ISOLASI DAN ANALISIS

KANDUNGAN TUMBUHAN OBAT

 KONTRAK PERKULIAHAN
MK / SKS : ISOLASI DAN ANALISIS TUMBUHAN OBAT
KODE MK : A600104207
SKS : 2 SKS (T)
PENGAJAR : 1. Dr. Titik Sunarni, M.Si., Apt
2. Fransiska Leviana, M.Sc., Apt
3. Mamik Ponco R., M.Si., Apt.
4. Ghani Nurfiana F.S., M.Farm., Apt.
SEMESTER : GANJIL
CAPAIAN PEMBELAJARAN :
• Mampu mejelaskan tentang metabolit sekunder jalur asam sikimat, asetat,
derivat asam amino, alkaloid dan karbohidrat dan peran bahan alam dalam
penemuan obat.
• Mampu melakukan isolasi dan analisis kandungan tanaman
DISKRIPSI PERKULIAHAN

Membahas tentang metode isolasi dan identifikasi :

• Senyawa fenolik : Fenol dan asam fenolat. Fenilpropanoat. Pigmen
flavonoid. Antosianin, flavonol dan flavon. Flavonoid minor, ksanton
dan stilben. Pigmen kuinon.
• Senyawa Nitrogenous : Pendahuluan. Asam amino. Amina. Alkaloid.
Glikosida sianogen. Indol. Purin. Pirimidin dan sitokinin. Klorofil.
• Terpenoid : Pendahuluan. Minyak esensial. Diterpenoid dan
giberelin. Triterpenoid dan steroid. Karotenoid.
• Asam organik, lemak dan senyawa sejenis : Asam-asam tanaman.
Asam lemak dan lemak. Alkan dan hidrokarbon sejenis. Poliasetilen.
Senyawa sulfur.
• Gula dan derivatnya : Pendahuluan. Monosakarida. Oligosakarida.
Gula alkohol dan siklitol. Polisakarida
 5. Daftar pustaka
• Colegate, Steven M. and Molyneux Russell J., 2008, Bioactive
natural products: Detection, Isolation, and Structural
Determination, second edition,Taylor & Francis Group,
London New York.
• Vermerris, W and Nicholson, R, 2006, Phenolic Compound
Biochemistry, Springer,
• Andersen, M. and Markham, Kenneth, R., 2006, Flavonoids :
chemistry, biocbiochemistry, and applications, Boca Raton,
Taylor & Francis Group By
 PUSTAKA
• Dewick PM. 2009. Natural Product in Medicines: A
Biosynthetic Approach.
• Bruneton J. 1999. Pharmacognosy – Phytochemistry –
Medicinal Plants.
• Samuelsson G. 1999. Drug of Natural Origin, A Textbook of
Pharmacognosy.
• Harborne JB. Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern
Menganalisis Tumbuhan.
• Houghton PJ and Raman A. 1998. Laboratory Handbook for
the Fractionation of Natural Extracts.
• Robinson T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. 6th
ed.
KRITERIA PENILAIAN
Nilai akhir dihitung berdasarkan pembobotan sebagai berikut :
1. Bobot masing-masing UKD 25%
2. Masing-masing UKD mengandung variable tugas
3. Tingkat kehadiran minimal 80 % untuk dapat mengikuti ujian
4. Penilaian dengan skala berikut :
A. dengan nilai akhir > 85
B. dengan nilai akhir > 70 - 84
C. dengan nilai akhir > 55 - 70
D. dengan nilai akhir > 45 - 54
E. dengan nilai akhir < 45

JIKA TIDAK MASUK  SAKIT,

PRESENSI ‘S’, SURAT DOKTER
 JADWAL PERKULIAHAN

PERTEMUAN TOPIK BAHASAN UKD BAHAN

KE BACAAN
1 KONTRAK PERKULIAHAN, UKD 1 1,2,3
PENDAHULUAN
2-4 SENYAWA FENOLIK 1,2,3
5-7 SENYAWA NITROGENOUS UKD 2 1,2,3
8 UTS (materi UKD 1 dan UKD 2)
9-12 TERPENOID UKD 3 1,2,3
13 LIPIDA TERSABUNKAN 1,2,3
14-15 KARBOHIDRAT UKD 4 1,2,3
16 UTS (materi UKD 3 dan UKD 4)
PENDAHULUAN

