REVIEW JURNAL UJI AKTIVITAS

PADA BAHARI KELAS

GASTROPODA
 KELOMPOK 3
Amar Maruf 11161003
Faima Shahnai Tahirah 11161024
Resti Rismayanti 11161085
Senya Nur Islami 11161109
Yohana Liunaruly 11161176
 PENELITI SUMBER DAN TAHUN BAHARI YANG UJI AKTIVITAS
DITELITI

Haslianti et al JPHPI 2017, Volume 20 Keong Kowoe Antioksidan

Normal 1

Cakasana et al Journal of Marine Cangkang Kerang Antioksidan

Research, Volume 3, Simping (Amusium sp)
Nomor 4, tahun 2014, dan Kerang Darah
Halamn 395-404 (Anadara sp)

Cahyani et al Journal of Coastal Life Keong matah merah Antidiabetes

Medicine 2015; 3(5): (Cerithidea obtuse)
356-360

3
 JURNAL 1
KARAKTERISTIK KEONG KOWOE
DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDANNYA
 TAKSONOMI

 Filum : Mollusca
 Kelas : Gastropoda
 Ordo : Operculata
 Famili : Ampullaridae
 Genus : Pomacea
 Spesies : Pomacea canaliculata Lamarck

5
 EKSTRAKSI dan ISOLASI
1. Ekstraksi menggunakan tiga pelarut :
✘ yaitu kloroform p.a. (non polar),
✘ etil asetat p.a. (semi polar) dan
✘ metanol p.a. (polar).

2. Ekstraksi dilakukan dengan maserasi

3. Residu yang dihasilkan dimaserasi dalam 100 ml etil asetat p.a. selama 48 jam dan
menggunakan orbital shaker dengan kecepatan 8 rpm,
4. filtrat ekstrak kloroform yang diperoleh dievaporasi hingga pelarut memisah dengan
ekstrak menggunakan rotary vacuum evapotator pada suhu 50 C.
5. Selanjutnya Residu etil asetat dimaserasi dalam 100 ml metanol kecepatan 8 rpm.
6. Filtrat yang diperoleh dari tiap ekstraksi dievaporasi menggunakan rotary vacum
evapotator pada suhu 50o C.
6
 UJI AKTIVITAS
✘ Pengujian antioksidan dilakukan
dengan metode (Molyneux
2004).
✘ Ekstrak keong kowoe dari hasil
ekstraksi bertingkat dan hasil
pemurnian dilarutkan dalam
metanol dengan konsentrasi
200, 400, 600 dan 800 ppm.
✘ Antioksidan sintetik BHT
digunakan sebagai pembanding
dan kontrol positif, dibuat
dengan cara dilarutkan dalam
pelarut metanol p.a. dengan
konsentrasi 2, 4, 6 dan 8 ppm.
7 mM dalam tabung reaksi.
✘ Larutan DPPH yang akan digunakan dibuat
dengan melarutkan kristal DPPH dalam pelarut
metanol dengan konsentrasi 1 mM. Masing-
masing sampel uji dan pembanding diambil 4,50
mL dan direaksikan dengan 500 μL
✘ larutan DPPH 1 mM dalam tabung reaksi yang
berbeda dan telah diberi label. Campuran
tersebut kemudian diinkubasi pada suhu 37°C
selama 30 menit dan diukur absorbansinya
menggunakan spektrofotometer UV-VIS Hitachi
U-2800 pada panjang gelombang 517 nm.
✘ Absorbansi dari larutan blanko juga diukur untuk
melakukan perhitungan persen inhibisi. Larutan
blanko dibuat dengan mereaksikan 4,50 mL
pelarut metanol dengan 500 μL larutan DPPH 1
 Hasil ekstraksi senyawa aktif keong kowoe

✘ Ekstraksi senyawa aktif keong kowoe bertujuan untuk

mendapatkan informasi mengenai rendemen,
kandungan fitokimia, dan aktivitas antioksidan ekstrak
kasar keong kowoe

