Extraction, Isolation and Identification

of Flavonoid from Chenopodium album

Aerial Parts
Ghina Izdihar 140210160002
Aldina Amalia Nur S. 140210160075
Ara Deani Somantri 140210160090
Fauzi Musary A. 140210160102
Tiara Prima Amalya 140210160104
 Flavonol
• Banyak ditemukan di buah, sayur mayur, dan
minuman seperti the dan red wine.
• Terdapat dalam bentuk glikosida (berikatan
Flavonol dengan molekul gula).
• Sedikit dalam bentuk aglikon.
• Ada 4 jenis flavonol yaitu quercetin,
kaempferol, myricetin, dan isorhamnetin.
(Paling banyak di alam yaitu quercetin dan
kaempferol).
• Pada posisi 4 terdapat C double bond O.
Quercetin • Pada posisi 3 terdapat OH seperti flavanol.
• Ada double bond di antara C2 dan C3.
• Atom oksigen berikatan ganda mirip dengan
golongan flavon.
• Memiliki daya serap UV yang kuat yaitu pada
daerah serapan UV-A (325 - 400 nm) dan
UV-B (280- 325 nm).

Kaempferol
 • Flavonol yang paling berlimpah di alam.
• Terdapat di makanan, rempah-rempah, dan bawang.
• Memiliki manfaat sebagai antioksidan. Contoh: bawang.

Quercetin

Quercetin dan
Kaemferol • Flavonol yang banyak ditemukan sebagai
O-glikosida.
• Terdapat 200 gula konjugasi.
• Memiliki berbagai aktivitas farmakologi,
termasuk antioksidan, anti-inflamasi,
antibakteri, antikanker, antidiabetes, dan
anti-osteoporosis (Calderon et al., 2011).
Kaempferol • Dapat menghambat sintesis DNA (Lim
et al., 2007).
Biosintesis Flavonol Quercetin

+
CHS CHS : Chalcone synthase
CHI : Chalcone isomerase
F3H : flavanone 3-hydroxylase
FLS : flavonol synthase

CHI

F3H FLS
Chenopodium album L (Bathua)
Kingdom : Plantae
SubClass : Angiosperms Kelompok Fenolik, Flavonoid, Saponin, Ecdysteroid
Class : Eudicots dan Triterpenoid
Orde : Caryophyllales
Family : Amaranthaceae
Genus : Chenopodium
Species : C. album 379 spesies telah terisolasi
 MANFAAT

Tapal pada gigitan serangga

Obat pencahar Penambah cairan Obat penenang
dalam tubuh

Sunstroke Rematik sendi

 Aktivitas Biologis
• Anthelmentik
• Antiphlogistic
• Antirematik
• Anti-inflammatory
 Prosedur
Persiapan Ekstrak

Bubuk C. album (1kg)

- Ditambahkan Petroleum eter

- Diekstraksi dengan etil asetat, aseton , dan metanol menggunkan Soklet ekstraktor
- Dimaserasi dingin dengan metanol 50% (7hari)
- Dipekatkan dengan rotary evaporator

Ekstrak Etil asetat Ekstrak Aseton (ACCA) Ekstrak Metanol (MECA) Ekstrak 50% Metanol
(EACA) 3,9% w/w 4,79% w/w 13,58% w/w (HACA) 12,76% w/w
 Prosedur
Uji Fitokimia (Metode TLC)

Ekstrak Sampel
- Dilakukan kromatografi lapis tipis dengan pelarut yang berbeda
- Dikeringkan dan disemprot menggunakan reagen AlCl3
- Dilihat pada sinar UV λ=366 nm

Ekstrak EACA (tannin, Ekstrak ACCA (protein, Ekstrak HACA (protein, Ekstrak MECA (protein,
sterol, flavon) tannin, flavon) karbohidrat, tannin, karbohidrat, tannin,
saponin, flavon) saponin, flavon)

Pelarut:
Etil aseat:methanol:air (100:13,5:10 v/v/v)
Etil asetat:asam formiat:asam asetat:air (100:11:11:26 v/v/v/v)
Kloroform:methanol:air (70:30:4 v/v/v)
Toluen:etil asetat:dietilamin (70:20:10 v/v/v/)
Etil asetat:methanol:air:asam asetat (65:15:15:10 v/v/v/v)
 Prosedur
Penentuan Flavonoid (Metode Aluminium Klorida)

Larutan Sampel 1 mL (1mg/mL)

- Ditambahkan 1,5 mL alcohol 95%

- Ditambahkan 0,1 mL 10 % AlCl3.6H2O
- Ditambahkan 0,1 mL 1M CH3COONa
- Ditambahkan 2,3 mL akuades
- Diinkubasi pada suhu ruang selama 40 menit
- Ditentukan absorbansi λ=435nm
- Dibuat data dalam mg ekuivalen rutin (RE)/g sampel

ACCA > HACA > EACA > MECA

 Prosedur
Isolasi dengan Flash Chromatography Karakterisasi Senyawa

Ekstrak ACCA ACCA 1

- Dilakukan flash chromatograpy
Peak 1 (F3-9)
- Dipekatkan dalam keadaan vakum
- Diuji dengan reagen flavonoid
- Dikarakterisasi dengan UV, IR,
¹H NMR, ¹³C NMR, dan MS
2-(3, 4-dihidroksifenil)-3, 5, 7-
trihidroksi-4H-kromen-4-on

ACCA 1 (13mg)
Struktur 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5,7-
trihydroxy-4H-chromen-4-one

Flavonol Quercetin
Hasil Pemisahan Flash Chromatography dari
Ekstrak ACCA

Hasil pemisahan :
Serbuk kuning pucat sebanyak 13 mg
yang kemudian digunakan untuk
identifikasi IR, NMR, dan MS

Titik leleh : 312 – 315°C

Titik leleh literatur untuk Flavonol

Quercetin = 313 – 314 °C 1

1 Singh, H.B. & K.A. Bharati. 2014. Handbook of Natural Dyes and Pigments
Alat Flash Chromatography
Identifikasi Spektrum UV dari ACCA-1
 Identifikasi Spektrum IR dari ACCA-1

Gugus Fungsi Absorpsi (cm-1)

O-H 3624
O-H 3473
O-H 3295
C=C 1616
C–O–C 1165
Identifikasi Spektrum C13 NMR dari ACCA-1
Identifikasi Spektrum ¹H NMR dari ACCA-1
Identifikasi Fragmen MS dari ACCA-1
Thank You