ABAT ALAMIAH DALAM PENGOBATAN MODERN

 ASAL OBAT
Sedikit yg menyadari jika sebagian obat-obatan yang banyak
diresepkan berasal dari alam
Tahapan pengembangan obat alami :
produk alami unmodified  diekstraksi  produk semi sintesis 
sintesi murni.
 Contoh : ASETOSAL
diawali dari Spesies Salix yang digunakan antipiretik
 Salix alba L. (1% salisin),
 Salix purpurea L.(6-8 % salisin) dan
 Salix fragilis L (10 % salisin).
Perkembangan Salix sp dalam obat modern
 Ibuprofen
Senyawa sintesis dg model dari asam salisilat
CH3
CH2OH
HO
COOH
HO O H2COH HC COOH
H3C
O
O C
OH

Salisin
O

Asetosal
COOH
CH2
HO
CH3 CH CH3

Ibuprofen

Asam salisilat
Senyawa NSAID lain :
- phenacetin
-Acetanilide
-Acetaminophen
PERAN OBAT ALAMI
Peran penting senyawa alami dalam pengobatan modern :
1. Sumber obat-obat penting yang sukar dibuat secara sintetis
contoh : glikosida jantung, alkaloid ergot, alkaloid opium.
O O

HO

HO
O O O
O
O O
HO
HO DIGOKSIN
HO
HO
2. Sumber senyawa dasar
 sedikit modifikasi menjadi senyawa yang lebih aktif/kurang toksik.
Contoh : modifikasi morfin
HO AcO
Morfin & turunannya :
Ac2O

O O
NMe NMe

H H

HO Morphine AcO Heroin

Me2SO4

MeO
MeO

H2

O
NMe O
NMe
H

HO H
Codein
HO Dihydrocodein
3. Sumber senyawa prototype/model/penuntun
 untuk mensintesis obat dengan aktivitas yang mirip aslinya.
Contoh :
a. Ephedrin
Senyawa alami Senyawa semi sintesis
OH CH3 OH CH3
H
H
C C N
C C N H H
H H H
CH3

Ephedrin Phenilpropanolamin
(telah dapat disintesis total)
b. Etoposide
Modifikasi dari Phodophylotoksin (Phodophylum peltatum)
H

H3C
O
OH O
O
HO
O OH
O
A B O
A B O
O
O
O
O

H3CO
OCH3
H3CO
OCH3
OCH3
OH
Phodophylotoksin
Etoposide
4. Sumber senyawa tak aktif
 dengan sedikit modifikasi menjadi senyawa lebih ampuh

Contoh : taxol semi sintesis

O
OR

O OH
10 O

O NH O O
HO OH
H 10

O
H
HO O
O O OH
O
HO O
O O O
O
Taxol
(paclitaxel)
Baccatin III
O
 PRODUK OBAT ALAMIAH

Sumber obat. alamiah beragam  bentuk produknya juga beragam

1. Tanaman tinggi
Tanaman Liar & budidaya
kendala : - control kualitas  ketat (kimia, biologi, fisika)
- salah identifikasi
- waktu panen tak tepat dsb
Tanaman liar  masalah kepunahan & kelangkaan
Best selling : ginseng, GBE dan minyak atsiri2x.
2. Metode alternatif
produksi metabolit sekunder dg teknik kultur sel tanaman.
kendala : - mahal
- hasil rendah
- pertumbahan sel lambat
gen pengkode enzim pengkatalisis biosintesis utk ditransfer ke
fungi/bakteri.
Lanjutan PRODUK OBAT ALAMIAH

3. Metabolit mikroba
Melalui fermentasi : - antibiotika
- antineoplastik
4. Rekayasa Genetika
Mirip dg teknik fermentasi utk antibiotika, bedanya Gen pengkode
pembentukan senyawa yg diinginkan di pindah dr sumber aslinya ke mikroba
atau cell line hewan yg dpt tumbuh cepat  produksi >
5. Biologik
- produk dari hewan : serum, antitoksin, globulin
- produk dari mikroba : vaksin, toksin
KIMIAWI OBAT ALAMI
Organisme hidup
Metabolisme

KH, protein, lipida Terpenoid, alkaloid, ma

(Metabolit primer) Efek fisiologis tertentu
(Metabolit sekunder)
Obat

Crud drug Ekstraksi, isolasi

HUBUNGAN MET. PRIMER DG MET. SEKUNDER
Jalur Metabolit primer Metabolit Primer Metabolit sekunder