8
 JURNAL 2
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KITOSAN YANG
DIPRODUKSI DARI CANGKANG KERANG
SIMPING (AMUSIUM SP) DAN KERANG
DARAH (ANADARA SP)
✘ Kerang simping ditemukan di sepanjang pesisir
utara Jawa Tengah (Brebes, Tegal, Pemalang,
Weleri-Kendal, dan Semarang) dan Jawa Timur
(Tuban, Pasuruan)
✘ Kerang darah di Pulau Jawa terpusat di perairan
pesisir Jawa Timur, Jawa Tengah, Cirebon, dan
Banten
✘ Jumlah kerang tersebut setiap tahun mengalami
peningkatan

10
 PROSES PEMBUATAN KITIN

✘ Preparasi Sampel
Cangkang dipisah sesuai dengan warnanya yaitu merah dan putih

Dicuci dan dikeringkan

Digiling

Diayak dengan sieve shaker

Diambil sampel dengan ukuran butir 350µ

11
Demineralisasi : Tepung cangkang dan HCl 1 M (1:10) gram/ml (25 - 30ᵒC) diaduk
120 menit  Residu dicuci dan dikeringkan

Deproteinasi : Tepung dan NaOH 1 M (1:10 gram/ml (60 - 70ᵒC) diaduk 60 menit
 Residu disaring  diperoleh padatan bebas dari kandungan protein  dicuci
dengan aquadest hingga diperoleh pH netral

Depigmentasi : Diekstrak dengan aseton selama 5 menit. Perbandingan (1:10)

gram/ml

Bleaching : NaOCl 0,315% selama 20 menit. Perbandingan NaOCl dengan sampel

yaitu 1:10 (gram/ml)  Dicuci dengan aquadest hingga pH netral  dikeringkan
dengan oven  diperoleh kitin.
12
Deasetilasi Kitin Menjadi Kitosan
Menggunakan NaOH 50% 1:20 (gram/ml), suhu 90 - 100ᵒC 
diaduk selama 1 jam.  Rendemen disaring dan dicuci dengan
aquadest hingga pH netral  dikeringkan  diperoleh padatan
yang berupa kitosan

Lakukan Karakterisasi dan Analisis Kandungan Kimia

13
 UJI ANTIOKSIDAN

✘ Sampel 0,5 gr diekstrak dengan methanol, 2 jam.

✘ Ekstrak diambil 0,1 ml dan direaksikan dengan 3,9 ml larutan DPPH 6x10-5
mol/L.
✘ Pengukuran absorbansi pada panjang gelombang 515 nm. Metanol dipakai
sebagai blanko.
✘ Aktivitas antioksidan terukur sebagai % discoloration dengan rumus:

Keterangan:

✗ At30 = absorbansi DPPH oleh sampel

✗ At0 = absorbansi blank

14
 HASIL DAN KESIMPULAN

Tidak ditemukan adanya aktivitas antioksidan pada ketiga sampel.

15
 JURNAL 3
Antidiabetic potential and secondary
metabolites screening of mangrove
gastropod Cerithidea obtusa
 TAKSONOMI
Kingdom: Animalia

Phylum: Mollusca

Class: Gastropoda
(unranked): clade Caenogastropoda
clade Sorbeoconcha
Superfamily: Cerithioidea

Family: Potamididae

Genus: Cerithidea

Species: C. obtusa

17
 PROSES PEMBUATAN KITIN

✘ Preparasi Sampel
Siapkan bahan baku C. obtusa

Dicuci bahan baku dengan air bersih

Pisahkan bagian shell, daging dan jeroan

Bagian daging dipotong kecil-kecil untuk memaksimalkan

proses ekstraksi

18
 PROSES PEMBUATAN KITIN
✘ Ekstraksi
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut tunggal,
yaitu metanol (polar), etil asetat (semi-polar) dan heksana (non-polar).

Daging C. obtusa ditimbang (75 g), lalu dipotong kecil-kecil, dimasukkan ke

dalam labu Erlenmeyer

larutan ekstrak yang diperoleh disaring dengan kertas saring untuk

memisahkan filtrat dan residu

Residu resoaked dengan 225 mL pelarut selama 24 jam dan disaring

menggunakan kertas saring.
19 filtrat diuapkan dengan rotavapor pada 40 ° C.
 UJI AKTIVITAS

✘ Kegiatan antidiabetes diukur in vitro

menggunakan α- Metode glucosidase
penghambatan [ 10]. Sekitar 1 mg α- enzim
glukosidase dilarutkan dalam 100 mL buffer
fosfat (pH 7,0) yang mengandung 200 mg
albumin bovine serum.

