100))X 100%

Teknologi dan Rekayasa

 Contoh Perhitungan APM
 Hasil Inkubasi Tes Penentu :

Pengenceran 10-1 10-2 10-3

Jumlah
Tabung yang 3 2 1
Positif

Maka APM dari tabel adalah : 150 APM/mL

Teknologi dan Rekayasa

Tabel APM Coliform

Teknologi dan Rekayasa

Teknologi dan Rekayasa