CO2 O2

Photosintesis
Glikosida
Glukosa Karbohidrat Polisakarida komplek
Antibiotik
Erythrose PO4 aminoglikosida
Glikolisis
Phenilpropanoid
Phosphoenolpyruvate Asam Sikimat Alkaloid

As. Amino Aromatik Protein Peptida

Pyruvate
Penicilin
As. Amino alifatis
Cephalosporin
AcetylCoA Malonyl CoA Asam lemak Lemak & Lilin
(lipid)
Erythromicin
TCA cycle
Tetrasiklin
Anthraquinon
CO2 Isopren Terpenoid

Squalene Steroid
 GLYCOLISIS PENTOSE PHOSPHATE
GLUCOSE CYCLE
BUILDING BLOCKS
OH
OH
OH
CO2H O PO
PO
O
OH Erythrose4-P
NH2 Glukosa 6-P
OH OH
glycine

HO2C OH PHOTOSYNTHESIS
CO2H
CO2H HS
HS CO2H
NH2 PO
NH2 3-phosphoglyceric acid CO2H
L-cysteine L-serine NH2
L-phenylalanine
HO2C OP
CO2H HO OH CO2H
phosphoenolpyruvate OH
L-valine NH2 NH2
shikimic acid HO
L-tyrosine
HO2C O
CO2H CO2H

L-alanin pyruvic acid HO NH2

NH2

CO2H CoAS O N
CO2H HO
H
OH
NH2 acetyl-CoA Mevalonic acid L-Tryptophan
L-leucine

asam malonat
CO2H KREBS CYCLE
CO2H HO2C
CO2H HO2C CO2H HO2C CO2H
NH2 HO2C
NH2 L-aspartic acid
O O NH2
L-Isoleucine L-glutamic acid
Oxaloacetic acid 2-oxoglutaric acid

S CO2H NH
H2 N CO2H CO2H
CO2H H2N
NH2 L-lysine HN2 N
NH2 H NH2
L-methionine NH2
L-ornithine
L-arginine
PRINSIP DALAM EKSTRAKSI DAN ISOLASI

1. Bahan Tumbuhan
a. sifat bahan tumbuhan :
Untuk tujuan analisis fitokimia,
• Idealnya segar dan segera dimasukkan dalam alkohol mendidih.
• Cara lain :
jaringan segar dikeringkan cepat sebelum diekstraksi. Pengeringan pada
suhu rendah dengan aliran udara.
Bahan kering dapat disimpan lama :
• flavonoid, alkaloid, kuinon, dan terpenoid  mantap.
• Minyak atsiri  perubahan kuantitatif
• Myristica fragrans  Miristisin naik perlahan sedang ß-pinen
menurun dengan berjalannya waktu.
b. Tidak ada pencemaran :
• tumbuhan sehat tidak berpenyakit (virus, bakteri, jamur).
• Jika jamur/parasit lain dikumpulkan, jaringan pohon harus
terpisah dari cuplikan.
dilaporkan asam klorogenat dari jamur ??

c. Identitas botani harus jelas (oleh ahli yang diakui)

 dianjurkan menyimpan contoh (herbarium)
penting jika melaporkan senyawa baru dari suatu tumbuhan
atau senyawa yang telah dikenal dari tumbuhan baru
2. METODE EKSTRAKSI
• Tergantung pada pada tekstur bahan dan jenis senyawa yang diekstraksi
• Umumnya diperlukan proses untuk menghentikan proses fitokimia.
• Tujuan ekstraksi :
1) Ekstraksi habis?
2) Ekstraksi parsial ?

Pencarian kandungan kimia

 ekstraksi dapat dilakukan dengan pelarut yang berganti-ganti.
• PE  KLOROFORM  ETIL ASETAT  ETANOL
DISESUAIKAN GOLONGAN SENYAWA YANG DICARI
Perlu dipertimbangkan yang akan dilakukan :
Ekstraksi bertingkat
atau
Ektraksi  fraksinasi??
TUGAS MEMBUAT MAKALAH & PRESENTASI
UKD 1 isolasi dan analisis kualitatif dan atau
kuantitatif senyawa kimia golongan :
• Kumarin
• Senyawa kuinon
• Tanin
• Flavonoid
• Antosianin
• Lignan
• Silben
• Antrakuinon