20
 ✘ Sebelum digunakan, 1 mL larutan enzim diencerkan 25 kali dengan
dapar fosfat (pH 7,0) yang mengandung 200 mg bovine serum
albumin. Larutan stok ekstrak dibuat dengan melarutkan ekstrak
50 mg dalam 1 mL dimetil sulfoksida dengan ultrasonik bath
sonicator. Sebanyak 10 μL ekstrak kemudian ditambahkan ke
tabung reaksi yang mengandung 25 μL p-nitrophenyl α-D-
glucopyranoside (P-NPG) (20 mmol / L) dan 50 µL buffer fosfat
(pH 7,0). Reaksi dimulai dengan penambahan 25 μL larutan enzim
dan 25 μL buffer fosfat diikuti dengan inkubasi selama 30 menit
pada suhu 37 ° C. Reaksi dihentikan dengan penambahan 100 μL
Na2CO3 (200 mmol / L). Absorbansi larutan diukur menggunakan
ELISA reader pada 410 nm.
21
 ✘ Persentase penghambatan α-glukosidase ditentukan dengan
menggunakan persamaan ini: Penghambatan alfa-glukosidase
(%) = [(B1 - B0) / (S1 - S0)] × 100 Dimana B1 adalah absorbansi
blanko, B0 adalah absorbansi kontrol kosong, S1 adalah
absorbansi sampel dan S0 adalah absorbansi kontrol sampel.
Sistem reaksi penghambatan α-glukosidase dalam penelitian
ini disajikan pada Tabel 1.

22
 HASIL
✘ Menurut uji ANOVA F pada ekstrak
metanol C. obtusa, nilai signifikan 0,000
(P <0,05) diperoleh, yang menunjukkan
bahwa perbedaan konsentrasi ekstrak
(10, 20, 30, 40 dan 50 mg / mL)
mempengaruhi penghambatan α-
glukosidase dengan persentase masing-
masing 12,19%, 33,97%, 43,25%, 54,48%
dan 57,91%. Nilai IC50 adalah 36,40 mg
/ mL. Hasil uji Duncan selanjutnya
menunjukkan bahwa ada perbedaan
yang signifikan dalam penghambatan α-
glukosidase pada berbagai konsentrasi
ekstrak.
23
✘ Menurut hasil dari uji F ANOVA di
acarbose, nilai signifikan 0,000 (P <0,05)
diperoleh, yang menunjukkan bahwa
perbedaan konsentrasi acarbosa (0,1, 0,5,
1, 5 dan 10 mg / mL) mempengaruhi α-
inhibisi glukosidase dengan persentase
masing-masing 23,83%, 63,20%,
75,98%, 92,36% dan 96,05%. Nilai IC50
adalah 0,32 mg / mL. Hasil uji Duncan
lebih lanjut menunjukkan bahwa ada
perbedaan yang signifikan dalam
penghambatan α-glukosidase pada
berbagai konsentrasi acarbose.
 Kesimpulan

✘ Korelasi antara konsentrasi ekstrak metanol C.

obtusa dengan persentase penghambatan α-
glukosidase dan korelasi antara konsentrasi
acarbose dengan persentase penghambatan
α-glukosidase disajikan pada Gambar 2 dan 3.
Berdasarkan Gambar 2, ada korelasi antara
konsentrasi ekstrak dengan persentase
penghambatan, di mana peningkatan
konsentrasi ekstrak diikuti oleh peningkatan
penghambatan α-glukosidase. Kurva
dibentuk oleh persamaan y = 28,821 ln (x) -
53,599, menghasilkan nilai IC50 sebesar
36,40 mg / mL. Acarbose sebagai kontrol
positif, kurva dibentuk oleh persamaan y =
15.306 ln (x) + 67.478 yang menghasilkan
24 nilai IC50 sebesar 0,32 mg / mL.
THANK’S
ANY QUESTIONS?

25